Фармакогностическое изучение и стандартизация травы эхинацеи пурпурной свежей и препарата на ее основе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Взорова, Людмила Николаевна

• Взорова, Людмила Николаевна
• кандидат фармацевтических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Взорова, Людмила Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Сведения об иммуномодуляторах растительного происхождения, данные о химическом составе представителей рода Эхинацея, вопросы стандартизации сырья и препаратов на основе эхинацеи.

1.1 Краткая ботаническая характеристика растений рода Эхинацея.

1.2. Иммуномодуллторы растительного происхождения.

1.3. Анализ данных по химическому составу эхинацеи пурпурной.

1.4. Стандартизация сырья и лекарственных средств из эхинацеи. Выводы к главе I.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИСЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА 2. СТАНДАРТИЗАЦИЯ СЫРЬЯ ЭХИНАЦЕИ

ПУРПУРНОЙ. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ СОКА

ЭХИНАЦЕИ.

2.1. Стандартизация травы эхинацеи пурпурной свежей.

2.2. Разработка технологии получения сока эхинацеи. Выводы к главе 2.

ГЛАВА 3. ФОТОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ СОКА ЭХИНАЦЕИ.

3.1. Исследование препаратов эхинацеи пурпурной методом спектрофотометрии в УФ области спектра.

3.2. Определение флавоноидов в препаратах эхинацеи методом спектрофотометрии.

3.3. Изучение фенольных соединений в препаратах эхинацеи пурпурной методом ВЭЖХ.

3.4. Разработка методики количественного определения суммы полисахаридов в соке эхинацеи. Выводы к главе 3.

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ СОДЕРЖАНИЯ СУММЫ ОКСИКОРИЧНЫХ КИСЛОТ В СОКЕ ЭХИНАЦЕИ. РАЗРАБОТКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАЧЕСТВА ДЛЯ ФЕРУЛОВОЙ КИСЛОТЫ СТАНДАРТНОГО ОБРАЗЦА.

4.1. Исследование по сравнительному изучению содержания суммы оксикоричных кислот в соке эхинацеи пурпурной в пересчете на цикориевую и феруловую кислоты

4.2. Разработка показателей качества для феруловой кислоты стандартного образца.

Выводы к главе 4.

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАЧЕСТВА И УСТАНОВЛЕНИЕ СРОКА ГОДНОСТИ СОКА ЭХИНАЦЕИ ПУРПУРНОЙ.

5.1. Разработка показателей качества сока эхинацеи пурпурной.

5.2. Изучение стабильности препарата в процессе хранения. Выводы к главе 5.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое изучение и стандартизация травы эхинацеи пурпурной свежей и препарата на ее основе»

Актуальность темы. В последние десятилетия одним из перспективных научных направлений признаны исследования в области иммунологии. Иммунная система играет основную роль в патогенезе инфекционных, воспалительных, аалергических, аутоиммунных и др. заболеваний, которые часто осложняются формированием вторичного иммунодефицита, вызываемого неблагоприятням воздействием на организм различных факторов - химических, экологических, медикаментозных и др. В этих условиях наблюдается тенденция к росту числа полиэтиологичных инфекций.

В связи с этим возникает необходимость поиска средств, способных неспецифически стимулировать иммунную систему с целью повышения резистентности организма к любым патогенам. Вещества, стимулирующие неспецифическую защиту организма, должны быть эффективны, доступны, безвредны, иметь удобную схему применения. Этим требованиям в определенной мере соответствуют иммуномодуляторы растительного происхождения, например, препараты из растений рода Эхинацея - Echinacea Moench. Препараты эхинацеи обладают мягким, поливалентным действием, практически не имеют отрицательных побочных эффектов и нежелательных отдаленных последствий.

Анализ номенклатуры иммуномодуляторов свидетельствует о том, что в настоящее время в клинической практике находят применение около 50 препаратов эхинацеи (в том числе гомеопатических), в основном зарубежного производства.

В связи с этим разработка новых эффективных отечественных иммуностимулирующих лекарственных средств, в том числе на основе эхинацеи, является актуальной задачей фармацевтической медицинской науки.

Цель и задачи исследования. Целью работы являлась разработка научно-методических основ создания и стандартизации препарата эхинацеи на основе «соковой» технологии из травы эхинацеи пурпурной свежей.

В задачи исследований входили.

- разработка показателей качества для травы эхинацеи пурпурной свежей;

- разработка технологии получения сока эхинацеи из травы эхинацеи пурпурной свежей;

- исследование химического состава сока эхинацеи пурпурной;

- разработка методики качественного и количественного анализа суммы биологически активных веществ (БАВ) в препарате и изучение стабильности препарата;

- разработка нормативной и технологической документации (НД) в виде технических условия (ТУ) на траву эхинацеи пурпурной свежей, опытно-промышленного регламента (ОПР) на производство сока эхинацеи и фармакопейной статьи предприятия (ФСП) на разработанный препарат.

Научная новизна. Разработаны научно-методические основы получения сока из травы эхинацеи пурпурной свежей, заключающиеся в обосновании целесообразности создания лекарственного средства, содержащего комплекс биологически активных веществ из свежего сырья в нативном состоянии.

Проведено фармакогностическое изучение образцов травы эхинацеи пурпурной свежей, разработаны показатели качества для ее стандартизации.

На основании проведенных исследований предложена оптимальная технология изготовления сока из свежей травы эхинацеи пурпурной.

С использованием методов спектрофотометрии, хроматографии в тонком слое сорбента (ТСХ) и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) разработаны методики качественного и количественного определения БАВ в соке эхинацеи.

Исследование извлечений препарата в УФ области спектра показало, что в соке эхинацеи обнаруживаются фенольные соединения.

С помощью методов ТСХ и ВЭЖХ в соке эхинацеи пурпурной установлено наличие флавоноидов - рутина, кверцетина, лютеолина, рутозида и фенолкарбоновых кислот - кофейной, цикориевой, хлорогеновой, коричной и феруловой.

Разработана методика количественного определения суммы полисахаридов в соке эхинацеи спектрофотометрическим методом, основанная на взаимодействии углеводов, образовавшихся в результате кислотного гидролиза полисахаридов, с пикриновой кислотой в щелочной среде.

Разработана методика количественного определения в препарате суммы оксикоричных кислот в пересчете на феруловую кислоту

Разработана методика идентификации веществ фенольного характера в соке эхинацеи методом хроматографии в тонком слое сорбента (ТСХ).

Разработан стандартный образец феруловой кислоты, качество которого регламентируется следующими показателями, описание, растворимость, подлинность, температура плавления, потеря в массе при высушивании, посторонние примеси и количественное определение.

Определены показатели , характеризующие качество сока эхинацеи пурпурной: состав, описание, подлинность, рН, сухой остаток, содержание спирта, количественное определение, микробиологическая чистота. Показатели качества введены в ФСП на Эхинацея-ВИЛАР сок.

Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований разработаны и внедрены ТУ 9373-142-04868244-01 «Эхинацеи пурпурной трава свежая», ТУ 9369-143-04868244-01 «Кислота феруловая - стандартный образец», ОПР 57-17-198 на производство препарата Эхинацея-ВИЛАР сок, ФСП 42-01712266-02 на Эхинацея-ВИЛАР сок.

Связь задач исследования с проблемным планом развития фармацевтической науки. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Всероссийского института лекарственных и ароматических растений (номер государственной регистрации 01860074455), соответствует направлению Проблемной комиссии по фармации 36.08 РАМН.

Апробация работы. Результаты экспериментальных исследований доложены на научно-практических конференциях, на конгрессе «Традиционная медицина-2000», на IX Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство», 2002 г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ.

Положения, выносимые на защиту:

- результаты фармакогностического изучения травы эхинацеи пурпурной свежей;

- технология получения сока из травы эхинацеи пурпурной свежей;

- результаты определения флавоноидов и фенолкарбоновых кислот в соке эхинацеи методами УФ спектрофотометрии и ВЭЖХ;

- результаты количественного определения в препарате суммы полисахаридов методом спектрофотометрии;

- результаты разработки методики количественного определения в соке эхинацеи суммы оксикоричных кислот в пересчете на феруловую кислоту;

- разработка стандартного образца феруловой кислоты и показателей его качества.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Взорова, Людмила Николаевна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Разработаны научно-методические основы создания отечественного препарата - сока эхинацеи из травы эхинацеи пурпурной свежей.

2. Проведено фармакогностическое изучение травы эхинацеи пурпурной свежей. Оценку качества сырья предложено проводить по следующим показателям: внешние признаки; микроскопия; влажность; содержание стеблей ; содержание побуревших и почерневших листьев; содержание органической и минеральной примесей; отсутствие поверхностной влаги, плесени и гнили. Результаты исследования включены в ТУ 9373-142-04868244-01 «Эхинацеи пурпурной трава свежая» и инструкцию по заготовке сырья.

3. Разработана оптимальная технология получения сока эхинацеи пурпурной, обеспечивающая его иммуностимулирующий эффект; оформлен опытно-промышленный регламент на производство препарата Эхинацея-ВИЛАР сок (ОПР 57-17-198).

4. Методами УФ спектрофотометрии, ТСХ и ВЭЖХ подтверждено наличие в препарате веществ фенольного характера. В полученных в соответствии с разработанной технологией образцах сока эхинацеи пурпурной установлено наличие флавоноидов: лютеолина, кверцетина, рутина, рутозида, и фенолкарбоновых кислот, цикориевой, кофейной, хлорогеновой, коричной и феруловой.

5. Разработана методика количественного определения суммы полисахаридов в соке эхинацеи с помощью метода спектрофотометрии, основанного на измерении оптической плотности окрашенного комплексного соединения пикриновой кислоты с моносахарами, полученными после гидролиза полисахаридов 10% серной кислотой.

6. Разработан стандартный образец феруловой кислоты , качество которого предложено оценивать по следующим показателям, описание, растворимость, подлинность, температура плавления, потеря в массе при высушивании, содержание посторонних примесей, количественное содержание; показатели качества включены в ТУ 93369-143-0486824401 Кислота феруловая- стандартный образец.

7. С использованием стандартного образца феруловой кислоты разработана методика количественного определения в соке эхинацеи суммы оксикоричных кислот в пересчете на феруловую кислоту методом спектрофотометрии.

8. Разработаны показатели качества и установлены нормы для сока эхинацеи пурпурной - описание, подлинность, рН, сухой остаток, содержание спирта, количественное содержание суммы оксикоричных кислот; микробиологическая чистота, которые введены в ФСП 4201712266-02 на Эхинацея-ВИЛАР сок.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Взорова, Людмила Николаевна, 2002 год

1. Авторское свидетельство. Фармацевтические препараты иммуностимулирующего действия и способы их получения. А61К31/19 № 3744570.- 1989.

2. Авторское свидетельство 38185 НРБ // Открытия.- 1985.- №11.

3. Амосова Б.Н., Зуева Е.П., Богадишин И.В., Яременко К.В. Повышение функциональной активности естественных клеток киллеров препаратами природного происхождения. // Иммунодефициты и аллергия. -М- 1986-с. 115.

4. Бабаева Е.Ю., Волобуева В.Ф. Климахин Г.И. и др. Влияние соединений марганца и цинка на посевные качества семян и урожайность эхинацеи пурпурной. Лекарственное растениеводство. Сб. Науч.тр., посвящ. 70-летию ВИЛАР. ВИЛАР РАСХН. -М.- 2000,- с. 268-276.

5. Бабаскина Л.И., Киселевский М.В. Исследование модулирующего влияния сока люцерны на противоопухолевую активность мононуклеаров крови. // IV Российский национальный конгресс «Человек и лекарство»: Тезисы докладов. М: - 1997.- с.264.

6. Багний Н И., Франчук А.Ю. Клиническая эффективность применения энтеросорбента Силлард-П и иммуномодулятора эхинацеи пурпурной в комплексном лечении рожениц с гестационарным пиелонефритом. // Изучение и использование эхинацеи: Матер.

7. Междунар. научн. конф., Полтава, 21-24 сентября 1998 г. Полтава. -1998. - с.101-103.

8. Бакуридзе Н.Д., Курцннадзе М.Ш. и др. Иммуномодуляторы растительного происхождения (обзор). // Химико-фармац. ж. -1993. № 8. -с. 43-47.

9. Барабой В.А. Биологическое действие растительных фенольных соединений. Киев. - Наукова думка. - 1976. - 260 с.

10. Барабой В.А. Растительные фенолы и здоровье человека. М. -Наука. - 1984. -160 с.

11. Блажий А., Щуплый J1. Фенольные соединения растительного происхождения. М. - Мир. - 1977. - 229 с.

12. Безменов А.Я., Грахов В.П., Четверня С.А. Анализ свободных фенолкарбоновых кислот лекарственных растений методом ВЭЖХ. // Тез. докл.: И-ая респ. конф. по медицинской ботанике. Киев. - 1988. - с. 198.

13. Богачева Н.Г., Алентьева О.Г., Коняева Е.А. Стандартизация лекарственного сырья из эхинацеи пурпурной. Химия, технология, медицина. Труды ВИЛАР. ВИЛАР РАСХН. -М,- 2000,- с. 57-68.

14. Бойко В.Н. Радиозащитная эффективность иммуномодуляторов различных групп. // Тез. докл.: 4-ая Всесоюзная конф. «Химия, фармакология, механизмы действия противолучевых препаратов». М. -1990.-с.10-11.

15. Бондаренко А.С., Резник С.Р., Мещеряков А.А. Иммуностимулирующие и иммунодепрессивные свойства соков и эфирных масел из лекарственных растений. // В кн.: Совещание по проблеме фитонцидов, 8-е., Тез. докл. Киев. - 1979. - с.94-95.

16. Бондаренко А.С. Высшие растения продуценты антибиотиков. // В кн.: Фитонциды. Роль в биогеоценозах, значение для медицины. - Киев. -1981. - с.204-210.

17. Вавилова Н.М. Гомеопатическая фармакодинамика. Смо ленск.- «Эверест», 1994. 270 4.

18. Вельтищев Ю.Б. Становление и развитие иммунной системы у детей. Иммунная недостаточность. Иммунодиатезы. -М.- НИИ педиатрии и хирургии, 1996.

19. Войтенко Г.Н., Ласица О.И., Яковлева Н.Ю., Усова Е.И. Применение настойки эхинацеи пурпурной в педиатрической практике. // Изучение и использование эхинацеи: Матер. Междунар. научн. конф., Полтава, 21-24 сентября 1998 г. Полтава. -1998. - с. 108-109.

20. ВФС 42-2371- 94. Трава эхинацеи пурпурной.23. ВФС 42-2373-94. Эстифан.

21. Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма. Ростов-на-Дону. - 1990. - с. 223 .

22. Георгиевский В.П., Казаринов Н А., Карыев М.О. Физико-химические методы анализа биологически активных веществ растительного происхождения. Ашхабад. - 1976. - 239 с.

23. Говорун М.И. Влияние эфирного масла лаванды на некоторые показатели клеточного и гуморального иммунитета. // В кн: Фитонциды. Бактериальные болезни растений. Киев. - 1985. - ч.1. - с.126-127.

24. Гончаренко Е.Н., Кудряшов Ю.Б. Противолучевые средства природного происхождения. // Успехи современной биологии. 1991., т.11, вып.2. - с.52-57.

25. Государственный реестр лекарственных средств. М.: Медицина.-2000 г.

26. Государственная Фармакопея СССР. XI изд., М.: Медицина, вып. 1, 1987; вып.2-1990 г.

27. Губанов И.А., Патудин А.Ф., Рабинович A.M. Лекарственные растения и грибы, используемые в гомеопатии. Краткий справочник. Москва: Гомеопатический центр.- 1995.

28. Давыдов В.В., Железнова ЕВ, Морозов В.Т., Самойлова О.В., Тоскуева Б.П. Фитоадаптогены как перспективные иммуномодуляторы. // Всерос. науч. конф. "Актуальные проблемы создания новых лекарственных средств". Санкт-Петербург. - 1990. - с.130-131.

29. Дрозд Г.А., Горбачева А.А., Ермакова Л.Л., Писарев В.М. Иммунофармакогностическое изучение лекарственных растений. // Тез. докл.: III Украинская конф. по медицинской ботанике. Киев. - 1992. - ч.1.- с.50.

30. Дрозд Г А., Писарев В.М., Ермакова А.Ф., Горбачева JI.A. Иммунотропность лекарственных растений и связь с химическим составом.// Тез. докл.: И-ая респ. конф. по медицинской ботанике. Киев.- 1988.-c.233.

31. Егоров В.А., Мошкова JI.B., Куркин В.А., Бараулов Г Г. Анализ номенклатуры иммуномодуляторов, представленных нафармацевтическом рынке. // Тез. докл.: Междунар. конф. "Фармация в XXI веке: инновации и традиции". Санкт-Петербург. - 1999. - с.94-95.

32. Егоров В.А, Мошкова Л.В. и др. Фармакоэкономические исследования новых фитопрепаратов. // Тез. докл.: VIII-ой Росс. нац. конгресс "Человек и лекарство". М - 2000. - с.80.

33. Ермольева З.В., Вайсберг Г.Е. Стимуляция неспецифи-ческой резистентности организма и бактериальные полисахариды. М. -Медицина. - 1976. - 184 с.

34. Иванченко М.И. Розроблення метод1в тдвищения видтворювально1 здатносп буга1в-шидниюв на основ! викоростання exmauei nypnypoeoi. Автореф.дис.канд.с.-г.наук. Кшв-Чубинське, 1998.

35. Караулов А.В. Природные иммуностимуляторы// Практикующий врач.- 1996,-№ 1 -с.И.

36. Ковалев И.Б. Иммунофармакология успехи и перспективы. // Химико-фармацевтический ж. - 1980. -№11.-с.11-21.

37. Кодаш А.А., Дмитрачкова Н.С. О перспективах селекции эхинацеи пурпурной как сырьевой базы для производства иммуностимулирующих препаратов. Лекарственное растени-еводство. Сб.науч. тр., посвящ. 70-летию ВИЛАР. ВИЛАР РАСХН, М. -2000-г., -с.251-254.

38. Косман В.М., Зенкевич И Г. Информационное обеспечение для идентификации фенольных соединений растительного происхождения в обращенно-фазовой ВЭЖХ. Флавоны, флавонолы, флавононы и их гликозиды // Раст.ресурсы.1997, -т.ЗЗ, вып.2, -с. 14-27.

39. Костенникова З.П., Акашкина Л.В., Григорьева Т.В. Количественное определение флавоноидов в настойках, применяемых в гомеопатической практике. // Ресурсоведеческое и фитохимическое изучение лекарственной флоры СССР. Научные труды, т. 29. Москва. -1991.

40. Костенникова З.П., Акашкина Л.В., Терешина Н.С. Исследования по стандартизации настоек, применяемых в гомеопатической практике. // Народная и нетрадиционная медицина, пути ее развития. Тез. докл.: 1-ая Укр. конф.- Полтава. 1993. - т.1. -с.85-86.

41. Костеша Н.Я., Фролова М.А., Фоменко А.С. и др. Сок сибирской пихты «Абисиб» высокоэффективный лечебный адаптоген.

42. V Российский национальный конгресс «Человек и лекарство»: Тезисы докладов. М.: РЦ «Фарммединфо», 1998. - с.377.

43. Костинская НЕ , Войтенко Г.Н. Иммуномодулирующее действие лекарственных растений. // Ш-ья Украинская конф. по медицинской ботанике: Тез. докл. Киев. - 1992. -ч.1. - с.79.

44. Конопля А.И., Дрозд Г.А., Кедровская Н.Н. Использование лекарственных препаратов растительного происхождения в качестве иммуномодуляторов. // Фармация. 1988. - т.37, №2. - с. 17-19.

45. Куркин В.А. Применение лекарственных растений, содержащих фенилпропаноиды в качестве иммуностимулирующих средств. // П-ой Росс. нац. конгресс "Человек и лекарство". М. - 1995. -с.138.

46. Куркин В.А., Авдеева О.И., Авдеева Е В. и др. Количественное определение суммы гидроксикоричных кислот в надземной части Echinacea purpurea (L.) Moench.// Растительные ресурсы. -1998. т.34 -вып.2 - с.81.85.

47. Куркин В.А., Авдеева О.И., Авдеева Е.В., Мизина П.Г. Количественное определение суммы гидроксикоричных кислот в надземной части Echinaceae purpureae (L.) Moench.// Растительные ресурсы.-1998.-т.34.-вып.2.

48. Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Авдеева Е.В. и др. Фенилпропаноиды перспективный источник препаратов. // Тез.докл. VII-ой Росс. нац. конгресс "Человек и лекарство". М. - 2000. -с.513.

49. Куцык Р.В., Зузун БМ, Рыбак О.В. Иммунокоррегирующне и противовоспалительные свойства биологически активных веществ растений рода Echinacea Moench. Харьков. - ж."Провизор". - 1999. -с.1-13.

50. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета. М. -Медицина. - 1985. - 255 с.

51. Лебеда А.Ф., Лященко К.П., Бравер-Чернобульская Б.С. и др. Иммуномодулирующая активность спиртовых соков эхинацеи пурпурной. // Тез. докл.: III-я Укр. конф. по медицинской ботанике. -Киев 1992.-ч.1.-с.3-11.

52. Лысоченко, Коган А.Г., Георгиевский В.П. Стандартизация настойки корней эхинацеи пурпурной. // В кн. Тез. докл.: Междунар. конф. "Фармация в XXI веке инновации и традиции". - Санкт-Петербург. - 1999. - с .175.

53. Лысоченко Л.М., Котов А.Г., Подпружников Ю.В., Гладченко С.В. Разработка методов стандартизации препаратов эхинацеи. // Харьков: Провизор 1999,- №6,- с.37-38.

54. Макарчук Н.М., Лещинская Я.С., Акимов Ю.А. и др. : отв. редактор Гродзинский A.M. Фитонциды в медицине. Киев. -Наукова думка. - 1990. - 216 с.

55. Макарчук Н.М., Лещинская Я.С., Лебеда А.Ф. и др. Антимикробное действие фитонцидов и их влияние на общую реактивность организма. // В кн.: Актуальные вопросы курортной фитотерапии. Пятигорск. - 1985. - с.66-67.

56. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Пособие для врачей. 4.1 и 2. М.: Медицина - 1998.

57. Моисеева Г.Ф. Способ идентификации гомеопатических соков эхинацеи пурпурной. // Проблемы лжарського рослинництва: Тези мжнар.наук-практ.конф.з нагоди 80-р1ччя шстлиарослин УААН (3-5 лоипня 1996 р., м. Лубни)/ Полтава, 1996.- с.230-231.

58. Муравьева Т.Н. Фармакосанирующие эффекты полисахаридов растительного происхождения. М. -1999. -120 с.

59. З.Никитин А.В., Навашин М.М. Иммуностимуляторы природного происхождения. // Антибиотики. 1983. - №8. - с.702-716.

60. НД 42-10923-00 Эхинацея-ратиофарм, таблетки 100 мг, ф. «Ратиофарм ГмбХ» Германия.

61. НД 42-9944-99 Эхинацея, таблетки для рассасывания, ф. «Натур Продукт» Франция.

62. НД 42-7690-01. Иммунорм, жидкость для приема внутрь, ф. «Ратиофарм ГмбХ» Германия.

63. НД 42-4501-01. Иммунал, капли для внутреннего при-менения, ф.»Лек д.д.» Словения.

64. НД 42-9945-99. Эхинацея, раствор для приема внутрь, ф.»Натур Продукт» Франция.

65. НД 42-10447-99. Эхинацин-ликвидум, раствор для приема внутрь, ф.»Мадаус АГ» Германия.

66. НД 42-7690-97. Эхинацея-Гексал, раствор для внутреннего применения, ф. «Гексал АГ» Германия.

67. НД 42-10760-00. Доктор Тайсс настойка эхинацеи, ф. «Натурварен ОХГ. Др. Петер Тайсс» Германия.

68. НД 42-10631-99. Доктор Тайсс экстракт эхинацеи, таблетки для рассасывания, ф. «Натурварен ОХГ. Др. Петер Тайсс» Германия.

69. НД 42-8713-98. Эхинацея узколистная, настойка матричная гомеопатическая ф. «Лаборатория Долизос» Бельгия.

70. Палов М. Энциклопедия лекарственных растений. Перевод с нем. М. «Мир». 1998. - с.320-321.

71. Патент № 2137490 «Иммуностимулирующее средство эстифан и способ его получения» Бюлл. Изобр. № 26,20.09.1999г.

72. Петров Р.В. Иммунология. М. - 1987.

73. Пономарев В.Д. Экстрагирование лекарственного сырья. М. -Медицина. - 1976. - 202 с.

74. Попов Ф.С., Филюнина Е.В., Голимид В.К., Васильев В.П.// Материалы к изучению женыпения и других лекарственных средств Дальнего Востока.-1967.-Вып.8.-с. 108-112.

75. Поспелов С В., Самородов В Н., Мусялковская А.А., Кожура И М. Сравнительная оценка сырья эхинацеи пурпурной и эхинацеи бледной по УФ-спектрам поглощения. // Вгсник Полтавського державного сшськогосподарського шституту.- 2000 №5.-с.22-25.

76. Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств под ред Ю.Ф. Крылова, 7 изд. М. - 2000. - 1519 с.

77. Ремова Т.Н., Бажанова И.Г., Шепелев И.Б. и др. Изучение иммуномодулирующих свойств некоторых биологически активных веществ растительного происхождения. // Иммуномодуляторы: Сборник трудов. М. - 1987. - с. 141-147.

78. Самородов В.Н., Поспелов С.В. Эхинацея на рубеже XXI века: проблемы, тенденции, перспективы (по материалам конференции в Канзас-сити, США) // BicH. Полтавськ.держ.с.-г. ш.-ту. 2000.- №3,-с.90-97.

79. Самородов В.Н., Поспелов С В., Моисеева Г.Ф., Сулда А.В. Фитохимический состав представителей рода эхинацея (Echinacea Moench), его фармакологические свойства (обзор). // Химико-фармац. ж. 1996. - №4. - с.32-37.

80. Селезненко JI.B., Осетров В.Д. Виды рода эхинацея как иммуномодуляторы. // Вторая республиканская конференция по медицинской ботанике: Тез. докл. Киев. - 1988. - с.399-400.

81. Середа А.В., Моисеева Г.Ф. Биологически активные вещества и стандартизация лекарственных растений рода ЕсЫпасеае//Провизор- 1998 № 3.-с. 13-23.

82. Сибиряк С.А., Юсупова Р.Ш., Курчатова Н. Иммунофенотитрование лимфосистем в клинической практике. -Уфа. 1999.-22 с.

83. ЮО.Сибиряк С В., Садыков Р Ф., Магазов Р.Ш., Сергеева С.А. Иммуномодуляторы. Уфа. - 1999. - 138 с.

84. Ю1.Сидорненко Г.И., Захарченко М П., Морозов В.Г., Кошелев Н.Ф. Экологические проблемы исследования иммунного статуса человека и популяции. М. - 1992. - 102 с.

85. Ю2.Смольянинов УС. и др. Влияние сока шлемника байкальского на иммунологический статус больных раком легкого вусловиях противоопухолевой химиотерапии. // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1997. - т.60 - №6 - с.49-51.

86. Современные проблемы иммунологии и иммунопатологии под ред. Академика А.А.Смородинцева. -М,- Медицина, 1970.

87. Способ получения средства, обладающего иммуностимулирующей активностью. // Даргаева Т.Д., Бакуридзе А.Д., Сергеев А.В. и др. А С. № 1243 881 СССР. 1987 - А61К 35178.

88. Справочник Видаль. Лекарственные препараты в России. М.: АстраФармСервис- 2000.

89. Юб.Справочник цветовода. М.: Колос. 1996. - с.434.

90. Стихин В.А., Сенина Т А., Алентьева О.Г., Климахин Г.И. Трава эхинацеи пурпурной новое лекарственное растительное сырье. // 1-ый междунар. симпозиум "Новые и нетрадиционные растения и их практическое значение: Тез. докл. - Пущино. - 1995. -с.766-768.

91. Ю8.Сюткина НИ., Купин В.И., Бланко Ф.Ф.

92. Иммуномодулирующее и противоопухолевое действие препаратов из семейства аралиевых. // Тез. докл.: III-я Украинская конф. по медицинской ботанике. Киев. - 1992. - ч.2. - с.44.

93. Ю9.Тутельян ВН., Суханов Б.П., Австриевская АН., Позняковский В.М. Биологически активные добавки в питании человека. Томск. - 1999. - 293 с.

94. ПО.Утешев Б.С. Актуальные вопросы иммунофармакологии, М. - 1987. - с.60-70.

95. Цыренжанова О. Д. Влияние полифенольной фракции горечавки бородатой на иммунное состояние. // 4-й Всесоюзн. симпозиум по фенольным соединениям. Ташкент. - 1982. - с.51-52.

96. Федосеев А,П., Федосеева Г.М., Горячкина Б.Г., Лавров М.Г. Влияние соков из некоторых видов лапчаток на иммунитет и инфекцию. // Актуальные вопросы фармацевтической науки и практики: Тез. докл. -Курск -1991.-с.200-201.

97. Химический состав Echinacea purpurea (L.) Moench, «продуцированной в республике Башкортостан. Баширова P.M., Никитина Т.Н., Шайдулина Г.Г., А.В. Баймухаметова, Усманов И.Ю. // Ратсительные ресурсы. 2000.- т.36, вып.2. - с. 103-107.

98. Чипеко Г.И. Химия и биология иммуномодуляторов. Рига. -1985.-c.8-20.

99. Швабе В. Гомеопатические лекарственные средства, под ред. В. Рыбака М.: Московское научно- медицинское общество врачей-гомеопатов, 1967 375 с.

100. Пб.Штигеле Н. Гомеопатическое лекарствоведение./пер. с нем. -М. Терра. - 1994. - 430 с.

101. Энциклопедический словарь лекарственных, эфиромасличных и ядовитых растений. М. - Изд. с/хоз. лит. -1951. - 449 с.

102. Энциклопедия садовода. Прага: Вид-Вагриус.- 1994.- с.290.

103. Яковлева Е.А., Яковлев А.И., Пркопенко Л.Г. Использование растительных гетерополисахаридов для коррекции иммунного ответа при действии на организм вибрации. // Фармакология и токсикология. -1990. -т.53, №6. с. 43-46.

104. Яковлев Л.И., Конопля А.И. Сравнительная характеристика полисахаридных и иммунологических свойств водорастворимых полисахаридов соцветий и листьев мать и - мачехи. // П-ая Республ. конф. по медицинской ботанике: Тез. докл. - Киев. - 1988. - с.328-329.

105. Bauer R., Hoheisel О., Stuhlfauth I., Wolf H. Extract of the Echinacea purpurea herb, an allopathic phytoimmunostimulant. Wien. - Med. Wochenschr. -1999. - 149: 8-10. - p.185-189.

106. Bauer R., Wagner H. Echinacea. // Handbuch fur Arste Apothekem und andere Naturwissenschaftlern. Stuttgart. Wiscenschafte Verl.Yes. -1990.

107. Bauer R., Remiger P. Deutsche Apothekem Zeitung. № 4. -p.174-180.

108. Bauer R. And Wagner H. Z.Phytotir. -1988. 9. - p.151-159.

109. Bauer V.R., Jurcic K., Puhlmann J., Wagner H. Immunologic in vivo and vitro studies on Echinacea extracts. Arzneimittelforschung 1988 Feb 38:2 276-81.

110. Becker H. and Asich W.Ch. Z.Naturborsch. -1998. 40 - p.585587.

111. Bomme U., Hobzl J. Hebler chr. al. Landwirtschaftliches. - 1992. -63.-3.-p.323-342.

112. Bukovsky M., Magnusova R., Vaverkuva S. Testing for immunomodulating effects of ethanol-water extracts of the above-ground partsof the plants Echinacea (Moench) and Rudbekia L. Cesk. Farm 1993 Aug 42:4 184-87.

113. Burger R.A., Torres A.R., Warren R.P., Caldwell V.D., Hughes B.G. Echinacea-induced cytokine production by human macrophages. Int. J. Immunopharmacol. 1997 Jul 19:7 371-9.

114. Chavali S.Rao, Francis Thomas, Camplell J.B. // Int. J. Immunopharmacol. 1987. - v.5, №6. - p.675-683.

115. Cheminal A., Bronibara R., Konerhectral P. // Photochemistry. -1989.-28.- 11.-p.3246-3247.

116. Cheminal A., Zawancky R., Becker H., Bronillard R. // Phytochemistry. 1988. 27, №9. - p.2787-2794.

117. Chopra R.N., Nayar N.S., Chopra 1С. Hossary of medicinal plants. Nt\ Dehli. 1956. - 390 p.

118. Daigle D.I., Concerton E.I. High performance liguia chromatography of 34 selected flavonoids. //1. Chromayography. 1982. -vol.240.-p.202-205.

119. Feher I., Conides A., Verecker A., Lang I., Nekam K., Peri A., Jergely P. Immunomodulatory effect of new radical scavengers. // Drugs. Exp. and с lin les . 1984. -10. - № 8-9. - p.549-561.

120. Foster F. Echinacea Nature's Immune Enhancer. Rochester. -Vermont. -1991.-p. 150.

121. Gle Xian-Quo, Lin-Longe-Ze, Bernart Manthew W., Lian Li-ghi. Analysis of alkamides in roots and achenes of Eshinacea purpurea by liquid chromatography-electrospray mass spectrometry.// J. Of chromatography1998.-v. 815.- p.205-211.

122. Jieldanjwski I. Immunostimulatory drugs ana endegenaus spleen colonies (CFCS). // Arch. Immunol, etthe exp. 1983. - 31. - № 5. - p.349-352.

123. Harborne I B., Mabry 1.1., Mabry H. The flavonoids. London. -1975.-560p.

124. Hardin I.M., Stuffe C.A. Analises of phenoli and flavonoid compounds by High-pressure perfomonce liquid chromatography. // Anal. Biochem. 1980. - vol.2. - p.171-175.

125. Heinzer F., Chavame J.-P. et al. Pharm. Asta. Helvetica. 1988. -63. p.132-136.

126. Hobbs R. The Echinacea. / Handbook eclectic. Herbal jrom.1999.-30.-p.l-7.

127. Homeopathic pharmacopoeia of India (HPI), 6-th volume, 1990.

128. Homoeopathic Pharmacopoeia of the Unated States. (Pharmacopoeia of the American institute of Homoeopathy. Copyright x 1988 by the Homoeopathic Pharmacopoeia Convention of the Unation States.)

129. Homoopathisches Arzneibuch 3 Auflage- 1958. Deutsche Apotheker- Verlag Stuttgart.

130. June K.I., Turda M., Fung I. Immunostimulatore effective polysacharide (getroglycane) from highes plants. //Arzneim. Forsch. (Drug. Res.) - 1985. - 35. - p. 1069-1072.

131. Kachalina T V., Senina Т.К., Stichin V.A. et al. The immunostimulating preparation Estifan from Echinacea purpurea Moensch. // Tradicional medicine, theoretical and practical aspects Ulan- ude. - 1998. -p.34-35.

132. Kahnt G. Biol. Zbl., 1966, Bd. 85 (5), S. 545-554.

133. Khobarkova V.B., Tzyrenzhapova O.D. et al. Immunomodulating propesties the dry extract dereveol from buch cinquefoil. //Traditional medicine: teoretical and practical aspects . Ulan- Ude. - 1998. - p.66-67.

134. Lohri R.K., Luttski U., Kames Waran L., Afail C.K. Effect of quercetin and saponina of rat mestcell. // Indian. Physiol, and Pharmacol. -1985.-vol.9.-№l.-p.45-46.

135. Luetting В., Steinmuller C., Gifford G.E., Wagner H., Lohmann-Matthes M.L. Macrophage activation by the polysaccharide arabinogalactan isolated from plant cell cultures of Echinacea purpurea. // Natl. Cancer Inst. 1989 May 3 81:9 669-75.

136. Mabry T.J., Makham K.K., Thomas R.B. The tematie identification of flavonoids. // New Jork. Springer - Verlag. - 1970. - p.353-354.

137. Macander P.I. Plant flavonoids and medicine. New Jork. -1986. -p.489-492.

138. Mauri P., Pietta P. High performance liquid chromatography /electrospray mass spectrometry of Hypericum perforatrem extracts. // Rapid Commun. Vass. spectrom. 2000. - vol.14. - № 2. - p.95-99.

139. Melchart D., Linde K., Worku F., Sarkady L., Holzmann M., Jurcic K., Wagner H. Results of five randomized studies on the immunomodulatory activity of preparations of Echinacea. // J.Altem. Complement. Med. 1995 Summer 1:2 145-60.

140. Pharmacopoeia Francaise -10 edition, 6 supplement: monographies de souches pour preparations homeopatigues. Paris. - 1990.

141. Roesler J., Emmendorffer A., Steinmuller C., Luetting В., Wagner H., Lochmann-Matthes M.L // Int. J. Immunopharmacol. 1991 13:7 931-41.

142. Roszkowski W., Jeljazewicz J. Immunostimulating drug. clin. chemotherapie. Nev - Jork. - 1983. - vol.2. - p. 550-558.

143. Schranner I., Wbrdinger M., Klumpp N., Lusch U., Okpanyi S.N. Modification of avian humoral immunoreactions by Influex and Echinacea angustifolia extract. Zentralbl Veterinarmed B. 1989 Jul 36:5 353-364.

144. Sicha I., Sjalko Т., Dusek I., Hrones I. Therapevtive use of Echinacea. Plants Echinacea. 1990. -2 - p - 46-47.

145. Stimpel M., Proksch A., Wagner H., Lohmann- Matthes M.L. Macrophage activation and induction of macrophage cytotoxicity by purified polysaccharide fractions from the plant Echinacea purpurea. Infect. Immun. 1984 Dec 46:3 845-9.

146. Stotzem CD, Hungerland U. Mengs U. Influence of Echinaceae purpureae on the phafocytosis of human granulocytes. Med.Sci Res 1992; 20:719-20.

147. Sun L.Z., Currier N.L., Miller S.C. The American coneflover: a prophylactic role involving nonspecific immunity. J. Altern. Complement. Med. 1999 Oct 5:5 437-46.

148. Tragni E., Galli C.L., Tubaro A., Del Negro P., Delia Loggia R. Anti-inflammatory activity of Echinacea angustifolia fractions separated onthe basis of molecular weight. Pharmacol. Res. Commun. 1988 Dec 20 Suppl 5 87-90.

149. Tubaro A., Tragni E., Del Negro P., Galli C.L., Delia Loggia R. Anti- inflammatory fctivity of a polysaccharide fraction of Echinacea angustifolia. J. Pharm. Pharmacol. 1987 Jul 39:7 567-9.

150. Vanhaelen M. Vanhaelen, Fastre R. High performance liquid, gas liquid and thin layer chromatography of naturall cuming flavonoids, phenolic and related compounds. / J. Chromatogr. 1990. - vol.18. - p.255-260.

151. Wagner H., Jurcic K. Immunologic studies of plant combination preparations. In-vitro and in-vivo studies on the stimulation of phagocytosis. Arzneimittelforschung 1991 Oct 41:10 1072-6.

152. Wagner H. Plant immunomostimulators. Deutsche Apoth. Ztg. -1991 -131 -9-Р.117-121.

153. Wildfeuer A., Mayerhofer D. The effects of plant preparations on cellular functions in body defense. Arzneimittelfofschung.- 1994 Bd 44-Mar№3.- s.361-366.

154. Wagner H., Pronsch A., Riess-Maurer J., Vollmas A., Odonthol S., Stuppner H., June K., Le Turdu M., Fung J.V. Immunostimulatory effective pollycharide (heteroglycane) from higher plants. Arzneim. Forsch.(Drug Res ). - 1985.-35. - p.1062-1072.

155. Wagner H. Immunostimulants of high plants //Shed. Org.Chem. -1986.-vol.26-p. 541-545.

156. Wulf Z.W., Nagel S. Analyses phenolic acids flavonoids by high liquid chromatography. // J. Chromatography 1976. - vol. 116 - №2 - p.271-272.