Влияние антител и цитокинов на эффективность фагоцитоза Staphylococcus aureus тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Слободчикова, Светлана Вадимовна

• Слободчикова, Светлана Вадимовна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Слободчикова, Светлана Вадимовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Проблема стафилококковых инфекций

1.2. Классификация и краткая характеристика бактерий рода стафилококк

1.3. Колонизация покровов макроорганизма золотистым стафилококком

1.4. Проникновение стафилококка через барьеры кожи и слизистых

оболочек

1.5. Защитная реакция макроорганизма на S. a ureus

1.5.1. Развитие воспаления в ответ на проникновение S. aureus

1.5.2. Значение нейтрофшов в защите от стафилококковой инфекции

1.5.3. Значение гуморального иммунитета в защите от стафилококковой инфекции

1.5.3.1. Значение иммуноглобулинов в защите от стафилококковой инфекции

1.5.3.2. Значение цитокинов в защите от стафилококковой инфекции

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Подготовка объектов фагоцитоза

2.1.1. Подготовка клеток стафилококков

2.1.1.1. Окраска клеток S. aureus флюоресцеина изотиоцианатом

2.1.1.2. Опсонизация клеток S. aureus препаратами антистафилококкового и нормального иммуноглобулинов

2.1.2. Подготовка опсонизированного зимозана

2.1.3. Получение модельных иммунных комплексов

2.2. Исследование иммуноглобулинсвязывающей активности штаммов

стафилококка

2.3. Определение средних размеров частиц взвеси стафилококков

2.4. Источник биологического материала

2.5. Культуры крови и определение концентрации цитокинов в супернатанах

2.6. Исследование поглотительной активности лейкоцитов

2.7. Исследование люминолзависимой хемилюминесценции лейкоцитов (JI3XJI)

2.8. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ АНТИТЕЛ НА ФАГОЦИТОЗ S. AUREUS

3.1. Связывание антител различными штаммами стафилококка в зависимости от содержания белка А в клеточной стенке бактерии

3.2. Зависимость поглотительной активности гранулоцитов и моноцитов от опсонизирующей функции антител

3.2.1. Характер поглощения неопсонизированного S. aureus Cowan I гранулоцитами и моноцитами

3.2.2. Влияние нормального иммуноглобулина на фагоцитоз S. aureus Cowan

I гранулоцитами и моноцитами

3.3. Влияние АСИ на поглощение S. aureus гранулоцитами

3.3.1. Исследование поглощения неопсонизированных стафилококков

3.3.2. Влияние АСИ на поглощение S. aureus Wood 46

3.3.3. Влияние АСИ на поглощение S. aureus Cowan 1

3.3.4. Влияние штамма стафилококков на поглотительную активность гранулоцитов

3.3.5. Сравнительная характеристика опсонизирующих свойств антистафилококкового и нормального иммуноглобулинов

3.4. Спектротурбидиметрическое определение изменения средних размеров частиц стафилококковых суспензий под влиянием иммуноглобулинов

3.5. Исследование влияния АСИ на ЛЗХЛ лейкоцитов

3.6. Обсуждение

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ЦИТОКИНОВ НА ФАГОЦИТОЗ S. AUREUS COWAN 1

4.1. Цитокиновый профиль суточных культур клеток цельной крови,

активированных различными стимуляторами

4.1.1. Секреция TNF-a в суточных культурах клеток цельной крови, стимулированных S. aureus Cowan 1

4.1.2. Секреция IL-lft и IL-1RA в суточных культурах клеток цельной крови, стимулированных S. aureus Cowan 1

4.1.3. Секреция TNF-a, IL-lft и IL-1RA в суточных культурах клеток цельной крови, стимулированных LPS, РНА и зимозаном

4.2. Влияние супернатантов культур клеток цельной крови,

стимулированных S. aureus cowan i, на поглотительную активность фагоцитов

4.2.1. Влияние супернатантов на поглотительную активность гранулоцитов

4.2.2. Влияние супернатантов на поглотительную активность моноцитов

4.3. Влияние супернатантов культур крови на ЛЗХЛ лейкоцитов

4.3.1. Влияние супернатантов культур клеток цельной крови, стимулированных S. aureus Cowan I, на уровень JIX3J1 лейкоцитов, поглотивших стафилококк

4.3.2. Отмена тренталом усиливающего влияния САК на ЛЗХЛ лейкоцитов, поглотивших S. aureus Cowan 1

4.4. ЛЗХЛ лейкоцитов в ответ на S. aureus и другие объекты фагоцитоза

4.5. Обсуждение

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА

121

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние антител и цитокинов на эффективность фагоцитоза Staphylococcus aureus»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. S. aureus является основным возбудителем нозокомиальных инфекций во всем мире [16; 61; 110; 136]. В настоящее время регистрируется рост числа стафилококковых заболеваний [22; 126].

Одной из причин распространённости стафилококковых инфекций является отсутствие надёжных средств специфической профилактики [158; 184] и лечения. Вакцины, предотвращающие развитие стафилококковых инфекций, отсутствуют. Антибиотики могут оказаться неэффективными в результате развития у бактерий антибиотикорезистентности [2; 69].

Другим объектом терапевтического воздействия при лечении инфекций является организм человека. Учитывая, что наличие антибиотикоустойчивости стафилококков является серьёзной проблемой, надежда на создание альтернативных средств лечения возлагается на препараты, действие которых направлено на макроорганизм.

Известно, что ключевым механизмом защиты макроорганизма от стафилококка является фагоцитоз [102; 114; 144]. На эффективность фагоцитоза оказывает влияние локальное микроокружение, важнейшими компонентами которого являются антитела и цитокины. Антитела обладают наиболее выраженной опсонизирующей активностью по сравнению с другими молекулами [115; 171; 189]. Дефицит антител приводит к развитию гноеродных инфекций, большей частью вызванных S. aureus [23]. Цитокины участвуют в регуляции количества лейкоцитов в очаге инфекции [92; 109] и осуществляют прайминг фагоцитов [47; 155].

Исходя из вышесказанного, основные усилия рзработчиков при создании иммунотропных средств лечения были сосредоточены на улучшении опсонизации бактерий с помощью введения или индукции in vivo образования антител. Тем не менее, четыре препарата с указанными свойствами не смогли успешно пройти

клинические испытания [112; 141]. В России в качестве дополнительного средства лечения стафилококковых инфекций в клинической практике используется антистафилококковый иммуноглобулин, который, однако, не проходил испытаний согласно требованиям доказательной медицины [90].

Неудачные попытки создания иммунопрепаратов для лечения стафилококковых инфекций свидетельствуют о недостаточном понимании их патогенеза [10; 63]. Всё это обуславливает необходимость вновь обратиться к вопросам изучения механизмов фагоцитоза S. aureus и факторов, определяющих его эффективность.

Цель работы - исследование влияния антител и цитокинов на эффективность фагоцитоза S. aureus.

Основные задачи исследования:

1. Оценить выраженность влияния опсонизации S. aureus антителами на реакцию интернализации и выработку активных форм кислорода лейкоцитами человека при поглощении стафилококков в системе in vitro.

2. Оценить опсонизирующую и агрегационную активность коммерческого антистафилококкового иммуноглобулина по отношению к S. aureus и сравнить указанные свойства специфического препарата со свойствами нормального иммуноглобулина человека.

3. Определить закономерности продукции основных провоспалительных и противовоспалительных цитокинов клетками крови при контакте со стафилококком, а также оценить выраженность влияния цитокинов на процессы интернализации и продукции активных форм кислорода лейкоцитами при фагоцитозе S. aureus в системе in vitro.

Научная новизна. Впервые показано, что антитела в несколько раз усиливают процесс поглощения стафилококков, однако это не приводит к адекватному повышению выработки активных форм кислорода фагоцитами. Впервые обнаружено, что опсонизирующие свойства препарата коммерческого

антистафилококкового иммуноглобулина по отношению к S. aureus уступают таковым препарата нормального иммуноглобулина человека.

Впервые показана возможность применения спектротурбидиметрии для оценки агрегационных свойств антител. Агрегационная активность коммерческого антистафилококкового иммуноглобулина по отношению к S. aureus выражена в меньшей степени, чем соответствующая функция препарата нормального иммуноглобулина.

Впервые получены данные о зависимости интенсивности синтеза провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в суточных культурах цельной крови от широкого диапазона концентраций S. aureus. Результаты позволяют проследить синтез цитокинов от уровня базовой секреции до уровня её запредельного торможения.

Впервые показано, что цитокины, вырабатываемые при контакте клеток крови со стафилококком, преимущественно усиливают выработку активных форм кислорода фагоцитами, оказывая незначительное влияние на интенсивность поглощения бактерий.

Теоретическая и практическая значимость работы. В теоретическом плане полученные результаты расширяют представления о механизмах фагоцитарных реакций по отношению к S. aureus. Показано, что основная проблема антистафилококковой защиты макроорганизма заключается в низком уровне кислородзависимой бактерицидности фагоцитов, поглотивших стафилококк. В практическом плане результаты работы позволяют по-новому взглянуть на эффективность повышения опсонизации S. aureus и применение цитокинов для усиления бактерицидного потенциала лейкоцитов при лечении стафилококковых инфекций.

Положения, выносимые на защиту:

1. Опсонизация стафилококков антителами в значительной степени усиливает интернализацию S. aureus лейкоцитами, оказывая при этом слабое стимулирующее влияние на выработку клетками активных форм кислорода.

2. Действие препарата коммерческого антистафилококкового иммуноглобулина на процесс поглощения S. aureus и агрегационная активность специфических антител уступают соответствующим свойствам нормального иммуноглобулина человека. Оба препарата в равной степени влияют на продукцию активных форм кислорода фагоцитами при поглощении S. aureus.

3. Цитокины, вырабатываемые клетками цельной крови при контакте со стафилококком, усиливают образование активных форм кислорода лейкоцитами, фагоцитирующими S. aureus; влияние цитокинов на реакцию поглощения стафилококков выражено в меньшей степени.

Апробация работы и публикации. Основные положения диссертационной работы были представлены в виде докладов и обсуждены на II Всероссийском конгрессе студентов и аспирантов-биологов с международным участием «Симбиоз Россия 2009» (25-29 мая 2009 г. - г. Пермь); VII конференции иммунологов Урала «Актуальные вопросы фундаментальной, клинической иммунологии и аллергологии» (29 июня - 3 июля 2009 г. - г. Архангельск); VIII конференции иммунологов Урала (28-30 июня 2010 г. - г. Сыктывкар); IX конференции иммунологов Урала (21-24 июня 2011 г. - г. Челябинск); X конференции иммунологов Урала (1-3 июля 2012 г. - г. Тюмень).

Основные результаты исследования представлены в 4 печатных работах, из них 3 статьи вышли в рецензируемых журналах, рекомендуемых ВАК Минобрнауки РФ для публикации материалов диссертационных исследований.

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 122 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, двух глав собственных результатов исследований, заключения, выводов, списка сокращений и условных обозначений, списка цитируемой литературы, включающего 194 источника, из них 18 отечественных и 176 зарубежных, списка иллюстративных материалов, содержащего 13 рисунков и 12 таблиц.

Связь работы с научными программами. Исследования поддержаны программой Президиума РАН «Фундаментальные науки - медицине», № проекта: 09-П-4-1015.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Проблема стафилококковых инфекций

S. aureus - главный возбудитель нозокомиальных инфекций во всем мире [16; 61; 110; 136; 186]. Стафилококковые инфекции являются проблемой хирургических стационаров, отделений интенсивной терапии, родильных домов [3; 16; 18; 129; 145; 157; 174]. Среди инфекций, осложняющих послеоперационный период, доля заболеваний, вызванных золотистым стафилококком, составляет около 50-70% [129; 145]. Другими часто встречающимися нозологическими формами являются ИВЛ-ассоциированная пневмония и инфекции, связанные с применением внутрисосудистых катетеров [61; 181]. Среди этиологических факторов инфекций кожи и мягких тканей золотистый стафилококк также стоит на первом месте (44,6% случаев), значительно опережая Pseudomonas aeruginosa (11,1%), ß-гемолитический стрептококк (4,1%) и коагулазо-негативные стафилококки (2,8%) [110]. В настоящее время в развитых странах отмечен рост числа стафилококковых заболеваний [22; 126]. В США общее количество стафилококковых инфекций, требующих госпитализации, ежегодно составляет более 35000000 случаев [126].

Одним из факторов преобладания S. aureus как причины нозокомиальных инфекций считают антибиотикорезистентность, которую стафилококки приобретают значительно легче, чем другие бактерии [2; 69]. В стационарах создаются благоприятные условия для возникновения и циркуляции антибиотико-резистентных штаммов [16; 61]. Доля антибиотикоустойчивых бактерий среди S. aureus варьирует в зависимости от географического региона: Швеция - 1-5%, Португалия - 25-50%, Румыния - больше 50%\ Тайвань - 97% [181]. Наличие антибиотикоустойчивости у микроорганизмов приводит к увеличению сроков пребывания пациента в стационаре и увеличивает стоимость лечения [20]. При бактериемии, вызванной резистентными штаммами, уровень смертности более

1 — URL: http://ecdc.europa.eu/en/publications/publications/0706 sur annual epidemiological _report_2007.pdf

высок, чем в том случае, когда этиологическим фактором бактериемии являются антибиотикочувствительные стафилококки [187].

Другой причиной большого количества внутрибольничных случаев стафилококковых инфекций является снижение общей реактивности организма пациентов, что делает их более восприимчивыми к оппортунистическим инфекциям [69]. Но в начале 1990-х годов эпидемическая ситуация изменилась: было зарегистрировано появление метициллин-устойчивых штаммов стафилококка, способных вызывать инфекции у практически здоровых людей [43; 69]. Новые штаммы отличались гипервирулентным фенотипом и получили название CA-MRSA (community-associated methicillin resistant Staphylococcus aureus, метициллин-устойчивый S. aureus, вызывающий внебольничные инфекции) [43; 69]. В настоящее время в США регистрируют рост числа заболеваний, вызванных CA-MRSA [88], ставшего главной причиной инфекционных болезней среди населения [61; 69].

Таким образом, распространение стафилококковых инфекций в мире, проблема антибиотикоустойчивости и образование новых болезнетворных штаммов в полной мере оправдывают эпитеты, употребляемые по отношению к стафилококку: «чума XX века» и «стафилококковое бедствие» [16]. Однако проблему стафилококковых инфекций следует рассматривать не только в эпидемиологическом аспекте. Современные исследователи отмечают, что до настоящего времени не достигнуто полного понимания патогенеза заболеваний, вызванных S. aureus. С практической точки зрения огромное значение имеет отсутствие эффективных средств лечения и профилактики инфекции.

1.2. Классификация и краткая характеристика бактерий

рода стафилококк

Стафилококки — грамположительные неподвижные аэробные или факультативно анаэробные кокки [1], по типу питания - хемоорганотрофы. Диаметр бактерий от 0,5 до 1,5 мкм; стафилококки формируют структуры в виде

грозди, либо собраны в группы по 2-4 клетки. Согласно классификации, представленной в определителе Берджи [27], род Staphylococcus относиться к типу XIII Firmicutes, классу I Bacilli, порядку I Bacillales, семейству VIII Staphylococcaceae. В род Staphylococcus входит 37 видов и несколько подвидов бактерий [27]. Внутри рода виды разделены на три группы по наличию у микроорганизмов коагулазы и устойчивости к новобиоцину (антибактериальному препарату, блокирующему АТФ-азную реакцию ДНК-гиразы микроорганизма):

- коагулазо-негативные, новобиоцин-чувствительные: S. epidermidis, S. capitis, S. caprae, S. haemolyticus, S. hominis, S. saccharolyticus, S. warneri, S. simulans, S. carnosos

-коагулазо-негативные, новобиоцин-устойчивые: S. saprophyticus, S. cohnii, S. xylosu, S. sciuri, S. lentus, S. vitulinus (син. pulvereri)

- коагулазо-позитивные, новобиоцин-чувствительные: S. intermedius, S. delphini, S. aureus, S. aureus подвид anaerobius.

Бактерии рода стафилококк являются представителями нормальной микрофлоры кожи и слизистых человека, домашних и диких животных, некоторых видов птиц. Стафилококки могут быть резидентными или транзиторными по отношению к макроорганизму. Резидентные бактерии представляют собой самовосстанавливающуюся популяцию микробов, присущую какому-либо хозяину [96]. Транзиторные штаммы стафилококков, попадая в макроорганизм из окружающей среды, быстро элиминируются организмом хозяина. У человека S. aureus заселяет эпителий преддверия носовой полости. Кроме этого, бактерия встречается на коже промежности и подмышечных впадин, слизистой глотки, ЖКТ и женских половых органов. По типу носительства стафилококка популяцию людей можно разделить на постоянных носителей (около 20%), периодических носителей (около 60%) и остальных, у которых никогда не обнаруживается стафилококк [61].

В то же время стафилококки - возбудители оппортунистических инфекций человека и животных. Коагулазо-позитивные бактерии (S. aureus, S. intermedius, S.

delphini, S. schleiferi подвид coagulans и коагулазо-вариабельный вид S. hyicus) рассматриваются как потенциальные патогены [27]. Для человека основным среди них является S. aureus [27; 74; 87; 173; 193]. Инфекции, вызванные S. aureus, имеют более тяжёлое течение и серьёзный прогноз, чем заболевания, вызванные коагулазо-негативными стафилококками [24; 98; 146].

1.3. Колонизация покровов макроорганизма золотистым стафилококком

Колонизация поверхности эпителия - комплексный процесс. Он включает в себя адгезию бактерий, формирование устойчивости к антимикробным компонентам макроорганизма и способность стафилококка конкурировать с другими представителями микрофлоры [46].

Адгезия стафилококка к слущивающемуся эпителию является первым условием, обеспечивающим колонизацию. О молекулярных механизмах адгезии стафилококка известно не много. Большинство накопленных сведений касаются фиксации стафилококка на эпителии носовой полости [56; 46]. Прикрепление бактерий осуществляется посредством взаимодействия молекул клеточной стенки стафилококка с поверхностными структурами эпителиальной клетки. Адгезивными свойствами обладают тейхоевые кислоты (структурный элемент клеточной стенки стафилококка) и различные белки: ClfB (Clumping factor В: фактор агрегации В), IsdA (iron-regulated surface determinant protein А: железо-регулируемый поверхностный детерминантный белок A), SasG (S. aureus surface protein: поверхностный белок G S. aureus), SdrC и SdrD (Serin-aspartic acid rich proteins С и D: содержащие в большом количестве серии и аспарагиновую кислоту белки С и D) [46; 76]. Тейхоевые кислоты, вероятно, являются лигандами скавенджерных рецепторов [185], а факторы ClfB и IsdA взаимодействуют с цитокератином эпителиальных клеток [46; 76]. Лиганды для SasG, SdrC и SdrD не известны [56]. Следует упомянуть о том, что стафилококк не использует все факторы адгезии одновременно. Так, тейхоевые кислоты важны в начальной

стадии взаимодействия бактерии и хозяина, тогда как ClfB и IsdA необходимы на поздних этапах колонизации [46]. Таким образом, стафилококк обладает выраженными адгезионными способностями, которые обеспечиваются набором белков-адгезинов и тейхоевыми кислотами.

Следующей важной составляющей процесса колонизации является формирование устойчивости микроба к антибактериальным компонентам организма-хозяина. В эпителии кожи и слизистых присутствует ряд бактерицидных молекул: лизоцим, катионные белки (бета-дефензины и кателицидин LL-37) [125], лактоферрин [38] и другие. Однако к большинству из них стафилококки приобрели резистентность. Так, пептидогликан S. aureus (основной полимер клеточной стенки) имеет химически изменённую структуру и поэтому не подвергается расщеплению под действием лизоцима [27]. Благодаря модифицирующим эффектам белков MprF (multiple peptide resistance factor: фактор, обеспечивающий устойчивость ко многим пептидам) и IsdA, анионные тейхоевые кислоты стафилококка имеют сниженный отрицательный заряд. В результате взаимодействие катионных белков организма-хозяина с поверхностью бактерии существенно ослабляется [46]. Кроме того дефензины и кателицидины могут быть разрушены секретируемыми ферментами золотистого стафилококка: стафилокиназой и ауреолизином [46]. IsdA инактивирует бактерицидную активность лактоферрина, который считается основным антистафилококковым белком слизистой носа [38]. Антибактериальной активностью обладают также гидрофобные жирные кислоты кожного сала [194]. Гидрофильные свойства поверхности бактерии препятствуют взаимодействию жирных кислот с клеткой стафилококка. Гидрофильность поверхности клетки стафилококка обеспечивается благодаря аминокислотному составу белка IsdA, расположенного на клеточной стенке [39]. Приведенные данные показывают, что стафилококк обладает определенным арсеналом средств, способных нивелировать действие многих антибактериальных молекул кожи и слизистых оболочек.

Состав микробиоты экологических ниш, в которых может находиться стафилококк, довольно разнообразен. Например, у здоровых людей

доминирующими видами комменсальной флоры носовой полости являются представители типа Actinobacteria (.Propionibacterium spp. и Corynebacterium spp.). На их долю приходится две трети всех бактерий. Четвертую часть микробиоты составляют бактерии типа Firmicutes (куда входит род Staphylococcus), причём на золотистый стафилококк приходится не более 5% от общего числа микробов. Наконец, третье место принадлежит микроорганизмам типа Proteobacteria, доля которых равна 4% [59]. В это число входят также условно-патогенные микроорганизмы: Streptococcus pneumoniae (тип Firmicutes), Haemophilus influenzae и Moraxella catarrhalis (тип Proteobacteria) [116]. Таким образом, микробиота носовой полости у здоровых людей содержит несколько видов бактерий, среди которых S. aureus - не самый многочисленный представитель.

Бактерии микрофлоры оказывают влияние на численность других микроорганизмов микробиоты. Например, чем больше коринебактерий или S. epidermidis находиться в преддверии носовой полости, тем меньше вероятность обнаружения S. aureus в составе её микробиоты. В свою очередь, золотистый стафилококк может вытеснять S. epidermidis из состава микрофлоры носовой полости [59], однако он не влияет на количество коринебактерий [103]. Вероятность обнаружения золотистого стафилококка среди носителей Streptococcus pneumoniae снижена в два раза по сравнению с лицами, у которых S. pneumoniae отсутствует. В свою очередь, среди носителей S. aureus колонизация S. pneumoniae наблюдается в два раза реже, чем среди неносителей [147]. Следовательно, Corynebacterium spp., S. epidermidis и S. pneumoniae проявляют антагонизм по отношению к золотистому стафилококку. S. aureus может вытеснять S. epidermidis [59] и S. pneumoniae [147] из состава микрофлоры, но он не проявляет такой активности по отношению к коринебактериям [103].

Подводя итог, можно сказать, что золотистый стафилококк обладает рядом факторов, которые позволяют ему фиксироваться на эпителиальных клетках макроорганизма, определяют его устойчивость к антибактериальным молекулам кожи и слизистых и обеспечивают его способность конкурировать с другими представителями микрофлоры. И, хотя S. aureus не является доминирующим

видом и присутствует в определённых зонах кожного покрова и слизистых человека, эти факторы дают возможность стафилококку конкурировать с другими микроорганизмами, входящими в состав микробиоты.

1.4. Проникновение стафилококка через барьеры кожи

и слизистых оболочек

Неповреждённая кожа, по-видимому, является непреодолимым препятствием для стафилококка. При носительстве S. aureus у человека отсутствуют клинические признаки воспаления. Начало инфекции, как правило, связано с нарушением целостности кожных или слизистых покровов. Это могут быть бытовые и спортивные травмы, инвазивные медицинские манипуляции (инъекции, хирургические вмешательства) и т.д.

Вместе с тем, существует ряд экспериментальных свидетельств, полученных при исследовании клеточных культур, показывающих, что S. aureus может проникать внутрь клеток эпителия [89; 93; 111; 160], фибробластов [58] и ряда клеточных линий [76]. Проникновение S. aureus в клетку происходит при участии фибронектина и фибронектин-связывающих белков (FnBPs: Fibronectin binding proteins). При этом фибронектин служит посредником между FnBPs стафилококка и интегрином a5pi на поверхности клетки макроорганизма. Взаимодействие данных молекул приводит к активной интернализации бактерий [76; 161].

В связи с тем, что верхний слой эпидермиса, состоящий из ороговевших неживых клеток, является непроницаемым для стафилококка, вероятный механизм проникновения микроорганизма через кожный покров представляется следующим образом. Нарушение целостности кожи обеспечивает S. aureus внедрение в нижележащие слои, где расположены живые клетки. Стафилококк получает возможность взаимодействовать с клетками кожи, используя их интегрины и собственные фибронектин-связывающие белки.

Реализация механизма внедрения зависит от доступности молекул,

участвующих в поглощении бактерии [46]. Здоровая и патологически изменённая кожа отличаются содержанием a5pl интегрина и фибронектина. Эпителий здоровой кожи не синтезирует а5(31. Клетки соединительнотканного слоя также отличаются слабой его экспрессией [134]. Кроме того, в соединительной ткани, расположенной на границе дермы и эпителия кожи, отмечено незначительное содержание фибронектина [41]. Однако, эта ситуация может меняться. Так, при псориазе эпидермальные клетки экспрессируют большое количество a5pi [134], а содержание фибронектина увеличивается как в дерме, так и в эпидермисе [62]. По-видимому, поглощение S. aureus живыми клетками кожи более вероятно в ткани, уже изменённой каким-либо патологическим процессом, чем в здоровом кожном покрове.

Кроме того, экспериментальные данные, раскрывающие детали проникновения S. aureus через однослойный эпителий, свидетельствуют о существовании иного механизма заражения. На модели стафилококковой пневмонии у мышей показано, что важную роль в преодолении защитного барьера может играть альфа-токсин стафилококка. Токсин связывается с расположенной на поверхности эпителиальных клеток лёгких металлопротеазой ADAM 10 и повышает её активность. Этот фермент, осуществляя протеолиз молекул Е-кадгерина, вызывает нарушение межклеточных контактов эпителиальных клеток [84].

Ослабление контактов клеток дыхательных путей может быть также результатом влияния белка А (основного белка клеточной стенки стафилококка) [166]. В экспериментах с монослоем эпителиальных клеток дыхательных путей показано, что протеин взаимодействует с клеточными рецепторами - TNFR1 и EGFR. Сигнал с этих рецепторов активирует RhoA/ROCK/MLC каскад, что приводит к сокращению цитоскелета. Дополнительный сигнал с EGFR вызывает в клетке активацию кальпаина (кальций-зависимой цистеиновой протеазы), который расщепляет белки межклеточной адгезии (окклюдин и Е-кадгерин). Сокращение цитоскелета и разрушение межклеточных связей обеспечивает стафилококку проникновение сквозь монослой эпителиоцитов. Кроме того, в

экспериментах in vivo показано, что блокирование активности кальпаина препятствует инвазии лёгочной паренхимы стафилококком [166]. Таким образом, стафилококковое инфицирование дыхательных путей может происходить при участии собственных факторов S. aureus (факторов патогенности), которые способны изменять проницаемость эпителия.

Вопрос о проникновении стафилококка через барьеры кожи и слизистых оболочек остаётся пока малоизученным. Однако из имеющихся сведений можно заключить, что для преодоления эпителиальных барьеров стафилококку необходимы условия, отличные от тех, которые существуют при колонизации (повреждение кожных покровов или проникновение в зоны, обычно не колонизируемые, например, полость лёгких). Контакт с живыми клетками макроорганизма позволяет стафилококку эксплуатировать их жизненно важные процессы (интегрин-опосредованную активацию цитоскелета, функционирование клеточных ферментов, цитокиновую регуляцию активности клетки) для осуществления инвазии. В процессе заражения принимают участие несколько факторов патогенности стафилококка. Наконец, проникновение через эпителиальный барьер может происходить как путём внедрения внутрь клетки, так и путём разрушения межклеточных связей эпителия.

1.5. Защитная реакция макроорганизма на S. aureus

1.5.1. Развитие воспаления в ответ на проникновение S. aureus

Проникновение стафилококка через барьеры кожи и слизистых оболочек приводит к развитию острой воспалительной реакции. Одним из условий её индукции является обнаружение патогена. Данную функцию выполняют паттерн-распознающие рецепторы, среди которых наиболее значимым для развития воспаления в ответ на внедрение стафилококка считается TLR2 [57]. Он взаимодействует с широким кругом молекулярных структур стафилококка -тейхоевыми кислотами, пептидогликаном, липопротеинами и фенол-растворимыми модулинами [57]. Возможно, что в обнаружении стафилококка

также принимают участие цитоплазматические рецепторы N0(12 (лиганд -мурамилдипептид) и Т1Ж9 (лиганд - бактериальная ДНК) [57; 113]. Эти структуры экспрессируются многими клетками макроорганизма: макрофагами, дендритными клетками, тучными клетками, В и Т лимфоцитами, плазматическими и №С клетками, фибробластами, кератиноцитами и клетками Лангерганса и т.д. [113]. Следовательно, обнаружение золотистого стафилококка возможно сразу после проникновения бактерий через барьеры кожи и слизистых оболочек.

Рецепция молекулярных паттернов стафилококка инициирует в клетках макроорганизма синтез и секрецию провоспалительных цитокинов ЮТ-а, 1Ь-1 (3, 1Ь-6, 1Ь-12, хемокинов СХСЫ, СХСЬ2, СХСЬ5, СХСЬ8 (1Ь-8) и других молекул, необходимых для развития воспаления [57; 113; 137]. Эти медиаторы обладают чрезвычайно широким спектром активности. Например, провоспалительные цитокины повышают экспрессию молекул адгезии и индуцируют синтез хемокинов эндотелиальными клетками, вызывают активацию лейкоцитов. В свою очередь, хемокины обеспечивают привлечение лейкоцитов в очаг поражения [113]. Таким образом, проникновение стафилококка через барьеры кожи и слизистых инициирует ряд событий, необходимых для развития воспалительной реакции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Слободчикова, Светлана Вадимовна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Браунвальд, Е. Внутренние болезни. В 10 кн. Кн. 3. Инфекционные болезни / Е. Браунвальд. - М.: Медицина, 1993. - 480 с. (в пер.).

2. Выгодчиков, Г.В. Стафилококковые инфекции (микробиология, иммунология и эпидемиология) / Г.В. Выгодчиков. - М.: Медгиз, 1963. - 272 с.

3. Гончаров, А.Е. Эпидемический штамм метициллин-резистентного Staphylococcus aureus в стационарах Санкт-Петербурга / А.Е. Гончаров, В. Olsson-Liljequist, Л.П. Зуева, В.В. Колоджиева, В.Ю. Хорошилов, Н.В. Сатосова // Журн. Микробиол. - 2010. - № 5. - С. 24-29.

4. Заривчацкий, М.Ф. Иммунотерапия гнойных ран мягких тканей / М.Ф. Заривчацкий // Гнойные раны мягких тканей / М.Ф. Заривчацкий. - Пермь: ГОУ ВПО ПГМА им. ак. Е.А. Вагнера Росздрава, 2008. - Гл. 8. - С. 228-237.

5. Исаков, Ю.Ф. Детская хирургия: национальное руководство / Ю.Ф. Исаков, А.Ф. Дронов А.Ф. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. - 1168 с.

6. Карницкая, Н.В. Нормальный у-глобулин человека как носитель специфических антистафилококковых антител / Н.В. Карницкая, М.Н. Левина, Е.А. Лукатос // Препараты нормальных и специфических иммуноглобулинов человека. Сборник научных трудов Московского НИИ эпидемиологии и микробиологии. - 1975. - Т. XVIII. - С. 102-106.

7. Кленин, В.И. Характеристические функции светорассеяния дисперсных систем / В.И. Кленин, С.Ю. Щеголев, В.И. Лаврушин. - Изд-во Саратовского университета, 1977. - 177 с.

8. Ковальчук, Л.В. Клиническая иммунология и аллергология с основами общей иммунологии. Учебник / Л.В. Ковальчук, Л.В. Гранковская, Р.Я. Мешкова. - М.: Издательская группа «ГЭОТАР-Медиа», 2011. - с. 640.

9. Королевская, Л.Б. Спектротурбидиметрическое определение размера иммунных агрегатов сывороток крови, образованных в полиэтиленгликоле / Л.Б. Королевская, К.В. Шмагель // Иммунология. - 2010. - № 2. - С. 108-111.

10. Кузьменко, О.М. Профилактика и иммунотерапия стафилококковых

инфекций бактериальными вакцинами / О.М. Кузьменко, И.М. Грубер, Р.Г. Прияткин // ЖМЭИ. - 2010. - № 5. - С. 106-112.

11. Лакин, Г.Ф. Биометрия: Учеб. Пособие для биол. спец. вузов / Г.Ф. Лакин. - 4-е изд., перераб. и доп. — М.: Высш. шк., 1990. — 352 с.

12. Мухина, H.A. Опыт производственного получения плацентарного противостафилококкового у-глобулина / H.A. Мухина // Препараты нормальных и специфических иммуноглобулинов человека: сб. науч. тр. Московского НИИ эпидемиологии и микробиологии / H.A. Мухина, Р.З. Маркелова, Е.Т. Петрова, М.П. Стрельцова, Н.И. Щетнев. - T. XVIII. - М., 1976. - С. 95-98.

13. Пинегин, Б.В. Оценка поглотительной активности фагоцитов периферической крови человека / Б.В. Пинегин // Применение проточной цитометрии для оценки функциональной активности иммунной системы человека. Пособие для врачей лаборантов /Б.В. Пинегин, A.A. Ярилин, A.B. Симонова, C.B. Климова, Д.В. Мазуров и др. - М., 2001. - С. 31-35.

14. Плохинский, H.A. Алгоритмы биометрии / H.A. Плохинский. - М.: Издательство Московского университета, 1980. - С. 22-25.

15. Скуркович, C.B. Тезисы докл. 43-го Пленума ученых Совета ЦОЛИПК / C.B. Скуркович, Т.В. Голосова, A.A. Фром, А.Е. Киселев. - Т. 2. -1967.-С. 328.

16. Смирнов, В.В. Стафилококк (биологически активные субстанции, иммунный ответ на антигены) / В.В. Смирнов, А.Е. Вершигора, Н.Е. Вихоть и др. - Киев: Наук, думка, 1988. - 248 с.

17. Шмагель, К.В. Местный иммунитет гнойных ран / К.В. Шмагель, H.A. Зубарева, A.B. Ренжин // Медицинская иммунология. - 2010. - Т. 12. - № 4—5. - С. 393-398.

18. Шуб, Г.М. Циркуляция метициллин-резистентных стафилококков в лечебных учреждениях разного профиля / Г.М. Шуб, Н.Г. Ходакова // Журн. Микробиол. - 2008. - №1. - С. 66 - 68.

19. Amulic, В. Neutrophil Function: From Mechanisms to Disease / B. Amulic, C. Cazalet, G.L. Hayes, K.D. Metzler, A. Zychlinsky // Annu. Rev. Immunol. -

2012.-Vol. 30.-P. 459-89.

20. Anderson, D.J. Clinical and Financial Outcomes Due to Methicillin Resistant Staphylococcus aureus Surgical Site Infection: A Multi-Center Matched Outcomes Study / D.J. Anderson, K.S. Kaye, L.F. Chen, K.E. Schmader, Y. Choi, R. Sloane, D.J. Sexton // PLoS ONE. - 2009. - Vol. 4. - No. 12.

21. Arend, W.P. An IL-1 inhibitor from human monocytes. Production and characterization of biologic properties / W.P. Arend, F.G. Joslin, R.C. Thompson, C.H. Hannum // J. Immunol. - 1989. - Vol. 143. - No. 6. - P. 1851-8.

22. Asgeirsson, H. Staphylococcus aureus bacteraemia in Iceland, 1995-2008: changing incidence and mortality / H. Asgeirsson, O. Gudlaugsson, K.G. Kristinsson, S. Heiddal, M. Kristjansson // Clin. Microbiol. Infect. - 2011. - Vol. 17. - No. 4. - P. 513-8.

23. Aydogan, M. Clinical and Immunologic Features of Pediatric Patients With Common Variable Immunodefi ciency and Respiratory Complications / M. Aydogan, A.O. Eifan, I. Gocmen, C. Ozdemir, N.N. Bahceciler, I.B. Barlan // J. Investig. Allergol. Clin. Immunol. - 2008. - Vol. 18. - No. 4. - P. 260-265.

24. Barretti, P. The role of virulence factors in the outcome of staphylococcal peritonitis in CAPD patients / P. Barretti, A.C. Montelli, J.E.N. Batalha, J.C.T. Caramori, M.de L.R.S. Cunha // BMC Infectious Diseases. - 2009. - Vol. 9. - No. 212.

25. Bassoe, C.F. The effect of serum opsonins on the phagocytosis of Staphylococcus aureus and zymosan particles, measured by flow cytometry / C.F. Bassoe, R. Bjerknes // Acta. Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. C. - 1984. - Vol. 92. -No. l.-P. 51-8.

26. Bell, J.A. Western blot analysis of staphylococcal antibodies present in human sera during health and disease / J.A. Bell, Т.Н. Pennington, D.T. Petrie // J. Med. Microbiol. 1987. - Vol. 23. - P. 95-99.

27. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. Vol. Ill, The Firmicutes / P.D. Vos, G.M. Garrity, D. Jones, N.R. Krieg, W. Ludwig, F.A. Rai. - 2nd - New York: Springer, 2009. - P. 1450.

28. Bhakdi, S. Alpha-Toxin of Staphylococcus aureus / S. Bhakdi, J. Tranum-

Jensen // MICROBIOLOGICAL REVIEWS. - 1991. - Vol. 55. - No. 4. - P. 733-751.

29. Borregaard, N. Granules and secretory vesicles of the human neutrophil / N. Borregaard, L. Kjeldsen, K. Lollike, H. Sengelov // Clin. Exp. Immunol. - 1995. -Vol. 101.-P. 6-9.

30. Brauner, A. Tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1 beta, and interleukin-1 receptor antagonist in dialysate and serum from patients on continuous ambulatory peritoneal dialysis / A. Brauner, B. Hylander, B. Wretlind // Am. J. Kidney Dis. -1996. - Vol. 27. - No. 3. - P. 402-8.

31. Briheim, G. Intra- and extracellular events in luminol-dependent chemiluminescence of polymorphonuclear leukocytes / G. Briheim, O. Stendahl, C. Dahlgren // Infect. Immun. - 1984. - Vol. 45. - No. 1. - P. 1-5.

32. Campbell, D.E. Proliferation and production of interferon-gamma (IFN-gamma) and IL-4 in response to Staphylococcus aureus and staphylococcal superantigen in childhood atopic dermatitis / D.E. Campbell, A.S. Kemp // Clin. Exp. Immunol. - 1997. - Vol. 107. - No. 2. - P. 392-7.

33. Casolini, F. Antibody Response to Fibronectin-Binding Adhesin FnbpA in Patients with Staphylococcus aureus Infections / F. Casolini, L. Visai, D. Joh, P.G. Conaldi, A. Toniolo, M. Hook, P. Speziale // Infection and Immunity. - 1998. - Vol. 66. -No. 11.-P. 5433-5442.

34. Champion, J.A. Role of Particle Size in Phagocytosis of Polymeric Microspheres / J.A. Champion, A. Walker, S. Mitragotri // Pharm. Res. - 2008. - Vol. 25, N8.-P. 1815-1821.

35. Chavakis, T. The anti-inflammatory activities of Staphylococcus aureus / T. Chavakis, K.T. Preissner, M. Herrmann // TRENDS in Immunology. - 2007. -Vol.28. - No.9. - P. 408—418.

36. Chen, Q. Novel synthetic (poly)glycerolphosphate-based antistaphylococcal conjugate vaccine / Q. Chen, J. Dintaman, A. Lees, G. Sen, D. Schwartz, M.E. Shirtliff, S. Park, J.C. Lee, JJ. Mond, C.M. Snapper // Infect. Immun. -2013.-Vol. 81.-No. 7.-P. 2554-61.

37. Chomarat, P. Balance of IL-1 receptor antagonist/IL-1 beta in rheumatoid

synovium and its regulation by IL-4 and IL-10 / P. Chomarat, E. Vannier, J. Dechanet, M.C. Rissoan, J. Banchereau, C.A. Dinarello, P. Miossec // J. Immunol. - 1995. - Vol. 154. - No. 3.-P. 1432-9.

38. Clarke, S.R. IsdA Protects Staphylococcus aureus against the Bactericidal Protease Activity of Apolactoferrin / S.R. Clarke, S.J. Foster // Infection and Immunity. - 2008. - Vol. 76. - No. 4. - P. 1518-1526.

39. Clarke, S.R. The Staphylococcus aureus Surface Protein IsdA Mediates Resistance to Innate Defenses of Human Skin / S.R. Clarke, R. Mohamed, L. Bian, A.F. Routh, J.F. Kokai-Kun, J.J. Mond, A. Tarkowski, S.J. Foster // Cell Host & Microbe. -2007.-Vol. l.-P. 199-212.

40. Colque-Navarro, P. Antibody Responses in Patients with Staphylococcal Septicemia against Two Staphylococcus aureus Fibrinogen Binding Proteins: Clumping Factor and an Extracellular Fibrinogen Binding Protein / P. Colque-Navarro, M. Palma, B. Söderquist, J.-I. Flock, R. Möllby // Clinical and Diagnosric Laboratory Immunology. - 2000. - Vol. 7. - No. 1. - P. 14-20.

41. Coolen, N.A. Comparison between human fetal and adult skin / N.A. Coolen, K.C.W.M. Schouten, E. Middelkoop, M.M.W. Ulrich // Arch. Dermatol. Res. -2010.-Vol. 302.-No. l.-P. 47-55.

42. Dahlgren, C. Role of myeloperoxidase in luminol-dependent chemiluminescence of polymorphonuclear leucocytes / C. Dahlgren, O. Stendahl // Infect. Immun. - 1983. - Vol. 39. - P. 736-741.

43. DeLeo, F.R. Host Defense and Pathogenesis in Staphylococcus aureus Infections / F.R. DeLeo, B.A. Diep, M. Otto // Infect. Dis. Clin. North. Am. - 2009. -Vol. 23.-No. l.-P. 17-34.

44. Dewas, C. TNF-alpha induces phosphorylation of p47phox in human neutrophils: partial phosphorylation of p47phox is a common event of priming of human neutrophils by TNF-alpha and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor / C. Dewas, P.M. Dang, M.A. Gougerot-Pocidalo, J. El-Benna // J. Immunol. - 2003. - Vol. 171.-No. 8.-P. 4392-8.

45. Dryla, A. Comparison of Antibody Repertoires against Staphylococcus

aureus in Healthy Individuals and in Acutely Infected Patients / A. Dryla, S. Prustomersky, D. Gelbmann, M. Hanner, E. Bettinger, B. Kocsis, T. Kustos, T. Henics, A. Meinke, E. Nagy // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. - 2005. - Vol. 12.-No. 3.-P. 387-398.

46. Edwards, A.M. Staphylococcus aureus Keratinocyte Invasion Is Dependent upon Multiple High-Affinity Fibronectin-Binding Repeats within FnBPA / A.M. Edwards, U. Potter, N.A.G. Meenan, J.R. Potts, R.C. Massey // PLoS ONE. - 2011. -Vol. 6.-No. 4.-el8899.

47. El-Benna, J. Priming of the neutrophil NADPH oxidase activation: role of p47phox phosphorylation and N0X2 mobilization to the plasma membrane / J. El-Benna, P.M.-C. Dang, M.-A. Gougerot-Pocidalo // Semin. Immunopathol. - 2008. -Vol. 30.-P. 279-289.

48. Elbim, C. Interleukin-18 primes the oxidative burst of neutrophils in response to formyl-peptides: role of cytochrome b558 translocation and N-formyl peptide receptor endocytosis / C. Elbim, C. Guichard, P.M. Dang, M. Fay, E. Pedruzzi, H. Demur, C. Pouzet, J. El Benna, M.A. Gougerot-Pocidalo // Clin Diagn Lab Immunol. 2005 Mar;12(3):436^16.

49. Endres, S. Cyclic nucleotides differentially regulate the synthesis of tumour necrosis factor-a and interleukin-lß by human mononuclear cells / S. Endres, H.-J. Fülle, B. Sinha, D. Soll, C.A. Dinarello, R. Gerzer, P.C. Weber // Immunology. - 1991. -Vol. 72.-P. 56-60.

50. Engelhardt, K.R. Large deletions and point mutations involving the dedicator of cytokinesis 8 (DOCK8) in the autosomal-recessive form of hyper-IgE syndrome / K.R. Engelhardt, S. McGhee, S. Winkler, A. Sassi et al. II J. Allergy Clin. Immunol. - 2009. - Vol. 124. - No. 6. - P. 1289-302.

51. Fattom, A.I. A Staphylococcus aureus Capsular Polysaccharide (CP) Vaccine and CP-Specific Antibodies Protect Mice against Bacterial Challenge / A.I. Fattom, J. Sarwar, A. Ortiz, R. Naso // Infection and Immunity. - 1996. — Vol. 64. - No. 5.-P. 1659-1665.

52. Firestein, G.S. Synovial interleukin-1 receptor antagonist and interleukin-1

balance in rheumatoid arthritis / G.S. Firestein, D.L. Boyle, C. Yu, M.M. Paine, T.D. Whisenand, N.J. Zvaifler, W.P. Arend // Arthritis Rheum. - 1994. - Vol. 37. - No. 5. -P. 644-52.

53. Flannagan, R.S. The Cell Biology of Phagocytosis / R.S. Flannagan, V. Jaumouille, S. Grinstein // Annu. Rev. Pathol. Mech. Dis. - 2012. - Vol. 7. - P. 49-86.

54. Fleischmann, J. Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor enhances phagocytosis of bacteria by human neutrophils / J. Fleischmann, D.W. Golde, R.H. Weisbart, J.C. Gasson // Blood. - 1986. - Vol. 68. - No. 3. - P. 708-11.

55. Forsberg, M. Tumour necrosis factor-alpha potentiates CR3-induced respiratory burst by activating p38 MAP kinase in human neutrophils / M. Forsberg, R. Lofgren, L. Zheng, O. Stendahl // Immunology. - 2001. - Vol. 103. - No. 4. - P. 46572.

56. Foster, T.J. Colonization and infection of the human host by staphylococci: adhesion, survival and immune evasion / T.J. Foster // Veterinary Dermatology. - 2009. -Vol. 20.-P. 456-470.

57. Fournier, B. Recognition of Staphylococcus aureus by the Innate Immune System / B. Fournier, D.J. Philpott // Clinical Microbiology Rviews. - 2005. - Vol. 18. -No. 3.- P. 521-540.

58. Fowler, T. Cellular invasion by Staphylococcus aureus involves a fibronectin bridge between the bacterial fibronectin-binding MSCRAMMs and host cell betal integrins / T. Fowler, E.R. Wann, D. Joh, S. Johansson, T.J. Foster, M. Hook // Eur. J. Cell Biol. - 2000. - Vol. 79. - No. 10. - P. 672-9.

59. Frank, D.N. The Human Nasal Microbiota and Staphylococcus aureus Carriage / D.N. Frank, L.M. Feazel, M.T. Bessesen, C.S. Price, E.N. Janoff, N.R. Pace // PLoS ONE. - 2010. - Vol. 5. - No. 5. - el0598.

60. Frieling, J.T. Differential induction of pro- and anti-inflammatory cytokines in whole blood by bacteria: effects of antibiotic treatment / J.T. Frieling, J. A. Mulder, T. Hendriks, J.H. Curfs, C.J. van der Linden, R.W. Sauerwein // Antimicrob. Agents Chemother. - 1997. - Vol. 41. - No. 7. - P. 1439-1443.

61. Fry, D.E. The Changing Face of Staphylococcus aureus: A Continuing

Surgical Challenge / D.E. Fry, P.S. Barie // Surgical Infections. - 2011. - Vol. 12. - No. 3.-P. 191-203.

62. Fyrand, O. Studies on fibronectin in the skin. II. Indirect immunofluorescence studies in psoriasis vulgaris / O. Fyrand // Arch. Dermatol. Res. -1979.-Vol. 266.-No. 1.-P. 33-41.

63. Garcia-Lara, J. Anti-Staphylococcus aureus immunotherapy: current status and prospects / J. Garcia-Lara, S J. Foster // Current Opinion in Pharmacology. - 2009. -Vol. 9. - P. 552-557.

64. Girard, S. Pro-inflammatory disequilibrium of the IL-1 beta/IL-IRA ratio in an experimental model of perinatal brain damages induced by lipopolysaccharide and hypoxia-ischemia / S. Girard, H. Kadhim, A. Larouche, M. Roy, F. Gobeil, G. Sebire // Cytokine. - 2008. - Vol. 43. - No. 1. - P. 54-62.

65. Glowalla, E. Proteomics-Based Identification of Anchorless Cell Wall Proteins as Vaccine Candidates against Staphylococcus aureus / E. Glowalla, B. Tosetti, M. Kronke, O. Krut // Infection and Immunity. - 2009. - Vol. 77. - No. 7. - P. 27192729.

66. Gordon, R.J. Pathogenesis of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infection / R.J. Gordon, F.D. Lowy // Clin. Infect. Dis. - 2008. - Vol. 46. - Suppl. 5. -P. S350-S359.

67. Gorter, A. IgA- and secretory IgA-opsonized S. aureus induce a respiratory burst and phagocytosis by polymorphonuclear leucocytes / A. Gorter, P.S. Hiemstra, P.C.J. Leijh, M.E. van der Sluys, M.T. van der Barselaar, L.A. van Es, M.R. Daha // Immunology. - 1987. - Vol. 61. - P. 303-309.

68. Graham, I.L. Complement receptor 3 (CR3, Mac-1, integrin alpha M beta 2, CD1 lb/CD 18) is required for tyrosine phosphorylation of paxillin in adherent and nonadherent neutrophils / I.L. Graham, D.C. Anderson, V.M. Holers, E.J. Brown // J. Cell Biol. - 1994. - Vol. 127. - No. 4. - P. 1139-^7.

69. Graves, S.F. Relative contribution of Panton-Valentine leukocidin to PMN plasma membrane permeability and lysis caused by US A300 and USA400 culture supernatants / S.F. Graves, S.D. Kobayashi, K.R. Braughton, B.A. Diep, H.F.

Chambers, M. Otto, F.R. Deleo // Microbes Infect. - 2010 (6). - Vol. 12. - No. 6. - P. 446-56.

70. Graves, S.F. Community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus immune evasion and virulence / S.F. Graves, S.D. Kobayashi, F.R. DeLeo // J. Mol. Med. - 2010 (a). - Vol. 88. - No. 2. - P. 109-114.

71. Grumann, D. Immune cell activation by enterotoxin gene cluster (egc)-encoded and non-egc superantigens from Staphylococcus aureus / D. Grumann, S.S. Scharf, S. Holtfreter, C. Kohler, L. Steil, S. Engelmann, M. Hecker, U. Völker, B.M. Bröker // J. Immunol. - 2008. - Vol. 181. - No. 7. - P. 5054-61.

72. Häger, M. Neutrophil granules in health and disease / M. Häger, J.B. Cowland, N. Borregaard // Journal of Internal Medicine. - 2010. - Vol. 268. - P. 25-34.

73. Hampton, M.B. Involvement of superoxide and myeloperoxidase in oxygen-dependent killing of Staphylococcus aureus by neutrophils / M.B. Hampton, A.J. Kettle, C.C. Winterbourn // Infect Immun. - 1996. - Vol. 64. - No. 9. - P. 3512-7.

74. Hanselman, B.A. Coagulase positive staphylococcal colonization of humans and their household pets / B.A. Hanselman, S.A. Kruth, J. Rousseau, J.S. Weese // Can. Vet. J. - 2009. - Vol. 50. - No. 9. - P. 954-8.

75. Härter, L. Increased expression of toll-like receptor-2 and -4 on leukocytes from patients with sepsis / L. Härter, L. Mica, R. Stocker, O. Trentz, M. Keel // Shock. -2004. - Vol. 22. - No. 5. - P. 403^109.

76. Hauck, C.R. Sticky connections: extracellular matrix protein recognition and integrin-mediated cellular invasion by Staphylococcus aureus / C.R. Hauck, K. Ohlsen // Current Opinion in Microbiology. - 2006. - No. 9. - P. 5-11.

77. Hebert, G.A. Synergistic hemolysis exhibited by species of staphylococci / G.A. Hebert, G.A. Hancock // Journal of Clinical Microbiology. - 1985. - Vol. 22. -No. 3.-P. 409-415.

78. Heinzelmann, M. Heparin binding protein (CAP37) is an opsonin for Staphylococcus aureus and increases phagocytosis in monocytes / M. Heinzelmann, A. Platz, H. Flodgaard, F.N. Miller // Inflammation. - 1998. - Vol. 22. - No. 5. - P. 493507.

79. Holtfreter, S. Staphylococcal superantigens: do they play a role in sepsis / S. Holtfreter, B.M. Broker // Arch. Immunol. Ther. Exp. - 2005. - Vol. 53. - P. 13-27.

80. Holtfreter, S. Antibody responses in furunculosis patients vaccinated with autologous formalin-killed Staphylococcus aureus / S. Holtfreter, J. Jursa-Kulesza, H. Masiuk, N.J. Verkaik, C. de Vogel, J. Kolata, M. Nowosiad, L. Steil, W. van Wamel, A. van Belkum, U. Völker, S. Giedrys-Kalemba, B.M. Bröker // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. - 2011. - Vol. 30. - P. 707-717.

81. Hsueh, K.C. Transient hypogammaglobulinemia of infancy presenting as Staphylococcus aureus sepsis with deep neck infection / K.C. Hsueh, H.H. Chiu, H.C. Lin, C.H. Hsu, F.J. Tsai // J. Microbiol. Immunol. Infect. - 2005. - Vol. 38. - No. 2. -P. 141-4.

82. Hu, D.L. Intranasal vaccination with a double mutant of staphylococcal enterotoxin C provides protection against Staphylococcus aureus infection / D.L. Hu, K. Omoe, K. Narita, J.C. Cui, K. Shinagawa, A. Nakane // Microbes Infect. - 2006. - No. 14-15.-P. 2841-8.

83. Hu, D.L. Vaccination with nontoxic mutant toxic shock syndrome toxin 1 protects against Staphylococcus aureus infection / D.L. Hu, K. Omoe, S. Sasaki, H. Sashinami, H. Sakuraba, Y. Yokomizo, K. Shinagawa, A. Nakane // J. Infect. Dis. -2003. - Vol. 188. - No. 5. - P. 743-52.

84. Inoshima, I. A Staphylococcus aureus pore-forming toxin subverts the activity of ADAM10 to cause lethal infection /1. Inoshima, N. Inoshima, G.A. Wilke, M.E. Powers, K.M. Frank, Y. Wang, J.B. Wardenburg // Nature Medicine. - 2011. -Vol. 17.-P. 1310-1314.

85. Ishikawa, Y. Effect of particle size on phagocytosis of latex particles by guinea-pig polymorphonuclear leucocytes / Y. Ishikawa, N. Muramatsu, H. Ohshima, T. Kondo // J. Biomater. Sei. Polym. Ed. - 1991. -N 2 (1). - P. 53-60.

86. Islander, U. Superantigenic Staphylococcus aureus Stimulates Production of Interleukin-17 from Memory but Not Naive T Cells / U. Islander, A. Andersson, E. Lindberg, I. Adlerberth, A.E. Wold, A. Rudin // Infection and Immunity. - 2010. - Vol. 78.-No. 1.-P. 381-386.

87. Iwatsuki, K. Staphylococcal cutaneous infections: Invasion, evasion and aggression / K. Iwatsuki, O. Yamasaki, S. Morizane, T. Oono // Journal of Dermatological Science. - 2006. - Vol. 42. - P. 203-214.

88. Jarvis, W.R. National prevalence of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in inpatients at United States health care facilities / W.R. Jarvis, A.A. Jarvis, R.Y. Chinn // American Journal of Infection Control. - 2012. - Vol. 40. - No. 3. - P. 194-200.

89. Jett, B.D. Internalization of Staphylococcus aureus by human corneal epithelial cells: role of bacterial fibronectin-binding protein and host cell factors / B.D. Jett, M.S. Gilmore // Infect. Immun. - 2002. - Vol. 70. - No. 8. - P. 4697-700.

90. Kelly, J. Immunotherapy against antibiotic-resistant bacteria: the Russian experience with an antistaphylococcal hyperimmune plasma and immunoglobulin / J. Kelly // Microbes and Infection. - 2000. -N. 2. - P. 1383-1392.

91. Kim, H.K. Recurrent infections and immune evasion strategies of Staphylococcus aureus / H.K. Kim, V. Thammavongsa, O. Schneewind, D. Missiakas // Curr. Opin. Microbiol. -2012. - Vol. 15. -No. 1. -P. 92-9.

92. Kimura, M. Blocking of TNF-alpha and IL-1 inhibits leukocyte infiltration at early, but not at late stage of S. awrews-induced arthritis and the concomitant cartilage destruction in rabbits / M. Kimura, A. Matsukawa, S. Ohkawara, K. Takagi, M. Yoshinaga//Clin. Immunol. Immunopathol. 1997. - Vol. 82. - No. 1. - P. 18-25.

93. Kintarak, S. Internalization of Staphylococcus aureus by Human Keratinocytes / S. Kintarak, S.A. Whawell, P.M. Speight, S. Packer, S.P. Nair // Infection and Immunity. - 2004. - Vol. 72. - No. 10. - P. 5668-5675.

94. Kluytmans, J. Nasal Carriage of Staphylococcus aureus: Epidemiology, Underlying Mechanisms, and Associated Risks / J. Kluytmans, A. van Belkum, H. Verbrugh // CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS. - 1997. - Vol. 10. - No. 3. - P. 505-520.

95. Kobayashi, S.D. Rapid Neutrophil Destruction following Phagocytosis of Staphylococcus aureus / S.D. Kobayashi, K.R. Braughton, A.M. Palazzolo-Ballance, A.D. Kennedy, E. Sampaio, E. Kristosturyan, A.R. Whitney, D.E. Sturdevant, D.W.

Dorward, S.M. Holland, B.N. Kreiswirth, J.M. Musser, F.R. DeLeo // J. Innate Immun. - 2010. - No. 2. - P. 560-575.

96. Kooistra-Smid, M. The role of nasal carriage in Staphylococcus aureus burn wound colonization / M. Kooistra-Smid, M. Nieuwenhuis, A. van Belkum, H. Verbrugh // FEMS Immunol. Med. Microbiol. - 2009. - Vol. 57. - P. 1-13.

97. Krishna, S. Innate and adaptive immune responses against Staphylococcus aureus skin infections / S. Krishna, L.S. Miller // Semin. Immunopathol. - 2012. - Vol. 34./-No. 2.-P. 261-80.

98. Laguna-Del Estal, P. [Comparative study of meningitis due to Staphylococcus aureus and coagulase-negative Staphylococci in adults] / P. LagunaDel Estal, A. Castañeda-Pastor, M. Gil-Navarro, R. García-Madero, M. López-Cano Gómez, M. Agud-Fernández // Rev. Neurol. - 2009. - Vol. 48. - No. 1. - P. 2-6.

99. Langereis, J.D. Steroids induce a disequilibrium of secreted interleukin-1 receptor antagonist and interleukin-1 P synthesis by human neutrophils / J.D. Langereis, E.J. Oudijk, R.C. Schweizer, J.W. Lammers, L. Koenderman, L.H. Ulfman // Eur. Respir. J. - 2011. - Vol. 37. - No. 2. - P. 406-15.

100. Lee, J.C. Protective Efficacy of Antibodies to the Staphylococcus aureus Type 5 Capsular Polysaccharide in a Modified Model of Endocarditis in Rats / J.C. Lee, J.-S. Park, S.E. Shepherd, V. Carey, A. Fattom // Infection and Immunity. - 1997. -Vol. 65.-No. 10.-P. 4146-4151.

101. Leijh, P.C.J. Kinetics of phagocytosis of Staphylococcus aureus and Escherichia coli by human granulocytes / P.C.J. Leijh, Th.M. van den Barselaar, Th.L. van Zwet, I. Dubbeldeman-Rempt, R. van Furth // Immunology. - 1979. - № 37. - P. 453-464.

102. Lekstrom-Himes, J.A. Immunodeficiency diseases caused by defects in phagocytes / J.A. Lekstrom-Himes, J.I. Gallin // The New England Journal of Medicine. - 2000. - Vol. 343(23). - P. 1703-1714.

103. Lina, G. Bacterial Competition for Human Nasal Cavity Colonization: Role of Staphylococcal agr Alleles / G. Lina, F. Boutite, A. Tristan, M. Bes, J. Etienne, F. Vandenesch // Applied and Enviromental Microbiology. - 2003. - Vol. 69. - No. 1. - P.

18-23.

104. Liu, G.Y. Staphylococcus aureus golden pigment impairs neutrophil killing and promotes virulence through its antioxidant activity / G.Y. Liu, A. Essex, J.T. Buchanan, V. Datta, H.M. Hoffman, J.F. Bastian, J. Fierer, V. Nizet // The Journal of Experimental Medicine. - 2005. - Vol. 202. - No. 2. - P. 209-215.

105. Livingston, D.H. The effect of tumor necrosis factor-alpha and interferon-gamma on neutrophil function / D.H. Livingston, S.H. Appel, G. Sonnenfeld, M.A. Malangoni // J. Surg. Res. - 1989. - Vol. 46. - No. 4. - P. 322-6.

106. Lorenz, H.M. In vivo blockade of TNF-alpha by intravenous infusion of a chimeric monoclonal TNF-alpha antibody in patients with rheumatoid arthritis. Short term cellular and molecular effects / H.M. Lorenz, C. Antoni, T. Valerius, R. Repp, M. Grunke, N. Schwerdtner, H. Nusslein, J. Woody, J.R. Kalden, B. Manger // J. Immunol. - 1996.-Vol. 156.-No. 4.-P. 1646-53.

107. Marques, L.J. Pentoxifylline Inhibits TNF-a Production from Human Alveolar Macrophages / L.J. Marques, L. Zheng, N. Poulakis, J. Guzman, U. Costabel // Am. J. Respir. Crit. Care. Med. - 1999. - Vol. 159. - P. 508-511.

108. Marsh, C.B. Fc gamma receptor cross-linking down-regulates IL-1 receptor antagonist and induces IL-1 beta in mononuclear phagocytes stimulated with endotoxin or Staphylococcus aureus / C.B. Marsh, H.A. Pope, M.D. Wewers 11 J. Immunol. -1994. - Vol. 152. - No. 9. - P. 4604 -11.

109. Matsukawa, A. Analysis of the inflammatory cytokine network among TNF alpha, IL-1 beta, IL-1 receptor antagonist, and IL-8 in LPS-induced rabbit arthritis / A. Matsukawa, T. Yoshimura, K. Miyamoto, S. Ohkawara, M. Yoshinaga // Lab. Invest. - 1997. - Vol. 76. - No. 5. - P. 629-638.

110. May, A.K. Skin and Soft Tissue Infections: The New Surgical Infection Society Guidelines / A.K. May // Surgical Infections. - 2011. - Vol. 12. - No. 3. - P. 179-184.

111. Mempel, M. Invasion of human keratinocytes by Staphylococcus aureus and intracellular bacterial persistence represent haemolysinindependent virulence mechanisms that are followed by features of necrotic and apoptotic keratinocyte cell

death / M. Mempel, C. Schnopp, M. Hojka, H. Fesq, S. Wetdinger, M. Schaller, H.C. Korting, J. Ring, D. Abeck // British Journal of Dermatology. - 2002. - Vol. 146. - P. 943-951.

112. Middleton, J.R. Staphylococcus aureus antigens and challenges in vaccine development / J.R. Middleton // Expert Rev. Vaccines. - 2008. - Vol. 7(6). P. 805-815.

113. Miller, L.S. Immunity against Staphylococcus aureus cutaneous infections / L.S. Miller, J.S. Cho // Nature Reviews Immunology. - 2011. - Vol. 11. - P. 505-518.

114. Molne, L. Role of neutrophil leukocytes in cutaneous infection caused by Staphylococcus aureus i L. Molne, M. Verdrengh, A. Tarkowski // Infection and immunity. - 2000. - Vol. 68(11). - P. 6162-6167.

115. Munro, C.S. Assessment of biological activity of immunoglobulin preparation by using opsonized micro-organisms to stimulate neutrophil chemiluminescence / C.S. Munro, P.J. Stanley, P.J. Cole // Clin. exp. Immunol. - 1985. -Vol. 61.-P. 183-188.

116. Murphy, T.F. Microbial interactions in the respiratory tract / T.F. Murphy, L.O. Bakaletz, P.R. Smeesters // Pediatr. Infect. Dis. J. - 2009. - Vol. 28 - No. 10. - P. S121-S126.

117. Nagy, Z.N. Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis strains differ in interleukin 2 inducing activity / Z.N. Nagy, I. Rosztoczy // Acta Microbiol. Hung. - 1988. - Vol. 35. - No. 4. - P. 379-82.

118. Narita, K. Intranasal immunization of mutant toxic shock syndrome toxin 1 elicits systemic and mucosal immune response against Staphylococcus aureus infection / K. Narita, D.-L. Hu, T. Tsuji, A. Nakane // FEMS Immunol. Med. Microbiol. - 2008. -Vol. 52.-P. 389-396.

119. Nathan, C. Points of control in inflammation / C. Nathan // Nature. - 2002. -Vol.420.-P. 846-852.

120. Negi, V.-S. Intravenous Immunoglobulin: An Update on the Clinical Use and Mechanisms of Action / V.-S. Negi, S. Elluru, S. Siberil, S. Graff-Dubois, L. Mouthon, M.D. Kazatchkine, S. Lacroix-Desmazes, J. Bayry, S.V. Kaveri // Journal of Clinical Immunology. - 2007. - Vol. 27. - No. 3. - P. 233-245.

121. Nelson, R.D. Chemiluminescence response of phagocytizing human monocytes / R.D. Nelson, E.L. Mills, R.L. Simmons, P.G. Quie // Infection and immunity.-1976.-Vol. 14.-No. l.-P. 129-134.

122. Neuner, P. Pentoxifylline in vivo down-regulates the release of IL-lß, IL-6, IL-8 and tumour necrosis factor-a by human peripheral blood mononuclear cells / P. Neuner, G. Klosner, E. Schauer, M. Pourmojib, W. Macheiner, C. Grunwald, R. Knobler, A. Schwarz, T. A. Luger, T. Schwarz // Immunology. - 1994. - Vol. 83. - P. 262-267.

123. Nilsson, I.-M. Protection against Staphylococcus aureus Sepsis by Vaccination with Recombinant Staphylococcal Enterotoxin A Devoid of Superantigenicity / I.-M. Nilsson, M. Verdrengh, R.G. Ulrich, S. Bavari, A. Tarkowski // The Journal of Infectious Diseases. - 1999. - Vol. 180. - P. 1370-3.

124. Nimmerjahn, F. Anti-Inflammatory Actions of Intravenous Immunoglobulin / F. Nimmerjahn, J.V. Ravetch // Annu. Rev. Immunol. - 2008. - Vol. 26.-P. 513-33.

125. Niyonsaba, F. Protective roles of the skin against infection: implication of naturally occurring human antimicrobial agents beta-defensins, cathelicidin LL-37 and lysozyme / F. Niyonsaba, H. Ogawa // J. Dermatol. Sei. - 2005. - Vol. 40. - No. 3. - P. 157-68.

126. Noskin, G.A. National trends in Staphylococcus aureus infection rates: impact on economic burden and mortality over a 6-year period (1998-2003) / G.A. Noskin, RJ. Rubin, J.J. Schentag, J. Kluytmans, E.C. Hedblom, C. Jacobson, M. Smulders, E. Gemmen, M. Bharmal // Clin. Infect. Dis. - 2007. - Vol. 45. - No. 9. - P. 1132-40.

127. Ochs, H.D. TH17 Cells and Regulatory T cells in Primary Immunodeficiency Diseases / H.D. Ochs, M. Oukka, T.R. Torgerson // J. Allergy Clin. Immunol. -2009. - Vol. 123. - No. 5. - P. 977-985.

128. Oh, H.M. Infections in systemic lupus erythematosus / H.M. Oh, H.H. Chng, M.L. Boey, P.H. Feng // Singapore Med. J. - 1993. - Vol. 34. - No. 5. - P. 4068.

I3U. Ulaiwan, A. UutäneöüS IlMlflgg in spüMüKJ äflU milllliai auiUbUiiidi dominant hyper-IgE syndrome: a retrospective, single-center study of 21 patients diagnosed using molecular analysis / A. Olaiwan, M.O. Chandesris, S. Fraitag, O. Lortholary, O. Hermine, A. Fischer, Y. de Prost, C. Picard, C. Bodemer // J. Am. Acad. Dermatol. - 2011. - Vol. 65. - No. 6. - P. 1167-72.

131. Olaru, F. Staphylococcus aureus Stimulates Neutrophil Targeting Chemokine Expression in Keratinocytes through an Autocrine IL-la Signaling Loop /

F. Olaru, L.E. Jensen // Journal of Investigative Dermatology. - 2010. - Vol. 130. - P. 1866-1876.

132. Palazzolo-Balance, A.M. Neutrophil microbicides induce a pathogen survival response in community-associated methicillin-resistant Staphylococcus aureus / A.M. Palazzolo-Ballance, M.L. Reniere, K.R. Braughton, D.E. Sturdevant, M. Otto, B.N. Kreiswirth, E.P. Skaar, F.R. DeLeo // J. Immunol. - 2008. - Vol. 180. - No. 1. -P. 500-9.

133. Pease, L.F. Determination of Protein Aggregation With Differential Mobility Analysis: Application to IgG Antibody / L.F. Pease, J.T. Elliott, D.H. Tsai, M.R. Zachariah, M.J. Tarlov // Biotechnol. Bioeng. - 2008. - Vol. 101. - P. 1214-1222.

134. Pellegrini, G. Expression, Topography, and Function of Integrin Receptors Are Severely Altered in Keratinocytes from Involved and Uninvolved Psoriatic Skin /

G. Pellegrini, M. De Luca, G. Orecchia, F. Balzac, O. Cremona, P. Savoia, R. Cancedda, P.C. Marchisio // J. Clin. Invest. - 1992. - Vol. 89. - P. 1783-1795.

135. Peterson, P.K. The key role of peptidoglycan in the opsonization of Staphylococcus aureus / P.K. Peterson, B.J. Wilkinson, Y. Kim, D. Schmeling, S.D. Douglas, P.G. Quie, J. Verhoef// J. Clin. Investig. - 1978. - Vol. 61. - P. 597-609.

136. Phakade, R.S. Is methicillin-resistant Staphylococcus aureus involved in community acquired skin and soft tissue infections?: Experience from a tertiary care centre in Mumbai / R.S. Phakade, G. Nataraj, S.K. Kuyare, U.S. Khopkar, P.R. Mehta //

129. Okapa, R. Septic complications after multilocal fractures and multiple traumatic injury / R. Okapa, S. Rak, J. Wenda, W. Marczynski, P. Walczak, J. Macias // Chir. Narzadow. Ruchu. Ortop. Pol. - 2011. - Vol. 76. - No. 4. - P. 214-8.

J. Postgrad. Med. - 2012. - Vol. 58. - P. 3-7.

137. Picard, C. Infectious Diseases in Patients with IRAK-4, MyD88, NEMO, or IicBa Deficiency / C. Picard, J.-L. Casanova, A. Puel // Clinical Microbiology Reviews. - 2011. - Vol. 24. - No. 3. - P. 490—497.

138. Pliyev, B.K. Urokinase receptor (uPAR) regulates complement receptor 3 (CR3)-mediated neutrophil phagocytosis / B.K. Pliyev, T.I. Arefieva, M.Yu. Menshikov // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 2010. - Vol. 397. - P. 277-282.

139. Pott, G.B. Alpha-1-antitrypsin is an endogenous inhibitor of proinflammatory cytokine production in whole blood / G.B. Pott, E.D. Chan, C.A. Dinarello, L. Shapiro // J. Leukoc. Biol. - 2009. - Vol. 85. - No. 5. - P. 886-95.

140. Pozzi, C. Opsonic and Protective Properties of Antibodies Raised to Conjugate Vaccines Targeting Six Staphylococcus aureus Antigens / C. Pozzi, K. Wilk, J.C. Lee, M. Gening, N. Nifantiev, G.B. Pier // PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7. - No. 10.

141. Projan, S.J. Staphylococcal vaccines and immunotherapy: to dream the impossible dream? / S.J. Projan, M. Nesin, P.M. Dunman // Current Opinion in Pharmacology. - 2006. - Vol. 6. - P. 473-479.

142. Prokesova, L. Class IgG, IgM and IgA antibodies against Staphylococcus aureus antigens in human serum and saliva / L. Prokesova, D.H. Dung, M. Jilek, Z. Vancikova, O. Lochmann, M. Mara, M. Bednar, C. John // Folia Microbiol. (Praha). -1991. - Vol. 36. - No. 5. - P. 502-6.

143. Pross, H. In vitro Stuides of 'Antigenic Competition' II. Reconstitution of the immune defect and the relationship between antigeninduced supression and nonspecific enhancement / H. Pross, D. Eidinger // Immunology. - 1973. - Vol. 25. - P. 269.

144. Quie, P.G. Clinical conditions associated with defective polymorphonuclear leukocyte chemotaxis / P.G. Quie, K.L. Cates // Am. J. Pathol. -1977. - Vol. 88(3). - P. 711-725.

145. Rao, S.B. Risk factors for surgical site infections following spinal fusion procedures: a case-control study / S.B. Rao, G. Vasquez, J. Harrop, M. Maltenfort, N.

Stein, G. Kaliyadan, F. Klibert, R. Epstein, A. Sharan, A. Vaccaro, P. Flomenberg // Clin. Infect. Dis. - 2011. - Vol. 53. - No. 7. - P. 686-92.

146. Rasmussen, R.V. One-year mortality in coagulase-negative Staphylococcus and Staphylococcus aureus infective endocarditis / R.V. Rasmussen, U. Snygg-Martin, L. Olaison, R. Andersson, K. Buchholtz, C.T. Larsen, T.F. Hansen, L. Kober, C. Hassager, N.E. Bruun // Scand. J. Infect. Dis. - 2009. - Vol. 41. - No. 6-7. - P. 456-61.

147. Regev-Yochay, G. Association Between Carriage of Streptococcus pneumoniae and Staphylococcus aureus in Children / G. Regev-Yochay, R. Dagan, M. Raz, Y. Carmeli, B. Shainberg, E. Derazne, G. Rahav, E. Rubinstein // JAMA. - 2004. -Vol. 292.-P. 716-720.

148. Rigby, K.M. Neutrophils in innate host defense against Staphylococcus aureus infections / K.M. Rigby, F.R. DeLeo // Semin. Immunopathol. - 2012. - Vol. 34.-P. 237-259.

149. Rivas-Fuentes, S. Fey receptors exhibit different phagocytosis potential in human neutrophils / S. Rivas-Fuentes, E. García-García, G. Nieto-Castañeda, C. Rosales // Cellular Immunology. - 2010. - Vol. 263. - P. 114-121.

150. Rozalska, B. Protective opsonic activity of antibodies against fibronectin-binding proteins (FnBPs) of Staphylococcus aureus / B. Rozalska, T. Wadstrom // Scand. J. Immunol. - 1993. - Vol. 37. - No. 5. - P. 575-80.

151. Schutze, G.E. Role of neutrophil receptors in opsonophagocytosis of coagulase-negative staphylococci / G.E. Schutze, M.A. Hall, C.J. Baker, M.S. Edwards // Infect. Immun. - 1991. - Vol. 59. - No. 8. - P. 2573-8.

152. Scribner, D.J. Neutrophil receptors for IgG and complement: their roles in the attachment and ingestion phases of phagocytosis / D.J. Scribner, D. Fahrney // J. Immunol. - 1976. - Vol. 116. - No. 4. - P. 892-7.

153. Segal, B.H. Chronic granulomatous disease: lessons from a rare disorder / B.H. Segal, P. Veys, H. Malech, M.J. Cowan // Blood Marrow Transplant. - 2011.

154. Seim, S. Role of myeloperoxidase in luminoldependent chemiluminescence response of phagocytosing human monocytes / S. Seim // Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. - 1983. - Vol. 91. - No. 2. - P. 123-128.

155. Sheppard, F.R. Structural organization of the neutrophil NADPH oxidase: phosphorylation and translocation during priming and activation / F.R. Sheppard, M.R. Kelher, E.E. Moore, N.J.D. McLaughlin, A. Banerjee, C.C. Silliman // J. Leukoc. Biol. - 2005. - Vol. 78. - P. 1025-1042.

156. Shingu, M. Increased IL-1 receptor antagonist (IL-IRA) production and decreased IL-1 beta/IL-IRA ratio in mononuclear cells from rheumatoid arthritis patients / M. Shingu, Y. Fujikawa, T. Wada, S. Nonaka, M. Nobunaga // Br. J. Rheumatol. 1995 Jan;34(l):24-30.

157. Shitaye, D. Risk factors and etiology of neonatal sepsis in Tikur Anbessa University Hospital, Ethiopia / D. Shitaye, D. Asrat, Y. Woldeamanuel, B. Worku // Ethiop.MedJ.-2010.-Vol. 48.-No. l.-P. 11-21.

158. Simor, A.E. Staphylococcal decolonisation: an effective strategy for prevention of infection? / A.E. Simor // Lancet. Infect. Dis. - 2011. - Vol. 11. - No. 12. -P. 952-62.

159. Singh, B.R. Antigenic competition among different 'O' antigens of Salmonella enterica subspecies enterica serovars during hyperimmunization in pony mares / B.R. Singh, M. Chandra, R.K. Agrawal, B. Nagrajan // Indian. J. Exp. Biol. -2006. - Vol. 44, N 12. - P. 1022-1025.

160. Sinha, B. Fibronectin-binding protein acts as Staphylococcus aureus invasin via fibronectin bridging to integrin alpha5betal / B. Sinha, P.P. François, O. Nusse, M. Foti, O.M. Hartford, P. Vaudaux, T.J. Foster, D.P. Lew, M. Herrmann, K.H. Krause // Cell Microbiol. - 1999. - Vol. 1. - No. 2. - P. 101-17.

161. Sinha, B. Staphylococcus aureus host cell invasion and post-invasion events / B. Sinha, M. Fraunholz // International Journal of Medical Microbiology. -2010. - Vol. 300. - P. 170-175.

162. Skurnik, D. Natural Antibodies in Normal Human Serum Inhibit Staphylococcus aureus Capsular Polysaccharide Vaccine Efficacy / D. Skurnik, A. Kropec, D. Roux, C. Theilacker, J. Huebner, G.B. Pier // Clin Infect Dis. - 2012. -[Epub ahead of print].

163. Skurnik, D. Animal and human antibodies to distinct Staphylococcus

aureus antigens mutually neutralize opsonic killing and protection in mice / D. Skurnik, M. Merighi, M. Grout, M. Gadjeva, T. Maira-Litran, M. Ericsson, D.A. Goldmann, S.S. Huang, R. Datta, J.C. Lee, G.B. Pier // J. Clin. Invest. - 2010. - Vol. 120. - No. 9. - P. 3220-33.

164. Skvaril, F. IgG subclasses in human gamma-globulin preparations for intravenous use and their reactivity with staphylococcus protein A / F. Skvaril, B. Roth-Wicky, S. Barandun // Vox. Sang. - 1980. - Vol. 38. - No. 3. - P. 147-55.

165. Smith, E.J. The Sbi protein is a multifunctional immune evasion factor of Staphylococcus aureus / E.J. Smith, L. Visai, S.W. Kerrigan, P. Speziale, T.J. Foster // Infect. Immun. - 2011. - Vol. 79. - No. 9. - P. 3801-9.

166. Soong, G. Staphylococcus aureus protein A mediates invasion across airway epithelial cells through activation of RhoA GTPase signaling and proteolytic activity / G. Soong, F.J. Martin, J. Chun, T.S. Cohen, D.S. Ahn, A. Prince // J. Biol. Chem. - 2011. - Vol. 286. - No. 41. - 35891-8.

167. Spika, J.S. Protein A Effect on Alternative Pathway Complement Activation and Opsonization of Staphylococcus aureus / J.S. Spika, H.A. Verbrugh, J. Verhoef// INFECTION AND IMMUNITY. - 1981. - Vol. 34. - No. 2. - P. 455^460.

168. Stranger-Jones, Y.K. Vaccine assembly from surface proteins of Staphylococcus aureus / Y.K. Stranger-Jones, T. Bae, O. Schneewind // PNAS. - 2006. -Vol. 103.-No. 45.-P. 16942-16947.

169. Stuyt, RJ. Differential roles of interleukin-18 (IL-18) and IL-12 for induction of gamma interferon by staphylococcal cell wall components and superantigens / R.J. Stuyt, M.G. Netea, S.H. Kim, D. Novick, M. Rubinstein, B.J. Kullberg, J.W. Van der Meer, C.A. Dinarello // Infect. Immun. - 2001. - Vol. 69. - No. 8.-P. 5025-30.

170. Swaak, A.J.G. Cytokine production in whole blood cell cultures of patients with rheumatoid arthritis / A.J.G. Swaak, H.G. van den Brink, L.A. Aarden // Annals of the Rheumatic Diseases. - 1997. - Vol. 56. - P. 693-695.

171. Szejda, P. Flow cytometric quantitation of oxidative product formation by polymorphonuclear leukocytes during phagocytosis / P. Szejda, J.W. Parce, M.S. Seeds,

D.A. Bass // J. Immunol. - 1984. - Vol. 133. - No. 6. - P. 3303-7.

172. Tay, S.P. Flow cytometric analysis of intracellular myeloperoxidase distinguishes lymphocytes, monocytes and granulocytes / S.P. Tay, S.K. Cheong, N.H. Hamidah, O. Ainoon // Malays J. Pathol. - 1998. - Vol. 20. - No. 2. - P. 91^1.

173. Tejada Artigas, A. Risk factors for nosocomial pneumonia in critically ill trauma patients / A. Tejada Artigas, S. Bello Dronda, E. Chacón Vallès, J. Muñoz Marco, M.C. Villuendas Usón, P. Figueras, F.J. Suarez, A. Hernández // Crit. Care. Med. - 2001. - Vol. 29. - No. 2. - P. 304-9.

174. Thornsberry, C. Epidemiology of staphylococcal infections — a USA perspective/C. Thornsberry//J. Chemother. - 1994.-Vol. 6.-No. 2.-P. 61-5.

175. Tkaczyk, C. Identification of anti-alpha toxin monoclonal antibodies that reduce the severity of Staphylococcus aureus dermonecrosis and exhibit a correlation between affinity and potency / C. Tkaczyk, L. Hua, R. Varkey, Y. Shi, L. Dettinger, R. Woods, A. Barnes, R.S. MacGill, S. Wilson, P. Chowdhury, C.K. Stover, B.R. Sellman // Clin. Vaccine. Immunol. - 2012. - Vol. 19. - No. 3. - P. 377-85.

176. Trakultivakorn, M. X-Linked Agammaglobulinemia in Northern Thailand / M. Trakultivakorn, H.D. Ochs // Asian Pacific Journal of Allergy and Immunology. -2006.-Vol. 24.-P. 57-63.

177. Tufano, M.A. Protein A and other surface components of Staphylococcus aureus stimulate production of IL-1 alpha, IL-4, IL-6, TNF and IFN-gamma / M.A. Tufano, G. C. de l'Ero, R. Ianniello, M. Galdiero, F. Galdiero // Eur. Cytokine. Netw. -1991. - Vol. 2. - No. 5. - P. 361-6.

178. Valderas, M.W. Identification and characterization of a second superoxide dismutase gene (sodM) from Staphylococcus aureus / M.W. Valderas, M.E. Hart // J. Bacteriol.-2001.-Vol. 183.-Vol. 11.-P. 3399-407.

179. Verhoef, J. Opsonic requirement for staphylococcal phagocytosis. Heterogeneity among strains / J. Verhoef, P.K. Peterson, Y. Kim, L.D. Sabath, P.G. Quie // Immunology. - 1977. - Vol. 33. - P. 191.

180. Voyich, J.M. Insights into Mechanisms Used by Staphylococcus aureus to Avoid Destruction by Human Neutrophils / J.M. Voyich, K.R. Braughton, D.E.

Sturdevant, A.R. Whitney, B. Sai'd-Salim, S.F. Porcella, R.D. Long, D.W. Dorward, D.J. Gardner, B.N. Kreiswirth, J.M. Musser, F.R. DeLeo // The Journal of Immunology.

- 2005. - Vol. 175. - P. 3907-3919.

181. Wang, F.D. Risk factors and mortality of nosocomial infections of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in an intensive care unit / F.D. Wang, Y.Y. Chen, T.L. Chen, Y.T. Lin, C.P. Fung // J. Crit. Care. - 2011. - Vol. 26. - No. 1. - P. 82-8.

182. Ward, R.A. Priming of the neutrophil respiratory burst involves p38 mitogen-activated protein kinase-dependent exocytosis of flavocytochrome b558-containing granules / R.A. Ward, M. Nakamura, K.R. McLeish // J. Biol. Chem. - 2000.

- Vol. 275. - No. 47. - P. 36713-9.

183. Wardenburg, J.B. Vaccine protection against Staphylococcus aureus pneumonia / J.B. Wardenburg, O. Schneewind // JEM. - 2008. - Vol. 205. - No. 2. - P. 287-294.

184. Weems, J J Jr. Phase II, randomized, double-blind, multicenter study comparing the safety and pharmacokinetics of tefibazumab to placebo for treatment of Staphylococcus aureus bacteremia / J.J.Jr. Weems, J.P. Steinberg, S. Filler, J.W. Baddley, G.R. Corey, P. Sampathkumar, L. Winston, J.F. John, C.J. Kubin, R. Talwani, T. Moore, J.M. Patti, S. Hetherington, M. Texter, E. Wenzel, V.A. Kelley, V.G.Jr. Fowler // Antimicrob. Agents Chemother. - 2006. - Vol. 50. - No. 8. - P. 2751-5.

185. Weidenmaier, C. Differential roles of sortase-anchored surface proteins and wall teichoic acid in Staphylococcus aureus nasal colonization / C. Weidenmaier, J.F Kokai-Kun., E. Kulauzovic, T. Kohler, G. Thumm, H. Stoll, F. Götz, A. Peschel // Int. J. Med. Microbiol. - 2008. - Vol. 298. - No. 5-6. - P. 505-13.

186. Weigelt, J.A. Surgical site infections: Causative pathogens and associated outcomes / J.A. Weigelt, B.A. Lipsky, Y.P. Tabak, K.G. Derby, M. Kim, V. Gupta // Am. J. Infect. Control. - 2010. - Vol. 38. - No. 2. - P. 112-20.

187. Whitby, M. Risk of death from methicillin-resistant Staphylococcus aureus bacteraemia: a meta-analysis / M. Whitby, M.L. McLaws, G. Berry // Med. J. Aust. -2001.-Vol. 175.-No. 5.-P. 264-7.

188. White, A. Diagnostic and therapeutic significance of staphylococcal teichoic acid antibodies / A. White, L.J. Wheat, R.B. Kohler // Scand. J. Infect. Dis. Suppl. - 1983. — No. 41. - P. 105-16.

189. Williams, A.J. Factor affecting the in vitro assessment of opsonization: a study of the kinetics of opsonization using the technique of phagocytic chemiluminescence / A.J. Williams, M.J.G. Hastings, C.S.F. Easmon, P.J. Cole // Immunology. - 1980. - Vol. 41. - P. 903-911.

190. Yamada, S. Chemiluminescence response of human phagocytes against IgG-opsonized staphylococci with and without protein A activities / S. Yamada // Microbiol. Immunol. - 1990. - Vol. 34. - No. 3. - P. 221-229.

191. Yanagisawa, C. Neutralization of staphylococcal exotoxins in vitro by human-origin intravenous immunoglobulin / C. Yanagisawa, H. Hanaki, T. Natae, K. Sunakawa // J. Infect. Chemother. - 2007. - 13. - 368-372.

192. Yoong, P. Enhancement of bacterial virulence by antibody neutralization of immune-activating toxins / P. Yoong // Virulence. - 2010. - Vol. 1. - No. 5. - P. 409413.

193. Youn, J.H. Prevalence and antimicrogram of Staphylococcus intermedius group isolates from veterinary staff, companion animals, and the environment in veterinary hospitals in Korea / J.H. Youn, J.W. Yoon, H.C. Koo, S.K. Lim, Y.H. Park // J. Vet. Diagn. Invest. - 2011. - Vol. 23. - No. 2. - P. 268-74.

194. Zinkernagel, A.S. Staphylococcus aureus: A Blemish on Skin Immunity / A.S. Zinkernagel, V. Nizet // Cell Host & Microbe. - 2007. - Vol. 1. - P. 161-162.

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА

Рисунок 1. Применение метода проточной цитометрии для анализа поглощения лейкоцитами периферической крови FITC-меченого S. aureus....................................................................................................................44

Рисунок 2. Содержание белка в супернатанте после инкубации

стафилококков в растворе НИ...........................................................................46

Рисунок 3. Поглощение неопсонизированного S. aureus Cowan I

гранулоцитами и моноцитами...........................................................................48

Рисунок 4. Влияние опсонизации S. aureus Cowan I нормальным иммуноглобулином на показатели поглощения гранулоцитов и моноцитов............................................................................................................50

Рисунок 5. Поглощение неопсонизированного S. aureus Wood 46 и S. aureus

Cowan I гранулоцитами периферической крови.............................................53

Рисунок 6. Интенсивность поглощения гранулоцитами S. aureus Wood 46 и S. aureus Cowan I, опсонизированных антистафилококковым и нормальным иммуноглобулинами....................................................................55

Рисунок 7. Спектротурбидиметрические показатели суспензий неопсонизированного и опсонизированного АСИ и НИ S. aureus Wood 46...........................................................................................................................60

Рисунок 8. Люминолзависимая хемилюминесценция лейкоцитов,

стимулированных 108 кл/мл S. aureus Wood 46 и S. aureus Cowan 1.............61

Рисунок 9. Содержание TNF-a, IL-lß и IL-1RA в супернатантах суточных

культур клеток крови, активированных S. aureus Cowan 1.............................69

Рисунок 10. Содержание TNF-a, IL-lß и IL-IRA в супернатантах суточных

культур крови, активированных LPS, РНА и зимозаном...............................71

Рисунок 11. Влияние супернатантов суточных культур крови, инкубированных с 108 кл/мл S. aureus Cowan I или без стимулятора, на уровень ИПП гранулоцитов и моноцитов периферической крови в

о

присутствии 10 кл/мл S. aureus Cowan 1..........................................................75

Рисунок 12. Влияние супернатантов суточных культур крови на уровень

q

ЛЗХЛ лейкоцитов в присутствии 10 кл/мл S. aureus Cowan I......................77

Рисунок 13. Влияние различных объектов фагоцитоза на ЛЗХЛ лейкоцитов.......79

Таблица 1 - Результаты дисперсионного анализа влияния опсонизации S. aureus Cowan I нормальным иммуноглобулином и концентрации бактерий на И1111 гранулоцитов........................................................................52

Таблица 2 - Результаты дисперсионного анализа влияния опсонизации S. aureus Cowan I нормальным иммуноглобулином и концентрации бактерий на И1111 моноцитов.............................................................................52

Таблица 3 - Результаты дисперсионного анализа влияния опсонизации S. aureus Wood 46 антистафилококковым иммуноглобулином и концентрации бактерий на И1111 гранулоцитов...............................................55

Таблица 4 - Результаты дисперсионного анализа влияния опсонизации S. aureus Wood 46 нормальным иммуноглобулином и концентрации бактерий на ИПП гранулоцитов........................................................................56

Таблица 5 - Результаты дисперсионного анализа влияния опсонизации S. aureus Cowan I антистафилококковым иммуноглобулином и концентрации бактерий на ИПП гранулоцитов...............................................57

Таблица 6 — Результаты дисперсионного анализа влияния типа опсонинизирующих иммуноглобулинов и концентрации S. aureus Wood 46 на ИПП гранулоцитов.........................................................................59

Таблица 7 — Результаты дисперсионного анализа влияния типа опсонинизирующих иммуноглобулинов и концентрации S. aureus Cowan I на ИПП гранулоцитов..........................................................................59

Таблица 8 - Продукция цитокинов в суточных культурах цельной крови,

стимулированых S. aureus Cowan 1....................................................................72

Таблица 9 - Продукция цитокинов в суточных культурах цельной крови,

стимулированых липополисахаридом...............................................................73

Таблица 10 — Продукция цитокинов в суточных культурах цельной крови,

стимулированых фитогемагглютинином..........................................................73

Таблица 11 - Продукция цитокинов в суточных культурах цельной крови,

стимулированых неопсонизированным зимозаном.........................................73

Таблица 12 - Результаты дисперсионного анализа влияния СНК и САК на

о

ИПП гранулоцитов в присутствии 10 кл/мл S. aureus Cowan 1.....................75