Закономерности кариотипической изменчивости в клеточных культурах при длительном культивировании в разных условиях тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, доктор биологических наук Полянская, Галина Георгиевна

• Полянская, Галина Георгиевна
• доктор биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации доктор биологических наук Полянская, Галина Георгиевна

1. Введение.

2. Обзор литературы.

2.1. Цитогенетические процессы в клеточных популяциях in vivo.

2.1.1.Системный контроль цитогенетических процессов в клеточных популяциях in vivo.

2.1.2. Влияние экзогенных и эндогенных факторов на кариотипическую изменчивость в клеточных популяциях in vivo.

2.2. Кариотипическая изменчивость в клеточных популяциях in vitro.

2.2.1. Некоторые генетические и цитогенетические характеристики неиммортализованных клеточных культур и их изменения в процессе иммортализации.

2.2.2. Кариотипическая структура иммортализованных клеточных линий.

2.2.3. Некоторые закономерности кариотипической изменчивости, определяющие процесс стабилизации в клеточных популяциях in vitro.

2.2.4.0собенности кариотипической изменчивости в стабильных «маркерных» клеточных линиях при культивировании в разных условиях.

2.2.5.Особенности кариотипической изменчивости в стабильных «безмаркерных» клеточных линиях при культивировании в разных условиях.

2.2.6. Цели и задачи представляемой работы.

3. Материалы и методы.

3.1. Материалы.

3.2. Методы.

3.2.1. Культивирование клеток.

3.2.2 Получение клеточных гибридов.

3.2.3. Кариологический анализ.

3.2.4. Используемые в работе воздействия (факторы), изменяющие условия культивирования и способствующие кариотипической нестабильности.

3.2.5. Методы статистического анализа.

4. Результаты и обсуждение.

4.1. Влияние факторов, как правило присутствующих при длительном культивировании, на структурную кариотипическую изменчивость в «безмаркерных» клеточных линиях.

4.1.1. Влияние антибиотиков в «терапевтических» дозах на хромосомные аберраций в клеточных линиях фибробластов кожи индийского мунтжака.

4.1.2. Влияние криоконсервации на цитогенетические характеристики клеточной сублинии МТ.

4.1.3. Влияние сыворотки на хромосомные аберрации в клеточных линиях М и М1.

4.1.4. Исследование кариотипической изменчивости в процессе длительного культивирования в клеточных линиях N61.-3-11 и N61-3-17.

4.2. Исследование действия факторов, влияющих на жизнедеятельность клеток, на хромосомные аберрации в разных клеточных линиях при длительном культивировании.

4.2.1. Изменчивость хромосом мунтжака в гибридах соматических клеток.

4.2.2. Влияние микоплазменной контаминации клеточной линии М на хромосомные аберрации.

4.2.3. Влияние микоплазменной контаминации клеточных линий N61-3-11 и N61-3-17 на хромосомные аберрации.

4.2.4. Блияние микоплазменной контаминации клеточной линии лейомиосаркомы человека 8К-11Т-16 на хромосомные аберрации.

4.2.5. Блияние микоплазменной контаминации клеточной линии легкого эмбриона человека MRC-5 на хромосомные аберрации.

4.2.6. Влияние микоплазменной контаминации клеточных линий с маркерными хромосомами V-79 и М Hela clone на хромосомные аберрации.

4.2.7. Исследование влияния ципрофлоксацина на клеточные линии почки кенгуровой крысы NBL-3-11 и фибробласты кожи индийского мунтжака М.

4.2.8. Влияние внеклеточного белка теплового шока (в-БТШ70) на хромосомную изменчивость в клетках линии М.

4.2.9. Характерные черты дицентриков, возникающих в «безмаркерных» клеточных линиях в процессе культивирования в разных условиях.

4.3. Влияние факторов, как правило присутствующих при длительном культивировании, на количественную кариотипическую изменчивость в «безмаркерных» клеточных линиях.

4.3.1. Влияние разных культуральных сред на количественную кариотипическую изменчивость в сублинии почки кенгуровой крысы NBL-3-17.

4.3.2. Влияние антибиотиков в «терапевтических» дозах на количественную кариотипическую изменчивость в клеточных линиях М и МТ.

4.3.3. Влияние сыворотки на количественную кариотипическую изменчивость клеток М и Mi.

4.4. Исследование действия факторов, влияющих на жизнедеятельность клеток, на количественную кариотипическую изменчивость в разных клеточных линиях при длительном культивировании.

4.4.1. Влияние микоплазменной контаминации клеточной линии М на количественную кариотипическую изменчивость.

4.4.2. Влияние ципрофлоксацина на количественную кариотипическую изменчивость в клеточных линиях М и NBL-3

4.4.3. Влияние микоплазменной контаминации клеточных линий NBL-3-11 и NBL-3-17 на количественную кариотипическую изменчивость.

4.4.4. Влияние микоплазменной контаминации клеточной линии легкого китайского хомячка V-79 на количественную кариотипическую изменчивость.

4.4.5. Влияние микоплазменной контаминации клеточных линий человека - лейомиосаркомы SK-UT-1В и карциномы шейки матки М Hela clone 11 на количественную кариотипическую изменчивость.

4.4.6. Влияние микоплазменной контаминации клеточной линии легкого эмбриона человека MRC-5 на количественную кариотипическую изменчивость.

4.4.7. Количественная изменчивость хромосом мунтжака в гибридах соматических клеток.

4.5. Анализ закономерностей количественной кариотипической изменчивости на примере нескольких клеточных линий.

4.5.1. Особенности количественной изменчивости кариотипа в клеточной линии М.

4.5.2. Особенности количественной изменчивости кариотипа в клеточных сублиниях МТ и М2.

4.5.3. Особенности количественной изменчивости кариотипа в клеточной линии NBL-3-11 и клоновых популяциях клеток китайского хомячка.

4.5.4. Исследование количественной изменчивости кариотипа при индукции хромосомной нестабильности в культивируемых клетках фибробластов кожи индийского мунтжака.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Закономерности кариотипической изменчивости в клеточных культурах при длительном культивировании в разных условиях»

Тема представляемой работы - «Закономерности кариотипической изменчивости в клеточных культурах при длительном культивировании в разных условиях.

Работа посвящена поиску и исследованию закономерностей структурных и количественных кариотипических изменений и их взаимодействия преимущественно в популяциях иммортализованных клеточных линий, не имеющих в составе кариотипа маркерных хромосом, при длительном культивировании в разных условиях. В работе проведено сопоставление результатов по характеру кариотипической изменчивости в «безмаркерных» и «маркерных» клеточных линиях.

Кариотипическая изменчивость клеток имеет место как in vivo, так и in vitro. Кариотипическая изменчивость в большой степени обусловливает протекание эволюционных процессов в природе. Те же процессы, т.е. количественные и структурные изменения в кариотипе, могут вызывать наследственные болезни и развитие новообразований, в частности злокачественных. В практических биомедицинских исследованиях индукция кариотипических изменений является тестом на мутагенность и канцерогенность окружающей среды. Очевидно, что поиск и изучение закономерностей кариотипической изменчивости является актуальной проблемой современной клеточной биологии.

Клеточные популяции в организме и вне его находятся в разных условиях. Так, обеспечение нормальной жизнедеятельности организма достигается посредством сложных межклеточных и межтканевых взаимодействия на уровне генов и их продуктов (Бахтин, 1980; Албертс и др., 1994). Клеточные популяции в организме имеют преимущественно постоянный кариотип. Следовательно, должны быть механизмы, поддерживающие это постоянство. По мере усложнения организации живых систем в процессе филогенеза животных развиваются их интегральные системы - нервная, гормональная и иммунная. Цитогенетические процессы, к которым относится и кариотипическая изменчивость, находятся под контролем этих систем. Системный контроль осуществляется через внутриклеточный обмен веществ и является одним из проявлений положения о том, что изменение метаболических процессов, вызванное любым фактором, может явиться одной из причин возникновения мутаций (Керкис, 1940; Лобашев, 1947). Существование системного контроля ци-тогенетических процессов к настоящему времени подтверждено большим количеством экспериментальных фактов (Speight et al., 1968; Та-рабрин, 1970; Невструева, 1970; Керкис, Логвинова, 1963; Полянская, 1969,1970, 1971,1972; Цапыгина, 1971; Лобашев, 1973). Было высказано предположение, что одной из существенных функций нервной системы является регуляция состояния генетического аппарата по принципу обратной связи в соответствии с текущими нуждами организма, влиянием среды и индивидуального опыта. По-видимому, нервная система организует и запускает сложную иерархию регуляторных влияний на хромосомный аппарат. При этом используется многообразие сигнальных веществ, синтезируемых как в самих нервных элементах, так и в различных железах внутренней секреции, активируемых нервной системой. Это положение подтверждено многими исследованиями влияния стресса на цитогенетические процессы. Установлена связь между совокупностью цитогенетических характеристик и генетически детерминированным уровнем функционального состояния нервной системы, определяемым как ее возбудимостью, так и особенностями метаболизма вторичных посредников, а также параллелизм в реактивности на стресс генетического аппарата, гипоталамо - гипофизарно - адренокортикальной системы и системы перекисного окисления липидов (Дюжикова и др., 1997). По-видимому, нарушение внутриклеточного гомеостаза, вызванное мобилизацией иммунологических механизмов организма против чужеродных антигенных субстанций, может приводить к структурным нарушениям хромосом (Керкис, Спорова, 1971).

Тем не менее известно, что под влиянием различных экзогенных и эндогенных факторов кариотипические изменения с небольшой частотой в организме происходят. Поддержание определенного уровня кариотипической изменчивости осуществляет стабилизирующий отбор, который поддерживает превосходство нормы над нарушениями (Бахтин, 1980).

При переходе клеток в состояние in vitro нарушаются условия их существования. Основными типами клеточного взаимодействия в популяциях in vitro становятся физический контакт между клетками и связь через метаболиты в культуральной среде. Эти взаимодействия объединяют клетки, составляющие клеточную популяцию в единую автономную систему, поддерживаемую благодаря существованию между клетками «метаболической кооперации» (Subak - Sharpe et al.,1966; Сох et al., 1972; Терци, 1977; Албертси др., 1994).

Образование постоянных клеточных линий, т.е. приобретение ими свойства иммортализации, связано со многими генетическими и цитоге-нетическими изменениями в клеточных популяциях (Yerganian et al., 1962; Wolman et al., 1964, 1980; Moorhead, Saksela, 1965; Counter et al., 1992; Дункан, Реддел, 1997; Реддел и др., 1997; Reddel, 1998; Wang et al., 1998; Chin et al., 1999; Ducray, 1999). После иммортализации изменяются первоначальные функции клеток. Основной функцией становится пролиферация. Условия in vitro более вариабельны, чем in vivo, поэтому в клеточных популяциях происходит усиление полиморфизма по многим свойствам, в частности по кариотипической структуре. Кариотипическая гетерогенность в клеточных культурах значительно усиливается по сравнению с состоянием in vivo.

Несмотря на то, что при переходе клеток в состояние in vitro изменяются многие функции, свойственные клеткам в условиях организма, потенции клеток к воссозданию первоначальных свойств остаются, а в некоторых клеточных линиях ряд свойств сохраняется (Терци, 1977, Malpoix, Poljanskaya, 1979; Бахтин, 1980; Фридлянская, 1984; Турилова и др, 1998, 1999). Некоторые закономерности кариотипической изменчивости клеток в культуре также сходны с таковыми в условиях организма. Так, в опухолевых и лейкозных клеточных линиях сохраняются многие специфические хромосомные перестройки, свойственные клеткам в организме; наблюдается неслучайный характер численных и структурных изменений хромосом в линиях разного гистогенеза; для одного вида животных характерны сходные хромосомные нарушения в разных клеточных линиях; имеет место утрата одной из половых хромосом при длительном культивировании клеточных культур, аналогичное явление происходит в организме при старении и разных формах новообразований; имеет место сходный характер распределения по числу нормальных хромосом в клеточных популяциях в условиях in vivo и in vitro. (Hughes, 1968; Fitzgerald, McEwan, 1977; Ford, Russel., 1985; Hando et al., 1994; Catalan et al., 1995; Nath et al., 1995; Мамаева, 1996; Mamaeva, 1998).

Клеточная популяция in vitro как автономная система имеет и свои особенности по сравнению с организмом. Так, в клеточных культурах в отличие от организма наблюдается, как правило, постоянство числа, интенсивности серебрения и распределения по хромосомам Ад - позитивных ядрышковых организаторов, что позволяет идентифицировать любую клеточную линию. Известно, что характер серебрения отражает функциональную активность рибосомных генов.(Mamaev, Mamaeva, 1990). В процессе стабилизации постоянной клеточной линии устанавливается сбалансированная кариотипическая структура, которая выражается во-первых, в сохранении всего хромосомного материала, свойственного донору, во-вторых, в сохранении, как минимум, дисомии по всем аутосомам (Мамаева, 1996; Mamaeva, 1998). При анализе нескольких линий культивируемых клеток китайского хомячка показана кариотипическая сбалансированность, которая проявляется в наличии корреляции между изменением общего числа хромосом в клетках стволовой линии и соотношением хромосом разных размеров (Zacharov et al., 1964; Захаров и др., 1966). Сбалансированность генома клеточных линий проявляется также в сходстве их по количеству ДНК независимо от числа хромосом (Kraemer et al., 1972; Розанов и др., 1984).

Следует обратить внимание, что несмотря на существенную структурную и количественную перестройку кариотипа в постоянных клеточных линиях, не наблюдаемую в организме, состояния, к которым стремятся клетки в условиях in vitro, сходны с in vivo. А именно, с одной стороны, нижним пределом кариотипической изменчивости клеток в культуре, как правило, является состояние дисомии, подобно состоянию in vivo; наблюдается сохранение хромосомного материала, свойственного донору и сохранение постоянного количества ДНК независимо от количества хромосом. С другой стороны, у разных видов млекопитающих, различающихся по числу хромосом, не обнаружено существенных различий по содержанию ДНК (Оно, 1973). Следовательно, пути, с помощью которых клетка адаптируется к условиям вне организма, свойственны исключительно клеточным популяциям in vitro как автономным целостным системам, но тем не менее «след» организма имеет место.

Большинство клеточных линий на этапе стабилизации характеризуется наличием в кариотипе ряда постоянных маркерных хромосом. Меньшая часть известных постоянных клеточных линий в составе карио-типа не имеет таких хромосом. Кариотипы этих линий либо соответствуют донорам, либо отличаются от них количеством гомологичных хромосом. Причем среди «безмаркерных» линий есть как иммортализованные, незлокачественные так и высокозлокачественные (Shaw, Krooth, 1964; Wurster, Benirschke, 1970; Grewal et al., 1971; Brown, Cohen, 1973 а, 6; Chen, 1988, 1990; Полянская, 1988 а, б; Полянская, Фридлянская, 1991; АТСС, 1992). Таким образом, рассматривая кариотипические варианты постоянных клеточных линий, можно предположить, что основными элементами, по которым идет отбор при образовании иммортализованных клеточных линий, являются генные изменения, как структурные, так и эпигенетические. По-видимому, хромосомные аберрации - лишь инструмент, с помощью которого достигается необходимый для существования клеточной популяции генный баланс. Неважно сколько образовалось в кариотипе хромосом, важно, как в нем функционируют гены. Таким образом, при стабилизации постоянной клеточной линии должны существовать определенные ограничения кариотипической изменчивости, обуславливающие сбалансированную генетическую структуру. В настоящее время есть ряд данных, подтверждающих это предположение. Так, при сопоставлении гетерогенности кариотипов отдельных клеток китайского хомячка по числу и размерам хромосом с постоянством суммарного распределения хромосом клоновых популяций по содержанию ДНК показано, что происходят постоянно одни и те же перестройки хромосом (Филатов и др., 1988). При анализе взаимосвязи нормальных и маркерных хромосом в сублиниях HeLa показано, что взаимосвязаны между собой именно хромосомы, имеющие в своем составе общий хромосомный материал ( Мамаева и др., 1986). Еще одним подтверждением могут явиться ранее упомянутые работы Захарова с соавторами, где полученные ими результаты свидетельствуют о существовании ограничений по количественной кариотипической изменчивости, определяющей хромосомную сбалансированность в клеточных популяциях китайского хомячка in vitro (Zakharov et al., 1964; Захаров и др., 1966). По-видимому, существенной для клеточной популяции in vitro является доза функционирующих генов. Возможно, что определенные пределы количественной изменчивости отчасти и отражают это явление. Утверждение о существовании определенных ограничений в кариотипической изменчивости клеточных популяций in vitro несомненно требует расширения исследований по поиску закономерностей этих ограничений.

Как было отмечено выше, клеточные популяции in vitro представляют собой автономные системы, которые, достигнув стадии стабилизации, имеют устойчивые характеристики. Тем не менее, они представляют собой динамичные системы и вне организма, лишившись многоступенчатого организменного контроля, они в значительной степени подвержены влиянию внешних факторов. Под внешними факторами следует понимать как непосредственно те, что постоянно присутствуют при культивировании (культуральная среда, сыворотка, качество подложки в культуральной посуде, «терапевтические» дозы антибиотиков, используемые для микробной деконтаминации культур, условия криоконсерва-ции и т. д.), так и прочие, которые могут способствовать созданию неблагоприятных условий (бактериальная или микоплазменная контаминация, токсичные дозы антибиотиков и т. д.). В связи с этим в клеточных популяциях in vitro может усиливаться полиморфизм по некоторым признакам и, в частности, по кариотипическим характеристикам. Усиление же кариотипической нестабильности может способствовать изменению других свойств, присущих определенной клеточной линии.

Логично предположить, что если большинство постоянных клеточных линий имеет маркерные хромосомы, то такой путь установления нового генного баланса, достигаемого, например через эффект положения, и приспособленного к условиям in vitro, наиболее адекватен для клеточных популяций. Структура же «безмаркерных» клеточных линий отличается от донора только генными изменениями и анеуплоидией, что, возможно, обуславливает отличные от «маркерных» линий закономерности кариотипической изменчивости в процессе культивирования клеточных линий, находящихся на стадии стабилизации. Ряд немногочисленных данных литературы, рассмотренных ниже, поддерживает сделанное нами предположение относительно возможных особенностей «безмаркерных» линий.

Результаты по индукции хромосомной нестабильности в «безмаркерных» клеточных линиях немногочисленны. Так, исследованы кариотипическая изменчивость при длительном культивировании клеточной линии почки кенгуровой крысы и трансформированных вирусом SV 40 и avian sarcoma viruses первичных культур фибробластов кожи и почки индийского мунтжака, а также влияние родамина В при кратковременном действии на клеточную линию фибробластов кожи индийского мунтжака (Levan, 1970; Yuasa et al., 1978; Yamaguchi, Huh, 1979; Piliidge et ai., 1986 a,b; Lewis et al., 1981). Вывод, который мы сделали, рассмотрев эти результаты, сводится к следующему: 1.«Безмаркерность», наблюдаемая в некоторых клеточных линиях, явление неслучайное и обусловлено, по-видимому, свойствами генотипа этих клеток. Возможно, что при образовании «маркерных» и «безмаркерных» клеточных линий существуют неизвестные пока причины, обусловливающие разный характер кариотипических изменений при становлении и стабилизации клеточных популяций. 2. При некоторых, совершенно разных, воздействиях и в разных линиях отмечается появление дицентриков, образованных на основе теломерных ассоциаций. При культивировании в разных условиях «маркерных» клеточных линий подобного явления не наблюдалось. Появление дицентриков в процессе культивирования имеет место не только в «безмаркерных» постоянных линиях, но и в неиммортализованных фибробластах человека при старении (Benn,1976; Harley et al., 1990). Обнаруженный нами при анализе литературных данных факт появления дицентриков на основе теломерных ассоциаций при отсутствии постоянной связи с другими типами хромосомных нарушений, позволяет предположить возможную особую биологическую роль этих образований в «безмаркерных» клеточных популяциях.

Задачей представляемой работы явилось детальное исследование кариотипической изменчивости в популяциях «безмаркерных» клеточных линий с целью поиска возможных характерных особенностей этого явления и изучения его закономерностей. В работе впервые проведено исследование кариотипической изменчивости в «безмаркерных» клеточных линиях, различающихся по степени трансформированное™ в разных условиях длительного культивирования. В качестве воздействий, индуцирующих кариотипическую нестабильность, были использованы факторы, как правило присутствующие при длительном культивировании, а также влияющие на жизнедеятельность клеток.

Выше мы указали на недостаточную изученность причин, обусловливающих ограничения кариотипической изменчивости в клеточных популяциях. В частности, образование и дальнейшее существование любой постоянной клеточной линии связано с установлением баланса между клетками, имеющими разное число хромосом, причем клетки как с модальным, так и с немодальными числами хромосом могут иметь разные структурные варианты кариотипа, т.е. разное число гомологов. Количественная сбалансированность кариотипической изменчивости, так же как и структурная в клеточной популяции в целом, обусловлена взаимодействием процессов кариотипической изменчивости и двух форм отбора (стабилизирующего и прогрессивного), работающих в клеточных популяциях in vitro (Бахтин, 1980). Нами были проведены поиск и исследование закономерностей, обеспечивающих сбалансированность кариотипической структуры, на этапе стабилизации интактных клеточных линий и при индукции в них хромосомной нестабильности. Впервые был проведен статистический анализ отклонений по числу хромосом от основного структурного варианта кариотипа и, что особенно важно, иссле

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Полянская, Галина Георгиевна

6. Выводы.

1. Факторы, как правило присутствующие при длительном культивировании постоянных клеточных линий без маркерных хромосом (фибробласты кожи индийского мунтжака и почка кенгуровой крысы), систематически способствуют образованию дицентриков (теломерных ассоциаций). В этом отношении исследованы: антибиотики в «терапевтических» дозах, длительность хранения без ОМБО в жидком азоте, качественно разные сыворотки (в варьирующих концентрациях), продолжительность культивирования. Тот же эффект наблюдается при действии и других факторов, влияющих на жизнедеятельность клеток «безмаркерных» линий (фибробласты кожи индийского мунтжака, почка кенгуровой крысы, лейомиосаркома человека, легкое эмбриона человека) в процессе длительного культивирования. В этом отношении исследованы: изменение генотипической среды в клеточных гибридах, мико-плазменная контаминация, антибиотик ципрофлоксацин (ЦФ) в геноток-сичных дозах. Из наших и литературных данных следует, что в постоянных клеточных линиях с маркерными хромосомами при длительном культивировании в разных условиях образование дицентриков не наблюдается.

2. Возникающие дицентрики характеризуются, постоянным появлением их с определенной частотой при действии разных по своим свойствам факторов; отсутствием постоянной взаимосвязи с другими типами хромосомных нарушений, наличием определенной количественной динамики при отсутствии усиления хромосомной нестабильности; преимущественным образованием их определенными хромосомами. Совокупность этих свойств позволяет предположить, что появление дицентриков в «безмаркерных» линиях связано с созданием генетических структур, обеспечивающих систему адаптации клеточной популяции как целостного образования к неблагоприятным условиям культивирования.

3. Дицентрики в «безмаркерных» клеточных линиях могут возникать не только при длительных , но и при кратковременных воздействиях в течение одного митотического цикла. Появление дицентриков в этом случае зависит от характера и времени воздействия. В частности, показано, что при раздельном действии ЦФ и внеклеточного белка теплового шока (в-БТШ70) на фибробласты кожи индийского мунтжака предположительно в конце - начале в фазы наблюдаются дицентрики, которые при совместном действии этих факторов не обнаруживаются. По-видимому, в-БТШ70 оказывает защитное действие на индуцированную ЦФ хромосомную нестабильность, которое в наибольшей степени проявляется в фазе митотического цикла.

4. При действии на клетки «безмаркерных» и «маркерных» клеточных линий неопухолевого происхождения (фибробласты кожи индийского мунтжака, почка кенгуровой крысы, легкое эмбриона человека, легкое китайского хомячка, яичник китайского хомячка) антибиотиков в «терапевтических» дозах, ЦФ в генотоксичных дозах, качественно разных культуральных сред и сывороток (в варьирующих концентрациях), при клонировании, а также при микоплазменной контаминации и изменении генотипической среды в условиях длительного культивирования возникают существенно однотипные изменения в количественных характеристиках кариотипа: в соотношении доли клеток с модальным, субмодальным и другими числами хромосом; в соотношении основного и дополнительных структурных вариантов кариотипа (СВК). В клетках с данным числом хромосом выявляется преобладающий СВК, который, возможно, имеет селективное преимущество. Пределы изменчивости по числу хромосом остаются устойчивой характеристикой при любых воздействиях.

5. В клеточных линиях опухолевого происхождения как в «безмаркерной», так и в «маркерной» (лейомиосаркома человека и карцинома шейки матки человека), в отличие от неопухолевых линий, при длительной микоплазменной контаминации имеет место значительное расширение пределов изменчивости по числу хромосом. Эти результаты в совокупности с данными литературы позволяют предположить, что причиной наблюдаемой нестабильности структуры кариотипа является опухолевое происхождение этих линий, возможно, связанное с наличием свойства злокачественности.

6. Статистический анализ индивидуальных кариотипов, проведенный на большом числе клеток «безмаркерных» и «маркерных» линий (фибробласты кожи индийского мунтжака, почка кенгуровой крысы, яичник китайского хомячка) в отсутствие каких-либо воздействий показал, что для выживания клеточной популяции in vitro необходимо существование в ней в определенном соотношении клеток с разными СВК. Выявляются: неслучайный характер распределения клеток по числу хромосомных отклонений от основного СВК; специфический характер отклонений каждой хромосомы от основного СВК; наличие достоверных связей между отдельными хромосомами при одновременных численных отклонениях. Установленные закономерности свидетельствуют о том, что отбор в клеточных популяциях идет не по отдельным хромосомам, а по сбалансированному кариотипу. При микоплазменной контаминации линии фибробластов кожи индийского мунтжака имеют место небольшие изменения в характере отклонений индивидуальных хромосом и частичные нарушения связей между хромосомами при одновременных отклонениях, не изменяющие основные количественные закономерности, установленные для интактных культур.

7. Закономерности количественной изменчивости, установленные при анализе СВК и тенденции морфологических изменений кариотипа (дицентрики), представляют собой проявления единой клеточно-популяционной функции в различных степенях выражения. В пользу этого положения свидетельствуют: образование дицентриков при микоплазменной контаминации именно теми хромосомами, между которыми нарушены связи при одновременных отклонениях; связь между неслучайной сегрегацией определенных хромосом мунтжака в гибриде между клетками клона саркомы Йенсена и фибробластами кожи индийского мунтжака и участием несегрегированных хромосом в образовании дицентриков.

223

8. Предполагается, что клеточные популяции могут адаптироваться к условиям in vitro, по крайней мере, двумя способами: 1) образованием дицентриков и изменениями в регуляции генной экспрессии; 2) стабилизацией определенной цитогенетической структуры в популяции (СВК). Эти способы могут быть как взаимодополняющими, так и взаимозаменяемыми на разных стадиях существования клеточной популяции. В целом в клеточной популяции реализуется состояние, которое можно назвать кариотипическим гомеостазом; наблюдаемые явления характеризуют процессы, составляющие такой гомеостаз.

5. Заключение.

Настоящая работа была посвящена детальному изучению карио-типической изменчивости, явления, давно известного для клеточных популяций. Кариотипическая изменчивость в клеточных популяциях выражена гораздо значительнее в условиях in vitro, чем in vivo. Закономерности кариотипической изменчивости в иммортализованных клеточных линиях, установленные ранее, были обнаружены при исследовании линий, имеющих в составе кариотипа маркерные хромосомы. Основное внимание в настоящей работе было уделено изучению кариотипической изменчивости в «безмаркерных» клеточных линиях, структура кариотипа которых существенно отличается от «маркерных» тем, что переход к иммортализованному состоянию и дальнейшая стабилизация этих линий связана только с генными изменениями (возможно эпигенетическими) и частично с анеуплоидией. Таким образом, значительно меньшая кариотипическая гетерогенность, свойственная «безмаркерным» линиям может обусловливать отличные от других линий закономерности кариотипической изменчивости, проявляющиеся в процессе культивирования уже находящихся на стадии стабилизации клеточных культур. Тем не менее нами исследован характер кариотипической изменчивости не только в «безмаркерных», но и в «маркерных» клеточных линиях при длительном культивировании в разных условиях с целью сравнения характера изменений.

В результате проведенной работы нам удалось показать, что характерной чертой кариотипической изменчивости «безмаркерных» клеточных линий при длительном культивировании в разных условиях являются дицентрики, образованные на основе теломерных ассоциаций. Установлено несколько характерных черт дицентриков.

1. Постоянное появление дицентриков с определенной частотой, преимущественно при длительном воздействии разных по своим свойствам факторов в процессе культивирования «безмаркерных» клеточных линий. Наблюдается разная степень увеличения количества дицентриков: их число может превышать уровень всех остальных хромосомных аберраций, может соответствовать этому уровню или быть несколько ниже. Некоторые факторы могут индуцировать дицентрики и при кратковременном воздействии.

2. Отсутствие постоянной взаимосвязи с другими типами хромосомных нарушений и наличие определенной количественной динамики дицентриков, заключающейся в ряде случаев в постепенном увеличении и последующем снижении их числа. Постоянный повышенный уровень количества дицентриков не влечет за собой повышение уровня других хромосомных аберраций, что может свидетельствовать об отсутствии нарушений при прохождении анафазы этими структурами, т. е. о нормальной сегрегации хромосом в митозе.

3. Преимущественное участие определенных хромосом в образовании дицентриков.

Учитывая перечисленные свойства дицентриков, можно заключить, что образование их в «безмаркерных» клеточных линиях носит универсальный характер. Результаты позволяют предположить, что появление дицентриков с определенной частотой в клеточной популяции in vitro является ее ответом на неблагоприятные условия культивирования, подобно маркерным хромосомам в других линиях. Возможно, что дицентрики являются способом адаптации «безмаркерных» клеточных линий к варьирующим условиям культивирования.

Основываясь на совокупности результатов и их обсуждении, мы предположили, что в данном случае роль дицентриков состоит не в создании кариотипической нестабильности, а наоборот, в создании генетических структур, обеспечивающих систему адаптации клеточной популяции как целостной системы к неблагоприятным условиям. (Полянская, 1989; Полянская, Фридлянская, 1991; Полянская, Ефремова, 1992, 1994, 1996; Полянская и др., 1993, 1997, 1998; Полянская, Сизова, 1996; Полянская, 2000). Ранее при исследовании иммортализованных эпителиальных клеток почки кролика было предположено, что образование дицентриков стабилизирует теломерную ДНК (Mac Donald et. al., 1991).

Совокупность полученных нами результатов, а также ряд данных литературы свидетельствуют о том, что кариотипическая структура кпеточных популяций in vitro, как правило имеет несколько характерных черт: 1) клетки с модальным числом хромосом, выраженным в большей или меньшей степени; 2) клетки с другими числами хромосом и, в частности, с субмодальным; 3) постоянные пределы изменчивости по числу хромосом. 4) клетки с любым выраженным числом хромосом имеют преобладающий С В К, который в клетках с модальным числом хромосом называется основным; 5) клетки с любым числом хромосом имеют дополнительные СВК. При варьировании условий длительного культивирования могут происходить изменения в характере анеуплоидии, которые выражаются в следующем: 1) изменение частоты клеток с определенным числом хромосом при постоянстве среди них количества клеток с основным СВК; 2) изменение частоты клеток с определенным числом хромосом и одновременное изменение доли клеток с основным СВК среди них; 3) появление новых СВК; 4) изменение пределов изменчивости по числу хромосом. В результате могут образовываться новые устойчивые сублинии, адаптированные к измененным условиям существования клеточной популяции.

Таким образом, образование и дальнейшее существование любой постоянной клеточной линии связано с установлением баланса между клетками, имеющими разное число хромосом и разные СВК. Количественная сбалансированность кариотипической структуры обусловлена взаимодействием процессов кариотипической изменчивости и двух форм отбора (стабилизирующего и прогрессивного), работающих в клеточных популяциях in vitro (Бахтин, 1980).

В результате анализа количественной кариотипической изменчивости в клеточной популяции в целом при исследовании большого числа индивидуальных хромосом или групп хромосом с помощью статистических методов впервые обнаружен ряд количественных закономерностей, имеющих место в любых клеточных культурах, независимо от присутствия или отсутствия маркерных хромосом и обусловливающих описанные выше явления. Так, показано, что для выживания клеточной популяции in vitro необходимо существование в ней в определенном соотношении клеток с разными СВК. Конкретные закономерности, определяющие кариотипическую структуру, таковы: 1) неслучайный характер распределения клеток по числу отклонений от основного СВК, 2) специфический характер отклонений каждой хромосомы от основного СВК, 3) наличие достоверных связей между отдельными хромосомами при одновременных численных отклонениях.

При анализе совместных отклонений по числу хромосом от основного СВК, в результате которых образовались дополнительные СВК в клетках фибробластов кожи индийского мунтжака, доказано, что существуют достоверные связи между хромосомами, т. е. появление этих СВК неслучайно. Следовательно, существующее предположение о том, что отбор в клеточной популяции идет не по отдельным хромосомам, а по сбалансированному кариотипу (Литвинчук и др., 1986; Полянская, Дьяконова, 1988; Полянская, Сизова, 1993) получило реальное подтверждение. Можно утверждать, что действительно существует взаимосвязь поведения отдельных хромосом при образовании СВК.

Тем не менее, несмотря на существование общих закономерностей для любых клеточных линий, каждая клеточная линия имеет свои специфические особенности. Так, в каждой линии мунтжака имеет место вполне определенная, отличная от других, частота отклонений по числу хромосом от основного СВК, разная частота отклонений по одинаковым хромосомам, небольшие различия по достоверным связям между хромосомами при одновременных численных отклонениях. В линии N61-3-11 также имеются некоторые различия по сравнению с линиями мунтжака, принципиально не нарушающие установленные закономерности.

Микоплазменная контаминация и соматическая гибридизация клеток не нарушают основных закономерностей, установленных для ин-тактных культур. Тем не менее, микоплазменная контаминация способствует увеличению количества отклонений в сторону уменьшения числа хромосом, а также нарушению некоторых связей между хромосомами при одновременных отклонениях. Микоплазменная контаминация оказывает существенное влияние на поведение хромосомы значительно увеличивая количество нуллисомиков по ней. Условно, без своей пары в увеличенном количестве остаются хромосомы 1, 2 и X, что может нарушить численную сбалансированность кариотипа. Наблюдаемое нами появление большого количества дицентриков (теломерных ассоциаций) в этих экспериментах, связанное именно с преимущественным слиянием хромосом 1, 2 и X (разд. 4.2.2.), позволяет провести аналогию между оставшимися «свободными» хромосомами и дицентриками. Возможно, что дицентрики являются механизмом, обеспечивающим сбалансированность кариотипа в определенных условиях. Эта аналогия может явиться еще одним косвенным подтверждением адаптивной роли дицентриков в «безмаркерных» клеточных линиях в неблагоприятных условиях культивирования.

Следует отметить еще одну особенность, которая наблюдается в гибридных клетках. Пока не стабилизировался новый основной СВК в гибриде иР1хМ2, в кариотипе наблюдалось большое число дицентриков, которые исчезли после стабилизации СВК. Существенно, что хромосомы, преимущественно участвующие в образовании дицентриков те же, что и во вновь установленном СВК -1,2 и У2 (разд.4.2.1.). Возможно, что дицентрики необходимы для адаптации клеток в нестабильных условиях. На основании вышеотмеченных наблюдений: образование дицентриков при микоплазменной контаминации именно теми хромосомами, между которыми нарушены связи при одновременных отклонениях; связь между неслучайной сегрегацией определенных хромосом мунтжака в клеточном гибриде иЯ1хМ2 и участием несегрегированных хромосом в образовании дицентриков - нами предположено, что закономерности количественной изменчивости, установленные при анализе СВК и тенденции морфологических изменений кариотипа (теломерные ассоциации) представляют собой проявления единой клеточно-популяционной функции в различных степенях выражения (Роуапэкауа а\., 1999; Полянская, 2000). При этом появление дицентриков может приниматься как одно из проявлений анеуплоидии.

Подводя итог проведенной работе необходимо отметить, что используя кариотипические особенности ряда клеточных линий, в частности, малое число легко идентифицируемых при рутинной окраске крупных хромосом, нам удалось выявить характерные черты кариотипиче-ской изменчивости, не отмечавшиеся ранее при исследовании других линий и подтвердить собственные результаты, полученные при анализе морфологических групп хромосом. Обобщая результаты проведенных исследований, можно сформулировать следующие положения: сбалансированность кариотипической структуры клеточной популяции in vitro обусловлена определенными соотношениями СВК, которые устанавливаются в результате ограниченной частоты отклонений по числу индивидуальных хромосом, а также в результате взаимосвязи разных хромосом при одновременных численных отклонениях от основного СВК. Наблюдаемое явление свойственно клеточным линиям с разной структурой кариотипа, независимо от наличия маркерных хромосом. Известно, что кариотип является единой генетической системой, функциональный смысл которой состоит во взаимосвязи отдельных ее элементов (Макгрегор, 1986). Явления, описанные в настоящей работе, могут быть компонентами общего механизма сцепления хромосом в кариотипе. В отличие от организма, где существует много способов поддержания устойчивой кариотипической структуры, в частности, системный контроль цитогенетических процессов, в условиях in vitro основное влияние на эти процессы оказывают непосредственные клеточные контакты и условия культивирования. Поэтому характер структурно-функциональных связей в кариотипе может изменяться, способствуя адаптации клеточной популяции к новым условиям. По-видимому, клеточные популяции могут адаптироваться к условиям in vitro, по крайней мере, двумя способами: 1) образованием дицентриков и изменениями в регуляции генной экспрессии; 2) стабилизацией определенной цитогенетической структуры в популяции (СВК). Эти способы могут быть как взаимодополняющими, так и взаимозаменяемыми на разных стадиях существования клеточной популяции. Возможно, что пределы количественной кариотипической изменчивости in vitro обусловлены установлением определенной дозы функционирующих генов, продукты которых находятся как в клетках, так и в окружающей их среде, и регулируют таким образом структурно-функциональную организацию кариотипа клеточной популяции. Ранее было показано наличие функциональной связи между генами, ответственными за геномную стабильность и анеуплоидию (Ouspenski et al., 1995). По-видимому, в клеточной популяции реализуется состояние, которое можно назвать кариотипическим гомеостазом; в целом наблюдаемые явления, морфологически выраженные и статистически выявленные, характеризуют процессы, составляющие такой гомеостаз.

Следует подчеркнуть, что совокупность полученных результатов не только существенно расширила и углубила представления о кариоти-пической изменчивости в клеточных популяциях in vitro, но и позволила дать практическую рекомендацию о необходимости периодического проведения цитогенетического контроля в экспериментах, связанных с длительным культивированием в разных условиях. Так, данные, касающиеся восстановительных процессов в клетках после размораживания, связанные с репарацией и репликацией, свидетельствуют о нестабильности клеточной культуры сразу после декриоконсервации, что необходимо учитывать при постановке экспериментов. Необходимо стремиться к минимальному по времени контакту клеток с DMSO после декриоконсервации в связи с установленной цито- и генотоксичностью препарата. Перевод клеток на другую среду, качество сыворотки могут изменять карио-типическую структуру клеточной популяции при длительном культивировании, что может привести к изменению других свойств линии, изучаемых как в фундаментальных, так и в прикладных работах. Необходима периодическая проверка присутствия микоплазмы в культурах, т. к. по мере удлинения срока контаминации могут происходить существенные кариотипические изменения, не проявляющиеся на ранних сроках. Ди-центрики, появляющиеся часто раньше других типов аберраций в «безмаркерных» линиях, по-видимому, могут служить показателем неблагоприятных условий культивирования.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Полянская, Галина Георгиевна, 2000 год

1. Авцын А. П., Кондакова Л. И., Полякова Г.П., Халанский A.C. 1987. Отечественные линии опухолей нервной системы в экспериментальных исследованиях. Цитология. 29 (9): 1071.

2. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. 1994. Молекулярная биология клетки. М.: Мир. Т. 2. 540 с.

3. Андреева Е. В., Петров Ю. П., Семенова Е. Г. 1987. Изменение кариотипа и поверхностных свойств L клеток при адаптации суспензионной культуры к росту в монослое. Цитология. 29 (6): 684 - 688.

4. Анисимов А.П. 1986. Полиплоидия в индивидуальном и историческом развитии организмов. Цитология. 28 (10): 1125.

5. Баренфельд Л. С., Калмыкова Н. В., Андреева Л. Ф., Плескач Н. М., Прокофьева В. В., Михельсон В. М. 1999. Морфофункциональные характеристики фибробластов при базально-клеточном невусе и синдроме Кокейна. Цитология. 41. (11): 927- 931.

6. Бариляк И. Р., Неумержицкая Л. В., Туркевич А. Н.1978. Исследование антимутагенных и антитератогенных свойств димексида (ДМСО). Цитология. 20 (1): 50 56.

7. Бершадский А.Д., Гельфанд В.И. 1970. Старение и малигнизация клеточных штаммов. Цитология. 12 (4): 423 435.

8. Борхсениус С.Н.,Чернова O.A. 1989. Микоплазмы. Л., Наука.156 с. Бочков Н. П., Козлов В. М., Севанькаев A.B., Антощина М.М.1966. Анализ анеуплоидии в культурах эмбриональных фибробластов и лейкоцитов человека. Генетика. (10): 120 -124.

9. Бочков Н. П., Пяткин Е. К. 1969. Факторы, индуцирующие хромосомные аберрации у человека. В кн. Основы цитогенетики человека. М.: Медицина: 176 246.

10. Ван-Ганзем П. 1979. Старение клеток in vitro. Цитология 21 (6): 627

11. Бахтин Ю.Б., 1974. Генетика соматических клеток. П.: Наука. 258 с.

12. Бахтин Ю.Б. 1980. Генетическая теория клеточных популяций. Л.: Наука. 168 с.

13. Вепринцев Б. Н., Новиков А. Н., Смолихина Т.И., Утешев В. К. 1989. Действие диметилсульфоксида и субнулевых температур на зародышей вьюна. Криобиология. (2): 16 21.

14. Глебов O.K., Полянская Г.Г., Пинаев Г.П. 1981. Идентификация изолированных метафазных хромосом. II. Сравнение с узнаваемостью хромосом в составе метафазных пластинок. Цитология. 23 (9): 1042 -1045.

15. Гринберг К. Н. 1969. Хромосомные болезни: нарушения в системе аутосом. В кн. Основы цитогенетики человека. М.: Медицина: 310 410.

16. Гундерина Л. И., Кикнадзе И. И., Голыгина В. В. 1999. Внутривидовая дифференциация цитогенетической структуры природных популяций Chironomus plumosus L. центрального вида группы видов - двойников (Chironomidae, Díptera). Генетика. 35 (2): 193 -202.

17. Дубинин Н. П., 1994. Некоторые проблемы современной генетики. М.: Наука. 223 с.

18. Дубинин Н. П., Чережанова Л.В., 1981. Антимутагенный и мутагенный эффект стрептомицина. ДАН СССР. 140 (3): 703 704.

19. Дункан Э.Л., Реддел P.P. 1997. Генетические изменения, связанные с иммортализацией. Биохимия. 62 (11): 1477-1490.

20. Дюжикова H.A., Токмачева Е.В., Лопатина Н. Г. 1997. Исследование структурно-функциональной организации хромосом при реакции на стресс. Генетика. 33 (8): 1077 -1082.

21. Захаров А.Ф., Какпакова Е.С., Еголина H.A. 1966. Взаимоотношение числовой и структурной изменчивости кариотипа в культивируемых клетках китайского хомячка. Цитология. 8 (2): 193-201

22. Игнатова Т. Н., 1984. Трансформация клеток. В кн. Биология клетки в культуре. Л.: Наука. 101 -194.

23. Ильинская Н. Б., Петрова Н. А., 1997. Кариотип и инверсионный полиморфизм природных популяций Camptochironomus tentans северозападного региона России (Díptera, Chironomidae). Цитология. 39 (9): 848 -856.

24. Ильинская Н. Б., Петрова Н. А., Матена И. 1999. Зависимость уровня инверсионного полиморфизма от типа водоема, сезона и года наблюдения у мотыля Chironomus plumosus L (Díptera, Chironomidae). Генетика. 35 (8): 1061 -1071.

25. Исаенко А. А., Немцов Ю.В., Царева A.A. 1990. Исследование кариотипа клеток почки африканской зеленой мартышки линии 4647, культивируемых в средах с различными сыворотками. Цитология. 32 (7): 736 740.

26. Какпакова Е.С. 1966. Эволюция кариотипа в длительно культивируемых клеточных популяциях китайского хомячка. Генетика. (5): 47-58.

27. Картавцева И. В., Павленко М. В., Костенко В. А., Чернявский Ф. Б.1998. Хромосомная изменчивость и аномальные кариотипы у красно -серой полевки Clethrionomys rufocanus (Rodentia, microtinae). Генетика. 34: 1106-1113.

28. Каталог РККК. Каталог Российской коллекции клеточных культур.1999. Отв ред. Пинаев Г.П., Полянская Г.Г. Санкт-Петербург Омск: ОмГПУ. Биол.серия, вып.5 (на русском и англ. яз.) 429 с.

29. Керкис Ю. Я. 1940. Физиологические изменения в клетке, как причины мутационного процесса. Усп. соврем. Биол. 12 (1): 143 -159.

30. Керкис Ю. Я., Логвинова В. В. 1963. Влияние гормонов надпочечника на радиоционную чувствительность хромосомного аппарата в эпителиальных клетках роговицы мышей. ДАН СССР. 152 (4): 992 994.

31. Керкис Ю. Я., Спорова С. В. 1971. Мутагенный эффект иммунологического стресса при тканевой несовместимости у мышей. Генетика. 7 (11): 70 -74.

32. Кузьмина С. В., 1972. Действие микоплазм на хромосомный аппарат клеток в культуре ткани на примере мышиных фибробластов. Генетика. 8 (1): 165 -167.

33. Кузьмина C.B. 1983. Малигнизация нормальных клеток в условиях длительного культивирования in vitro. M. Наука. 228 с.

34. Куренова Е. В., Мейсон Д. М. 1997. О функциях теломер. Биохимия. 62 (11): 1453 -1466.

35. Лейпольдт М., Шмидтке И. 1986. Экспрессия генов у филогенетически полиплоидных организмов. В кн.: Эволюция генома. М. Мир: 217-233.

36. Литвинчук Л. Ф., Мамаева С. Е., Ковтунович И. Г., Пинаев Г. П. 1986. Кариотип постоянных клеточных линий. Изменчивость кариотипа M Hela при статическом и роллерном способах культивирования. Цитология. 28 (1): 56 61.

37. Лобашев M. Е., 1947. Физиологическая (паранекротическая) гипотеза мутационного процесса. Вестн. Ленингр. ун -та. (8): 10-29.

38. Лобашев M. Е., Пономаренко В. В., Полянская Г. Г., Цапыгина Р. И. 1973. О роли нервной системы в регуляции различных генетических и цитогенетических процессов. Журн. Эволюц. биохим. физиол. 9 (4): 398 -406.

39. Логвинова В. В., Керкис Ю. Я. 1967. Влияние адреналэктомии на радиочувствительность хромосом в клетках эпителия роговицы и костного мозга крыс линии Вистар. Генетика. 3 (7): 48 50.

40. Логвинова В. В., Керкис Ю.Я., Попова И. А. 1970. Анеуплоидия в клетках костного мозга крыс после инъекции гидрокортизона. Цитология. 12 (12): 1579-1582.

41. Лучник Н. В. 1968. Биофизика цитогенетических поражений и генетический код. Л.: Медицина. 296 с.

42. Макгрегор Г. 1986. Гигантские хромосомы и видообразование у амфибий. В кн. «Эволюция генома». М.: Мир: 313-328.

43. Мамаева С. Е. 1984. Цитогенетика клеток в культуре. В кн.: Биология клетки в культуре. П.: Наука. 195 234.

44. Мамаева С. Е. 1988. Хромосомный анализ культивируемых клеток. В кн.: Методы культивирования клеток. Л.: Наука. 78 97.

45. Мамаева С.Е., 1996. Закономерности кариотипической эволюции клеток в культуре. Цитология. 38 (8): 787-814.

46. Мамаева С.Е., Литвинчук Л.Ф., Пинаев Г.П. 1986. Характеристика кариотипа постоянных клеточных линий. II. Изменчивость и сбалансированность хромосомного набора клеток M-Hela. Цитология. 28 (2): 193-203.

47. Навашин М. С., Герасимова Е. П. 1935. Природа и причины мутации. 1. О природе и значении хромосомных мутаций, возникающих в клетках покоящихся растительных зародышей в результате старения. Биол. журн. 4 (4): 593 632.

48. Назаренко С. А., Бурмакина Ю. Э. 1986. Оценка кинетики клеточной пролиферации с помощью дифференциальной окраски сестринских хроматид по двум точкам фиксации. Бюл. эксперим. биол. мед. 102(10): 457-459.

49. Невструева В. В. 1970. Сперматогенез при нарушении нормальных иннервационных отношений в семеннике. В сб. Вопросы нервной регуляции тканевых процессов. М.: 148 -155.

50. Никольский H. Н. 1984. Пролиферация клеток в культуре. В кн.: Биология клетки в культуре. Л.: Наука. 10-49.

51. Оно С. 1973. Генетические механизмы прогрессивной эволюции. М.: Мир, 227 с.

52. Орбели Л. А. 1938. Лекции по физиологии нервной системы. Л.

53. Петрова Н. А., Ильинская Н. Б., Кайданов Л. 3. 1996. Адаптивный характер инверсионного полиморфизма у мотыля Chironomus plumosus

54. Мд (Díptera, Chironomidae): Пространственное разделение инверсий по ареалу. Генетика. 32 (12): 1417 -1430.

55. Пименова М.Н. 1975. Влияние нейро-активных веществ на цитогенетические процессы в соматических клетках (мышь, человек). Автореферат канд. дисс. Л.

56. Пименова М.Н., Симоненко В.Д. 1974. Метод культивирования роговицы глаза мыши in vitro. Цитология. 16 (9): 1179-1181.

57. Полянская Г. Г. 1969. Влияние преганглионарной симпатэктомии на радиационную чувствительность хромосом в эпителии роговицы мышей. Цитология. 11 (7): 888 891.

58. Полянская Г. Г. 1970. Влияние преганглионарной симпатэктомии на возникновение хромосомных перестроек и митотическую активность в эпителии роговицы мышей. Цитология. 12 (6): 790 794.

59. Полянская Г. Г. 1971. Зависимость количества хромосомных перестроек и митотической активности от времени после облучения X -лучами в эпителии роговицы симпатэктомированных мышей. Вестник ЛГУ, сер. биол. вып. 3(15): 129 -136.

60. Полянская Г. Г. 1972. Влияние симпатикотомии на суточный ритм митотической активности в эпителии роговицы мышей. Вестник ЛГУ, сер. биол. вып 3 (15): 117-123.

61. Полянская Г. Г. 1988. Кариотипическая характеристика клеточных сублиний почки кенгуровой крысы и фибробластов кожи индийского мунтжака. Цитология. 30 (6): 732 -738.

62. Полянская Г. Г. 1989. Влияние условий культивирования на кариотипическую структуру двух клеточных сублиний фибробластов кожи индийского мунтжака. Цитология. 31(7): 807-817.

63. Полянская Г. Г. 1999. Особенности количественной изменчивости кариотипа в клеточных сублиниях фибробластов кожи индийского мунтжака. Цитология. 41 (3/4): 305.

64. Полянская Г. Г. 2000. Закономерности кариотипической изменчивости в клеточных культурах при длительном культивировании в разных условиях (Обзор). Успехи совр. биол. (в печати).

65. Полянская Г. Г., Дьяконова М. Ю. 1988. Влияние условий культивирования на кариотипическую структуру клеточной сублинии почки кенгуровой крысы. Цитология. 30 (11): 1355 -1363.

66. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н. 1992. Влияние микоплазменной контаминации на кариотипическую структуру клеточной линии индийского мунтжака. Цитология. 34 (3): 82-88.

67. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н. 1993. Влияние микоплазменной контаминации и деконтаминации с помощью ципрофлоксацина на кариотипическую структуру клеточной линии легкого китайского хомячка V-79. Цитология. 35 (8): 71-78.

68. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н. 1994. Влияние контаминации микоплазмой культур фибробластов кожи индийского мунтжака и последующей деконтаминации культур с помощью ципрофлоксацина на кариотипическую структуру клеточной линии. Цитология. 36 (4): 393-400.

69. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н. 1996. Влияние микоплазменной контаминации двух сублиний клеток почки кенгуровой крысы на кариотипическую структуру. Цитология. 38 (1): 75-84.

70. Полянская Г. Г., Ефремова Т. Н. 2000. Влияние микоплазменной контаминации на кариотипическую изменчивость клеточной линии карциномы шейки матки человека М HeLa clone 11. Цитология, (в печати).

71. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н., Сакута Г.А. 2000а. Влияние микоплазменной контаминации клеточной линии легкого эмбриона человека MRC-5 на кариотипическую изменчивость. Цитология. 42 (2): 190-195.

72. Полянская Г. Г., Ефремова Т.Н., Сакута Г. А. 20006. Кариотипическая изменчивость в длительно культивируемых клеточных линиях без маркерных хромосом. Тезисы II съезда ВОГиС. Санкт-Петербург. 1: 246-247.

73. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н., Сизова Л. С. 1996. Влияние микоплазменной контаминации на кариотипическую изменчивость в клеточных линиях с разной структурой кариотипа. Цитология. 38 (2): 243 -244.

74. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н., Фридлянская И. И. 1994а. Деконтаминация культивируемых клеток от микоплазм с помощью ципрофлоксацина: отсутствие гено- и цитотоксических эффектов. Цитология. 36 (6): 534.

75. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н., Эндер Н.А. 1998. Влияние микоплазменной контаминации клеточной линии лейомиосаркомы человека SK-UT-1B на кариотипическую структуру. Цитология. 40 (1): 2330.

76. Полянская Г. Г., Самокиш В.А. 1999а. Особенности количественной изменчивости кариотипа в клеточной линии фибробластов кожи индийского мунтжака. Цитология. 41 (8): 729 734.

77. Полянская Г.Г., Самокиш В.А. 19996. Особенности количественной изменчивости кариотипа в клеточных сублиниях фибробластов кожи индийского мунтжака. Цитология. 41 (9):747 751.

78. Полянская Г. Г., Самокиш В. А. 1999в. Особенности количественной кариотипической изменчивости в клеточной линии почки кенгуровой крысы. Цитология. 41 (9): 758 763.

79. Полянская Г. Г., Самокиш В. А. 1999г. Исследование количественной кариотипической изменчивости при индукции хромосомной нестабильности в культивируемых клетках фибробластов кожи индийского мунтжака. Цитология. 41 (9): 752 757.

80. Полянская Г.Г., Сизова J1. С. 1996. Исследование генотоксического влияния ципрофлоксацина на культивируемые клетки почки кенгуровой крысы и фибробласты кожи индийского мунтжака. Цитология. 38 (9): 958 -973.

81. Полянская ГГ., Сизова Л.С., Николаенко Н.С. 1993. Кариотипическая характеристика линии фибробластов кожи индийскогомунтжака при культивировании с разными сыворотками. Цитология. 35 (2): 86-96.

82. Полянская Г. Г., Смирнова Т. Д. 1987. Влияние микоплазм на цитогенетические характеристики клеточных линий. Цитология. 29 (9): 1100.

83. Полянская Г.Г., Фридлянская ИИ. 1991. Изменчивость хромосом индийского мунтжака в гибридах соматических клеток. Цитология. 33 (6): 86-94.

84. Полянская Г.Г.,Абрамян Д.С., Глебов O.K. 1981. Кариотипическая структура клоновых популяций клеток китайского хомячка при длительном культивировании. Цитология. .23 (7): 818-830.

85. Полянская Г.Г., Кинев A.B., Сакута Г.А., Асеева Е.В. 1997. Влияние внеклеточного белка теплового шока на хромосомную изменчивость в клеточной культуре фибробластов кожи индийского мунтжака. Цитология. 39 (11) 1070-1082.

86. Полянская Г. Г., Семенова Е. Г., Шубин Н. А. 1990. Влияние криоконсервации на цитогенетические характеристики клеточной сублинии фибробластов кожи индийского мунтжака. Цитология. 32 (3): 256 265.

87. Полянская Г.Г., Фридлянская И.И. 1991. Изменчивость хромосом индийского мунтжака в гибридах соматических клеток. Цитология. 33 (6): 86-94.

88. Полянская Г. Г., Цапыгина Р. И. 1968. Инверсионный полиморфизм Boophtora erythrocephala (Simuliidae, Díptera). Генетика. 4 (5): 70 79.

89. Прайс К. М. 1997. Синтез теломерной с-цепи. Биохимия. 62 (11): 1423-1431.

90. Прокофьева-Бельговская А. А. 1966. Природа ассоциации акроцентрических хромосом человека. Цитология . 8 (2): 169 -177.

91. Реддел Р. Р., Брайан Т. М., Мернейн Д. П. 1997. Иммортализованные клетки без измеримой активности теломеразы. Биохимия. 62 (11): 1467 -1476.

92. Розанов Ю. М., Мамаева С. Е., Литвинчук Л. Ф., Савельева Л. Г., Гольцова Т. А. 1984. Сравнительный кариотипический и ДНК-цитометрический анализ постоянных клеточных линий человека. Цитология. 26 (9) 1079 -1080.

93. Рокицкий П. Ф. 1967. Биологическая статистика. Минск: Вышейш. школа, 328 с.

94. Созанский О. А., Терехов С. М. 1984. Клональный анализ межклеточной вариабельности в активности ядрышковых организаторов хромосом человека. Бюл. эксперим. биол. мед. 97 (5): 592 595.

95. Сальникова Т. В., 1976. Влияние ДМСО на мутагенную активность N -нитрозо N - диэтилмочевины. Генетика. 12 (2): 157-161.

96. Семенова Е. Г., 1988. Внеплановый синтез ДНК в культивируемых клетках после криоконсервации. Криобиология. (1): 17 20.

97. Семенова Е.Г., 1989. Действие трипсина, версена и криопротекторов на внеплановый синтез ДНК клеток в культуре в период подготовки к криоконсервации и после деконсервации. Криобиология. (3): 20 24.

98. Семенова Е. Г., Хоменко А. В., Мамаева С. Е.1984. Изменение продолжительности клеточного цикла и кариотипа клеток L мыши при смене способа культивирования. Цитология. 26 (10): 1156 -1160.

99. Скулачев В. П. 1997. Старение организма особая биологическая функция, а не результат поломки сложной живой системы:биохимическое обоснование гипотезы Вейсмана. Биохимия. 62 (11): 1394 -1399.

100. Смирнова Т. Д. 1986. Деконтаминация клеточных культур от микоплазмы: сравнение двух методов. Цитология. 28 (10): 1113-1116.

101. Сорокина Е. А., Новикова И. Ю., Гринчук Т. М., Сальникова К. В. 1988. Анализ кариотипа мышиных фибробластов клона 1 929 с применением дифференциальной окраски хромосом. Цитология. 30 (2): 197-203.

102. Спитковский Д. М. 1997. Теломерные последовательности ДНК и концепция о клетках онтогенетического резерва. Биохимия. 62 (11): 1503 -1509.

103. Стобецкий В. И., 1976. Теломерное слияние хромосом в клетках, обработанных колцемидом и 5БДУ. Бюл. эксперим. биол. мед. 82 (9): 1142-1144.

104. Стобецкий В. И., 1990. Индукция специфических дицентрических хромосом в клетках яичника китайского хомячка СНО 6. Цитология. 32 (1): 92-94.

105. Стобецкий В. И., Миронова Л. Л., 1988. Повышение интенсивности образования полицентрических хромосом в клетках с микроядрами при воздействии 5 бромдезоксиуридина в условиях длительной гипертермии при 40°С. Цитология. 30 (3): 358 - 360.

106. Тарабрин С. Б. 1970. Нарушение иннервациии и мутационный процесс в ткани. В сб. Вопросы нервной регуляции тканевых процессов. М.: 85-93.

107. Тартаковский А. Д., 1988. Питательные среды для культивирования клеток млекопитающих. В кн. Методы культивирования клеток. Л.: Наука. 44 62.

108. Терци М. 1977. Генетика и животная клетка. М.: Мир, 291 с.

109. Тихомирова М. М., Ватти К. В., Мамон Л. А., Барабанова Л. В., Куцкова Ю. А. 1994. Механизмы, обеспечивающие устойчивость генетического материала клетки к стрессовым воздействиям. Генетика. 30 (8): 1097-1104.

110. Филатов J1. В., Мамаева С. Е., 1985. Стабильность кариотипа двух постоянных линий клеток китайского хомячка СНО-К1 и V-79. Цитология. 27 (9): 1031 1038.

111. Фридлянская И.И., 1984. Постоянные клеточные линии, дифференцирующиеся in vitro. В кн.: Биология клетки в культуре. Л.: Наука. 50-100.

112. Фридлянская И. И., Полянская Г. Г., Блумквист Е., Татулян С. А., Пинаев Г. П. 1983. Экспрессия признаков, характеризующих клеточную поверхность, в гибридах малигнизированных и немалигнизированных клеток. Цитология. 25 (5): 593 600.

113. Хейфлик Л. 1997. Смертность и бессмертие на клеточном уровне. Биохимия. 62 (11): 1380 1393.

114. Цапыгина Р. И. 1971. Роль центральной нервной системы в регуляции процессов клеточного деления и радиочувствительности хромосом клеток эпителия роговицы у мышей. В сб. Исследования по генетике. Ленингр. ун-т. (4): 54 60.

115. Царева А. А., Исаенко А.А.,Урманова М.А., Юрченко М.Д., Балзовская Е.Г., Родионова М.О. 1990. Исследование кариотипа клеток линии Vero, длительно культивируемых в монослое статическим и роллерным способами. Цитология. 32 (7): 741 747.

116. Чернова О.А., Волкова Е.Н., Чернов В.М. 1996. Хромосомные аберрации, индуцированные микоплазменными инфекциями в лимфоцитах периферической крови человека. Генетика. 32 (6): 810-815.

117. Abruzzo М. A., Miller J. A., et al., Singer V.L. 1991. Telomeric associations involving Yq12 in a lymphoblastoid cell line. Cytogenet. Cell Genet. 56: 149-151.

118. Adair G., Stallings B. L., Friend K., Siciliano M. J. 1983. Gene mapping and linkage analysis in Chinese hamster: assignment of the genes for APRT, LDHA, IDH2 and GAA to chromosome 3. Somat. Cell Genet. 9: 477 488.

119. Alder G. M., Austen В. M., Bashford C. L., Pasternak C. A. 1990. Heat shock proteins induce pores in membranes. Biopsi. Rep. 10: 509 518.

120. Aledo R., Aurias A., Avril M.F., Ditrillaux B.1989. Jumping end -to end dicentrics in a case of squamous cell carcinoma from a patient with xeroderma pigmentosum. Cancer Genet. Cytogenet. 40: 95 -103.

121. Allshire R. C., Dempster M., Hastie N. D. 1989. Human telomeres contain at least three types of G-rich repeat distributed non-randomly. Nucleic Acid Res. 17: 4611 -4617.

122. Ancelin K., Brun C., Gibson E.1998. Role of the telomeric DNA-binding protein TRF2 in stability of human chromosomes ends. BioEssays. 20: 879 -883.

123. Ashwood-Smith M. J., Friedmann G. B. 1979. Lethal and chromosomal effects of freezing, thawing storage time, and X irradiation of mammalian cells preserved at -196° in dimethyl sulfoxide. Cryobiology. 16: 132 - 140.

124. ATCC American type culture collection. Catalogue of cell lines and hybridoms. 1988,1992. Rockville.

125. Aula P., Nichols W. W., 1967. The cytogenetic effects of mycoplasma in human leukocyte cultures. J. Cell. Physiol. 70: 281 290.

126. Bailey S. M., Meyne J., Chen D. J., Kurimasa A., Li G. C., Lehnert B. E., Goodwin E. H. 1999. DNA double-strand break repair proteins are required to cap the ends of mammalian chromosomes. Pros. Natl. Acad. Sci USA. 96: 14899-14904.

127. Barile M. F., 1978. Mycoplasma tissue cell interactions. The mycoplasma, Human and animal mycoplasma. New York: Acad. Press. V. 2. 500p.

128. Barnett B. M. 1972. Radioprotective effects of dimethyl sulfoxide on Dr. melanogaster. Radiat. Res. 51: 131 -141.

129. Barile M. F. 1979. Mycoplasma tissue cell interaction. The mycoplasma. Human and animal mycoplasma. New York: Acad. Press. V 2, 500 p.

130. Baseman J. B. 1996. Interplay between mycoplasmas and host cells. IOM Lett. 4: 26.

131. Bastian F., Clement W.M., Holbook W.M. 1992. Eucaryotic chromosome abnormalities secondary to spiroplasma infection. IOM Lett. 2: 142.

132. Becaert S., Vermeesch J. R., Marijnen., Van Oostveldt P. 1998. Telomere length regulation in telomerase positive murine cell line. Cytogenet Cell Genet. 81: 116.

133. Becak M.L., Becak W. 1998. Evolution by polyploidy in Amphibia: new insights. Cytogenet. Cell Genet. 80: 28 33.

134. Benn P. A. 1976. Specific chromosome aberrations in senescent fibroblast cell lines derived from human embryos. Am. J. Hum. Genet. 28: 465 -473.

135. Berger R., Bernheim A., Fellous M., Brouet J. C. 1979. Cytogenetic study of a european Burkitt's lymphoma cell line. J. Nat. Cancer Inst. 62: 1187-1192.

136. Bertuch A., Lundblad V. 1998. Telomeres and double-strand breaks: trying to make ends meet. Trends in Cell Biol. 8: 339 342.

137. Besnard C., Lores P., Daegelen d., Jami J. 1989. Reversible extinction of insulin gene expression in insulinoma x fibroblast somatic cell hybrids. Exp. Cell Res. 185: 101 -108.

138. Biessmann H., Mason J.M. 1994. Telomeric repeat sequences. Chromosoma. 103: 154-161.

139. Bigner S. H., Mark J., Bigner D. D. 1987. Chromosomal progression of malignant human gliomas from biopsy to establishment as permanent lines in vitro. Cancer Genet. Cytogenet. 24: 163 -176.

140. Blasco M. A., Lee H., Hande M. P., Samper E., Lansdorp P.M., DePinho R. A., Greider C. W. 1997. Telomere shortening and tumor formation by mouse cells lacking telomerase RNA. Cell. 91: 25 34.

141. Bond D. J., 1987. Mechanisms of aneuploid induction. Mutat. Res. 181: 257-267.

142. Bradford M. M. 1976. A rapid and simple method for quantititation of microgram quantities of proteins utilising the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. 72: 248 254.

143. Brat S.V., Verma R.S., Dosik H. 1979. Structural organization of chromosomes of the Indian muntjac (Muntjacus muntjak). Cytogenet. Cell Genet., 24: 201-208.

144. Brat S.V., Verma R.S., Dosik H. 1979. Anthramycin-induced sister-chromatid exchange and caffeine potentiation in the chromosomes of Indian muntjac. Mutat. Res. 63: 325 334.

145. Brinkley B. R., Valdivia M. M., Tousson A., Brenner S. L. 1984. Compound kinetochore of the Indian muntjac. Evolution by linear fusion of unit kinetochores. Chromosoma. 91: 1 -11.

146. Brown J.A., Cohen M.M. 1973a. The characterization of two established heteroploid lines (Indian muntjac and Rat-kangaroo) with a low chromosome number.I. In vitro karyotype evolution and cell cycle dynamics. Canad. J. Genet. Cytol. 15:135-143.

147. Brown K. D., Wood K. W., Cleveland D. W. 1996. The kinesin-like protein CENP E is kinetochore-associated throughout poleward chromosome segregation during anaphase A. J. Cell Sci. 109: 961 - 969.

148. Casati A., Stefanini M., Giorgi R., Ghetti P., Nuzzo F. 1991. Chromosome rearrangements in normal fibroblasts from Xeroderma pigmentosum homozygotes and heterozygotes. Cancer Genet. Cytogenet. 51: 89-101.

149. Catalan J., Autio K., Wessman M., Lindholm C., Knuutila S., Sorsa M., Norppa H. 1995. Age-associated micronuclei containing centromeres and the X chromosome in lymphocytes of women. Cytogenet. Cell Genet. 68: 11 -16.

150. Charron M., Hancock R., 1991. Chromosome recombination and defective genome segregation induced in Chinese humster cells by the topoisomerase II inhibitor VM-26. Chromosoma. 100: 97 -102.

151. Chen T. R. 1977. In situ detection of mycoplasma contamination in cell cultures by fluorescent HOEHST 33258 stain. Exp. Cell Res. 104: 255 262.

152. Chen T. R. 1979. Cytogenetics of somatic cell hybrids. 1. Progression of stemlines in continuous uncloned cultures of man-mouse cell hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 23: 221 230.

153. Chen T. R., 1988. SK-UT-1B, a human tumorigenic diploid cell line. Cancer Genet. Cytogenet. 33: 77 81.

154. Chen T. R., 1990. SK-UT-1B cell line has the diploid karyotype. Cancer Genet. Cytogenet. 48: 139 -141.

155. Chen T. R., Hay R.J., Macy M. L. 1982. Karyotype consistency in human colorectal carcinoma cell line established in vitro. Cancer Genet. Cytogenet. 6: 93 -117.

156. Chen M., Beck W. T. 1995. Differences in inhibition of chromosome separation and G2 arrest by DNA topoisomerase II inhibitors merbarone and VM-26. Cancer Res. 55: 1509 -1516.

157. Chin L., Artandi S. E., Shen Q., Tam A., Lee S L , Gottlieb G. J., Greider C. W., DePinho R. A. 1999. P53 deficiency rescues the adverseeffects of telomere loss and cooperates with telomere dysfunction to accelerate cancinogenesis. Cell. 97: 527 538.

158. Chong L., van Steensel B., Broccoli D., Erdjument-Bromage H., Hanish J., Tempst P., de Lange T. 1995. A human telomeric protein. Science. 270. 1663-1667.

159. Cifone M. A., Fiedler I. J. 1981. Increasing metastatic potential is assosiated with increasing genetic instability of clones isolated from murine neoplasms. Proc. Nat. Sci. USA. 78: 6949 6952.

160. Cimini D., Antoccia A., Tanzarella C., Degrassi F. 1997. Topoisomerase II inhibition in mitosis produces numerical and structural chromosomal aberrations in human fibroblasts. Cytogenet. Cell Genet. 76: 61 -67.

161. Clarke D. J., Johnson R. T., Downes C. S. 1993. Topoisomerase II inhibition prevents anaphase chromatid segregation in mammalian cells independently of the generation of DNA strand breaks. J. Cell Sci. 105: 563 -569.

162. Cortes F., Pinero J., Palitti F. 1993. Cytogenetic effects of inhibition of topoisomerase I or II activies in the CHO mutant EM9 and its parental line AA8. Mutat. Res. 288: 281 289.

163. Counter C. C., Avilion A. A., Le Feuvre C.E., Stewart N. G., Greider C. W., Harly C. B., Bacehetti S. 1992. Telomere shortering associated with chromosome instability is arrested in immortal cells which express telomerase activity. EMBO. 11: 1921 -1929.

164. Cox R. P., Krauss M. R., Balis M. E., Dancis J. 1972. Communication between normal and enzyme-deficient cells in tissue culture. Exp. Cell Res. 74: 251 268.

165. Cram L.S., Bartholdi M.F., Ray F.A. Travis G. L., Kraemer P. M. 1983. Spontaneous neoplastic evolution of Chinese Hamster cells in culture, multistep progression of karyotype. Cancer Res. 43: 4828 4837.

166. Cunha R.A.F., Takimoto M.S. 1994. Clastogenic effects caused by certain serotypes of Ureaplasma urealyticum on human chromosomes. IOM Lett. 3: 643 644.

167. De Vries G., Vogelzang A. 1967. Mycoplasma and Down's syndrome. Lancet. 1: 160-161.

168. Di Leonardo A., Carolina P., Maddalena A. 1993. DNA topoisomerase II inhibition and gene amplification in V79/B7 cells. Mutat. Res. 301: 177 -183.

169. Downes C. S., Clarke D. J., Millinger A. M., Gimenez Abiun J. F., Creighton A. M., Johnson R. T. 1994. A topoisomerase II - dependent G2 cycle check-point in mammalian cells (Erratum). Nature. 372: 467 - 470.

170. Ducray C., Pommier J -P., Martins L., Boussin F. D., Sabatier L. 1999. Telomere dynamics, end-to-end fusions and telomerase activation during the human fibroblast immortalization process. Oncogene. 18: 4211 -4223.

171. Dutrillaux B., Croquette M. F., Viegas-Pequignot E., Aurias A., Coget J., Couturier J., Lejeune J. 1978. Human somatic chromosome chains and rings: a preliminary note on end-to-end fusions. Cytogenet. Cell Genet. 20: 70-77.

172. Earnshaw W. C., Migeon B. R. 1985. Three related centromere proteins are absent from the inactive centromere of a stable isodicentric. Chromosoma. 92: 290 296.

173. Earnshaw W. C., Ratrie H., Stetten G. 1989. Visualization of centromere proteins CENP B and CENP - C on a stable dicentric chromosome in cytological spreads. Chromosoma. 98: 1-12.

174. ECACC. 1992. European collection of animal cell cultures. Catalogue of Cell lines and services. 4th edition.

175. Ellis R. J., van der Vies S. M. 1991. Molecular chaperones. Ann. Rev. Bioch. 60: 321 347.

176. Elsea S. H., Osheroff N., Nitiss J. L. 1992. Cytotoxicity of quinolones toward eukaryotic cells: identification of topoisomerase II, as the primary cellular target for the quinolone CP-115, 953 in yeast. J. Biol. Chem. 267: 13150-13153.

177. Feder J. H., Rossi J. M., Solomon N., Lindquist S. 1992. The consequences of expressing hsp70 in Drosophila in normal temperatures. Genes, Development. 6: 1402 -1413.

178. Fett-Conte Agnes C., Liedtke H. Jr., Chaves H., Thome J. A., Tajara E.H. 1993. Telomeric fusions in a Wilm's tumor. Cancer Genet. Cytogenet. 69: 141 -145.

179. Figueroa J., Saffrich R., Ansorge W., Valdivia M. 1998. Microinjection of antibodies to centromere protein CENP A arrests cells in interphase but does not prevent mitosis. Chromosoma. 107: 397 - 405.

180. Finn G. K., Kuzz B. W., Cheng R. Z., Shmookler R. J. 1989. Homologous plasmid recombination is elevated in immortally transformed cells. Mol.Cell Biol. 9: 4009 4017.

181. Fitzgerald P. H., 1975. A mechanism of X chromosome aneuploidy in lymphocytes of aging women. Humangenetic. 28: 153 -158.

182. Fitzgerald P.H., McEwan C.M. 1977. Total aneuploidy and age-related sex chromosome aneuploidy in cultured lymphocytes of normal men and women. Hum. Genet. 39: 329 337.

183. Fitzgerald P.H., Morris C.M., 1984. Telomeric associations of chromosomes in B cell lymphoid leukemia. Hum. Genet. 67: 385 - 390.

184. Fogh J., Fogh H.1965. Chromosome changes in PPLO-infected FL human amnion cells. Pros. Soc. Exp. Biol. Med. 119: 233 238.

185. Fogh J., Fogh H. 1967. Irreversibility of major chromosome changes in a mycoplasma modified line of FL human amnion cells. Pros. Soc. Exp. Biol. Med. 126: 67-74.

186. Fogh J., Fogh H. 1968. Karyotypic changes in mycoplasma-modified line of FL human amnion cells. Pros. Soc. Exp. Biol. Med. 129: 944 950.

187. Ford J. H., Russel J. A. 1985. Differences in the error mechnisms affecting sex and autosomal chromosomes in women of different ages within the reproductive age group. Am. J Hum. Genet. 37: 973 983.

188. Fredga K. 1971.ldiogram and fluorescence patterns of the chromosomes of the Indian muntjac. Hereditas. 68: 332-337.

189. Freedlanskaya I. I., Drexler H., Mac Leod R., Efremova T. N., Voges M., Poljanskaya G. G. 1994. Mycoplasma infection and ciprofloxacin mycoplasma erradication in mammalian cell lines; Cytogenetical assay. IOM Lett. 3, P126: 308.

190. Freedlanskaya I. I., Poljanskaya G. G., Efremova T. N., Pinaev G. P. 1992. Animal cell culture collection in Russia. In vitro. 28 (3, part 2): P169A.

191. Fukagawa T., Pendón C., Morris J., Brown W. 1999. CENP C is necessary but not sufficient to induce formation of a functional centromere. EMBO. 18: 4196-4210.

192. Fulton A. M., Bond D. J. 1984. Dymethylsulfoxide induces aneuploidy in a fungal test system. Mol. Gen. Genet. 197: 347 349.

193. Gallardo M. H., Bickham J. W., Honeycutt R. C., Ojeda R. A., Kohler N. 1999. Discovery of tetraploidy in a mammals. Nature. 401: 341.

194. Galloway S. M., Buckton K. E. 1978. Aneuploidy and ageing: chromosome studies on a random sample of the population using G-banding. Cytogenet. Cell Genet. 20: 78 95.

195. Garagna S., Broccoli D., Redi C. A., Searle B., Cooke H. J., Capanna E. 1995. Robertsonian metacentrics of the house mouse lose telomericsequences but retain some minor satellite DNA in the pericentromeric area. Chromosoma. 103: 685 692.

196. Gille J.J.P., Joenje H. 1989. Chromosomal instability and progressive loss of chromosomes in HeLa cells during adaptation to hyperoxic growth conditions. Mutat. Res. 219: 231 -240.

197. Gille J. J. P., Mullaart E., Vijg J., Leyva A. L., Arvert F„ Joenje H. 1989. Chromosomal instability in an oxygen-tolerant variant of Chinese hamster ovary cells. Mutat. Res. 219: 17 28.

198. Goswami P. C., Roto Roti J. L., Hunt C. R. 1996. The cell cycle-coupled expression of a-topoisomerase II a during S phase is regulated by mRNA stability and is disrupted by heat shock or ionizing radiation. Mol. Cell. Biol. 16: 1500-1508.

199. Grewal M. S., Dev V.G., Miller D. A., Miller O.J. 1971. Quinacrine fluorescent patterns of the chromosomes in cell lines of the rat-kangaroo {Potorous tridactylis apicalis). Exp. Cell Res. 69: 241-244.

200. Gupta P., Sharma T. 1981. Non-random distribution of aberrations and identification with C- and G-bandings of the position of breakage points on Muntjak chromosomes induced by mytomycin C, bromodeoxyuridine and hydroxylamine. Mutat. Res. 81: 63 74.

201. Guzhova I., Negulayev Yu., Kinev A., Margulis B. A. 1994. Interaction of exogenous hsp70 with the cell surface. Micromolecules and stressresponse: Abstr. Of Workshop of ESF network on stress genes and their protein products. Rome, Italy: P. 52.

202. Haaf T., Schmid M. 1990. Y isochromosome associated with a mosaic karyotype and inactivation of centromere. Hum. Genet. 85: 486 490.

203. Hadlaczky Gy., Went M., Ringertz N. R. 1986. Direct evidence for the non-random localization of mammalian chromosomes in the interphase nucleus. Exp. Cell Res. 167: 1 -17.

204. Hammond C., Helenius A. 1995. Quality control in the secretory pathway. Curr. Opin. Cell Biol. 7: 523 529.

205. Hando J. C., Nath J., Tucker J. D. 1994. Sex chromosomes, micronuclei and aging in women. Chromosoma. 103: 186 -192.

206. Harley C.B., Futcher A.B., Greider C.W. 1990. Telomeric shorten during ageing of human fibroblasts. Nature. 345: 458 460.

207. Hastie N. D., Allshire R.C.1989. Human telomeres: fusion and interstitial sites. Trends Genet. 5: 326 321.

208. Hastie N. D., Dempster M., Dunlop M. G., Thompson A. M., Green D. F., Allshire R. C. 1990. Telomere reduction in human colorectal carcinoma and with ageing. Nature. 346: 866 868.

209. Hayashi K., Schmid W., 1975. Tandem duplication q14 and dicentric formation by end to end chromosome fusions in Ataxia telangiestasia. Humangenetic. 30: 135-141.

210. Heneen W. K., 1976. HeLa cells and their possible contamination of other cell lines: karyotype studies. Hereditas. 82: 217 248.

211. Hittelman W. N., Rao P. N. 1974. Bleomycin-induced damage in prematurely condensed chromosomes and its relationship to cell cycle progression in CHO cells. Cancer Res. 34: 3433 3439.

212. Jacobs P. A., Court-Brown W. M., Doll R. 1961. Distribution of human chromosome counts in relation to age. Nature. 191: 1178.

213. Johnson A. D., Tytell M., 1993. Exogenous HSP70 becomes cell associated, but not internalized, by stressed arterial smooth muscle cells. In vitro Cell Develop. Biol. 29A: 807 812.

214. Jovtchev G., Stergios M., Rieger R., Michaelis A. 1993. Modulatory effects of novobiocin, actinomycin D and caffeine on heat shock protection against induction of chromatid aberrations by maleic hydrazide in Hordeum vulgare. Biol. Zbl. 112: 358 364.

215. Kapoor M., de Oca Luna., Liu G., Lozano G., Cummings C., Mancini M., Ouspenski I., Brinkley B. R., May G. S. 1998. The CENP В gene is not essential in mice. Chromosoma. 107: 570 - 576.

216. Karlseder J., Broccoli D., Dai Y., Hardy S., de Lange T. 1999. P53 -and ATM-dependent apoptosis induced by telomeres lacking TRF2. Science. 283: 1321 -1325.

217. Katzenel A., Tarshis M., Rottem S. 1998. Survival of M. penetrans with HeLa cells. IOM Lett. 5: 193.

218. Khan M., Smith M. 1984. Report of the commitee on the genetic constitution of chromosome 7, 8 and 9. Human gene mapping 7. Cytogenet. Cell Genet. 39: 71 -102.

219. Kobayashi M. K.H., de Campos Bicudo H. E. M. 1997. Inversion polymorphism in laboratory strains and natural samples of Drosophila sturtevanti. Cytobios. 89: 7-21.

220. Kohno S. I., Minowada J., Sandberg A. A. 1980. Chromosome evolution of nearhaploid clones in an established human acute lymphoblastic leukemia cell line (Nalm-16). J. Nat. Cancer Inst. 64: 485 493.

221. Kondo I., Shimizu N. 1983. Mapping of the human gene for epidermal growth factor receptor (EGER) on the p13-q22 region of chromosome 7. Cytogenet. Cell Genet. 35: 9-14.

222. Kotani H., Phillips D., McGarrity G. J. 1986. Malignant transformation of NIH3T3 and CV-1 cells by a helical mycoplasma, Spiroplasma mirum, strain SMCA. In vitro. 22: 756 763.

223. Kovacs G., Muller-Brechlin R., Szucs S.1987. Telomeric association in two human renal tumors. Cancer Genet. Cytogenet. 28: 363 366.

224. Kraemer P.M., Deaven L. L., Crissman H. A., Van Dilla M. A. 1972. DNA constancy despite variability in chromosome number. Adv. Cell Mol. Biol. 2: 47-108.

225. Mac Donald C., Watts P., Stuart B., Kreuzbarg-Duffy U., Scott DM., Kinne R.K. 1991. Studies on the phenotype and karyotype of immortalized Rabbit kidney epithelial cell line. Exp. Cell Res. 195: 458 -461.

226. MacPherson J., Montagnier L., 1964. Agar suspension culture for the selective assay of cells transformed by polyoma virus. Virology. 23: 291 -294.

227. Malpoix P., Poljanskaya G, 1979. Dyserythropoietic cytological anomalies preceding changes in proliferation and differentiation. Adv. In Comparative Leukemia Res.: 65 -66.

228. Mamaev N., Mamaeva S. 1990. Nucleolar organizer region activity in human chromosomes and interphase nuclei of normal, leukemic and tumor cells, as evaluated by silver staining. Int. Rev. Cytol. 121: 233 266.

229. Mamaeva S. E. 1998. Karyotypic evolution of cells in culture: a new concept. Int. Rev. Cytol. 178: 1 -40.

230. Mandahl N., Heim S., Kristoffersson U., Mitelman F., Rooser B., Rydholm A., Willen H. 1985. Telomeric association in a malignant fibrous histiocytoma. Hum. Genet. 71: 321 324.

231. Mandahl N., Heim S., Arheden K., Rydholm A., Willen H. Mitelman F. 1988. Rings, dicentrics and telomeric association in histiocytomas. Cancer Genet. Cytogenet. 30: 23 33.

232. Margulis B. A., Guzhova I., Welsh M., Kinev A., Lasunskaya E., Darieva Z., Nilsson K. 1993. Stress-induced post-translational protein modifications. Abstr. of Workshop of ESF network on stress genes and their protein products. Paris, France. P13.

233. Margulis B. A., Nachrov P. V., Tsvetkova O., Welsh M., Kinev A. 1991. The characterization and use of different antibodies against the HSP70 major heat shock pritein family for the development of an immunoassay. Electrophoresis. 12: 670-673.

234. Mark H. F., Naram R., Santoro K., Bland K. I. 1995. A study of induced genotoxicity in MRC-7 cells. Cytobios. 84: 171 -177.

235. Matlashewski G., Osborn K., Banks L., Stanley M., Crawford L.1988. Transformation of primary human fibroblast cells with human papillomavirus type 16 DNA and Ej ras. Int. J. Cancer. 42: 232 - 238.

236. McGarrity G.J., Vanaman V., Sarama J. 1984. Cytogenetic effects of mycoplasmal infection of cell cultures: a review. In vitro. 20: 1-19.

237. McKusick V. 1980. The anatomy of the human genome. J. Hered. 71: 370 391.

238. Merry D. E., Pathak S., Hsu T. C., Brinkley B. R. 1985. Anti-kinetochore antibodies: use as probes of inactive centromeres. Am. J. Hum. Genet. 37: 425 430.

239. Meyne J., Ratliff R. L., Moyzis R. K. 1989. Conservation of the human telomere sequence (TTAGGG)n among vertebrates. Proc. Natl. Acad Sci USA. 89: 7049 7053.

240. Miller R. G., Nickols W.W., Pottash J., Aronson M.M. 1977. In vitro aging. Cytogenetic comparison of diploid human fibroblast and epithelioid cell lines. Exp. Cell Res. 110: 63-73.

241. Monteagudo L.V., Arruga M.V. 1991. NOR activity interaction among the chromosomes of common rabbit: a statistical analysis. Caryologia. 44: 85 -91.

242. Moorhead P. S., Saksela E. 1965. The sequence of chromosome aberrations during SV40 transformation of a human diploid cell. Hereditas. 52: 271 284.

243. Morgan R., Jarzabek V., Jaffe J. P., Hecht B.K., Hecht F., Sandberg A. A. 1986. Telomeric fusion in pre-T- cell acute lymphoblastic leukemia. Hum. Genet. 73: 260 263.

244. Morimoto R. I., Tissieres A., Georgopoulos C. 1990. The stress response, function of the proteins, and perspectives. Stress proteins in biology and medicine. New York: Cold Spring Harbor Lab. Press: 1 36.

245. Morita T., Nagaki T., Fukuda I., Okumura K. 1991. Effect of pH on the activity and stability of clastogens in the in vitro chromosomal aberration test with Chinese hamster ovary K1 cells. Mutat Res. 262: 159 166.

246. Morita T., Takeda K., Okumura K. 1990. Evaluation of clastogenicity of formic acid, acetic acid and lactic acid on cultured mammalian cells. Mutat. Res. 240: 195-202.

247. Mowles J. M., 1988. The use of ciprofloxacin for the eliminator of mycoplasma from naturally infected cell lines. Cytotechnology. 1: 355 358.

248. Mukherjee A., Sen S., Agarwal K. 1993. Ciprofloxacin: mammalian DNA topoisomerase type 2 poison in vitro. Mutat. Res. 301: 87 92.

249. Mukherji B., MacAlisterT. J., Guha A., Gillies G., Jeffers D. C., Slocum S. K. 1984. Spontaneous In vitro transformation of human fibroblasts. J. Nat. Cancer Inst. 73: 583 594.

250. Murakami H., Masui H., Sato G. H., Sueoka N., Chow T. P., Kasro -Sueoka T. 1982. Growth of hybridoma cells in serum-free medium: ethanolamine is an essential component. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 79: 1158 -1162.

251. Mutchinick D., Ruz L., Casas L. 1980. Time of first generation metaphases. 1. The effect of various culture media and of fetal calf serum in human lymphocyte cultures. Mutat. Res. 72: 127 -134.

252. Nakagome Y., Abe Т., Misawa S., Takeshita Т., linuma K. 1984. The «loss» of centromeres from chromosomes of aged women. Am. J. Hum. Genet. 36: 398 404.

253. Nanda I., Schneider-Rasp S., Winking H., Schmid M. 1995. Loss of telomeric sites in the chromosomes of Mus musculus domesticus (Rodentia: Muridae) during Robertsonian rearrangements. Chromosome Res. 3: 399 -409.

254. Nath J., Tucker J. D., Hando J. C. 1995. Y chromosome aneuploidy, micronuclei, kinetochores and aging in men. Chromosoma. 103: 725 731.

255. Negulyaev Y. A., Vedernikova E. A., Kinev A. V., Voronin A. P. 1996. Exogenous heat shock protein hsp70 activates potassium channels in U 937. Biochim. Biophys. acta. 1291: 156 -162.

256. Nielsen K. 1972. The chromosomes of an in vitro derivative of an Ehrlich ascites tumor of the mouse during its adaptation from monolayer to suspension culture. Hereditas 70: 217 -224.

257. Nikolis J., Kekic V. 1988. Evidence for a compensatory mechanism regulating Ag-NOR activity in families with de novo 21,21 translocation Down syndrome. Cytogenet. Cell Genet. 47:197 200.

258. Parry J. M., Parry E. M. 1987. Comparisons of tests for aneuploidy. Mutat. Res. 181: 267-287.

259. Pathak S., Wang Z., Dhaliwal M. K., Sacks P. S. 1988. Telomeric association: another characteristic of cancer chromosomes. Cytogenet. Cell Genet. 47:227 229.

260. Paton G. R., Jacobs I.P., Perkins F.T.1965. Chromosome changes in human diploid cell cultures infected with Mycoplasma. Nature. 207: 49-51.

261. Patterson M. K., Maxwell M. D., Conway E. 1969. Studies on the asparagine requirement of the Jensen sarcoma and derivation of its nutritional variant. Cancer Res. 29: 296 305.

262. Paul J., 1975. Cell and tissue culture. Edinburgh: Livingstone. 490 p.

263. Pillidge L., Downes C. S., Jonson R.T. 1986. Defective post-replication recovery and U.V. sensitivity in a simian virus 40-transformed Indian muntjac cell line. Int. J. Radiat. Biol. 50: 119 -136.

264. Poljak L., Kas E., 1995. Resolving the role of topoisomerase II in chromatin structure and function. Trends in Cell Biol. 5: 348 355.

265. Poljanskaya G. G., Efremova T. N., Sakuta G. A. 1999. Karyotypic variability of «markerless» continuous cell lines. Mol. Biol. Cell, Suppl, Abstracts 39th ASCB annual meeting. 10: 282.

266. Rao P. N., Engelberg J. 1965. Hela cells: effects of temperature on the life cycle. Science. 148: 1092 -1094.

267. Ray F.A., Meyne J., Kraemer P.M., 1992. SV-40T antigen induced chromosome changes reflect a process that is both clastogenic and aneuploidogenic and is ongoing throughout neuplastic progression of human fibroblasts. Mutat. Res. 284: 265 275.

268. Razin S., Barile M.F. 1985. Cytogenetics effects of mycoplasmas. The mycoplasmas. Vol. 4. Mycoplasma patogenecity. New York, London. Acad. Press. 508 p.

269. Reddel R. R. 1998. Genes involved in the control of cellular proliferative potential. In: Annales of the New York Academy of Science. 854: 8-19.

270. Retzlaff C., Yamamoto Y., Hoffman P. S., Friedman H., Klein T.W. 1994. Bacterial heat shock proteins directly induce cytokine mRNA and interleukin-1 secretion in macrophage cultures. Infect. Immun. 62: 5689 -5693.

271. Rey J. A., Bello M. J.Ramos C., Benitez J., Muelas J. M. 1983. Serial cytogenetic study of a human glioma cell line. Cancer Genet. Cytogenet. 8: 287 -295.

272. Rieder C. L., Salmon E. D. 1998. The vertebrate cell kinetochore and its roles during mitosis. Trends in Cell Biol. 8: 310 318.

273. Rottem S., Naot Y., 1998. Subversion and exploitation of host cells by mycoplasmas. Trends in microbiology. 6: 436 441

274. Rudd N. L., Hoar D. I., Williams S. E., Hennig U. G. G. 1989. Genotype and the cryopreservation process affect the levels of aneuploidy and chromosome breakage in cultured human fibroblasts. Genome. 32: 196 202.

275. Ryan A.J., Johnson R.T. 1996. Dominant genetic instability and sensitivity to DNA damaging agents in a Mammalian Cell line. Somat. Cell Mol. Genet. 22: 177-189.

276. Saksela E., Saxen E., Penttinon K. 1960. Further studies on the growth controlling action of human serum on cells cultivated in vitro. Exp. Cell Res. 19: 402-404.

277. Saltman D., Morgan R., Cleary M. L., de Lange T. 1993. Telomeric structure in cells with chromosome end associations. Chromosoma. 102: 121 -128

278. Saltman D., Ross F. M., Fantes J. A., Allshire R., Turner G. E., Evans H.J. 1989. Telomeric associations in a lymphoblastoid cell line from a patient with B cell follicular lymphoma. Cytogenet. Cell Genet. 50: 230 - 233.

279. Samali A., Cotter T. G., 1996. Heat Shock proteins increase resistance to apoptosis. Exp. Cell Res. 223: 163-171.

280. Sarlangue J., Poutiers F., Benaudin H., Bebear C. 1992. Assay the several antibiotic treatments for elimination of mycoplasmas from cell cultures. IOM Lett. 2: 312.

281. Saveljeva L., Mamaeva S. 1988. Population analysis of karyotypic heterogeneity of the Raji, Burkitt lymphoma cell line: analysis of 100 karyotypes. Cancer Genet. Cytogenet. 34: 63 75.

282. Schmitt K., Daubener W., Bitter-Suerman D., Hadding U. 1988. A safe and efficient method for elimination of cell culture mycoplasmas using cyprofloxacin. J. Immunol. Meth. 109: 17 -25.

283. Schubert I., Schriever-Schwemmer G., Werner T., Adler l.-D. 1992. Telomeric signals in Robertsonian fusion and fission chromosomes: implications for the origin of pseudoaneuploidy. Cytogenet Cell Genet. 59: 6 -9.

284. Seabright M. A. 1971. A rapid banding technique for human chromosomes. Lancet. 2: 971 972.

285. Sen P., Sharma T. 1985. Characterization of G-banded chromosomes of the Indian muntjak and progression of banding patterns through different stages of condensation. Cytogenet. Cell Genet. 39:145-150.

286. Shaw M. W., Krooth R. S. 1964. The chromosomes of the tasmanian rat- kangaroo (Potorous tridactylis apicalis). Cytogenet. 3: 19-33.

287. Shepard J. S., Pettengill 0. S., Wurster-Hill D. H., Sorenson G. D. 1979. Karyotypic evolution associated with loss of tumorigenicity. JNCI. 62: 547 555.

288. Shubber E. K., Al-Allak B. M. A., Nada S. M. 1987. Spontaneous frequencies of chromosomal aberrations and sister chromatid exchanges in human lymphocytes, II. Effects of serum, incubation time and blood storage, the Nucleus. 30: 21 28.

289. Slijepcevic P., Hande M. P., Bouffler S.D., Lansdorf P., Bryant P.E. 1997. Telomere length, chromatin structure and chromosome fusigenic potential. Chromosoma. 106: 413 421.

290. Slijepcevic P., Bryant P. E. 1995. Absence of terminal telomeric FISH signals in chromosomes from immortal Chinese hamster cells. Cytogenet. Cell Genet. 69: 87 89

291. Smith P. J. S., Duthie G. G., Shipley A., Tytell M. 1993. Steady-state calcium effect from Aplysia neurons: perturbation by H202 and protection by stress protein, hsp70. Biol. Bull. 185: 293-294.

292. Speight J., Smith E., Baba W., Wilson G. 1968. Lymphocyte chromosomes in untreated and 131J-treated thyrotoxic patients. J. Endocrinol. 42: 277 282.

293. Sperling K., Ludtke E. K. 1981. Arrangement of prematurely condensed chromosomes in cultured cells and lymphocytes of the Indian muntjac. Chromosoma. 83: 541 553.

294. Stanbridge E., Onen M., Perkins F.T., Hayflick L. 1969. Karyological and morphological characteristics of human diploid cell strain WI-38 infected with mycoplasmas. Exp. Cell Res 57: 397 410.

295. Steel C. M., Shade M., Woodward M. A. 1980. Chromosome aberrations acquired in vitro by human B-cell lines. Gains and losses of material. J. Nat. Cancer Inst. 65: 95 100.

296. Stewart S. D., Watson H.L., Cassell G.H.1994. Investigation of the clastogenic potential of Ureaplasma urealyticum on human leukocytes. IOM Lett. 3: 662 663.

297. Stobetsky V. I. 1978. Mammalian polykaryocytes in vitro II. The phenomenon of delayed disruption of telomeric links between chromosomes. Biol. Zbl. 97: 595 604.

298. Strauss B. S. 1990. The control of O6 methylguanine - DNA methyltransferase (MGMT) activity in mammalian cells: A pre-molecular view. Mutat. Res. 233: 139-150.

299. Sturrock J. E., Nunn J. F. 1978. Cromosomal damage and mutations after exposure of Chinese hamster cells to high concentrations of oxygen. Mutat Res. 57: 27 33.

300. Subak-Sharpe H., Burk R. R., Pitts J. D. 1966. Metabolic cooperation by cell to cell transfer between genetically different mammalian cells in tissue culture. Heredity. 21: 342-343.

301. Sullivan B. A., Willard H. F. 1998. Stable dicentric X chromosomes with two functional centromeres. Nature Genet. 20: 227 228.

302. Sumner A. T. 1972. A simple technique for demonstrating centromeric heterochromatin. Exp. Cell Res. 75: 304 306.

303. Sumner A. T. 1995. Topoisomerase II and chromosome segregation. Proc. on chromosome segregation and aneuploidy. Edit, by A. Abbondandolo, B.K. Vig, R.Roi. April 24-29, Sorrento, Italy: 121 -132.

304. Suzuki H., Nakane S. 1994. Differential induction of chromosomal aberrations by topoisomerase inhibitors in culture Chinese hamster cells. Biol, and Pharm. Bull. 17: 222 226.

305. Szostak J.W., BlackburnE.H. 1982. Cloning yeast telomeres on linear plasmid vectors. Cell. 29: 245 255.

306. Taylor A. M., Oxford J. M., Metcalfe J. A. 1981. Spontaneous cytogenetic abnormalities in lymphocytes from thirteen patients with ataxia telangiectasia. Int. J. Cancer. 27: 311 -319.

307. Taylor-Robinson D., Davies H. A., Sarathchandra P., Furr P. M. 1991. Intracellular location of mycoplasmas in cultured cells demonstrated by immunocytochemistry and electron microscopy. Int. J. Exp. Path. 72: 705 -714.

308. Therman E., Trunca C., Kuhn E. M., Sarto G. E. 1986. Dicentric chromosomes and the inactivation of the centromere. Hum. Genet. 72: 191 -195.

309. Thielmann H. W., Fischer E. 1983. Spontaneous in vitro malignant transformation in a xeroderma pigmentosum fibroblast line. Int. J. of Cancer. 31:687-700.

310. Thompson K. V. A., Holliday R., 1975. Chromosome changes during the in vitro ageing of MRC-5 human fibroblasts. Exp. Cell Res. 96: 1 6.

311. Trewyn R. W., Kerr S. J., Lehman J. M. 1979. Karyotype and Tumorigenicity of 1-methylguanine transformed Chinese Hamster Cells. 62: 633 - 638.

312. Tytell M., Barbe M. F., Brown I. R. 1994. Induction of heat shock (stress) protein 70 and its mRNA in the normal and light-damaged rat retina after whole body hyperthermia. Neurosci. Res. 38: 19 31.

313. Vig B. K. 1984. Sequence of centromere separation: orderly separation of multicentric chromosomes in mouse L cells. Chromosoma. 90: 39 - 45.

314. Vig B. K., Broccoli D. 1988. Sequence of centromere separation: differential replication of pericentric heterochromatin in multicentric chromosomes. Chromosoma. 96: 311 -317.

315. Vig B. K., Paweletz N., Schroeter D.1989. Sequence of centromere separation: kinetochore formation and DNA replication in dicentric chromosomes showing premature centromere separation in rat cerebral cells. Cancer Genet. Cytogenet. 38: 283 296.

316. Vig B. K., Swearngin S. E. 1985. Sequence of centromere separation: premature centromere separation in multicentric chromosomes. Cytobios. 43: 253 262.

317. Vig B. K., Willcourt M. 1998. Decondensation of pericentric heterochromatin alters the sequence of centromere separation in mouse cells. Chromosoma. 107: 417 -423.

318. Voronin A., Aseeva E., Kinev A., Margulis B.1995. The exogenous HSP70/HSC70 decreases DNA synthesis in human leukemia U 937 cells. Biology of molecular chaperones: Abstr. Of ESF and Euroconferences meeting. Grete (Greece): 102.

319. Wainwright L. J., Middleton P. G., Rees J. L. 1995. Changes in mean telomere length in basal cell carcinomas of the skin. Genes, Chromosomes, Cancer. 12: 45-49.

320. Wandall A. 1994. A stable dicentric chromosome: both centromere develop kinetochores and attach to the spindle in monocentric and dicentric configuration. Chromosoma. 103: 56-62.

321. Wang S., Grash R.N., Chellappan S.P. 1998. Raf -1 physically interacts with Rb and regulates its function: a link between mutagenicsignaling and cell cycle regulation. MCB (Mol. And Cell Biol ). 18: 7487 -7498.

322. Welch W. J., Feramisco J.R. 1985. Rapid purification of mammalian 70.000-dalton stress proteins: affinity of the proteins for nucleotides. Mol. Cell Biol. 5: 1229-1236.

323. Whitaker A. M., Gould J., Smith E. M. 1974. Chromosomes of WI-38. The effect of repeated subcultivations and of a serum with an unusual property. Exp. Cell Res. 87: 55 62.

324. Wolman S. R., Hirschhorn K., Todaro G.J. 1964. Early chromosomal changes in SV40 infected human fibroblast cultures. Cytogenetics. 3: 45 61.

325. Wolman S. R., Steinberg M.L., Defendi V. 1980. Simian virus 40-induced chromosome changes in human epidermal cultures. Cancer Genet. Cytogenet. 2: 39 46.

326. Wright W.E., Shay J. W. 1992. Telomere positional effects and the regulation of cellular senescence. Trends in Genetics. 8: 193 -197.

327. Wright W. E„ Tesmer V. M., Huffman K. E., Levene S. D., Shay J. W. 1997. Normal human chromosomes have long G-rich telomeric overhangs at one end. Genes & development. 11: 2801 2809.

328. Wurster D. H., Benirschke K. 1970. Indian muntjac, Muntiacus muntjak: a deer with a low diploid chromosome number. Science. 168: 82 84.

329. Yamaguchi N., Huh N. 1979. Establishment and characterization of Indian muntjak cell lines transformed with simian virus 40. J. Gen. Virol. 42: 289 296.260

330. Автор выражает чувство глубокой благодарности профессору Георгию Петровичу Пинаеву, который оказывал постоянную поддержку автору в процессе выполнения работы.

331. Автор глубоко признателен всем своим соавторам. Особенно хочется поблагодарить Олега Константиновича Глебова, Ирину Исааковну Фридлянскую, Татьяну Николаевну Ефремову, Галину Анатольевну Сакута и Владимира Андреевича Самокиша.г<ьга1 1 11б1