Адаптация вируса африканской чумы свиней, выделенного в Российской Федерации, к перевиваемым культурам клеток и изучение его биологических свойств тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Прудникова, Елена Юрьевна

• Прудникова, Елена Юрьевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Прудникова, Елена Юрьевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 6

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ 7

1.1 Актуальность темы 7

1.2 Степень разработанности проблемы 8

1.3 Цель и задачи исследований 8

1.4 Научная новизна результатов исследований 9

1.5 Теоретическая и практическая значимость работы 10

1.6 Степень достоверности и апробация работы 10

1.7 Соответствие содержания диссертации паспорту научной 11 специальности

1.8 Публикации 11

1.9 Структура и объем диссертации 11

1.10 Основные положения диссертационной работы, выносимые 12 на защиту

1.11 Личный вклад автора в выполнение работы 12

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 13 2.1 Африканская чума свиней: общая характеристика болезни 13

2.1.1 Распространение, экономический ущерб 13

2.1.2 Эпизоотология 15

2.1.3 Биологические свойства вируса африканской чумы свиней 17

2.1.3.1 Строение вируса африканской чумы свиней 17

2.1.3.2 Таксономия вируса АЧС 19

2.1.3.3 Сероиммунологическая классификация и генотипирование 19 вируса АЧС

2.1.3.4 Сохраняемость во внешней среде и устойчивость к 20 химическим и физическим факторам

2.1.4 Патогенез 21

2.1.5 Клинические признаки и патологоанатомическая картина 23

болезни

2.1.6 Иммунитет и специфическая профилактика 25

2

2.1.7 Лабораторная диагностика 26

2.2 Культивирование вирусов 28

2.3 Адаптация вирусов 30

2.4 Культивирование вируса африканской чумы свиней в 33 первичных и перевиваемых линиях клеток

2.5 Заключение по обзору литературы 39 3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 41

3.1 Материалы и методы 41

3.1.1 Вирусы 41

3.1.2 Культуры клеток 41

3.1.3 Питательные среды, растворы, сыворотки и реактивы 42

3.1.4 Животные 43

3.1.5 Оборудование и расходные материалы 43

3.1.6 Выращивание перевиваемых культур клеток 43

3.1.7 Адаптация вируса АЧС к перевиваемым линиям клеток 44

3.1.8 Культивирование вируса африканской чумы свиней в 44 первичных культурах клеток

3.1.9 Определение инфекционной активности вируса АЧС 44

3.1.10 Постановка реакции гемадсорбции 45

3.1.11 Постановка реакции прямой и непрямой 45 иммунофлуоресценции

3.1.12 Постановка твердофазного иммуноферментного анализа 46

3.1.13 Метод микробляшек 47

3.1.14 Оценка патогенности и иммуногенности культуральных 47 вариантов вируса АЧС

3.1.15 Отбор проб крови 48

3.1.16 Получение сыворотки 48

3.1.17 Анализ генетической изменчивости вируса АЧС 48

3.2 Результаты исследований 50

3.2.1 Обоснование выбора штамма вируса африканской чумы 50 свиней

3.2.2 Обоснование выбора перевиваемых культур клеток 50

3.2.3 Адаптация вируса АЧС к перевиваемым линиям клеток 51

3.2.4 Оптимизация условий культивирования вируса АЧС в 57 перевиваемых линиях клеток

3.2.4.1 Определение оптимальной множественности заражения 57

3.2.4.2 Влияние pH среды на накопление вируса 58

3.2.4.3 Влияние концентрации сыворотки крови на накопление 59 вируса

3.2.4.4 Влияние возраста культуры клеток на накопление вируса 60 АЧС

3.2.5 Получение перевиваемой сублинии клеток А4С2/9к 62

3.2.6 Культивирование вируса АЧС штамм Ставрополь 01/08 в 63 перевиваемой культуре клеток А4С2/9к

3.2.7 Размножение вируса АЧС, адаптированного к клеткам 64 А4С2/9к в перевиваемых линиях клеток

3.2.8 Суспензионное культивирование вируса АЧС 66

3.2.9 Гемадсорбция в перевиваемой линии клеток А4С2/9к 68

3.2.10 Изучение чувствительности перевиваемой линии клеток 69 А4С2/9к к различным изолятам вируса АЧС

3.2.11 Постановка РЗГАд в перевиваемой культуре клеток А4С2/9к 71

3.2.12 Культуральные свойства вируса АЧС, адаптированного к 73 перевиваемым линиям клеток

3.2.12.1 Изучение цикла репродукции вируса АЧС в перевиваемых 73 линиях клеток

3.2.12.2 Цитопатические изменения 75

3.2.12.3 Влияние адаптации вируса АЧС к перевиваемым 76 культурам клеток на характер проявления гемадсорбции

3.2.12.4 Инфекционная активность 78

3.2.12.5 Антигенная активность 79

3.2.12.6 Бляшкообразующие свойства 80

3.2.13 Анализ вариабельных участков генома вируса АЧС 83

3.2.14 Патогенные и иммуногенные свойства штамма Ставрополь 86 01/08 вируса АЧС, полученного в различных культурах

клеток

3.2.15 Получение ЗГАд сыворотки к вирусу АЧС 8 серотипа 91

4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 92

5 ВЫВОДЫ 100

6 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 101

7 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 102 ПРИЛОЖЕНИЯ 133

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АЧС - африканская чума свиней

ВНИИВВиМ - Всероссийский НИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии

ГАЕ - гемадсорбирующая единица ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ИФА - иммуноферментный анализ КМБ - казеин - мертиолятный буфер KMC - костный мозг свиней КЧС - классическая чума свиней JIC - лейкоциты свиней

ПСГК - 60 - перевиваемая линия клеток почки свиньи

ППК - 666 - монослойно - суспензионная клональная сублиния перевиваемых клеток почки эмбриона свиньи ПЭГ - полиэтиленгликоль

ПЦР РВ - полимеразная цепная реакция в режиме реального времени ГАд - гемадсорбция

РЗГАд - реакция задержки гемадсорбции

РНК - рибонуклеиновая кислота

РПИФ - реакция прямой иммунофлуоресценции

ТЦД - тканевая цитопатическая доза

ФИТЦ - флуоресцинизотиоцианат

ЦПД - цитопатогенное действие

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

А4С2 - штамм внутривидовых гибридных клеток почки плода свиньи СПЭВ-ТК" и спленоцитов свиньи

ВНК - 21 - перевиваемая линия клеток почки новорожденного сирийского хомячка

CV - 1 - перевиваемая линия клеток почки африканской зеленной мартышки РК - 15 - перевиваемая линия клеток почки поросенка РК-2а - первичная культура клеток почки свиньи

VERO - перевиваемая линия клеток почки африканской зеленной мартышки

б

1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Адаптация вируса африканской чумы свиней, выделенного в Российской Федерации, к перевиваемым культурам клеток и изучение его биологических свойств»

1.1 Актуальность темы

Африканская чума свиней (АЧС) - контагиозная вирусная болезнь свиней, характеризующаяся лихорадкой, обширными геморрагиями и цианозом кожи, тяжелыми дистрофическими и некротическими поражениями клеток ретикулоэндотелиальной системы и высокой смертностью [6].

Впервые африканская чума была описана в 1921 г английским исследователем Р. Монтгомери, который наблюдал многочисленные вспышки болезни среди завезенных в Кению европейских пород свиней [173].

Африканская чума свиней (АЧС) относится к особо опасным болезням свиней. Заболевание наносит свиноводству огромный экономический ущерб, связанный с убоем всех животных в эпизоотическом очаге и 1 угрожаемой зоне, проведением жестких ветеринарно-санитарных и карантинных мероприятий, ограничивающих все производственные связи хозяйства [34].

Особенно острой проблема АЧС для России стала в 2007 г. после заноса возбудителя болезни из Грузии в Чеченскую Республику, а оттуда и в другие регионы страны [8]. Так, по данным Россельхознадзора, только в первом полугодии 2013 г. зарегистрировано 125 вспышек АЧС в 14 субъектах Российской Федерации [94].

В связи с особенностями биологических свойств возбудителя средства

специфической профилактики против АЧС не разработаны, поэтому быстрая

лабораторная диагностика имеет решающее значение в борьбе с болезнью.

Чувствительность лабораторных диагностических методов зависит от

концентрации вируса и качества патматериала. В некоторых случаях

необходимо проведение субпассажей патологического материала в

чувствительных культурах клеток костного мозга свиней (KMC) и

лейкоцитов свиней (J1C) с целью накопления вируса АЧС в диагностических

концентрациях [171]. Однако получение таких культур клеток и их

7

жизнеспособность зависит от свиней - доноров, что затрудняет стандартизацию получаемого сырья.

Перспективными для культивирования вируса АЧС являются перевиваемые линии клеток, обеспечивающие получение однородного вируссодержащего материала в больших объемах. Вируссодержащий материал, полученный в перевиваемых линиях клеток, широко применяется как при изучении биологических и молекулярно-генетических свойств различных изолятов вируса АЧС, так и при изготовлении диагностических препаратов, а также изучении иммуногенеза болезни [37, 39, 73, 76].

В связи с изложенным, исследования по адаптации выделенного в Российской Федерации вируса АЧС к перевиваемым культурам клеток различного происхождения и изучение его биологических свойств являются актуальными.

1.2 Степень разработанности проблемы

Работами зарубежных и отечественных ученых показана возможность размножения вируса АЧС в перевиваемых культурах клеток различного происхождения [38, 39, 199]. Интерес по адаптации вируса АЧС к перевиваемым культурам клеток обусловлен возможностью длительного его поддержания в лабораторных условиях, относительной однородностью популяции и стабильностью биологических свойств. Описаны штаммы вируса АЧС, адаптированные к перевиваемым культурам клеток ППК-666, ВНК-21, ПСГК-60, CV-1, VERO [38, 39, 147, 171, 199]. В то же время на начало проведения наших исследований адаптированного к перевиваемым линиям клеток вируса АЧС, выделенного в Российской Федерации, не было.

1.3 Цель и задачи исследований

Целью данной работы является адаптация выделенного в Российской Федерации в 2008-2013 гг. вируса АЧС к перевиваемым культурам клеток и изучение его биологических свойств.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- провести адаптацию вируса АЧС, выделенного в Российской Федерации, к перевиваемым линиям клеток гомологичного (ППК - 666, ПСГК - 60, А4С2) или гетерологичного (CV - 1) происхождения;

- провести исследования по получению аттенуированого вируса АЧС путем последовательных селективных пассажей вирулентного вируса в культурах клеток различного происхождения;

- отработать оптимальные параметры культивирования вируса АЧС, адаптированного к перевиваемым линиям клеток;

- изучить культуральные, антигенные и иммуногенные свойства адаптированного к перевиваемым культурам клеток вируса АЧС;

-получить типоспецифическую, задерживающую гемадсорбцию, сыворотку к вирусу АЧС 8 серотипа.

1.4 Научная новизна результатов исследований

Получены культуральные варианты штамма Ставрополь 01/08 вируса АЧС, адаптированные к перевиваемым линиям клеток гомологичного (ПСГК - 60, ППК - 666, А4С2) и гетерологичного (CV-1) происхождения и изучены их биологические свойства.

Получена перевиваемая сублиния внутривидовых гибридных эмбриональных клеток почки свиньи СПЭВ ТК" с лимфоцитоподобными клетками свиньи - А4С2/9К, которая может быть использована для выделения вируса АЧС, определения его инфекционной активности, серотиповой принадлежности и обеспечивающая его накопление в титре до 6,0 - 6,5 lg ГАЕ50/см . Сублиния внутривидовых гибридных клеток депонирована в Специализированной коллекции клеточных культур при ГНУ ВИЭВ Россельхозакадемии под № 87.

Селективными пассажами вирулентного вируса АЧС штамм Ставрополь 01/08 в перевиваемых культурах клеток получены аттенуированные варианты вируса с измененными фенотипическими признаками (характер гемадсорбции, размер микробляшек, патогенность для свиней).

1.5 Теоретическая и практическая значимость работы

Аттенуированные варианты штамма Ставрополь 01/08 вируса АЧС, полученные в культуре клеток А4С2/9к, используются в ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии при получении специфических сывороток к вирусу АЧС и изучении патогенеза и иммуногенеза болезни.

Перевиваемая гибридная линия клеток А4С2/9к используется в ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии при выделении вируса АЧС, определении его инфекционной активности и типовой принадлежности, а так же оценке эффективности дезинфицирующих средств в отношении вируса АЧС.

Разработаны: «Методические положения по оценке питательных сред и сывороток для суспензионного культивирования клеток и вирусов»; «Методические положения по адаптации вируса африканской чумы свиней к перевиваемым линиям клеток»; «Методические положения по поддержанию и применению перевиваемой линии клеток А4С2/9к и ее использованию для идентификации и определения инфекционной активности вируса африканской чумы свиней»; «Методические положения по оценке эффективности дезсредств в отношении вируса АЧС», утвержденные академиком-секретарем Отделения ветеринарной медицины

Россельхозакадемии A.M. Смирновым 10.11.2011, 12.12.12, 21.11.2013, 21.11.2013, соответственно (Приложение 1, 2).

1.6 Степень достоверности и апробация работы

Статистический анализ результатов исследований проводили согласно рекомендациям Лакина Г.Ф. с пакетом прикладных программ Statgrafics версия 2.1. или MS Excel [50]. Научные положения, выводы и практические предложения диссертационной работы аргументировано отражают содержание диссертации.

Результаты исследований, выполненных по теме диссертации,

представлены, заслушаны и обсуждены на заседаниях ученого совета ГНУ

ВНИИВВиМ Россельхозакадемии в 2010-2013 гг., на II Международной

научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы

ю

инфекционной патологии в ветеринарной медицине» ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии (г. Покров, 2012 г.); Международной научно -практической конференции «Достижения молодых ученых в ветеринарную практику» ФГУ ВНИИЗЖ (г. Владимир, 2012 г.); Международной научно -практической конференции «Научные основы производства и обеспечения качества биологических препаратов для АПК» ГНУ ВНИТИБП (г. Щелково, 2012 г.).

1.7 Соответствие содержания диссертации паспорту научной специальности

В соответствии с формулой специальности 06.02.02 Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология, в диссертации представлены данные по адаптации вируса АЧС, выделенного в РФ к перевиваемым культурам клеток. Приведены сведения по разработке оптимальных режимов культивирования вируса в культурах клеток гомологичного и гетерологичного происхождения, а также представлены результаты изучения иммунобиологических свойств аттенуированных вариантов вируса АЧС. Результаты научного исследования соответствуют пунктам паспорта специальности - 1, 3, 4, 5, 6, 14.

1.8 Публикации

По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации.

1.9 Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 132 страницах машинописного текста, иллюстрирована 14 таблицами и 16 рисунками. Список литературы включает 230 источников, из которых 135 - иностранные.

1.10 Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту

1. Вирус АЧС штамм Ставрополь 01/08 после предварительной адаптации размножается в культурах клеток гомологичного и гетерологичного происхождения (ПСГК - 60, ППК - 666, А4С2/9к и CV-1).

2. Перевиваемая сублиния клеток А4С2/9к пригодна для выделения, определения инфекционной активности и типовой принадлежности вируса АЧС.

3. Результаты изучения иммунобиологических свойств аттенуированных вариантов штамма Ставрополь 01/08 вируса АЧС.

1.11 Личный вклад автора в выполнение работы

Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно.

Отдельные этапы исследований выполнены при консультативной и методической помощи сотрудников лабораторий: Музейных штаммов (д.в.н., профессор В.М. Балышев), Биотехнологии (д.б.н., профессор С.Г. Юрков, к.в.н. О.Г. Лаптева), Биофизики (д.б.н. В.Н. Пономарев), Молекулярной вирусологии (к.б.н. A.C. Малоголовкин), Диагностики (к.в.н., С.А. Белянин). Исследования проведены в лаборатории Биотехнологии и Музейных штаммов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии.

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1 Африканская чума свиней: общая характеристика болезни

2.1.1 Распространение, экономический ущерб

Африканская чума свиней - контагиозная вирусная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, цианозом кожных покровов, тяжелыми дистрофическими и некротическими поражениями клеток ретикулоэндотелиальной системы. Восприимчивы домашние и дикие свиньи независимо от породы и возраста. Различают сверхострое, острое, хроническое и бессимптомное течение болезни [5, 6, 43, 75].

Впервые описал и доказал вирусную природу болезни английский исследователь Р. Монтгомери в 1921 г., который в 1909 - 1912 гг. наблюдал многочисленные вспышки смертельной инфекции среди завезенных в Кению европейских свиней [173].

До 1957 г. АЧС была распространена только на Африканском континенте [107, 129]. В апреле 1957 г. заболевание впервые было диагностировано в Португалии в хозяйствах вблизи аэропорта города Лиссабон. Предполагают, что возбудитель болезни был занесён из Анголы с отходами пищевых продуктов. В результате убоя больных и подозреваемых в заболевании свиней болезнь была ликвидирована в июне 1958 г. Однако в апреле 1960 г. в Португалии была вновь зарегистрирована АЧС, которая быстро распространилась по стране, и уже в мае этого же года первые случаи АЧС были зафиксированы в Испании в хозяйствах, расположенных на границе с Португалией в одном из крупных свиноводческих хозяйств [111, 157].

В дальнейшем болезнь распространилась с Иберийского полуострова и укоренилась в южно-европейских странах: Франции (1964, 1967, 1974 гг.), Мальте (1978 г.) и Италии (1967 г., 1978-1984 гг.). Затем отдельные вспышки заболевания были зафиксированы в Нидерландах (1986 г.) и Голландии (1986 г.), которые удалось купировать [95].

В это же время АЧС регистрировали в странах Центральной и Южной Америки: в Бразилии (1978- 1979 гг.), на Кубе (1970 г., 1980 г.), в Доминиканской Республике (1978-1980 гг.) и на Гаити (1978-1980 гг.). Искоренение заболевания на Кубе в Доминиканской Республике, на Мальте и Гаити было достигнуто посредством массового забоя свиней [170].

АЧС также регистрировалась в 1977 г. на территории бывшего СССР -в Одесской области [45].

В 1994 г. в Кении вновь был обнаружен возбудитель АЧС. В 1997 г. вспышки АЧС были зарегистрированы в Нигерии. Болезнь быстро распространилась и в 1998 г. поразила многие свиноводческие хозяйства в дельте реки Нигер [108, 188]. В этом же году впервые АЧС была выявлена на острове Мадагаскар [49, 156].

В июне 2007 г. АЧС была установлена в Республике Грузия, где пало большое количество свиней прежде, чем был установлен диагноз [102].

Первый случай АЧС на территории Российской Федерации зарегистрирован в ноябре 2007 г. в Чеченской Республике, куда вирус был занесен из Грузии инфицированными кабанами. Затем болезнь регистрировали в Ингушетии, Республике Северная Осетия, Кабардино-Балкарии, Дагестане, Карачаево-Черкесии, Адыгее, Краснодарском и Ставропольском краях - среди домашних свиней и кабанов [23].

В 2008 - 2011 гг. отмечены новые вспышки АЧС в Республике Абхазия, Краснодарском и Ставропольском краях, Калининградской, Ростовской, Ленинградской, Мурманской, Архангельской, Воронежской, Курской областях [48, 51, 87].

С начала 2013 г. в РФ зарегистрировано 125 вспышек АЧС: в Белгородской, Волгоградской, Воронежской, Московской, Псковской, Ростовской, Смоленской, Тамбовской, Тверской, Тульской, Ярославской и Владимирской областях. Согласно данным Россельхознадзора в первом полугодии 2013 года в Российской Федерации выявлено 73 неблагополучных пункта и 77 инфицированных объектов [94].

14

Всего за период с 2007 г. по 2013 г. на территории Российской Федерации зарегистрировано 529 случаев возникновения АЧС [94].

АЧС наносит огромный экономический ущерб, который складывается из прямых потерь (затрат на уничтожение всех свиней на неблагополучной территории), а также проведения дорогостоящих ветеринарно-санитарных и карантинных мероприятий, введения ограничений в торговле свиньями и продуктами их убоя. Суммарный ущерб исчисляется десятками миллионов долларов [53, 183].

2.1.2 Эпизоотология

В дикой природе заболевание регистрируется у кабанов и африканских свиней-бородавочников (Phacochoerus aethiopicus), кустарниковых свиней (Potamochoerus porcus) и гигантских лесных свиней (Hylochoeriis meinertzhageni). Болезнь у этих видов животных протекает субклинически. В результате эволюции между вирусом АЧС и дикими африканскими свиньями установилось биологическое равновесие, в результате которого вирус длительно размножается в организме этих животных, не вызывая патологических изменений. Таким образом, дикие свиньи Африки являются естественным резервуаром вируса [45, 104, 112].

Домашние свиньи и европейские дикие кабаны крайне восприимчивы к АЧС. Исключением стали ошейниковые пекари, которые оказались совершенно невосприимчивыми к данному возбудителю [229].

В неблагополучных странах АЧС протекает в форме эпизоотий, для неё характерна стационарность, которая связана с длительным вирусоносительством, высокой устойчивостью вируса во внешней среде и возможностью сохранения его в организме грызунов и членистоногих [2].

Источником инфекции являются больные, переболевшие, павшие

свиньи и животные-вирусоносители, из организма которых вирус в больших

количествах выделяется с фекалиями, мочой, слюной, секретом

конъюнктивы, выделениями из половых путей. Максимальная концентрация

15

вируса обнаруживается в крови, в которой вирус накапливается до 7,0 - 7,5 ^ ГАЕ50/см3 [43].

Заражение происходит главным образом при совместном содержании свиней с инфицированными, находящимися в инкубационном периоде животными и вирусоносителями. Поедание кормов, контаминированных вирусом, нахождение в инфицированных помещениях и транспортных средствах также приводит к развитию болезни. Особую опасность представляют продукты убоя зараженных свиней (мясо, мясные изделия, сало, кровь, кости, шкуры и т.п.) [5]. При первичном возникновении болезни заболеваемость и смертность свиней в хозяйствах приближаются к 100% [64].

Из организма зараженных животных вирус начинает выделяться за 24 часа до появления первых клинических признаков болезни с кровью - при носовом и других видах кровотечений, с фекалиями, мочой, секретами слизистых оболочек носовой полости, слюной [113]. Также передача вируса может происходить ятрогенным путём, то есть через заражённые иглы, во время массовых обработок при проведении профилактических и лечебных мероприятий [181].

Механически вирус могут распространять люди, птицы, различные виды домашних и диких животных, грызуны, накожные паразиты (некоторые виды клещей, вши) [70, 85]. Естественным резервуаром и переносчиком инфекционного начала при АЧС являются аргасовые клещи рода ОгпШюёогоз. Членистоногие получают вирус при кровососании больных животных, затем возбудитель размножается в их организме и клещи передают его здоровым свиньям при последующем укусе [71, 103].

Размножение и персистирование возбудителя АЧС в неблагополучных

зонах наблюдается у 70-75% аргасовых клещей рода ОгтИюёогоБ, кроме

того, вирус сохраняет жизнеспособность даже в мертвых клещах [158]. Среди

клещей вирус передается трансстадийно, трансовариально и половым путём.

Даже после однократного попадания вируса АЧС в популяцию клещей

16

возникает его циркуляция независимо от контакта этой популяции с естественно восприимчивыми животными. В связи с большой продолжительностью жизни клещей (10-15, а иногда - 25 лет) очаг болезни может существовать неопределенно долгое время без повторных заносов вируса [45, 104].

По данным Mellor P.S., единственными, за исключением клещей, членистоногими, способными сохранять вирус АЧС и передавать его свиньям, являются мухи осенние жигалки из рода Stomoxys, которые способны передавать вирус в течение 24 - 48 ч [168].

2.1.3 Биологические свойства вируса африканской чумы свиней 2.1.3.1 Строение вируса африканской чумы свиней Возбудитель болезни АЧС - 20-гранный цитоплазматический ДНК-содержащий вирус. Вирионы представляют собой округлые частицы диаметром 175 - 215 нм, состоящие из сердцевины (70-100 нм), содержащей ДНК, белок и различные ферменты, необходимые для репликации вируса (рисунок 1) [222]. Сердцевина окружена двумя липидными слоями икосаэдрического капсида (170-190 нм), состоящего из 1892-2172 капсомеров. Поверхностная оболочка и капсид содержат большое количество липидов, под которыми находится нуклеопротеид из плотных фибрилл, содержащих ДНК. С капсидом ассоциирована ДНК-зависимая РНК-полимераза, участвующая в начальных стадиях репродукции вируса [85, 99, 159, 160,161, 176, 194].

Рисунок 1 - Строение вируса африканской чумы свиней [222]

17

В геноме вируса АЧС различают от 150 до 200 открытых рамок считывания, кодирующих структурные и вирусспецифические белки [198]. Каждый вирион содержит по два ДНК - связывающих протеина р10 и р14,5 и по семь протеинов с трансмембранными регионами (р12, р17, р22, р54 или jl3L, jl8L, j5R и EP402R) [210]. Основными структурными вирусными протеинами являются р72, рЗО, р150, р37, р34, р35 и р 15. Остальные протеины являются неструктурными, их количество и вид варьирует в зависимости от изолятов [47, 62, 80, 74, 100, 105, 126, 140, 175, 198].

В 1993-1999 гг. была определена полная нуклеотидная последовательность генома вируса АЧС, который представлен одной двуспиральной линейной молекулой ДНК, состоящей из 170-190 тыс. пар нуклеотидов. Центральная часть цепочек ДНК консервативна, но наблюдаются значительные вариации по длине в концевых участках генома, а именно 40 тысяч пар нуклеотидов на левом и 15 тысяч пар нуклеотидов на правом, из-за гомологичной и негомологичной рекомбинации, приводящей к делециям генов мультигенных семейств [121, 139, 141, 177].

Вирус АЧС содержит гены, кодирующие ферменты, вовлеченные в нуклеотидный метаболизм, репликацию, репарацию и транскрипцию ДНК. Также вирус содержит несколько генов, кодирующих белки, имеющие гомологию с белками хозяина, что обеспечивает вирусу своеобразную мимикрию в отношении клеточных структур [172, 220].

В левой концевой области генома вируса АЧС расположены гены, кодирующие вирусспецифические белки, важные для фенотипического проявления иммунобиологических свойств вируса [73, 172].

2.1.3.2 Таксономия вируса АЧС

На основании общего плана строения вируса АЧС, локализации вирапластов в инфицированных клетках, его отнесли к группе иридовирусов. Однако он отличался от иридовирусов по структуре ДНК и стратегии репликации. Кроме того, он выделялся среди ДНК-содержащих вирусов способностью размножаться как в организме позвоночных, так и в беспозвоночных хозяев, что характерно для арбовирусов [89].

В 2000 г. после детального изучения свойств возбудителя АЧС была выдвинута гипотеза о его гибридном происхождении. Rodriguez J., Salas M.L. et al (1996) предположили, что его предками были вирусы группы оспы и один из иридовирусов насекомых [197].

В 2000 г. вирус АЧС Международным комитетом по таксономии вирусов был выделен в отдельное семейство Asfarviridae род Asfivirus [136].

2.1.3.3 Сероиммунологическая классификация и генотипирование вируса АЧС

Вирус АЧС неоднороден. Имеются сообщения о высокой изменчивости вируса. Полевые штаммы вируса АЧС обычно являются гетерогенными поликлональными популяциями, различающимися по вирулентности, гемадсорбирущим, антигенным и иммунобиологическим свойствам.

Предположение о существовании нескольких иммунологических типов

вируса АЧС появилось в 30 годах прошлого столетия и получило

экспериментальное подтверждение на рубеже 50 - 60 годов [184]. D. Tray

обнаружил антигенные различия между африканскими изолятами Хинде,

Уганда и Тенгани в реакции задержки гемадсорбции [216]. Используя

реакцию задержки гемадсорбции и иммунологическую пробу на животных,

W. Malmquist доказал антигенное многообразие изолятов, выделенных в

Африке. Им установлено семь иммунологических и серологических типов с

референс - штаммами: Л - 57, J1 - 60, Хинде - 2, Родезия, Дакар, 2743,

Мозамбик. На основании различий результатов РЗГАд с антисыворотками

против штаммов вируса из провинции Катанга, с острова Мадейра и на

19

Португалии J. Vigario с соавторами (1974) выделили 2 самостоятельные подгруппы (А, Б) и третью подгруппу штаммов (С), гемадсорбция которых не ингибировалась имеющимися сыворотками [109].

Во ВНИИВВиМ была разработана сероиммунологическая классификация природных изолятов вирулентных и аттенуированных штаммов вируса АЧС, хранящихся в музее микроорганизмов института. Изученные штаммы и изоляты вируса АЧС были разделены на 11 групп. Штаммы с четко выраженными иммунобиологическими свойствами объединены в 8 сероиммунотипов. Оставшиеся 3 группы включают: изоляты, серотиповая принадлежность которых не соответствует результатами иммунобиологической пробы (9 группа), изоляты, гетерогенные в типовом отношении (10 группа), и новые нетипированные изоляты (11 группа) [81].

В настоящее время для дифференциации штаммов и изолятов вируса АЧС используют методы генотипирования на основе амплификации и секвенирования высоковариабельных фрагментов генома мажорного структурного белка р72. На основании результатов генотипирования изоляты вируса АЧС были разделены на 22 генопита [142].

Вирус АЧС, выделенный в регионах Российской Федерации, относится к II генотипу и был типирован в РЗГА как представитель VIII серотипа [8, 27, 86, 178].

2.1.3.4 Сохраняемость во внешней среде и устойчивость к химическим и физическим факторам

Вирус АЧС устойчив в широком диапазоне температур и рН среды, а также выдерживает длительное высушивание, замораживание и гниение.

Рассматривая влияние температурного фактора, учёные установили, что при минусовых температурах и при 4 °С возбудитель АЧС может сохранять жизнеспособность годами: при минус 30 - 60 С - от 6 до 10 лет, при 20 °С - до 18 мес., при 37 °С - до 30 дней, при 50 °С - 1 ч. [42].

Возбудитель АЧС устойчив в широком диапазоне рН - как в кислой,

так и в щелочной среде (4,0-13,0). В препаратах, свободных от сыворотки,

20

инфекционная активность вируса сохранялась в течение 21 часа при рН 13,4, добавление 25% сыворотки увеличивало время инактивации вируса до 7 суток при том же значении рН. В бессывороточной среде наблюдалась быстрая инактивация возбудителя при рН ниже 3,9. Вирус сохраняет патогенность для свиней 4 часа при рН 2,7 и 2 часа при рН 1,9 [43, 182].

Большинство веществ, обладающих дезинфицирующими свойствами (креолин, лизол), не инактивируют вирус АЧС. К 1,5 % раствору ЫаОН вирус АЧС не чувствителен, а обработка 3 % раствором ЫаОН приводит к потере его инфекционной активности через 24 часа. Наибольшее вирулицидное действие на вирус оказывают формальдегиды и хлорактивные препараты. Так, 5 % раствор хлорамина, гипохлорит натрия и кальция с 1 -2 % активного хлора, а также хлорная известь, инактивирует вирус за 4 ч. [92]. При дезинфекции особое внимание обращают на тщательную механическую очистку и промывание горячей водой, так как органические вещества навоза могут снизить эффективность дезинфекции [2, 12].

2.1.4 Патогенез

Несмотря на различные способы проникновения вируса АЧС в организм свиней, первичными клетками-мишенями являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов: моноциты крови и их предшественники в костном мозге, а также тканевые макрофаги [2, 43, 85, 124]. В естественных условиях вирус проникает в организм свиней через органы пищеварения, дыхания, поврежденную кожу и слизистые оболочки. Он индуцирует перестройку клеточного метаболизма, активизирует гидролитические ферменты, вызывает пролиферацию клеток лимфоидной ткани. Затем вирус попадает в лимфатические узлы, расположенные недалеко от места проникновения вируса, где в моноцитах и макрофагах происходит первичная репликация вируса [41, 53, 213].

Вирус с крово- и лимфотоком распространяется во вторичные места

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Прудникова, Елена Юрьевна, 2013 год

7 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Алимов, A.M. Значение достижений биотехнологии для диагностики и профилактики инфекционных болезней животных / A.M. Алимов, Т.Ф. Фаизов, P.A. Саетдинов // Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных: материалы Международной конференции ВНИИВВиМ. - Покров, 1998. - С. 184 - 187.

2. Африканская чума свиней // Инфекционная патология животных: в 2 - х т. / гл. ред. А.Я. Самуйленко и др. -М., 2006,-Т. 1. - С. 807 - 817.

3. Африканская чума свиней - модель взаимодействия патогена с антигеном мононуклеарных фагоцитов / В.В. Макаров, С.Ф. Чевелев, М.С. Малахова, H.A. Власов // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции / ВНИИВВиМ. 4.1.-Покров, 1992. - С.13 - 21.

4. Балышева, В.И. Ассоциированная инактивированная вакцина против болезней Ауэски и Тешена / В.И. Балышева, A.A. Шишкова, В.И. Жестерев // Ветеринария. - 2007. - № 6. - С. 20-23.

5. Бакулов, И.А. Проблемы современной эволюции африканской чумы свиней / И.А. Бакулов, В.В. Макаров // Вестник сельскохозяйственных наук. -1990. -№ 12. - С. 122 - 128.

6. Бакулов, И.А. Эпизоотология: африканская чума свиней / И.А. Бакулов. - Москва: Колос, 1969. - С. 267 - 290.

7. Биологические свойства вируса африканской чумы свиней / Ф.А. Бадаев, Э.В. Рудобельский, С.Ф. Чевелев, A.B. Киселев // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции / ВНИИВВиМ. 4.1. - Покров, 1992. - С. 24 - 27.

8. Биологические свойства вируса африканской чумы свиней, выделенного в Российской Федерации / В.М. Балышев, В.В. Куриннов, С.Ж. Цыбанов, Ю.Ф. Калантаенко, Д.В. Колбасов, В.В. Пронин, Г.В. Корнева // Ветеринария. - 2010. - №7. - С. 25 - 27.

9. Бектемиров, Т.А. Перспективы использования перевиваемых культур клеток как источника вируса для изготовления инактивированных и живых вирусных вакцин / Т.А. Бектемиров // Актуальность проблемы создания и применения иммунобиологических препаратов для диагностики и профилактики инфекционных болезней. - Пермь: Иммуноген, 1991. - С.67 -69.

Ю.Белянин, С. А. Характеристика полевых высоковирулентных и низковирулентных изолятов вируса АЧС / С.А. Белянин // Ветеринарная медицина XXI века: инновации, опыт, проблемы и пути их решения, посвященной Всемирному году ветеринарии в ознаменование 250-летия профессии ветеринарного врача: материалы Международной научно-практической конференции. - Ульяновск, 2011. - Т. 1. - С.56 - 60.

11 .Вирулентность изолятов вируса африканской чумы свиней / С.А. Белянин, А.П. Васильев, Д.В. Колбасов, С.Ж. Цыбанов, В.М. Балышев, В.В. Куриннов, О.Ю. Черных // Ветеринария Кубани. - 2011. - №5. - С.9 - 10.

12. Влияние некоторых физики - химических факторов на вирус африканской чумы свиней / И.В. Никишин, Ф.А. Бадаев, Э.В. Рудобельский, С.Ф. Чевелев // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции / ВНИИВВиМ. 4.1. -Покров, 1992. - С.48.

13.Внутривидовая гибридная культура клеток СПЭВ ТК-хлимфоциты свиньи / Л.П. Дьяконов, Т.В. Гальнбек, И.В. Щекалова [и др.] // Сельскохозяйственная биология. - 1996. - № 2. - С.25 - 30.

14.Выращивание культур клеток животных на микроносителе / Н.В. Грудина, В. А. Сергеев, В.П. Хижинская, В.И. Жестерев // Сельскохозяйственная биология. - 1985. - №2. - С. 85 - 91.

15.Герасимов, В.Н. Поддержание и выращивание гибридной культуры клеток А4С2 в условиях лаборатории / В.Н. Герасимов, Л.П. Дьяконов, Т.В. Гальнбек // Проблемы и перспективы инновационного развития: материалы конференции. - Алмата, 2008. - С. 73 - 74.

16.Голубев, Д.Б. Руководство по применению клеточных культур в вирусологии / Д.Б. Голубев, А.А. Соминина, М.Н. Медведева. - Л.: Медицина, 1976. - 224 с.

17.Грачев, Д.В. Адаптация вируса оспы коз к первичным и перевиваемым культурам клеток / Д.В. Грачев // Проблемы мониторинга и генодиагностики инфекционных болезней животных: материалы Международная научная конференция. - Владимир, 2004. - С. 97 - 99.

18.Гулевич, Н.Е. Восстановление чувствительности клеток, резистентных к вирусу Коксаки ВЗ, при обработке их фильтратом чувствительных клеток / Н.Е. Гулевич, Ф.В. Воронина, Я.Е. Хесин // Вопросы вирусологии. - 1980. -№2. - С. 241 -244.

19.Диагностика африканской чумы свиней. I Реакция гемадсорбции и задержки гемадсорбции при африканской чумы свиней / И.В. Вишняков, Н.И. Митин, А.Н. Курносов, В.М. Колосов, Г.М. Карпов, И.В. Федорищев, В.А. Бурлаков // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции ВНИИВВиМ.-Покров, 1992.-С. 57-62.

20.Диагностика африканской чумы свиней. III Методы прямой и не прямой иммунофлюоресценции / И.В. Вишняков, Е.М. Карасева, Л.Я. Олейник, Н.И. Митин // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и

эпизоотологии: материалы научной конференции ВНИИВВиМ.-Покров, 1992.-С. 65 -68.

21.Диагностика африканской чумы свиней. 4 Метод иммуноферментного анализа / И.Ф. Вишняков, Л.Я. Цыбанова, Г.М. Карпов // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции ВНИИВВиМ. - Покров, 1992. - С. 68 - 70.

22.Диагностика и дифференциальная диагностика африканской и классической чумы свиней / И.Ф. Вишняков, Н.И. Митин, Г.М. Карпов, В.В. Куриннов, А.Т. Яшин // Ветеринария. - 1991. - № 3. - С.46 - 55.

23.Диагностика и мониторинг при вспышках африканской чумы свиней в республиках Кавказа в 2007 - 2008 гг. / В.В. Куриннов, Д.В. Колбасов, С.Ж. Цыбанов, И.М. Калабеков, В.М. Лыска, А.П. Васильев, М.Б. Новикова, О.М. Стрижакова, С.В. Миколайчук, Ю.Ф. Калантаенко, В.М. Балышев, A.A. Коломыцев, А.Н. Жуков, Н.В. Гончарова, В.В. Герасимов, Э.А. Аншба, Е.А. Непоклонов, С.С. Яковлев, H.A. Власов // Ветеринария. - 2008. - № 10. - С. 20 -25.

24.Дудар, Л.Н. Внуртивидовые гибриды клеток свиньи и их способность к интерферонообразованию / Л.Н. Дудар // Ветериная. - 1990. - №4. - С. 29 - 3.

25.Дьяконов, Л.П. Животная клетка в культуре / Л.П. Дьяконов, В.И. Ситьков. - М.: Спутник, 2000. - С. 350.

26.Дьяконов, Л.П. Животная клетка в культуре / Л.П. Дьяконов, В.И. Ситьков. - М.: Спутник, 2000. - С. 400.

27.Елсукова, A.A. Анализ гипервариабельного участка генома вируса АЧС (гена B602L) музейных штаммов и изолятов, полученных на территории РФ / A.A. Елсукова, И.Х. Газаев // Актуальные проблемы инфекционной патологии ветеринарной медицины: материалы конференции молодых ученых / ГНУ ВНИИВВиМ. - Покров, 2009. - С. 72 - 76.

28.Жестерев, В.И. Современные аспекты крупномасштабного культивирования клеточных субстратов и вирусов / В.И. Жестерев, С.Г. Юрков // Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропозонозов: труды Межданародной научной - практической конференции / ГНУ ВНИИВВиМ. -Покров, 2003.-С. 38-41.

2 9. Идентификация вируса африканской чумы свиней с помощью полемеразной цепной реакцией / В.О. Копытов, Л.Я. Цыбанов, Ю.О. Селянинов, С.Ж. Цыбанов // Генодиагностика инфекционных заболеваний: сборник тезисов Всероссийской научной - практической конференции. -Москва, 2002. - С. 341 - 343.

30.Изучение возможности выращивания первичных и перевиваемых клеток на микроносителе / В.П. Хижинская, В.И. Жестерев, Н.В. Грудина [и др.] // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: Тезисы докладов научной конференции. - Покров, 1983. - С. 172- 173.

31.Изучение стабильности генома вируса ринопневмонии лошадей при пассировании в культуре клеток МДВК / Л.Я. Цыбанова, С.Ж. Цыбанов, В.М. Балышев, Р.Т. Кадыкоев, М.И. Калабеков // Тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 30 - летию института: Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов. -Щелково, 2000. - С. 59 - 60.

32.Изыскание отечественных микроносителей для культивирования клеток / В.И. Жестерев, В.А. Сергеев, В.П. Хижинская, Н.В. Грудина [и др.] // Цитология. - 1986 .- Т. 27.-№4,- С. 465 - 469.

33.Иммунные реакции на вирус африканской чумы свиней / А.Д. Середа, С.Л. Соловкин, Л.Г. Фугина, В.В. Макаров // Вопросы вирусологии. - 1992. -№ 3. - С. 168- 170.

34.Инструкция о мероприятиях по предупреждению и ликвидации африканской чумы свиней. - М., 1980. - 14 с.

35.Исследование генома вакцинного штамма вируса бешенства при пассировании в культурах клеток / В.В. Недосеков, М.А. Наумкин, Я.С. Цыбанов, В.В. Куриннов, JI.A. Щетникова, В.М. Балышев // Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов: тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 30 - летию института. - Щелково, 2000. - С. 38 - 39.

36.Использование микроносителей ДЭАЭ - сефадекс / Н.И. Краснова, Ф.Г. Нагиева, Т.А. Бектемиров [и др.] // Вопросы вирусологии. - 1984. - №1. - С. 51 - 55.

37.Использование перевиваемых линий клеток для размножения штамма «Катанга - 350» вируса АЧС / В.И. Репин, Ю.И. Петров, A.B. Киселев, С.Г. Юрков, JI.J1. Черятников, Н.В. Черных, Э.Г. // Классическая чума свиней -неотложные проблемы науки и практики: Материалы научно - практической конференции ВНИИВВиМ / ГНУ ВНИИВВиМ. - Покров, 1995. - С. 139 -140.

38.Каламина, Т.В. Персистенция вируса АЧС в культуре клеток ПСГК / Т.В. Каламина, В.И. Жестерев // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции ВНИИВВиМ. - Покров, 1992. - С. 36 - 37.

39.Калантаенко, Ю.Ф. Выращивание вируса африканской чумы свиней в культуре перевиваемых клеток: дис. ...канд. вет. наук. 16.00.03 / Калантаенко Юрий Федорович - Покров, 1982. - 155 с.

40.Клинические признаки и патоморфологические изменения у домашних свиней при подостром течение африканской чумы свиней на территории Российской Федерации / A.C. Белянин, Д.В. Колбасов, В.В. Куриннов, A.B.

Рыжова, B.B. Пронин, Г.В. Корнева // Ветеринарная патология. - 2011. - №4. -С.36 - 39.

41.Ковалев, H.A. Африканская чума свиней: клинико-эпизоотологическое проявление, диагностика и профилактика / H.A. Ковалев, A.A. Гусев, П.А. Красочко, A.C. Ястребов // Белорусское сельское хозяйство. - 2010. - № 1. - С. 53 - 55.

42.Коваленко, Я.Р. Африканская чума свиней / Я.Р. Коваленко, М.А. Сидоров, Л.Г. Бурба. - М.: Колос, 1972. - С. 95 - 102.

43.Коваленко, Я.Р. Африканская чума свиней / Я.Р. Коваленко. - М.: Колос, 1972. - 200 с.

44.Коваленко, Я.Р. Опыты по адаптации вируса африканской чумы свиней / Я.Р. Коваленко, М.А. Сидоров, Л.Г. Бурба // Доклады ВАСХНИЛ. - 1966. -№2. - С.36 - 39.

45.Козлова, Д.И. Современные проблемы африканской чумы свиней / Д.И. Козлова, В.А. Бесхлебнов. - М.: ВНИИТЭИСХ, 1980. - 60 с.

46.Кокорев, B.C. Неспецифическая резистентность культур тканей, выращенных в среде с сывороточными липидными ингибиторами к некоторым арбовирусам / B.C. Кокорев, Р.В. Филлиповец // Вопросы вирусологии. - 1973. - №3. - С.266 - 271.

47. Колонцов, A.A. Локализация мажорных полипептидов вируса африканской чумы свиней и вирусассоциированных ферментов в структуре вирионов / A.A. Колонцов // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология.- 1995.- №3.-С. 34 - 38.

48.Куриннов, В.В. Вспышка африканской чумы в хозяйстве закрытого типа [Краснодарский край, ноябрь 2008 г.] / В.В. Куриннов, О.Ю. Черных, C.B. Миколайчук // Животноводство России. - 2009. - №4. - С. 29 - 31.

49.Курченко, Г. А. Оценка эпизоотической ситуации в отношении африканской чумы свиней и организация возможных мер борьбы и надзора за распространением болезни в регионе оз. Алаотра, Мадагаскар (Мадагаскар, Франция) / Г.А. Курченко // РЖ Ветеринария. - 2007. - №3. - С. 35.

50.Лакин, Г.Ф. Биометрия: учеб. пособие для биол. спец. вузов. - 4 изд. / Г.Ф. Лакин. - М.: Высшая школа, 1990. - 352 с.

51.Ликвидация африканской чумы свиней в Республике Абхазия / В.Н. Герасимов, С.А. Кукушкин, A.B. Мищенко, В.В. Никифоров, Э.А. Аншба, H.A. Власов, С.С. Яковлев, Д.В. Колбасов, В.М. Балышев, В.В. Куриннов, С.П. Живодеров // Ветеринария. - 2008. - №3. - С. 19 - 24.

52.Макаров, В.В. Апоптоз при африканской чуме свиней / В.В. Макаров, С.Ф.Чевелев, Е.К. Сенечкин, А.Д. Середа // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: материалы научно - практической конференции ВНИИВВиМ «Классическая чума свиней - неотложные проблемы науки и практики». - Покров, 1994. - С. 139.

53.Макаров, В.В. Африканская чума свиней: монография / В.В. Макаров. -М.: Российский университет дружбы народов, 2011. - 269 с.

/

54.Медуницын, Н.В. Вакцинология / Н.В. Медуницын. - М.: Триада-Х, 1999.- 272 с.

55.Никольский, H.H. Пролиферация клеток в культуре / H.H. Никольский // Биология клетки в культуре. - Л.: Наука, 1984. - С. 25 - 27.

56.Оптимизация условий постановки РЗГАд при типизации вируса АЧС / М.В.Болгова, В.М. Балышев, С.Г. Юрков, Ю.Ф.Калантаенко, Н.В. Князева // Задачи ветеринарной науки в реализации доктрины продовольственной безопасности Российской Федерации: материалы Международной научно-

практической конференции / ГНУ ВНИИВВиМ. - Покров, 2011. - С. 100 -105.

57.Пассивный иммунитет у новорожденных поросят при африканской чуме свиней / Э.В. Рудобельский, Ф.А. Бадаев, С.Ф. Чевелев, И.В. Никишин // Ветеринария. - 1992. - № 1. - С. 26 - 29.

58.Патент 2082758 Российская Федерация, C12N5/06. Штамм внутривидовых гибридных клеток suis domesfice, используемый для выделения и культивирования вируса классической чумы свиней / Л.П. Дьяконов, Е.В. Майджи, В.Н. Герасимов, Т.В. Гальнбек; Л.Н. Дудар; Н.В. Солдатова, Е.Е. Федорова, А.И. Егорова; ГНУ ВИЭВ. - № 94026140/13; заявл. 14.07.1994; опубл. 27.06.1997.

59.Патент 2439152 Российская Федерация, Штамм «Ставрополь 01/08» вируса АЧС для вирусологических, молекулярно - генетических и мониторинговых исследований / В.М. Балышев, Д.В. Колбасов, В.В. Куриннов, Ю.Ф. Калантаенко, А.Н. Жуков, С.Ж. Цыбанов, А.П. Васильев; ГНУ ВНИИВВиМ. - № 2010126641/10; заявл 30.06.2010; опубл. 10.01.2012.

60.Патогенетическая роль аллергических процессов при африканской чуме свиней / Ю.И. Петров, Н.И. Митин, В.М. Дубровин, В.А. Зеленцов // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции / ВНИИВВиМ. Ч.1.- Покров, 1992. - С.21 -24.

61.Патология клеток лимфоидной ткани, in vitro инфицированных вирусом африканской чумы свиней / Е.М. Каралова, Г.Е. Восканян, Х.В. Саркисян, Л.О. Аброян, A.C. Авестисян, Л.А. Акопян, З.Б. Семерджян, О.С. Закарян, Г.А. Арзуманян, З.А. Каралян // Вопросы вирусологии. - 2011. - №1. - С. 33 -37.

62.Петров, Ю.И. Иммунологические свойства вируса африканской чумы свиней / Ю.И. Петров // Ветеринария. - 1991. - №5. - С. 20 - 22.

63.Пинаев, Г.А. Культуры клеток животных и биотехнология / Г.А. Пинаев // Культивирование клеток животных и человека: тезисы докладов. -Пущино, 1985. - С.72 - 73.

64.Природная очаговость африканской чумы свиней / В.В. Макаров, A.A. Гусев, Е.В. Гусева [и др.] // Экология и животный мир. - 2010. - №2. -С.З - 13.

65.Проблемы разработки вакцины при африканской чуме свиней / И.Ф.

Вишняков, Ю.И. Петров, A.B. Киселев, JI.JI. Черятников //Актуальные

вопросы ветеринарной вирусологии: материалы научно - практической

_ «\

конференции ВНИИВВиМ «Классическая чума свиней - неотложные

проблемы науки и практики». - Покров, 1994. - С.144 - 145.

66.Разработка иммуноферментных методов диагностики африканской чумы свиней / В.В. Цибезов, Ю.О. Терехова, М.В. Баландина, O.E. Латышев, Т.В. Гребенникова, O.A. Верховский, Т.И. Алипер, В.Н. Шевкопляс // Ветеринария Кубани. - 2012. - №1. _ с.20 - 24.

67.Разработка культуральной инактивированной вакцины против КЧС / В.И. Жестерев, В.И. Балышева, Г.Н. Чурбанова, Р.Д. Устаров // Классическая чума свиней - неотложные проблемы науки и практики: материалы научной -практической конференции. - Покров, 1995. - С. 117.

68.Разработка микрометода типизации вируса африканской чумы свиней / М.В. Салина, Ю.И. Петров, В.М. Балышев, И.В. Федорищев, Н.В. Князева // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: материалы научно -практической конференции ВНИИВВиМ «Классическая чума свиней -неотложные проблемы науки и практики». - Покров, 1994. - С. 143 - 144.

69.Реактогенные и иммуногенные свойства аттенуированного штамма "Катанга - 350» вируса АЧС / В.И. Репин, Ю.И. Петров, JI.JT. Черятников, A.B. Киселев, Т.Р. Кирюхина // Классическая чума свиней - неотложные проблемы науки и практики: материалы научно - практической конференции ВНИИВВиМ / ГНУ ВНИИВВиМ. - Покров, 1995. - С. 140 - 141.

70.Роль диких животных в экологии вируса африканской чумы свиней / М.В. Салина, В.М. Балышев, JI.JT. Черятников [и др.] // Биолого-экологические проблемы заразных болезней диких животных и их роль в патологии сельскохозяйственных животных и людей. - Покров, 2002. - С. 40 -42.

71.Роль иксодофауны в эпизоотологии африканской чумы свиней / Ф.А. Бадаев, Э.В. Рудобельский, В.И. Никишин, С.Ф. Чевелев, JI.J1. Черятников, Н.В. Бадаева, В.М. Захаров, А.Н. Бурдов // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции / ВНИИВВиМ. Т. 1. - Покров, 1992. - С. 45 - 46.

72.Самуйленко, А .Я. Основы технологии производства ветеринарных биологических препаратов / А.Я. Самуйленко, Е.А. Рубан. - М., 2000. - Т.1. -С. 190-241.

73.Селянинов, Ю.О. Вирус африканской чумы свиней: физическое картирование генома штаммов / Селянинов Ю.О., Балышев В.М., Цыбанов С.Ж. // Вестник РАСХН. - 2000. - № 5. - С. 75 - 76.

74.Селянинов, Ю.О. Физическое картирование генома вируса африканской чумы свиней / Ю.О. Селянинов, Е.К. Сенечкина // Доклады РАСХН. - 1995. -№2. - С. 37 - 39.

75.Семенихин, A.JI. Африканская чума свиней / A.J1. Семенихин // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2008. - № 1. - С. 15 - 18.

76.Сенечкина, E.K. Синтез РНК в культуре клеток, зараженной вирусом африканской чумы свиней / Е.К. Сенечкина, В.В. Макаров, Л.П. Бучацкий // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 1993. - № 4. -С. 65 -69.

77.Сергеев, В.А. Вирусы и вирусные вакцины / В.А. Сергеев, Е.А. Непоклонов, Т.Н. Алипер. - М.: Библиотека, 2007. - 524 с.

78.Сергеев, В.А. Влияние трипсинизации на рост клеток и размножение вируса ящура и болезни Ауески / В.А. Сергеев, В.П. Хижинская // Сельскохозяйственная биология. - 1967. - №2. - С.26 - 36.

79.Сергеев, О.В. Испытание аттенуированного штамма вируса эпизоотической диареи свиней в экспериментальных условиях / О.В. Сергеев, Т.И. Алипер, А.Н. Мухин, В.А. Сергеев // Ветеринария. - 2010. - № 1. - С. 21 - 25.

80.Середа, А.Д. Белки вируса африканской чумы свиней / А.Д. Середа, Д.В. Колбасов // Научный журнал КубГАУ. - 2012. - №77(03). [Электронный ресурс]. - http://ej.kubagro.ru/2012/03/pdf/48.pdf

81.Сероиммунологическая классификация природных изолятов вируса африканской чумы свиней / И.Ф. Вишняков, Н.И. Митин, Ю.И. Петров, Л.Л. Черятников, A.B. Киселев, В.А. Бурлаков, В.М. Балышев, И.В. Федорищев, Ю.П. Моргунов // Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: материалы научной практической конференции /ГНУ ВНИИВВиМ. - Покров, 1995. -С.141 - 143.

82.Стегний, М.Ю. Выделение вирусов в культуре клеток и методы их идентификации. Животная клетка в культуре. - 2 изд. / М.Ю. Стегний, A.A. Поздняков, Л.П. Дьяконов; под редакцией Л.П. Дьяконова. - М.: Спутник, 2009.-521 -530 с.

83.Стимуляция пролиферации клеток в культуре и репродукции в них вирусов комбинированием сывороток крови разных видов животных / И.М. Ганиев, Н.И. Гурьянов, Р.Я. Гильмутдинов, В.Г. Гумеров, P.P. Шарафиева P.P. // Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний: материалы Международного симпозиума. - Ч. 2. - Казань, 2005. - С. 92 - 96.

84.Сюрин, В.Н. Ветеринарная вирусология / В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина. - М.: Колос, 1984.-376 е., ил. - (Учебники и учеб. пособия для высших с.-х. учеб. заведений).

85.Сюрин, В.Н. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьёв, Н.В. Фомина. - Москва: ВНИТИБП, 1998. - 770787 с.

86.Филогенетический анализ полевых изолятов вируса африканской чумы свиней / И.М. Калабеков, A.A. Елсукова, А.Г. Шендрик, С.Ж. Цыбанов, Д.В. Колбасов, К. Галлардо, Е. Мартин, М. Ариас // Ветеринария. - 2010. - №5. - С. 31-33.

87.Чепелева, E.H. Эпизоотологическая и социальная опасность африканской чумы свиней в Южном Федеральном округе РФ: эпизоотологический мониторинг: дис. ... канд. вет. наук. - Нижний Новгород, 2010,- 168 с.

88.Черятников, Л.Л. Получение аттенуированных вариантов из различных изолятов вируса африканской чумы свиней и их сравнительная оценка / Л.Л. Черятников, Ю.И. Петров, Н.И. Митин // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: материалы научной конференции. Ч. 1. - Покров, 1992. - С. 52.

89.Чумак, P.M. Таксономическая принадлежность вируса АЧС / P.M. Чумак // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и

эпизоотологии: материалы научной конференции. 4.1. - Покров, 1992. - С. 32 -34.

90.Шафеева, P.C. Культуральная антирабическая вакцина на клетках Vero / P.C. Шафеева, A.B. Фролова // Цитология. - 1994. - Т. 36.-№ 6. - С. 588.

91.Шубина, Н.Г. Гиперчувствительность замедленного типа и патогенез вирусной геморрогичекой лихорадки (африканской чумы свиней) / Н.Г. Шубина, A.A. Колонцов, В.В. Макаров // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 1994.-Т. 118.-№8.-С. 168- 170.

92.Шуляк, Б.Ф. Африканская чума свиней / Шуляк Б.Ф. // Российский ветеринарный журнал Сельскохозяйственные животные. - 2008. - № 3. - С. 36-37.

93.Экспериментальное воспроизведение АЧС у европейских диких свиней / С.А. Белянин, А.П. Васильев, Д.В. Колбасов, В.М. Балышев, В.М. Лыска, Ю.Ф. Калантаенко, А.Н. Жуков, С.Н. Зубаирова, A.B. Савин, О.Ю. Черных, В.В. Куринов // Ветеринарная медицина. - 2011. - №95. - С. 13 - 15.

94. Эпизоотическая ситуация по АЧС на территории Российской Федерации в 2012 г. (по данным на 15.10.2012 г.)/ Официальный сайт Россельхознадзора [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.fsvps.ru/fsvpdocs/ru/iac/asf/2012/15102012/06.pdf. - Загл. с экрана.

95.African swine fever / A.D. Glock, R.D.W.L. Mengeling, R.H.C. Penny, E. Scholl, B. Straw // Diseases of swine, 6th Edn. Ames / USA, Iowa State University Press, 1986.-P. 237 -245.

96.African swine fever / A.D. Leman, B.E. Straw, W.L. Mengeling, S. Dallaire, D.J. Taylor // Diseases of Swine, 9th Edition, Iowa State University Press, 2006. -P. 93 - 102.

97.African swine fever. Demonstration of the viral antigen by means of immunofluorescence / P. Boulanger, G.L. Bannister, A.S. Greig, D.P. Gray, G.M. Ruckerbauer, N.G. Willis // Canad. J. Comp.Med. - 1967. - Vol.31, №1. - P. 16 -23.

98.African swine fever virus DNA: deletion and addition during adaptation to growth in monkey kidney cells / E. Tabares, I. Olivares, C. Santurde, M.J. Garcia,

E. Martine, M.E. Carnero // Arch. Virol. - 1987. - V. 97. - P. 333 - 346.

99.African swine fever virus DNA in soft ticks, Senegal / L. Vial, B. Wieland,

F. Jori [et al.] // Emerg. Infect. Dis. - 2007. - Vol. 13. - P. 1928 - 1931.

100. African swine fever virus encodes a serine protein kinase which is packaged into virions / S.A. Baylis, A.H. Banham, S. Vydelingum [et al.] // J. Virol. - 1993. - Vol. 67, № 8. - P. 4549 - 4556.

101. African swine fever virus encodes two genes which share significant homology with the two largest subunits of DNA-dependent RNA polymerases / R.J. Yanez, M. Bpursnell, M.L. Nogal [et al.] // J. Nucleic Acids Res. - 1993. -Vol. 21, № 10.-P. 2423 -2427.

102. African swine fever: how can global spread be prevented? / S. Costard, B. Wieland, W. Glanville, F. Jori, R. Rowlands, W. Vosloo, F. Roger, D.U. Pfeiffer, L.K. Dixon // Phil. Trans. R. Soc. B. - 2009. - Vol. 364. - P. 2683 -2696.

103. African swine fever virus infection in the argasid host, Ornithodoros porcinus porcinus / S.B. Kleiboeker, T.G. Burrage, G.A. Scoles, D. Fish, D.L. Rock //.J Virol. - 1998. - № 72. - P. 1711 - 1724.

104. African swine fever virus infection of the bush pig (Potamochoerus porcus) and ils significance in the epidemiology of the disease / E.C. Anderson,

G.H. Hutchings, N. Mukarati [et al.] // Vet. Microbiol. - 1998. - Vol. 62, № 1. - P. 1 - 15.

105. African swine fever virus structural protein pE120R is essential for virus transport from assembly sites to plasma membrane but not for infectivity / G. Andres, R. Garcia-Escudero, E. Vinuela, M.L. Salas, J.M. Rodriguez // J Virol. -2001. - Vol.75. - P. 6758 - 6768.

106. A highly sensitive and specific gel-based multiplex RT-PCR assay for the simultaneous and differential diagnosis of African swine fever and Classical swine fever in clinical samples/ M. Aguero, J. Fernandez, L.J. Romero, M.J. Zamora, C. Sanchez, S. Belak, M. Arias, J.M. Sanchez-Vizcaino // Vet Res. -2004. - Vol.35. -P.551 - 563.

107. An investigation into natural resistance to African swine fever in domestic pigs from an endemic area in southern Africa / M.L. Penrith, G.R. Thomson, A.D. Bastos [et al.] // Rev. Sci. Tech. - 2004. - Vol. 23. - P. 965 - 977.

108. An outbreak of African swine fever in Nigeria: virus isolation and molecular characterization of the VP2 gene of a first isolate from west Africa / S.O. Odemuyiwa, I.A. Adebayo, W. Ammerlaan [et al.] // Virus Genes. - 2000. -Vol. 20, №2. - P. 139 - 142.

109. Antigenic relationships among strains of african swine fever virus / J.D. Vigario, A.M. Terrinha, J. Moura, J.F. Nunes // Arch. ges. Virusforsch. -1974. - Vol. 45, № 3. _ p. 272 - 277.

110. Apoptosis induced in an early step of African swine virus entry into Vero cell does not require virus replication / A.L. Carrascosa, M.J. Bustos, M.L. Nogal [et al.] // J. Virol. - 2002. - Vol. 294. - P. 372 - 382.

111. Arias, M. African swine fever eradication: the Spanish model / M. Arias, J.M. Sanchez - Vizcaino // Trends in Emerging Viral Infections of Swine. -Iowa, 2002. - P. 133 - 139.

112. Assessent of interactions between African swine fever virus, bushpigs (Potamochoerus larvatus), Omithodoros ticks and domestic pigs in north-western

117

Madagascar / J. Ravaomanana, F. Jori, L. Vial [et al.] // Transboundary and Emerging Diseases. - 2011. - Vol. 58. - P. 247 - 254.

113. Boinas, F.S. Transmission of African swine fever virus / F.S. Boinas, P.J. Wilkinson, A. Galo // Proc. Workshop Coordinat. Agricult. Res. - 1993. - P. 211 -222.

114. Botija, C. Diagnostic differential de routine de la peste porcine classique et de la peste porcine africaine par F immunofluorescence et F hemadsorption associees / C. Botija, A. Ordas //Bull. Off.int. Epiz. - 1969. - Vol. 72. - P. 763 - 784.

115. Botija, S. Modification of the African swine fever virus by passage in cell cultures / S. Botija // Bull. Off. Int. Epiz. - 1963. - Vol. 60. - P. - 901 - 919.

116. Carrasco, L. Changes in macrophages in spleen and lymph nodes during acute African swine fever: expression of cytokines / L. Carrasco, J.C. Gomez-Villamandos // Vet. Immunol. Immunopathol. - 2002. - Vol. 90. - P. 11 -22.

117. Carrascosa, A.L. Production and titration of African swine fever virus in porcine alveolar macrophages / A.L. Carrascosa, J.F. Santaren, E. Vinuela // Virol. Methods. - 1982. - Vol. 3. - P. 303 - 310.

118. Casai, I. Porcine Leukocyte Cellular Sunsinive to African Swine Fever Virus In Vitro / I. Casai, L. Enjuanes, E. Vinuela // J. Virology. - 1984. -Vol.52, №1. -P.37 -46.

119. Coggins, L. Segregation of a nonhemadsorbing african swine fever virus in tissue culture / L. Coggins // Cornell Vet. - 1968. - Vol. 58, №1. - P. 12 -20.

120. Comparison of large-scale mammalian cell culture systems with egg culture for the production of influenza virus A vaccine strains / J. Tree, C. Richardson, A. Fooks [et al.] // Vaccine. - 2001. - Vol.19. - P. 3444 - 3450.

121. Comprison of the genome sequences of nonpathogenic and pathogenic African swine fever virus isolates / D.A.G. Chapman, V. Tcherepanov, C. Upton, L.K. Dixon // J. Get. Virol. - 2008. - Vol. 89. - P.397 - 408.

122. Continuous porcine cell lines developed from alveolar macrophage: partial characterization and virus susceptibility / H.M. Weingartl, M. Sabara, J. Pasick [et al.] // Virol. Methods. - 2002. - Vol. 10. - P. 203 - 216.

123. Detection of African swine fever virus antibodies by immunoblotting assay/ M.J. Pastor, M.D. Laviada, J.M. Sanchez-Vizcaino, J.M. Escribano // Can J Vet Res. - 1989.-Vol. 53, № 1.-P. 105 - 107.

124. Development of a Taq Man PCR assay with internal amplification control for the detection of African swine fever virus / D.P. King, S.M. Reid, G.H. Hutchigs, S. Griersos, P.J. Wilkinson, L.K. Dixon, D.S. Bastos, T.W. Drew // J. Virol. Methods. - 2003. - Vol. 107, №1. - P. 53 - 61.

125. Development of new DNA vaccine strategies against African swine fever / E. Perez-Martin, J. Arguilaget, M. Perez-Filgueira, C. Gallardo, J. Pujols, M. Nofrarias, I. Diaz, N. Fernandez-Borges, J. Salguero, E. Blanco, J. M. Escribano, F. Rodriguez // Proceedings of the 7th International Congress of Veterinary Virology. - Lisbon, Portugal, 2006. - P.l 18.

126. Dixon, L.K. The structure and fraction of the African swine fever genome / L.K. Dixon // Rev. Sci., tech. Off. int. Epiz. - 1986. - Vol. 5, № 2. - P. 469-475.

127. Donald, C. Development of new cell liness for animal cell biotechnoloqy / C. Donald // CRC Crit Rev. Biotechnol. - 1990. - Vol. 10, № 2. -P. 155 - 178.

128. Edwards, J.F. The pathogenesis of thrombocytopenia and hemorrhage in African swine fever / J.F. Edwards // Dissertation Abstracts International. -1984.-Vol. 44, №9.-P. 2675.

129. Ekue, N.F. Epidemiology of African swine fever in Cameroon (swine fever) / N.F. Ekue // Dissertation Abstracts International. - 1990. - Vol. 50, № 12. -P. 5397.

130. Ekue, N.F. The effect of passage in pigs and pig bone marrow cultures on the genome of the Cameroon isolate (CAM/82) of ASF virus / N.F. Ekue, P.J. Wilkinson // Rev. Elevage Med. veter. Plays trop. - 1999. -T. 52, № 3/4 - P. 209 -213.

131. Endris, R.G. Experimental transmission of African nwine fever virus by the Tick Ornithodoros puertoricensis / R.G. Endris, T.M. Haslett, W.R. Hess // Med. Enthomol. - 1991. - Vol. 28. - P. 854 - 858.

132. Enhancing DNA immunization by targeting ASFV antigens to SLA-II bearing cells. / J.M. Argilaguet, E. Pérez-Martín, C. Gallardo, F.J. Salguero, B. Borrego, A. Lacasta, F. Accensi, I. Díaz, M. Nofrarias, M. Pujols, E. Blanco, M. Pérez-Filgueira, J.M. Escribano, F. Rodriguez // Vaccine. - 2011. - Vol. 29. -P.5379 - 5385.

133. Enjuanes, L. Isolation and Propertiesof the DNA of African Swine Fever Virus / L. Enjuanes, A. L. Carrscosa, E. Vinuela // J. gen. Virol. - 1976. -Vol.32.-P.479-492.

134. Enjuanes, L. Sensitivity of Macrophages from Different Species to African Swine Fever Virus / L. Enjuanes, I. Cubero, E. Vinuela // J. gen. Virol. -1977. - Vol. 34. -P.455 -463.

135. Experimental African Swine fever: apoptosis of lymphocytes and virus replication in other cells / J.C. Gomes - Villamandos, J. Hervas, A. Mendez,

L. Carrasco, J. M. Mulas, C. J. Villeda, P, J. Wilkinson, M.A. Siarra // J. Gen. Virol. - 1995. - Vol. 76. - P. 2399 - 2405.

136. Family Asfarviridae. Virus Taxonomy: Classification and Nomenclature of Viruses / L.K. Dixon, J.V. Costa, J.M. Escribano, M.H. Van Regen-Mortel, D.H. Bishob [et al.] // San Diego. - 2000. - P. 159 - 165.

137. Forman, A.J. The immunological response of pigs and guinea pigs to antigens of African swine fever virus / A.J. Forman, R.C. Wardley, P.J. Wilkinson // Arch. Virol. - 1982. - Vol. 74, № 3. - P. 91 - 100.

138. Geiger, W. Der derzeitige Stand unserer Kentnisse über die afrikanische Virusseuche der Schweine / W. Geiger // Deut. Tierarzt. Wschr. -1961, № 13. P. 384 - 388.

139. Genetic characterization of African swine fever viruses from outbreaks in southern Africa (1973-1999) / C.I. Boshoff, A.D. Bastos, L.J. Gerber [et al.] // Vet. Microbiol. - 2007. - Vol. 121. - P. 45 - 55.

140. Genetic stability of African swine fever virus grown in monkey kidney cells. Brief report / G. Santurde, F.R. Gonzalvo, M.E. Carnero, E. Tabares //Arch Virol. - 1988.-Vol. 98.-P.117 - 122.

141. Genetic variation of African swine fever virus: variable regions near the ends of the viral DNA / R. Blasco, I. Vega, F. Almazan, M. Aguero, E. Vinuela // Virology. - 1989. - Vol. 173. - P. 251 - 257.

142. Genotyping field strains of African swine fever virus by partial p72 gene characterization / A.D. Bastos, M.L. Penrith, C. Cruciere, J.L. Edrich, G. Hutchings, F. Roger, E.R. Couacy-Hymann, G. Thomson // Arch. Virol.- 2003. -Vol. 148. -P.693 -706.

143. Gierloff, B. Europaeisk og afrikansk swine pest, Nord / B. Gierloff // Vet. Med. - 1963. - Vol.15, № 5. P - 365 - 394.

144. Gill - Fernandes, C. Plague formation of African swine fever virus in chick embryo fibroblasts in the absence of C02 atmosphere / C. Gill - Fernandes, A. Garcia - Gancedo, V. Minondo // Arch. ges. Virusforsch. - 1976. - Vol. 52, №3. -P. 207-216.

145. Gonsalvo, R.V. Peste porcina africaine. Adaptation d'une souche de virus aux cultures de rein de porcine/ R.V. Gonsalvo, J. Haag, R. Carnero, B. Larenaudie // J. Med. Vet. - 1966. - Vol. 142, № 12. - P. 1237 - 1249.

146. Greig, A.S. African Swine Fever V. Cultivation of the Virus in Primary Pig Kidney Cells // A.S. Greig, P. Boulanger, G.L. Bannister// Can. J. Comp. Med. Vet. Sci. - 1967. - Vol. 31. - P. 24 - 31.

147. Hess, W.R. African swine fever virus / W.R. Hess // J. Virology. -1971. - № 9. - P. 1-33.

148. Hess, W.R. African swine fever: a reassessment / W.R. Hess // Adv. vet. Sci. comp. Med. - 1981. - № 25. - P. 39 - 69.

149. Hess, W.R. Propagation and modification of African swine fever virus in cell cultures // W.R. Hess, B.F. Cox, W.P. Heuschele, S.S. Stone // Amer. J. Vet. Res. - 1965. - Vol. 26. - P. 141 - 146.

150. Hess, W.R. The use of leukocyte cultures foa diagnosis of African swine fever / W.R. Hess, D. Tray // Bull.Epiz. Dis. Afr. - 1960. - № 8. - P. 317 -320.

151. Heuschele, W.P. Fluorescent antibody studies on African swine fever virus / W.P. Heuschele, L. Coggins, S.S. Stone // Amer. J. vet. Res. - 1966. - № 27.-477-484.

152. Highly Sensitive PCR Assay for Routine Diagnosis of African Swine Fever Virus in Clinical Samples / M. Agüero, J. Fernández, L. Romero, C. Sánchez

Mascaraque, M. Arias, J. M. Sánchez-Vizcaíno // J. Clin. Microbiol. - 2003. - Vol. 41, №9.-P. 4431 -4434.

153. Iddekinge, B.J.L.H. Genome analysis of Marek's disease virus strain CVL - 988: effect of cell culture passage on the inverted repeat regions / B.J.L.H. Iddekinge, L. Stenzler, K.A. Schat, H. Boerrigter, G. Koch // Avian Dis. - 1999. -Vol. 43, №2.-P. 182- 188.

154. Infection bursal disease live vaccines: changes in the virus porulation during serial passage in chickens and chicken embryo fibroblast cells / T. Yamaguchi, A. Setiyono, M. Kobayashi, S. Takigami, H. Fukushi, K. Hirai, // Avian Dis. - 2000. - Vol. 44, № 2. - P 284 - 290.

155. In vivo Study of Hemadsorption in African Swine Fever Virus Infected Cells / M.A. Sierra, J.C. Gomez - Villamandos, L. Carrasco, A. Fernandes, E. Mozos, J. Jover//J. Vet. Pathol. - 1991. - Vol.28. - P. 178 - 181.

156. Isolation of a non - haemadsorbing, non - cytopathic stain of African swine fever virus in Madagascar / M. Gonzague, F. Roget, A. Bastos, C. Burger, T. Randriamparany, S. Smondack, C. Cruciere // Epidemiol. Infect. - 2001. - Vol. 126. - P. 453 -459.

157. Jove, P. La peste porcine africaine en Espagne / P. Jove, C. Sanchez Botija // Bull. of. internat. epiz. - 1961. - Vol. 56. - P. 399 - 407.

158. Kinetics of African swine fever virus infection in Ornithodoros erraticus ticks / A.P. Basto, R.J. Nix, F. Boinas, S. Mendes, M.J. Silva, C. Cartaxeiro, R.S. Portugal, A. Leitao, L.K. Dixon, C. Martins /'/' J. Gen. Virol. -2006. - Vol.87. -P.1863 - 1871.

159. Larenaudie, B. Etude en microscopi electronique de 1'hemadsorption provoques par le virus de la peste porcine africaine / B. Larenaudie, J. Santucci, R. Carnero// Rec. Med. Vet. - 1967. - Vol.143, № 40. - P. 925 -935.

160. Larenaudie, B. La peste porcine africaine / B. Larenaudie, J. Haag, B. Lacaze // Enc. Vet. - 1964. - Vol. 21. - P. 172 - 177.

161. Larenaudie, B. La purification du virus de la peste porcine africaine par le fluorocarbone / B. Larenaudie, J. Taag, B. Carnero // Bull. off. Internat. Epizoot. - 1965. - Vol. 63, № 5 - 6. - P. 711 - 716.

162. Lucas, A. Freeich methods for laboratory diagnosis of swine fever and african swine fever / A. Lucas, I. Haag, B. Larenaudie // Bull.Off.int.Epiz. - 1965. - Vol. 63, № 5 - 6. - P. 723 - 731.

163. Malmquist, W.A. Hemadsorption and cytopathic effect produced by African swine fever virus in swine bone marrow and buffy coat cultures/ W.A. Malmquist, D. Hay // Am J Vet Res. - 1960. - № 21. - P. 104 - 108.

164. Malmguist, W.A. Propagation, modification and hemadsorption of African swine fever virus in cell cultures / W.A. Malmguist // Amer. J. Vet. Res. -1962.-Vol. 23.-P. 241 -247.

165. Malogolovkin, A. Molecular characterization of African swine fever virus isolates originating from outbreaks in the Russian Federation between 2007 and 2011 / A. Malogolovkin, A. Yelsukova , S. Tsybanov , D. Kolbasov // Vet. Microbiol. - 2012. - Vol.158, № 3 - 4. - P. 415 - 419.

166. Moura, N.I. Ultrastructural study of African swine fever virus reglication in cultures of swine bone marrow cells / N.I. Moura, I. Vigario, A. Terrinha//Arch. Virol. - 1975. - Vol. 48, № 1. - P. 59-66.

167. Maurer, F. Pathology of african swine fever-comparison with hog cholera / F. Maurer, R. J. Griesemer, T. Jones // Amer. J. Vet. Res. - 1958. - Vol. 19, №72.-P. 517 - 539.

168. Mellor, P.S. Mechanical transmission of capripox virus and African swine fever virus by Stomoxys calcitrans / P.S. Mellor, R.P. Kitching, P.J. Wilkinson // Research in Veterinary Science. - 1987. - Vol.43. - P. 109 - 112.

169. Mendes, A.M. Studies on the lapinisation of swine fever virus in Angola / A.M. Mendes, A. Dascalos // Bull. Off. Epiz. Dis. Afr. - 1955. - Vol. 3. -P. 9- 14.

170. Medus, C.A. Additional characteristics of diseases caused by the African swine fever viruses isolated from Brazil and Dominican Republic / C.A. Medus, A.H. Dardiri // Proc. Ann. Meet. U.S. Anim. Health Asso. - 1979. - Vol. 82.-P. 227 -239.

171. Methods for Growing and Titrating African Swine Fever Virus: Field and Laboratory Samples // A.L. Carrascossa, M.J. Bustos, P. Leon // Wiley Online Library.-2011.-Vol. 12.-P. 26.14.1 -26.14.25.

172. Molecular epidemiology of African swine fever in East Africa / B.L. Lubisi, A.D. Bastos, R.M. Dwarka [et al] // Arch. Virol. - 2005. - Vol. 150, № 12. -P. 2439-24 51.

173. Montgomery, R.E. On a form of swine fever occurring in British East Africa (Kenya colony) / R.E. Montgomery // J. Comp. Path. Therap. - 1921. - Vol. 34,№3.-P. 159- 191.

174. Neutralizing antibodies to African swine fever virus proteins p30, p54, and p72 are not sufficient for antibody-mediated protection / J.C. Neilan, L. Zsak, Z. Lu [et al] // J. Virol. - 2004. - Vol. 319. - P. 337 - 342.

175. Neutralizing antibodies to different proteins of African swine fever virus inhibit both virus attachment and internalization / P. Gomez-Puertas, F. Rodriguez, J.M. Oviedo, F. Ramiro-Ibanez, F. Ruiz-Gonzalvo, C. Alonso, J.M. Escribano // J. Virol. - 1996. - Vol.70. - P. 5689 - 5694.

176. Nix, R.J. Molecular epidemiology of African swine fever virus studied by analysis of four variable genome regions / R.J. Nix, C. Gallardo, G. Hutchings [et al] // Arch. Virol. - 2006. - Vol. 151, № 12. - P. 2475 - 2494.

177. Novel swine virulence determinant in the left variable region of the African swine fever virus genome / J.G. Neilan, L. Zsak, Z. Lu [et al.] // J. Virol. -2002. - Vol. 7, №7. - P. 3095 - 3104.

178. Phylogenetic analysis of ASFV strains and isolates / D. Kolbasov, S. Tcybanov, V. Balyshev, [et al] // 4th Annual meeting Epizone "Bridges to the Future" - Saint Malo, 2010. - P. 190.

179. Pastor, M.J. Comparison of two antigens for use in an enzyme-linked immunosorbent assay to detect African swine fever antibody / M.J. Pastor, M. Arias, J.M. Escribano // Am J Vet Res. - 1990. - Vol. 51. - P. 1540 - 1543.

180. Pathological changes in renal interstitial capillaries of pigs inoculated with two different strains of African swine fever virus // J. Gomez-Villamandos, J. Hervas, A. Mendaz [et al] // Comparative Pathology. - 1995. - Vol. 112. - P. 283 -298.

181. Penrith, M.L. African swine fever / M.L. Penrith, G.R. Thomson, A.D.S. Bastos // Infectious diseases of livestock (2nd edn) Oxford University Press, 2004. - Vol. 2. - P. 1087 - 1119.

182. Penrith, M.L. African swine fever / M.L. Penrith // Vet. Res. - 2009. -Vol. 76, № l.-P. 91 -95.

183. Penrith, M.L. Review of African swine fever: transmission, spread end control / M.L. Penrith, W. Vosloo // Afr. Vet. Assoc. - 2009. - Vol. 80, № 2. -P. 58-62.

184. Pini, A. Isolation and segregation of non-hemadsorbing strains of African swine fever virus / A. Pini // Vet. Res. - 1976. - Vol. 99. - P. 479 - 480.

185. Pini, A. Isolation of non-hemadsorbing strain of african swine fever virus from a natural outbreak of the disease / A. Pini, G. Wegenear // Vet.Rec. -1974.-Vol. 94.-P. 2.

186. Plaque assay for African swine fever virus on swine macrophages / M.J. Huston, M.L. Nogal, Y. Revilla [et al] // Arch. Virol. - 2002. - Vol. 147. - P. 1453 - 1459.

187. Polymerase chain reaction detection of the genome of African Swine Fever virus from natural infection in a nigerian Baby Warthog / N.J Luther, P.G Udeama, K.A Majiyagbe, D. Shamaki, J. Antiabong, Y. Bitrus, C.I. Nwosuh, O.A. Owolodun. // Nigerian Veterinary Journal. - 2007. - Vol. 28, № 2. - P. 35 - 47.

188. Potamochoerus porcus and ils significance in the epidemiology of the disease / E.C. Anderson, G.H. Hutchings, N. Mukarati [et al] // Vet. Microbiol. -1998. - Vol. 62, № 1. - P. 1 - 15.

189. Preclinical Diagnosis of African Swine Fever in Contact - Exposed Swine by a Real - Time PCR Assay / L. Zsak, M.V. Borca, G.R. Risatti, A. Zsak, R.A. French, G.F. Kutish, J.G. Neilan, J.D. Callahan, W.M. Nelson, D.L. Rock // Journal Of Clinical Microbiology. - 2005. - P. 112 - 119.

190. Production of influenza virus in serum-free mammalian cell cultures / O. Merten, J. Managuerra, C. Hannoun [et al] // Dev. Biol. Stand. - 1999. - Vol. 98.-P. 23 - 37.

191. Proinflammatory cytokines induce lymphocyte apoptosis in acute African swine fever infection / F.J. Salguero, P.J. Sanchez-Cordon, A. Nunez, M.M. Fernandez, J.C. Gomez-Villamandos //. J Comp Pathol. - 2005. - Vol. 132. -P. 289-302.

192. Quantitative PCR assays for mouse enteric flora reveal strain-dependent differences in composition that are influenced by the microenvironment

/ A.D. Alexander, R.P. Orcutt, J.C. Henry, J.Baker, A.C. Bissahoyo, D.W. Threadgill 11 Mammalian Genome. - 2006. - Vol. 17, № 11. - P. 1093 - 1104.

193. Rapid and biologically safe diagnosis of African swine fever virus infection by using polymerase chain reaction / Y. Steiger, M. Ackermann, C. Mettraux, U. Kihm. // J. Clin. Microbiol. - 1992. - Vol. 30, № 1. - P. 1.

194. Replication of African swine fever virus DNA in infected cell / G. Rojo, R. Garcia-Beato, E. Vinuela [et al] // J. Virol. - 1999. - Vol. 257. - P. 524 -536.

195. Requirement of Cell Nucleus for African Swine Fever Virus Replication in Vero Cells //J. Ortin, E. Vinuela // J. Virology. - 1977. - Vol. 21, №3. - P. 902-905.

196. Restriction site map of African swine fever virus DNA / J.M. Almendral, R. Blasco, V. Ley, A. Beloso, A. Talaver, E. Vinuela // Virol. - 1984. -Vol. 133. - P. 258-270.

197. Rodriguez, J.M.Intermediate class of mRNAs in African swine fever virus / J.M. Rodriguez, M.L. Salas, E. Vinuela // J. Virol. - 1996. - Vol. 70. - P. 8584 - 8589.

198. Salas, M. Asfrican swine fever (Asfarviridae)/ M. Salas/ In: R.G.W. Allan Granoff (ed.)// Encyclopedia of Virology. - London: Academic Press, 1999. - 1997 pp.

199. Salas, J. Establishment of a Vero Cell Line Persistently Infected with African Swine Fever Virus // J.Salas, E. Vinuela // J. Virology. - 1986. - Vol. 58, №2. - P. 676 - 679.

200. Sanchez- Botija, C. African swine fever / C. Sanchez- Botija, A. Ordas // Seminar in the EEC Programme. Madrid, 1976. - P. 658 - 668.

201. Sanchez-Botija, C. African swine fever. New developments / C. Sanchez-Botija // Rev. sei. tech. Off. int. Epiz. - 1982. - Vol.1, № 4. - P. 1065 -1094.

202. Sanchez- Botija, C. El diagnosticode la peste porcine africana por la prueba de la hemadsorption / C. Sanchez- Botija, R. Botija // Bull. Off Int. Epixoot. - 1965. - Vol. 63. - P. 239 - 250.

203. Sanchez- Botija, C. La immunofluorescencica indirecta aplicada a la investigation de anticorps de la Peste porcine africane. Su valor Para el diagnostici / C. Sanchez- Botija, A. Ordas, J.G. Gonzales // Rev.Vet.Venez. - 1979. - Vol. 29, № 172.-P.283 - 303.

204. Sanchez - Botija, R. Preparación de cultivos de leucocitos de cerdo para el diagnostic de la peste porcina Africana / R. Sanchez Botija // Rev. Patron. Biol. Anim. - 1967. - Vol. 11, №2. - P. 59 - 72.

205. Schlafer, D.H. The pathogenesis of African swine fever in pregnant sows, their fetuses and neonates / D.H. Schlafer // Dissertation Abstracts International. - 1983. - Vol. 43, № 6. - P. 1759.

206. Serological and immunohistochemical study of African swine fever in wild boar in Spain / J. Perez, A.I. Fernandez, M.A. Sierra [et al] // Vet. Ree. -1998. - Vol. 143. - P. 136 - 139.

207. Serological behavior of isolated African swine fever virus / J.D. Vigario, A.M. Terrinha, A.Z. Bastos [et al] // Arch. Ges.Virusforschung. - 1970. -Vol. 31. - P. 387-389.

208. Southern, E.M. Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis / E.M. Southern // J. Mol. Biol. - 1975. -Vol. 98.-P.503 - 518.

209. Spier, R.E. The production of foot-and-mouth diseasevirus from BHK-21 c 13 cells growth on the surface of DEAE-Sephadex A50 beads / R.E. Spier, J.P. Whiteside // Biotechnol. Bioeng. - 1976. - Vol. 18. - P.659 - 667.

210. The African swine fever virus proteins p54 and p30 are involved in two distinct steps of virus attachment and both contribute to the antibody-mediated protective immune response / P. Gomez-Puertas, F. Rodriguez, J. M. Oviedo, A. Brun, C. Alonso, J. M. Escribano // Virology. - 1998. - Vol. 243. - P. 461 - 471.

211. The diagnosis of African swine fever by immunofluorescence / P.H. Bool, A. Ordas, C. Sanchez Botija // Bui Off Int Epizoot. - 1969. - Vol.72. - P. 819 -839.

212. The low - virulent African swine fever virus (ASFV/NH/P68) induces enhanced expression and production of relevant regulatory cytokines on porcine macrophages in comparison to the highly virulent ASFV/L60 / S. Gill, N. Sepulveda, E. Albina [et al.] // Arch. Virol. - 2008. - Vol. 153. - P. 1845 - 1854.

213. The pathogenesis of African swine fever in the resistant bush pig / C.A. Oura, P.P. Powell, E. Anderson [et al] // Gen. Virol. - 1998. - Vol. 79. - P.

1439 . 1443.

214. Titration of African Swine Fever Virus // L. Enjuanes, A.L. Carrascosa, M.A. Moreno, E. Vinuela // J. get. Virol. - 1976. - Vol. 32. - P. 471 -477.

215. Towards a DNA-vaccine against African swine fever: an ongoing effort / A. Lacasta, M. Ballester, F. Accensi, J. M. Argilaguet, E. Perez-Martin, M. Mora, P. L. Monteagudo [et al] // Proceedings of 6th Symposium on Emerging and Re-emerging pig diseases. - 2011. - № 23. - P. 66.

216. Tray, D. E. Blood changes in swine with african swine fever / D.E. Tray, G. R. Scott // Amer. J. Vet. Res. - 1957. - Vol. 18, № 68. - P. 484 - 490.

217. Tray, D.E. Resistens of viremia and immunity on African swine fever / D.E. Tray 11 J.Vet. Res. - 1957. - Vol.18. - P. 811 - 816.

218. Tubiash, H.J. Quantity production of leucocyte for use in haeamdsorption test with African swine fever / H.J. Tubiash // Amer. J. vet. Res. -1963.-Vol. 24. -P.381 - 384.

219. Vaccination with viral protein-mimicking peptides postpones mortality in domestic pig infected by African swine fever virus / V. Ivanov, E.E. Efremov, B. Novikov, V.M. Balysev, S. Tsibanov, T. Kalinovsky, D.V. Kolbasov, A. Niedzwiecki, M. Rath//Mol. Med. Report. -2011. - № 4. -P. 395 -401.

220. Variable and constant regions in African swine fever virus DNA / R. Blasco, M. Aguero, J.M. Almendral, E. Vinuela // Virol. - 1989. - Vol. 168. - P. 330 - 338.

221. Velho, E.L. La peste porcine africaine / E.L. Velho // Bull. off. internat, epiz. - 1957. - Vol. 48. - P. 395 - 402.

222. ViralZone [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://expasv.org/viralzone/all by species/12.htmr.

223. Virus association to lymphocytes in acute African swine fever / L. Carrasco, F. Chacon de Lara, J. Martin de las Mulas // Vet. Res. - 1996. - Vol. 27. -P. 305 -312.

224. Virus-specific cell receptors are necessary, but not sufficient, to confer cell swine fever virus / A.L. Carrascosa, M.J. Bustos, I. Galindo [et al] // Arch. Virol. - 1999. - Vol. 144. - P. 1309 - 1321.

225. Wardley, R.C. African Swine Fever Virus Replication in Porcine Lymhocytes / R.C. Wardley, P. J. Wilrinson, F. Hamilton // J. gen. Virol. - 1977. -Vol. 37, №5.-P. 425 -427.

226. Wardley, R.C. The growth of africsn swine fever virus in pig monocytes and macrophages / R.C. Wardley, P.J. Wilkinson // J. Gen. Virol. -1977.-Vol. 38.-P. 183 - 186.

227. Wezel, A.L. Growth of cell strains and primary cells on microcarries in homogenous culture / A.L. Van Wezel // Nature. - London, 1967. - Vol. 216. — P.64 - 65.

228. Wilkinson, P.J. African swine fever // Manual of Standards for Diagnostics Test and Vaccines / P.J. Wilkinson // Office International des Epizooties. - Paris, 2000. - P. 189 - 198.

229. Wilkinson, P.J. Transmission of the African swine fever virus / P.J. Wilkinson // Prev. Vet. Med. - 1984. - № 2. - P. 71.

230. Zsak, L. Regulation of apoptosis in African swine fever virus- inlccted macrophages / L. Zsak, J.G. Neilan // Scientific World Journal. - 2002. - Vol. 2, № 5. -P. 1186- 1195.

российская академия сельскохозяйственных наук государственное научное учреждение всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии

утверждаю

академик - секретарь Отделения 'ветеринарной медицины "" " '"-i4t Россельхозакадемии, /5акаДеМик Россельхозакадемии i ^ ^ J/ A.M. Смирнов

Vе , 2012 г.

^ * , >/

МЕТОДИЧЕСКИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

по адаптации вируса африканской чумы свиней к переви ваемым линиям клеток

Покров 2012 г.

Методические положения разработаны в лабораториях Биотехнологии и Музейных штаммов ГНУ ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии Россельхозакадемии.

Разработчики: аспирант Е. Ю. Прудникова; проф. Балышев B.M., д.б.н. Балышева В.И.

Методические положения рассмотрены и одобрены на секции «Ветеринарная биотехнология» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (Протокол № 3 от 27 сентября 2012г.)

Рецензенты: д.б.н., проф. Еремец В.И.(ВНИТИБП), д.б.н., проф. Юрков С.Г. (ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии).

Методические положения предназначены для специалистов диагностических лабораторий и научно-исследовательских институтов соответствующего профиля.

Ответственный за выпуск: заведующий сектором инфекционной и инвазионной патологии Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии, кандидат ветеринарных наук A.B. Суворов.

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ С Г Л 1,С КО ХОЛЯ ЙСТИГ. ШИ.1Х ИАУК ГО С УДЛ PCT1I 111 I МО К НАУЧНОЕ УЧ F. 1'ЕЖДК HUE

ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО - HCCJt ЕДОВАТЕЛ ЬСКИЙ ИНСТИТУТ ВЕТЕРИНАРНОЙ ВИРУСОЛОГИИ И МИКРОБИОЛОГИИ

УТВЕРЖДАЮ

Акадсми к-сскрсгарь Отделения нетеринарний медицины Россел ьх о;и к адем ми, #'• ■'.'"Экадемик Росхеиьхшакадсмии , лАм Смирнов

V - 2011 г

V, ^Т---. </

Г.

МЕТОДИЧЕСКИЕ ПОЛОЖЕНИЯ ПО ОЦЕНКЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ сред и сывороток крови для суспензионного КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК И ВИРУСОВ

Покров 2011г

Методические положения разработаны в лаборатории Биотехнологии ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии.

Разработчики:

д.б.н. ведущий научный сотрудник Балышева В.И., к.в.н. старший научный сотрудник Лаптева О.Г., аспирант Нестеров Е. А., аспирант Прудникова Е.Ю.

Методические положения рассмотрены и одобрены на заседании секции «Инфекционной патологии животных» отделения ветеринарной медицины РАСХН Протокол № 4 от 23 сентября 2011 г.

Рецензенты:

Зав. лабораторией Биотехнологии ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии, доктор биологических наук, профессор С.Г. Юрков

Зам директора по НИР ВНИТИБП, доктор биологических наук, профессор В.И. Еремец

Методические положения предназначены для сотрудников биопредприятий и научно-исследовательских учреждений ветеринарного профиля.

Ответственный за выпуск: главный специалист Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии, кандидат ветеринарных наук A.B. Суворов.

Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р. Коваленко Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВИЭВ Россельхозакадемии)

109428, Москва, Рязанский проспект, 24, к.1 т. 970-03-69, 785-84-25

№ ¡г'¥__» 2013 г.

СПРАВКА О ДЕПОНИРОВАНИИ внутривидовой гибридной сублинии клеток СПЭВ ТК" с лимфоцитоподобными клетками (А4С2/9К)

в Специализированной Коллекции перевиваемых соматических клеточных культур сельскохозяйственных и промысловых животных РККК (СХЖ РАСХН) ВИЭВ при Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко (ВИЭВ).

Учреждение депозитор: ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии, г. Покров.

Авторы: Прудникова Е.Ю., Балышева В.И., Гальнбек Т.В., Балышев В.М.

Учреждение депозитарий: ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко, (ВИЭВ) 109428 г. Москва, Рязанский проспект, 24, к.1.

Дата депонирования: 31 октября 2013 г.

Линии клеток присвоен коллекционный номер: №87.

Штамм депонирован с научным описанием.

Телефон коллекции: [phone].

Директор ВИЭВ,

Академик РАСХН / ^ м и Гулкжин

8v

3 Т-а

Руководитель специй! г .

Коллекции (СХЖ РА© ? т.В. Гальнбек

Российская академия сельскохозяйственных наук

ГНУ ВНИИВВиМ РОССЕЛЬХОЗАКАДЕМИИ 601120, г. Покров, Владимирской обл.

ПАСПОРТ НА СЫВОРОТКУ

1 Видовая принадлежность Типоспецифическая ЗГАд сыворотка к вирусу АЧС - 8 типа

2 Вид донора Свинья

3 Схема получения Заражение и двукратная гирепиммунизация вирусом АЧС шт Ставрополь, обескровлен через 30 дней после I ипериммунизации

4 Активное! 1, сыворотки и ее характеристика Титр в РЗГА 1:80 в отношении ипаммоь вируса АЧС 8-го серотипа

5 Наличие неспецифических ингибиторов Отсутствуют

6 Метод консервации Без консерванта

7 Объем серии (к-во ампул) 40 ампул

8 Дата приготовления 06.05.2011

9 Условия и сроки хранения При минус 40 1,С в течение 20 ле1

10 Дополнительные сведения Не контаминирована бактериальной и грибной микрофлорой Не содержит вирус АЧС а

11 Сыворотку получили с Балышев В.М -- Прудникова Е.Ю ^/й/Р

Сыворотку лиофинизировали Моргунов Ю.П., Парилов C.B.

Зав. лабораторией Музейных штаммов (jjiâûoi-é-éf В.M. Балышев