Биологические свойства штамма «ВНД КРС/ДАГЕСТАН/2015» вируса заразного узелкового дерматита крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Шумилова Ирина Николаевна

• Шумилова Ирина Николаевна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Шумилова Ирина Николаевна

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Распространение ЗУД КРС и ущерб, причиняемый этим заболеванием

2.2. Эпизоотологическая характеристика ЗУД КРС

2.3.Характеристика семейства Poxviridae

2.3.1. Классификация поксвирусов

2.3.2. Строение поксвирусов

2.3.3. Геном поксвирусов

2.3.4. Репродукция поксвирусов

2.4. Общая характеристика ЗУД КРС

2.4.1. Определение заболевания

2.4.2. Патогенез и клиническая картина при ЗУД КРС

2.4.3. Патологоанатомические изменения при ЗУД КРС

2.5. Культивирование вируса ЗУД КРС

2.6.Характеристика иммунобиологических свойств вируса ЗУД КРС

2.6.1. Морфология и химический состав вируса ЗУД КРС

2.6.2.Устойчивость вируса ЗУД

2.6.3.Антигенная структура

2.6.4.Антигенная активность вируса ЗУД КРС

2.6.5.Антигенная вариабельность и родство

2.7 Меры борьбы и профилактика ЗУД КРС

2.8.Диагностика ЗУД КРС

2.9. Заключение по обзору литературы

3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Материалы

3.1.1 Вирус

3.2.1 Животные

3.2.1 Животные

3.1.3 Культура клеток

3.1.4 Оборудование и инструменты

3.1.5 Растворы и питательные среды

3.2 Методы

3.2.1Выделение вируса ЗУД КРС в культуре клеток

3.2.2 Культивирование вируса ЗУД КРС, получение и титрование вируссодержащего материала

3.2.3 Заражение животных

3.2.4 Отбор проб крови и патологического материала от животных для лабораторного исследования

3.2.5Определение уровня вируснейтрализующих антител к вирусу ЗУД в

сыворотках крови животных

3.2.6 Выделение ДНК и постановка ПЦР-РВ

3.2.7 Секвенирование

3.3 Статистическая обработка результатов исследования

4. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

4.1 Анализ распространения ЗУД КРС в Российской Федерации за 2015-2018 г

4.2 Получение штамма вируса ЗУД КРС «ВНД КРС/Дагестан/2015»

4.2.1 Выделение изолята вируса ЗУД КРС из проб патологического материала в культурах клеток

4.2.2 Контроль стерильности и отсутствия контаминации посторонними вирусами

4.2.3 Контроль биологической активности и стабильности штамма «ВНД КРС/Дагестан/2015»

4.2.4 Идентификация и филогенетическое родство штамма «ВНД КРС/Дагестан/2015» (методом ПЦР)

4.2.5.Депонирование штамма «ВНД КРС/Дагестан/2015»

4.3-Оптимизация условий культивирования штамма «ВНДКРС/ДАГЕСТАН/2015» вируса ЗУД

4.3.1 Изучение чувствительности различных перевиваемых линий культур клеток к вирусу ЗУД КРС штамм «ВНД КРС/Дагестан/2015»

4.3.2 Влияние возраста культур клеток на репродукцию вируса

4.3.3 Накопление вируса ЗУД КРС штамм «ВНД КРС/ДАГЕСТАН/2015»в культурах клеток ЯДК-04 и ТЯ при разной множественности

заражения

4.3.4 Влияние времени культивирования на инфекционную активность вируса ЗУД КРС

4.3.5 Влияние величины рН среды на репродукцию вируса ЗУД КРС штамм «ВНД КРС/Дагестан/2015» в перевиваемых клеточных культурах ЯДК-04 и ТЯ

4.3.6 Влияние приема ««замораживания - оттаивания» на выход вируса

4.3.7 Устойчивость вируса ЗУД при различных температурах хранения

4.4 Изучение клинических признаков вируса ЗУД КРС штамм «ВНД КРС/Дагестан/2015» на естественно восприимчивых животных

4.5.Оптимизация условий постановки реакции микронейтрализации при выявлении антител против ЗУД КРС

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

6. ВЫВОДЫ

7. ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРЕДЛОЖЕНИЕ

8. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

9. ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологические свойства штамма «ВНД КРС/ДАГЕСТАН/2015» вируса заразного узелкового дерматита крупного рогатого скота»

1. ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Заразный узелковый дерматит крупного рогатого скота (нодулярный дерматит, кожная бугорчатка, узелковая экзантема, кожно-узелковая сыпь, «лоскутная болезнь кожи») -трансграничная, эмерджентная инфекционная болезнь крупного рогатого скота (КРС), проявляющаяся персистентной лихорадкой, поражением лимфатической системы, отеком подкожной клетчатки и внутренних органов, образованием кожных узлов (бугров), поражением глаз и слизистых оболочек органов дыхания и пищеварения, потерей продуктивности и живой массы тела [1, 7, 12, 13, 16,17].

Возбудителем заразного узелкового дерматита (ЗУД) является ДНК-содержащий оболочечный вирус, относящийся к группе Neethling, рода СарпрохуггыБ, семейства Poxviridae. Вирус ^вМ^ является прототипным возбудителем ЗУД. Этот патоген имеет антигенное родство с вирусом оспы овец [1, 7,13].

ЗУД относят к особо опасным болезням животных, способным вызывать эпизоотии и наносить экономический ущерб. В соответствии с новой классификацией он включен в список болезней МЭБ (Международное Эпизоотическое Бюро), подлежащих обязательному уведомлению (нотификации), в категорию «Болезни и инфекции крупного рогатого скота» [56]. Согласно приказу № 62 Минсельхоза РФ, ЗУД КРС внесен в "Перечень заразных и иных болезней животных" [43].

В настоящее время заболевание встречается в 34 странах Африки и Азии. По официальным сводкам МЭБ за три года (с 2013 по 2015 г.) это заболевание широко распространилось в странах Ближнего Востока. По данным национальных ветеринарных служб в 2014 г. заболевание КРС вирусом ЗУД было выявлено в Турции - 230 очагов, Ливане - 32, Азербайджане и Ираке - по 16, Египте и Иране - по 6 очагов. В 2014-2015 г. болезнь была диагностирована на Кипре и в Греции [14, 15, 11, 42, 46, 47,51].

В течение длительного времени Россия оставалась благополучной по данному заболеванию. Однако в 2015 г. первые случаи ЗУД в России были зарегистрированы на территории Республики Дагестан и Чеченской Республики. За второе полугодие 2015 года в РФ было выявлено уже 17 вспышек болезни в 3 субъектах РФ. За период 2016 года нотифицировано 313 вспышек в 16 субъектах РФ. В 2017 году было зарегистрировано 43 вспышки в 6 субъектах РФ. Это обстоятельство указывает на то, что данное заболевание продолжает распространятся на новые территории Российской Федерации, и может приводить к серьезным социально-экономическим последствиям для отечественного животноводства [9, 27 ,46 ,47].

Заболевание наносит значительный экономический ущерб в скотоводстве, так как вызывает существенное снижение удоя молока, потерю живой массы тела, повреждение качества шкуры. У стельных животных отмечают аборты, быки могут стать временно или постоянно стерильными. Возможна гибель больных животных при острой форме развития болезни, либо осложнении секундарной инфекцией [20, 48 ,49].

В связи с этим, исследования по изучению биологических свойств данного возбудителя с учетом выбора средств и методов диагностики, является актуальной задачей.

Степень разработанности проблемы

На настоящий момент представлено небольшое число отечественных публикаций, касающихся изучения биологических вируса ЗУД КРС. При этом большая часть исследований проводилась только с одним референтным полевым вирулентным штаммом-прототипом «NeetЫmg» вируса ЗУД КРС. На основе изучения его свойств, установлена чувствительность вируса к различным клеточным культурам, определены оптимальные условия его культивирования [22, 41]. В ходе исследований клинической картины заболевания установлено, что возбудитель ЗУД КРС вызывает повышение температуры, виремию и образование бугров на коже с последующим некрозом. При внутривенном заражении вызывает генерализованную

инфекцию, а при внутрикожном - заболевание протекает в мягкой форме [90]. Однако результаты работы по исследованию клинических признаков, вызываемых экспериментальным заражением животных штаммом «Э-95» вируса ЗУД, говорят о возможности вызывать заболевание естественно восприимчивых животных с характерными клиническими признаками при внутрикожном введении возбудителя [116].

Из-за недостаточной изученности биологических свойств вируса диагностические методы ограничены исключительно молекулярными подходами [3, 36, 125, 140, 141].

В связи с вышеизложенным, изучение биологических свойств вируса ЗУД КРС с целью разработки новых средств диагностики и профилактики вышеуказанной болезни является актуальной задачей ветеринарной науки и практики.

Цель и задачи исследований

Целью диссертационной работы являлось изучение биологических свойств вируса ЗУД КРС штамм «ВНД КРС /Дагестан/2015», выделенного на территории Республики Дагестан в 2015 г.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить распространение вируса ЗУД КРС на территории РФ за 2015-2018 гг.

2. Выделить вирус ЗУД КРС и изучить его культуральные свойства.

3. Подобрать наиболее технологичные условия культивирования штамма «ВНД КРС /Дагестан/2015».

4. Провести депонирование штамма «ВНД КРС /Дагестан/2015» вируса заразного узелкового дерматита в коллекции штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ»;

5. Изучить клинические признаки и патологоанатомические изменения, вызываемые при заражении естественно восприимчивых животных штаммом «ВНД КРС /Дагестан/2015» вируса ЗУД КРС.

6. Оптимизировать условия постановки реакции микронейтрализации (РМН) для выявления антител к вирусу ЗУД КРС.

Научная новизна исследований

В результате проведенных исследований впервые на территории РФ в Республике Дагестан в 2015 г. выделен вирус ЗУД КРС, получен изолят, который депонирован в коллекции штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером (ссылкой) - «ВНД КРС/Дагестан/2015». Научная новизна подтверждена патентом на изобретение № 2606254 от 10.01.2017 г.

Изучены биологические свойства штамма «ВНД КРС/Дагестан/2015» вируса ЗУД КРС.

Изучена чувствительность различных клеточных культур к вирусу ЗУД КРС, в результате чего подобрана оптимальная система культивирования.

Воспроизведена генерализованная форма инфекции при заражении КРС штаммом «ВНД КРС/Дагестан/2015».

Оптимизированы условия постановки РМН для выявления антител к вирусу ЗУД КРС.

Теоретическая и практическая значимость исследований

Выделенный на территории Республики Дагестан штамм вируса ЗУД КРС признан оригинальным и депонирован в Коллекции штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ» как штамм «ВНД КРС/Дагестан/2015» и может быть использован при разработке диагностических препаратов и их контроля при диагностики ЗУД КРС с возможностью его применения при проведении НИР с целью производства вакцинных препаратов для специфической иммунопрофилактики. В ходе выполнения научно-исследовательских работ по теме диссертации были разработаны, одобрены и утверждены ученым советом, директором ФГБУ «ВНИИЗЖ» и Федеральной

службой по ветеринарному и фитосанитарному надзору следующие методики:

1. «Методические рекомендации по выделению вируса нодулярного дерматита крупного рогатого скота в культуре клеток».

2. «Методические рекомендации по выявлению антител к вирусу нодулярного дерматита крупного рогатого скота в реакции нейтрализации микрометодом».

Методология и методы исследований

Методология проведенных исследований включает стандартные процедуры с использованием различных материалов и естественно восприимчивых животных. В работе использовали молекулярно-биологические и вирусологические методы исследований.

Положения выносимые на защиту.

1. Данные по распространению вируса ЗУД КРС на территории РФ за 2015-2018 гг.;

2. Биологические свойства штамма «ВНД КРС/Дагестан/2015» вируса ЗУД КРС;

3. Клинические признаки и патологоанатомические изменения у КРС после инокуляции суспензии вируса ЗУД штамм «ВНД КРС /Дагестан/2015» на КРС;

4. Оптимизация постановки РМН для выявления антител к вирусу ЗУД КРС.

Личный вклад соискателя

Исследования по теме диссертационной работы (планирование и выполнение основных работ экспериментов, обобщение полученных результатов) проведены автором самостоятельно. Консультативную и методическую помощь при выполнении отдельных этапов работы оказывали: к.б.н Кононова С.В., к.б.н. Бьядовская О.П., к.в.н Нестеров А.А., к.б.н. Спрыгин А.В., к.б.н. Манин Б.Л., д.в.н Мищенко В.А., д.в.н Диев В.И за что автор выражает им глубокую признательность.

Исследования по диссертационной работе были выполнены в период с 2015 по 2018 гг. в ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»).

Степень достоверности и апробации результатов Результаты исследований по теме диссертации были опубликованы и доложены на: Международной научной конференции молодых ученых «Достижение молодых ученых - в ветеринарную практику» в ФГБУ «ВНИИЗЖ» (Владимир, 2016г.); Международной научно - методической конференции по патологической анатомии животных (Ставрополь, 2017 г.); Всероссийская научно - практическая конференция молодых ученых «наука и инновация в АПК XXI века» (Казань, 2018 г.). И на заседаниях ученого совета ФГБУ «ВНИИЗЖ» (2015-2018 гг.).

Публикации научных исследований По теме диссертационной работы опубликовано 9 научных работ, в том числе 5 в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки РФ для докторских и кандидатских диссертаций.

Объем и структура диссертации Диссертация изложена на 115 страницах и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список литературы и приложения. Работа иллюстрирована 14 таблицами и 25 рисунками. Список использованной литературы включает 146 источников, из которых 63 на русском языке.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1. Распространение ЗУД КРС

Заразный узелковый дерматит (ЗУД) был впервые зарегистрирован в Замбии в 1929 году, потом в Ботсване 1943 и в Южной Африке [6, 27, 31,145].

До 1989 года распространение ЗУД было ограничено Африканским континентом к югу от Сахары [31, 116 ,111, 105]. В Египте первая вспышка была зарегистрирована в 1988 году, в Израиле в 1989 году. В последующие годы Бахрейн, Кувейт, Оман, Йемен также сообщили о вспышках ЗУД. С июля 2012 по август 2013 года в Израиле были зарегистрированы 293 вспышки заболевания, в 2012 году 34 вспышки были зарегистрированы в Ливане, в мае 2013 года две вспышки были отмечены в Иордании, в сентябре 2013 г - 28 вспышек в Ираке, с августа 2013 г заболевание было зафиксировано в Турции (236 вспышек в 2013 г), в мае 2014 года четыре вспышки имели место в Иране, в июле 2014 г заболевание нотифицировано в Азербайджане [66, 72, 73, 77, 81, 82, 84, 99, 106, 112, 118].

С 2015 г ЗУД стал эндемическим заболеванием для Турции. Большинство вспышек в Турции произошли вдоль восточной границы с Сирией и Ираком. Первые клинические признаки ЗУД в Турции у КРС были зарегистрированы в сентябре 2013 г в провинции Кахраманмараш и Батман. После первых сообщений в 2013 г, в общей сложности, имели место 236 вспышек, 90% из них отмечены в южных провинциях на границе с Сирией в эпидемическом кластере в провинциях: Кахраманмараш, Адана, Османие, Хатай, Газиантеп, а некоторые на границе с Ираком [11, 17, 28,29].

В январе 2014 г. распространение инфекции было отмечено в провинции Сивас, находящейся на расстоянии более 400 км к северу от предыдущих вспышек. А так же инфицированные животные были обнаружены в районе, расположенном на высоте 1300 м над уровнем моря, где средняя температура воздуха в середине зимы составляет минус 5°С.

Отсутствие контроля распространения инфекции в Турции привело к заносу инфекции на континентальную часть Европы. В 2015 г ЗУД впервые был зарегистрирован на территории Греции. В течение года были выявлены 117 очагов заболевания. Ликвидация очагов инфекции проводилась методом стемпинг аута, то есть уничтожением всего восприимчивого поголовья. Несмотря на принятые меры, ЗУД регистрировали в стране и в 2016 г. Наряду с Грецией очаги инфекции были выявлены в Болгарии и Македонии. В Болгарии первые случаи заболевания КРС ЗУД были отмечены в районах, расположенных в центре страны. Все это послужило болгарским специалистам основанием для предположений о том, что ЗУД был занесен в страну преднамеренно. В дальнейшем вспышки ЗУД были выявлены и в других странах Юго-Восточной Европы (Албания, Сербия, Македония, Косово и другие). Все эти факты свидетельствуют о низкой эффективности используемых мер борьбы и профилактики ЗУД.

В начале декабря 2015 г. заболевание было обнаружено у КРС Сюникской области Армении, граничащей с провинцией Восточный Азербайджан Исламской Республики Иран. В начале ноября 2016 г. заболевание ЗУД было зарегистрировано у КРС, принадлежащего жителям двух приграничных с Россией населенных пунктов провинции Рача -Лечхуми и Квемо - Сванети, Грузия [42, 44, 51, 54, 63, 65]. Распространение вируса ЗУД за пределы эпизоотического очага происходит при прямых и непрямых контактах. В Ливане, Египте, Иране и Азербайджане, инфекция распространялась после контактов животных на приграничных пастбищах с КРС сопредельных стран, в которых ранее были нотифицированы случаи ЗУД [28, 29, 44, 63].

По данным МЭБ в Азербайджане ЗУД в 2014 г регистрировался в 16-ти очагах, в четырех районах: (Билясуварском Агдашском, Джалилабадском и Уджарском районах), расположенных на берегах р. Куры.

По данным, опубликованным в СМИ, в 2014 г. заболевание ЗУД регистрировалось в 12-ти районах Азербайджана (Агдашском,

Билясуварском, Джалилабадском, Бардинском, Самухском, Лачинском, Зардабском, Уджарском и других). По данным Информационно-Аналитического Центра Россельхознадзора, многолетним вектором распространения ЗУД КРС является направление с юга на северо-восток [29, 28, 29].

Учитывая наличие общих пастбищ скота в пограничных районах РФ с Азербайджаном, был определен вектор возможного заноса инфекции на территорию южных районов России. Ветеринарные специалисты Азербайджана предполагают, что на их территорию проникновение возбудителя ЗУД произошло в нейтральной зоне Ирано-Азербайджанской границы, где был отмечен совместный выпас КРС [27, 28, 42].

В июле 2015 г. у выпасавшегося на горных пастбищах КРС, принадлежащего жителям приграничных с Азербайджаном и Грузией сел Барнаб и Камилух Тляратинского района Республики Дагестан, был выявлен ЗУД КРС. В августе 2015 г. ЗУД был диагностирован у животных принадлежащих жителям станицы Калиновская Наурского района Чеченской Республики. Во второй половине 2015 г. в РФ зарегистрировано 17 очагов болезни в 3 субъектах: в Республике Дагестан (11 очагов), Чеченской Республике (4 очага) и Республике Северная Осетия (2 очага) [32]. Наблюдалась следующая временная динамика возникновения вспышек: июль-8; август-4; сентябрь-2; октябрь-3 [11, 29, 28, 35, 44,49].

ЗУД вновь зарегистрирован в России 25 мая 2016 года на территории Краснодарского края. С 29 мая по 12 июня на территории Республики Дагестан выявлено 15 очагов данного заболевания, очаги выявлены на фермах, где содержалось в общей сложности 36645 животных [35].

В 2016 всего нотифицировано 313 вспышек в 16 субъектах четырех федеральных округов РФ (Южный, Северо-Кавказский, Центральный, и Приволжский). Чеченская Республика, Калмыкия, Ингушетия, Ставропольский край, Дагестан, Астраханская обл, Карачаево-Черкессия, Волгоградская обл, Тамбовская обл, Ростовская обл, Самарская обл,

Рязанская обл, Адыгея, Кабардино-Балкария, Воронежская обл, Краснодарский край. Очаги ЗУД в Тамбовской и Рязанской областях расположены севернее 53° северной широты. Такое стремительное распространение ЗУД можно объяснить высокой патогенностью вируса, многочисленными механизмами передачи возбудителя инфекции, несанкционированным вывоз КРС в регионах Российской Федерации. За 2017 г. было зарегистрировано 43 вспышки в 6 субъектах РФ (Волгоградская обл, Оренбургская обл, Республика Башкортостан, Самара, Саратов, Ульяновск) [11, 28, 29, 33, 44, 49].

2.2. Эпизоотическая характеристика и пути передачи инфекции

ЗУД - трансграничная, эмерджентная, вирусная инфекция КРС, основным источником возбудителя являются больные животные и реконвалесценты. При первичном возникновении болезни в стаде поражается от 5 до 50, в отдельных случаях 75 и 100% животных. Особенно более восприимчивы к инфекции животные европейских пород. У 50% заболевших животных болезнь может протекать латентно (бессимптомно) [37, 57].

Заболевание ЗУД КРС может протекать в острой, подострой и хронической формах, поражая животных всех возрастов и пород. Так же распространено скрытое (латентное) течение болезни, без наблюдаемых клинических признаков [29, 37 ,44].

Важные эпизоотологические особенности ЗУД, как нозологической единицы, обусловлены патогенезом болезни, биологическими свойствами возбудителя, и экологией. Выработанный в процессе эволюции механизм передачи возбудителя болезни включает следующие этапы:

- пути выделения возбудителя из организма больного (инфицированного) ЗУД КРС;

- факторы передачи, обеспечивающие временное сохранение вируса во внешней среде и доставку его к новому хозяину;

- пути проникновения (внедрения) возбудителя в организм и связанная с этим его первичная локализация [63].

Источником возбудителя ЗУД является больной КРС, ткани которого служат элективной средой для размножения вируса. В организме восприимчивых животных вирус ЗУД обладает выраженным тропизмом к клеткам эпидермиса, слизистых оболочек органов дыхания и пищеварительного тракта. Особенностью патогенеза ЗУД является наличие в течение 1 -2 недель вирусемии, обеспечивающей выделение вируса во внешнюю среду. Возбудитель выделяется с выдыхаемым воздухом, слюной, истечениями из носа и глаз, спермой, молоком, экссудатами, а также при поражениях кожи и слизистых оболочек [29, 44, 63, 117].

В Ливане, Иране, Египте, Палестине, и Азербайджане инфекция распространилась после контактов животных на приграничных пастбищах с КРС сопредельных стран, в которых ранее были нотифицированы случаи ЗУД. Распространение вируса за пределы эпизоотического очага возможно: зараженными, а так же находящимися в инкубационной стадии животными, активными продуцентами возбудителя, реже реконвалесцентами. В этом случае источник инфекции выполняет функции не только выделителя, но и распространителя вируса на большие расстояния; пассивными (механическими) промежуточными переносчиками вируса -контаминированные продукты животноводства, корма, обслуживающий персонал, животные и предметы ухода за ними, транспортные средства. Доказаны факты механического переноса возбудителя кровососущими насекомыми, в том числе клещами, мухами [94, 101, 101].

Известно, что вирусы рода Сарпроху^ш семейства Poxviridae часто размножаются в органах дыхания и в стадах передаются с выдыхаемым воздухом. Все это позволяет предполагать, что при ЗУД КРС недооценен аэрогенный (воздушно-капельный) механизм передачи инфекции. Нельзя исключать и возможность воздушно - пылевого, а также гемоконтактного механизмов заражения. Вирус распространяется с инфицированным молоком и спермой [2,18 ,20 ,52 ,67 ,68 ,69 ,70 ,79 ,80 ,85 ,92 ,93 ,141].

Экспериментальные и полевые данные показывают, что вирус ЗУД неэффективно передается между животными путем прямого контакта, хотя необходимы дальнейшие экспериментальные исследования с использованием достаточного количества животных и современных методов исследований, чтобы продемонстрировать прямую передачу. Передача через сперму (естественной случки или искусственного осеменения) было экспериментально продемонстрировано, и вирус был выделен в сперме экспериментально зараженных быков в течение 22 дней после заражения. Современные исследования продемонстрировали сохранение вируса в бычьей сперме до 42 дней, вирусная ДНК обнаруживалась до 159 дня [133]. В обоих исследованиях был выделен вирус из спермы КРС, не имеющих клинических признаков заболевания. При вспышке ЗУД в Египте в 20062007г, 640 коров были обследованы с использованием УЗИ. При этом 25% животных были инфицированы вирусом ЗУД, отмечено, что 93% из них имели дисфункцию яичников и не подавали никаких признаков течки. У инфицированных коров, яичники были меньших размеров, чем в среднем и не была отмечена активность яичников. Кроме того, отмечено снижение уровня прогестерона и альбумина, меди, железа в их крови [109].

Данные многих исследований свидетельствуют о том, что вирус ЗУД может механически передаваться с помощью различных кровососущих насекомых. Распространение ЗУД часто, но не обязательно, связано с теплыми и влажными погодными условиями, и с высокой плотностью кровососущих насекомых, что объясняет передачу инфекции между удаленными друг от друга стадами. Так, математические модели вспышек ЗУД в молочных стадах в Израиле 2006 года подтверждают предположение о том, что передача вируса произошла посредством насекомых-переносчиков [117]. Однако, мало информации о значении различных видов членистоногих переносчиков в естественных полевых условиях. Имеется предположение, что чем больше популяция насекомых (а возможно и их видовое

разнообразие), то больше шансов приобретать, сохранять и передавать вирус[125, 124, 125].

Доказана механическая передача вируса клещами Rhipicephalus appendiculatus: после кормления на экспериментально зараженном крупном рогатом скоте, напитавшихся клещей переносили на нативных животных, которые стали виремичными и имели сероконверсию. Имеются доказательства в литературных источниках механической трансмиссии для Amblyomma hebraeum, хотя уровень вирусемии был очень низким. Роль 1аЬашёв (слепней) в передаче вируса заразного узелкового дерматита также недостаточно изучена[92, 93].

Значение различных членистоногих переносчиков вируса ЗУД КРС, вероятнее всего, будет отличаться для разных районов/регионов в зависимости от численности и видового состава насекомых, их трофических связей [119, 131].

Таким образом, в зависимости от различных экологических условий в различных регионах пострадавших стран, а так же особенностей распространения и кормления членистоногих, главную роль в механической передаче вируса могут играть разные виды насекомых [125].

Определенную роль в распространении инфекции играет человек. Вступая в прямой контакт с инфицированными животными и окружающей их средой, люди на своей одежде, обуви, на руках и в верхних дыхательных путях могут вынести вирус из очага, занести его в благополучные стада или распространить его на большие расстояния. Возбудитель может сохраняться длительное время в контаминированных грубых и концентрированных кормах, на корнеплодах. Такие объекты представляют собой эпизоотическую опасность, как передатчики патогена ЗУД [29, 31, 44].

Экспериментальные попытки передать вирус ЗУД КРС непрямым путем передачи (например, ручная обработка восприимчивых животных немедленно после манипуляций с зараженным), не удались. Поэтому был сделан вывод о том, что прямой или непрямой контакт между зараженными и

восприимчивыми животными является неэффективным методом передачи. Но, подобные исследования осложняются еще и тем, что только 50% зараженных животных проявляют клинические признаки, в то время как большинство экспериментально зараженных животных становятся виремичными без клинического проявления [33].

2.3. Характеристика семейства Poxviridae 2.3.1. Классификация поксвирусов

Поксвирусы (семейство Poxviridae; от лат. pox пустула, язва) — семейство крупных ДНК-содержащих вирусов.

Ранее поксвирусы называли вирусами оспы. Поксвирусы самые крупные вирусы. В семействе Poxviridae выделено два подсемейства: Chordopoxvirinae(вирусы оспы животных) иEntomopoxvirinae(вирусы оспы насекомых).

Подсемейство Chordopoxvirinae состоит из 8 родов: Orthopoxvirus, Parapoxvirus, Leporopoxvirus, Capripoxvirus, Suipoxvirus, Molluscipoxvirus, Yatapoxvirus, Avipoxvirus, которые отличаются друг от друга по процентному содержанию и свойствам ДНК, устойчивости к эфиру, способности оброзовывать гемагглютинины и, главное, спектру патогенности[74, 75, 126].

Представители каждого рода имеют обширные антигены и обладают способностью к генетической рекомбинации.

Orthopoxvirus (от греч. Orthos-правильный). Включает вирусы вакцины (прототипный вирус) и натуральной оспы (вариола), вирусы оспа коров, верблюдов, енотов-полоскунов, африканских песчанок, обезьян. Вирусы оспы буйволов и кроликов являются подвидами вируса вакцины. Вирионы имеют кирпичеобразную форму, размер 200-250 х 250-300 нм. Геном этих вирусов состоит из 185 тыс. нуклеотидных пар (н.п.), доля Г (гуанин) + Ц (цитозин) 36%. Вирусы обладают гемагглютинирующей активностью. Между различными видами происходит генетическая рекомбинация. Вирусы сходны по антигенной структуре и дают между собой перекрестные серологические реакции.

Parapoxvirus (от греч. рara-около) типовой вид-вирус контагиозной эктимы. В состав рода входят вирус контагиозно-пустулезного дерматита, вирусы папулезного стоматита КРС и псевдооспы коров (паравакцины, болезнь узелков рук доярок). Вирион овоидных форм размерами 200-250^220-300 нм. Поверхностные трубчатые белковые структуры образуют спираль, обвивающий весь вирион. Геном состоит из130-150 тыс. н.п., доля Г+Ц 64%. Между представителями рода имеется антигенное родство.

Leporopoxvirus (от лат.Leporis-заяц). Типовой вирус миксомы кроликов, в состав рода входят вирусы фибромы зайцев, кроликов, белок. Возможный представитель рода - вирус злокачественной фибромы кроликов. Вирионы имеют кирпичеобразную форму, размер 250-300x250x200 нм. Геном состоит из 160 тыс. н.п., содержание Г+Ц 40%Вирусы дают между собой перекрестные серологические реакции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Шумилова Ирина Николаевна, 2018 год

8. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Биологические свойства вируса бугорчатки крупного рогатого скота / В.М. Захаров [и др.] // Вопр. вет. вирусологии, микробиологии и эпизоотологии. - Покров, 1992. - Ч.1. - С. 168.

2. Векторная компетентность и способность насекомых-переносчиков инфекций / В.В.Макаров [и др.] // Российский паразитологический журн. - 2014. - № 3. - С. 38-47.

3. Видовая и штаммовая дифференциация каприпоксвирусов методом полимеразной цепной реакции / Е.С. Орлова [и др.] // Молекулярная биология. - 2006. -Т. 40, № 1. - С. 158-164.

4. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин [и др.]. - М.: ВНИТИБП, 1998. - С. 747-750.

5. Влияние физиологического и иммунобиологического статуса крупного рогатого скота на уровень поствакцинального иммунитета / В.А. Мищенко [и др.] // Ветеринария Кубани. - 2008. - № 2. - С. 5-7.

6. География особо опасных инфекций болезней диких животных / И.А. Бакулов [и др.] // Ветеринария. - 1999. - № 1. - С. 17-21.

7. Гуненков, В.В. Заразный узелковый дерматит крупного рогатого скота / В.В. Гуненков // Сб. науч. тр. / ВГНКИ. - 2005. - Т. 66. - С. 46-54.

8. Диагностика инфекционных болезней животных / А.А. Шевченко [и др.]. - Краснодар: Куб ГАУ, 2014. - С. 580.

9. Дрю, Т. Нодулярный дерматит: эмерджентная угроза в Российской Федерации / Т. Дрю //Актуальные вет. аспекты молочного и мясного скотоводства: материалы конф. - Сочи, 2016. - 5 с.

10. Дагестан / М.Ш. Шапиев [и др.] // Проблемы развития АПК региона. - 2016. - № 1(25). - С. 152-159.

11. Заразный узелковый дерматит. Ретроспективный анализ эпизоотии 2015-2016 гг. в Российской Федерации и качественная оценка риска, сопряженного с экспертом говядины из РФ /А.С. Оганесян [и др.] // БИО. - 2017. - С. 24-30.

12. Зоопатогенные ортобуньявирусы (Orthobunyavirus, Bunyaviridae) / В.В. Макаров [и др.] // Вопр. вирусологии. - 2016. - Т.61, № 2. - С. 53-58.

13. Инфекционная патология животных / А.Я. Самуйленко [и др.]. -М.: Академкнига, 2006. - Т.1. - С. 46-54.

14. Караулов, А.К. Нодулярный дерматит: DIVA-стратегия / А.К. Караулов, О.Н. Петрова // БИО. - 2017. - № 4. - С. 14-16.

15. Караулов, А.К. Прогнозируемое возникновение вспышек нодулярного дерматита в Российской федерации в 2017 г. и характеристика основных путей распространения этой инфекции / А.К. Караулов, О.Н. Петрова, Ф.И. Коренной // БИО. - 2017. - № 6. - С. 27-32.

16. Клинические признаки у крупного рогатого скота, зараженного вирусом нодулярного дерматита (бугорчатка) / В.И. Диев [и др.] // Вирусные болезни с.-х. животных. - Владимир, 1995.- С. 214.

17. Кожная бугорчатка // Патологоанатомическая диагностика вирусных болезней крупного рогатого скота / А.В Акулов [и др.]. - М.: Агропромиздат, 1987. - С. 147-149.

18. Колбасов, Д.В. Трансмиссивные заболевания жвачных / Д.В. Колбасов // Животноводство России. - 2013. - №10. - С. 14-15.

19. Коновалов, М.Г. Профилактика нодулярного дерматита в Краснодарском крае / М.Г. Коновалов, А.А. Шевченко // Перспективы производства продуктов питания нового поколения. - Омск, 2017. - С. 79-81.

20. Кононов, А.В. Заразный узелковый дерматит (нодулярный дерматит) КРС: современная эпизоотическая ситуация и меры борьбы /А.В. Кононов // Актуальные ветеринарные аспекты молочного и мясного животноводства. - Уфа, 2017. - С. 79-80.

21. Косарева, О.А. Гистологические изменения в эпителиальных и лимфоидной тканях в результате экспериментального заражения КРС вирусом нодулярного дерматита / О.А. Косарева, А.В. Борисов, А.А. Егоров // Веткорм. - 2011. -№ 6. - С. 29-30.

22. Косарева, О.А. Чувствительность перевиваемой культуры клеток гонад козы к вирусу нодулярного дерматита крупного рогатого скота / О.А. Косарева, А.В. Константинов, М.С. Кукушкина // Ветеринарная патология. -2011. - № 3. - С. 95-98.

23. Кутумбетов, Л.Б. Стратегия борьба с нодулярным дерматитом крупного рогатога скота в Республике Казахстан / Л.Б. Кутумбетов. -Алматы, 2016. - 51с.

24. Культура животных клеток: методы / под ред. Р. Фрешни. - М.: Мир, 1988. - 332 с.

25. Максимович, В.В. Нодулярный дерматит крупного рогатого скота / В.В. Максимович // Ветеринарный журн. Беларуси. - 2016. - № 3(5). - С. 3-7.

26. Методы культивирования клеток / отв. ред. Г.П. Пинаев. - Л.: Наука,1988. - С. 319.

27. Мировое распространение экзотических особо опасных болезней животных /А.В. Книзе [и др.] //Актуальные вопр. контроля инфекционных болезней животных: материалы Междунар. науч.- практ. конф, посвящ. 55-летию ВНИИВВиМ. - Покров, 2014. - Ч. 2. - С. 275-284.

28. Мищенко, А.В. Эпизоотическая ситуация по трансграничным и экономически значимым инфекционным болезням КРС в России в 2013 году / А.В. Мищенко, В.А. Мищенко // Актуальные вет. пробл. в молочном и мясном животноводстве: материалы. конф. - Казань, 2014. - 6 с.

29. Мищенко, А.В. Нодулярный дерматит крупного рогатого скота / А.В.Мищенко, А.К. Караулов, В.А. Мищенко // Ветеринария. - 2016. - № 4.-С. 3-6.

30. Нодулярный дерматит (бугорчатка), клинические признаки при экспериментальном заражении крупного рогатого скота / О.А. Косарева [и др.] // Тр. Федерального центра охраны здоровья животных. - 2010. - Т. 8. -С. 73-84.

31. Нодулярный дерматит крупного рогатого скота (обзор литературы) / О.А. Рябикина [и др.] // Актуальные вопр. вет. вирусологии. -2015. - № 4. - С. 45-52.

32. Нодулярный дерматит крупного рогатого скота в Республике Северная Осетия - Алания / В. Н. Герасимов [и др.] // Ветеринария. -2016. -№ 3. - С. 11-13.

33. Нодулярный дерматит крупного рогатого скота: характеристика возбудителя болезни, распространение, диагностика и меры борьбы (обзор

литературы) / Н.И. Закутский [и др.] // Ветеринарный врач. -2016. - № 4. - С. 3-11.

34. Общая вирусология: пер с англ. / С. Лурия [и др.] // - М.: Мир, 1981. - С. 464-471.

35. О мероприятиях по организации борьбы с нодулярным дерматитом КРС, оспой овец и бруцеллезом животных в Республике Дагестан /М. Ш. Шапиев [и др] // Проблемы развития АПК региона. -2016.-№1(25).-С. 152-159.

36. Орлова, Е.С. Видовая и штаммовая дифференциация каприпоксвирусов с использованием ПЦР / Е.Е. Орлова, А. В. Щербаков // Генодиагностика инфекционных болезней -2007. - М, 2007. - Т. 2.- С. 43.

37. Основы инфекционной иммунологии: учеб. пособие для вузов / В.В. Макаров [и др.]. - М.; Владимир: Фолиант, 2000. - 173 с.

38. Особо опасные болезни животных: справочник / И.А. Бакулов [и др]. - Покров; Новосибирск, 2002. -184 с.

39. Патологоанатомическая диагностика вирусных инфекций животных: справ. изд. / И.Н. Архипов [и др.]. - М.: Колос,1984. - С. 69-72.

40. Патоморфологические изменения при нодулярном дерматите крупного рогатого скота / О.Ю. Черных [и др.] // Ветеринария Кубани. -2017. - № 3. - С. 3-9.

41. Пермиссивность культур клеток различного происхождения при культивировании вируса нодулярного дерматита / В.И. Балышева [и др.] // Сельскохозяйственная биология. - 2017. - Т. 2, № 6. - С. 1265-1272.

42. Петрова, О.Н. Анализ ситуации по нодулярному дерматиту и идентификация опасности его распространения в Российской Федерации / О.Н. Петрова, А.К. Караулов // БИО. -2016. - № 1/2. - С. 24-29.

43. Приказ Министерства сельского хозяйства Российской Федерации от 9 марта 2011 г. N 62 «Об утверждении Перечня заразных и иных болезней животных». Зарегистрирован Минюстом России 1 июня 2011 г. Регистрационный № 20921.

44. Проблема нодулярного дерматита крупного рогатого скота / А.В.Мищенко [и др.] // Ветеринария Кубани. - 2015. - № 5. - С. 3-6.

45. Проблема профилактики и ликвидации очагов нодулярного дерматита крупного рогатого скота / Р.А. Кривонос [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2017. - № 20(1). - С. 38-44.

46. Прогноз по нодулярному дерматиту крупного рогатого скота в Российской Федерации на 2016 год / А.К. Караулов [и др.] // Прогнозы по ряду болезней животных в Российской Федерации на 2016 год ФГБУ «ВНИИЗЖ». - Владимир, 2016. - С. 126-148.

47. Прогноз по нодулярному дерматиту крупного рогатого скота в Российской Федерации на 2017 год / А.К. Караулов [и др.] // Прогнозы по ряду болезней животных в Российской Федерации на 2016 год ФГБУ «ВНИИЗЖ». - Владимир, 2017.- С. 135-163.

48. Проявление вирусного нодулярного дерматита на территории Республики Дагестан / М.Р. Айгубов [и др.] // Современные проблемы АПК и перспективы его развития. - Махачкала, 2017. - С. 77-78.

49. Распространение и клинические проявления нодулярного дерматита крупного рогатого скота в Республике Дагестан / М.Г. Газимагомедов [и др.] // Ветеринария. -2016. - № 8.- С. 11-15.

50. Романенко, В.Ф. Размножение и цитопатогенное действие вируса оспы овец в культуре ткани / В.Ф. Романенко // Тр. ВИЭВ. - М., 1961. - Т.27 - С. 51 - 56.

51. Распространение заразного узелкового дерматита (нодулярного дерматита) крупного рогатого скота в мире / В.П. Семакина [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2017. - № 3(22). - С. 13-19.

52. Результаты генодиагностики нодулярного дерматита в Дагестане и Чеченской Республике - первое официальное подтверждение болезни на территории Российской Федерации / М.В. Бирюченкова [и др.] // Ветеринария сегодня. -2015. - № 4(15). - С. 43-45.

53. Скалинский, Е.И. Структура и морфогенез вируса оспы коз / Е.И. Скалинский, Ю.Ф. Борисович // Ветеринария. -1975. - № 7. - С. 39-41.

54. Специфическая профилактика нодулярного дерматита крупного рогатого скота / О.Ю. Черных [и др.] // Ветеринария Кубани. - 2016. - № 3. -С. 3-4.

55. Спиера, Р.Е. Биотехнология клеток животных/ Р.Е. Спиера, Дж. Гриффитс. - М: Агропромиздат, 1989. - С. 171-224.

56. Список МЭБ и трансграничные инфекции животных: монография / В.В. Макаров [и др.]. - Владимир: ВИТ- принт, 2012. - С. 76-79.

57. Трансмиссивная передача вирусных инфекций насекомыми-переносчиками / В.В. Макаров [и др.] // Вопр. нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2014. - № 2. - С. 44-50.

58. Троценко, Н.И. Практикум по ветеринарной вирусологии / Н.И. Троценко, Р.В. Белоусова, Э.А. Преображенская. - М.: Колос, 2000. - 272 с.

59. Троценко, Н.И. Размножение вируса оспы овец на культурах тканей / Н.И. Троценко // Тр. ГНКИ. -1961. - Т.9. - С. 24-33.

60. Теория и практика иммуноферментного анализа / А.М. Егоров [и др.] // Высшая школа, 1991.-288с.

61. Частная вирусология: руководство. Т.2 / под ред. В.М. Жданова, С.Я. Гайдамович. - М.: Медицина, 1982. - С. 340-374.

62. Шаталов, В.Ф. Бактериальные и вирусные. болезни сельскохозяйственных животных и птиц в хозяйствах Северного Кавказа / В.Ф. Шаталов. - Новочеркасск, 1988. - С. 83-90.

63. Экологические особенности нодулярного дерматита крупного рогатого скота /А.В. Мищенко [и др.] // Ветеринария Кубани. - 2017. - № 5. -С. 3-7.

64. Absence of lumpy skin disease virus in semen of vaccinated bulls following vaccination andsubsequent experimintally infection / U.I. Osuagwuh [et al.] // Vaccine. - 2007. - Vol. 25, N 12. - P. 22-38.

65. Adverse reactions to field vaccination against lumpy skin disease in Jordan / S.M. Abutarbush [et al.] // Transbound. . Emerg. Dis.. - 2014. - Vol. 63, N 2. - P. 213-219.

66. Ali, B.H. Investigation of the first outbreaks of lumpy skin disease in the Sudan / B.H. Ali, H.M. Obeid // British Vet. J. -1977. - Vol. 133. - P.184.

67. Anderson, R.A. Interrupted blood feeding by Culex (Diptera:Culicidae) in relation to individual host tolerance to mosquito attack /

R.A. Anderson, R.A. Brust // J. Med. Entomology. - 1997. - Vol. 34, N 2. - P. 95101.

68. Attempted mechanical transmission of lumpy skin disease virus by biting insects / C.M. Rennie [et al.] // Medical and Veterinary Entomology. - 2003. Vol. 17. - P. 294-300.

69. Transmission of pathogens by Stomoxys flies (Diptera, Muscidae): a review / F. Baldacchino [et al.] // Parasite. - 2013. - Vol. 20. - P. 26.

70. Barin, A. The housefly, Musca domestica, as a possible mechanical vector of Newcastle disease virus in the laboratory and field / A. Barin [et al.] // Medical and Vet. Entomology. -2010. - Vol. 24, N 1. - P. 88-90.

71. Blancou, J. Histore de la surveillance et du controle des maladies animals transmissibles / J Blancou. - Paris: OIE, 2000. - 366 p.

72. Braverman, Y. Retrospective study on the epidemiology of the first lumpy skin disease outbreak in Israel in 1989 / Y. Braverman, I. Yeruham, M. Davidson // IXth Intern. Congr. Virol. - Glasgow, Scotland, 1993. - P. 184.

73. Burdin, M.L. Observations on the first outbreak of lumpy skin disease in Kenya / M.L. Burdin, J. Prydie // Bull. Epiz. Dis. Africa. - 1959. -Vol. 7. - P. 21-26.

74. Capripoxvirus diseases: current statusand opportunities for control / E.S. Tuppurainen [et al.] // Transbound. Emerg. Dis. - 2015. - N 1. - P. 1-17.

75. Capripoxvirus tissue tropism and spedding: a quantitative study in experimentally infected sheep and shedding: a quantitative study in experimentally infected sheep and goats / T.R. Bowden [et al.] // Virology. - 2008. - Vol. 371. -P. 380-393.

76. Carn, V.M. An antigen trapping ELISA for the detection of capripoxviruses in tissue culture supernatant and biopsy samples / V.M. Carn // J. Virol. Meth. - 1995. - Vol. 51. - P. 95-102.

77. Carn, V.M. An investigation of possible routes of transmission of lumpy skin disease virus (Neethling) / V.M. Carn, R.P. Kitching // Epidemiol. Infect. - 1995. - Vol. 114. - P. 219-226.

78. Carn, V.M. Control of capripoxviruses infection / V.M. Carn // Vaccine. - 1993. - Vol. 11. - P. 1275-1279.

79. Chihota, C.M. Attempted mechanical transmission of lumpy skin disease virus by biting insects / C.M. Chihota [et al.] // Med. and Vet. Entomology.

- 2003. - Vol. 17, N 3. - P. 294-300.

80. Chihota, C.M. Mechanical transmission of lumpy skin disease virus by Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) / C.M. Chihota [et al.] // Epidemiol. Infect. -2001. - Vol. 126, N 2. - P. 317-321.

81. Clinical and pathological studies on lumpy skin disease in Egypt /A.A. Ali [et al.] // Med.-1991. - Vol. 46, N 1. - P. 20-23.

82. Clinical and pathological studies on lumpy skin disease firstly recorded in Egypt / A.A. Ali [et al.] // Bull. Anim. Prod. Afr. - 1992. -Vol. 40. - P. 225-233.

83. Clinico -histopathological findings and PCR based diagnosis of lumpy skin disease in the Sultanate of Oman / M. Body [et al.] // Pakistan Vet. J. - 2012. -Vol. 32. - P. 1-5.

84. Coetzer, J.A.W. Lumpy skin disease / J.A.W. Coetzer, R.C. Tustin // Infectious diseases of livestock. - 2nd ed. - Cape Town: Oxford Univ. Press, 2004.

- P. 1268-1276.

85. Common emerging vector-borne and infrequent abortogenic virus infections of cattle / H. Ali [et al.] // Transbound. Emerg. Dis. - 2012. - Vol. 59, N 1. - P. 11-25.

86. Complete genome sequence of a lumpy skin disease virus strain isolated from the skin of a vaccinated animal / I. Lojkic [et al.] //Genome Announc. - 2018. - Vol. 31, N 6. - P. 22.

87. Capstick, P.B Protection of cattle against lumpy skin disease. 1. Trials with f vaccine against Neethling type infection / P.B. Capstick, W.Coakley // Res. Vet. Sci. -1961. - Vol. 2. - P. 362-368.

88. Davis, F.G. Lumpy skin disease of cattle / F.G. Davis // Brit. Vet. J. 1991. - Vol. 147. - P. 489-502.

89. Detection of lumpy skin disease virus in skin lesions, blood, nasal swabs and milk following preventive vaccination / T. Bedekovic [et al.] // Transbound. Emerg. Dis. - 2018. - Vol. 65, N 2. - P. 491-496.

90. Epidemiological aspects and financial impact of lumpy skin disease in Ethiopia (NAHDIC) / G. Gari [et al.] // Prevent. Vet. Med. - 2011. - Vol. 102. - P. 274-283.

91. Evaluation of different diagnostic methods for diagnosis of lumpy skin diseases in coves / W.S. Awad [et al.] // Trop. Anim. Health Prod. - 2010. -Vol. 42. - P. 777-783.

92. Evidence of vertical transmission of lumpy skin disease virus in Rhipicephalus decoloratus ticks / E.M.S. Tuppurainen [et al.] // Ticks and Tickborne Dis. - 2013. - Vol. 4. - P. 329-333.

93. Evidence of lumpy skin disease virus over-wintering by transstadial persistence in Amblyomma hebraeum and transovarial persistence in Rhipicephalus decolaratus ticks / J.C. Lubinga [et al.] // Experimental and Applied Acarology. - 2014. -Vol. 62. - P. 77- 90.

94. Fenner, F. Myxomatosis / F. Fenner, F.N. Ratcliffe. - Cambridge: Cambridge Univ. Press, 1965.

95. Gershon, P.D. Physical characterization of the genome of a cattle isolate of capripoxviruses / P.D. Gershon [et al.] // Virology. - 1987. - Vol. 160. -P. 473-476.

96. Hunter, P. lumpy skin disease in southern Africa: a review of the disease and aspects of control / P. Hunter, D. Wallace // J. S. Afr. Vet. Assoc. -2001. - Vol. 72. - N2. - P. 68 - 71.

97. Investigation on the incidence of adverse reactions, viraemia and haematological changes following field immunization of cattle using a live attenuated vaccine against lumpy skin disease / P.D. Katsoulos [et al.] // Transbound. Emerg. Dis. - 2018. - Vol. 65, N 1. - P.174-185.

98. Kahrs, R.F. Lumpy skin disease / R.F. Kahrs // Viral Diseases of Cattle. - Iova, Ames, 1982. - P. 263-268.

99. Kilelu, E.S. Incidence of lumpy skin disease in Kenya / E.S. Kilelu, J.L. Omolo // Bull. Anim. Prod. Afr. - 1992. -Vol. 40. - P. 119-121.

100. Kitching, R.P. Insekt transmission of capripoxvirus / R.P. Kitching, P.S. Mellor // Res. Vet. Sci. -1986. - Vol. 40. - P. 255-258.

101. Kitching, R.P. Transmission of capripoxvirus / R.P. Kitching, W.P. Taylor // Res. Vet. Sci. - 1985. - Vol. 39. - P. 196-199.

102. Kitching, R.P. Vaccines for lumpy skin disease, sheep pox and goat pox / R.P. Kitching // Dev. Biol. Standard. -2003. - Vol. - P. 161-167.

103. Kitchng, R.P. Comparison of the external dimensions of capripoxvirus isolates / R.P Kitchng, C. Smale [et al.] // Res. Vet. Sci. - 1986. -Vol. 41. - P. 425-427.

104. Kitchng, R.P. The characterization of African strains capripoxvirus / R.P. Kitchng, P.P. Bhat, D.N. Blak // Epidemiol. Infect. -1989. - Vol. 102. - P. 335-343.

105. Kondela, A.J. Lumpy skin disease epidemic in Kilimanjaro region / A.J. Kondela [et al.] // Proc. Tanzanian Vet. Assoc. Sci. Conf. - 1984. - Vol. 2. -P. 110-125.

106. Kugler, J. Musicidae of Israel / J. Kugler // Israel J. Entomol. - 1969. - N 4. - P. 322-337.

107. Lefevre, P.C. Sheep and goats pox / P. C. Lefevre // Ins. Elev. Med. Vet. Pays Trop. Prod. - 1983. - V. 12 - P. 171.

108. Lubinga, J. Evidence of transstadial and mechanical transmission of lumpy skin disease virus by Amblyomma hebraeum ticks / J. Lubinga [et al.] // Transboun. Emerg. Dis. - 2013. - Vol. 62. - P. 174-182.

109. Lumpy skin disease (LSD) in a large dairy herd in Israel, July 2006 / J. Brenner [et al.] // Isr. J. Vet. Med. - 2006. - Vol. 61. - P. 73-77.

110. Lumpy skin disease. - Режим доступа: http://www.oie.int/wahis 2/public/wahid.php/ Diseaseinformation/Immsummary.

111. Lumpy skin disease / B.J. Barnard [et al.] // J.A.W. Coetzer. Infectious Diseases of Livestock with Special Reference to Southern Africa. - Cape Town, 1994. - P. 604-612.

112. Lumpy skin disease / J.T. Timoney [et al.] // Hagan and Bruners Mikrobiology and Infectious Diseases of Domestic Animals. - 8th ed. - Ithaca; London, 1988. - P. 577-579.

113. Lumpy skin disease I-cutaneous and testicular lesions /A.A. Nagi [et al.] // Assiut Vet. Med. J. -1990. -Vol. 23, N 45. - P. 90-99.

114. Lumpy skin disease in Jordan: disease emergence, clinical signs, complications and preliminary-associated economic losses / S.M. Abutarbush [et. al.] // Transbound. Emerg. Dis. - 2015. - Vol. 62, N 5. - P. 549-554.

115. Lumpy skin disease // OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. - Paris, 2012. -Vol. 1, Chap. 2.4.14. - P.762-774.

116. Macowan, K.D.S. Observations on the epizootiology of lumpy skin disease during the first year of its occurrence in Kenya / K.D.S Macowan // Bull. Epiz. Dis. Afr. - 1959. - Vol. 7. - P. 7-20.

117. Magori-Cohen, R. Mathematical modelling and evaluation of the different routes of transmission of lumpy skin disease virus / R. Magori-Cohen [et al.] // Vet. Res. -2012. - Vol. 43. - P. 1.

118. Mayr, A. Lumpy skin disease (LSD)/ A. Mayr, G. EiBner, B. Mayr -Bibrack // Handbuch der Schutzimpfungen in der Tiermedizin. - Berlin, 1984. - S. 778-779.

119. Mechanical transmission of lumpy skin disease virus by Aedes aegipti (Diptera: Culicedae) /C.M. Chihota [et al.] // Epidemiol. Infect. - 2001. - Vol. 126. - P. 317-321.

120. Mechanical transmission of lumpy skin disease virus by Rhipicephalus appendiculatus male ticks / E.M.S. Tuppurainen [et al.] // J. Epidemiol. Infect. - 2013. - Vol. 141. P. 425-430.

121. Mellor, J. A transcriptional activator is located in the coding region of the yeast PGK gene / J. Mellor [et al.] // Nucleic Acids Res. -1987. - Vol. 15. - P. 6243-6259.

122. New records and ecological remarks regarding the tribe Stomoxyini (Diptera: Muscidae) from Israel / G.C. Muller [et al.] // J. Vector Ecology. - 2011. -Vol. 36. - P. 468-470.

123. OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. -7th ed. - Vol.1, Chap. 2.4.14. - Paris, 2012. - P. 762-774.

124. Platt, K.B. Impact of dengue virus infection on feeding behavior of Aedes aegypti / K.B. Platt, K. Lerdthusnee, D.W.Vaughn // Amer. J. Tropical Med. and Hyg. - 1997. - Vol. 57, N 2. - P. 119-125.

125. Potential role fox ixodid (hard) tick vectors in the transmission of lumpy skin disease virus in cattle / E.M.S Tuppurainen [et al.] // Transbound. Emerg. Dis. - 2011. - Vol. 58. - P. 93-104.

126. Poxvirus genetic recombination during natural virus transmission capripoxvirus / P.D. Gershon [et al.] // J. Gen. Virol. - 1989. - Vol. 70. - P. 485489.

127. Poxviridae Eight Report of the International Committee on the Taxonomy of Viruses / R.M. Buller [et al.]. - Oxford: Elsevier Acad. Press, 2005. - P. 117-133.

128. Pprozesky, L. A study of the pathology of lumpy skin disease in cattle / L. Pprozesky [et. al.] // Onderstepoort J. Vet. Res. - 1982. - Vol. 49. - P.167-175.

129. Quantification of lumpy skin disease virus following experimental infection in cattle / S. Babiuk [et al.] // Transbound. Emerg. Dis. - 2008. - Vol. 55, N 7. - P. 299-307.

130. Ramyar, H. Propagation of goat pox virus on monolayer cell cultures / H. Ramyar // Zentralbl. Veterinarmed, B. - 1966. - Vol.13, N 4. - P. 334-337.

131. Reisen, W.K. The epidemiology of vector-borne diseases / W.K. Reisen, G.R. Mullen, L.A. Durden // Med. Vet. Entomology. - New York, 2009. -P. 19-34.

132. Review on epidemiology and economic importance of lumpy skin disease / Z. Abera [et al.] // Intern. J. Basic Appl. Virol. - 2015. -Vol. 4, N 1. P. 8-21.

133. Rouby, S. Evidence of intrauterine transmission of lumpy skin disease virus / S. Rouby, E. Aboulsoud // Vet. J. - 2016. - Vol. 209. - P.193-195.

134. Schofield,S. A comparison of the feeding behaviour of tsetse and stable flies / S. Schofield, S.J. Torr // Med. Vet. Entomology. - 2002. - Vol. 16, N 2. - P. 177-185.

135. Shimshony, A. Disease prevention and preparedness for animal health emergencies in the Middle East /A. Shimshony, P. Economides // Rev. Sci. Tech. OIE. - 2006. - Vol. 25. - P. 253-269.

136. Somasundaram, M.K. An outbreak of lumpy skin disease in a Holstein dairy herd in Oman: a clinical report / M.K. Somasundaram // Asian J. Animal Vet. Adv. - 2011. - Vol. 6. - P. 851-859.

137. Studies on the major precipitating antigen of capripoxvirus / R.P. Kitchng [et al.] // J. Gen. Virol. - 1986. - Vol. 70. -P. 485-489.

138. Spread of lumpy skin disease virus in Israeli dairy herds / I. Yeruham, O. Nir, Y. Braverman [et al.] // Vet. Rec. - 1995.- Vol. 137. - N4. P. 91-93.

139. The laboratory diagnosis of lumpy skin disease / F.G. Krauss [et al.] // Res. Vet. Sci. - 1971. - Vol. 12. - P. 123-127.

140. Tuppurainen, E.M.S Lumpy skin disease: African cattle disease getting closer to the EU / E.M.S. Tuppurainen, C. Oura // Vet. Record. - 2014. -Vol. 175, N 27. - P. 300-301.

141. Tuppurainen, E.M.S The detection of lumpy skin disease virus in samples of experimintally infected cattle using different diagnostic techniques / E.M.S. Tuppurainen, E.H. Venter, J.A.W. Coetzer // Onderstepoort J. Vet. Res. -2005. - Vol. 72, N 2. - P. 153-164.

142. Use of f recombinant antigen in an indirect ELISA fur detection bovine antibody to capripoxviruses / V.M.Carn [et al.] // J. Virol. Meth. - 1994.-Vol. 49. - P. 285-294.

143. Validation of a high-throughput realtime polymerase chain reaction assay for the detection of capripoxviral DNA / S. Stubbs [et al.] // J. Virol. Meth. 2012. - Vol. 179, N2. - P. 419-422.

144. Weiss, K.E. Lumpy skin disease virus / K.E. Weiss // Virology. -1968. - Vol. 3. - P. 111-131.

145. Woods, J.A. Lumpy skin disease - a review / J.A. Woods // Trop. Anim. Health Prod. - 1988. -Vol. 20, N 1. - P. 11-17.

146. Yeruham, I. Spread of lumpy skin disease in Israeli dairy herds / I Yeruham [et al.] // Vet. Res. - 1995. - Vol. 137, N4. - P. 91-93.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Копия

'iffît

Фскра-о-ам сяуяЦ я» вспримрнму ■ фяпкимирявап ня-lMfiv

IГОССЫЬХО ШЛД ЮГ) федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральные центр охраны иоровья животных» (ФГБУ «ВНИТПЖ»)

О.Р

«и |нф|пт1ш .iMfcipmnfim M )f>wm>pj |1гжтр\Г)Б ■ utin in iMi акши

N MinpiUM ыижшгЬ MMiHwi IN г Iрши Цепочная llfWIU, AN >1ШЧ1М

Рфрппш IHVip 1Ш >M' |И ш ctpM Ц»м I ft л ib. im J 4 Лот ■ lull iiinl Сарм (Ma

600901. Россия. Kuuiixiipcwu) область, г. Владимир. мкр. Юрьевен тел.: [phone]. тел'факс: 26-«-77 E-mail: mail äairiith.fü

Федеральный институт промышленной собс1всннос1н (ФНПС) Росютента 123945, Москве, Бережковская маб . 30. к 1 г-5ч. гам

E-mail: Пи«« mnio.ru

20

■Nt

СПРАВКА Ä51 16-3

о «епонирмаиии штамма труса т>ауляроо.-о Лерыатипы -(ВИД) КРС Лч. а нып 21114 (аив.тнктычеекмй) Оля прохождения патентной процедуры

Авторы: C.B. KuMiHuwa. А В Кононов. H.H. Шумилова. О.П. Бьяловская. Ю.Ю. Бабяв. A.B. Шишкин. U.A. Мншенко. В Н. Днса. И.Г. Камалоп. А В Констшгтвиое.

1Шамм ВИЛ КРС Дагссттш.2015 выявят от крупного рогатого скота (КРС) в Республике Дагестан в 2015 г. В ФГБУ «ВНИШЖ» получен путем адаптации я течение 5 шкледонвгсльиь« пассажей « иереппииемоЛ культуре КЛГГСЖ циников лоиотнсЯ ко1ы (КК ЯДК-04) и субкультуре клеток тести кул ягненка (КК ГЯ).

Штамм oiHcefti к семейству Pux\irUh*, роду Caprtpaxwus. виду Dermatitis nodularis buvum Cuit.) iuui t.um/ri Skin Disease (аигл). преллоакя в качестве диагностического д;и и-иотиилекия препаратов и их контроля при диагностике ВИД КРС с вочможностью его применения при проведении НИР с целью прмпводстм Biuttutiinux препаратов специфической иммунопрофилактики

алицккое наименование - штамм ВИД КРС Датестан'2015

Регистр. Ми (ли агностический).

Местом хранении леномиромииого (лиапюстичеспого» определена Коллекция 1 Федеральный UCHip охраны хюровья животньк» (ФГБУ «ВНИИЗЖ») ио адресу: Россия. 60CW01. Владимирская область. г. Владимир. мкр. Юрьсвсц.

штамма ВИД КРС Дагестан 2015 штаммов мпкрооргшш тмоа Ф1 ЬУ

Дли депонирования: «28 о мартп 21)16^

Там. директора Ф1ЪУ -ШШИТЖ» по качеству Руководители Коллекции иггачэюя михрооргтипгаюв

С.К. Старое И.Г. Камалиа

«00»|, PiH'rmi. Hm |»U»|KK«U otLiarrw nipni Rumviip. u>iqia|i«*.iii Hip,..-«,, ■ел.: (4932116-u* 14. MW2> U-Se-77

L mail: null«ârriali.rv

x;.

ï m

уШяОПв ВЕРНА

-ВНИИЗЖ-OTt'Jr? S г РУCAJTEEB

УШУ'-

ШАТЕШТ

НА ИЗОБРЕТЕНИЕ

№ 2606254

Штамм вируса нодулярного дерматита крупного рогатого скота Dermatitis nodularis bovum, рода Capripoxvirus для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики нодулярного дерматита крупного рогатого скота

Патентообладатель: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") (Яи)

Авгоры: см. на обороте

Заявках» 2016118457

Приоритет изобретения 11 мая 2016 г. Дата государственной регистрации в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 10 января 2017 г. Срок действия исключительного права на изобретение истекает 11 хая 2036 г.

Руководитель Фед'ераШапщжбы по иптеллекгщшъг{ой(щн$( -------

ЩЫжшL

__/ 77. УЛ;

-2S-

ВС PVCAJEEB

ПАСПОРТ

1. Регжтрвшюмлый иовввр, itTCptw адшпиниш ипамма Штамм вируса иоду.хкриого дгрмапгта крупа в га рогат ofo смотв — ВЫЛ КРС /Ди*стая/201$ ^»пюспмгск!««)

штвым Idrsv пВНИИЧЖ.

3. От maro пив амвогаого» гвв а во» ди вовучвк Выжлев п пжгашгечсжпсе Marapaam от KFT Госв}«пв»в /^гктаи » 201? г.

4. Ллввтшвв. способ получвшш игпим Адюшромн ■ ОСФШШММОЛ «yjKT>V* 1ЛГПЖ (ИГ) ■ниш *™мшяг* ios (ЯД1С-04) ■ су6«у«м>Р» -racnotyj

5 СяСимкгь Beanrmctш свойств вгтвмт (ntui срв репролусция 1 W ЯДКЛ4 ■ K'K Г* •

C wcftmo Panvwat TDK. <4Prjw*>*w -

Т nftiam аст\тьм»»мм| xiwui мруи Ировеласве in ■ i i им i ■ ии ксс.кикшишй

t ВнпсииМ MU Сублешяеомно «мет шеищ» i^ntHX cycrxirua ЮС Г* • шде гюсистай теш бледшуроювато im «p»MI«tW4 r^w иавусоао* темпер«туре, фаосваа ix> 2.С см'

9 Нлхлнт акторонню цмиД, гаммш. Окулиуст

ЮЧктшшш У Дчц1ч». rpjmm ------ —

lt Коиташшацка другш» афуемш (MCJUJ ПНР) bes кагапшаша аафуова КТС: ввфян.впюго рнптраштв, праграшпа-З, аврусмоа диарее рот»- а нцллм^пха, я также ир^кш осзы овец а осши жш

12 Массовая дол опимш! un суЛхжлктл, 14 <0

IJ.Ita.»«—шжвпх.«.. Прв рспрпдояяв ■ КХ ЯДК-П4 a КХ ТЯ -*тр а арцмл

5,0-5,5 1*ТЦД»о.'

Ститшфичин ■ Ш1ШИН IL ППУМ! в Спшафтаскн штвас» а рвжшит 1A-I.IC

ревщяа ик*шлзго ондвич - вврввят» ИФА

15- Идттвфгвгвгт« в фиогсмичквх родство Иявгпафацярлвав. ш гш ВИЛ ОС с рвжтшш > сушсствукшш вшш ал банк *ТЧ

1С. Мб^фМОПВ МфЖ'Н! Кшаи шалмиак* к» сферачессоя формы. шкет ЧМвмуЮ ляоютуи OftfCXTOJ

17 Рмир ..тою.,» ряметр »крас.» 150-2«! «к

Ллмучаа ояетвосп a CaCI 1.1» г ''см' ХлмичаскяЯ состав: И* 0®ди, ДНК. 44 шиш и JH к «воды

20 Устойчивость к яйствню внсяткх фмтсупв в \-£МКЧССККХ К1ВСП üapyc ставшее в окружающей срана пра вамшпюЯ

11 X, • аирапамид учаеттш аова - ж «сакс VI a ciBoaa -11 д., сперме бмаоа - 22 д.. • ЮС при «4*С -4 иас-Оттамы рН 6,6 - 1.6. югагапааьт симвеиве гвтр» tipu )ТС ж 5 лмсЯ. перекосит З-краттюе таиоражяааяае и ютаявеяме. туастмететеп i )фяфу. хлороформу, аахиаий температуре. При температуре ияхус КГС мгтявеп > течегае 10 лет

по интеллектуальной Ш

[нисти

Полнее

уоъшлъж&Ш фвдеращш!

а а -х- з аз- с

ПАТЕНТ

НА ИЗОБРЕТЕНИЕ

№ 2658493

а Олнгонуклеотндные пранмеры и флуоресцентно-меченый

зонд, способ и тесг-снстема ПЦР в режиме реального

времени дли выявления генома капрнпоксвирусов

2 Патентообладатель: Федеральное государственное бюджетное

учреждение "Федеральный центр охраны здоровья

животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") (Яи)

Авторы: см. на обороте

Заявка*» 2017130118

Приоритет изобретет!» 24 августа 2017 г.

Дата государственной регистрации в

Государсшетюм реестре изобретений

Российской Федерации 21 ИЮНЯ 2018 г.

Срок действия исключительного права

а изобретение истекает 24 ни густа 2037 г,

Руководитель Ф*^срат„нт^служ6ы

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ВЕТЕРИНАРНОМУ И ФИ ГОС А] »ПАРНОМУ НАДЗОРУ ФЬЧЕРАЛЫЮГ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕВДН1И1-; -ФЕДЕРАЛЫ 1ЫЛ ЦЕНТР ОХРАНЫ ЗДОРОВЬЯ ЖИВОТНЫХ. (ФПВУ «ВНИИЗЖ»)

СОГЛАСОВАНО Директор ФГВУ «Федеца.и.иив центр охраны илрлаьх жиэоишх» ФГ"ЬУ «ВНИИЗЖ*

А * ДА. Лотовой « _2017 г.

УТВЕРЖДАЮ Зшеспгжа Рутдаводител» Фиерышай службы по аегеринаржщ) в фитссанн гарному надзору

___.НА. В.члсов

«_»_ 2017 г.

МЕТОДИЧЕСКИЕ О КАЗАНИЯ

ПО ВЫЯВЛЕНИЮ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ ЗАРАЗНОГО УЗЕЛКОВОГО ДЕРМАТИТА 'НЦДУЛЯРНОГО ДЕРМАТИТА) КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА В РЕАКЦИИ НЕЙТРАЛ» !ЗАЦ) III МИКРОМЕТОДОМ

Владимир 20П

ФЕР84

ВННИЗЖ-ВС РУСА ЛЕЕВ