Цитоморфологическая характеристика изменений кроветворной ткани до и после эпигенетического и цитостатического воздействия у больных миелодиспластическими синдромами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат наук Двирнык, Валентина Николаевна

• Двирнык, Валентина Николаевна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Двирнык, Валентина Николаевна

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений................................................................2

Введение................................................................................7

ГЛАВА 1. Обзор литературы.................................................12

1.1. Классификация и прогностические критерии МДС................12

1.2. Цитологическая диагностика МДС.....................................16

1.3. Гистологическая диагностика МДС....................................21

1.4. Роль гиперметилирования при эпигенетических нарушениях у больных МДС...........................................................................27

1.5. Морфологическая картина кроветворной ткани у больных миелодиспластическими синдромами при современной терапии............30

1.5.1. Морфологическая картина кроветворной ткани у больных миелодиспластическими синдромами при эпигенетической терапии.......30

1.5.2. Морфологическая картина кроветворной ткани у больных миелодиспластическими синдромами при аллогенной трансплантации гемопоэтических кроветворных стволовых клеток..............................33

1.5.3. Вторичный дисмиелопоэз у больных миелодиспластическими синдромами..............................................................................35

ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования........................50

2.1. Больные, включенные в исследование.................................50

2.1.1. Больные миелодиспластическими синдромами, обследованные в период проведения эпигенетической терапии децитабином (1 группа)...50

2.1.2. Больные миелодиспластическими синдромами, обследованные на различных этапах аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (2 группа)..........................................................54

2.1.3. Доноры гемопоэтических стволовых клеток.......................56

2.2. Диагностические критерии...............................................56

2.3. Методы исследования.....................................................57

2.3.1. Методы цитологического исследования............................57

2.3.2. Методы гистологического исследования...........................59

5

2.4. Сроки обследования больных..........................................61

2.4.1. Больные миелодиспластическими синдромами, обследованные в период проведения эпигенетической терапии (1 группа)....................61

2.4.2. Больные миелодиспластическими синдромами, обследованные на различных этапах аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (2 группа).........................................................61

2.4.3. Доноры гемопоэтических клеток.....................................61

2.5. Статистический анализ...................................................62

ГЛАВА 3. Результаты морфологического исследования костного

мозга и их обсуждение................................................................63

3.1. Результаты морфологического исследования костного мозга здоровых доноров.......................................................................63

3.2. Референсные данные независимых морфологов.....................65

3.3. Результаты морфологического исследования костного мозга больных миелодиспластическими синдромами, обследованные в период проведения эпигенетической терапии децитабином (1 группа)...............66

3.3.1. Результаты морфологического исследования костного мозга больных миелодиспластическими синдромами, обследованных непосредственно перед проведением эпигенетической терапии............66

3.3.2. Результаты морфологического исследования костного мозга больных миелодиспластическими синдромами обследованных в процессе эпигенетической терапии.............................................................69

3.3.3. Морфологическая характеристика дисмиелопоэза у больных миелодиспластическими синдромами на фоне эпигенетической терапии..87

3.4. Результаты морфологического исследования костного мозга больных миелодиспластическими синдромами, обследованные на различных этапах аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (2 группа).......................................................................101

3.4.1. Морфологическая картина костного мозга непосредственно перед аллогенной трансплантацией гемопоэтических стволовых

клеток..........................................................................................101

3.4.2. Морфологическая картина донорского костного мозга после

аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток...........103

ЗАКЛЮЧЕНИЕ...............................................................116

ВЫВОДЫ.......................................................................128

ЛИТЕРАТУРА................................................................130

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Цитоморфологическая характеристика изменений кроветворной ткани до и после эпигенетического и цитостатического воздействия у больных миелодиспластическими синдромами»

ВВЕДЕНИЕ

1. Актуальность проблемы

Диагностика, классификация и прогноз больных с миелодиспластическими синдромами (МДС) основаны на клинических данных, анализе периферической крови (ПК), морфологическом анализе мазков костного мозга (КМ) и трепанобиоптатов (ТБ), цитогенетической и молекулярной характеристике. Трактовка результатов морфологического анализа ПК и КМ, миелодиспластических изменений кроветворных клеток, обнаруженных при первичной диагностике МДС, так и в процессе терапии, является исключительно сложной и важной клинико-лабораторной задачей в дифференциальной диагностике. В ряде случаев эти изменения являются проявлением клонального заболевания, в других - следствием разнообразных воздействий.

Достигнут значительный прогресс в лечении МДС. В настоящее время стали активно использоваться в лечении больных МДС препараты эпигенетического воздействия - ингибиторы ДНК-метилтрансфераз, такие как децитабин и азацитидин, способствующие изменению естественного течения МДС, восстанавливая экспрессию генов - онкосупрессоров и приводя к удалению патологического клона. [79, 103, 108, 126, 189, 207, 208].

Не вызывают сомнения успехи применения аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК), которая стала возможна у пожилых больных МДС, а также у пациентов с сопутствующей патологией при проведении предтрансплантационного кондиционирования в режиме пониженной интенсивности. Длительная безрецидивная выживаемость после алло-ТГСК у больных с благоприятным прогнозом составляет 60-70%, а с неблагоприятным -менее 50%. Частота рецидивов заболевания составляет 35 - 40% [168, 178].

В последнее десятилетие появились новые данные о патогенезе МДС,

совершенствуются методы цитогенетической и молекулярной диагностики.

Тем не менее, морфологические методы исследования, а именно

8

цитологический и гистологический анализ кроветворной ткани, остаются ведущими в определении различных вариантов МДС, прогнозирования течения заболевания, а так же в оценке ответа на терапию. Морфологическая характеристика кроветворной ткани при различных вариантах МДС хорошо изучена [199, 79, 26], однако, интенсивность и виды терапевтического воздействия на кроветворную ткань значительно изменились. В то же время, морфологические особенности, происходящие в гемопоэтической ткани в динамике у больных МДС при современных методах лечения, а именно при проведении эпигенетической терапии, а так же при алло-ТГСК с кондиционированием в режиме пониженной интенсивности, мало изучены.

В связи с вышеизложенным, представляется актуальным изучение морфологической характеристики кроветворной ткани и стромального компонента у больных МДС при современной терапии: применении препаратов с эпигенетическим воздействием, а так же при алло-ТГСК с кондиционированием в режиме пониженной интенсивности в динамике в определенные, заданные временные промежутки.

2. Цель исследования

Изучить особенности морфологической картины гемопоэза у больных миелодиспластическими синдромами при эпигенетической терапии и при алло-ТГСК с кондиционированием в режиме пониженной интенсивности.

3. Задачи исследования

1. Сравнить клеточность кроветворной ткани у больных миелодиспластическими синдромами до эпигенетического воздействия и в процессе терапии;

2. Изучить морфологические особенности гранулоцитарного, эритроидного и мегакариоцитарного ростков кроветворения и динамику миелодиспластических проявлений кроветворных клеток в процессе

гипометилирующей терапии по сравнению с исходными данными;

9

3. Выявить взаимосвязь между изменениями кроветворной ткани в процессе лечения гипометилирующими препаратами и эффективностью терапии;

4. Изучить морфологические особенности донорского гемопоэза у больных миелодиспластическими синдромами на различных этапах после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток;

5. Охарактеризовать вторичные признаки донорского дисмиелопоэза у больных МДС на ранних этапах после алло-ТГСК и в отдаленное время.

4. Научная новизна

Проведен динамический анализ цитологических и гистологических препаратов костного мозга у больных МДС, которым осуществляли эпигенетическую терапию децитабином (Дакогеном) и азацитидином (Вайдазой).

Обнаружено, что уменьшение количества клеток гранулоцитарного ряда после 2 курсов гипометилирующей терапии коррелирует со значимым увеличением показателя общей выживаемости.

Выявлены значимые различия в ответе на терапию и в показателях общей выживаемости у больных, у которых зафиксировано > 50% диспластических проявлений хотя бы в одной гемопоэтической линии до начала терапии.

Подробно изучена репарация донорской кроветворной ткани у больных МДС после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток с режимом кондиционирования пониженной интенсивности.

Охарактеризованы морфологические особенности вторичного дисмиелопоэза донорских кроветворных клеток по сравнению с дисмиелопоэзом, выявляемым на момент диагностики МДС.

5. Научно-практическая ценность работы

Проведен глубокий совокупный анализ данных цитологического и гистологического методов исследования кроветворения у больных миелодиспластическими синдромами при эпигенетической терапии.

Подтвержден миелосупрессивный эффект гипометилирующих препаратов у большинства больных, а так же выявлены особенности миелодиспластических изменений кроветворных клеток в динамике при эпигенетическом воздействии.

Описаны особенности состояния кроветворения при трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток в режиме кондиционирования пониженной интенсивности. Установлены особенности репарации донорской кроветворной ткани в разные сроки после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток.

Полученные результаты и выводы могут быть использованы в практической деятельности гематологических отделений, в исследовательской работе, в учебном процессе в институтах усовершенствования врачей.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Двирнык, Валентина Николаевна

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Диагностика МДС основывается на анализе морфологической картины кроветворной ткани. Морфологическое исследование мазков периферической крови, пунктатов костного мозга и трепанобиоптатов позволяет оценить состояние гемопоэза как в дебюте заболевания, так и в процессе терапии. В настоящее время появились новые взгляды на механизмы патогенеза МДС, что привело к возможности использовать современные терапевтические подходы у этой категории больных, в том числе эпигенетическую терапию. Кроме того, с внедрением режимов кондиционирования со сниженной интенсивностью, у более широкой категории больных МДС появилась возможность применять алло-ТГСК.

Литературные данные о морфологической характеристике кроветворения при эпигенетической терапии, а также при алло-ТГСК с режимом кондиционирования со сниженной интенсивностью немногочислены. Трактовка результатов морфологических исследований зачастую вызывает большие трудности. Так, например, выявление признаков дисплазии кроветворных клеток у больных МДС не всегда является подтверждением клональности заболевания, в то же время их неяркий характер может быть обнаружен при уже подтвержденном диагнозе, а так же у больных, резистентных к терапии.

В настоящее исследование включены 34 больных: 24 получали лечение децитабином или азацитидином в отделении химиотерапии гемобластозов, аплазии кроветворения и трансплантации костного мозга ФГБУ ГНЦ МЗ РФ и 10 больным осуществлена трансплантация алло-ТГСК в отделении высокодозной химиотерапии и трансплантации костного мозга ФГБУ ГНЦ МЗ РФ. Группу контроля составили 16 доноров гемопоэтических клеток.

Первичное обследование с целью оценки кроветворения выполнено всем больным МДС и донорам аллогенных гемопоэтических стволовых

клеток. В дальнейшем обследовались только больные МДС в процессе эпигенетической терапии и больные в ходе алло-ТГСК.

Для изучения особенностей кроветворения у 24 больных МДС при эпигенетической терапии децитабином или азацитидином были ретроспективно проанализированы данные контрольных исследований пунктатов КМ и ТБ в сроки до начала терапии, а так же после 2, 4 и 8 курсов противоопухолевого лечения. У 10 больных, которым была осуществлена трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, контрольные исследования проводились в сроки до начала алло-ТГСК, а так же на +30, +60, +90, +180 дни, на +1 год и на +2 года после трансплантации. Состояние кроветворной ткани было сопоставлено с результатами анализа периферической крови и другими лабораторными данными, а так же с клинической картиной заболевания.

Исследования показали, что до начала эпигенетической терапии клеточность КМ по результатам двух видов исследования отличалась. В пунктатах КМ у половины больных (54,2%) клеточность была нормальной, у третьей части - сниженная (33,3%), и только у 12,5%> - повышенная. По данным ТБ у половины больных клеточность КМ была повышенная (54,1%), у третьей части - сниженная (33,4%), и нормальная только у 12,5%) больных. Полное совпадение клеточности КМ, оцененное двумя методами, отмечено лишь у 10(41,7%) больных, коэфициент согласия ге=0,22.

Выявлено, что у большинства больных было отмечено нарушение соотношения ростков кроветворения. По данным ТБ у 15% больных за счет расширения эритроидного ростка, у 16,7% вследствие резкого сужения эритроидного ростка. Гранулоцитарный росток у большинства больных был суженным (66,6%>), Ме суммы всех клеток гранулоцитарного ряда в пунктатах КМ составила 26,8% (12,0-59,6). Мегакариоцитарный росток был расширенным или нормальным у половины больных (58,3%) и у половины больных (45,9%)) суженным. Очаговый или диффузный фиброз

стромы выявлен у 66,7% больных, увеличение количества лимфоидных клеток у 33,3% больных.

На фоне эпигенетической терапии клеточность КМ снижалась примерно у половины больных после 2 курсов терапии, что подтвердило миелотоксический эффект препаратов. По данным пунктата КМ снижение клеточности зарегестрировано у 41,7%), а по данным ТБ - у 47,1%. Только после проведения 6-8 курсов терапии клеточность восстанавливалась, что, по-видимому, свидетельствует о достижении терапевтического эффекта у тех больных, которым продолжали лечение. Отмечено, что у больных, у которых после проведения 2 курсов терапии была констатирована гипоплазия или аплазия кроветворной ткани, наблюдалось снижение показателя общей выживаемости (статистически незначимое) по сравнению с больными, у которых КМ был нормо- или гиперклеточным. Ме общей выживаемости составила 425 и 858 дней, соответственно (р=0,12).

В работе было показано, что для характеристики клеточности кроветворной ткани недостаточным было исследование только пунктатов КМ, поскольку оно не всегда отражало истинное состояние кроветворения.

Практически на всех этапах эпигенетической терапии сохранялось преобладание эритроидного ростка кроветворения, более отчетливо определяемое по результатам исследования трепанобиоптатов, что диктует необходимость совокупной оценки данных пунктатов и трепанобиоптатов костного мозга. После 2 курса терапии, на фоне умеренной гипоплазии кроветворения примерно у половины больных, сохранялось преобладание эритроидного ростка как по данным пунктатов, так и ТБ (62,5% и 58,3%) соответственно). После 4 курсов отмечено уменьшение числа больных с расширенным эритроидным ростком, по данным ТБ они составили 25%. После 8 курсов терапии только у 1 из 7 больных величина эритроидного ростка кроветворения соответствовала норме, а у 5 из 7 больных (71,4%) эритроидный росток оставался расширенным, что, скорее всего, связано с

сохраняющимся напряжением эритропоэза. Так же отмечено по результатам двух видов исследования уменьшение признаков дизэритропоэза у больных после 4 и 8 курсов терапии.

При проведении эпигенетической терапии по данным пунктата КМ после 2 курсов терапии отмечено снижение суммы всех гранулоцитов, Me 16,5% (3,0-62,8%)), с усугублением гранулоцитопении в ПК, Me 0,4 х 109/л (0-5,0). После 4 и 8 курсов констатировано увеличение количества клеток гранулоцитарного ростка в пунктате КМ, но нормальных значений достигнуто не было (Me после 8 курсов составила 37,5%). При этом так же увеличилось количество гранулоцитов в периферической крови (Me 1,6 х 109/л). Признаки дисгранулоцитопоэза у большинства больных, достигших ремиссии, не определялись или были слабо выражены, что косвенно указывает на восстановление гранулоцитопоэза. Выявлено статистически значимое увеличение показателя общей выживаемости больных, у которых после 2 курсов терапии количество гранулоцитов в пунктате КМ уменьшилось по сравнению с больными, у которых наблюдалось увеличение количества гранулоцитов. Me составила 750 и 211 дней соответствено. Относительный риск (Log-Rank) = 5,8; р=0,016.

Охарактеризовать мегакариоцитарный росток кроветворения было возможно по результатам исследования только двух морфологических методов. После 2 курсов терапии в пунктате КМ наблюдалось уменьшение количества мегакариоцитов в сочетании с тромбоцитопенией, Me 48 х 109/л (2-227х 10%). После 4-го курса отмечено увеличение количества мегакариоцитов в пунктате КМ с увеличением количества тромбоцитов в периферической крови (Me 108 х 109/л). По результатам исследования ТБ у 25% больных до терапии гипометилирующими агентами мегакариоцитарный росток был расширенным, после 2 и 4 курсов мегакариоцитарный росток оставался расширенным у половины из этих больных с преобладанием микроформ и форм с гипосегментацией ядра. После 8-го курса только у 2 больных мегакариоцитарный росток

соответствовал норме, у 3 - был сужен и у 2 - расширен. Анализ показал, что на начальных этапах терапии происходит некоторое угнетение мегакариоцитарного ростка кроветворения с сохраняющейся тромбоцитопенией у большинства больных. После 4 курсов наблюдается его восстановление с нормализацией эффективности мегакариоцитопоэза у тех больных, у которых был получен ответ на терапию.

Признаки дисплазии клеток в различных гемопоэтических линиях выявляли практически у всех больных. До терапии ДЭ наблюдали в 83,3% случаев по данным пунктатов и ТБ КМ, ДГ чаще фиксировали в пунктатах КМ (79,2%>), ДМ чаще выявляли в ТБ - в 83,3%» случаев. Однако, после проведения анализа 2 методов исследования по выявлению 1, 2 и 3 линейных дисплазий до терапии, полное совпадение признаков отмечено лишь у 9 (37,5%>) больных, коэфициент согласия эг=0,06.

На фоне гипометилирующей терапии мы отметили уменьшение числа больных с признаками миелодисплазии по данным 2-х видов исследования. При этом 2-х и 3-х линейная дисплазия по данным ТБ также наблюдалась значительно реже, сохранялись лишь отдельные проявления дисплазии, чаще наблюдаемые в одной кроветворной линии. Было также показано, что выраженность диспластических проявлений до начала терапии у больных, которые в дальнейшем ответили на терапию, была ниже по сравнению с больными, которые не ответили на терапию.

Анализ показал, что вероятность достижения положительного ответа на гипометилирующую терапию была статистически значимо ниже у больных, у которых хотя бы в одном ростке кроветворения перед терапией было зафиксировано >50% диспластических форм. 011=8,9; С195( 1,4-56,6); р=0,038. Выявлена также зависимость снижения общей выживаемости от наличия более 50% диспластичных форм в каком-либо ряду кроветворения перед началом гипометилирующей терапии. Так, общая выживаемость больных, у которых количество диспластичных форм хотя бы в одном ряду кроветворения составляло >50%, была равна 281 дню, в то время как

у больных, у которых количество диспластичных форм ни в одном ростке не превышало 49%, была равна 858 дням. Относительный риск (Ьо§-11апк=3,28;р=0,06). Высказано предположение, что снижение количества диспластичных форм кроветворных клеток в различных ростках кроветворения при гипометилирующей терапии, возможно, связано не столько с фактом положительного ответа на терапию, но и с фактом более низкого процента диспластических форм у этих больных перед началом трапии.

При оценке состояния стромы регистрировали очаговый или диффузный фиброз, который был выявлен у 16 больных (66,7%>) до терапии. Диффузный фиброз стромы в дебюте заболевания и на фоне лечения наблюдали у 3 больных: у 2 больных, резистентных к проводимой терапии и у 1 больного, у которого после 2 курса достигнута ПР, а после 6 курса он был снят с терапии из-за рецидива заболевания. У 13 (54,2%) больных выявили очаговый фиброз стромы, у 7 из них был достигнута ремиссия заболевания и 1 больного - гематологическое улучшение. От тяжелых инфекционных осложнений, связанных с миелосупрессией, скончалась 1 больная. В дальнейшем у 3 больных, у которых была достигнута ремиссия заболевания, после 4-го курса терапии признаки очагового фиброза стромы не наблюдались. Также мы отметили на фоне лечения появление диффузного ретикулинового фиброза стромы МР-1 и МБ-2 у 4 больных, при первичной диагностике которых этот признак отсутствовал. Выявление диффузного фиброза стромы в дебюте заболевания косвенно указывало на неблагоприятный прогноз заболевания, а наличие очагового фиброза не отразилось на прогнозе заболевания.

Наличие лимфоидных узелков в ТБ в дебюте заболевания отмечено у 8 больных (33,3%>), а в процессе терапии у 6 (25%>) больных, что рассматривали как реактивный ответ на лечение и восстановление кроветворной ткани, после 8 курса терапии лимфоидные узелки не были обнаружены ни у одного больного. Кроме того, до начала терапии и в

процессе лечения в трепанобиоптатах выявляли сидерофаги, что могло отражать нарушения в обмене железа, также определяли очаговые расстройства гемодинамики.

При изучении гемопоэза у 10 больных, которым была проведена алло-ТГСК с режимом кондиционирования пониженной интенсивности, на этапе до трансплантации были выявлены определенные особенности.

Данные миелограмм недостаточно точно отражали истиную клеточность КМ, которая по данным ТБ непосредственно перед кондиционированием превышала возрастную норму у 5 больных, у 4 - была снижена, а у одного пациента наблюдалось сочетание гиперклеточности с очаговой гипоплазией кроветворной ткани. Количество бластных клеток было увеличено у большинства больных, Ме составила 6,5% (0-12,5). Суммарное количество всех гранулоцитарных клеток было снижено у большинства больных, Ме 41,3 (21,5-69,6). При этом среди клеток гранулоцитарного ряда преобладали незрелые формы, Ме индекса созревания гранулоцитов составила 1,48 (0,39-36). Ме количества гранулоцитов в периферической крови составила 1,3х199/л (0,3-12,0).

Суммарное относительное количество всех эритрокариоцитов было увеличено у большинства больных, Ме составила 32% (5,0-58,8), с нормальным созреванием эритрокариоцитов у большинства больных. Ме индекса созревания эритрокариоцитов составила 0,85 (0,4-0,96). Ме уровня НЬ в периферической крови составила 68г/л (29-114).

При подсчете мегакариоцитов снижение их количества наблюдали у половины больных, нормальное количество у 4 больных, и у 1 -повышенное. Ме составила 9 клеток (0-132). По данным ТБ практически у всех больных (9 из 10) количество мегакариоцитов было сниженным. Ме абсолютного количества тромбоцитов в периферической крови при этом составляла 31х199/л (20-205). Таким образом, данные количественного подсчета клеток различных ростков кроветворения указывают на неэффективный грануло-, эритро- и тромбоцитопоэз.

При оценке выраженности проявлений дисмиелопоэза по данным ПКМ отмечено наличие 3-ростковой дисплазии у 5 больных, 2-ростковой дисплазии у 5 больных. Ме количества диспластичных клеток в гранулоцитарном ряду составила 28,0% (15-70), в эритроидном ряду 29,0% (0-100) и в мегакариоцитарном ряду 80%) (34-84). По данным ТБ отмечено наличие 3-ростковой дисплазии у 6 больных, 2-ростковой дисплазии у 3 больных и дисплазии 1 ростка кроветворения (эритроидного) у 1 больного. Было очевидно, что возможность выявить признаки ДМ в пунктате КМ зависила от количества мегакариоцитов в мазке. Только у 3-х пациентов в мазках ПКМ количество мегакариоцитов непосредственно перед алло-ТГСК было достаточным, для того чтобы оценить диспластические проявления. Чаще обнаруживали 1 и 2-х ядерные формы, а также микроформы. Мегакариоциты с сепарированным ядром наблюдали реже. По данным же ТБ у всех этих пациентов выявлялись признаки дисмегакариоцитопоэза.

После алло-ТГСК в разные сроки имела место гипоплазия кроветворной ткани, более часто выявляемая в ТБ по сравнению с пунктатами КМ. Наши результаты согласуются с данными Е.О. Грибановой, которая показала, что клеточность кроветворной ткани у больных острыми лейкозами поле алло-ТКМ до исходного предтрансплантационного уровня не восстанавливалась даже в отдаленные (до 10 лет) сроки.

За период наблюдения до +90 дней отмечено значительное снижение клеточности КМ у подавляющего числа больных, более отчетливо выявленное по данным ТБ (в 22 из 24 случаев). В клеточном составе наблюдали относительное увеличение эритрокариоцитов с наличием в них немногочисленных эритробластов и клеток с мегалобластоидным ядром. От полугода до двух лет после алло-ТГСК гипопластические изменения кроветворной ткани в ТБ наблюдали практически у всех больных, более часто выявляемые в ТБ по сравнению с пунктатами КМ. На ранних этапах

гипоплазия КМ была обусловлена, вероятнее всего, предтрансплантационным кондиционированием, а на поздних сроках, возможно, связана с повреждением стромального микроокружения, что ограничивает полное восстановление гемопоэтической ткани. Случаев аплазии КМ, которые по данным литературы чаще выявляются у реципиентов после миелоаблативных режимов, зафиксировано не было. Несмотря на пониженную клеточность крветворной ткани, показатели ПК у большинства пациентов были, тем не менее, нормальными в течение всего периода наблюдения.

В нашем исследовании мы отметили достаточно быстрое восстановление показателей ПК. Количество гранулоцитов и тромбоцитов были в пределах нормы, начиная с +30 дня. Несмотря на раннюю, по данным ТБ, репарацию клеток эритроидного ряда, уровень НЬ оставался сниженным (до 92г/л) на +30 день. Начиная с +90 дня все показатели ПК у большинства больных были в пределах нормальных значений, что говорит о раннем восстановлении донорского гемопоэза у больных МДС после проведении алло-ТГСК с кондиционированием пониженной интесивности. Тем не менее, у трёх пациентов наблюдали отсроченное (от 33 до 45 дней) приживление трансплантата КМ. У двух из них развилась острая РТПХ II-IV степени с поражением кожи, кишечника, печени. При этом, статистически значимой разницы показателя клеточности КМ у больных с выраженной РТПХ по сравнению с больными, у которых РТПХ не наблюдалось, не было. По данным Е.О. Грибановой, восстановление гемопоэза в костном мозге так же остается отсроченным до лечения РТПХ.

Алло-ТГСК способствует максимальной эрадикации опухолевых клеток, но в то же время, опухолевые клетки и интенсивная химиотерапия, предшествующая алло-ТГСК, повреждает и нормальную кроветворную ткань, и стромальное микроокружение. Поэтому нами было проведено исследование пунктатов и ТБ КМ у больных МДС с целью оценки дисмиелопоэза, которое выявило, что признаки вторичного донорского

дисмиелопоэза у больных наблюдались значительно реже по сравнению с их исходнми характеристиками.

До трансплантации в эритрокариоцитах по данным пунктатов и ТБ чаще всего выявляли мегалобластоидные черты, которые имели место потом и в ранние сроки после алло-ТГСК, что, по-видимому, это связано с репарацией эритрокариоцитов в момент приживления трансплантата. В дальнейшем у большинства больных отмечали значительную редукцию диспластических изменений эритрокариоцитов. Так, до трансплантации Ме количества диспластичных эритрокариоцитов составила 29% (0-100%), начиная с +60 дня после алло-ТГСК Ме клеток с проявлениями ДЭ не превышала норму. При этом с +90 дня значительно снизился разброс признака (максимальное количество диспластичных форм составило 16%). В ТБ наблюдалась схожая морфологическая картина: на сроках до + 1 года ДЭ выявляли в 33,3%) случаев, а с + 1 года проявления ДЭ не отмечали .

В ПКМ диспластичные формы гранулоцитов перед алло-ТГСК наблюдали у всех пациентов (максимальное количество диспластичных форм составило 70%>). Чаще всего это были клетки с гипогрануляцией (значительно реже наблюдали псевдопельгероидные или гиперсегментированные формы нейтрофилов). После алло-ТГСК уменьшилось количество гранулоцитов с признаками дисплазии, Ме донорских гранулоцитов с признаками дисплазии уже на +30 день не превышала норму, а после 1 года признаки ДГ не выявлялись ни у одного пациента. Случаев вторичных диспластических проявлений гранулоцитов зафиксировано не было. В ТБ до + 1 года картину ДГ отмечали в 6,7%> случаев, а позднее - не выявляли.

Оценка проявлений ДМ была возможна лишь по данным ТБ, поскольку у большинства больных количество мегакариоцитов в мазках КМ было недостаточным. Лишь к +2 годам после алло ТГСК количество мегакариоцитов несколько увеличилось и оценить их было возможным у 5 из 8 больных, при этом, у 4 больных присутствовали признаки ДМ,

преимущественно выявлялись микроформы. По данным же ТБ практически у всех больных (9 из 10) до проведения алло-ТГСК был выражен ДМ, характеризующийся не только диспластическими чертами мегакариоцитов, но и в большинстве случаев аномальной их локализацией. В посттрансплантационном периоде диспластические изменения мегакариоцитов в ранние сроки наблюдали примерно у трети больных, к +90 дню - у 6 из 10 больных, что, по-видимому, связано с усиленной репарацией костномозговой ткани. В более поздние сроки, до + 1 года, отдельные диспластичные формы мегакариоцитов наблюдали в половине случаев, после + 1 года - в 37,5% случаев, что, вероятно, связано с отдалёнными проявлениями неполноценности стромального компонента и нарушениями клеточного взаимодействия после алло-ТГСК.

Изменения микроокружения до алло-ТКМ проявлялись небольшими очагами фиброза у 5 больных (у 2 из них они сохранялись и после алло-ТГСК), в 8 случаях наблюдалось небольшое количество рассеянных мелких лимфоидных клеток, единичные плазмоциты и макрофаги. На различных этапах посттрансплантационного периода у 5 пациентов выявляли мелкие очаговые скопления лимфоидных клеток, при этом клинических признаков РТПХ не было ни у одного пациента. У одного больного мелкие очаговые скопления лимфоидных клеток были обнаружены на + 180 день после алло-ТГСК на фоне резкого снижения клеточности КМ и при выраженном уменьшении количества клеток гранулоцитарной линии. При иммуногистохимическом исследовании ТБ выявились в 50% клеток вирусы HSV1, HSV2 и EBV. Через 7 месяцев после алло-ТГСК у этого пациента наступила аплазия кроветворной ткани и была диагностирована несостоятельность трансплантата.

Литературные данные о морфологических проявлениях РТПХ в кроветворной ткани противоречивы. Согласно одним исследованиям РТПХ не имеет каких-либо морфологических особенностей, в других исследованиях указывается на увеличение частоты выявления и размеров

пролифератов малых лимфоцитов Т-фенотипа у больных с РТПХ. В настоящем исследовании не было обнаружено увеличения количества лимфоидных пролифератов у пациентов при РТПХ.

Таким образом, проведенное исследование охарактеризовало на основании совокупных данных морфологическую картину кроветворной ткани у больных МДС, находящихся на различных этапах эпигенетической терапии, а так же при проведении алло-ТГСК с режимом кондиционирования со сниженной интенсивностью. Это позволило расширить наши представления о динамике изменений кроветворной ткани при современной терапии МДС, охарактеризовать некоторые стромальные изменения КМ. В работе показана необходимость совокупного анализа результатов исследования пунктатов КМ и ТБ, их сопоставление с клиническими данными, а так же с данными других методов исследования. Все это позволит получить врачам-гематологам и врачам-морфологам более полноценную информацию о состоянии костномозгового кроветворения при современной терапии МДС.

ВЫВОДЫ:

1. Несоответствие в оценке клеточности кроветворной ткани между аспиратом и трепанобиоптатом выявляется при анализе гиперклеточного или нормоклеточного костного мозга у 58,3% больных (эв=0,22). После 2 курсов гипометилирующей терапии наблюдается снижение клеточности костного мозга, оцениваемое при анализе трепанобиоптатов, у 47,1% больных, из них у пациентов с гиперклеточным костным мозгом в 75% случаев. Достоверных отличий в долгосрочных результатах у больных с гипоплазией костного мозга в сравнении с нормо- или гиперклеточным костным мозгом после 2 курсов терапии не выявлено, Медиана общей выживаемости составила 14,6 мес. и 28,6 мес., соответственно (Log-Rank =2,4; р=0,12).

2. Доказано, что уменьшение количества клеток гранулоцитарного ряда в пунктате костного мозга после 2 курсов гипометилирующей терапии статистически значимо ассоциировано с увеличением показателя общей выживаемости: 25 мес. в сравнении с 7 мес. (Log-Rank = 5,8; р=0,016). Изменения в эритроидном и мегакариоцитарном ростках не коррелирует с эффективностью лечения.

3. Показано, что снижение выраженности признаков дизэритро-, дисгрануло- и дисмегакариоцитопоэза после 4 курсов эпигенетическй терапии наблюдается у 62,5%), 56,3% и 37,5% больных, соответственно. Однако уменьшение количества клеток с признаками дисплазии не ассоциировано с вероятностью достижения ответа на гипометилирующую терапию.

4. Определено, что наличие > 50% диспластичных форм хотя бы в одном ряду кроветворения перед проведением гипометилирующей терапии ассоциировано как с уменьшением вероятности достижения общего ответа на терапию (OR=8,9; Ci95(l,4-56,6); р=0,038), так и со снижением показателя общей выживаемости (9,4 мес. в сравнении с 28,6 мес.; Log-Rank=3,28; р=0,06).

5. Отмечено, что у больных миелодиспластическими синдромами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток с режимом кондиционирования пониженной интенсивности наблюдается быстрое восстановление гемопоэза (Ме +17 дней), который характеризуется снижением клеточности костного мозга на всех сроках наблюдения и расширением эритроидного ростка на сроке до +1 года в 50% случаев.

6. Признаки вторичного донорского дисмиелопоэза выявляются на сроке до + 1 года в мегакариоцитарном ростке в 50%> случаев, в эритроидном - в 33,3%), в гранулоцитарном - в 6,7%>. На сроке после 1 года фиксируются только проявления дисмегакариоцитопоэза в 37,5% случаев.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Двирнык, Валентина Николаевна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:

1. Гайдамака Н.В., Паровичникова E.H., Завалишина Л.Э., Гармаева Т.Ц., Гапонова Т.В., Троицкая В.В. Длительные аплазии костного мозга после химиотерапии у больных острыми лейкозами. Терапевтический архив, 2010, №7, с 12-18.

2. Гармаева Т.Ц. Вирусные гепатиты В и С у больных заболеваниями системы крови. Автореф. дис. ... д-ра мед. наук: Москва, 2012.

3. Гармаева Т.Ц., Куликов С.М., Карякин A.B. и другие. Мониторирование факторов риска и индикаторов инфицированности вирусами гепатитов В и С гематологических больных. Гематология и трансфузиология. 2006; № 1: 23-27.

4. Гладыш В.В. Клиника и диагностика идиопатических миелодиспластических синдромов (рефрактерных анемий): Автореф. дис. ... канд. мед. наук: Москва, 1988.

5. Грибанова Е.О., Гласко E.H., Любимова Л.С. Капланская И.Б. и др. Гистологическая картина костного мозга у больных острыми лейкозами в разные сроки после трансплантации костного мозга. Проблемы гематологии 2002; 4: 13-20.

6. Грибанова Е.О. Кроветворение после аллогенной и аутологичной трансплантации костного мозга при острых лейкозах. Автореф. дис. ... канд. мед. наук: Москва, 2005.

7. Грицаев C.B., Мартынкевич И.С., Кострома И.И., Аксенова В.Ю., Петрова Е.В., Сергеев А.Н. и др. Децитабин: уроки, извлеченные из опыта лечения больных с миелоидными опухолями. Клиническая онкогематология; 2012, том 5, № 3, стр. 225-231.

8. Желнова Е. И., Демидова И. А., Гальцева И. В., Любимова Л. С., Мисюрин А. В., Савченко В. Г. Количественный анализ гемопоэтического химеризма у больных после аллогенной трансплантации стволовых клеток

крови методом иммуномагнитной селекции и ПЦР-амплификации гипервариабельных участков ДНК. Молекулярная Медицина. 2009; №3: 32-37.

9. Заваденко М.А. Прогностические критерии при первичном миелодиспластическом синдроме. Автореф. дис. ... канд. мед наук: Москва, 1995.

10. Клясова Г. А. Профилактика и лечение инфекционных осложнений. Руководство по гематологии. Под редакцией А.И.Воробьева. 2007; стр. 465-486.

11. Клясова Г.А. Рациональное лечение инфекционных осложнений цитостатической терапии в условиях иммуносупрессии. Вестник Московского онкологического общества, 2009, №1, с 5-8

12. Кост Е.А. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Москва, издательство «Медицина», 1975.

13. Кохно А. В., Паровичникова E.H. Терапия миелодисплазии гипометилирующими препаратами. Программное лечение лейкозов. Под редакцией В.Г. Савченко. Москва, 2008, с. 318-327.

14. Кохно A.B. Терапия рефрактерных анемий и острых малопроцентных лейкозов. Автореф. дис. ...канд. мед. наук: Москва, 2001.

15. Куликов С.М., Гармаева Т.Ц., Зингерман Б.В. и др. Вирусная безопасность трансфузий и методы ее оценки. Гематология и трансфузиология, 2008, т.53, № 4, с.3-5.

16. Нажаева М.И. Роль тромбоцитарно-мегакариоцитарных нарушений гемостаза в патогенезе геморрагических расстройств при первичной миелопоэтической дисплазии. Автореф. дис. ... канд. мед наук: Москва, 2004.

17. Новое в гематологии. Под ред. А.И. Воробьева, Ю.И. Лорие. Москва, 1977.

18. Рудницкая Ю.В., Морозова Е.В., Мамаев H.H., Бабенко Е.В., Алянский А.Л., Залялов Ю.Р. и др. Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клетов крови с использованием режимов

кондиционирования со сниженной интенсивностью у пациентов с миелодиспластическим синдромом. Клиническая онкогематология. 2011; том 4; №3: стр. 196-200.

19. Савченко В.Г., Паровичникова E.H., Михайлова Е.А., Ольльшанская Ю.В., Устинова E.H., Грибанова Е.О., Франк Г.А., Тихонова Л.Ю., Кохно A.B., Обидина H.A., Кучма Ю.М. Миелодиспластический синдром: некоторые вопросы патогенеза и лечения. Терапевтический архив; 1996: №7, с. 31-37.

20. Савченко В.Г., Троицкая В.В., Мисюрин A.B., Паровичникова В.Н., Исаев В.Г., Менделеева Л.П., и др. Цитомегаловирусная инфекция у пациентов с гемобластозами Тер. арх. 2003. - Т.75, №7. - С. 52-58.

21. Семочкин C.B., Толстых Т.Н., Иванова В.Л., Лунин В.В., Почтарь М.Е., Туманова Е.Л. и др. Азацитидин в лечении миелодиспластических синдромов: клиническое наблюдение и обзор литературы. Клиническая онкогематология; 2012, том 5, № 3, стр. 233-238.

22. Соколов В.В, Грибова И.А. Гематологические показатели здорового человека. Москва, 1972.

23. Троицкая В.В. Диагностика и лечение цитомегаловирусной инфекции у больных гемобластозами. Автореф. дис. ... канд. мед наук: Москва, 2004.

24. Февралева И.С., Глинщикова O.A., Элижбаева М.А., Гармаева Т.Ц., Зингерман Б.В., Гудилина Ю, Куликов С.М., Судариков А.Б., Савченко В.Г. Распространенность парвовируса В19 среди больных гематологического стационара. Гематология и трансфузиология, 2011, № 6: 24-28.

25. Цветаева Н.В., М.А. Заваденко, В.Ю. Попов, E.H. Гласко, В.Ф. Городничева, A.A. Левина и др. Прогностические критерии при первичном миелодиспластическом синдроме. Терапевтический архив, 1996, № 7: 37-42.

26. Франк Г.А., Гласко E.H., Цветаева Н.В., Заваденко М.А. Гистологическая диагностика миелодиспластических синдромов. Российский онкологический журнал. 1997; №6: 35-39.

27. Alessandrino E.P., Porta M.G., Bacigalupo A. et al. WHO classification and WPSS predict posttransplantation outcome in patients with myelodysplastic syndrome a study from the Gruppo Italiano Trapianto di Midollo Osseo (GITMO). Blood 2008; 112: 895-902.

28. Altucci L., Clarke N., Nebbioso A et al. Acute myeloid leukemia: Theraputic impact of epigenetic drugs Int Journ of Biochem and Cell Biol, 2005, 37, 1752-1762

29. Arindam Pande, Maitreyee Bhattacharyya, Shantasil Pain. Study of bone marrow changes in antiretroviral naive human immunodeficiency virus-infected anemic patients Indian Journal of Pathology and Microbiology. 2011 ; 54; 3: 542-546.

30. Armand P., Kim H.T., Cutler C.S. et al. Prognostic impact of elevated pretransplantation serum ferritin in patients undergoing myeloablative stem cell transplantation. Blood 2007; 109: 4586-8.

31. Asmis LM, Hadaya K, Majno P, et al. Acquired and reversible Pelger-Hunt anomaly of polymorphonuclear neutrophils in three transplant patients receiving mycophenolate mofetil therapy. Am J Hematol. 2003;73:244-248.

32. Aul C., Bowen D.T. Yoshida Y. Pathogenesis, ethiology and epidemiology of-myelodysplastic syndromes.//Hematologica. 1998. №23. P. 71- 86.

33. Aul C., Gathermann N., Heyll A., Germing U., Derigs G., Schneider W.Primary myelodisplastic syndromes: analysis of prognostic factors in 235 patients and proposals for an improved scoring system.// Leukemia. 1992. №6. P.52 59.

34. Aul C, Giagounidis A, Heinsch M, Germing U, Ganser A. Prognostic indicators and scoring systems for predicting outcome in patients with myelodysplastic syndromes. Rev Clin Exp Hematol. 2004;8(2):E1.

35. Azzi A, Fanci R, Ciappi S, Zakrzewska K, Bosi A. Human parvovirus B19 infection in bone marrow transplantation patients. Am J Hematol 1993;44:207-209.

36. Bain BJ. Blood cells: a practical guide. 4th ed. Maiden, Mass.: Blackwell, 2006

37. Bain B.J. The haematological features of HIV infection. Brit. J. Haematol., 1997; 99: 1-8.

38. Bain BJ, Thompson EM. Expression of CD117 by proerythroblasts. Am J Hematol. 2010;85(2):123.

39. Banerjee R, Halil O, Bain B.J, Cummins D and Banner N.R. Neutrophil dysplasia caused by mycophenolat mofetil. Transplantation, 2000; 70: 1608-1610.

40. Baresova P., Chermak J. et al. An increase in aberrant pl5INK4b gene methylation in myelodysplastic syndromes correlates with the number of bone marrow blasts and with progression of the disease. Leuk. Res. 2007; 31(Suppl): Abs. P062.

41. Barret A.G., Savani B.N. Stem cell transplantation with reduced-intencity conditioning regimens a review of ten years experience with new transplant concepts and new therapeutic agents. Leukemia 2006; 20: 1661-1672.

42. Bart R., Frisch B., Baumgart R. Morphologic classification of the myelodysplastic syndromes (MDS): combined utilization of bone marrow aspirates and trephine biopsies. Leuk Res. 1992; 16(1): 15-33.

43. Baweja M, Moreno-Aspitia A, Menke DM et al. Marked elliptocytosis in myelodysplastic syndromes. Blood, 2005, 106, 31 lb-312b.

44. Baylin SB, Herman JG, Graff JR, Vertino PM, Issa JP. Alterations in DNA methylation: a fundamental aspect of neoplasia. Adv Cancer Res. 1998; 72: 141-96.

45. Bennett J.M., Catovsky D., Daniel M.T., et al. Proposals for the classification of the acute leucemias. Br. J. Haematol. 1976; vol. 33: 451-458.

46. Bennett J.M., Catovsky D., Daniel M.T., et al. Proposals for the classification of the myelodysplastic syndromes. Br. J. Haematol. 1982; 51: 189-99.

47. Bennett JM, Orazi A. Diagnostic criteria to distinguish hypocellular acute myeloid leukemia from hypocellular myelodysplastic syndromes and

aplastic anemia: recommendations for a standardized approach. Haematologica. 2009; 94 (2): 264-268.

48. Bernstein LS. Adverse reactions to trimethoprim-sulfamethoxazole, with particular reference to long-term therapy. Can Med Assoc J. 1975 Jun 14; 112(13 Spec No): 96-8.

49. Bernstein W.B., Trotta R.F., Rector J.T., Tjaden J.A., Barile A.J. Mechanisms for linezolid-induced anemia and thrombocytopenia. Ann Pharmacother. 2003. Apr; 37(4): 517-20.

50. Bielenberg J. Folic acid and vitamin deficiency caused by oral contraceptives.Med Monatsschr Pharm. 1991; Aug; 14 (8): 244-7.

51. Bogdanovic A. D., Trpinac D. P., Jankovic G. M., Bumbasirevic V. Z., Obradovic M., Colovic M. D. Incidence and role of apoptosis in myelodysplastic syndrome: morphological and ultrastructural assessment Leukemia. 1997; Vol. 11, p. 656-659.

52. Broliden K. Parvovirus B19 infection in pediatric solid-organ and bone marrow transplantation. Pediatr Transplant 2001;5:320-330.

53. Bruce F. Farber, Robert C. Moellering. Retrospective Study of the Toxicity of Preparations of Vancomycin from 1974 to 1981. Antimicrob Agents Chemother. 1983; January; 23(1): 138-141.

54. Brunning R.D., Bennett J.M., Flandrin G. et al. Myelodysplastic syndromes: Introduction. World Heals Organisation Classification of Tumours; 2001; 63-73.

55. Buesche G, Teoman H, Wilczak W, Ganser A, Hecker H, Wilkens L, et al. Marrow fibrosis predicts early fatal marrow failure in patients with myelodysplastic syndromes. Leukemia. 2008; 22(2): 313-22.

56. Btische G, Teoman H, Wilczak W, Ganser A, Hecker H, Wilkens L, et al. Marrow fibrosis predicts early fatal marrow failure in patients with myelodysplastic syndromes. Leukemia. 2008;22(2):313-322.

57. Carpenter S.L., Zimmerman S.A., Ware R.E. Acute parvovirus B19 infection mimicking congenital dyserythropoietic anemia. J. Pediatr. Hematol. Oncol. 2004; 26; p: 133-135.

58. Casagrande G., Michot F. Alcohol-induced bone marrow damage: status before and after a 4-week period of abstinence from alcohol with or without disulfiram. A randomized bone marrow study in alcohol-dependent individuals. Blut. 1989 Sep; 59(3): 231-6.

59. Cheson BD, Bennett JM et al. Report of an International Working Group to standardize response criteria for myelodysplastic syndromes. Blood 2000; 96:3671-4.

60. Chang C., Storer B.E., Scott B.L., Bryant E.M., Shulman H.M., Flowers M.E. et al. Hematopoietic cell transplantation in patient with myelodysplastic syndrome or acute myeloid leukemia arising from myelodysplastic syndrome: similar outcomes in patients with de novo disease and disease following prior therapy or antecedent hematologic disorders. Blood. 2007; 110(4): 1379-87.

61. Cheson BD, Greenberg PL, Bennett JM, et al. Clinical application and proposal for modification of the International Working Group (IWG) response criteria in myelodysplasia. Blood. 2006: 108:419-425.

62. Christmas JK. 5-Azacytidine and 5-aza-2-deoxycytidine as inhibitors of DNA methylation: mechanistic studies and their implications for cancer therapy. Oncogene 2002, 21, 5483-5495.

63. Cicchitto G, Parravicini M, De Lorenzo S, et al. Tuberculosis and Pelger-Hujit anomaly: case report. Panminerva Med. 1999;41:367-369.

64. Cohen J.R., Creger W.P., Viala J.J. et al. Dysmyelopoietic syndromes. A serch for prognostic factors in 103 patients. Cancer, 1983, vol. 52, 83-90.

65. Cunningham I, MacCallum S J, Nicholls MD, et al. The myelodysplastic syndromes: an analysis of prognostic factors in 226 cases from a single institution. Br J Haematol. 1995;90:602-606.

66. Cunningham JM, Patnaik MM, Hammerschmidt DE, et al. Historical perspective and clinical implications of the Pelger-Hbet cell. Am J Hematol. 2009;84:116-119.

67. Deeg H.J., Stoler B., Slattery J.T. et al. Conditioning with targeted busulfan and cyclophosphamide for hemopoietic stem cell transplantation from related and unrelated donors in patients with myelodysplastic syndrome. Blood 2002; 100: 1201-7.

68. Delacretaz F., Schmidt P., Piquet D. et al. Histopatology of myelodysplastic syndromes. The FAB classification (proposals) applied to bone marrow biopsy. - Am. J. Clin. Pathol., 1987, vol. 87, 180-186.

69. Delia Porta MG, Malcovati L, Boveri E, Travaglino E, Pietra D, Pascutto C, et al. Clinical relevance of bone marrow fibrosis and CD34-positive cell clusters in primary myelodysplastic syndromes. J Clin Oncol. 2009; 27(5):754-762.

70. De Pree C, Cabrol C, Frossard JL and Beris P. Pseudoreticulocytosis in case of myelodysplastic syndrome with t(l;14)(q42;q32). Semin Hematol, 1995, 32, 232-236.

71. Djulbegovic B., Seidenfield J., Bonnell C., Kumar A. Nonmyeloablative allogeneic stem cell transplantation for Hematological malignancies: a systematic review. Cancer Control. 2003; 10: 17-41.

72. Djulbegovic B., Siedenfield J., Bonnell C. et al. Nonmyeloablative allogeneic stem cell transplantation for hematological malignancies a systematic review. Cancer Control. 2003; 10: 17-41.

73. Doll DC, List AF, Dayhoff DA, Loy TS et al. Acanthocytosis associated with myelodysplasia. J Clin Oncol, 1989, 7, 1569- 1572.

74. Domenech J., Roingeard F., Binet C. Mechanisms involved in impairment of hematopoiesis after autologous bone marrow transplantation. Leuk. Lymphoma. 1997; 24: 239-256.

75. Egger G., Liang G, Aparicio A., Jones PA. Epigenetics in human disease and prospects for epigenetic therapy. Nature, 2004, 429, 457-463.

76. Endi Wang, Elizabeth Boswell, Imran Siddiqi et al. Pseudo-Pelger-Hunt Anomaly Induced by Medications. A Clinicopathologic Study in Comparison With Myelodysplastic Syndrome-Related Pseudo-Pelger-Hunt Anomaly. Am J Clin Pathol 2011;135:291-303.

77. Etzell JE, Wang E. Acquired Pelger-Hunt anomaly in association with concomitant tacrolimus and mycophenolate mofetil in a liver transplant patient: a case report and review of the literature. Arch Pathol Lab Med. 2006;130:93-96.

78. Fenaux P., Mufti G.J., Hellstrom-Lindberg E. Et al. Azacitidine prolongs overall survival compared with conventional care regimens in elderly patients with low bone marrow blast count acute myeloid leukemia. J. Clin. Oncol. 2010; 28: 562-569.

79. Fenaux P., Mufti G.J., Hellstrom-Lindberg E., Santini V., Finelli C., Giagounidis A. et al. International Vidaza High-Risk MDS Survival Study Group. Efficacy of azacitidine compared with that of conventional care regimens in the treatment of higher-risk myelodysplastic syndromes: a randomised, open-label, phase III study. Lancet Oncol. 2009 Mar; 10(3): 223-232.

80. Frickhofen N, Arnold R, Hertenstein B, Wiesneth M, Young NS. Parvovirus B19 infection and bone marrow transplantation. Ann Hematol 1992;64(Suppl):A121-124.

81. Frisch B, Bartl R. Bone marrow histology in myelodysplastic syndromes. Scand J Haematol. Suppl. 1986; 45: 21-37.

82. Germing, U., Gattermann, N., Strupp, C., Aivado, M. & Aul, C. (2000a) Validation of the WHO proposals for a new classification of primary myelodysplastic syndromes: a retrospective analysis of 1600 patients. Leukemia Research; 2000a; 24: 983-992.

83. Germing U., Strupp C., Giagounidis A. Detalied morphologic finding in 2773 patients with myelodysplastic syndromes. Leuk. Res. 2009; 33: p.34.

84. Germing U., Strupp C., Kundgen A. No increase in age-specific incidence of myelodysplastic syndromes. Haematologica, 2004; 89: 905-910.

85. Giralt S., Thall P. F., Khouri I. et al. Melphalan and purine analog-containing preparative regimens reduced intensity conditioning for patients with hematologic malignancies undergoing allogeneic progenitor cell transplantation. Blood 2001; 97: 631-637.

86. Girdwood RH. Drug-induced anaemias. Drugs. 1976; 11 (5): 394-404.

87. Goasquen JE, Bennett JM. Classification and morphologic features of the myelodysplastic syndromes. Semin.Oncol. 1992 19 (1): 4-13.

88. Gondo H, Okamura C, Osaki K, et al. Acquired Pelger-Hujit anomaly in association with concomitant tacrolimus and fluconazole therapy following allogeneic bone marrow transplantation. Bone Marrow Transplant. 2000; 26: 1255-1257.

89. Greenberg P., Cox C., LeBeau M., et al. International scoring system for evaluating prognosis in myelodysplastic syndromes. Blood, 1997; 89:2079-88.

90. Greenberg P.L. The smouldering myeloid leukemic states: clinical and biological features. Blood, 1983, vol. 61, 1035-1044.

91. Hamilton-Patterson J.L. Preleukemic anemia. Acta Haematol., 1949, vol 2, 30.

92. Heegaard E. D., Brown K. E. Human parvovirus B19. Clin Microbiol Rev. 2002; B. 3; T. 15; p: 485-505.

93. Heidemann E., Nerke O., Waller H.D. Alcohol induced changes in hemopoiesis. Klin Wochenschr., 1981 Dec 1; 59(23): 1303-12.

94. Hellerich U, Budde R. Toxic alcohol dysmyelopoiesis - bone marrow histology studies of a forensic medicine autopsy sample. Beitr Gerichtl Med. 1992; 50: 69-74.

95. Herman JG. Hypermethylation of tumor suppressor genes in cancer. Semin Cancer Biol. 1999, Oct; 9 (5): 359-67.

96. Hoffmann K, Dreger CK, Olins AL, et al. Mutations in the gene encoding the lamin B receptor produce an altered nuclear morphology in granulocytes (Pelger-Hujit anomaly). Nat Genet. 2002;31:410-414.

97. Holiday R, Pugh JE. DNA modification mechanism and gene activity during development. Science, 1975, 187, 226-232.

98. Horny HP, Sotlar K, Valent P. Diagnostic value of histology and immunohistochemistry in myelodysplastic syndromes. Leuk Res. 2007; 31(12): 1609-1616.

99. Horny HP, Wehrmann M, Schlicker HU, Eichstaedt A, Clemens MR, et al. QBENDIO for the diagnosis of myelodysplastic syndromes in routinely processed bone marrow biopsy specimens. J Clin Pathol. 995;48(4):291-294.

100. Hoyle C, Kaeda J, Leslie J and Luzzatto L. Case report acquired ß-thalassemia trait in MDS. Br J Hematol, 1991, 79; 116-117.

101. Hunt GJ. Familiaire anomalie der leucocyten. Ned Tijdschr Geneeskd. 1931; 75: 5956-5959.

102. Hur M, Lee KM, Cho HC et al. Protein 4.1 deficiency and deletion of chromosome 20q are associated with acquired elliptocytosis in myelodysplastic syndrome. Clin Lab Haematol, 2004, 26, 69-72.

103. Issa J.P., Garsia-Manero G., Giles F.J., et al. Phase 1 study of low-dose prolonged exposure schedules of the hypomethylating agent 5-aza-2-deoxycytidine (decitabine) in hematopoetic malignancies. Blood 2004; 103(5): 1635-40.

104. Jaffe E.S., Harris N.L., Stein H. Et al. World Health Organization Classification of tumor. Pathology and Genetics of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. Lyon: IARS-press, 2001; 351.

105. Jaffe E.S, Harris N.L, Vardiman JW, et al. World Heals Organisation Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. (2001) Lyon France: I ARC.

106. Jewkes R.F., Edwards M.S., Grant B.J. Haematological changes in a patient on long-term treatment with a trimethoprim-sulphonamide combination. Postgrad. Med. J. 1970 Dec; 46(542): 723-726.

107. Juneja SK, Matthews JP, Luzinat R, et al. Association of acquired Pelger-Hujit anomaly with taxoid therapy. Br J Haematol. 1996;93:139-141.

108. Kantarjian H, Issa JP et al. Results of randomized study of 3 schedules of low-dose decitabine in higher-risk myelodysplastic syndrome and chronic myelomonocytic leukemia. Blood 2007, 109, 52-57.

109. Kantarjian H., Issa J.P., Rosenfeld C. et al. Decitabin improves patient outcomes in myelodysplastic syndromes. Resalts of a fase III randomized study. Cancer 2006; 106: 1794-1803.

110. Kantarjian H.M., O'Brien S., Huang X. Et al. Survival advantage with decitabine versus intensive chemotherapy in patients with higher risk myelodysplastic syndrome comparison with historical experience. Cancer 2007; 109: 1133-1137.

111. Kantarjian H., O'Brien S., Ravandi F. Et al. Proposal for a new risk model in myelodysplastic syndrome that accounts for events not considered in the original international Progn. Scoring Syst. Cancer 2008; 113(6): 1351-1361.

112. Kaplan JM, Barrett O Jr. Reversible pseudo-Pelger anomaly related to sulfisoxazole therapy. N Engl J Med. 1967;277:421-422.

113. Kennedy GA, Kay TD, Johnson DW, et al. Neutrophil dysplasia characterised by a pseudo-Pelger-Hunt anomaly occurring with the use of mycophenolate mofetil and ganciclovir following renal transplantation: a report of five cases. Pathology. 2002;34:263-266.

114. Khabori M.A., El-Emary M., Xu W. et al. Impact of intensity of conditioning therapy in patients aged 40-60 years with AML/myelodysplastic syndrome undergoing allogeneic transplantation. Bone Marrow Transplant. 2011 Apr; 46(4): 516-522.

115. Khouri I. F., Keating M., Korbling M. et al. Transplant-lite: induction of graft-versus-malignancy using fludarabine-based non-ablative chemotherapy and allogenic blood progenitor-cell transplantation as treatment for lymphoid malignancies. J. Clin. Oncol. 1998; 16: 2817-2824.

116. Kim D.Y., Lee J.H.,Park Y.H. et al. Feasibility of hypomethylating agents followed by allogeneic hemopoietic cell transplantation in patients with myelodysplastic syndrome. Bone Marrow Transpl. 2011; 11 [Epub ahead of print].

117. Kopterides P., Halikias S., Tsavaris N. Visceral leishmaniasis masquerading as myelodysplasia. Am. J. Hematol. 2003; 74: 198-199.

118. Kossaekowska A.E. Bon marrow pathology after bone marrow transplantation. Przeglad Lekarski. 2000; Supl. 1; 42-44.

119. Kroger N., Zabelina T., van Biezen A. et al. Allogeneic stem cell transplantation for myelodysplastic syndromes with bone marrow fibrosis. Haematologica. 2011 February; 96(2): 291-297.

120. Latvala J., Parkkila S., Niemela O. Excess alcohol consumption is common in patients with cytopenia: studies in blood and bone marrow cells. Alcohol Clin Exp Res., 2004 Apr; 28(4): 619-624.

121. Kuriyama K, Tomonaga M, Matsuo T, et al. Diagnostic significance of detecting pseudo-Pelger-Hujit anomalies and micro-megakaryocytes in myelodysplastic syndrome. Br J Haematol. 1986;63:665-669.

122. Lee SH, Erber WN, Porwit A, Tomonaga M, Peterson LC. ICSH guidelines for the standardization of bone marrow specimens and reports. Int J Lab Hematol. 2008;30(5):349-364.

123. Leone G, Teofili L, Voso MT, Lybbert M. DNA methylation and demethylating drugs in myelodysplasting syndromes and secondary leukemias. Haematologica 2002: 87, 1324-1334.

124. Levin JM. Pelger-Hujit anomaly and d-penicillamine [letter]. J Rheumatol. 1980; 7: 418-419.

125. Lindenbaum J. Drugs and vitamin B12 and folate metabolism. Curr Concepts Nutr. 1983; 12: 73-87.

126. Lubbert M, Susiu S, Baila L et al. Low-dose decitabine versus best supportive care in elderly patients with intermediate- or high-risk myelodysplastic syndrome ineligible for intensive chemotherapy: final results of the randomized phase III study of the European Organisathion for research and treatment of Cancer Leukemia Group and the German MDS Study Group. J Clin Oncol. 2011; 15:1987-1996.

127. Malcovati L, Germing U, Kuendgen A, et al. Time-dependent prognostic scoring system for predicting survival and leukemic evolution in myelodysplastic syndromes. J Clin Oncol. 2007; 25: 3503-3510.

128. Malcovati L, Porta MG, Pascutto C, et al. Prognostic factors and life expectancy in myelodysplastic syndromes classified according to WHO criteria a basis for clinical decision making. J Clin Oncol. 2005; 23: 7594-7603.

129. Maloney D.G., Sandmaier B.M., Mackinnon S. et al. Non-myeloablative transplantation. Hematology. 2002; 1: 392-421.

130. Marsh J. C. W., Geary C.G. IS APLASTIC ANAEMIA A PKE-LEUKAEMIC DISORDER? Brit. J. Haematology 1991, Vol. 77, p. 447-452.

131. Martino R., de Wreede L., Fiocco M. Et al. Comparison of conditioning regimens of various intensities for allogeneic hematopoietic SCT using HLA-identical sibling donors in AML and MDS with <10% BM blasts: a report from EBMT. Bone Marrow Transplantation, 2012, doi:10.1038, p. 236.

132. Martino R., Lacobelli S., Brand R. et al. Retrospective comparison of reduced-intensity conditioning and myelodysplastic syndromes cell transplantation using HLA-identical sibling donors in conventional high-dose conditioning for allogeneic hematopoietic stem Blood, 2006, 108: 836-846.

133. Maschek H., Georgii A. Histopathologie und Klinik des prinwen myelodysplastischen Syndroms // Pathologe. - 1995, Vol. 16. - P. 53 - 61.

134. Mashek H., Kaloutsi V., Rodriquez-Kaiser M. et al. Hypoplastic myelodysplastic syndrome: incidence, morphology, cytogenetics and prognosis. Ann. Hematol. 1993; Vol 66, p. 117-122.

135. Ma SK, Wong KF, Chan JKC and Kwong YL. Refractory cytopenia with t(l;7), +8 abnormality and dysplastic eosinophils showing intranuclear Charcot-Leyden crystals: a fluorescence in situ hybridization study. Br J Haematol, 1995, 90, 216.

136. Matsushima T, Handa H, Yokohama A et al. Prevalence and clinical characteristics of myelodysplasia syndrome with bone marrow eosinophilia and basophilia. Blood, 2003, 101, 3386-3390.

137. Miyahara M, Shimamoto Y, Yamada H, Shibata K, Matsuzaki M, Ono K. Cytomegalovirus-associated myelodysplasia and thrombocytopenia in an immunocompetent adult. Ann Hematol. 1997 Feb; 74(2): 99-101.

138. Mizutani K, Azuma E, Komada Y, Ito M, Sakurai M, Hironaka T, Hirai K. An infantile case of cytomegalovirus induced idiopathic thrombocytopenic purpura with predominant proliferation of CD 10 positive lymphoblast in bone marrow. Acta Paediatr Jpn. 1995 Feb; 37(1): 71-74.

139. Mineishi S., Filippa D., Childs B., Castro-Malaspina H. Blood. 1994; Vol. 84, N 10 - Suppl.l N 1245.

140. Miyahara M., Shimamoto Y., Yamada H. Cytomegalovirus-associated myelodysplasia and thrombocytopenia in an immunocompetent adult. Ann. Hematol.; 1997; Feb; 74(2): 99-101.

141. Monk M. Epigenetic programming of different gene expression in development and evolution. Dev Genet 1995, 17, 188-197.

142. Moreira AM, Vieira LM, Rios DR, et al. Acquired Pelger-Hujit anomaly associated with ibuprofen therapy [letter] [published correction appears in Clin Chim Acta. 2010;411:1397]. Clin Chim Acta. 2009; 409: 140-141.

143. Mufti GJ, Bennett JM, Goasguen J, Bain BJ, Baumann I, Brunning R, et al. Diagnosis and classification of myelodysplastic syndrome: International Working Group on Morphology of myelodysplastic syndrome (IWGM-MDS) consensus proposals for the definition and enumeration of myeloblasts and ring sideroblasts. Haematologica. 2008; 93(11): 1712-1717.

144. Nalini Rao, Bruce H., Ziran, Marilyn M. Wagener, Elizabeth R. Santal, Victor L. Yul. Similar Hematologic Effects of Long-Term Linezolid and Vancomycin Therapy in a Prospective Observational Study of Patients with Orthopedic Infections. Clin Infect Dis. 2004; 38 (8): 1058-1064.

145. Nicolaus Kröger, Tatjana Zabelina, Anja van Biezen, Ronald Brand, Dietger Niederwieser. Allogeneic stem cell transplantation for myelodysplastic syndromes with bone marrow fibrosis. Haematologica. 2011 February; 96(2): 291-297.

146. Niemelä O, Parkkila S. Alcoholic macrocytosis - is there a role for acetaldehyde and adducts? Addict Biol. 2004; Mar; 9(1): 3-10.

147. Niitsu H, Takatsu H, Miura I et al. Pure red cell aplasia induced by B19 parvovirus during allogeneic bone marrow transplantation. Rinsho Ketsueki 1990; 31: 1566-1571.

148. Nimer SD. Myelodysplasie syndromes. Blood, 2008, 111, 4841-4851.

149. O'Flaherty E., Sparrow R., Szer J. Bone marrow stromal function from patients after bone marrow transplantation. Bone Marrow Transplant. 1995; 15: 207-212.

150. Orazi A, Albitar M, Heerema NA, Haskins S, Neiman RS. Hypoplastic myelodysplastic syndromes can be distinguished from acquired aplastic anemia by CD34 and PCNA immunostaining of bone marrow biopsy specimens. Am J Clin Pathol. 1997; 107 (3):268-274.

151. Orazi A, Czader MB. Myelodysplastic syndromes. Am J Clin Pathol. 2009; 132 (2):290-305.

152. Orazi A, Germing U. The myelodysplastic/myeloproliferative neoplasms: myeloproliferative diseases with dysplastic features. Leukemia. 2008; 22(7): 1308-1319.

153. Olsen RJ, Dunphy CH, O'Malley DP, Rice L, Ewton AA et al. The implication of identifying JAK2 (V617F) in myeloproliferative neoplasms and myelodysplastic syndromes with bone marrow fibrosis. J Hematop. 2008; 1(2): 111-117.

154. Orazi A. Histopathology in the diagnosis and classification of acute myeloid leukemia, myelodysplastic syndromes, and myelodysplastic/ myeloproliferative diseases. Pathobiology. 2007; 74(2): 97-114.

155. Parker J. E., Mufti Gh. J. The Myelodysplastic Syndromes: A Matter of Life or Death // Acta Haematologica. - 2004, Vol. 111. - P. 78-99.

156. Pelger K. Demonstrate van een paar zeldzaam voorkomende typen van bloedlichaampjes en bespreking der patienten. Ned Tijdschr Geneeskd. 1928; 72: 1178.

157. Peter A. Jones. DNA methylation errors and cancer. Cancer Research 1996; 56, Jun 1: 2463-7.

158. Peter Valent, Attilio Orazi, Guntram Büsche, Annette Schmitt-Gräff, Tracy I.et al. Standards and Impact of Hematopathology in Myelodysplastic Syndromes (MDS). Oncotarget, 2010; voll, №7: 483 - 496.

159. P.W. Laird, R. Jaenisch. DNA methylation and cancer. Human Molecular Genetics. 1994; 3 (suppl 1): 1487-1495.

160. Raza A., Geser S., Mundell S. et al. Ibid. - 1995; vol. 86, №1, p. 268-276.

161. Raza A., Gregory S., Mundell S. et al. Ibid. - 1994; vol. 84, №10, suppl. 1 №2528.

162. Raza A., Mundell S., Iftikhar A. et al. Ibid. - 1993; vol. 82, №10, suppl. 1 №1482.

163. Raza A., Mundle S., Iftikhar A., Gregory S., Marcus B., Khan Z., Alvi S., Shetty V., Dameron S., Wright V., Adler S., Loew J.M., Shott S., Ali S.N., Preisler H. Simultaneous assessment of cell kinetics and programmed cell death in bone marrow biopsies of myelodysplasias reveals extensive apoptosis as the probable basis for ineffective hematopoiesis. American Journal of Hematology. 1995; Vol. 48, p. 143-154.

164. Rein Jan Piso, Kveti Kriz, and Marie-Claire Desax. Severe isoniazid related sideroblastic anemia. Hematol Rep. 2011 January 13; 3(1): e2, p 3-4.

165. Riggs AD. X inactivation, differentiation and DNA methylation. Cytogenet Cell Genet, 1975, 14, 9-25.

166. Rodrigo Martino, Simona Iacobelli, Ronald Brand et al. Retrospective comparison of reduced-intensity conditioning and conventional high-dose conditioning for allogeneic hematopoietic stem cell transplantation using HLA-identical sibling donors in myelodysplastic syndromes. Blood, 2006; 108: 836-846.

167. Rosell Arnold E, Rodraguez Miguñlez JM, Roquer Gonzôlez JM, et al. Reversible Pelger-Htet anomaly associated with acute gastroenteritis caused by salmonella group D [in Spanish]. An Esp Pediatr. 1989; 30: 143-144.

168. Rouveix B., Lassoued K., Vittecoq D., Regnier B. Neutropenia due to beta lactamine antibodies. Br. Med. J. (Clin. Res. Ed.). 1983, Dec, 17; 287 (6408): 1832-4.

169. Rummens JL, Verfaillie C, Criel A. et all. Elliptocytosis and schistocytes in myelodysplasia: report of two cases. Acta Haematol, 1986; 75, 174-177.

170. Rundee V., de Witte T., Arnold R. et al. Bone marrow transplantation from HLA-identical siblings as first-line treatment in patients with myelodysplastic syndromes: warly transplantation is associated with improved outcome. Bone Marrow Transplant. 1998; 21: 225-61.

171. Samson RE, Abdalla SH and Bain B J. Teaching cases from the Royal Marsden and St Maryes Hospitals Case 18. Severe anaemya and thrombocytopenia with red cell fragmentation. Leuk Lymphoma, 1998, 31, 433-435.

172. Santini V, Fenaux P, Mufti GJ, Hellstrôm-Lindberg E, Silverman LR, List A. et al. Management and supportive care measures for adverse events in patients with myelodysplastic syndromes treated with azacitidine. Eur J Haematol. 2010 Aug; 85(2): 130-138.

173. Sanz G. Nomdedeu B, Such E, et al. Independent impact of iron overload and transfusion dependency on survival and leukemic evolution in patient with myelodysplastic syndrome. Blood. 2008; 112: 640.

174. Schmitz LL, McClure JS, Litz CE et al. Morphologic and quantitave changes in blood and marrow cells following growth factor therapy. Am O Clin Pathol; 1994; 101: 67-75;

175. Scott BL, Storer B.E, Greene JE, Hackman RC, Appelbaum FR, Deeg HJ. Marrow fibrosis as a risk factor for posttransplantation outcome in patients with advanced myelodysplastic syndrome or acute myeloid leukemia

with multilineage dysplasia. Biol Blood Marrow Transplant. 2007; 13 (3): 345354.

176. Scott JM, Weir DG. Drug-induced megaloblastic change. Clin Haematol. 1980 Oct; 9(3): 587-606.

177. Sharp RA, Lowe JG, Johnston RN. Antituberculous drugs and sideroblastic anaemia. Br J Clin Pract 1990; 44: 706-707.

178. Silva L.P., Lima M., Kantarjian H. et al. Feasibility of allo-SCT after hypomethylating therapy with decitabine for myelodysplasia syndrome. Bone Marrow Transpl. 2009; 43: 839-843.

179. Silverman L.R., Demacos E.P., Peterson B.L., Kornblith A.B., Holland J.C., Odchimar-Reissig R. et al. Randomized controlled trial of azacitidine in patients with myelodysplastic syndrome A study of the Cancer and Leukemia Group B. J. Clin. Oncol. 2002; 20(10): 2429-2440.

180. Silver R.T., Bennett J.M., Goldman J.M., et al. The third international congress on myeloproliferative and myelodysplastic syndromes. Leuk. Res. 2007; 31: 11-17.

181. Slavov S. N., Kashima S., Pinto A. C., Covas D. T. Human parvovirus B19: general considerations and impact on patients with sickle-cell disease and thalassemia and on blood transfusions. FEMS Immunol Med Microbiol. 2011; 3; 62; p: 247-262.

182. Slavin S., Nagler A., Naparstek E., et al. Nonmyeloablative stem cell transplantation and cell therapy as an alternative to conventional bone marrow transplantation with lethal cytoreduction for the treatment of malignant and non-malignant hematologic diseases. Blood 1998; 91: 756-763.

183. Solano C, Juan O, Gimeno C, Garcia-Conde J. Engraftment failure associated with peripheral blood stem cell transplantation after B19 parvovirus infection. Blood 1996; 88: 1515-1517.

184. Soligo DA, Oriani A, Annaloro C, Cortelezzi A, Calori R, et al. CD34 immunohistochemistry of bone marrow biopsies: prognostic significance in primary myelodysplastic syndromes. Am J Hematol. 1994; 46 (1): 9-17.

185. Speeckaert MM, Verhelst C, Koch A, et al. Pelger-Hunt anomaly: a critical review of the literature. Acta Haematol. 2009; 121: 202-206.

186. Spitzer T.R., McAfee A., Sackstein R. et al. International induction of mixed chimerism and achievement of antitumor responses after nonmyeloablative conditioning therapy with HLA-matched donor bone marrow transplantation for refractory hematological malignancies. Biol. Blood Marrow Transplant. 2000; 6: 309-320.

187. Steensma DP, Bennett JM. The Myelodysplasie Syndromes Diagnosis and Treatment. Mayo Clinic Proceedings, January 2006; 81(1): 104-130.

188. Steensma D.P., Bennett J.M. The Myelodysplasie Syndromes. Semin. Hematol. 2005; 42, p. 23-31.

189. Silverman L.R., Demakos E.P., Peterson B.L., Kornblith A.B., Holland J.C., Odchimar-Reissig R. et al. Randomized controlled trial of azacitidine in patients with myelodysplastic syndrome A study of the Cancer and Leukemia Group B. J. Clin. Oncol. 2002; 20(10): 2429-40.

190. Stanton L. Gerson, Sheldon L. Kaplan., Jon B. Bruss, Vu Le, Felix M. Arellano, Barry Hafkin and David J. Kuter. Hematologic Effects of Linezolid: Summary of Clinical Experience. Antimicrob Agents Chemother. 2002 August; 46(8): 2723-2726.

191. Steensma DP, Viprakasit V, Hendrick A et all. Deletion of the a-globine gene claster as a cause of acquired a-thalassemia in myelodysplastic syndrome. Blood, 1995, 103; 1518-1520.

192. Stefani Parmentier, Johannes Schetelig, Kerstin Lorenz, Michael Kramer, Robin Ireland, Ulrich Schuler et al. Assessment of dysplastic hematopoiesis: lessons from healthy bone marrow donors. Hematologica. 2012; 97(5): 723-730.

193. Swerdlow S. H. Campo E., Harris N.L. et al. WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues. Lyon: IARS-press, 2008; 439.

194. Taegtmeyer A., Halil O., Bell A. et al. Neutrophil dysplasia (acquired pseudo-pelger anomaly) caused by ganciclovir. Transplantation. 2005 Jul 15; 80(1): 127-130.

195. Takai D, Jhones PA. Comprehensive analysis of CpG islands in human chromosomes 21 and 22. Proc Natl Acad Sei USA , 2002; 99, 3740-3745.

196. Teshima T, Shibuya T, Harada M, et al. Effects of G-CSF, GM-CSF, and IL-5 on nuclear segmentation of neutrophils and eosinophils in congenital or acquired Pelger-Hujit anomaly. Exp Hematol. 1991; 19: 322-325.

197. Thiele J, Kvasnicka HM, Facchetti F, Franco V, van der Walt J, Orazi A. European consensus on grading bone marrow fibrosis and assessment of cellularity. Haematologica. 2005; 90(8): 1128-1132.

198. Thiele J., Quitmann H., Wagner S., Fischer R Dysmegakaryopoiesis in myelodysplastic syndromes (MDS): an immunomorphometric study of bone marrow trephine biopsy specimens. J Clin Pathol. 1991; Vol. 44. - P. 300-305.

199. Tricot G.J., De Wolf-Peeters C., Hendrick B. et al. Prognostic value of ALIP in MDS. Br J Haematol, 1984, vol 57, 423-430.

200. Tricot G.J., Wolf-Peeters C. et al. Bone marrow histology in myelodysplastic syndromes. Histologycal finding in myelodysplastic syndromes and comparison with bone marrow smears. Br. J. Haematol., 1984; vol. 57: 423-430.

201. Toyota, m., Ho, C., Ohe-Toyota, M., Baylin, S., and Issa J. P.J. Cancer Res., 1999, 59, 4535-4541.

202. Valent P, Horny HP, Bennett JM, Fonatsch C, Germing U, Greenberg P, et al. Definitions and standards in the diagnosis and treatment of the myelodysplastic syndromes: Consensus statements and report from a working conference. Leuk Res. 2007; 31: 727-736.

203. Valent P, Spanblochl E, Bankl H-C, Sperr WR et al. Kit ligand/mast cells in myelodysplasia and chronic myeloid leukemic blast crisis. Blood, 1994, 84, 4322-4333.

204. van de Loosdrecht A. A., Vellenga E. Myelodysplasia and apoptosis: new insights into ineffective erythropoiesis. Medical Oncology. 2000; Vol. 17, p. 16-21.

205. van Hook L, Spivack C, Duncanson FP. Acquired Pelger-Hunt anomaly associated with Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Am J Clin Pathol. 1985; 84: 248-251.

206. Warlic E.D., Smith B.D. Myelodysplastic syndromes: review of pathophysiology and current novel approaches. Curr. Cancer Drug Target 2007; 7: 541-58.

207. Weiland HT, Salimans MM, Fibbe WE, Kluin PM, Cohen BJ. Prolonged parvovirus B19 infection with severe anaemia in a bone marrow transplant patient. Br J Haematol 1989; 71: 300.

208. Wijermans P, Suciu S, Baila L et al. Low or High risk MDS not eligible for intensive chemotherapy: final results of the randomized phase 111 study (06011) of the EORTC Leukemia and German MDS Study Groups. Blood 2008; 112: Abstract 226.

209. Wijermans P.W., Libbert M., Verhoef G. et al. Low-dose 5-aza-2-deoxycytidine, a DNA hypomethylating agent, for the treatment of high-risk myelodysplastic syndrome: a multicenter phase II study in eidderly patients. J Clin Oncol. 2000; 18: 956-962.