Ассоциация рака гортани с онкогенными вирусами папилломы человека и Эпштейна-Барр тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат биологических наук Шилова, Ольга Юрьевна

• Шилова, Ольга Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шилова, Ольга Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Эпидемиологические аспекты и факторы риска развития рака гортани

1.2. Современные представления о механизмах вирусного канцерогенеза.

1.2.1. Механизмы канг}ерогенеза, обусловленного вирусом папилломы человека.

1.2.2. Ассоциация вируса папилломы человека с опухолями верхних дыхательных путей.

1.3. Эпидемиология и молекулярно-генетическая организация вируса Эпштейна-Барр.

1.3.1. Общая характеристика вируса Эпштейна-Барр.

1.3.2. Дифференциальная генная экспрессия ВЭБ в латентно инфицированных клетках

1.3.3. Ассоциация вируса Эпштейна-Барр с опухолевыми заболеваниями человека.

1.4. Основные механизмы биотрансформации и детоксикации ксенобиотиков и роль в развитии рака гортани.

1.4.1. Механизмы биотрансформации глутатион-Б-трансфераз.

1.4.2. Полиморфизм глутатион-Б-трансфераз.

1.4.3. Глутатион-5-трансферазы и риск развития рака гортани

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика клинического материала.

2.2. Методы исследования

2.3. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Частота детекции вируса папилломы человека (ВПЧ) в группе больных раком гортани.

3.1.1. Связь уровня инфицированности ВПЧ с клинико-морфологическими параметрами в группе больных раком гортани.

3.2. Особенности гуморального иммунного ответа к антигенам вируса Эпштейна-Барр в группе больных раком

3.3. Анализ выживаемости в группе больных раком гортани.

3.4 Синтез латентного мембранного протеина (LMP-1) вируса Эпштейна-Барр в опухолевых клетках больных раком гортани

3.5. Полиморфизм генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков GSTT1 и GSTM1: взаимосвязь с риском развития рака гортани.

3.6. Факторы риска развития рака гортани.

3.7. Корреляционные связи клинических и вирусо-генетических параметров.

3.7.1. Корреляг{ионные связи клинико-морфологических и вирусо-генетических параметров в группе больных раком гортани.

3.7.2. Корреляционные связи клинических и вирусологических параметров в группе больных предопухолевыми заболеваниями гортани

3.7.3. Корреляционные связи вирусологических параметров в контрольной группе

3.8. Гипотетическая схема вирусного канцерогенеза при раке гортани.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ассоциация рака гортани с онкогенными вирусами папилломы человека и Эпштейна-Барр»

Рак гортани (РГ) занимает лидирующие позиции среди злокачественных опухолей верхних дыхательных путей, составляя 65-70%, а в структуре общей онкологической заболеваемости - 1,4%, среди которых 2,8% - приходится на мужчин и 0,2% - женщин. Так, в 2006 году в России было выявлено 6655 новых случаев заболевания раком гортани (В .И. Чиссов и др., 2008). К сожалению, бессимптомное течение, которое отмечается у 35% больных РГ, приводит к тому, что более 60-70% пациентов обращаются в специализированные учреждения с уже распространенным опухолевым процессом, а показатель запущенности, отражающий состояние диагностики злокачественных новообразований в России, составил в 1996 г. 24,9% (Ольшанский В.О., 1995; Кицманюк З.Д. и др., 1998; Пачес А.И., 2000, Чиссов В.И. и др., 2000; Виноградов В.В. и др., 2007; Черемисина О.В., 2007).

Мощными индукторами опухолевых поражений слизистой оболочки верхних дыхательных путей являются курение и алкоголь (Olsen J., 1985; Franceschi S., 1990; Заридзе Д.Г., 2001; Заридзе Д.Г. и др., 2002; Shafey О., 2003; Левшин В.Ф. и др., 2003; Макушкина О.В., 2004; IARC, 2004; Осипов В.Д., 2005а; Ragin C.C.R., 2007; Шаньгина О.В., 2007). Сформулирована гипотеза, согласно которой алкоголь является активатором канцерогенного действия табачного дыма на слизистую оболочку верхнего респираторного тракта. Однако важная роль в этиопатогенезе рака гортани принадлежит воспалительным процессам, в частности, гиперпластическим заболеваниям верхних дыхательных путей (папилломатоз, хронический гиперпластический ларингит). В общей структуре воспалительных заболеваний JIOP-органов на долю хронического гиперпластического ларингита (ХГЛ) приходится от 8,4% до 10% с последующей малигнизацией эпителия гортани в 8-20% случаев (Чумаков Ф.В. и др., 2002; Осипов В.Д., 2005 б),

Согласно современным представлениям, 10 - 25% случаев рака в мире могут быть этиологически связаны с хроническими вирусными инфекциями

Фирсова Г.А. и др., 1991; Butenco Z.A. et al., 2000; Wong M., 2002; Лялина Л.В., 2003; Гурцевич В.Э. и др., 2002; Киселев Ф.Л., 2000; zur Hausen Н., 2000; Wong М. et al., 2004; Заридзе Д.Г., 2005). Все большее внимание исследователей привлекает вирусная теория канцерогенеза верхних дыхательных путей (Parkin D.M. et al., 1999; Лялина Л.В. и др., 2003). При этом .по оценкам разных авторов, от 25% до 35% опухолей головы и шеи ассоциировано с ВПЧ-инфекцией (McKaig, RG., et al., 1998; Киселев Ф.Л., 2000; Gillison М, 2000).

Трансформирующие свойства папилломавирусов обеспечиваются функционированием генов Е6 и Е7 (zur Hausen Н., 1999; Киселев Ф.Л., 2000;). Белок Е6 взаимодействует с р53, вызывая его деградацию по убиквитин-зависимому типу. Это приводит к предотвращению апоптоза и нарушению защитных регуляторных механизмов, обеспечивающих репарацию ДНК, что способствует дестабилизации генома. Кроме того, Е6 подавляет выработку интерферона, активирует теломеразу, усиливая таким образом пролиферацию (zur Hausen Н., 2002). Основным свойством белка Е7 является взаимодействие с продуктом гена Rb, с убиквитинизацией последнего и высвобождением из комплекса pRb-E2F транскрипционного фактора E2F, регулирующего клеточную пролиферацию, высокая активность которого может привести к апоптозу (Киселев Ф.Л., 2000; zur Hauzen Н., 2002; Киселев В.И. и др., 2003; Мазуренко H.H., 2003). Белок Е7 также усиливает мутагенное действие химических канцерогенов, может индуцировать анеоплоидию. Каждый из генов Е6 и Е7 способен иммортализовать культуру клеток. Совместная экспрессия этих генов значительно усиливает прогрессию, благодаря уникальному кооперативному эффекту (zur Hausen Н., 1996).

Говоря о вирусном канцерогенезе верхних дыхательных путей, не следует забывать о вирусе Эпштейна-Барр (ВЭБ), представителе семейства у-герпесвирусов человека, который связан с возникновением ряда лимфопролиферативных заболеваний, некоторых гистологических вариантов рака желудка, легких, слюнных, околоушных, молочных желез (Sixbey J.W. et al, 1984; Исаева Т.М. 1990; Shibata D. et al., 1991; Чойнзонов Е.Л., 1995; Takada К. et al., 2000; Гончарова E.B., 2001; Гурцевич В.Э. и др., 2002; Севастьянова Н.В., 2004). При этом показана трансформирующая активность ряда протеинов ВЭБ, одним из проявлений которой является способность инактивировать ген р53 (Niedobitek G. et al., 1993; Fries K.L. et al., 1996). Значительная роль в процессе малигнизации эпителиальных клеток отводится латентному мембранному протеину вируса Эпштейна-Барр (LMP-I). В доступных нам литературных источниках, практически, не освещается вирусный канцерогенез рака гортани: нет четких данных о роли вируса Эпштейна-Барр в патогенезе РГ, не выявлены механизмы опухолевой трансформации клеток, а также вклад факторов, которые могут способствовать онкогенезу, в частности, ВЭБ-ассоциированных хронических воспалительных процессов в эпителии слизистой, его иммунодепрессивное влияние при инфицировании организма хозяина. Однако получены данные о модифицирующем влиянии канцерогенных факторов внешней среды на чувствительность эпителиальных клеток к инфицированию ВЭБ (Niedobitek G. et al., 1994; Thomas J.A. et al., 1991).

Известно, что в патогенезе онкологических заболеваний участвуют гены-модификаторы, в частности, гены «внешней среды», ответственные за биотрансформацию поступающих в организм чужеродных веществ и определяющие реакцию организма на неблагоприятные внешние воздействия (Саприн А.Н., 1991; Hirvonen A. et al., 1997; Белицкий Г.А. и др., 1998; Е.В. Белогубова и др., 2000; Hong Y.J. et al., 2000; Вавилин B.A. и др., 2002; Жолдакова З.И. и др., 2002; Баранов B.C. и др., 2003; Habdous M. et al., 2004; Gajecka M. et al., 2005). Делеция этих генов приводит к синтезу функционально неполноценных белков, влияющих на способность гена-онкосупрессора р53 останавливать клеточный цикл для совершения репарационных процессов, что в дальнейшем вызывает повреждение генетического аппарата клетки и злокачественную трансформацию

Нурмухаметова Е.В., 1996; Rebbeck T.R., 1997; Баранов B.C. и др., 2003; Loeb L. et al., 2003; Scian M.J., 2004).

Вышесказанное определяет актуальность изучения, в сопоставлении с клинико-морфологическими особенностями опухолевого процесса, частоты выявления онкогенных вирусов папилломы человека и комплексной оценки уровня антител к антигенам Эпштейна-Барр для установления их статуса при раке гортани.

Цель исследования. Изучить ассоциацию вирусов папилломы человека и Эпштейна-Барр с клинико-морфологическими показателями у больных раком и предопухолевыми заболеваниями гортани, определить диагностическую и прогностическую значимость изученных показателей.

Задачи исследования.

1. Изучить частоту ассоциации рака и предопухолевых заболеваний хронический гиперпластический ларингит, папилломатоз) гортани с онкогенными вирусами папилломы человека и Эпштейна-Барр.

2. Изучить взаимосвязь уровня антител к белкам литической инфекции ВЭБ с частотой синтеза латентного мембранного протеина (LMP-1) в опухолевых клетках больных раком гортани.

3. Оценить частоту делеции генов глутатион-Б-трансфераз GSTT1 и GSTM1 у больных раком и предопухолевыми заболеваниями гортани.

4. Изучить взаимосвязь вирусной инфекции с клинико-морфологическими особенностями рака гортани.

5. Определить факторы риска развития рака гортани.

Научная новизна. Проведено комплексное исследование частоты ассоциации онкогенных вирусов со злокачественными и предопухолевыми заболеваниями гортани. Показан 8,5-кратный риск развития рака гортани, ассоциирующий с инфицированностью эпителия гортани вирусом папилломы человека 6 типа.

Определена частота встречаемости делеции генов глутатион-S-трансфераз GSTT1 и GSTM1 у больных раком и предопухолевыми заболеваниями гортани. Установлен ассоциирующий с носительством делеции гена ОБТЫ 3- и 4-кратный риск развития РГ у больных предопухолевыми заболеваниями и РГ.

Проведен сравнительный анализ результатов определения латентного мембранного протеина (ЬМР-1) в опухолевых клетках больных РГ и иммунного ответа к антигенам литической инфекции ВЭБ. Показано, что в 87,5% случаев синтез ЬМР-1 сопровождается повышением уровня антител к антигенам литической инфекции ВЭБ.

Показано значимое увеличение частоты встречаемости высокого уровня ^О к вирусному капсидному антигену ВЭБ у больных РГ с ТЗ объемом опухоли. Выделены критерии формирования группы повышенного онкологического риска развития рака гортани.

Теоретическая и практическая значимость. Выявление опухолей гортани, ассоциированных с онкогенными вирусами папилломы человека и Эпштейна-Барр, может служить важной предпосылкой для углубленного изучения их этиопатогенеза, разработки новых подходов к ранней диагностике и прогнозированию клинического течения заболевания. Установленная ассоциация инфицированности эпителия гортани ВПЧ 6 типа и носительства делеции гена 08ТТ1 с РГ, свидетельствует о возможности использования изученных показателей в качестве дополнительных критериев формирования групп повышенного риска развития рака гортани.

Определение в опухолевых клетках больных раком гортани синтеза латентного мембранного протеина (ЬМР-1), сопровождающегося повышением уровня антител к антигенам литической инфекции ВЭБ может свидетельствовать о вкладе вирусной составляющей в процесс канцерогенеза гортани.

Выявленные факторы риска могут быть использованы в качестве дополнительного критерия при скрининге лиц с предопухолевыми заболеваниями. Результаты, полученные на модели одной из наиболее распространенных эпителиальных опухолей человека, будут способствовать более глубокому пониманию механизмов вирусного канцерогенеза.

Положения, выносимые на защиту:

1. Частота выявления и спектр папилломавирусной инфекции в группе больных раком гортани превышает данные показатели у пациентов предопухолевыми заболеваниями гортани и здоровых лиц.

2. Наличие в опухолевых клетках больных раком гортани маркера латентной инфекции вируса Эпштейна-Барр, мембранного протеина (LMP-1), сопряжено с повышением уровня антител к антигенам литической инфекции ВЭБ.

3. Носительство делеции GSTT1 гена повышает риск развития РГ. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были представлены на региональной конференции молодых ученых имени академика РАМН Н.В.Васильева "Актуальные вопросы экспериментальной и клинической онкологии", Томск (2005, 2006, 2007); III Российской научной конференции с международным участием "Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера", Новосибирск (2006); Российской научно-практической конференции с международным участием "Современные методы лечения онкологических больных: достижения и неудачи", Барнаул (2006, 2007); IV съезде онкологов и радиологов СНГ, Баку (2006); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием "Опухоли головы и шеи", Анапа (2006); VI Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Генодиагностика инфекционных болезней — 2007» Москва (2007).

Публикации. Основные результаты исследования опубликованы в 17 печатных работах, из них три - в журналах, рекомендованных ВАК.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 163 страницах машинописного текста и состоит из введения, 3 глав, выводов, списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 34 рисунками и 15 таблицами. Библиографический указатель включает 262 источник, из них 74 отечественных и 188 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Шилова, Ольга Юрьевна

134 ВЫВОДЫ

1. Частота выявления вируса папилломы человека у больных раком гортани составила 20,4%, в 2,3 раза превышая таковой в группе больных предопухолевыми заболеваниями гортани и значимо различаясь с данным показателем в контрольной группе.

2. Диапазон типов вируса папилломы человека в опухолевой ткани зависел от стадии заболевания: на III стадии развития рака гортани зарегистрирован более широкий спектр типов вируса папилломы человека по сравнению с данным параметром у больных со II стадией.

3. В опухолевых клетках 42,4% больных раком гортани выявлен латентный мембранный протеин (ЬМР-1) вируса Эпштейна-Барр, синтез которого в 87,5% случаев сопровождается высокой активностью гуморального иммунного ответа на антигены литической инфекции вируса Эпштейна-Барр.

4. Показано значимое увеличение частоты встречаемости высокого уровня иммуноглобулина О к вирусному капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр у больных раком гортани с ТЗ объемом опухоли по сравнению с величиной данного параметра у больных с Т1 и Т2 объемом.

5. К факторам риска развития рака гортани отнесены инфицирование эпителия гортани вирусом папилломы человека 6 типа, высокие уровни иммуноглобулина в к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр, носительство делеции С8ТТ1 гена, возраст больного.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Рак гортани (РГ) составляет 65-70% среди злокачественных опухолей верхних дыхательных путей. В структуре общей заболеваемости злокачественными новообразованиями эта патология занимает 9-е место, что составляет 1,8-2%, а в структуре заболеваемости мужского населения — 4-е место (Пачес А.И., 2000; Мухамедов М.Р., 2005). При этом рак гортани наиболее часто, в 50-60% случаев поражает лиц трудоспособного возраста (40-59 лет), реже - лиц в возрасте старше 60 лет (20-30%) и наименее часто, в 15-28% случаев - до 40 лет (Бойков В.П., 1989; Morra В., 1987). Все вышеперечисленное указывает на необходимость тщательного изучения и серьезного переосмысления подходов к ранней диагностике данной патологии и скринингу лиц с предопухолевыми заболеваниями, которые составляют группу риска.

Многочисленные эпидемиологические исследования, проводимые в различных странах мира, убедительно показали, что основными этиологическими факторами риска развития РГ являются курение, употребление алкоголя, воздействие на слизистую оболочку респираторного тракта экзо- и эндогенных факторов и хронические заболевания (хронический гиперпластический ларингит - XTJI и папилломатоз - ПГ), частота которых составляет 9,7% и 0,4-90,0%, соответственно (Дайняк Л.Б., 1986; Чумаков Ф.И., 2002). Эти заболевания принято рассматривать в качестве облигатного предрака (IARC, 1988, 2002). Так, у лиц с ХГЛ, чья работа связана с воздействием на верхний респираторный тракт производственных канцерогенов, риск развития РГ в 3,5 раза превышает таковой у практически здоровых лиц, работающих в аналогичных условиях (Журба А.Н., 1988).

В последние годы в литературе все чаще встречаются сообщения о выявлении в опухолевой ткани больных предраком и раком гортани генетической информации онкогенных вирусов папилломы человека и Эпштейна-Барр (8.К. Е1-Мойу е! а1., 2003, Балукова О.В. и др., 2004). Однако, мы не встретили работ, в которых бы уделялось достаточно внимания роли вирусной составляющей в этиопатогенезе рака гортани, поэтому мы сочли целесообразным провести комплексную оценку вирусо-генетических параметров и изучить их ассоциацию с клинико-морфологическими характеристиками опухоли, а также диагностическую и прогностическую значимость изученных показателей.

В соответствие с поставленной целью было проведено комплексное обследование больных, проходивших в 2004-2007 гг. стационарное и амбулаторное лечение в ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН. В исследование включено 182 человека, из которых были сформированы группы больных раком и предопухолевыми заболеваниями гортани. Контрольную группу составили здоровые лица без морфологических изменений эпителия гортани, не предъявляющие жалоб по данной локализации в течение двух лет. Всем обследуемым методом ПЦР было проведено тестирование на наличие вирусов папилломы человека в эпителии гортани. Методом непрямой иммунофлюоресценции в сыворотке крови определены уровни антител к антигенам литической инфекции вируса Эпштейна-Барр. Кроме того, методом иммуногистохимии в опухолевой ткани больных РГ выявлялся латентного мембранного протеина (ЬМР-1) вируса Эпштейна-Барр.

Показано, что частота встречаемости вирусов папилломы человека в изученной популяции здоровых лиц составила 5,4%. Однако отмечено, что частота выявления низкоонкогенных ВПЧ 6 и 11 у здоровых лиц, приведенная в представленной работе (3,6%), оказалась ниже цитируемой в литературе, согласно которой, изученный показатель колеблется среди здоровых лиц от 23% до 36%. Среди них 19-25% оказываются носителями низкоонкогенных типов - ВПЧ 6 и 11 (ТЧипеэ Б.А., 1994), а 9% -высокоонкогенных ВПЧ 16 и 18 (1а1а1 Н. е1 а1., 1992; БгусПохузкл 1. е! а1., 1999). McKaiq Я. е1 а1. (1998) приводят еще более высокую частоту детекции вируса папилломы человека в слизистой оболочке гортани (60%), без уточнения типа выявленных вирусов.

Следует отметить, что все случаи инфицирования ВПЧ слизистой оболочки гортани здоровых лиц были отмечены нами лишь в возрастной группе 40-59 лет. Возможно, приводимые в литературе данные по высокому уровню инфицированности больных вирусом папилломы объясняются региональными особенностями данного показателя у здорового населения. Низкая частота инфицирования ВПЧ, показанная нами для больных ПЗГ, может быть обусловлена как низкой частотой инфицированности здорового населения региона, так и присутствием в обследуемой группе подавляющего большинства лиц с хроническим гиперпластическим ларингитом, среди которых случаи ВПЧ-ассоциированной формы данного заболевания, согласно литературным данным - достаточно редкое событие (R. McKaig, 1998; Пачес, 2004). Следует принять во внимание результаты корреляционного анализа, согласно которому между присутствием в мофологически неизмененной ткани гортани здоровых индивидуумов ВПЧ6 и 11 и эндоскопическим диагнозом выявлена средняя по силе связь (г=0,485; р=0,05), что позволяет предположить, что для здоровой популяции г. Томска уровень инфицированности слизистой оболочки гортани папилломавирусами, показанный в нашей работе, является нормой.

Учитывая, что почти 100% населения планеты инфицировано вирусом Эпштейна-Барр, но, тем не менее, механизм возникновения заболеваний, ассоциированных с этим вирусом, в том числе и онкологических, остается открытым, представляется целесообразным изучить особенности гуморального ответа к антигенам литической инфекции вируса Эпштейна-Барр у больных РГ и взаимосвязь изученных показателей с клинико-морфологическими параметрами и синтезом маркера латентной инфекции ВЭБ - мембранным антигеном LMP-I.

Показано, что у здоровых лиц, инфицированных вирусом папилломы человека, в 94,5% случаев были выявлены антитела класса G к к BKA вируса

Эпштейна-Барр, в то время, как антитела класса А к комплексу ранних антигенов в сыворотке крови у обследуемых лиц обнаружены не были. МогеЬес! К. (2003) при изучении сывороток, полученных от здоровых доноров, вообще не обнаружил антител к антигенам литической инфекции ВЭБ. Однако годом раньше этот же автором, изучая иммунный ответ организма на антигены литической инфекции ВЭБ в другой популяции здоровых лиц, у 88,8% обследованных выявил высокий уровень антител класса ^О к ВКА, сравнимый с таковым у 89,3% больных раком гортани, что может быть свидетельством реинфекции ВЭБ на момент забора крови Могшее! К., 2002).

Низкие значения антител к антигенам литической инфекции ВЭБ или отсутствие таковых в сыворотке крови у обследованных нами лиц контрольной группы могут свидетельствовать об отсутствии в этого типа организме литической инфекции, что, в свою очередь, может быть объяснено малым количеством курящих среди обследованных лиц, что приводит к отсутствию в слизистой оболочке гортани воспалительного процесса, который поддерживается постоянным термическим воздействием табачного дыма, что, в свою очередь, способствует инфицированию, создавая для этого благоприятный фон, в конечном результате приводя к ослаблению защитных резервов иммунной системы, чего мы не наблюдали у здоровых лиц. А факт отсутствия у лиц контрольной группы антител к антигенам литической инфекции ВЭБ даже при условии инфицирования слизистой оболочки гортани ВПЧ, может быть объяснен автономностью существования, различной тропностью или пермессивностью каждого из изученных вирусов.

Наряду с такими известными экзогенными факторами риска развития патологических процессов в гортани, как курение, воздействие токсических веществ и т. д., в последнее время немаловажная роль отводится эндогенным факторам, к которым принадлежит наличие делеции в генах ферментов детоксикации ксенбиотиков - ОБТИ и М1 (Zhong Б. е! а1., 1991; Ют е! а1., 2000; ВепЬатои Б. е! .а1., 2002). Частота делеции ОБТИ и М1 генов у изученных нами здоровых лиц составила 15% и 43%, соответственно, что несколько ниже популяционной для Северо-Западного региона Сибири (23,3%) (Попова С.Н., Сломинский П.А., 2002), в том числе и для г.г. Томска и Новосибирска (23,7%) (Брагина Е. Ю., 2005, Ляхович и др., 2000; Вавилин и др., 2002). Относительно высокая частота делеции М1 гена является нормой для популяции, поскольку до 56% здоровых лиц, согласно литературным данным, являются носителями данного структурного нарушения генома.

Таким образом, низкий уровень инфицирования ВПЧ слизистой оболочки гортани, низкие значения антител к антигенам литической инфекции вируса Эпштейна-Барр и низкая частота обнаружения делеции 08ТТ1 гена у здоровых лиц, показанные нами, могут свидетельствовать об относительно благоприятной экологической и эпидемиологической обстановке на территории Томской области.

Согласно литературным данным, такие патологические процессы гортани, как хронический гиперпластический ларингит и папилломатоз, на долю которых приходится до 70% и 100% заболеваний ЛОР-органов, соответственно, рассматриваются, на основании высокой частоты малигнизации, как предрак (Чирешкин Д.Г. и др., 1994; Гаращенко Т.И. и др., 1996; Нурмухамедов Р.Х., 1998; Василенко Ю.С. и др., 2000; Чумаков Ф.В. и др., 2002).

При обследовании группы больных с предопухолевой патологией гортани в 82,6% случаев был диагностирован хронический гиперпластический ларингит, в 21,1% случаев - папилломатоз. Общий уровень инфицированности ВПЧ у больных предраком гортани составил 8,7%. При этом, например, у больного С. с хроническим гиперпластическим ларингитом, гистологически верифицированным как гиперплазия, в морфологически неизмененной ткани гортани был обнаружен ВПЧ 31. В морфологически неизмененной ткани пациентки 3. с папилломатозом, на фоне которого развилась дисплазии II степени, обнаружена микст-инфекция

ВПЧ 6 и 11. У лиц контрольной группы, помимо перечисленных типов вируса в эпителии гортани был определен ВПЧ 33. Нами показано, что у лиц с предраком вирусом папилломы была инфицирована только морфологически неизмененная ткань. В литературе мы встретили, к сожалению, лишь единичные работы, посвященные изучению ассоциации ВПЧ-инфекции с хроническим гиперпластическим ларингитом, автор одной из которых привел частоту детекции вируса папилломы человека, которая составила 19% (Rihkanen Н., 1994).

Так же, как и ВПЧ-позитивные здоровые индивидуумы, ВПЧ(+) больные ХГЛ принадлежали к возрастной группе 40-59 лет. Причем, вовлеченным в процесс инфицирования оказался складочный отдел гортани, что подтверждается литературными данными относительно хронической формы патологии гортани (Хрусталева Е.В., 2005; Onami К., 1979).

Сопоставляя длительность заболевания с типом ВПЧ у больного с ХГЛ, инфицированного ВПЧ 31 было показано, что патологический процесс у этого пациента развивался в течение 6 лет. У пациентки, страдающей папилломатозом гортани, инфицированной ВПЧ 6, 11 длительность заболевания составила 4 года, с возникновением 6 рецидивов, по поводу которых получено хирургическое лечение. Полученные данные свидетельствуют об агрессивности течения папилломатоза, ассоциированного с ВПЧ 6 и 11 типов и относительно вялом развитии - при инфицированности ВПЧ 31 что находит подтверждение в литературных данных, согласно которым, папилломатоз, вызванный ВПЧ И протекает более агрессивно по сравнению с ВПЧ 6, в связи с чем у больных регистрируется менее длительные безрецидивные периоды, что влечет за собой увеличение частоты хиургических вмешательств (Зайцев B.C. и др., 2005; Rabah R. et al., 2004).

Нами отмечено, что лишь в 4,3% случаев папилломатоз гортани оказался ВПЧ-ассоциированным. У пациентки 3. с верифицированным ПГ вирус был обнаружен только в участке ткани с дисплазией, тогда как клетки самой папилломы инфицированы не были. Подобный случай описан К. Lin et al. (1997), которые у 58-летней пациентки с папилломатозом, на фоне тяжелой дисплазии, выявили ВПЧ 6 и 11 только в диспластически измененных клетках. При этом ВПЧ 11 активно реплицировался, а ВПЧ 16 -находился в интегрированной форме. Следует также отметить, что в морфологически неизмененных клетках слизистой оболочки гортани этой пациентки вирусов папилломы выявлено не было. Возникновение дисплазии в инфицированной ВПЧ 11 ткани Rady P.et al. (1998) объясняют интеграцией вирусного генетического материала в геном клетки, что в свою очередь, влечет за собой мутацию гена-онкосупрессора р53. Происходит промоция генетической нестабильности в клетке, что является причиной появления пула диспластических клеток с последующей малигнизацией. Авторы подчеркивают, что в доброкачественных опухолях ВПЧ11 находится как в эписомальной, так и в интегрированной форме, тогда как при переходе к злокачественному росту происходит либо селекция пула клеток, содержащих исключительно интегрированный генотип, либо тотальная интеграция вирусного генома во всех инфицированных клетках. P. Raidy (2004) также полагает, что в случае ВПЧ 11-ассоциированного папилломатоза гортани, вирусный геном интегрируется с последующей малигнизацией ткани. Свои предположения автор подкрепляет фактом выявления в опухолевых клетках трех из семи (48,3%) обследованных больных карциномой гортани интегрированной формы вирусной ДНК. Противником данного утверждения выступает S.Watts (1991), показавший, что 60% случаев карциномы области головы и шеи ассоциируют исключительно с эписомальной формой генома ВПЧ 6, 11, 16 и 18. Фактом интеграции можно объяснить и высокую частоту малигнизации папиллом, в клетках которых находят ВПЧ 6, 11, либо оба типа одновременно. P. Draganov et al. (2006) приводят убедительные данные, согласно которым у больных, в папилломах которых были выявлены ВПЧ 11, 6, или микст-инфекция ВПЧ 6+11, произошла малигнизация клеток с распространением процесса на ткань легких.

При изучении особенностей гуморального иммунного ответа к антигенам ВЭБ у больных с предопухолевой патологией гортани в сыворотке крови пациента с ХГЛ были обнаружены IgG к BKA и РА ВЭБ в высоких значениях (1:1280 и 1:80, соответственно), что объясняется хронизацией процесса и воздействием на слизистую оболочку гортани табачного дыма, который еще более усугубляет течение заболевания и способствует периодическому обострению инфекции. В сыворотке же крови больной ПГ были обнаружены низкие значения антител класса G к BKA, тогда как антитела к РА не определялись, что является свидетельством как разных пермиссивных систем, так и подтверждением разнонаправленности действия в отношении патогенеза вирусов папилломы человека и Эпштейна-Барр.

В патогенез онкологических заболеваний, являющихся мультифакториальными, вовлекается множество разных функционально взаимосвязанных генов, включающие, наряду с главными, второстепенные, т.е. гены-модификаторы, эффект которых во многом определяется средовыми факторами (Баранов B.C. и др., 2000; Колчанов H.A. и др., 2000). Исследованные нами гены GSTTI и GSTMI, как уже упоминалось, кодирую две различных формы глутатион-8-трансфераз — TI и MI, которые участвуют в биотрансформации ксенобиотиков. Так как данные ферменты являются важными составляющими системы детоксикации, гомозиготность по нулевому аллелю одного из генов может привести к высокой восприимчивости организма к вредным воздействиям, повышением канцерогенной нагрузки, и, следовательно, увеличением риска развития рака. Как показали результаты настоящего исследования, в группе больных предраком гортани выявлены делеции в генах GSTT1 и GSTM1 в 43,5% и 26,1% случаев, соответственно, при этом риск развития патологии ассоциировал с делецией гена GSTTI (OR=2,90; С195%=1,05-7,96). Следует отметить, что в группе больных с предраком частота нулевого генотипа GSTM1 (26,1%) практически соответствовала таковой (29,1%) в группе больных раком гортани, в 1,6 раз превышая аналогичный показатель в группе здоровых лиц. Указанные различия как между группами больных, так и при сравнении с лицами контрольной группы оказались незначимыми (р >0,05). При изучении частоты встречаемости сочетанных генотипов было показано, что для больных с предраком характерно наличие либо функционально полноценного (13%), либо функционально неполноценного, т. е. делегированного по двум генам (43,5%). Данный факт, возможно, свидетельствует об отсутствии существенного влияния делеции в изученных генах на патогенез предрака.

В ходе корреляционного анализа в группе больных с предраком, было показано наличие связи между ВПЧ 6 и 11, что, возможно, объясняется равновероятным и одновременным инфицированием слизистой гортани как 6, так и 11 типами ВПЧ, что, в свою очередь, может означать наиболее широкое распространение данных типов среди других представителей семейства Рароуаутёеа, тропных к эпителию гортани.

Таким образом, низкую частоту встречаемости ВПЧ, адекватный ответ со стороны гуморального звена системы иммунитета на литическую инфекцию вируса Эпштейна-Барр, но, наряду с этим, повышенную в три раза, по сравнению со здоровыми лицами, частоту обнаружения делеции гена в8ТТ1 и, как следствие, ассоциацию данного нарушения с повышенным риском развития заболевания, у больных с предраком, можно рассматривать как показатели отнесения данного контингента пациентов к группе повышенного риска развития злокачественной патологии гортани.

До определенного момента хронический процесс в слизистой оболочке гортани, будь то гиперпластическая форма ларингита или папилломатоз, протекают относительно спокойно и доброкачественно. Но при воздействии таких дополнительных факторов, как курение, наличие делеции в генах ОБТТ, ослабление Т-клеточного звена иммунной системы, инфицирование слизистой гортани папилломавирусами человека, может произойти малигнизация.

Нами показано, что максимальная частота встречаемости ВПЧ (20,4%) зарегистрирована у больных со II и III стадией злокачественного процесса гортани. При исследовании инфицирования прилежащей морфологически неизмененной ткани больных РГ вирусом папилломы человека более высокая частота встречаемости ВПЧ (32%) была зафиксирована у пациентов со II стадией процесса, тогда как у больных с III стадией этот показатель составил 27%. Уровень инфицированности ВПЧ опухолевой ткани этой группы больных несколько ниже: установлено наличие вируса папилломы человека у 18% больных с III стадией злокачественного процесса и 16% больных со II стадией. Спектр изученных типов ВПЧ был наиболее ярко представлен как в опухолевой (ВПЧ 6, 11, 31, 33, 16 и 18), так и в прилежащей к опухоли морфологически неизмененной ткани (ВПЧ6, 11,31 и 33) больных РГ с III стадией заболевания. Однако и у больных со II стадией был выявлен достаточно широкий спектр ВПЧ, за исключением 31, 33 и 16 типов вируса. Данные, полученные нами по частоте и спектру инфицированности опухолевой ткани больных раком гортани, нашли подтверждение и в литературных источниках. В отношении инфицированности прилежащей ткани у больных раком гортани, данных, к сожалению, недостаточно (А1тас1оп в. е1 а1., 1996; Уепий А. е1 а1., 2000). Тот факт, что именно в ткани больных с III стадией наиболее широко представлены изученные типы ВПЧ, можно объяснить либо с позиции изначально высокого уровня инфицированности среди больных с данной стадией рака, либо процессом аккумуляции (накопления) дополнительных (ВПЧ 31, 33, 16 и 18), возможно, играющих важную роль в процессе малигнизации эпителия гортани ВПЧ.

При анализе ассоциации степени дифференцировки опухоли с уровнем инфицированности ткани ВПЧ было показано, что максимальная частота встречаемости и спектр изученных типов были представлены у пациентов с умеренной степенью дифференцировки. Совпадение изученных вирусных параметров (частоты встречаемости и спектра изученных типов ВПЧ) у больных с III стадией умеренной степенью дифференцировки логично, поскольку у большинства больных с III стадией отмечена умеренная степень дифференцировки опухоли.

Закономерные, на наш взгляд, результаты были получены в отношении взаимосвязи длительности течения предшествующего раку хронического заболевания и представленных типов вируса папилломы человека. Так, максимальная частота детекции ВПЧ (60,8%) была показана для больных, заболевание которых разворачивалось в течение 05,-2 лет. Причем как в прилежащей, так и в опухолевой ткани этой группы больных были обнаружены только ВПЧ 6 и 11. Вполовину реже - 27,3% и 26,5%, соответственно, вирус папилломы человека был выявлен у больных с 0,5- и 5-10-летней продолжительностью течения заболевания. Однако в ткани этих больных наряду с ВПЧ 6 и 11 были также выявлен ВПЧ 31 - для больных с 0,5-летней и ВПЧ 16 и 18 - с 5-10-летней продолжительностью. Исходя из вышесказанного, можно предположить, что одновременное присутствие в ткани ВПЧ 6, 11 и 31 ассоциирует с более агрессивным течением патологического процесса в слизистой оболочке гортани, тогда как наличие ВПЧ 33, 16 и 18 (в комплексе с ВПЧ 6 и 11) выступают сдерживающим фактором и способствуют более вялому развитию процесса.

Принимая во внимание данные корреляционного анализа, согласно которому не показано ассоциации между присутствием в прилежащей к опухоли ткани ВПЧ 6 и 11, что может свидетельствовать о равновероятном инфицировании больного, но установлена связь между наличием в прилежащей ткани только ВПЧ 6 и присутствием в опухолевой ВПЧ 6, 11 и 16, можно предположить моноклональность опухоли в отношении ВПЧ 6. В то же время, в морфологическом отношении опухоль является гетерогенной структурой, в связи с чем мы можем предполагать моноклональность лишь отдельного пула клеток, произошедшего из изначально инфицированной ВПЧ 6 клетки. Выявленная относительно сильная корреляционная связь между присутствием ВПЧ 6,11 и ВПЧ 16, 18 в опухолевой ткани, означает, возможно, не только широкое распространение и обязательно совместное инфицирование именно данными представителями папилломавирусов (умеренно- и высокоонкогенными типами), но и обязательное их присутствие, а значит, и существенный вклад в канцерогенез гортани. Средняя по силе связь между присутствием в опухолевой ткани больных ВПЧ 6 и 16, 18, также может означать обязательное присутствие данных типов для инициации злокачественного заболевания. Высокую тропность ВПЧ 6, 11 типов к эпителию гортани и их высокую распространенность еще раз подтверждает корреляционный анализ, который установил наличие связи данных типов вируса, обнаруженных в опухолевой ткани, с курением, его стажем и количеством выкуриваемых сигарет, подтверждая, что при наличии вышеперечисленных условий, эпителий инфицируют именно ВПЧ 6 и 11 типов.

Изучая состояние гуморального иммунного ответа к антигенам ВЭБ у больных раком гортани, в сыворотке крови большинства обследованных пациентов мы обнаружили повышенные уровни антител к антигенам литической инфекции вируса. Причем, для большинства больных с III стадией определены антитела класса G к BKA в значении 1:320, что может быть расценено как свидетельство в недавнем прошлом наличия литической инфекции ВЭБ, либо начальной стадии иммунного ответа на реинфекцию. Возможно, данное значение IgG к BKA может выступать в роли прогностического для больных с III стадией рака гортани.

Согласно литературным данным, в опухолевых клетках больных раком области головы и шеи, с определенной долей вероятности, может экспрессироваться латентный мембранный белок (LMP-I) ВЭБ, который является маркером латентной инфекции, обладает онкогенными свойствами и ингибирует литическую инфекцию данного вируса (Baumforth К., 1999; Stuart Prince, 2003; Bar-Sela G, 2003). В нашем исследовании LMP-I был обнаружен у 42,4% больных РГ. При этом установлено, что с максимальной частотой (32,2%) данный белок экспрессируется в опухолевых клетках больных с умеренной степенью дифференцировки опухоли. Однако, одновременно с обнаружением в опухолевых клетках подавляющего большинства больных ЬМР-1, в сыворотке крови этих пациентов были определены и высокие уровни антител к антигенам литической инфекции ВЭБ, что противоречит литературным данным относительно ингибирования литической инфекции ВЭБ латентным мембранным белком. Тем не менее, можно попытаться объяснить полученные результаты. Повышенные уровни антител у обследованного контингента могут быть расценены как остаточное явление литической инфекции, в то время как синтез ЬМР-1 еще только запускается. Следовательно, можно предположить, что на более поздних стадиях онкогенеза можно будет наблюдать сочетание низких уровней антител и высокой частоты синтеза латентного мембранного протеина. Тем не менее, в результате корреляционного анализа показана сильная обратная связь(г=-0,694) между экспрессией ЬМР-1 и наличием антител класса О к РА ВЭБ, которая подтверждает литературные данные об ингибировании данным белком литической инфекции. Подобная связь (г=-0,587) была установлена также между частотой экспрессии ЬМР-1 и длительностью заболевания, указывая на начало синтеза белка в слизистой оболочке гортани на ранних этапах канцерогенеза. Вероятно, у лиц, с предраком гортани есть предрасположенность к инфекционным заболеваниям, так как слизистая, постоянно пребывающая в воспаленном состоянии, особенно при поддержании этого процесса такими факторами, как курение, переохлаждение, воздействие мелкодисперсной взвези, инфильтрируется лимфоцитами, которые, в свою очередь, являются пермиссивной системой для ВЭБ. Постоянный контакт инфицированной ВЭБ популяции лимфоцитов с очагом воспаления может привести к диссеминации вируса (при наличии литической инфекции) на слизистую оболочку гортани с последующим инфицированием эпителиальных клеток и возникновением латентной инфекции, сопровождающейся экспрессией ЬМР-1.

Для демонстрации отношения и вклада делеции генов ферментов детоксикации ксенобиотиков ОБТИ и 08ТМ1 в патогенез рака гортани, мы изучили частоту встречаемости данного структурного нарушения в группах больных.

Частота встречаемости делеции С8ТТ1 и С8ТМ1 генов среди больных раком гортани составила 58% и 29%, соответственно, превышая таковую для больных с предраком. Причем, так же как и у больных с предраком, риск развития заболевания ассоциировал (СЖ=3,88; С]95о/о 2,37-6,37) с делецией С8ТТ1 гена. Однако, для больных РГ характерным оказались сочетанные генотипы, одним из обязательных условий которых являлось наличие делеции в одном из изученных генов. Были выявлены статистически значимые различия по частоте встречаемости делетированного С8ТМ1 (р=0,0001), в возрастных группах 40-59 лет и 60-75 лет а также в отношении ассоциации данного параметра с полом больных (р=0,001), что еще раз подтверждает литературные данные относительно преобладания среди больных РГ лиц мужского пола в возрасте с 59-79 лет и старше. Статистически значимые результаты получены и в отношении курящих и некурящих больных-носителей делеции по М1 гену, указывая на возможный вклад вредной привычки совместно со структурным нарушением генома в патогенез рака гортани. Вместе с тем, в отношении стажа курения, количества между носителями делеции по этому гену показаны достоверные различия. Однако корреляционный анализ показал наличие связи между С8ТТ1 - курением (г=0,198; р=0,04) и количеством выкуриваемых сигарет (г=0,256; р=0,0001).

У ВПЧ-позитивных больных РГ, в генах которых выявлена делеция хотя бы в одном изученном гене, не наблюдалось одновременного наличия делеции в обоих генах, при этом делеция С8ТТ1 и в8ТМ1 генов зафиксирована в группе обследованных пациентов с одинаковой частотой, что может свидетельствовать о равновероятном вкладе обоих генов в развитие рака гортани.

Таким образом, показаны: высокий уровень инфицированности и широкий спектр изученных типов вируса папилломы человека в прилежащей и опухолевой ткани больных раком гортани; инфицирование ВПЧ большинства больных раком гортани с III стадией и умеренной степенью дифференцировки опухоли; преимущественное выявление ВПЧ 6 и 11 у больных раком гортани с коротким периодом предшествующего хронического заболевания; высокие значения (с преобладанием значения 1:320) антител класса в к вирусному капсидному и комплексу ранних антигенов вируса Эпштейна-Барр у больных с III стадией заболевания; статистически значимое повышение серопозитивных к антигенам литической инфекции ВЭБ случаев у больных раком гортани с ТЗ опухолью по сравнению с Т2 и XI; синтез маркера латентной инфекции ЬМР-1 ВЭБ в опухолевых клетках больных раком гортани, сочетающийся с синтезом антигенов литической инфекции ВЭБ; максимальная частота делеции гена фермента детоксикации ксенобиотиков в8ТТ1 и ассоциированный с ним повышенный риск развития РГ.

Изученные особенности экспрессии молекулярно-биологических маркеров онкогенных вирусов важны как для формирования групп повышенного риска по развитию опухолей гортани, так и для прогнозирования клинического течения заболевания. Тем не менее, принимая во внимание полученные в работе результаты, можно заключить, что вклад и значение вирусной составляющей в этиопатогенез рака гортани неоднозначны и, порой, противоречивы, что еще раз подтверждает сложность взаимоотношений между вирусом и организмом и требует дальнейшего изучения и осмысления.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шилова, Ольга Юрьевна, 2008 год

1. Арефьева Н. А. Иммунопатология и проблемы иммунотерапии в ринологии / Н. А. Арефьева, Ю. А. Медведев, Р. М. Фазлеев. — Уфа, 1997.- 120 с.

2. Афанасьева Т. А. Молекуляно-биологические аспекты канцерогенеза, ассоциированного с вирусом Эпштейна-Барр / Т. А. Афанасьева, В. Э. Гурцевич // Молекулярная биология. 1998. - Т.32, № 6. - С. 940-947.

3. Балукова О. В. Нарушение отдельных генов клеточного цикла на различных стадиях развития опухолей гортани (экспериментальное исследование): автореф. дисс.канд. биол. наук. / О. В. Балукова. — Москва, 2005.-21 с.

4. Баранов В. С. Гены предрасположенности или болезни, которые нас выбирают / В. С. Баранов // Наука в России. 2003. - № 1. - С. 27-31.

5. Белицкий Г. А. Факторы индивидуальной чувствительности к генотоксическим канцерогенам / Г. А. Белицкий, М. А. Добровольская, М. Г. Якубовская // Генетика. 1998. - № 5. - С. 59 -74.

6. Белушкина Н. Н. Контроль процессов апоптоза белками семейства Ьс1-2 / Н. Н. Белушкина // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химиии. 2000. - №4. - С.6-18.

7. Букринская А. Г. Молекулярные основы патогенности вирусов / А. Г. Букринская, В. М. Жданов. М.: Медицина, 1991. - 255 с.

8. Быкорез А. И. Причины рака: факты и гипотезы / А. И. Быкорез, Б. JI. Рубенчик. Киев: Наукова думка, 1987. - 120 с.

9. П.Виноградов В. В. Клинико-онкологические аспекты комбинированного лечения больных раком гортани и гортаноглотки III и IV стадии / В. В. Виноградов, А. JI. Клочихин // Российская оториноларингология. 2007. - №1. - С. 192-195.

10. Вознесенская И. А. Папилломы верхних дыхательных путей. — М.: Медицина, 1974. С.25.

11. Геном человека и гены «предрасположенности»: (Введение в предиктивную медицину) / В. С. Баранов, В. Е. Баранова, Т.Э. Иващенко, М. В. Асеев. Спб.: Интермедика, 2000. — 272 с.

12. Гены и ферменты системы метаболизма ксенобиотиков в онкопатологии / В. В. Ляхович, В. А. Вавилин, Н. И. Гуткина и др. // Вопросы мед. химии. 1997. - Т. 43, № 5. - С. 330 - 338.

13. Георгиев Г. П. Как нормальная клетка превращается в раковую / Г. П. Георгиев // Соросовский образовательный журнал (биология). 1999. -№4.-С. 17-22.

14. Герайн В. Молекулярно-биологические аспекты ювенильного респираторного папилломатоза и его комбинированное лечение / В. Герайн, Д. Г. Чирешкин // Вестн. Оторинолар. 1996. - №4. - С.3-8.

15. Гончарова Е. В. Вирус Эпштейна-Барр и рак желудка: поиск и анализ вирусологических и молекулярно-генетических маркеровэкспериментальное исследование): автореф. дисс. канд.биол.наук. / Е.В. Гончарова. Москва, 2001. - 24 с.

16. Горькавцева Р. Ф. Молекулярно-генетические аспекты злокачественных новообразований / Р. Ф. Горькавцева, И. В. Горькавцев // Вестник РАМН. 1999. - № 2. - С. 38 - 44.

17. Гурцевич В. Э. Онкогенные вирусы и их маркеры в диагностике и мониторинге злокачественных новообразований человека / В. Э. Гурцевич, Н. Б. Сенюта, О. К. Павлиш // Русск. Журнал "ВИЧ, СПИД и родственные проблемы". 2002а. - Т. 6. - №1. - С. 22-32.

18. Гурцевич В. Э. Структурные и функциональные особенности гена ЬМР-1 вируса Эпштейна-Барр у больных недифференцированным раком носоглотки в России / В. Э. Гурцевич, Л. Н. Щербак, Е. В. Новикова // Вестник РАМН. 20026. - № 1. - С. 53-59.

19. Давыдов М. И. Злокачественные новообразования в России и станах СНГ в 2000 г. / М. И. Давыдов, Е. М. Аксель. М., 2002. - 281 с.

20. Дмитриев Г. А. Качество лабораторной диагностики инфекций, передаваемых половым путем / Г. А. Дмитриев // Гинекология: журнал для практических врачей. 2006. - Т.8. - №5/6 - С. 17-21.

21. Молекулярная генетика опухолей человека / Е. Н. Имянитов, В. П. Калиновский, П. Г. Князев, А. А. Лыщев // Вопросы онкологии. -1997.-Т. 43. №1. - С. 95-101.

22. Долл Р. Причины рака / Р. Долл, Р. Пито. Киев: Наукова думка, 1984.-254 с.

23. Жолдакова 3. И. Механизмы процессов биоактивации чужеродных химических веществ под действием ферментных систем организма / 3. И. Жолдакова, Н. В. Харчевникова // Вестник РАМН. 2002. - № 8. -С. 44-50.

24. Заридзе Д. Г. Эпидемиология и профилактика рака / Д. Г. Заридзе // Вестн. Рос. акад. мед. наук. 2001. - №9. - С. 6-14.

25. Курение основная причина высокой смертности россиян / Д. Г. Заридзе, Р. С. Карпов, С. М. Киселева и др. // Вестник РАМН. - 2002. -№9.-С. 40-45.

26. Заридзе Д. Г. Эпидемиология, механизмы канцерогенеза и профилактики рака / Д. Г. Заридзе // Проблемы клинической медицины. 2005. - №2. - С. 10-16.

27. Злокачественные опухоли головы и шеи / 3. Д. Кицманюк, Е. Л. Чойнзонов, В. А. Новиков, В. В. Карасева. Томск: 8ТТ. - 1998. - С. 384.

28. Иванченко Г. Ф. Профилактика и лечение папилломатоза гортани / Г. Ф. Иванченко, Ф. С. Каримова // Заболевание голосового аппарата верхних дыхательных путей. М.: Боргес. - 2001. - С. 111-113.

29. Исаева Т. М. Динамика антител к вирусу Эпштейна-Барр как дополнительный диагностический и прогностический критерий при опухолях головы и шеи: автореф. дис. . канд. мед. наук / Т. М. Исаева -Томск, 1990.-20 с.

30. Исаков В. А. Герпес: патогенез и лабораторная диагностика / В. А. Исаков, В. В. Борисов, В. Д. Исаков. М.: Лань, 1999. - 192с.

31. Исследование иммунологических показателей у детей с папилломатозом гортани и возможные пути иммунокоррекции / Т. И. Гаращенко, Т. П. Маркова, Д. Г. Чувиров // Вестн. Оторинолар. 1996. - №4 - С. 15-18.

32. Киселев В. И. Этиологическая роль вируса папилломы человека в развитии шейки матки: генетические и патогенентические механизмы / В. И. Киселев, О. И. Киселев // Цитокины и воспаление. 2003. - Т.2, № 4. - С.31-38.

33. Киселев Ф. Л. Вирус-ассоциированные опухоли человека / Ф. Л. Киселев // Биохимия. 2000. - № 65. - С. 68-77.

34. Клинико-иммунологическая хаактеристика рецидивирующего респираторного папилломатоза / М. С. Плужников, Е. Б. Катинас, М.

35. A. Рябова и др. // Российская оториноларингология. 2006. - № 3. -С.22-27.

36. Копнин Б. П. Неопластическая клетка: основные свойства и механизмы их возникновения / Б. П. Копнин // Практическая онкология. 2002. - Т.З, №4 - С. 229-235.

37. Кулинский В. И. Обезвреживание ксенобиотиков / В.И. Кулинский // Соросовский образовательный журнал. 1999. - № 1. - С. 8 - 12.

38. Левшин В. Ф. Табак и злокачественные новообразования / В.Ф. Левшин, Д. Г. Заридзе // Вопросы онкологии. 2003. - Т.49, № 4. -С.391-399.

39. Леенман Е. Е. О роли вируса Эпштейна-Барр в патогенезе лимфогрануломатоза, иммуногистохимическое и молекулярно-биологичкское (гибридизация in situ) исследование / Е. Е. Леенман, Б.

40. B. Афанасьев, К. М. Пожарисский // Архив патологии. 1999. - Т.61, №1. - С. 15-22.

41. Львов М. Д. Вирусы герпеса человека 6, 7, 8 типов - новые патогены семейства Herpesviriadae / М. Д. Львов, А. Д. Мельниченко // Вопросы вирусологии. - 1999. - № 3. - С. 105 - 111.

42. Мазуренко Н. Н. Роль вирусов папиллом человека в канцерогенезе шейки матки / Н. Н. Мазуренко // Современная онкология. 2003. - Т. 5,№ 1.-С.1-8.

43. Макушкина О. В. Хроническая патология ЛОР-органов в условиях мелкодисперсного загрязнения воздуха рабочей зоны у работников табачной и фармацевтической промышленности / О. В. Макушкина // Вестник Оториноларингологии. — 2004. — Т.5. С.25-27.

44. Нурмухамедов P. X. Патогенез, клиника и лечение ювенильного респтраторного папилломатоза у детей: автореф. дисс. канд. мед. наук. / P. X. Нурмухаметов. Москва, 1998.- 20 с.

45. Нурмухаметова Е. В. Роль р53 в возникновении и развитии злокачественных опухолей / Е. В. Нурмухаметова // Русский медицинский журнал. 1996. - Т.4, № 6. - С. 11-14.

46. Обнаружение и характеристика опухолей желудка, ассоциированных с вирусом герпеса Эпстейна-Барр / В. Э. Гурцевич, С. А. Галецкий, С. Н. Неред и др. // Вестник РАМН. 1999. - № 3. - С. 56-60.

47. Ольшанский В. О. Хирургическая реабилитация голосовой функции после полного удаления гортани / В. О. Ольшанский, Л. Г. Кожанов. — М.- 1995.-С.46-63.

48. Осипов В. Д. Влияние загрязнения атмосферного воздуха в крупном промышленном городе на эпидемиологию рака гортани / В.Д. Осипов // Российская оториноларингология. 2005 а. - № 5. - С. 78-80.

49. Осипов В.Д. Применение ингаляций и спелеотерапии в профилактике и лечении воспалительных заболеваний гортани у рабочих металлургических предприятий / В. Д. Осипов, Н.В. Мингалев, А. П. Ильин // Российская оториноларингология. — 2005 б. № 5. - С 80-82.

50. Папилломавирусная инфекция в предопухолевых и опухолевых образованиях гортани / О. В. Балукова, Л. Н. Щербак, Н. А. Савелов, Г. В. Унгиадзе и др. // Вестник оториноларингологии. 2004. — Т.1. -С. 36-38.

51. Пачес А. И. Опухоли головы и шеи / А. И. Пачес. — М.: Медицина. -2000. С. 480.

52. Полиморфизм гена 08ТМ1 в группах предрасположенности и резистентности к раку легкого / Е. В. Белогубова, А. В., Т. В. Кондратьева и др. // Вопросы онкологии. 2000 — Т.46, № 5. - С. 549 -554.

53. Полиморфизм глутатион-8-трансфераз М1 и Т1 в ряде популяций России / С. Н. Попова, П. А.Сломинский, С. Н. Галушкин и др. // Генетика. 2002. - Т. 38, № 2. - С. 281 - 284.

54. Результаты выявления маркеров герпесвирусов у пациентов с предраковыми заболеваниями легких и желудка / Е. Н. Кологривова, А. А. Шишков, О. В. Черемисина и др. // Вопросы онкологии. — 2003. — Т.49, №2. С. 156-159.

55. Роль папилломавирусной инфекции при раке яичников / Л. А. Ашрафян, В. И. Киселев, Г. П. Снигирева, С. В. Мухтарулина // -Российский онкологический журнал. 2005. - № 4. - С. 50-52.

56. Рузаев Л. Н. Ассоциация некоторых опухолей с вирусом Эпштейна-Барр и инфицированность им населения севера Сибири / Л.Н. Рузаев: дис. канд. мед. наук / Л. Н. Рузаев Томск, 1985. - 259 с.

57. Саприн А. Н. Ферменты метаболизма и детоксикации ксенобиотиков / А. Н. Саприн // Успехи биол. химии. 1991. - Т.32. - С. 146 - 172.

58. Севостьянова Н. В. Особенности и механизмы экспрессии молекулярно-биологических маркеров опухолевого роста при раке легкого: автореф. дис. . докт. мед. наук / Н. В. Севостьянова Томск, 2004. - 20 с.

59. Серологические и эпидемиологические особенности инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр, в республике Беларусь / Л. П. Титов, Е. О. Самойлович, Б. Кочановский, X. И. Вольф // Вестник онкологии. 1999. - №1. - С. 21-24.

60. Саприн А. Н. Ферменты метаболизма и детоксикации ксенобиотиков / А. Н. Саприн//Успехи биол. химии. 1991. - Т.32. - С. 146 - 172.

61. Севостьянова Н. В. Особенности и механизмы экспрессии молекулярно-биологических маркеров опухолевого роста при раке легкого: дис. . докт. мед. наук / Н. В. Севостьянова. Томск, 2004. — С. 18-21.

62. Стимуляция опухолевого процесса под влиянием персистентной вирусной инфекции / Фирсова Г. А., Мамедов М. К., Трещалина Е. М. и соавт. // Вестник Всесоюзного онкологического научного центра АМН СССР 1991. - №1. - С. 11-12.

63. Факторы риска развития рака гортани в странах восточной и центральной Европы / О. В. Шаньгина, А. М. Сдвижков, Л. Г. Кожанов и др. // Вопросы онкологии. 2007. - Т.53, № 3. - С. 321-328.

64. Чаклин А. В. Проблема века: онкология. 2-е издание / А. В. Чаклин. - М.: Знание, 1990. - 287 с.

65. Черемисина О. В. Возможности эндоскопической диагностики предопухолевых заболеваний и рака гортани в современной онкологии / О. В. Черемисина, Е. Л. Чойнзонов // Сибирский онкологический журнал. 2007. - № 3. - С. 5-9.

66. Чирешкин Д. Г. Хроническая обструкция гортанной части глотки, гортани и трахеи у детей. М.: Медицина, 1994. - 56 с.

67. Чиссов В. И. Состояние онкологической помощи населению Российской Федерации / В. И. Чиссов, В. В. Старинский, Б. Н. Ковалев и др. // Рос. онкол. журн. 2000. - №1. - С. 5-12.

68. Чойнзонов Е. Л. Рак верхних отделов дыхательного и пищварительного тракта (эпидемиологические и иммунологические аспекты, оценка эффективности лечения): автореф. дис. . докт. мед. наук / Е. Л Чойнзонов. Томск, 1995. - 46 с.

69. Чумаков Ф. И. О распространенности и некоторых особенностях хронического гиперпластического ларингита / Ф. И. Чумаков, Т. А. Рогачикова// Вест. Оторинолар. 2002. - №2. - С. 31-33.

70. Юрков А. Ю. Функциональное состояние вегетативной нервной системы у больных с хроническим гипертрофическим ларингитом / А. Ю. Юрков, Т. И. Шустова // Российская оториноларингология. 2005. - № 4. - С. 133-137.

71. Юрков А. Ю. Нейровегетативные расстройства у больных раком гортани / А. Ю. Юрков, Т. И. Шустова, В. С. Ушаков // Российская оториноларингология. 2006. - № 6. - С. 66-68.

72. Яблонский С. В. Клиника, диагностика и лечение изолированного папилломатоза трахеи и легких у детей / С. В. Яблонский // Российская оториноларингология. — 2003. № 2. — С. 205-207.

73. Abundant expression of EBER1 small nuclear RNA in nasopharyngeal carcinoma / T.-C. Wu, R. B. Mann, I. J. Epstein et al. // Am J Pathol. -1999.-№138.-P. 1461-1469.

74. Aaltonen L. Human papillomavirus in larynx cancer / L. M. Aaltonen, H. Rihkanen, A. Vaheri // Laryngoscope. - 2002. - Т. 112. - № 4. - P. 700-707.

75. Adivano M. A. Adjuvant drug strategies in the treatment of recurrent respiratory papillomatosis / M. A. Adivano, G. T. Singleton // Otolaryngol. Head. Nesk. Surg 1995.

76. Age-dependence of human papillomavirus DNA presence in oral squamouse cell carcinomas / I. B. Crus, P. J. Snijders, R. D. Steenberger et al. // Eur J Cancer & Oral Oncol. 1996. - № 32B. - P. 55-62.

77. Anagnostopoulos I. Morphology, immunophentype and distribution of latently and or productively Epstein-Barr virus / I. Anagnostopoulos, M. Hammel, C. Kreschel // Blood. 1995. - Vol.85, № 3. - P. 744-750.

78. Antibody to Epstein-Barr virus-specific Dnase as a marker for the early detection of nasopharyngeal carcinoma / Chen Jen-Yang, Liu Mei-Ying, Chen Chien-Jen et al. // J. Med. Virol. 1985. - Voll7, № 1. - P. 47-49.

79. Apoptosis: molecular regulation of cell death / A. J. Hale, C. A. Smith, L. C. Sutherland, V. E. A. Stoneman, et al. // Eur J Biochem. 1996. - № 236. -P. 26.

80. Arrand R. Two families of sequence in the small RNA-encoding region or Epstein-Barr virus correlate with EBV types A and B / R. Arrand, S. Lavrence, J. Tugwood // J. Virol. 1989. - Vol.63. - P. 983-986.

81. Association HPV with cancer of the larynx / P. Busson, R McCoy, R Sadler, K. Gilligan, et al. // IIL Virol. 1992. - V.66. - P. 3257-3262.

82. Associations of CYP1A1. GSTM1, and CYP2E1 polymorphisms with lung cancer suggest cell type specificities to tobacco carcinogens / L. Le Marchand, L. Sivaraman, L. Pierce et al. // Cancer Res. 1998. - Vol.58-P. 4858-4863.

83. Association of the A870G cyclin D1 gene polymorphism with genetic susceptibility to nasopharyngeal carcinoma / R. J. Catarino, E. Breda, V. Coelho, D. Pinto, et al. // Head & Neck. 2006. - №5. - P. 2234-2236.

84. Atula S. Human papillomavirus and Epstein-Barr in epithelial carcinomas of the head and neck region / S. Atula, E. Auvinen, R. Grenman // Anticncer Res. 1997. - № 17. - P. 4427-4433.

85. Badaracco G. Human in head and neck carcinomas: prevalence, physical status and relationship with clinical/pathological parameters // G. Badaracco, A. Venuti, R. Morello, A. Muller // anticancer Res. 2000. - № 20. - P. 1301-1305.

86. Beer-Romero P. Antisense targeting of E6AP elevates p53 in HPV-infected cells but not in normal cells. / P. Beer-Romero, S. Glass, M. Rolfe // Oncogene. 1997. - № 14. - P. 595-602.

87. Bernardo A. LMP1 strain variant: biological and molecular properties / A. Bernardo, M. Raab-Traub, N. Raab-Traub // Journal of Virology. 2006. -Vol. 80, № 13. - P. 6458-6468.

88. Bogger-Horen S. Nasopharyngeal carcinoma in Israel: epidemiology and Epstein-Barr virus-related serology / S. Bogger-Horen // Eur J Cancer Clin Oncol. 1987.-№23.-P. 1277-1281.

89. Both cell proliferation and apoptosis increase with lesion grade in cervical neoplasia but do not correlate with human papillomavirus type / C. Isacson, T. D. Kessis, L. Hedrick, K. R. Cho // Cancer Res. 1996. - № 56. - P. 669-674.

90. Boyer S. N. E7 protein of human papilloma virus-16 induces degradation of retinoblastoma protein through the ubiquitin-proteasome pathway / SN. Boyer, D. E. Wazer, V. Band // Cancer Res. 1996. - № 56. - P. 46204624.

91. Butenko Z. A., Phylchenkov A. A. Modern concepts of viral oncogenesis: fundamental and applyied aspects // Experemental Oncology. 2000. - № 22. -P. 239-245.

92. Butler A. E. Colby T. V., Weiss L., Lombard C. HPV and cancer // II Am J Surg. Pathol. 1989. - V. 13. - P. 632-639.

93. Cancer incidence in five continents / D. M. Parkin, S. L.Whelan, J. Ferlay, L. Teppo. Lyon: IARC Scientific Publications. 2002.

94. Carcinoma: monoclonal epithelial malignant cells expressing Epstein-Barr virus latent infection protein / S. Lnai, S. Koizttmi, M. Sitgiura, M. Tokunaga // II Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994. - Vol. 91. - P. 9131-9135.

95. Carroll M. C. The role of complement and complement receptors in induction and regulation of immunity / M. C. Carroll // Annu. Rev. Immunol. 1998. -№16. - P.545.

96. Cason J. Vertical transmission of human papillomaviruses / J. Cason, J. M. Best, R. S. Raju. // Am Obstet Gynecol. 1999. - № 180. - P. 774-775.

97. Chao T. Y. Expression of Epstein-Barr virus-encoded RNAs as a marker for metastatic undifferentiated nasopharyngeal carcinoma / T. Y. Chao, K. C. Chow, J. Y. Chang // Cancer. 1996. - №1. - P.24-29.

98. Cohen J. I. Epstein-Barr virus and the immune system. Hide and seek / J. I. Cohen // JAMA. 1997. - Vol.278. - P. 510-513.

99. Combined effect of polymorphic GST genes on individual susceptibility to lung cancer / S. T. Saarikoski, A. Voho, M. Reinikainen et al. // Int. J. Cancer. 1998. - Vol. 77. - P. 516 - 521.

100. Correlation of apoptosis with tumour cell differentiation, progression, and HPV infection in cervical carcinoma / Y. Shoji, M. Saegusa, Y. Takano, M. Ohbu, et al. // J Clin Pathol. 1996. - № 49. P. 134-138.

101. Correnti M. Detection of papillomaviruses of high oncogenic potential in oral squamous cell carcinoma in a Venezuelan population / M. Correnti, H. Rivera, ME. Cavazza // Oral Dis. 2004. - № 10. - P. 163-166.

102. Detection of Epstein-Barr virus DNA and RNA in human pharyngeal epithelial cells / J. W. Sixbey, J. G. Nedmd, A. Raab-Trauh, R. A. Hwies // Engl. J. Med. 1984.-Vol.310.-P. 1225-1230.

103. Decreased programmed cell death in the uterine cervix associated with high risk human papillomavirus infection / P. Nair, K. M. Nair, P. G. Jayaprakash, M.R. Pillai // Pathol Oncol Res. 1999. - № 5. - P. 95-103.

104. Detection of human papillomavirus in juvenile laryngeal papillomatosis using polymerase chain reaction / M. A. Gomez, R. Drut, M. M. Lojo, R. M. Drut //Medicina (B. Aries). 1995. - Vol. 55, №3. - P. 213-217.

105. Dongsheng Xu. The latent membrane protein 1 of Epstein-Barr virus (EBV) primes EBV latency cell for type 1 interferon production / Xu Dongsheng, K. Brumm, L. Zhang // J. Biol. Chem. 2006. - Vol. 281, № 14. - P. 9163-9169.

106. EBV DNA in biopsies of Burkitt tumours and anaplastic carcinomas of the nasopharynx / H. zur Hausen, H. Schulte-Holthausen, G. Klein et al. // Nature. 1970. - № 228. - P. 1056-1058.

107. Epstein M. A. Virus particles in cultured lymphoblasts from Burcitts lymphoma / M. A. Epstein, B. C. Achong, Y. M. Barr // Lancet. 1964. -Vol.1.-P. 702-703.

108. Epstein-Barr virus in head and neck cancer assessed by quantitative polymerase chain reaction / D. Goldenberg, N. E. Benoit, S. Begum et al. // Laryngoscope. 2004. - № 114. - P. 1027-1031.

109. Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma and Epstein-Barr virus infection of the stomach / M. Fukayama, Y. Hayashi, Y. Iwasaki et al. // Lab. Invest. 1994. -№ 71.-P. 73-81.

110. Epstein M. A. Culttivation in vitro of human lymphobllasts from Burkitt's malignant lymphoma / M. A. Epstein, Y. M. Barr // Lancet. 1964. -Vol.1.-P.252-253.

111. Evidence that respiratory tract is major reservoir for Epstein-Barr virus / M. L. Lang., W. K. Lam, S. Y. So et al. // Lancet. 1985. - Vol.84. -P.889-892.

112. Evidence for causal association between human papillomavirusand subset of head and neck cancers / M. L. Gillison, W. M. Koch, R. B. Capone, M. Spafford, W. H. Westra, L. Wu // O Natl Cancer Inst. 2000. - № 92. - P. 709-720.

113. Extranodal head and neck lymphomas in Guatemala: high frequency of Epstein-Barr virus-associated sinonasal lymphomas / M. van de Rijn, V. Molina-Kirrsch, R. Carlos-Bregni et al. // Hum Pathol. 1997. - № 28. -P. 834-839.

114. Farrell PJ. Epstein-Barr virus genes and cancer cells / P. J. Farrell, I. Cludts, A. Stuhler // Biomed Pharmacother. 1997. - № 51. - P. 258-267.

115. Fearon DT. Complement receptor tupel (C3/C4b receptor, CD35) and complement receptor type 2 (C3d/Epstein-Barr virus receptor; CD21) / DT. Fearon, JM. Ahearn// Curr. Top. Microbiol. Immunol. 1990. - № 153. - P. 83.

116. Ferlay J. GLOBOCAN 2000: Cancer incidence, Mortality and Prevalence: Worldwide IARC Cancer Base № 5. version 1.0. Lyon, IARC Press, 2001.

117. Foppa I. Power and sample size calculations for case-control studies of gene-environment interactions with a polytomous exposure variable / I. Foppa, D. Spiegelman // Am. J. Epidemiol. 1997. - Vol. 146. - P. 596 -604.

118. Ford J. G. Glutathion S-transferase Ml polymorphism and lung cancer risk in African-Americans / J. G. Ford, Y. Li, M. M. O'Sullivan // Carcinogenesis. 2000. - Vol.21. - P. 1971 - 1975.

119. Fries K. L. Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 blocks p53-mediated apoptosis through the induction of the A20 gene / K. L. Fries, W.E. Miller, N. R. Traub // J. Virol. 1996. - № 70. - P. 8653-8659.

120. Fukushima K. Human papillomavirus type 16 DNA detected by the polymerase chain reaction in non-cancer tissues of the head and neck / K.

121. Fukushima, H. Ogura, S. Watanabe // Europ. Arch. Otorhinolaryngol. -1994. Vol. 251, № 2.-P. 109-112.

122. Functional analysis of different LMP1 proteins isolated from Epatein-Barr virus-positive carries / N. Fischer, B. Kopper, J. Graf et al. // Virus Res. -1999. -№60.-P. 41-54.

123. Gale N. Laringeal papillomatosis: molecular, histopathological, and clinical evaluation / N. Gale, M. Poijak, V. Kambic // Virchows Arch. -1994. Vol. 425, № 3. - P. 291-295.

124. Gallo O. Cancer and viruses / O. Gallo, I. Chiarelli, V. Boddi // Int. J. Cancer.- 1999,- Vol. 84.- P. 573-579.

125. Garcia-Closas M. Power and sample size calculations in case-control studies of gene-environment interactions: comments on different approaches / M. Garcia-Closas, J. H. Lubin // Am. J. Epidemiol-1999-Vol. 149.-P. 689-692.

126. Garcia-Milian R. Detection and typing of human papillomavirus DNA in benign and malignant tumours of laryngeal epithelium // R. Garcia-Milian, H. Hernandes, L. Panade // Acta Otolaryngol. 1998. - № 118. -P. 754-758.

127. Genetic polymorphism of glutathione S-transferases Ml and T1 as a risk factor in lung and bladder cancers / J. Salagovic, I. Kalina, J. Stubna et al. // Neoplasma. 1998. - Vol. 45. - P.312-317.

128. Genital human papillomavirus (HPV) infection in Hungarian women / J. Czegledy, G. Veress, J. Kenya, L. Gergelv // Acta Microbiol Hung. -1993,- Vol. 40, №2. P. 115-122.

129. Glutathione S-transferase GSTM3 and GSTP1 genotypes and larynx cancer risk / N. Jourenkova-Mironova, A. Voho, C. Boucgardy et al. // Cancer Epidemiology Biomarkers & Prevention. 1999. - Vol. 8. - P. 185-188.

130. Glutathione S-transferases genetic polymorphisms and human diseases: overview of epidemiological studies / M. Habdous, G. Siest., B. Herbeth. et al. // Ami Biol Clin. 2004. - № 62. - P. 15-24.

131. Go C. Molecular transformation of recurrent respiratory papillomatosis: viral typing and p53 overexpression / C. Go, M. R. Schwartz, D. T. Donovan // Ann Oto Rhinol Laryngol. 2003. - Apr, № 112. - P. 298302.

132. Grossman S. R. Association cancer with viruses / S. R Grossman, E. Johannsen, X. Tong, R. Yalaman-chili // II Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1994.-V.91.-P. 7568-7572.

133. Hashida T. Induction of chromosome abnormalities in mouse and human epidermal keratinocytes by the human papillomavirus type 16 E7 oncogene / T. Hashida, S. Yasumoto // J Gen Virol. 1991. - № 72. - P. 1569-1577.

134. Hearing J. Expression and mapping of an Epstein-Barr virus nuclear antigen EBNA / J. Hearing, A. J. Levine // Cancer cells. 1984. - Vol.2. -P.411-418.

135. Henle G., Seroepidemiology of the virus Epstein / G. Henle, W. Henle // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1968. - V. 59. - P. 94-101.

136. Herrero R. Human papillomavirus and cancer of upper aerodigestive tract / R. Herrero, N. Munos // Cancer Surv. 2004. - № 33. - P. 75-98.

137. Hirvonen A. Combination of susceptible genotypes and individual responses to toxicants / A. Hirvonen // Environ. Health Perspect. 1997. -№ 105.-P. 755-758.

138. Hong YJ. Influence of glutathione S-transferase Ml and T1 genotypes on larynx cancer risk among Korean smokers / Y. J. Hong, J. K. Lee, G. H. Hong // Clin Chem Lab Med. 2000. - № 38. - P. 917-9.

139. Human papillomavirus (HPV) is rarely present in normal oral and nasal mucosa / A. Eike, C. Buchwald, J. Rolighed, H. Lindeberg // Clin. Otolaryngol. 1995. - № 20. - P. 171-173.

140. High risk genital papillomavirus infection are not spread vertically / J. Dillner, A. Andersson-Ellstrom, B. Hagmer, J. Schiller // Med Virol. -1999. -№ 9. P. 23-29.

141. High-risk human papillomavirus types and squamous cell carcinoma in patients with respiratory papillomas / C. E. Moore, B. J. Wiatrak, K. D. McClatchey, C. F. Koopmann, et al. // Otolaryngol Head Neck Surg. -1999. Vol. 120, № 5. - P. 698-705.

142. High prevalence of human papillomaviruses in normal oral cavity of adults / M. Terai, K. Hashimoto, K. Yoda, T. Sata // Oral Microbiol Immunol. 1999. - № 14. - P. 210-205.

143. Human papillomaviruses in patients with larynx cancer / G. Almadory, G. Gadoni, P. Cattani P. Posteraro, E. Scarano // Clin. Cancer Res. 2001.-Vol. 7.- P. 3988-3993.

144. HPV-induced squamous cell carcinoma of the larynx / L. Brooks, Q. Yao, A. Rickinson, L. Young // II J. Virol. 1992. - V. 66. - P. 2689-2697.

145. HPV-association cancer head and neck / S. L. Glaser, RJ. Lin, R.F. Ambinder, F. R. Jatrett, et al. // Int. J. Cancer. -1997. V. 70, N 4. - P. 375-382.

146. Human papillomavirus its association with epithelial proliferative lesions / L. J. Costa, F. R. Silveira, J. M. Batista, E. G. Birman // Braz Dent J. - 1994.-T. 5. № l.-P. 5-10.

147. Human papilloma viruses and p53 mutations in normal pre-malignant and malignant oral epithelia / E. J. Mao, S. M. Schwartz, D. Oda et al. // Int J Cancer.-1996.-№69.-P. 152-158.

148. Human papillomavirus and risk of laryngeal cancer / E. M. Smith, K. F. Summersgill, J. Allen, H. T. Hoffman // Ann. Otol Rhinol Laryngol. -2000.-Vol.109, № 11.-P. 1069-1076.

149. Human papillomaviruses in normal oral mucosa: a comparison of methods for sample collection / G. Lawton, S. Thomas, J. Schonrock et al. // J Oral Pathol Med. 1992. - № 21. - P. 265-269.

150. Human papillomavirus type 16 E7 protein sensitizes cervical keratinocytes to apoptosis and release of interleukin-1 alpha / M. Iglesias, K. Yen, D. Gaiotti, A. Hildesheim, et al. // Oncogene. 1998. - № 17. -P. 1195-205.

151. Human papillomavirus (HPV) type 16 and 18 detected in head and neck squamouse cell carcinoma / H. Mineta, T. Ogino, H. M Amano, Y. Ohkawa, K. Araki // Anticancer Res. 1998. - № 18. - P. 4765-4768.

152. Human papillomavirus-11-associated recurrent respiratory papillomatosis is more agressive than papillomavirus-6-associated disease / R. Rabach, W. D. Lancaster, R. Tomas, L. Gregoire // Pediat Dev Pathol.- 2001. -Vol. 4, №. 1. P. 68-72.

153. Human papillomavirus (HPV) infection of the upper respiratory tract of healthy children / J. Szydlowski, E. Fike, K.Zimna et al. // Advances in pediatric otorhinolaryngology. 1999. - V. 7. - P. 109-112.

154. Hyperplastic lesion of the larynx. Experience of the Barcelona groups. / B. Azzimonti, L. Hertel, P. Aluffi et al. // J Med/ Virol. 1999.- Vol. 59. -P. 110-116.

155. Identification of p53 and human papilloma virus in Schneiderian papillomas / N. Mirza, K. Montone, Y. Sato et al. // Laryngoscope. -1998. -№108(4). -P. 497-501.

156. Incidence of human papillomavirus 6, 11, 16, 18 and 33 in normal oral mucosa of a Greek population / AF. Lambropoulos, J. Dimitrakopoulus, E. Frangoulides et al. // Eur J Oral Sci. 1997. - №105. - P. 294-297.

157. Increased expression of nuclear factor E2 p45-related factor 2 (NRF2) in head and neck squamous cell carcinomas / D. R.Stacy, K. Ely, P. P. Massion, W. G.Yarbrough, et al. // Head & Neck. 2006. - №24. -P. 123126.

158. International Agency for Research on Cancer. Tobacco smoke and involuntary smoking. IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans. -Lyon, 2004.-Vol. 83.-P. 1-1438.

159. Ishii H. Interrelationship between Epstein-Barr virus infection in gastric carcinomas and expression of apoptosis-associated proteins / H. Ishii, n. Gobe, Y. Sato, Y. Ebihara // Histophatology. 2001. - № 38. -P. 111-119.

160. Iwatsuki K. Plane warts under spontaneous regression. Immunopathologic study on cellular constituents leading to an inflammatory reaction / K. Iwatsuki, M. Tagami // Arch.Dermatol.-1986.-V.122.-P.655-659.

161. Izumi K. M. Identification of EBV transforming genes by recombinant EBV technology / K. M. Izumi // Semin Cancer Biol. 2001. - №1 1. -P. 407-414.

162. Jacob S. Problems of cancer / S. Jacob, E. Sreevidya, E. Chacko, M. R. Pillai // J. Surg. Oncol.- 2002,- Vol. 79. P. 42-50.

163. Jakubikoba J. It is possible to predict the clinical development of juvenile papillomatosis of the larynx / J. Jakubikoba, B. Ondrus. 7 International Congress of Pediatric Otorhinolaryngology. Helsinki. 1998. - P. 209.

164. Jakubikoba J. It is possible to predict the clinical development of juvenilejLpapillomatosis of the larynx / J. Jakubikoba, B. Ondrus. 7 International Congress of Pediatric Otorhinolaryngology. Helsinki. 1998. - P. 209.

165. Kashima H. K. Recurrent respiratory papillomatosis / H. K. Kashima, P. Mounts, K. Shah // Obstet Gynecol Clin North Am.-1996. Vol.23, №3. -P.699-706.

166. Kaye K. Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 is essential for B-lymphocyte growth transformation / K. Kaye, K. Izunii, E. Kieff // II Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993. - V. 90. - P. 9150-9154.

167. Kinzler K. W. Cancer-susceptibility genes. Gatekeepers and caretakers / K. W. Kinzler, B. Vogelstein // Nature (Lond.). 1997. - Vol. 386. - P. 761 - 763.

168. Klein G. Epstein-Barr virus and human lymphomas / G. Klein, E. Klein // The lymphomas. 1998. - № 1. - P. 63-73.

169. Le Roux F. Epstein-Barr virus and nasopharyngeal carcinoma / F. Le Roux, I. Joab // Epstein-Barr virus Report. 1998. - № 5. - P. 53-57.

170. Leon S., Lambert P. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1995. - Vol. 92. - P. 1654-1658.

171. Liy E. S. Presence of human papillomavirus in squamouse cell laryngeal carcinomas. A study of thirty-nine cases using PCR and in situ hybridization // E. S. Liy, F. Karlsen, R. Holm // Acta Otolaryngol. -1996.-№ ll.-C. 900-905.

172. Loeb L. Multiple mutation and cancer / L. Loeb, K. Loeb, J. Anderson // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2003. - Vol. 100, № 3. P. 776-781.

173. Loss of heterozygosity on chromosome 9p 13-23 in microdissected laryngeal squamous cell carcinoma by microsatellite analysis / X. Xu, Q. An, J. Zhang et al. // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 2001. - № 36. - P. 367-371.

174. Maternal-fetal tramsmission of human papillomavirus / S. Alberico, R. Pinsana, M. Comar et al. // Minevra Ginecol.-1996.-Vol. 48, № 5. P. 199-204.

175. Matthew P. Epstein-Barr virus and cancer / P. Matthew, T. Kurzrock, R. Kurzrock // Clinical cancer Research. 2004. - Vol. 10. - P. 803-821.

176. McKaig R. G. Human papillomavirus and head and neck cancer: epidemiology and molecular biology / R. G. McKaig, R. S. Baric, A. F. Olshan // Head Neck. 1998. -Vol. 20. - P. 250-265.

177. Miller G. the switch between latency and replication of Epstein-Barr virus /G. Miller//J Infect Dis. 1990. -№ 161.-P. 833-844.

178. Morphological and immunohistochemical evidence suggesting human papillomavirus (HPV) involvement in oral squamous cell carcinogenesis / Syrjanen K., Syrjanen S., M. Lamberg et al. // Int J Oral Surg. 1983. - № 12.-P. 418-424.

179. Mounts P. Respiratory papillomatosis; Etiological relation to genital tract papillomaviruses / P. Mounts, K.V. Shah // Prog Med Virol. 1984. - № 29.-P. 90-114.

180. Multhaupt H. A. Detection of human papillomavirus in laryngeal lesions by in situ hybridization / H. A. Multhaupt, J. N. Fessler, M. J. Warhol // Hum Pathol. 1994. - Vol. 25, № 12. - P. 1302-1305.

181. Murray R. J. Virus-targeted therapy for EBV-associated malignancies / R. J. Murray, L. S. Young // Front Biosci. 2002. - № 7. - P. 519-540.

182. New association of human papillomavirus, simian virus 40, and Epstein-Barr virus with human cancer / M. Wong, J. S. Pagano, J. T. Shiller et al. // Journal of the National Cancer Institute. 2002. - Vol. 94, №24. - P. 1832-1836.

183. New type B isolates of Epstein-Barr virus from Burkitts lymphoma and from normal individuals in endemic areas / L. S. Young, Q. Y. Yao, C. M. Rooney et al. // J. Gen. Virol. 1987. - № 68. - P. 2853-2862.

184. Niedobitek G. Epstein-Barr virus persistence and virus-associated tumours / G. Niedobitek, L. S. Young // Lancet. 1994. - Vol. 343. -P. 333-335.

185. Olsen J. Interaction of alcohol and tobacco as risk factors in cancer of the larynx region / J. Olsen, S. Shabero, U. Fasting // J. Epidemiol Community Health. 1985. - № 39. - P. 165-168.

186. Parkin DM. The global health burden of infection associated cancer / DM. Parkin, P. Pisani, N. Munoz, J. Ferlay // Cancer Surv. 1999. - №3. - P. 5-33.

187. Patrick K. The role of human papillomavirus in oral carcinogenesis / K. Patrick, J. Ha, A. Califano // Crit Rev Oral Bio Med. 2004. - № 15. - P. 18-196.

188. Perera F. Environment and cancer. Who a susceptible? / F. Perera // Science. 1997. - Vol. 278, № 5340. - P. 1068 - 1073.

189. Persistant of human papillomavirus infection in HPV-infected and uninfected adolescent girls: risk factors and differences, by phylogenetictype / A. B. Moscicki, J. H. Ellenberg, S. Farhat, J. Xu // J Infect Dis. -2004. Jul 1. № 190. - P. 37-45.

190. Pim D. HPV-18 E6*I protein modulates the E6-directed degradation of p53 by binding to full-length HPV-18 E6 / D. Pim, L. Banks // Oncogene. 1999. - № 18. - P. 7403-7408.

191. Polymorphisms at the glutathione S-transferase GSTM1, GSTT1, and GSTP1 loci: risk of ovarian cancer by histological subtype / A. B. Spurdle, P. M. Webb, D. M. Purdie. et al. // Carcinogenesis. 2001. -Vol. 22.-P. 67-72.

192. Pou A. M. Aduit Respiratory Papillomatosis: human papillomavirus type and viral coinfections as oredictors of prognosis / A. M. Pou, F. K. Rimmeell, J. Jordan // Ann Otol. Rhinol. Laryngol.- 1995.- Vol. 104, №5.- P.758-762.

193. Prevalence and revalence of EBV latency in nasopharyngeal carcinoma in Israel / G. Bar-Sela, A. Kuten, I. Minkov E. Gov-Ari, O. Ben-Izhak // J Clin Phatol. 2004. - № 57. - P. 290-293.

194. Puranen M. H. Exposure of an infant to cervical human papillomavirus infection are not spread vertically / M. H. Puranen, S. Yliskovski, S. Syrjanen // Med Virol. 1999. - V. 9. - P. 23-29.

195. Ragin C. C. R. The epidemiology and risk factors of head and neck cancer: a focus on human papillomavirus / C. C. R. Ragin, F. Modugno, S.M. Gollin // O Dent Res. 2007. - № 86. - P. 104-115.

196. Rapp L. The papillomavirus E6 proteins / L. Rapp, J. J. Chen // Biochim Biophys Acta. 1998. -№ 137.-P. 1-19.

197. Rebbeck T. R. Molecular epidemiology of the human glutathione S-transferase genotypes GSTM1 and GSTT1 in cancer susceptibility / T.R. Rebbeck // Cancer Epidemiol. Biomark. Prev. 1997. - № 6. - P. 733743.

198. Reduced plasma RNA integrity in nasopharyngeal carcinoma patients / B. C. Wong, K. C.Chan, C. A. Than, S. F.Leung, et al. // Clin Cancer Res. -2006. -№ 12.-P. 2512-2516.

199. Rickinson A. Epstein-Barr virus / A. Rickinson, E. Kieff // Virology. -1996. №2. - P. 397-446.

200. Rimmeell F. L. Pediatric respiratory papillomatosis: prognostic role of viral typing and cofactor / F. L. Rimmeell, D. L. Shoemaker, A. M. Pou // Laryngoscope.-1997.-Vol. 107, № 7.- P. 915-918.

201. Role of glutathione S-transferase GSTM1, GSTM3, GSTP1 and GSTT1 genotypes in modulating susceptibility to smoking-related lung cancer / N. Jourenkova-Mironova, H. Wikman, C. Bouchardy et al. // Pharmacogenetics. 1998. - Vol. 8. - P. 495 - 502.

202. Role of vascular endothelial growth factor-A in recurrent respiratory papillomatosis / R. Rahbar, S. O. Vargas, J. Folkman, T. J. McGill, et al. // Ann Otol Rhinol Laryngol. 2005. - № 114. - P. 289-295.

203. Scholle F. Epstein-Barr virus LMP2A transforms epithelial cells, inhibits cell differentiation, and activates Akt / F. Scholle, K. M. Bendt, N. Raab-Traub // J Virol. 2000. - №74. - P. 10681-10689.

204. Scian M. J. Modulation of gene expression by tumour-derived p53 mutants / M. J. Scian // Cancer Res. 2004. - Vol 64, № 20. - P. 74477454.

205. Shafey O. Tobacco Control Country Profiles / O. Shafey, S. Dolwick, G.E. Guindon. 2nd edition. Geneva: ACS. WHO, UICC, 2003.

206. Shibata D. Association of Epstein-Barr virus with undifferentiated gastrc carcinomas with intens lymphoid infiltration: lymphoepitethelioma-Like carcinoma / D. Shibata, M. Tokunaga, M. Uemura // Am. J. Pathol. -1991.-Vol. 139. P. 469-474.

207. Smoking and drinking in relation to cancer of the otal cavity, pharynx, larynx, and esophagus in northern Italy / S. Franceschi, R. Talamini, S. Barra, A. E. Baron, et al. // Cancer Res. 1990. - № 50. - P. 6502-6507.

208. Structural and transcriptional analysis of human papillomavirus type 16 sequences in cervical carcinoma cell lines / C. C. Baker, W. C. Pheps, V. Lindgren et al. // J Virol. 1987. - № 61. - P. 962-971.

209. Study of cyfra 21-1, a tumor marker, in head and neck squamous cell carcinoma / P. Ceruse, M. Rabilloud, A. Charrie, C. Dubreuil, et al. // Ann Otol Rhinol Laryngol. 2005. - № 114. - P. 768-76.

210. Sugerman P. B. The high risk human papillomaviruses and oral cancer: evidence fr and against a causal relationship / P. B. Sugerman, E. J. Shillitoe // Oral Dis. 1997. - № 3. - P. 130-147.

211. Shin W.S. Cancer and viruses load / W. S. Shin, M. W. Kang, J. H. Kang // Am J. Clin. Pathol. 1996. - V. 105. P. 174-181.

212. Simons M. J. / M. J. Simons, Wee G. B., Goh E. H. // H J. Nat. Cancer Inst. -1976.-V. 57.-P. 977-980.

213. Sinonasal undifferentiated carcinoma; immunochistichemical profile and lack of EBV association / L. A. Cerilli, V. A. Hoist, M. S. Brandwein et al.//Am J Surg Pathol.-2001. -№25.-P. 156-163.

214. Somers G. R. Juvenile laryngeal papillomatosis in a pediatric population: a clinicopathologic study / G. R. Somers, S. N.Tabrizi, A. J. Borg // Pediatr Pathol Lab Med. 1997. - Vol. 17, № 1. - P. 53-64.

215. Song X. Epstein-Barr virus-encoded latent membrane protein 1 modulates cyclin D1 by c-Jun/Jun H heterodimers / X. Song, Y. Tao, L. Zeng // Sci China C Life Sci. 2005. - №48. - P. 385-393.

216. Sugar J. Some etio-patogenetic factors in laryngeal carcinogenesis / J. Sugar, V I.ereczkey, J. Toth // J Environ Pathol Toxicol Oncol. 1996. -№ 15.-P. 195-199.

217. Sun A. K. Detection of human papillomavirus DNA with biotinylated probes in laryngeal papillomas by in situ hybridization / A. K. Sun // Chung Hua Erh Pi Yen Hou Ko Tsa Chin. 1993. - Vol. 28, № 5. -P. 297-299.

218. Takada K. Epstein-Barr virus and gastric carcinoma / K. Takada // J Clin Path. 2000. - Vol.53. - P. 255-261.

219. The Epstein-Barr virus transforming protein LMP1 engages signaling proteins for the tumour necrosis factor receptor family / G. Mosialos, M. Birkenhach, T. Yalamanchili Ran Ar-sdale et al. // Cell. 1995. - V. 80. -P. 389-399.

220. The E7 oncoprotein of human papillomavirus type 16 stabilizes p53 through a mechanism independent of pi9 (ARF) / S. E.Seavey, M. Holubar, L. J. Saucedo, M. E. Perry // J Virol. 1999. - № 73. P. 75907598.

221. The human papilloma virus-16 E7 oncoprotein is able to bind to the retinoblastoma gene product / N. Dyson, P. M. Howley, K. Mungen, E. Harlow // Science. 1989. - Vol. 243. - P. 934-937.

222. The glutathione S-transferase GSTP1 polymorphysm: effects on susceptibility to oral/pharyngeal and laryngeal carcinomas / C. Matthias,

223. U. Bockmuhl, V. Jahnke et al. // Phamacogenetics. 1998. - № 8. -P. 1-6.

224. Thorlev-Lawson D. A. The mechanism of carcinogenesis / D. A Thorlev-Lawson, L. M. Nadler, A. K. Blamn, R. T. Schooiey // J. Exp. Med. -1985.-V. 161.-P. 45-59.

225. Thomas J. Epstein-Barr virus gene expression and epithelial cell differentiation in oral hairy leukoplakia / J. Thomas, D. H. Felix, D. Wray //Am J Pathol.-1991.-Vol. 139.-P. 1369-1380.

226. Thomas M. The role of the E6-p53 interaction in the molecular pathogenesis of HPV / M. Thomas, D. Pim, L. Banks // Oncogene. -1999.-№ 18.-P. 7690-700.

227. Tokitnaga M. Viruses and cancer-risk / M. Tokitnaga, Y. Uenntra, T. Tokudome// II Acta Pathol. Jpn. 1993. - V.43 . - P. 574-581.

228. Tsoukas C. D. Expression of EBV C3b receptors on T cells: biological significance / C. D. Tsoukas, J. D. Lambris // Immunol. Today. 1993. -№ 14.-P. 56.

229. Wang F. Study on the association between squamous cell carcinoma larynx and HPV subgene by PCR / F. Wang, T. Zhang, F. Zhang // Zhounghua Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi. 1999. - № 34. - P. 106-107.

230. Wang CX. Epstein-Barr virus-encoded latent membrane protein 1 activates NF-kB via a mechanism involving TRAF2 in nasopharyngeal carcinoma / C. X. Wang, X. Y. Li, H. Xiao // Ai Zheng. 2000. - №19. -P. 517-520.

231. White A. E. Differential disruption of genomic integrity and cell cycle regulation in normal human fibroblasts by the HPV oncoproteins /

232. A. E. White, E. M. Livanos, T. D. Tisty // Genes Dev. 1994. - №8. - P. 666-677.

233. Wolf H. Epstein-Barr virus and its interaction with the host / H. Wolf, C. Bogedan, F. Schwarzmann // Intervirology. 1993. - Vol.35, № 1. -P.26-39.

234. Wolf C. R. Metabolic polymorphisms in carcinogen metabolising enzymes and cancer susceptibility / C. R. Wolf, C. A. Smith, D. Forman // Br. Med. Bull. 1994. - Vol. 50. - P. 718 - 731.

235. Wunsch F. V. The epidemiology of laryngeal cancer in Brazil / F. V. Wunsch // Sao Paulo Med. J. 2004. - № 122. - P. 188-194.

236. Xavier R. Perinatal transmission of human papilloma virus. 7th International Congress of Pediatric Otorhinolaryngology / R. Xavier, G. Santos, R. Medeiros. Helsinki. 1998. - P. 210.

237. Xing LQ. Analysis of the characteristics of human papilloma virus infection in 85 neoplasms of the respiratory system in adult patients / L. Q.Xing, H. R.Liu, J. Y. Si // Zhonghua Zhong Liu Za Zhi. 1994. - № 16. p. 424-427.

238. Yang J. Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 induces the telomerase activity in human nasopharyngeal cells / J. Yang, X. Y. Deng, H. H. Gu // Shi Yan Sheng Wu Xue Bao. 2001. - № 34. - P. 207-211.

239. Yeu-san Tyan. Detection of Epstein-Barr and Human Papillomavirus in Head and Neck Tumors / Tyan Yeu-san, Liu Shin-Tung, Ong Wen-Rou // Journal of Clinical Microbiology. 1993. - Vol.31. - № 1. - P. 53-56.