Гликозаминогликаны в биохимических механизмах старения организма тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, доктор биологических наук Зимницкий, Александр Николаевич

• Зимницкий, Александр Николаевич
• доктор биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации доктор биологических наук Зимницкий, Александр Николаевич

Список принятых сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Структура и функции гликозаминогликанов.

1.2. Взаимосвязь обмена гликозаминогликанов с процессами детоксикации ксенобиотиков.

1.3. Возрастные изменения биохимических процессов в печени.

1.4. Возрастные изменения фракционного состава белков сыворотки крови.

1.5. Изменения белкового спектра при беременности.

1.6. Теории старения и возрастные изменения биохимических показателей кожи.

1.6.1. Генетическая теория старения.

1.6.2. Свободнорадикальная теория старения.

1.6.3. Элевационная теория старения.

1.7. К вопросу о локализации биосинтеза полисахаридов и его связи с генетическим аппаратом клетки.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Гликозаминогликаны в биохимических механизмах старения организма»

Актуальность работы. Биохимические механизмы адаптации организма к патологическим состояниям, неблагоприятным воздействиям со стороны окружающей среды, возрастным и физиологическим изменениям, например, таким как состояние беременности, в течение последних десятилетий постоянно привлекают внимание исследователей с целью создания средств, повышающих адаптационные возможности организма. В этом отношении недостаточно изучена роль гетерополисахаридов - гликозаминогликанов (ГАГ) (прежнее наименование "кислые мукополисахариды"), содержащих в своем составе гексозами-ны, гексозы и гексуроновые кислоты (Кочетков Н.К., 1967), подразделяющихся в основном на гиалуроновую кислоту (ГК), хондроитинсульфаты (ХС) и гепа-рансульфаты (ГС).

ГАГ содержатся в межклеточном матриксе, клеточных мембранах (Hunter G.K., Heersche J.N.M., Aubin J.E., 1983; Vogel K.G., Dolde J.,1979; Vogel K.G., Peterson D.W., 1981), а также в ядрах клеток в виде ассоциированных с хроматином протеогликанов (Onarheim H., Missavage А.Е., Gunther R.A. et al., 1991; Stein G.S., Roberts R.M., Davis J.L. et al.,1975). В настоящее время известно (Серов В.В., Шехтер А.Б., 1981; Фукс Б.Б., Фукс Б.И.,1968), что ГАГ в составе протеогликанов соединительной ткани обеспечивают ее механические свойства, участвуют в воспалительных реакциях (Лабори Г., 1970) и репаративных процессах (Слуцкий Л.И., 1969), необходимы для нормального кроветворения (Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Агафонов В.И. и др., 1995; Северин М.В., Юшков Б.Г., Ястребов А.П.,1993; Ястребов А.П., Юшков Б.Г., Большаков В.Н.,1988) и полноценного иммунного ответа (Соловьев Г.М., Петрова И.В., Ковалев C.B., 1987), выполняют за счет влияния на проницаемость веществ в клетки трофическую и антитоксическую функции (Лабори Г., 1970). Следует подчеркнуть, что традиционные представления о механизмах антитоксических эффектов ГАГ основываются на их полианионных возможностях связывать гидрофильные токсические вещества основного характера в межклеточном матриксе, блокируя тем самым их поступление в клетки (Лабори Г., 1970; Переверзев А.Е.,1986).

Этот механизм не представляется исчерпывающим в связи с общностью метаболических путей обмена ГАГ, пентозофосфатного цикла, детоксицирую-^ щих реакций глюкуронидной конъюгации (Парк Д.В.,1973) и монооксигеназной системы (Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов Л.А.,1986).

Не вызывает сомнений, что именно механизмы устойчивости к ксенобиотикам определяют возможность самого выживания организмов в окружающей среде, которая становится все более насыщенной невероятным количеством разнообразных химических соединений. То есть, проблема адаптации организма к неблагоприятным ситуациям во многом может быть сведена к общебиологической способности клетки защищать себя от токсического воздействия экзогенных и эндогенных токсикантов, используя в качестве щита гетерополисаха

А ( ридные компоненты межклеточного матрикса (Зимницкий А.Н., Башкатов С.А.,

2004).

Однако участие в процессах детоксикации, как уже отмечалось, только часть функций ГАГ в рамках глобального явления адаптации. Источники литературы свидетельствуют, что в организме человека с возрастом отмечаются морфологические и физиологические изменения, являющиеся следствием биохимических сдвигов. Данные литературы констатируют наличие возрастных изменений концентраций низко- и высокомолекулярных эндогенных соединений в органах и тканях организма человека и животных. Однако наблюдения авторов фрагментарны и часто противоречат друг другу. Так, например, не существует однозначного мнения о биохимических механизмах старения и их регуляции, о направленности обусловленных возрастом концентрационных сдвигов содержания альбуминов и глобулинов в крови, фракций ГАГ и ДНК в коже.

Не вызывает сомнений, что качество обмена биополимеров в организме во многом зависит от токсической нагрузки на него экзо- и эндогенных соединений, метаболизирующихся в реакциях микросомального окисления и различных типов конъюгации и, тем самым, отвлекающих на себя метаболические потоки субстратов и макроэргических соединений, а также загружающих бело-ксинтетический и каталитический аппараты клетки. Очевидно, что такие физиологические состояния как старение и беременность в силу различных причин сопровождаются интоксикацией. В указанной связи возникает закономерное предположение о наличии определенного сходства в направленности биохимических сдвигов при этих состояниях. В пользу этой гипотезы свидетельствуют, например, сведения различных авторов об уменьшении концентрации альбумина в сыворотке крови, как при старении (Маршалл В.Дж., 2002; Пименов Ю.С., 1993; Кипшидзе H.H., Ткешелашвили J1.K., Салуквадзе Н.С., 1963; Коркушко О.В., 1963; Нагорный JI.B., Никитин В.И., Буланкин И.И., 1963), так и при беременности (Кухта В.К., 1986).

В конце восьмидесятых годов прошлого века в руководимой нами лаборатории биотехнологии Отдела биохимии и цитохимии Уфимского научного центра РАН был разработан лекарственный препарат «Плазан», представляющий собой высокомолекулярную фракцию биополимеров из плаценты человека, основным компонентом которой являлись гетерополисахариды из класса ГАГ. В экспериментах на животных была продемонстрирована способность плазана стимулировать синтез РНК, подавлять рост патогенных микроорганизмов, значительно ускорять процессы репаративной регенерации. После успешного проведенных доклинических исследований безопасности препарата и получения разрешения на клиническую апробацию в начале девяностых годов была показана высокая терапевтическая эффективность плазана при лечении хирургических и гинекологических заболеваний.

В последующие годы плазан успешно использовался в качестве биологически активной добавки в изделиях лечебно-профилактической косметики, существенно улучшая у пациентов состояние кожных покровов и корригируя внешние проявления старения кожи. Именно в этот период середины девяностых годов стала очевидной взаимосвязь между качеством обмена ГАГ и функциональным состоянием кожи у человека, послужившая толчком к выполнению настоящих экспериментальных исследований, направленных на выяснение биохимических механизмов старения организма, сопряженных с обменом ГАГ. На наш взгляд, выполненная работа является примером того, как выяснение биохимических механизмов, лежащих в основе фармакологической активности препаратов, позволяет получить новую информацию о сути общебиологических процессов. В нашем случае исследование фармакологической активности ГАГ проливает свет на ранее неизвестные стороны метаболизма биополимеров и патохимических механизмов старения организма в целом. В указанной связи сведения о терапевтической эффективности плазана в экспериментальных исследованиях на лабораторных животных и в клинике вынесены в заключительную часть работы, так как используются в качестве дополнительного подтверждения основной гипотезы исследования.

В связи со сказанным, основной гипотезой нашей работы являлось предположении о том, что патохимические механизмы старения сопряжены с изменением обмена таких биополимеров как гликозаминогликаны, белки и нуклеиновые кислоты. В качестве объекта исследования мы, помимо лабораторных животных, намеренно выбрали женскую популяцию по двум причинам: во-первых, на наш взгляд, характеристика «практически здоровые лица» в старческом возрасте больше соответствует женщинам и, во-вторых, если говорить о прикладном аспекте наших исследований, то есть о прикладной геронтологии и дерматокосметологии, то женская популяция в силу исторически сложившейся структуры социальных отношений, системы культурных ценностей и норм поведения больше заинтересована в создании средств, корригирующих патологические изменения при старении.

Целью настоящей работы является теоретическое и экспериментальное обоснование значимой роли гликозаминогликанов и других биополимеров в биохимических процессах возрастных изменений, уточнение патохимических механизмов старения и разработка подходов к их направленной коррекции.

Для достижения поставленной цели представлялось необходимым решить следующие задачи:

1. Изучить фракционный состав гликозаминогликанов в органах и тканях неин-бредных белых крыс.

2. Оценить интенсивность метаболизма в органах и тканях различных фракций ГАГ по интенсивности включения радиоактивного сульфата (35S042') и 14С-глюкозы, меченой по Сь у лабораторных животных различных возрастных групп.

3. Квантово-химическими и молекулярно-генетическими (дот-гибридизация) методами оценить возможность взаимодействия карбоксильной и гидрокси-метильной групп моно- и полисахаридов с генетическим аппаратом клетки.

4. Изучить фракционный состав ГАГ и белков в сыворотке крови у женщин различных возрастных групп.

5. Изучить фракционный состав ГАГ, уровни общего белка и ДНК в коже у женщин различных возрастных групп.

6. Исследовать возрастную динамику состояния печени по показателям «печеночных проб» у женщин.

7. Сопоставить возрастные изменения фракционного состава белков сыворотки крови у женщин с аналогичными показателями в динамике беременности.

8. Оценить возможность стимуляции ГАГ транскрипционных процессов (синтеза РНК) и репаративной регенерации в целом.

9. Методами корреляционного, регрессионного, дисперсионного, факторного и кластерного анализов изучить взаимосвязи и взаимовлияния изучаемых показателей, описать их математически с помощью уравнений линейной регрессии, а также выявить латентные переменные и их конструкты.

10. Оценить принципиальную возможность патогенетически обоснованной коррекции негативных возрастных биохимических сдвигов.

11. Разработать концепцию дестабилизации системы гликозаминогликанов как одного из общих механизмов старения.

12. Обосновать возможность прогнозирования интенсивности процессов старения по показателям гликозаминогликанового и белкового обменов.

13. Показать возможность практического использования результатов экспериментальных исследований биохимических механизмов фармакологической активности ГАГ в хирургии, гинекологии и дерматокосметологии.

Научная новизна. Проведенные исследования позволили существенно расширить представления о биохимических механизмах, лежащих в основе старения, сопоставить их с побочными эффектами беременности и выявить взаимосвязь с генетическим аппаратом клетки. При этом установлены зависимости между возрастом и показателями содержания в органах и тканях глико-заминогликанов, белков, а также их фракций и нуклеиновых кислот. Показано сходство сдвигов исследованных биохимических параметров при старении и беременности. Разработаны методические подходы к формированию оптимальных концентраций гиалуроновой кислоты в органах и тканях для профилактического применения с целью повышения резистентности организма к возрастным изменениям биохимических процессов. Предложена концепция дестабилизации системы гликозаминогликанов как одного из общих механизмов старения, заключающегося в том, что с возрастом нарушается генетически детерминированный обмен биополимеров межклеточного матрикса, приводящий к обеднению гликозаминогликанами органов, покровной ткани и повышением вследствие этого их концентрации в сыворотке крови. В экспериментах по изучению биохимических механизмов фармакологических эффектов гликозаминогликанов (и в частности, препарата «Плазан») установлено, что в их реализации существенную роль играет стимуляция транскрипционной активности клеточных ядер, обеспечивающая интенсификацию репаративной регенерации тканей и антимикробной активности иммунокомпетентных клеток.

Практическая значимость выполненного исследования заключается в том, что показана принципиальная возможность прогнозирования интенсивности процессов старения по показателям гликозаминогликанового и белкового обменов путем определения фракционного состава гликозаминогликанов, белков в сыворотке крови с последующей подстановкой результатов в соответствующие уравнения линейной регрессии. Сопоставление данных биохимических исследований механизмов метаболизма гликозаминогликанов и результатов клинических испытаний препарата «Плазан», содержащего плацентарные ГАГ, при хирургических и гинекологических заболеваниях позволяет рекомендовать проведение дальнейших исследований с целью расширения показаний к применению плацентарных ГАГ и, в перспективе, широкого внедрения препаратов на их основе в практическое здравоохранение и дерматокосметологию.

На защиту выносятся следующие научные положения:

1. В патогенезе старения существенное значение имеет снижение генетически детерминированного синтеза организмом несульфатированных и сульфати-рованных гликозаминогликанов.

2. Существуют возрастные различия во фракционном составе гликозаминогликанов и белков в органах и тканях у подопытных животных, а также в сыворотке крови и коже у женщин.

3. Существуют возрастные различия показателей состояния печени у женщин.

4. Существуют возрастные изменения фракционного состава белков сыворотки крови у женщин, сопоставимые с аналогичными показателями в динамике беременности.

5. В норме в организме существуют взаимосвязи и взаимовлияния показателей возраста, беременности и обмена биополимеров.

6. Существует принципиальная возможность коррекции негативных возрастных биохимических сдвигов путем стабилизации обмена биополимеров межклеточного матрикса.

7. В биохмическом механизме фармакологической активности гликозаминогликанов существенную роль играет стимуляция транскрипционной активности ядер клеток, обеспечивающей интенсификацию репаративной регенерации тканей и антимикробной активности иммунокомпетентных клеток.

8. Дестабилизацию системы гликозаминогликанов правомерно рассматривать в качестве одного из общих механизмов старения организма.

9. Существует возможность прогнозирования интенсивности процессов старения по показателям гликозаминогликанового и белкового обменов.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на IV Международном конгрессе по косметологии и эстетической медицине «Kosmetik international»(MocKBa,2005), на II Всероссийском симпозиуме с международным участием «Клинические и фундаментальные, аспекты тканевой терапии» (Самара, 2004), на IV Международном конгрессе по эстетической медицине (Москва, 2004), на III Международном форуме по пластической хирургии и дерматокосметологии (Москва, 2004), на III Международном конгрессе по косметологии и эстетической медицине «Kosmetik international» (Москва, 2004), на Международной конференции «Профессиональная косметика и современные технологии в эстетической косметологии» (Санкт-Петербург, 2004), на Международном форуме по пластической хирургии и дерматокосметологии (Москва, 2003), на II Международном конгрессе по косметологии и эстетической медицине «Kosmetik international» (Москва, 2003), на IV конгрессе по пластической, реконструктивной и эстетической хирургии (Ярославль, 2003), на IV Коференции «Косметология будущего — косметология antu-age» (Санкт-Петербург, 2003), на X Юбилейной научно-практической конференции «Клиническая эффективность нелекарственных оздоровительных продуктов: пара-фармацевтики, нутрицевтики, космецевтики» (Москва, 2003), на VII Всероссийской конференции по проблеме термических травм (Челябинск, 1999), на IV Съезде травматологов и ортопедов России (Нижний Новгород, 1997), на Научной конференции «Люминесцентный анализ в медицине и его аппаратурное обеспечение» (Рига, 1988), на Международной конференции «Медицина и катастрофы» (Уфа, 1990), на Научно-практической конференции «Изучение, охрана и рациональное использование природных ресурсов (Уфа, 1989).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 54 научные работы.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на 334 страницах, содержит 125 таблиц, 79 рисунков и состоит из введения, обзора литературы, описания объектов, предметов и методов исследования, 14 глав результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 235 источников, из которых 132 отечественных и 103 иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Зимницкий, Александр Николаевич

ВЫВОДЫ

1. Применение методов аналитической биохимии, меченых атомов, молекулярной биологии и квантово-химических расчетов позволило аргументировать выдвижение гипотезы матричного синтеза гликозаминогликанов.

2. В патогенезе старения, по данным корреляционного и дисперсионного анализов, существенное значение имеют взаимозависимые снижения синтеза и концентрации в тканях не только несульфатированных, но и сульфатированных гликозаминогликанов.

3. Переменная «возраст», показатели содержания гликозаминогликанов и их фракций, а также анаболизма сульфатированных гликозаминогликанов, по данным факторного анализа, описываются одним математическим конструктом, доказывающим регуляцию именно возрастом биохимических процессов в организме.

4. Возраст, по данным кластерного анализа, в большей мере связан с биохимическими показателями печени и мозга и в меньшей степени с биохимическими показателями кожи, что свидетельствует о первичности патохимических сдвигов в печени, головном мозге и вторичности — в коже.

5. С возрастом изменяется фракционный состав гликозаминогликанов органов и тканей организма (головного мозга, печени, кожи и сыворотки крови). При этом наименьшие патохимические сдвиги отмечаются в головном мозге, что свидетельствует о его большей устойчивости к возрастной патологии.

6. Выявлена отчетливая зависимость между возрастной динамикой биохимических показателей обмена гликозаминогликанов, белков и показателями состояния печени. По данным регрессионного анализа, интегральная оценка состояния организма может быть получена расчетом следующих индексов: 1) [ГАГ кожи]/возраст; 2) [ГАГ сыв]*[НК кожи]; 3) [Белок кожи]*Тимоловая проба.

7. Возрастные изменения фракционного состава белков сыворотки крови у женщин сопоставимы с аналогичными показателями в динамике беременности. Значения коэффициента а 1/(3 у беременных соответствуют показателям старших возрастных групп, что позволяет предположить, по крайней мере, временную интенсификацию процессов старения в период беременности.

8. В норме в организме существуют взаимосвязи и взаимовлияния показателей возраста, беременности и обмена биополимеров. Показатель «срок беременности» в структуре корреляционных связей фактически ведет себя аналогично показателю «возраст» у небеременных женщин.

9. Существует принципиальная возможность коррекции негативных возрастных биохимических сдвигов путем стабилизации обмена биополимеров межклеточного матрикса.

10.Дестабилизацию системы гликозаминогликанов правомерно рассматривать в качестве одного из общих механизмов старения организма.

П.Существует возможность прогнозирования интенсивности процессов старения по показателям гликозаминогликанового и белкового обменов.

12.Можно считать доказанной гипотезу о сопряженности механизмов старения с состоянием гликозаминогликанового и белкового обмена.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Для диагностики соответствия паспортного возраста биологическому целесообразно определять показатели фракционного состава гликозаминогликанов и белков в сыворотке крови с последующей оценкой путем применения регрессионного анализа.

2. При разработке лекарственных препаратов из группы геронтопротекторов целесообразно проводить их скрининг по показателям воздействия на спектральный состав гликозаминогликанов и белков сыворотки крови с расчетом соответствующих возрастных коэффициентов.

3. С учетом полученных сведений о биохимических механизмах метаболизма гликозаминогликанов и результатов клинических исследований фармакологической активности препарата «Плазан», в целях повышения адаптационных возможностей организма представляется целесообразным изучить на соответствующих экспериментальных моделях фармакологическую активность УДФ-глюкуроновой кислоты.

4. Целесообразна подготовка соответствующей документации, способствующей широкому внедрению препарата «Плазан» в практическое здравоохранение. т

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Зимницкий, Александр Николаевич, 2005 год

1. Абрамов Ю.В., Володина Т.В., Маркина Л.Г., Ребров Л.Б. Гликозаминогликаны кожи при эмоциональном стрессе //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 1999. — Т. 127. - №2. - С. 134136.

2. Агапова E.H., Крутовская О.В., Михалев И.Д., Ткаченко A.M., Фаунова В.И., Денисова Т.П. Белково-липидный состав, свертывающая и антисвертывающая системы крови у долгожителей. Геронтология и гериатрия, 1972. Ежегодник. Долгожители. Киев,1973, с.213-215.

3. Александрова М.Д. Очерки психофизиологии старения. Ленинград: Изд. Ленинградского университета, 1965. — 112с.

4. Алехин Е.К., Богданова А.III., Плечев В.В., Фархутдинов P.P. Влияние лекарственных средств на процессы свободнорадикального окисления: Справочник.-Уфа: БГМУ, 2002.-288с.

5. Ангелова-Гатева П.,Стойнев Г., Иванова Е. Некоторые биохимические показатели кровяной плазмы долгожителей. Геронтология и гериатрия, 1972. Ежегодник. Долгожители. Киев,1973, с.203-205.

6. Асинова М.И., Белая И.И. Липидный обмен и социальная адаптация человека при старении //Клиническая геронтология. 2001. - №7. — С.18-22.

7. Ашмарин И.П., Стукалов П.В., Ещенко Н.Д. и др. Биохимия мозга.-СПб: Изд-во СПб ун-та, 1999.-328с.

8. Баклаш В., Йорханова А., Кветнянски Р. Катехоламины и их синтез в процессе старения //Геронтология и гериатрия. -Киев, 1976. с. 163- 166.

9. Башкатов С.А. Плацентарные гликозаминогликаны перспективные • средства метаболической терапии и лечебно-профилактическойкосметики //Актуальные вопросы пластической хирургии и дерматокосметологии.- М.: Майер Джей, 2003.- С.93.

10. Берштейн JIM. Эстрогены, старение и возрастная патология //Успехи -геронтологии. 1998. - №2. - С.90-97.

11. Богацкая JI.H. Особенности липидного обмена и его регуляция у долгожителей. Геронтология и гериатрия, 1972. Ежегодник. Долгожители. Киев, 1973, с. 196-203.

12. Богацкая Л.Н., Коркушко О.В., Киряков O.A. Особенности содержания липидов в крови лиц пожилого и старческого возраста с хронической ишемической болезнью сердца. Вопросы геронтологии. Киев — 1978 -с.65-74.

13. Богацкая Л.Н. Коркушко О.В., Киряков O.A. Состояние липидного обмена у больных хронической ишемической болезнью сердца различного возраста. Вопросы геронтологии. Киев — 1982 с.51-58.

14. Бурмистров С.О., Опарина Т.И., Прокопенко Г.Р., Арютюнян A.B. Показатели процесса деградации белков и антиокислительной системы при нормальной беременности.//Акушерство и гинекология. 2001 - №6. -С. 17-20.

15. Вержиковская Н.В., Валуева Г.В., Сабольч И. Возрастные особенности дейодирования тироксина и экстратиреоидного образования прямого и обратного трийодтиронина //Вопросы геронтологии.-Киев, 1978. — С.43-48.

16. Войтенко В.П. Значение наследственности и факторов среды в продолжительности жизни человека. Геронтология и гериатрия. — 1970. — Киев. С.390-400.fir.

17. Войтенко В.П., Полюхов A.M. Системные механизмы развития и старения. Л.: Наука, 1986. — 184с.

18. Введение в клиническую биохимию (основы патохимии). Под. Ред. Иванова И.И.- Ленинград: Медицина, 1969.— 493с.

19. Галь Э., Медьеши Г., Верецкеи Л. Электрофорез в разделении биологических макромолекул. — М.: Мир — 1982, 446с.

20. Гацко Г.Г., Гулько В.В. Гликогенная функция печени и мышц в зависимости от возраста. // Обмен и функции стареющего организма. — Минск, 1969, с. 38-44.

21. Гацко Г.Г, Жукова A.C., Чайка Л.Д. Жировая ткань при старении . — Минск: Наука и техника, 1985. — 184с.

22. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов Л.А. Общие механизмы токсического действия. — Л.: Медицина, 1986. — 280с.

23. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Агафонов В.И. и др. Принципы создания лекарственных препаратов стимуляторов кроветворения природного происхождения//Эксперим. и клин. фармакол.,1995.-Т.58.-№1.-С.З-7.

24. Гулько В.В. Взаимоотношение цинка и кадмия в печени и почках человека в зависимости от возраста //Обмен и функции стареющего организма. Минск, 1969, с. 11-15.

25. Гуськова P.A., Виленчик М.М., Кольтовер В.К., Роль свободных супероксидных радикалов в старении биологических объектов //Биофизика. 1980. - Том 25. - С. 102-105.

26. Дейл 3. Влияние 17-бета-эстрадиола на метаболизм коллагена I и III типов у лабораторных животных разного возраста // Вопросы геронтологии. Эндокринные механизмы старения и возрастной патологии, вып. X Киев 1988 - С. 27-34.

27. Дейл 3, Сохорова Л., Михль Дж., Фролькис В.В. Анализ возрастных изменений содержания и интенсивности синтеза белков плазматических мембран /Вопросы геронтологии, 1982. — С.3-13.1. Ъ».

28. Дубинская В.А., Виноградова Е.В. Кожа человека: влагообмен и старение //Клиническая геронтология. — 2000. №7-8. - С.22-26.

29. Елаев Н.Р., Бахтиярова К.З. Аномальная экскреция гликозаминогликанов больных сирингомиелией //Бюлл.эксперим.биол. и мед.-1992.-№9:-С.271-272.

30. Ещенко Н.Д. Энергетический обмен головного мозга //Нейрохимия /Под ред. И.П.Ашмарина и П.В.Стукалова.-М.:Изд-во Ин-та биомедицинской химии РАМН, 1996.-С.145-192.

31. Ермолаев О.Ю. Математическая статистика для психологов.-М.:Флинта,2002.-336с.

32. Жижина Г.П. Роль апоптоза в нормальном онтогенезе, патогенезе и старении //Клиническая геронтология. — 2002. Т.8. - №4. - С.3-9.

33. Кочетков Н.К. Методы химии углеводов.-М.:Мир,1967.-С.38-42.

34. Зайдиева ЯЗ. Гормональная терапия в перименопаузе. //Акушерство и гинекология 1995 - №3 - с.28-30.

35. Захариева С., Кирянов А., Златарев.О., Наврькова Ю. Базальный уровень пролактина плазмы крови у старых людей и больных гиперпролактинемией различных типов //Вопросы геронтологии.-Киев, 1980.-С.40-42.

36. Зеленин А. В. Геном растений //Вестник Российской Академии Наук.2003.-Т. 73.- № 9.-С.797-806 .

37. Зелезинская Г.А. Возрастная характеристика некоторых реакций аминокислотного обмена /Обмен и функции стареющего организма. — Минск, 1969, с.51-58.

38. Зимина Н.П. Рыкова В.И., Архипов И.А. //Успехи современной биологии.-1992.- Т.112.-Вып.4.-С.571.

39. Измайлов Д.М., Обухова JI.K. Мелатонин как геропротектор: эксперименты. //Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 1999. Том 127. - №2. - С.205-206.

40. Инструкция по применению: Аминотрансфераза АлАТ, Био-Ла-Тест, Pliva-Lachema, Брно, 2004.

41. Инструкция по применению: Аминотрансфераза АсАТ, Био-Ла-Тест,0)

42. Pliva-Lachema, Брно, 2004.

43. Инструкция по применению: Билирубин С, Био-Ла-Тест, Pliva-Lachema, Брно, 2004.

44. Инструкция по применению: Тимоловая проба, Био-Ла-Тест, Pliva-Lachema, Брно, 2004.

45. Киселев Л.Л. Геном человека и биология XXI века //Вестник Российской Академии Наук.-2000.- Т.70.- № 5.-С.412-424.

46. Кожура И.М. Содержание фракций белков и липопротеидов в сыворотке крови кроликов разного возраста при экспериментальном атеросклерозе // Механизмы старения. Киев: Государственное медицинское издательство УССР, 1963. -С.121-126.

47. Кольтовер В.К. Свободнорадикальная теория старения: современное состояние и перспективы //Успехи геронтологии. — 1998. -№2. — С.37-42.

48. Конопля Н.Ф., Лукша Г.М. Гормоны и старение. Цитоплазматическая рецепция стероидных гормонов Минск.: Наука и техника, 1991. — 173с.

49. Коркушко О.В. Возрастная характеристика белкового спектра сыворотки крови у практически здоровых людей пожилого и старческого возраста, в сборнике Механизмы старения — Киев: Государственное медицинское издательство УССР, 1963 С.84-95.1. Гф

50. Королевская Л.И., Серова Л.Д., Лукьянчиков B.C., Чеботарева Е.В, Климакс и постменопаузный остеопороз. //Клиническая геронтология — 2003 Т.9 - №9 — С.55-61.

51. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии.-М.: Высш. шк.,1980.-272с.

52. Кустаров В.Н., Черниченко И.И. Перименопауза и ее осложнения.//Клиническая геронтология — 2003. Т.9. - №1. - С.45-49.

53. Курашвили Р.Б., Мегрелишвили Г.Н., Думбадзе Э.Г Зарандия Л.Т.,

54. Шатиришвили Э.Г. Некоторые показатели липидного обмена и системысвертывания крови у долгожителей. Геронтология и гериатрия, 1972. Ежегодник. Долгожители. — Киев,1973, с.205-208.

55. Кухта В.К., Олецкий Э.И., Стожаров А.Н. Белки плазмы крови: Патохимия и клиническое значение. Справочник. — Минск: Беларусь. -1986, 79с.

56. Лабори Г. Регуляция обменных процессов (теоретический, экспериментальный, фармакологический и терапевтический аспекты).-М. :Медицина, 1970.-3 84с.to

57. Лабори Г. Метаболические и фармакологические основы нейрофизиологии.-М.: Медицина, 1974.-168с.

58. Лакин Г.Ф. Биометрия.-М.: Высшая школа, 1990.-352с.

59. Ландау М.А. Молекулярная природа отдельных физиологических процессов. М.: Наука, 1985 — 264с.

60. Ластовская Т.Г. Содержание сульфгидрильных групп в некоторых тканях и митохондриях крыс различного возраста /Обмен и функции стареющего организма. Минск, 1969, с.45-50.

61. Литошенко А.Я. Некоторые стороны системы биосинтеза белка митохондрий печени в старости//Геронтология и гериатрия. 1979. Ежегодник. Продление жизни: прогнозы, механизмы, контроль. Киев, 1979, с. 87-91

62. Мальцева Н.В., Горин B.C., Жабин С.Г., Зорин H.A. Сравнительное изучение иммуносупрессивных свойств ассоциированных с беременностью протеина А, А2-гликопротеина, а также А2-макроглобулина //Ж Акушерство и гинекология.- 1991. № 5. - С.27-30.

63. Маралов В.Г. Основы саморазвития и самопознания.-М.:Академия, 2002.-256с.

64. Маршалл В.Дж. Клиническая биохимия -2-ое изд.пер с англ. — М. — СПб.: БИНОМ Невский диалект. - 2002. - 784с.

65. Мартин Р., Мартин Г., Мурадян Х.К. Возрастные особенности влияниягидрокортизона на активность РНК-полимераз и транскрипцию разных классов РНК в печени крыс. /Сб. ст. Вопросы геронтологии. Под. Ред. Чеботарева Д.Д., 1978. С.49-56.

66. Матковская Т.А., Юрьева Э.А., Сухоруков B.C., Столяров Ю.Ю. О профилактике возрастных изменений кожи //Военно-медицинский журнал. 2000. - №8. - С. 16-20.

67. Меньшиков В.В. Руководство по клинической лабораторной диагностике. М.: Медицина, 1982. - 576с.1. Ч,

68. Мешкова Н.П., Северин С.Е. Практикум по биохимии.-М.:Изд-во МГУ, 1979.-430с.

69. Мхитарян В.Г., Агаджанов М.И., Геворкян Д.М. Ферментные механизмы антирадикальной защиты клетки при экстремальных состояниях //Вестн. АМН СССР,1982.-№9.-С.15-19.

70. Нагорнев В.А., Назаров П.Г.,Полевщиков В.А., Рабинович B.C. с соавт. Атерогенез и реакция «острой фазы» печени //Архив патологии. — 1998. Т. 60. №6. - С.62-68.

71. Нагорный J1.B., Никитин В.И., Буланкин И.И. Проблема старения и долголетия. М.:Медгиз — 1963 - 740с.

72. Никитин Ю П. Бондарева З.Г., Отева Э.А. с соавт. Образ жизни и показатели липидного состава крови у людей старческого возраста. //Терапевтический архив — 1989 №12 - с.109-112.

73. Никитин Ю.П., Бондарева З.Г. Отева Э.А., Филимонова Т.А. Липидный состав сыворотки крови у здоровых и больных старческого возраста и долгожителей. //Клиническая медицина 1991 - №6- с.32-35.

74. Никитин В.Н., Блок Л.Н., Белоконь Н.С., Красницкая A.A. Системы протеосинтеза печени белых крыс в онтогенезе (эксперименты in vitro) //Геронтология и гериатрия. 1979. Ежегодник. Продление жизни: прогнозы, механизмы, контроль.-Киев, 1979.- с.77-82.

75. Никитин Ю.П., Бондарева З.Г. Отева Э.А., Филимонова Т.А. Липидныйсостав сыворотки крови у здоровых и больных старческого возраста и долгожителей. //Клиническая медицина 1991 - №6- с.32-35.

76. Обухова Л.К., Эмануэль Н.М. Роль свободнорадикальных реакций окисления в молекулярных механизмах старения живых организмов //1983. Том 52. - С.353-371.

77. Орехович В.Н. Современные методы в биохимии.- М.:Медицина,1968.-372с.

78. Парк Д.В. Биохимия чужеродных соединений.-М.:Медицина, 1973.-287 с.84.