Запасные белки семян подсолнечника: Гетерогенность, полиморфизм, генетический контроль тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, доктор биологических наук Анисимова, Ирина Николаевна

• Анисимова, Ирина Николаевна
• доктор биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации доктор биологических наук Анисимова, Ирина Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.&

Глава 1. ЗАПАСНЫЕ БЕЛКИ СЕМЯН КАК ОБЪЕКТ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

1.1. Молекулярная гетерогенность и полиморфизм белков семян двудольных растений.А

1.2. Молекулярно-генетическая организация и биохимические особенности альбуминов семян двудольных растений.2.6.

1.3. Запасные белки семян подсолнечника.Ш

1.4. Выводы.АЗ.

Глава 2. МЕТОДОЛОГИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Генетический анализ.

2.2. Общая характеристика материала. .40.

2.3. Методы идентификации и анализа признаков

2.3.1. Выделение белков.4.

2.3.2. Электрофоретический анализ.#7.

2.3.3. Иммунохимический анализ.

2.3.4. Обратнофазная высокоразрешающая жидкостная хроматография (НР-НРЬС).

Глава 3. ГЕТЕРОГЕННОСТЬ И ПОЛИМОРФИЗМ ГЕЛИАНТИНИНА

Глава 4. ГЕТЕРОГЕННОСТЬ И ПОЛИМОРФИЗМ 28 АЛЬБУМИНОВ

4.1. Состав и функциональные свойства 28 альбуминов подсолнечника.

4.2. Характеристика индивидуальных компонентов альбуминовой фракции.1.1 Я

4.3. Полиморфизм 28 альбуминов.

4.4. Полиморфизм богатых метионином компонентов альбуминовой фракции.1Я

4.5. Выводы.127.

Молекулярная гетерогенность белков семян подсолнечника.

Молекулярная гетерогенность гелиантинина.

Полиморфизм гелиантинина у однолетнего культурного подсолнечника Н.аппит (Н.аппит виЬхр.аппит).

Межвидовая изменчивость гелиантинина в роде НеИап1кт.$

Выводы.

Глава 5.

ГЕНЕТИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ БЕЛКОВ СЕМЯН ПОДСОЛНЕЧНИКА

5.1. Анализ наследования гелиантинина у межлинейных гибридов.{2.

5.2. Гипотеза генетической организации гелиантинина.!.ЬЯ

5.3. Анализ совместного наследование локусов гелиантинина и других признаков.

5.4. Анализ наследования гелиантинина и 2S альбуминов при отдалённых скрещиваниях в роде Helianthus.Ш

5.5. Гипотеза генетического контроля 2S альбуминов.(Ф

5.6. О некоторых общих закономерностях организации и изменчивости мультигенных семейств, кодирущих запасные белки семян.{7.2.

5.7. Выводы.{7.&

Глава 6. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ БЕЛКОВ СЕМЯН В ПРИКЛАДНОЙ БОТАНИКЕ, ГЕНЕТИКЕ И СЕЛЕКЦИИ ПОДСОЛНЕЧНИКА

6.1. Белки семян в геномном анализе рода Helianthus.i$.Q

6.2. IIS глобулин как серологический маркёр в изучении взаимосвязей в семействе Asteraceae.

6.3. Использование гелиантинина в качестве генетического маркёра в селекционно-генетических исследованиях подсолнечника.ШВ

6.4. Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Запасные белки семян подсолнечника: Гетерогенность, полиморфизм, генетический контроль»

i

Подсолнечник {Helianthus annum L.) - одна из важнейших масличных культур. Благодаря хорошей адаптации к различным климатическим условиям, подсолнечник культивируется даже в тех районах, которые непригодны для выращивания других масличных растений. Ежегодно в разных странах мира производится около 22 млн.т семян подсолнечника (Anderson 1992). Семена подсолнечника служат источником пищевого растительного масла, отличающегося высоким содержанием биологически активных ненасыщенных жирных кислот - олеиновой и линолевой. Масло подсолнечника имеет широкий спектр промышленного применения при производстве масел для светильников, стеарина, мыла, косметики, фармацевтических препаратов, эмульгаторов, смазочных веществ, связующих компонентов красок, лаков и полировочных материалов, пластика и полимеров, синтетической резины, составов для выделки кож и обработки шерсти, а также в качестве кормовых добавок (Пустовойт 1975, Friedt et al. 1994). Растительные масла и эфиры жирных кислот могут служить перспективными добавками, либо заменителями для дизельного топлива (Lühs and Friedt 1994).

Другими ценными продуктами, получаемыми при переработке семян подсолнечника на масло, являются жмых и шрот. Подсолнечный шрот отличается высоким содержанием белка и занимает по этому показателю третье место после арахисового жмыха и соевого шрота (Sabir and Sosulski 1973; Пустовойт 1975). Ценность подсолнечного шрота заключается в том, что содержащийся в нём белок имеет в своём составе (и в довольно значительных количествах) все незаменимые аминокислоты (Дублянская и Супрунова 1969). Содержание белковой фракции в семенах подсолнечника колеблется в пределах 25-40%, а у некоторых сортов достигает 47% (Чмелёва и др. 1981). По суммарному содержанию масла и белка в семенах подсолнечник лишь немного уступает клещевине, превосходя другие масличные культуры: лён масличный, • горчицу, сою, арахис, кунжут (Пустовойт 1975). Белки семени подсолнечника хорошо сбалансированы по аминокислотному составу. Их биологическая ценность по сумме незаменимых аминокислот составляет 53,6 - 63,5% в сравнении со стандартным белком ФАО (Чмёлева и др. 1981). Кроме того, белки подсолнечника выгодно отличаются от белков семян других масличных отсутствием аллергенных, антипитательных и токсических компонентов (Smith 1968). Поэтому они рассматриваются в качестве исключительно ценных источников пищевого и кормового белка (Gassman 1983; Sosulski 1984; Lusas 1985; Vaintraub and Lapteva 1996). Обогащенные белком изоляты и концентраты подсолнечника находят в последние десятилетия применение в различных областях пищевой промышленности Зайченко и др. 1984, Щербаков 1984, Артемьева 1985). Их основными компонентами являются белки глобулиновой природы. В семенах подсолнечника и других масличных растений была обнаружена богатая серосодержащими аминокислотами метионином и цистеином фракция низкомолекулярных водорастворимых белков - 2S альбуминов (Youle and Huang 1981). Установлено, что главный компонент альбуминовой фракции семян подсолнечника, белок SFA8, характеризуется исключительно высоким содержанием остатков метионина (16 мол%, Kortt and Caldwell 1990). Ген этого белка уже используется для генетической трансформации ряда растений с целью повышения содержания метионина в семенах и вегетативных органах (Kortt et al. 1991). Таким образом, белки семян подсолнечника могут служить как объектом селекции, так и источником ценных признаков для генетических модификаций других сельскохозяйственных культур.

Несмотря на то, что физико-химические и функциональные свойства белков и белковых изолятов семян подсолнечника исследовались весьма интенсивно (Тюрина и Клименко 1978, Артемьева 1985, Parrado et al. 1993, Veintkesh and Prokash 1993), сведения о составе и свойствах главных запасных белков семени подсолнечника немногочисленны й ограничиваются в основном его глобулиновой фракцией. Это объясняется прежде всего тем, что до недавнего времени альбумины рассматривались как метаболические и, следовательно, высокоизменчивые белки. Кроме того, альбумины имеют , небольшой молекулярный вес, с чем связаны определенные методические трудности при их выделении и анализе. Между тем альбумины составляют весьма значительную в процентном отношении фракцию семени подсолнечника. По сравнению с глобулинами, они содержат больше незаменимых аминокислот (лизина, метионина) и играют вполне определенную, хотя и не изученную роль в накоплении масла (Бородулина и Супрунова 1978, Kabbaj and Berville 1997). Отсутствует в литературе и информация о генетическом полиморфизме запасных белков подсолнечника. В этой связи изучение состава и изменчивости белков семян рассматривается как одно из актуальных направлений исследований в области генетики физиологических и биохимических признаков подсолнечника на ближайшие годы (Materials FAO Meeting 1995).

Ещё одной причиной выбора белков в качестве объекта исследования явилась необходимость поиска эффективных маркёрных признаков для решения актуальных проблем прикладной ботаники, генетики и селекции подсолнечника. Среди них - выяснение филогенетических взаимоотношений в роде Helianthus. Дикорастущие виды рода Helianthus адаптированы к различным условиям обитания и обладают значительной изменчивостью большинства хозяйственных и агрономических признаков, ценным биохимическим составом семян, а также устойчивостью к болезням и вредителям (Seiler 1992). В то же время генетическая основа современных сортов в большинстве своём ограничена; в последние десятилетия это значительно осложнило возможности распространения культуры подсолнечника в мире (Анащенко 1979; Arnaud 1986). Так, например, многие возделываемые сорта оказались чувствительными к грибным заболеваниям, что обусловило необходимость передачи признаков устойчивости от дикорастущих видов в геном культурного подсолнечника. При производстве семян коммерческих гибридов подсолнечника используется один и тот же источник цитоплазматической мужской стерильности, полученный Леклерком, cms petiolaris (Leclerq 1969), в связи с чем большинство используемых в мире гибридов имеют идентичную цитоплазму и являются близкородственными. Межвидовая гибридизация может служить одним из способов расширения основ цитоплазматической мужской стерильности. (Whelan 1980,1981; Anashchenko 1981; Heiser 1982; Christov 1996). Однако сообщения об успешных межвидовых скрещиваниях культурного подсолнечника с дикорастущими видами немногочисленны и объясняется это низкой совместимостью многих видов рода Helianthus, особенно многолетних и однолетних. Для выяснения причин репродуктивной изоляции и прогнозирования результатов скрещиваний при отдаленной гибридизации важное значение имеет оценка степени родства видов Helianthus. Рядом авторов предпринимались попытки использования в качестве хемотаксономических признаков веществ вторичного происхождения. В частности, у сложноцветных для этих целей использовались флавоноиды (Seeligmann 1996), алканы воска листьев (Maffei 1996), лактоны (Spring and Buschmann 1996), антоцианы и фитоалексины (Harborne 1996). Однако полиморфные системы запасных белков семян, успешно зарекомендовавшие себя в качестве молекулярно-генетических маркеров у различных видов растений (Конарев 1983), пока еще не нашли применения в семействе Asteraceae. Предпосылкой настоящего исследования послужила работа А.В.Анащенко и И.П.Гаврилюк (1979), в которой впервые были охарактеризованы иммунохимические свойства белков семян различных видов рода Helianthus и показана принципиальная возможность использования сравнительного анализа белков для выяснения родственных взаимосвязей между видами подсолнечника.

Другой актуальной проблемой, стимулировавшей поиск генетических маркеров среди запасных белков семян, явилась проблема межлинейной гибридизации в селекции подсолнечника на гетерозис. В связи с возрастанием числа инбредных линий, используемых в селекционных программах, перед селекционерами встала задача поиска точных и надежных критериев оценки генетической чистоты родительских линий и определения полноты гибридизации. В последние годы у ряда сельскохозяйственных культур для этих целей успешно использовались полиморфные системы запасных белков семян и изоферментов (Конарев и др. 1993). Однако работы по использованию белков семян в качестве маркёров для идентификации генотипов подсолнечника в литературе неизвестны.

Изучение запасных белков как признаков имеет важное значение и для частной генетики культуры. Следует отметить, что у подсолнечника, в отличие от многих других сельскохозяйственных растений, число идентифицированных генов сравнительно невелико. Их можно условно объединить в пять групп. К первой группе относятся гены, контролирующие морфологические признаки (окраску цветков, ветвистость, высоту растений и другие). Их анализу были посвящены многочисленные работы (Luczkiewicz 1975, Fick 1976, Skaloud and Kovacik 1978, Демурин и Толмачёв 1986, Тихонов и др. 1992, Есаев 1978). Ко второй группе можно отнести многочисленные идентифицированные гены устойчивости к болезням (Miller and Fick 1997). Третью группу составляют гены, контролирующие биохимические признаки - состав токоферолов и жирнокислотный состав масла (Демурин 1988, Demurin 1993, Miller and Fick 1997), важнейшие изоферментные системы (Torres 1974, Kahler and Lay 1985, Лоскутов и др. 1988, Lay et al. 1988). К четвертой группе относятся генетические системы, обусловливающие мужскую стерильность (Miller and Fick 1997). В пятую группу можно объединить гены, контролирующие физиологические и анатомические признаки, связанные с адаптацией растений подсолнечника к засухе (Fambrini et al. 1995, Ruso and Fernandez-Martinez 1998). Совместное наследование ряда морфологических и биохимических признаков изучалось в работах (Боровкова и др. 1991; Demurin et al. 1993), однако из-за большого числа хромосом (п=17) лишь в нескольких случаях удалось выявить сцепление кодирующих локусов.

• i |

Значительный прогресс в создании генетических карт подсолнечника был достигнут при использовании молекулярных ДНК-маркеров. К настоящему времени сконструированы несколько RFLP карт культурного подсолнечника (Berry et al. 1995, Gentzbittel et al. 1995, Jan et al. 1998) и одна RFLP карта - для дикорастущего вида H:anomalus (Riesberg et al. 1993). Построена также объединенная RFLP/AFLP карта (Prüfe et al. 1998). Осуществлено картирование ряда генов, контролирующих ценнейшие биологические признаки, в частности, устойчивость к ложной мучнистой росе (Mouzeyar et al. 1995, Brahm and Friedt 1996, Vear et al. 1997, Brahm et al. 1998), локуса Rß, контролирующего признак восстановления фертильности (Prüfe et al. 1998), некоторых изоферментных систем, окраски рыльцев, а также фактора, определяющего жизнеспособность пыльцы в межвидовом скрещивании (Quilett et al. 1995). С созданием методов фингерпринтинга ДНК, RAPD- и RFLP-анализа была заложена основа для так называемой "marker based selection", для идентификации QTL {quantitative trait loci), сцепленных с важными агрономическими признаками, для клонирования новых генов - кандидатов для трансформации. В частности, были идентифицированы молекулярные маркёры, связанные с интенсивностью транспирации (Beihassen et al. 1993), ветвлением (Iouras et al. 1998), масличностью семян и их лузжистостью (Leon et al. 1995). В связи с проблемой картирования генома изучение генетики запасных белков семян - важных биологических и хозяйственных1 признаков, без сомнения, представляет актуальную научную задачу.

Цель настоящей работы - раскрытие генетического потенциала запасных белков семян подсолнечника как признаков, выполняющих важные биологические функции, имеющих хозяйственную ценность и перспективных для использования в качестве генетических маркёров.

В ходе выполнения работы были решены следующие задачи:

• разработаны способы идентификации и анализа изучаемых признаков: выделение и очистка белков из отдельных семян и их частей, различные модификации электрофореза и иммунохимических методов;

• изучен состав полипептидов гелиантинина и 2S альбуминов;

• проведен скрининг основных представителей генофонда подсолнечника и проанализирован полиморфизм Запасных белков;

• проанализирован характер наследования состава запасных белков семян у гибридов от внутривидовых и межвидовых скрещиваний;

• исследованы пути использования запасных белков семян в качестве молекулярно-генетических маркёров для решения актуальных проблем прикладной ботаники, генетики и селекции подсолнечника.

Работа состоит из шести глав, введения, заключения, списка литературы и приложения. Во введении обоснован выбор запасных белков семян подсолнечника в качестве объекта исследования, обсуждается биологическое и хозяйственное значение этих признаков. Показано общее состояние изученности генетики признаков подсолнечника. Даётся общая характеристика работы и её основных частей, обосновывается актуальность задач исследования, формулируются выносимые Hai защиту положения. В первой главе анализируются данные литературы о составе, полиморфизме и генетическом контроле главных запасных белков семян двудольных растений. Показано^ что как 7S, так и IIS глобулины из семян различных видов характеризуются едиными типами структурной организации. Все они проявляют молекулярную гетерогенность и кодируются небольшими мультигенными семьями, состоящими из нескольких высокогомологичных последовательностей. В литературе накоплена обширная информация о молекулярно-генетической организации запасных глобулинов ряда бобовых растений: гороха, кормовых бобов. Значительно меньшая по объему информация существует для суперсемейства 2S альбуминов. В главе приводятся основные сведения о составе белковой фракции семян подсолнечника. Её главными компонентами являются IIS глобулин, получивший название гелиантинина, и 2S альбумины. Подчеркивается, что необходимость изучения полиморфизма и генетического контроля запасных белков семян вызвана их малой изученностью, отсутствием данных об изменчивости и характере наследования, отсутствием у подсолнечника надёжных молекулярно-генетических маркёров, перспективных для решения актуальных проблем прикладной ботаники, генетики и селекции культуры.

Вторая глава посвящена методологии исследования. В качестве основного метода в работе использован генетический анализ. Потенциал изучаемых признаков раскрывается в ходе детального анализа фенотипической изменчивости, основным материалом для которого послужили инбредные линии, принадлежавшие к различным генетическим пулам культурного подсолнечника. Дана краткая характеристика изученного материала. Описываются методические приёмы, использованные при изучении генетического разнообразия белковых признаков. В большинстве своём они представляют модифицированные автором стандартные биохимические методы. Приводятся схемы извлечения суммарных белков, гелиантинина и 2S альбуминов из отдельных семян, методики иммунохимического анализа, а также различные способы электрофоретического и хроматографического фракционирования белков. Они обладают хорошей разрешающей способностью и высокой воспроизводимостью, что является необходимым условием генетического анализа.

В третью главу включены данные о молекулярно-генетической гетерогенности и полиморфизме гелиантинина. Приведена разработанная номенклатура и описан состав электрофоретических компонентов стандартного (или нормального) типа гелиантинина, за который условно принят спектр выборки 100 семян сорта Передовик. Описываются различные фенотипические варианты гелиантинина: аллельные (отличающиеся по молекулярной массе), нулевые, добавочные и варианты с изменённой экспрессией. С учетом всех этих вариантов составлен эталонный спектр гелиантинина, включающий все идентифицированные при анализе изменчивости компоненты. Анализируется фенотипическая изменчивость гелиантинина среди отобранных для исследования представителей генофонда подсолнечника: у сортов и коммерческих гибридов, самоопылённых линий селекции ВИР, линий зарубежной селекции, генетической коллекции ВНИИМК. Изучено разнообразие гелиантинина у различных видов рода НеИаШкш. Оказалось, что лишь 2-3 фенотипических варианта полипептидов гелиантинина консервативны у всех видов рода; остальные обнаружили полиморфизм на внутривидовом (у Н.аппит) и межвидовом уровнях.

Четвертая глава посвящена характеристике гетерогенности и полиморфизма 2Б альбуминов. Результаты разделения альбуминов методами одномерного и двумерного электрофореза, обратнофазной высокоразрешающей жидкостной хроматографии (НРЬС) свидетельствуют о том, что эта фракция белков гетерогенна и Представляет собой смесь из 12-13 полипептидов с молекулярными массами от 10000 до 18000. Установлено, что в отличие от 2Б альбуминов других двудольных растений, альбумины подсолнечника являются одноцепочечными белками, компактная структура которых поддерживается благодаря внутрицепочечным дисульфидным связям. Методом препаративной НРЬС изолированы отдельные полипептиды из суммарной фракции 2Б альбуминов сорта БипЬгес! 246. Определены (полностью или частично) их Ы-концевые последовательности, анализ которых показал, что 2Б альбумины подсолнечника, по-видимому, являются продуктами экспрессии двух или трех небольших мультигенных семейств. Выявлена внутривидовая изменчивость состава альбуминовой фракции у культурного подсолнечника. Особое внимание уделено исследованию семейства богатых метионином белков (с молекулярной массой 10000). У ряда генотипов обнаружен вариантный белок 8РА8, отличавшийся от нормального по размеру (молекулярной массе). Богатые метионином белки характерны для однолетних видов НеИаМ/гш; у многолетних видов они идентифицируются лишь в виде следов.

В пятой главе обсуждаются гипотезы генетической организации главных запасных белков семян подсолнечника. На основании результатов анализа

I. внутривидовой изменчивости и характера наследования фенотипических вариантов при скрещиваниях линий, различавшихся по составу полипептидов, предложена гипотеза генетической организации гелиантинина. Предполагается, что гелиантинйн кодируется тремя сложными локусами: Не1А, НеШ и Не1С, соответствующим субъединицам групп А, В,и С. Локус Не1А состоит из двух членов, а локусы НеШ и Не1С включают по три гена. В каждом из локусов идентифицированы серии полиморфных аллелей. Установлено сцепление локусов Не1В и Не1С (коэффициент рекомбинации около 22%) и независимое наследование локуса Не1А от локусов НеШ и Не1С при скрещиваниях. Анализ полученных данных позволил предположить, что семейство генов 2Б альбуминов также кластировано в двух или трех локусах. Анализируется характер наследования состава запасных белков семян при межвидовой

I. гибридизации в роде НеИаШкш. Подчёркивается, что особенности наследования белка у гибридов от отдалённых скрещиваний в целом согласуются с характером наследования морфобиологических признаков. В фертильных гибридных потомствах от скрещиваний культурный подсолнечник х многолетний вид экспрессировался гелиантинин "однолетнего" типа, но не идентичный гелиантинину материнского родителя. Характерной особенностью большинства таких гибридов является аллель /ге/9 дикого типа, свойственная дикорастущим однолетним формам. Её появление объясняется как результат десупрессии "дремлющей" предковой аллели, присутствующей в составе мультигенной семьи. В свете полученных данных в главе обсуждаются вопросы организации, изменчивости и эволюции мультигенных семейств, кодирующих запасные белки семян.

В шестой главе рассматриваются различные пути использования запасных белков семян подсолнечника в качестве молекулярно-генетических маркёров. Установлено, что антигенный состав суммарных водо-солерастворимых белков связан с геномной организацией видов рода Helianthus. Сравнительный анализ выявил ряд белков-антигенов, специфичных как для отдельных геномов, так и для некоторых видов. Методами иммунохимии изучены белки семян полиплоидных видов сложного гибридного происхождения. В частности, результаты анализа подтвердили гипотезу о наличии генома однолетнего вида (В) в составе гексаплоидного Н. tuberosus. Белки-маркёры генома В не выявлены у другого гексаплоида, H.rigidus. Схема геномной дифференциации рода Helianthus, предложенная на основании ботанических и генетических данных (Анащенко 1979), а также анализа иммунохимических свойств белков семян, подтверждена результатами исследования с помощью RAPD-маркёров (Sossey-Alaoui et al. 1996, 1998). На основании полученных данных обсуждены гипотезы их геномного состава. Полиморфизм главных запасных белков (аллельная изменчивость), выявляемый методами электрофореза, может быть использован для идентификации генотипов. Рассмотрены возможности и перспективы использования изменчивости запасных белков семян для паспортизации коллекции, в селекции, семеноводстве и семенном контроле.

Научная новизна работы состоит в следующем.

• Разработаны оригинальные методики, обеспечивающие возможность генетического анализа сложных белковых признаков подсолнечника.

• Современными биохимическими методами (иммунохимии, электрофореза, обратнофазной высокоразрешающей жидкостной хроматографии (RP-HPLC) и N-концевого секвенирования) проанализирован обширный (более 30 тыс генотипов) материал; охарактеризована молекулярная гетерогенность и изучен состав главных запасных белков семян подсолнечника -IIS глобулина и 2S альбуминов - проанализирована их изменчивость и изучено наследование при внутривидовых скрещиваниях у культурного подсолнечника H.annuus и при межвидовой гибридизации в роде Helianthus.

• Выявлена уникальная молекулярная организация 2Б альбуминов подсолнечника, которые существуют в виде одноцепочечных полипепти^ов с молекулярными массами от 10000 до 18000; большинство этих белков имеют внутрицепочечные дисульфидные связи; обнаружен сложный состав семейства метионин-богатых белков альбуминовой фракции.

• Установлено, что главные запасные белки семян подсолнечника характеризуются генетической изменчивостью; идентифицированы три локуса, кодирующие 115 глобулин культурного подсолнечника; в каждом из них выявлены полиморфные аллели; показано, что 2Б альбумины подсолнечника также кодируются небольшими мультигенными семьями.

• Доказана возможность использования запасных белков семян в качестве маркёров для идентификации генотипов и геномов подсолнечника.

Положения, выносимые на защиту. Выполненные автором исследования позволяют утверждать, что главные запасные белки семян подсолнечника:

• представляют сложные признаки, характеризующиеся молекулярной гетерогенностью и проявляющие генетическую изменчивость;

• кодируются небольшими мультигенными семьями различной структкрной организации;

• обладают аллельной и геномной специфичностью и могут быть использованы в качестве молекулярно-генетических маркёров.

Личный вклад автора. Выдвижение гипотез, выбор и постановка задач исследования осуществлялись автором преимущественно единолично. Автор принимал участие на всех этапах проведения исследований. Вклад автора был определяющим на стадии формулирования результатов и выводов, а также в написании подавляющего большинства статей по теме диссертации. Работа выполнена в отделе биохимии и молекулярной биологии ВНИИ растениеводства им.Н.И.Вавилова в рамках плановых тем отдела, ВНИИ защиты растений (С.-Петербург), ВНИИ масличных культур им.В.С.Пустовойта (Краснодар), Института генетики им.Акад. Дончо Костова Болгарской Академии наук (София), Бристольского Университета (Лонг-Эштон, Англия), Лаборатории технологических свойств белков Института сельскохозяйственных исследований (Нант, Франция).

Апробация работы. Результаты работы докладывались автором на Симпозиумах секции белковых и масличных культур EUCARPIA (Ленинград, 1984 г.; Албена, Болгария, 1994 г.), III Международном симпозиуме по биохимической идентификации сортов (Ленинград, 19В7 г.), Международной школе-конференции по генетике (Албена, Болгария, 1987 г.), XV Научнотехнической конференции молодых учёных ВНИИМК (Краснодар 1990 г.), II, t

III, IV Европейских симпозиумах по биотехнологии подсолнечника (Албена,

Болгария 1993 г., Гессен, Германия, 1995 г., Монпеллье, Франция, 1998 г.),

Международной конференции по сложноцветным (Кью, Англия, 1994 г.), XV Конгрессе EUCARPIA "Генетика и селекция качества и устойчивости" (Витербо, Италия, 1998 г.)'.

Благодарности. Выполнение данной работы на всех её этапах было бы невозможным без тщательно подобранного, надёжного материала, большая частькоторого принадлежала коллекции ВИР и была любезно предоставлена автору В.А.Гавриловой и В.Т.Рожковой. Большую роль в развитии научных представлений автора сыграла работа в отделе молекулярной биологии ВИР под руководством академика РАСХН В.Г.Конарева, а также его постоянное внимание и поддержка. Неоценимое влияние на формирование научных интересов и стиля работы автора оказали профессора А.В.Анащенко, И.П.Гаврилюк, Т.С.Фадеева и П.Р.Шьюри. При выполнении отдельных частей диссертационной работы автор опирался на полезное содействие коллег и соавторов: Г.В.Алексеева, И.Г.Боровковой, Р.Вассилевой, Й.Георгиевой-Тодоровой, Ал.В.Конарева, А.^.Лоскутова, И.С.Образцова, А.С.Татама, В.В.Толмачёва, Р.Дж.Файдо, З.В.Чмелёвой. Всем им автор выражает глубокую благодарность и сердечную признательность. О

Заключение диссертации по теме «Генетика», Анисимова, Ирина Николаевна

6.4. Выводы

Итак, в настоящей главе показаны основные подходы к использованию запасных белков в качестве маркерных признаков для идентификации генотипов и геномов, для построения филогенетических схем, для решения задач селекции, семеноводства и семенного контроля. Результаты комплексного исследования иммунохимических свойств белковых фракций семян и поли пептидного состава гелиантинина 2Б альбуминов продемонстрировали, что степень сходства запасных белков семян может служить мерой степени родства видов подсолнечника. Наши данные использованы при разработке схем геномной организации рода НеНашНиз

Боззеу-Акош е1 а1. 1996, 1998). Антигенный состав запасных белков свидетельствует о значительных отличиях геномов однолетних и многолетних видов рода. В составе суммарной водосолерастворимой фракции семян однолетних форм выявлен дополнительный компонент (В1), отсутствующий у большинства многолетних видов. Этот специфический антиген рассматривается как маркёр генома однолетней группы видов. Его присутствие в составе белков многолетнего гексаплоидного Н.шЪегояиз рассматривается как подтверждение участия генома однолетнего подсолнечника в аллполиплоидном происхождении этого вида. Поскольку формирование мультигенных семейств, кодирующих запасные белки семян -событие достаточно древнее и, по-видимому, совпавшее с формированием семейства Л^ега^еае, локусы запасных белков также могут служить маркёрами определённых геномов. Среди изученных в работе локусов с базовым геномом С для рода НеНаШкт (по 8оззеу-А1аош е1 а1. 1998) связаны локусы Не1А и НеШ, кодирующие субъединицы А и В гелиантинина, а также локусы А\ЪА и А!ЬВ, кодирующие 2Б альбумины. К базовому геному Н секции НеНамНия относится семейство богатых метионином белков 8РА7/8РА8. Анализ иммунохимических свойств гелиантинина и гомологичных белков из других триб семейства Л^егасеае перспективен для исследований и в области систематики сложноцветных. Выявленная аллельная изменчивость запасных белков указывает на возможность их использования в качестве маркёров для различения генотипов. Так, состав полипептидов запасных белков может служить одним из признаков для идентификации и регистрации инбредных линий. Гелиантинин - стабильный и надёжный маркёрный признак для определения генетической чистоты инбредных линий и контроля гибридности при межлинейной гибридизации. Отдельные варианты полипептидов гелиантинина кодируются аллелями генов и имеют кодоминантный тип наследования. Это позволяет использовать частоты полиморфных аллелей для сравнительного анализа сортовых популяций подсолнечника, являющегося типично перекрёстноопыляющейся культурой. Такой анализ может быть проведён для вариантов, генетика которых достаточно изучена. В более общем случае рекомендуется оценка частот встречаемости фенотипических вариантов гелиантинина.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящей работе представлены результаты генетического анализа запасных белков семян подсолнечника - сложных белковых признаков различной биохимической природы. В ходе исследования нами были разработаны методические приёмы для анализа фенотипической и генотипической изменчивости изучаемых признаков, в частности, подобраны условия выделения различных фракций запасных белков из индивидуальных семян, электрофореза, хроматографии, иммунохимического анализа. В результате была детально охарактеризована молекулярно-генетическая гетерогенность главных запасных белков семян подсолнечника - гелиантинина и 2S альбуминов.

При подборе материала автор руководствовался основополагающей концепцией вида у культурных растений, разработанной Н.И.Вавиловым и рассматривающей вид как систему. В 1931 г. Н.И.Вавилов писал: "Генетика отдельных видов даст представление о наследственной природе вида только тогда, когла она будет базироваться не на случайных нескольких сортах, полученных от семенных фирм.а на определённо подобранном, хотя бы выборочном материале, учитывая вид как сложную систему." Изученный в настоящей работе материал максимально охватывал генетическое разнообразие культуры. Он включал инбредные линии различного происхождения, сортовые и гибридные популяции, дикорастущие виды и межвидовые гибриды, что позволило выявить и описать полиморфизм запасных белков.

В работе установлено, что главные запасные белки семян подсолнечника характеризуются значительной гетерогенностью. В составе гелиантинина идентифицировано восемь типов субъединиц, различающихся по молекулярной массе. Эти субъединицы принадлежат к трем классам: А (56000), В (55000) и С (52000) и являются продуктами трех сложных локусов или мультигенных семейств Hei А, НеШ и HelC. Локус Hei А состоит из двух генов, а локусы НеШ и HelC включают по три члена каждый. Последовательности из локусов НеШ и HelC были изолированы и клонированы ранее (Vonder Haar et al. 1988).

Генетическим анализом в составе мультигенного семейства, кодирующего субъединицы группы С выявлены анцестральные "дремлющие" аллели, десупрессия которых происходит под влиянием стрессовых факторов (например отдалённой гибридизации). Подобные явления наблюдаются и у других генетических объектов (например дрозофил, Голубовский 1985) и, очевидно, отражают общие закономерности организации и эволюции геномов.

В альбуминовой фракции семян подсолнечника выявлено 12-13 полипептидов с молекулярными массами от 10000 до 18000. 2S альбумины подсолнечника оказались уникальными среди представителей этого семейства белков, охарактеризованных к настоящему времени у двудольных растений. Фракция 2S альбуминов подсолнечника представлена в основном одноцепочечными поли пептидам и, большинство из которых имеют внутрицепочечные дисульфидные связи. Из результатов работы следует, что семейство 2S альбуминов подсолнечника кластировано по меньшей мере в двух локусах - AlbA и AlbB. Локус AlbA включает два высокогомологичных, тесно сцепленных гена (Brunei 1994b). Кодируемые этими генами предшественники посттрансляционно расщепляются на два полипептида с молекулярными массами 14000 и 16000 (18000), последовательности которых соответствуют N и С концам гена HaG5 ( Allen et al. 1987). Гены, кодирующие богатые серосодержащими аминокислотами белки SFA7 и SFA8, образуют небольшое подсемейство AlbB, включающее, как минимум, два высокогомологичных члена. Кодируемые этим подсемейством предшественники не подвергаются пост-трансляционному процессингу. Белки SFA7 и SFA8 структурно родственны; уровень гомологии их аминокислотных последовательностей составляет 91,5% (Kabbaj and Berville 1997). Ген белка SFA8 был изолирован (Kortt et al. 1991), а ген, предположительно кодирующий SFA7, клонировали (Kabbaj and Berville 1997). Таким образом, в настоящей работе идентифицированы пять сложных локусов, кодирующих главные запасные белки семян подсолнечника.

Предположения о числе генов, входящих в каждый из локусов, основывались на данных литературы, а также результатах анализа гетерогенности и изменчивости полипептидов, выявляемых электрофорезом. В этой связи закономерен вопрос: в какой степени наблюдаемая молекулярная гетерогенность запасных белков отражает структуру и эволюцию мультигенных семейств, кодирующих эти признаки? Известно, что у подсолнечника, как и у других растений, нуклеотидные последовательности членов отдельных подсемейств характеризуются значительной (более 90%) гомологией (Yonder Haar et al. 1988, Brunei 1994b, Kabbaj and Berville 1997), тогда как члены из разных подсемейств обнаруживают не более 50% сходства. Значительным сходством, хотя и не полной идентичностью по молекулярной массе, обладают продукты отдельных генных подсемейств, исследованных в работе. Так, например, все три субъединицы группы С кодируемые локусом HelC, имеют близкие значения молекулярных масс. Образующие их кислые и основные полипептиды также незначительно различаются по молекулярной массе. Генные подсемейства для субъединиц группы С включают, как минимум, три высокогомологичных члена (Yonder Haar et al. 1988). Очевидно, что все они возникли в результате дупликации. К подсемейству HelC относится и аллель hel9, в норме находящаяся в супрессированном состоянии, но проявляющаяся эпистатично по отношению к аллели hel\2 "культурного" типа при определенных условиях. Таким образом, локус HelC может включать и более трех членов.

Высокая степень гомологии в подсемействе HelC свидетельствует о его сравнительно недавнем происхождении в эволюции рода Helianthus. Полипептиды группы С, а также богатые метионином компоненты альбуминовой фракции экспрессируются лишь у однолетних видов. Локус HelC, также как и подсемейство, кодирующее богатые метионином альбумины, имеет отношение к геному В (Анащенко 1979, Анисимова 1984), или Н (Sossey-Alaoui 1996, 1998), специфичному для группы однолетних видов. С геномом С, общим для всех секций рода, связано подсемейство НеШ. Члены этого подсемейства дивергировали в значительной степени. Кодируемые локусом НеШ полипептиды заметно различаются по молекулярной массе (например, различие между полипептидами /ПО и ß 3 составляет 1500 дальтон). Идентичные по размеру полипептиды могут входить в различные субъединицы, что объясняется дупликациями и конверсиями, имевшими место в эволюции подсемейства.

В каждом из гелиантинин-кодирующих локусов идентифицированы полиморфные аллели: Ы34 и helAnu¡ в локусе HelA, hel29, hel30nul и hel\Omd в локусе НеШ, he 19, hel\ 1 и hel\Tul в локусе HelC. Полиморфные аллели в различных сочетаниях и с различной частотой присутствуют у большинства проанализированных сортов. Однако в целом, за небольшими исключениями (сорта Гигант 549, Первенец, ВНИИМК 1646), в сортах преобладают аллели, так называемого стандартного типа. Большинство селекционных линий характеризуются стандартным набором аллелей гелиантинина. В то же время линии, отличающиеся маркёрными морфологическими признаками, как правило, маркированы и по гелиантинину. Этим объясняется более высокая встречаемость полиморфных аллелей гелиантинина среди линий из генетических коллекций.

В работе выявлена и описана изменчивость в семействе богатых метионином белков. Идентифицирована вариантная аллель гена, кодирующего альбумин SFA8. Вариантный полипептид, отличающийся от нормального по молекулярной массе и изоэлектрической точке, обнаружен у пяти инбредных линий коллекции ВИР. Показано, что содержание метионина и цистеина в альбуминовой фракции семян подсолнечника определяется уровнем накопления белков SFA7 и SFA8. Однако уровень этих полипептидов варьирует у различных генотипов в широких пределах. В Fi межлинейных гибридов наблюдается высокий гетерозисный эффект по уровню накопления богатых метионином белков. Этот эффект не обнаруживается в семенах F2. Полученные результаты свидетельствуют о том, что содержание полипептидов SFA7 и SFA8 может определяется как генетическими, так и средовыми (например, обеспеченностью серой) факторами. Тем не менее детальный анализ уровня накопления отдельных полипептидов позволяет предположить, что генотипические факторы могут иметь определяющую роль в регуляции транскрипции различных членов одной и той же мультигенной семьи, в данном случае кодирующей метион-богатые белки. Это предположение хорошо укладывается в рамки гипотезы о пространственно-временном характере регуляции генов, кодирующих запасные белки семян у двудольных растений (Goldberg 1986).

Подводя итоги, укажем на ряд актуальных проблем, прогресс в решении которых может быть связан с использованием полученных в настоящей работе данных.

1. Картирование локусов. кодирующих гелиантинин и 2S альбумины. В связи с тем, что запасные белки являются важным агрономическим признаком, картирование соответствуюших генов необходимо для разработки подходов к так называемой селекции с помощью маркеров (MAS). Кроме того, несомненна роль запасных белков, в частности альбуминов, в биосинтезе жирных кислот, поскольку сушествует определенная, но пока еще малоизученная связь между накоплением альбуминов и масла в семенах подсолнечника (Бородулина и Супрунова 1977 1978, Kabbaj and Berville 1997). Уже была предпринята попытка локализации на RFLP карте культурного подсолнечника генов, контролирующих масличность и лузжистость семян (Leon et al. 1995). Тем не менее всё ещё не удалось картировать гены запасных белков, что объясняется отсутствием данных о внутривидовой изменчивости этих признаков. Обнаруженная в нашей работе аллельная изменчивость в локусах, кодирующих запасные белки семян, может быть использована при составлении генетических карт подсолнечника. Линии, различающиеся по аллелям белок-кодирующих генов, могут служить родительскими формами для получения рсщепляющихся гибридных популяций и проведения гибридологического анализа.

2. Обнаружение и идентификация новых белков. Полученные результаты позволяют предполагать наличие в белковой фракции семян подсолнечника новых, ещё не исследованных компонентов. Это, в частности, относится к так называемому антигену В2, специфичному для однолетних дикорастущих видов (subsp. lenticularis), но отсутствующему у культурного подсолнечника. О возможном участии этого белка в детерминации послеуборочного покоя семян косвенно свидетельствуют следующие факты. Во первых, антиген В2 присутствует в семенах форм с осыпающимися семянками, но не обнаружен у видов с неосыпающимися семенами (культурного подсолнечника, подсолнечника черешкового). Во-вторых, семена дикорастущих однолетних видов характеризуются продолжительным периодом послеуборочного покоя семян (Seiler 1996). Специальное исследование показало, что subsp.annuus и subsp.petiolaris имеют различные физиологические механизмы, обусловливающие послеуборочный покой (Seiler 1996). В третьих, белок В2 исчезал из семян, хранившихся более года, что соответствовало периоду наиболее выраженного покоя. Монофакториальный менделевский характер наследования гена В2 позволяет предположить, что соответствующий белок имеет несложную вторичную структуру и, возможно, является компонентом, ингибирующим процесс прорастания семян. Поскольку белок присутствует в свежеубранных семенах в очень больших количествах, клонирование соответствующего гена и дальнейшее изучение этого компонента представляются вполне осуществимыми задачами. Еще одну группу белков, заслуживающих дальнейшего изучения представляют белки мембран масличных тел. В литературе сведения об этих белках практически отсутствуют. Судя по предварительным результатам, белки мембран масличных тел имеют небольшую молекулярную массу (около 20000), хорошо разделяются в электрофорезе и обладают генотипической изменчивостью.

3. Поиск вариантов белков с улучшенными функциональными и биологическими свойствами. В настоящей работе были выявлены четкие различия функциональных свойств альбуминовых фракций семян у различных генотипов подсолнечника. В работах (Yagasaki et al. 1996, 1997) доказана зависимость функциональных свойств IIS белка семян сои, глицинина, от присутствия тех или иных субъединиц, кодируемых различными аллелями в соответствующих локусах. Аналогичное исследование, выполненное на гелиантинине у линий, несущих разные аллели этого белка, позволит значительно расширить представления о возможности изменений и улучшений функциональных и технологических свойств белковых изолятов подсолнечника.

4. Изучение механизмов накопления запасных белков. Выявленная в настоящей работе изменчивость уровня накопления индивидуальных белков подтверждает мнение А.Б.Дьякова (1984) о том, что наследование содержания белка в семенах подсолнечника представляет сложный процесс, определяемый множеством факторов. Между тем доля альбуминовой и глобулиновой фракций в семенах двудольных растений может различаться при относительно одинаковом уровне суммарного белка (Бородулина и Супрунова 1977, Romero et al. 1986, Rao and Pernolett 1981). Кроме того, у подсолнечника установлена прямая связь между уровнем экспрессии индивидуальных полипептидов альбуминовой фракции и масличностью (Kabbaj and Berville 1997). Из результатов нашей работы следует, что определяющий вклад в содержание незаменимых аминокислот метионина и цистеина в суммарном белке семян подсолнечника вносит альбуминовая фракция, а именно - её низкомолекулярные компоненты SFA7 и SFA8, уровень накопления которых, по-видимому, находится под контролем генотипа. В связи с проблемой гетерозиса определённое биологическое значение может иметь высокий гетерозисный эффект по уровню накопления богатых метионином белков в семенах Fi межлинейного гибрида и затухание гетерозиса в семенах F2. Дальнейшие исследования биосинтеза отдельных полипептидов запасных белков должны учитывать влияние генотипических и средовых факторов (таких как обеспеченность серой). На наш взгляд, эта проблема особенно актуальна в связи с получившими в последнее время широкое развитие опытами по генетическим манипуляциям с клонированными генами, направленными на модификацию и улучшение некоторых признаков и свойств. Известно, что клонированный ген SFA8 подсолнечника уже активно используется для переноса в другие виды растений с целью повышения содержания метионина в семенах и вегетативных органах. Выявленная в настоящей работе значительная генотипическая изменчивость в накоплении белков SFA7 и SFA8 показывает, что характер регуляции богатых метионином белков сложен и неоднозначен.

Теоретическое значение работы состоит в том, что в рамках представлений классической генетики, установлена генетическая организация двух сложных признаков различной биохимической природы - запасных белков семян подсолнечника гелиантинина и 2S альбуминов; определена структура кодирующих их мультигенных семейств; идентифицированы полиморфные аллели в каждом из подсемейств. Таким образом, в работе описаны новые гены подсолнечника и идентифицированы их продукты.

Практическая ценность работы заключается в том, что изученные в ней признаки могут быть использованы в качестве молекулярно-генетических маркёров для решения ряда актуальных проблем прикладной ботаники, генетики и селекции подсолнечника. К числу таких проблем мы относим следующие.

1. Исследования геномного состава и филогенетических отношений в роде НеНаШкия. Интерес к исследованиям филогении и геномного состава рода НеНаШкш резко возрос в последние годы в связи с активным привлечением генетических ресурсов дикорастущих видов в селекцию культурного подсолнечника. Результаты иммунохимического анализа белков (Анисимова 1984), а также данные об изменчивости гелиантинина у разных видов НеИаШЬш (Ашвтшуа е1 а1. 1993) уже использованы наряду с молекулярными КАРЭ-маркерами для разработки современной концепции геномного состава рода Helia.nth.us и в анализе филогенетических отношений между видами (5оз8еу-А1аош 1996, 1998). Иммунохимический и электрофоретический анализ белков рекомендуется для определения видовой и геномной принадлежности образцов. Ввиду значительных отличий в составе белков между однолетними и многолетними видами, эти признаки, безусловно, перспективны для контроля за процессом отдаленной гибридизации в рода НеНаШкиз.

2. Паспортизация коллекции, контроль за целостностью образцов при хранении семян. Обнаруженная в работе аллельная изменчивость в локусах, кодирующих запасные белки гелиантинин и 2Б альбумины, свидетельствует о возможности использования этих признаков для регистрации коллекции подсолнечника. Большинство линий из коллекции ВИР, а также ряд наиболее распространенных сортов, уже проанализированы к настоящему времени. Сведения о составе аллелей в белок-кодирующих локусах у линий и сортов подсолнечника из коллекции ВИР отражены в каталоге А.В.Анащенко с соавторами (1992) и ряде публикаций (Анисимова и др. 1991, Конарев и др. 1993, Копагеу е1 а1. 1996, Агштюуа е1 а1. 1999). В связи с тем, что белковые признаки имеют четкое фенотипическое проявление и изучены генетически, их включение в базу данных по подсолнечнику можно считать вполне правомерным.

3. Селекционно-генетические исследования. Метод электрофореза гелиантинина рекомендован для определения генетической чистоты селекционных линий и установления гибридности семян (Анисимова 1988, Конарев и др. 1989, Anisimova et al. 1991). Сравнительно низкий полиморфизм гелиантинина среди селекционных линий ограничивает возможности метода, его эффективность, как показали исследования (Анисимова и др. 1991), сопоставима с эффективностью методов, основанных на анализе изоферментных систем. Однако среди доступных способов маркирования генотипов, электрофорез запасных белков на современном этапе является единственным методом, обладающим хорошей разрешающей способностью, высокой воспроизводимостью и возможностью для стандартизации (Созинов 1985, Конарев и др. 1993, Gavrilyuk et al. 1995). Изученные нами маркёрные признаки могут быть полезны при оценке степени родства сортов и популяций подсолнечника. В задачу исследования не входило определение генетических расстояний между популяциями, однако установленный внутрипопуляционный и межпопуляционный полиморфизм белок-кодирующих аллелей допускает такую возможность. Подобная работа была выполнена на сортовых популяциях с использованием изоферментных маркёров (Bazan et al. 1988) и на диких видах с использованием запасных белков семян (Ivanov 1994).

Полученные результаты позволяют сделать следующие выводы.

1. Главные запасные белки семян подсолнечника - IIS глобулин (гелиантинин) и 2S альбумины - представляют собой кодируемые небольшими мультигенными семьями сложные признаки, характеризующиеся молекулярной гетерогенностью и различающиеся по биохимическим и иммунохимическим свойствам.

2. Гелиантинин культурного подсолнечника {H.annuus subsp.annuus) включает восемь типов главных субъединиц, каждая из которых состоит из дисульфидно связанных кислого и основного полипептидов. В составе гелиантинина идентифицируются четыре-пять типов кислых (а) полипептидов с Мг-37500-38500, три типа кислых (а') полипептидов с Мг-31000-31500 и восемь типов основных (ß-ß') полипептидов с Мг-21500-24000.

3. У большинства сортов и селекционных линий культурного подсолнечника преобладает гелиантинин стандартного (нормального) типа. Скрининг генофонда выявил значительную фенотипическую изменчивость гелиантинина, обусловленную наличием вариантных полипептидов (отличающихся по молекулярной массе), нулевых вариантов, добавочных полипептидов и компонентов с измененной экспрессией. Их проявление контролируется генотипом и не зависит от условий выращивания растений.

4. Семейство генов гелиантинина кластировано, по меньшей мере, в трёх локусах: HelA, НеШ и HelC, соответствующих субъединицам А, В и С. Локус HelA включает два высокогомологичных члена, кодирующих субъединицы Al и А2. Локус НеШ содержит три дивергентных гена для субъединиц В1, В2, ВЗ, а локус HelC включает три гена, кодирующих субъединицы CI, С2 и СЗ. В каждом из локусов идентифицирован ряд полиморфных аллелей: /ге/34 и heWul в локусе HelA, hel29, hei30™г и hell 0й"'в локусе НеШ, hel9, hell 1 и hell 2nul в локусе HelC. В составе мультигенных семей, кодирующих гелиантинин культурного подсолнечника, присутствуют анцестральные "дремлющие" аллели; их де-супрессия может происходить под влиянием стрессовых факторов, в частности, в результате отдалённой гибридизации.

5. При межлинейных скрещиваниях локус HelA наследуется независимо от локусов НеШ и HelC. Локусы НеШ и HelC обнаружили сцепление в комбинации скрещивания ВИР130хСМ44; частота рекомбинации между ними составила 21,8%.

6. Фракция 2S альбуминов семян подсолнечника включает до 13 одноцепочечных полипептидов с молекулярными массами в интервале между 10000 и 18000; большинство из них имеют внутрицепочечные дисульфидные связи. Результаты анализа N-концевых аминокислотных последовательностей индивидуальных полипептидов, очищенных с помощью метода RP-HPLC из суммарной фракции 2S альбуминов сорта Sunbred 246, свидетельствуют о наличии двух или трех групп альбуминовых белков, различающихся по физико-химическим свойствам. Установлено, что полипептиды с Мг 1400016000 (18000) являются продуктами пост-трансляционного расщепления предшественников, кодируемых небольшим подсемейством гомологичных, тесно сцепленных генов 04/ЬА), один из которых (HaG5) клонирован и секвенирован в работе (Allen et al. 1987).

7. В альбуминовой фракции семян подсолнечника присутствует семейство структурно родственных низкомолекулярных богатых метионином белков SFA7 и SFA8 с Мг около 10000. Содержание этих белков у различных инбредных линий варьирует в широких пределах. Суммарный уровень белков SFA7 SFA8 в альбуминовых фракциях из семян различных генотипов коррелирует с количеством серосодержащих аминокислот - метионина и цистина.

8. Богатые метионином альбумины SFA7 и SFA8 кодируются небольшим генным подсемейством (Л/6В), включающим, как минимум, два высокогомологичных члена. Ген, кодирующий альбумин SFA8, в генофонде культурного подсолнечника представлен двумя аллелями, различающимися по фенотипическому проявлению. В семенах Fi от скрещиваний различных инбредных линий наблюдается гетерозисный эффект, выражающийся в значительном возрастании уровня богатых метионином белков альбуминовой фракции. Эффект гетерозиса затухает в F2, однако характер варьирования белков SFA7 и SFA8 среди отдельных семян свидетельствует об участии генотипических факторов в контроле накопления этих полипептидов.

9. Белки семян однолетних видов рода Helianthus (секция Helianthus) отличаются от белков многолетних диплоидных и полиплоидных видов секции Atrorubentes как по иммунохимическим свойствам суммарной фракции, так и по составу полипептидов главных запасных белков. Все однолетние виды имеют в составе суммарной белковой фракции характерный антиген В1. В главных запасных белках видов рода Helianthus присутствуют консервативные (свойственные всем видам рода) полипептиды. Подсемейство генов, кодирующих субъединицы группы С, у однолетних и многолетних суммарной фракции 2S альбуминов сорта Sunbred 246, свидетельствуют о наличии двух или трех групп альбуминовых белков, различающихся по физико-химическим свойствам. Установлено, что полипептиды с М,- 1400016000 (18000) являются продуктами пост-трансляционного расщепления предшественников, кодируемых небольшим подсемейством гомологичных, тесно сцепленных генов {AlbA), один из которых {HaGS) клонирован и секвенирован в работе (Allen et al. 1987).

7. В альбуминовой фракции семян подсолнечника присутствует семейство структурно родственных низкомолекулярных богатых метионином белков SFA7 и SFA8 с Мг около 10000. Содержание этих белков у различных инбредных линий варьирует в широких пределах. Суммарный уровень белков SFA7 SFA8 в альбуминовых фракциях из семян различных генотипов коррелирует с количеством серосодержащих аминокислот - метионина и цистина.

8. Богатые метионином альбумины SFA7 и SFA8 кодируются небольшим генным подсемейством {AlbB), включающим, как минимум, два высокогомологичных члена. Ген, кодирующий альбумин SFA8, в генофонде культурного подсолнечника представлен двумя аллелями, различающимися по фенотипическому проявлению. В семенах Fi от скрещиваний различных инбредных линий наблюдается гетерозисный эффект, выражающийся в значительном возрастании уровня богатых метионином белков альбуминовой фракции. Эффект гетерозиса затухает в F2, однако характер варьирования белков SFA7 и SFA8 среди отдельных семян свидетельствует об участии генотипических факторов в контроле накопления этих полипептидов.

9. Белки семян однолетних видов рода Helianthus (секция Helianthus) отличаются от белков многолетних диплоидных и полиплоидных видов секции Atrorubentes как по иммунохимическим свойствам суммарной фракции, так и по составу полипептидов главных запасных белков. Все однолетние виды имеют в составе суммарной белковой фракции характерный антиген В1. В главных запасных белках видов рода Helianthus присутствуют консервативные (свойственные всем видам рода) полипептиды. Подсемейство генов, кодирующих субъединицы группы С, у однолетних и многолетних видов характеризуется значительной степенью дивергенции и, по-видимому, связано с различными базовыми геномами. У видов секции Atrorubentes практически отсутствует (или проявляется в виде следов) группа богатых метионином компонентов альбуминовой фракции. Состав полипептидов гелиантинина у культурного подсолнечника и ближайших дикорастущих сородичей (H.annuus subsp. lenticularis) контролируется гомологичными генами. Локус HelC subsp. annuus отличается от гомологичного локуса subsp.lenticularis единственной аллелью hel\2.

10.Выявленная аллельная изменчивость состава полипептидов гелиантинина у культурного подсолнечника и кодоминантный характер наследования этого признака служат теоретическим обоснованием для использования гелиантинина в качестве генетического маркёра для идентификации генотипов, определения генетической чистоты инбредных линий и контроля гибридности семян при межлинейной гибридизации, а также при сравнительном анализе сортовых популяций.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Анисимова, Ирина Николаевна, 1999 год

1.Алексенко А.Ю., Седова Т.С., Николаев И.В., Винецкий Ю.П. Полиморфизм запасных белков многолетней сои подрода 01усте//Генетика, 1987, т.23, №1, с. 135-142.

2. Алтухов Ю.П. Молекулярная эволюция популяций. В кн.: Молекулярные механизмы генетических процессов: Молекулярная генетика, эволюция и молекулярно-генетические основы селекции (под ред.А.А.Созинова). М.: Наука, 1985, с. 100-131.

3. Анащенко A.B. К систематике рода Helianthus Ь.//Ботанич.журн., 1974, т.59, №10, с. 1472-1481.

4. Анащенко A.B. Достижения и перспективы селекции подсолнечника в мире. М.: Изд.ВАСХНИЛ, 1977, 53с.

5. Анащенко A.B. Филогенетические связи в роде Helianthus Ь.//Тр.прикл. бот.ген. сел. ВНИИ растениевод., 1979, т.64, №2, с.146-156.

6. Анащенко A.B., Гаврилова В.А., Анисимова И.Н., Рожкова В.Т., Смирнова Н.Г. Каталог Мировой коллекции ВИР, вып.627. Самоопылённые маркированные линии подсолнечника, С.-Петербург, ВИР, 1992, 26 с.

7. Анисимова И.Н. Наследование антигенного состава белков семян при отдаленных скрещиваниях однолетнего подсолнечника//Тр.прикл.бот. ген.сел., 1981, т.70, вып.2.

8. Анисимова И.Н. Геномный анализ рода Helianthus Ь.//Генетика, 1984, №12, с.1925-1933.

9. Анисимова И.Н. Геномный и генетический анализ рода Helianthus L. с использованием методов иммунохимиии//С.х. биология, 1984, №9, с. 4552.

10. Анисимова И.Н. О генетической природе Helianthus tomentosus Michx.// Докл. ВАСХНИЛ, 1984, №5, с.22-23.

11. Анисимова И.Н. Геномный анализ рода Helianthus L. Материалы Третьей междунар.молодежной школы-конф. по генетике. Варна, 12-17 сентября 1986 г. София, 1987, с.301-306.

12. Анисимова И.Н. Идентификация сортов, линий и гибридов подсолнечника по составу полипептидов гелиантинина//Тр.прикл.бот.ген.сел., 1987, т. 114, с. 114-125.

13. Анисимова И.Н. Идентификация, анализ и регистрация сортов, линий и гибридов подсолнечника методом электрофореза гелиантинина. Методич. указания (под ред. И.П.Гаврилюк), Л.: ВИР, 1988, 21с.

14. Анисимова И.Н. Полиморфизм гелиантинина и его использование в идентификации сортов, линий и гибридов подсолнечника//С.х. биология, 1991, №1, с.88-95.

15. Анисимова И.Н. Белки семян в геномном анализе и идентификации сортов, линий и гибридов подсолнечника. В кн.: Теоретические основы селекции (под ред.В.Г.Конарева). Т.1., 1993, М.: Колос, с.287-314.

16. Анисимова И.Н., Гаврилюк И.П., Конарев В.Г. Состав субъединиц и полипептидов IIS глобулина семян подсолнечника//Докл.ВАСХНИЛ, 1986, №8, с.4-8.

17. П.Анисимова И.Н., Анащенко A.B., Гаврилюк И.П. Некоторые вопросы геномного анализа рода Helianthus Ь.//Вестн.с.х. науки, 1982, №3.

18. Анисимова И.Н., Лоскутов A.B., Боровкова И.П. Идентификация линий подсолнечника методами электрофореза гелиантинина и изоферментов// Докл. ВАСХНИЛ, 1991, №6, с. 12-15.

19. Артемьева Н.Л. Биохимическая характеристика запасных белковподсолнечника и их изменение при технологической переработке. Автореф. канд. дис., Краснодар, 1985, 24с.

20. Боровкова И.Г., Лоскутов A.B., Толмачев В.В. Анализ наследования и сцепления локусов, кодирующих морфологические признаки и изоферменты у подсолнечника Helianthus annuus Ь.//Генетика, 1991, т.27, №Ю, с.1773-1780.

21. Бородулина A.A., Супрунова Л.В. Изменение качественного состава белкового компонента семян подсолнечника в зависимости от генотипических и фенотипических факторов. Мат. VII Междун. конф. по подсолнечнику. Краснодар, ВНИИМК, 1978, с.445-448.

22. Бородулина A.A. Супрунова Л.В. Изменение состава белкового комплекса у семян подсолнечника//Вестн.с.х. науки, 1977, №2,с.29-32.

23. Вавилов Н.И. Линневский вид как система//Тр.прикл.бот.ген.сел., 1931, т.26, вып.З, с.109-134.

24. Вайнтрауб И.А., Шутов А.Д. Молекулярный вес субъединиц IIS белка семян сои//Биохимия, 1971, т.36, вып.5б, с. 1086-1088.

25. Вееке Б. Принципы, оборудование, реактивы и процессы. В кн.: Руководство по количественному иммуноэлектрофорезу. М.: Мир, 1977, с. 11-42.

26. Гаврилова В.А. Результаты межвидовой гибридизации культурного и многолетних дикорастущих видов подсолнечника. В сб.: Проблемы интродукции растений и отдалённой гибридизации. Тез.докл. Междун.конф., М., ГБС, 1998, с.292-294.

27. Гаврилюк И.П. Иммунохимия запасных глобулинов семян двудольных растений. Автореф. докт. дисс., М., 1986, 52с.

28. Гаврилюк И.П., Губарева Н.К., Конарев В.Г. Выделение, фракционирование и идентификация белков, используемых в геномном анализе культурных растений//Тр.прикл.бот.ген.сел. ВНИИ растениевод., 1973, т.52, вып. 1, с.249-281.

29. Гаврилюк И.П., Лизгунова Т.В., Конарев В.Г. Геномный анализ некоторых видов рода Brassica L. по белкам семян//Тр.прикл.бот.ген.сел., 1983, т.81, с.3-7.

30. ЗГГундаев А.И. Основные принципы селекции подсолнечника. В кн.: Генетические основы селекции растений. М., "Наука", 1971, с.417-465.

31. Гусев А.И., Цветков B.C. К технике постановки реакции преципитации в агаре//Лабораторное дело, 1961, №2, с.43-46.

32. Демурин Я.Н. Параметры фенотипического варьирования общего содержания токоферолов в отдельных семенах подсолнечника//Науч.-техн.бюл. ВНИИ маслич.культур, 1984, вып.846, с.51-54.

33. Демурин Я.Н. Генетический анализ состава токоферолов в семенах подсолнечника. Автореф.канд.дис., ВИР, Л., 1988, 12с.

34. Демурин Я.Н., Толмачев В.В. Наследование некоторых признаков у подсолнечника. В кн: Вопросы прикладной физиологии и генетики масличных растений. Краснодар, ВНИИМК, 1986, с. 14-19.

35. Дублянская Н.В., Супрунова Л.В. Содержание протеина в семенах высокомасличных сортов подсолнечника//Вестник с.-х.науки, 1969, №9.

36. Дьяков А.Б. Особенности средовой ковариации продуктивности подсолнечника с масличностью и белковостью семян//Науч.-тех.бюл.ВНИИ маслич.культур, 1984, вып.86, с.29-33.

37. Егги Э.Э., Гаврилюк И.П. Иммунохймическая специфичность субъединиц и полипептидов легумина/УБиохимия, 1985, т.50, №10, с. 1599-1606.

38. Есаев А.Л. Генетический контроль короткостебельности у некоторых инбредных линий культурного подсолнечника. Автореф. канд. дисс., С.-Петербург, ВИР, 1998, 23 с.

39. Ефремов А.Е. Особенности морфологии и цитоэмбриологии тетраплоидного подсолнечника//Генетика, 1967, т. 11, с.31-36.

40. Иванова Д.И. Идентификация генома А у представителей рода Oryza L. по белкам зерновки (по данным иммунохимического анализа)//Вестн. с.х. науки, 1980, №9, с.63-66.

41. Конарев В.Г. Принцип белковых маркёров в геномном анализе и сортовой идентификации пшеницы/ЛГр.прикл.бот.ген.сел. ВНИИ растениевод., 1973, т.49, вып.З, с.46-58.

42. Конарев В.Г. Белки растений как генетические маркёры. М.:Колос, 1983, 319с.

43. Конарев В.Г. Белковые маркёры в сортовой идентификации генетических ресурсов культурных растений// Тр. прикл. бот. ген. сел. ВНИИ растениевод., 1987, т. 114, с.3-14.

44. Конарев В.Г. Проблемы современной биологии и селекции. В кн.: Теоретические основы селекции (под ред.В.Г.Конарева). Т.1, М.:Колос, 1993, с.7-27.

45. Конарев В.Г., Гаврилюк И.П., Губарева Н.К. Полиморфизм глиадина и его использование в идентификации сортов и регистрации генетических ресурсов пшеницы и других злаков//Вестник с.х. науки, 1977, №7, с.84-94.

46. Копусь М.М., Перерева Т.П., Мокрушина Н.И. Спонтанный мутант компонентного состава глиадина «полупустой» гель. В кн.: Селекция и семеноводство зерновых культур. Саратов, 1986, с.58-59.

47. Лесневич Л.А., Борисюк В.А., Болелова З.А. Значение белков как генетических маркёров при идентификации геномов свеклы. В кн.: Цитогенет. и цитоэмбриол. исслед. в селекции свеклы. Киев, 1988, с.89-97.

48. Лесневич Л.А., Зайцева Л.Н., Гаврилюк И.П., Конарев В.Г. Запасные глобулины семян свеклы//Физиол. и биохимия культ, раст., 1988, т.20, №6, с.592-597.

49. Лисицын Е.М. Полиморфизм глобулинов семян у сортов сахарной свеклы//Докл. ВАСХНИЛ, 1988, №12, с.7-9.

50. Лоскутов A.B., Боровкова И.Г., Боровков А.Ю. Генетический анализ изоферментных вариантов подсолнечника//Бюлл. ВНИИМК, 1988, т.4, №103, с.22-29.

51. Пенева Т.И., Мигушова Э.Ф. Структура генома S(B) эгилопсов группы Sitopsis по данным электрофоретического и иммунохимического анализа глиадинов//Тр.прикл.бот.ген.сел. ВНИИ растениевод., 1973, т.52, вып.1, с.178-192.

52. Полякова Е.В. Нуль-аллели генов, контролирующих синтез ферментов: распространение в природе и биологическое значение//Успехи совр. биологии, 1991, т.Ш, вып.З., с.339-352.

53. Подсолнечник. Под ред.акад.В.С.Пустовойта.М.:Колос, 1975, 592с.

54. Рахманкулов С., Абидов Р., Юлдашев А., Сыдык-Ходжаева Л.А. Полиморфизм и фракционный состав легкорастворимых белков семян хлопчатника//Физиол. и биохимия культ, раст., 1990, т.22, №3, с.300-304.

55. Рокицкий П.Ф. Введение в статистическую генетику. Минск, Вышейшая школа, 1974, 447с.

56. Свендсен Ю. Слитный ракетный иммуноэлектрофорез. В кн.: Руководство по количественному иммуноэлектрофорезу. М, Мир, 1977, с.81-91.

57. Стоянова Й., Иванов П.И. Наследоване съдържанито на масло и протеин при слнъчогледав FiZ/Растен.Науки, 1975, т. 12, №9, с.30-35.

58. Тюрина Ж.П., Клименко В.Г. Исследования белков и их аминокислотного состава семян жмыха подсолнечника//Изв. АН СССР, Сер.Биол.и хим. наук, 1978, т.1.

59. Фадеева Т.С., Соснихина С.П., Иркаева Н.М. Сравнительная генетика растений. Д.: Изд.ЛГУ, 1980, 248с.

60. Федоренко Т.С. Морфология хромосом Helianthus tomentosus Michx.Z/Бюлл. Науч.-техн. информации по масличным культурам, 1975, вып.З, с. 18-21.

61. Хакимова А.Г., Гаврилюк И.П. Компонентный и антигенный состав глиадина разных представителей Ac.squarrosa L.//Tp. по прикл бот., ген. и сел. ВНИИ растениевод., 1973, т.52, вып.1, с. 178-192.

62. Чмелёва З.В., Анисимова И.Н. Качественная характеристика 2S альбуминов семян подсолнечника//Докл.РАСХН, 1995, № 5, с. 11-13.

63. Чмелёва З.В., Захарова Н.С., Анащенко А.В. Характеристика коллекции подсолнечника по содержанию белка, незаменимых аминокислот и масла в ядре//Тр.по прикл.бот.,ген. и сел. ВНИИ растениевод., 1981, т.70, вып.2, с. 120-128.

64. Щербаков В.Г., Артемьева Н.К., Иваницкий С.Б., Минакова А.Д. Качественные характеристики белкового комплекса семян подсолнечника //Изв.Вузов, Пищ.Технол., 1984, с. 13-15.

65. Щибря Н.А. Межвидовая гибридизация в роде Helianthus Ь.//Изв. АН СССР. Сер. Биол., 1938, №3, с.733.

66. Akazawa Т., Hara-Nishimura Topographic aspects of biosynthesis, extracellular secretion and intracellular storage of proteins in plant cells//Ann. Rev. Plant Physiol., 1985, Vol.36, pp.441-472.

67. Allen R.D., Bernier F., Lessard P.A., Beachy R.N. Nuclear factors interact with a soybean p -conglycinin enhancer//Plant Cell, 1989, Yol.l, pp.623-631.

68. Allen R.D., Cohen E.A., Yonder Haar R.A., Adams C.A., Ma D.P., Nessler C.L., Thomas T.L. Sequence and expression of a gene encoding an albumin storage protein in sunflower//Mol. Gen.Genet., 1987, Vol.210, pp.211-218.

69. Allen R.D., Nessler C.L., Thomas T.L. Developmental expression of sunflower IIS storage protein genes//Plant Mol.Biol., 1985, Vol.5, pp. 165-173.

70. Altenbach S.B., Pearson K.W., Leung F.W. and Sun S.S.M. Cloning and sequence analysis of a cDNA encoding a Brasil nut protein exceptionally rich in methionine//Plant Molecular Biology, 1987, Vol.8, pp.239-250.

71. Ampe C., Van Damme J., Castro L.A.B., Sampaio M.J.A., Van Montagu M., Vandekerckhove J. The amino-acid sequence of the 2S sulphur-rich priteins from seeds of Brazil nut (Bertholletia excelsa H.B.K.)//Eur.J.Biochem., 1986, Vol.159, pp.597-604.

72. Anisimova I.N. Seed proteins as markers in Helianthus. In: P.D.S.Caligari and D.J.Hind (Eds) Compositae: Biology and Utilization. Proc.Int.Compositae Conf., Kew, 1994 (Hind D.J.N., Editor-in-chief), Royal Botanic Gardens, Kew, 1996, Vol.2, pp.627-641.

73. Anisimova I., Gavrilova V., Loskutov A. and Tolmachev V. Identification of gene loci encoding for 1 IS globulin of sunflower seed. Proc. 14th Int. Sunflower Conf., 1996, (Beijing, China, June 1996).

74. Anisimova I.N., R.J.Fido, A.S.Tatham, P.R.Shewry. Genotypic variation and polymorphism of 2S albumins of sunflower//Euphytica, 1995, Vol.83, pp. 15-23.

75. Anisimova I.N., R.J.Fido, A.S.Tatham, P.R.Shewry. Heterogeneity and polymorphism of sunflower seed 2S albumins//Biotech. and Biotech. Eq., 1994, No.7, pp.46-51.

76. Anisimova I.N., J.Georgieva-Todorova, R.Vassileva. Variability of helianthinin, the major seed globulin in the genus Helianthus!/Helia, Int. Sci. Bull, on Sunflower, 1993, Vol.16, No. 18, pp.49-58.

77. Anisimova I.N., Gavriljuk I.P., Konarev V.G. Identification of sunflower lines and varieties by helianthinin electrophoresis//Plant Varieties and Seeds, 1991, No.4, pp.133-141.

78. Anisimova I.N., R.J.Fido, A.S.Tatham, P.R.Shewry. Purification and characterization of 2S albumins from sunflower seed. In: EUCARPIA Symp. On Breeding of Oil and Protein Crops (22.09.-24.09.1994, Albena, Bulgaria), pp. 197-201.

79. Anashchenko A.V. Gene pool of sunflower and its utilization in breeding. In: Proc. Eucarpia Symp.Sunflower Breeding, 1981, Prague, pp. 122-137.

80. Anderson R.L. The evolution of world oilseed production and trade. 1992, Australian Oilseeds Federation Forum, Sydney, 27 pp.

81. Arias D.M. Rieseberg. Genetic relationships among domesticated and wild sunflowers (.Helianthus annuus, Asteraceae)//Econ.Bot., 1995, Vol.49, No.3, pp.239-248.

82. Arnaud J. Plante selection. Cahier technique tournesol. 1986, CETIOM, Paris, pp. 1-28.

83. Ashari S., Aspinall D., Sedgley M. Identification and investigation of relationships of mandarin types using isozyme analysis//Scientia Horticulturae, 1989, Vol.40, pp.305-315.

84. Badley R.A., Atkinson D., Hauser H., Oldam D., Green J.P., Stubbs J.M. The structure, physical and chemical properties of the soybean protein glycinin// Biochim.Biophys.Acta, 1975, Vol.412, pp.214-228.

85. Bassuner R., Manteuffel R., Muntz K., Puchel M., Schmidt P., Weber E. Analysis of in vivo and in vitro globulin formation during cotyledon development of field bean (Vicia faba L. var. Minor)/iBiochem. Physiol. Pflanz., 1983, Vol.178, pp.665-684.

86. Baudet J., Mosse J. Fractionation of sunflower seed//J. Amer. Oil Chem.Soc., 1977, Vol.54, pp.82A-86A.

87. Baumlein H., Pustell J., Wobus U., Kafatos F.C. The legumin gene family: Structure of a B type gene of Vicia faba and a possible legumin gene specific regulatory element//Nucl. Acids Res., 1986, Vol.14, pp.2707-2720.

88. Bazan O., Blanchard Ph., Brunei D., Vincourt P. Genetic distances between sunflower populations. 12th Int.Sunflower Conf., Novi Sad, Yugoslavia, 1988, pp.478-483.

89. Beachy R.N., Jarvis N.P., Barton K.A. Biosynthesis of subunits of the soybean 7S storage protein//J. Mol.Appl.Genet., 1981, Vol.1, pp. 19-27.

90. Beachy R.M., Chen Z.L., Horsch R.B., Rogers S.G., Hoffman N.J., Fraley R.T. Accumulation and assembly of soybean j3-conglicinin in seeds of transformed petunia plants//EMBO J., 1985, Vol.4, pp.3047-3053

91. Behlke J., Schwenke K.D. Determination of molecular weight in 11S-7S association-dissociation system of sunflower globulin//Studia Biophysica, 1976, Vol.59, No. 1,pp.55-60.

92. Benner M.S., Phillips R.L., Kihara J.A.,Messing J.W. Genetic analysis of methionine rich storage protein accumulation in maize//Theor.Appl.Genet., 1989, Vol.78, pp.761-767.

93. Bentham G. Notes on the classification, history and geographical distribution of Compositae//J. Linn. Soc., Bot., 1873, Vol.13, pp.335-582.

94. Berry S.T., Allen R.J., Barnes S.R., Caligari P.D.S. Molecular marker analysis of Helianthus annuus L. 1. Restriction fragment length polymorphism between inbred lines of cultivated sunflower//Theor.Appl.Genet., 1994, Vol.89, pp.435441.

95. Berry S.T., Leon A.J., Hanfrey C.C., Challis P., Burkholz A., Barnes S.R., Ruflner G.K., Lee M., Caligari P.D.S. Molecular marker analysis of

96. Helianthus annuus L. 2. Construction of a RFLP linkage map for cultivated sunflower/VTheor.Appl.Genet., 1995, Vol.91, pp. 195-199.

97. Beyermann B., Nurnberg P., Weihe A., Meixner M., Epplen J.T., Borner T. Fingerprinting plant genomes with oligonucleotide probes specific for simple repetitive DNA sequences//Theor.Appl.Genet., 1992, Vol.83, pp.691-704.

98. Bietz J.A., Burnouf T. Chromosomal control of wheat gliadin: analysis by reversed-phase high-performance liquid chromatography//Theor.Appl.Genet., 1985, Vol.70, pp.599-609.

99. Bliss F.L.A, Brown J.W.S. Genetic control of phaseolin protein expression in seeds of common bean, Phaseolus vulgaris L.//Qual.plant.Plant Foods Human Nutr., 1982, Vol.31, No.3, pp.269-279.

100. Bogue M.A., Vonder Haar R.A., Nuccio M.L., Griffmg L.R., Thomas T.L. Developmentally regulated expression of a sunflower 1 IS seed protein gene in transgenic tobacco//Mol.Gen.Genet., 1990, Vol.220, pp.49-57.

101. Bollini R., Chrispeels M.J. The rough endoplasmic reticulum is the site of reserve protein synthesis in developing Phaseolus vulgaris cotyedons//Planta, 1979, Vol.146, pp.487-501.

102. Bollini R., Vitale A., Chrispeels M.J. In vivo and in vitro processing of seed reserve protein in the endoplasmic reticulum: evidence for two glycosylation//J. Cell. Biol., 1983, Vol.96, pp.999-1007.

103. Borroto K., Dure L.III. The globulin seed storage proteins of flowering plants are derived from two ancestral genes//Plant Mol.Biol., 1987, Vol.8, pp.113-131.

104. Bown D., Levasseur M., Croy R.R.D., Boulter D., Gatehouse J.A. Sequence of a pseudogene in the legumin gene family of pea (Pisum sativum L.)//Nucl. Acids Res., 1985, Vol.13, No.12, pp.4527-4538.

105. Brahm L., Friedt W. Identifizierung von RAPD-Fragmenten mit Kopplung an die Resistenz gegen den Falschen Mehltau (Rasse 2) der Sonnenblume. Votr. Pflanzenzuchtg, 1996, Vol.32, pp. 106-108.

106. Brahm L., Rocher T., Horn R., Prufe M., Friedt W. Mapping downy mildew resistance in sunflower//Abstracts XV EUCARPIA 1998 General Congress "Genetics and Breeding for Crop Quality and Resistance", Sept. 20-25 1998, Viterbo, Italy, p.7.

107. Bremers K. Asteraceae: cladistics and classification. Portland, Or: Timber Press, 1994, 752pp.

108. Brinegar C., Goundan S. Isolation and characterization of chenopodin, the 1 IS seed storage protein of quineoa (Chenopoium quinoa)l/J. Agric. Food Chem., 1993, Vol.41, pp.182-185.

109. Brown J.W.S., Bliss F.A., Hall T.C. Linkage relationships between genes controlling seed proteins in French bean//Theor.Appl.Genet., 1981, Vol.60, No.4, pp.251-255.

110. Brown J.W.S., Osborn T.C., Bliss F.A., Hall T.C. Genetic variation in the subunits of the globulin-2 and albumin seed proteins of French bean //Theor.Appl.Genet, 1981, Vol.60, pp.245-251.

111. Brown J.V.S., Ma Y., Bliss F.A., Hall T.C. Genetic variation in the subunits of globulin-1 storage proteins of French Bean//Theor.Appl.Genet., 1981, Vol.59, pp.83-88.

112. Brown J.W.S., McFerson J.R., Bliss F.A., Hall T.C. Genetic divergence among commercial classes of Phaseolus vulgaris in relation to phaseolin pattern//Hort. Sci., 1982, Vol.17, No.5, pp.752-754.

113. Brunei D. A microsatellite marker of Helianthus annuus L.//Plant Mol.Biol., 1994, Vol.24, pp.397-400.

114. Brunel D Denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and direct sequencing of PCR amplified genomic DNA: rapid and reliable identification of Helianthus annuus L. cultivars//Seed Sci., 1994, Vol.22, pp. 185-194.

115. Burnouf T., Bietz J.A. Chromatograph control of glutenin subunits in aneuploid lines of wheat: analysis by reversed-phase high-performance liquid chromatography//Theor.Appl.Genet., 1985, Vol.70, No.6, pp.610-619.

116. Burnouf T., Bietz J. A. Reversed-phase high-performance liquid chromatography of glutenin, a disulfide-bonded protein of wheat endosperm//J.Chromatogr., 1984, Vol.299, pp. 185-199.

117. Buttrose M.S., Lott J.N.A. Inclusions in seed protein bodies in members of the Compositae and Anacardiaceae: comparison with other dicotyledonous families//Canad. J. Bot., 1977, Vol.56, pp.2062-2071.

118. Cannella W. Whipping properties of sunflower protein dispersions//Food Sci. Technol. (London), 1978, Vol.14, pp.259-261.

119. Casey R. Genetic variability in the structure of the J3 -subumit of legumin from Pisum a two-dimensional gel electrophoresis study//Heredity, 1979, Vol.43, No.2, pp.265-272.

120. Casey R., March J.F., Sanger E. N-terminal amino acid sequence of a-subumit of legumin from Pisum sativum//Phytochemistry, 1981, Vol.20, p. 161-163.

121. Casey R. The genetics of pea seed storage proteins//Qual. plant. Plant Foods Human Nutr., 1982, Vol.31, No.3, pp.281-195.

122. Casey R., Domoney C. The genetics of legume storage proteins//Phil. Trans. Roy. Soc. London, 1984, B304, No.l 120, pp.349-358.

123. Casey R., Domoney C. Variation in pea-seed storage proteins. In: Pea Crop, London e. a., 1985, pp.359-368.

124. Cauderon Y. Analyse cytogenetique d'hybrdes entre Helianthus tuberosus et H.annuus. Consequences en matiere de selection//Ann.Amelior.Plantes, 1965, Vol.15, No.2, pp.241-261.

125. Cazaux E., Serieys H., Lambert P., Sossey-Alaoui K., Tersac M., Berville A. Phenotypic and molecular analyses of sunflower xH.mollis interspecific crosses. In: Proc.l4th Int.Sunflower Conf., Beijing, China, 1996, pp.1093-1098.

126. Ceccarelli M., Jalistocco E., Damiani F. Isoenzyme arid protein patterns of Italian natural populations of Festuca/ZBasic Appl.Histochem., 1989, Vol.33, Suppl., p.27.

127. Chandler J.M., Jan C.C., Beard B.H. Chromosomal differentiation among the annual Helianthus species//Syst.Bot., 1986, Vol. 11, pp.354-371.

128. Chen Z.L., Pan N.S., Beachy R.N. A DNA sequence element that confers seed-specific enhancement to a constitutive promotor//EMBO Journ., 1988, Vol.7, pp.297-302.

129. Chlan C.A., Pyle J.B., Legocki A.B., Dure III.L. Developmental biochemistry of cottonseed embryogenesis and germination, XVIII, cDNA and amino acids sequences of members of the storage protein families//Plant Mol. Biol., 1986, Vol.7, pp.475-489.

130. Cho T.-J., Davies C.S., Fisher R.L., Turner N.E., Goldberg R.B., Nielsen N.C. Molecular characterization of an aberrant allele for the Gy3 glycinin gene: A chromosomal rearrangement//Plant Cell, 1989, Vol.1, No.3, pp.339-350.

131. Cho T.-J., Davies C.S., Nielsen N.C. Inheritance and organization of glycinin genes in soybean//Plant Cell, 1989, Vol.1, No.3, pp.329-337.

132. Choumane W., Heizmann P. Structure and variability of nuclear genes in the genus Helianthus//Theor. Appl. Genet., 1988, Vol.76, No.4, p.481-489.

133. Chrispeels M.J., Higgins T.J.V., Craig S., Spencer D. Role of the endoplasmic reticulum in the synthesis of reserve proteins and the kinetics of their transport to protein bodies in developing pea cotyledons//J.Cell Biol., 1982, Vol.93, pp.514.

134. Chrispeels M.J., Higgins T.J.V., Spencer D. Assembly of storage protein oligomers in the endoplasmic reticulum and processing of the polypeptides in the protein bodies of developing pea cotyledons//Journ.Ce!l Biol., 1982, Vol.93, pp.306-313.

135. Coates J.B., Mediros J.S., Jhanh V.H., Nielsen N.C. Characterization of the subunits of /?-conglycinin//Arch.Biochem.Biophys., 1985, Vol.243, pp. 184194.

136. Cockerell T.D.A. Hybrid sunflower//Amer.Naturalist, 1929, Vol.63, N 688, p.470.

137. Cockerell T.D.A. Hybrid perennial sunflowers//Bot.Gas., 1919, Vol.67, N 3, pp.264-266.

138. Croy R.R.D., Gatehouse J.A., Evans I.M., Boulter D. Characterization of the storage protein subunits synthesized in vitro by polyribosomes and RNA from developing pea (Visum sativum L.) I. Legumin//Planta, 1980, Vol. 148, pp.49-56.

139. Croy R.R.D., Lycett G.W., Gatehouse J.A., Yarwood 'J.N. Cloning and analysis of cDNAs encoding plant storage protein precursors//Nature (London), 1982, Vol.295, pp.76-79.

140. Croy R.R.D., Lycett G.W., Gatehouse J.A., Boulter D. Synthesis, cloning and sequence analysis of pea (Pisum sativum L.) storage protein specific cDNAs//Kulturpflanze, 1984, Vol.32, pp.S81-S97.

141. Dalgalarrondo M., Raymond J., Azanza J.L. Sunflower seed proteins: characterization and subunit composition of the globulin fraction //J.Exp.Botany, 1984, Vol.35, No. 160, pp. 1618-1628.

142. Dalgalarrondo M., Raymond J., Azanza J.L. Sunflower seed proteins: size and heterogeneity in subunits of the globulin fraction//Biochem, 1985, Vol.67, pp.629-632.

143. Daffa A.K.L., Das J.L., Biswas A.K. Electrophoretic characterization and evaluation of proteins in control and mutant lines of Nigella saizW/Cytologia, 1987, Vol.52, No.2, pp.317-322.

144. Davey R.A., Dudman W.F. The carbohydrate of storage glycoproteins from seeds of Pisum sativum: Characterization and distribution of component polypeptides//Aust.J.Plant Physiol., 1979, Vol.6, pp.435-447.

145. Davies C.S., Coatees J.B., Nielsen N.C. Inheritance and biochemical analysis of four electrophoretic variants of /? -conglycinin from soybean// Theor. Appl. Genet., 1985, Vol.71, No.2, p.351-358.

146. Davies D.R. The ra locus and legumin synthesis in Pisum sativum!fàiochem. Genet., 1980, Vol.18, No.l 1-12, pp.1207-1219.

147. Decherf-Hamey S., Mimouni B., Raymond J., Azanza J.L. Partial characterization of polypeptide components of sunflower (Helianthus annuus L.) seed albumin fraction//Die Nahrung, 1990, Vol.34, No.4, pp.387-398.

148. Derbyshire E., Wright D.J., Boulter D. Legumin and vicitin, storage protein of legume seeds//Phytochemistry, 1976, Vol.15, No.l, pp.3-24.

149. Domoney C., Casey R. Measurement of gene number for storage proteins in Pisum! fNucMc Acids Res., 1985, Vol.13, pp.687-699.

150. Domoney Claire, Ellis T.H. Noel, Davies D.Roy. Organization and mapping of legumin genes in Pisum/IMoland Gen.Genet., 1986, Vol.202, No.2, pp.280285.

151. Doyle J.J., Schuler M.A., Godette W.D., Lenger V., Beachy R.N., Slightom J.L. The glycosylated seed storage proteins of Glycine max and Phaseolus vulgaris. Structural homologies of genes and proteins//J.Biol.Chem., Vol.261, pp.9228-9238.

152. Durante M., Bernardi R., Lupi M.C., Pini S. Phaseolus coccineus storage proteins. II. Electrophoretic analysis and erythrocyte agglutinating activity in various cultivars//Plant Breed., 1989, Vol.102, No.l, pp.58-65.

153. Durante M., Bernardi R., Lupi M.C., Sabelli P. Characterization of Helianthus annuus L. storage proteins//J.Agric.Food Chem., 1989, Vol.37, pp.852-855.

154. Ellis T.H.N., Domoney C., Castleton J., Cheary W., Davies D.R. Vicilin genes of Pm/m//Mol.Gen.Genet., 1986, Vol.205, No.l, pp. 164-169.

155. Ericson M.L., Rodin J., Leman M., Glimelius K., Josefsson L.-G., Rask L. Structure of the rapesced 1.7S storage protein napin, and its precursor //Journ.of Biol.Chem., 1986, Vol.261, No.31, pp. 14576-14581.

156. Fambrini M., Vernieri P., Rocca M., Pugliesi C., Baroncelli S. ABA-deficient mutants in sunflower (Helianthus annuus L.)//Helia, 1995, Vol. 18, pp. 1 -24.

157. Fernandez-Martinez J., Alba E. Breeding for oil and meel quality in sunflower. In: Proc.Int.Symp.Sci.Biotechnol.Integral.sunflower Utiliz. (Alba E., Greco I., Eds.), Univ.Bary, Italy, pp.75-97.

158. Ferjani E., Perrault A., Ledoigt G. Precursor analysis and biosynthesis of sunflower globulin//Plant Physiol.Biochem., 1989, Vol.27, No.2, pp.315-322.

159. Friedt W., Gansmann M., Korell M. Improvement of sunflower oil quality. In: EUCARPIA Symp.Breed.Oil and Protein Crops (22.09-24.09.1994). Albena, Bulgaria, Inst.Wheat and Sunflower near General Toshevo, 1994, pp. 1-29.

160. Fukushima D. Structures of plant storage proteins and their functions//Food Rev.Int., 1991, No.7, pp.353-381.

161. Fukazawa C., Momma T., Hirano H., Harada K., Udaka K. Glycinin A3B4 mRNA. Cloning and sequencing of double-stranded cDNA complementary to a soybean storage protein//J.Biol.Chem., 1985, Vol.260, No.10, pp.6234-6239.

162. Gassman B. Preparation and application of vegetable proteins, especially proteins from sunflower seed, for human consumption. An approach//Nahrung, 1983, Vol.27, pp.351-369.

163. Gatehouse J.A., Bown D., Gilroy J., Levasseur M., Castleton J., Ellis T.H.N. Two genes encoding «minor» legumin polypeptides in pea (Pisum sativum L.) //Bioch.J., 1988, Vol.250, pp. 15-24.

164. Gatehouse J.A., Croy R.R.D., Boulter D. The synthesis and structure of pea storage proteins. In: CRC Crit.Rev.Plant, Scil, pp.287-314.

165. Gatehouse J. A., Croy R.R.D., Morton H., Tyler M., Boulter D. Characterization and subunit structure of the vicilin storage proteins of pea (Pisum sativum L.) //Eur. J.Biochem., 1981, Vol. 118, pp.627-633.

166. Gatehouse J.A., Evans I.M., Croy R.R.D. and Boulter D. Differential expression of genes during legume seed development//Phyl.Trans.Roy.Soc., 1986, B314, pp.367-384.

167. Gavrilova V.A., Yesaev A.L. The study of dwarf forms of sunflower in different climatic zones. Adaptation in Plant Breeding, XIV EUCARPIA Congress: Abstracts. Juvasckyla, Finland, 1995, p.78.

168. GavriIyuk I.P., Eggi E.E., Anisimova I.N., Farber S.P., Konarev V.G. The standard electrophoretic methods for cultivar identification of dicotyledons. Materials 24th Int.ISTA Congress, Denmark, 1995.

169. Gentzbittel L., Zhang G., Vear F., Berville A. and Nicolas P. Development of a consensuns linkage RFLP map of cultivated sunflower {Helianthus annuus L.)//Theor.Appl.Genet., 1995, Vol.90, pp. 1079-1086.

170. Georgieva-Todorova J. Interspecific hybridization in the genus Helianthus L./fL. Pflanzenzucht., 1984, Vol.93, p.265-279.

171. Georgieva-Todorova J., Hristova A. studies on several wild-growing Helianthus species//,ZioKJi.CXA HM.r.^HMHTpoBa, 1975, h.8, Bbin.4, c.51-55.

172. Gepts P., Bliss R.A. Phaseolin variability among wild and cultivated common beans {Phaseolus vulgaris) from Colombia//Econ.Bot., 1986, Vol.40, N 4, pp.469-478.

173. Gepts P., Bliss R.A. Dissemination pathways of common bean {Phaseolus vulgaris Fabaceae) deduced from Europe and Africa//Econ.Bot., 1988, Vol.42, pp.86-104.

174. Gepts P., Osborn T.C., Rashka K., Bliss R.A. Phaseolin protein variability in wild forms and landraces of the common bean {Phaseolus vulgaris L.): evidence for multiple centres of domestication//Econ.Bot., 1986, Vol.40, pp.451-468.

175. Geric I., Joksimovic J., Zlokolika H. Phenotypic and electrophoretic assessment of genetic purity in sunflower inbred lines. In: Proc.l2th Int.Sunflower Conf., Novi Sad, Jugoslavia, 1988, Vol.11, p.504.

176. Gheyasuddin S., Cater C.M., Mattil K.F. Effect of several variabiles on the extractibility of sunflower seed proteins//Journal of Science, 1970, Vol.35, pp.453-456.

177. Goldberg R.B. Regulation on plant gene expression//Phil.Trans.Roy.Soc. London, 1986, B314, No.l 166, pp.343-353.

178. Gonzalez C., Gaima C., Henriques-Gill N. Characterization and variability of seed storage protein subunits in Sophora japonica {Fabaceae)!ISilvae Genet., 1996, Vol.45, No.2-3, pp.64-75.

179. Greneche M., Cordon P. Isozymic variability and identification of sunflower cultivars//4th Int.ISTA symposium on the development and the application of new technologies foe varietal identification, 1990, Ames IOWA

180. Gueguen J., Popineau Y., Anisimova I.N., Fido R.J., Shewry P.R., Tatham A.S. Functionality of the 2S albumin seed storage proteins from sunflower {Helianthus annuus L.)//J.Agric.Food Chem., 1996, Vol.44, No.5, pp. 11841189.

181. Guerche P., De-Almeida E.R.P., Schwarztein M.A., Gander E., Krebbers E., Pelletier G. Expression of the 2S albumin from Bertholletia excelsa in Brassica napusllMol.Gen.Genetics, 1990, Vol.221, pp.306-314.

182. Hall T.C., McLeester R.C., Bliss F.A. Equal expression of the maternal and paternal alleles for the polypeptide subunits of the major storage protein of the bean Phaseolus vulgarus L.//Plant Physiol., 1977, Vol.59, pp.1122-1124.

183. Hara-Nishimura I. Introduction of a disulfide bond in proglobulin molecules during the 11S globulin biosynthesis in developing pumpkin cotyledons//J. Agric.Biol.Chem., Vol.51, No.7, pp.2007-2008.

184. Harada J.J., Barker S.J., Goldberg R.B. Soybean /? -conglycinin genes are clustered in several DNA regions and are regulated by transcriptional and posttranscriptional processes//Plant Cell, 1989, Vol.1, No.4, pp.415-425.

185. Heath J.D., Weldon R., Monnot C., Meinke D.W. Arabidopsis thaliana. Analysis of storage proteins in normal and aborted seeds from embryo-lethal mutants of Arabidopsis thaliana/IPlanta, 1986, Vol.169, No.3, pp.304-312.

186. Heim U., Schubert R., Baumlein H., Wobus U. The legumin gene family: structure and evolutionary implications of Vicia faba B-type genes and pseudogenes//Plant Mol. Biol., 1989, Vol.13, No.6, pp.653-664.

187. Heiser C.B.Jr. Registration of Indiana-I CMS sunflower germplasm//Crop Sci.,1982, Vol.22, p.1089.

188. Heiser C.B., Smith D.M. New chromosome numbers in Helianthus and related genera (Compositae)//Proc.lnd.Acad.ScL, 1955, Vol.64, pp.250-253.

189. Heiser C.B., Smith D.M. Species crosses in Helianthus: II. Polyploid species //Rhodora, 1964, Vol.66, No.768, pp.344-358.

190. Heiser C.B., Smith D.M., Clevenger S.B., Martin W.C. The North American Sunflowers (Helianthus)/IMQm.Torrey Bot.Club, 1969, Vol.22, No.3, 218 p.

191. Higgins T.J.V. Synthesis and regilation of major proteins in seeds//Annual Review of Plant Physiol., 1984, Vol.35, pp. 191-221.

192. Holm E.T., Breedon C.H. Comparison of the whippability of defatted meals from three hybrid varieties of sunflower seed//J.Food Sci., 1983, Vol.48, pp.1131-1134.

193. Huffman V.L., Lee C.K., Burns E.E. Selected functional properties of sunflower meal// J.Food Sci., 1975, Vol.40, pp.70-74.

194. Horstmann C. Specific subunit pairs of legumin from Vicia faball Biochemistry,1983, Vol.22, No.9, pp. 1861-1866.

195. Hynes M.J. Genetically controlled variants of storage protein in Pisum sativum//AusU.Bio\.S>cl, 1968, Vol.21, pp.827-829.

196. Iouras M., Patrascu M., Vasile C. A marker genes collection and RAPD markers for recessive branching in sunflower. Proc. Fourth European Conf. Sunflower Biotech., 1998, pp.

197. Iouras M., Stoenescu Fl. Studii de linkage la florea-soarelui//Probleme de Genet.Theor.si.Appl., 1982, Vol.14, pp. 145-153.

198. Ivanov P., Christov M. Cluster analysis classification of 60 accessions belonging to 23 Helianthus species according to their SDS-PAGE storage protein patterns//Proc.EUCARPIA Symp.Breed.Oil Protein Crops (Albena, Bulgaria, 1994), pp.213-218.

199. Jackson R.C. Cytotaxonomy of Helianthus ciliaris and related species of Southwestern U.S. and Mexico//Brittonia, 1963, Vol.15, No.3, pp.260-271.

200. Jackson R.C., Murray B.G. Colchicine induced quadrivalent formation in Helianthus: evidence of ancient polyploidy//Theor.Appl.Genet., 1983, Vol.64, pp.219-222.

201. Jan C.C., Vick B.A., Miller J.F., Kahler A.L., Butler E.T. Construction of an RFLP linkage map for cultivated sunflower//Theor.AppI.Genet., 1998, Vol.96, pp. 15-22.

202. Jansen R.K., Holsinger H.J., Palmer J.D. Phylogenetic analysis of chloroplast DNA restriction site data at hogher taxonomic levels: an example from the Asteraceae/l Evolution, 1990,

203. Jansen R.K., Palmer J.D. Phylogenetic implications of chloroplast DNA restriction site variation in the Mutisieae (Asteraceae)//AmerJ.Bot., 1988, Vol.75, No.5, pp.753-766.

204. Jensen U. Steps toward the natural system of the dicotyledon; serological characters//Aliso, 1991,Vol.3, No.l, pp.183-190.

205. Jensen U., Penner R. Investigation of serological determinants from single storage plant proteins//Biochem.Syst.Ecol., 1980, Vol.8, No.2, pp. 161-170.

206. Jofuku K.D., Okamuro J., Goldberg R.B. Interaction of an embryo DNA binding protein with a soybean lectin gene upstream region//Nature, 1987, No.328, pp.734-737.

207. Jofufku K.D., Schipper R.D., Goldberg R.B. A frameshift mutation prevents Kunitz trypsin inhibitor mRNA accumulaton in soybean embryos//Plant Cell, 1989, Vol.1, pp.427-435.

208. Joubert F.J. Sunflower seed proteins//Biochim.Biophys.Acta, 1955, Vol.16, pp.520-523.

209. Kabbaj A., Berville A. Cloning and mPNA transcription analysis of five developmentally regulated cDNA families in sunflower immature embryos// Helia, 1997, Vol.20, No.26, pp.1-16.

210. Kabirullah M., Wills R.B.H. Foaming properties of sunflower seed proteins//J.Food Sci.Technol., 1988, Vol.25, pp. 16-19.

211. Kahler A.L., Lay C.L. Genetics of electrophoretic variants in the annual sunflower//J.Hered., 1985, Vol.76, No.5. Pp.335-340.

212. Kim S.H., Kinsella J.E. Surface active properties of food proteins: Effects of progressive succinylation on film properties and foam stability of glycinin//J.Food Sci., 1987, No.52, pp. 1341-1343.

213. Kinsella J.E. Functional properties of proteins: possible relationships between structure and function in foams//Food Chem., 1981, Yol7., pp.273-288.

214. Kirihara J.A., Petri J.B., Messing J. Isolation and sequence of a gene encoding a methionine-rich 10-kDa zein protein from maize//Gene, 1988, Vol.71, pp.359-370.

215. Kitamura K., Kaizuma N. Mutant strains with low lvel of subunits of 7S globulin in soybean (Glycine Max Merr.)//Japan J.Breed., 1981, Vol.31, No.4, pp.353-359.

216. Kitamura K., Toyokawa K., Harada H. Polymorphism of glycinin in soybean seeds//Phytochemistry, 1980, Vol.19, No.8, pp.11841

217. Koenig R.L., Singh S.P., Gepts P. Novel phaseolin types in wild and cultivated common bean, 1990.

218. Koranyi P. Characterization and purity checking of sunflower (Helianthus annuus L.) lines and hybrids by protein monomer analysis. In: Biochemical identification of varieties (Materials III ISTA Symposium), Leningrad, VIR, 1987, pp.231-236.

219. Kortt A.A., Caldwell J.B. Sunflower 11S globulin, susceptibility to proteolytic cleavage of the subunits of native helianthinin during isolation: HPLC fractionation of the subunits//Phytochemistry, 1990a, Vol.29, No.5, pp. 13891396.

220. Kortt A.A., Caldwell J.B. Low molecular weight albumins from sunflower seed: identification of a methionine-rich albumin//Phytochemistry, 1990b, Vol.29, No.9, pp.2805-2810.

221. Kortt A.A., Caldwell J.B., Lilley G.G., Hjiggins T.J.V. Amino acid and cDNA sequences of a methionine-rich 2S protein from sunflower seed (Helianthus annuus L.)//Eur.J.Biochem., Vol.195, pp.329-334.

222. Kovacik A., Skaloud V., Sasek A. Some possibilities of the genetic interpretation of the electrophoretic study of the proteins of sunflower (Helianthus annuus L.)//Sci.Agric.Bohemosl., 1975, Vol.7, No.4, pp.301-311.

223. Krauter R., Steinmetz A., Freidt W. Efficient interspecific hybridization in the genus Helianthus via "embryo rescue" and characterization of the hybrids// Theor.Appl.Genet., 1991, Vol.82, pp.521-525.

224. Kreis M., Shewry P.R. Unusual features of protein structure and evolution//Bio-Essays, 1989, No. 10, pp.201-207.

225. Kreis M., Shewry P.R., Forde B.G., Forde J., Miftin B.J. Structure and evolution of seed storage proteins and their genes with particular reference to those of wheat, barley, and rye//Oxford Surv.Plant Mol.Cell Biol., 1985, Vol.2, pp.253-317.

226. Krishna T.G., Pawar S.E., Mitra R. Variation and inheritance of the arachin polypeptides of groundnut (Arachis hypogaea L.)//Theor.Appl.Genet., 1986, Vol.73, No.l, pp.82-87.

227. Krishna T.G., Mitra R. The probable genome donors to Arachis hypogaea L. based on arachin seed storage protein//Euphytica, 1988, Vol.37, No.l, pp.4752.

228. Ladin B.F., Doyle J.J., Beachy R.N. Molecular characterization of a deletion mutation affecting the a'-subunit of /3-conglycinin of soybean//J.Mol. Appl. Genet., 1984, Vol.2, No.4, pp.372-380.

229. Ladin B.F., Tierney M.L., Meinke D.W., Hosangadi P., Veith M., Beachy R.N. Developmental regulation of /3 -conglycinin in soybean axes and cotyledons// Plant Physiol., Vol.84, pp.35-41.

230. Ladizinsky G., Hymowitz T. Seed protein electrophoresis in taxonomic and evolutionary studies//Theor.Appl.Genet., 1979, Vol.54, pp. 145-151.

231. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4//Nature, 1970, Vol.227, No.5259, pp.680-685.

232. Lay C., Gerdes J., Kahler A., Whalen R. Inheritance and linkage of nine electrophoretic variants in Helianthus annuus L. 12th Int.Sunflower Conf., Novi Sad, Yugoslavia, 1988, p.411.

233. Leclercq P. Une sterilite male cytoplasmique chez le Tournesol//Ann. ameliorat. plantes, 1969, Vol.19, No.2, pp.99-106.

234. Laroche-Raynal M., Delseny M. Identification and characterization of mRNA for major storage proteins from radish//Eur.J.Biochem., 1986, Vol.157, No.2, pp.321-327.

235. Lawhon J.T., Cater C.M., Maffil F.K. A comparative study of the whipping potential of an extract from several oilseed flours//Cereal Sci.Today, 1972, Vol.17, pp.110-114.

236. Lei M.G., Tyrell D., Bassette R., Reeck G.R. Two-dimensional electrophoretic analysis of soybean proteins//J.Agric.Food Chem., 1983, Vol.31, pp.963-968.

237. LeIievre J.M., Oliveira L.O., Nielsen N.C. 5'-CATGCAT-3' elements modulate the expression of glycinin genes//Plant Physiol., 1992, Vol.98, pp.387-391.

238. Li W.-H., Luo C.C., Wu C.I. Evolution of DNA sequences. In: Molecular evolutionary genetics. MeJntre R.J. (Ed), Plenum Press, N.Y., 1985, pp. 1-94.

239. Lin M.J.Y., Humberts E.S., Sosulski F.W. Certain functional properties of sunflower meal products//J.Food Sci., 1974, Vol.39, pp.368-370.

240. Lioi L. Variation of the storage protein phaseolin in common bean (Phaseolus vulgaris L.) from the Mediterrenean area//Euphytica, 1989, Vol.44, No. 1-2, pp.151-155.

241. Loomis W.F., Gilpin M.E. Multigene families and vestigial sequences//Proc. Natl.Acad.Sci.USA, 1986, Vol.83, pp.2143-2147.

242. Lowry O.H., Resebreugh N.J., Farr A.L., Kandall R.S. Protein measurement with Folin phenol reagent//J.Biol.Chem., 1951, Vol.193, No.l, pp.256-275.

243. Luhs W., Freidt W. Non-food uses of vegetable oils and fatty acids. In: Designer Oilseed Crops (Murphy D.J., ed), VCH Press Ltd., 1994, pp.73-130.

244. Luczkiewicz T. Inheritance of some characters and properties in sunflower (Helianthus annuus L.)//Genet.Pol., 1975, Vol.16, No.2, pp.167-184.

245. Lusas E.W. Sunflower seed proteins. In: New Protein Foods (Altschul A.M., Wilke H.L., eds.), Academic Press, London, 1985, Vol.5, p.393.

246. Lycett G.W., Croy R.R.D., Shirast A.H., Boulter D. The complete nucleotide sequence of a legumin gene from pea (Pisum sativum L.)//Nucleic Acids Res., 1984, Vol.12, pp.4493-4505.

247. Lycett G.W., Croy R.R.D., Shrisat A.H., Richards D.M., Boulter D. The 5'-flanking regions of three pea legumin genes: comparison of the DNA sequences//Nucleic Acids Res., 1985,Vol. 13, No. 18, pp.6733-6743.

248. Lycett G.W., Delauncy A.J., Gatehouse J.A., Gilroy J., Croy R.R.D., Boulter D. The vicilin gene family of pea: a complete cDNA sequence for preprovicilin//Nucleic Acids Res., 1983, Vol.11, pp.2367-2380.

249. Lycett G.W., Delauncy A.J., Zhao W., Gatehouse J.A., Croy R.R.D., Boulter D. Two cDNA clones coding for the legumin protein of Pisum sativum L. contain sequence repeats//Plant Mol.Biol., Vol.3, pp.91-96.

250. Ma Y, Bliss F.A., Hall T.C. Peptide mapping reveals considerable sequence homology among the three polypeptide subunits of G1 storage protein from French been seed//Plant Physiol., Vol.66, pp.897-902.

251. Macas J., Weschke W., Baumlein H., Pitch U., Houben A., Wobus U., Schubert I. Localization of vicilin genes via polymerase chain reaction on microisolated field bean chromosomes//The Plant J., 1993, Vol.3, No.6, pp.883-886.

252. Maeda N., Smithies O. The evolution of miltigenic families: human haptoglobulin genes//Ann.Rev.Genet., 1986, Vol.20, pp.81-108.

253. Mahmoud S.H., Gatehouse J.A. Inheritance and mapping of vicilin storage protein genes in Pisum sativum L.//Heredity, 1984, Vol53, No. I, pp. 185-191.

254. Matta N.K., Gatehouse J.A. Inheritance and maping of storage protein genes in Pisum sativum L.//Heredity, 1982, Vol.48, No.3, pp.383-392.

255. Matta N.K., Gatehouse J.A., Boulter D. The structure of legumin of Vicia faba L. areappraisal//J.Exp.Bot., 1981a Vol.32, pp. 183-197.

256. MattaN.K., Gatehouse J.A., Boulter D. Subunit heterogeneity and structure of legumin of Pisum sativum L. a multidimensional gel electrophoresis study //J.Exp.Bot., 1981b Vol.32, pp. 1295-1307.

257. Materials of FAO Technical Consultation Meeting, Buchurest, Romania, 1995.

258. Morell M.K., Peakall R., Appels R., Preston L.R., Lloyd H.L. DNA profiling techniques for plant variety identification//Aust.J.Experiment.Agric., 1995, Vol.35, pp.807-819.

259. Morcillo J., Aberlenc-Bertossi F., Trouslot P., Hamon S., Duval Y. Characterization of 2S and 7S storage proteins in embryos of oil palm//Plant Science, 1997, Vol.122, pp.141-151.

260. Mori T., Utsumi S., Inaba H., Kitamura K., Harada K. Differences in sub unit composition of glycinin among soybean cultivars//J.Agric.Food Chem., 1981, Vol.29, No.l, pp.20-23.

261. Mouzeyar S., Roeckel-drevert P., Gentzbittel L., Philippon J., Tourvielle D., Vear F., Nicolas P. RFLP and RAPD mapping of the sunflower Pl\ locus for resistance to plasmopara halstedi race l//Theor.Appl.Genet., 1995, Vol.91, pp.733-737.

262. Muntz K., Baumlein H., Bassuner R., Manteufell R., Puckel M., Schmidt P. Wobus U. The regulation of biosynthesis and accumulation of storage proteins during plant seed development//Biochem.Physiol.Plflanzen, 1981, No. 176, pp.401-422.

263. Muntz K., Horstmann c., Schleisier B. Seed proteins and their genetics in Vicia faba L.//Biologisches Zentralblatt, 1986, Vol.105, pp. 107-120.

264. Negoro T., Momma T., Fukazawa C. A cDNA clone encoding a glycinin Aia subunit precursor of soybean//Nucl.Acids Res., 1985, Vol.13, No.18, pp.67196731.

265. Nielsen N.C., Dickinson C.D., Cho T.-J., Thanh Y.H., Scallon B.J., Fischer R.L., Sims T.L., Drews G.N., Goldberg R.B. Characterization of the glycinin gene family in soybean//Plant Cell, 1989, Vol.1, No.3, pp.313-328.

266. Osborne T.B., Campbell Proteis of the soy bean (Glycine hispida)HJ.Amer. Chem.Soc., 1898, Vol.20, pp.419-428.

267. Pang P.P., Pruitt R.E., Meyerowitz E.M., Molecular cloning, genomic organization, expression and evolution of 12S seed storage protein genes of Arabidopsis thalianal/Plant Mol.Biol., 1988, Vol.11, .No.6, pp.805-820.

268. Parrado J., Millan F., Hernandez-Pinzon I., Bautista J., Machado A. Characterization ofenzymatic sunflower protein hydrolysates//J.Agric.Food. Chem., 1993, Vol.41, pp. 1821-1825.

269. Pasgualini S., Lluch C., Antonielli M. Seed storage proteins in several genetic lines of Vicia faba//Plant Physiol.Biochem., 1991, Vol.29, No.5, pp.597-516.

270. Pedersen K., Argos P., Naravana S.Y.L., Larkins B.A. Sequence analysis and characterization of a maize gene encoding a high-sulfur zein protein of Mr 15,000//J.Biol.Chem., 1986, Vol.261, pp.6279-6284.

271. Philips R.L., McClure B.A., Elevated protein-bound methionine in seeds of a maize line resistant to lysine plus threonine//Cereal Chemistry, 1985, Vol.62, pp.213-218.

272. Plietz P., Damaschung G., Muller J.J., Schwenke K.D. The structure of 11S globulin from sunflower and rape seed. A small-angle X-ray scattering study//Eur.J.Biochem, 1983, Vol.130, pp.315-320.

273. Polignano G.B., Lioi L. Genetic analysis in polypeptide subunits of phaseolin, the major storage protein of Phaseolus vulgaris L.//Genet.Agr., 1985, Vol.39, No.2, pp.211-219.

274. Polignano G.B., Splendido R., Perrino P. Seed storage proteins diversity in faba bean (Vicia faba L) entries from Ethiopia and Afganistan//J.Genet.Breed., 1990, Vol.44, No. 1, pp.31-37.

275. Prufe H., Lazarescu E., Brahm L., Friedt W., Horn R. Genome mapping and positional cloning of the restorer gene Rfl in sunflower//Proc.Fourth European Conf.Sunflower Biotech. 1998, pp.44-45.

276. Przybylska J., Blixt S., Hurrich J. Comparative study of seed proteins in the genus Pz'swm.VI.Electrophoretic analysis of variation in the legumin fraction composition//Genet.Pol., 1983, Vol.24, No.l, pp.21-39.

277. Quillet M.C., Madjidian N., Griveau Y., Serieys H., Tersac M., Lotieux M., Berville A. Mapping genetic factors controlling pollen viability in an interspecific cross in Helianthus sect. Helianthus/nheov.Appl.Genet., 1995, Vol.91, pp.1195-1202.

278. Rafalsky J.A. Structure of wheat gamma-gliadin genes//Gene, 1986, Vol.43, pp.221-229.

279. Rahma E.H., Rao M.S.N. Isolation and characterization of the major protein fraction of sunflower seeds//J.Agric.Food Chem., 1981, Vol.29, No.3, pp.518521.

280. Rao R., Costa A., Croy R.R.D., Boulter D., Gatehouse J.A. Variation in polypeptides of the major albumin protein of pea (Pisum sativum L.): Inheritance and molecular analysis// Mol.Gen.Genet., 1989, Vol.219, pp.277281.

281. Rao R., Mogno M.R., Grillo M.S. Genetic studies and inheritance of seed storage protein of pea chromosome mutants//Gen.Manipulat.Plant Breed. Proc. 1st Symp., Berlin (West), Sept. 8-13, 1985. Berlin; New York, 1986, pp.77-79.

282. Rao R., Pernolett J.C. Pisum sativum seed globulins as biochemical markers for "wrinkled-smooth" seed character: comparison of genotypes through different protein extraction and electrophoretic procedures//Agronomie, 1981, Vol.1, No. 10, pp.909-916.

283. Raymond J., Inquello V., Azanza J.L. The seed proteins of sunflower: comparative studies of cultivars//Phytochemistry, 1991, Vol.30, No.9, pp.28492856.

284. Raymond J., Mimouni B., Azanza J.L. Variability in the 1 IS globulin fraction of seed storage proteins of Helianthus (Asteraceae)!/Plant Syst.Evol., 1994, Vol.193, No. 1/4, pp.69-79.

285. Reddy I.M., Narasinga Rao M.S. Physicochemical properties of gossypin (11S protein) and congossypin (7S) protein of glanded cottonseed//J.Agric.Food Chem., 1988, Vol.36, No.2, pp241-245.

286. Riesberg L.H., Choi H., Chan R., Spore C. Genomic map of a diploid hybrid species//Heredity, 1993, Vol.70, pp.285-293.

287. Rieseberg L.H., Seiler G. Molecular evidence and the origin and development of the domesticated sunflower (Helianthus annuus L.)//Econ.Bot., 1990, Vol.44 (3S), pp.79-91.

288. Rigby P.W.J., Burleigh J.R., Harley B.S. Gene duplication in experimental evolution//Nature, 1974, No.251, pp.200-204.

289. Rodin J., Rask L. Characterization of matteuccin, the 2.2S storage protein of the ostrich fern. Evolutionary relationship to angiosperm seed atorage proteins//Eur.J.Biochem., 1990, Vol.192, pp.101-107.

290. Rogers C.E., Thompson T.E., Seiler G.J. Sunflower species of the United States. National Sunflower Association, Bismark, ND, 1982, 75pp.

291. Romero L., Sun S.M., Mc Leester R.C., Bliss F.A., Hall T.C. Heritable variation in a polypeptide subunit of the major storage protein of the bean, Phaseolus vulgaris L.//Plant Physiol., 1975, Vol.56, No.6, pp.776-779.

292. Romero A.J., Yandell B.S., Bliss F.A. Bean arcelin. 1. Inheritance of a novel seed protein of Phaseolus vulgaris 1. and its effect on seed composition//Theor.Appl. Genet., 1986, Vol.72, No.l, pp. 123-128.

293. Romero A.J., Bliss F.A. Heritable variation in the phaseolin protein of nondomesticated common bean, Phaseolus vulgaris .//Theor.Appl.Genet., 1985, Vol.71, No.3, pp.478-480.

294. Ruso J., Fernandez-Martinez J. Inheriotance of trichome characteriistics in interspecific cross between cultivated sunflower and H.argophyllus T.&G.//Proc. Fourth European Sunflower Biotechnology Conference, 1998, p.74.

295. Ryan A.J., Royal C.L., Hutchinson J., Shaw C.H. Genomic sequence of a 12S seed storage protein from oilseed rape (Brassica napus c.v.Jet neuf)//Nucl.Acids Res., 1989, Vol.17, No.8, pp.35-84.

296. Sabir M.A., Sosulski F.W. Gel chromatography of sunflower proteins//J.Agr.Food Chem., 1973, Vol.21, No.6, pp.988-993.

297. Saiki R.K., Scharf S., Faloona F., Mullis K.B., Horn G.T., Erlich H.A., Arnheim N. Enzymatic amplification of /?-globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia//Science, 1985, Vol.230, pp. 1350-1354.

298. Salmanowicz B.P., Przybylska J. Comparative HPLC analysis of seed albumins from Vicia faba and V.kalokhensis (Fabaceae)!/Plant Syst.Evol., 1997, Vol.208, No. 1-2, pp. 1-9.

299. Sanlaville C., Jay M., Guard J. Utilisation des composes phenoliques pour le marquage de pools geniques de tournesol cultive//Agronomie, 1988, Vol.8, No.4, pp.341-345.

300. Savoy C.F. Peanut (Arachis hypogaea L.) seed protein characterisation and genotype sample classification using polyacrilamide gel electrophoresis//Biochem. Biophys. Res.Commun., 1976, Vol.68, pp.886-893.

301. Scallon B., Thanh V.H., Floener L.A., Nielsen N.C. Identification and characterization of cDNA clones encoding group-II glycinin subunits//Theor.Appl.Genet., 1985, Vol.70, No.5, pp.510-519.

302. Scalon R.J., Dickinson C.D., Nielsen N.C. Characterization of a null-allele of the Gy4 glycinin gene from soybean//Mol.Gen.Genet., 1987, Vol.208, No. 1-2, pp.107-113.

303. Schagger H., Von Jagow G. Tricine-sodium-dodecylsulfate-polyacrilamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa//Anal.Biochem., 1987, Vol.166, pp.386-399.

304. Scheidegger J. Immunoelectrophorese on agar gel//Inter. Arch. Allergy. Appl. Immunol., 1955, Vol.7, No. 103.

305. Schilling E.E., Heiser C.B. Infrageneric classification of Helianthus (Compositae)!I Taxon, 1981, Vol.30, No.2, pp.393-413.

306. Schleiser B. A gel electrophoretic study of the polypeptide structure of vicilin// Kulturpflanze, 1984, Vol.32, pp.223-225.

307. Scholz G., Manteuffel R., Müntz, Rudolph A. Low molecular weight polypeptides of vicilin from Vicia faba L are products of proteolytic breakdown//Eur.J.Biochem., 1983, Vol.132, pp.103-107.

308. Schuler M.A., Ladin B.F., Pollaco C., Freyer G., Beachy R.N. Structural sequences are conserved in the genes coding for the alpha, alpha and beta-subunits of the soybean 7S seed storage protein//Nucl.Acids Res., 1982, Vol.10, pp.8245-8261.

309. Schuler M.A., Schmitt E.S., Beachy R.N. Closely related families of genes code for the a, a' subunits of the soybean 7S storage protein complex//Nucl.Acids Res., 1982, Vol.10, No.24, pp.8225-8244.

310. Schwenke K.D., Schultz M., Linow K.J., Uhlig J., Franzke C.L. Uber Samenproteine.4.Mitt. Isolierung der globulin-hauptkomponente aus sonnenblumensamen//Nahrung, 1974, Vol.18, pp.709-719.

311. Schwenke K.D., Schultz M., Linow K.J. Isolierung und characterisierung des IIS globulins aus Sonnenblumensamen (Helianthus annuus L.)//Nahrung, 1975, Vol.19, No.9/10, pp.817-822.

312. Schwenke K.D., Kim Y.H., Kroll J., Lange E., Mieth G. Modification of the low-molecular weight basic albumin fraction from rapeseed (Brassica napus L.)by acetylation. Part 2. Selected functional properties//Nahrung, 1991, Vol.35, pp.293-301.

313. Schwenke K.D., Pahtz W., Linow K.J., Raab W., Schultz M. On seed proteins. Part II. Purification, chemical composition and some properties of the 11S globulin (helianthinin) in sunflower seed//Nahrung, 1979, Vol.23, No.3, pp.241-254.

314. Scofield S.R., Crouch M.L. Nucleotide sequence of a member of the napin storage protein family from Brassica napusllJ.Biol.Chem., 1987, Vol.262, pp. 12202-12208.

315. Seiler G.J. Utilization of wild sunflower species for the improvement of cultivated sunflower//Field Crops Research, 1992, Vol.30, pp. 195-230.

316. Seiler G.J. Dormancy and germination of wild Helianthus species. In: Hind D.J.K., Beentje H.J. (Eds) Compositae: systematics, biology, utilization (Proc.Int. Compositae Conf.Kew 1994 Vol.2) Royal Botanic Garden, Kew, UK, 1996, pp.213-222.

317. Sengupta C., Deluca V., Bailey D.S., Verma D.P.S. Post-transcriptional processing of 7S and 11S components of soybean storage proteins//Plant Mol.Biol., 1981, Vol.1, pp. 19-34.

318. Shah A., Stegemann H. Proteins of jojoba beans (Simmondsia chinensis), extraction and characterization by electrophoresis/^.Agron.Crop sci., 1983, Vol.152, pp.39-47.

319. Sharief F.S., Li S.-L. Amino acid sequence of small and large subunits of seed storage protein from Ricinus communis//J.Biol.Chem., 1982, Vol.257, No.24, pp. 14753-14759.

320. Shewry P.R., Parmar S., Field J.M. Two-dimensional electrophoresis of cereal prolamins: applications to biochemical and genetic analysis//Electrophoresis, 1988, Vol.9, pp.727-737.

321. Shotwell M.A., Larkins B.A. The biochemistry and molecular biology of seed storage proteins//Biochem.Plants: comprehensive treatise. Vol.15. San Diego etc., 1989, pp.297-345.

322. Simon A.E., Tenbarge K.M., Scofield S.R., Finkelstein R.R., Crouch M.L. Nucleotide sequence of a cDNA clone of Brassica napus I2S storage protein shows homology with legumin from Pisum sativum//Plant Mol.Biol., 1985, Vol.5, pp. 191-201.

323. Sims T.L., Goldberg R.B. The glycinin Gyi gene from soybean//Nucl. Acids Res., 1989, Vol.17, No.l 1,P.4386.

324. Skaloud V., Kovacik a. Survey on inheritance of sunflower characters which are conditioned by a small number of genes//Proc.8th Intern.Sunflower Conf., Minneapolis, USA, 1978, pp.490-496.

325. Slightom J.L., Drong R.F., Klassy R C., Hoffman L.M. Nucl.Acids Res., 1985, Vol.13, No. 18, pp.6483-6498.

326. Slightom J.L., Sun S.M., Hall. T.C. Complete nucleotide sequence of french bean storage protein gene: phaseolin//Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1983, Vol.80, pp.1897-1901.

327. Smith J.K. A review of the nutritional value of sunflower meal//Feedstuff, 1968, Vol.40, pp.20-25.

328. Smith J.S.C., Smith O.S. The description and assessment of distances between inbred lines of maize: I. The use of morphological traits as descriptors//Maydica, 1989, Vol.34, pp.141-150.

329. Smithies O., Powers P. Gene conversions and their relation to homologous chromosome pairing//Phil.Trans.Roy.Soc.London, 1986, B312, pp.291-302.

330. Sossey-Alaoi K., Serieys H. Tersac M., Lambert P., Schilling E., Griveau Y., Kaan F., Berville A. Evidence for several genomes in Helianthus/ITheor.Appl. Genet., 1998a, Vol. 97, pp.422-430.

331. Sossey-Alaoui K., Tersac M., Serieys H., Lambert P., Griveau Y., Kaan F., Berville A. Species relationships based on genome organization in Helianthus/IProc.Fourth European Conf.Sunflower.Biotech., 1998b, pp.27-28.

332. Sosulski F.W. Food uses of sunflower proteins//J.Am.Oil.Chem.Soc., 1979, Vol.56, pp.438-442.

333. Sosulski F.W., Sarwar G. Amino acid composition of oilseed meals and protein isolates//Can.Inst.Food Sci.Tech.J., 1973, Vol.6, No. 1, pp. 1-5.

334. Spena A., Viotti A., Pirrotta V. Two adjacent genomic zein sequences: structure, Organization and tissue-specific resctriction patterns//J.Mol.Biol., 1983, Vol.169, pp.799-811.

335. Staswick P.E., Nielsen N.C. Characterisation of soybean cultivars lacking certain glycinin subunits//Arch.Biochem.Biophys., 1982, Vol.223, p.l.

336. Suigimoto T., Momma M., Hashizume K., Saio K. Components of storage protein in hypocotyl-radicle axis of soybean seeds//Agric.Biol.Chem., 1987, Vol.51, pp.1231-1238.

337. Sullivan J.G., Bliss F.A. Genetic control of quantitative variation in phaseolin seed protein of common bean//J.Amer.Soc.Hort.Sci., 1983, Vol.108, N 5, pp.782-787.

338. Slightom J.L., Sun S.M., Hall. T.C. Complete nucleotide sequence of french bean storage protein gene: phaseolin//Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1983, Vol.80, pp. 1897-1901.

339. Smith J.K. A review of the nutritional value of sunflower meal//Feedstuff, 1968, Vol.40, pp.20-25.

340. Smith J.S.C., Smith O.S. The description and assessment of distances between inbred lines of maize: I.The use of morphological traits as descriptors//Maydica, 1989, Vol.34, pp.141-150.

341. Smithies O., Powers P. Gene conversions and their relation to homologous chromosome pairing//Phil.Trans.Roy.Soc.London, 1986, B312, pp.291-302.

342. Sossey-Alaoi K., Serieys H. Tersac M., Lambert P., Schilling E., Griveau Y., Kaan F., Berville A. Evidence for several genomes in Helianthusi'/Theor.Appl. Genet., 1998a, Vol. 97, pp.422-430.

343. Sossey-Alaoui K., Tersac M., Serieys H., Lambert P., Griveau Y., Kaan F., Berville A. Species relationships based on genome organization in Helianthusi I Proc.Fourth European Conf.Sunflower.Biotech., 1998b, pp.27-28.

344. Sosulski F.W. Food uses of sunflower proteins//J.Am.Oil.Chem.Soc., 1979, Vol.56, pp.438-442.

345. Sosulski F.W., Sarwar G. Amino acid composition of oilseed meals and protein isolates//Can.Inst.Food Sci.Tech.J., 1973, Vol.6, No.l, pp. 1-5.

346. Spena A., Viotti A., Pirrotta V. Two adjacent genomic zein sequences: structure, Organization and tissue-specific resctriction patterns//J.Mol.Biol., 1983, Vol.169, pp.799-811.

347. Staswick P.E., Nielsen N.C. Characterisation of soybean cultivars lacking certain glycinin subunits//Arch.Biochem.Biophys., 1982, Vol.223, p.l.

348. Suigimoto T., Momma M., Hashizume K., Saio K. Components of storage protein in hypocotyl-radicle axis of soybean seeds//Agric.Biol.Chem., 1987, Vol.51, pp.1231-1238.

349. Sullivan J.G., Bliss F.A. Genetic control of quantitative variation in phaseolin seed protein of common bean//J.Amer.Soc.Hort.Sci., 1983, Vol.108, N 5, pp.782-787.

350. Sun S.S.M., Leung F.W., Tomic J.C. Brazil nut (Bertolettia excelsa H.B.K.) proteins: fractionation, composition and identification of a sulphur-rich protein//J.Agric.Food Chem., 1987, Vol.35, pp.232-235.

351. Sykes G.E., Gayler K.R. Detection and characterization of a new ¡3 -conglycinin from soybean seeds//Arch.Biochem.Biophys., 1981, Vol.210, pp.525-530.

352. Szabo L. Kulso alaktani belyegek napraforgo (Helianthus annuus L.) fajtak (vonalak, hybridek) jellemzesere//Novenytermeles, 1980, Vol.29, No.3, pp.227233.

353. Takaiwa F., Kikuchi S., Oono K. A rice glutelin gene family a major type of glutelin mRNAs can be divided into two classes//Mol.Gen.Genet., 1987, Vol.208, pp. 15-22.

354. Tempeleman T.S., Stein D.B., Demaggio A.E. A gern spore storage protein is genetically similar to the 1.7S seed storage protein of Brassica napusI№\ochem. Genet., 1988, Vol.26, No.9-10, pp.595-603.

355. Terras F.R.G., Torekens S., Van Leuven F., Osborn R.W., Vanderkeyden J., Cammue B.P.A., Broekaert W.F. A new family of basic cysteine-rich plant antifungal proteins from Brassicaceae species//FEBS Letters, 1993, Vol.316, No.3, pp.233-240.

356. Thanh V.H., Shibasaki K. Beta-conglycinin from soybean proteins. Isolation and immunological and physicochemical properties of the monomeric forms//Biochim. Biophys.Acta, 1977, Vol.490, pp.370-384.

357. Thanh V.H., Shibasaki K. Heterogeneity of ¡3 -conglycinin//Biochim. Biophys. Acta, 1976, Vol.439, pp.326-338.

358. Thanh V.H., Shibasaki K. Major proteins of soybean seeds: subunit structure of/? -conglycinin//J.Agric.Food Chem., 1978, Vol.26, pp.692-695.

359. This P., Goffner D., Raynal M., Chartier Y., Delsney M Characterization of major storage proteins of sunflower and their accumulation//Plant Physiol.Biochem., 1988, Vol.26, pp. 125-132.

360. Thomson J.A., Schroeder H.E., Dudman W.F. Cotyledonary storage proteins in Pisum sativum. I. Molecular heterogeneity//Aust.J.Plant Physiol., 1978, Vol.5, pp.263-279.

361. Thomson J.A., Schroeder H.E. Cotyledonary storage proteins in Pisum sativum. II. Hereditary variation in components of the legumin and vicilin fraction//Aust.J.Plant Physiol., 1978, Vol.5, pp.281-294.

362. Tierney M.L., Bray E.A., Allen R.D., Ma Y., Drong R.F., Slightom J., Beachy R.N. Isolation and characterization of a genomic clone encoding the subunit of fl -conglycinin//Planta, 1987, Vol.172, No.3, pp.356-363.

363. Torres A.M. Genetics of sunflower alcohol dehydrohenase ADH2; nonlinkage to ADHi and ADH2 early alleles//Biochem.Genet., 1974, Vol.12, No.5, pp.385392.

364. Tucci M., Capparelli R., Costa A., Rao R. Molecular heterogeneity and genetics of Vicia faba seed storage proteins//Theor.Appl.Genet., 1991, Vol.81, pp.50-58.

365. Velockovic D., Vucelic-Radovic B., Bietz J., Huebner F. Analysis of soybean proteins by size-exclusion high performance liquid chromotography//Rev.Res. Work Fac.Agric., 1992, Vol.37, No.2, pp.117-122.

366. Voelker T.A., Moreno J., Chrispeels M.J. Expression analysis of a pseudogene in transgenic tobacco: a frameshift mutation prevents mRNA accumulation//Plant Cell, 1990, Vol.2, pp.255-261.

367. Voelker T.A., Staswick M.J., Chrispeels M.J. Molecular analysis of two phytogemagglutinin genes and their expression in Phaseolus vulgaris cv.Pinto, a lectin-deficient cultivar of the bean//EMBO J., 1986, Vol.5, pp.3075-3082.

368. Vonder Haar R.A., Allen R.D., Cohen E.A., Nessler C.L., Thomas T.L. Organization of the sunflower 11S storage protein gene family//Gene, 1988, Vol.74, pp.433-443.

369. Utsumi S., Mori T. Heterogeneity of broad bean legumin//Biochim.Biophys. Acta, 1980, Vol.621, pp.179-189.

370. Utsumi S., Yokoyama Z., Mori T. Comparative studies of subunit compositions of legumins from various cultivars of Vicia faba L. seeds//Agric. Biol.Chem., 1980, Vol.44, pp.595-601.

371. Utsumi S., Inaba H., Mori T. Heterogeneity of soybean glycinin //Phytochemistry, 1980, Vol.20, pp.585-589.

372. Utsumi S., Kim C.S., Kohno M.P.A. Polymorphism and expression of cDNAs encoding glycinin subunits//Agric.Biol.Chem., 1987, Vol.51, pp.3267

373. Walburg G., Larkins B.A. Oat seed globulin. Subunit characterization and demonstration of its synthesis as a precursor//Plant Physiol., 1983, Vol.72, pp.161-165.

374. Wallace R.S., Jansen R.K. Systematic implications of chloroplast DNA variation in the genus Microseris (Asteraceae: Lactuceae)H Systematic Botany, 1990, Vol.15, No.4, pp.606-616.

375. Watson E.E. Contribution to a monograph of the genus Helianthus L.//Papers Mich.Acad.Sci.Arts and Letters, 1929, Vol.9, pp.305-475.

376. Weshke W., Baumlein H., Wobus U. Nucleotide sequence of a field bean (Vicia faba var.minor) vicilin gene//Nucl.Acids Res., 1987, Vol.15, No.23, p. 10065.

377. Weschke W., Bassuner R., Van Hai N., Czihal A., Baumlein H., Wobus U. The structure of a Vicia faba vicilin gene//Biochem.Physiol.Pflanz., 1988, Vol.183, No.2-3, pp.233-242.

378. Whelan E.D.P. A new source of cytoplasmic male sterility in sunflower//Euphytica, 1980, Vol.29, pp.33-46.

379. Whelan E.D.P. Cytoplasmic male sterility in Helianthus giganteus hxH.annuus L. interspecific hybrids//Crop Sei., 1981, Vol.21, pp.855-858.

380. Wobus U., Baumlein H., Bassuner R., Heim U., Jing R., Mintz K., Panitz R., Saalbach G., Weschke W. Molecular characterization of Vicia faba storage protein specific DNA//Kulturpflanze, 1984, Vol.32, pp.117-126.

381. Wobus U., Baumlein H., Bassuner R., Jung R., Müntz K., Saalbach G. Analyse von zwei Legumin-Genfamilien der Ackerbohne (Vicia faba L.)//Acta Biotechnol., 1986, Vol.6, No.l, pp.40-41.

382. Wobus U., Baumlein H., Bassuner R., Gräfe R., Jung R., Müntz K., Saalbach G. Weschke W. Cloning and Characterizing Vicia faba seed storage protein genes//Biol.Zbl., 1986, Vol.105, No. 1-2, pp. 121-128.

383. Wolf W.J., Briggs D.R., Studies on the cold-insoluble fraction of the water-extractable soybean proteins. II. Factors influencing conformation changes in the 1 IS component//Arch.BiochemBiophys., 1958, Vol.76, pp.377-393.

384. Xu L.T., Xu M.L., Shen W., Zhuang N.L., Hu W.M., Shen S.C. Characterization of a Gy4 glycinin gene from soybean Glycine max cv. Forest //Plant Mol.Biol., 1992, Vol.18, No.5, pp.897-908.

385. Yagasaki K., Kaizuma N., Kitamura K. Inheritance of glycinin subunits and characterization of glycinin molecules lacking the sabunits in soybean {Glycine max L.) Merr.//Breed Sei., 1996, Vol.46, No.l, pp.11-15.

386. Yagasaki K., Takagi T., Sakai M., Kitamura K. Biochemical characterization of soybean protein consisting of different subunits of glycinin//J.Agric. Food Chem., 1997, Vol.45, pp.656-660.

387. Youle R.J., Huang A.H.C. Occurrence of low molecular weight and high cysteine containing albumin storage proteins in oilseeds of diverse species//Amer.J.Bot., 1981, Vol.68, No.l, pp.44-48.

388. Yu M.A., Damoderan S. Kinetics of déstabilisation of soy protein foams//J.Agric.Food Chem., 1991, Vol.39, pp.1563-1567.

389. Zhang Q., Saghai-Maroof M.A., Kleinfors A. Comparative diversity analysis of RFLPs and isozymes within and among populations of Hordeum vulgare ssp.spontaneuml ¡Genetics, 1993, Vol.134, pp.909-916.