Характеристика хромосомных нарушений в эпителиальных клетках при хроническом гастрите и раке желудка тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат биологических наук Матвеенко, Ольга Альбертовна

• Матвеенко, Ольга Альбертовна
• кандидат биологических наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Матвеенко, Ольга Альбертовна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Механизм инициации воспалительной реакции организма

1.1.2. Индукция хронического воспаления в эпителиальной ткани

1.2. Экзогенные агенты, потенцирующие хроническое воспаление эпителия желудка

1.3. Последствия хронизации процесса воспаления на тканевом уровне

1.3.1. Метапластические изменения эпителиальной ткани желудка

1.3.2. Дисплазия как предопухолевое изменение слизистой оболочки желудка

1.4. Роль хромосомных нарушений в развитии рака желудка

1.4.1. Цитогенетические нарушения в клетках слизистой оболочки

при предопухолевых заболеваниях желудка

1.4.2. Хромосомные нарушения и их корреляция с некоторыми клинико-морфологическими параметрами при раке желудка

1.4.2.1. Хромосомные аномалии и гистологический тип опухоли

1.4.2.2. Хромосомные нарушения и метастазирование опухоли

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

2.1 Материал исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Приготовление препаратов метафазных хромосомных здорового индивида

2.2.2. Выделение ДНК из анализируемой ткани

2.2.3. Получение контрольной ДНК

2.2.4. Приготовление зондов, путем введения метки в тестируемую

и контрольную ДНК

2.2.5. Проведение реакции сравнительной геномной гибридизации зондов на хромосомном препарате

2.2.6. Детекция гибридизационных сигналов

2.2.7. Хромогенная in situ гибридизация малых ядерных РНК (EBERs)

и латентного мембранного протеина (LMP2А) вируса Эпштейна-Барр

2.2.8. Методы статистического анализа

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Хромосомные нарушения в морфологически нормальном эпителии пациентов на фоне слабого хронического воспаления

3.2. Анализ уровня и спектра хромосомных аберраций в клетках эпителиальной ткани на фоне хронического гастрита

3.2.1. Хромосомные нарушения в клетках эпителиальных тканей

без дисплазии

3.2.2. Структура хромосомных нарушений в группе больных хроническим гастритом с диспластическими изменениями эпителия

3.3. Анализ уровня и спектра хромосомных аберраций в опухолевой

и прилежащей эпителиальной ткани на фоне хронического воспаления

3.4. Сравнительный анализ уровня и спектра хромосомных аберраций

по ходу развития патологического процесса в слизистой оболочке желудка. 89 3.5. Выявление ранних РНК (ЕВЕЯз) и белка латентной инфекции 2А (ЬМР2А) вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) в эпителиальных клетках на фоне

хронического гастрита

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Приложение 1. Клинико-морфологическая характеристика группы

пациентов с клиническим диагнозом хронический гастрит

Приложение 2. Характеристика группы пациентов с интестинальным

типом рака желудка

Приложение 3. Хромосомные нарушения в клетках эпителиальной ткани

желудка без морфологических изменений при хроническом гастрите

Приложение 4. Хромосомные нарушения в клетках эпителиальной ткани

желудка с диспластическими изменениями при хроническом гастрите

Приложение 5. Хромосомные аберрации в клетках эпителиальной ткани

у больных интестинальным типом РЖ на фоне хронического гастрита

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВЭБ - вирус Эпштейна-Барр

ГС - гибридизационная смесь

ДАБ - диаминобензидин

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ИЛ - интерлейкин

КМ - кишечная метаплазия

НАДФ - никотинамидадениндинуклеотидфосфат

ПГЕ - простогландин Е

СОЖ - слизистая оболочка желудка

ФГА - фитогемаагглютинин

ФНО - фактор некроза опухоли

ЦОГ - циклооксигеназа

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

АФК - активные формы кислорода

ВАС - (bacterial artificial chromosome) -искусственные хромосомы бактерий BSA - (bovine serum albumin) - бычий сывороточный альбумин CGH - (comparative genomic hybridization) - сравнительная геномная гибридизация

СОХ -1,2- (cyclooxygenase -1,2)- циклооксигеназа - 1,2

EBERs - (virus-encoded small RNAs) - малые кодирующие вирусные РНК

EBNA1 - (Epstein-Barr virus nuclear antigen 1) - ядерный антиген 1 вируса

Эпштейна-Барр

FISH - (fluorescence in situ hybridization) - флуоресцентная in situ гибридизация HIF - (hypoxia-inducible factor) - фактор, индуцируемый гипоксией HR-CGH - (high resolution comparative genomic hybridization) - сравнительная геномная гибридизация высокого разрешения

IGF-1 - (insulin-like growth factors) - инсулинозависимый фактор роста IL - (interleukin) - интерлейкин

LMP2A - (latent membrane protein 2A) - латентный мембранный протеин 2А

4

NF-kB - (nuclear factor kappa В) - ядерный фактор каппа В NOS - (NO-synthetase) - NO-синтетаза

PBS - (phosphate buffered saline) - фосфатно-буферный солевой раствор SDS - (sodium dodecyl sulfate) - додецилсульфат SSC - (saline-sodium citrate) - солевой цитрат

STAT - (signal transducer and activator of transcription) - переносчик сигнала и активатор транскрипции

TNF - (tumor necrosis factor) - фактор некроза опухоли

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Характеристика хромосомных нарушений в эпителиальных клетках при хроническом гастрите и раке желудка»

ВВЕДЕНИЕ

Рак желудка является одной из ведущих онкопатологий в структуре заболеваемости и смертности населения во всем мире, что определяет повышенный интерес к изучению данного заболевания (Писарева и др., 2009; Никитина, 2010). Канцерогенез желудка представляет собой многоступенчатый процесс, протекающий через множество предопухолевых состояний к манифестированному раку желудка (Байкова, Фазлыев, 2012; Correa, 1992; Alfaro, Lauwers, 2011; Micev, Cosic-Micev, 2011).

Как известно, процесс малигнизации клеток инициируется взаимодействием различных факторов, среди которых заметное место занимают генетические изменения. В общей структуре нарушений генетического аппарата малигнизированной клетки, таких как генные мутации и эпигенетические аномалии (Залетаев, 2008; Имянитов, 2008), выделяются числовые и структурные аберрации хромосом, наличие которых может обусловливать возникновение геномной нестабильности через амплификацию и делецию определенных участков генома, в которых локализованы онкогены или гены-супрессоры опухолей. На сегодняшний день нет однозначного мнения относительно роли хромосомных аберраций в процессе малигнизации. Однако в результате ряда исследований получены доказательства в пользу того, что возникновение хромосомных нарушений может являться ранним событием и инициировать развитие геномной нестабильности клетки, способствуя, тем самым, ее злокачественной трансформации (Sen, 2000; Bannon et al., 2009; Ganmore et al., 2009; Sánchez-Pérez et al., 2009; Rossi et al., 2011; Hudler, 2012). Кроме того, на текущий момент (январь 2013 г.) в базе данных «Progenetix» собрана информация о 994 цитогенетических исследованиях 29743 опухолей различных локализаций, среди которых 1143 случая рака желудка, показывающая существенную роль хромосомных аберраций в развитии рака (www.progenetix.org).

Одним из предопухолевых состояний желудка является хронический атрофический гастрит, который формируется на фоне постоянной воспалительной реакции (Букин, 2000; Павлова, 2005; Dai et al., 2011; Vannella et al., 2012). Факторами, вызывающими развитие воспаления, могут быть химические (асбест, диоксид кремния, алкоголь и др.) и инфекционные агенты (бактерия Н. pylori, вирусы Эпштейна-Барр (ВЭБ), гепатита В и С, папилломы человека и др.).

Хроническое воспаление может привести к формированию различных предопухолевых заболеваний, наличие которых является фактором риска развития опухоли желудка, поскольку на их фоне происходят патологические морфологические перестройки ткани, характеризующиеся метаплазией и дисплазией эпителия желудка (Аруин, 1998; Пальцев, Аничков, 2005; Волынец и др., 2006; Каракешишева и др., 2007; Мозговой, 2009; Наумова и др., 2009; Gregory et al., 2007). Было показано, что развитие 15-20 % опухолей эпителиальных органов инициируется или осложняется воспалительным процессом (Kim et al., 2010).

Вероятность злокачественной трансформации хронического атрофического гастрита варьирует от 3 до 50 % (Писарева, Коломиец, 2001; Сельчук, Никулин, 2003). Столь высокая вариабельность требует поиска маркеров, связанных с риском злокачественной трансформации клеток. Действительно, для таких предраковых заболеваний желудка как аденома или гиперпластические полипы, известны хромосомные аномалии, регистрируемые практически в каждом исследуемом случае (Weiss et al., 2003). Однако, несмотря на то, что хронический гастрит является фактором риска развития опухоли желудка, данная патология остается недостаточно исследованной с цитогенетических позиций.

Кроме того, известно, что один из факторов, инициирующих хроническое воспаление, вирус Эпштейна-Барр, является убиквитарным и персистирует в организме пожизненно. На сегодняшний день выявлено, что

10 % всех случаев рака желудка являются ВЭБ-позитивными

7

(Давыдов и др., 1999; Fukayama, 2010). За год в мире регистрируется более 50000 новых случаев ВЭБ-позитивных опухолей желудка, однако остается открытым вопрос о этио-патогенетичекой роли этого вируса при развитии рака данной локализации (Sousa et al., 2008). Работы по исследованию структуры хромосомных нарушений в ВЭБ-позитивных опухолях желудка показали наличие специфических аберраций, характерных именно для данного типа патологии (Chan et al., 2001; zur Hausen et al., 2001; Chan et al., 2002). Однако в выполненных исследованиях были проанализированы аберрации в опухолевой ткани на поздних стадиях развития заболевания. Таким образом, возникает вопрос: насколько ранним событием является проникновение ВЭБ в клетки эпителиальной ткани желудка и способна ли данная вирусная инфекция вызывать специфические хромосомные аберрации?

В связи с высоким значением генетических нарушений в процессе канцерогенеза и тем, что хронический атрофический гастрит является распространенным патологическим состоянием слизистой оболочки желудка с относительно высоким риском трансформации, является актуальным исследование хромосомных аберраций в эпителиальных тканях желудка на фоне хронического атрофического гастрита.

Цель работы: Сравнительное цитогенетическое исследование эпителиальных клеток слизистой оболочки желудка на фоне хронического гастрита и рака. Задачи исследования:

1. Сравнить уровень и спектр несбалансированных хромосомных аберраций в клетках слизистой оболочки желудка больных хроническим атрофическим гастритом с диспластическими изменениями и без дисплазии.

2. Выявить и сопоставить структуру хромосомных нарушений в клетках опухоли и прилежащего к ней эпителия из очага хронического воспаления у больных раком желудка.

3. Провести сравнительный анализ хромосомных аберраций в динамике развития патологического процесса в клетках слизистой оболочки желудка.

4. Оценить частоту инфицирования вирусом Эпштейна-Барр эпителиальных клеток слизистой оболочки желудка при хроническом гастрите.

5. Оценить модифицирующее влияние вируса Эпштейна-Барр на уровень хромосомных аберраций в эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка у больных хроническим гастритом.

Научная новизна исследования. В результате работы установлен

спектр и уровень несбалансированных хромосомных аберраций в

эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка от стадии хронического

гастрита до манифестированной опухоли. Впервые с помощью

сравнительной геномной гибридизации получены данные о наличии

хромосомных нарушений в эпителиальных клетках желудка при

хроническом атрофическом гастрите. Показано, что хромосомные нарушения

выявляются в клетках эпителия слизистой оболочки желудка уже на стадии

слабого воспалительного процесса. Установлено, что в эпителии без

морфологических изменений основным типом хромосомных нарушений

является делеция 15ц 11.2^26, тогда как в диспластическом эпителии -

амплификация 3р12-р23. Максимальные отличия по уровню хромосомных

аберраций отмечены между опухолевой тканью и эпителием слизистой

оболочки на фоне хронического воспаления при отсутствии опухолевого

очага, что может свидетельствовать о независимости мутационных процессов

при воспалительной реакции в слизистой оболочке и раке желудка. Показано,

что в эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка 24 % больных

9

хроническим гастритом экспрессируются онкомаркеры вируса Эпштейна-Барр, что свидетельствует об инфицированности клеток вирусом на самых ранних этапах патологического процесса.

Практическая значимость результатов: Полученные результаты расширяют представления о цитогенетических аспектах инициации и прогрессии рака желудка. Использование метода сравнительной геномной гибридизации (CGH, comparative genomic hybridization) позволяет выявить нарушения хромосомного материала в слизистой оболочке желудка уже на стадии слабого воспаления и хронического атрофического гастрита, свидетельствуя, таким образом, о вовлеченности хромосомных аберраций в развитие патологического процесса в эпителиальной ткани желудка при хроническом воспалении. Молекулярно-цитогенетический анализ тканей желудка при хроническом гастрите может служить дополнительным методом оценки нарушений генетического аппарата клетки. Положения, выносимые на защиту:

1. Эпителиальные клетки слизистой оболочки желудка на фоне хронического атрофического гастрита характеризуются наличием множественных несбалансированных хромосомных аберраций.

2. Развитие диспластических предопухолевых изменений в клетках слизистой оболочки желудка сопровождается увеличением спектра хромосомных аберраций.

3. Максимальные отличия по частоте хромосомных нарушений в ряду от нормального эпителия без воспаления, эпителия с дисплазией и опухолью отмечены между эпителием слизистой оболочки желудка на фоне хронического воспаления при отсутствии опухолевого очага и опухолевой тканью.

Публикации:

По теме исследования опубликовано 18 работ, из них 4 статьи в журналах перечня ВАК.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Матвеенко, Ольга Альбертовна

выводы

1. Впервые установлено, что клетки слизистой оболочки желудка при хроническом гастрите характеризуются наличием несбалансированных хромосомных аберраций.

2. Делеция 15qll.2-q26 является частой для эпителиальных клеток слизистой оболочки желудка (66,6 %) больных хроническим гастритом без морфологических изменений слизистой желудка, тогда как амплификация 3р12-р23 (55,5 %) является наиболее частой аберрацией в группе пациентов с диспластическими изменениями эпителия.

3. В опухолевых клетках больных раком желудка в 30 % случаев выявлены делеции 5ql2-q23 и \Sq\2-q2\, а также амплификации 20р11.2-р13, 7q21-q35 и 8я21.2-я24 с частотой 20%.

4. Для клеток прилежащего к опухоли эпителия на фоне хронического воспаления показаны делеции 19р13.2, 19я 13.1-я 13.3, 18ц11.2-я21, 15ц15-ц22.

5. Максимальные отличия по частоте хромосомных аберраций по ходу развития патологического процесса выявлены между эпителием слизистой оболочки желудка на фоне хронического воспаления при отсутствии опухолевого очага и опухолевой тканью.

6. В клетках опухолевой ткани больных раком желудка уровень амплификаций статистически значимо превышает аналогичный показатель для эпителия, прилежащего к неопластическому очагу (р = 0,031).

7. Онкомаркеры вируса Эпштейна-Барр выявлены на самых ранних этапах патологического процесса в эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка 24 % больных хроническим атрофическим гастритом.

8. Модифицирующего влияния вируса Эпштейна-Барр на частоту и разнообразие хромосомных мутаций в эпителии слизистой оболочки желудка у пациентов с хроническим гастритом не выявлено.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Настоящая работа была направлена на сравнительную характеристику эпителиальных клеток слизистой оболочки при хроническом воспалении и раке желудка с цитогенетических позиций, с целью выявления особенностей спектра и уровня аберраций по ходу развития патологического процесса в СОЖ, а также на исследование наличия маркеров латентной инфекции вируса Эпштейна-Барр в эпителии слизистой желудка на ранних стадиях патологического процесса.

Выбор направления исследования был продиктован несколькими причинами. Во-первых, хронический гастрит как предраковое состояние желудка с высокой частотой выявляется при клинических исследованиях и является фактором риска развития опухолей желудка, в частности интестинального типа (Busuttil et al., 2009). Вероятность злокачественной трансформации клеток при хроническом гастрите составляет от 1,3 до 50%.

Сельчук, Никулин, 2003; Чойнзонов и др., 2004). Во-вторых, рак желудка представляет собой многофакторное заболевание, развитие которого определяется различными факторами экзогенной и эндогенной природы, среди которых значительное место занимают нарушения хромосомного материала. Наличие числовых и структурных аберраций хромосом может обусловливать возникновение геномной нестабильности через амплификацию и делецию определенных участков генома, в которых локализуются онкогены или гены-супрессоры опухолей. На сегодняшний день не вызывает сомнений, что ткани различных органов больных предопухолевыми заболеваниями характеризуются наличием хромосомных нарушений (Willenbucher et al., 1997; Moskovitz et al., 2000; Choi et al., 2009;

Kulaylat, Dayton, 2010). Для предраковых заболеваний желудочно-кишечного тракта также известны хромосомные аберрации, регистрируемые практически в каждом исследуемом случае (Weiss etal., 2003; Kim et al.,

2001). Однако, группа хронических гастритов, с цитогенетических позиций, остается недостаточно исследованной. Анализ литературных данных по

99 данной проблеме показывает наличие числовых нарушений хромосом в эпителиальных клетках желудка при хроническом гастрите (Teodori et al., 1984; Cesar et al., 2006). Однако работ с использованием CGH-анализа хромосомных нарушений клеток эпителия при хроническом гастрите не проводилось. И, наконец, эпителиальная ткань на фоне хронического воспалительного ответа часто характеризуются развитием метапластических и диспластических изменений. Данные морфо-гистологические изменения являются непосредственным фактором риска инициации развития опухолевого очага.

Таким образом, целью данной работы явилось исследование цитогенетические нарушения в слизистой оболочке на фоне хронического гастрита и в опухолевых клетках желудка, а также проследить изменение числа и спектра хромосомных аберраций на этапах патологического процесса в ткани слизистой оболочки желудка. Кроме того, одна из поставленных задач предполагала исследование наличия вирусных компонент в эпителии желудка при хроническом гастрите с целью изучения вовлеченности ВЭБ в развитие раннего патологического процесса в слизистой желудка, а также модифицирующего влияния вируса на индукцию хромосомных нарушений в эпителии.

В ходе проведенного исследования с помощью CGH-анализа были получены данные об уровне и спектре хромосомных нарушений в клетках слизистой оболочки желудка при развитии патологического процесса, начиная с его ранних этапов.

При этом, в группе с морфологически нормальной тканью без признаков воспаления, аберраций хромосом выявлено не было, тогда, как в образцах слизистой со слабовыраженным воспалительным процессом детектированы единичные амплификации хромосомного материала.

В группе пациентов с хроническим гастритом без диспластических изменений эпителия был выявлен высокий уровень хромосомных нарушений: у 9 из 12 больных (75% случаев) обнаружены изменения числа

100 копий ДНК. При этом, данная подгруппа характеризовалась узким спектром нарушений. Так, единичные амплификации хромосомного материала были детектированы только в 3 из 9 образцов тканей, тогда как делеции были выявлены у 6 из 9 больных. Число амплификаций равнялось 5, делеций - 6. Основным типом нарушений в данной подгруппе была делеция 15qll.2-q26, с минимальным перекрывающимся сегментом 15ql2-ql5 (66,6%). Анализируя полученные данные, следует иметь в виду наличие в ткани нескольких клеточных клонов, а также то, что метод сравнительной геномной гибридизации позволяет зафиксировать определенных «временной срез» событий. Возможно, клетки, обладающие выявленной делецией, подвергаются апоптотической гибели, предотвращая развитие хромосомной нестабильности.

Следующим этапом развития патологического процесса в СОЖ, согласно модели канцерогенеза, является морфологическое изменение структуры эпителия, которое характеризуется наличием дисплазии клеток. Таким образом, изучая последовательные этапы развития патологического процесса, в подгруппе больных с хроническим гастритом, при наличии метапластических и диспластических изменений эпителия, был также выявлен высокий уровень хромосомных аберраций. У 9 из 12 больных (75%) показаны нарушения хромосомного материала. Однако, спектр хромосомных нарушений, по сравнению с подгруппой без дисплазии, был значительно шире. Так, число выявленных амплификаций равнялось 52, а делеций - 4. Спектр аберраций расширился за счет увеличения числа амплификаций. Основным типом нарушений для данной группы больных была амплификация 3р12-р23 (55,5%).

Были обнаружены статистически значимые отличия по соотношению амплификаций и делеций в клетках тканей исследуемых групп. Так, среди пациентов с дисплазией соотношение амплификаций и делеций увеличивалось в сторону амплификаций (р=0,007).

Аккумуляция, расширение спектра хромосомных нарушений приводит к дисбалансу сотен генов, ответственных за многие ключевые процессы, поддерживающие целостность и правильную работу различных механизмов, таких, например, как апоптоз, пролиферация.

Следует отметить, что частота и спектр нарушений хромосомного материала, несмотря на наличие некоторых общих аномалий хромосом, значительно варьирует в исследуемой группе больных с дисплазией. Данный факт может быть объяснен наличием различных мутантных клеточных клонов в отдельно полученном биоптате. Кроме того, возможно, что развитие хронического гастрита не всегда сопровождается нарушениями хромосомного материала на стадии воспалительной инфильтрации и гиперплазии. Однако, факт наличия высокого уровня несбалансированных хромосомных аберраций заслуживает пристального внимания в качестве фактора, сопутствующего развитию диспластических изменений.

В ходе нашего исследования на момент проведения цитогенетического анализа тканей эпителия желудка при хроническом гастрите, данных о переходе предопухолевого состояния обследованных пациентов в онкологическое заболевание установлено не было. В определенной степени это может объясняться длительностью развития неопластического процесса. С другой стороны, для данного типа заболевания показан определенный курс терапии, и при своевременном проведении всех необходимых лечебных мероприятий хронический гастрит поддается лечению.

Поэтапное развитие неоплазии желудка интестинального типа предполагает возникновение опухолевого очага на фоне диспластических изменений эпителия. С целью анализа хромосомных нарушений в опухолевых клетках желудка были исследованы образцы опухолевой ткани и прилежащего к неопластическому очагу эпителию.

Цитогенетический анализ опухолевой ткани желудка показал наличие хромосомных нарушений во всех исследуемых образцах. Нарушения были выявлены у 10 из 10 человек (100%), в то время как в клетках эпителиальной

102 ткани прилежащего к опухоли очага воспаления аберрации были детектированы у 7 человек (70%). Общее число аберраций в опухолевых клетках составило 42 (23 делеций и 19 амплификаций), тогда как в клетках прилежащего эпителия аналогичный показатель был равен 30 (23 делеций и 7 амплификаций).

Наиболее частыми хромосомными нарушениями в опухолевой ткани были делеции в 5ql2-q23 (30%) и 18q (30%). Также, у 20% больных выявлены амплификации 20pll.2-pl3, 7q21-q35 и 8q21.2-q24, и в одном случае - трисомия по 20 хромосоме.

В прилежащей к опухолевому очагу эпителиальной ткани на фоне хронического воспаления частыми нарушениями были делеции в хромосомных субсегментах 19р13.2, 19ql3.1-ql3.3 (30%), 18ql2-q21 (20%) и в одном случае - моносомия по 18 хромосоме.

Сравнивая число делеций и амплификации в опухолевой ткани и ткани из области хронического воспаления, было выявлено увеличение в 2,7 раза числа амплификаций в клетках опухоли по сравнению с клетками эпителия из очага воспаления. Проведение сравнений числа аберраций в образцах гастрита и опухоли от одних и тех же пациентов с помощью теста Уилкоксона показало статистически значимые различия по числу амплификаций (р=0,031), тогда как по количеству делеций и общему числу аберраций значимых отличий выявлено не было (р=0,91; р=0,13).

Следует отметить, что полученные в ходе выполнения нашей работы результаты по изучению типов наиболее частых аберраций в опухолевой ткани, согласуются с данными литературных источников. Выявленные типы нарушений хромосомного материала регистрируются практически в каждом исследуемом случае рака желудка (Коо et al., 2000; Kong et al., 2001; Kimura et al., 2004; Weiss et al., 2004; Zhu et al., 2007; Bi et al., 2008).

Также были обнаружены хромосомные аберрации, которые явились общими для двух типов тканей. Так, делеции 18ql2-q21 детектированы в трех случаях в опухолевой и прилежащей к опухоли ткани эпителия у одних

ЮЗ и тех же больных раком желудка. Кроме того, стоит отметить, что делеции в хромосомных субсегментах 19р13.2, 19ц13.1-ц13.3, которые были частыми в прилежащем эпителии из области хронического воспаления, также встречались и в опухолевой ткани. Необходимо обратить внимание на то, что в группах больных только с хроническим гастритом данных хромосомных аберраций обнаружено не было.

Сравнительный анализ биологического материала всех обследованных пациентов показал следующие результаты. Статистически значимые отличия по числу амплификаций и делеций были выявлены при сравнении групп больных с опухолевой патологией и пациентов с хроническим гастритом без диспластических изменений слизистой (р=0,01; р=0,009, соответственно). В группе больных раком желудка, по сравнению с пациентами с хроническим гастритом при наличии дисплазии, было зафиксировано большее число делеций (р=0,014). По числу амплификаций не было обнаружено статистически значимых отличий между данными группами. Были выявлены значимые различия по уровню амплификаций между двумя типами тканей: опухолевой и прилежащим эпителием из очага хронического гастрита (р=0,031). Таким образом, клетки опухоли характеризовались большим числом амплификаций, чем клетки эпителия на фоне гастрита. По результатам сравнения было выявлено, что только ткани крайних точек развития процесса (гастрит без дисплазии и опухоль) значимо отличаются по всем типам хромосомных аберраций, детектированных с помощью СвН-анализа, тогда как патологические состояния и изменения эпителия более близкие друг к другу с позиции гастроканцерогенеза, отличаются лишь по отдельным типам аберраций.

На основании проведенного исследования можно сделать вывод о том, что на начальном этапе развития патологического процесса ведущими аберрациями хромосом являются амплификации, которые обеспечивают увеличение хромосомного материала и повышение жизнеспособности клеточных клонов. Далее, в ходе эволюции опухоли, выделяются популяции

104 с мутациями, способными поддерживать существование клона, на фоне которых возникают делеции хромосомного материала в регионах, содержащих опухолесупрессорные гены. Опухолевые клетки приобретают относительную стабильность для дальнейшего существования и развития.

Анализируя разнообразие хромосомных аномалий, следует иметь в виду, что полученные генетические профили представляют собой картину нарушений хромосомного материала на определенном временном этапе развития патологического процесса. Кроме того, необходимо отметить, что результатом СвН-анализа являются данные не о кариотипе какой-то определенной группы клеток, а о комплексных нарушениях в нескольких клеточных клонах, каждый из которых имеет свой набор аберраций вследствие определенных мутационных событий.

Были получены положительные результаты относительно вовлеченности вируса Эпштейна-Барр в развитие патологического процесса желудка на начальных этапах. Присутствие вирусных компонент было обнаружено в 5 из 21 образца ткани с хроническим гастритом, что составило 24% всех исследованных случаев. В 2 из 5 образцов были выявлены делеции сегментов по длинному плечу 15 хромосомы, при отсутствии каких-либо других типов аберраций (15qlЗ-ql4 и 15ql4-q21). В остальных 3 образцах не обнаружено частых нарушений хромосом. Таким образом, в данной работе не было выявлено специфического влияния вирусных компонент на типы спектр и уровень хромосомных аберраций в эпителиальных клетках слизистой оболочки желудка, однако подтверждены литературные данные относительно раннего проникновении вируса в эпителиальные клетки в ходе установления хронической воспалительной реакции в слизистой оболочке желудка.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Матвеенко, Ольга Альбертовна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аруин Л.И. Новая международная классификация дисплазий слизистой оболочки желудка / Л.И. Аруин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2002. - Т. 12. - №3. -С. 15-17.

2. Аруин Л. И. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника / Л. И. Аруин, Л. Л. Капуллер, В. А. Исаков. - Москва: Триада-Х, 1998.-483с.

3. Аруин Л.И. Рак желудка / Л.И. Аруин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 1999. - Т.9. - №1. -С. 67-72.

4. Байкова Э.Р., Фазлыев М.М. Факторы риска развития рака желудка при язвенной болезни // Забайкальский медицинский вестник . - 2012. - №1. -С. 101-109.

5. Баранская Е.К. Клинический спектр предраковой патологии желудка / Е.К. Баранская, В.Т. Ивашкин // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии - 2002. - №3. - С. 7-14.

6. Букин Ю.В., Драудин-Крыленко В.А. Молекулярно-биологические механизмы гастроканцерогенеза и подходы к профилактике рака желудка // Успехи биологической химии. - 2000. - Т. 40. - С. 329-356.

7. Волынец Г. В., Клембовский А. И., Новикова А. В. Морфологические изменения слизистой оболочки желудка у детей с хроническим гастритом в зависимости от этиологических факторов заболевания // Российский педиатрический журнал. - 2006. - №4. - С. 32—44.

8. Давыдов М.И., Гурцевич В.Э., Яковлева Л.С. и др. Обнаружение и характеристика опухолей желудка, ассоциированных с вирусом герпеса Эпштейна-Барр // Вестник Российской Академии медицинских наук. -1999.-№3,-С. 56-59.

9. Давыдов М.И., Франк Г.А., Степина В.Н. Молекулярно-биологическое и

клинико-морфологическое исследование опухолей желудка,

107

ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр // Вестник Российской Академии медицинских наук. - 2000. - № 3. - С. 27-31.

10. Залетаев Д.В. Эпигенетическая регуляция экспрессии генов в процессах канцерогенеза // Молекулярная медицина. - 2008. - №4. - С. 46-51.

11. Имяников E.H. Молекулярная диагностика в онкологии // Молекулярная биология. - 2008. - №5. - С. 772-785.

12. Каракешишева М.Б., Бочкарева Н.В. и др. Роль компонентов желудочной слизи и клеточного состава воспалительного инфильтрата слизистой оболочки в оценке риска развития рака желудка // Сибирский онкологический журнал. - 2007. - №4. - С. 57-61.

13. Маев И. В. Кишечная метаплазия слизистой оболочки желудка в практике гастроэнтеролога: современный взгляд на проблему / И.В. Маев, О.В. Зайратьянц // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2006. - Т. 16, №4. - С. 38-47.

14. Мерабишвили В.М. Злокачественные новообразования в мире, России, Санкт-Петербурге. / Мерабишвили В.М. - СПб., 2007. - 424с.

15. Мозговой С.И. Кишечная метаплазия слизистой оболочки желудка: от природы феномена к прогнозу // Бюллетень Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. - 2009. - №3. - С. 5-9.

16. Наумова J1. А., Пальцев А. И., Беляева Я. Ю. Клинико-морфологические варианты атрофического поражения слизистой оболочки желудка // Терапевтический архив. - 2009. - №2. - С. 17-23.

17. Никитина JI.B. Рак желудка: факторы риска, диагностика рака и предшествующих поражений // Дальневосточный медицинский журнал. - 2010. -№1. - С. 122-127.

18. Павлова H.H. Патогенетические и морфологические основы предрака и рака желудка // Вестник Тюменского государственного университета. -2005.-№1,-С. 209-218.

19. Пальцев М.А., Аничков Н.М. Атлас патологии опухолей человека. - М.:

ОАО Изд-во «Медицина». - 2005. - 424с.

108

20. Писарева Л.Ф., Бояркина А.П., Ушакова И. В. Рак желудка в регионе Сибири и Дальнего востока (1991-2005 гг.) // Сибирский онкологический журнал. - 2009. - №3. - 36-43.

21. Писарева Л.Ф., Коломиец Л.А. Рак желудка в регионе Сибири и Дальнего Востока. Факторы риска. - Томск: STT, 2001. - 276 с.

22. Сельчук В.Ю., Никулин М.П. Рак желудка // Русский медицинский журнал.-2003.-Т. 11.-№26.-С. 1441-1448.

23. Сидоренко Ю.С., Франциянц Е.М., Дмитриева С. Д. и др. Сравнительный анализ состояний свободнорадикальных процессов в ткани злокачественных и доброкачественных новообразований желудка // Сибирский онкологический журнал. - 2008. - №6. - С. 35-39.

24. Успенская М.Н. Биохимические и иммунологические критерии оценки состояния слизистой оболочки желудка при ее опухолевой и неопухолевой патологии / М.Н. Успенская, В.П. Калиновский, Е.И. Ткаченко // Вопросы онкологии. - 2007. - Т. 53, №3. - С. 304-310.

25. Хомерики С. Г. Процессы регенерации в слизистой оболочке желудка и канцерогенез / С.Г. Хомерики // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2001. - №2. - С. 17-25.

26. Хоробрых Т.В., Черноусов Ф.А., Жаров A.A. и др. Язвенная болезнь желудка и рак (мифы и реальность) // Вестник хирургической гастроэнтерологии. - 2006. - №1. - С. 1-10.

27. Чиссов В.И. Предрак желудка / В.И. Чиссов, Г.А. Франк, Т.А. Белоус // Клиническая медицина. - 1999. - № 7. - С. 23-26.

28. Чойнзонов Е.Л, Писарева Л.Ф Бояркина А.П. и др. Онкологическая заболеваемость населения Томской области. - Томск: Изд-во Том. ун-та, 2004.-254с.

29. Шварцбург П.М. Хроническое воспаление повышает риск развития эпителиальных новообразований, индуцируя предраковое микроокружение: анализ механизмов дисрегуляции // Вопросы

онкологии. - 2006. - Т. 52. - №2. - С. 137-144.

109

30. Яицкий А.Н., Данилов И.Н. Особенности лимфогенного метастазирования при раке желудка // Вестник хирургии им. И.И. Грекова. - 2010.-№1.-С. 113-116.

31. Яковенко Э.П., Иванов А.Н., Илларионова Ю.В. и др. Хронический гастрит: диагностика и лечение // Фарматека. - 2008. - №8. - С. 50-54.

32. Adsay N.V., Dergham S.T., Koppitch F.C., et al. Utility of fluorescence in situ hybridization in pancreatic ductal adenocarcinoma // Pancreas. - 1999. -Vol. 18.-P. 111-116.

33. Alfaro E.E., Lauwers G.Y. Early gastric neoplasia: diagnosis and implications // Adv Anat Pathol. - 2011. - Vol. 18. - P. 268-280.

34. Allavena P., Garlanda C., Borrello M.G. et al. Pathways connecting inflammation and cancer // Curr. Opinion in Genetics and Development. -2008.-Vol. 18.-P. 3-10.

35. Ambinder R.F. Epstein-barr virus and Hodgkin lymphoma // Hematology Am Soc Hematol Educ Program. - 2007. - P. 204-209.

36. Anderson G.P., Bozinovski S. Acquired somatic mutation in the molecular pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease // Thrends in Pharmacol. - 2003. - Vol. 24. - P. 71-76.

37. Assumpgao P.P., Ishak G., Chen E.S., et al. Numerical aberrations of chromosome 8 detected by conventional cytogenetics and fluorescence in situ hybridization in individuals from northern Brazil with gastric adenocarcinoma // Cancer Genet Cytogenet. - 2006. - Vol. 169. - P. 45^9.

38. Balkwill F., Charles K.A., Mantovani A. Smoldering and polarized inflammation in the initiation and promotion of malignant disease // Cancer Cell. - 2005. - Vol. 7. - P. 211-217.

39. Beggs A.D., Abulafi M., Hodgson S.V. The DCC gene and colorectal cancer: the story is more complex. // Colorectal Dis. - 2008. - Vol. 10. - P. 630

40. Bi J., Lau S.H., Hu L., et al. Downregulation of ZIP kinase is associated with tumor invasion, metastasis and poor prognosis in gastric cancer // Int J

Cancer. - 2008. - Vol. 19.-P. 1587-1593.

110

41. Blaser M.J. Linking Helicobacrer pilory to gastric cancer // Nature Med. -2000.-Vol. 6. -P. 376-377.

42. Brady G., MacArthur G.J., Farrell P.G., et al. Epstein-Barr virus and Burkitt lymphoma // J Clin Pathol. - 2007. - Vol. - 60. - P. 1397-1402.

43. Bromberg J., Wang T.C. Inflammation and cancer: IL-6 and STAT3. Complete the link // Cancer cell. - 2009. - Vol. 15. - P. 79-80.

44. Buffart T.E., Carvalho B., Mons T., et al. DNA copy number profiles of gastric cancer precursor lesions // BMS Genomicg. - 2007. - Vol. 8. - P.345-349.

45. Burbano R.R., Assump9ao P.P., Leal M.F., et al. C-MYC locus amplification as metastasis predictor in intestinal-type of gastric adenocarcinomas: CGH study in Brazil // Anticancer Res. - 2006. - Vol. 26. - P. 2909-2914.

46. Burgos J.S. Involvement of the Epstein-Barr virus in the nasopharyngeal carcinoma pathogenesis // Med Oncol. - 2005. - Vol. 22. - P. 113-121.

47. Busuttil R.A., Boussioutas A. Intestinal metaplasia: A premalignant lesion involved in gastric carcinogenesis // Journal of Gastroenterology and Hepatology. - 2009. - Vol. 24. - P. 193-201.

48. Campisi J. Senescent cells, tumor suppression and organism age: Good citizens, bad neighbors//Cell.-2005.-Vol. 120.-P. 5123-5125.

49. Carrascal E., Koriyama C., Akiba S., et al. Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma in Cali, Colombia // Oncol Rep. - 2003. - Vol. 10. - P. 1059-1062.

50. Carvalho B., Buffart T.E., Reis R.M., et al. Mixed gastric carcinomas show similar chromosomal aberrations in both their diffuse and glandular components // Cell. Oncol. - 2006. - Vol. 28. - P. 283-294.

51. Ceradini D.J., Kulkarni H., Callaghan M.J. et al. Progenitor cell/trafficking is regulated by hypoxic gradients through HIF-1 induction of CDF// Nature. Med. - 2004. - Vol. 10.-P. 858-864.

52. Cesar A.C.G., Calmon M., Cury P.M., et al. Genetic alterations in benign lesions: chronic gastritis and gastric ulcer // World of Gastroenterol. - 2006. -Vol. 12.-P. 625-629.

53. Chakraborty S.B., Dasgupta S., Roy A., et al. Differential deletions in 3p are associated with the development of head and neck squamous cell carcinoma in Indian patients // Cancer Genet Cytogenet. - 2003. - Vol. 146 - P. 130138.

54. Chan W.-Y., Chan A. B.-W., Liu A.Y., et al. Chromosome 11 Copy Number Gains and Epstein-Barr Virus-Associated Malignancies // Diagnostic Molecular Pathology. - 2001. - Vol. 10. - P. 223-227.

55. Chan W.Y., Liu Y., Li C.Y., et al. Recurrent genomic aberrations in gastric carcinomas associated with Helicobacter pylori and Epstein-Barr virus // Diagn Mol Pathol. - 2002. - Vol. 11. - P. 127-134.

56. Chao C., Hellmich M.R. Gastrin, inflammation, and carcinogenesis // Curr Opin Endocrinol Obes. - 2010. - Vol. 17. - P. 33-39.

57. Chen J., Fu L., Zhang L.Y., et al. Tumor suppressor genes on frequently deleted chromosome 3p in nasopharyngeal carcinoma // Chin J Cancer. -2012.-Vol. 31. -P. 215-222.

58. Choi J.S., Lee W.J., Baik S.H. Array CGH Reveals Genomic Aberrations in Human Emphysema // Lung. - 2009. - Vol. 187. - P. 165-167.

59. Colotta F., Allavena P., Sica A. Cancer-related inflammation, the seventh hallmark of cancer: links to genetic instability // Carcinogenesis. - 2009. -Vol. 30. - P.1073-1081.

60. Cooke M.S., Evans M.D., Dizdaroglu M., et al. Oxidative DNA damage: mechanism, mutation, and disease // FASEB L. - 2003. - Vol. 17. - P. 11951214.

61. Correa P. Human gastric carcinogenesis: a multistep and multifactorial process. First American Society Lecture on Cancer Epidemiology and prevention // Cancer Rev. - 1992. - Vol. 52. - P. 6735 - 6740.

62. Correa P., Houghton J. Carcinogenesis of Helicobacter pylori II Gastroenterol. - 2007. - Vol. 133. - P. 659-672.

63. Coussense L.M., Fingleton B., Matrisian L.M. Matrix metalloproteinase inhibitors and cancer: trials and tribulation // Science. - 2002. - Vol. 295. - P. 2387-2392.

64. Dai Y.C., Tang Z.P., Zhang YL. How to assess the severity of atrophic gastritis // World J Gastroenterol. - 2011. - Vol. 7. - P. 1690-1693.

65. DePinho R. The age of cancer // Nature. - 2000. - Vol. 408. - P. 248-254

66. Erashi T., Das P., Roberts M.R. Low O2 tensions and the prevention of differentiation of hES cells // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 2005. - Vol. 102.-P. 4783—4789.

67. Fukayama M. Epstein-Barr virus and gastric carcinoma // Pathology international. - 2010. - Vol. 60. - P. 337-350.

68. Gao J., Luo X., Tang K., et al. Epstein-Barr virus integrates frequently into chromosome 4q, 2q, lq and 7q of Burkitt's lymphoma cell line (Raji) // J Virol Methods. - 2006. - Vol. 136. - P. 193-199.

69. Genta R.M. One more dysplasia // Journal of Gastroenterology and Hepatology.-2001.-Vol. 13.-P. 1411-1414.

70. Gonda T.A., Tu S., Wang T.C. Chronic inflammation, the tumor microenvironment and carcinogenesis // Cell Cycle. - 2009. - Vol. 8. - P. 2005-2013.

71. Gregory Y., Lauwers M.D., Amitabh S. Gastric preneoplastic lesions and epithelial dysplasia // Gastroenterol Clin. - 2007. - Vol. 36. - P. 813-829

72. Griffin C.A., Hruban R.H., Bolden S., et al. Chromosome abnormalities in pancreatic adenocarcinoma // Genes Chromosomes Cancer. - 1994. - Vol. 9. -P. 93-100.

73. Gulley M.L., Pulitzer D.R., Eagan P.A., et al. Epstein-Barr virus infection is an early event in gastric carcinogenesis and is independent of bcl-2 expression and p53 accumulation // Hum Pathol. - 1996. - Vol. 27. - P. 20-27.

74. Han S., Kim H.Y., Park K., et al. C-myc expression is related with cell proliferation and associated with poor clinical outcome in human gastric cancer // J. Korean Med. - 1999. - Vol.14. - P. 526-530.

75. Han Y.-P., Nien Y.-D., Garner W.L. TNF-induced proteolytic activation of pro-matrix metalloproteinase-9 by human skin is controlled by down-regulation tissue-associated chymotrypsin-like proteinase // J. Biol. Chem. -2002. - Vol. 277. - P. 27319-27327.

76. Haseba M., Yasutake T., Kondo M., et al. Frequent gains of 20q and losses of 18q are associated with lymph node metastasis in intestinal-type gastric cancer // Anticancer Res. - 2003. - Vol. 23. - P. 3353-3357.

77. Hatakeyama M. Helicobacter pilory and gastric carcinogenesis // J. Gastroenterol. - 2009. - Vol. 44. - P. 239-248.

78. Heinmoller E., Dietmaier W., Zirngibl H., et al. Molecular analysis of microdissected tumors and preneoplastic intraductal in pancreatic carcinoma // Am J Pathol. - 2000. - Vol. 157. - P. 83-92.

79. Hino R., Uozaki H. Inoue Y., et al. Survival advantage of EBV-associated gastric carcinoma: Survivin up-regulation by viral latent membrane protein 2A // Cancer Res. - 2008. - Vol. 68. - P. 1427-1435.

80. Hudler P. Genetic aspects of gastric cancer instability // Scientific World Journal. - 2012. - Vol. - 2012. - P. 1-10.

81. Itzkowitz S.H., Yio X. Inflammation and cancer IV. Colorectal cancer in inflammatory bowel disease: the role of inflammation // Amer J. Physiol. -2004.-Vol. 287.-P. 7-17.

82. Iwakiri D., Takada K. Role of EBERs in the pathogenesis of EBV infection //Adv Cancer Res. -2010. -Vol. 107.-P. 119-136.

83. Kaizaki Y., Sakurai S., Chong J.M., et al. Atrophic gastritis, Epstein-Barr virus infection, and Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma // Gastric cancer. - 1999.-Vol. 2.-P. 101-108.

84. Kallioniemi A., Kallioniemi O.P., Sudar D., et al. Comparative genomic hybridization for molecular cytogenetics analysis of solid tumor // Science. -1992.-Vol.258. - P.818-821.

85. Kang J.U., Kang J.J., Kwon K.C., et al. Genetic alterations in primary gastric carcinomas correlated with clinicopathological variables by array comparative hybridization // J. Korean Med. - 2006. - Vol. 21. - P.656-665.

86. Karaman A., Kabalar M.E., Binici D.N., et al. Genetic alterations in gastric precancerous lesions // Genet Couns. - 2010. - Vol. 21. - P.439-450.

87. Karin M. Nuclear factor-kappaB in cancer development and progression // Nature. - 2006. - Vol. 441. - P. 431-436.

88. Kijima Y., Ishigami S., Hokita S., et al. The comparison of the prognosis between Epstein-Barr virus (EBV)-positive gastric carcinomas and EBV-negative ones //Cancer Lett. - 2003. - Vol. 200. - P. 33-40.

89. Kim J.C., Koo K.H., Roh S.A., et al. Genetic and epigenetic changes in the APC gene in sporadic colorectal carcinoma with synchronous adenoma // Int J Colorectal Dis. - 2003. - Vol. 18. - P. 203-209.

90. Kim Y.H., Kim N.-G., Lim J.G., et al. Chromosomal alterations in paired gastric adenomas and carcinomas // American journal of pathology. - 2001. -Vol. 158.-P. 665-662.

91. Kimura Y., Noguchi T, Kawahara K., et al. Genetic alterations in 102 primary gastric cancers by comparative genomic hybridization: gain of 20q and loss of 18q are associated with tumor progression // Mod Pathol. - 2004. - Vol. 17, № 11,- P.1328-1337.

92. Kitayama Y., Igarashi H., Watanabe F., et al. Nonrandom chromosomal numerical abnormality predicting prognosis of gastric cancer: a retrospective study of 51 cases using pathology archives // Lab Invest. - 2003. - Vol. 83. -P. 1311-1320.

93. Koch H.K., Oehlert M., Oehlert W. An evaluation of gastric dysplasia in the years 1986 and 1987 // Pathol Res Pract. - 1990. - Vol. 186. - P. 80-84.

94. Kokkola A., Monni O., Puolakkainen P., et al. 17ql2-21 amplification, a novel recurrent genetic change in intestinal type of gastric carcinoma: a comparative genomic hybridization study // Genes Chromosomes Cancer. -1997.-Vol. 20. - P. 38^3.

95. Kong G., Oga A., Park C.K., et al. DNA sequence copy number aberrations associated with histological subtypes and DNA ploidy in gastric carcinoma // Jpn J Cancer Res. - 2001. - Vol. 92, № 7. - P. 740-747.

96. Konturec P.C., Konturek S.J., Brzozowski T. Helicobacter pilory infection in gastric carcinogenesis // Journal of physiology and pharmacology. - 2009. -Vol. 60.-P. 3-21.

97. Koo S.H., Kwon K.C., Shin S.Y., et al. Genetic alterations of gastric cancer: comparative genomic hybridization and fluorescence In situ hybridization studies // Cancer Genet Cytogenet. - 2000. - Vol. 117, № 2. - P. 97-103.

98. Kulaylat M.H., Dayton M.T. Ulcerative colitis and cancer // Journal of Surgical Oncology. -2010. - Vol. 101. - P. 706-712.

99. Kundu J.K., Surh Y.J. Inflammation: gearing the journey to cancer // Mutat Res. - 2008. - Vol. 659. - P. 15-30.

100. Kushima R., Mukaisho K., Vieth M., et al. Pyloric-gland-type adenoma of the stomach // Stomach Intestine. - 2003. - Vol. 38 - P. 1377-1387.

101. Kushima R., Vieth M., Borchard F., et al. Gastric-type well-differentiated adenocarcinoma and pyloric gland adenoma of the stomach // Gastric Cancer. -2006.-Vol. 9. P. 177-184.

102. Kutok J.L., Wang F. Spectrum of Epstein-Barr virus-associated diseases // Mol Pathol.-2006.-Vol. 53.-P. 255-261.

103. Landino L.M., Crews B.C., Timmons M.D., et al. Peroxynitrite, the coupling product of nitric oxide and superoxide activates prostaglandin biosynthesis // Proc. Natl. Acad. Sci. - 1996. - Vol. 93.-P. 15069-15074.

104. Lauren P. The two histological main types of gastric cancer // IARC Sci. Publ.- 1965.-Vol. 157. -P.327-349.

105. Lauwers G.Y., Srivastava A. Gastric preneoplastic lesions and epithelial dysplasia // Gastroenterol Clin N Am. - 2007. - Vol. 36. - P. 813-829.

106. Lee T.-S., Chan L.-Y. Heme oxygenase-1 antiinflammatory affect of interleukin-10 in mice // Nat. Med. - 2002. - Vol. 8. - P. 240-246.

107. Lindberg J.O., Stenling R.B., Rutegard J.N. DNA aneuploidy as a marker of premalignancy in surveillance of patients with ulcerative colitis // Br J Surg. -1999. - Vol. 86. - P. 947-950.

108. Liu X.-P., Li D.-Y., Liu X.-L., et al. Comparison of chromosomal aberrations between primary tumors and their synchronous lymph-node metastases in intestinal-type of gastric carcinoma // Pathology-Research and Practice. -2009.-Vol. 205.-P. 105-111.

109. Marnett L.J. Oxiradicals and DNA damage // Carcinogenesis. - 2000. - Vol. 21.-P. 361-370.

110. Merlo L.M.F., Wang L., Pepper J.W., et al. Polyploidization and Cancer // N-Y.: Springer Science. - 2010. - P. 1-10.

111.Micci F., Haugom L., Ahlquist T., et al. Genomic aberrations in borderline ovarian tumors // J Transl Med. - 2010. - Vol. 8. - P. 1-9.

112. Micev M., Cosic-Micev M. Pathology and pathobiology of the gastric carcinoma //Acta Chir Iugosl. - 2011. - Vol. 58. - P. 39-52.

113.Morewaya J., Koriyama C., Akiba S., et al. Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma in Papua new Guinea // Oncol Rep. - 2004. - Vol. 12. - P. 1093-1098.

114. Moskovitz A.H., Lowenfels N.J., Brentnall T.A. Chromosomal instability in pancreatic cells from patients with chronic pancreatitis and pancreatic adenocarcinoma // Genes, Chromosomes and cancer . - 2003. - Vol. 37. - P. 201-206.

115.Nanbo A., Yoshiyama H., Takada K. Epstein-Barr virus-encoded poly(A)-RNA confers resistance to apoptosis mediated through Fas by blocking the PKR pathway in human epithelial intestine 407 cells // J. Virol. - 2005. - Vol. 79.-P. 12280-12285.

116. Noguchi T., Wirtz H.C., Michaelis S., et al. Chromosomal imbalances in gastric cancer. Correlation with histologic subtypes and tumor progression // Am J Clin Pathol.-2001.-Vol. 115, №6. -P. 828-834.

117. Ohshima H., Tazawa H., Sylla B.S. et al. Prevention of human cancer by modulation of chronic inflammatory processes // Mut. Res. - 2005. - Vol. 591.-P. 110-122.

118. Pang M.-F., Lin K.-W., Pen S.-C. The signaling pathways of Epstein-Barr virus-encoded latent membrane protein 2A (LMP2A) in latency and cancer // Cell Mol Biol Lett. - 2009. - Vol. 14. - P. 222-247.

119. Peng D.-F., Sugihara H., Mukaisho K., et al. Alterations of chromosomal copy numbers during progression of diffuse-type gastric carcinomas: metaphase and array-based comparative genomic hybridization analyses of multiple samples from individual tumors // J. Pathol. - 2003. - Vol. 201. - P. 439-450.

120. Pikarsky E. NF-kappaB functions as a tumour promoter in inflammation-associated cancer // Nature. - 2004. - Vol. 431. - P. 461-466.

121. Pirkin D.M., Bray F., Ferlay J., et al. Global cancer statistic // CA Cancer J Clin. - 2005. - Vol. 55. - P. 74-108.

122. Porschen R., Robin U., Schumacher A., et al. DNA aneuploidy in Crohn's disease and ulcerative colitis: results of a comparative flow cytometric study // Gut. - 1999. - Vol. 33. - P. 663-667.

123. Ranganath P., Agarwal M., Phadke S.R. Angelman syndrome and prenatally diagnosed Prader-Willi syndrome in first cousins // Am J Med Genet A. -2011.-Vol. 155.-P. 2788-2790.

124. Reisinger J., Rumpler S., Lion T., et al. Visualization of episomal and integrated Epstein-Barr virus DNA by fiber fluorescence in situ hybridization // Int. J. Cancer. - 2006. - Vol. 118. - P. 1603-1608.

125. Rius J., Guma M., Schuchtrup C., et al. NFkappaB links innate immunity to the hypoxic response through transcriptional regulation of HIF-1 alpha //

Nsture. - 2008. - Vol. 453.-P. 807-811.

118

126. Rosman-Urach M., Niv Y., Birk Y., et al. A high degree of aneuploidy, loss of p53 gene, and low soluble p53 protein serum levels are detected in ulcerative colitis patients // Dis Colon Rectum. - 2004. - Vol. 47. - P. 304313.

127. Rossi E., Klersy C., et al. Correlation between genomic alterations assessed by array comparative genomic hybridization, prognostically informative histologic subtype, stage, and patient survival in gastric cancer // Hum Pathol. -2011. - Vol. 42.-P. 1937^5.

128. Sen S. Aneuploidy and cancer // Current Opinion in Oncology. - 2000. - Vol. 12.-P. 82-88.

129. Seo J.S., Jun S.M., Kwon S.W., et al. Establishment and characterization of gastric carcinoma cell clones expressing LMP2A of Epstein-Barr virus // International journal of molecular medicine. - 2010. - Vol. 25. - P. 11-16.

130. Sheu J.J., Lee C.H., Ko J.Y., et al. Chromosome 3pl2.3-pl4.2 and 3q26.2-q26.32 are genomic markers for prognosis of advanced nasopharyngeal carcinoma // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. - 2009. - Vol. 18. - P. 2709-2716.

131.SilvaM., Veiga I., Ribeiro F.R., et al. Chromosome copy number changes carry prognostic information independent of KIT/PDGFRA point mutations in gastrointestinal stromal tumors // BMC Medicine. - 2010. - Vol. 8. - P. 26.

132. Smith M.G., Hold G.L., Tahara E., et al. Cellular and molecular aspects of gastric cancer // World J. Gastroenterol. - 2006. - Vol. 12, № 19. - P. 29792990.

133. Snijders A.M., Pinkel D., Albertson D.G. Current status and future prospects of array-based comparative genomic hybridization // Brief Funct Genomic Proteomic. - 2003. -Vol. 2. P. 37-45.

134. Sousa H., Pinto-Correia A.L., Medeiros R., et al. Epstein-Barr virus is associated with gastric carcinoma: The question is the significance? // World of Gastroenterol.- 2008. -Vol. 14.-P. 4347-4351.

135. Stec-Michalska K., Peczek L., Michalski B., et al. Helicobacter pylori infection and family history of gastric cancer decrease expression of FHIT tumor suppressor gene in gastric mucosa of dyspeptic patients // Helicobacter. -2009.-Vol. 14.-P. 126-134.

136. Suehiro Y., Umayahara K., Ohara H., et al. Genetic aberrations detected by comparative genomic hybridization predict outcome in patients with endometrioid carcinoma // Genes Chromosomes Cancer. - 2000. - Vol. 29. -P. 75-82.

137. Sulaiman L., Nilsson I.-L., Juhlin C. C., et al. Genetic characterization of large parathyroid adenomas // Endocrine-Related Cancer. - 2012. - Vol. 19. -P. 389-407.

138. Takakuwa T., Luo W.J., Ham M.F., et al. Identification of Epstein-Barr virus integrated sites in lymphoblastoid cell line (IB4) // Virus Res. - 2005. - Vol. 108.-P. 133-138.

139. Takakuwa T., Luo W.J., Ham M.F., et al. Integration of Epstein-Barr virus into chromosome 6ql5 of Burkitt lymphoma cell line (Raji) induces loss of BACH2 expression // Am J Pathol. - 2004. - Vol. 164. - P. 967-974.

140. Tamura G., Maesawa C., Suzuki Y., et al. Mutations of the APC Gene Occur during Early Stages of Gastric Adenoma Development // Cancer Res. - 1994. -Vol. 54.-P. 1149-1151.

141. Teodori L., Capurso L., Cordelli E., et al. Cytometrically determined relative DNA content as an indicator of neoplasia in gastric lesions // Cytometry. -1984.-Vol. 5.-P. 63-70.

142. Terdiman J.P., Aust D.E., Chang C.G., et al. High resolution analysis of chromosome 18 alterations in ulcerative colitis-related colorectal cancer // Cancer Genet Cytogenet. - 2002. - Vol. 15. - P. 129-137.

143. Teshima I., Chadwick D., Chitayat D., et al. FISH detection of chromosome 15 deletions in Prader-Willi and Angelman syndromes // Am J Med Genet. -1996.-Vol. 29.-P. 217-223.

144. Tompson M.P., Kurzrock R. Epstein-Barr virus and cancer // Clin Cancer Res. - 2004. - Vol. 10. - P. 803-821.

145. Tonk V., Wyandt H.E., Michand L., et al. Deletion of 15ql2 in Angelman syndrome: report of 3 new cases // Clin Genet. - 1992. - Vol. 42. - P. 229233.

146. Tu S., Bhagat G., Cui G. et al. Overexpression of interleukin-1 beta induces gastric inflammation and cancer and mobilized myeloid-derived suppressor cells in mice //Cancer cell. - 2008. - Vol. 14. - P. 408-419.

147. Uozaki H, Fukayama M. Epstein-Barr virus and gastric carcinoma-viral carcinogenesis through epigenetic mechanisms // Int J Clin Exp Pathol. -2008.-Vol. 3,-P. 198-216.

148. URL: http://www. progenetix.net/progenetix/locuslinkpage.html (дата обращения 10.09.2011) - база данных progenetix.

149. van Dekken H., Alers J.C., Riegman P.H., et al. Molecular Cytogenetic Evaluation of Gastric Cardia Adenocarcinoma and Precursor Lesions // American Journal of Pathology. - 2001. - Vol. 158. - P. 1961-1967.

150. van Dieren J.M., Wink J.C., Vissers K.J., et al. Chromosomal and microsatellite instability of adenocarcinomas and dysplastic lesions (DALM) in ulcerative colitis // Diagn Mol Pathol. - 2006. - Vol. 15. - P. 216-222.

151. Vane J.R., Mitchel J.A., Appleton L. et al. Inducible isoforms of cyclooxygenase and nitric-oxide synthase in inflammation // Ibid. - 1994. -Vol. 91.-P. 2046-2050.

152. Vannella L., Lahner E., Annibale B. Risk for gastric neoplasias in patients with chronic atrophic gastritis: a critical reappraisal // World J Gastroenterol. - 2012. - Vol. 28. - P. 279-285.

153.Varis A., Wolf M., Monni O., et al. Targets of Gene Amplification and Overexpression at 17q in Gastric Cancer // Cancer research. - 2002. - Vol. 62.-P. 2625-2629.

154. Vetsika E.K., Callan M. Infectious mononucleosis and Epstein-Barr virus //

Expert Rev Mol Med. - 2004. - Vol. 6. - P. 1-16.

121

155. Wagener F.A.D.T.G., Van Beurden H.E., Von den Hoff J.W. et al. The heme-heme oxygenase system: a molecular switch in wound healing // Blood/ - 2003. - Vol. 102. - P. 521-528.

156. Wagener F.A.D.T.G., Volk H.-D., Willis D. et al. Different faces of the heme-heme oxygenase system in inflammation // Pharmacological Reviews. - 2003. -Vol. 55.-P. 551-571.

157. Weiss H., Gutz H.J., Schroter J., et al. CDA distribution pattern in chronic gastritis. DNA ploidy and cell cycle distribution // Scsnd J Gastroenterol. -1989. - Vol. 24. - P. 643-648.

158. Weiss M.M., Kuipers E.J., Postma C., et al. Genomic alterations in primary gastric adenocarcinomas correlate with clinicopathological characteristics and survival // Cell Oncol. - 2004. - Vol. 26, № 5-6. - P.307-317.

159. Weiss M.M., Kuipers E.J., Postma C., et al. Genomic profiling of gastric cancer predict lymph node and survival // Oncogen. - 2003. - Vol. 22. - P. 1872-1879.

160. Weiss M.M., Snijders A.M., Kuipers E.J. et al. Determination of amplicon boundaries at 20ql3.2 in tissue samples of human gastric adenocarcinomas by high-resolution microarray comparative genomic hybridization // J. Pathol. 2003. - Vol. 200. - P. 320-326.

161.Wiech T., Nikolopoulos E., Lassman S., et al. Cyclin D1 expression is induced by viral BARF1 and is overexpressed in EBV-associated gastric cancer // Virchows Arch. - 2008. - Vol. 452. - P. 621-627.

162. Willenbucher R.F., Aust D.E., Chang C.G., et al. Genomic instability is an early event during the progression pathway of ulcerative-colitis-related neoplasia // Am J Pathol. - 1999. - Vol. 154. - P. 1825-1830.

163. Willenbucher R.F., Zelman S.J., Ferrel L.D., et al. Chromosomal alterations in ulcerative colitis-related neoplastic progression // Gastroenterology. -1997.-Vol. 113.-P. 791-801.

164. Wu C.W., Chen G.D., Fann C.S., et al. Clinical implications of chromosomal abnormalities in gastric adenocarcinomas // Genes Chromosomes Cancer. -2002.-Vol. 35.-P. 219-231.

165. Wu M.S., Chang M.C., Huang S.P., et al. Correlation of histologic subtypes and replication error phenotype with comparative genomic hybridization in gastric cancer // Genes Chromosome Cancer. - 2001. - Vol. 30. - P. 80-86.

166. Yanai H., Murakami T., Yoshiyama H., et al. Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma and atrophic gastritis // J Clin Gastroenterol. - 1999. - Vol. 29.-P. 39^13.

167. Yanai H., Takada K., Shimizu N., et al. Epstein-Barr virus infection in noncarcinomatous gastric epithelium // J Pathol. - 1997. - Vol. 183. - P. 293298.

168. Yao H.-Q., He S., Wu Y.-P., et al. Application of multicolor fluorescence in situ hybridization to early diagnosis of esophageal squamous cell carcinoma // Chinese Journal of Cancer . - 2008. - Vol. 27. - P. 396-401.

169. Yoshiwara E., Koriyama C., Akiba S., et al. Epstein-Barr virus-associated gastric carcinoma in Lima, Peru // J Exp Clin Cancer Res. - 2005. - Vol. 24. - P. 49-54.

170. Zha S., Yegnasubramanian V., Nelson W.G., et al. Cyclooxygenases in cancer: progress and perspective // Cancer Lett. - 2004. - Vol. 215. -P. 1-20.

171. Zhang D., Wang Z., Lou Y., et al. Analysis copy number aberrations by Multiple ligation-dependent probe amplification on 50 intestinal type gastric cancers // Journal of Surgical Oncology. - 2011. - Vol. 103. - P. 124-132.

172. Zheng H., Takahashi H., Murai Y., et al. Low expression of FHIT and PTEN correlates with malignancy of gastric carcinomas: tissue-array findings // Appl Immunohistochem Mol Morphol. - 2007. - Vol. 15. - P. 432^140.

173. Zheng-Hao D., Ji-Fang W., De-Sheng X., et al. Galectin-1 is up-regulated by RASSF1A gene in human gastric carcinoma cell line SGC7901// APMIS. -2012. - Vol. 120. - P. 582-590.

174. Zhu Y.Q., Zhu Z.G., Liu B.Y., et al. Chromosomal alterations analyzed by comparative genomic hybridization in primary gastric carcinoma // Zhonghua Wei Chang Wai Ke Za Zhi. - 2007. - Vol. 10. - P. 160-164.

175. zur Hausen A., Nicole C., van Griekent T., et al. Distinct Chromosomal Aberrations in Epstein-Barr Virus-carrying Gastric Carcinomas Tested by Comparative Genomic Hybridization // Gastroenterology. - 2001. - Vol. 121.-P. 612-618.

176. Zur Hausen A., van Rees B.P., van Beek J., et al. Epstein-Barr virus in gastric carcinomas and gastric stump carcinomas: a late event in gastric carcinogenesis // J Clin Pathol. - 2004. - Vol. 57. - P. 487-491.

Приложение 1. Клинико-морфологическая характеристика группы

пациентов с клиническим диагнозом хронический гастрит

№ Пол (м/ж) Возраст Гистологическое заключение

Степень морфологических изменений эпителия Степень выраженности хронического воспаления

1 ж 55 гиперплазия умеренное воспаление

2 ж 59 гиперплазия выраженное воспаление

3 м 52 гиперплазия, дисплазия I степени (ДО выраженное воспаление

4 м 29 гиперплазия, дисплазия I степени (Д1) выраженное воспаление

5 ж 51 эпителий без особенностей умеренное воспаление

6 м 46 эпителий без особенностей умеренное воспаление

7 ж 71 дисплазия II степени (ДП) умеренное воспаление

8 ж 75 гиперплазия умеренное воспаление

9 м 55 гиперплазия, дисплазия I степени (Д1) умеренное воспаление

10 м 59 дисплазия I-II степени (Д1-И) выраженное воспаление

11 м 32 эпителий без особенностей умеренное воспаление

12 ж 60 эпителий без особенностей слабое воспаление

13 м 66 гиперплазия, дисплазия I степени (ДО умеренное воспаление

14 ж 61 дисплазия III степени (ДШ) выраженное воспаление

15 ж 75 эпителий без особенностей слабое воспаление

16 ж 61 гиперплазия умеренное воспаление

Приложение 1. Окончание

17 ж 73 неполная кишечная метаплазия, дисплазия 2 степени (Д2) умеренное воспаление

18 ж 57 гиперплазия воспаление

19 ж 60 гиперплазия воспаление

20 ж 24 гиперплазия слабое воспаление

21 ж 72 эпителий без особенностей слабое воспаление

22 м 46 гиперплазия, дисплазия 1 степени (Д1) выраженное воспаление

23 ж 71 гиперплазия, дисплазия 1 степени (Д1) выраженное воспаление

24 ж 56 эпителий без особенностей умеренное воспаление

25 ж 45 дисплазия 1 степени (Д1), некроз эпителия умеренное воспаление

26 м 59 эпителий без особенностей умеренное воспаление

27 ж 33 эпителий без особенностей умеренное воспаление

28 ж 54 эпителий без особенностей слабое воспаление

29 ж 50 дисплазия 1 степени (Д1) слабое воспаление

Приложение 2. Характеристика группы пациентов с интестинальным

типом рака желудка

№ Пол Возраст Гистологическое заключение по опухолевому материалу Характеристи-ка опухоли (по ТОМ) Гистологическое заключение по материалу из очага воспаления

Т N М

1 ж 78 умереннодифференц ированная аденокарцинома с прорастанием до серозы (нет данных) хронический гастрит; умеренная лимфоидная и лейкоцитарная инфильтрация в слизистом и подслизистом слоях

2 м 50 умереннодифференц ированная и недифференцирован ная аденокарцинома с прорастанием мышечного слоя до серозного (нет данных) хроническое воспаление с выраженной лимфоидной инфильтрацией

3 ж 64 аденокарцинома с участками умеренной дифференцировки с прорастанием до середины мышечного слоя 2 0 0 хроническое воспаление, регенераторные изменения эпителиальных желез

4 м 62 умереннодифференц ированная аденокарцинома желудка с прорастанием (нет данных) выраженная воспалительная инфильтрация в слизистом и подслизистых слоях