Влияние аскорбиновой кислоты на обмен гликозаминогликанов и резистентность организма к токсическим воздействиям тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Ерофеева, Ольга Евгеньевна

• Ерофеева, Ольга Евгеньевна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ерофеева, Ольга Евгеньевна

Список принятых сокращений.

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Обмен гликозаминогликанов.

2.1.1. Структура и функции гликозаминогликанов.

2.1.2. Биосинтез гликозаминогликанов. Взаимосвязь синтеза гликозаминогликанов с процессами детоксикации ксенобиотиков.

2.1.3. Катаболизм протеогликанов.

2.2. Глюкуронидная конъюгация.

2.3. Глюкуронат-ксилулезный цикл: описание и биохимические эффекты его функционирования.

2.4. Структура и функции аскорбиновой кислоты. Роль аскорбиновой кислоты в биохимических и физиологических процессах.

2.5. Влияние аскорбиновой кислоты на метаболизм протеогликанов. Сопряженность обмена аскорбиновой кислоты с функционированием глюкуронат-ксилулезного цикла и глюкуронидной коньюгацией.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние аскорбиновой кислоты на обмен гликозаминогликанов и резистентность организма к токсическим воздействиям»

Актуальность работы. Проблема поиска средств, повышающих адаптационные возможности организма к неблагоприятным воздействиям окружающей среды, в последнее время стала особенно актуальной. Это связано как с ухудшением экологической обстановки, так и с возрастанием информационно-эмоциональной нагрузки на психику человека. Иными словами, даже в случае здорового образа жизни при любом неблагоприятном воздействии в клеточном микроокружении появляются токсические вещества эндогенной или экзогенной природы, что неизбежно требует своей коррекции [5]. Основным путем обезвреживания этих соединений является их конъюгация с УДФ-глюкуроновой кислотой (УДФ-ГК) с последующим выведением из организма. Однако за УДФ-ГК конкурируют и другие метаболические процессы, основным из которых является биосинтез гетерополисахаридов -гликозаминогликанов межклеточного матрикса, что приводит к снижению эффективности детоксикации [5]. Таким образом, и глюкуронидные конъюгаты, и гликозаминогликаны (ГАГ) синтезируются из общего предшественника - УДФ-глюкуроновой кислоты. После выполнения своей функции гликозаминогликаны метаболизируются в глюкуронат-ксилулозном цикле (ГКЦ), одним из метаболитов которого является аскорбиновая кислота. Из сказанного следует, что метаболизм УДФ-глюкуроновой кислоты, тесно сопряженный с функционированием ГКЦ, обменом ГАГ и аскорбиновой кислоты, имеет большое значение для защиты организма при самых различных неблагоприятных воздействиях.

В методическом плане отметим, что в организме крыс аскорбиновая кислота (АК) синтезируется в глюкуронат-ксилулозном цикле в количестве примерно 50 мг/кг и является необходимым метаболитом биосинтеза (ГАГ), выступающих одним из основных компонентов межклеточного матрикса. У приматов (в том числе человека) и морских свинок аскорбиновая кислота не синтезируется из-за отсутствия двух специфических ферментов ГКЦ (Ьгулонат: гулоно-у-лактонгидролазы (альдонолактоназы) 3.1.1.18 и гулоно-у-лактон: кислород-оксидоредуктазы (L-гулонодактоноксидазы) 1.1.3.8 [26], является витамином, который, однако, по механизму своего действия представляет собой типичный нормальный метаболит.

Катаболизм гликозаминогликанов с образованием аскорбиновой кислоты у крыс протекает также в глюкуронат-ксилулозном цикле, поэтому представляется вероятным, что нагрузка этого цикла большим количеством АК должна замедлить катаболизм ГАГ и направить основной предшественник их синтеза УДФ-глюкуроновую кислоту в реакции глюкуронидной конъюгации, обеспечивающие процессы детоксикации в организме и тем самым повысить его неспецифическую резистентность. В качестве уровней однократного воздействия аскорбиновой кислоты нами были выбраны 100, 500 и 1000 мг/кг, превышающие нормальный биосинтез этого метаболита у крыс соответственно в 2, 10 и 20 раз и не вызывающие летальных эффектов, что не противоречит основным фармакологическим принципам испытания биологической активности веществ. В указанной связи следует отметить, что в фармакологических исследованиях часто используются дозы 1/10 - 1/30 от уровня среднесмертельного воздействия, то есть от DL50.

К эмпирическим предтечам настоящей работы можно отнести экспериментальные данные о фармакологической эффективности больших дозировок аскорбиновой кислоты, полученные дважды лауреатом Нобелевской премии Лайнусом Полингом и опубликованные им в работах «Витамин С и простуда» («Vitamin С and the Common Cold») [163] и «Рак и витамин С» («Cancer and Vitamin С») (1979). В этих книгах JI. Полинг отмечал, что систематическое применение больших доз аскорбиновой кислоты улучшает состояние больных. На наш взгляд, заключение JI. Полинга свидетельствует в пользу доводов о повышении аскорбиновой кислотой неспецифической резистентности организма.

Для изучения антитоксической эффективности аскорбиновой кислоты нами в качестве модельного агента был выбран фенол, обладающий выраженным нейротоксическим действием и детоксицирующийся организмом в реакциях глюкуронидной конъюгации с превращением в нетоксичные фенилглюкурониды.

Таким образом, выбор нами аскорбиновой кислоты в качестве средства, модулирующего обмен веществ, обусловлен необходимостью предложить новые подходы к регуляции обмена веществ нормальными метаболитами на примере аскорбиновой кислоты для аскорбат-независимого вида (крыс) и экстраполировать полученные результаты на аскорбат-зависимые виды.

С учетом изложенного, представляется теоретически обоснованным выдвижение основной эмпирической гипотезы о существовании ингибирующего действия больших дозировок аскорбиновой кислоты на биосинтез гликозаминогликанов, приводящего к перераспределению в организме фонда УДФ-глюкуроновой кислоты в сторону реакций конъюгации и повышающего за счет этого его неспецифическую резистентность к токсическим воздействиям. В указанной связи целью настоящей экспериментальной работы являлось изучение влияния больших доз аскорбиновой кислоты на обмен гликозаминогликанов и защитную эффективность при остром отравлении фенолом, а также теоретическое обоснование ее применения в качестве средства, повышающего неспецифическую резистентность организма к неблагоприятным экзо- и эндогенным воздействиям.

Для достижения поставленной цели представлялось необходимым решить следующие задачи:

1. Изучить влияние больших доз аскорбиновой кислоты на состояние обмена гликозаминогликанов и их фракций - гиалуроновой кислоты и сульфатированных гликозаминогликанов - в различных органах белых неинбредных крыс.

2. Изучить влияние больших доз аскорбиновой кислоты на содержание нуклеиновых кислот в различных органах белых неинбредных крыс.

3. Оценить защитную эффективность аскорбиновой кислоты при остром отравлении фенолом белых неинбредных крыс

4. Изучить влияние аскорбиновой кислоты на интенсивность реакций глюкуронидной конъюгации с применением в качестве токсического агента ,4С-фенола.

5. Разработать практические рекомендации по дальнейшему изучению аскорбиновой кислоты в качестве средства, повышающего неспецифическую резистентность организма.

Научная новизна. Проведенные исследования позволили существенно расширить представления о биохимических механизмах, лежащих в основе фармакологических эффектов аскорбиновой кислоты. Установлено, что в организме белых неинбредных крыс аскорбиновая кислота в дозе 100 мг/кг ингибирует анаболизм гликозаминогликанов и их фракций, в дозе 500 мг/кг -ингибирует и анаболизм, и катаболизм этих биополимеров, а в дозе 1 ООО мг/кг - к блокированию обмена гликозаминогликанов добавляется нарушение соотношения фракционного состава сульфатированных и несульфатированных ГАГ. Установлено защитное действие аскорбиновой кислоты при остром отравлении фенолом белых крыс, одним из биохимических механизмов которого выступает повышение интенсивности реакций глюкуронидной конъюгации, происходящее на фоне увеличения содержания в печени нуклеиновых кислот, что является косвенным подтверждением интенсификации биосинтетических процессов. Теоретически обосновано, что биохимические механизмы фармакологических эффектов именно больших доз аскорбиновой кислоты носят сходный характер у аскорбат-зависимых и аскорбат-независимых видов. Не вызывает сомнений целесообразность проведения дальнейших фундаментальных исследований в этом направлении.

Практическая значимость Показана возможность принципиально нового подхода к разработке средств, повышающих адаптационные резервы организма. Практически продемонстрировано, что нормальный метаболит (аскорбиновая кислота) может быть использован для биохимического регулирования интенсивности метаболических потоков макроэргических соединений (УДФ-глюкуроновой кислоты) для решения тех или иных фармакологических задач. Предложен как общий принцип повышения адаптационных возможностей организма, так и конкретный методический подход, заключающийся в применении для этих целей аскорбиновой кислоты для аскорбат-независимых видов, например, в ветеринарии и животноводстве. Вместе с тем для практического внедрения нашего предложения необходимо проведение большого количества доклинических исследований уточняющего характера.

На защиту выносятся следующие научные положения:

1. Аскорбиновая кислота при введении белым крысам в больших дозировках ингибирует обмен гликозаминогликанов и их фракций -гиалуроновой кислоты и сульфатированных ГАГ.

2. Аскорбиновая кислота в больших дозировках увеличивает в организме крыс биосинтез нуклеиновых кислот.

3. Аскорбиновая кислота проявляет защитную эффективность при остром отравлении белых крыс фенолом.

4. Аскорбиновая кислота в больших дозировках повышает в организме крыс интенсивность реакций глюкуронидной конъюгации.

5. Существует принципиальная возможность повышения адаптационных возможностей аскорбат-независимых видов путем применения больших дозировок аскорбиновой кислоты.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Пироговской научной конференции студентов и молодых ученых

Москва, 2003), Конференции ученых Республики Башкортостан «Научный прорыв - 2004» (Уфа, 2004), на Межрегиональной научно-практической конференции «Формирование здорового образа жизни: государственные, национальные, личностные приоритеты» (Уфа, 2005), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины (Уфа, 2006).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 113 страницах, содержит 27 таблиц, 36 рисунков и состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, глав результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 197 источников, из которых 78 отечественных и 119 иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Ерофеева, Ольга Евгеньевна

IX. ВЫВОДЫ

1. Аскорбиновая кислота в больших дозировках: 100, 500 и 1000 мг/кг введенная в организм белых крыс, доза-зависимо ингибирует обмен гликозаминогликанов и их фракций - гиалуроновой кислоты и сульфатированных ГАГ, соответственно сначала подавляя анаболизм, затем и катаболизм этих биополимеров.

2. Аскорбиновая кислота во всех больших дозировках - 100, 500 и 1000 мг/кг - увеличивает биосинтез нуклеиновых кислот в печени крыс.

3. Аскорбиновая кислота в диапазоне доз 100 - 500 мг/кг проявляет защитную эффективность при остром отравлении белых крыс фенолом в дозе 01,84.

4. Аскорбиновая кислота в дозировке 500 мг/кг повышает интенсивность реакций глюкуронидной конъюгации в печени крыс на модели острого отравления фенолом.

5. Теоретически и экспериментально обоснована принципиальная возможность повышения адаптационных возможностей аскорбат-независимых видов путем применения больших дозировок аскорбиновой кислоты.

X. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Представляется целесообразным проведение дополнительных биохимических исследований, направленных на уточнение механизмов фармакологической активности больших дозировок аскорбиновой кислоты у аскорбат-зависимых видов.

2. Представляется целесообразным проведение теоретических и экспериментальных исследований, направленных на обоснование методического подхода к решению фармакологических задач на основе применения больших дозировок эндогенных соединений для целенаправленного перераспределения метаболических потоков.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ерофеева, Ольга Евгеньевна, 2007 год

1. Алехин Е.К., Богданова А.Ш., Плечев В.В., Фархутдинов Р.Р. Влияние лекарственных средств на процессы свободнорадикального окисления: Справочник.- Уфа: БГМУ, 2002.- С.288.

2. Андреева М.П., Раскин A.M. Заболевания надпочечников // Руководство по внутренним болезням, 2002.- Т.7.- С.423-499.

3. Бабаева А.Г. Традиционные и нетрадиционные представления о роли системы иммуногенеза в организме // Вестник АМН СССР.- 1986. № 1. - С.22.

4. Баренбойм Г.М., Маленков А.Г. Биологически активные вещества. Новые принципы поиска. М.: Наука, 1986. - С.368.

5. Башкатов С. А. Гликозаминогликаны в механизмах адаптации организма.-Уфа: БашГУ, 1996. -144 с.

6. Беленький M.JI. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л.: Медицина, 1963. - 152 с.

7. Белоусов Ю.Б., Моисеев B.C., Лепахин В.К. Клиническая фармакология и фармакотерапия. М.: Универсум, 1993. - 400 с.

8. Березов Т.Г. Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1982.-750 с.

9. Биохимический справочник.- Киев: Вища школа, 1979. 304 с.

10. Бойд У. Основы иммунологии.- М.: Мир, 1969.- 647 с.

11. Брехман И.И. Человек и биологически активные вещества, 2-е изд. М.: Наука, 1980.-С. 120.

12. Бурлакова Е.Б. Биоантиоксиданты и синтетические ингибиторы радикальных реакций // Успехи химии.- 1975. Т.44. - №10. - С.874-886.

13. Бычков С.М., Захарова М.М. Новые данные о гликозаминогликанах и протеогликанах //Вопр. мед. хим. 1979, - №3. - С.227-237.

14. Бышевский А.Ш., Терсенов O.A. Биохимия для врачей.-Екатерининбург: Уральский рабочий, 1994 384с.

15. Введение в клиническую биохимию (основы патохимии) / Под ред. Иванова И.И.- Л.: Медицина, 1969. 493с.

16. Вельтищев Ю.У. Наследственные аномалии обмена витаминов. // Генетика.- 1980. Т.5. - С. 123-148.

17. Гадаскина И.Д., Филов В.А. Превращение и определение промышленных органических ядов в организме. JL: Медицина, 1971. - 304 с.

18. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов JI.A. Общие механизмы токсического действия. JL: Медицина, 1986. - 280с.

19. Головенко Н.Я. Механизмы реакций метаболизма ксенобиотиков в биологических мембранах. Киев, 1981. - 312с.

20. Гофман Э. Динамическая биохимия. М.: Медицина, 1971. - 321с.

21. Гуськова P.A., Виленчик М.М., Кольтовер В.К. Роль свободных супероксидных радикалов в старении биологических объектов // Биофизика. -1980.-Т. 25.-С. 102-105.

22. Ермолаев О.Ю. Математическая статистика для психологов. -М.:Флинта, 2002. С.336.

23. Денисенко П.П. Экстремальные состояния как фармакологическая проблема // Поиск фармакологических средств для профилактики и ранней терапии нарушений, вызванных экстремальными факторами: Сб. науч. тр. Ленинградского СГМИ.-Л., 1986. С. 4-7.

24. Джиоев Ф.К. Влияние глюкуроновой кислоты на канцерогенное действие уретана, дибунилнитрозамина и 7,12-диметилбенза.антрацена //Вопросы онкологии. 1988. - Т.34. - №4. - С.463-467.

25. Дэгли С., Николсон Д. Метаболические пути.- М.:Мир, 1973. 3Юс.

26. Жамгоцев Г.Г., Предтеченский М.Б. Медицинская помощь пораженным сильнодействующими ядовитыми веществами (СДЯВ). М.: Медицина, 1993. -208с.

27. Журавлев А.И. Биоантиокислители в животном организме // Биоантиокислители: Тр. Моск. об-ва исп. природы. М.: Наука, 1975. - Т.52. -С.15-29.

28. Журавлев А.И. Развитие идей Б.Н.Тарусова о роли цепных процессов в биологии // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии: Тр. Моск. об-ва исп. природы.-М.:Наука,1982.-Т.57.-С.З-37.

29. Зайчик А.Ш., Чурилов Л.П. Основы патохимии СПб., 2001. - С.374-379

30. Зимина Н.П., Дмитриев И.П., Рыкова В.И. Состав и степень сульфатирования гликозаминогликанов из тканей животных различных видов: гетерогенность и тканевая специфичность гепарансульфатов // Биохимия,-1987. Т.52.- Вып.6. - С.984-990.

31. Зимина Н.П., Рыкова В.И., Архипов И.А. Протеогликаны животных тканей как нерегулярные биополимеры: информативность структуры и контроль биосинтеза // Успехи современной биологии.-1992. Т.112.- Вып. 4. -С.571-588.

32. Зимина Н.П., Рыкова В.И. Протеогликаны животных тканей и их влияние на синтез ДНК //Биохимия,- 1986. Т.51.- С.1555-1561.

33. Зимина Н.П. Рыкова В.И., Дмитриев И.П. Сравнительная характеристика состава и степени сульфатирования гликозаминогликанов покоящихся и активно пролиферирующих тканей. // Биохимия.- 1987. Т. 52.-С. 856-861.

34. Зимницкий А.Н., Башкатов С.А. Гликозаминогликаны в биохимических механизмах адаптации организма к некоторым физиологическим и патологическим состояниям. М.: Фармацевтический Бюллетень, 2004. - С.208.

35. Зимницкий А.Н., Башкатов С.А. Сопряженность биосинтеза гликозаминогликанов с ядерным и микросомальным аппаратом клетки // Молекулярная биология, 2006.- Т. 40.- № 2. С.1-11.

36. Ивантер Э.В., Коросов A.B. Основы биометрии: введение в статистический анализ биологических явлений и процессов.- Петрозаводск: ПГУ, 1992.-С.163.

37. Киселева А.Ф., Житников А.Я., Кейсевич J1.B. и др. Морфофункциональные методы исследования в норме и при патологии. Киев: Здоров'я, 1983. - 168с.

38. Клещенко Е. Аскорбинка по Полингу: вопрос решен или забыт? //Химия и жизнь, 1999.-№10. С. 18-22

39. Кольман Я., Рем К.Г. Наглядная биохимия. М.: Мир, 2000.- 469с.

40. Кожура И.М. Содержание фракций белков и липопротеидов в сыворотке крови кроликов разного возраста при экспериментальном атеросклерозе // Механизмы старения. Киев: Государственное медицинское издательство УССР, 1963. - С. 121 -126.

41. Крылов Ю.Ф., Неугодова Н.П., Смирнов П.А. Роль биотрансформации лекарственных средств в реализации фармакологического эффекта // Вестник АМН СССР. 1984. - №12. - С.76-80.

42. Лабори Г. Регуляция обменных процессов (теоретический, экспериментальный, фармакологический и терапевтический аспекты). -М.:Медицина,1970. -С.384.

43. Лабори Г. Метаболические и фармакологические основы нейрофизиологии. М.: Медицина, 1974. - С. 168.

44. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета.-М.: Медицина, 1985.-256с.

45. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. - С.352.

46. Ландау М.А. Молекулярная природа отдельных физиологических процессов. М.: Наука, 1985.- 264с.

47. Лашнеева Н.В., Тутельян В.А. Индукция цитохрома Р-450 в печени крыс при воздействии полихлорированных дифенилов // Фармакология и токсикология.-1984. №6. - С. 77-80.

48. Логаткин М.Н. Критерии адекватного питания. Л.: ЛПМИ, 1984. - С.88

49. Маршалл В.Дж. Клиническая биохимия -2-ое изд. пер с англ. СПб.: Невский диалект, 2002. - С.784.

50. Меньшиков В.В. Руководство по клинической лабораторной диагностике. -М.: Медицина, 1982. С.576.

51. Методы биохимических исследований / Под ред. М.И.Прохоровой.- Л.: Изд-во ЛГУ, 1982. 272с.

52. Методы практической биохимии / Под ред. Уильямса Б., Уилсона К. -М.:Мир,1978.- 272с.

53. Методы химии углеводов / Под ред. Н.К.Кочеткова. М.: Мир, 1967. -С.38-42.

54. Мешкова Н.П., Северин С.Е. Практикум по биохимии.-М.:Изд-во МГУ, 1979.- 430с.

55. Мхитарян В.Г., Агаджанов М.И., Геворкян Д.М. Ферментные механизмы антирадикальной защиты клетки при экстремальных состояниях // Вестн. АМН СССР. -1982. №9. - С.15-19.

56. Обухова Л.К., Эмануэль Н.М. Роль свободнорадикальных реакций окисления в молекулярных механизмах старения живых организмов // 1983. -Т.52.-С.353-371.

57. Орехович В.Н. Современные методы в биохимии,- М. :Медицина, 1968.-372с.

58. Парк Д.В. Биохимия чужеродных соединений.-М.:Медицина,1973.-287с.

59. Полинг Л. "Витамин С и здоровье".- М.:Наука, 1974.- С. 115

60. Роберте Дж., Касерио М. Основы органической химии. М.: Мир, 1978.320 с.

61. Северин М.В., Юшков Б.Г., Ястребов А.П. Регенерация тканей при экстремальных воздействиях на организм. Екатеринбург, 1993. - 187с.

62. Сергеев П.В., Галенко-Ярошевский П.А., Шимановский H.JI. Очерки биохимической фармакологии. М.: РЦ "Фармединфо",1996. - 384с.

63. Сергеев П.В. и соавт. Биохимическая фармакология. М.: Высшая школа, 1982. - С.343.

64. Серов В.В., Шехтер В.Б. Соединительная ткань М.: Медицина, 1981. — С.312.

65. Слуцкий Л.И. Биохимия нормальной и патологически измененной соединительной ткани. Л.: Медицина, 1969.- С.376.

66. Соколовский В.В. Окислительно-восстановительные процессы в биохимическом механизме неспецифической реакции организма на действие экстремальных факторов внешней среды // Антиоксиданты и адаптация. Л., 1984.- С.5-19.

67. Стейси М., Баркер С. Углеводы живых тканей. М.:Мир, 1965. - С.324.

68. Страйер Л. Биохимия: в 3-х т. Пер. с англ. М.: Мир, 1985. - Т.З. -С.400.

69. Уайт. Дж. Основы биохимии. М.: Мир, 1982. - Т.З. - 232с.

70. Фукс Б.Б., Фукс Б.И. Очерки морфологии и гистохимии соединительной ткани.- Л. :Медицина,1968. 216с.

71. Хмелевский Ю.В., Усатенко O.K. Основные биохимические константы человека в норме и при патологии.- Киев: Здоров'я, 1987. 160с.

72. Хочачка П., Сомеро Дж. Стратегия биохимической адаптации. Мир, 1977. -С.216-228

73. Хьюз Р. Гликопротеины.-М.: Мир.- 1985.

74. Чекман И.С., Гриневич А.И. Конъюгация ксенобиотиков //Фармакология и токсикология. 1988. - №1. - С.86-89.

75. Шараев П.Н., Иванов В.Г., Рябов В.И. Биохимические методы анализа показателей обмена биополимеров соединительной ткани. Ижевск, 1989.-15с.

76. Эмануэль Н.М. Ингибиторы радикальных процессов (антиоксиданты) и возможности продления жизни //Геронтология и гериатрия. -Киев, 1979. -С.118-127.

77. Banhegyi G., Braun L., Csala М., Puskas F., Mandl J. Ascorbate metabolism and its regulation in animals // Free Radic. Biol. Med. 1997. - Vol.23. - №5. -P.793-803.

78. Bean A., Almarza A., Athanasiou K. Effects of Ascorbic Acid Concentration on the Tissue Engineering of the Temporomandibular Joint Disc // Journal of Engineering in Medicine.-2006.-Vol.220.-N.3.-P.439-447.

79. Bird T.A., Schvartz N.B., Peterkofsky B. Mechanism for the decreased biosynthesis of cartilage proteoglycans in the scorbutic guinea pig // J. Biol. Chem. -1986. Vol.261. - №24. - P. 11166-11172.

80. Bird T.A., Spanheimer R.G., Peterkofsky B. Coordinate regulation of collagen and proteoglycan synthesis in costal cartilage of scorbutic and acutely fasted, vitamin C-suplemented guinea pigs. // Arch. Biochem. Biophis. 1986. - № 246 (1).-P.42-51.

81. Boyle J., Luan B., Cruz T.F., Kandel R.A. Characterization of proteoglycan accumulation during formation of cartilagenous tissue in vitro // Osteoarthritis Cartilage. 1995. - Vol.3. - №2. -P.l 17-125.

82. Bray B.J., Rosengren R.J. Retinol potentiates acetomiphen-induced hepatotoxity in the mouse: mechanistic studies // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2001. -Vol.173.-№3.- P.129-136.

83. Burlakova E.B. Irradiation effect on free radical mechanism of cell proliferation regulation // Simp. Papers I Intern. Biophys. Congr.-Pushchino, 1973. -P.55-62.

84. Campo G., Avenoso A., Campo S., Ferlazzo A. Efficacy of treatment with glycosaminoglycans on experimental collagen-induced arthritis in rats // Artritis Research & Therapy. 2003. - Vol.5, №3. - P. 122-132.

85. Cappelletti R., Del Rosso M., Chiarugi V.P. A new electrophoretic method for the complete separation of all known animal glycosaminoglycans in a monodimentional run//Anal. Biochem.-1979.-Vol.99. P.311-315.

86. Cassaro C.M.F., Dietrich C.P. Distribution of sulfated mucopolysaccharides in invertebrates Hi. Biol. Chem. 1977. - Vol.252, №7. - P.2254-2261.

87. Comper W.D. Evolution and development of extracellular matrixes is correlated with the sulfation of matrix macromolecules to form higly variable macroion binding templates // Interplag. Genet. Phys. Processes. Dev. Biol. Form. -1994. -P.121-127.

88. Coon M.J., Persson A.V. Microsomal cytochrome P-450: A central catalyst in detoxication reactions //Enzymatic basis of detoxication /Ed. Jakobt V.B. N.Y., I980.-Vol.l. - P. 117-134.

89. Coughtrie M.W., Sharp S. Glucuronidation of imipramine in rabbit and human liver microsomes: assay conditions and interaction with other tertiary amine drugs//Biochem.Pharmacol.- 1991.-Vol.42. -№7.-P.1497-l501.

90. Dietrich C.P., Sampaio L.O., Toledo O.M.S. Characteristic distribution of sulfated mucopolysaccharides in different tissuse and their mitochondria // Biochem. and Biophys. Res. Commun 1977. - Vol.75.- №2.- P.329-336.

91. Dingell J.V., Sossi N. Studies on the glucuronidation of 7-hydroxychlorpromazine in vitro //Drug. Metab. Dispos. 1977. - Vol.5. - №4. -P.397-404.

92. Diculescu I., Onicescu D, The histochemistry o epimerases. Uridin diphosphatase glucuronic acid epimerases // Acta Histochem. 1966. - Vol.25. -№5. - P.242-250.

93. Edward M, Oliver RF. Changes in the synthesis, distribution and sulphation of glycosaminoglycans of cultured human skin fibroblasts upon ascorbate feeding. // Cell Sci.- 1983.- N. 11.- P.245-254.

94. Edward M. Ascorbate induced changes in glycosaminoglycan synthesis and distribution of normal and SV40-transformed fibroblasts. // J. Cell Sci. -1986.-N.9.-P.217-229.

95. Fink R.M, Lengfelder E. Hyaluronic acid degradation by ascorbic acid and influence of iron. // Free Radic. Res. Commun. 1987. - Vol.3. - №1-5. - P.85-92.

96. Fisher E., McLennan S.V., Tada H., Heffernan S., Yue D.K., Turtle J.R. Interaction of ascorbic acid and glucose on production of collagen and proteoglycan by fibroblasts // Diabetes. 1991. - Vol.40. - №3. - P.371-376.

97. Fishman W.H., Smith M., Thompson D.B. et. al. Investigation of glucuronic acid metabolism in human subjects // J. Clin. Invest. 1951. -Vol.30. - P.685-696.

98. Freeman C., Hopwood J.J. Human liver glucuronate 2-sulfatase. Purificatin, characterization catalytic properties // Biochem. J. 1989. - Vol.259. - №1. - P. 209216.

99. Furucava K. Glycosaminoglycans in cell nuclei and their biological functions // Saibo Kogaru. 1990. - Vol.9. - №3. - P.207-214.

100. Garg H.G., Siebert E.P., Swann D.A. Isolation and some structure analyses of a copolymeric chondroitin sulfate-dermatan sulfate proteoglycan from post-burn, human hypertrophic scar//Carbohydr. Res.-1990. Vol.197. - P. 159-169.

101. González M.J. Orthomolecular Oncology Review: Ascorbic Acid and Cancer 25 Years Later// Integrative Cancer Therapies.-2005.-Vol.4.-N.l .-P.32-44.

102. Glaser L., Brown D.H. Purification and properties of d-glucose-6-phosphate dehydrogenase // Proc.Natl. Acad. Sci. US, 1955. -N.41. -P.253.

103. Glaser J.H., Conrad H.E. Chick emryo liver beta-glucuronidase. Comparison of activity on natural artificial substrates // J. Biol. Chem. 1979. - Vol.254. -N. 14. -P. 6588-6597.

104. Glowaski A., Kozma E.M., Olczyk K., Kucharz E.J. Glycosaminoglycans -structure and function//Posteiy Biochem 1995. - Vol. 41. - №23. - P. 139-148.

105. Glucuronic Acid. (Ed. Dutton G.). New York: Acad Press. - 1966.

106. Gomes P.B., Dietrich C.P. Distribution of heparin and other sulfated glycosaminoglycans in vertebrates //Comp. Biochem. and Physiol.- 1982. Vol.73 N.4. - P.857-863.

107. Goode D., Lewis M.E., Crabbe M.J. Accumulation of xylitol in the mammalian lens is related to glucuronate metabolism. //FEBS Lett. 1996. -Vol.395.-N.2-3.-P.174-178.

108. Hagner-Mcwhirter A., Lindahl U., Li J. Biosynthesis of heparin/heparan sulfate: mechanism of epimerization of glucuronyl C5. //Biochem. J. 2000. -Vol.347.-N.1.-P.69-75.

109. Harper G.S., O'Shannessy D.I., Gahl W.A. High-performance ion-exchange chromatographic separation of proteoglycans //Anal. Biochem.- 1986. Vol. 159.-P. 150-156.

110. Hata R.I., Nagai Y. A low-sulfated chondroitin sulfate in rat blood: an acidic glycosaminoglycan wih a hight metabolic rate // Biochim. Biophys. Acta. 1978. -Vol.543. -N.2.-P.149-155.

111. Hata R., Senoo H. L-ascorbic acid 2-phosphate stimulates collagen accumulation, cell proliferation, and formation of a three-dimensional tissuelike substance by skin fibroblast // J. Cell. Physiol. 1989. - Vol.138. - N.l. - P.8-16.

112. Hata R, Sunada H, Arai K, Sato T, Ninomiya Y, Nagai Y, Senoo H. Regulation of collagen metabolism and cell growth by epidermal growth factor and ascorbate in cultured human skin fibroblasts // Eur J. Biochem.- 1988.-N.15.- P.261-267.

113. Haulthouse A.L., Becker K., Beck M. Proteoglycan synthesis by cultured human chondrocytes // Microsc. Res. Tech. 1994. - Vol.28. - N.6. - P.520-526.

114. Herbert V. Nutrition Cultism.-Philadelphia: G.F.Stickley & Co, 1980.-234p.

115. Herbert V. Vitamins and "Health" Foods.- G.F.Stickley & Co: Philadelphia, 1980.-P.94-96.

116. Hochman Y., Zakim D. Stadies of the catalitic mechanism of microsomal UDP-glucuroniltransferase. Alpha-glucuronidase activity and its stimulation by phospholipids //J.Biol.Chem. 1984. - Vol.259. - N.9. - P.5521 -5525.

117. Hook M., Kjellen L., Jahansson S., Robinson J. Cell-surface glycosaminoglycans. // Annual Rev. Biochem. 1984. -N.6. - P.847-869.

118. Horecker BL. The biochemistry of sugars // int. Z. Vitam. Ernahrungsforsch. Beih.-1976.-Vol.15.-P.l-21.

119. Hunter G.K., Heersche J.N.M., Aubin J.E. Isolation of three species of proteoglycan synthesized by cloned bone cells //Biochemistry.- 1983. Vol.22.- N.4. -P.831-837.

120. Jeffrey D Esko. Influence of core protein sequence on glycosaminoglycan assembly /Jeffrey D Esko, L. Zhang // Current Opinion in Structural Biology. 1996. -Vol.5.-P. 663-670.

121. Jorge A., Robertson W., Robertson K. Ascorbic acid and the synthesis of chondroitin sulfate // Biochimica and biophysica acta. 1998 - Vol.124. - N.l. -P.86-94.

122. Jouis V., Bocquet J., Pujol J.P. Effect of ascorbic acid on secreted proteoglycan from rabbit articular chondrocytes // FEBS Lett. 1985. - Vol.186. -N.2. - P.233-240.

123. Kasper Ch., Henton D. Glucuronidation. In: Enzymatic Basis of Detoxication/Ed. W. Jakoby N.W., London; Toronto; Sydney; San Francisco, 1980.-Vol.2.- P.3-36.

124. Kao J., Huey G., Kao R., Stern R. Ascorbic acid stimulates production of glycosaminoglycans in cultured fibroblasts // Exp. Mol. Pathol. 1990. - Vol.53. -N.l. -P.l-10.

125. Kazuyuki S., Hiroshi K. Recent advances in the study of the biosynthesis and functions of sulfated glycosaminoglycans // Current Opinion in Structural Biology. 2000. - Vol.10. - N.5. - P.518-527.

126. Kim G, Okumura M, Bosnakovski D, Ishiguro T, Park CH, Kadosawa T, Fujinaga T. Effects of ascorbic acid on proliferation and biological properties of bovine chondrocytes in alginate beads // Jpn. J. Vet. Res.- 2003. Vol.51. - N.2. -P.83-94.

127. Koide N., Tsuji T.Proteoglycan // Kan. Tan. Sui. 1995. - Vol. 31. - N.3. -P.361-369.

128. Kolb E. Recent knowledge concerning the biochemistry and significance of ascorbic acid Z Gesamte // Inn Med. 1984.-N. 1. - P.21 -27.

129. Nambisan B, Kurup PA. Ascorbic acid and glycosarninoglycan and lipid metabolism in guinea pigs fed normal and atherogenic diets Atherosclerosis. // Inn Med. 1975.-N. 11-12.-P.447-461.

130. Lam R. The nature of cytoplasmic vacuoles in chondroma cells. A correlative enzyme and electron microscopic histochemical study // Pathol.Res. Pract. 1990. -Vol.186.-N.5.-P.642-650.

131. Lau, Eduardo C., lean V. Chromatography on DEAE-cellulose microcolumns: a quantitative method for the fraction of small quantities of GAG //Anal. Biochem.-1983.-Vol.130.- N.l. P.237-245.

132. Laurent T.C. Biochemistry of hyaluronan // Acta Otolaryngol. Suppl. -1987.-Vol.442.-P.7-24.

133. Lindahl U ., Kjellen L. // Biology of proteoglican. Eds Wight T.N., Mecham R.P. Orlando: Acad. Press. 1987. P.59.

134. Levene C. I., Bates C. J. Growth and Macromolecular Synthesis in the 3T6 Mouse Fibroblast. General Description and the Role of Ascorbic Acid // Journal of Cell Science.-1970.-Vol.7.-P.671-682.

135. Linster C.L., Van Schaftingen E. Rapid stimulation of free glucuronate formation by non-glucuronidable xenobiotics in isolated rat hepatocytes //J. Biol. Chem. 2003. - Vol.278. - N.38. - P.36328-36333.

136. Lyon M., Nieduszynski I.A. A study of equilibrium binding of link protein to hyaluronate //Biochem. J. 1983. - Vol.213.- P.445-450.

137. Markovic O., Huttl S. Contribution to a methodical approach to determination of protein and glycoprotein components in synovial fluid // Cas Lek Cesk. 1964.- N.5.- P.522-525.

138. Margolis R.K., Crockett C.P., Kiang W.L. Glycosaminoglycans and glycoproteins associated with rat brain nuclei //Biochim. et Biophys. Acta. 1976. -Vol.451.-N.2.-P.465-469.

139. Marsh C. A. Metabolism of glucuronolactone in mammalian system. 3. Further studies of D-glucuronolactone dehydrogenase of rat liver /7 Biochem. J. -1963.-Vol.89.-P.108-114.

140. Marsh C. A. Metabolism of glucuronolactone in mammalian system. Identification of D-glucaric acid as a normal constituent of urine //Biochem. J. -1963.-Vol.83.-P.77-86.

141. Marsh C. A. Metabolism of glucuronolactone into D-glucaric acid by tissue preparation // Biochem. J. 1963. - Vol.87. - P.82-90.

142. Matyas G.R., Morre D.J. Coupling of uridine-5-diphosphate (UDP) formation and nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) reduction for cytochemical localization of glycosyltransferases // J. Histochem. Cytochem. 1983. - Vol.31. -N.10.-P.1175-1182.

143. McAuliffe A.V. High glucose inhibits effect of ascorbic acid on 35S. sulfate incorporation in mesangial cell and matrix proteoglycan / A.V. McAuliffe, E.J. Fisher, S.V. McLennan // Diabetes Ras. Clin. Pract. 1997. - Vol.37. - N.2. -P.101-108.

144. McAuliffe A.V., Brooks B.A., Fisher E.J., Molyneaux L.M., Yue D.K. Administration of Ascorbic Acid and an Aldose Reductase Inhibitor (Tolrestat) in

145. Diabetes: Effect on Urinary Albumin Excretion I I Nephron.-1998.-Vol.80.-P.277-284.

146. Meech R., Mackenzie P.I. Structure and function of uridine diphosphate glucuronosyltransferase // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 1997. - Vol.24. - N.12. -P.907-915.

147. Merimee T.J., Misbin R.L, Gold L. Elevated L-xylulose concentrations in serum: a difference between type I and type II diabetes // Metabolism. 1984. -Vol33. -N.1.-P.82-84.

148. Mitolo M. The glucuronic acid-xylulose cycle as metabolic alternative of glucides // Progr. Vtl. 1961. - Vol 15. -N.17. - P.151-158.

149. Mochizuki H., Oda H., Yokogoshi H. Dietary taurine alters ascorbic acid matabolism in rats fed diets containing Polychlorinated Biphenyls // Journal of Nutrition. 2000. - Vol.130. - P.873-876.

150. Niedermeier W., Dobson C., Laney R.P. Studies on the ascorbic acid-induced depolymerization of haluronic acid // Biochimica and biophysica acta. 1967. -Vol.141.-N.9.-P.366-373.

151. Parke D.V., Williams R.T. The metabolism of benzene, a) The formation of phenylglucuronide and phenylsulphuric acid from C14 benzene, b) The metabolism of C14 phenol // Biochem. J.-1953.- Vol.55.- P.337.

152. Parquet M., Pessah M., Sacquet E., Salvat C., Raizman A. Effective glucuronidation of 6 alpha-hydroxylated bile acids by human hepatic and renal microsomes // Eur. J. Biochem. 1988. - Vol.171. -N. 1-2. - P.329-334.

153. Pacifi M. Independent secretion of proteoglycans and collagens in chick chondrocyte cultures during acute ascorbic acid treatment. // Biochem. J. 1990. -Vol.15. -N.272(1).- P.193-199.

154. Pauling L: Vitamin C and the Common Cold. San Francisco: WH Freeman, 1976.- 220p.

155. Pauling L. Vitamin C and longevity // Agressologe.-1983.-V.24.-N.7.-P.317-319.

156. Pauling L, Cameron E. Supplemental ascorbate in the supportive treatment of cancer: réévaluation of prolongation of survival times in terminal human cancer // Proceeding of the National Academy of Sciences.- 1978.- Vol. 75.- P.4538-4542.

157. Pedersen L.C., DardenT.A., Negishi M. Crystal structure of beta 1,3-glucuronyltransferasel in complex with active donor substrate UDP-GlcUA // J. Biol. Chem. 2002. - Vol.277. - N.24. - P.21869-21873.

158. Pedersen L.C., Tsuchida K., Kitagawa H., Sugahara K., Darden T.A., Negishi M. Heparan/chondroitin sulfate biosyntesis. Structure and mechanism of human glucuronyltransferase // J. Biol. Chem. 2000. — Vol.275 - P.34580-34585.

159. Price V.F., Schulte J.M., Jollow. Mechanism of fasting-induced supression of acetamiphen glucuronidation in the rat //Adv. Exp. Med. Biol. 1986. - Vol.197. -P.697-706.

160. Radominska-Pandya A., Czernik P.J., Little J.M., Battaglia E., Mackenzie P.I. Structure Mid function of UDP- glucuronosyltransferases // Drug Metab. Rev. -1999. Vol.31. - N.4. - P.817-899.

161. Robinson J.A., Robinson H.C. Initiation of chondroiti sulfate syntesis by beta-D-galactosides. Substrates for galactosyltransferase II. // Biochem. J. 1985. -Vol. 227. - N.3. - P.805-814.

162. Rohrmann K., Niemann R., Budecke E. Two N-acetylgalactosaminyltransferase are involved in the biosynthesis of chondroitin sulfate //Eur. J. Biochem. 1985. - Vol.148. -N.3. - Vol.463-469.

163. Rondle C.J.M., Morgan W.T.The determination of glucosamine and galactosamine. // Biochem J. 1955.- N.12.- P.586-589.

164. Roseman S., Ludowieg J, Moses F., Dorfman A. The biosynthesis of the glucuronic acid moiety of hyaluronic acid // Arch. Biochem. Biophys. 1953.- N.2.-P.472-473.

165. Rosenberg L., Hellmann W., Kleinschmidt A.K. Electron microscopic studies of proteoglycan aggregates from bovine articular cartilages // J. Biol. Chem.-1975.-Vol.250.- N.5.- P. 1877-1883.

166. Schwartz E.R., Adamy L. Effect of ascorbic acid on arylsulfatase activities and sulfated proteoglycan metabolism in chondrocyte cultures // J. Clin. Invest.-1977.-Vol.60.-N. 1.- P.96-106.

167. Silbert J.E. Structure and metabolism of proteoglycans and glycosaminoglycans // J. Invest. Dermatol. 1982. - Vol.79. - N. 1. - P.31 -37.

168. Silbert J.E. Sugumaran G .Intracellular membranes in synthesis, transport, and metabolism of proteoglycans Biochim. // Biophys. Acta. 1995. - Vol. 1241. -N.3. -P.371-384.

169. Spindler K.P., Shapiro D.B., Gross S.B., Brighton C.T., Clark C.C. The effect of ascorbic acid on the metabolism of rat calvarial bone cells in vitro //J. Orthop. Res. 1989. - Vol. 7. - N.5. - P.696-701.

170. Smythies J.R. Persons E. Guide to Antioxydants.- Rutgers Univ.Press:New Brunswick.,1998.-P. 146.

171. Stein G.S., Roberts R.M., Davis J.L. et al. Are glycoproteins and glycosaminoglycans components of the eucaryotic genome? // Nature.- 1975.-Vol.258. N.5536. - P.639-641.

172. Srinivasan S., Govindarajulu A. Impact of oestradiol and progesterone on the glycosaminoglycans and their depolymerizing enzymes of the rat mammary gland // Acta Physiologica Scandinavica.-2000.-Vol.l68.-N.3.-P385.

173. Tool B.D., Biswas Ch., Gross J. Hyaluronat and invasiness of the rabbit V2 carcinoma // Proc. Nat. Acad. Sci. USA Biol. Sci. 1979. - Vol.76.- N.12.-P.6299-6303.

174. Ueno N., Chakrabarti B., Garg H.G. Hyaluronic acid of human skin and post-burn scar: heterogeneity in primary structure and molecular weight // Biochem.Int. -1992. Vol.26.- N.5.- P.787-796.

175. Valla S., Li J., Barbeyron T., Lindahl U. Hexuronil C5-epimerases in alginate and glysaminoglycan biosynthesis // Biochimie. 2001. - Vol.83. - N.8. - P.819-830.

176. Vogel K.G. Glycosaminoglycans and proteoglycans. Review // Extracell Matrix. Assem. Struct. Edited by Yurchenco P.D Academic San Diego, Calif., 1994.- 382p.

177. Vogel K.G., Peterson D.W. Extracellular surface and intracellular proteoglycans produced by human embryo lung fibroblasts in culture (IMR-90) // J.Biol.Chem. -1981. Vol.256.- N.24.- P. 13235-13242.

178. Waddington R.J., Roberts H.C., Sugars R.V. Differentias roles for small leucine-rich proteoglycans in bone formations // Europian Cells and Materials. -2003.- Vol.6. -P.12-21.

179. Wislocki P.G., Miwa G.T., Lu A.Y. Reactions catalyzed by the cytochrome P-450 system // Enzymatic basis of detoxication /Ed. Jakoby W.B. N.Y.,1980. -Vol.1. -P.135-182.

180. White B.N., Shetlar M.R., Shurley H.M., Shilling J.A. Incorporation of (1-14C) Glucosamine into mucopolysaccarides of rat connective tissue. // Biochim Biophys Acta.- 1965.- N.3.- P.97-105.

181. Wong S.F, Halliwell B, Richmond R, Skowroneck WR. The role of superoxide and hydroxyl radicals in the degradation of hyaluronic acid induced by metal ions and by ascorbic acid. // J. Inorg. Biochem.-1981.- N.4. P. 127-134.

182. Zhou L., Higginbotham E.J., Yue B.Y. Effects of ascorbic acid on levels of fibronectin, laminin and collagen type 1 in bovine trabecular meshwork in organ culture // Taylor & Francis.-1998.-Vol. 17.-N.2.-P.211-217.