Высокоэффективная жидкостная хроматография в исследовании протекторных свойств вин в условиях окислительного стресса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.04, кандидат химических наук Ульянова, Екатерина Владимировна

• Ульянова, Екатерина Владимировна
• кандидат химических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат химических наук Ульянова, Екатерина Владимировна

Введение

СОДЕРЖАНИЕ

Глава 1. Литературный обзор

1.1. Понятия "антиоксидант" и "антиоксидантная активность"

1.2. Общая характеристика флавоноидов

1.2.1. Флавоноиды вина

1.3. Физико-химические методы обработки вин

1.3.1. Радиационно-химические методы обработки вин

1.4. Методы определения антиоксидантной активности вин

1.4.1. Прямые методы

1.4.2. Косвенные методы

1.4.3. Роль ВЭЖХ в исследовании антиоксидантной 29 активности вин

1.5. Методы определения полифенолов в винах

1.5.1. Пробоподготовка образцов вин для анализа

1.5.2. Детекторы для определения флавоноидов в ви- 35 нах

1.5.3. Сорбенты для определения флавоноидов в винах

1.5.4. Подвижные фазы для определения флавоноидов 37 в винах

1.5.5. Примеры определения флавоноидов в винах

1.6. Зависимость антиоксидантной активности вин от состава

1.7. Проблема фальсификации винодельческой продукции 44 Выводы главы

Экспериментальная часть

Глава 2. Исходные вещества, приборы, методики экспериментов

2.1. Растворы, реагенты, объекты исследования

2.2. Приборы и методы исследования

Формулы для расчёта

Глава 3. Определение степеней превращения фенольных веществ и 53 идентификация продуктов их радиолиза методом ВЭЖХ

Глава 4. Исследование антиоксидантных и радиопротекторных 63 свойств вин

4.1. Хроматографическое определение фенольных веществ в 66 вине

4.2. Радиационно-химические превращения фенольных ве- 80 ществ в вине

Глава 5. Применение хроматографического и амперометрического 110 методов для выявления фальсификатов коньячной продукции

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Высокоэффективная жидкостная хроматография в исследовании протекторных свойств вин в условиях окислительного стресса»

Актуальность темы.

С развитием ядерной энергетики все более актуальными становятся не только вопросы влияния ионизирующих излучений на живые организмы и среду их обитания, но и вопросы противостояния возникающему в биосистемах в результате воздействия данных излучений окислительному стрессу. Известно, что потенциальной способностью регулировать окислительно-восстановительные процессы обладают вина - источники биологически активных фенольных соединений (ФС) с антиоксидантными и радиопротекторными свойствами. Однако механизм этого процесса неясен. При у-облучении данные соединения претерпевают химические превращения. В связи с этим весьма важными являются исследования влияния радиационного воздействия на состав и физико-химические свойства вин. Метод ВЭЖХ позволяет определять продукты этого воздействия, а также рассчитывать степень превращения исходных веществ. Первое играет важную роль в изучении механизма проявления протекторных свойств вин, а второе необходимо при оценке радиационной устойчивости биологически активных соединений, входящих в их состав, поскольку в последнее время на предприятиях винодельческой отрасли всё чаще используется у-облучение с целью биологической стабилизации вин.

Кроме того, изучение антиоксидантных свойств продукции данной отрасли необходимо для разработки методики экспрессного выявления фальсификатов, например, коньячных изделий, представленных на отечественном рынке. В этом случае перспективным является использование амперометри-ческого метода измерения антиоксидантной активности (АОА), которая характеризует общее содержание фенольных соединений в исследуемом коньяке. Величина антиоксидантной активности, помимо выявления явных случаев фальсификации, позволяет в определенной степени оценить возраст натурального коньяка. Таким образом, развитие комплексного подхода, включающего использование таких физико-химических методов, как хроматография, амперометрия и др., для исследования антиоксидантных и радиопротекторных свойств винодельческой продукции позволяет решать целый ряд современных задач.

Цель работы: исследование физико-химическими методами (хромато-графическим, спектрофотометрическим, амперометрическим) протекторных свойств фенольных соединений и вин различных сортов, регионов и сроков хранения в условиях у-облучения по отношению к дрожжам 8. сегеу1з!ае.

В соответствии с поставленной целью определены задачи диссертации:

1. Выбрать оптимальные с точки зрения поставленных целей условия разделения ФС в винах различных сортов, регионов и сроков хранения, получить их хроматографические и спектральные характеристики.

2. С использованием разработанной методики ВЭЖХ разделить продукты радиационно-химических превращений, ФС в винах и растворах индивидуальных соединений, зарегистрировать их спектры и. рассчитать степени превращения исходных веществ для оценки их радиационной устойчивости.

3. Сопоставить общие массовые концентрации ФС в винах, а также их радиопротекторные и антиоксидантные активности, определить радиопротекторные активности индивидуальных ФС, с которыми могут быть связаны радиопротекторные свойства вин.

4. Изучить изменение радиопротекторной активности вин в процессе хранения.

5. Изучить зависимость антиоксидантной активности коньяков от их качества и срока выдержки для разработки методики выявления фальсификатов.

Научная новизна определяется совокупностью полученных в работе новых результатов:

1. Впервые получены физико-химические характеристики (хромато-графические и спектральные) продуктов радиационно-химических превращений ФС в винах и оценены степени превращения исходных веществ.

2. Определены радиопротекторные активности и реактивирующие способности индивидуальных ФС и вин по отношению к клеткам дрожжей; показано, что все исследованные флавоноиды, а также молодые красные вина в условиях моделирования окислительного стресса проявили протекторные свойства, которые не сохранялись в процессе хранения вин.

3. Амперометрическим методом определены значения АОА ряда вин и коньяков; показано, что, при практически близком содержании ФС в образцах вин из одного сорта винограда, их АОА различны. Вина с более высокими значениями АОА по данным ВЭЖХ отличались большим содержанием радиационно-лабильных ФС, в том числе кверцетина, (+)катехина - соединений, которые относятся к группе сильных антиоксидантов.

4. Методом ВЭЖХ показано, что в результате воздействия радиолиза в винах третьего года хранения произошли менее значительные изменения содержания ФС по сравнению с молодыми винами, т.е. в последних ФС являются более радиационно-лабильными.

5. Установлена зависимость антиоксидантной активности коньяков от их качества, которая может быть использована для разработки методики экспрессного выявления фальсификатов и оценки возраста продукции.

6. Заложены основы в разработку методики экспрессного выявления фальсификатов и оценки возраста коньяков с использованием амперометри-ческого определения их антиоксидантной активности.

Практическая значимость:

• Разработан метод исследования радиационно-химической стабильности ряда флавоноидов с использованием обращённо-фазовой ВЭЖХ. Метод может использоваться для прогнозирования поведения флавоноидов в биологических системах, а также при выборе оптимальных фенольных антиокси-дантов в медицине, биотехнологии и винодельческой промышленности.

• Полученные физико-химические (хроматографические и спектральные) характеристики природных флавоноидов дополнили существующую базу данных ФС, которая может быть использована при разработке методов разделения и идентификации флавоноидов в сложных смесях, в том числе в винах.

• Заложены основы в разработку методики экспрессного выявления фальсификатов и оценки возраста коньяков с использованием амперометри-ческого определения их антиоксидантной активности.

• Поскольку наиболее выраженными радиопротекторными свойствами в отношении модельных организмов по данным работы обладали молодые красные вина, то именно их можно рекомендовать для смягчения воздействия ионизирующего излучения на организм человека в зонах с повышенной радиацией.

На защиту выносятся следующие положения:

• сопоставление радиопротекторных и антиоксидантных свойств ряда красных и белых вин с их составом;

• изучение методом обращённо-фазовой ВЭЖХ радиационно-химической стабильности флавоноидов;

• изучение методом обращённо-фазовой ВЭЖХ продуктов радиацион-но-химических превращений ФС в винах.

Апробация работы и публикации. По материалам диссертации опубликовано 14 печатных работ, в том числе 3 статьи, из них 2 статьи в рекомендованных ВАК научных журналах, и 11 тезисов докладов.

Основные результаты диссертации изложены в публикациях и доложены на научно-практической конференции "Интеграция- фундаментальных и прикладных исследований — основа развития современных аграрно-пищевых технологий" (Углич, 5-6 сентября 2007 г.); симпозиуме "Биотехнология" (Москва, 11-15 марта 2008 г.); Всероссийском симпозиуме "Хроматография и хромато-масс-спектромерия" (Москва — Клязьма, 14-18 апреля 2008 г.); конференции молодых учёных, аспирантов и студентов "Физикохимия-2008" (Москва, 11-12 ноября 2008 г.); Всероссийской конференции "Теория и практика хроматографии. Хроматография и нанотехнологии." (Самара, 6-10 июля 2009 г.); VII Международном Симпозиуме по фенольным соединениям: фундаментальные и прикладные аспекты (Москва, 19-23 октября 2009 г.); Московской конференции-конкурсе молодых учёных, аспирантов и студентов "Физикохимия-2009" (Москва, 1 ноября — 4 декабря 2009 г.); Всероссийской научно-практической конференции "Хроматография — народному хозяйству" (Дзержинск, 19-23 апреля 2010 г.); V конференции молодых учёных, аспирантов и студентов ИФХЭ РАН "Физикохимия-2010" (Москва, 1-30 ноября 2010 г.).

Основные результаты диссертации изложены в следующих публикациях:

1. Андриевская Д.В., Песчанская В.А., Рейтблат Б.Б., Урусова JI.M., Рё-вина A.A., Ульянова Е.В., Фенин A.A. Научно-практическая конференция "Интеграция фундаментальных и прикладных исследований — основа развития современных аграрно-пищевых технологий" (Углич, 5-6 сентября 2007 г.) Тезисы. Углич. 2007. с. 22-24

2.0ганесянц JI.A., Песчанская В.А., Рёвина A.A., Андриевская Д.В., Ульянова Е.В., Фенин A.A. Симпозиум "Биотехнология" (Москва, 11-15 марта 2008 г.). Тезисы. Москва. 2008.

3.Ульянова Е.В., Ларионов О.Г., Рёвина A.A., Андриевская Д.В., Урусова JI.M. Всероссийский симпозиум "Хроматография и хромато-масс-спектромерия" (Москва - Клязьма, 14-18 апреля 2008 г.) Тезисы. Москва — Клязьма. 2008. с. 168 (получена грамота)

4. Ульянова Е.В., Ларионов О.Г., Рёвина A.A., Фенин A.A. Всероссийский симпозиум "Хроматография и хромато-масс-спектромерия" (Москва -Клязьма, 14-18 апреля 2008 г.) Тезисы. Москва — Клязьма. 2008. с. 169

5.Кочетова М.В., Ларионов О.Г., Ульянова Е.В. Определение качественного состава коньячных изделий методом ВЭЖХ. // Сорбционные и хро-матографические процессы. 2008. Т.8 №4 С.658-667

6.Ульянова Е.В., Ларионов О.Г. Конференция молодых учёных, аспирантов и студентов "Физикохимия-2008" (Москва, 11-12 ноября 2008 г.). Тезисы. Москва. 2008. с. 43 (получена премия им. члена-корреспондента РАН К.В. Чмутова)

7.Яшин А .Я., Федина П.А., Рёвина A.A., Ульянова Е.В., Ларионов О.Г., Белякова Л.Д. Всероссийская конференция "Теория и практика хроматографии. Хроматография и нанотехнологии." (Самара, 6-10 июля 2009 г.) Тезисы. Самара. 2009. с. 242

8. Ульянова Е.В., Ларионов О.Г., Антропова И.Г., Фенин A.A., Тимони-на O.K. Всероссийская конференция "Теория и практика хроматографии. Хроматография и нанотехнологии." (Самара, 6-10 июля 2009 г.) Тезисы. Самара. 2009. с. 213

9.Ульянова Е.В., Ларионов О.Г., Рёвина A.A. VII Международный Симпозиум по фенольным соединениям: фундаментальные и прикладные аспекты (Москва, 19-23 октября 2009 г.) Тезисы. Москва. 2009. с. 263

10. Ульянова Е.В., Ларионов О.Г., Рёвина A.A. Московская конференция-конкурс молодых учёных, аспирантов и студентов "Физикохимия-2009" (Москва, 1 ноября - 4 декабря 2009 г.). Тезисы. Москва. 2009. с. 88

11. Ульянова Е.В., Ларионов О.Г. Всероссийская научно-практическая конференция "Хроматография - народному хозяйству" (Дзержинск, 19-23 апреля 2010 г.). Тезисы Дзержинск. 2010. с. 27

12. Ульянова Е.В., Ларионов О.Г., Рёвина A.A., Андриевская Д.В. Высокоэффективная жидкостная хроматография в исследовании антиоксидант-ных свойств вин. // Сорбционные и хроматографические процессы. 2010. Т. 10 №4 С.522-532

13. Ульянова Е.В., Ларионов О.Г., Рёвина A.A., Андриевская Д.В., Фенин A.A. V конференция молодых учёных, аспирантов и студентов ИФХЭ

РАН "Физикохимия-2010" (Москва, 1-30 ноября 2010 г.). Тезисы. Москва. 2010. с. 14 (заняла III место)

14. Оганесянц JI.A., Андриевская Д.В., Песчанская В.А., Урусова JI.M., Рёвина A.A., Ульянова Е.В., Фенин A.A. Влияние различных сроков хранения на биологическую ценность вин. // Виноделие и виноградарство. 2010. №6 С.11-14

Заключение диссертации по теме «Физическая химия», Ульянова, Екатерина Владимировна

Выводы

1. Установлено, что наибольшей радиопротекторной активностью в отношении дрожжей 8. сегеу1з1ае среди исследованных флавоноидов обладают гесперидин, (+)катехин и нарингин, наименьшей — нарингенин, пиноцем-брин и акацетин. Радиопротекторное действие было установлено практически для всех образцов красных вин первого года хранения. Белые вина, а также вина третьего года хранения не обладали радиопротекторным действием.

2. Показано, что метод ВЭЖХ можно использовать для исследования протекторных свойств вин в условиях у-облучения, поскольку данным методом удалось разделить и зарегистрировать спектры продуктов радиолиза, а также рассчитать степени превращения исходных веществ.

3. Для индивидуальных фенольных соединений наблюдается следующая закономерность: вещества, обладающие низкой антиоксидантной активностью, проявляют наименьшую, радиационную лабильность по данным ВЭЖХ.

4. Если рассматривать вина из одного сорта винограда, то за время хранения и в процессе радиолиза в тех из них, которые обладали более высоким значением антиоксидантной активности (чилийские вина), по данным ВЭЖХ произошли более значительные изменения концентраций фенольных соединений, чем в других (французские вина).

5. Методом ВЭЖХ показано, что в результате воздействия радиолиза в винах третьего года хранения произошли менее значительные изменения содержания фенольных соединений по сравнению с молодыми винами, т.е. в последних фенольные соединения являются более радиационно-лабильными.

6. Установлена зависимость антиоксидантной активности коньяков от их качества, которая может быть использована для разработки методики экспрессного выявления фальсификатов и оценки возраста продукции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Ульянова, Екатерина Владимировна, 2011 год

1. Prior R.L., Cao G. 1. vivo total antioxidant capacity: comparison of different analytical methods. // Free Rad. Biology & Medicine. 1999. V.27. N. 11/12. P. 1173-1181.

2. Никифорова Т.Е., Козлов B.A., Багровская H.A., Родионова М.В. Сорб-ционная очистка вин. // Химия растительного сырья. 2007. N.1 С.69-73.

3. Sun В., Spranger I., Yang J., Leandro C., Guo L., Canario S., Zhao Y., Wu C. Red wine phenolic complexes and their in vitro antioxidant activuty. // J. Agr. Food Chem. 2009 V.57. 8623-8627.

4. Shu-Ping Wang, Kuo-Jun Huang Determination of flavonoids by highperformance liquid chromatography and capillary electrophoresis. // J. Chromatog. A 2003. V.1032. P.273-279.

5. Kerem Z., Bravdo В., Shoseyov O., Tugendhaft Y. Rapid liquid chromatog-raphy-ultraviolet determination of organic acids and phenolic compounds in red wine and must. // J. Chromatog. A 2004. V.1032. P.211-215.

6. Rodrigo R., Rivera G. Renal damage mediated by oxidative stress: a hypothesis of protective effects of red wines. // Free Rad. Biology & Medicine. 2002. V.33. N.3. P. 409-422.

7. Robert M. Hackman, John A. Polagruto, Qin Yan Zhu, Buxiang Sun, Hajime Fujii, Carl L. Keen. Flavanols: digestion, absorption and bioactivity. // Phytochem Rev. 2008. V.7. P. 195-208.

8. Giovanelly G., Brenna O.V. Oxidative stability of red wine stored in package with different oxygen permeatability. // Eur Food Res Technol. 2007. V.226. P.169-179.

9. Эмануэль Н.М. Биофизические аспекты действия физических и химических факторов на живые организмы. Защитные свойства антиоксидантов. // Биофизика. 1984. Т.29. N.4. С.706-719.

10. Moreno-Arribas M.V., Polo M.C. (eds.) Wine Chemistry and Biochemistry. New York: Springer Science + Business Media. 2009. 465 p.

11. Багиян JI.B. Изменение химического состава виноградных вин при криообработке. //Известия вузов. Пищевая технология. 2009. N.4. С. 30-32

12. Исламов М.Н., Исмаилов Т.А., Кишковский З.Н. Исследование возможности применения электродиализа для биологической стабилизации виноградных вин- и соков. // Современные проблемы науки и образования. 2007. N.6. www.rae.ru

13. Узун Л.Н., Христюк В.Т. Изменение содержания' фенольных веществ виноматериала в результате обработки мезги электромагнитным полем. // Известия вузов. Пищевая технология. 2003. N.5-6. С. 44-45.

14. Cantos Е., Espin J.C., Fernandez M.J., Oliva J., Tomas-Barberan F.A. Post-harvest UV-c-irradiated grapes as a potential source for producing stilbene-enriched red wines. // J. Agr. Food Ghem. 2003. V.51. P.1208-1214.

15. Bors W., Michel C. Antioxidant capacity of flavanols and gallate esters: puis radiollysis studies. // Free Rad. Biology & Medicine. 1999. V.27. N. 11/12 P.1413-1426.

16. Mahal H.S., Mukherjee T. Scavenging of reactive oxygen radicals by resvera-trol: antioxidant effect. // Res. Chem. Intermed. 2006. V. 32. N.l. P.59-71.

17. Зенкевич И.Г., Ещенко А.Ю., Макарова C.B., Утсаль В.А. Продукты окисления кверцетина кислородом воздуха при комнатной температуре и их идентификация. // Растительные ресурсы. 2007. Т. 43. N. 2. С. 111-124.

18. Pietta P. Flavonoids as antioxidant. // J. Nat. Prod. 2000. V. 63. P. 1035-1042.

19. Areias F.M., Rego A.C., Oliveira C.R., Seabra R.M. Antioxidant effect of flavonoids after ascorbate/Fe2+-induced oxidative stress in cultured retinal cells. // Biochemical Pharmocology. 2001. V. 62. P. 111-118.

20. Stasko A., Liptakova M., Malic F., Misik V. Free radical scavenging activities of white and red wines: an EPR spin« trapping study. // Appl. Magn. Reson. 2002. V.22. P. 101-113.

21. Andrew C. Clark The production of yellow pigments from (+)-catexin and dyhydroxyfumaric acid in a model wine system. // Eur Food Res Technol. 2008. V.226. P.925-931.

22. Beer D., Joubert E., Marais J., Manley M. Untravelling the total antioxidant capacity of pinotage wines: countribution of phenolic compounds. // J. Agr. Food Chem. 2006. V.54. P.2897-2905.

23. Rivero-Perez M.D., Muniz P., Gonzalez-Sanjose M.L. Countribution of an-thocyanin fraction to the antioxidant properties of wine. // Food and Chemical Toxicology. 2008. V.46, N.8, P.2815-2822.\

24. Talcott S.T., Lee J. Ellagic acid and flavonoids antioxidant content of muscadine wine and juice. // J. Agr. Food Chem. 2002. V.50. P.3186-3192.

25. Stasko A., Polovka M., Brezova V., Biskupic S., Malic F. Tocay wines as scavengers of free radicals (an EPR study). // Food Chemistry. V.96. N.2. P. 185196.

26. Frankel E.N., Waterhouhouse A.L. Teissedre P.L. Principal phenolic phyto-chemicals in selected California wines and their antioxidant activity in inhibiting oxidation of human low density lipoproteins. // J. Agr. Food Chem. 1995. V.43. N.4. P.890-894.

27. Pellegrini N., Simonetti P^, Gardana C., Brenna O., Brighenti F., Pietta P. Polyphenol Content and Total, Antioxidant Activity of Vini Novelly (Young Red Wines). // J. Agr. Food Chem. 2000. V.48. P.732-735.

28. Gorjanovic S.Z., Novakovic M.M., Potkonjak N.I., Suznjevic D.Z. Antioxidant activity of wines determined by polarographic assay based on hydrogen peroxide scavenge. //J. Agr. Food Chem. 2010. V.58. P.4626-4631.

29. Лапин A.A., Борисенков М.Ф., Карманов А.П., Бердник И.В., Кочева Л.С., Мусин Р.З., Магдеев И.М. Антиоксидантные свойства продуктов растительного происхождения. // Химия растительного сырья. 2007. N. 2 С.79-83.

30. Нбпег К., Cervellaty R, Neddens С. Measurements of the in vitro antioxidant activity of German white wines using a novel method. // Eur Food Res Technol. 2002. V.214. P.356-360.

31. Mannino S., Brenna O., Buratti S., Cosio M.S. A new method for the evaluation of the antioxidant power of wines. // Electroanalysis. 1998. V.10. N.13. P.908-912.

32. Dapkevicius A., Van Beek T.A., Niederlander H.A.G. Evaluation and com-prasion of two improved techniques for the on-line detection of antioxidants in liquid chromatography eluates. // J. Chromatog. A 2001. V.912. P.73-82.

33. Peyrat-Maillard M.N., Bonnely S., Berset C. Determination of the antioxidant activity of phenolic compounds by coulometric detection. // Talanta. 2000. V.51. P.709-716.

34. Rong Tsao, Raymond Yang Optimization of a new mobile phase to know the complex and real polyphenolic composition: towards a total phenolic index using high-performance liquid chromatography. // J. Chromatog. A 2003. V.1018. P.29-40.

35. Mulero J., Pardo F., Zafrilla P. Effect of principal polyphenolic components in relation to antioxidant activity in conventional and organic red.wines during storage. // Eur Food Res Technol. 2009. V.229: P. 807-812.

36. Sherma J. Thin-layer chromatography in food and agricultural analysis. // J. Chromatog. A 2000. V.880. P.129-147.

37. Cacciola F., Jandera P., Mondello L. Comparison of high-temperature gradient heart-cutting and comorehensive LC-LC systems for the separation of phenolic antioxidants. // Chromatographia. 2007. V.66. P.661-667.

38. Ivanova V., Dornyei A., Márke L., Vojnoski B., Stafilov T., Stefova M., Kilár F. Polyphenolic content of Vranec wines produced by different vinification conditions. // Food Chemistry. 2011. V. 124. N. 1. P. 316-325.

39. Seruga M., Novak I., Jakobek L. Determination of polyphenols content and antioxidant activity of some red wines by differential1 pulse voltammetry, HPLC and spectrophotometric methods. // Food Chemistry. 2011. V. 124. N. 3. P. 1208-1216.

40. Vinkovic Vrcek I., Bojic M., Zuntar I., Mendas G., Medic-Saric M. Phenol content, antioxidant activity and metal composition of Croatian wines deriving from organically and conventionally grown grapes. // Food Chemistry. 2011. V. 124. N. l.P. 354-361.

41. Hernades-Borges J., Borges-Miquel'T., Gonzalez-Hernandez G., Rodriguez-Delgado M.A. Rapid separation of antioxidants in food, samples by coelectroosmo-tic CE. // Chromatographia. 2005. V.62. P.271-276.

42. Fernandez de Simon B., Peres-Ilzarbe J., Hernandez T., Gomes-Cordoves C., Estrella I. HPLC study of the efficiency of extraction- of phenolic compounds. // Chromatographia. 1990. V.30. N.l-2. P.35-37.

43. Revilla E., Alonso E., Estrella M.I. Analysis of flavonol aglycones in wine extracts by high performance liquid chromatography. // Chromatographia. 1986. V.22. N.l-6. P.157-159.

44. Rio Segade S., Soto Vazquez E., Vazquez Rodriguez E.I., Rego Martinez J.F. Influence of training system on chromatics and phenolic composition in red wines. // Eur Food Res Technol. 2009. V.229. P.763-770.

45. Kelebek H., Canbas A., Selli S. HPLC-DAD-MS analysis of anthocyanins in rose wine made from cv. Óküzgózü Grapes, and effect of maceration time on an-thocyanin content. // Chromatographia. 2007. V.66. P.207-212.

46. Карцова Л.А., Алексеева А.В. Хроматографические и электрофоретиче-ские методы определения полифенольных соединений. // ЖАХ. 2008. Т.63. N.11. С. 1126-1136.

47. A. De Villiers, F. Lynen, A. Crouch, P. Sandra Development of a Solid-Phase Extraction Procedure for the Simultaneous Determination of polyphenols, Organic Acids and Sugars in Wine. // Chromatographia. 2004. V.59. P.403-409.

48. Presta M.A., Bruyneel В., Zanella R., Kool J., Krabbe J.G., Lingeman H. Determination of flavonoids and resveratrol in wine by turbulent-flow chromatogra-phy-LC-MS. // Chromatographia. 2009. V.69. P.S167-S173.

49. Careri M., Corradini C., Elviri L., Nicoletti I., Zagnoni I. Direct HPLC analysis of quercetin and trans-resveratrol in red wine, grape and winemaking byproducts. //J. Agr. Food Chem. 2003. V.51. P:5226-5231.

50. Tinttunen S., Lehtonen P. Distinguishing organic wines from normal wines on the basis of concentrations of phenolic compounds and spectral data. // Eur Food Res Technol. 2001. V.212. P.390-394.

51. Carando S., Teissedre P.L., Cabanis J.C. HPLC coupled with fluorescence detection for the determination of procyanidins in white wines. // Chromatographia, 1999, V.50, N.3/4, P.253-254.

52. Tsanova-Savova S., Ribarova F. Free and conjugated myricetin, quercetin, andkaempferol in bulgarian red wines. // Journal of food composition1 and analysis. 2002. V.15. P.639-645.

53. Taróla A.M., Giannetti V. Detemination by LC of polyphenols in italian red wine. Chromatographia. 2007. V.65. P.367-371.

54. Rodrigues-Delgado M.A., Malonova S., Peres J.P., Borges T., Garsia Monte-longo F.J. Separation of phenolic compounds by high-performance liquid chromatography with absorbance and fluorimetric detection. // J. Chromatog. A 2001. V.912. P.249-257.

55. Darias-Martin J.J., Andres-Lacueva C., Diaz-Romero C., Lamuela-Raventos R.M. Phenolic profile in varietal white wines made in the Canary islands. // Eur Food Res Technol. 2008. V.226: P.871-876.

56. Alcalde-Eon C., Escribano-Bailon M.T., Santos-Buelga C., Rivas-Gouzalo J.C. Changes in the detailed pigment composition of red wine during maturity and ageing. // Analytica Chimica Acta. 2006. V.563. P.238-254.

57. Repolles C., Herrero-Martinez J.M., Rafos C. Analysis of prominent flavon-oids aglycones by high-performance liquid chromatography using a monolithic type columns. //J. Chromatog. A 2006. V.1131. P.51-57.

58. Cacciola F., Jandera P., Hajdu Z., Cesla P., Mondello L. Comprehensive two-dimensional liquid chromatography with parallel gradients for separation of phenolic and flavone antioxidants. // J. Chromatog. A 2007. V.l 149. P.73-87.

59. Harnly J.M., Bhagwat S., Lin L.-Z. Profiling methods for the determination of phenolic compounds in foods and dietary supplements. // Anal Bional Chem. 2007. V. 389. P.47-61.

60. Czyzowska A., Pogorzelski E. Changes to polyphenols in the process of must and wines from blackcurrants and cherries. Part 1. Total polyphenols and phenolic acids. // Eur. Food Res. technol. 2002. V.214. P. 148.

61. Guadalupe Z., Soldevilla A., Saenz-Navajas M.-P., Ayestaran B. Analysis of polymeric phenolics in red wines using different techniques combined with, gel permeation chromatography fractionation. // J. Chromatog. A 2006. V. 1112. P. 112-120.

62. Bravo M.N., Silva S., Coelho A.V., Vilas Boas L., Bronze M.R. Analysis of phenolic compounds in Muscatel wines produced in Portugal. // Analytica Chimica Acta. 2006. V. 563. P. 84-92.

63. He J., Santos-Buelga C., Mateus N., de Freitas V. Isolation andquantification of oligomeric pyranoanthocyanin-flavanol- pigments from'red wines by combination of column chromatographic techniques. // Jt Chromatog. A 2006. V. 1134. P. 215225.

64. Pellegrini N., Simonetti P., Garana C. et al. Poliphenol content and total antioxidant activity of Vini Novelli (Young Red Wines). // J. Agr. Food Chem. Chemistry. 2000; V.48. P.732-735.

65. Netzel M., Strass G., Bitsch I., Könitz R., Christmann M., Bitsch R. Effect of grape processing on selected antioxidant phenolics in red wine. // J. Food Eng., 2003, V.56, P. 223-228.

66. Li Z., Panl Q., Jina Z., Mua L., Duan C. Comparison on phenolic compounds in Vitis vinifera cv. Cabernet Sauvignon wines from five wine-growing regions in China. // Food Chemistry. 2011. V. 125. N. 1. P. 77-83.

67. Fernandez-Pachon M.S., Villaño D., Garcia-Parrilla M.C., Troncoso A.M. Antioxidant activity of wines and relation with their polyphenols composition. // Analytica Chimica Acta. 2004. V.513. P.l 13-118.

68. Ghiselli A., Serafini M., Natella F., Scaccini C. Total antioxidant capacity as a tool to assess redox status: critical view and experimental data. // Free Rad. Biology & Medicine. 2000. V.29. N.l 1. P. 1106-1114.

69. Савчук C.A., Власов B.H., Апполонова C.A., Арбузов В.Н., Веденин А.Н., Мезинов А.Б., Григорьян Б.Р. Применение хроматографии и спектрометрии для идентификации подлинности спиртных напитков. // ЖАХ. 2001. T.56.N.3.C. 246-264.

70. Савчук С.А., Нужный В.П. Химический состав и потенциальная токсичность образцов легальной и нелегальной алкогольной продукции. // Наркология. 2006. N.7. С.67-76.

71. Савчук С.А., Колесов Г.М. О правильности хроматографического определения эфиров фталевых кислот, как показателя фальсификации коньяков и коньячных спиртов. // ЖАХ. 2007. Т.62. N.8. С.845-857.

72. Вязьмина H.A., Савчук С.А. Исследование примесного состава этилового спирта и продуктов его ректификации. // Партнеры и Конкуренты. 2002. N.2. С. 30-40.

73. Вязьмина H.A., Савчук С.А. Применение методов газовой хроматографии для идентификации происхождения спирта. // ЖАХ. 2002. Т.57. N.8. С.813-819.i127

74. Савчук С.А., Власов В.Н. Идентификация винодельческой продукции методами высокоэффективной хроматографии и спектрометрии. // Виноград и вино России. 2000. N.5. С.5-13.

75. Савчук С.А. Контроль качества и идентификация подлинности коньяков хроматографическими методами. // Методы оценки соответствия. 2006. N.9. С.30-37.

76. Нужный В.П. Савчук С.А., Каюмов Р.И. Химико-токсикологическое исследование крепких алкогольных напитков домашнего изготовления (Самогон из разных регионов России). // Наркология. 2002. N.5. С.43-48.

77. Нужный В.П., Савчук С.А., Тюрин И.А., Белов С.К. Проблема денатурирующих добавок к этиловому спирту в связи с исследованием образцов нелегальной алкогольной продукции. // Токсикологический вестник. 2004. N.3. С.7-12.

78. Скурихин И.М. Химия коньяка и бренди. Ml: ДеЛи Принт. 2005. С.167

79. Савчук С.А., Колесов Г.М. Хроматографические методы в контроле качества коньяков и коньячных спиртов. // ЖАХ. 2005. Т. 60. N. 8. С. 848-868.

80. Соболев Э.М., Оселедцева И.В. Идентификация подлинности и уровня качества коньячной продукции. // Известия вузов. Пищевая технология. 2005. N.5-6. С. 98-101.

81. Методы технохимического контроля в виноделии. Под ред. Гержиковой В.Г. Симферополь: Таврида, 2002 г. - 260 с.

82. Яшин А.Я., Яшин Я.И., Черноусова Н.И. Антиоксиданты в красном вине и их определение амперометрическим методом// Виноделие и виноградарство. 2007. N.6. С.22-23.

83. Пикаев А.К. Современная радиационная химия. Экспериментальная техника и методы. М.: Наука, 1985 г.

84. ГОСТ Р ИСО 5725-2-2001 Точность (правильность и прецизионность методов и результатов измерения)

85. Рудаков О.Б., Востров И.А., Федоров С.В., Филиппов А.А., Селеменев В.Ф., Приданцев А.А. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии. Воронеж.: Водолей. 2004. 528 с.

86. Аббас А.М:, Бандюкова В.А., Пищков Ю.Г., Никитина Г.К., Ващенко Т.Н., Гаврилин М.В. Полифенолы и полисахариды чашелистиков Habiscus Sa-dariffa L. // Растительные ресурсы. 1993. Т. 29. N. 2. С. 31-40.

87. Запромётов М.Н. Фенольные соединения: распространение, метаболизм и функции в растениях. М.: Наука. 1993. 272 с.

88. Wang S.-P., Fu M.-D., Wang M:-H. Separation mechanism and determination of flavanones with capillary electrophoresis and high-performance liquid chromatography. // J. Chromatog. A 2007. V. 1164. P. 306-312.

89. Ульянова E.B.,. Ларионов О.Г., Рёвина А.А., Андриевская Д.В. Высокоэффективная жидкостная хроматография в исследовании антиоксидантных свойств вин. // Сорбционные и хроматографические процессы. 2010. Т. 10. N. 4. С. 522-532.

90. Ревина А.А. Полифункциональная радиопротекторная активность природных пигментов флавоноидов. // Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты. / Сб. научн. трудов. Москва. 2003. Вып. 9. С. 197-208.

91. Гродзинский Д.М., Гудков И.Н. Защита растений от лучевого поражения. М.: Атомиздат. 1973. 232 с.

92. Запромётов М.Н. Биохимия катехинов. М.: Наука. 1964. 295 с.

93. Лысиков В.Н., Луцик Т.К., Ревина А.А. Промежуточные продукты радиолиза антоциана как антимутагенный фактор. // Известия АН МССР. сер. биологич. и химич. наук. Кишинев. 1986. Т. 5. С. 29-33.

94. Ревина A.A. Радиационно-химическое моделирование быстропроте-кающих процессов с участием промежуточных кислородсодержащих реакционных центров в различных системах.// Автореф. диссертации, д.х.н. Москва. ИХФ РАН. 1995.

95. Кочетова М.В., Ларионов О.Г., Ульянова Е.В. Определение качественного состава коньячных изделий методом ВЭЖХ. // Сорбционные и хроматографические процессы. 2008. Т. 8. N. 4. С. 658-667.

96. Автор выражает благодарность в подготовке работы:

97. Научному руководителю, д.х.н., профессору Ларионову О.Г. (ИФХЭ РАН, Москва)д.х.н., профессору Ревиной A.A. (ИФХЭ РАН, Москва) к.т.н. Андриевской Д.В. (ГУ ВНИИ ПБ и ВП, Москва) Фенину A.A. (РХТУ им. Д.И. Менделеева)