Ассоциация эпителиальных опухолей кожи с вирусами папилломы человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.11, кандидат медицинских наук Кладова, Анна Юрьевна

• Кладова, Анна Юрьевна
• кандидат медицинских наук
• 0

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Кладова, Анна Юрьевна

Список сокращений

Введение

1. Обзор литературы

1.1. Современные представления о роли вирусов папилломы человека ^ в развитии эпителиальных опухолей кожи

1.2. Вирусная концепция канцерогенеза как теоретическая основа для разработки перспективных методов лечения и профилактики 30 эпителиальных опухолей кожи

1.3. Молекулярно-биологические методы идентификации ДНК вирусов папилломы человека

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Общая характеристика исследуемой группы больных

2.2. Генодиагностика папилломавирусной инфекции

Глава 3. Разработка методики выявления и количественного определения вирусов папилломы человека рода beta (5 видов)

Глава 4. Выявление и определение вирусной нагрузки вирусов папилломы человека рода beta (5 видов) у больных эпителиальными 73 опухолями кожи

4.1. Выявление ДНК вирусов папилломы человека рода beta у больных эпителиальными опухолями кожи

4.2. Определение вирусной нагрузки вирусов папилломы человека рода beta в эпителиальных опухолях кожи

4.3. Анализ вирусной нагрузки вирусов папилломы человека с учетом клинического течения опухолевого процесса на примере 82 кератоакантом

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Ассоциация эпителиальных опухолей кожи с вирусами папилломы человека»

Актуальность проблемы

Эпителиальные опухоли кожи (ЭОК) — одна из самых распространенных групп опухолей человека, отличающаяся значительным разнообразием. Отмечаемый в последние годы неуклонный рост заболеваемости ЭОК некоторые авторы называют «бесшумной эпидемией» [Holme S. et al., 2000; Nguen Т. et al. 2002]. Этиология и патогенез ЭОК изучены не достаточно. Вместе с тем, исследования в данном направлении представляют значительный интерес с точки зрения оптимизации лечения и профилактики этих опухолей. [Сергеев Ю.В. и соавт., 1999; Снарская Е.С., 2004; Галил-Оглы Г.А. и соавт., 2005; Молочков В.А. и соавт., 2006; Kaplan В. et al., 2000; Arlette J. et al., 2004].

К факторам, способствующим развитию ЭОК, относят длительную инсоляцию, химические канцерогены, а также ионизирующее излучение [Tolbert P. et al., 1997; Armstrong В. et al., 2001]. Определенную роль отводят наследственным и иммунологическим нарушениям [Молочков В.А., 1993; Снарская Е.С., 2004; Галил-Оглы Г.А. и соавт., 2005; Grossman D. et al., 1997]. В последние годы благодаря достижениям в области молекулярной биологии сложились предпосылки для изучения новых аспектов этиологии и патогенеза ЭОК. В частности, предпринимаются попытки определить роль вируса папилломы человека (ВПЧ) в развитии отдельных вариантов ЭОК — кератоакантомы, себорейного кератоза, актинического кератоза, болезни Боуэна, базальноклеточного и плоскоклеточного рака кожи [Shamanin V. et al., 1996; Berkhout R. et al., 2000; Harwood A. et al., 2000; Weissenborn S. et al., 2005; de Villiers E., 2004].

Число больных, страдающих заболеваниями, ассоциированными с ВПЧ, продолжает непрерывно увеличиваться [Киселев В.И., 2004; Дмитриев Г.А., 2006; zur Hausen Н. et al., 1996]. В настоящее время известно около 200 генотипов вирусов папилломы, инфицирующих эпителий слизистых оболочек (род alpha) и кожи (род beta, gamma, mu и nu) [de Villiers E., 2004]. Опасность ВПЧ-инфекции заключается в высокой онкогенности отдельных разновидностей вируса [Киселев В.И., 2004; zur Hausen Н. et al., 2001]. Так, ВПЧ-16 и ВПЧ-18, относящиеся к роду alpha, признаны основными этиологическими агентами рака шейки матки и других раков аногенитальной области [ВОЗ, 2004]. Эпидемиологические и молекулярно-биологические данные позволяют предполагать, что кожные типы ВПЧ рода beta могут обуславливать формирование ряда ЭОК, однако данная взаимосвязь в настоящее время не достаточно изучена [Orth G., 2004; Pfister Н., 2005]. Частота выявления ВПЧ рода beta в различных ЭОК существенно варьирует [Shamanin V. et al., 1996; Harwood С. et al., 2000; Iftner A. et al., 2003; Forslund O. et al., 2003]. Это обусловлено разнообразием используемых с этой целью лабораторных методов: менее чувствительные - способны обнаруживать вирус только при его высокой концентрации, более чувствительные - даже единичные копии вируса в пробе [Meyer Т. et al., 2000]. Кроме того, предполагают, что ассоциация ВПЧ-инфекции с ЭОК может иметь региональные особенности, различаясь у жителей Восточной Европы, Центральной Европы и Америки [zur Hausen P. et al., 2005]. В России подобные исследования не проводились.

В последнее время становится очевидным, что обнаружение ВПЧ в ЭОК не может являться прямым доказательством этиологической роли вируса в развитии данных состояний. Присутствие ВПЧ в патологически измененном эпителии кожи может быть следствием как активной вирусной инфекции, так и бессимптомной персистенции, характерной для условно-патогенных инфекционных агентов. В связи с этим, помимо выявления ВПЧ, необходимо проводить измерение вирусной нагрузки (количество геномов ВПЧ в эпителиальных клетках) [Snijders Р.; 2003; Stoler М., 2006]. Определение вирусной нагрузки является сравнительно новым подходом в генодиагностике, уже продемонстрировавшим высокую значимость в мониторинге течения и прогрессирования генитальной (слизистой) ВПЧ - инфекции [Snijders P. et al., 2003; Stoler М., 2006]. В настоящее время не вызывает сомнений необходимость проведения количественного анализа вирусных геномов в коже. Это позволит более объективно судить о состоянии ВПЧ в опухолях кожи, а, следовательно, глубже понимать механизмы, связывающие ЭОК и ВПЧ [Snijders Р., 2003; Harwood С. et al., 2004; zur Hausen P. et al., 2005; Weissenborn S. et al., 2005].

Наиболее интересной нозологической формой для изучения связи вирусной нагрузки ВПЧ с динамикой клинического течения опухолевого процесса является кератоакантома. Известно, что эта опухоль быстро проходит стадию роста и стабилизации, а затем спонтанно самоизлечивается с формированием выраженного иммунного ответа на антигены опухоли [Беренбейн и др., 1980; Молочков В.А. и др., 2003; Schwartz et al., 1994]. Однако в «атипичных» случаях кератоакантома персистирует и даже подвергается злокачественному перерождению [Молочков В.А. и др., 2003; Shwartz R. et al., 1994]. Клинические особенности течения кератоакантомы представляют удобную модель для изучения вирус - индуцированного канцерогенеза в коже.

С учетом вышеизложенного, изучение ассоциации ВПЧ с различными формами ЭОК (доброкачественными, предраковыми и злокачественными) на основе количественного определения ДНК ВПЧ, является актуальной задачей дерматоонкологии, решение которой будет способствовать дальнейшему пониманию взаимосвязей ЭОК и ВПЧ.

Цель исследования: изучить ассоциацию эпителиальных опухолей кожи с вирусами папилломы человека.

Задачи исследования:

1. Разработать методику выявления и количественного определения ДНК ВПЧ в коже.

2. Оценить выявляемость ДНК ВПЧ в эпителиальных опухолях кожи.

3. Определить вирусную нагрузку ВПЧ в эпителиальных опухолях кожи.

4. На примере кератоакантом изучить изменение вирусной нагрузки ВПЧ в зависимости от динамики клинического течения опухолевого процесса.

Научная новизна

Впервые разработана количественная методика обнаружения кожных типов ВПЧ рода beta с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР) «в режиме реального времени».

На основе количественного анализа впервые детально изучена ассоциация доброкачественных (себорейный кератоз, кератоакантома), предраковых (актинический кератоз, болезнь Боуэна) и злокачественных (базальноклеточный рак, плоскоклеточный рак) ЭОК с ВПЧ рода beta.

На примере кератоакантом продемонстрировано изменение вирусной нагрузки ВПЧ в зависимости от динамики клинического течения опухолевого процесса.

Положения, выносимые на защиту:

1. Доброкачественные (себорейный кератоз, кератоакантома) предраковые (актинический кератоз, болезнь Боуэна) и злокачественные (базальноклеточный рак, плоскоклеточный рак) ЭОК не менее, чем в 70% случаев ассоциированы с инфекцией ВПЧ рода beta.

2. Концентрация ДНК ВПЧ рода beta у больных ВПЧ-ассоциированными ЭОК достоверно превосходит таковую у бессимптомных носителей ВПЧ (контрольная группа).

3. Динамика вирусной нагрузки ВПЧ может описывать клиническое течение ЭОК, что продемонстрировано на примере кератоакантом.

Внедрение в практику

Результаты работы используются в лечебном и учебном процессе на кафедре кожных и венерических болезней ФППОВ ММА им. И.М. Сеченова, кафедре дерматовенерологии и дерматоонкологии ФУВ МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского, а также на базе Центра молекулярной диагностики ФГУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены и обсуждены на заседании Московского областного общества дерматовенерологов, Москва, 2005г.; 2007г.; на научно-практической конференции «Пролиферативные заболевания кожи», Москва 25-26 апреля 2006 г.; 23rd INTERNATIONAL PAPILLOMAVIRUS CONFERENCE & CLINICAL WORKSHOP 2006 Prague, September 1-7 2006г.; на международной научно-практической конференции «Геномные технологии в медицине и медицинское образование на рубеже веков», Алмата 19-20 мая 2006 г.; на научно-практической конференции «Социально-значимые заболевания в дерматовенерологии», Москва 29-30 сентября 2006 г.; на научно-практической конференции «Современная диагностика и лечение урогенитального хламидиоза», Москва 26-27 апреля 2007 г.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ.

Структура диссертации

Диссертация изложена на 119 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов, выводов и библиографического указателя. Указатель литературы включает 29 отечественных и 179 зарубежных работ. Работа иллюстрирована 3 фотографиями, 10 рисунками и 16 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Кожные и венерические болезни», Кладова, Анна Юрьевна

выводы

1. Выявление и определение вирусной нагрузки 5 видов ВПЧ рода beta в коже можно проводить с помощью разработанной количественной методики на основе ПЦР в «режиме реального времени».

2. С помощью ПЦР в «режиме реального времени» ассоциация ЭОК с ДНК ВПЧ рода beta была выявлена в 75% случаев себорейного кератоза, 76,2% -кератоакантом, 93,3% - актинического кератоза, 80% - болезни Боуэна, 81,7% -базальноклеточного рака кожи и 70% - плоскоклеточного рака кожи. В нормальной коже здоровых людей ДНК ВПЧ рода beta обнаруживался в 46,9% случаев.

3. В образцах предраковых (актинический кератоз) и злокачественных (базальноклеточный и плоскоклеточный рак) ЭОК beta 1 и beta 2 виды ВПЧ встречались в 1,5-2 раза чаще, чем beta 3, 4, 5 виды. В 66,6% ЭОК отмечалась ассоциация 2 и более видов ВПЧ рода beta.

4. В ходе количественного анализа было установлено, что вирусная нагрузка ВПЧ во всех ЭОК превышала вирусную нагрузку ВПЧ в нормальной коже (1,4 ± 0,6 lg/ 105 клеток), причем при себорейном кератозе (3,0 ± 0,7 lg/ 105 клеток), кератоакантоме (3,2 ± 1,6 lg/ 105 клеток), актиническом кератозе (4,5± 1,2 lg/ 105 клеток) и базальноклеточном раке кожи (2,08 ± 1,4 lg/ 105 клеток) различия имели достоверный характер.

5. На примере кератоакантом продемонстрирована связь вирусной нагрузки ВПЧ с динамикой клинического течения опухолевого процесса: в фазу роста кератоакантом вирусная нагрузка составила 3,1 ± 1,6 lg/Ю5 клеток, в фазу стабилизации - 3,9 ± 1,6 lg/Ю5 клеток, в фазу регресса - 1,6 ± 1,5 lg/Ю5 клеток.

Практические рекомендации

1. Всем больным эпителиальными опухолями кожи (доброкачественными, предраковыми и злокачественными) целесообразно проводить обследование на наличие папилломавирусной инфекции рода beta. Показана необходимость дифференцированного выявления 5 видов вирусов папилломы человека рода beta.

2. Обнаружение вирусов папилломы человека рода beta в эпителиальных опухолях кожи следует проводить с определением вирусной нагрузки, объективно отражающей состояние вирусов (активация или бессимптомная персистенция) в эпителиальных клетках кожи.

3. С целью уточнения клинического течения эпителиальных опухолей кожи обосновано определение динамики вирусной нагрузки.

4. Обнаружение и количественное определение вирусов папилломы человека рода beta в образцах кожи (биоптаты, соскобы) может проводиться с помощью разработанной методики ПЦР в «режиме реального времени».

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Кладова, Анна Юрьевна, 0 год

1. Апатенко А.К. Эпителиальные опухоли и пороки развития кожи. М., 1973;

2. Беренбейн Б.А., Студиницин А.А. Дифференциальная диагностика кожных болезней. 2-е изд.- М.б 1989;

3. Галил-Оглы Г. А., Молочков В. А., Сергеев Ю.В. Дерматоонкология. -М.Медицина, 2005;

4. Гистологическая классификация опухолей кожи ВОЗ (2-е изд., 1996);

5. Молекулярная клиническая диагностика// Под ред. С. Херингтона и Дж. Макги -М.: Мир, 1999;

6. Дмитриев Г.А. Биткина О.А. Папилломавирусная инфекция М., 2006;

7. Екимов А.Н., Шипулин Г.А. Бочкарев Е.Г. Новейшие технологии в генодиагностике: полимеразно-цепная реакция в реальном времени (Real-time PCR)// Вестник последипломного медицинского образования. 2001- №3 - С. 3841

8. Злокачественные новообразования в России в 2003г. (заболеваемость и смертность)// Под ред. Чиссова В.И. и др. М., 2004;

9. Ильин И.И., Молочков В.А. Князева Р.А. Некоторые аспекты диагностики и терапии одиночных кератоакантом// Вестн. Дерматол. 1986. - №3. - С.9-15;

10. Киворкова М.Э. Распространенность некоторых эпителиальных новообразований кожи в Ставропольском крае. Иммуноморфологические особенности, лечение и профилактика солнечного кератоза// Дисс. канд. мед. наук.-М., 1991;

11. Киселев В.И. Вирусы папилломы человека в развитии рака шейки матки М., 2004;

12. Киселев В.И., Киселев О.И., Северин Е.С., Исследование специфической активности индол-3карбинола в отношении клеток, инфицированных вирусом папилломы человека// Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2003. - №4. - С.28-32;

13. Киселев Ф.Л. Вирус ассоциированные опухоли человека: Рак шейки матки и вирус папилломы// Биохимия. 2000. -№1.- С. 248-251;

14. Киселев Ф.Л., Мазуренко Н.Н., Киселева Н.П., Кобзева В.К. и др. Молекулярные маркеры рака шейки матки//Мол. Биология. 2002. - С. 8-13;

15. Кубанов А.А. Комплексная иммунологическая и молекулярная диагностика папилломавирусной инфекции у больных и определение формирования злокачественной трансформации эпителиальных тканей//Дисс. докт. мед. наук. -М., 2005;

16. Лихтенштейн А. В., Киселева Н.П. Биохимия. — 2001.-Т. 66, №3 - С. 657-669

17. Малишевская Н.П. Клинико-эпидемиологические особенности злокачественных новообразований кожи на Среднем Урале// Дисс. докт. мед. наук. М., 1999;

18. Мол очков В. А. Кератоакантома и ее трансформация в плоскоклеточный рак. Клиника, патогенез, дифференциальная диагностика, лечение. Особенности краевой патологии// Дисс. докт. мед. наук. — М., 1993;

19. Молочков В.А. Плоскоклеточный рак кожи// Вестник дерматологии и венерологии. 1997. - № 6. - С. 44-48;

20. Молочков В.А., Казанцева И.А., Кунцевич Ж.С., Бочкарева Е.В. Кератоакантома. Клиника, диагностика, лечение, трансформация в рак. — М., 2006;

21. Молочков В.А., Киселев В.И., Рудых И.В., Щербо С.Н. Папилломавирусная инфекция: клиника, диагностика, лечение. М., 2004;

22. Мяделец О.Д., Адаскевич В.П. Морфофункциональная дерматология. М., 2006; ;

23. Писклакова Т.П. Региональный регистр базально-клеточного рака кожи как основа мониторинга, диспансеризации и оптимизации лечения больных// Дисс. докт. мед. наук. — М., 2004;

24. Принцип метода полимеразной цепной реакции//информация с сайта http://www.medigen.ru/9.1.1 .php

25. Скрипкин Ю.К., Мордовцев В.Н. Кожные и венерические болезни. — М., 1999;

26. Снарская Е.С. Иммуноморфологические аспекты патогенеза, дифференциальной диагностики и иммунотерапии язвенной разновидности базальноклеточного и метатипического рака кожи// Дисс. докт. мед. наук. М., 2005;

27. Трапезников Н.Н., Шайн А.А. Онкология. М., 1992;

28. Цветкова Г.М., Мордовцев В.Н. Патоморфологическая диагностика заболеваний кожи. Руководство. — М., 1986;

29. Шанин А.П. Опухоли кожи, их происхождение, клиника и лечение. JL, 1969. -С.269;

30. Actinic Keratosis. Net: American Academy of Dermatology Web site. Available at: http://www.skincarephysicians.com/

31. Alam M., Ratner D. Cutaneous squamous cell carcinoma// N Engl J Med. 2001. — V. 344. - P. 975-983;

32. Antonsson A., Forslund O., Ekberg H., et al. The ubiquity and impressive genomic diversity of human skin papillomaviruses suggest a commensalic nature of these viruses// J Virol. 2000. - V.74. - P. 11636-11641;

33. Arlette J., Trotter M. Squamous cell carcinoma in situ of the skin: history, presentation, biology and treatment// Australas J Dermatol. 2004-V.45 .-P.1-11;

34. Armstrong В., Kricker A. The epidemiology of UV induced skin cancer// J PhotochemPhotobiol. 2001.- V. 63. -P. 8-18;

35. Aroni K., Lazaris A., loakim-Liossi A. et al. Histological diagnosis of cutaneous 'warty' carcinoma on a pre-existing HPV lesion// Acta Derm Venereol. 2000. - V.80. — P. 294-296;

36. Astori G., Lavergne D., Benton C. et al. Human papillomaviruses are commonly found in normal skin of immunocompetent hosts// J Invest Dermatol. 1998. — V. 110. — P. 752-755;

37. Bernard H.-U. The clinical importance of the nonmenclature, evolution and taxonomy of human papillomaviruses// J. Clinical Virology. 2005. — V. 75. - P. 325329;

38. Berkhout R., Bavinck В., ter Schegget J. Persistence of human papillomavirus DNA in benign and (pre)malignant skin lesions from renal transplant recipients// J Clin Microbiol. 2000. - V. 38(6). - P. 2087-96;

39. Biliris К., Koumantakis E., Dokianakis D., et al. Human papillomavirus infection of non-melanoma skin cancers in immunocompetent hosts// Cancer Lett. 2000. - V.161. -P.83-88;

40. Blessing K., McClaren K., Benton E., et al. Histopathology of skin lesions in renal allograft recipients: an assessment of viral features and dysplasia// Histopathology. -1989.-V. 14.-P.129-139;

41. Bosch F., Lorinz A., Munos N., The causal relation between human papillomavirus and cervical cancer// J Clin Pathol 2002. - V. 55. - P. 244-265;

42. Boyle J., McKie R., Briggs J., et al. Cancer, warts and sunshine in renal transplant recipients: a case control study// Lancet. 1984. - V.l. - P. 702-705;

43. Boxman I., Berkhout P., Mulder L., et al. Detection of human papillomavirus DNA in plucked hairs from renal transplant recipients and healthy volunteers// J Invest Dermatol.- 1997.-V. 108.-P. 712-715;

44. Boxman I., Mulder L., Russell A., et al. Human papillomavirus type 5 is commonly present in immunosuppressed and immunocompetent individuals// Br J Dermatol. -1999.-V.141.-P. 246-249;

45. Braun-Falco O., Plewig G., Wolf H., Winkelman R. Dermatologica. 2nd ed.-Berlin: Springer-Verlag, 1991;

46. Butcher R. Malignant potential of keratoacantoma// Laryngoscope. 1979. - Vol. 89. -P. 1092-8;

47. Caldeira S., Zehbe I, Accardi R., Malanchi I., Dong W., et al. The E6 and E7 Proteins of the Cutaneous Human Papillomavirus Type 38 Display Transforming Properties// Journal of Virology. 2003. - Vol. 77 - P. 2195-2206;

48. Caforio A., Forina A., Piaserico S., et al. Skin cancer in heart transplant recipients:risk factor analysis and relevance of immunosuppressive therapy// Circulation 2000. -V. 102.-P. 222-227;

49. Cerroni L., Kerl H. Abberant bcl-2 expression provides a possible mechanism of neoplastic cell growth in cutaneus basal-cell carcinoma// J. Cutan. Pathol. 1994.- V. 21.-P. 398-403;

50. Cooke J., Proby C., Storey A. HPV interference with the DNA damage response identifies viral types that may predispose to skin cancer development// 23rd interanatioal papillomaviruses conference & clinical workshop 2006 Prague, September 1-7. P.77;

51. Derancourt C., Mougia C., Chopard M., et al. Oncogenic human papillomaviruses in extra-genital Bowen disease revealed by in situ hybridization //Ann Dermatol Venereol.- 2001.-V. 128-P. 715-718;

52. Diepgen Т., Mahler V. The epidemiology of skin cancer// Br J Dermatol. 2002. - V. 146. - P. 1-6;

53. Diogenes M., Bomizzo E. Eurtado J. A spoctos evelutiuol observados em 18 cases do keratoacanthoma//An. Brasill. Dermatol. 1985. - Vol. 1. - P. 265-270;

54. Eckert R., Crish J., Balsubramanian S., Rorke F. Transgenic animal models of human papillomavirus-dependent disease// Int J Oncol. 2000. - V. 16. - P. 853-870;

55. Euvrard S., Chardonnet Y., Pouteil-Noble C. Association of skin malignancies with various and multiple carcinogenic and noncarcinogenic human papillomaviruses in renal transplant recipients// Cancer. 1993. - V. 72(7). - P. 2198-206;

56. Favre M., Majewski S., Noszczyk В., Maienfisch F., Рига A., Orth G., Jablonska S. Antibodies to Human Papillomavirus Type 5 are Generated in Epidermal Repair Processes// J Invest Dermatol. 2000. - V. 114. - P.403-407;

57. Favre M., Orth G., Majewski S., et al. Psoriasis, a possible reservoir for human papillomavirus type 5, the virus associated with skin carcinomas of Epidermodysplasia verruciformis// J Invest Dermatol. 1998. - V. 110. - P. 311 -317;

58. Favre M., Majewski S., Noszczyk В., et al. Antibodies to human papillomavirus type 5 are generated in epidermal repair processes// J Invest Dermatol. 2000. — V. 114. — P.403.407;

59. Fife К., Cramer H., et al. Detection of multiple human papillomavirus types in the lower genital tract correlates with cervical dysplasia// J. Medical Virology. 2001. V.64. - P. 550-559;

60. Fisher E., McCoy M., Wechsler H. Analysis of histopathological and electron microscopic determinants of keratoacanthoma and squamous cell carcinoma// Cancer. -1972.-Vol.29. P.1387-1397;

61. Forslund O., Antonsson A., Nordin P., et al. A broad range of human papillomavirus types detected with a general PCR method suitable for analysis of cutaneous tumours and normal skin// J Gen Virol. 1999. - V. 80. - P. 2437-2443;

62. Foslund O., De Angelis P., Beigi M. et al. Identification of human papillomavirus in keratoacanthomas// J.Cutan.Pathol. 2003. - Vol.30. - P. 423-429;

63. Forslund O., Ly H., Higgins G. Improved detection of cutaneous human papillomavirus DNA by single tube nested 'hanging droplet' PCR// J Virol Methods. — 2003.-V. 110(2).-P. 129-36;

64. Franceschi S., Levi F., Randimbison L., La Vecchia C. Site distribution of different types of skin cancer: new aetiological clues// Int J Cancer. 1996. - V. 3. - P. 4-8;

65. Franco E., Rohan Т., Villa L. Epidemiologic evidence and human papillomavirus infection as a necessary cause of cervical cancer// J. Natl. Cancer Inst. 1999. — V. 91. -P. 506-511;

66. Fu F., Cockerell C. The actinic (solar) keratosis: a 21st century perspective// Arch Dermatol. 2003. - V. 139. - P. 66-70;

67. Gallagher R., Hill G., Bajdik C., et al. Sunlight exposure, pigmentary factors, and risk of nonmelanocytic skin cancer// Arch Dermatol. 1995. - V.131 - P. 157-163;

68. Galloway D., Underbrink M., Bedard K. Perez C. Beta-HPV E6 proteins and their role in apoptosis and telomerase activation// 23rd interanatioal papillomaviruses conference & clinical workshop 2006 Prague, September 1-7. P.77;

69. Gassenmaier A., Phister H., Gornstein O. Human papillomavirus 25-related DNA insolitary keratoacanthoma// Arch. Dermatol.Res. 1986. -Vol. 279 - P.73-76;

70. Ghadially F.,Barton В., Kerrige D. The etiology of keratoacanthoma// Cancer. -1963. Vol.16. -P.603-611;

71. Glass A., Hoover R. The emerging epidemic of melanoma and squamous cell skin cancer// JAMA. 1989. - V. 262. - P. 2097-2100;

72. Glogau R. The risk of progression to invasive disease// J Am Acad Dermatol. 2000. - V.42. - P.23-24;

73. Glover M., Niranjan N., Kwan J., Leigh I. Non-melanoma skin cancer in renal transplant recipients: the extent of the problem and a strategy for management// Br J Plastic Surg. 1994. - V.47. - P. 86-89;

74. Goldenhersh M., Olsen T. Invasive squamous cell carcinoma initially diagnosed as a giant keratoacanthoma// J. Am. Acad. Dermatol. 1984. - Vol. 10. - P. 372-378;

75. Grossman D., Lefell D. The molecular basis of non-melanoma skin cancer: new understanding// Arch Dermatol. 1997. - V. 133. - P. 1263-1270;

76. Haagsma E., Hagens V., Schaapveld M., et al. Increased cancer risk after liver transplantation: a population-based study// J Hepatol. 2001. - V.34. - P.84-91;

77. Haber J. Cellular immunopathology in Cutaneus oncology// Miller and Maloney. — Oxford. 1998. - P. 599-601;

78. Han R., Cladel N., Reed C., et al. DNA vaccination prevents and/or delays carcinoma development of papillomavirus-induced skin papillomas on rabbits// J Virol. 2000. — V. 74.-P. 9712-9716;

79. Harwood C., Surentheran Т., McGregor J., et al. Human papillomavirus infection and non-melanoma skin cancer in immunosuppressed and immunocompetent individuals// J Med Virol. 2000. - V. 61. - P. 289-297;

80. Harwood C., Spink P., Surentheran Т., et al. Degenerate and nested PCR; a highly sensitive and specific method for the detection of human papillomavirus infection in cutaneous warts// J Clin Microbiol. 1999. - V. 37. - P. 3545-3555;

81. Harwood C., McGregor J., Proby C. et al. Human papillomavirus and the development of non-melanoma skin cancer// J Clin Pathol. 1999. -V.52.- P.249-253;

82. Harwood C., Proby C. Human papillomavirus and non-melanoma skin cancer// Current Opin Infect Disease. 2002. - V. 15.- P.l01-114;

83. Harwood C., Spink P., Surentheran Т., et al. Detection of human papillomavirus

84. DNA in PUVA-associated non-melanoma skin cancers// J Invest Dermatol. 1998. -V.lll.-P. 123-127;

85. Heid C. Real-time quantitative PCR// Genome Res. 1996. - V.6. - P.986-994;

86. Herman J. Epigenetic changes in cancer and preneoplasia// Cold Spring Harb Symp Quant Biol. 2005. - V.70. - P. 329-33;

87. Herrigton C., Evans M., Hallan N. et al. Human papillomavirus status in prediction of high grade cervical neoplasia in patients with persistent low- grade cervical cytological abnormalities// Br. J. Cancer. 1995. - V. 71. - P. 206-209;

88. Higuchi R Kinetic PCR Analysis: Real-time monitoring of DNA amplification reactions//J Biotechnology. 1993.-V.ll. - P. 1026-1030;

89. Holcomb S. Nonemelanoma skin cancer// Nursing. 2006. - V.36(6). - P.56-7;

90. Holme S., Malinkovsky K., Roberts D. Changing trends in non-melanoma skin cancer in South Wales, 1988-98//Br J Dermatol. -2000.- V. 143. P. 1211-1216;

91. Hopfil R., Schir M., Fritsch P. Keratoacanthomas: human papillomavirus associated?//Arch. Dermatol.-1992.-Vol.128. P.563-564;

92. Hsi E. et al Detection of human papilloma virus DNA in keratoacanthomas by polymerase chain reaction// Am J Dermatol. 1997. - Vol.19. - P.10; ; '

93. Hundeiker R. Klinische varianten der keratoacanthoma// Z. Hantkrz. 1978. - V. 53. -P. 563-571;

94. Jablonska S., Majewski S. On the immunopathogenesis of psoriasis// Arch Dermatol. -2001.-V.137.-P. 229-230;

95. Jackson S., Storey A. E6 proteins from diverse cutaneous HPV types inhibit apoptosis in response to UV damage// Oncogene. 2000. - Vol. 19. - P. 592-598.

96. Jackson S., Ghali L., Harwood C., Storey A. Reduced apoptotic levels in squamous but not basal cell carcinomas correlates with detection of cutaneous human papillomavirus// British Journal of Cancer. 2002. - V. 87 - P. 319 - 323;

97. Kern W., McCray M. The histopatologic differentiation of keratoacanthoma and squamous cell carcinova of the skin// J. Cutan. Pathol. 1980. - Vol. 7. - P. 318-325;

98. Kiviat N. Papillomaviruses in non-melanoma skin cancer: epidemiological aspects// Semin Cancer Biol. 1999. - V. 9. - P.397-403;

99. Lampert A., Pauwels C., Duboucher C., et al. Detection of human papillomavirus in cutaneous extragenital Bowen's disease in immunocompetent patients// Ann Dermatol Venereol. 2000. -V. 127. - |P.40-45;

100. Lee S., Kang D., et al. Multiple HPV infection in cervical cancer screened by HPV DNA Chip//Cancer Lett. 2003. - V.20. - P.187-192;

101. Leigh Goedert J.J. Infectious causes of cancer: targets for intervention//- Humana Press Inc. Totowa-New Jersey. - 2000. - P. 289-309.

102. Levers histopathology of the skin 8-th-ed// Lippincott-Raven. -Philadelphia-New York.- 1999.-P. 1051-1059;

103. Lindelof В., Sigurgeirsson В., Gabel H., Stern R. Incidence of skin cancer in 5356 patients following organ transplantation// Br J Dermatol. 2000. - V. 143 - P. 614-618;

104. Li Y., Chen G., Dong X., Chen H. Detection of epidermodysplasia verruciformis-associated human papillomavirus DNA in nongenital seborrhoeic keratosis // Br J Dermatol. 2004.-V.151(5)-P.l060-5;

105. Lober В. Actinic keratosis is squamous cell carcinoma// South Med J. 2000; — V.93. - P.650-655;

106. Magee K. et al. Human papillomavirus associated with keratoacanthomas// Arch. Dermatol.-1989. Vol.125.-P.1587-92;

107. Majewski S., Jablonska S. Epidermodysplasia verruciformis as a model of human papillomavirus-induced genetic cancer of the skin// Arch Dermatol. 1995. -V. 131. — P. 1312-1318;

108. Marales-Ducret C., Van de Rijn M. et al. Bcl-2 expression in primary malignancies of the skin//Arch. Dermstol. 1995. - Vol.131. - P. 909-912;

109. Martin J. Scientific American Molecular Neurology// Nature medicine. 1999. - Vol 5.-P. 479-480;

110. Marshall S., Bordea C., Wojnarowska F., et al. P53 codon 72 polymorphism andsusceptibility to skin cancer after renal transplantation// Transplantation. 2000. — V. 69.-P. 994-996;

111. McGregor J., Berkhout R., Rozycka M., et al. P53 mutations implicate sunlight in posttransplant skin cancer irrespective of human papillomavirus status// Oncogene. -1997.-V.15-P. 1727-1740;

112. Meyer Т., Arndt R., Christophers E. et al.Frequency and distribution of HPV types detected in cutaneous squamous-cell carcinomas depends upon the HPV detection system: a comparison of four PCR assays// Dermatology -2000. -V. 201.-P. 204-211;

113. Meyer Т., Arndt R., Nindl I., Christophers E. Importance of human papillomaviruses for the development of skin cancer// Cancer Detect. Prev. 2001. - 25(6). - P.533-47;

114. Michelle S. Longworth A., Lamonis A. Pathogeneis of human papillomaviruses in differentiating epithelia// J Microbiology rew. 2004. - V. 68 (2). - P. 362-372;

115. Mitsuishi Т., Kawahima M., Matsukura Т., Sata T. Human papillomavirus type 58 in Bowen's disease of the elbow// Br J Dermatol. 2001. - V.144 -P.384-386;

116. Molijn A., Kleter В., Quint W., Doom L. Molecular diagnosis of human papillomavirus (HPV) infections// J Clin. Virology. 2005. - V.32. - P.43-51;

117. Monsonegro J. Emerging issues on HPV infections: from science to practice. Basel, Karger - 2006;

118. Moy R. Abido J., Benneth R. T- lymphocyte subpopulation in patients with basall cell carcinoma// Clin Res. 1986. - V. 34. - P. 162-167;

119. Munoz N., Bosch X. et al. Epidemiologic classification of Human Papillomavirus types associated with cervical cancer// New England J. of medicine. 2003. — V.348. -P. 518-527;

120. Munoz N. Human papillomavirus vaccines and their potential use in the prevention and treatment of cervical neoplasia// New developments in cervical cancer screening and prevention. 1997. - P.425-431;

121. Nagano Т., Ueda M., Ichihashi M. Expression of p53 protein is an early event in ultraviolet light-induced cutaneous squamous cell carcinogenesis// Arch Dermatol. -1993. V.129. -P.l 157-1161;

122. Naldi L., Fortina A., Lovati S., et al. Risk of nonmelanoma skin cancer in organ transplant recipients: a registry-based study// Transplantation. 2000. - V. 70 - P. 14791484;

123. Neubauer О. Arsenical cancer. A review// Br J Cancer. 1947. V. 1:192.

124. Nguyen Т., Ho D. Nonmelanoma skin cancer// Curr Treat Options Oncol. 2002. — V.3. -P.193-203;

125. Pincus H., Actinic keratoses actinic skin// Cancer of the skin: biology-diagnosis-management. - Philadelphia: W. B. Saunders. - 1976. - P. 437-457;

126. Pfister H. HPV in skin cancer. Comments on the IARC international evaluation// HPV today. -2005.-V. 7.-P. 11;

127. Pfister H., ter Schegget J. Role of HPV in cutaneous premalignant and malignant tumours// Clin Dermatol. 1997. - V. 15. - P. 335-347;

128. Phister H., Gassenmaier A., Fuchs P. Demonstration of human papillomavirus DNA in two keratoacanthomas// Arch. Dermatol.Res. 1986. - Vol. 278. - P.243-246;

129. Pfister H., Fuchs P., Majewski S., Jablonska S., et al High prevalence of epidermodysplasia verruciformis-associated human papillomavirus DNA in actinic keratoses of the immunocompetent population// Arch Dermatol Res. 2003. - V. 295(7).-P. 273-79;

130. Proby C., Storey A., McGregor J. Does human papillomavirus infection play a role in non-melanoma skin cancer?// Papillomavirus Report. 1996. - V. 7. - P.53-60;

131. Proby C., Purdie K., Sexton C., et al. Spontaenous keratinocyte cell lines representing early and advanced stages of malignant transformation of the epidermis// Exp Dermatol. 2000. — V. 9. -P.104-117;

132. Purdie К., Sexton С., Proby С., et al. Malignant transformation of cutaneous lesions in renal allograft patients: a role for human papillomavirus// Cancer Res. 1993. - V. 53. — P. 5328-5333;

133. Ramoz N., Taieb A., Rueda et al. Evidence for a nonallelic heterogeneity of epidermodysplasia verruciformis with two susceptibility loci mapped to chromosome regions 2p21-p24 and 17q25//J Invest Dermatol. 2000.-V. 14-P. 1148-1153;

134. Ramsey H., Fryer A., Reece S., et al. Clinical risk factors associated with nonmelanoma skin cancer in renal transplant recipients// Am J Kidney Dis. 2000. - V. 36 -P. 167-176;

135. Reizner G., Chuang Т., Elpern D., Stone J., Farmer E. Bowen's disease (squamous cell carcinoma in situ) in Kauai, Hawaii. A population-based incidence report// J Am Acad Dermatol. 1994.-V. 31.-P.596-600;

136. Rodrigo A., Goracke P., Rowhanian K., et al. Quantitation of target molecules from PCR-based limiting dilution assays// AIDS Res. Human. Retrovir. 1997. - Vol. 13. — P. 737-742; := '

137. Ruhland A., de Villiers E. Opposite regulation of the HPV 20-URR and HPV 27-URR promoters by ultraviolet irradiation and cytokines// Int J Cancer 2001. - V. 91 - P. 828-834;

138. Rust A., McGovern R., Gostout В., et al. Human papillomavirus in cutaneous squamous cell carcinoma and cervix of a patient with psoriasis and extensive ultraviolet radiation//J Am Acad Dermatol. 2001.-V.44 - P. 681-686;

139. Sahl W., Snow S., Levine N. Giant basal cell carcinoma. Report of two cases and review of literature// J Am Acad Dermatol. 1994. - V.30 - P. 856-9;

140. Severson J., Evans Т., Lee P., et al. Human papillomavirus infections: epidemiology, pathogenesis, and therapy// J Cutan Med Surg. 2001. - V.5 - P. 43;

141. Scrivener Y., Grosshans E., Cribier B. Variations of basal cell carcinomas according to gender, age, location and histopathological subtype// Br J Dermatol. -2002. V. 147 -P.41-47;

142. Schaper I., Marcuzzi G., Weissenbom S. et al. Development of skin tumors in mice transgenic for early genes of human papillomavirus type 8// Cancer Res. -2005 — V.65(4). -P.1394-400;

143. Schwartz R. Keratoacanthoma// J. Am. Acad. Dermatol. 1994. - Vol.30. - P.l-19;

144. Silverman M., Kopf A., Grin C., Bart R. Recurrence rates of treated basal cell carcinomas// J. Dermatol. Surg. Oncol. 1991. -V. 17. - P. 713-718;

145. Shamanin V., Glover M., Rausch C., et al. Specific types of human papillomavirus found in benign proliferations and carcinomas of the skin in immunosuppressed patients// Cancer Res. 1994. - V. 54 - P.4610-4613;

146. Shamanin V., zur Hausen H., Lavergne D., et al. HPV infections in nonmelanoma skin cancers from renal transplant recipients and non-immuno-suppressed patients// J Natl Cancer Inst. 1996. - V.88 - P.802-811;

147. Sharp D. Quantative use of the electron microscope in virus research. Methods fiid recent results of particle counting// Lab. Invest. 1965. - V.14. - P. 831-863;

148. Shope R. A filtrate virus causing a tumor like conditions in rabbits and its relationship to virus myxomatosum// J. Exp. Med. 1932. - 56. - P.803-822;

149. Snijders P. Chris J. The value of viral load in HPV detection in screening // HPV today.-2006.-V.8.-P. 8-9;

150. SolerC., Chardonnet V., Eurard S. et al. Evaluation of human papillomavirus type 5 on frosen sections of multiple lesions from transplant recipients with hybridization and isotopic problem// Dermatology. 1992. -Vol. 184. - P.248-253;

151. Spence A., Franco E., Ferenczy A. The role of human papillomavirus in cancer: evidence to date// J Amn Cancer. 2005. - V. 4 - P. 49-64;

152. Stark S., Petridis A., Ghim S., et al. Prevalence of antibodies against viruslike particles of Epidermodysplasia verruciformis-associated HPV8 in patients at risk of skin cancer// J Invest Dermatol. 1998. - V.l 11 - P. 696-701;

153. Sterling J. Human papillomaviruses and skin cancer// J Clin Virol. 2005 - V. 32. -P. 67-71;

154. Stockfelth E., Meinke В., Arudt R. Identification of DNA sequences of both genital and cutaneous HPV types in a small number of keratoacanthomas of immunosuppressed patients//Dermatology. -1999. -Vol. 198.- P.122-125;

155. Stockfleth E., Meyer Т., Benninghoff В., Christophers E. Successful treatment ofactininc keratoses with imiquimod cream 5%: a report of six cases// Br J Dermatol. -2001.-V.144-P. 1050-1053;

156. Storey A., Thomas M., Kalita A., et al. Role of p53 polymorphism in the development of human papillomavirus-associated cancer// Nature. 1998. - V. 393. - P. 229-234;

157. Termorshuizen F., Feltkamp M., Struijk L., Frank R. de Gruijl et al. Presence of Human Papillomavirus DNA in Plucked Eyebrow Hairs Is Associated with a History of Cutaneous Squamous Cell Carcinoma// J Invest Dermatol. 2004. — Vol. 122:6. -P.1456-1462;

158. Tolbert PE. Oils and cancer. // Cancer Causes Control. 1997. - 8:386-405.

159. Traenkle H. X-ray induced skin cancer in man//Natl Cancer Inst. 1963. - V. 10. - P. 423-27;

160. Trowell H., Dyall-Smith M. et al//Human papillomavirus associated with keratoacanthomas in Australian patients// Arch. Dermatol. 1990.-Vol.126. - P.1654;

161. Tsambaos D., Monastirli A., Kapranos N., Georgiou S., Detection of human papillomavirus DNA in nongenital seborrhoeic keratoses// Arch Dermatol Res.- 1995. — V. 287(6). -P. 612-5;

162. Staak V., Bergers A. Intranuclear particles in keratoacanthoma: possible association with malignant degeneration// Dermatologica. 1979. — Vol.158. - P.413-416;

163. Visscher JG, van der Val JE Stazink TM Giant keratoacanthoma of the lower lip// Oral Surg. Med. Oral Pathol. Oral. Radiol. 1996 - Vol. 81. - P. 143-146;

164. Viviano E., Sorce M., Mantegna M. Solitare keratoacanthoma in immunocompetents: no detection of papillomavirus DNA by polimerase chain reaction// New Microbiol. -2001. Vol.24.-P.295-297;

165. Walboomers J., Jacobs M., Manos M. Human papillomaviruses is necessary cause of invasive cervical cancer worldwide// J Pathol. 1999. - V. 189 (1). - P. 12-19;

166. Walder В., Robertson M., Jeremy D. Skin cancer and immunosuppression//:Lancet. -1971. V.ll. -P.1282-1283;

167. Weissenborn S., Funke A., Helmich M., et al. DNA loads of oncogenic human papillomaviruses are strongly elevated in HIV-positive women with high grade cervical lesions// J. Clin. Microbiol. 2003. - Vol. 41. - P. 2763-2767;

168. Weissenborn S., Nidi I., Purdie K., et al. Human papillomavirus-DNA-loads in actinic keratoses exceeded those in non-melanoma skin cancer// J. Invest. Dermatol. -2005.-Vol. 125.-P. 93-97;

169. Wieland U., Ritzkowksy A., Stoltidis M., et al. Papillomavirus DNA in basal cell carcinomas of immunocompetent patients: an accidental association// J Invest Dermatol. -2000. -V.l 15 P. 124-128;

170. Weimar V., Ceilley R. Aggressive biological behavior of basal and squamous cell carcinoma in patients with chronic lymphocytic leukemia or chronic lymphocyticlymphoma// J. Dermatol. Surg. Oncol. 1979. - V.5. - P. 331-338;i

171. Weimin Q., Jiang G. et al. PCR Detection of Human Papillomavirus: Comparison between MY09/MY11 and GP5+/GP6+ primer system// J. of Clinical Virology. 1997.-V.35 P.1304-1310;

172. Zelickson A., Linch F. Electron microscopy of virus-like particles in keratoacanthoma// J. Invest. Dermatol. 1961. - V. 37. - P. 79-83;

173. Zur Hausen H. Papillomavirus infections: a major cause of human cancers// Biochim Biophys Acta. 1996. - V.1288. - P/.55-78;

174. Zur Hausen H. Papillomaviruses causing cancer: evasion from host-cell control in early events in carcinogenesis// J Natl Cancer Inst. 2000. - V.92 - P. 690-698;