Фармакокинетика новых лекарственных форм пироксикама: экспериментальное исследование тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат биологических наук Бобокалонов, Джамшед Толехмуродович

• Бобокалонов, Джамшед Толехмуродович
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Бобокалонов, Джамшед Толехмуродович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1.ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Перспективы развития производства терапевтических систем.

1.2. Введение в полимерные системы доставки лекарств.

1.3. Биополимеры, как потенциальная основа для СДЛ.

1.2.1. Фармакокинетика высвобождение ЛВ из полимерных СДЛ.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Методы получения, свойства пектинов и зеинов.

2.1.1. Выделения, очистка и характеристика пектинов из растительных сырья.

2.1.2. Выделение и характеристика зеинов кукурузы [46].

Обезжиривание семян кукурузы.

Выделение кукурузного масла.

Выделение зеина из обезжиренной муки кукурузы.

Выделение и очистка пироксикама.

2.2. Методы контроля исходных субстанций.

2.2.1. Анализ зеинов кукурузы методом электрофореза в ПААГ.

Определение общего белка в обезжиренной муке кукурузы.

Электрофорез зеина в 7.5% ПААГ.

Электрофорез зеина в ПААГ, содержащем

Турбидиметрическое титрование зеина.

2.3. Получение и характеристика СДЛ.

2.3.1. Получение гидрогелевых микросфер на основе пектинов и зеина.

2.4. Методики фармакологических исследований СДЛ на лабораторных животных.

2.4.1. Определение общего действия и острой токсичности СДЛ.

2.4.2. Изучение влияния СДЛ на нервную систему.

2.4.3. Определение влияния СДЛ на сердечно- сосудистую систему.

2.4.4. Миотропное действие изучаемых СДЛ.

2.4.5. Методика исследования влияния СДЛ на диурез.

2.4.6. Методика исследования влияния СДЛ на желчеотделение [62,63].

2.4.7. Хроническое токсикологические исследования СДЛ.

2.4.8. Влияние СДЛ на морфологию крови.

2.4.9. Патоморфологические исследования влияния СДЛ.

2.5. Исследование контролируемого высвобоэюдения модельного JIB из СДЛ в опытах in vitro (Фармакокинетические исследования СДЛ в опытах in vitro)

2.6. Исследование контролируемого высвобождения модельного ЛВ из СДЛ в опытах ex vivo (фармакокинетические исследования СДЛ в опытах ex vivo).

2.7. Исследование контролируемого высвобождения модельного ЛВ из СДЛ в опытах in vivo (фармакокинетические исследования СДЛ в опытах in vivo).

2.1 Л. Процедура анализа крови.

2.7.2. Определение пироксикама в тонком и толстом кишечниках.

2.8. Протокол проведения экспериментов на лабораторных животных.

2.8.1. Предварительный скрининг СДЛ.

2.8.2. Протокол №1 (эксперимент ex vivo).

Эвтаназия.

2.8.3. Протокол №2 Эксперимент in vivo.

Фармакокинетика высвобождения пироксикама in vivo.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Гидрогелевые микросферы пектина с зеином как носители ЛС.

3.1.1 Микросферы на основе низкометилированного цитрусового пектина и зеина.

3.1.2. Микросферы на основе яблочных пектинов и зеина.

3.2. Кинетика выхода пироксикама из пектин-зеиновых комплксов в опытах in vitro.

3.3. Математическое моделирование процесса высвобождения JIB из СДЛ.

3.4. Исследование токсичности зеин-пектинового композита на белых мышах и белых крысах.

3.5. Кинетика выхода пироксикама из зеин - пектиновых носителей в опытах ex vivo.

3.6. Кинетика выхода пироксикама из зеин - пектиновых носителей в опытах in vivo.

3.7. Исследование концентрации пироксикама в плазме кровы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакокинетика новых лекарственных форм пироксикама: экспериментальное исследование»

Актуальность работы. В настоящее время все большее внимание фармацевтической науки, в том числе и фармацевтической технологии, уделяется созданию новых лекарственных форм (ЛФ) с улучшенными биофармацевтическими характеристиками. В этой связи большой интерес представляют ЛФ с пролонгированным и контролируемым высвобождением, которые имеют ряд преимуществ перед традиционными ЛФ.

В последние десятилетия проводятся интенсивные исследования и разработка систем доставки лекарственных веществ (СДЛ) на основе биосовместимых, биодеградируемых природных полимеров с контролируемым высвобождением фармакологически активного вещества (ФАВ). Пролонгированная доставка ФАВ в организм в требуемых дозах позволяет устранить многие недостатки перорального, инъекционного, ингаляционного и других способов их введения при использовании традиционных лекарственных форм. Использование СДЛ дает возможность планомерно и целенаправленно вводить в организм требуемую дозу ФАВ, что особенно важно при терапии хронических заболеваний.

В настоящее время природные полимеры, получаемые из сельскохозяйственных отходов, привлекают большое внимание для применения в различных областях и, в частности, в медицине и фармации. Они обладают широким спектром полезных эксплуатационных характеристик, среди которых, прежде всего, следует отметить биосовместимость и способность к биодеградации с образованием полезных для организма в целом конечных продуктов. В Институте химии им. В.И. Никитина АН РТ разработана технология получения пектина из различных сельскохозяйственных отходов, который используется в качестве полимера- носителя для исследования и разработки новых лекарственных форм.

Большинство работ в мире по созданию СДЛ ведутся с использованием синтетических биоразлагаемых полимеров, на основе молочной кислоты, таких как полилактиды, полигликолиды и их сополимеры, имеющие ряд недостатков.

Полученные в настоящей работе гидрогелиевые микросферы на основе полимеров растительного происхождения пектина и зеина позволят разработать новые ЛФ, исключающие воспалительную тканевую реакцию при применении СДЛ на основе синтетических полимеров.

Сложность количественного описания кинетики высвобождения ЛВ связана с необходимостью учета специфики состояния полимерной композиции, т.е. ее структуры и морфологии. Более того, среди научных и патентных публикаций в указанной области лишь крайне ограниченное число работ описывает транспорт в терапевтических матрицах, полученных из смесевых гидрогелей.

В Институте химии им. В.И. Никитина АН РТ разработана технология получения пектина из различных сельскохозяйственных отходов, в связи с этим в качестве полимер - носителя для исследования и разработки новых лекарственных форм был использован данный материал.

Данная работа посвящена разработке и изучению гидрогелиевых микросфер на основе пектина и зеина, как направленный поиск новых лекарственных форм, способных длительное время осуществлять контролируемое высвобождение ЛВ с учетом диффузии и гидролитического разложения, что свидетельствует об актуальности исследования.

Цель и задачи исследования — заключалась в фармакологическом изучении кинетики высвобождения модельного лекарственного вещества (пироксикама) из разработанных гидрогелевых микросфер на основе природных полимеров пектина и зеина как системы доставки лекарств в толстом отделе кишечника. В соответствии с целью были определены следующие задачи: на основе биополимеров пектина и зеина; создать ЛФ пироксикама путем его инкапсулирования в СДЛ; изучить кинетику высвобождения пироксикама из ЛФ полимерных гидрогелевых носителей и микросфер в опытах in vitro. выявить влияние таких определяющих характеристик системы, как структура биополимеров, их соотношение, степень захвата лекарственного вещества (JIB), тип сшивающего металла и форма носителя, на кинетику высвобождения JIB из зеин-пектиновых микросфер (ЗПМ) в условиях in vitro; провести комбинированные исследования высвобождения JIB из СДЛ в опытах ex vivo и in vivo для оценки возможности их применения в качестве лекарственной формы; разработать математическую модель транспорта фармакологически активного ЛВ из СДЛ.

Научная новизна работы: впервые получены ЛФ пироксикама в виде микросфер на основе зеина кукурузы и пектинов цитрусовых, яблочных и подсолнечника; проведена биофармацевтическая оценка модельных ЛФ в условиях in vitro, ex vivo и in vivo и показан двухстадийный механизм процесса высвобождения JIB из ЗПМ: первый связан с набуханием полимерной цепи с преобладанием диффузионных процессов; второй - с доминированием ферментативной деструкции пектиновой матрицы и выходом JIB соответствующий диффузионному суперслучаю II, подчиняющийся кинетике нулевого порядка; показано, что на процесс образования комплексов, степень насыщения микросфер ЛВ и кинетические параметры влияют природа биополимеров, их соотношение, присутствие двухвалентных металлов и молекулярная масса пектина; показано, что биполимерный композиционный носитель обладает бимодальным высвобождением и предполагает создание хроно-фармакологической системы с постепенным нарастанием концентрации ЛВ в крови, через определенный интервал времени от начала приема; разработана математическая модель процесса высвобождения JIB из гидро-гелевых ЗПМ, основанная на изменении соотношения биополимеров и степени их заполнения JIB, позволяющая регулировать скорость диффузии, необходимую при создании матричных пролонгированных систем для контролируемого высвобождения JIB; — доказано, что при контакте с физиологическим раствором зеин-пектиновые I гидрогели с ионами Zn проявляют большую устойчивость, чем гидрогели сформированные с ионами

Практическая ценность работы. Результаты исследования фармакоки-нетических, физико-химических, диффузионно-транспортных и технологических свойств полученных композиционных носителей на основе пектина и зеи-на позволили обосновать технологию получения СДЛ, которые обеспечат биофармацевтические характеристики, необходимые для пролонгированных ЛФ и ЛФ с направленной доставкой ЛВ в кишечник.

Разработанные зеин-пектиновые гидрогелевые системы био совместимы, их адгезивные участки полисахаридной цепи могут являться потенциальными носителями белков, гена и культур клеток. Кроме того, гидрогели могут использоваться в качестве контактных линз и заменителей межтканевых жидкостей в тканевой инженерии. Следовательно, разработанные системы могут быть использованы для длительной и контролируемой дозировки, активных ингредиентов в лечебных и профилактических целях.

Экспериментально было определено, что полученные биополимерные комплексы деградируются только в кишечнике, что, несомненно, предоставляет потенциальную возможность для широкого их клинического применения для доставки JIB чувствительных к ферментам и кислой среде ЖКТ при лечении широкого спектра заболеваний.

Работы по созданию ЛФ на основе биоразлагаемых полимерных микросфер в Таджикистане находятся на начальном этапе, и все имеющиеся на фармацевтическом рынке страны ЛФ экспортируют из других высокоразвитых стран. Полученные результаты могут быть использованы для создания новых отечественных ЛФ с контролируемым высвобождением ЛВ для лечения широкого спектра заболеваний.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, изложения результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка цитируемой отечественной и зарубежной литературы, включающего 92 источников. Работа изложена на 100 страницах компьютерного текста, содержит 18 рисунков и 3 таблиц.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Бобокалонов, Джамшед Толехмуродович

ВЫВОДЫ

1. Впервые разработаны СДЛ на основе гидрогелевых микросфер пектина и зеина, с включением модельного ЛВ и изучена фармакокинетика новых ЛФ пи-роксикама с контролируемым высвобождением в опытах in vitro, ex vivo и in vivo.

2. Доказано, что путем изменения соотношений биополимеров изменяется и степень их заполнения ЛВ. Определен механизм процесса его высвобождения из гидрогелевых П/З микросфер, который можно регулировать скорость диффузии при создании матричных пролонгированных систем с контролируемым высвобождением.

3. Установлено, что лимитирующую роль в процессе высвобождения модельного ЛВ играет диффузия лекарственного агента в матрице, подтверждаемая низкой величиной экспонента в уравнении Пепасса. Заметная разница кинетических констант в опытах in vitro и ex vivo, указывает на то, что полимерная сетка, образованная за счет пектина и зеина, реагирует на внешние стимулы, делая изученные СДЛ привлекательными для транспорта ЛВ в ЖКТ.

4. Определено, что исследованный биополимерный комплекс при внутриже-лудочном введении по параметрам острой токсичности относится к малотоксичным веществам и при ежедневном нанесении на кожу в течение 14 дней не проявляет раздражающего действия.

5. Фармакокинетика новых терапевтических форм пироксикама в сравнении с традиционными ЛФ показали, что разработанные СДЛ обладают рядом преимуществ: способствуют максимальному прохождению ЛВ через верхний отдел ЖКТ, уменьшая дозировку ЛВ и усиливая биодоступность препарата путем его контролируемого высвобождения в кишечнике и поддерживая его концентрацию в крови на постоянном уровне длительное время.

6. Экспериментально было определено, что полученные биополимерные комплексы деградируются только в кишечнике, что, несомненно, предоставляет потенциальную возможность для широкого их клинического применения для доставки ЛВ чувствительных к ферментам и кислой среде ЖКТ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Пектиновые полисахариды и белки, как биоразрушающиеся и биосвмести-мые природные полимеры, широко используются в фармацевтической промышленности при создании СДЛ. Для успешной доставки лекарственного вещества в нужное пространство, необходимо, чтобы полимерный носитель не разлагался в верхней части желудочно-кишечного тракта. Способность низко-метилированного (НМ-) пектина образовывать гель в присутствие ионов металлов явилось основой при создании носителей лекарственных препаратов в виде микросфер, микрокапсул и композиций. Однако высокая степень набухания пектинового геля в физиологических условиях способствует преждевременному высвобождению ЛВ, вследствие расширения размера его пор. Предотвратить данный процесс можно за счет увеличения гидрофобности полисахаридной сетки включением в нее гидрофобного полимера посредством физической сшивки. Зеин кукурузы - это многокомпонентный белок с высоким содержанием про-лина и глютамина, состоящий из а, Р, у - зеинов, которые отличаются по молекулярной массе и способности к агрегированию, у-зеин, доминирующая фракция, представляет собой протеин из последовательно связанных концевых пролинов. За счёт высокого содержания лейцина, изолейцина, валина и фенила-ланина имеют большое число гидрофобных групп. За счёт гидрофобного взаимодействия и водородных связей зеин способен формировать различные агрегаты диаметрами от 6 до 20 нм цилиндрической формы Способность зеина формировать комплексы с полисахаридами широко используется во многих областях, включая медицину.

Контролируемый прием терапевтических доз ЛВ эффективен, если доза будет поддерживаться продолжительный период, т.е. подчиняться законам кинетики нулевого порядка. Спад концентрации лекарственного вещества в крови ниже определенного уровня считается не эффективным. Более того, некоторые лекарства являются токсичными при высокой концентрации в крови и очень трудно достигнуть баланса между эффективным и токсичным уровнем, когда спад концентрации лекарственного вещества в крови происходит быстро. Следовательно, необходимы исследования, нацеленные на усовершенствование методов достижения контролированного и постоянного приема ЛС.

Комплексы пектина с зеином, подавляють набухание пектина в желудке и, тем самым, ограничат разрушение ЛВ в верхней части ЖКТ. Для получения микросфер с ЛВ, стойких в верхней части желудочно-кишечного тракта, нами осуществлялась модификация экспериментов путем изменения соотношения 3/П, концентрации сшивающих металлов, РХ и технологии получения комплексов. Полученные данные показали, что выход микросфер, полученных на основе НМ пектина ЬМ-31 и степень насыщения комплексов РХ зависят от соотношения 3/П: чем больше зеина в комплексе, тем больше степень связывания РХ. При всех соотношениях П/3, с увеличением содержание зеина от 1 до 5, эффективность инкапсулирования увеличивается от 9.8 до 93.8 масса.%. В то же время, необходимо отметить, что желаемый эффект не был достигнут при увеличении количества РХ в 10 раз при соотношении 3/П =1.4:1. Это, по-видимому, связано с природой биополимеров и плотностью упаковки гидрофобных участков полимерной цепи. В данном случае можно утверждать, что в образовании комплексов участвуют энтальпийные факторы.

3/П микросферы с НМ-ВМ- яблочными пектинами с различными соотношением, были получены при аналогичных условиях. Комплексы с ВМ-пектином отличались большим весом и степенью набухания. Однако степень насыщения РХ была выше у комплексов с НМ-пектином. Из представленных данных очевидно, что с увеличением содержания ионов Са2+ в реакционной смеси повышался выход микросфер. При замене ионов Са на ионы степень насыщения микросфер ЛВ при соотношении 3/П =1:1 заметно увеличивалась, при этом выход несколько уменьшался, что подтверждает об образовании различных по структуре комплексов.

На основе ВМ- яблочного пектина в присутствии ионов двухвалентных металлов, образовывались слабые по структуре гидрогелевые шарики, которые затем трансформировались в агрегаты. Степень связывания РХ в комплекы была больше у НМ, чем ВМ- пектина. Эти отличия, как уже отмечалось, связаны с особенностями структуры полисахарида, образующего с зеином коацерваты, способные захватывать большее количество JIB.

Полученные данные подтверждают, что ионы Zn2+, по сравнению с ионами

Л I

Са , как сшивающие металлы, способствуют образованию более компактной структуры с пектином, что представляется важным при создании носителей ЛВ стойких к преждевременному высвобождению ЛВ в верхней ЖЕСТ. Кроме того, гидрогели с ионами цинка при контакте с физиологическим раствором проявили большую механическую прочность, чем гидрогели с ионами кальция. Таким образом, в результате исследований определены оптимальные условия получения микросфер на основе природных биополимеров - пектина и зеина с инкапсулированным JIB. Показано, что на процесс образования комплексов, степень насыщения микросфер лекарством влияют природа биополимеров, их соотношение, присутствие двухвалентных металлов и молекулярная масса пектина. При формировании микросфер с использованием НМ-пектинов комплексы образуются, в основном, за счет поперечных связей с ионами двухвалентных металлов, а в случае с ВМ-пектином, за счет гидрофобных взаимодействий биополимеров. Зеин-пектиновые гидрогели с ионами Zn2+ проявили устойчивость при контакте с физиологическим раствором, чем гидрогели, сформированные на основе ионов Са . В результате получен ряд микросфер, на основе биоразру-шающих и биосовместимых полимеров - пектина и зеина, которые могут найти применение при создании носителей JIB с контролируемым высвобождением.

На основе анализа представленных результатов можно предполагать, что РХ адсорбированный на поверхности микросфер будет высвобождаться в первые часы инкубации по механизму диффузии и растворения JIB независимо от рН среды. Высокая степень высвобождения происходит вследствие релаксации полимерной сетки при воздействии напряжения в процессе набухания полимера в условиях среды. Кроме того, гидрофобные взаимодействия протеина с РХ должны еще больше замедлять выход JIB из полимерной сетки. С увеличением содержания зеина, при рН 1.2, должны усиливаться релаксационные процессы полимерной сетки за счет ионизации аминогрупп, однако этот процесс, из-за малого количества аминогруп в зеине, заметного влияния на скорость диффузии не оказывает. В то время как при рН 6.4, с увеличением доли зеина, наблюдается рост скорости диффузии как из-за высокой степени заполнения гидрогелей РХ, так и за счет ионизации карбоксильных групп (в основном пектина). Необходимо отметить, что в микросферах с большим содержанием зеина, высвобождение ЛВ происходит скорее по механизму кооперативной десорбции: чем больше степень заполнения ЛВ микросфер, тем больше скорость диффузии.

Наблюдаемая двухступенчатая скорость высвобождения РХ из комплексов обусловлена, вероятно, различным механизмом взаимодействия РХ с пектином и зеином.

Поэтому, учитывая сложный характер системы и возможность образования кристаллических фаз пироксикама, результаты данной работе показывают, что лимитирующей стадией высвобождения остается не растворение кристаллов JIB в микросферах, а диффузия РХ из полимерных смесей различного состава. Таким образом, исследование характера диффузии в микросферических композициях пектина и зеина позволяет регулировать скорость высвобождения JIB в пределах десятичных порядков, что является необходимым при регулировании скорости десорбции низкомолекулярного компонента и, следовательно, при создании матричных пролонгированных систем для контролируемого высвобождения JIB.

Полученные данные свидетельствуют о том, что лимитирующую роль в процессе высвобождения пироксикама из гидрогелевых микросфер играет диффузия терапевтического агента в матрице, что подтверждается низкой величиной экспонента в уравнении Пепасса. Столь заметная разница кинетических констант в изученных средах, указывает на то, что полимерная сетка, образованная за счет пектина и зеина, способна реагировать на внешние стимулы, что делает изученные СДЛ привлекательными для транспорта ЛВ в ЖКТ. Кроме того, созданные терапевтические формы на основе биоразрущающихся полимеров, являются альтернативным вариантом для перорального назначения множества ЛВ с ограниченной биодоступностью, снижая побочные эффекты путем уменьшения их дозировки, и при этом создавая массу удобств пациентам в плане дозировки и безопасности ЛВ. Наконец, такая постановка эксперимента облегчает (упрощает) дальнейшее доклиническое и клиническое исследование СДЛ.

Применение РХ в виде СДЛ указывает на устойчивый выход ЛВ и позволяет контролировать принимаемую дозу. Кроме того Рх инкапсулированный в разработанные нами СДЛ, представляет собой новую ЛФ, которая может уменьшить используемую дозу лекарственного вещества и ряд побочных эффектов, возникающих при приеме большого количества препарата. В развитии и использовании полимерных гидрогелей, существует заинтересованность в создание новых терапевтических форм и мукоадгезивных СДЛ а также для доставки белков. Надо отметить, что разработанные зеин-пектиновые гидрогелевые системы биосовместимы, их адгезивные участки полисахаридной цепи могут являться потенциальными носителями белков, гена и культур клеток. Кроме того, гидрогели могут использоваться в качестве контактных линз и заменителей межтканевых жидкостей в тканевой инженерии. Следовательно, разработанные системы могут быть использованы для длительной и контролируемой дозировки, активных инградиентов как в лечебных, так и практических целях.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Бобокалонов, Джамшед Толехмуродович, 2011 год

1. Dutta R.C. Drug carriers in pharmaceutical design: promises and progress // Cur. Pharm. Des. -2007. - 13 (7), -P. 761-769.

2. Caruthers S.D., Wickline S.A., Lanza G.M. Nanotechnological aplications in medicine // Cur. Opin. Biotechnol. 2007. - 18 (1), - P. 26-30.

3. Covreur P., Barret G., Fatalla E., Legrand P.H., Vauthier C. Nanocapsule Technology: A Review // Critical Review in Therapeutic Drug Carrier Systems. -2002.-19(2)-P.99-134

4. Коржавых Э., Румянцев А. Лекарственные формы с модифицированным высвобождением и действием // Российские аптеки. 2003. -№4. - С. 14-59.

5. Chiellini Е. et al.. Biomedical Polymers and Polymer Therapeutics / -Kluwer: Academic Publishers, -2001. 470 p.

6. Harrison K. Introduction to polymeric drug delivery systems. In Biomedical polymers / ed. by M. Jenkins. -Publishing England, Limited Cambridge: CRC Press, 2007. -236 p.

7. Fassihi R., Kim J.H. Matrix for controlled delivery of highly soluble pharmaceutical agents // US patent 6337091 Bl; 2002, issued Jan. 8.

8. Pillay V., Danckwerts M.P., Muhidinov Z.K., Fassihi R. A crosslinked calciurri-alginate-pectinate-cellulose acetophthalate gelisphers system for liner drug release // Drug Delivery. 2002.- 9. - P. 77-86.

9. Liu L.S., Fishmana M.L., Kost J., Hicks K.B. Pectin-based systems for colon-specific drug delivery via oral route // Biomaterials. 2003. - 24- P. 3333-3343.

10. Vandamme Th.F., Lenourry A., Charrueau C., Chaumeil J.C. The use of polysaccharides to target drugs to the colon // Carbohydrate Polymers. -2002. 48 - P. 219-23.

11. Wong T.W, Chan L.W., Lee H.Y., Heng P.W.S. Release characteristic of pectin microsphers prepared by an emulsification technique // Journal of Microencapsulation.-2002. 19.-P. 511-522.

12. Voragen A.G.J., Pilnik W., Thibault J.F., Axelos M.A.V., Renard C.M.G.C/Лп: Food Polysaccharides and Their Applications /Ed. By Stephen A.M., Marcel Dekker. -New York. -1995. -P. 287-339.

13. Peppas N.A., Leobandung W.J. Stimuli-sensitive Hydrogels in Chronotherapeutic Applications // Biomaterial Sciences, Polymer Ed. -2004. -15. -P. 125-144

14. Gomez-Burgaz M., Carr D., Fisher O.Z., Peppas N.A. New pH-sensitive Hydrogel for an Oral Delivery of Proteins with a High Isoelectric Point // Proceed. World Meet. Pharm. Biopharm. Pharm Techn. -2008 6. -P. 77.

15. Muhiddinov Z.K., Khalikov D.Kh., Speaker Т., Fassihi R. Development and charchterzation of different low methoxy pectin microcapsules by an emulsion•interface reaction // Microencapsulation. -2004. 21(7). -P.729-741.

16. Мухиддинов З.К, Халикова М.Д., Камилова Г.И., Хайдаров К.Х. // Микрокапсулы на основе низкометилированного пектина. Докл. АН РТ. 2008. -48(1). -С.39-43.

17. Radchenco I.L., Sukhorukov G.B., Mohwald Н. A novel method for encapsulation of poorly water-soluble drugs: precipitation in polyelectrolyte multiplayer shells // International Journal of Pharmaceutics. -2002. Vol. 24, - P. 2219-2233.

18. Cuzman M. Formation and characterization of cyclosporine-loaded nanoparticles // Journal of Pharmaceutical Sciences. -1993. -Vol. 82, -P. 498-502.

19. Shiga K., Mumhuiku N., Kondo T. Preparation of poly (D-L-Iactide) and copoly (Iactide-glycolide) microspheres of uniform size // Journal of Pharmocology. -1996.-Vol.48,-P. 891-895.

20. Leo E., Vandell M.A., Cameroni R., Forni F. Doxorubicin-loaded gelatin nano-particies stabilized by glutaraldehyde: involved of the drug in the cross-linking process // International Journal of Parmaceutics. -1997. —Vol.155, —p. 75-82

21. Fresta M., Cavallaro G., Giammona G., Wehrli E., Puglishi G. Preparation and Characterization of polyethylene-2-cyanoacrilate nanocapsuls containing aniticep-iletic drugs // Biomaterials. 1996. -Vol.17, -P. 751-758.

22. Freiberg S., Zhu X.X. Polymer microspheres for controlled drug release // Int. J. Pharm. -2004. -282. -P. 1-18.

23. Anderson J. M., Shive M. S. Biodégradation and biocompatibility of PLA and PLGA microspheres // Adv. Drug Deliv. Rev. 28:5-24 (1997).

24. Bodmeier R, Wang J. Microencapsulation of drugs with aqueous colloidal polymer dispersions // Journal of Pharmaceutical Sciences. -1993. -Vol. 82. P. 191194.

25. Muhiddinov Z.K., Khalikov D.Kh., Abdusamiev F.T., Avloev Ch.Ch. I solation and Structural characterization of pectin homo-and rhamnogalacturonan // Talan-ta. -2000. -Vol. 53 -P. 171-176.

26. Carpita N.M., Defemez M., Findlay K., Wells B., Shoue D.A., et al. Cell wall architecture of the elongating maize coleoptile // Plant Physiol. 2001. -Vol.127. -p. 551-565.

27. Ridley B. L., O'Neill M.A., Mohnen D.A. Pectins: Structure-Biosynthesis- and Oligogalacturonide, Related Signaling // Phytochemistry. -2001. -Vol. 57. -P. 929-967.

28. Andrew N.R., Neil M.R., Alistair M.D., Steven G.R., Victor J.M. Investigating the nature of branching in pectin by atomic force microscopy and carbohydrate analysis // Carbohydrate Research, 2001. -Vol. 331. -P. 337-342.

29. Mohnen D.A. Pectin structure and biosynthesis // Current Opinion in Plant Biology. -2008, -11. -P.266-277

30. Rinaudo M., G. Ravanat, M. Vincedon NMR investigation on oligo-and polyga1. Л rlacturonic acid; gel formation in the presence of Ca counterions // Macro-mol.Chem. -1980. -Vol.181, (5). -P.1059-1070.

31. Халикова М.Д., Авлоев X.X., Мухиддинов З.К. Комплексообразование ионов цинка с макромолекулами пектина // Докл. АН РТ. -2005. -Т.48., №1. -С.80-84.

32. Созинов А.А. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции // М.: Наука, 1985.-272 с.

33. Конарев А.В., Конарев В.Г., Губарева Н.К., Пенева Т.И. Белки семян как маркеры в решении проблем генетических ресурсов растений, селекции и семеноводства / // Цитология и генетика -2000. -Т. 34, № 2. -С. 91-104.

34. Shukla, R. Cheryan М. Zein: the industrial protein from corn // Ind. Crops Prod. — 13. -2001. -P. 171-192.

35. Lawton J.W. Zein: a history of processing and use // Cereal Chem. -79. -2002. -p.1-18.

36. Sessa D J., Selling G.W., Willett J.L., Palmquist D. E. Viscosity control of zein processing with sodium dodecyl sulfate // Industrial Crops and Products. —23. -2006.-P. 15-22.

37. Юта S., Sessa D.J., Lawton J.W. Characterization of zein modified with a mild cross-linking agent //-Industrial Crops and Products. -2004. -20. -P.291-300.

38. Liu LS., Fishman M.L., Hicks K.B., Kende M., Ruthel G. Pectin/Zein beads for potential colon-specific drug delivery: Synthesis and in vitro evaluation // Drug Delivery. -2006. -13. -P. 417-423.

39. Mastromatteo M., Barbuzzi G., Conte A. Controlled release of thymol from zein based film // Del Nobile Innovative Food Science and Emerging Technologies. -2009. -10. -P. 222-227.

40. Esen A. A. Proposed nomenclature for the alcohol-soluble proteins (zeins) of maize (zea mays L.) // Journal of Cereal Science -1987. -5. -P.l 17-128

41. Kogan M.J., Dalcol I., Gorostiza P., Lopez-Iglesias C., Pons M., Sanz F., Ludevid D., Giralt E. Self-assembly of the Amphipathic Helix (VHLPPP). A Mechanism for Zein Protein Body Formation // Journal of Molecular Biology. -2001. -312. P. 907-913.

42. Касымова Г.Ф., Бобокалонов Д.Т., Халикова М.Д., Мухиддинов З.К., Кука-ниев М.А. Выделение и характеристика зеинов кукурузы, произрастающей в Таджикистане // Изв. АН РТ. отд. физ-мат, хим. и геол. наук. -2007. -2(127), -С. 42-50.

43. Zhou Н., Zhang Y., Biggs D.L., Manning М.С., Randolph T.W., Christians U., Hybertson B.M. Microparticle-based lung delivery of INH decreases INH metabolism and targets alveolar macrophages // Journal of Contr. Rel. -2005. -107(2). -P.288-299.

44. William L. N-Hong Li., Benson J.R. New Polymer Enables Near Zero-Order Release of Drugs // Drug Delivery Technology. -2005. -5(2). -P. 48-55.

45. Wai-Yip Lee Т., Robinson R.J. Controlled drug delivery systems // In: Gennaro AR The Science and Practice of Pharmacy.20th ed. Philadelphia, PA: University of Sciences in Philadelphia; / ed. by Remington. 2000-903Y929.

46. DeLuca P., Капке M. Sato Т., Schroeder H. Porous microspheres for drug delivery and methods for making same // US Pat. No. 4,818,542, 1989.

47. Jankower L., Shipley W. Controlled release formulating employing resilient mi-crobeads // US Pat. No. 4,873,091

48. McGee J.P., Davis S., O'Hagan D. Zero order release of protein from poly (D,L-lactide-coglycolide) microparticles prepared using a modified phase separation technique // Journal of Controlled Release -1995. -34. -P.77-86.

49. Мухидинов З.К. Способ очистки пектинового гидролизата и получение пектинового геля / Патент Республики Таджикистан № TJ 197. от 14.11.1998, опубликовано в бюллетене №3 (11).

50. Мухидинов З.К. Физико-химические аспекты получения и производства пектиновых полисахаридов: автореферат диссертации доктора химических наук. Душанбе, 2003.

51. Мухидинов З.К., Горшкова Р., Халиков Д.Х. Способ получения пектина из растительного сырья // Малый патент Республики Таджикистан №TJ 290. 20.01.2010, опубликовано в бюллетене № 57 (1).

52. Мухидинов З.К., Горшкова P.M., Валиев М.В., и др. Влияние продолжительности процесса на выход и параметры яблочного пектина при быстрой экстракции // Докл. АН РТ. -2010. -Т.53. -№8 -С.617-621

53. Машковский М.Д., Бабаян Э.А. и д.р. Государственная фармакопея СССР. -XI издание, выпуск 2. М.: -1990. -398с.

54. Штанчаев А.Ш., А.С. Насриддинов, Х.И. Тешаев. Турбидиметрическое титрование зеина кукурузной муки // Доклады АН РТ. Т. 50 , №9- 2007. -С. 725-730

55. Мухидинов З.К. Мухидинов, Касымова Г.Ф., Бобокалонов Д.Т., и др. Пек-тин-зеиновые микросферы как носители лекарственных средств// Химико -Фармацевтический журнал. 2010.- Т. 44, -№10. -С. 35-39.

56. Саге and Use of Laboratory Animals at the experimental-biological clinics of the V.I. Nikitin Chemistry Institute pharmacological laboratory. -Dushanbe. -2007

57. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ; под общ. ред. Р.У. Хабриева. —2-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина. -2005. -832 с.

58. Саратиков А.С. Материалы к механизму желчеобразования и действия желчегонных средств // Новые лекарственные растения Сибири, их лечебные препараты и применение. Томск -1959.-5. -С.122-130.

59. Халикова М.Д., Мухидинов З.К., Нуралиев Ю.Н., Хайдаров К.Х. Влияние пектиновых веществ на химизм желчи // Докл. АН РТ Т. 52, №3. -2009. С.217-221.

60. Халикова М.Д., Саидов А.А., Бобокалонов Д.Т., Мухиддинов З.К. / Фармакологическое изучение биологической активности новых комплексов пектина. // Материалы VI Нумановских чтений 29-30 мая, -Душанбе. -2009. -С. 45-47.

61. Инструкция по уходу и содержанию животных в экспериментально-биологической клинике лаборатории фармакологии Института химии им. В. И. Никитина. Комитетом по этике при АН РТ. —Душанбе. —2007. -5 с.

62. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Washington, D.C., -1996.

63. Касымова Г.Ф., Мухидинов 3.K., Штанчаев А.Ш. и др. Пектин-зеиновые комплексы для капсулирования лекарственных средств // Материалы межд. конф. «Наноструктура в полисахаридах: формирование, структура, свойства, применение». -Душанбе. -2008. -С. 61-65

64. Мухидинов З.К., Касымова Г.Ф., Бобокалонов Д.Т., и др. Гидрогелевые микросферы на основе биоразрушающих полимеров, как носители лекарственных средств // Известия АН РТ -2009. №1 (134). С. 59

65. Мухидинов З.К., Халиков Д.Х. Пектин, лечебно-профилактический продукт для здоровых и больных. Монография, НПИ Центр Мин. Экономики и Торговли РТ. -Душанбе -2005. -65 с.

66. Мухидинов З.К., Касымова Г.Ф., Бобокалонов Д.Т. и др. Кинетика высвобождения пироксикама из гидрогелей низкометилированного цитрусового пектина и зеина // Хим.-фарм.журн. -2011. находится в печати.

67. Siepmann J., Goepferich A. Mathematical modeling of biodegradable, polymeric drug delivery systems / // Adv. Drug Deliv.Rev. -2001. -48. -C.229-247.

68. Manca D. Rovaglio M. Modeling the controlled release of microencapsulated drugs: theory and experimental validation // Chemical Engineering Science. -2003.-58.-P.1337- 1351.

69. Siepmann O.A., Faisant N., Benoit J.P. New Mathematical Model Quantifying Drug Release from Bioerodible Microparticles Using Monte Carlo Simulations // Pharmaceutical Research. -2002. -Vol. 19 (12). -P.1885-1893

70. Grassi M., Grassi G. Mathematical Modelling and Controlled Drug Delivery // Matrix Systems Current Drug Delivery, -2005. -Vol. 2, № 1. -P. 97-116.

71. Arifin D.Y. Arifin D.Y., Lee L.Y., Wang C.H. Mathematical modeling and simulation of drug release from microspheres: Implications to drug delivery systems // Advanced Drug Delivery Reviews. -2006. -58. -p. 1274-1325

72. Lin, C.C., Metters, A.T. Hydrogels in controlled release formulations: network design and mathematical modeling // Adv. Drug Deliv. Rev. -2006. 58. -P.1379-1408.

73. Korsmeyer R.W., Lustig S.R., Peppas N.A. Solute and water diffusion in swella-ble polymers // Mathematical modeling, Journal of Polym. Sci. Polym. Phys. -1986.-24.-P. 395-408.

74. Ritger P.L., Peppas N.A. A simple equation for description of solute release. I. Fickian and non-Fckian release from non-swellable devices in the form of slabs, spheres, cylinders or discs // Journal of Control. Release -1987. -5. -P. 23-36.

75. Kimura, E., Bersani Amado, C. A., Sudo, L. S., Santos, S R., Oga, S. Pharmacokinetic profile of piroxicam beta-cyclodextrin, in rat plasma and lymph // Gen-Pharmacol. -1997. -28(5) -P. 695-698

76. Nicholas A Peppas, Kristy M Wood & James O Blanchette. Hydrogels for oral delivery of therapeutic proteins // Expert Opin. Biol. Ther. -2004. -4(6) -P. 1-7

77. Sakuma S, Sudo R, Suzuki N, Kikuchi H, Akashi M, Hayashi. Mucoadhesion of polystyrene nanoparticles having surface hydrophilic polymeric chains in the gastrointestinal tract // Int. J. Pharm. -1999. -177. -P.161-172.

78. Goto T, Morishita M, Kavimandan N.J., Takayama K.,1 Peppas N.A. Gastrointestinal Transit and Mucoadhesive Characteristics of Complexation Hydrogels in Rats // Journal of Pharmaceutical Sciences -2006. -vol. 95( 2).

79. Morishita M, Lowman AM, Takayama K, Nagai T, Peppas NA. Elucidation of the mechanism of incorporation of insulin in controlled release systems based on complexation polymers // J. Control Release -2002. -81. -P.25-32.

80. Liu LS, Fishman ML, Hicks KB, Kende M. An in vitro study of mucoadhesive properties of pectins // Proceeding of 7th US-Japan Symposium on drug delivery systems. -2003. -b. -II. -P. 16

81. Liu LS, Fishman ML, Hicks KB, Kende M. Interactions of various pectin formulations with porcine colonic tissues. Biomaterials 2005a;26:5907-5916

82. Siepmann, J., Peppas N.A. Modeling of drug release from delivery systems based on hydroxypropyl methylcellulose (HPMC). // Adv. Drug Deliv. Rev. -2001. -48. -P. 139—157.

83. Lao L.L., Venkatraman S.S., Peppas N.A. Modeling of Drug Release from Biodegradable Polymer Blends // Europ. Journal of Pharm. Biopharm. -2008. -70. -P. 796-803.

84. Higuchi Т. Mechanisms of sustained action mediation. Theoretical analysis of rate of release of solid drugs dispersed in solid matrices // Jornal of Pharm. Sci. -1963.-52.-P. 1145-1149.