Гликозилхлорид N,N-диацетилнейраминовой кислоты в синтезе полипренилсиалилфосфатов - предполагаемых интермедиатов биосинтеза полисиаловых кислот тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат химических наук Шпирт, Анна Михайловна

• Шпирт, Анна Михайловна
• кандидат химических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат химических наук Шпирт, Анна Михайловна

Список сокращений

1. Введение

2. Литературный обзор 13 2.1 Общие сведения о спектроскопии ЯМР 31Р

2.2. Спектры ЯМР 31Р фосфотриэфиров

2.2.1. Спектры ЯМР 31Р фосфотриэфиров со сложноэфирными защитными группами в углеводном остатке

2.2.2. Спектры ЯМР 31Р фосфотриэфиров с бензильными защитными группами в углеводном остатке

2.2.3. Спектры ЯМР 31Р фосфотриэфиров с защитными группами разного типа в углеводном остатке

2.2.4. Спектры ЯМР 31Р дифенилгликозилфосфатов (фосфотриэфиры с феннльными защитными группами на фосфатной группе)

2.2.5. Спектры ЯМР 31Р фосфотриэфиров с разными заместителями на фосфатной группе

2.3. Спектры ЯМР 31Р фосфодиэфиров

2.3.1. Спектры ЯМР 31Р фосфодиэфиров с защитными группами в углеводном остатке

2.3.2. Спектры ЯМР 31Р фосфодиэфиров с углеводным остатком без загцитных групп

2.3.3. Спектры ЯМР 31Р фосфодиэфиров, в которых фосфатная группа имеет два углеводных заместителя

2.3.3.1 Спектры ЯМР 31Р гликозилированных нуклеотидов с защитными группами

2.3.3.2 Спектры ЯМР31Р гликозилированных нуклеотидов без защитных групп

2.3.3.3 Спектры ЯМР 31Р защищенных очигосахаридов, соединенных между собой с помощью фосфатного мостика

2.3.3.4 Спектры ЯМР 31Р незащищенных очигосахаридов, соединенных между собой с помощью фосфатного мостика

2.4 Спектры ЯМР 31Р фосфомоноэфиров

2.4.1. Спектры ЯМР 31Р фосфомоноэфиров с защитными группами в углеводном остатке

2.4.2. Спектры ЯМР 31Р фосфомоноэфиров без защитных групп

2.5 Спектры ЯМР 31Р циклических гликозилфосфатов

2.5.1. Спектры ЯМР 31Р циклических гликозилфосфатов с защитными группами

2.5.2. Спектры ЯМР 31Р циклических гликозилфосфатов без защитных групп

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Гликозилхлорид N,N-диацетилнейраминовой кислоты в синтезе полипренилсиалилфосфатов - предполагаемых интермедиатов биосинтеза полисиаловых кислот»

Сиаловые кислоты - девятиуглеродные сахара, имеющие карбоксильную группу у аномерного центра. Они образуют группу нон-2-улозоновых кислот. К настоящему времени известно более 40 различных сиаловых кислот. JV-Ацетилнейраминовой кислотой (Neu5Ac) называют сиаловую кислоту, у которой аминогруппа у С-5 атома ацетилирована1. Сложные углеводные молекулы, содержащие jV-ацетилнейраминовую кислоту, являются важнейшими природными соединениями, определяющими протекание целого ряда иммунологических, нейробиологических, онкологических и других биологических процессов . В природе известны полимерные формы N-ацетилнейраминовой кислоты - полисиаловые кислоты (ПСК), состоящие из повторяющихся блоков со связями: а(2—>8)-, а(2—>9)- или чередующимися а(2->8)/а(2->9)-гликозидными связями. ПСК являются полианионами, обладающими набором уникальных физико-химических свойств. ПСК встречаются в гликопротеинах (Neural Cell Adhesion Molecule (N-CAM)) эмбриональных нервных клеток позвоночных, в том числе и у человека. Изменение содержания ПСК в N-CAM в ходе развития нервных клеток модулирует межклеточную адгезию нервных клеток, позволяя им передвигаться и способствуя росту аксонов, что напрямую связано с организацией нервных клеток в ткани зрелого головного мозга. Наличие ПСК в составе N-CAM необходимо для нормального морфогенеза и психического развития3. Бактериальная ПСК защищает клетки от фагоцитоза, является рецептором для связывания с бактериофагами. Защитные капсулы ряда возбудителей менингита, таких как, например, Escherichia coli Kl, fC92, Neisseria meningitidis типов В и С, состоят из ПСК. Они определяет иммунологическую специфичность этих бактерий и их способность поражать нервные ткани, являясь, таким образом, одним из важнейших факторов вирулентности. По своей структуре ПСК бактерий близки ПСК человека. До настоящего времени вакцина против бактериального менингита, вызванного бактериями Neisseria meningitidis типов В и С, не Найдена?. В то время как биосинтез ПСК млекопитающих (в том числе человека) довольно хорошо изучен, в биосинтезе бактериальных ПСК остается ряд неясностей5. Бибсинтез бактериальных ПСК подробно изучался на примере Escherichia coli Kl. Установлено, что в биосинтезе бактериальных ПСК гликозил-донором является цитидинмонофосфат N-ацетилнейраминовой кислоты. Однако природа первичного гликозил-акцептора в биосинтезе бактериальных ПСК до сих пор окончательно не выяснена. В настоящее время предполагается, что роль первичного гликозил-акцептора выполняет полипренилсиалилфосфат, образование которого инициирует биосинтез ПСК у бактерий. Это соединение образовано из остатка А^-ацетилнейраминовой кислоты и ундекапренола (аллильный спирт, состоящий из одиннадцати изопреноидных звеньев), соединенных между собой фосфодиэфирной связью. Полипренилсиалилфосфат не удалось выделить из природного источника, и его структура была определена косвенными методами, поэтому, в частности, неизвестна конфигурация аномерного центра. В то же время, точное знание В то же время точное знание строения первичного сиалил-акцептора позволило бы разработать новые подходы к синтезу селективных ингибиторов биосинтеза бактериальных ПСК. Такие ингибиторы могли бы блокировать биосинтез ПСК в клетках бактериальных патогенов и не влиять на биосинтез ПСК в клетках мозга человека, который протекает иначе, чем в бактериях и не включает упомянутый ундекапренилфосфат №и5Ас. Для окончательного прояснения вопроса о его структуре требуется провести синтез полипренилсиалилфосфата и проверить экспериментально, является ли он субстратом сиалилтрансфераз — ферментов ответственных за биосинтез ПСК. Химический синтез этого соединения ранее не был осуществлен и является актуальной задачей в химии углеводов. Поскольку конфигурация аномерного центра в природном полипренилсиалилфосфате неизвестна, необходимо разработать методы, приводящие к получению как а-, так и р-фосфатов Ыеи5Ас, и в том числе соответствующих полипренилсиалилфосфатов.

Подходы к синтезу Р-фосфатов Ыеи5Ас простого строения разработаны достаточно хорошо, тогда как направленный синтез а-фосфатов Ыеи5Ас в литературе не описан. Процесс получения сиалилфосфатов является частным случаем реакции сиалилирования — гликозилирования производными №и5Ас. Разработка новых методов эффективного введения остатков сиаловых кислот является одной из фундаментальных проблем современной биоорганической химии. Недавно показано, что на результат сиалилирования существенно влияет характер замещения атома азота нейраминовой кислоты. Большинство успешных препаративных синтезов сиалоконъюгатов было осуществлено с применением производных нейраминовой кислоты, содержащих один ацетильный остаток у атома азота. В то же время в последние годы появились сообщения о том, что использование для синтеза сиалоолигосахаридов тиогликозидных производных А^-диацетилнейраминовой кислоты имеет значительные преимущества: реакции гликозилирования идут значительно быстрее, продукты гликозилирования образуются с большими выходами и высокой стереоселективностыо. Однако причины влияния удаленного заместителя у атома азота на результат реакции гликозилирования до сих пор оставались невыясненными. Поэтому необходим поиск новых сиалил-доноров с модифицированными заместителями у атома азота и исследование их реакционной способности в сравнении с известными /^-ацетильными производными.

Данная диссертационная работа посвящена исследованию реакционной способности гликозилхлоридов нейраминовой кислоты (сиалилхлоридов) с одной и двумя ацетильными группами у атома азота и их применению для синтеза ранее неизвестных полипренилсиалилфосфатов — предполагаемых интермедиатов биосинтеза бактериальных полисиаловых кислот.

Работа состоит из трех основных частей: обзора литературы (глава 2), обсуждения полученных результатов (глава 3), выводов (глава 4), экспериментальной части (глава 5), а также списка литературы и приложения.

В главе 2 рассмотрены литературные данные по спектрам ЯМР 31Р гликозилмонофосфатов, к которым относятся и синтезируемые нами полипренилсиалилфосфаты. В литературе неизвестны обзорные статьи по спектрам ЯМР 31Р гликозилмонофосфатов, поэтому в этой главе обсуждаются общие тенденции положения сигналов атомов фосфора в спектре ЯМР 31Р в зависимости от строения сахара. Выявленные в результате анализа литературные закономерности были использованы нами при интерпретации спектров ЯМР 31Р соединений, синтезированных в данной работе.

В главе 3 описаны синтез и исследование реакционной способности известного гликозилхлорида Neu5Ac и нового гликозилхлорида нейраминовой кислоты с двумя ацетильными группами у атома азота с нуклеофилами, в том числе с различными фосфатными реагентами. На основе выявленных закономерностей предложен первый синтез полипренилсиалилфосфатов, предполагаемых интермедиатов биосинтеза бактериальных полисиаловых кислот.

Глава 5 содержит описание методик эксперимента и физико-химические характеристики полученных соединений.

В приложении в таблицах собраны литературные данные, опубликованные до февраля 2008 г. по спектрам ЯМР 31Р гликозилмонофосфатов.

Основные результаты научного исследования опубликованы в виде статей и докладов на конференциях.

Статьи:

1. Шпирт А. М., Кононов JT. О., Торгов В. И., Шибаев В. Н. // Превращение гликозилхлорида Лг-ацетилнейраминовой кислоты в гликозилдибензилфосфат: О-гликозилирование в отсутствие промотора // Изв. АН. Сер. хим. -2004, -с. 684-686.

2. Шпирт А. М., Кононов JI. О., Торгов В. И., Шибаев В. Н. // Селективное образование а-гликозилфосфата из гликозилхлорида iV-ацетилнейраминовой кислоты // Изв. АН. Сер. хим. -2005 -с. 470-472.

3. Kulikova N. Yu., Shpirt A. M., Kononov L. О. // A facile synthesis of JV-acetylneuraminic acid glycal // Synthesis -2006 -p. 423-424.

1. Шпирт A. M., Кононов JI. О., Шибаев В. H. // Синтез ß-дибензилфосфата Лг-ацетшшейраминовой кислоты // Синтезы органических соединений; ред. Егоров М. П. -М. «МАКС Пресс» -2008 -с. 262-265.

2. Orlova А. V., Shpirt A. M., Kulikova N. Yu., Kononov L. О. Il N,M-diacetylneuraminic acid glycosyl chloride - a novel readily accessible sialyl donor in reactions with charged nucleophiles and alcohols // -2008 -направлено в печать.

3. Shpirt A. M., Kononov L. O., Maltsev C. D., Shibaev V. N. // Chemical synthesis of sialic acid polyprenyl phosphate, a probable biosynthetic intermediate of bacterial polysialic acid. 1. Synthesis of protected neuraminic acid moraprenyl glycosyl phosphate // -2008 -направлено в печать.

Конференции:

1. Shpirt A.M., Kononov L.O., Shibaev V. N. // New synthesis of sialic acid glycosyl phosphate // The Carbohydrate Workshop 2003, 27-30 March 2003, Güstrow, Germany -Book of abstracts -p. P20.

2. Shpirt A. M., Kononov L. O., Shibaev V. N. // New synthesis of sialic acid glycosyl phosphate // EGC-5: Synthesis of Biologically Important Carbohydrates and Analogues, virtual conference (http://www.netconferences.net/eurotron/), 2-6 June 2003, http://www.netconferences.net/eurotron/egc-5/abstracts/kononov.pdf.

3. Shpirt A.M., Kononov L.O., Shibaev V. N. // New synthesis of sialic acid glycosyl phosphate // 12th European Carbohydrate Symposium (Eurocarb XII), 6-11 July 2003, Grenoble, France -Book of abstracts -p. P343.

4. Шпирт A.M., Кононов JI.O., Шибаев B.H. // Новый синтез гликозилфосфата сиаловой кислоты // XVII Менделеевский съезд по общей и прикладной химии, 2126 сентября 2003 г., Казань -т. 2 -с. 436.

5. Шпирт А. М., Кононов JL О., Шибаев В. Н. // Новый синтез гликозилфосфата сиаловой кислоты // Молодежная научная школа по органической химии «Актуальные проблемы органической химии», 29 сентября-3 октября 2003 г., Новосибирск -http://www.nioch.nsc.ru/school/03/file/85.pdf.

6. Kulikova N. Yu., Shpirt А. М., Kononov L. О. // A facile synthesis of N-acetylneuraminic acid glycal // The Carbohydrate Workshop 2004, 17-20 March 2004, Borstel, Germany -Book of abstracts.

7. Shpirt A. M., Kononov L. O., Torgov V. I., Shibaev V. N. // Stereoselective synthesis of key intermediate of biosynthesis of bacterial polysialic Acid // 22nd Carbohydrate Symposium, 23-27 July 2004, Glasgow, UK -Book of abstracts -p. P324.

8. Шпирт A. M., Кононов JI. О., Торгов В. И., Шибаев В. Н. // Стереонаправленный синтез ключевых интермедиатов биосинтеза бактериальных полинейраминовых кислот // III Всероссийская школа-конференция «Химия и биохимия углеводов», 911 сентября 2004 г., Саратов -Сборник тезисов докладов -с. 61.

9. Шпирт А. М., Кононов Л. О., Торгов В. И., Шибаев В. Н. // Подходы к синтезу полипренилфосфатов iV-ацетилнейраминовой кислоты — предполагаемых интермедиатов биосинтеза бактериальных полинейраминовых кислот // I молодежная конференция ИОХ РАН, 31 марта-1 апреля 2005 г., Москва -Сборник тезисов докладов -с. 55-56.

10. Shpirt А. М., Kononov L. О., Torgov V. I., Shibaev V. N. // Chemical synthesis of sialic acid polyprenyl phosphate, a probable biosynthetic intermediate of bacterial polysialic acid // XVIII International Symposium on Glycoconjugates (GLYCO XVlII), September 4-9, 2005, Firenze, Italy -Abstract P064, Glycoconj. J. -2005 -vol. 22 -p. 257-258.

11. Шпирт A. M., Кононов Л. О., Торгов В. И., Шибаев В. Н. // Гликозилхлорид N,N-диацетилнейраминовой кислоты - новый гликозил-донор для стереоселективного синтеза гликозилфосфатов // II Молодежная конференция ИОХ РАН, 13-15 апреля 2006 г., Москва -Сборник тезисов докладов -с. 36-37.

12. Орлова А. В., Куликова Н. Ю., Шпирт А. М., Кононов Л. О. // НоЬый гликозил-донор - гликозилхлорид N, yV-диацетилнейраминовой кислоты // II Молодежная конференция ИОХ, 13-15 апреля 2006 г., Москва -Сборник тезисов докладов -с. 160-161.

13. Shpirt А. М., Kononov L. О., Torgov V. I., Shibaev V. N. // Total synthesis of sialic acid polyprenyl phosphate, a probable biosynthetic intermediate of bacterial polysialic acid //

2nd Baltic Meeting on Microbial Carbohydrates, 4-8 October 2006, Rostock, Germany -Book of abstracts - p. 9.

14. Orlova A. V., Kulikova N. Yu., Shpirt A. M., Kononov L. O., Torgov V. I. // A novel glycosyl donor — A^V-diacetylneuraminic acid glycosyl chloride // 2nd Baltic Meeting on Microbial Carbohydrates, 4-8 October 2006, Rostock, Germany -Book of abstracts -p. 10.

15. Орлова А. В., Куликова H. Ю., Шпирт А. М., Кононов JI. О. // Сравнение гликозилирующей способности гликозилхлоридов //-ацетил- и Аг,Лг-диацетил-нейраминовых кислот// IX научная школа-конференция по органической химии, 2-15 декабря 2006 г., Звенигород -Сборник тезисов докладов -с. 276

16. Шпирт А. М., Кононов JI. О., Торгов В. И., Шибаев В. Н. // Полный синтез полипренилгликозилфосфатов jV-ацетилнейраминовой кислоты — возможных интермедиатов биосинтеза бактериальных полисиаловых кислот// IX научная школа-конференция по органической химии, 2-15 декабря 2006 г., Звенигород -Сборник тезисов докладов -с. 334.

17. Shpirt А. М., Orlova А. V., Kulikova N. Yu., Kononov L. О., Torgov V. I., Shibaev V. N. // iV.jV-diacetyl-neuraminic acid glycosyl chloride — a novel glycosyl donor // 14th European Carbohydrate Symposium (Eurocarb XIV), 2-7 September 2007, Lubeck, Germany -Book of abstracts -p. РО-ОЗЗ.

18. Шпирт A. M., Орлова А. В., Куликова H. IO., Кононов JI. О., Торгов В. И., Шибаев В. Н. // Гликозилхлорид iV.iV-диацетилнейраминовой кислоты — новый сиалил-донор // XVIII Менделеевский съезд по общей и прикладной химии, 23-28 сентября 2007 г., Москва -Сборник тезисов докладов -с. 62.

19. Назарова JI. А., Шпирт А. М., Кононов JI. О. // Синтез гликозилфосфатов с помощью. ионообменной смолы // XV Международная конференция по химии соединений фосфора (ICCPC-XV), 25-30 мая 2008 г., Пушкин (Царское село) -Сборник тезисов докладов -с. 404.

2. Литературный обзор

2.1 Общие сведения о спектроскопии ЯМР 31Р

Спектроскопия ЯМР 31Р находит широкое применение для изучения строения биомолекул (белков, липидов, нуклеиновых кислот), их конформационных изменений, реакций комплексообразования с металлами6. Преимуществом данного метода является то, что атомов фосфора в молекулах содержится меньше, чем атомов других элементов, таких как углерод, водород, азот, кислород. Спектры ЯМР на ядрах 31Р обычно регистрируют с подавлением спин-спинового взаимодействия с протонами, и поэтому чаще всего спектр представляет собой набор синглетов, что облегчает его расшифровку. В литературе имеется обширный материал по спектрам фосфорсодержащих белков, фосфолипидов, нуклеиновых кислот6, но отсутствуют обзорные работы, в которых бы обсуждались спектры фосфатов углеводов. В диссертационной работе (см. раздел 3) обсуждается синтез сиалилмонофосфатов, поэтому задачей данного литературного обзора является анализ известных данных по спектрам ЯМР 31Р с целью выявления закономерностей влияния строения молекул гликозилмонофосфатов на химический сдвиг атома фосфора в спектре ЯМР 31Р.

Изотоп 31Р - единственный природный изотоп фосфора, его ядро имеет спин 1А. Свойства его таковы, что для получения сигналов одинаковой интенсивности необходимо иметь концентрацию фосфорсодержащего соединения приблизительно в 15 раз более высокую, чем для получения спектра ЯМР 'Н (6.64% чувствительности метода ЯМР 'Н). it 1-7

Теоретически спектроскопия ЯМР Р чувствительнее, чем спектроскопия ЯМР 1JC ч f приблизительно в 400 раз . На практике разница не столь велика из-за того, что ширина линий в спектрах ЯМР 13С заметно меньше, чем в спектрах ЯМР 31Р.

В спектроскопии ЯМР 31Р принято использовать в качестве внешнего стандарта 85%-ный водный раствор Н3РО4, химический сдвиг которой принимается равным нулю. В 1976 о году, по рекомендации ИЮПАК, было принято, что химический сдвиг сигнала, находящегося в более слабом поле, чем стандарт, считается положительным.

Несколько авторов предпринимали попытки разработать унифицированный подход для расчета химических сдвигов атома фосфора (см. книгу6). Наиболее удачный теоретический метод предложили Летчер (J. Н. Letcher) и Ван Вазер (J. R. Van Wazer). На основании квантово-механических расчетов они предложили формулу:

А5 = -СЬ^Хх + ^«я- + ЛД0, в которой учтены три фактора, главным образом определяющие разницу химических сдвигов атома фосфора: А%х - разница в электроотрицательностях атомов в связи Р — X, АпТ - разница в тг-перекрывании, А© разница в углах (в том числе торсионных) между а - связями, а С, к, А- константы.

В книге Горенштейна6 (Б. О. Оогег^ет) говорится о том, что влияние растворителя на химический сдвиг 31Р мало по сравнению с выше перечисленными факторами и, главным образом, связано со способностью растворителя к образованию водородных связей с фосфатом. Было показано, что на положение сигналов сказывается изменение температуры, что может сместить положения сигнала на ~ 0.5 м.д. Влияние температуры объясняется тем, что при повышении температуры .изменяется конформация в молекулах заместителей у атома фосфора, при этом изменяются торсионные углы Р-О-С-Ни, следовательно, изменяется химический сдвиг. Небольшое влияние также оказывает изменение конформации циклов и наличие водородных связей (например, для V нуклеиновых кислот от ~0.4 м.д. до 0.6 м.д.). Для гликозилмонофосфатов исследовании, связанных с влиянием среды на положение сигналов атома фосфора проведено не было.

В данном литературном обзоре представлены выборочные данные спектров ЯМР 31Р, призванные проиллюстрировать существующие тенденции и закономерности, полные

11 данные, опубликованные до февраля 2008 г., спектрам ЯМР Р гликозилмонофосфатов находятся в приложении. Все величины химических сдвигов приведены с точностью, указанной в оригинальных публикациях. Для исключения дублирования ссылки на литературу приведены на схемах, а не в тексте обзора.

Заключение диссертации по теме «Биоорганическая химия», Шпирт, Анна Михайловна

2.6 Заключение

Данные, представленные в этом обзоре, демонстрируют эффективность применения спектроскопии ЯМР 31Р для изучения строения гликозилфосфатов. Было показано, что положение сигнала атома фосфора определяется не только стереоэлектронными факторами, но и пространственным окружением фосфатной группы. Спектроскопия ЯМР 31Р позволяет определять строение веществ, которые сложно выделить в индивидуальном состоянии, так как для регистрации спектров применим любой растворитель. Необходимо отметить, что положение сигнала атома фосфора зависит не только от соседщих с фосфатной группой заместителей, но и от удаленных, что говорит о конформационных изменениях в пиранозных циклах. Впрочем, этот вопрос требует дополнительного изучения. Образование супрамолекулрных агрегатов оказывает значительнЬе влияние на спектры ЯМР 31Р, причем это влияние иногда превышает влияние внутримолекулярный электронных факторов.

3. Обсуждение результатов

3. Обсуждение результатов

В настоящее время актуальной задачей химии углеводов является поиск подходов к синтезу интермедиатов биосинтеза бактериальных полисиаловых кислот (ПСК), в первую очередь полипренилгликозилфосфата iV-ацетилнейраминовой кислоты (Neu5Ac), которые имеют большое значение в медико-биологических исследованиях. Основная сложность заключается в том, что в настоящее время отсутствуют методы стереоконтролируемого синтеза гликозилфосфатов (Neu5Ac) с а-конфигурацией аномерного центра. Для окончательного выяснения структуры природного полипренилсиалилфосфата необходимо синтезировать полипренилфосфаты Neu5Ac с различными конфигурациями аномерного центра. Полученные соединения могут быть в дальнейшем использованы в качестве модельных гликозил-акцепторов в ферментативных системах. Результаты работы послужат прояснению неизвестных в настоящее время деталей начальных стадий биосинтеза бактериальных полисиаловых кислот. Синтез таких молекул предоставит возможность для создания на их основе лекарств нового поколения.

Большинство успешных препаративных синтезов сиалогликонъюгатов было осуществлено с использованием производных JV-ацетилнейраминовой кислоты, содержащих один ацетильный остаток у атома азота (см. обзоры82,83'84). Йедавно было показано, что на результат реакции сиалилирования значительно влияет природа заместителей у атома азота остатка нейраминовой кислоты (Схемы 1, 2, 3). Как было

Of * продемонстрировано в работах Бунса (G.-J. Boons) и сотр., в реакциях метилтиогликозидов la,b с гликозил-акцептором 2 выход и время реакции зависели от заместителя у атома азота (см. Схему 1).

Схема 1

А^-Ацетилметилтиогликозид 1а реагировал с галактопроизводным 2 в течение 6 у, давая дисахарид а-За с выходом 61%. При использовании ДЛ^-диацетилметилтиогликозида 1Ь реакция завершилась через 5 мин с выходом 72%, причем потребовалось меньше гликозил - донора85 (1.7 экв. для 1а и 1.1 экв. для 1Ь). х X

1а,b (а:р = 1:1) 2

За: 2-6 ч, только а, 61% ЗЬ: 5 мин, только а, 72%

3м X — И b: X = Ас Условия реакции: /': NIS/TfOH, 3 A, MeCN, -40 °С

Магнуссон86 (О. Мадпшяоп) и сотр. (Схема 2) синтезировали гликозилфосфиты 4а,Ь. Аномерная конфигурация продуктов гликозилирования определялась стереоконтролирующей группой у С-3 атома, выход продуктов 6а,Ь и скорость реакции гликозирования зависели от заместителя у атома азота при С-5.

Схема 2

ОАс

ОАс

ОАс ОР(ОЕ02

07 'С02Ме ЭеРЬ

4а,Ь

АсО'' • - АсЫ

ОАс С02Ме а: X = Н

Ь: X = Ас 6а: 80 мин, только а, 76% 6Ь: 40 мин, только а, 50%

Условия реакции: /': ТМБСПТ, А\Л/ 300, МеСЬ!, -40 °С

Как показано в экспериментах в группе Фукасе87 (К. Биказе) сиалил-донор 7Ь реагирует быстрее, чем соответствующее производное 7а с одной ацетильной группой у атома азота, однако стереоселективность и выход реакции ниже, чем при использовании 7а (Схема 3).

Схема 3

ОАс НО ОАс

-С1-ОАС С02Ме ^С^ОАс С02Ме гр + □ ~ ---»- АсО''-^—Т^-О-^А^,

Асы-/*Т</ [Г" 9а: 6 ч, 93%, а:Р = 3.3:1

Л АсО Д ' АсО 9Ь: < 5 мин, 75%, а:р = 2.5:1

7а,Ь 8 ВгОЛ^А

ВгО|

О ^^

Условия реакции: //': ТМвСИТ, 4 А, ЕГСЫ, -78 °С

Причины влияния удаленного заместителя на результат реакции гликозилирования до

ОО ОЛ о/) сих пор неясны ' • . Представляет интерес поиск новых сиалил-доноров с двумя ацетильными группами у атома азота и исследование их реакционной способности в сравнении с известными моноацетильными производными.

Данная диссертационная работа посвящена исследованию реакционной способности гликозилхлоридов нейраминовой кислоты (сиалилхлоридов) с одной и двумя ацетильными группами у атома азота и их применению для синтеза полипренилсиалилфосфатов - предполагаемых интермедиатов биосинтеза полисиаловых кислот.

3.1. Синтез гликозилхлорида 7У,Л^диацетилнейраминовой кйслот£1

Гликозилхлорид91 11а с одной ацетильной группой у атома азота был впервые синтезирован в 1965 г. (Схема 4). В литературе описано несколько способов синтеза а: X = н

Ь: X = Ас

82 сиалилхлорида 11а , наиболее распространенным является использование газообразного HCl в АсС1. В данной работе гликозилхлорид 11а с одной ацетильной группой у атома азота был получен по модифицированной методике из известного ацетата92 10а. Мы разработали удобную методику получения 11а в CH2CI2, основанную на генерировании хлорирующего реагента (HCl) in situ из AcCl и МеОН (Схема 4). После завершения реакции, процесс выделения продукта сводится к простому упариванию реакционной смеси. Выход гликозилхлорида 11а на -18% превышает теоретический, что обусловлено координацией HCl с амидной группой в /V-ацетилнейраминовой кислоте93. Спектры ЯМР *Н и 13С совпали с литературными94.

Схема 4 о-/-со2ме сн,С1, achnZZÄ/ COzMe

11а

ОАс Ж

TsOH • н2о

-100%

ОАс

ОАс HCl Ас0, ^ '

2 q 2 2 aco acu 1qb

-100%

Интересующий нас гликозилхлорид lib с двумя ацетильными группами у атома азота в литературе описан не был, и нам предстояло разработать метод его синтеза. Мы получили гликозилхлорид lib с количественным выходом из известного перацетйлированнного производного85 10b, используя те же условия, что и для синтеза гликозилхлорида 11а (Схема 4). Было найдено, что новое соединение lib достаточно стабильно и может храниться в течение месяцев при низкой температуре. Строение lib было доказано с помощью спектроскопии ЯМР *Н и 13С. Так, например, в спектре ЯМР *Н хлорка lib V присутствуют необычно слабопольные сигналы H-3eq (5н 2.89 м.д.) и Н-4 (5н 5.89 м.д.) (ср. для 11а: H-3eq (8Н 2.78 м.д.) и Н-4 (8Н 5.35 м.д.)). В то же время, в спектре ЯГу1Р 13С хлорида lib сигнал С-5 (5с 56.1 м.д.) сдвинут в слабое поле по сравнению с сигналом С-5 в спектре 11а (5с 48.5 м.д.), что однозначно указывает на присутствие дополнительной электроноакцепторной группы у атома азота C(5)N.

3.2. Реакции гликозилхлоридов нейраминовой кислоты с нуклеофилами

Далее мы исследовали реакционную способность гликозилхлорида N,N-диацетилнейраминовой кислоты lib в сравнении с известным гликозилхлоридом N-ацетилнейраминовой кислоты 11а в реакциях с различными нуклеофилами.

3.2.1. Реакции с незаряженными О-нуклеафилами (спиртами)

На первом этапе нашей работы мы решили оценить реакционную способность гликозилхлоридов 11а,Ь в реакциях с незаряженными О-нуклеофилами, простыми спиртами. В качестве модельных реакций мы выбрали реакции с МеОН и А110Н. Все реакции хлоридов 11а,Ь со спиртами проводили в отсутствие промотора, т.к. ранее было показано, что гликозилхлорид 11а с одной ацетильной группой у атома азота реагирует с метанолом за 1 ч без добавления промотора, давая с высоким выходом исключительно а-метилгликозид95 (Схема 5, таблица 1, опыт 1). Мы ожидали, что, как и в случае с N,N-диацетилтиогликозидами85'88, гликозилхлорид lib будет более реакционноспособен, чем хлорид 11а. И действительно, реакция хлорида lib с чистым метанолом завершилась через 0.5 ч, давая метилгликозид 12Ь с высоким выходом -100% в качестве единственного продукта. К нашему удивлению, реакция сиалилхлорида lib с метанолом дала существенные количества ß-изомера наряду с а-метилгликозидом 12Ь (схема 5, таблица 1, опыт 2).

Стереоселективность реакции уменьшается, если проводить ее в смеси МеОН — MeCN (1:1). При этом гликозилхлорид 11а давал смесь аномеров a:ß = 12:1 (таблица 1, опыт 3), а гликозилхлорид lib с двумя ацетильными группами у атома азота прйводил к еще большему падению стереоселективности (a:ß = 3:1, таблица 1, опыт 4). Спектры ЯМР 'Н и 13С для соединений 12а95 и 12Ь96 совпали с известными в литературе.

Схема 5 а, с: X = Н b: X = Ас

ОАс

ОАс CI

C02R'

11а: R' = Me 11b: R' = Me 11c: R" = H

OAc

ROH

OAc C02R'

OR

OAc

AcO' AcN 'AcO

12a,b: R = R" = Me 13a: R' = Me, R = All 13b: R1 = Me, R = All 13c: R' = H, R = All

AcO"

COzMe

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Шпирт, Анна Михайловна, 2008 год

1. Angata Т., VarkiA. Chem. Rev. -2002 -Vol. 102 -p. 439-469

2. Schauer R. In Carbohydrates in Chemistry and Biology (Eds.: B. Ernst, G. W. Hart, P. Sinay), Wiley-VCH, Weinheim -2000 -part II -Vol. 3 -p. 227-244.

3. Mühlenhoff M., Eckhardt M, Gerardy-Schahn R. Curr. Biol, in Struc. Biol -1998 -Vol. 8 -p. 558-564.

4. Jydar L., Feavers I. M, Salisbury D., GranoffD. M The Lancet -2002 -Vol. 359 -p. 14991508.

5. Troy II F.A. Glycobiology -1992 -Vol. 2 -p. 5-23.

6. Gorenstein D. G. Phosphurs 31 NMR, principles and applications (Ed by Gorenstein D. G.). -Academic Press, 1984. -604 p.

7. КорбриджД. Фосфор. Основы химии, биохимии, технологии. -М. «Мир», 1982. -с. 644.

8. Правила ИЮПАК: Pure Appl. Chem. -1976 -Vol. 45 -p. 217-219.

9. Martin T.J. Dissertation Dr. rer. nat., , Universität Konstanz, Deutschland. Hartung-Gorre-Verlag 1994.

10. Tai V. W.-F., Imperial В. J. Org. Chem. -2001 -No 19 -p. 6217-6228.

11. Rulschow S„ Thiem J., Kranz С., Marquardt Т. Bioorg. Med. Chem. -2002 -Vol. 10 -No. 12 -p. 4043-4050.

12. Ravida A., LiuX., Kovacs L., SeebergerP. II. Org. Lett. -2006 -Vol. 9 -p. 1815-1818.

13. Soldaini G.,Cordana F. Goti A. Org. Lett. -2005 -Vol. 4, -p. 725 728.

14. Montoya-Peleaz P. J., Riley J. G., Szarek W. A., Valvano M. A„ Schutzbach J. S„ Brockhausen I. Bioorg. Med. Chem. Lett. -2005 -Vol. 15 -No. 4 -p. 1205-1212.

15. Flitsch S. L, Pinches H. L., Taylor J. P., Turner N. J. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 -1992 -No. 16 -p. 2087-2094.

16. Zamyatina A., Gronow S., Puchberger M., Graziani A., Hofinger A., Kosma P. Carbohydr. Res. -2003 Vol. 338 -No. 23 -p. 2571-2590.

17. Schmidt R. R., Wegmann В., Jung К.-H. Liebigs Ann. Chem. -1991 -No. 2 -p. 121-124.

18. Zhang Q., Liu H.-w. J. Am. Chem. Soc. -2001 -Vol. 123 -No. 28 -p. 6756-6766.

19. Zhang Q., Liu H.-w. J. Am. Chem. Soc. -2000 -Vol. 122 -No. 38 -p. 9065-9070.

20. Tsvetkov Y. E., Nikolaev A. V. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 -2000 -Vol. 6 -p. 889-892.21. de Lederkremer R. M., Nahmad V. B. Varela O. J. Org. Chem. -1994 -Vol. 59 -No. 3 -p. 690-692.

21. Pale P., Whitesides G. M. J. Org. Chem. -1991 -Vol. 56 -No. 14 -p. 4547-4549.

22. Jiang J., Biggins, J. В., Thorson J. S. J. Am. Chem. Soc. -2000 -Vol. 122 -No. 28 -p. 6803-6804.

23. Ott A.-J., Brackhagen M., Davtyan A., Nolting В., Boye H, Schoknecht A., Vogel С. J. Carbohydr. Chem. -2001 -Vol. 20 -No. 7-8 -p. 611-636.

24. Veeneman G. H., Broxterman H. J. G., Marel G. A. van, der Boom J. H. van Tetrahedron Lett. -1991 -Vol. 32 -No. 43 -p. 6175-6178.

25. Melean L. G. Love K. R. Seeberger P. H. Carbohydr. Res. -2002 -Vol. 337 -No. 21-23 -p. 1893-1916.

26. Plante О. J., Palmacci E. R„ Andrade К В., Seeberger P. H. J. Am. Chem. Soc. -2001 -Vol. 123 -No. 39 -p. 9545-9554.

27. Plante О. J., Andrade R. В., Seeberger P. H. Org. Lett -1999 -Vol. 1 -No. 2 -p. 211-214.

28. Timmers С. M., van Straten N. С. R., van der Marel G. A., van Boom J. H. J. Carbohydr. Chem. -1998 -Vol. 17 -No. 3 -p. 471-488.

29. Love K. R., Seeberger P. H. Synthesis -2001 -No. 2 -p. 317-322.

30. HochM., Heinz E., Schmidt R. R. Carbohydr. Res. -1989 -Vol. 191 -p. 21-28.

31. Hartman M. С. Т., Coward J. K. J. Am. Chem. Soc. -2002 -Vol. 124 -No. 34 -p. 1003610053.

32. Понтер X. Введение в курс спектроскопии ЯМР. -М. «Мир», 1984 -с. 82.

33. Hunt D. К., Seeberger P. Н. Org. Lett. 2002 -No. 16 -p. 2751-2754.

34. Sabesan S., Neira S. Carbohydr. Res. -1992 -Vol. 223 -p. 169-186.

35. Vincent S. P., Burkart M. D. Tsai C.-Y., Zhang Z., Wong C.-H. J. Org. Chem. -1999 -Vol. 64 -No. 14 -p. 5264-5279.

36. Tai V. W.-F., O'Reilly M. K„ Imperiali B. Bioorg. Med. Chem. -2001 -Vol. 9 -No. 5 -p. 1133-1140.38. lllarionov P. A., Torgov V. 1., Hancock I. C., Shibaev V. N. Tetrahedron Lett. -1999 -Vol. 40 -No. 22 -p. 4247-4250.

37. Илларионов П. А., Торгов В. И., Ханкок И. И., Шибаев В. Н. Изв. АН. Серия хим. -2001 -№ 7 -с. 1242-1247.

38. GranataA., Perlin A. S. Carbohydr. Res. 1981 -Vol. 94 -p. 165-172.41 .Majumdar D., Elsayed G. A., Buskas Т., Boons G.-J. J. Org. Chem. -2005 -Vol. 5 -p. 1691-1697.

39. El-Abadla N., Lampilas M., Hennig L., Findeisen M„ Welzel P. Tetrahedron -1999 -Vol. 55 -No. 3 -p. 699-722.

40. Riedel S„ Donnerstag A., Hennig L., Welzel P., Richter J. Tetrahedron -1999 -Vol. 55 -No. 7-p. 1921-1936.

41. Higson А. P., Ross А. ./., Tsvetkov Y. Е., Routier F. К, Sizova О. V., Ferguson М. A. J., Nikolaev А. V. Chem. Europ. J. -2005 -Vol. 11 -No. 7 -p. 2019-2030.

42. Nikolaev A. V., Rutherford T. J., Ferguson M. A. J., Brimacombe J. S. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 -1996 -No. 13 -p. 1559-1566.

43. Ross A. J., Ivanova I. A., Ferguson M. A. J., Nikolaev A. V. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1 -2001 -No. 1 -p. 72-81.

44. Ruhe la D., Chatterjee P., Vishwakarma R. A. Org. Biomol. Chem. -2005 -Vol. 6 -p. 1043-1048.

45. Лебедев А. В., Резвухин А. И. Биоорган. Хим. -1983 -Т. 9 -с. 149-185.

46. Martin Т. J., Schmidt R. R. Tetrahedron Lett. -1993 -Vol. 34 -No. 11 -p. 1765-1768.

47. Kajihara Y., Ebata Т., Koseki K, Kodama H„ Matsushita H„ Hashimoto H. J. Org. Chem. -1995 -Vol. 60 -No. 17 -p. 5732-5735.

48. ChappellM. D., Halcomb R. L. Tetrahedron Lett. -1999 -Vol. 40 -No. 1 -p. 1-4.

49. Kajihara Г., Ebata Т., Kodama H. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. -1998 -Vol. 37 -No. 22 -p. 3166-3169

50. Simon E. S., Bednarski M. D., Whitesides G. M. J. Am. Chem. Soc. -1988 -Vol. 110 -p. 7159-7163.

51. Liu J. L., Shen G. J., Ichikawa Y„ Rutan J. F., Zapata G., Vann W. F., Wong С. H. J. Am. Chem. Soc. -1992 -Vol. 114 -p. 3901-3910.

52. Hermans J. P. G., de Vroom E., Elie C. J. J., van der Marel G. A., van Boom J. H. Reel. Trav. Chim. Pays-Bas 1986 -Vol. 105 -p. 510-512.

53. Salam M. A., Behrman E. J. Carbohydr. Res. -1981 -Vol. 90 -p. 83-90.

54. Елисеева Г. К, Иванова И. А., Николаев А. В., Шибаев В. Н. Биоорган. Хим. -1991 -Т. 17 -№ 10-е. 1401-1411.

55. Nikolaev А. V., Ivanova I. A., Shibaev V. N. Kochetkov N. К. Carbohydr. Res. -1990 -Vol. 204 -No. 1 -p. 65-78.

56. Nikolaev A. V., Ivanova I. A., Shibaev V. N. Carbohydr. Res. -1993 -Vol. 242 -p. 91-108.

57. Berkin A., Coxon В., Pozsgay V. Chem. Europ. J. -2002 -Vol. 8 -No. 19 -p. 4424-4433.

58. Nikolaev A. V., ChudekJ. A., Ferguson M. A. J. Carbohydr. Res. -1995 -Vpl. 272 -No. 2 -p. 179-190.

59. Ogawa Т., Seta A. Carbohydr. Res. -1982 -Vol. 110 -p. C1-C4.

60. Николаев А. В., Иванова И. А., Шибаев В. Н. Биоорган. Хим. -1992 -Т. 18 -№ 1 -с. 126-141.

61. Ruda К., Lindberg J., Garegg P. J., Oscarson S., Konradsson P. Tetrahedron -2000 -Vol. 56 -No. 24 -p. 3969-3976.

62. Shibaev V. N„ Danilov L. L. in Studies in Natural Products Chemistry (ed by Atta Ur -Rahman). -A.: Elsevier, 1991 -p. 63-113.

63. Cozzone P. J., Jardetzky O. Biochemistry -1976 -Vol. 15 -No. -22 -p. 4853-4859.

64. Gokhale U. В., Hindsgaul O., Palcic M. M. Can. J. Chem. -1990 -Vol. 68 -No. 7 -p. 1063-1071.

65. Percival M, D., Withers S. G. Can. J. Chem. -1988 -Vol. 66 -p. 1970-1972.

66. Hanessian S., Lu P.-P., Ishida H. J. Am. Chem. Soc. -1998 -Vol. 120 -No. 51 -p. 1329613300.

67. Costello A. J. R., Glonek Т., van WazerJ. R. Inorg. Chem. -1976 -Vol. 15 -p. 972-974.

68. В erne t В., Wyss C. Helv. Chim. Acta -1988 -Vol. 71 -p. 818-821.

69. Zhao Y., ThorsonJ. S. J. Org. Chem. -1998 -Vol. 63 -No. 21 -p. 7568-7572.

70. Miles J. A. L„ Mitchell L., Percy J. M., Singh K., Uneyama E. J. Org. Chem. -2007 -Vol. 72-No. 5-p. 1575-1587.

71. Euzen R., Ferrieres V., Plusquellec D. J. Org. Chem. -2005 -Vol. 70 -No. 3 -p. 847-855.

72. Marino K., Marino C., Lima C., Baldoni L„ Lederkremer R. M. de Eur. J. Org. Chem. -2005 -No. 14 -p. 2958-2964.

73. Hariprasad V., Singh G., Tranoyl. Chem. Commun. -1998 -No. 19 -p. 2129-2130.

74. VankayalapatiH., Singh G., Tranoyl. Tetrahedron: Asymmetry -2001 -Vol. 12 -No. 9 -p. 1373-1382.

75. Zamyatina A., Gronow S., Oertelt C., Puchberger M., Brade H., Kosma P. Angew. Chem. Int. Ed. -2000 -Vol. 39 -No. 22 -p. 4150-4153.

76. FathiR., Jordan F. J. Org. Chem. -1986 -Vol. 51 -No. 22 -p. 4143-4146.

77. FathiR., Jordan F. J. Org. Chem. -1988 -Vol. 53 -No. 9 -p. 1997-2001.

78. Marlow A. L., KiesslingL. L. Org. Lett. -2001 -Vol. 3 -No. 16 -p. 2517 2520.

79. Boons G.-J., DemchenkoA. V. Chem. Rev. -2000 -Vol. 100 -p. 4539-4565.

80. RessD. K., Linhardt R. J. Curr. Org. Synth. -2004 -Vol. 1 -p. 31-46.

81. De Meo C. in Frontiers in Modern Carbohydrate Chemistry (Ed by A. V. Demchenko), ACS symposium series 960, Washington DC -2007 -p. 118-129.

82. DemchenkoA. V., Boons G.-J. Eur. J. Chem. Org. -1999 -Vol. 5 -p. 1278-1283.

83. Ercegovic Т., Nilsson U. J., Magnusson G. Carbhydr. Res. -2001 -Vol. 331 -p. 255-263.

84. TanakaK., Goi Т., Fukase K. Synlett -2005 -p. 2958-2962.

85. De Meo C„ Priyadarshani U. Carbohyd. Res. -2008 -Vol. 343 -p. 1540-1552.89., Кононов JI. О., Малышева Н. Н., Кононова Е. Г., Гаркуша О. Г. Изв. АН, Сер. Хим -2006 -№7 -с. 1263-1265.

86. Kononov L. О., Malysheva N. N. Kononova E. G„ Orlova A. V. Eur. J. Chem. Org. -2008 -No. 19-p. 3251 -3255.

87. TuppyM. Monatsh. Chem. -1965 -Vol. 96 -p. 802-814.

88. Marra A., Sinay P. Carb. Res. -1989 -Vol. 190 -p. 317-322.

89. ByramovaN. E., TuzikovA. В., BovinN. V. Carbohydr. Res. -1992 -Vol. 237 -p. 161-175.

90. SharmaM. N. EbyR. Carbohydr. Res. -1984 -Vol. 127 -p. 201-210.

91. Kononov L. O., Magnusson G. Acta. Chem. Scand. -1998 -Vol. 52 -p. 141-144.

92. Crich D., Li W. Org. Lett. -2006 -Vol. 8 -p. 959-962.

93. Allanson N. M, Davidson A. H., Floyd C. D., Martin F M. Tetrahedron: Asymmetry -1994-Vol. 5-p. 2061-2076.

94. Tanaka Т., Ozawa M„ Miura Т., Inazu Т., Tsuji S., Kajimoto T. Synlett -2002 -p. 14871490.

95. TropperF. D., Andersson F. O., Braun S., Roy R. Synthesis -1992 -p. 618-620.

96. Cao S., Meunier S. J., Andersson F. O., Letellier M„ Roy R. Tetrahedron: Asymmetry -1994 -Vol. 5 -p. 2303-2312.

97. Marra A., Sinay P. Carbohydr. Res. -1989 -Vol. 187 -p. 35-42.

98. Martichonok V., Whitesides G. M. J. Org. Chem, -1996 -Vol. 61 -P. 1702-1706

99. Tropper F. D., Andersson F. O., Cao S., Roy R. J. Carbohydr. Chem. -1992 -Vol. 11 -P. 741-750.

100. Makosza M. Pure Appl. Chem. -2000 -Vol. 72 -p. 1399-1403.

101. Ando #., Koike Y., Ishida #., Kiso M. Tetrahedron Lett. -2003 -Vol. 44 -p. 68836886.

102. Xia J., Alderfer J. L„ Piskorz C. F, Locke R. D„ Matta K. L. Carbohyd. Res. -2000-Vol. 328 -p. 147-163.

103. Gokhalaen U. В., Hindsgaul O., Palcic M. M. Can. J. Chem -1990 -Vol. 68 -p. 1063-1071.

104. Sim M. M., Kondo H., Wong С. Я J. Am. Chem. Soc. -1993 -Vol. 115 -p. 22602267.

105. Hori Я, Nakajima Т., Nishida Y., Ohrui H„ Meguro H. Tetrahedron Lett. -1988 -Vol. 29-p. 6317-6320.

106. Tsvetkov Y. E., Nifantiev N. E. -Synlett -2005 -№ 9 -p. 1375-1380.

107. Ходж П., Шеррингтон Д. Реакции на полимерных подложках в органическом синтезе -М.: Мир, 1983 -604 с.

108. Tzschucke С. С., Markert С., Bannwarth W., Roller S., Hebel A., Haag R. Angew. Chem. Int. Ed. -2002 -Vol. 41 -p. 3964-4000.

109. Лемъе Р. У. Методы химии углеводов, под ред. Кочеткова Н. К. -М. «Мир» -1967 -с. 123-125.

110. Roy R., Tropper F., Grand-Maitre С. Can. J. Chem. -1991 -Vol. 69 -p. 14621467.

111. Baisch G„ Ohrlein R. Bioorg. Med. Chem. -1997 -Vol. 5 -№. 2 -p. 383-391.

112. Hennen W.J., Sweers H.M., Wang Y.-F., Wong C.-H. J. Org. Chem. -1988 -53 -p. 4939-4945.

113. Niggemann J., Thiem J. Liebigs Ann. Chem. -1992 -p. 535-538.

114. Bock K., Guzman J. F.- В., Norrestam R. Carbohydr. Res. -1988 -Vol. 179 -p. 97124.

115. Хортон Д. Методы исследования углеводов, под ред. Хорлина А. Я. -М. «Мир»-1975 -с. 221-224.

116. Байрамова Н. Э., Бакиновский Л. В., Кочетков Н. К. -Изв. АН. Сер. хим. -1985 -т. 5-с. 1140-1145.

117. Chambers D.J., Evans G.R. Tetrahedron -2004 -Vol. 60 -p. 8411-8419.

118. MisraA. K, Agnihotri G. Carbohydr. Res. -2004 -Vol. 339 -p. 885-890.

119. Okamoto K, Kondo Т., Goto T. Bull. Chem. Soc. Jpn. -1987 -Vol. 60 -p. 631-636.

120. Bagget В., Marsden N. Carb. Res. -1982 -Vol. 110 -p. 11-18.125. von Itzstein M. Nature Rev. Drug disc. -2007 -Vol. 2 -p. 961-91 A.

121. Meindl P, Tuppy tf Monatsh. Chem. -1969 -Vol. 100 -p. 1295- 1306.

122. Claesson A., Luthman K. Acta Chem. Scand., Ser. B. -1982 -Vol. В 36 -p. 719720.

123. Schmid W., Christian R, Zbiral E. -Tetrahedron Lett. -1988 -Vol 29 -p. 36433646.

124. Ercegovic Т., Magnusson G. J. Chem. Soc. Chem. Commun. -1994 -p. 831-832.

125. Kok G. В., Mackey B. L, von Itzstein M. -Carbohydr. Res. -1996 -Vol. 289 -p. 6775.

126. Кононов Л. О., Комарова Б. С., Нифантьев Н. Э. -Изв. АН. Сер. хим. -2002 -р. 644-648.

127. Ikeda, К.; Konishi, К.; Sano, К.; Тапака, К. Chem. Pharm. Bull. -2000 -Vol. 48 -p. 163-165.

128. Ichikawa Y., Sim M. M. Wong C.-H. J. Org. Chem. -1997 -57 -p. 2943-2946.

129. Gotoh Т., Koyama Т., Ogura K. J. Biochem. -1992 -Vol. 122 -p. 20-27.

130. Smith M. В., March J. March's Adv. Org. Chem 5ed -Wiley: New Yorck -2001 -2083 p.

131. Kiss J Z, Rougon G. Curr. Opin. Neurobiol. -1997 -Vol. 640-646.

132. Glick M. C. Livingston B. D„ Shaw G. W, Jacobs G. L. Troy F. A. Adv. in Neurobl. Res. (in Evans A. E., Knudson A. G., Seeger R. C., D' Angio G. J. Ed), Willey-Liss, New York -1991 -Vol. 3 -p. 267-274.

133. Heitz P. U., Komminoth P., Lackie P. M., Zuber C., Roth J. Verh. Dtsch. Ges. Pathol. -1990 -Vol. 74 -p. 376-377.

134. Moolenaar С. E., Muller E. J., Schol D. J., Figdor C. G., Bock E. Cancer Res. -1990-Vol. 50-1102-1106.

135. Ito F., Inoue S., Inoue Y., Troy F. A. Glycoconjugate J. -1991 -Vol. 8 -p. 153.

136. Colino J., Outschoorn I. Infect. Immun. -1997 -Vol. 66 -p. 505-513.

137. Vogel U., Weinberger A., Frank R., Muller A., Kohl J., Atkinson J. P., Frosch M. -Infect. Immun. -1997 -Vol. 65 -p. 4022-4029.

138. Jarvis G. A. Trends Microbiol. -1995 -Vol. 3 -p. 198-201.

139. Vimr E., Steenbergen S., Cieslewicz M. J. Indust. Microbiol. -1995 -Vol. 15 -p. 352-360.

140. VionnetJ, Vann W F. Glycobiology -2007 -Vol. 17 -p. 735-743.

141. Gaudino J. J., Paulson J. C. J. Am. Chem. Soc. -1994 -Vol. 116 -p. 1149-1150.

142. Кусов Ю. Ю., Киселева E. В., Данилов JI. Л., Шибаев В. Н., Кочетков Н. К, Рожнова С. Ш., Килессо В. А. Биорг. хим. -1979 -т. 5 -с. 1863-1872.

143. Warren С. D„ Jeanloz R. W -Biochemistry -1973 -12 -p. 5031-5037.

144. Yamazaki Т., Laske D. W, Herscovics A., Jeanloz R. W. -Carb. Res. -1983 -120 -p. 159-170.

145. Zhou G. P., Troy IIF. A Glycobiology -2005 -Vol. 4 -p. 347-359.

146. Гордон А., Форд P. Спутник химика -M. «Мир» -1976 -с.440.

147. Фрумииа Н. С., Лисенко Н. Ф., Чернова М. А.Хлор. -М.: Наука -1983 -с. 19.

148. Leaback D., Heath Е„ Roseman S. -Biochemistry -1969 -Vol. 8 -№4 -p. 13511359.

149. Franzyk H., Meldal M., Paulsen H., Bock K. J. Chem. Soc., Perkin Tran.l -1995 -Vol. 22 -p. 2883-2898.

150. Досон P., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. -Справочник биохимика -М. «Мир», 1991 -с. 359.1. Оглавление к Приложению