Антигенная характеристика культивируемых IN VITRO лимфоидных клеток приматов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Медведева, Наиля Михайловна

• Медведева, Наиля Михайловна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Медведева, Наиля Михайловна

Введение.

Часть I. Обзор литературы

Глава 1. Лимфоидные культуры клеток - как модель в медико-биологических исследованиях.

1.1. Лимфоидные культуры клеток человека.

1.2. Лимфоидные культуры клеток обезьян.

1.3. Лимфоидные культуры клеток, инфицированные двумя вирусами разной тропности.

Глава 2. Дифференцировочнозначимые лимфоцитарные маркеры, выявляемые моноклональными антителами.

Глава 3. Выявление маркеров лимфоидных клеток различными методами (достоинства и недостатки).

Часть II. Собственные исследования.

Глава 1. Материалы и методы исследования.

1.1. Материалы.

1.1.1. Лимфоидные культуры клеток обезьян.

1.1.2. Панель моноклональных антител.

1.1.3. Праймеры к участкам ДНК вирусов HVP и STLV-1.

1.2. Методы.

1.2.1. Культивирование лимфоидных культур клеток.

1.2.2. Криоконсервация и деконсервация культур клеток.

1.2.3. Непрямой иммунопероксидазный тест с применением пероксидаза-антипероксидазного комплекса на фиксированных ацетоном и глутаровым альдегидом клетках.

1.2.4. Метод проточной цитофлуориметрии.

1.2.5. ПЦР анализ

1.2.6. Статистическая обработка.

Результаты исследования.

Глава 2. Лимфоидные культуры клеток и их биологическая характеристика.

Глава 3. Иммунологическая характеристика лимфоидных культур клеток приматов.

3.1. Фенотипическая характеристика павианьих лимфоидных культур клеток, фиксированных ацетоном и глутаровым альдегидом, при использовании метода непрямой иммуноферментной реакции.

3.2. Фенотипическая характеристика павианьих лимфоидных культур клеток, полученная на проточном цитофлуориметре.

3.3. Фенотипическая характеристика макаковых лимфоидных культур клеток, фиксированных ацетоном и глутаровым альдегидом, в непрямом 56 иммуноферментном тесте.

3.4. Иммунологические параметры клеток макаковых лимфоидных культур, полученные при проточной цитофлуориметрии.

3.5. Иммунофенотип лимфоидной культуры клеток зеленой мартышки при иммунофенотипировании непрямым иммуноферментным методом.

3.6. Характеристика иммунофенотипа лимфоидной культуры клеток зеленой мартышки при проточной цитофлуориметрии.

3.7. Иммунологические принципы классификации лимфоидных культур клеток приматов.

Глава 4. Сравнение различных методов иммунофенотипирования.

Глава 5. Результаты молекулярно-биологического исследования клеток лимфоидных культур приматов.

Обсуждение.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Антигенная характеристика культивируемых IN VITRO лимфоидных клеток приматов»

Актуальность проблемы.

В экспериментальной медицине и биологии постоянно появляются все новые аспекты использования культур клеток в различных областях исследований, от клеточной и молекулярной биологии до быстро прогрессирующих прикладных областей биотехнологической промышленности и медицинской практики.

Актуальность исследования связана также с тем, что лимфоидные культуры клеток являются источником для получения и накопления лимфотропных вирусов, исследования иммунологических аспектов клеточной биологии, проведения филогенетических исследований, а также механизмов клеточной трансформации, скрининга и производства моноклональных антител, генно-инженерных противовирусных вакцин и других медикаментозных средств и т.д. Для решения этих задач в нашей стране, по примеру с Американской и Европейской коллекциями, была создана Межрегиональная общественная организация «Ассоциация специалистов по клеточным культурам» ["Клеточные культуры" Информационный бюллетень, вып. 16, С Петербург, 2001]. Установление (выведение) новых культур и их полная характеристика необходимы для корректной оценки получаемых результатов. Существует насущная необходимость анализа и сертификации используемого клеточного материала с применением надежных критериев для оценки их чистоты, стабильности и аутентичности. Одним из таких критериев является иммунофенотипическая и вирусологическая характеристика культивируемых лимфоидных клеток.

Известно, что обезьяны являются адекватной моделью для изучения патологических состояний человека [Лапин Б.А. и др., 1979; 1986]. Поскольку эксперименты на обезьянах в настоящее время по многим причинам (дороговизна, исчезновение многих видов обезьян из мест естественного обитания, запреты законодательствами многих стран на экспорт обезьян и т.д.) недоступны, эксперименты на культурах обезьяньих клеток приобретают большое значение.

В литературе большое число работ посвящено изучению лимфоидных линий человека и обезьян. Сообщения об иммунологических исследованиях клеток этих культур малочисленны [Nilsson, 1979; Lestou V.S. et al., 1993; Daibata M. et al., 1996; Инджия Л.В. и др., 1986; Агрба В.З. и др., 2001]. Поэтому изучение иммунологических особенностей лимфоидных клеточных линий приматов различного видового и тканевого происхождения восполняет этот пробел и является актуальным.

Работа по формированию банка лимфоидных культур клеток обезьян началась в Научно-исследовательском институте экспериментальной патологии и терапии АМН СССР и явилась фрагментом большого исследования по изучению вирусной этиологии лейкозов/лимфом человека в модельных опытах на обезьянах, проводимого под руководством академика Лапина Б.А. и профессора Яковлевой Л.А. [Лапин Б.А. и др. 1979]. Клетки выведенных культур были криоконсервированы и хранились в жидком азоте длительное время.

В настоящее время в Государственном Учреждении Научно-исследовательском институте медицинской приматологии РАМН имеется коллекция лимфоидных культур клеток приматов, выведенных как от больных злокачественной лимфомой животных, так и клинически здоровых, продуцирующих различные типы лимфотропных вирусов приматов. Биологические, цитогенетические и другие их характеристики изучены подробно, а иммунологические частично из-за ограниченного набора МКАТ и методических приемов, существовавших в период их становления. Эти пробелы восполняются настоящим исследованием.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Иммунофенотипическая характеристика культивируемых лимфоидных клеток низших обезьян с использованием широкой панели моноклональных антител к дифференцировочным антигенам В- и Т-лимфоцитов человека.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1. Определить иммунофенотипические характеристики клеток лимфоидных культур низших обезьян, используя широкий спектр моноклональных антител.

2. Доказать стабильность клеточного состава в постоянных перевиваемых лимфоидных линиях при помощи иммунологических методов.

3. Провести сравнительный анализ моноклональных антител к дифференцировочным лейкоцитарным антигенам человека, на культивируемых in vitro лимфоидных клетках приматов разных видов.

4. Подобрать оптимальный (доступный, не требующий дорогостоящего оборудования) метод иммунофенотипирования клеток в культуре.

5. Классифицировать лимфоидные культуры клеток приматов, используя иммунологический критерий.

6. Определить с помощью полимеразной цепной реакции в клетках лимфоидных культур обезьян наличие лимфотропных вирусов приматов.

Основные разделы работы выполнены самостоятельно, но ряд отдельных вопросов был изучен совместно с другими исследователями. В частности, культивирование и дальнейшее поддержание лимфоидных культур клеток приматов, изучение биологических характеристик лимфоидных клеток в культуре, молекулярно-биологическое изучение вирусов, реплицирующихся в культурах клеток приматов, было проведено в лаборатории иммунологии и онковирусологии Государственного Учреждения Научно-исследовательского института медицинской приматологии РАМН (зав. д.м.н. В.З. Агрба), цитофлуориметрический анализ образцов культур на проточном цитофлуориметре был выполнен в институте Экспериментальной Диагностики и Терапии Опухолей РОНЦ, в г. Москве под руководством к.м.н. Е.Р. Полосухиной.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА.

В результате проведенных исследований получены иммунологические характеристики 11 лимфоидных культур клеток приматов разных видов. Подтверждена иммунофенотипическая стабильность культивируемых клеток этих линий. Моноклональные антитела к дифференцировочным лейкоцитарным антигенам человека перекрестно реагируют не только с нормальными мононуклеарами периферической крови обезьян, но и с клетками постоянных лимфоидных культур приматов.

Применение современных методов (иммунопероксидазный тест и проточная цитофлуориметрия) позволило получить подробные иммунологические показатели для лимфоидных клеток низших приматов в культуре, что дало возможность дополнить биологические характеристики культур клеток и легло в основу их классификации по принципу иммунологической принадлежности. Полученные данные позволили среди примененных практических тестов отобрать наиболее адекватный: метод проточной цитофлуориметрии.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ:

1) паспорт клеточной линии, утвержденный к VII Совещанию Комиссии по клеточным культурам, может быть дополнен 29-м пунктом (если речь идет о лимфоидных культурах) в формулировке «иммунофенотип клеток»;

2) для исследований рекомендуется иммуноферментный метод, как наиболее доступный, не требующий специального дорогостоящего оборудования;

3) охарактеризованные культуры клеток являются адекватной, доступной, стабильной моделью для широкого круга медико-биологических исследований.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ:

1. Клетки лимфоидных культур обезьян экспрессируют большинство поверхностных антигенов, распознаваемых моноклональными антителами против лейкоцитарных дифференцировочных антигенов человека.

2. В процессе длительного культивирования фенотип клеток не изменяется.

3. Примененные методы исследования являются адекватными и информативными.

4. Клетки культур продуцируют один или два типа лимфотропных вирусов.

Часть I. Обзор литературы.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Медведева, Наиля Михайловна

выводы.

1. Обнаружена экспрессия антигенов различной клеточной специфичности на одних и тех же клетках лимфоидных культур приматов.

2. Стабильность иммунофенотипа клеток лимфоидных культур, сохраняется после их длительной криоконсервации.

3. Моноклональные антитела к дифференцировочным антигенам человека выявляют специфические маркеры В- и Т-клеток культивируемых in vitro низших обезьян разных видов (павиана гамадрила, макака бурого, зеленой мартышки).

4. Наиболее информативным методом исследования является проточная цитофлуориметрия, а доступным и недорогим и не менее адекватным - иммуноферментный анализ.

5. Иммунологический критерий классификации лимфоидных культур клеток, основанный на экспрессии антигенов В- и Т-клеточной специфичности, позволяет разделить изученные культуры на три основных типа.

6. Выявлены смешанноклеточные культуры, содержащие одновременно элементы В- и Т-клеточной принадлежности.

7. Доказана связь между иммунофенотипом лимфоидных клеток, культивируемых in vitro, и типом лимфотропных вирусов их инфицирующих.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Медведева, Наиля Михайловна, 2003 год

1. Агрба В.З., Яковлева Л.А., Сангулия Б.А. Получение и изучение долгоживущих вируспродуцирующих культур из кроветворных органов больных лейкозом обезьян. //Вирусы рака и лейкоза., М., 1974, с.83-85.

2. Агрба В.З., Яковлева Л.А., Лапин Б.А., Лебедев В.Н., Григорьев

3. Агрба В.З., Онищук Ф.Д., Бубеник Я., Роубалова К, Тимановская

4. B.В. Подходы к классификации лимфоидных суспензионных линий клеток павианов гамадрилов. //В кн: Злокачественные лимфомы и ассоциированные с ними лдимфотропные вирусы, Дагомыс, 1984, Москва, 1986, с.145-148.

5. Агрба В.З., Тимановская В.В., Новожилов С.В. Получение и характеристика постоянных суспензионных культур клеток приматов. //Цитология, 1987 (2), т.34, с.44.

6. Агрба В.З., Тимановская В.В. Методы получения и культивирования лимфоидных суспензионных линий клеток приматов.// В кн.: методы культивирования клеток. Л., Наука., 1988, с. 299-309.

7. Аравиашвили Д.Э., Агрба В.З., Тимановская В.В., Цвиленева Н.Н., Мамаева С.Е. Цитогенетическая характеристика В-лимфоидных линий павианов гамадрилов (Papio hamadryas) имакаков бурых (Масаса arctoides). //Цитология., 1994, т.36, №7, с.701-707.

8. Барышников А.Ю., Кадагидзе З.Г., Махонова Л.А., Тупицин Н.Н. Иммунологический фенотип лейкозной клетки. //М. Медицина, 1989, с.9-52.

9. Васильева В.А., Лапин Б.А., Яковлева Л.А., Иванов М.Т., Маркарян Д.С., Быковский А.Ф., Сангулия Б.А. Получение перевиваемой линии из культуры лейкоцитов павиана гамадрила с лейкозом ретикулезом.// Вопросы вирусологии., 1971, №3, с.312-316.

10. Гурцевич В.Э Герпесвирусы: вирус Эпштейна-Барр. //В кн. Канцерогенез. Под ред. Д.Г. Заридзе, М. «Научный мир», 2000, с. 193-205(1).

11. Гурцевич В.Э Ретровирусы: вирус Т-клеточного лейкоза человека. //В кн. Канцерогенез. Под ред. Д.Г. Заридзе, М. «Научный мир», 2000, с. 218-226 (2).

12. Инджия Л.В., Яковлева Л.А., Чикобава М.Г., Валентайн М., Лапин Б.А., Кларк Э. Неходжкинские злокачественные лимфомы в отрядеприматов (принципы иммунодиагностики Т-клеточных лимфом). //Вестник АМН СССР, 1990, №9, с.21-27.

13. Каминский Л.С. Статистическая обработка лабораторных и клинических данных. Ленинград «Медицина», 1964, с.43-45.

14. Лапин Б.А., Кокоша Л.В., Агрба В.З. Иммунологическое изучение суспензионных культур, полученных из клеток кроветворных органов больных лимфомой павианов. // Вопр.Вир., 1976, № 2, с.141-145.

15. Лапин Б.А., Яковлева Л.А., Агрба В.З., Инджия Л.В., Воеводин А.Ф. Гемобластозы приматов и роль вирусов в их возникновении.// М. Медицина, 1979, 168 с.

16. Пол У. Иммунная система //В кн. Иммунология., 1989, т.1, гл. 1, с. 14-45.

17. Ройт А. Основы иммунологии. 1989, с. 28-50.

18. Скорикова А.С., Скуркович С.В., Булычева В.Э. Получение перививаемых линий клеток из лейкоцитарной взвеси крови больных острым лейкозом.// Пробл. гематол. и перилив. крови. 1975, №2, с.49-53.

19. Тимановская В.В., Воеводин А.Ф., Яковлева Л.А., Маркарян Д.С., Иванов М.Т. Злокачественные лимфомы у кроликов, вызванные введением материала, содержащего вирус герпеса бурых макаков. //Экспер.онкол., 1988, т. 10, с.47-51.

20. Чикобава М.Г., Шатцель Г., Яковлева Л.А., и др. Новый вариант обезьяньего Т- лимфотропного ретровируса первого типа (STLV-1F) в Сухумской колонии павианов гамадрилов.// Вопросы вирусологии, 1993,№6, с. 249- 253.

21. Чикобава М.Г., Яковлева Л.А., Инджия Л.В., Шатцель Г., Лапин Б.А. Обнаружение интеграции STLV-1 в ДНК, экстрагированной из формалин фиксированных и заключенных в парафин материалов лимфом М. arctoides в PCR.// БЭБИМ, 1995, №8, с. .

22. Яковлева Л.А., Агрба В.З, Букаева И.А. и др., Характеристика аутологичных лимфобластоидных культур, полученных из клеток обезьян и людей, больных гемобластозом.// В кн.: Моделирование патологических состояний человека., М, 1977, т.1, с.5-14.

23. Яковлева Л.С., Павлиш О.А., Тупицин Н.Н., Гурцевич В.Э. Варианты Т-клеточного лейкоза человека (HTLV-1) с В-кпетками лимфобластоидных линий. // Вопр. Вир., 1992, т.37, №5-6, с 232235.

24. Яковлева Л.С., Павлиш О.А. Особенности репродукции вируса Т-клеточного лейкоза взрослых в В-клеточных линиях и его взаимодействие с герпесвирусом Эпштейна-Барр. //Вопр.Вир., 1997, №2, с.77-81.

25. Agrba V.Z., Timanovskaya V.V., Kakubava V.V., Indzhiia L.V., Araviashvili D.E., Chikobava M.G. Establishment and characteristics of an interleukin-2-dependent STLV-1 producing lymphoid cell line SPH-7

26. T) obtained from Papio hamadryas with malignant lymphoma.// In vitro Cell Dev. Biol., 1994, Oct., 30A(10). p. 637-639.

27. Ambinder R.F. Human lumphotropic viruses associated with lymphoid malignancy: Epstein-Barr and HTLV-1. //Hematology/oncology Clinics of North America, 1990, v.4, N 4, p.821-833.

28. Aune T.M. and Pogue S.L., Generation and characterization of continuous lines of CD8+ suppressor T lymphocytes. //The Jornal of Immunology, 1989, v.142, N 11, p.3731-3739.

29. Axberg I., Gale M.J., Afar B. and Clark E.A. Characterization of T-cell subsets and T-cell receptor subgroups in Pigtailed Macaques using two-and three-color flow cytometry. //J. of Clin. Immunol., 1991, v.11, N 4, p.1-12.

30. Benini V., Niaudet P., Kaplan C., Broyer M., Monteiro R.C. Detection of antilineage specific leucocyte antibodies by a qantitative immunocytometry method in sera from candidates for renal allografts. //Transpl. Immunol., 1995, v.3, N 4, p.356-362.

31. Biguet C., Wakasugi N., Wakasugi H., Tursz T. Role of ADF/thioredoxin in signal transduction mechanisms: involvement in cellular proliferation (meeting abstract). //Proc Annu Meet Am Assoc Cancer Res, 1992, v.33, A2090

32. Bobbit K.R. and Justment L.B. Regulation of MHC class II signal transduction by the В cell coreceptor CD19 and CD22. //The Jornal of Immunology, 2000, v. 165, p.5588-5596.

33. Boesen A.M. and Hokland P. Ultrastructural of normal human blood T lymphocyte subsets isolated by cell sorting using monoclonal antibodies. /Л/irchovs Arch. (Cell Pathol.), 1982, v.41, p.107-117.

34. Boumpas D.T., Hooks J.J., Popovic M., Tsokos G.C., Mann D.L. Human T-cell leukemia/lymphoma virus I and/or Epstein-Barr virus -infected B-cell lines spontaneously produce acide-labile alpha-interferon. //J.Clin Immunol., 1985, v.5, N 5, p.340-344.

35. Buisson M., Morand P., Genoulaz O., Bourgeat M.J., Micoud M., Seigneurin J.M. Changes in the dominant Epstein-Barr virus type during human immunodeficiency virus infection. Leuk Lymphoma 1994 Nov; 15(5-6):389-97

36. Carmo A.M., Castro M.A. and Arosa F.A., CD2 and CD3 associate independently with CD5 and differentially regulate signaling through CD5 in Jurkat T cells. //The Jornal of Immunology, 1999, v. 163, p.4238-4245.

37. Chang R.S., Haleh M.W., Blankenship W. Initiation and establishment of lymphoid cell lines from blood of healthy persons. //J. Natl. Cancer. Inst., 1971, v.47, p.469-477.

38. Chen B.P., Lam V., Kraus E.E. Restriction of Epstein-Barr virus-specific cytotoxic T cell by HLA-A, -B, and -C molecules. Hum immunol, 1989, N26(2), p137-147.

39. Clark E.A. Activation and regulatory signals in human T- and B-lymphocytes. //Leucocyte Typing IV. Oxford, 1990, ch.9, p. 1054-1057.

40. Clark E.A., Martin P.J., Hansen J.A. and Ledbetter J.A. Evolution of epitopes on human and nonhuman primate lymphocyte cell surface antigens. //Immunogenetics, 1983, v.18, p.599-615.

41. Clarke M.F., Mann D.L., Murray C., Reitz M.S. Differential methylation of class I histocompatibility antigen genes in T-cell lines derived from two different types of T-cell malignancies. //Leukemia Research, 1984, v.8, N 6, p.965-973.

42. Connolly J.H., Canfield P.J., Hemsley S., Spenser A.J. Lymphoid neoplasia in the koala. //Aust. Vet. J., 1998, v.76, N 12, p.819-825.

43. Conti C., Cirone M., Sgro R.t Altieri F., Zompetta C., Faggioni A. Early interactions of human herpesvirus 6 with lymphoid cells: role of membrane protein components and glycosaminoglycans in virus binding. //J. Med. Virol., 2000, v.62, N 4, p.487-497.

44. Daibata M., Kubonishi I., Mioshi I. Differential tumorogenicity between Epstein-Barr virus genome-positive and genome-negative cell lines with t(11;14)(q13;q32) derived from mantle cell. //Jornal of Virology, 1996, v.70, N 12, p.9003-9007.

45. De The G., Ho J.H.C., Muir C. Nasopharingeal Carcinoma in viral infection of humans. //Plenum Medical Book Co., NY-London, 1975, p. 539-563.

46. Daibata M.t Taguchi Т., Kubonishi I. Lymphoblastoid cell lines with integrated human herpesvirus type 6. //J. Hum. Virol., 1998, v.1, N 7, p.475-481.

47. Drexler H.G., Matsuo Y. Malignant hematopoietic cell lines: in vitro models for the study of natural killer cell leukemia-lymphoma. //Leukemia, 2000, v. 14, N 5, p. 777-782.

48. Epstein M.A., Henle W., Achong B.G., Barr Y.M. Morphological and biological studies on virus in cultural lymphoblasts from Burkitt's lymphoma. //J. Exp. Med., 1965, v.121, p.761-770.

49. Evans A.S., Niederman J.S., McCollum R.W. Seroepidemiologic studies of infectious mononucleosis with EB virus. // New Engl. J. Med., 1968, v.279, p.1121-1127.

50. Fishwild D.M., Benike C.J., Engleman E.G. Activation of HLA-restricted EBV-specific cytotoxic T cells does not require CD4+ (helper) T cells or exogenous cytokines. //J.Immunol., 1988, v.140, N 6, p.1994-1998.

51. Francis C., Connelly M.C. Rapid single step method for flow cytometric detection of surface and intracellular antigens using whool blood. //Cytometry, 1996, v.25, N 1, p. 58-70.

52. Gadol N., Ault K.A. Phenotypic and functional characterization of human Leu1 (CD5) В cells. //Immunol. Rev., 1986, v.93, p.23-34.

53. Gessain A., Barin F.f Vernant J.C. Antibodies to human T-lymphotropic virus type-l in patients with tropical spastic paraparesis. -Lancet, 1985, 2, p. 407-410.

54. Handbook of Immunoperoxidase Staining Methods. DAKO Corporation, 1989.

55. Hattori Т., Uchiyama Т., Toibana Т., Takatsuki K., Uchino H. Surface phenotype of Japanese adult T-cell leukemia cells characterized by monoclonal antibodies. //Blood, 1981, 58, pp.645-647.

56. Hayami M., Ishikawa K., Komuro A., Kawamoto Y., Nozawa K., Yamamoto K., Ishida Т., Hinuma Y. ATLV antibody in cynomolgus monkey in the wild. -Lancet, 1983, v.I, p. 620- 624.

57. Hayami M., Komuro A., Ishikawa K. Natural existence of antibody to adult T- cell leukemia virus in nonhuman primates. //In: Leukemia reviews international. M.A. Rich (ed), M.Dekker, New York, Basel, 1983b, v.l, p.76-77.

58. Hinuma Y. and Grace J.T. Cloning of immunoglobulin-priducing human leukemic and lymphoma cells in long term cultures. //Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1967, v.124, p.107-111.

59. Homma Т., Kanki P.J., King N.W., Jr., Hunt R.D., О Connell M.J., Letvin N.L., Daniel M.D., Desrosiers R.C., Yang C.S., Essex M. Lymphoma in macaques; association with virus of human T lymphotropic family. //Science., 1984, v. 225, p.716-718.

60. Honda S., Takasaki Т., Okuno K., Yasutomi M., Kurane I. Establishment and characterization of Epstein-Barr virus-specific human CD4+ T lymphocyte clones. Acta Virol, 1998, v.4 2(5), p. 307-313.

61. Hsu S-M.and Raine L. Advances in immunohistochemistry. //in De Lellils R.A. (ed), NY, Masson, 1984, p.31-42.

62. Indjhiia L.V., Chepnian E.R. T- and B-cell panel reactivity on baboon normal lymfoid tissues and T-cell malignant lymphomas. //XV-th Congress of the Internal. Prim. Society, 1994, p. 198.

63. Ishida Т., Yamamoto K., Kaneko R., Tokita E., Hinuma Y. Seroepidemiological study of antibodies to adult Tcell leukemia virus associated antigen (ATLA) in free- ranging Japanese monkeys (Macaca fuscata). //Microbiol. Immunol., 1983, v.27, p.297-301.

64. Iwakata S., Grace S.T. Cultivating of in vitro of mieloblasts from human leukemia. //NY State J. med., 1964, v.64, p.2279-2282.

65. Jarrett R.F., Mitsuya H., Mann D.L., Cossman J., Broder S., Reitz M.S. Configuration and expression of the T cell receptor beta chain gene in human T-lymphotropic virus I infected cells. //J. Exp. Med., 1986, v.163, N2, p.383-399.

66. Johnstone A., Thorpe R. Immunochemistry in practice. 1988, p.30-92.

67. Juneja H.S., Rajaraman S., Ramsey K.M. and Elder F.B. Role of marrow stromal cells in the establishment of a transformedlymphoblastic B-cell line from a normal human subject, //leukemia Research. 1986, v. 10, N 10, p. 1209-1219.

68. Kane K.P., Champoux P. and Mescher M.F., Solid-phase binding of class I and II MHC proteins: immunoassay and T cell recognition. //Molecular Immunology, 1989, v.26, N 8, p.759-768.

69. Koizumi S., Sugiura M., Zhang X.K. Simultaneous expression of the T-cell and myeloid cell phenotypes in eight newly established HTLV-I-positive T-cell lines. //Jap. J. Cancer, 1992(1), v.83, N 9, p.929-932.

70. Koizumi S., Zhang X.K., Imai S. Infection of the HTLV-1-harboring T-lymphoblastoid line MT-2 by Epstein-Barr virus. Virology, 1992(2), v. 188, N 2, p.959-863

71. Kokosha L.V., Agrba V.Z., Lapin B.A. Continuous limphoblastoid suspension cultures from cells of haematopoetic organs of baboons with malignant lymphoma. Report 3: Exp. Path., 1977, Bd.13, p.247-254.

72. Komuro A., Watanabe Т., Miyoshi I., Hayami M., Tsujimoto H., Seiki, M., Yoshida, M. Detection and characterization of simian retroviruses homologous to human T cell leukemia virus type I. -Virology, 1984, 138, p. 373- 378.

73. Krensky A.M., Sanches-Madrid F., Robbins E. The functional significance distribution, and structure of LFA-1, LFA-2, and LFA-3: cell surface antigens associated with CTL-target interactions. // J. Immunol., 1983, v.131, p.611.

74. Lai L., Alaverdi N. Maltais L. and Morse H.C. III. Mouse cell surface antigens: nomenclature and immunofenotyping. // The Jornal of Immunology, 1998, v. 160, p.3861-3868.

75. Lam V., De Mars R., Chen B.P., Hank J.A., Kovats S., Fisch P. and Sondel P.M. Human T cell receptor-gamma delta-expressing T-cell lines recognize. 1990, v.145, N1, p.36-45.

76. Lapin B.A., Timanovskaya V.V. and Yakovleva L.A. Herpesvirus HVMA: a new representative in the group of the EBV-like B-lymphotropic herpesviruses of primates. //Hematology and Blood transfusion., 1985, v.29, p.312-313.

77. Larramendy M.L., Knuutila S. Immunophenotype and sister chromatide differentiation: a cjmbined methodology for analysing cell proliferation in unfractionated lymphocyte cultures. //Exp.Cell. Res., 1990, v.188, N2, p.209-213.

78. Laurent G., Gourdin M.F., Reyes F. Detection of surface immunoglobulins of human lymphoid cells: a comparative study of live and fixed cells using a direct immunoperoxdase procedure. //J. Clin. Pathol., 1982, v.35, N 2, p.139-143.

79. Lestou V.S., De Braekeller M., Strehe S., Otts G., Gadner H., Ambros P.F. Non-random integration of Epstein-Barr virus in lymphoblastoid cell lines. //Genes Chromosomes Cancer, 1993, v.8, N 1, p.38-48.

80. Lin J.C., Lin S.S., De B.K. Precision of genotyping of Epstain- Barr virus by PCR using ree gene loci (EBNA- 2, EBNA- 3C, and EBER): Predominance of type A virus associated with Hodgkin's disease. //Blood 1993; 81, p.3372.

81. Lin J.C., Lin S.C., Маг E.C. A strategy for precision of genotyping of Epstein-Barr virus by polymerase chain reaction: application for studying Hodgkin's lymphoma. //Leuk Lymphoma 1994, v. 15(5-6), p.389-97.

82. Lindstedt R., Monk N., Lombardi G. and Lechler R. Amino acid substitutions in the putative MHC class II "Dimer of Dimers" interface inhibit CD4+ T cell activation. // The Jornal of Immunology, 2001, v. 166, p.800-808.

83. Mackenzie L.E., Youinou P.Y., Hicks R., Yuksel В., Mageed R.A., Lydyard P.M. Auto- and polyreactivity of IgM from CD5+ and CD5- cord blood В cells. //Scand. J. Immunol. 1991, v.33, N 3, p.329-335.

84. Maecker H.T., Maino V.C., Picker L.J. Immunofluorescence analysis of T-cell responses in health and disease. // J. Clin. Immunol., 2000, v.20, N 6, p.391-399.

85. Maino V.C., Suni M.A., Ruitenberg J.J. Rapid flow cytometric method for measuring lymphocyte subset activation. //Cytometry, 1995, v.20, N 2, p. 127-133.

86. Meuer S.C. Cluster report: CD2. //T-cell antigens -papers. 1989, p.270-283.

87. Miyoshi I., Ohtsuki Y., Fujishita M., Yoshimoto S., Kubonishi I., Minezawa M. Detection of type С virus particles in Japanese monkeysseropositive to adult T-cell leukemia-associated antigens. -Gann, 1982(a), v.73, p.848- 849.

88. Miyoshi I., Taguchi H., Fujishita M, Yoshimoto S., Kubonishi I., Ohtsuki Y., Shiraishi Y. and Akagi T. Transformation of monkey lymphocytes with adult T-cell leukemia virus. //-Lancet, 1982, v.1, p.1016-1017.

89. Moebius U. Cluster report: CD4. //T-cell antigens papers, 1989, p.314-330.

90. Montecino-Rodrigues E., Dorshkind K. Long-term culture of triple-negative thymocytes. //J.lmmunol., 1996, v.156, N 3, p.957-962.

91. Moore G.E., Gerner R.E., Franklin R.E. Culture of normal leucocytes. //J. Am. Med. Assoc., 1967, v.199, p.519-524.

92. Moore G.E., Grace J.T., Citron P. Leukocyte cultures of patients with leukemia and lymphomas. //NY State J. Med., 1966, v.66, p.2757-2764.

93. Moretta A., Pantaleo G., Mingari M.C., Moretta L., Cerottini J.C. Clonal heterogeneity in the requirement for ТЗ, T4, and T8 molecules in human cytolytic T lymphocyte function. //J. Exp. Med., 1984, v. 159, N 3, p.921-934.

94. Morgan D.A., Ruscetti F.W., Gallo R.C. Selective in vitro growth of T-lymphocytes from normal human bone marrow. //Science, 1976, v. 193, p. 1007-1008.

95. Murayama Y., Katashi F., Atsuo N. Epitope expression on primate surface antigens. //J. Med. Primatol., 1986, v.15, p. 215-226.

96. Naish S.J. Immunological Staining Method. California, 1989, p.40.

97. Neubauer R.H., Briggs C.J., Noer K.B. and Rabin H. Identification of normal and transformed lymphocyte subset of nonhuman primates with monoclonal antibodies to human lymphocytes. // The Jornal of Immunology, 1983, v. 130, N 3, p. 1323-1329.

98. Newell D.G., Bohane C., Payne S., Smith J.L. The intracellular localisationof immunoglobulins in human lymphoid cells andhaematopoietic cell lines by immunoperoxidase electron microscopy. // J.Immunol. Methods, 1980, v.37, N 3-4, p.275-286.

99. Nilsson K, Klein G., Henle W. The establishment of lymphoblastoid lines from adult and fetal human tissue and its dependense on EBV. //Int. J. Cancer, 1971, v.8, p.443-450.

100. Nilsson K., The nature of lymphoid cell lines and their relationship to the virus. // The Epstein-Barr virus., 1979, p.225-281.

101. Oertel J., Oertel В., Schleicher J., Huhn D. Detection of small numbers of immature cells in the blood of healthy subjects. //J. Clin Pathol., 1998, v.51, N 12, p.886-890.

102. Okada M., Koyanang Y., Kobayashi N., Tonaka Y., Nakai M., Sano K., Takeuchi K., Hinuma Y., Hatanaka M., Yamamoto N. In vitro infection of human В lymphocytes with Adult T-cell Leukemia virus. //Cancer letters, 1984, v.22, p. 11-21

103. Pacheco-Castro A., Alvarez-Zapata D., Serrano-Torres P. and Regueiro J.R. Signaling through a CD3y-deficient TCR/CD3 complex in immortalized mature CD4+ and CD8+ T lymphocytes. // The Jornal of Immunology, 1998,v.161, p.3152-3160.

104. Репа-Rossi C., Zuckerman L.A., Strong J., Kwan J., Ferris W., Chan S., Tarakhovsky A., Beyers A.D. and Killeen N. Negative regulation of CD4 lineage development and responses by CD5. // The Jornal of Immunology, 1999, v. 163, p.6494-6501.

105. Pittaluga S., Raffeld M., Lipford E.H., Cossman J. 3A1 (CD7) expression precedes T beta gene rearrangements in precursor T (lymphoblastic) neoplasms. //Blood., 1986, v.68, p.134-139.

106. Plotnicky H., Touraine J.L. Recognition of Epstein-Barr virus (EBV)-infected cells by T cell colonies from a human chimera: restriction by allogeneic determinants. //Clin Exp Immunol, 1993, v. 94(3), p. 494-499

107. Poiesz B.J., Ruscetti F.W., Reitz M.S., Kalyanaraman V.S., Gallo R.C. Isolation of a new type С retrovirus (HTLV-1) in primary uncultured cells of a patient with Sezary T cell leukemia. -Nature (Lond.), 1981, v.294, p.268-271.

108. Popovic M, Sarin P.S., Robert-Guroff M., Kalyanaraman V.S., Mann D., Minovada J., Gallo R.C. Isolation and transmission of human retrovirus (Human T cell leukemia virus). //Science (Washington, D.C.), 1983, 219, p. 856-859

109. Procopio D.O., Barros H.C., Mortara R.A. Actin-rich structures formed during the invasion of cultured cells by infective forms of Trypanosoma crusi. //Eur. J. Cell. Biol., 1999, v.78, N 12, p.911-924.

110. Pulvertaft R.J.V. A study of malignant tumors in Nigeria by short term tissue culture. //J.Clin. Pathol., 1965, v. 18, p.261-273.

111. Pulvertaft R.J.V. Cytology of Burkitt's tumor (African lymphoma). //Lancet, 1964, v.1, p.238-240.

112. Purtilo D.T., Okano M., Grierson H.L. Immune deficiency as a risk factor in Epstein-Barr virus -induced malignant diseases. //Environ. Health. Perspect., 1990, v.88, p.225-230.

113. Purtilo D.T., Stevenson M. Lymphotropic viruses as etiologic agents of lymphoma. // Hematol. Jncol. Clin. North Am., 1991, v.5, N 5, p.901-923.

114. Purtilo D.T., Strobach R.S., Okano M., Davis J.R. Epstein-Barr virus-associated lymphoproliferative disorders. //Lab. Invest., 1992, v.67, N 1, p. 5-23.

115. Reina J., Ballesteros F., Munar M., Mari M., Subirats M. Evaluation of different clinical samples and ctll lines in the isolation of enterovirus in pediatric patients. //Enferm. Infecc. Microbiol. Clin., 2000, v. 18, N 3, p.116-119.

116. Reinherz E.L., Kung P.C., Coldstein G. Discrete stages of human intrathymic differentiation: Analysis of normal thymocytes and leukemic lymphoblasts of T lineage. // Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 1980, v.77, p. 1588-1592.

117. Reiter C. Cluster report: CD5. // T-cell antigens papers., 1989, p. 331-338.

118. Reitz M.R., Poiesz B.J., Ruscetti F. W., Gallo R.C. Characterization and distribution of nucleic acid sequences of a novel type С retrovirus isolated from neo- plastic human T lymphocytes. -Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1981, 78, p. 1887- 1891.

119. Rickinson A.B., Young L.S. and Rowe M.// J.Virol., 1987, v. 61, p. 1310- 1317.

120. Rivadeneira E.D., Ferrari M.G., Jarrett R.F., Armstrong A.A., Markham P., Birkebak Т., Takemoto S., Johnson-Delany C., Recon-Slattery J., Clark E.A., Franchini G. A novel Epstein-Barr virus-like virus,

121. HV(MNE), in a Macaca nemestrina with mycosis fungoides. //Blood, 1999, v.94, N 6, p.2090-2101.

122. Ruscetti F.W., Morgan D.A., Gallo R.C. Functional and morphological characterization of human T-cell continuously growth in vitro. //J.Immunol., 1977, v.119, p.131-138.

123. Salmon P., Mong M., Xiao-Jun Kang, Gado D. and Robey E. The role of CD8a' in the CD4 versus CD8 lineage choice. // The Jornal of Immunology, 1999, v.163, p.5312-5318.

124. Santos G.C., longatto-Filho A., de Carvalho L.V., Neves J.I., Alves A.C. Immunocytochemical study of malignant lymphoma in serous effusions. //Acta cytol., 2000, v.44, N 4, p.539-542.

125. Seiki M., Hattori S., Yoshida M. Human adult T-cell leukemia virus: Molecular cloning of the provirus DNA and the unique terminal structure.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1982, v.79, p.6899-6902.

126. Seiki M., Hottori S., Hirayama Y., Yoshida M. Human adult T-cell leukemia virus: Complite nucleotide sequence of the provirus genome integrated in leukemia cell DNA. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1983, v.80, p.3618-3622.

127. Sen J., Rosenberg N., Burakoff S.J. Expression and ontogeny of CD2 on murine В cells.//j.lmmunol., 1990., v. 144, N 8, p.2925-2930.

128. Sixbey, J.W., Shiriey. P., Chesney, P.J. et al.// Lancet 1989, v. II, p. 761-765.

129. Smith M.R., Greene C.W., Molecular biology of the type I human T-cell leukemia virus (HTLV-1) and adult T-cell leukemia. J. Clin. Invest., 1991, v.87, p. 761-766.

130. Sommerlund M., Pallesen G., Moller-Larsen A., Hansen H.J., Haahr S. Retrovirus-like particles in an Epstein-Barr virus-producing cell line derived from a patient with chronic progressive mielopathy. Acta Neurol Scand, 1993, v. 87(2), p.71-76.

131. Stevens H.P.J., Kwast Т., Timmermans A. Monoclonal antibodies for immunohistochemical labeling of immunocompetent cells in frozen sections of rhesus monkey tissues. //J.Med. Primatol., 1991, v.20, p.386-393.

132. Stuart F.A., Corbel M.J., Richardson C., Brewer R.A., Bradley R., Bridges A.W. Experimental Haemophilus somnus infection in pregnant cattle. //Br. Vet. J., 1990, v.146, N 1, p.57-67.

133. Sugihara A., Inaba M., Mori S.I., Taketani S., Adachi Y., Hisha H., Onaba K., Toki J., horio Т., Gershwin M.E., Ikehara S. Differentiation from thymic В cell progenitors to mature В cells in vitro. //Immunobiology., 2000, v. 201, N 5, p.515-526.

134. Sun Q., Burton R.L., Pollok K.E., Emanuel D.J., Lucas K.G. CD4+ Epstein-Barr virus-specific cytotoxic T-lymphocytes from human umbilical cord blood. Cell Immunol. 1999, N 1, v. 195(2), p.81-88

135. Tedder T.F. Cloning and structure of CD19, a member of the immunoglobulin superfamily. Use of transfected cells to examine the Workshope antibodies.// B-cell antigens papers., 1989, p.36-46.

136. Tokunaga M., Imai S., Vemura Y., Tokudome Т., Osato Т., Sato E. Epstein-Barr virus in adult T-cell leukemia/lymphoma. //Am. J. Pathol., 1993, v.143, N 5, p. 1263-1268.

137. Tollerud D.J., Brown L.M., Clark J.W., Neuland C.Y., Mann D.L., Pankiw-Trost L.K., Blattner W.A. Criopreservation and long-term liquid nitrogen storage of periferal blood mononuclear. //J. Clin. Lab. Anal., 1991, v.5, N4, p.255-261.

138. Tsoukas C.D. and Lambris J.D. //Eur. J. Immunol., 1988, v.18, p. 1299.

139. Verwer B.J., Terstappen L.W. Automatic lineage assignment of acute leukemias by flow cytometry. //Cytometry, 1993, v. 14, N 8, p. 862-875.

140. Watanabe Т., Seiki M., Hirayama Y., Yoshida M. Human T-cell leukemia virus tipe I is a member of the African subtipe of simian viruses (STLV-I).//Virology, 1986, v.148, p.385-388.

141. Winchester R.J., Fu S.M., Wernet P. Recognition by pregnancy serums of non-HLA allo-antigens selectively expressed on В lymphocytes. //J.Exp. Med., 1975, v. 141, p.924.

142. Wuttke N.J., Macardle P.J., Zola H. Blood group antibodies are made CD5+ and by CD5- В cells. //Immunol. Cell. Biol., 1997, v.75, N 5, p. 478-483.

143. Yagita H., Nakamura Т., Asakawa J., Matsuda H., Tansyo S., iigo Y.( Okumura K. CD2 expression in murine В cell lineage.// Int. Immunol., 1989, v.1, N1, p.94-98.

144. Yamamoto N., Okada M., Koyanagi Y., Kannagi M., Hinuma Y. Transformation of human leukocytes by cocultivation with an adult T cellleukemia virus producer cell line. //Science (Washington, D.C.), 1982, v.217, p.737-739.

145. Yokoshi Т., Holly R.D. and ClarkE.A. Epstein-Barr virus-activated В cell blasts, В lymphoblastoid cell lines and Burkitt's lymphomas. //J. immunol., 1982, v.128, N 2, p.823-827.

146. Yoshida M., Miyoshi I., Hinuma Y. Isolation and characterization of retrovirus from cell lines of human adult T cell leukemia and its implication in the disease. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1982, 79, p. 2031-2035.

147. Yoshida M., Osame M., Usuku K. Viruses detected in HTLV-1 associated myelopathy and adult T-cell leukemia are identical on DNA blotting. //Lancet, 1987, v.1, p. 1085-1086.

148. Yoshida M., Seiki M., Hattory S., Watanabe T. //In Human T- cell leukemia -lymphoma viruses. (Gallo R.C., et.al., (eds); Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor N.Y., 1984, p. 141 -148.

149. Ziegler В., Testa U., Condorelli G., Vitelli L., Valtieri M.t Peschle C. Unilineage hematopoietic differentiation in bulk and singl cell culture.//Stem Cells., 1998, v.16, N 1, p.51-73.

150. Zola H. Marcers of cell lineage, differentiation and activation.// J.Biol. Regul. Homeost. Agent, 2000, v.14, N 3, p.218-219.

151. Zola H. The expression of sub-population markers on В cells: a re-evaluation using high-sensitivity fluorescence flow cytometry. //Dis Markers, 1991, v.9, N 2, p.103-118.

152. Zola H. The surface antigens of human В lymphocytes. //Immunology Today, 1987, v.8, N 10, p.308-315.