Взаимодействие чужеродного генетического материала (ДНК) с геномом высших растений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, доктор биологических наук Картель, Николай Александрович

• Картель, Николай Александрович
• доктор биологических наук
• 1983

Оглавление диссертации доктор биологических наук Картель, Николай Александрович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ДНК РАСТЕНИЙ, МЕТОДЫ ЕЕ ВЫДЕЛЕНИЯ, МЕЧЕНИЯ

И АНАЛИЗА

1.1. Структура и организация ДНК в геноме.

1.2. Методические вопросы выделения и анализа

ДНК растений

1.3. Методические вопросы получения радиоактивных препаратов ДНК и анализа радиоактив-. ности растений.

ГЛАВА 2. ВКЛЮЧЕНИЕ ЭКЗОГЕННОЙ ДНК В РЕЦИПИЕНТ

2.1. Анализ проблемы

2.2. Поглощение растениями экзогенной гомологичной 3Н-ДНК

2.3. Изучение включения экзогенной ДНК методом . радиоавтографии

2Л. Поглощение гомологичной. Зйв-Днк интактными зародышами ячменя

2.5. Изучение включения экзогенной ДНК в ядра клеток зародышей ячменя с помощью двойной метки . НО

ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО И ФЕНОТИПИЧЕСКОГО ВЛИЯНИЯ ЭКЗОГЕННОЙ.ДНК НА РАСТИТЕЛЬНЫЙ. ОРГАНИЗМ.".

3.1. Влияние экзогенной ДНК на включение 3Н-тимидина в клетки растений

3.2. Влияние экзогенной ДНК на завязываемость и всхожесть семян, рост и развитие растений

3.3. Влияние ДНК на каллусообразование и органо-. генез в культуре клеток зародышей ячменя

3.4. Влияние экзогенной ДНК на пестролистность, устойчивость к корневым гнилям и морозоустойчивость растений ячменя.

3.4.1. Пестролистность.

3.4.2. Устойчивость к корневой гнили

3.4.3. Морозоустойчивость.

ГЛАВА 4. ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ДНК

4.1. Краткий литературный обзор

4.2. Влияние ДНК на образование аберраций хро-. мосом у растений ячменя

4.3. Влияние ДНК на частоту и спектр повреждений хромосом в клетках облученных семян ячменя.

4.3.1. Эксперименты по действию ДНК на общую частоту аберраций хромосом.в клетках . облученных семян

4.3.2. Влияние ДНК на соотношение одиночных и двойных мостов в клетках облученных семян.

4.3.2.1. Зависимость эффекта ДНК от концентрации и нативности препарата

4.3.2.2. Эффективность ДНК разного происхождения

4.4. Частота и спектр аберраций хромосом при обработке облученных семян геномными. фракциями ДНК

ГЛАВА 5. ИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ДНК

5.1. Состояние проблемы

5.2. Способы введения ДНК и исходный материал, использованные в экспериментах по индуцированию наследственных изменений

5.3. Генетические эффекты чужеродной ДНК

5.3.1. Реверсия мутантного признака вакси к дикому типу

5.3.2. Фенотипическая изменчивость

5.3.3. Наследственные изменения хозяйственно- . полезных признаков ячменя

5.4. Анализ возможных механизмов действия

ДНК на геном растений.

5.5. О перспективах получения генетической трансформации у сельскохозяйственных растений

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Взаимодействие чужеродного генетического материала (ДНК) с геномом высших растений»

Одним из главных направлений современной генетики является изучение структурной организации и функционирования наследственного аппарата, а также разработка приемов и методов кон -струирования новых генетических структур с целью создания клеток и целых организмов с заданными свойствами. Бурное развитие эти исследования получили после доказательства генетической роли и установления вторичной структуры ДНК. По существу все наиболее важные достижения биологии и генетики наших дней связаны с успехами в исследовании нуклеиновых кислот. Получение гибридных молекул ДНК, их клонирование и трансляция в трансформированных клетках приобретают в настоящее время трудно пере оценимое значение особенно для медицины и сельского хозяй -ства.

До недавнего времени молекулярно-генетические исследования проводились в основном на прокариотах - бактериях, фагах, вирусах. На пневмококках, стрептококках, кишечной палочке,си-незеленых водорослях четко показано, что чужеродный генетический материал - ДНК - способен проникать в клетки, интегиро-вать и нормально функционировать в их геноме, изменяя наследственные признаки реципиентного организма.

Что касается возможности генетической трансформации у высших организмов, то долгое время этот вопрос оставался открытым. В 60-х и начале 70-х годов на животных были получены многочисленные, но в основном отрицательные данные. Положительные результаты, как правило, плохо воспроизводились (см. обзорыLedoux L. » 1971; Бердышев Г.Д., Масюк А.И., 1974; Картель H.A., 1981).

Однако в последние годы, благодаря использованию культуры клеток и селектируемых маркеров, генетическая трансформа

6 . . ция убедительно показана на дрожжах ( Hinnen A., Hicks J.B.,

Fink g.r. » 1978), на клетках млекопитающих ( Baechetti s.,

Graham F.L. , I977;wigler M., Pellicer A., et al. ,1978) и рыбах-меченосцах ( Vilkind S., Haas-Andela H., Anders F.,

1976).

На растениях исследования по генетической трансформации начались практически лишь в 70-х годах. К началу наших иссле-> дований по биологическому действию чужеродной ДНК на растения (Турбин Н.Б., Сойфер В.Н., Картель H.A. и др., 1973) были известны лишь работы Кое и Саркара на кукурузе ( Сое E.H., Sarkar K.R. , 1966) и Хесса на петунии (Hess D. , 1969; 1970; 1971). ivieEfly тем изучение биологической активности чужеродной ДНК, включая генетическую трансформацию, у высших растений имеет важное теоретическое и практическое значение.

Исследования показывают, что наряду с общими закономерностями в строении и функционировании геномов прокариот и эука-риот между ними существуют большие различия, проявляющиеся прежде всего в огромной сложности наследственного аппарата высших по сравнению с низшими организмами, а также в механизмах функционирования генома и реализации наследственной информации в процессе онтогенеза (Корнберг А., 1977; Стент Т., 1979). Существуют также определенные различия в структуре и организации ДНК в геноме между растениями и животными (Бердышев Т.Д., Кри-воручко И.Ф., 1979).

Необходимо подчеркнуть, что наши знания о наследственном аппарате высших организмов, в особенности растений, все еще крайне недостаточны. Вместе с тем, метод генетической трансформации позволяет изучать закономерности взаимодействия чужеродного генетического материала с геном реципиента, организацию и механизмы функционирования и регуляции сложных гене -тических структур клеток.

Особую актуальность приобрела проблема разработки метода генетической трансформации у растений в связи с успехами генетической инженерии у бактерий, позволяющей in vitro получать гибридные (рекомбинантные) молекулы ДНК и синтезировать новые гены. Разработка эффективного метода трансформации, открывая большие возмоености для создания принципиально новых подходов в селекции, позволяет конструировать новые формы растений. А как известно, одной из главных задач, выдвинутой Продовольственной программой страны в области сельского хозяйства, является дальнейшее генетико-селекционное улучшение культурных растений, создание нетрадиционных методов повышения их урожайности, качества продукции, устойчивости к неблагоприятным факторам.

Наряду с изучением проблемы генетической трансформации заслуживают серьезного внимания также совершенно не исследованные на растениях вопросы физиолого-биохимического, мута -генного и цитогенетического действия чужеродной ДНК на растительный организм. К настоящему времени не получили окончательного решения такие важные проблемы как механизмы возникновения аберраций хромосом, спонтанных и индуцированных мутаций, репарации повреждений генетического материала. Обнаружение в последние годы новых интересных явлений, закономерностей и фактов (избыточная ДНК в виде повторов, транспозоны, интроны и т.д.) заставляет по новому взглянуть и осмыслить представления по указанным проблемам.

Одним из подходов к изучению механизмов возникновения аберраций хромосом и их репарации, является, например, применение веществ, модифицирующих повреждающее действие физических и химических факторов. Известно, что ДНК также может влиять на повреждения хромосом, причем некоторые особенности этого модифицирующего влияния позволяют предполагать специфичность механизма ее действия, отличающегося от механизма действия других веществ. Поэтому использование ДНК в подобных цитогенетических исследованиях может быть весьма эффективным*

Некоторые особенности биологического действия ДНК позволяют предположить, что наблюдаемые эффекты, по крайней мере в ряде случаев,обусловлены комплементарным взаимодействием фрагментов экзогенной ДНК с ДНК хромосом клетки (Гершензон Ü.M., Александров Ю.Н., Малюта С.С., 1975). Локусоспецифиче-ское взаимодействие (рекомбинация) экзогенной ДНК с геномом клетки является необходимой предпосылкой генетической трансформации. В связи с этим, изучение биологической активности ДНК одновременно может быть полезным для разработки методов трансформации.

Исследование проблемы генетической трансформации и других биологических эффектов чужеродной ДНК у растений невозможно без исследования механизмов поглощения и дальнейшей судьбы экзогенного генетического материала в клетке, без разработки эффективных методов его введения в реципиентный организм.

Эта проблема в последние 10-15 лет привлекла усиленное внимание исследователей, однако все еще находится на стадии разработок (см, обзоры Kleinhofs А. , 1977; Картель Н.А,, •i

1981). Не выяснены теоретические основы взаимодействия чужеродного генетического материала с геномом высших растений. Не разработаны методы использования препаратов ДНК для индуцирования наследственных изменений у высших растений»

Исследования по данной проблеме в нашей стране впервые были начаты нами (Институт генетики и цитологии. АН БССР, г.Минск) совместно с академиком АН БССР и ВАСХНИЛ Н.В.Турбиным

ВНИИ прикладной молекулярной биологии и генетики, г.Москва) в 1972 г.

В представленной диссертационной работе излагаются результаты исследований по:

1. Изучению некоторых методических вопросов, связанных с выделением ДНК растений, с получением высокомеченной по 3Н-тимидину растительной ДНК in vivo и in vitro и анализом реципиентного материала.

2. Изучению условий и методов введения чужеродной ДНК в клетки и органы растений, ее сохранности и взаимодействию с ДНК клетки, а также разработке эффективных систем для исследования биологической активности экзогенного генетического материала.

3. Изучению морфо-физиологических эффектов ДНК, ее влиянию на рост, развитие и изменчивость растений.

Изучению модифицирующего влияния ДНК на частоту и спектр аберраций хромосом в клетках облученных семян, на кал-лусо- и органогенез в культуре клеток облученных зародышей ячменя.

5. Изучению генетического действия чужеродной ДНК при разных способах ее введения в реципиент и анализу полученных наследственных изменений.

6. Выяснению возможности генетической трансформации высших растений с помощью чужеродного генетического материала.

Выполнением этих исследований преследовалась цель изучения нового направления в генетике растений - взаимодействие чужеродного генетического материала с геномом высших растений. Главной задачей исследования являлась разработка теоретических подходов и выявление закономерностей взаимодействия экзогенной ДНК с геномом высшего растения, а также разработка методических путей ее использования как фактор^наследственной изменчивости для получения селекционно-ценных форм растений.

В процессе экспериментальных исследований, выполненных автором в течение 1972-1982 гг., был изучен прежде всего ряд недостаточно разработанных методических вопросов, касающихся особенностей выделения ДНК из различных органов растений, получения высокомеченной по 3Н-тимидину ДНК in vivo и in vitro , анализа меченного растительного материала методом введения экзогенной ДНК в клетки и органы растений, которые могут быть использованы для изучения биологической активности ДНК и в селекционной работе с сельскохозяйственными культурами. "Способ индуцирования наследственных изменений у зерновых-самоопылителей" зарегистрирован в качестве изобретения.

Впервые выявлен цитогенетический эффект ДНК,заключающийся в изменении спектра аберраций хромосом в клетках корешков облученных семян ячменя под влиянием ДНК эукариот и показано отсутствие этого эффекта с ДНК прокариот. Эти данные свидетельствуют о сайт-специфическом действии ДНК донора и могут служить одним из подходов к выяснению механизмов взаимодействия чужеродного генетического материала и генома растений.

Установлено генетическое действие вводимой неполовым путем чужеродной генетической информации на растительный организм. Зю позволяет использовать препараты ДНК в качестве фактора, индуцирующего наследственные изменения и тем самым расширить возможности мутационной селекции сельскохозяйственных культур.

На основании выявленных закономерностей возникновения и наследования генетических изменений предложен и обоснован механизм генетического действия тотального препарата ДНК, заключающийся в том, что экзогенная ДНК через сайт-специфическое взаимодействие подобно мобильным генетическим элементам (тран-спозонам) оказывает регуляторное действие на геном реципиент-ного растения.

Исследована возможность генетической трансформации у высших растений и показаны перспективные пути получения направленных наследственных изменений у сельскохозяйственных растений, в том числе с использованием разработанной системы: интактные зародыши - каллусная культура.

Теоретическое обобщение полученных автором и другими исследователями данных свидетельствует о взаимодействии чужеродного генетического материала - ДНК - с геномом растений и ее способности индуцировать цитогенетические и генетические эффекты у высших растений, что позволяет рекомендовать разработанные нами методы и системы для использования в селекционной работе с сельскохозяйственными культурами. Совместно с сотрудниками БелНИИ земледелия МСХ БССР получены формы ячменя из сорта Надя, представляющие селекционную ценность. Образцы переданы селекционерам Западного селекцентра ВАСХНИЛ и для регистрации в ВИР.

Автор выражает глубокую признательность академику АН БССР и ВАСХНИЛ Н.В.Турбину и академику АН БССР Л.В. Хотылевой,оказавшим консультативную помощь и поддержку при проведении данных исследований, а также сердечную благодарность сотрудникам группы, принимавшим непосредственное участие в выполнении представленной работы: К.И.Забеньковой, О.В.Квитко, Т.В.Мане-шиной, С.Е.Аблову.

12

Заключение диссертации по теме «Генетика», Картель, Николай Александрович

ВЫВОДЫ

1. Впервые проведено систематическое исследование действия экзогенной ДНК на растительный организм. На примере зерновой культуры ячменя изучено и показано физиологическое, цито-генетическое и генетическое действие изо-, гомо- и гетерологич-ной ДНК.

2. Изучен процесс вхождения экзогенной ДНК в клетки и ядра растения и отдельных его органов. На интактных зародышах семян установлены закономерности проникновения экзогенной ДНК в клетки и ядра клеток, определены оптимальные сроки введения и концентрации препаратов ДНК. В инкубационном растворе ДНК сохраняется в высокополимерной форме в течение не менее 10 часов. Поглощение ДНК.ядрами клеток зародышей до 200 мкг/мл возрастает прямопропорционально концентрации ее в исходном растворе, при более высоких концентрациях интенсивность поглощения замедляется.

3. В градиенте хлористого цезия с использованием ДНК, мечеq ной по °Н-аденину и 5-бромдезоксиуредину, показано включение в ядра клеток зародышей высокополимерной гомологичной ДНК и сохранность ее в ядрах в интактной форме не менее 5-6 часов. Длительная инкубация зародышей (до 24 час) не приводит к увеличению поглощения ДНК. Поглощенная ядрами ДНК частично разрушается, реути-лизируется и возможно частично интегрирует в геномную ДНК реципиента, о чем свидетельствует появление промежуточного пика по плотности.

4. ДНК, как сложный биополимер и носитель наследственной информации, оказывает разнообразное действие на реципиентные растения. Она способна проявлять как неспецифические, так и специфические морфофизиологические эффекты, которые можно наблюдать не только на организмах, подвергнутых воздействию, но и в их потомстве.

5. Гомологичная ДНК в концентрациях 50-200 мкг/мл не оказывает влияния на индукцию каллусов из зародышей ячменя. Вместе с тем ДНК существенно влияет на интенсивность роста каллусов и их морфо-генетические потенции. Обработка гомологичной ДНК облученных зародышей повышает жизнеспособность каллусов, однако существенно не сказывается на нарастании массы каллусов из облученных зародышей. ДНК, а также совместное действие ДНК и радиации в нулевом пассаже снижают, а в первом - повышают регенерационную способность каллусов.

6. ДНК высших организмов, как правило, не вызывает повреждений хромосом в клетках растений. Однако она способна модифицировать частоту и спектр аберраций хромосом индуцируемых радиацией. Установлено действие ДНК на соотношение хромосомных и хрома-тидных обменов в анафазе первого митотического цикла в корешках облученных семян. Доля одиночных мостов в общей частоте обменных перестроек возрастает с увеличением концентрации ДНК и зависит от нативности и происхождения препарата ДНК. ДНК прокариот не влияет на соотношение одиночных и двойных мостов индуцируемых радиацией.

7. Установленные закономерности модифицирующего действия экзогенной ДНК на спектр обменных перестроек хромосом подтверждают данные с радиоактивной меткой о включении нативной ДНК в клетки реципиента, указывают на участие экзогенной ДНК в репарации потенциальных повреждений, ведущим к обменным перестройкам, а также показывают оцределенную специфичность во взаимодействии ДНК донора и генома реципиента.

8. Предложена гипотеза возможного молекулярного механизма цитогенетического действия экзогенной ДНК, основанная на взаимодействии ДНК донора и реципиента по гомологичным сайтам локальной денатурации (лабильным АТ-богатым участкам).

9. Показано, что изо-, гомо- и гетерологичная (злаков) ДНК способна индуцировать наследственные изменения. Однако их частота, характер проявления и наследования, как правило, отличаются от типичных мутаций.

10. Обоснована, как наиболее эффективная для получения наследственных изменений у самоопыляющихся растений, система инкубации цветков в ДНК на стадии зрелой пыльцы. Способ получения наследственных изменений путем введения ДНК в колосья на стадии зрелой пыльцы зарегистрирован в качестве изобретения.

11. Анализ полученных в работе данных позволяет заключить, что генетическое действие ДНК, также как и модифицирующее, связано с взаимодействием фрагментов поглощенной ДНК (в виде эпи-сомы или экзосомы) и генома реципиента по сайтам гомологии. Наиболее последовательное объяснение генетического действия

ДНК на растение находит в рамках представлений о механизме генетической регуляции с помощью подвижных повторяющихся генетических элементов.

12. Показано, что интактные зародыши семян растений являются удобной системой для введения -экзогенного генетического материала. Она может быть предложена,по крайней мере для злаковых растений, с целью изучения проблем биологической активности ДНК, в том числе и генетической трансформации поскольку это еще и удобная система для получения каллусной культуры и регенерации растений.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Носитель наследственной информации - ДНК - является сейчас объектом тщательного изучения и использования в качестве фактора генетической изменчивости как для прокариот, так и для высших организмов, в том числе и растений. Наименее исследованной является ДНК растений как в плане ее организации в геноме, так и в плане изучения ее биологической активности.

В настоящей работе впервые проведено систематическое исследование возможных аспектов взаимодействия экзогенной ДНК и растительного генома.

В ходе исследований был изучен ряд методических вопросов, касающихся совершенствования и упрощения методик выделения ДНК, получения меченых по 3Н-тимидину молекул ДНК in vivo и vitro . Разработан метод получения меченой по 3Н-тимидину ДНК на интактных зародышах семян, позволяющий повысить на 1-2 порядка по сравнению с существовавшими ранее методами активность растительной ДНК. Выявлены условия и подобраны системы, в которых экзогенная ДНК длительное время способна сохранять высокую полимерность в процессе обработки реципиента.

Поглощение экзогенной ДНК клетками растений и возможность ее интеграции в ДНК реципиента являются краеугольным камнем всех исследований по биологической активности ДНК и в особенности по генетической трансформации.

Несмотря на имеющиеся в литературе противоречивые мнения теоретический анализ показывает, что проникновение экзогенного генетического материала в растительную клетку и ее сохранность там определенное время в полимерной форме в принципе возможны. Задача состоит в том, чтобы найти те оптимальные условия и методы введения ДНК, при которых эта возможность может быть реализована.

Автором проведено детальное изучение поглощения гомологичной и гетерологичной ДНК растениями, отдельными его органа-ми, интактными зародышами семян с помощью радиоактивной и плот-ностной меток, методом радиоавтографии, анализа материала на сцинтилляционном счетчике и в градиенте плотности хлористого цезия.

Сравнивая включение меченого тимидина и ДНК той же активности в проростки, взрослые растения, зародыши семян, нам удалось установить существенные различия в поглощении этих препаратов реципиентными клетками. Не выявлено включение экзогенной ДНК и даже продуктов ее распада в колосья растений, инкубировавшихся корневыми системами в ДНК, в тоже время на цроростках 79 дневного возраста обнаружено поглощение ДНК не только корневыми системами, но и верхней не имевшей контакта с ДНК частью проростка, хотя о степени ее сохранности судить трудно.

Выявлено поглощение экзогенной ДНК зерновками на стадии молочной спелости и развивающимися колосьями после инъекций, пыльцой и завязями после замачивания колосьев на стадии зрелой пыльцы. Показано включение меченой ДНК корешками проростков и изолированными корешками, а также пыльцой методом радиоавтографии. При этом наблюдается в отличие от тимидина накопление зерен серебра не только над ядрами, но и на оболочках клеток, в цитоплазме и в проводящих тканях, что косвенно может свидетельствовать о полимерности проникшей к клеткам и в клетки экзогенной ДНК.

Наиболее детально механизм поглощения ДНК клетками и ядрами растений изучен на интактных зародышах, которые очень удобны для этих целей, а также являются с нашей точки зрения перспективной системой для изучения генетических эффектов ДНК.

В процессе изучения установлены важные закономерности проникновения экзогенной ДНК в клетки и ядра клеток, определены оптимальные сроки введения и концентрации используемой ДНК. Убедительно показано, что полимерная ДНК лучше проникает в ядра клеток по сравнению с ДНК, разрушенной ДНКазой и тимидином в первые часы после замачивания. Эффективность поглощения ДНК и включения ее в ядра существенно не зависела от того, были зародыши облучены предварительно гамма-лучами, вносились ли в раствор протамин-сульфат, ДЕАЕ-декстран, или применялась вакуум-инфильтрация. В тоже время концентрация ДНК от 20 до 200 мкг/мл прямо пропорционально влияет на удельную радиоактивность выделяемой из ядер ДНК. С повышением концентрации ДНК до 700 мкг/ мл в инкубационном растворе рост содержания меченой ДНК в ядрах замедляется. Подсчеты показывают, что в ядра клеток зародышей может войти до 0,5% исходной ДНК.

Разработана модификация метода получения in vivo ДНК с двойной меткой по 3Н-аденину и бромдезоксиуридину. Полученная ДНК использована для изучения проникновения ДНК в ядра зародышей и дальнейшей ее судьбы в реципиенте. С помощью равновесного центрифугирования в хлористом цезии подтверждено относительно быстрое (за 5 час) проникновение гомологичной ДНК в высокополимерной форме в ядра клеток. Более длительная инкубация зародышей в ДНК не приводит к увеличению поглощения; вошедшая ДНК частично разрушается и реутилизируется и частично, по-видимому, интегрирует в геномную ДНК, о чем свидетельствует появление промежуточного пика по плотности.

Таким образом,убедительно показано включение высокополимерной ДНК растений в ядра клеток при замачивании в ней неразрушенных сухих зародышей семян ячменя. Эти исследования для зерновых культур проведены нами впервые и свидетельствуют о том, что ин-тактные зародыши семян зерновых культур являются удобной системой для введения экзогенного генетического материала. Интактные зародыши особенно привлекательны еще и тем, что с успехом могут быть использованы в культуре ткани in vitro . Нами впервые проведены исследования по действию ДНК на каллусообразование и органогенез.

Показано, что при определенном сочетании действия радиации и экзогенной ДНК можно усилить эффективность каллусообразования и способность культуры к регенерации новых растений. Все это позволяет нам рекомендовать интактные зародыши злаковых культур как удобную и перспективную систему для изучения проблем биологической активности ДНК, в т.ч. и генетической трансформации у растений.

ДНК, как сложный природный биополимер и носитель генетической информации, оказывает разнообразные действия на реципиент-ные растения. Проведенные исследования показали, что в зависимости от физиологического состояния реципиента, условий воздействия, происхождения препарата, его чистоты, полимерности и концентрации эффект ДНК может проявляться по разному. ДНК существенно не влияет на репликационный синтез ДНК реципиента, не вызывает пестролистность растений, но может снижать лабораторную и полевую всхожесть семян, завязываемость зерен в обработанных колосьях на стадии зрелой пыльцы, изменять некоторые количественные признаки растений,модифицировать действие радиации, повышать морозоустойчивость и устойчивость растений ячменя к корневым гнйлям. При этом нами показано, что ДНК способна проявлять как неспецифические, так и специфические морфофизиологические эффекты, которые можно наблюдать не только на организмах, подвергнутых воздействию, но и в их потомстве.

Действие ДНК на возникновение повреждений хромосом у растений неоднозначно. Проявляется оно не всегда и зависит от препарата ДНК, физиологического состояния реципиента, в частности, от влажности семян. Обработка ДНК воздушно-сухих семян, а также семян, начинающих прорастать не приводит к образованию аберраций хромосом,однако если используются семена с низкой влажностью, например, 5%, то наблюдается достоверный эффект ДНК.

Таким образом, полученные данные позволяют сделать вывод, что высокополимерная изо-гомо- и гетерологичная (растительная) ДНК, как правило, не индуцируют повреждений хромосом в корешках проростков растений. В тоже время впервые проведенные нами исследования показывают, что ДНК модифицирует частоту и спектр аберраций хромосом, индуцируемых радиацией. Особенно большой интерес представляют наши данные по влиянию ДНК на соотношение хромосомных (двойных мостов) и хроматидных (одиночных мостов) обменов в корешках облученных семян ячменя. Влияние ДНК имеет дозовую зависимость, т.е. возрастает с увеличением концентрации (от 100 до 1000 мкг/мл). При этом эффективными оказываются только нативные препараты. Денатурация молекул ДНК почти полностью устраняет эффект по соотношению перестроек хроматидного и хромосомного типа. Следовательно, модифицирующее действие проявляют только те молекулы ДНК, которые являются двунитевыми и имеют достаточно протяженные участки соединенных водородными связями нуклеотидных пар. По-видимому, нативная структура необходима не только для проникновения ДНК в ядра клеток, но и является необходимым условием для эффективного взаимодействия экзогенной ДНК.

Выявленный феномен зависит также от происхождения ДНК. Оказалось, что доля одиночных мостов в общей частоте обменных аберраций достоверно возрастает лишь под влиянием ДНК из эукариот-ных организмов (ДНК ячменя, тимуса, теленка, дрожжей). Препараты же бактериальной ДНК (кишечной палочки и сенной палочки) не оказали достоверного действия на изменение соотношения обменных перестроек в хромосомах ячменя.

Модифицирующее действие экзогенной ДНК на спектр аберраций, установленное впервые в наших экспериментах, предполагает ряд следствий. Во-первых, наличие эффекта подтверждает наши исследования о проникновении нативной ДНК в клетки зародышей, во-вторых, указывает на участие ДНК в репарации потенциальных повреждений, ведущих к обменным перестройкам, и, в-третьих, подтверждает определенную специфичность во взаимодействии экзогенной ДНК и генома реципиента. Выявленные закономерности в ци-тогенетическом действии ДНК позволили нам предложить гипотезу возможного механизма взаимодействия экзогенной ДНК и ДНК облученных и высушенных семян.

Известно, что ионизирующая радиация вызывает локальную денатурацию молекул ДНК как в районах возникновения одиночных разрывов, так и вне их, что эти участки локальной денатурации играют важную роль в реализации потенциальных повреждений в хромосомные аберрации. Высказывается также предположение, что де-гидротация, нарушая вторичную структуру ДНК, может играть важную роль в появлении структурных мутаций при облучении и воздействии химическими веществами. Можно предположить, что как у сильно высушенных, так и у облученных семян возникают сайты локальной денатурации (например, по легкоплавким АТ-последователь-ностям нуклеотидов), с которыми проникшая в ядро ДНК активно взаимодействует и, следовательно, влияет на процесс реализации потенциальных повреждений, т.е. она может црепятствовать образованию межхромосомных обменов и одновременно повышать вероятность реализации внутрихромосомных (хроматидных) обменов. При этом взаимодействие, по-видимому, происходит по локусоспецифическому механизму, о чем свидетельствует различие в действии ДНК эукариот и прокариот.

Наряду с цитогенетическими эффектами под действием ДНК установлены также наследственные изменения ряда признаков растений ячменя.

Доказательство индуцирования наследственных изменений получено на очень удобной модели - гомозиготной линии ячменя, му-тантной по вакси цризнаку (waxy ). Это позволило проанализировать огромное количество микроспор (зрелых пыльцевых зерен) и, по реверсии мутантного признака к дикому типу, установить определенные закономерности в генетическом действии ДНК на растение.

Исследования показали, что изо, - гомо- и гетерологичная (злаков) ДНК вызывают наследственные изменения. Однако индукция изменений обнаруживается не по всем тестам (нащ)имер, хлорофиль-ным мутациям) и зависит от способа введения ДНК в клетки растений.

Среди исследованных систем для введения тотальных препаратов ДНК была обоснована как наиболее эффективная для получения наследственных изменений у самоопылителей система инкубации в ДНК цветков на стадии зрелой пыльцы. Способ получения наследственных изменений путем введения ДНК на стадии зрелой пыльцы зарегистрирован в качестве изобретения и рекомендуется для расширения наследственной изменчивости у зерновых культур в селекционных целях.

Выявленные наследственные изменения, их частота, характер проявления и наследования, как правило, отличаются от типичных мутаций и не соответствуют классическим представлениям о генетической трансформации. Наследственные изменения часто возникают кластерно, затрагивают сразу несколько признаков, причем как в сторону доминантности, так и в сторону рецессивности. Расположение генов, ответственных за измененные признаки, как цравило, связано с различными группами сцепления. Частота возникающих изменений довольно высокая - 0,08, 5,3%. Дважды были полностью воспроизведены под действием ДНК ржи изменения не только по признаку вакси, но и некоторым другим фенотипическим признакам (например, зазубренности остей). Вместе с тем, аналогичные изменения получены в вариантах с изологичной ДНК. Анализ измененных семей по запасным белкам в крахмальном геле не выявил каких-либо существенных изменений в спектре гордеинов по сравнению с исходной мутантной линией вакси, что подтверждает отсутствие случайного засорения или спонтанного переопыления материала.

Генетический анализ материала главы 5, а также результатов исследований, изложенных в предыдущих главах, и анализ литературы позволяют заключить, что генетическое действие ДНК, также как и модифицирующее, связано с сайт-специфическим взаимодействием фрагментов поглощенной ДНК и генома реципиента.

Наиболее последовательное объяснение генетическому действию ДНК может быть сделано в рамках представлений о механизмах генетической регуляции с помощью подвижных повторяющихся элементов - транспозонов (контролирующих элементов по Мак-Клинток). Это могут быть экзосомомные или эписомные структуры донорной ДНК, которые подобно "пригающим" последовательностям (генам) собственной ДНК, взаимодействуя с ДНК реципиента, изменяют структуру ДНК и экспрессию кодирующих последовательностей. Вместе с тем, при введении тотального препарата ДНК теоретически возможны не только регуляторное, но и мутагенное, и трансформационное действия ДНК на геном реципиентного растения.

На основании полученных результатов и анализа литературы высказаны соображения и предложены системы для дальнейшего исследования проблемы генетической трансформации у сельскохозяйственных растений.

С целью практического использования разработанных методов введения ДНК и получения наследственных изменений поставлены опыты по получению хозяйственно-ценных форм растений ячменя.

Выделены образцы ячменя из сорта Надя, которые переданы селекционерам как исходный материал для селекционной работы, а также в коллекцию ВИРа.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Картель, Николай Александрович, 1983 год

1. Аблов С.Е., Картель H.A. Связывание экзогенной ДНК ядрами и хлоропластами клеток проростков ячменя. Весц1 АН БССР. Сер.бШ.навук, 1980, № 2, с.37-41.

2. Аблов С.Е., Картель H.A. Изучение проникновения экзогенной ДНК в растения методом радиоавтографии. В кн.: Биологические аспекты изучения и радиационного использования животного и растительного мира. Тез.докл. Рига, 1981, с.З.

3. Аблов С.Е., Картель H.A., Забенькова К.И. Изучение проникновения экзогенной ДНК в корешки проростков ячменя методом радиоавтографии. В сб.: Молекулщшая биология. Киев, 1982, вып. 32, с.44-46. ~

4. Аветисов В.А., Валева С.А. Эффект обработки этиленими-ном семян ячменя, облученных гамма-квантами и быстрыми нейтронами. Генетика, 1968, т.4, № 5, с.31-38.

5. Александров Ю.Н., Гершензон С.М. Исследование возможности исправления наследственного дефекта у дрозофилы методом генетической инженерии. ДАН СССР, 1979, т.248, № 3, с.747-748.

6. Александров Ю.Н., Гершензон С.М. Мутагенное действие двух синтетических полирибонуклеотидов и его высокая специфичность. Молек. биология, 1982, вып. 30, с.16-18.

7. Амерханова М.Б., Федотов А.П., Шиян А.Н., Винецкий Ю.П. Расщепление ДНК высших растений рестрикционной нуклеазой Есо El . ДАН СССР, 1976, т.227, №3, с.746-749.

8. Андрощук А.Ф., Мареха Л.Н. Индуцированная пестролист-ность ячменя в Mj, ее наследование и микроспорогенез. Цитология и генетика, 1968, т.2, № I, с.39-34.

9. Антонов A.C. О специфичности первичных структур ДНК хордовых животных. В кн.: Строение ДНК и положение организмов в системе. М., 1972, с.245.

10. Астауров Б.Л., Беднякова Т.А., Гинцбург Г.И. и бр. Опыт получения наследственных изменений у тутового шелкопряда

11. Bombyx mori L. ) посредством межлинейных инъекций дезоксири-бонуклеиновой кислоты. ДАН СССР, i960, т.134, te 2, с.449-452.

12. Ашмарин И.П., Молекулярная биология. Л., 1977. 367~с.

13. Бердышев Г.Д., Масюк А.й. Проблема рестрикации уэука-риот и возможные механизмы этого явления. Молекулярная генетика и биофизика, 1973, № 4, с.91-95.

14. Бердышев Г.Д., Масюк А.И. Действие экзогенной ДНК на организм и клетки эукариотов. Цитол. и генет., 1974, т.8, te 5, с.452-464.

15. Бердышев Г.Д., Криворучко И.Ф. Генетика человека с основами медицинской генетики. Киев, 1979. 447 с.

16. Беридзе Т.Г., Одинцова М.С., Сисакян Н.М. Распределение компонентов ДНК листьев фасоли во фракциях клеточных структур. Молекулярная биология, 1967, т.1, te I, с. 142-153.

17. Беридзе Т.Г. Исследование сателлитных компонентов ДНК рода Phaseoius • Молекулярная биология, 1972, т.6, вып. 6,с.908-914. ° : /

18. Беридзе Т.Г., Брагвадзе Г.П. О свойствах сателлитной ДНК Phaseolus vulgaris . Молекулярная биология, 1976, т.10,te 6, с.1279-1289.

19. Богданов Ю.Ф. Зависимость между синтезом ДНК и типами перестроек хромосом при прорастании семян гороха, облученных рентгеновскими лучами. Генетика, 1965, т.1, te 3, с.35-43.

20. Валодз1н У.Г., Картэлъ М.А., Л1соуская 3.1. Да пытан-ня аб крытэрыях радыеадчувальнасц1 расл1н. Весц1 АН БССР. Сер. б1ял.навук, 1972, № I, с.65-67.

21. Ванюшин Б.Ф., Белозерский А.Н. Нуклеотидный состав де-зоксирибонуклеиновых кислот высших растений. ДАН СССР, 1959,т.129, № 4, с.944-946.

22. Ванюшин Б.Ф. Метилирование ДНК и его значение в диффе-ренцировке видов и эволюции организмов. В кн.: Строение ДНК и положение организмов в системе. М., 1972, с.272-319.

23. Винецкий Ю.П. Генетическая инженерия растительной клетки. В сб.: Культура клеток растений. Изд. Наука. М., 1981,с.106-112.

24. Владыченская Н.С., Антонов A.C. Организация полинукле-отидных последовательностей в геномах различных организмов. В сб.: Строение ДНК и положение организмов в системе. М., 1972, с. 252-278.

25. Габриелан Д.Е. Влияние влажности на характер хромосомных аберраций, вызванных облучением. Баологический журнал Армении, 1976, т.29, № 8, с.51-65.

26. Газарян К.Г., Тарантул В.3. Экспериментальный перенос генов в соматических клетках млекопитающих. Успехи совр.биологии, 1981, т.92, в2(5), с.163-179.

27. Газарян К.Г., Набирочкин С.Д., Эшкинд Л.Г., Гольцов В.А., Попов Л.С., Генинч, Киселев Ф.Л., Снитковский Д.Д., Тато-сян А.Г. Внедрение генома вируса саркомы Рауса в ДНК мышей и

28. Д- meianogaster с П0М01Ч;ью1 микроинъекций. Рекомбинантные ДНК, тез.докл., Пущино, 1982, с.19.

29. Гаузе Г.Г. Митохондриальная ДНК. М., 1977, 225 с.

30. Георгиев Г.П. Гипотеза о структурной организации оперо-на и регуляции синтеза РНК в животной клетке. Молекулярная биология, 1970, т.4, вып. I, с.17-29.

31. Георгиев Г.П. Исследование структуры генома эукариотов в Институте молекулярной биологии АН СССР. Молек.биология, 1977, т.II, вып. 6, c.I27W283.

32. Георгиев Г.П., Гвоздев В.А. Мобильные диспергированные гены эукариот. Вестн.АН СССР, 1980, № 8, с.19-27.

33. Гершензон С.М. Вызывание направленных мутаций у Dro-sophila melanogaster. ДАН СССР, 1939, т.25, № 3, с.224-227.

34. Гершензон С.М., Киселева И.А. Вызывание направленных наследственных изменений у Drosophila melanogaster . ДАН СССР, 1958, 123, № 3, с.554-557.

35. Гершензон С.М., Кок И.П., Самош Л.В. и др. Попытка получения генетических трансформаций у животных с помощью дезокси-рибонуклеопротеида. Журн. общей биологии, I960, т.21, № 5,с.387-389.

36. Гершензон С.М. Вызывание летальных мутаций с помощью препарата ДНУ У Drosophila melanogaster . Журн.общей биологии, 1964, т.25, № 3, с.371-375.

37. Гершензон С.М. Мутагенное действие ДНК и проблема направленных мутаций. Генетика, 1966, т.2, № 5, с.1-12.

38. Гершензон С.М. Обратная транскрипция и ее"значение для общей генетики и онкологии. Успехи совр. биол., 1973, т.75, № 3, с.323-339.

39. Гершензон С.М., Александров Ю.Н., Малюта С.С. Мутагенное действие ДНК и вирусов у дрозофилы. Киев, 1975, 160 с.

40. Гродзинский A.M., Гродзинский Д.М. Краткий справочник по физиологии растений. Киев, 1973, с.

41. Даскалюк В.П., Остаплюк А.Н., Порох Л.С., Тищенко E.H., Лобов В.П. Сравнительное исследование структуры ДНК пшеницы сортов Артемовна, Мироновская 808 и Мироновская яровая. Физиология и биохимия культурных растений, 1981, 13, № 5, с.513-518.

42. Девидсон Д.Ж. Биохимия нуклеиновых кислот. Москва, 1978, с.333.

43. Дегтярев С.Г. Анализ садктуры генома эукариот методом циклизации фрагментов ДНК in vitro . Автореф. канд.дис. Минск, 1982.

44. Дегтярев С.В., Терентьев М.А., Какова О.Ю., Акифьев А.П. Циклические структуры из ДНК мыши и человека как возможная модель подвижных элементов генома уэкариот. ДАН СССР, 1982,т.265, № I, с.206-209. ~

45. Деркамбаев Т.Б., Заиров С.З., Рахманова М.А. Действие эвзогенноей ДНК на свойства белков пшеницы. В сб.: ХП Международный ботанический конгресс. Тез.докл.Л., 1975, с.383.

46. Дорохов Ю.Л., Александрова Н.М. Молекулярные аспекты фитовирусологии. С.-х.биологии, 1980, т.15, №2, с.198-206.

47. Дрожденюк А.П., Сулимова Г.Б., Ванюшин Б.Ф. Содержание 5-метилцитозина в различных классах повторяющихся последовательностей ДНК некоторых высших растений. Биохимия, 1977,т.42, № 8, с.1439-1444.

48. Дрожденюк А.П; Характер метилирования ДНК у некоторых высших растений. Автореф. дис.канд.биол.наук. Мн., 1977, 21 с.

49. Дубинин Н.П., Немцева Л.С., Халиков П.Х. Появление хро-матидных перестроек при воздействии радивции на фазу g^ . Радиобиология, 1971, т.И, вып. I, с.57-63.

50. Дубинин Н.П., Немцева Л.С. Хромосомные и хроматидные перестройки как результат воздействия радиации на фазу Gi клеток семян Allium сера • Цитол. и генет., 1972, т.6, вып. 2,с.99-102.

51. Дэвидскон Дж. Биохимия нуклеиновых кислот. М., 1976,411 с. . .51. ^рмишин А.П. Изучение каллусной культуры in vitro пшеницы и ржи с целью использования в селекционно-генетических исследованиях. Автореф.канд.дис. Минск, 1980, с.20.

52. Епифанова О.И., Терских В.В., Захаров А.Ф. Радиоавтография. M.f Высшая школа, 1977.

53. Калам Ю., Орав Т. Хлорофильная мутация. Таллин, Валгус,1974 . .

54. Капица О.С., Кулинич A.B., Винецкий Ю.П. Спонтанные1ас+ мутанты клеток культуры ткани табака в связи с экспериментами по трансгенозу. ДАН СССР, 1977, с. 235, № 6, с.1426-1429.

55. Каримов М., Лысенко A.M., Винецкий Ю.П., Насыров Ю.С. Структура и функция нуклеиновых кислот и биосинтез белка в растениях. Ташкент, "ФАН", 1977.

56. Картель H.A. Культура клеток сельскохозяйственных растений, ее значение и возможности использования в генетических исследованиях и селекции. В сб.: Генетика продуктивности сельскохозяйственных культур. Мн., 1978, с.ЮО-114.

57. Картель H.A. Поглощение экзогенной гомологичной ДНК клетками растений. В сб.: Молекулярная биология. Киев, 1979, вып. 24, с.65-71. ^

58. Картель H.A. Эффекты экзогенной ДНК у высших растений. Мн., Наука и техника, 1980, с.142.

59. Картель H.A. Генетическая трансформация у растений: проблемы и перспективы. Весц1 АН БССР, сер.б1ял.навук, 1983, № I, с.20-26.

60. Картель H.A., Аблов С.Е. Поглощение экзогенной ДНК проростками ячменя. Весц1 АН БССР. Сер.б1ял.навук, 1978, № 4, с.2022. ; . . . . . .

61. Картэль М.А., Валодз1н У.Г., Сень Л.А. Уплыу кафе1ну напрацэс реал1зацы1 патэнцыяльных пашкоджанняу у абпрамененым на-сенн1 ячменю. Весц1 АН БССР. Сер.б1ял.навук, 1975? № 3, с.47-50.

62. Картель H.A., Забенькова К.И., Аблов С.Ё., Квитко О.В., Манешина Т.В. Исследование поглощения и биологической активноети экзогенной ДНК у растений. В кн.: Тезисы докладов 1У съезда БелОГиС. Мн., 1981, с.196.

63. Картель H.A., Забенькова К.И., Ромащенко А.Г. Получение высокомеченной растительной ДНК in vitro . ДАН БССР, 1982, т.16, № 2, с.185-187. ~

64. Картель H.A., Квитко О.В. Опыт получения о$ищенной высокополимерной ДНК из проростков и зародышей ячменя. Весц1 АН БССР. Сер.бШ.навук, 1977, № I, с.103-105.

65. Картэль М.А., KbItko O.B. Камб1наванае дзеянне экзаген-най ДНК I кафе1ну на храмасомы у ячменю. Весц1 АН БССР. Сер.б1ял. навук, 1977, №6, с. 29-31.

66. Картель H.A., Квитко О.В. Влияние экзогенной ДНК на частоту и спектр радиационных повреждений хромосом у ячменя. ДАН БССР, 1977, T.2I, Ш 7, с.651-654.

67. Картель H.A., Квитко О.В. Модификация кофеином действия экзогенной ДНК на радиационные повреждения хромосом у ячменя. ДАН БССР, 1977, T.2I, №8, с.753-755.

68. Картель H.A., Квитко О.В., Забенькова К.И. Генетические и цитогенетические эффекты экзогенной ДНК у растений. В кн.: 1У съезд ВОГиС им. Н.И.Вавилова. Кишинев, 1982, с.74-75.

69. Картель H.A., Квитко О.В., Сиволап Ю.М., Турбин Н.В. Действие геномных фракций экзогенной ДНК на радиационные повреждения хромосом у ячменя. В кн.: Х1У Международный генетический конгресс. Тез.докл.часть П. Москва, 1978, с. 236.

70. Картель H.A., Манешина Т.В. Биологический эффект гамма-облучения семян ArabicLopsis thaliana(L) Heynh В зависимостиот интенсивности излучения. Радиобиология, 1974, т.16, вып. 6, с. 869-874.

71. Картель H.A., Манешина Т.В. Реакция десинаптического мутанта ( dsds) ячменя на облучение. В сб.: Чувствительность организмов к мутагенным факторам и возникновение мутаций. Вильнюс, 1977, с.42-47.

72. Картель H.A., Манешина Т.В. Каллусообразование у разных по генотипу растения ячменя ( Hordeum vulgare L. ). Цитол. и генет., 1977, т.II, № 6, с. 486-490.

73. Картель H.A., Манешина Т.В. Регенерация растений ячменя в культуре каллусной ткани. Физиол. раст., 1978, т.25, вып. 2, с. 283-287.

74. Картель H.A., Манешина Т.В., Гриб О.М. Каллусообразова-ние и регенерация растений из 2-х недельных эмбрионов ячменя. Ш Всесоюзная конференция "Культура клеток растений". Тез.докл.Або-вян, 1979, с.125.

75. Картель H.A., Манешина Т.В., Гриб О.М. Каллусообразова-ние и регенерация растений из двухнедельных эмбрионов ячменя. Весц1 АН БССР, сер. бШ.навук, 1980, № 5, с. 29-31.

76. Картель H.A., Метельская В.Н. Биологические эффекты экзогенной ДНК на растения ячменя. В кн.: Биологические аспекты изучения и радиационного использования животного и растительного мира. Тез.докл., Рига, 1981, с. 36.

77. Картель H.A., Шатерник Д.А. Активность ДНКаз в гомоге-натах различных органов растений ячменя. Весц1 АН БССР. Сер. б1ял.навук, 1976, №6, с. 106-108.

78. Картель H.A., Шатерник Д.А., Манешина Т.В. и др. Изучение влияния экзогенной растительной ДНК на признак waxy при введении ее в растения в период микроспорогенеза. В сб.: Генетика продуктивности сельскохозяйственных культур. Мн., 1978, c.II5-II9.

79. Квитко О.В. Цитогенетическое действие экзогенной ДНК на облученные семена ячменя. Автореф.дис.кан.биол.наук, Мн., 1980, 20 с.

80. Квитко О.Б., Картель H.A. Получение высокомеченной 3Н-тимидином ДНК ячменя. Весц1 АН БССР. Сер.бШ.навук, 1978, № 5, C.IIO-III.

81. Квитко О.В., Картель H.A. Изменение частоты радиационных хлорофильных химер и мутаций под влиянием экзогенной ДНК у ячменя. В кн.: Изменчивость и отбор. Мн., Наука и техника,1980, с.100-105.

82. Квитко О.В., Картель H.A., Сиволап-Ю.М;, Вербицкая Т.Г. Цитогенетическое действие тотального препарата ДНК и его геномных фракций на облученные семена ячменя. Сб.: Молекулярная биология, 1980, №25, с. 15-17.

83. Ким В.Х., Иванник Б.П., Рябченко Н.И. Зависимость лечебного эффекта ДНК от дозы при введении облученным мышам. Радиобиология, 1977, т.17, вып. I, с.8-11.

84. Кларксон Д. Транспорт ионов и структура растительной клетки. М., 1978, 368 с.

85. Конарев В.Г., Тютерев С.Л. Методы биохимии и цитохимии нуклеиновых кислот растений. Л., 1970, 201 с.

86. Кордюмов B.Ä., Моргун В.В., Черних С.И. Передача дом1~ нантного алеля гена Suuj у кукурудзи за допомогою екзогенно1 ДНК. Доповид1 АН УССР. Сер. Б, 1974, № 8, с. 759-762.

87. Корнберг А. Синтез ДНК. М., 1977, 359 с. ~

88. Кукушкина Л.М. Роль стадий клеточного цикла в образовании аберраций хромосом под действием физических и химических факторов. Автореф. канд.дис. Мн., 1977, с.20.

89. Кушев В.В. Механизмы генетической'рекомбинации. Л-д,1971. .

90. Ландау С.М. Использование генома sv-40 в качествевектора для эукариотических клеток. Мол.биология, 1982, вып. 30, с.57-69. ~

91. Леду Л., Уар Р., Рингертс А и др. Коррекции тиаминовых мутаций у Arabidopsis с помощью ДНК. В сб.: Х1У Международный генетический конгресс: Тез.докл. М., 1978, ч. 2, с. 247.

92. Ли Д.Е. Действие радиации на живые клетки. М., 1963, 157 с. .

93. Либинзон P.E., Константинова В.В., Мукеинова К.Н. и др. Эффективность высокошшшерной ДНК цри лечении острой лучевой болезни. Радиобиология, 1963, т.З, № I, c.III-116.

94. Лобанок Е.В., Картель H.A., Фомичева В.В. Синтез индо-лилуксусной кислоты онкогенными и неонкогенными штаммами А. tumefaciens • ДАН БССР, т.26, Ш 6, с. 565-566.

95. Лобов В.П., Скрипка Л.В. Повторяющиеся последовательности в ДНК кукурузы. Физиология и биохимия культурных растений, 1981, т.13, № 5, с.477-480.

96. Лобов В.П., Скрипка Л.В. Особенности ДНК линейной кукурузы. Физиология и биохимия культурных растений, 1980,т.12, № 3, с.280-284.

97. Лучник Н.В., Фесенко Э.В., Овчинникова В.Г., Морозов К.Н. Аберрации хромосом, вызываемые облучением разных периодов интерфазы клеток проростков Crépis capilaris . Генетика, 1974, T.IO, № 8, с.47-57.

98. Лучник А. Короче кизнь короче ДНК. Химия и жизнь, 1981, № 4, с.9.

99. Малюта С.С., Левенко Б.А., Лазуркевич З.В., Легейда В.Ф. Попытка передачи бактериального гена растительным клеткам. В кн.: Тр. 1У съезда микробиологов Украины. Киев, 1975, с.204241. . .

100. Мандель М., Мармур Д. Определение содержания ГЦ парв ДНК по кривым плавления. В кн.: Методы исследования нуклеиновых кислот. M., 1970, с. 191.

101. Манешина Т.В., Гриб О.М., Картель H.A. Каллусообразование и регенерация растений из двухнедельных эмбрионов ячменя. Весц1 АН БССР, сер.бШ.навук, 1980, № 5, с. 29-31.

102. Маринова Е.И., Владыченская Н.С., Антонов A.C. Нукле-отидный состав ДНК некоторых однодольных растений. ДАН СССР, 1969, т.185, №4, с. 945-948.

103. Метлицкий Л.В., Озерецковская О.Л. Индуцирование у растений устойчивости к инфекщюнным болезням. Успехи совр. биологии, 1981, т.92, в 3(6), с.406-420.

104. Мирошниченко Г;П., Антонов A.C. Молекулярная организация и эволюция структуры ДНК высших растений. В сб.: Молекулярные основы геносистематики. M., 1980, с.130-152.

105. ПО. Мирошниченко Г.П., Дьяченко Л.Ф, Современные методы выделения ДНК из высших растений. Успехи совр. биологии, 1981, т.91, № I, с.49-60.

106. Модилевский Я.С. Цитоэмбриология высших растений. Киев, 1963, 104 с.112, Моргун В.П. Экспериментальный мутагенез и его использование в селекции кукурузы. Автореф. докт.дис., 1980, с.45.

107. ИЗ. Моргун В.В., Кордюм В.А., Ларченко Е.А., Ткаченко Л.В. Передача наследственных признаков с помощью экзогенной ДНК у кукурузы. В сб.: Молекулярная биология. Киев, 1980, вып. 26, с.9-12.

108. Муксинова К.Н., Русинова Г.Г., Либинзон Р.Е. Репарация радиационных повреждений хромосом клеток костного мозга при введении высокополимерной гомологичной ДНК. Радиобиология, 1971, T.II, № I, с.69-73.

109. Нецветаев В.П. Генетический контроль синтеза гордеина и его связь с хозяйственными признаками у ярового ячменя. Автореф. канд.дис. Минск, 1980, с. 21.

110. Никитин В.А., Земскова М.Ю., Бендукидзе К.А. Метод микроинъекций для введения ДНК в ядра клеток животных. Тез.докл. Рекомбинантные молекулы ДНК. Пущино, 1982, с.22.

111. Николаевская Н.Г., Муксинова К.Н. Влияние предварительного введения ДНК на частоту радиационных повреждений эфомо-сом. Радиобиология, 1974, т.14, вып. 5, с.695-699.

112. Николаевская Н.Г., Мушкачева Г.С., Муксинова К.И. Влияние ДНК млекопитающих и Escherichia coli на хромосомы соматических клеток крыс. Генетика, 1975, т.II, № 6, с. 83-88.

113. Николаевская Н.Г. Изучение действия низкомолекулярной ДНК на геном соматических клеток здоровых и облученных животных. Радиобиология, 1976, т.16, №6, с. 897-899.

114. Николов X., Георгиева С. Хлорофильные химеры в Mj и их значение при учете индуцированных хлорофильных мутаций у ячменя. Генетика, 1975, т.II, № 6, с. 47-50.

115. Никольский Ю.К. Некоторые соображения о механизме взаимодействия модификаторов радиационно-генетических повреждений (роль структуры воды). Информ. бш. Радиобиология, 1975, вып. 18, с.22-24.

116. Нуждин Н.И. Влияние нуклеиновых кислот на образование морфозов. Бюл. экспер. биол. и мед., 1946, т.22, № 4, с.3840. .

117. Паноян P.E., Сакян М.А. Влияние радиопротектора АЭТна цитогенетические изменения клеток корешков ячменя при разных дозах гамма-обучения. Биол. журнал Армении, 1975, т.28, № 8, с.74-77.

118. Петров И.А. Индуцирование мутаций растительными мутагенами. В сб.: Индуцирование мутаций биологическими мутагенами. Л., 1972, с. 2-44.

119. Петров Н.Д., Шальнов М.И. Испытание ДНК, РНК, гидро-лизата РНК и оротовой кислоты в противолучевой защите лейкопо-эза кроликов и 1фыс. Радиобиология, 1966, т.6, № I, с.101-104.

120. Пирузян Э.С., Андрианов В.М., Могутов М.А., Велико-дворская Г.А., Стехин И.Н., Царьков С.Г. Принципы передачи генетической информации в клетки растений с помощью TL -плазмиды мини-Ми вектора. Тез. докл. Рекомбинантные ДНК. Пущино, 1982, с.8.

121. Поглазов А.Б., Щукин H.H. Плазмиды TL Agrobacterium tumefaciens и их роль в образовании опухолей у растений. Молекулярная биология, 1980, т.14, вып. 4, с.725-733.

122. Поддубная-Арнольди В.А. Эмбриология покрытосеменных растений. М., 1964, 482 с.

123. Попова О.Н.,"Шершунова В.А. Частота ^аху-мутаций в пыльцевых зернах ячменя, выращиваемого в условиях хроническогооблучения малыми, дозами. Генетика, 1981, т.17, № 7, с.1229-1233.

124. Прозоров A.A. Генетическая трансформация у микроорганизмов. М., 1966, с.128.

125. Прозоров A.A. Генетическая трансформация и трансфек-ция. M., 1980, 248 с.

126. Ранчалис В.П. Регуляция чувствительности высших растений к мутагенным факторам. Вильнюс, 1978, 185 с.

127. Рапопорт И.А. Влияние тимонукдеиновой и нуклеиновой кислот, некоторых компонентов и их солей на мутации. ДАН СССР, 1940, т.27, № 9, с.1033-1036.

128. Рогачева С.А., Лузанова О.В., Клышук К.Н., Шарова Э.Г., Либинзон P.E. Зависимость лечебного действия гетерологич-ной ДНК при острой лучевой болезни собак от дозы препарата. Радиобиология, 1971, т.II, вып. I, с.Юб-ИЗ.

129. Романов В.И. Денатурация ДНК и мутагенез. Успехи соврем. генет., 1979, вып. 8, с.147-167.

130. Рябченко Н.И., Спитковский Д.М., Цейтлин П.И. Некоторые физико-химические аспекты однотяжевой ДНК. Биофизика, 1963, № 8, с.19.

131. Садыков С.С., Эргашев А.К., Димани А.Д. Сулейманов З.М. Защитные эффекты предшественников ДНК и РНК при химическом мутагенезе в клетках Crépis capilaris . ДАН УзССР, 1975, т.12, с.49-50.

132. Сиволап Ю.М. Перспективы использования генной инжене-тии в селекции растений. Сб.научн. трудов Всесоюзного селекционно-генетического института, 1976, вып. 14, с.22-28.

133. Сиволап Ю.М., Хорошевская Л.П. Эффект введения участков генома ржи растеням ячменя. Цитол. и генет., 1976, т.10,4, с.320-325. . / '

134. Сиволап Ю.М., Вербицкая Т.Г. Изучение молекулярной организации генома ячменя ( Hordeum vulgare )• Цитол. и генет., 1976, т.10, № 6, с.511-515.

135. Сиволап Ю.М., Дьяченко Л.Ф., Вербицкая Т.Г. Исследование интермолекулярной гетерогенности ДНК растений. В сб.: Научн.тр. ВСГИ, 1976, вып. 13, с.48-59.

136. Сиволап Ю.М., Образцов И.С., Хорошевская Л.П. генетический эффект введения экзогенной ДНК в высшие растения. В сб.: Молекулярная биология. Киев, 1978, вып. 19, с.20-27.

137. Сиволап Ю.М., Образцов И.С., Бабак Н.М. Поглощение и особенности расцределения ДНК Bacillus subtiiis в тканях Pisum sativum« Цитол. и генет., 1979, T.I3, № 4, с.309-313.

138. Сиволап Ю.М. Проблемы генной инженерии в селекции растений. Цитол. и генет., 1979, т.13, № 5, с.411-420.

139. Сиволап Ю.М., Образцов И.С. Возможность генетической трансформации у высших растений. В сб.: Молекулярная биология, Киев, 1980, вып. 26, с.3-8.

140. Слюсаренко А.Г. Первичная структура ДНК как таксономический признак у высших растений. В сб.: Строение ДНК и положение организмов в системе. М., 1972, с.196-210.

141. Снитковский Д.М., Цейтлин П.И. К вопросу об оцределе-нии некоторых молекулярных параметров дезоксирибонуклеиновой кислоты методом вискозиметрии. Биофизика, 1958, № 3, с.396.

142. Сойфер В.Н., Картель H.A., Циеминис К.К., Аграновский A.A. Прямое изучение синтеза ДНК в проростках ячменя в норме, при облучении гамма-лучами и при постлучевой обработке кофеином. Докл. ВАСХНИЛ, 1973, № II, с.8-10.

143. Сойфер В.Н., Циеминис К.К., Турбин Н.В. Выделение и очистка ДНК из различных органов высших растений. Докл. ВАСХНИЛ, 1973, № 5, с.10.

144. Сойфер В.Н., Циеминис К.К., Титов Ю.Б. Включение 3Ни ^С-тиамина и тимидина в ДНК на ранних стадиях развития растений и получение высокомеченой ДНК растений. Физиол.раст., 1974, т.21, вып. 5, с.946-951.

145. Спирин A.C. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот. Биохимия, 1958, 23, с.656.

146. Стент Г. Молекулярная генетика. М., 1974. 535 с.

147. Сулимова Г.Е., Дрожденюк А.П., Ванюшин Б.Ф. Выделение и очистка ДНК высших растений с помощью бромистого цетнлтриме-тиламмония в сочетании с хроматографией на оксиапатите. 1. Биоорганическая химия, 1976, т.2, № 9, с.32-35.

148. Сулимова Г.Е., Слюсаренко А.Г. Выделение дезоксирибо-нуклеиновых кислот из тканей высших растений. В кн.: Строение ДНК и положение организмов а системе. Изд.Московского университета, 1972.

149. Тарасенко Н.Д. Синтез ДНК в клетках зародышей прорастающих семян ячменя и пшеницы при воздействии химическими мутагенами. Генетика, 1970, т.6, № I, с.36-41.

150. Тарасов В.А., Македонов Г.П. Генные мутации и структурные перестройки генома. Тез.докл. 1У Всес. съезда Общ. генет. и селекци. Кишинев, 1982, с.10-11.

151. Турбин Н.В., Картель H.A. О влиянии чужеродного добавочного опыления на изменчивость в потомстве растений ячменя. ДАН СССР, 1972, т.202, № 2, с.456-458.

152. Турбин Н.В., Сойфер В.Н., Картель H.A., Чекалин Н.М., Дорохов Ю.Л., Титов Ю.Б., Циеминис К.К. Генетическое изменениецризнака waxy у ячменя под влиянием экзогенной ДНК дикого типа. М., 1973, с.29.

153. Турбин'Н.В., Сойфер В.Н., Картель H.A. и др. Генетическое изменение признака waxy у ячменя под влиянием экзогенной ДНК дикого типа. С.-х. биол., 1974, т.9, № 2, с.204-215.

154. Турбин Н.В., Сойфер В.Н., Картель H.A. Проверка возможности осуществеления генетической трансформации у растений при использовании ДНК той же линии. Докл. ВАСХНИЛ, 1975, № 12, с.4-5. .

155. Турбин Н.В. Генетическая инженерия: реальность, перспективы. Сб.: Генетическая инженерия, изд. Знание. М., 1978,с.45-55. .

156. Федорова Т.А., Терещенко О.Я., Мазурик В.К. Нуклеиновые кислоты и белки при лучевом поражении. М., 1972, 604 с.

157. Филатов Н.С. Физиологическое влияние ДНК донора у свеклы. Цитол. и генет., 1973, т.7, № 4, с. 338-341.

158. Фодор И., Беридзе Т. Изучение структуры сателлитной фракции геномов растений: Структурная организация рибосомных ДНК. В кн.: Матер. 1У Всесоюз. симпозиума "Молекулярные механизмы генетических процессов". Тез.докл. М., 1979, с. 138.

159. Хотылева Л.В., Ермишин А.П. Каллусообразование и стеблевой органогенез в культуре in vitro у дителоцентрических линий мягкой пшеницы сорта Чайниз Спринг. ДАН БССР, 1979, т.23,1. I, с.85-87.

160. Цивин М.О. Влияние тимонуклеиновой кислоты на вго-sophila melanogaster. ДАН СССР, 1946, т.52, № 3, с.263-264.

161. Чащин H.A., Кордюм В.А. Сравнительная характеристика методов исследования взаимодействия экзогенной ДНК с изолированными растительными ядрами. Молекулярная биология, вып.26, 1980, с.16-19.

162. Чащин H.A. Влияние катионов на поглощение экзогенной ДНК изолированными ядрами проростков кукурузы. Структура и генетические функции биополимеров. Киев, 1981, с.68-70.

163. Чеботарев Е.Е., Рябова Э.З., Индык В.М. Защитное и лечебное действие экзогенной ДНК при облучении быстрыми нейронами. Киев, 1974. 140 с.

164. Чубыкин В.Л. Особенности образования сзфуктурных мутаций хромосом при спонтанном и индуцированном мутагенезе. Авто-реф. канд. дис. Новосибирск, 1980, с.16.

165. Чуриков H.A., Ильин Ю.В., Георгиев Г.П. Новый принцип организации генетического материала у эукариот: характеристика гена ДМ 225 представителя множественных рассеянных по хромосомам генов дрозофилы. ДАН СССР, 1978, т.239, № 6, с.1486-1489.

166. Шальнов М.И. Радиационно-химические повреждения ДНК in vitro и in vivo . В кн.: Нуклеиновые кислоты и биологическое действие ионизирующей радиации. М., 1967, с.28-44.

167. Шапот B.C., Чудинова И.А., Кречетова Г.Д. В сб.: Современные методы в биохимии. М., 1964, с.267.

168. Шапот B.C. Нукмазы. М., 1968, с.149.

169. Швед А.Д., Соломко А.П., Потопальский А.И. и др. Структурно-функциональные особенности модифицированных нуклеиновых кислот. В сб.: Молекулщшая биология. Киев, 1980, вып. 26, с.64-78.

170. Шевелуха B.C., Беленкевич O.A., Картель H.A. и др. Наследственные изменения у растений ячменя под влиянием ДНК овса. В сб.: Молекулярная биология, 1982, вып. 32, с.49-52.

171. Юшкова Л.Ф., Неханевич Н.Ф., Потапов В.А., Ромащенко А.Г. Модификация метода выделения ДНК-полимеразы из E.coli Биохимия, 1976, т.41, с.420-425.

172. Amos Н. Protamine enhancement of ША uptake by cultured chick cells, Biochem.Biophys.Res.Commun., 1961, vol.5, N 1, p.1-4.

173. Ando Т., Fukuda E. Effects of drying of deoxyribonucleic acids. J.Had.Res,, 1974, vol.15, N 4, p.212-215.

174. Anfinsen C.B., Redfield R.R., Choate W.L., Page J., Carrel W.R. J.Biol.Chem., 1954, vol.207, p.201.

175. Angerer R.C., Davidson E.H., Britten R.J. Single copy ША and structural gene sequence relationships among four Sea Urchin species. Chromosoma, 1976, vol.56, N 3, p.213-221.

176. Arber W. Host specificity of DNA produced by Escherichia coli. V. The role of methionine in the production of host specificity. J.Mol.Biol., 1965, vol,11, N 2, p.247-256.

177. Bacchetti S., Graham F.L. Transfer of the gene for thymidin kinase to thymidine kinase-deficient human cells by purified herpes simplex viral DNA. Proc.Nat*Acad.Sci.USA, 1977, vol.74, N 4, p.1590-1594.

178. Barnhart В., Herriott R. Penetration of dexyribonuc-leic acid into Hemophilus influenzae. Biochim.et biophys.acta, 1963, vol.76, N 1, p.25-39.

179. Beam I.G., Kirby K.S. Failure of DNA to produce pigment changes in the albino rat» Exp»Cell Bes., 1959» vol.17, p.547-549.

180. Bendich A.J., Anderson R.S., Ward B.L. Plant DNA: long, pure and simple. In: Genome organization and expression in plants. Ed. Plenum N.Y., 1980.

181. Bendich A.J., Filner P. Uptake of exogenous DNA by-pea seedlings and tobacco cells. Mutat.Res., 1971» vol.13, N 2, p.199-214.

182. Benoit J., Leroy P., Vendrely C., Vendrely R. Des mutations somatiques dirigees sonti-elles possible chez oiseax? G.r.Acad.sci., 1957, vol.244, p.2320-2321.

183. Beridze T. Properties of satellite DNAs higher plants. Plant Sci.Lett., 1980, vol.19, N 4, p.325-338.

184. Bhargava P.M., Shanmugan G. Uptake of nonviral nucleic acids by mammalian cells. Progr.Nucl.Acids Res.Mol.Biol., 1971, vol.11, p.103-192.

185. Bonnett H.T., Ericsson I. Transfer of algal chloro-plasts of higher plants. Planta, 1974, vol.120, p.71-79.

186. Bottino P.J. The potential of genetic manipulation in plant cell cultures for plant breeding. Rad.Bot., 1975» vol. 15, p.45-62.

187. Brink R.A., MacGillivray J.H. Segregation for the waxy character in maize pollen and differential development of the male gametophyte. Amer.J.Bot., 1924, vol.11, p.465-469.

188. Britten R.J., Davidson E.H. Gen regulation for higher cells: a theory. Science, 1969, vol.165, N 3889, p.349.

189. Britten R.J., Kohne D.E. Repeated sequences in DNA. Science, 1968, vol.161, N 3841, p.529-540.

190. Brown J., Huart R., Ledoux L., Swinnen J. High specific radioactivity of heavy DNA fraction in progeny of Ara-bidopsis treated by Micrococcus lysodeikticus DNA. Arch.Int. Physiol., 1971, vol.79, N4, p.820-821.

191. Cairns E., Doerfler W., Schweiger H.G. Expression of A-DNA animal, virus genome in a plant cell. EEBS Letters, 1978, vol.96, N 2, p.295-297.

192. Cannon P. The use of bacterial plasmids in plant cell genetics. Cell genetics in higher plants. In:Proc.Int. Training Course (Szeged, 1976). Budapest, 1976, p.95-105.

193. Carlson P.S. The use of protoplasts for genetic research. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1973, vol.70, N 2, p.598.

194. Cheng T.Y., Smith H.H. Organogenesis from culture of Hordeum vulgare. Planta, 1975, vol.123, p.20-23.

195. Chilton M.D., Drummond M.H., Merlo D.I., Sciacky D. Highly conserved DNA of Ti-plasmids overlaps T-DNA maintained in plant tumours. Nature, 1973, vol.275, N 5676, p. 147«

196. Chilton M.D., Saiki R.K., Yadav N. T-DNA from Agro-bacterium Ti-plasmid is in the nuclear DNA fraction of crowngall tumor cells. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1980, vol.77, N 7» p.4060-4064.

197. Chilton M.D., Tepfer D.A., Petit A., David Ch., Casse-Delbort P., Tempe J. Agrobacterium rhizogenes inserts T-DNA into the genomes of the host plant root cells. Nature, 1982, vol.295i N 5848, p.432-434.

198. Cocking E.C. Plant protoplasts as a genetic systems. Genetic manipulation with plant material. N.Y.-L., 1975» P. 311-329.

199. Cocking E.C. Plant protoplasts. Viewpoints Biol., 1965, vol.4, p.170-203.

200. Coe E.H., Sarkar K.R. Preparation of nucleic acids and a genetic transformation attempt in maize. Crop Sci., 1966, vol.6, p.432-435.

201. Cole J.L., Ellis M. Studies on the chemical nature of the radiation protection factor in mouse spleen: I. Enzymatic inactivation by deoxyribonuclease and trypsin. Rad.Res., 1954, vol.1, N4, p.547-357.

202. Collins G.N. A new type of Indian corn from China. U.S.Dept.Agric.Bur.Plant Industry Bull., 1909, vol.161, p.7-30.

203. Constantini P., Lacy E. Introdaction of rabbit — globin gene into the mouse germ line. Nature, 1982, vol.294, N 5836, p.92-94.

204. Cullis C.A. DNA sequence organization in the flax genome. Biochim.et biophys.acta, 1981» vol.652, N 1, p.1-15.

205. Dennis E.S., Gerlach W.L., Peacock W.J. Indentical polypyrimidine-polypurine satellite DNAs in wheat and barley. Heredity, 1980, vol.44, N 3, p.349-366.

206. Davey M.R., Cocking E.C., Freeman J. et al. Transformation of Petunia protoplasts by isolated. Agrobacterium plasmids. Plant Sci.Lett., 1980, vol.18, IT 3, p.307-313.

207. Davey M.S., Freeman J., Draper J. Transformation of higher plant protoplasts by isolated Agrobacterium plasmids. In; Fifth Intern.Protoplasts Sympos.Szeged, 1979, p.81.

208. Dellaporta S.L., Giles K.L. A possible method for the high frequency transformation of plant protoplasts. In: Fifth Intern.Protoplasts Sympos.Szeged, 1979, p.138.

209. Demerec M.A. A case of pollen dimorphism in maize. Amer.J.Bot., 1924, vol.11, p.461-464.

210. Dimitriadis G.I. Translation of rabbit globin m-RNA introduced by liposomes into mouse lymphocytes. Nature, 1978, vol.274, N 5674, p.923-924.

211. Doy C.H., Gresshoff P.M., Rolfe B.G. Biological and molecular evidence for the transgenosis of genes from bacteria to plant cells. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1973, vol.70, N 2, p. 723-726.

212. Drummond M.H., Gordon M.P., Hester E.W., Chilton M.D. Foreign DNA bacterial plasmid origin is transcribed in crown gall tumours. Nature, 1977, vol.269, N 5628, p.535-536.

213. Eriksson G, Radiation induced reversions of a waxy allele in barley. Rad.Bot., 1962, vol.2, p.35-39.

214. Eriksson G. The waxy character. Hereditas, 1969, vol. 63, N 1-2, p.180-204.

215. Eskridge R.W., Weinfeld H., Paigen K. Succeptibility of different coliphage genomes to host-controlled variation. J.Bacterid., 1967, vol.93, N 3, p.835-844.

216. Fahmy O.G., Fahmy M.J. Induction of mutations by deoxyribonucleic acid in Drosophila melanogaster. Nature, 1961, vol.191, P.776-779.

217. Fahmy O.G., Fahmy ^M.J. Genetic properties of exogenous deoxyribonucleic acid at various levels of degradation in Drosophila melanogaster. Nature, 1965, vol.207, p.507-510.

218. Fahmy O.G., Fahmy M.J. The nature and distribution of the mutations induced by unirradiated and irradiated heterologous deoxyribonucleic acid in Drosophila melanogaster. Genetics, 1966, vol.54, N 5, p.1123-1138.

219. Fernandez S.M., Lurguin P.F., Kado C.J. Incorporation and maintenance of recombinant-DNA plasmid vehicles pBR 313 and pCRI in plant protoplasts. FEBS Letters, 1978, vol.87, N 2, p.277-282.

220. Flam W., McCallum M,, WaiLker P. The isolation of complementary strands from a mouse DNA fraction. Eroc.Nat.Acad. Sci. USA, 1967, vol.57, N 6, p.'1729-1734-.

221. Flavell R. The molecular characterization and organization of plant chromosomal DNA sequences. Annu. Rev. Plant Physiol., 1980, vol.31, p.569-596. (Palo Alto, Calif.).

222. Fox A.S., Yoon S.B. Specific genetic effects of DNA in Drosophila melanogaster. Genetics, 1966, vol.53, N 5» p. 897-911.

223. Fox М», Fox B.W., Ayad S.R. Evidence for genetic expression of integrated DNA in lymphoma cells. Nature, 1969» vol.222, p.1086-1087.

224. Fox A.S., Yoon S.B. DNA-induced transformation in Drosophilas locus-specificity and the establishment of transformed stocks. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1970, vol.67, N 3, p. 1608-1615.

225. Fox A.S., Duggleby W.F., Gelbart W.M., Yoon S.B. DNA induced transformation in Drosophilas evidence for transmission without integration. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1970, vol,67, N 4, p.1834-1838.

226. Fox A.S., Yoon S.B. DNA-induced transformation in Drosophilas genetic analysis of transformed stock. Proc.Nat.Acad. Sci.USAi' 1971, vol.68, N 2, p.332-346.

227. Fox A.S., Parzen S.D., Salverson H., Yoon S.B. Gene transfer in Drosophila melanogasters genetic transformations induced by the DNA of transformed stocks. Genet.Res., 1975» vol. 26, N 2, p.137-147»

228. Franklin R.E., Gosling R.G. The structure of sodium thymonucleate fibress I. The influence of water content. Acta crystallogr., 1953, vol.6, p.673.

229. Frey M., Rail S., Roth A., Hemleben V. Evidence for uptake plasmid DNA into intact plants (Lemna perpusilla) proved by an E.coli transformation assay. Z.Naturforsch., 1980, Bd.35, N 3» S.1104-1106.

230. Gamborg O.L., Eveligh D.E. Culture methods and detection of gluconases in suspension cultures of wheat and barley. Canad.J,Biochem., 1968, N 46, p.417-421.

231. Graham P.L. Biological activity of tumor virus DNA. In: Advances in cancer research. N.Y., 1977» vol.25, p.1-46.

232. Grandman-Rebel W.E., Hemleben V. Incorporation of T4 phage DNA into a specific DNA fraction from the higher plant Matthiola incana. Z.Naturforsch., 1976, Bd.31S, N 9, p.558-564.

233. Grierson D., McKee R.A., Attridge Т.Н., Smith H. Studies on the uptake and expression of foreing genetic material by higher plant cells. In: Modification of the information content of plant cells. Amsterdam; New-York, 1975, p.91-100.

234. Griffith Б*. Significance of pneumococcal types. jJ. Hyg.,1928, vol.27, p.113-159.

235. Hanson R.S., Chilton M, On the question of integration of Agrobacterium tumefaciens deoxyribonucleic acid by tomato plants. J.Bacteriol., 1975, vol.124, N 3, p.1220-1226.

236. Hess D. Versuche zur Transformation an höheren Pflanzen: Wiederholung der Anthocyan-Induktion bei Petunia und erste Charakterisierung des transformierenden Prinzips. Z.Pflanzenphysiol., 1969, Bd.61, N 3, p.286-298.

237. Hess D, Versuche zur Transformation an höheren Pflanzen: Genetische Charakterisierung einiger mutmasslich transformierter Pflanzen. Z.Pflanzenphysiol., 1970, Bd.63, N 1, p.31-43.

238. Hess D. Beseitigung der transformierenden Activitat durch DNase. -Naturwissenschaften, 1971, Bd.58, N 7, S.366.

239. Hess D. Versuche zur Trnasformation an höheren Pflanzens Nachweis von Heterozygoten in Versuchen zur Transplantation von Genen für Anthocyansynthese bei Petunia hybrida. Z.Pflanzen-physiol., 1972, Bd.66, N 2, S.155-166.

240. Hess D. Neue Methoden der genetischen Kombination bei höheren Pflanzen, Biol.Rdsch., 1974, Bd.12, N 5, S.297-311.

241. Hess D., Lö'rz H., Weissert Б.М. Die Aufnahme bakterieller DNA in quellende und kieurende Pollen von Petunia hybrida und Nicotiana glauca. Z.PClanzenphysiol., 1974, Bd.74,1. N 1, S.52-63.

242. Hess D. Uptake of DNA and bacteriophage into pollen and genetic manipulation. Genetic manipulation with plant material. N.Y.-L., 1975, P.519-537.

243. Hess D. Modification of plant development by exogenous genetic material. In: XII Intern.Bot.Congr.Leningrad, 1975, part 2, p.292.

244. Hess D., Schneider G., Lorz H., Blaich G. Investigations on the tumor induction in Nicotiana glauca by pollen transfer of DNA isolated from Nicotiana langsdorffii. Z.Pflanzen-physiol., 1976, Bd.77, N 3, S.247-254.

245. Hess D. Genetic effects in Petunia hybrida induced by pollination with pollen treated with lac transdusing phages.

246. Z.Pflanzenphysiol•, 1978, Bd.90, N 2, S.119-132.

247. Hess D.Investigations on the intra-and interspecific transfer of anthocyamin genes using pollen as vectors. Z.Pflanzenphysiol., 1980, Bd.98, N 4, S.321-338.

248. Heyn R.F., Hermans A.K., Schilperoort E.A. Rapid anf efficient isolation of highly polymerized plant DNA. Plant Science Letters, 1974, vol.2, p.73-78.

249. Higuchi E., Paddock G.V., Wall R., Salser W. A general method for cloning eukaryotic structural gene sequences. Proc.Nat.Sci.USA, 1976, vol.73, N 9, p.3146-3150.

250. Hinnen A., Hicks J.B., Fink G.R. Transformation of yeast. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1978, vol.75» N 4, p.1929-1933.

251. Hirofumi U., Murashige T. Tobacco protoplasts: Nutrient medium requirement for the recovery of dividing cells and observations of absorption of homologous DNA. Plant physiol., 1975, vol.56, N 2, p»38-41•

252. Hirofumi U., Murashige T. Quantitative analysis of the fate of exogenous DNA in Nicotiana protoplasts. Plant Physiol.,1977, vol.59, N 2, p.301-309.

253. Hoffman R.M., Margolis L.B., Bergelson L.B. Binding and entrapment of high molecular weight DNA by lecithin liposomes. FEBS Letters, 1978, vol.93, p.365-368,

254. Holl F.B., Gamborg O.L., Ohyama K., Pelcher L. Genetic transformation in plants. In: Tissue culture and plant science. N.Y., 1974, p.301-327.

255. Horst J., Kluge F., Beyreuther K., Gerok W. Gene transfer to human cells: transducing phageX plac gene expression in GM, gangliosidosis fibroblasts. Proc.Nat.Acad,Sci.USA, 1975, vol.72, N 9, p.3531-3535.

256. Howell S.H., Odell J.T., Dubley R.K., Walden R.M. Theintroduction and expression of CaMV DNA in turnips. 6th.EMB0 Annu.Symp. Mol. Biol. Look Jreen Plants, Heidelberg, 1980, Abstrf. S.1, s.a.61.

257. Hughes B.G., Munyon W.H. Temperature-sensitive mutants of herpes simplex virus type 1 defective in lysis but not in transformation. J.Virol., 1975, vol.16, N 2, p.275-283.

258. Hughes B.G., White F.G., Smith M.A. Pate of bacterial DNA during uptake by barley and tobacco protoplasts. Z.Pflanzen-physiol., 1978, Bd.87S, N 1, S.1-23.

259. Hughes B.G., White P.G., Smith M.A. Contribution of damaged protoplasts to DNA uptake by purified plant protoplasts. Plant Sci.Lett., 1978, vol.11, N 2, p.199-206.

260. Hughes B.G., White F.C., Smith M.A. Fate of bacterial plasmid DNA during uptake by barley and tobacco protoplasts: II. Protection by £oly-L-ornithine. Plant Sci.Lett., 1979, vol.14, N4, p.303-310.

261. Hull R. Genetic engineering in plants: the possible use of cauliflower mosaic virus DNA as a vector. Plant cell cultures: results and perspectives. Elsvier/North-Hollazid Biomedical press, Amsterdam-New York, Oxford, 1980, p.219-224.

262. Iida S., Wataya Y., Kudo I., Hayatsu H. Bisulfite-ca-talysed tritium labelling of DNA and RNA. PEBS Letters, 1974, vol.39, N 5,p.263-265.

263. Ingle J., Pearson G.G., Sinclair J. Species distribution and properties of nuclear satellite DNA in higher plants. Nature New Biol., 1973, vol.242, N 120, p.193-197.

264. Ising G. New results from work with a transposable element in Drosophila melanogaster. Hereditas, 1976, vol.84, N 2, p.243-247.

265. Johnson C.B., Grierson D., Smith H. Expression ofA plac 5 DNA in cultured cells of a higher plant. Nature new Biol., 1973, vol.244, p.105-106.

266. Kado C.I., Lurguin P.F. Studies on Agrobacterium tumefaciens: V. Fate of exogenously added bacterial DNA in Ni-cotiana tabacum. Physiol.Plant Pathol., 1976, vol.8, N 1, p.73-82,

267. Kanazir D., Panjevac B., Cecuk 0. et al. Recovery from radiation injury obtained by highly polymerized nucleic acids. Rad.Res., 1958, vol.9, N 1, p.137.

268. Karpfel Z., Slotova J. Chromosome aberrations caused by exogenous deoxyribonucleic acids. In: Genetic variation somatic cells. Prague, 1966, p.127-135.

269. King P.J., Potrykus I., Thomas E. In vitro genetics of cereals: problems and perspectives. Physiol.Veg,, 1978, vol. 16, N 3, p.381-399.

270. Kirby K.S. A new method for the isolation of deoxy-ribonuclei acids. Biochem.J., 1957, vol.66, p.495.

271. Kleinhofs A., Eden F., Chilton M., Bendich A. On the question of the integration of exogenous bacterial DNA into plant DNA. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1975, vol.72, N 7, p.2748-2752.

272. Kleinhofs A. Physical and biological studies uptake by plants. In: Molecular genetic modification of eucaryotes.

273. New York-San Francisco-London, 1977, p.137-147.

274. KLeinhofs A., Behki R. Prospects for plant genome modification by nonconventional methods. Ann.Rev,Genet., 1977, vol.11, N 1, p.79-101.

275. Kleinhofs A. Physical and biological studies of DNA uptake by plants. In: Molecular genetic modification of euca-ryotes. New York-San Francisco-London, 1977, p.137-147.

276. Kolata Gina Bari. Repeated-DNA: Molecular genetics of higher organisms. Science, 1973, vol.182, N4116, p.1009-1011.

277. Kool A.J. Transformatie: een moleculair-biologische methode voor de genetische modificatie van planten? Vakblad voor biologen, 1977, vol.57» N 21, p.363-367.

278. Korohoda I., Strzalka K, High efficiency genetic transformation in maize induced by exogenous DNA. Z.Pflanzenphysiol., 1979, Bd. 94, N 2, p.95-99.

279. Larguin P.F. Recent advances in the transfer of DNA to plant protoplasts. Plant cell cultures: results and perspectives. Elsevier /North-Holland Biomedical Press, 1980, p.247-250.

280. Leber B., Hemleben V. Uptake of homologous DNA into nuclei of seedlings and by isolated nuclei of higher plant. Z.Pflanzenphysiol., 1979, Bd.91, N 4, S.305-316.

281. Ledoux L., Huart R. Fate of exogenous bacterial deoxyribonucleic acids in barley seedlings. J.Mol.Biol., 1969,vol.43, N 1-3, p.243-262.

282. Ledoux L. Informative molecules in biological systems. Amsterdam, 1971.-466p,

283. Ledoux L., Huart R. Fate of exogenous DNA in Arabi-dopsis thaliana: Translocation and integration. Eur. J.Biochem.1971, vol.23, N 1, p.96-108.

284. Ledoux L., Huart R., Jacobs M. DNA-mediated genetic correction of thiamineless Arabidopsis thaliana. Nature, 1974, vol.249, N 5451, p.17-21.

285. Ledoux L., Huart R., Mergeay M., et al. DNA-mediated genetic correction of thiamineless Arabidopsis thaliana. In: Modification of the information content of plant cells. Amsterdam, 1975, p.67-89.

286. Ledoux L. Fate of exogenous DNA in plants. In: Genetic manipulation with plant material. N.Y.-L., 1975» p.479-498.

287. Ledoux L., Huart R. Importance of DNA size for integration in plant materials. Physiol.Biochim., 1975» vol.83, N 1, p.194-196.

288. Ledoux L., Huart R., Ryngaert-Agriaenssens A. et al. Does DNA correct Arabidopsis thiamine mutants? Arch.Int.Physiol., 1977, vol.85, N 5, p.992-994.

289. Lerman L., Tolmach L. Genetic transformation: II. The significance of damage to the DNA molecule. Biochim.et biphys.acta, 1959, vol.33, N 3, p.371-387.

290. Levy J., Kazan P., Varmus M. The importance of DNA size for successful transfection of chicken embryo fibroblasts. J.Virol., 197^-, vol.61, N 1, p.297-302.

291. Liebke B., Hess D. Uptake of bacterial DNA into isolated mesophyl protoplasts of Petunia hybrida. Biochem.Physiol. Pflanzen., 1977, Bd.17lS, S.493-501,

292. Lorz H., Potrykus I. Uptake of nuclei into higher plant protoplasts. In: Cell genetics in higher plants. Budapest, 1976, p.239-244.

293. Lurguin P.F., Hotta Y. Reutilization of bacterial DNA by Arabidopsis thaliana cells in tissue culture. Plant

294. Sci.Lett., 1975, vol.5, N 1, p.103-112.

295. Lurguin P.F., Behki R.M. Use of molecular sieving on agarose gels to study DNA uptake by Chlamidomonas reinhar-di. In.Genetic manipulation with plant material. N.Y.-L., 1976, p.429-449.

296. Lurguin P.F. Integration of exogenous DNA in plants: A hypothesis awaiting clear-cut demonstration. In: Cell genetics in higher plants. Budapest, 1976, p.77-90.

297. Lurguin P.F., Kado C.I. Escherichia coli plasmid pBR 313 insertion into plant protoplast and^their nuclei. Mol.Gen. Genet., 1977, vol.154, N 2, p.113-121.

298. Lurguin P.F., Marton L. DNA transfer experiments with plant protoplasts and bacterial plasmids. -In: Fifth Intern.Protoplasts Sympos. Szeged, 1979, p.138.

299. Lurguin P.F. Entrapment of plasmid DNA by liposomes and their interactions with plant protoplasts. Nucl.Acids Res., 1979, vol.6, N 12, p.3773-3784.

300. Luyindula N., Ledoux L. On the fate of exogenously supplied bacterial DNA in soybean. Arch.Int.Physiol. Biochim., 1977, vol.85, N 5, p.1001-1002.

301. Malhorta K., Rashid A., Maheschwari S.C. Transgenosis in higher plant cells a réévaluation. Z» Pflanzenphysiol., 1979, Bd. 95, N 1, S.21-31.

302. Malmberg R.L., Griesbach R.S. The isolation of mitotic and meiotic chromosomes from plant protoplasts. Plant Sci. Lett., 1980, vol.17, N 2, p.141-147.

303. Marmur J. Procedure for the isolation of deoxyribonucleic acid from microorganisms. J.Mol.Biol., 1961, vol.3, p. 208.

304. Mathew C. The production of recessive lethals by calfthymus DNA in Drosophila. Genet.Res., 1965» vol.6, N 2, p. 163-174.

305. McBride O.W., Athwal R.S. Genetic analysis by chromosome-mediated gene transfer. In Vitro, 1976, vol.12, N 11, p. 777-786.

306. McClintock B. The origin and behaviour of mutable loci. Proc.Nat.Ac ad.S ci.USA, 1950» vol.36, p.344-355.

307. McClintock B. The control of gene action in maize. In: Genetic control of differentiation: Brookhaven Symp.Biol., 1965» vol.18, p.162-184.

308. Michaelis A., Rieger R. New caryotypes of Vicia faba L. Chromosoma, 1971» vol.35» N 1, p.1-8.

309. Merril C., Geier M.R., Petricciani J.C. Bacterial virus gene expression in human cells. Nature, 1971» vol. 233, N 5319, p.398-400.339* Merril C.R., Stahbro H. Intercellular gene transfer. Z.Pflanzenphysiol., 1974, Bd.72, N 5, S.372-388.

310. Miller D.L., Gubbins E.I., Pegg E.W., Donelson J.E. Transcription and translation of cloned Drosophila fragments in Escherichia coli. Biochemistry, 1977, vol.16, N 6, p.1031-1038.

311. Van Montagu M., Schell J. The Ti-plasmids of Agrobacterium. Gene Clonning Organ. Other then E.coli. Berlin e.a., 1982, p.237-254.

312. Morrison D.A., Gild W.R. Transformation and deoxyribonucleic acid size: extend of degradation on entry varies with size of donors. J.Bact., 1972, vol.112, N 3, p.1157-1168.

313. Munyon W., Kraiselburd E., Davies D., Mann J. Transfer of thymidine kinase to thymidine kinaseless L-cells by infection with ultraviolet-irradiated herpes simplex virus. J* Virol., 1971» vol.7» N 6, p.813-820.

314. Murray M.G., Cuellar R.E., Thompson W.F. DNA sequence organization in the pea genome. Biochemistry, 1978, vol.17» N 26, p.5781-5790.

315. Nuti M.P., Ledeboer A.M., Durante M. et al. Detection of Ti-plasmid sequences in infected tissues by in situ hybridization. Plant Sci.Lett., 1980, vol.18, N 1, p.1-6.

316. Murton L., Molendijk L., Schilperoort R.A. In vitro transformation of cultured cells from Nicotiana tabacum by Agrobacterium tumefaciens. Nature, 1979» vol.277, N 5692, p.129-131.

317. Murton L., Wullems G.J., Lurguin P.P. et al. Crown gall transformation of tobacco protoplasts by Ti-plasmid DNAof Agrobacterium tumefaciens• In: Fifth Intern.Protoplast Symp. Szeged, 1979, p.144.

318. Nawa S., Jamada M.A. Heredity change in Ephestia after treatment with DNA. Genetics, 1968, vol.58, N 4, p.573-584.

319. Nawa S., Sakaguchi B., Jamada M.A., Tsujita M. Hereditary change in bombyx after treatment with DNA. Genetics, 1971, vol,67, N 2, p.221-234.

320. Ondrej M., Lim En Se. The influence of pretreatment with exogenous DNA on the frequencies of aberration induced by X-rays. Biol .Plant., 1976, vol.18, N4, p.386-372.

321. Ondrej M., Tichy P. Autoradiographic detection of uptake of bacterial H^-DNA label by barley seeds and isolated barley embryos. Biol.Plant., 1978, vol.20, N 1, p.67-69.

322. Owens L.D., Binding of ColEI-kan plasmid DNA by tobacco protoplasts. Nonexpression of plasmid gene. Plant Physiol.,-3471979, vol.63, N 4, p.683-686.

323. Parnel F.R. Note on the detection of segregation by examination of the pollen of rice. J.Genet., 1921, vol.11, N 2, p.209-212.

324. Pellicer A., Wigler M., Axel R., Silverstein S. The transfer and stable integration of the HSV-thymidine kinase gene into mouse cells. Cell, 1978, vol.14, N 1, p.133-141.

325. Perry T.R., Walker D, Failure of deoxyribonucleic acid to effect somatic transformation in the rat. Proc.Soc.exp. biol.med., 1958, vol.99, p.717-720.

326. Pickering R.A. The effect of tridemorph and pirimi-carb on embryo development in barley. Cereal Res.Commun., 1982, vol.10, N 1, p.79-85«

327. Polisky B., Bishop R.J., Gelfand D.H. A plasmid cloning vehicle allowing regulated expression of eucaryotic DNA in bacteria. Proc.Nat.Acad.Sei. USA, 1976, vol.73, N 11, p. 3900-3904.

328. Potricus I., Hoffman F. Transplantation of nuclei into protoplasts of higher plants. Z.Pflanzenphysiol., 1973, Bd. 69, N 3, S.287-289.

329. Potricus I. Transplantation of chloroplasts into protoplasts of Petunia. Z.Pflanzenphysiol., 1973, Bd.70, N 4, S. 363-366.

330. Ramage R.T., Burham C.R., Hagberg A. A summary of translocation studies in barley. Crop Sei., 1961, vol.1, N 2, p.277-279.

331. Ranjekar P.K., Lafontaine J.G., Pallotta D. Characterization of repetitive DNA in rye (Secale cereale). Chromo-soma, 1974, vol.48, N 4, p.427-440.

332. Ranjekar P.K., Pallotta D., Lafontaine J.G. Analysisof the genome of plants: II. Characterization of repetitive DNA in barley (Hordeum vulgare) and wheat (Triticum aestivum). Biochim.biophys.acta, 1976, vol.425, N 1, p.50-40.

333. Rebel W., Hemleben V., Seyffert W. Fate of T4 phage DNA in seedlings of Matthiola incana. Z.Naturforsch., 1973, Bd. 28S, S.473-474.

334. Redei G.P., Acedo G., Weingarten H., Kier L.D. Has DNA corrected genetically thiamineless mutants of Arabidopsis? In: Cell genetics in higher plants: Proc.Int.Training Course. Szeged, 1977, p.91-94.

335. Richardson C.C., Lehran I.R., Kornberg A.A. A deoxyribonucleic acid phosphotase-exonuclease from Escherichia coli. J.Biol.Chem., 1964, vol.239, p.251-258.

336. Richardson C.C., Schildkrant C.L., Kornberg A, Enzymatic synthesis of deoxyribonucleic acid. J.Biochem., 1964, vol.239, p.224-231.

337. Rieger R., Michaelis A. Die Auslosung von Chromosomen Aberrationen bei Vicia faba durch chemische Abenzien. Kulturpflanzen, 1962, Bd.10, S.212-292.

338. Rimpau J., Smith D.B., Flavell R.B. Sequence organization in barley and oats chromosomes revealed by interspecies DNA/DNA hybridization. Heredity, 1980, vol.44, N 1, p.131-149.

339. Robertson D.W., Wiebe G.A., Shands R.G. A summary of linkage studies in barley: Suppl. 1 (1940-1946). J.Amer.Soc. Agron., 1997, vol.39, N 4, p.464-473.

340. Roslbash M., Campo M.S., Gummerson K.S. Conservation of cytoplasmic poly(A)-containing RNA in mouse and rat. Nature, 1975, vol.258, N 5537, P.682.

341. Schell J. On the transfer and expression procaryotic

342. DNA in plant cells transformed by Agrobacterium tumefaciens. Hoppe-Seyler1s Z.Physiol.Chem., 1977, Bd.358, N 4, S.422-423.

343. Schell J. The use of the Ti-plasmid as a vector for the introduction of foreign DNA into plants. In: Proc.4th Int. Conf.Plant Pathol.Bact.Angers, 1978, vol.1, p.115-126.

344. Schell J., Van Montagu M., De Beuckeleer M, et al. Interactions and DNA transfer between Agrobacterium tumefaciens, the Ti-plasmid and the plant host. Proc.Roy.Soc.London, 1979, vol.204B, N 1155, p.251-266.

345. Schell J., Montagu M.V. The Ti-plasmids of Agrobacterium tumefaciens and their role in crown gall formation. In: Gemome organization and expression in plants / Ed.C.J.Leaver. Plenum Publishing Corporation, 1980, p.453-470.

346. Scowcroft W.R. Somatic cell genetics and plant improvement. In: Advances in agronomy. New York-San Francisco-London, 1977, vol.20, p.39-81.

347. Seckiguchi T., Seckiguchi F., Tachibana T., Yamada T. Gene expression of foreign methaphase chromosomes introduced into cultured mammalian cells. Exp.Cell Res., 1975, vol.94,1. N 2, p.327-338.

348. Shapiro J., Cordell B. Eucaryotic mobile and repeated genetic elements. Biol.Cell, 1982, vol.43, p.31-54.

349. Slotova J., Karpfel Z. Influence of exogenous DNA on Y penyltreated chromosomes of Vicia faba L. Biol.Plant.,1969, vol.11, N 3, p.216-225.

350. Slotova J"., Karpfel Z., KubiKkova D. Contribution to the study on the reparation effect of exogenous DNA in irradiated meristem of Vicia faba. Biologia Plantarum, 1971» vol.13, N 2, p.69-78.

351. Slotova J., Karpfel Z., KubiSkova D. Participation of exogenous DNA in the repair processes of meristematic Vicia faba cells injured by monofunctional alkylating agent ethylenmethane sulphonate. Biol.Plant., 1974, vol.16, N 1, p. 21-27.

352. Slotova J., Karpfel Z. Dependence of repair effect of exogenous DNA on time interval of its application to irradiated cells. Studia biophys., 1974, vol.44, N 3, p.191-196.

353. Slotova J., Rieger R., Schubert I. et al. Chromatid aberrations induced by exogenous DNA in Vicia faba. Mut.Res., 1977» vol.44, N 2, p.247-256.

354. Smale B.C. DMSOï agricultural solvent-penetrant carrier antiviral agent. Sulphur Inst.J., 1969» vol.5, N 1, p.2-6.

355. Smith H., McKee R.A., Attridge Т.Н., Grierson D. Studies on the use of transducing bacteriophages as vectors for the transfer of foreign genes to higher plants. In: Gtene£ tic Manipulation with Plant Material. N.Y.-L., 1975, p.551-562.

356. Soyfer V.N., Turbin N.V., Kartel N.A. et al. Restoration of the normal waxy allele in barley on the injection of the wild gene. В кн.: Международный ботанический конгресс, т.2. тез.докл. Л-д, 1975, с.317.

357. Soyfer V.N., Morozkin A.D., Bogdanov V.P. et al. Starch composition and hordein electrophoretic patterns of grains of genetically transformed barley plants. Envir.and Esqp. Bot*, 1978, vol.18, N 1, p.105-111.

358. Stroun M., Anker P., Charles P., Ledoux L. Fate of bacterial deoxyribonucleic acid in Lycopersicum esculentum. Nature, 1966, vol.212, N 5060, p.397.

359. Stroun M., Anker P., Charles P., Ledoux L. Translocation of DNA of bacterial origin in Lycopersicum esculentum by ultracentrifugation in cesium chloride gradient. Nature, 1967, vol.215, N 5109, p.975-976.

360. Struhl K., Stinchcomb D.T., Scherer S., Davis E.W. High-frequency transformation of yeast: autonomous replication of hybrid DNA molecules. Proc.Nat.Acad.Sci. USA, 1979, vol.76, N 3, p.1035-1039.

361. Suzuki M., Takebe I. Uptake of single-stranded bacteriophage DNA by isolated tobacco protoplasts. Z.Pflanzenphysiol., 1976, Bd.78S, N 5, S.421-433.

362. Suzuki M., Takebe I. Uptake of double-stranded bacteriophage DNA by isolated tobacco leaf protoplasts. Z.Pflanzenphysiol., 1978, Bd.89S, N 4 S.297-311.

363. Svoboda J., Haskova V. Failure to produce somatic changes between strains of ducks by means of specific DNA. Folia Biol.(Prague), 1959, vol.5, p.402-404.

364. Temin H.M., Mizutani S. SNA-dependent DNA polymerase in various of Eous sarcoma virus. Nature, 1970, vol.226, N 5252, p.1211-1213.

365. Thilly W.G., Lozeron H.A., Szybalski W. Attempts to transform mammalian cells with DNA of phage 80 dsu III carrying the thymidine kinase gene. In: Possible episomes in eucary-otes. Amsterdam-London, 1973, p.250-254.

366. Tomasz A. Cell surface structures and the absorption of DNA molecules during, genetic transformation of bacteria. Ins Membranes and walls of bacteria. N.Y,, 1973, p.322-335.

367. Tomasz A. The mechanism of competence for DNA uptake and transformation in pneumococci. Ins Genetic manipulation with plant material. N.Y.-L., 1975, p.27-43.

368. Tsai Chia-Yin. The function of the waxy locus in starch synthesis in maize endosperm. Biochem.Genet., 1974, vol.11, N 2, p.83-96.

369. Turbin N.V., Soyfer V.N., Kartel N.A. et al. Genetic modification of the waxy character in barley under the action of exogenous DNA of the wild variety. Mutat.Res., 1975» vol.27, N 1, p.59-68.

370. Van Larebeke N., Engler G., Holsters M. „et al. Large plasmid in Agrobacterium tumefaciens essential for crown gall-inducing ability. Nature, 1974, vol,252, N 5419, p.169-170.

371. Vargha J., Koncz Cs., Dutits D. Microinjection of plant protoplasts. Ins Fifth Int.Protoplasts Symp.Abstr.Szeged, 1979, P.151.

372. Vilkind' J., Haas-Andela H., Anders F. DNA-mediated transformation in the platyfish-swordtail melanoma system. Expe-rientia, 1976, vol.32, p.1043—1044,

373. Wardell W.L. Floral activity in solutions of deoxyribonucleic acid extracted from tobacco stems. Plant Physiol., 1976, vol.5, N 6, p.855-861.

374. Watson J.D,, Crick F.H.C Molecular structure of nucleic acids. A structure for deoxyribose nucleic acid. Nature, 1953, vol.171, N 4360, p.737.

375. Watts J.W., Cooper D,, King J.M. Plant protoplasts in transformation studies: some practical considerations. In: Modifications of the information content of plant cells. Amsterdam-New York, 1975, p.119-131.

376. Widholm J.M. Thé use of plant cell culture mutant. In: XII Intern.Bot.Congr.Leningrad, 1975, part 2, p.324.

377. Wiering H., de Vlaming P. Glicolisation ajad metilation patterns of anthocyanis in Petunia hybrids. The Gene Gf.Genen. Phaenen., 1973, vol.15, N 1, p.35.

378. Wigler M., Silverstein S., Lee L.S. et al. Transfer of purified herpes virus thymidine kinase gene to cultured mouse cells. Cell, 1977, vol.11, N 2, p.223-232.

379. Wigler M., Pellicer A., Silverstein S., Axel E. Biochemical transfer of single-copy eucaryotic genes using total cellular DNA as donor. Cell, 1978, vol.14, N 3, p.725-731.

380. Wigler M., Sweet R., Sim G.K. et al. Transformation of mammalian cells with genes from procaryotes and eucaryotes. Cell, 1979, vol.16, N 3, p.777-785.

381. Wu J., Hurn J., Bonner J. Size and distribution of the repetive segments of the Drosophila genome, J.Mol.Biol., 1972, vol,64, N 1, p.211-219.

382. Wyllie A.H., Gurdon J.B., Price J. Nuclear localization of an oocyte component required for stability of injected DNA. Nature, 1977, vol.268, N 5617, p.150-152.