Формирование подходов к поиску и фармакологической оценке новых соединений – кандидатов в лекарственные средства для лечения эндотелий-ассоциированной патологии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, доктор наук Корокина Лилия Викторовна

• Корокина Лилия Викторовна
• доктор наук
• 2025

Оглавление диссертации доктор наук Корокина Лилия Викторовна

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ

1.1 Фармакологические методы коррекции эндотелиальной дисфункции

1.2 Сахарный диабет и его сосудистые осложнения - роль нарушений метаболизма оксида азота

1.3 Легочная артериальная гипертензия - эпидемиология и возможности фармакологической коррекции

1.4 Ингибиторы тромбина - возможности фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции

1.5. Производные эритропоэтина в коррекции эндотелий-ассоциированной

патологии и легочной гипертензии

Резюме

2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Соответствие диссертационного исследования принципам биоэтики и гуманного обращения с животными

2.2 Дизайн исследования

2.3 Исследуемые в работе соединения, лекарственные вещества

2.3.1 Соединения фенольной природы

2.3.2 Производные эритропоэтина, лишенные гемопоэтической активности

2.4 Лабораторные животные

2.5 Методы проведения докинговых исследований

2.6. Скрининговые исследования фармакологической активности

2.6.1 Методы скринингового изучения активности соединений на препаратах изолированных колец аорты

2.6.2 Методы изучения активности соединений фенольной природы на модели L-КАМЕ индуцированной эндотелиальной дисфункции

2.6.3 Первичный скрининг эндотелиопротективной активности инновационных

пептидов, имитирующих а-спираль b эритропоэтина на модели гипергомоцистеин-индуцрованной эндотелиальной дисфункции

2.7 Методы изучения фармакологической активности на моделях легочной гипертензии

2.7.1 Модель монокроталиновой легочной гипертензии

2.7.2 Модель легочной гипертензии, индуцированной гипоксией у мышей

2.7.3 Методы оценки развития легочной гипертензии и ее коррекции исследуемыми соединениями

2.8 Методы изучения фармакологической активности на модели сахарного диабета и его сосудистых осложнений

2.9 Методы изучения фармакологической активности при моделировании баллонной травмы и FeCl3 индуцированной модели тромбообразования

2.10 Методы изучения фармакологической активности комбинированного применения соединений-лидеров из группы производных эритропоэтина и производных амидов гетероциклических кислот на модели гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции

2.11 Методы изучения острой и субхронической токсичности

2.12 Методы изучения специфических видов токсичности

2.12.1 Исследование специфических видов токсичности соединений фенольной природы

2.12.2 Доклиническое исследование мутагенности КУД

2.13 Статистический анализ полученных результатов

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Выбор образцов соединений фенольной природы, содержащих непосредственно связанные гетероатомные и/или гетероциклические структурные фрагменты методом компьютерного моделирования

3.2 Результаты скрининговых исследований фармакологической активности соединений фенольной природы и производных эритропоэтина

3.2.1 Скрининг активности соединений на препаратах изолированных колец аорты

3.2.2 Скрининг активности соединений фенольной природы на модели L-NAME индуцированной эндотелиальной дисфункции

3.2.3 Скрининговое исследование активности производных эритропоэтина на модели гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиалиальной дисфункции

3.3 Результаты исследования фармакологической активности соединения-лидера из группы соединений фенольной природы на моделях легочной гипертензии

3.3.1 Результаты исследования на модели монокроталин-индуцированной легочной гипертензии

3.3.2 Результаты исследования на модели легочной гипертензии, индуцированной гипоксией

3.4 Результаты исследования фармакологической активности соединения-лидера фенольной природы из группы ингибиторов тромбина на модели сосудистых осложнений сахарного диабета

3.5 Результаты исследования фармакологической активности соединения-лидера из группы ингибиторов тромбина и аргиназы-2 при моделировании баллонной травмы и FeQ3 индуцированной модели тромбообразования

3.6 Результаты исследования фармакологической активности производных эритропоэтина на модели легочной гипертензии

3.6.1 Результаты исследования на модели монокроталин-индуцированной легочной гипертензии

3.6.2 Результаты исследования на модели легочной гипертензии, индуцированной гипоксией

3.7 Результаты исследования фармакологической активности производных эритропоэтина на модели сосудистых осложнений сахарного диабета

3.8 Результаты исследования фармакологической активности производных эритропоэтина при моделировании баллонной травмы и FeQ3 индуцированной модели тромбообразования

3.9 Результаты комбинированного применения соединения-лидера из группы соединений фенольной природы и соединения-лидера из группы производных эритропоэтина на модели гипергомоцистеин индуцированной эндотелиальной дисфункции

3.10 Изучение общей токсичности соединения фенольной природы, содержащего непосредственно связанные гетероатомные и/или гетероциклические структурные фрагменты с лабораторным шифром

3.10.1 Острая токсичность

3.10.2 Субхроническая токсичность

3.11 Изучение специфических видов токсичности соединений фенольной природы, содержащих непосредственно связанные гетероатомные и/или гетероциклические структурные фрагменты с лабораторным шифром КУД975

3.11.1 Результаты исследования аллергизирующих свойств

3.11.2 Результаты исследования мутагенной активности

3.11.3 Оценка цитогенетической активности соединения фенольной природы с лабораторным шифром КУД975 в популяции клеток костного мозга in vivo

3.11.4 Результаты исследования иммунотоксичности

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность избранной темы исследования

Дисфункция сосудистого эндотелия и возникающая в результате сосудистая патология на сегодняшний день идентифицированы как ранние признаки множества заболеваний, включая артериальную гипертензию, легочную гипертензию, сахарный диабет и его сосудистые осложения, ишемическую болезнь сердца, гестоз и другие социально-значимые заболевания. Одним из основных факторов, способствующих эндотелиальной дисфункции, является снижение биодоступности оксида азота (N0), нарушение передачи сигналов N0 и увеличение количества активных форм кислорода (АФК). В эндотелии N0 вырабатывается эндотелиальной синтазой оксида азота (eN0S), субстратом для которой является L-аргинин. Учитывая выше сказанное, поиск новый путей и подоходов к терапевтическому воздействию на основные звенья эндотелий ассоциированного сосудистого гомеостаза является актуальной задачей современной медицины и фармакологии.

Степень разработанности темы

Актуальность формирования целостных подходов к поиску и фармакологической оценке новых соединений - кандидатов в лекарственные средства для лечения эндотелий-ассоциированной патологии обусловлена и теми нозологическими формами, которые входят в перечень эндотелий-ассоциированных заболеваний. Так, легочная гипертензия (ЛГ) - группа опасных для жизни прогрессирующих заболеваний различного генеза, характеризующихся прогрессивным повышением артериального давления (АД) в легочной артерии (ЛА), ремоделированием легочных сосудов, что приводит к усилению легочного сосудистого сопротивления и легочного артериального давления и, чаще всего, приводит к правожелудочковой сердечной недостаточности и преждевременной смерти. В последние годы активно изучается роль дисфункции эндотелия легочных сосудов при ЛГ различного генеза. На сегодняшний день остается актуальным вопрос взаимосвязи нарушений сосудистой реактивности, связанной

с гипоксией при различной патологии легких, в том числе при легочной гипертензии, и эндотелиальной дисфункции.

Другим социально-значимым заболеванием, ассоциированным с эндотелиальной дисфункцией, является сахарный диабет (СД) и его сосудистые осложнения. У пациентов с сахарным диабетом атеросклероз является основной причиной снижения продолжительности жизни, а диабетическая нефропатия и ретинопатия являются основными причинами терминальной стадии почечной недостаточности и слепоты соответственно. Оптимизация терапевтических стратегий в лечения сосудистых осложнений диабета может включать блокаду механизмов повреждения, а также стимулирование защитных или регенерирующих факторов, например, путем усиления действия генов, регулируемых инсулином, в эндотелиальных клетках, активизации антиоксидантных или противовоспалительных факторов. Такие терапевтические стратегии могли бы сыграть ключевую роль в профилактике сосудистых осложнений сахарного диабета несмотря на неоптимальный метаболический контроль гликемии.

Одновременно эндотелиальная дисфункция является причиной различных нарушений в системе свертывания крови. Нарушения в системе свёртывания крови являются причиной более чем трети смертей при различных патологических состояниях: сердечно-сосудистых заболеваниях, травмах различной природы и хирургических операциях, сепсисе, ожогах, онкологических заболеваниях, заболеваниях, связанных с патологией гемостаза, и т.п.

При анализе литературных данных становится очевидно, что разработка новых ингибиторов аргиназ представляет собой многообещающую стратегию в отношении лечения заболеваний, связанных с нитроксидэргичекой системой. Кроме того, учитывая различную экспрессию аргиназы-1 и аргиназы-2 в тканях и их различное физиологическое действие, на сегодняшний день доступно достаточно большое количество специфических и селективных ингибиторов этих двух изоформ фермента. Например, эндотелиоциты экспрессируют обе изоформы аргиназ, однако точно неизвестно, какова роль каждой из этих изоформ в

развитии ЭД. Остаются значительные разногласия относительно роли экспрессии аргиназ при различных состояниях, таких как атеросклероз и другие формы воспаления сосудов. Например, гипергликемия при сахарном диабете вызывает ЭД посредством активации p38 MAPK, который вызывает повышенную регуляцию ARG 1 в коронарных артериях и повышенную экспрессию ARG 2 в брыжеечных артериях [27, 177]. Исследования показали, что блокада аргиназ может предотвращать снижение ангиогенеза за счет увеличения экспрессии VEGF, индуцированной NO, индуцировать восстановление сосудов при экспериментальной ишемической ретинопатии (нормализация функции NOS и снижение выработки супероксида) [24] и способствовать заживлению ран у мышей [25]. С другой стороны, нам известна эффективность разнонаправленного подхода к фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции, когда для терапевтического воздействия применяются два и более соединения, различных по своему механизму действия и точке приложения. Эндотелиальные клетки обладают антитромботической активностью, высвобождая оксид азота и простациклин, которые являются мощными сосудорасширяющими средствами и ингибиторами тромбоцитов. Вызванная тромбином эндотелиальная дисфункция в микроциркуляторном русле может иметь патологические последствия и способствовать поражение органов-мишеней при эндотелий-ассоциированной патологии [150]. С учетом патогенеза эндотелиальной дисфункции, кроме классических мишеней, нас заинтересовал подход к органо- и цитопротекции с помощью регуляторных пептидов на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции. Например, учеными показано, рекомбинантный эритропоэтин оказывает потенциально благоприятное воздействие на сердечно-сосудистую функцию [170]. В тоже время, применение рекомбинантного эритропоэтина при -сердечно-сосудистой патологии ограничено рядом побочных эффектов и противопоказаний, связанных с основным его механизмом действия и гемопоэтическими эффектами. Изначально, с целью цито- и органопротекции ученые применяли субэритропоэтические дозы рекомбинантного эритропоэтина, а в последующем, в 2004 г. Майкл Брайнс и коллеги обнаружили, что сигналинг

негематопоэтических эффектов ЭПО осуществляется через связывание альфа-спирали Ь молекулы ЭПО с гетерорецептором EPOR/CD131 [133]. Следовательно, актуальной задачей является поиск производных эритропоэтина, реализующих свои тканезащитные свойства модулирую активность гетерорецептора ЕРОИ^131.

Учитывая выше сказанное, повышение эффективности фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции при различной эндотелий-ассоциированной патологии путем разработки и фармакологической оценки соединений различной природы, оценка перспектив их медицинского применения в качестве лекарственных кандидатов с новым механизмом действия, направленным на эндотелиотропные мишени с целью дальнейшего вывода на Российский фармацевтический рынок оригинальных лекарственных средств, направленных на фармакологическую коррекции социально-значимых эндотелий ассоциированных заболеваний, является новым направлением и актуальной задачей фармакологии.

Глубокую благодарность выражаем группам ученых, принимавших участие в разработке и синтезе соединений, изученных в настоящей работе. Соединения фенольной природы разработаны и синтезированы при участии группы ученых под руководством доктора химических наук Кудрявцева Константина Викторовича. Проивзодные эритропоэтина разработаны и синтезированы при участии группы ученых под руководством профессора Олеси Титце и Максима Жученко.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Формирование подходов к поиску и фармакологической оценке новых соединений – кандидатов в лекарственные средства для лечения эндотелий-ассоциированной патологии»

Цель работы:

Формирование подходов к разработке и фармакологической оценке новых классов соединений различной природы с механизмом действия, направленным на эндотелиотропные мишени с целью выбора лекарственных кандидатов для лечения эндотелий ассоциированной патологии.

Задачи исследования:

1. Выбор образцов соединений фенольной природы, содержащих непосредственно связанные гетероатомные и/или гетероциклические структурные

фрагменты методом компьютерного моделирования и производных эритропоэтина с помощью BLAST скрининга.

2. Провести скрининговое исследование эндотелиопротективной активности соединений фенольной природы и производных эритропоэтина на экспериментальных моделях эндотелиальной дисфункции, определить соединения-лидеры.

3. Изучить фармакологическую активность соединения-лидера из группы соединений фенольной природы на моделях легочной гипертензии.

4. Изучить возможности фармакологической коррекции сосудистых осложнений сахарного диабета с использованием соединения-лидера из группы соединений фенольной природы.

5. Провести исследование фармакологической активности соединения-лидера из группы соединений фенольной природы при моделировании баллонной травмы и FeCh индуцированной модели тромбообразования.

6. Изучить фармакологическую активность пептидных производных, имитирующих простраственную структуру цепи b эритропоэтина на модели легочной гипертензии.

7. Провести изучение фармакологической активности активность пептидных производных, имитирующих простраственную структуру цепи b эритропоэтина на модели сосудистых осложнений сахарного диабета.

8. Изучить фармакологическую активность активность пептидных производных, имитирующих простраственную структуру цепи b эритропоэтина при моделировании баллонной травмы и FeCl3 индуцированной модели тромбообразования.

9. Провести исследование эффективности комбинированного применения соединений-лидеров из группы соединений фенольной природы и производных эритропоэтина на модели гипергомоцистеин индуцированной эндотелиальной дисфункции.

10. Провести изучение общей токсичности соединения-лидера из группы соединений фенольной природы.

11. Провести изучение специфических видов токсичности соединения-лидера из группы соединений фенольной природы.

Научная новизна исследования

В работе впервые сформирован комплекс подходов, включающий разработку и фармакологическую оценку новых классов соединений различной природы. Впервые проведена оценка перспектив их медицинского применения в качестве лекарственных кандидатов с новым механизмом действия, направленным на эндотелиотропные мишени с целью дальнейшего вывода на Российский фармацевтический рынок оригинальных лекарственных средств, направленных на фармакологическую коррекции социально-значимых эндотелий ассоциированных заболеваний.

В работе впервые дано комплексное обоснование использования валидных экспериментальных моделей, позволяющих комплексно оценивать развитие изучаемой патологии и степень ее коррекции с использованием полученных в рамках настоящего исследования соединений-лидеров.

В настоящем исследовании впервые разработаны соединения нового класса, которые содержат привилегированную подструктуру - структурный фрагмент гетероциклического тиоацетамида. Соединения КУД259, КУД970, КУД971, КУД972, КУД973, КУД974, КУД975 и КУД976 впервые синтезированы в ходе выполнения данного исследования с использованием концепции привилегированных структур и компьютерного моделирования. В работе впервые показано, что геометрия энергетически наиболее выгодных и рассчитанных AutoDock Vina расположение ароматических и пролиновых фрагментов соединений фенольной природы совпадают с соответствующими экспериментальными характеристиками Л-фенилаланил-Ы-(3-хлорбензил)-£-пролиламида комплекса PDB:2zc9. Карбоксильная группа в обоих комплексах частично участвует в образовании водородных связей с амидным фрагментом основной цепи аминокислотного остатка Trp-215 тромбина и аргиназы-2. В работе впервые показано, что соединения нового класса группы КУД и взаимодействия этих соединений с сериновой протеазой системы гемостаза

тромбином и аргиназой 2 подтверждают целесообразность дальнейших экспериментальных исследований разрабатываемых в работе соединений КУД в качестве потенциальных препаратов, обладающих эндотелиопротекторной активностью.

В работе впервые показано коррекция легочной гипертензии различного генеза с использованием соединения фенольной природы КУД975 и производного эритропоэтина с лабораторным шифром ЕР-11-3. Впервые продемонстрировано, что при выраженной активности на моделях легочной гипертензии, указанные соединения обладают фармакологической активностью на модели сахарного диабета и его сосудистых осложнений на фоне отсутствия влияния на гликемический профиль.

В работе впервые показано, что соединение фенольной природы с лабораторным шифром КУД975 статистически значимо уменьшает размер атеросклеротической бляшки и снижает соотношение Вах/Вс1-2, характеризующее интегральную проапоптическую направленность клетки. Также, на фоне моделирования баллонной травмы и применения КУД975 показано снижение экспрессии мРНК iNOS и УСЛМ-1. Доказано что соединение-лидер с лабораторным шифром КУД975 эффективнее, чем препарат сравнения L-норвалин, снижает экспрессию факторов, связанных с ангиогенезом.

При изучении фармакологической активности соединений КУД975 на модели FeQз индуцированного тромбообразования впервые установлено, что введение соединения с лабораторным шифром КУД975 привело к статистически значимому увеличению времени до полного прекращения кровотока от момента воздействия FeQз.

На модели гипергомоцистеин индуцированной эндотелиальной дисфункции впервые показано положительное фармакодинамическое взаимодействие соединения фенольной природы с лабораторным шифром КУД975 и производного эритропоэтина ЕР-11-3, выразившееся в максимальном снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции, восстановления функции сосудистого эндотелия за счет повышения количества циркулирующих

предшественников эндотелиальных клеток, повышения экспрессии eNOS и концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота. Впервые показано, что максимальное снижение соотношения факторов, характеризующих проапоптическую направленность клетки, обнаружено в группе, получавшей комбинацию соединений ЕР-11-3 и КУД975.

С учетом впервые показанной токсикологической безопасности соединений, разработанных в рамках настоящего исследования, они могут быть рассмотрены как перспективные лекарственные кандидаты.

Научная новизна проведенных исследований подтверждена получением 5 патентов РФ на изобретения.

Теоретическая и практическая значимость работы

В результате проведенных исследований разработаны фундаментальные и прикладные подходы к поиску и дальнейшей фармакологической оценки новых классов соединений, обладающих эндотелийзаивисимыми механизмами действия.

Полученные экспериментальные данные позволили обосновать новый перспективный класс соединений - ингибиторов тромбина и аргиназы-2, который может быть использован для фармакологической коррекции эндотелий-ассоциированной патологии, в том числе легочной гипертензии и сосудистых осложнений сахарного диабета. Использованные подходы к молекулярному дизайну перспективных кандидатов в лекарственные средства с использованием концепции привилегированных структур и BLAST-скрининга позволяют получать новые эффективные терапевтические агенты для коррекции эндотелий ассоциированной патологии.

Таким образом, на основании результатов проведенной исследовательской работы сформированы теоретические положения, совокупность которых можно квалифицировать как крупное научное достижение в развитии актуальных направлений фармакологии с целью обоснованного экспериментального и теоретического обосновании поиска и фармакологической оценки новых соединений - кандидатов в лекарственные средства для лечения эндотелий-ассоциированной патологии.

Настоящая работа легла в основу масштабных комплексных исследований, поддержанных в рамках Федеральной целевой программы «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу» и «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 - 2020 годы»:

- Разработка и фармакологическая оценка соединений фенольной природы, содержащих непосредственно связанные гетероатомные и/или гетероциклические структурные фрагменты - потенциальных эндотелиопротекторов с новым механизмом действия.

- Изучение цитопротекторной активности инновационных пептидов, имитирующих пространственную структуру а-спирали Ь эритропоэтина, с использованием тканеспецифичного нокаута гена POLG в эндотелии для оптимизации персонализированной терапии заболеваний сердечно-сосудистой системы в биомедицине и ветеринарии».

В результате работ по реализации указанного проекта в рамках ФЦП Фарма-2020 разработаны лабораторные регламенты для получения готовых лекарственных форм на основе разработанных соединений, проведены фармацевтические исследования, исследования фармакокинетики и полный объем доклинических исследований фармакологической активности и токсикологической безопасности.

Таким образом, завершен полный цикл исследований в рамках тематики диссертационного исследования, рекомендован лекарственный кандидат, сформированы документы для получения разрешения на клинические испытания нового лекарственного средства.

Методология и методы диссертационного исследования

В основе методологических подходов к планированию и выполнению данного экспериментального диссертационного исследования легли принципы, сочетающие в себе качественные и количественные методы для обеспечения

комплексного подхода к решению поставленных задач, с соблюдением принципов гуманности и этики в медико-биологическом эксперименте.

Для реализации комплексного подхода методология настоящей диссертационной работы основана на собственных научных разработках, разработках отечественных и зарубежных ученых, работающих в экспериментальной фармакологии, молекулярной биологии, биохимии, физиологии, морфологии. Для формирования методов диссертационного исследования, адекватных поставленным задачам, использованы доступные литературные источники, приведенные в рукописи диссертации.

Расчет дозирования и режимы введения исследуемых соединений и препаратов сравнения основаны на их эффективности в экспериментальных исследованиях, проведенных ранее в лаборатории НИИ Фармакологии живых систем НИУ «БелГУ» и исследовательскими группами в других лабораториях. Перерасчет доз произведен с использованием межвидовых коэффициентов, а дизайн проведенных экспериментальных исследований осуществлен в соответствии с рекомендациями по доклиническим исследованиям под редакцией Хабриева Р.У., 2005 [10] и Миронова А.Н., 2012 [11]. Исследование проводили на животных с использованием сертифицированного оборудования на кафедре фармакологии и клинической фармакологии и в НИИ фармакологии живых систем ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет». Для анализа результатов исследования использовали либо специальные статистические методики, соответсвующие псотавленных задачам.

Положения, выносимые на защиту:

1. Результаты проведённых докинговых исследований разрабатываемых в работе соединений КУД и взаимодействия этих соединений с сериновой протеазой системы гемостаза тромбином и аргиназой 2 подтверждают целесообразность дальнейших экспериментальных исследований разрабатываемых в работе соединений КУД в качестве потенциальных препаратов, обладающих эндотелиопротекторной активностью.

2. Соединения фенольной природы группы КУД обладают выраженной эндотелиопротективной активностью на препаратах изолированных колец аорты и на модели L-NAME индуцированной эндотелиальной дисфункции. На основании полученных экспериментальных данных выбрано соединение-лидер -производное фенольной природы с лабораторным шифром КУД975.

3. Производные эритропоэтина, полученные с использованием BLAST скрининга обладают выраженным эндотелиопротективным действием на препаратах изолированных колец аорты и на модели гипергомоцистеин индуцированной эндотелиальной дисфункции. На основании полученных экспериментальных данных выбрано соединение-лидер - производное эритропоэтина с лабораторным шифром ЕР-11-3 (UEQLERALNTS).

4. Соединение-лидер с лабораторным шифром КУД975 показывает выраженную эндотелиопротективную активность на моделях легочной гипертензии, сосудистых осложнений сахарного диабета, FeCl3 индуцированного тромбообразования и при моделировании баллонной травмы.

5. Соединение-лидер с лабораторным шифром ЕР-11-3 показывает выраженную эндотелиопротективную активность на моделях легочной гипертензии, сосудистых осложнений сахарного диабета, FeCl3 индуцированного тромбообразования и при моделировании баллонной травмы.

6. При комбинированном применении соединений КУД975 и ЕР-11-3 на экспериментальной модели гипергомоцистеин индуцированной эндотелиальной дисфункции показано положительное фармакодинамическое взаимодействие соединений-лидеров.

7. Соединение-лидер фенольной природы с лабораторным шифром КУД975 при исследовании общей и специфической токсичности не вызывают изменения в состоянии систем и органов экспериментальных животных, не проявляет признаков острой и хронической токсичности, не обладают аллергизирующими и иммунотоксическими свойствами.

Степень достоверности

Исследование выполненено на мышах (320) и крысах (370), морских свинках (60) с использованием современных методов и методических подходов, высокотехнологичного оборудования, имеющего соответствующие сертификаты и прошедшего поверку в метрологической службе, подтверждает высокую достоверность полученных результатов.

Достоверность полученных результатов обусловлена: рациональным дизайном и планом исследования, основанном на собственном опыте, анализе доступных литературных данных по направлению исследования, количестве животных в экспериментальных группах, достаточном для статистического анализа полученных экспериментальных данных, строгим соблюдением принципов GLP, стандартных операционных процедур лаборатории, этических норм обращения с лабораторными животными, корректной регистрацией полученных экспериментальных данных, использованием материально-технической базы экспертного уровня а также корректных методов статистического анализа.

Апробация диссертационной работы

Результаты диссертационной работы были представлены на Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Инновационные решения в фармакологии» (г. Белгород, 10-11 июня 2019 г.), темы докладов: «Исследование влияния соединений фенольной природы на процессы формирования тромба», «Коррекция эндотелиальной дисфункции соединениями фенольной природы»; XXVII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (г. Москва, 6-9 апреля 2020 г.), темы докладов - «Изучение эндотелиопротективной активности пептида, имитирующего пространственную структуру а-спирали B эритропоэтина», «Изучение кардиопротективной активности соединений фенольной природы - ингибиторов аргиназы-2 и тромбина»; 88th European Atherosclerosis Society (EAS) Virtual Congress 2020: Read clinically focused news coverage of key developments from EAS (October, 04-07 2020), тема доклада - «Nonhematopoietic erythropoietin-derived peptide: study of the

atheroprotective activity using a novel murine model of mitochondrial dysfunction»; Седьмой междисциплинарной конференции «Молекулярные и биологические аспекты химии, фармацевтики и фармакологии» (г. Москва, 12-14 сентября 2021 г.), тема доклада - «Скрининг цитопротективной активности пептидов иммитирующих пространственную структуру цепи в эритропоэтина»; 5-й Российской конференции по медицинской химии с международным участием «МедХим-Россия 2021» (г. Волгоград, 16-19 мая 2022 г.), тема доклада - «In vitro изучение цитопротекторного действия 11-кислотных пептидов, полученных путем модификации пептида HBSP (ARA290)»; Всероссийской научной конференции «Вопросы морфологии XXI века» (г. Санкт-Петербург, 22-23 сентября 2022 г.), тема доклада - «Патоморфологические особенности миодистрофий»; XX Международной научно-практической конференции «Наука, образование, инновации: актуальные вопросы и современные аспекты» (г. Пенза, 12 января 2024 г.), тема доклада - «Результаты исследования фармакологической активности соединения-лидера фенольной природы из группы ингибиторов тромбина на модели сосудистых осложнений сахарного диабета»; XXVI Международной научно-практической конференции «Научные исследования молодых учёных» (г. Пенза, 15 января 2024 г.), тема доклада - «Результаты исследования фармакологической активности производных эритропоэтина на модели сосудистых осложнений сахарного диабета».

Публикации

По теме диссертационного исследования опубликовано 40 научных работ, из них 30 статей в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК при Министерстве науки и высшего образования Российской Федерации, в том числе 21 статья опубликована в изданиях, входящих в международные реферативные базы данных и системы цитирования Scopus, Web of Science; получено 5 патентов на изобретение Российской Федерации.

Внедрение результатов научных исследований:

Исследования, включенные в материалы диссертации, легли в основу государственных контрактов, реализованных в рамках Федеральной целевой

программы «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности Российской Федерации на период до 2020 года и дальнейшую перспективу» и «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014 -2020 годы»:

- Разработка и фармакологическая оценка соединений фенольной природы, содержащих непосредственно связанные гетероатомные и/или гетероциклические структурные фрагменты - потенциальных эндотелиопротекторов с новым механизмом действия. Соглашение от «05» июня 2014 г. № 14.578.21.0012.

- Изучение цитопротекторной активности инновационных пептидов, имитирующих пространственную структуру а-спирали Ь эритропоэтина, с использованием тканеспецифичного нокаута гена POLG в эндотелии для оптимизации персонализированной терапии заболеваний сердечно-сосудистой системы в биомедицине и ветеринарии». Соглашение от «19» ноября 2019 г. № 075-15-2019-1709.

Запланировано проведение клинических исследований готовых лекарственных форм, разработанных в ходе настоящего исследования.

Информация о подходах к молекулярному дизайну перспективных кандидатов в лекарственные средства с применением концепции привилегированных структур и BLAST-скрининга, использованная в рамках настоящего исследования, а также полученные экспериментальные данные о фармакологической активности соединений, полученных в настоящем исследовании, используются в учебно-методической и научно-исследовательской деятельности кафедры фармакологии и клинической фармакологии и НИИ Фармакологии живых систем НИУ «БелГУ»; материалы диссертации внедрены в научную работу НП ЦВТ «Химрар»; результаты диссертации внедрены в научную работу ООО «29 февраля».

Личный вклад автора

Диссертантом самостоятельно выдвинута идея и сформулирована концепция, ставшая основой настоящего диссертационного исследования. Автором самостоятельно выполнен обзор литературы, сформулированы цели и

задачи исследования, предложены экспериментальные модели и направления поиска новых лекарственных кандидатов для фармакологической коррекции эндотелий ассоциированной патологии. Автором разработаны и составлены план, дизайн и протокол исследования, проведены рандомизация и отбор животных. Автор непосредственно формулировала техническое задание и принимала деятельное участие в компьютерном моделировании и BLAST скрининге соединений, разработанных в рамках настоящего исследования.

Автором самостоятельно выполнена математическая и статистическая обработка полученных материалов с последующим их анализом, сопоставлением с доступными литературными данными и формулировкой выводов и рекомендаций по результатам исследования.

Автор приняла непосредственное и активное участие в подготовке и написании научных публикаций по теме диссертационного исследования. Перу автора принадлежат рукописи диссертации и автореферата.

Структура и объем диссертационной работы

Диссертация написана по традиционному для работ в области экспериментальной фармакологии плану, логично структурирована и включает следующие разделы: введение, обзор литературных источников, материал и методы исследования, результаты собственных исследований, заключение, выводы, список сокращений и условных обозначений, список литературы.

Диссетрация изложена на 265 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 75 рисунками и 34 таблицами. Список литературы содержит выходные данные 189 источников, 178 из которых - иностранные.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ

1.1 Фармакологические методы коррекции эндотелиальной дисфункции

Исследование эндотелийзависимой вазодилатации началось с наблюдения того, что удаление эндотелиальных клеток из изолированных артерий предотвращает вазодилаторный отклик на введение ацетилхолина. Различные вазоактивные вещества, такие, как лиганды G-белок сопряжённых рецепторов, проявляют подобное индуцирующее влияние на вазодилатацию. Эндотелий-зависимая вазодилатация вызывается высвобождением простациклина PGЬ и монооксида азота N0 или эндотелиальных факторов гиперполяризации (например, Н2О2) [112]. Вызываемое агонистами или кровотоком расширение изолированных артерий блокируется каталазой. Ферментативное разрушение гликокаликса, выстилающего поверхность эндотелиальных клеток, значительно ослабляет вызываемое кровотоком сдвиговое расширение сосудов [112]. Таким образом, фармакологическая стабилизация микрофиламентной/микротрубочковой сети эндотелиального цитоскелета может способствовать индуцируемой кровотоком вазодилатации. Методы улучшения и восстановления эндотелиальной дисфункции при различных патологических состояниях интенсивно исследуются. Данные клинических исследований лекарственных препаратов, улучшающих эндотелиальную дисфункцию приведены в таблице 1.1 [173].

Таблица 1.1 - Клинические исследования лекарственных препаратов, показавшие

улучшение эндотелиальной дисфункции [173]

Патологическое состояние Лекарственный препарат Структурная формула Основные физиологичес кие эффекты

Хроническая сердечная недостаточность Розувастатин (гиполипидемическое лекарственное средство IV поколения из группы статинов) -гЭ?1' Окисленные ЛНП Щерекисное окисление липидов 1 Стволовые клетки и клетки- предшественники т ПОР т

Острый

коронарный

синдром

Периндоприл (ингибитор

ангиотензинпревращающе го фермента (АПФ))

Апоптоз | CD34+

мобилизация |

фрэс т

ЮТ-а | Брадикинин Т

Кардиальный синдром Х

Небиволол

(кардиоселективный бета-адреноблокатор III

поколения с

вазодилатирующими свойствами)

ПОР ~ Высокая чувствительно сть к С-реактивному белку |

Фактор фон Виллебранда | Фибриноген |

Гипертензивная гипертрофия левого желудочка

Карведилол (альфа-бета-адреноблокатор внутренней симпатомиметической активности)_

и

без

ПОР т

Эндотелин-1 | N0 Т

Ишемическая болезнь сердца и нарушенная толерантность к глюкозе

Пиоглитазон

(селективный стимулятор рецепторов PPAR-y и в меньшей степени PPAR-a)

пор т

ЮТ-а | Триглицериды

I

высокомолекул ярный

адипонектин Т

Гипертония и нарушенная толерантность к глюкозе

Телмисартан (антагонист ангиотензинового II

рецептора)

пор т

Сопротивляемо сть к инсулину

I

Толерантность к глюкозе Т

Диабет 2 типа

Гликлазид (стимулятор секреции инсулина бета-клетками поджелудочной железы)

пор т

Эндотелтальные клетки-

предшественники

Ожирение

Питавастатин (ингибитор ГМГ-КоА-редуктазы)

пор т

Триглицериды

т

т

Заболевание

периферических

артерий

Телмисартан (антагонист ангиотензинового II

рецептора)

Максимальное расстояние прогулки т

пор т

Болезнь Бехчета

Аторвастатин (селективный конкурентный ингибитор ГМГ-КоА-редуктазы)

пор т

Болезнь Бехчета

Лизиноприл (ингибитор АПФ пролонгированного действия)

пор т

Синдром

поликистоза

яичников

Спиронолактон (калийсберегающий диуретик, конкурентный антагонист альдостерона и других

минералокортикоидов)

пор т

Субклинический гипотиреоз

Левотироксин

пор т

БТ4 т ТТГ I общий холестерин |

Анкилозирующий спондилоартрит

Инфликсимаб (моноклональные антитела к ТОТ'-а)

пор т

Нитрит сыворотки | Скорость оседания эритроцитов | С-реактивный белок |_

Хронический гемодиализ

Симвастатин (активный метаболит подавляет ГМГ-КоА-редуктазу)

пор т

Окисленные ЛНП

I

VCAM-1 |

8-эпи-

простагдандин F2

I

Биодоступнос ть N0 т

Примечания: ЛНП - липопротеины низкой плотности, ПОР - поток-опосредованное расширение, ФРЭС - фактор роста эндотелия сосудов, ТОТ-а -фактор некроза опухоли-а, ТТГ - тиреотропный гормон, УСДМ-1 - васкулярная молекула клеточной адгезии 1

Список литературы диссертационного исследования доктор наук Корокина Лилия Викторовна, 2025 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Амиды 2-(2-гидроксифенилтио)уксусной кислоты, обладающие антиоксидантной активностью, и способ их получения : патент 2473540 Российская Федерация : МПК C07C 323/18 (2006.01), A61K 31/095 (2006.01), A61P 39/06 (2006.01) / К.В. Кудрявцев, Н.Т. Берберова, В.П. Осипова, Антонова Н.А. ; патентообладатель ФГОУ ВПО Астраханский гос. техн. ун-т (ФГОУ ВПО АГТУ). - № 2011122906/04 ; заявл. 06.06.2011 ; опубл. 27.01.2013, Бюл. № 3.

2. Захаров, C.B. Исследование антигипертензивного действия экстракта мицелия Pleurotus ostreatus 1137 (фармакологической субстанции) / С.В. Захаров, В.П. Герасименя // Экстракты мицелия вешенки (Pleurotus ostreatus): медико-биологические эффекты и возможные механизмы действия : [сборник статей] / под ред. В.П. Герасимени, В.Ю. Полякова. - Москва, 2013. - С. 60-82.

3. Изучение антиатеросклеротической и эндотелиопротективной активности пептидных агонистов гетерорецептора EPOR/CD131 / О.А. Пученкова, С.В. Надеждин, В.О. Солдатов [и др.] // Фармация и фармакология. -2020. - Т. 8, № 2. - С. 100-111.

4. Изучение фармакологической активности новых агонистов гетерорецептора EPOR/CD131 у животных с эндотелиоспецифичной экспрессией мутантного гена POLG / М.В. Корокин, М.В. Кубекина, А.В. Дейкин [и др.] // Фармация и фармакология. - 2021. - Т. 9, № 4. - С. 294-305.

5. Кудрявцев, К.В. Ароматизация алкилтио(арилтио)циклогексанов при бромировании и ее использование в синтезе : специальность 02.00.03 «Органическая химия» : диссертация на соискание ученой степени канд. химических наук / К.В. Кудрявцев. - Москва, 1996. - 115 с.

6. Кудрявцев, К.В. Новый подход к синтезу дибензодитиа- и бензотиаазакраун-эфиров, основанный на ароматизации 2-алкил(арил)тиоциклогексанов при бромировании / К.В. Кудрявцев, В.В. Самошин // Химия гетероциклических соединений. - 1997. - № 1. - С. 121-127.

7. Метельская, В.А. Скрининг-метод определения уровня метаболитов оксида азота в сыворотке крови / В.А. Метельская, Н.Г. Гуманова // Клиническая лабораторная диагностика. - 2005. - № 6. - С. 15-18.

8. 11-аминокислотный пептид, имитирующий структуру а-спирали b эритропоэтина, улучшает функцию эндотелия, но стимулирует тромбообразование у крыс / М.В. Корокин, В.О. Солдатов, А. Титце [и др.] // Фармация и фармакология. - 2019. - Т. 7, № 6. - С. 312-320.

9. Пептиды, имитирующие пространственную структуру а-цепи B эритропоэтина - новые возможности лечения и профилактики гипергомоцистеин-индуцированной эндотелиальной дисфункции / М.В. Корокин, М.В. Покровский, Л.В. Корокина [и др.] // Профилактическая медицина. - 2020. - Т. 23, № 6-2. - С. 105-110.

10. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ : учеб. пособие для системы послевуз. проф. образования врачей / Науч. центр экспертизы средств мед. применения ; под общ. ред. Р.У. Хабриева. - 2-е изд., перераб. и доп. - Москва : Изд-во Медицина : Изд-во Шико, 2005. - 826 с. - ISBN 5-225-04219-8.

11. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств : в 2 ч. / Науч. центр экспертизы средств мед. применения ; редкол.: А.Н. Миронов (пред.) [и др.]. - Москва : «Гриф и К», 2012. - Ч. 1. - 940 с. - ISBN 978-5-8125-1466-3.

12. A comparison of continuous intravenous epoprostenol (prostacyclin) with conventional therapy for primary pulmonary hypertension / R.J. Barst, L.J. Rubin, W.A. Long [et al.] // N. Engl. J. Med. - 1996. - Vol. 334, № 5. - P. 296-302.

13. A meta-analysis of randomised controlled trial in pulmonary arterial hypertension / N. Galie, A. Manes, L. Negro [et al.] // Eur. Heart J. - 2009. - Vol. 30, № 4. - P. 394-403.

14. ACCF/AHA 2009 expert consensus document on pulmonary hypertension a report of the American College of Cardiology Foundation Task Force on Expert Consensus Documents and the American Heart Association developed in collaboration

with the American College of Chest Physicians; American Thoracic Society, Inc; and the Pulmonary Hypertension Association / V.V. McLaughlin, S.L. Archer, D.B. Badesch [et al.] // J. Am. Coll. Cardiol. - 2009. - Vol. 53, № 17. - P. 1573-1619.

15. Activation of oxidative stress by acute glucose fluctuations compared with sustained chronic hyperglycemia in patients with type 2 diabetes / L. Monnier, E. Mas, C. Ginet [et al.] // JAMA. - 2006. - Vol. 295, № 14. - P. 1681-1687.

16. Activation of soluble guanylate cyclase reverses experimental pulmonary hypertension and vascular remodeling / R. Dumitrascu, N. Weissmann, H.A. Ghofrani [et al.] // Circulation. - 2006. - Vol. 113, № 2. - P. 286-295.

17. Addition of sildenafil to bosentan monotherapy in pulmonary arterial hypertension / S.C. Mathai, R.E. Girgis, M.R. Fisher [et al.] // Eur. Respir. J. - 2007. -Vol. 29, № 3. - P. 469-475.

18. Ambrisentan for the treatment of pulmonary arterial hypertension: results of the ambrisentan in pulmonary arterial hypertension, randomized, double-blind, placebo-controlled, multicenter, efficacy (ARIES) study 1 and 2 / N. Galiè, H. Olschewski, R.J. Oudiz [et al.] // Circulation. - 2008. - Vol. 117, № 23. - P. 30103019.

19. Angiotensin II and vascular injury / A.C. Montezano, A.N.D. Cat, F.J. Rios, R.M. Touyz. // Curr. Hypertens. Rep. - 2014. - Vol. 16, № 6. - Art. 431.

20. Angiotensin II promotes the anticoagulant effects of rivaroxaban via angiotensin type 2 receptor signaling in mice / D. Yang, J. Shao, R. Hu [et al.] // Sci. Rep. - 2017. - Vol. 7, № 1. - Art. 369.

21. Angiotensin II-induced vascular dysfunction depends on interferon-y-driven immune cell recruitment and mutual activation of monocytes and NK-cells / S. Kossmann, M. Schwenk, M. Hausding [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. -2013. - Vol. 33, № 6. - P. 1313-1319.

22. Angiotensin-converting enzyme 2 activation improves endothelial function / R.A. Fraga-Silva, F.P. Costa-Fraga, T.M. Murça [et al.] // Hypertension. - 2013. -Vol. 61, № 6. - P. 1233-1238.

23. ARA 290 improves symptoms in patients with sarcoidosis-associated small nerve fiber loss and increases corneal nerve fiber density / A. Dahan, A. Dunne, M. Swartjes [et al.] // Mol. Med. - 2013. - Vol. 19, № 1. - P. 334-345.

24. Arginase inhibition enhances angiogenesis in endothelial cells exposed to hypoxia / L. Wang, A. Bhatta, H.A. Toque [et al.] // Microvasc. Res. - 2015. - Vol. 98. - P. 1-18.

25. Arginase inhibition promotes wound healing in mice / S.L. Kavalukas, A.R. Uzgare, T.J. Bivalacqua, A. Barbul // Surgery. - 2012. - Vol. 151, № 2. - P. 287295.

26. Arginase inhibition restores endothelial function in diet-induced obesity / J.H. Chung, J. Moonb, Y.S. Lee [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Comm. - 2014. -Vol. 451, № 2. - P. 179-183.

27. Arginase: an old enzyme with new tricks / R.B. Caldwell, H.A. Toque, S.P. Narayanan, R.W. Caldwell // Trends Pharmacol. Sci. - 2015. - Vol. 36, № 6. - P. 395405.

28. Ashutosh, K. Noninvasive tests for responsiveness of pulmonary hypertension to oxygen. Prediction of survival in patients with chronic obstructive lung disease and cor pulmonale / K. Ashutosh, M. Dunsky // Chest. - 1987. - Vol. 92, № 3. -P. 393-399.

29. Aspects of oxidative stress in children with type 1 diabetes mellitus / J. Varvarovska, J. Racek, R. Stetina [et al.] // Biomed. Pharmacother. - 2004. - Vol. 58, № 10. - P. 539-545.

30. Atrial septostomy in the treatment of severe pulmonary arterial hypertension / F. Reichenberger, J. Pepke-Zaba, K. McNeil [et al.] // Thorax. - 2003. -Vol. 58, № 9. - P. 797-800.

31. AutoDock4 and AutoDockTools4: Automated docking with selective receptor flexibility / G.M. Morris, R. Huey, W. Lindstrom [et al.] // J. Comput. Chem. -2009. - Vol. 30, № 16. - P. 2785-2791.

32. Bartesaghi, S. Fundamentals on the biochemistry of peroxynitrite and protein tyrosine nitration / S. Bartesaghi, R. Radi // Redox Biol. - 2018. - Vol. 14. - P. 618-625.

33. Bernatova, I. Endothelial dysfunction in experimental models of arterial hypertension: Cause or consequence? / I. Bernatova. // Biomed. Res. Int. - 2014. - Vol. 2014. - Art. 598271.

34. Blockade of PAR-1 signaling attenuates cardiac hypertrophy and fibrosis in renin-overexpressing hypertensive mice / Y. Yokono, K. Hanada, M. Narita [et al.]. // J. Am. Heart. Assoc. - 2020. - Vol. 9, № 12. - Art. e015616.

35. Bosentan treatment in patients with primary pulmonary hypertension receiving nonparenteral prostanoids / M.M. Hoeper, N. Taha, A. Bekjarova [et al.] // Eur. Respir. J. - 2003. - Vol. 22, № 2. - P. 330-334.

36. Brain capillary endothelial cells express two forms of erythropoietin receptor mRNA / R. Yamaji, T. Okada, M. Moriya [et al.] // Eur. J. Biochem. - 1996. -Vol. 239, № 2. - P. 494-500.

37. Brines, M. Discovery of a master regulator of injury and healing: tipping the outcome from damage toward repair / M. Brines // Mol. Med. - 2014. - Vol. 20, Suppl. 1. - P. S10-S16.

38. Brownlee, M. Biochemistry and molecular cell biology of diabetic complications / M. Brownlee // Nature. - 2001. - Vol. 414, № 6865. - P. 813-820.

39. Bunn, H.F. Erythropoietin / H.F. Bunn // Cold Spring Harb. Perspect. Med. - 2013. - Vol. 3, № 3. - Art. a011619.

40. Cahill-Smith, S. Oxidative stress, redox signalling and endothelial dysfunction in ageing-related neurodegenerative diseases: a role of NADPH oxidase 2 / S. Cahill-Smith, J.-M. Li // Br. J. Clin. Pharmacol. - 2014. - Vol. 78, № 3. - P. 441453.

41. Ceriello, A. The emerging role of post-prandial hyperglycaemic spikes in the pathogenesis of diabetic complications / A. Ceriello // Diabet. Med. - 1998. - Vol. 15, № 3. - P. 188-193.

42. Chistiakov, D.A. Endothelial barrier and its abnormalities in cardiovascular disease / D.A. Chistiakov, A.N. Orekhov, Y.V. Bobryshev // Front. Physiol. - 2015. -Vol. 6. - Art. 365.

43. Collins, A.J. Anaemia management prior to dialysis: cardiovascular and cost-benefit observations / A.J. Collins // Nephrol. Dial. Transplant. - 2003. - Vol. 18, suppl. 2. - P. ii2-ii6.

44. Combating oxidative stress in vascular disease: NADPH oxidases as therapeutic targets / G.R. Drummond, S. Selemidis, K.K. Griendling, C.G. Sobey // Nat. Rev. Drug Discov. - 2011. - Vol. 10, № 6. - P. 453-471.

45. Combination of erythropoietin and sildenafil can effectively attenuate hypoxia-induced pulmonary hypertension in mice / V. Samillan, T. Haider, J. Vogel [et al.] // Pulm. Circ. - 2013. - Vol. 3, № 4. - P. 898-907.

46. Congenital erythropoietin over-expression causes "anti-pulmonary hypertensive" structural and functional changes in mice, both in normoxia and hypoxia / N. Weissmann, D. Manz, D. Buchspies [et al.] // Thromb. Haemost. - 2005. - Vol. 94, № 3. - P. 630-638.

47. Congestive Heart Failure / eds. J.D. Hosenpud, B.H. Greenberg. - 3rd ed. -Philadelphia : Lippincott Williams & Wilkins, 2007. - 883 p. - ISBN 1-4698-7653-1.

48. Continuous or nocturnal oxygen therapy in hypoxemic chronic obstructive lung disease: a clinical trial. Nocturnal Oxygen Therapy Trial Group / // Ann. Intern. Med. - 1980. - Vol. 93, № 3. - P. 391-398.

49. Correction of ADMA-induced preeclampsia with use of tetrahydrobiopterin and selective inhibitor of arginase II ZB49-0010 / V.V. Gureev, M.V. Pokrovskii, M.V. Korokin [et al.] // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2015. - Vol. 6, №5. - P. 1538-1541.

50. Current and future management of chronic thromboembolic pulmonary hypertension: from diagnosis to treatment responses / L.J. Rubin, M.M. Hoeper, W. Klepetko [et al.] // Proc. Am. Thorac. Soc. - 2006. - Vol. 3, № 7. - P. 601-607.

51. Deanfield, J.E. Endothelial function and dysfunction: Testing and clinical relevance / J.E. Deanfield, J.P. Halcox, T.J. Rabelink // Circulation. - 2007. - Vol. 115, № 10. - P. 1285-1295.

52. Degradation of glycocalyx and multiple manifestations of endothelial dysfunction coincide in the early phase of endothelial dysfunction before atherosclerotic plaque development in apolipoprotein E/low-density lipoprotein receptor-deficient mice / A. Bar, M. Targosz-Korecka, J. Suraj [et al.] // J. Am. Heart. Assoc. - 2019. - Vol. 8, № 6. - Art. e011171.

53. Derivatives of erythropoietin that are tissue protective but not erythropoietic / M. Leist, P. Ghezzi, G. Grasso [et al.] // Science. - 2004. - Vol. 305, № 5681. - P. 239-242.

54. Diabetic Complications and Oxidative Stress: A 20-Year Voyage Back in Time and Back to the Future / C. Iacobini, M. Vitale, C. Pesce [et al.] // Antioxidants. -2021. - Vol. 10, № 5. - Art. 727.

55. Discovery of (R)-2-amino-6-borono-2-(2-(piperidin-1-yl)ethyl)hexanoic acid and congeners as highly potent inhibitors of human arginases I and II for treatment of myocardial reperfusion injury / M.C. Van Zandt, D.L. Whitehouse, A. Golebiowski [et al.] // J. Med. Chem. - 2013. - Vol. 56, № 6. - P. 2568-2580.

56. Dunning, J. Pulmonary thromboendarterectomy for chronic thromboembolic pulmonary hypertension / J. Dunning, K. McNeil // Thorax. - 1999. -Vol. 54, № 9. - P. 755-756.

57. Effects of erythropoietin on advanced pulmonary vascular remodeling / M.E. van Albada, G.J. du Marchie Sarvas, J. Koster [et al.] // Eur. Respir J. - 2008. -Vol. 31, № 1. - P. 126-134.

58. Effects of exercise training in patients with idiopathic pulmonary arterial hypertension / F.S. de Man, M.L. Handoko, H. Groepenhoff [et al.] // Eur. Respir. J. -2009. - Vol. 34, № 3. - P. 669-675.

59. Endothelial dysfunction and vascular disease-A 30th anniversary update / P.M. Vanhoutte, H. Shimokawa, M. Feletou, E.H. Tang // Acta Physiol. (Oxf.). - 2017. - Vol. 219, № 1. - P. 22-96.

60. Endothelial dysfunction is correlated with microalbuminuria in children with short-duration type 1 diabetes / A.M. Ladeia, C. Ladeia-Frota, L. Pinho [et al.] // Diabetes Care. - 2005. - Vol. 28, № 8. - P. 2048-2050.

61. Endothelial dysfunction is related to poor glycemic control in adolescents with type 1 diabetes under 5 years of disease: Evidence of metabolic memory / G.V. Ce, L.E. Rohde, A.M. da Silva [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2011. - Vol. 96, № 5.

- P. 1493-1499.

62. Endothelial function and oxidative stress in cardiovascular diseases / Y. Higashi, K. Noma, M. Yoshizumi, Y. Kihara // Circ. J. - 2009. - Vol. 73, № 3. - P. 411-418.

63. Endothelial progenitor cells and cardiovascular homeostasis: clinical implications / G. Pompilio, M.C. Capogrossi, M. Pesce [et al.] // Int. J. Cardiol. - 2009.

- Vol. 131, № 2. - P. 156-167.

64. Enhanced thrombin generation in patients with arterial hypertension / A. Elias, W. Rock, A. Odetalla [et al.] // Thromb. Res. - 2019. - Vol. 174. - P. 121-128.

65. Erlanson, D.A. Fragment-based drug discovery / D.A. Erlanson, R.S. McDowell, T. O'Brien // J. Med. Chem. - 2004. - Vol. 47, № 14. - P. 3463-3482.

66. Erythropoietin and its derivatives: from tissue protection to immune regulation / B. Peng, G. Kong, C. Yang, Y. Ming // Cell Death Dis. - 2020. - Vol. 11, № 2. - Art. 79.

67. Erythropoietin Attenuates Pulmonary Vascular Remodeling in Experimental Pulmonary Arterial Hypertension through Interplay between Endothelial Progenitor Cells and Heme Oxygenase / R.L. van Loon, B. Bartelds, F.A. Wagener, N. Affara // Front. Pediatr. - 2015. - Vol. 3. - Art. 71.

68. Erythropoietin mediates tissue protection through an erythropoietin and common beta-subunit heteroreceptor / M. Brines, G. Grasso, F. Fiordaliso [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2004. - Vol. 101, № 41. - P. 14907-14912.

69. Erythropoietin Mimetic Peptide (pHBSP) Corrects Endothelial Dysfunction in a Rat Model of Preeclampsia / M. Korokin, V. Gureev, O. Gudyrev [et al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2020. - Vol. 21, № 18. - Art. 6759.

70. Erythropoietin upregulation in pulmonary arterial hypertension / V.A. Karamanian, M. Harhay, G.R. Grant [et al.] // Pulm. Circ. - 2014. - Vol. 4, № 2. - P. 269-279.

71. Erythropoietin, but not asialoerythropoietin or carbamyl-erythropoietin, attenuates monocrotaline-induced pulmonary hypertension in rats / N. Ikarashi, K. Toba, K. Kato [et al.] // Clin. Exp. Hypertens. - 2012. - Vol. 34, № 8. - P. 575-581.

72. Erythropoietin-mediated protection in kidney transplantation: nonerythropoietic EPO derivatives improve function without increasing risk of cardiovascular events / W.G. van Rijt, H. van Goor, R.J. Ploeg, H.G. Leuvenink // Transpl. Int. - 2014. - Vol. 27, № 3. - P. 241-248.

73. Essential role of endothelial nitric oxide synthase in vascular effects of erythropoietin / L.V. d'Uscio, L.A. Smith, A.V. Santhanam [et al.] // Hypertension. -2007. - Vol. 49, № 5. - P. 1142-1148.

74. Evaluating oxidative stress in human cardiovascular disease: methodological aspects and considerations / R. Lee, M. Margaritis, K.M. Channon, C. Antoniades // Curr. Med. Chem. - 2012. - Vol. 19, № 16. - P. 2504-2520.

75. Evidence for Rho-kinase activation in patients with pulmonary arterial hypertension / e Z. Do, Y. Fukumoto, A. Takaki [et al.] // Circ. J. - 2009. - Vol. 73, № 9. - P. 1731-1739.

76. Exercise and respiratory training improve exercise capacity and quality of life in patients with severe chronic pulmonary hypertension / D. Mereles, N. Ehlken, S. Kreuscher [et al.] // Circulation. - 2006. - Vol. 114, № 14. - P. 1482-1489.

77. Experimental and computational approaches to estimate solubility and permeability in drug discovery and development settings / C.A. Lipinski, F. Lombardo, B.W. Dominy, P.J. Feeney // Adv. Drug Deliv. Rev. - 2001. - Vol. 46, № 1-3. - P. 326.

78. Expression and activity of cAMP phosphodiesterase isoforms in pulmonary artery smooth muscle cells from patients with pulmonary hypertension: role for PDE1 / F. Murray, H.H. Patel, R.Y. Suda [et al.] // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. -2007. - Vol. 292, № 1. - P. L294-L303.

79. Flipping the molecular switch for innate protection and repair of tissues: long-lasting effects of a non-erythropoietic small peptide engineered from erythropoietin / M. Collino, C. Thiemermann, A. Cerami, M. Brines // Pharmacol. Ther. - 2015. - Vol. 151. - P. 32-40.

80. Foex, P. Hypertension: Pathophysiology and treatment / P. Foex, J.W. Sear // Contin. Educ. Anaesthesia Crit. Care Pain. - 2004. - Vol. 4. - P. 71-75.

81. Forstermann, U. Nitric oxide synthases: Regulation and function / U. Forstermann, W.C. Sessa // Eur. Heart J. - 2012. - Vol. 33, № 7. - P. 829-837, 837a-837d.

82. Forstermann, U. Roles of Vascular Oxidative Stress and Nitric Oxide in the Pathogenesis of Atherosclerosis / U. Forstermann, N. Xia, H. Li // Circ. Res. - 2017. -Vol. 120, № 4. - P. 713-735.

83. Fukumoto, Y. Recent progress in the treatment of pulmonary arterial hypertension: expectation for Rho-kinase inhibitors / Y. Fukumoto, S. Tawara, H. Shimokawa // Tohoku J. Exp. Med. - 2007. - Vol. 211, № 4. - P. 309-320.

84. Genistein attenuates hypoxic pulmonary hypertension via enhanced nitric oxide signaling and the erythropoietin system / S. Kuriyama, Y. Morio, M. Toba [et al.] // Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. - 2014. - Vol. 306, № 11. - P. L996-L1005.

85. Gimbrone, M.A. Jr. Endothelial Cell Dysfunction and the Pathobiology of Atherosclerosis / M.A. Gimbrone Jr., G. Garcia-Cardena // Circ. Res. - 2016. - Vol. 118, № 4. - P. 620-636.

86. Glucose control and vascular complications in veterans with type 2 diabetes / W. Duckworth, C. Abraira, T. Moritz [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2009. -Vol. 360, № 2. - P. 129-139.

87. Gogg, S. Increased MAPK activation and impaired insulin signaling in subcutaneous microvascular endothelial cells in type 2 diabetes: The role of endothelin-1 / S. Gogg, U. Smith, P.A. Jansson // Diabetes. - 2009. - Vol. 58, №10. - P. 22382245.

88. Guidelines for the diagnosis and treatment of pulmonary hypertension: the Task Force for the Diagnosis and Treatment of Pulmonary Hypertension of the

European Society of Cardiology (ESC) and the European Respiratory Society (ERS), endorsed by the International Society of Heart and Lung Transplantation (ISHLT). ESC Committee for Practice Guidelines (CPG) / N. Galie, M.M. Hoeper, M. Humbert [et al.] // Eur. Heart J. - 2009. - Vol. 30, № 20. - P. 2493-2537.

89. Hajduk, P.J. A decade of fragment-based drug design: strategic advances and lessons learned / P.J. Hajduk, J. Greer // Nat. Rev. Drug Discovery. - 2007. - Vol. 6, № 3. - P. 211-219.

90. Hajduk, P.J. Fragment-based drug design: how big is too big? / P.J. Hajduk // J. Med. Chem. - 2006. - Vol. 49, № 24. - P. 6972-6976.

91. Hemodynamic and gas exchange effects of sildenafil in patients with chronic obstructive pulmonary disease and pulmonary hypertension / I. Blanco, E. Gimeno, P.A. Munoz [et al.] // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 2010. - Vol. 181, № 3. - P. 270-278.

92. Heuberger, D.M. Protease-activated receptors (PARs): Mechanisms of action and potential therapeutic modulators in PAR-driven inflammatory diseases / D.M. Heuberger, R.A. Schuepbach // Thromb. J. - 2019. - Vol. 17. - Art. 4.

93. Hopkins, A.L. Ligand efficiency: a useful metric for lead selection / A.L. Hopkins, C.R. Groom, A. Alex // Drug Discov. Today. - 2004. - Vol. 9, № 10. - P. 430-431.

94. Humbert, M. Treatment of pulmonary arterial hypertension / M. Humbert, O. Sitbon, G. Simonneau // N. Engl. J. Med. - 2004. - Vol. 351, № 14. - P. 1425-1436.

95. Hyperglycemia inhibits endothelial nitric oxide synthase activity by posttranslational modification at the Akt site / X.L. Du, D. Edelstein, S. Dimmeler [et al.] // J. Clin. Invest. - 2001. - Vol. 108, № 9. - P. 1341-1348.

96. Impaired endothelium-dependent and independent vasodilation in patients with type 2 (non-insulin-dependent) diabetes mellitus / G.E. McVeigh, G.M. Brennan, G.D. Johnston [et al.] // Diabetologia. - 1992. - Vol. 35, № 8. - P. 771-776.

97. Impaired endothelium-dependent vasodilation in patients with insulin-dependent diabetes mellitus / M.T. Johnstone, S.J. Creager, K.M. Scales [et al.] // Circulation. - 1993. - Vol. 88, № 6. - P. 2510-2516.

98. Impaired nitric oxide-mediated vasodilation in patients with non-insulin-dependent diabetes mellitus / S.B. Williams, J.A. Cusco, M.A. Roddy [et al.]// J. Am. Coll. Cardiol. - 1996. - Vol. 27, № 3. - P. 567-574.

99. Impaired skin microvascular function in children, adolescents, and young adults with type 1 diabetes / F. Khan, T.A. Elhadd, S.A. Greene, J.J. Belch // Diabetes Care. - 2000. - Vol. 23, № 2. - P. 215-220.

100. Impaired vascular reactivity in insulin-dependent diabetes mellitus is related to disease duration and low density lipoprotein cholesterol levels / P. Clarkson, D.S. Celermajer, A.E. Donald [et al.] // J. Am. Coll. Cardiol. - 1996. - Vol. 28, № 3. -P. 573-579.

101. Important role of endogenous erythropoietin system in recruitment of endothelial progenitor cells in hypoxia-induced pulmonary hypertension in mice / K. Satoh, Y. Kagaya, M. Nakano [et al.] // Circulation. - 2006. - Vol. 113, № 11. - P. 1442-1450.

102. Inhaled iloprost in severe pulmonary hypertension / H. Olschewski, G. Simonneau, N. Galie [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2002. - Vol. 347, № 5. - P. 322-329.

103. Integrated evaluation of the endothelioprotective activity of an innovative peptide simulating the alpha-helix of b-erythropoethin in L-NAME-induced nitrogen oxide deficiency at the late gestation period / M.V. Pokrovskii, A.V. Yurakova, V.V. Gureev [et al.] // Journal of Critical Reviews. - 2019. - Vol. 6, № 6. - P. 180-184.

104. Intensive blood glucose control and vascular outcomes in patients with type 2 diabetes / ADVANCE Collaborative Group ; A. Patel, S. MacMahon, J. Chalmers [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2008. - Vol. 358, № 24. - P. 2560-2572.

105. Intermittent high glucose enhances apoptosis in human umbilical vein endothelial cells in culture / A. Risso, F. Mercuri, L. Quagliaro [et al.] // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. - 2001. - Vol. 281, № 5. - P. E924-E930.

106. Intermittent high glucose enhances apoptosis related to oxidative stress in human umbilical vein endothelial cells: The role of protein kinase C and NAD(P)H-oxidase activation / L. Quagliaro, L. Piconi, R. Assaloni [et al.] // Diabetes. - 2003. -Vol. 52, № 11. - P. 2795-2804.

107. Interruption of CD40 Pathway improves efficacy of transplanted endothelial progenitor cells in monocrotaline induced pulmonary arterial hypertension / Y. Pan, S. Wang, J. Yang [et al.] // Cell. Physiol. Biochem. - 2015. - Vol. 36, № 2. - P. 683-696.

108. Interventional and surgical modalities of treatment in pulmonary hypertension / A.M. Keogh, E. Mayer, R.L. Benza [et al.] // J. Am. Coll. Cardiol. -2009. - Vol. 54, № 1, Suppl. - P. S67-S77.

109. Johnson, S.R. Anticoagulation in pulmonary arterial hypertension: a qualitative systematic review / S.R. Johnson, S. Mehta, J.T. Granton // Eur. Respir. J. -2006. - Vol. 28, № 5. - P. 999-1004.

110. Kim, N.H. Riociguat: an upcoming therapy in chronic thromboembolic pulmonary hypertension? / N.H. Kim // Eur. Respir. Rev. - 2010. - Vol. 19, № 115. -P. 68-71.

111. Kubota, T. The role of endothelial insulin signaling in the regulation of glucose metabolism / T. Kubota, N. Kubota, T. Kadowaki // Rev. Endocr. Metab. Disord. - 2013. - Vol. 14, № 2. - P. 207-216.

112. Kvietys, P.R. Role of reactive oxygen and nitrogen species in the vascular responses to inflammation / P.R. Kvietys, D.N. Granger // Free Radic. Biol. Med. -2012. - Vol. 52, № 3. - P. 556-592.

113. Leeson, P.D. The influence of drug-like concepts on decision-making in medicinal chemistry / P.D. Leeson, B. Springthorpe // Nat. Rev. Drug Discov. - 2007. -Vol. 6, № 11. - P. 881-890.

114. Long term domiciliary oxygen therapy in chronic hypoxic cor pulmonale complicating chronic bronchitis and emphysema. Report of the Medical Research Council Working Party // Lancet. - 1981. - Vol. 1, № 8222. - P. 681-686.

115. Long-term ambrisentan therapy for the treatment of pulmonary arterial hypertension / R.J. Oudiz, N. Galié, H. Olschewski [et al.] // J. Am. Coll. Cardiol. -2009. - Vol. 54, № 21. - P. 1971-1981.

116. Long-term effects of intensive glucose lowering on cardiovascular outcomes / ACCORD Study Group ; H.C. Gerstein, M.E. Miller, S. Genuth [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2011. - Vol. 364, № 9. - P. 818-828.

117. Long-term intravenous epoprostenol infusion in primary pulmonary hypertension: prognostic factors and survival / O. Sitbon, M. Humbert, H. Nunes [et al.] // J. Am. Coll. Cardiol. - 2002. - Vol. 40, № 4. - P. 780-788.

118. Long-term intravenous prostaglandin (epoprostenol or iloprost) for treatment of severe pulmonary hypertension / T. Higenbottam, A.Y. Butt, A. McMahon [et al.] // Heart. - 1998. - Vol. 80, № 2. - 151-155.

119. Long-term response to calcium channel blockers in idiopathic pulmonary arterial hypertension / O. Sitbon, M. Humbert, X. Jais [et al.] // Circulation. - 2005. -Vol. 111, № 23. - P. 3105-3111.

120. Lysozyme M-positive monocytes mediate angiotensin II-induced arterial hypertension and vascular dysfunction / P. Wenzel, M. Knorr, S. Kossmann [et al.] // Circulation. - 2011. - Vol. 124, № 12. - P. 1370-1381.

121. MacLean, M.R. The serotonin hypothesis of pulmonary hypertension revisited / M.R. MacLean, Y. Dempsie // Adv. Exp. Med. Biol. - 2010. - Vol. 661. - P. 309-322.

122. Maruhashi, T. Pathophysiological Association between Diabetes Mellitus and Endothelial Dysfunction / T. Maruhashi, Y. Higashi // Antioxidants (Basel). - 2021.

- Vol. 10, № 8. - Art. 1306.

123. McCann, S.K. NADPH oxidase as a therapeutic target for neuroprotection against ischaemic stroke: future perspectives / S.K. McCann, C.L. Roulston // Brain Sci.

- 2013. - Vol. 3, № 2. - P. 561-598.

124. McLaughlin, V.V. Survival in primary pulmonary hypertension: the impact of epoprostenol therapy / V.V. McLaughlin, A. Shillington, S. Rich // Circulation. -2002. - Vol. 106, № 12. - P. 1477-1482.

125. Medical therapy for pulmonary arterial hypertension: updated ACCP evidence-based clinical practice guidelines / D.B. Badesch, S.H. Abman, G. Simonneau [et al.] // Ches. - 2007. - Vol. 131, № 6. - P. 1917-1928.

126. Modulation of a-thrombin function by distinct interactions with platelet glycoprotein Iba / R. Celikel, R.A. McClintock, J.R. Roberts [et al.] // Science. - 2003.

- Vol. 301, № 5630. - P. 218-221.

127. Molecular mechanisms and cell signaling of 20-hydroxyeicosatetraenoic acid in vascular pathophysiology / F. Fan, Y. Ge, W. Lv [et al.] // Front. Biosci. - 2016.

- Vol. 21, № 7. - P. 1427-1463.

128. Molinspiration Cheminformatics Software / Bratislava University. -Slovensky Grob, Slovak Republic, 2023.

129. More than a simple lipophilic contact: a detailed thermodynamic analysis of nonbasic residues in the S1 pocket of thrombin / B. Baum, M. Mohamed, M. Zayed [et al.] // J. Mol. Biol. - 2009. - Vol. 390, № 1. - P. 56-69.

130. Murphy, M.P. How mitochondria produce reactive oxygen species / M.P. Murphy // Biochem. J. - 2009. - Vol. 417, № 1. - P. 1-13.

131. New insights into oxidative stress and inflammation during diabetes mellitus-accelerated atherosclerosis / T. Yuan, T. Yang, H. Chen [et al.] // Redox Biol. -2019. - Vol. 20. - P. 247-260.

132. New predictors of outcome in idiopathic pulmonary arterial hypertension / S.M. Kawut, E.M. Horn, K.K. Berekashvili [et al.] // Am. J. Cardiol. - 2005. - Vol. 95, № 2. - P. 199-203.

133. Nonerythropoietic, tissue-protective peptides derived from the tertiary structure of erythropoietin / M. Brines, N.S. Patel, P. Villa [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2008. - Vol. 105, № 31. - P. 10925-10930.

134. Nox2 NADPH oxidase has a critical role in insulin resistance-related endothelial cell dysfunction / P. Sukumar, H. Viswambharan, H. Imrie [et al.] // Diabetes. - 2013. - Vol. 62, № 6. - P. 2130-2134.

135. Open Babel: An open chemical toolbox / N.M. O'Boyle, M. Banck, C.A. James [et al.] // J. Cheminf. - 2011. - Vol. 3. - Art. 33.

136. Oxidative stress and endothelial dysfunction: Clinical evidence and therapeutic implications / Y. Higashi, T. Maruhashi, K. Noma, Y. Kihara // Trends Cardiovasc. Med. - 2014. - Vol. 24, № 4. - P. 165-169.

137. Oxidative stress at onset and in early stages of type 1 diabetes in children and adolescents / C. Dominguez, E. Ruiz, M. Gussinye, A. Carrascosa // Diabetes Care. - 1998. -Vol. 21, № 10. - P. 1736-1742.

138. Parameters of oxidative stress in children with Type 1 diabetes mellitus and their relatives / J. Varvarovska, J. Racek, F. Stozicky [et al.] // J. Diabetes Complicat. -2003. - Vol. 17, № 1. - P. 7-10.

139. Peptide-directed highly selective targeting of pulmonary arterial hypertension / T. Urakami, T.A. Jarvinen, M. Toba [et al.] // Am. J. Pathol. - 2011. -Vol. 178, № 6. - P. 2489-2495.

140. Pharmacological correction of endothelial dysfunction in rats using e-NOS cofactors / M.V. Korokin, M.V. Pokrovskiy, O.S. Gudyrev [et al.] // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2015. - Vol. 6, № 5. - P. 1548-1552.

141. Pharmacological inhibition of S-nitrosoglutathione reductase improves endothelial vasodilatory function in rats in vivo / Q. Chen, R.E. Sievers, M. Varga [et al.] // J. Appl. Physiol. - 2013. - Vol. 114, № 6. - P. 752-760.

142. Phosphodiesterase 5 inhibitors for pulmonary hypertension / H. Barnes, Z. Brown, A. Burns, T. Williams // Cochrane Database Syst. Rev. - 2019. - Vol. 1, № 1. -Art. CD012621.

143. Pirani, N. Population attributable fraction for cardiovascular diseases risk factors in selected countries: A comparative study / N. Pirani, F.F. Khiavi // Mater. Socio Med. - 2017. - Vol. 29, № 1. - P. 35-39.

144. Platelet glycoprotein Iba is a counterreceptor for the leukocyte integrin Mac-1 (CD11b/CD18) / D.I. Simon, Z. Chen, H. Xu [et al.] // J. Exp. Med. - 2000. -Vol. 192, № 2. - P. 193-204.

145. Platelet-localized FXI promotes a vascular coagulation-inflammatory circuit in arterial hypertension / S. Kossmann, J. Lagrange, S. Jackel [et al.] // Sci. Transl. Med. - 2017. - Vol. 9, № 375. - Art. eaah4923.

146. Prevalence of cardiovascular disease in type 2 diabetes: A systematic literature review of scientific evidence from across the world in 2007-2017 / T.R.

Einarson, A. Acs, C. Ludwig, U.H. Panton // Cardiovasc. Diabetol. - 2018. - Vol. 17, № 1. - Art. 83.

147. Protease-activated receptor 1 contributes to angiotensin II-induced cardiovascular remodeling and inflammation / S. Antoniak, J.C. Cardenas, L.J. Buczek [et al.] // Cardiology. - 2017. - Vol. 136, № 4. - P. 258-268.

148. Pulmonary arterial hypertension: baseline characteristics from the REVEAL Registry / D.B. Badesch, G.E. Raskob, C.G. Elliott [et al.] // Chest. - 2010. -Vol. 137, № 2. - P. 376-387.

149. Pulmonary endarterectomy: experience and lessons learned in 1,500 cases / S.W. Jamieson, D.P. Kapelanski, N. Sakakibara [et al.] // Ann. Thorac. Surg. - 2003. -Vol. 76, № 5. - P. 1457-1462.

150. Rabiet, M.J. Thrombin-induced endothelial cell dysfunction / M.J. Rabiet, J.L. Plantier, E. Dejana // Br. Med. Bull. - 1994. - Vol. 50, № 4. - P. 936-945.

151. Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: twenty-fourth official adult lung and heart-lung transplantation report-2007 / E.P. Trulock, J.D. Christie, L.B. Edwards [et al.] // J. Heart Lung Transplant. - 2007. - Vol. 26, № 8. - P. 782-795.

152. Relating protein pharmacology by ligand chemistry / M.J. Keiser, B.L. Roth, B.N. Armbruster [et al.] // Nature Biotechnology. - 2007. - Vol. 25, № 2. - P. 197-206.

153. Relationship between flow-mediated vasodilation and cardiovascular risk factors in a large community-based study / T. Maruhashi, J. Soga, N. Fujimura [et al.] // Heart. - 2013. - Vol. 99, № 24. - P. 1837-1842.

154. Relationship between fluctuations in glucose levels measured by continuous glucose monitoring and vascular endothelial dysfunction in type 2 diabetes mellitus / K. Torimoto, Y. Okada, H. Mori, Y. Tanaka // Cardiovasc. Diabetol. - 2013. - Vol. 12. - Art. 1.

155. Reriani, M.K. Endothelial function as a functional expression of cardiovascular risk factors / M.K. Reriani, L.O. Lerman, A. Lerman // Biomark. Med. -2010. - Vol. 4, № 3. - P. 351-360.

156. Rich, S. The effect of high doses of calcium-channel blockers on survival in primary pulmonary hypertension / S. Rich, E. Kaufmann, P.S. Levy // N. Engl. J. Med. - 1992. - Vol. 327, № 2. - P. 76-81.

157. Rogers, D. Extended-connectivity fingerprints / D. Rogers, M. Hahn // J. Chem. Inf. Model. - 2010. - Vol. 50, № 5. - P. 742-754.

158. Roles for insulin receptor, PI3-kinase, and Akt in insulin-signaling pathways related to production of nitric oxide in human vascular endothelial cells / G. Zeng, F.H. Nystrom, L.V. Ravichandran [et al.] // Circulation. - 2000. - Vol. 101, № 13. - P. 1539-1545.

159. Sarcoidosis-associated pulmonary hypertension: outcome with long-term epoprostenol treatment / K.A. Fisher, D.M. Serlin, K.C. Wilson [et al.] // Chest. - 2006.

- Vol. 130, № 5. - P. 1481-1488.

160. Shah, M.S. Molecular and Cellular Mechanisms of Cardiovascular Disorders in Diabetes / M.S. Shah, M. Brownlee // Circ. Res. - 2016. - Vol. 118, № 11.

- P. 1808-1829.

161. Shi, Y. Macro- and microvascular endothelial dysfunction in diabetes / Y. Shi, P.M. Vanhoutte // J. Diabetes. - 2017. - Vol. 9, № 5. - P. 434-449.

162. Sies, H. Reactive oxygen species (ROS) as pleiotropic physiological signalling agents / H. Sies, D.P. Jones // Nat. Rev. Mol. Cell Biol. - 2020. - Vol. 21, № 7. - P. 363-383.

163. Sildenafil for treatment of lung fibrosis and pulmonary hypertension: a randomised controlled trial / H.A. Ghofrani, R. Wiedemann, F. Rose [et al.] // Lancet. -2002. - Vol. 360, № 9337. - P. 895-900.

164. Sitbon, O. Treat-to-target strategies in pulmonary arterial hypertension: the importance of using multiple goals / O. Sitbon, N. Galie // Eur. Respir. Rev. - 2010. -Vol. 19, № 118. - P. 272-278.

165. Song, Y. Heterocycle-thioacetic acid motif: a privileged molecular scaffold with potent, broad-ranging pharmacological activities / Y. Song, P. Zhan, X. Liu // Curr. Pharm. Des. - 2013. - Vol. 19, № 40. - P. 7141-7154.

166. Steppan, J. Development of novel arginase inhibitors for therapy of

endothelial dysfunction / J. Steppan, D. Nyhan, D.E. Berkowitz // Front. Immunol. -2013. - Vol. 4. - Art. 278.

167. Surgical treatments/interventions for pulmonary arterial hypertension: ACCP evidence-based clinical practice guidelines / R.L. Doyle, D. McCrory, R.N. Channick [et al.] // Chest. - 2004. - Vol. 126, № 1, Suppl. - P. 63S-71S.

168. Synthesis of quaternary a-amino acid-based arginase inhibitors via the Ugi reaction / A. Golebiowski, D. Whitehouse, R.P. Beckett [et al.] // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2013. - Vol. 23, № 17. - P. 4837-4841.

169. T cell-derived IL-17A induces vascular dysfunction via perivascular fibrosis formation and dysregulation ofNO/cGMP signaling / R. Schüler, P. Efentakis, J. Wild [et al.] // Oxid. Med. Cell. Longev. - 2019. - Vol. 2019. - Art. 6721531.

170. The cardiovascular effects of erythropoietin / K.J. Smith, A.J. Bleyer, W.C. Little, D.C. Sane // Cardiovasc. Res. - 2003. - Vol. 59, № 3. - P. 538-548.

171. The homozygous VHL(D126N) missense mutation is associated with dramatically elevated erythropoietin levels, consequent polycythemia, and early onset severe pulmonary hypertension / S. Sarangi, L. Lanikova, K. Kapralova [et al.] // Pediatr. Blood Cancer. - 2014. - Vol. 61, № 11. - P. 2104-2106.

172. Therapeutic advances in pulmonary arterial hypertension / K. Boutet, D. Montani, X. Jais [et al.] // Ther. Adv. Respir. Dis. - 2008. - Vol. 2, № 4. - P. 249-265.

173. Therapeutic approach in the improvement of endothelial dysfunction: the current state of the art / M. Radenkovic, M. Stojanovic, T. Potpara, M. Prostran. // BioMed Res. Int. - 2013. - Vol. 2013. - Art. 252158.

174. Thrombin induces angiotensin II-mediated senescence in atrial endothelial cells: Impact on pro-remodeling patterns / H. Hasan, S.H. Park, C. Auger [et al.]. // J. Clin. Med. - 2019 - Vol. 8, № 10. - Art. 1570.

175. Thrombin inhibition by dabigatran attenuates endothelial dysfunction in diabetic mice / A. Rahadian, D. Fukuda, H.M. Salim [et al.] // Vascul Pharmacol. -2020. - Vol. 124. - Art. 106632.

176. Thrombin Inhibition Prevents Endothelial Dysfunction and Reverses 20-HETE Overproduction without Affecting Blood Pressure in Angiotensin II-Induced

Hypertension in Mice / A. Kij, A. Bar, K. Przyborowski [et al.] // Int. J. Mol. Sci. -2021. - Vol. 22, № 16. - Art. 8664.

177. Tissue-specific up-regulation of arginase I and II induced by p38 MAPK mediates endothelial dysfunction in type 1 diabetes mellitus / J. Pernow, A. Kissa, Y. Tratsiakovich, B. Climent // Br. J. Pharmacol - 2015. - Vol. 172, № 19. - P. 46844698.

178. Treprostinil-based therapy in the treatment of moderate-to-severe pulmonary arterial hypertension: long-term efficacy and combination with bosentan / R.L. Benza, B.K. Rayburn, J.A. Tallaj [et al.] // Chest. - 2008. - Vol. 134, № 1. - P. 139-145.

179. Type 2 diabetes is associated with impaired endothelium-dependent, flow-mediated dilation, but impaired glucose metabolism is not; The Hoorn Study / R.M. Henry, I. Ferreira, P.J. Kostense [et al.] // Atherosclerosis. - 2004. - Vol. 174, № 1. - P. 49-56.

180. Updated clinical classification of pulmonary hypertension / G. Simonneau, I.M. Robbins, M. Beghetti [et al.] // J. Am. Coll. Cardiol. - 2009. - Vol. 54, № 1, Suppl. - P. S43-S54.

181. Updated evidence-based treatment algorithm in pulmonary arterial hypertension / R.J. Barst, J.S. Gibbs, H.A. Ghofrani [et al.] // J. Am. Coll. Cardiol. -2009. - Vol. 54, № 1, Suppl. - P. S78-S84.

182. Vane, J.R. Regulatory functions of the vascular endothelium / J.R. Vane, E.E. Anggard, R.M. Botting // N. Engl. J. Med. - 1990. - Vol. 323, № 1. - P. 27-36.

183. Vanhoutte, P. Endothelial function and dysfunction / P. Vanhoutte, C. Boulanger // Biology of the arterial wall / ed. B.I. Levy, A. Tedgui - New York, 1999. -P. 49-70.

184. Vasoactive intestinal peptide as a new drug for treatment of primary pulmonary hypertension / V. Petkov, W. Mosgoeller, R. Ziesche [et al.] // J. Clin. Invest. - 2003. - Vol. 111, № 9. - P. 1339-1346.

185. Virtual computational chemistry laboratory - design and description / I.V. Tetko, J. Gasteiger, R. Todeschini [et al.] // J. Comput. Aided Mol. Des. - 2005. - Vol. 19, № 6. - P. 453-463.

186. Virtual Computational Chemistry Laboratory / I.V. Tetko ; Helmholtz Center Munich (HMGU) - German Research Center for Environmental Health (GmbH). - Munich, 2001-2023.

187. Worldwide trends in diabetes since 1980: A pooled analysis of 751 population-based studies with 4.4 million participants / NCD Risk Factor Collaboration // Lancet. - 2016. - Vol. 387, № 10027. - P. 1513-1530.

188. Zeng, G. Insulin-stimulated production of nitric oxide is inhibited by wortmannin. Direct measurement in vascular endothelial cells / G. Zeng, M.J. Quon // J. Clin. Investig. - 1996. - Vol. 98, № 4. - P. 894-898.

189. Zimmerman, M.A. Autoimmune-mediated oxidative stress and endothelial dysfunction: Implications of accelerated vascular injury in type I diabetes / M.A. Zimmerman, S.C. Flores /// J. Surg. Res. - 2009. - Vol. 155, № 1. - P. 173-178.