Кроветворная ткань и стромальное микроокружение в процессе интенсивной терапии и мобилизации гемопоэтических стволовых клеток у больных множественной миеломой тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат медицинских наук Покровская, Ольга Станиславовна

• Покровская, Ольга Станиславовна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Покровская, Ольга Станиславовна

Список используемых сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы. Г-КСФ как стандарт мобилизации и его клиническое эффекты.

Глава 2. Характеристика больных. Методы исследования.

2.1. Характеристика больных.

2.1.1. Характеристика больных ММ.

2.1.2. Характеристика больных из группы сравнения.

2.1.3. Характеристика контрольной группы.

2.2. Режимы мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови и сопроводительные лечебно-профилактические мероприятия.

2.3. Сбор гемопоэтических стволовых клеток.

2.4. Методы исследования.

2.4.1. Гистологическое исследование костного мозга.

2.4.2. Иммуногистохимическое исследование костного мозга.

2.5. Другие метолы исследования.

2.6. Статистический анализ.

Глава 3. Эффективность мобилизации аутологичных гемопоэтических стволовых клеток крови с использованием циклофосфана и Г-КСФ у пациентов с множественной миеломой.

3.1. Эффективность мобилизации ГСКК в зависимости от сроков начала применения Г-КСФ.

3.2. Эффективность мобилизации ГСКК в зависимости от величины дозы ЦФ в схеме ЦФ + Г-КСФ.

3.3. Роль импульсного воздействия высоких доз циклофосфана в формировании противоопухолевого ответа при множественной миеломе.

3.4. Эффективность мобилизации ГСКК в зависимости от схем индукционной терапии.

3.5. Влияние бортезомиба, входящего в состав индукционной терапии, на эффективность мобилизации ГСКК.

Глава 4. Изменение состояния костномозгового кроветворения у больных ММ в результате применения высоких доз ЦФ и Г-КСФ с целью мобилизации ГСКК.

4.1. Гистологическое исследование костного мозга здоровых доноров.

4.2. Гистологическое исследование костного мозга больных множественной миеломой до мобилизации ГСКК.

4.3. Гистологическая картина костного мозга больных ММ после мобилизации ГСКК.

4.4. Морфометрическое исследование костного мозга больных ММ до и после мобилизации ГСКК.

4.5. Иммуногистохимическое исследование костного мозга больных ММ до и после мобилизации ГСКК.

4.6. Влияние гранулоцитарного колониестимулирующего фактора на костномозговое кроветворение больных ОЛ.

4.6.1. Гистологическая картина костного мозга больных ОЛ до и после применения Г-КСФ.

4.6.2. Морфометрическая картина костного мозга больных ОЛ до и после применения Г-КСФ.

4.6.3. Иммуногистохимическая картина костного мозга больных ОЛ до и после применения Г-КСФ.

Глава 5. Ангиогенез в костном мозге больных множественной миеломой на различных этапах высокодозной химиотерапии.

5.1. Ангиогенез в костном мозге доноров КМ.

5.2 Ангиогенез в костном мозге больных ММ в дебюте заболевания.

5.3. Ангиогенез в костном мозге больных ММ после индукционной и консолидирующей терапии.

5.4. Изменение плотности микрососудов в костном мозге больных ММ на фоне мобилизации гемопоэтических клеток с использованием циклофосфана (6 г/м ) и Г-КСФ.

5.5. Сопоставление показателей плотности микрососудов в костном мозге больных ММ, острыми лейкозами и лимфопролиферативными заболеваниями на фоне мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови.

5.6. Сопоставление отдаленных результатов высокодозной химиотерапии с последующей аутоТГСКК и плотности микрососудов в костном мозге больных ММ.

5.7. Взаимозависимость показателей плотности микрососудов КМ в дебюте заболевания и факторов неблагоприятного прогноза течения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Кроветворная ткань и стромальное микроокружение в процессе интенсивной терапии и мобилизации гемопоэтических стволовых клеток у больных множественной миеломой»

Актуальность проблемы.

Внедрение в клиническую практику рекомбинантных человеческих гемопоэтических ростовых факторов, которые способствуют увеличению концентрации клеток-предшественниц в крови, расширило возможности использования периферической крови в качестве источника гемопоэтических клеток как для аутологичной, так и для аллогенной трансплантации. В последние 15 лет гранулоцитарный колониестимулирующий фактор зарекомендовал себя в качестве эффективного средства, мобилизующего СБ34+ клетки в периферическую кровь. Несмотря на многочисленные исследования, остается дискутабельным вопрос о необходимом количестве СБ34+ клеток для успешного и быстрого восстановления. гемопоэза после аутотрансплантации. Схемы, содержащие только гранулоцитарный колониестимулирующий фактор, используются для мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови при различных онкогематологических заболеваниях. Преимуществами такой мобилизации на фоне стабильного состояния кроветворения является отсутствие фебрильной нейтропении, тяжелых инфекционных осложнений, продолжительной госпитализации, необходимости применения антибактериальной терапии и заместительных трансфузий компонентов крови. Однако количество СЭ34+ клеток, которое удается собрать в результате мобилизации с использованием только одного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора, значительно уступает таковому при использовании сочетания химиотерапевтических препаратов и ростового фактора. До сих пор не решен вопрос, какая схема мобилизации является оптимальной, позволяющей заготовить количество СБ34+ клеток, достаточное для быстрого и полноценного восстановления гемопоэза.

Высокодозная химиотерапия с последующей трансплантацией аутологичных гемопоэтических стволовых клеток является стандартом в современной терапии больных множественной миеломой моложе 65 лет. Так, по данным Европейского Регистра по трансплантации костного мозга, в 2009 году всего выполнено 16591 трансплантация аутологичных гемопоэтических клеток, при этом наиболее частым показанием для выполнения аутотрансплантации была множественная миелома. При этой нозологии выполнено 6918 трансплантаций аутологичных гемопоэтических клеток, что составляет 41,7% от общего количества.

Целесообразность сбора значительного количества С034+клеток у больных множественной миеломой диктуется не только потребностью выполнения двух трансплантаций. Анализ течения раннего посттрансплантационного периода у больных множественной миеломой, лейкозами и лимфомами показал, что доза' перелитых С034+ клеток оказывает влияние на сроки восстановления гранулоцитов в периферической крови.

Несмотря на многочисленные исследования, до настоящего времени нет однозначного ответа на вопрос о механизмах воздействия гранулоцитарного колониестимулирующего фактора на кроветворение, которые обеспечивают «выход» СБ34+ клеток в кровь. В литературе представлены противоречивые сведения о стимуляции пролиферации костномозговых клеток, а также о клетках, служащих мишенями для действия гранулоцитарного колониестимулирующего фактора и посредниками в реализации его эффектов.

Сообщается, что при множественной миеломе происходит выраженное новообразование сосудов, однако отсутствуют четкие сведения об изменении сосудистого русла на разных этапах терапии, а также роль ангиогенеза как прогностического фактора. Имеются лишь единичные работы, посвященные изучению влияния гранулоцитарного колониестимулирующего фактора на кроветворение с использованием гистологических и цитологических методик. В основном встречаются работы, в которых представлены результаты иммунофенотипического и молекулярного анализа. Однако изучение гистологической и иммуногистохимической картины остается единственным способом, позволяющим оценить структуру костного мозга и взаимодействие клеточных элементов, в частности — стромы и гемопоэтической ткани, полноценно оценить клеточность костного мозга. Нами не найдено работ, подробно анализирующих изменения, происходящие в костном мозге и стромальном микроокружении при различных режимах мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови.

В связи с этим представляется важным сопоставить результаты мобилизации, и сбора гемопоэтических стволовых клеток крови у больных множественной миеломой в зависимости от дозы химиотерапевтического препарата циклофосфана, включенного в схему мобилизации; оценить влияние мобилизующих агентов на костномозговое кроветворение и изучить некоторые клинические эффекты. Комплекс перечисленных проблем и определил выбор темы данной научной работы.

Цель работы:

Изучение состояния кроветворной ткани и стромального микроокружения на фоне применения Г-КСФ в различных схемах мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови, а также интенсивной индукционной и консолидирующей терапии у больных множественной миеломой.

Задачи работы:

1. Изучить эффективность мобилизации и сбора гемопоэтических стволовых клеток крови у больных ММ в зависимости от дозы циклофосфана, сроков начала инъекций Г-КСФ, схем индукционной химиотерапии для оптимизации мобилизационных режимов.

2. Исследовать состояние кроветворения у больных ММ на фоне мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови гистологическим, морфометрическим и иммуногистохимическим методами.

3. Изучить плотность микрососудов в костном мозге у больных ММ в дебюте заболевания, после индукции и высокодозной консолидации с последующей аутологичной трансплантацией.

4. Проанализировать влияние схемы мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови на анпюгенез в костном мозге у больных ММ.

5. Оценить значимость показателя плотности микрососудов в костном мозге больных ММ как прогностического фактора, влияющего на вероятность посттрансплантационной выживаемости без признаков прогрессии.

Научная новизна.

В работе проанализирована эффективность мобилизации и сбора гемопоэтических стволовых клеток крови в зависимости от дозы циклофосфана, используемого в схеме мобилизации, показано влияние различных схем индукционной терапии, сроков начала инъекций гранулоцитарного колониестимулирующего фактора на результаты мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови у больных множественной миеломой.

Проведен подробный анализ изменений в костном мозге больных множественной миеломой и острыми лейкозами, происходящих на фоне мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови с использованием гистологических, морфометрических и иммуногистохимических методов с маркерами гемопоэтических клеток. Выполнено сравнение результатов цитологического и иммуногистохимического исследований.

Изучены параметры ангиогенеза в костном мозге у больных множественной миеломой на каждом этапе программной терапии. Впервые показано, что количество сосудов в костном мозге является признаком, определяющим вероятность сохранения ремиссии после трансплантации аутологичных гемопоэтических стволовых клеток крови, опережая по значимости противоопухолевый ответ, достигнутый на этапе индукционной терапии.

Впервые изучено влияние различных режимов мобилизации на ангиогенез в костном мозге.

Научно-практическая ценность работы.

Оптимизирован режим мобилизации и сбора гемопоэтических стволовых клеток крови-у больных множественной миеломой. Отработаны сроки начала введений ростового фактора, позволившие сэкономить 4-5 инъекций препарата. Установлены оптимальные дозы циклофосфана в схеме мобилизации, обеспечивающие заготовку необходимого количества СОЗЛ+ клеток при минимальной потребности в сопроводительной терапии.

Изучены гистологические изменения, происходящие в кроветворной ткани и стромальном микроокружении на фоне мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови. Показана роль ангиогенеза в костном мозге в становлении длительной ремиссии после высокодозной химиотерапии с последующей трансплантацией аутологичных гемопоэтических стволовых клеток крови.

Пути практической реализации.

Результаты исследования внедрены в практику работы отделения высокодозной химиотерапии гемобластозов и трансплантации костного мозга ГНЦ МЗСР РФ. На основании этих результатов создан протокол мобилизации гемопоэтических стволовых клеток крови.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Покровская, Ольга Станиславовна

Выводы

1. Применение гранулоцитарного колониестимулирующего фактора в сочетании с циклофосфаном у больных множественной миеломой приводит к увеличению в костном мозге числа клеток гранулоцитарного ряда с 58,4 ± 3,9% до 76,2 14,1% и к резорбции костной ткани, проявляющейся снижением ее площади с 14,4 ± 0,62% до 13,1 ± 0,60%. При этом не возрастает общая клеточность костного мозга.

2. В дебюте множественной миеломы опухолевая инфильтрация костного мозга сопровождается значительно выраженным неоангиогенезом (плотность микрососудов достигает 96,0' ± 5,3 микрососудов/мм). В результате индукционной и консолидирующей терапии происходит достоверное снижение этого показателя (до 78,6 ± 3,9- и 60,8 ± 1,8 л микрососудов/мм , соответственно). При этом у 30,8% больных после аутотрансплантации плотность микрососудов снижается до нормальных значений.

3. Состояние ангиогенеза является важным прогностическим признаком, определяющим продолжительную выживаемость больных множественной миеломой после аутологичной трансплантации. Вероятность 5-летней посттрансплантационной выживаемости без признаков прогрессии составляет 90% для больных с низкой плотностью (менее 68,6/мм ) микрососудов и полной и очень хорошей частичной ремиссией перед выполнением аутотрансплантации, 68% - для больных с низкой плотностью микрососудов и частичной ремиссией, и 20% для

14 больных с высокой плотностью (более 68,6/мм ) микрососудов даже при наличии полной и очень хорошей частичной ремиссии.

4. Гранулоцитарный колониестимулирующий фактор в схеме мобилизации приводит к достоверному увеличению плотности микрососудов в костном мозге у больных множественной миеломой (с 72,5 л

3,1 до 90,0 ± 2,6 микрососудов/мм , р<0,05), а также при лимфосаркомах и лимфогранулематозе (с 48,2 ± 4,3 до 73,2 ± 4,4 на мм2 , р<0,05) и у больных острыми лейкозами (с 43,9 ± 4,2 до 74,1 + 5,8 микрососудов/мм2, р<0,05).

5. Мобилизация гемопоэтических стволовых клеток крови с

О О использованием различных доз циклофосфана (6 г/м или 4 г/м ) и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора обеспечивает сбор СБ34+ клеток в количестве, достаточном для выполнения двойной аутотрансплантации (29,45 ± 3,37 и 21,1 ± 3,68 х106/кг С034+клеток, соответственно) у 94,9 — 100% больных. Применение циклофосфана в дозе 6 г/м сопровождалось более высоким выбросом СИЗ 4+ клеток в периферическую кровь (р<0,01), в то время как при дозе циклофосфана 4 л г/м отмечена достоверно меньшая (р<0,05) потребность в заместительной гемотрансфузионной терапии.

6. Начало применения гранулоцитарного колониестимулирующего фактора в схеме мобилизации стволовых клеток крови при уровне леикоцитов менее

1 х109/л не снижает эффективность мобилизации и сбора СБ 34+ клеток, позволяя сэкономить 4-5 инъекций препарата.

Заключение

Высокодозная химиотерапия с последующей трансплантацией аутологичных гемопоэтических стволовых клеток является стандартом в современной терапии больных ММ моложе 65 лет. Благодаря внедрению в практику интенсивных высокодозных лечебных стратегий, а также новых биологически направленных лекарственных препаратов (ингибиторы протеосом, иммуномодуляторы), взгляды клиницистов на результаты терапии ММ значительно изменились. Появилась возможность обсуждать не только частоту полных и частичных ремиссий у больных ММ, но и оценивать длительность ремиссий, а также зависимость продолжительности ответа на лечение от глубины этого ответа. В клинических исследованиях последнего десятилетия было убедительно показано, что достижение полной ремиссии ассоциируется* с длительной" выживаемостью больных без прогрессии заболевания (ВБП). В то же время у пациентов, противоопухолевый ответ на лечение у которых был минимальным (МО) или не превышал параметров частичного (ЧО), прогрессия ММ наблюдалась в ближайшие сроки. [37, 132, 154, 229] В. Ваг^1е и соавт., проанализировав отдаленные результаты лечения ММ по программе Тотальной Терапии 2, показал, что достижение полной ремиссии сопровождается также и более высокими показателями, общей выживаемости. [38] Аналогичную закономерность отмечали Клш 18 и соавт., изучавшие влияние фазы заболевания перед аутологичной трансплантацией на общую выживаемость больных после трансплантации. При медиане посттрансплантационного наблюдения 22,4 месяца (разброс 0,4-96 мес.), общая выживаемость пациентов с документированной ПР перед трансплантацией значительно превышала таковую у пациентов, трансплантация которым выполнялась на фоне лишь ЧР (р=0,0015). [132].

Несмотря на многочисленные исследования, остается дискутабельным вопрос о необходимом количестве СЭ34+ клеток для успешного и быстрого восстановления гемопоэза после аутотрансплантации. [55, 78, 94, 102, 124, 173, 184. 227, 228, 256, 265] Целесообразность сбора значительного количества СЭ34+клеток у больных ММ диктуется не только потребностью выполнения двух трансплантаций. Анализ течения раннего посттрансплантационного периода у больных ММ, лейкозами и лимфомами показал, что доза перелитых СБ34+клеток оказывает влияние на сроки восстановления гранулоцитов в периферической крови. Так, продолжительность агранулоцитоза была достоверно меньше в группе больных, которым было трансплантировано более 5x106 СЭ34+ клеток/кг. Антибиотикотерапия у этих пациентов была отменена достоверно раньше, чем у больных с меньшей дозой трансплантированных С034+ клеток. Однако частота и характер инфекционных осложнений в ранние сроки после аутотрансплантации не зависели от дозы перелитых клеток и были одинаковыми у больных, которым перелили как более, так и менее 5x106 СБ34+ клеток/кг. [6].

Схемы, содержащие только Г-КСФ, используются для мобилизации ГСКК при различных онкогематологических заболеваниях. Преимуществами такой мобилизации на фоне стабильного состояния кроветворения является отсутствие фебрильной нейтропении, тяжелых инфекционных осложнений, продолжительной госпитализации, необходимости применения антибактериальной терапии и заместительных трансфузий компонентов крови. Однако количество С034+ клеток, которое удается собрать в результате мобилизации одним Г-КСФ, значительно уступает таковому при использовании сочетания химиотерапевтических препаратов и ростового фактора. [4, 42, 212] Клинические исследования, выполнявшиеся в нашей клинике в предыдущие годы, также статистически незначимыми. Что же касается параметров, характеризующих тромбоцитарный и эритроцитарный ростки кроветворения после применения схемы ЦФ+Г-КСФ, то глубокая тромбоцитопения и анемия наблюдались значительно чаще после применения ЦФ в дозе 6 г/м , что требовало достоверно большего объема заместительных трансфузий.

Аналогичные сведения представлены в некоторых зарубежных публикациях. Авторы отметили, что при практически равнозначных количествах собранных СБ34+клеток, в группе ЦФ 4 г/м2 отмечена л меньшая длительность нейтропении по сравнению с группой ЦФ 7г/м , меньшее число фебрильных эпизодов (73,8 и 97,3% соответственно, р<0,001), что потребовало меньшего применения системных антибиотиков (69,1 и 97,3% соответственно, р<0,001). Заместительные трансфузии л тромбоконцентратов также реже проводились в группе ЦФ 4 г/м по л сравнению с ЦФ 7 г/м (26,2 и 75,7% соответственно, р<0,001). Однако более 2,5x106/кг СБ34+ клеток удалось заготовить у 92,7% больных в группе ЦФ 4 г/м и лишь у 67,6% больных в группе ЦФ 7г/м , что связано с большей частотой инфекционных осложнений. [87, 123, 135]

С целью определения оптимальных сроков начала введений колониестимулирующего фактора в схеме мобилизации ЦФ + Г-КСФ, были проанализированы результаты мобилизации и сбора ГСКК у л больных, доза ЦФ у которых равнялась 6 г/м . Было показано, что дата первого сбора ГСКК выпадала на одни и те же сроки (медиана - 15-ый день после введения ЦФ) вне зависимости от того, на 3-ий, 5-ый день от начала мобилизации или уже на фоне развившегося агранулоцитоза приходилось начало инъекций Г-КСФ. Эффективность мобилизации и сбора ГСКК также оказалась одинаковой независимо от сроков начала введения Г-КСФ или от продолжительности его применения. Полученные нами результаты подтвердили, что экономия 3-5 доз Г-КСФ у каждого пациента за счет более позднего назначения препарата в схеме мобилизации не снижает эффективность мобилизации ГСКК, обеспечивая достаточный для нескольких аутологичных трансплантаций сбор СЭ34+ клеток.

На основании проведенного анализа стало возможным заключить, что схема ЦФ+Г-КСФ является адекватной для мобилизации ГСКК у больных ММ. В нашей работе у 90 из 93 (96,7%) больных мобилизация по этой схеме завершилась успешным сбором СВ34+ клеток в количестве, достаточном для двух аутотрансплантаций. Эффективность мобилизации и сбора ГСКК не зависела от сроков начала введения Г-КСФ или от продолжительности его применения, что позволило оптимизировать схему мобилизации. Нами было показано, что начало лейкаферезов приходится в среднем на 15-ый день после введения ЦФ. Это позволяет планировать приблизительные сроки начала мобилизации, чтобы сбор С034+ клеток, по возможности, не выпадал на выходные дни. Кроме того, при подробном анализе роли импульсного воздействия высоких доз циклофосфана в формировании противоопухолевого ответа при ММ было выявлено, что дополнительный противоопухолевый эффект наблюдался лишь у пациентов с химиочувствительной опухолью. При сохраняющейся значимой секреции парапротеина (5,2-16,8 г/л) не происходило выраженной редукции опухолевого клона. Доза ЦФ, равная 4 г/м , может рассматриваться как оптимальная, позволяющая собрать достаточное для двух аутотрансплантаций количество СБ34+ клеток, сопровождающаяся менее глубокой тромбоцитопенией и меньшей потребностью в заместительных трансфузиях, и не вызывающая серьезных токсических осложнений.

Гистологическое исследование костного мозга, особенно проведенное в динамике на разных этапах подготовки и проведения аутоТГСКК, является единственным методом, позволяющим оценить структуру, клеточность и взаимоотношение клеточных элементов гемопоэтической ткани и стромы и, таким образом, получить наиболее полную и достоверную характеристику костномозгового кроветворения. Нам встретились лишь единичные работы, в которых описаны изменения в костном мозге, строме и костной ткани больных ММ, происходящие на фоне лечения. [5, 11]

С целью более глубокого изучения изменений, происходящих в кроветворной ткани и стромальном микроокружении при мобилизации ГСКК у больных ММ, нами были использованы гистологические, иммуногистохимические и морфометрические методы исследования. Показано, что применение высоких доз ЦФ с последующим длительным назначением Г-КСФ с целью мобилизации ГСКК не влияет на общую клеточность костного мозга, но приводит к нарушению соотношения! среди клеток нормального гемопоэза. Это проявляется заметным снижением количества эритрокариоцитов, в то время- как происходит увеличение клеток гранулоцитарного ростка. Количество мегакариоцитов после мобилизации у большинства больных оставалось сниженным, тогда как до мобилизации у 50% пациентов мегакариоцитарный росток был нормальным или расширенным.

Результаты гистологического исследования КМ были подтверждены морфометрическим и иммуногистохимическим исследованием. Отмечено, что соотношение площади кроветворной ткани и площади жировой ткани практически не изменилось. Небольшое повышение площади кроветворной ткани после мобилизации (44,1 ± 3,19% против 41,6 ± 1,93%, соответственно) статистически не достоверно. В то же время выявлено достоверное снижение площади костной ткани после мобилизации (13,1 ± 0,60% против 14,4 ± 0,62%. соответственно). Объяснения этого факта можно найти в работах Bishop N.J. и соавт., а также ряда других авторов, где было показано, что длительное применение Г-КСФ у молодых пациентов с тяжелой врожденной нейтропенией приводит к развитию остеопороза. [49] Уже на 3-й день применения Г-КСФ уменьшается концентрация специфического маркера костеобразования — сывороточного остеокальцина. Деградация костной ткани продолжается и после отмены Г-КСФ: в течение всего времени введения Г-КСФ и вплоть до 7-го дня после его отмены в моче оставалась повышенной концентрация дезоксипиридинолина — специфического маркера резорбции костной ткани. В эксперименте на мышах было обнаружено, что после назначения Г-КСФ количество остеокластов в костном мозге увеличивалось одновременно с повышением содержания дезоксипиридинолина в моче. [240].

После применения высоких доз ЦФ и Г-КСФ с целью мобилизации ГСКК наблюдалось повышение М:Е индекса как по данным ИГХ-исследования (до 4,9 ± 0,72), так и по данным подсчета миелограммы (до 6,93 ± 1,46), что еще раз достоверно подтверждало увеличение количества клеток миелоидного ряда. При этом повышение содержания клеток гранулоцитарного ряда и снижение количества эритрокариоцитов было выражено более ярко при изучении цитологических препаратов.

После мобилизации не было выявлено увеличения содержания СБ34+ клеток в костном мозге. Более того, ни в одном случае СБ34+ незрелые предшественники гранулоцитарного ряда не были обнаружены в центрах костномозговых полостей. Данный факт доказывает, что режим мобилизации ЦФ + Г-КСФ ведет к расширению гранулоцитарного ростка за счет увеличения содержания молодых форм, но не примитивных клеток, экспрессирующих С034+.

Мы учитывали, что изменения, произошедшие в костном мозге больных ММ после мобилизации ГСКК, связаны не только с длительным использованием Г-КСФ, но и с импульсным воздействием высоких доз ЦФ. Для того, чтобы изучить непосредственное влияние Г-КСФ на костномозговое кроветворение, нами было оценено состояние КМ у больных гемобластозами, которым мобилизация ГСКК проводилась в виде монотерапии Г-КСФ на фоне стабильного состояния кроветворения. Проведенное гистологическое исследование продемонстрировало, что после мобилизации у больных ОЛ резко возросла клеточность костного мозга, у 77,8% пациентов был выявлен гиперклеточный костный мозг, тогда как до мобилизации у 66,7% пациентов отмечалась гипоплазия кроветворения. Увеличение клеточности также было обусловлено увеличением числа клеток гранулоцитарного ряда. При этом не было выявлено влияния Г-КСФ на мегакариоцитарный росток. После применения Г-КСФ в гистологических препаратах КМ больных ОЛ, также как и у пациентов с ММ не было выявлено увеличения содержания примитивных СБЗ 4-позитивных клеток.

Результаты нашего исследования сопоставимы с данными, полученными- С.Маг1:те2 и соавт., исследовавших влияние Г-КСФ на содержание С034+ клеток и наиболее ранних клеток-предшественниц в костном мозге у 10 здоровых доноров, которым мобилизация ГСКК проводилась на фоне стабильного состояния кроветворения. Было выявлено значительное увеличение количества ядросодержащих клеток в костном мозге на фоне применения ростового фактора. Процентное содержание СБ34+ клеток в костном мозге уменьшалось с 0,88 (0,47-1,44) в первый день до 0,57 (0,32-1,87) в третий день и 0,42 (0,16-0,87) в пятый день. Авторы отметили небольшое увеличение общего количества С034+ клеток костного мозга на третий день мобилизации (0,66 х 109/л (0,130,77)), и снижение на пятый день (0,23 х 109/л (0,06-1,23)) по сравнению с исходными значениями (0,40 х 109/л (0,06-1,68)). Было выявлено уменьшение в костном мозге процентного содержания наиболее примитивных клеток-предшественниц (СБ34+СБ38-, СВ34+НЬА-1Ж-, СВ34+СВ117-). [168] Однако это исследование было выполнено с использованием цитологических и иммунофенотипических методик, что не позволяет оценить локализацию CD34+ клеток.

Полученные нами данные подтверждают имеющиеся сведения об отсутствии влияния Г-КСФ на количественное содержание CD34+ клеток. Более того, при проведении повторных процедур лейкафереза на фоне продолжающихся инъекций Г-КСФ не происходит дальнейшего увеличения количества CD34+ клеток в периферической крови. [131] Предполагается, что основную роль в процессе мобилизации CD34+ клеток в периферическую кровь играют нейтрофилы, в гранулах которых содержится эластаза и катепсин G. В ответ на связывание Г-КСФ с рецептором, зрелые гранулоциты индуцируют секрецию ферментов; Эластаза играет главную роль в миграции CD34+ клеток из стромы КМ путем разрушения VLA-4 и VCAM. Эти протеазы также разлагают CXCR4 и SDF-1. [155-158, 251], Применение Г-КСФ или циклофосфамида (ЦФ) ведет к резкому уменьшению экспрессии VCAM-1, что совпадает с накоплением гранулоцитов и высвобождением активных протеаз нейтрофилов (нейтрофильной эластазы и катепсина G), in vitro разрушающих VCAM-1/CD106. [158].

При изучении гистологических препаратов костного мозга больных множественной миеломой нами было обращено внимание на увеличенное количество микрососудов в кроветворной ткани. Причем плотность микрососудов то снижалась, то возрастала на фоне выполнения различных этапов терапии. Роль неоангиогенеза при некоторых опухолевых заболеваниях изучалась различными исследователями в течение последних лет. Прогностическое значение неоваскуляризации было впервые описано при меланоме кожи. Было найдено, что увеличенная сосудистая плотность при меланоме коррелирует с высоким метастатическим потенциалом. [103, 230]. Позже этот биологический феномен был описан и для других солидных и гематологических опухолей. [19-21, 28, 84, 105;, 162, 261] Так, у пациентов с острыми лейкозами плотность микрососудов в костном мозге в дебюте заболевания достоверно превышала таковую у пациентов контрольной группы, а при достижении клинико-гематологической ремиссии количество микрососудов было сравнимо с контрольной группой. [2]

Также имеются сообщения о наличии обратной зависимости между бессобытийной выживаемостью и уровнем факторов роста УЕвР и ЬБвР в сыворотке крови у пациентов с лимфомами. [46, 47, 214]

Некоторыми авторами было выявлено увеличение плотности микрососудов в костном мозге у больных множественной миеломой, причем как на фоне развернутой картины заболевания, так и после высокодозной химиотерапии и даже трансплантации аутологичных гемопоэтических стволовых клеток. Кроме того, было показано; что ангиогенез в костном мозге прогрессивно возрастает по мере озлокачествления парапротеинемического гемобластоза, начиная от моноклональной гаммапатии неясного генеза, «тлеющей» миеломы, множественной миеломы с клиническими проявлениями и заканчивая рецидивирующим и прогрессирующим течением ММ. [182, 204, 205, 219, 220, 250] Кроме того, О. Бегег и соавт. показали достоверные различия выживаемости больных ММ в зависимости от наличия низкой или высокой плотности микрососудов в костном мозге в дебюте заболевания. Также сообщалось о корреляции большого количества микрососудов в костном мозге и факторов неблагоприятного прогноза. Однако, несмотря на столь высокий интерес исследователей к значению ангиогенеза в клиническом течении ММ, в литературе не было найдено сведений, характеризующих динамику состояния ангиогенеза на всех этапах программной химиотерапии ММ от индукции до высокодозной консолидации.

В целях оценки прогностического значения ангиогенеза, нами было изучено изменение количества микрососудов в костномозговой ткани больных ММ на фоне проведения индукционной и высокодозной химиотерапии с последующей трансплантацией аутологичных гемопоэтических клеток, а также определена взаимозависимость состояния ангиогенеза и сохранения достигнутого противоопухолевого ответа после высокодозного лечения. По результатам проведенного исследования было отмечено, что у пациентов с ММ в дебюте заболевания количество микрососудов более чем в 2 раза превышало таковое у доноров и составляло в среднем, 96,0±5,3 микрососудов/мм2.

После каждого этапа программной терапии ММ (индукции, высокодозной консолидации) наблюдалось уменьшение количества микрососудов. Так, после завершения индукционного этапа оно составило л в среднем 78,6±3,9 микрососудов/мм . В это время уже у 44,5% пациентов была достигнута полная и очень хорошая частичная ремиссия. После завершения высокодозной трансплантационной терапии количество о микрососудов было в среднем 60,8+1,8 на мм , причем у 8 из 26 пациентов число микрососудов в КМ нормализовалось, составив 43,4-55,3 л сосудов/мм . При этом уже у 77,8% больных была констатирована полная и очень хорошая частичная ремиссия. По мере увеличения процента полных и очень хороших частичных ремиссий после выполнения каждого из этапов интенсивного лечения количество микрососудов в КМ достоверно снижалось. И после завершения высокодозной терапии средние значения плотности микрососудов снизились более чем на треть по сравнению с исходными значениями. При сопоставлении плотности микрососудов на каждом этапе терапии с показателями противоопухолевого ответа на терапию, была выявлена корреляция количества микрососудов со степенью выраженности противоопухолевого ответа.

Учитывая полученные данные, нами была выявлена зависимость между количеством микрососудов в КМ перед аутоТГСКК и показателями посттрансплантационной выживаемости без прогрессии.

Оказалось, что вероятность 5-летней выживаемости без признаков прогрессии заболевания составляла 82% у больных с «малым» (менее 68,6 микрососудов/мм) количеством микрососудов в КМ перед трансплантацией, в отличие от 19% для больных с «высоким» (более 68,6 микрососудов/мм2) содержанием микрососудов в КМ (р=0,0008).

Подобная зависимость выявлена также в исследовании Ргапеп и соавт., показавших в многофакторном анализе влияние плотности микрососудов в костном мозге в дебюте ММ на общую выживаемость и выживаемость без признаков прогрессии ММ. Медиана общей выживаемости составила 33 и 23 месяца (р=0,01) в группах пациентов с низкой и высокой' плотностью микрососудов, соответственно. Однако в данной работе не приведены результаты исследования ангиогенеза после индукционной и консолидационной терапии ММ. [200]

При сопоставлении отдаленных результатов высокодозной химиотерапии с последующей аутоТГСКК в зависимости от фазы заболевания на момент выполнения трансплантации было выявлено, что длительная выживаемость без признаков прогрессии ММ достоверно выше (р<0,0001) в группе пациентов, у которых достигнута полная или очень хорошая частичная ремиссия. Так, 5-ти летняя выживаемость после аутоТГСКК без признаков прогрессии в этой группе составляла 80%, тогда как для больных, у которых противоопухолевый ответ перед аутотрансплантацией оценивался как частичная ремиссия или стабилизация процесса, вероятность прожить 5 лет без прогрессии заболевания не превышала 13%. Наши результаты подтверждают данные, полученные в многоцентровых исследованиях, где было показано, что глубина противоопухолевого ответа коррелирует с длительной выживаемостью без признаков прогрессии ММ. [37, 38, 132, 151, 154, 229, 252]

Высоко значимые сведения были получены нами при сравнительном анализе отдаленных результатов аутологичной трансплантации у больных ММ в зависимости от различного сочетания перед трансплантацией двух признаков — количества микрососудов в КМ и степени противоопухолевого ответа. Наилучшие результаты 5-летней выживаемости без признаков прогрессии ММ (90%) отмечены у больных с низкой плотностью микрососудов и полной или очень хорошей частичной ремиссией перед выполнением аутотрансплантации. Также высокие показатели выживаемости (68%) получены и в группе больных с низкой4 плотностью сосудов и частичной ремиссией или даже стабилизацией ММ. Значительно хуже результаты 5-летней ВБП (20%) наблюдались у пациентов с высокой плотностью микрососудов даже при наличии полной или очень хорошей частичной ремиссии. И у всех пациентов из группы с высокой плотностью микрососудов и слабым противоопухолевым ответом прогрессия заболевания была выявлена в течение 2-х лет после аутотрансплантации.

Нам удалось убедительно доказать, что выживаемость без признаков прогрессии ММ достоверно выше у тех пациентов, у которых количество сосудов в КМ перед трансплантацией было менее 68,6/мм2, вне зависимости от достигнутого на этот момент противоопухолевого ответа. Именно количество сосудов в КМ явилось признаком, определявшим вероятность сохранения ремиссии после аутоТГСКК, опережая по значимости противоопухолевый ответ, достигнутый на этапе индукционной терапии.

Большой интерес представляло изучение изменения плотности микрососудов в костном мозге в результате длительного применения Г

КСФ, назначавшегося после введения высоких доз ЦФ с целью мобилизации ГСКК. У всех обследованных больных было выявлено увеличение количества микрососудов после завершения инъекций Г-КСФ. Так, если до мобилизации плотность микрососудов составляла 72,5±3,1, то после мобилизации она возросла до 90,0+2,6 микрососудов/мм2 (р=0,005). Однако в данной ситуации утверждать, что увеличение плотности микрососудов связано только с непосредственным влиянием Г-КСФ, не представляется возможным, поскольку мобилизация проводилась с использованием сочетания двух агентов — Г-КСФ и ЦФ.

Увеличение плотности микрососудов в костном мозге после мобилизации ГСКК с последовательным использованием химиотерапевтических препаратов и Г-КСФ было выявлено также у больных лимфопролиферативными заболеваниями. Плотность» микрососудов у пациентов' с лимфосаркомами и лимфогранулематозом после мобилизации увеличилась с 48,2±4,3 до 73,2±4,4 на мм2(р<0,001).

Непосредственное влияние Г-КСФ на ангиогенез в костном мозге было изучено в группе пациентов' с острыми лейкозами, которым мобилизацию, проводили одним Г-КСФ в дозе 10 мкг/кг в течение 5-7 дней. Плотность микрососудов до мобилизации составляла 43,9±4,2 на мм , это количество статистически не отличалось от условной нормы, что еще раз подтверждало наличие ремиссии ОЛ. После применения Г-КСФ плотность микрососудов возросла до 74,1±5,8 микрососудов/мм .

Сопоставляя кратность увеличения плотности микрососудов КМ на фоне мобилизации у больных ММ, лимфопролиферативными заболеваниями и ОЛ, удалось отметить, что наиболее выраженное увеличение плотности наблюдалось именно у больных ОЛ, у которых использовался только один мобилизующий агент — Г-КСФ.

В опубликованной литературе приводится несколько объяснений такого феномена как увеличение количества микрососудов в результате применения Г-КСФ. Так, Уи. ОЫа сообщал, что стимуляция ангиогенеза при применении Г-КСФ связана с высвобождением УЕОБ, содержащегося в везикулах и цитоплазматических гранулах нейтрофилов. В свою очередь увеличение концентрации УЕОБ приводит к мобилизации эндотелиальных клеток-предшественников. [185] Именно на этом основана методика лечения инфаркта миокарда, когда Г-КСФ вводится местно в ишемизированную ткань. Это приводит к увеличению плотности капилляров в поврежденном миокарде. В более ранних исследованиях на животных моделях было показано, что при инфаркте миокарда регенерация ткани связана с мобилизацией костномозговых клеток или эндотелиальных клеток-предшественников, участвующих в неоангиогенезе и васкулогенезе. [136, 187,210, 225, 266]

Итак, в результате проведенных исследований удалось оптимизировать протокол мобилизации ГСКК у больных множественной миеломой. Отработаны сроки начала введений ростового фактора, позволившие сэкономить 3-5 флаконов препарата. Установлены оптимальные дозы ЦФ в схеме мобилизации, обеспечивающие заготовку необходимого количества CD34+ клеток при минимальной потребности в сопроводительной терапии.

Убедительно показано, что при применении Г-КСФ происходит выраженная гиперплазия костного мозга за счет увеличения количества клеток гранулоцитарного ряда. При этом имеет место нарастание количества не только зрелых генераций, но и промежуточных форм. В то же время не отмечается нарастания СБ34+ бластных клеток с появлением их атипичной локализации.

Изучение плотности микрососудов в КМ больных ММ на фоне различных этапов, интенсивного лечения позволило убедительно-показать, что количество микрососудов является важным прогностическим признаком, определяющим вероятность продолжительной выживаемости без прогрессии после аутотрансплантации. Полученные нами данные позволяют предложить состояние ангиогенеза у больных ММ как один из ведущих прогностических факторов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Покровская, Ольга Станиславовна, 2011 год

1. Андреева Л.Ю., Тупицын H.H., Кадагидзе З.Г. и соавт. Стволовые гемопоэтические клетки в крови онкологических больных: экспрессия CD34 и колониеобразование/ЛГематология и трансфузиология.- 1999.-Т.44,№4.-С.З-11.

2. Гайдамака Н.В. Гистологический мониторинг кроветворной ткани у больных острыми лейкозами на фоне современной химиотерапии: Автореф. дис. . канд. мед. наук.-М.,2010.-24С.

3. Голышевская В.И., Егорова О.В., Севастьянова Э.В. и соавт. Люминесцентная микроскопия. Учебное пособие для проведения курсов обучения. М.,2008. - 36С.

4. Зубаровская Л.С., Семенова Е.В., Бабенко Е.В и соавт. Эффективность мобилизации периферических стволовых клеток крови с помощью препарата лейкостим у больных злокачественными новообразованиями/Юнкогематология.-2008.-№1.-С.70-75.

5. Краевский H.A., Неменова Н.М., Хохлова М.П. Патологическая анатомия и вопросы патогенеза лейкозов.-М.,1965.-С.246-259.

6. Менделеева Л.П., Митиш Н.Е., Клясова Г.А. и соавт. Инфекционные осложнения после трансплантации аутологичных гемопоэтических клеток при гемобластозах//Терапевтический архив.-2005.-Том77,№7.-С.33-39.

7. Менделеева Л.П., Савченко В.Г., Павлова O.A. и соавт. Мобилизация гранулоцитарным колониестимулирующим фактором аутологичных гемопоэтических клеток крови у больных лимфомами и раком молочной железы/ЯТроблемы гематологии.-1999.-№4.-С.5-12.

8. Павлова O.A. Мобилизация и трансплантация аутологичных гемопоэтических клеток у больных лимфопролиферативными заболеваниями: Автореф. дис.канд. мед. наук.-М.-2001.-24С.

9. Рощина JI.C. Патоморфология множественной миеломы по данным трепанобиопсий костного мозга (диагностическое и прогностическое значение): Автореф. дис. .канд. мед. наук.-М.,1992.-25С.

10. Руководство по гематологии. Под редакцией академика А.И. Воробьева.-М.,2007.-С.57.

11. Румянцев А.Г., Масчан A.A. Трансплантация гемопоэтических стволовых клеток у детей: Руководство для врачей.-М.,2003.-С.86-99.

12. Румянцев С.А., Владимирская Е.Б., Румянцев А.Г. Механизмы Г-КСФ-индуцированной мобилизации гемопоэтических стволовых клеток//В опросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии.-2003.-Т.2,№4.-С.5-9.

13. Чертков И.Л., Дризе Н.И., Воробьев А.И. Схема кроветворения: 2005//Терапевтический архив.-2006.-Т.77,№7.-С.5-11.

14. Aceñero M.J., Gonzales J.F., Gallego G.M. et al. Vascular enumeration as a significant prognosticator for invasive breast carcinoma//J. Clin. Oncol.-1998.-Vol. 165,№5 .-P. 1684-1688.

15. Adams G.B., Martin R.P., Alley I.R. et al. Therapeutic targeting of a stem cell niche//Nat. Biotechnol.-2007.-Vol.25,№2.-P.23 8-243.

16. Adler B.K., Salzman D.E., Carabasi M.H. et al. Fatal sickle cell crisis after granulocyte colony-stimulating factor administration//Blood.-2001.-Vol.97,№10.-P.3313-3314.

17. Aguayo A., Estey E., Kantarjian H. et al. Cellular vascular endothelial growth factor is a predictor of outcome in patients with acute myeloid leukemia//Blood.-1999.-Vol.94,№ 11 .-P.3717-3721.

18. Aguayo A., Kantarjian H., Estey E.H. et al. Plasma vascular endothelial growth factor levels have prognostic significance in patients with acute myeloid leukemia but not in patients with myelodysplastic syndromes//Cancer.-2002.-Vol.95,№5.-P.1923-1930.

19. Aguayo A., Kantarjian H., Manshouri T. et al. Angiogenesis in acute and chronic leukemias and myelodysplastic syndromes//Blood.-2000.-Vol.96,№6.-P.2240-2245.

20. Alegre A., Tomas J.P., Martfnez-Chamorro C. Comparison of peripheral blood progenitor cell mobilization in patients with multiple myeloma: highdose cyclophosphamide plus GM-CSF vs. G-CSF alone/ZBone Marrow Transplant.-1997.-Vol.20,№3 .-P.211-217.

21. Alvares C.L., Davies F.E., Horton C. et al. The role of second autografts in the management of myeloma at first relapse//Haematologica.-2006.-Vol.91,№l.-P.141-142.

22. Anderlini P., Przepiorka D., Seong C. et al. Factors affecting mobilization of CD34+ cells in normal donors treated with filgrastim//Transfusion.-1997.-Vol.37,№5.-P.507-512.

23. Anderlini P., Korbling M., Dale D. et al. Allogeneic blood stem cell transplantation: consideration for donors//Blood.-1997.-Vol.90,№3.-P.903-908.

24. Aref S., Salama O., Shamaa S. et al. Angiogenesis factor pattern differs in acute lymphoblastic leukemia and chronic lymphocytic leukemia//Hematology.-2007.-Vol.12, №4.-P.319-324.

25. Arimura K., Inoue H., Kukita T. et al. Acute lung injury in a healthy donor during mobilization of peripheral blood stem cells using granulocyte-colony stimulating factor alone//Haematologica.-2005.-№90.-ECR 10.

26. Attal M., Harousseau J.L., Stoppa A.M. et al. A prospective, randomized trial of autologous bone marrow transplantation and chemotherapy in multiple myeloma. Intergroupe Français du Myelome//N. Engl. J. Med.-1996.-Vol.335,№2.-P.91-97.

27. Aznavoorian S., Murphy A.N., Stetler-Stevenson W.G. et al. Molecular aspects of tumor cell invasion and metastasis//Cancer.-1993.-Vol.71,№4.-P. 1368—1383.

28. Balaguer H., Calmes A., Ventayol G. et al. Splenic rupture after granulocyte colony-stimulating factor mobilization in a peripheral blood progenitor cell donor//Transfusion.-2004.-Vol.44s№8.-P. 1260-1261.

29. Barlogie B., Jagannath S., Desikan K.R. et al. Total therapy with tandem transplants for newly diagnosed patients//Blood.-1999.-VoL93,№l.-P.55-65.

30. Barlogie B., Pineda-Roman M., van Rhee F. et al. Thalidomide arm of Total Therapy 2 improves complete remission duration and survival in myeloma patients with metaphase cytogenetic abnormalities//Blood.-2008.-Vol. 112,№8 P.3115-3121.

31. Benito A.I., Diaz M.A., Gonzalez-Vicent M. et al. Hematopoietic stem cell transplantation using umbilical cord blood progenitors: review of current clinical results//Bone Marrow Transplant.-2004.-Vol.33,№7.-P.675-690.

32. Bensinger W., DiPersio J.F., McCarty J.M. Improving stem cell mobilization strategies: future directions//Bone Marrow Transplant.-2009.-Vol.43,№3.-P.181-195.

33. Bensinger W., Appelbaum F., Rowley S. et al. Factors that influence collection and engraftment of autologous peripheral blood stem cells//J. Clin. Oncol.-1995.-Vol.l3,№10.-P.2547-2555.

34. Bensinger W.I., Martin P. J., Storer B. et al. Transplantation of bone marrow as compared with peripheral blood cells from HLA-identical relatives in patients with hematologic cancers//N. Engl. J. Med.-2001.-Vol.344,№3.-P.175-181.

35. Bertolini F. Biomarkers for angiogenesis and antiangiogenic drugs in clinical oncology//Breast.-2009.-Vol. 18,№3 .-P.48-50.

36. Bertolini F., Paolucci M., Peccatori F. et al. Angiogenic growth factors and endostatin in non-Hodgkin's lymphoma//Br. J. Haematol.-1999.-Vol.l06,№2.-P.504-509.

37. Bishop M.R., Anderson J.R., Jackson J.D. et al. High-dose therapy and peripheral blood progenitor cell transplantation: effects of recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor on the autograft/ZBlood.-1994.-Vol.83 ,№2.-P.610-616.

38. Bishop N.J., Williams D.M., Compston J.C. et al. Osteoporosis in severe congenital neutropenia treated with granulocyte colony-stimulating factor//Br. J. Haematol.-1995.-Vol.89,№4.-P.927-928.

39. Blume K.G., Thomas E.D. A review of autologous hematopoietic cell transplantation//Biol. Blood Marrow Transplant.-2000.-Vol.6,№ 1 .-P. 1-12.

40. Boccadoro M., Palumbo A., Bringhen S. et al. Oral melphalan at diagnosis hampers adequate collection of peripheral blood progenitor cells in multiple myeloma//Haematologica.-2002.-Vol.87,№8.-P.846-850.

41. Bodine D.M., Seidel N.E., Zsebo K.M. et al. In vivo administration of stem cell factor to mice increases the absolute number of pluripotent hematopoietic stem cells//Blood.-1993.-Vol.82,№2.-P.445-455.

42. Bojko P., Waschek S., Seeber S. et al. Comparison of G-CSF and GM-CSF in combination with chemotherapy for peripheral blood stem cell (PBSC) mobilization//Blood.-2001 .-Vol.98, №11 .-P.81.

43. Broxmeyer H.E., Orschell C.M., Clapp D.W. et al. Rapid mobilization of murine and human hematopoietic stem and progenitor cells with AMD3100, a CXCR4 antagonist//.!. Exp. Med.-2005.-Vol.201,№8.-P.1307-1318.

44. Carmeliet P. Mechanisms of angiogenesis and arteriogenesis//Nat. Med.-2000.-Vol.6,№4.-P.-389-395.

45. Carrai A., de la Rubia J., Martin G. et al. Factors influencing the collection of peripheral blood stem cells in patients with acute myeloblasts leukemia and nonmyeloid malignancies//Leuk. Res.-2003.-Vol.27 ,№1.-P.5-12.

46. Cesana C., Regazzi E., Garau D. et al. Clonogenic potential and phenotypic analysis of CD34+ cells mobilized by différent chemotherapy regimens// Haematologica.-1999.-Vol.84,№9.-P.771 -778.

47. Chaudhary R., Bromley M., Clarke N.W. et al. Prognostic relevance of micro-vessel density in cancer of the urinary bladder//Anticancer Res.-1999.-Vol. 19,№4.-P.3479-3484.

48. Child J.A., Morgan G.J., Davies F.E. et al. High-dose chemotherapy with hematopoietic stem-cell rescue for multiple myeloma//N. Engl. J. Med.-2003 .-Vol.348,№ 19.-P. 1875-1883.

49. Civin C., Strauss L. Antigenic analysis of haematopoesis III. A haematopoetic progenitor cell surface antigen defined by a monoclonal antibody reside against KG-1 cells//J. Immunol.-1984.-Vol.l33,№l.-P.157-165.

50. Conti J.A., Scher H.I. Acute arterial thrombosis after escalated-dose methotrexate, vinblastine, doxorubicin and cisplatin chemotherapy withrecombinant granulocyte colony-stimulating factor//Cancer.-1992.-Vol.70,№l 1 .-P.2699-2702.

51. Cottle T.E., Fier C.J., Donadieu J. et al. Risk and benefit of treatment of severe chronic neutropenia with granulocyte colony-stimulating factor//Semin. Hematol.-2002.-Vol.39,№2.-P. 134-140.

52. Dale D.C., Bonilla M.A., Davis M.W. et al. A randomized controlled phase III trial of recombinant human granulocyte colony-stimulating factor (filgrastim) for treatment of severe chronic neutropenia//Blood.-1993.-Vol.81 ,№ 10.-P.2496-2502.

53. De Boer F., Drager A.M., Van Haperen MJ. et al. The phenotypic profile of CD34-positive peripheral blood stem cells in different mobilization regimens//Br. J. Haematol.-2000.-Vol.l 11,№4.-P.l 138-1144.

54. Demirer T., Buckner C.D., Gooley T. et al. Factors influencing collection of peripheral blood stem cells in patients with multiple myeloma//Bone Marrow Transplant.-1996.-Vol.l7,№6.-P .937-941.

55. Devine S.M., Flomenberg N., Vesole D.H. et al. Rapid mobilization of CD34+ cells following administration of the CXCR4 antagonist AMD3100 to patients with multiple myeloma and non-Hodgkiris lymphoma//J. Clin. Oncol.-2004.-Vol.22,№6.-P. 1095-1102.

56. Dincer A.P., Gottschall J., Margolis D.A. Splenic rupture in a parental donor undergoing peripheral blood progenitor cell mobilization//J. Pediatr. Hematol. Oncol.-2004.-Vol.26,№ 11 .-P.761 -763.

57. Dvorak H.F., Nagy J.A., Feng D. et al. Vascular permeability factor/ vascular endothelial growth factor and the significance of microvascular hyperpermeability in angiogenesis//Curr. Top. Microbiol. Immunol.-1999.1. V0I.237.-P.97-I32.

58. EbiharaY., Xu M.I., Manabe A. et al. Exclusive expression of G-CSF receptor on myeloid progenitors in bone marrow CD34+-cells//Br. J. Haematoli-2000.-Vol. 109,№ 1.-P.153-161.

59. Englehardt M., Bertz H., Afting M. et al. High-versus standard-dose filgrastim (rhG-CSF) for mobilization of peripheral-blood progenitor cells from allogenic donors and CD34+ immunoselection//J. Clin. Oncol.- 1999.-Vol.l7,№7.-P.2160-2172.

60. Faderl S., Do K.A., Johnson M.M. et al. Angiogenic factors may have a different prognostic role in adult acute lymphoblastic leukemia//Blood.-2005.-Vol. 106,№ 13 .-P.4303-4307.

61. Falzetti F., Aversa F., Minelli O. et al. Spontaneous rupture of spleen during peripheral blood stem-cell mobilization in a healthy donor//Lancet.- 1999.-Vol.353,№9152.-P.555.

62. Fleming D.R., Goldsmith J., Goldsmith G.H. et al. Mobilization of peripheral blood stem cells in high-risk breast cancer patients using G-CSF after standard dose doxetaxel//J. Hematother. Stem Cell Res.- 2000.-Vol.9,№6.-P.855-860.

63. Folkman J. Seminars in Medicine of the Beth Israel Hospital, Boston. Clinical applications of research on angiogenesis//N. Engl. J. Med.-1995.-Vol.333,№26.-P. 1757-1763.

64. Fossa S.D., Poulsen J.P., Aaserud A. Alkaline phosphatase and lactate dehydrogenase changes during leukocytosis induced by G-CSF in testicular cancer//Lancet.-1992.-Vol.340,№8834-8835.-P.1544.

65. Fruehauf S., Klaus J., Huesing J. et al. Efficient mobilization of peripheral blood stem cells following CAD chemotherapy and a single dose of pegylated G-CSF in patients with multiple myeloma//Bone Marrow Transplant.-2007.-Vol.39,№12.-P.743-750.

66. Fu S., Liesveld J. Mobilization of hematopoietic stem cells//Blood Rev.-2000.-Vol. 14,№4.-P.205-218.

67. Gallego G.M., Acenero M.J., Sanz Ortega J. et al. Vascular enumeration as a prognosticator for colorectal carcinoma//Eur. J. Cancer.-2000.-Voli36,№l.-P.55-60.

68. Gazitt Y. Comparison between granulocyte colony-stimulating factor and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in the mobilization of peripheral blood stem cells//Curr. Opin. Hematol.-2002.-Vol.9,№3.-P.190-198.

69. Gerlach L.O., Skerlj R.T., Bridger GJ. et al. Molecular interactions of cyclam and bicyclam non-peptide antagonists with the cxcr4 chemokine receptor//J. Biol. Chem.-2001 .-Vol.276,№ 17.-P.14153-14160.

70. Goldman J.M., Horowitz M.M. The international bone marrow transplant registry//Int. J. Hematol.-2002.-Vol.76,Suppl. 1 .-P.393-397.

71. Gordan L.N., Sugrue M.W., Lynch J.W. et al. Poor mobilization of peripheral blood stem; cells is a risk factor for worse outcome in ¡lymphoma patients undergoing autologous stem cell transplantation//Leuk. Lymphoma.-2003.-Vol.44,№5.-P.815-820.

72. Graham C.H., Rivers J., Kerbel R.S. et al. Extent of vascularization as a prognostic indicator in thin (<0.76 mm) malignant melanomas//Am. J. Pathol.-1994.-VoI. 145,№3 .-P. 510-514:

73. Grignani G., Perissinotto E., Cavalloni G. et al. Clinical use of AMD3100 to mobilize CD34+ cells in patients affected by non-Hodgkin's lymphoma or multiple myeloma//J. Clin. 0ncol.-2005.-Vol.23,№ 16.-P.3 871-3 872.

74. Grosicki S., Grosicka A., Holowiecki J. Clinical importance of angiogenesis and: angiogenic factors in oncohematology//Wiad. Lek.-2007.-Vol.60,№l-2.-P.39-46.

75. Gupta M.K., Qin R.Y. Mechanism and its regulation of tumorinduced angiogenesis//World J. Gastroenterol.-2003.-Vol.9,№6.-P.l 144-1155.

76. Haas R., Ho A.D., Bredthauer U. et al. Successful autologous transplantation of blood stem cells mobilized with recombinant humangranulocyte-macrophage colony-stimulating factor//Ex. Hematol.- 1990.-Vol. 18,№2.-P.94-98.

77. Hari P., Pasquini M.C., Vesole D.H. Cure of multiple myeloma—more hype, less reality//Bone Marrow Transplant.-2006.-Vol.37,№l.-P.l-18.

78. Harousseau J.L., Moreau P; Role of bone marrow transplantation in the disease pathway of myeloma//J. Natl. Compr. Cane. Netw.-2007.-Vol.5,№2.-P. 163-169.

79. Heldal D., Tjonnfjord G., Brinch L. et al. A randomized study of allogeneic transplantation with stem cells from blood or bone marrow/ZBone Marrow Transplant.-2000.-Vol.25,№l l.-P.l 129-1136.

80. Hibbin J.A., Njoku O.S., Matutes E. et al. Myeloid progenitor cells in the circulation of patients with myelofibrosis and other myeloproliferative disorders//Br. J. Haematol.-1984.-Vol.57,№3 .-P.495-503.

81. Hilbe W., Nussbaumer W., Bonatti H. et al. Unusual adverse events following peripheral blood stem cell (PBSC) mobilization using granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) in healthy donors/ZBone Marrow Transplant.-2000.-Vol.26,№7.-P. 811-813.

82. Horowitz M.M., Confer D.L. Evaluation of hemopoietic stem cell donors/ZHematology Am. Soc. Educ. Program.-2005.-P.469-475.

83. Hosing C., Qazilbash M.H., Kebriaei P. et al. Fixed-dose single agent pegfilgrastim for peripheral blood progenitor cell mobilisation in patients with multiple myeloma//Br. J. Haematol.-2006.-Vol. 133,№5.-P.533-537.

84. Hussong J.W., George M.P., Shami PJ. et al. Evidence of increased angiogenesis in patients with acute myeloid leukemia//Blood.-2000.-Vol.95, №1.-P.309-313.

85. Jackson J.D., Yan Y., Branda M.J. et al. Interleukin-12 enhances peripheral hematopoiesis in vivo//Blood.-l 995 .-Vol.85,№9.-P.2371-2376.

86. Jagannath S., Durie B.G., Wolf J. et al. Bortezomib therapy alone and in combination with dexamethasone for previously untreated symptomatic multiple myeloma//Br. J. Haematol.-2005.-Vol. 129,№6.-P.776-783.

87. Jansen J., Thompson J., Dugan M. et al. Impaired PBPC collection in patients with myeloma after high-dose melphalan//Cytotherapy.-2004.-Vol.6,№5.-P.498-504.

88. Jillella A.P., Ustun C. What is the optimum number of CD34+ peripheral blood stem cells for an autologous transplant?//Stem Cells Dev.2004.-Vol.l3,№6.-P.598-606.

89. Kanaji T., Okamura T., Nagafiiji K. et al. Megakaryocytes produce the receptor for granulocyte colony-stimulating factor//Blood.-1995.-Vol.85,№l 1.-P.3359-3360.

90. Kang E., Areman E., David-Ocampo V. et al. Mobilization, collection and processing of peripheral blood stem cells in individuals with sickle cell trait//Blood.-2002.-Vol.99,№3.-850-855.

91. Kiel K., Cremer F.W., Ehrbrecht E. et al. First and second apheresis in patients with multiple myeloma: no differences in tumor load and hematopoietic stem cell yield//Bone Marrow Transplant.-1998.-Vol.21,№l 1 .-P.l 109-1115.

92. Knudsen L.M., Rasmussen T., Nikolaisen K. et al. Mobilization of tumor cells along with CD34+ cells to peripheral blood in multiple myeloma//Eur. J. Haematol.-2001 .-Vol.67,№5-6.-P.289-295.

93. Knudsen L.M., Rasmussen T., Jensen L. et al. Reduced bone marrow stem cell pool and progenitor mobilisation in multiple myeloma after melphalan treatment//Med. Oncol.-1999.-Vol. 16,№4.-P.245-254.

94. Koenigsmann M., Jentsch-Ullrich K., Mohren M., et al. The role of diagnosis in patients failing peripheral blood progenitor cell mobilization//Transfusion.-2004.-Vol.55,№5.-P.777-784.

95. Kolbe K., Peschel C., Rupilius B. et al. Peripheral blood stem cell (PBSC) mobilization1 with chemotherapy followed by sequential IL-3 and G-CSF administration in extensively pretreated patients/ZBone Marrow Transplant.-1997.-Vol.20,№12.-P. 1027-1032.

96. Korbling M. Collection of allogeneic peripheral blood stem cells. Baillieres BestPract. Res. Clin. Haematol.-1999.-Vol.l2,№l-2.-P.41-55

97. Kotasek D., Sherpherd S.M., Sage R.E. et al. Factors affecting blood stem cell collections following high-dose cyclophosphamide mobilisation in lymphoma, myeloma, and solid tumors//Bone Marrow Transplant.-1992.-Vol.9,№ 1 .-P. 11 -17.

98. Krause D., Fackler M., Civin C. et al. CD34: structure, biology and clinical utility//Blood.-1996.-Vol. 87,№ 1 .-P. 1 -13.

99. Kroschinsky F., Holig K., Poppe-Thiede K. et al. Single-dose Pegfilgrastim for the mobilization of allogenic CD34+ peripheral blood progenitor cells in healthy family and unrelated donors//Haematologica.-2005.-Vol.90,№12.-P.1665-1671.

100. Kuittinen T., Nousiainen T., Halonen P. et al. Prediction of mobilization failure in patients with non-Hodgkin's lymphoma//Bone Marrow Transplant.-2004.-Vol.33,№9.-P.907-912.

101. Kumar S., Hayman S., Buadi F. et al. Phase II trial of lenalidomide (RevlimidTM) with cyclophosphamide and dexamethasone (RCd) for newly diagnosed myeloma//Blood: ASH Annual Meeting Abstracts.-2008.-Vol. 112,№11 .-P.40.

102. Kurnick JE, Robison WA. Colony growth of human peripheral white blood cells in vitro//Blood.-1971.-Vol.37,№2.-P.136-141.

103. Lapidot T., Petit I. Current understanding of stem cell mobilization: the roles of chemokines, proteolytic enzymes, adhesion molecules,, cytokines, andstromal cells//Exp. Hematol.-2002.-Vol.30,№9.-P.973-981.

104. Lemoli R.M., Martinelli G., Olivieri A. et al. Selection and transplantation of autologous CD34+ B-lineage negative cells in advanced-phase multiple myeloma patients: a pilot study//Br. J. Haematol.-1999.-Vol. 107,№2.-P.419-428

105. Levesque J.P., Bendall L.J., Hendy J. et al. Neutrophil enzymes degrade CXCR4 on CD34+ progenitors: implications for progenitor cell mobilization//Blood.-2002.-Vol. 100.-P. 107.

106. Levesque J.P., Hendy J., Takamatsu Y. et al. Disruption of the CXCR4-CXCL12 chemotactic interaction during hematopoietic stem cell mobilization induced by GCSF or cyclophosphamide//!. Clin. Invest.-2003.-Vol. Ill ,№2.-P. 187-196.

107. Levesque J.P., Hendy J., Takamatsu Y. et al. Mobilization by eitheer cyclophosphamide or granulocyte colony-stimulating factor tfansforms the bone marrow into a highly proteolitic environment//Exp. Hematol.- 2002.-Vol.3 0,№5 .-P.440-449.

108. Liles W.C., Broxmeyer H.E., Rodger E. et al. Mobilization of hematopoietic progenitor cells in healthy volunteers by AMD3100, a CXCR4 antagonist//Blood.-2003 .-Vol. 102,№8.-P.2728-2730.

109. Liu F., Poursine-Laurent J., Link D.C. Expression of the G-CSF receptor on hematopoietic progenitor cells is not required for their mobilization by G-CSF//Blood.-2000.-Vol.95 ,№ 10.-P.3 025-3 031.

110. Ludwig H., Beksac M., Blade J. et al. Current multiple myeloma treatment strategies with novel agents: a European perspective//The Oncologist.-2010.-Vol.l5,№l.-P.6-25.

111. Maeda K., Chung Y-S., Takatsuka S. et al. Tumor angiogenesis as a predictor of recurrence in gastric carcinoma//J. Clin. Oncol.- 1995.-Vol. 13,№2.-P.477-481.

112. Mahe B., Milpied N., Hermouet S. et al. G-CSF-alone mobilizes sufficient peripheral blood CD34+ cells for positive selection in newly diagnosed patients with myeloma and lymphoma//Br. J. Haematol.-1996.-Vol.92,№2.-P.263-268.

113. Makita K., Ohta K., Mugitani A et al. Acute myelogenous leukemia in a donor after granulocyte colony-stimulating factor-primed peripheral blood stem cell harvest//Bone Marrow Transplant.-2004.-Vol.33,№6.-P.661-665.

114. Mark T., Stern J., Furst J.R. et al. Stem cell mobilization with cyclophosphamide overcomes the suppressive effect of lenalidomide therapy on stem cell collection in multiple myeloma//Biol. Blood Marrow Transplant.-2008.-Vol. 14,№7.-P.795-798.

115. Martinez C., Urbano-Ispizua A., Marin P. et al. Efficacy and toxicity of a high-dose G-CSF schedule for peripheral blood progenitor cell mobilization in healthy donors//Bone Marrow Transplant.-1999.-Vol.24,№12.-P.1273-1278.

116. Martinez C., Urbano-Ispizua A., Rozman M. et al. Effects of short-term administration of G-CSF (filgrastim) on bone marrow progenitor cells: analysis of serial marrow samples from normal donors//Bone Marrow Transplant.-1999.-Vol.23 ,№ 1 .-P. 15-19.

117. McCredie K.B., Hersh E.M., Freireich E.J. Cells capable of colony formation in the peripheral blood of man//Science.-1971.-Vol.l71,№968.-P.293-294.

118. Mele A., Leopardi G., Sparaventi G. et al. Mini-ICE effectively mobilises peripheral blood stem cells after fludarabine-based regimens in acute myeloid leukemia//Eur. J. Haematol.-2005.-Vol.74,№4.-P.277-281.

119. Menekay S., Ozsan G.H., Demirkan F. et al. Effect of granulocyte-colony-stimulating factor on serum lactate dehydrogenase levels and isoenzymes in a rabbit model//Acta Haematol.-2002.-Vol. 107,№1 .-P. 18-22.

120. Micallef I., Apostolidis J., Rohatiner A. et al. Factors which predict unsuccessful mobilization of peripheral blood progenitor cells following G-CSF alone in patients with non-Hodgkin's lymphoma/ZHematol. J.- 2000.-Vol. 1 ,№6.-P.367-373.

121. Montgomery M., Cottier-Fox M. Mobilization and collection of autologous hematopoietic progenitor/stem cells//Clin. Adv. Hematol. Oncol.- 2007.-Vol.5,№2.-P. 127-136.

122. Morris C., Siegel E., Barlogie B. et al. Mobilization of CD34+ cells in elderly patients (>/= 70 years) with multiple myeloma: influence of age, prior therapy, platelet count and mobilization regimen//Br. J. Haematol.-2003 .-Vol. 120,№3 .-P.413-423.

123. Moskowitz C.H., Glassman J.R., West D. et al. Factors affecting mobilization of peripheral blood progenitor cells in patients with lymphoma//Clin. Cancer Res.-1998.-Vol.4,№2.-P.311-316.

124. Munshi N.C., Wilson C. Increased bone marrow microvessel density in newly diagnosed multiple myeloma carries a poor prognosis//Semin. 0ncol.-2001.-Vol.28,№6.-P.565-569.

125. Murata M., Harada M., Kato S. et al. Peripheral blood stem cell mobilization and apheresis: analysis of adverse events in 94 normal donors/ZBone Marrow Transplant.-1999.-Vol.24,№10.-P.1065-1071.

126. Nademanee A., Forman SJ. Role of hematopoietic stem cell transplantation for advanced-stage diffuse large B-cell lymphoma-B//Semin. Hematol.-2006.-Vol.43 ,№4.-P.240-250.

127. Narayanasami U., Kanteti R., Morelli J. et al. Randomized trial of filgrastim versus chemotherapy and filgrastim mobilization of hematopoietic progenitor cells for rescue in autologous transplantation//Blood.-2001.-Vol.98,№7.-P.2059-2064.

128. Olin R.L., Vogl D.T., Porter D.L. et al. Second auto-SCT is safe and effective salvage therapy for relapsed multiple myeloma//Bone Marrow Transplant.-2009.-Vol.43 ,№5 .-P.417-422.

129. Orlic D., Kajstura, J. Chimenti S. et al. Mobilized bone marrow cells repair the infarcted heart, improving function and survival//Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2001 .-Vol.98,№ 18 .-P. 10344-10349.

130. Pakkali T., Volin I., Siren M.K., Ruutu T. Acute iritis induced by granulocyte colony-stimulating factor used for mobilization in a volunteer unrelated peripheral blood progenitor cell donor//Bone Marrow Transplant.-1996.-Volil7,№3.-P.433-434.

131. Papayannopoulou T., Priestley G.V., Nakamoto B. Anti-VL A4/VCAM-1 -induced mobilization requires cooperative signaling through the kit/mkit ligandpathway//Blood.-1998.-Vol.91,№7.-P.2231-2239.

132. Perez-Atayde A., Sallan S., Tedrow U. et al. Spectrum of tumor angiogenesis in the bone- marrow of children with acute lymphoblastic leukemia//Am. J. Pathol.-1997.-Vol. 150,№3.-P.815-821.

133. Pitini V., Ciccolo A., Arrigo C. et al. Spontaneous rupture of spleen during peripheral blood stem cell mobilization in a patient with breast cancer// Haematologica.-2000.-Vol.85,№5.-P.559-560.

134. Ponisch W., Leiblein S., Edel E. et al. Mobilization of peripheral blood progenitor cells (PBPC) in normal donors for allogeneic PBPCtransplantation: comparison between once a day vs. twice a day G-CSF administration/ZBlood.-1999.-Vol.94.-P. 13 7.

135. Prince H.M., Imrie K., Sutherland D.R. et al. Peripheral blood progenitor cell collections in multiple myeloma: predictors and management of inadequate collections//Br. J. Haematol.-1996.-Vol.93,№ 1 .-P. 142-145.

136. Prosper F., Stroncek D., McCarthy J.B. et al. Mobilization and homing of peripheral blood progenitors is related to reversible downregulation of alpha4 betal integrin expression and function//.!. Clin. Invest.-1998.-Vol. 101 ,№11 .-P.2456-2467.

137. Pruijt J.F., Willemze R:, Fibbe W.E. Mechanisms underlying hematopoietic stem cell mobilization induced by the GXG chemokine interleukin-8//Curr. Opin. Hematol.-1999.-Vol.6,№3 .-P. 152-158.

138. Pruneri G., Ponzoni M., Ferreri A.J. et al. Microvessel density, a surrogate marker of angiogenesis, is significantly related to survival in multiple myeloma patients//Br. J. Haematol.-2002.-Vol. 118,№3 .-P.817-820.

139. Pugh C.W., Ratcliffe P.J. Regulation of angiogenesis by hypoxia: role of the HIF system//Nat. Med.-2003.-Vol.9,№6.-P.677-684.

140. Rajkumar S.V., Fonseca R., Witzig T.E. et al. Bone marrow angiogenesis in complete responders after stem cell transplantation for multiple myeloma// Leukemia.-1999. Vol. 13 ,№3 .-P.469-472.

141. Rajkumar S.V., Mesa R:A., Fonseca R. et al. Bone Marrow Angiogenesis in 400 Patients with Monoclonal Gammopathy of Undetermined Significance, Multiple Myeloma, and Primary Amyloidosis//Clinical Cancer Reaearch.-2002.-Vol.8,№7.-P.2210-2216.

142. Reeder C.B., Reece D.E., Kukreti V. et al. Cyclophosphamide, bortezomib and dexamethasone induction for newly diagnosed multiple myeloma: high-response rates, in a phase II clinical trial//Leukemia.-2009.-Vol.23,№7.-P.1337-1341.

143. Richman C.M:, Weiner R.S., Yankee R.A. Increase in circulating stem cells following chemotherapy in man//Blood.-1976.-Vol.47,№6.-P.1031-1039.

144. Ringden O., Remberger Mi, Runde V. et al; Faster engraftment of neutrophils and-platelets with peripheral blood stem cells from unrelated donors: a comparison with marrow transplantation/ZBone Marrow Transplant.-2000:-Volt25 ,№2.-P;36-3 8.

145. Rosenfeld C.S., Bolwell M., LeFever A. et al. Comparison of four cytokine regimens for mobilization of peripheral blood stem cells: IE-3 alone and in combination with GM-CSF for G-CSF//Bone Marrow Transplant.-1996.-Vol.l7,№2.-P.179-183:

146. Rubia J., Blade J., Lahuerta J.J., et al. Effëct of chemotherapy with alkylating agents; on the yield of CD34+ cells in patients with multiple myeloma: results of the Spanish Myeloma Group- (GEM) Study//Haematologica.-2006.-Vol.91,№5.-P.62r-627.

147. Salven P., Teerenhovi L., Joensuu H. A high pretreatment serum vascular endothelial? growth; factor; concentration is associated with poor outcome in non-Hodgkin'slymphoma//Blood:-1997.-Voli90i№8i-P:31^7-3172u.

148. Santos: G.W. Histoiy of bone marrow transplantation//Clin. Haematol.-1983 .-Vol. 12,№3 .-P.611 -639.

149. Schimoda K., OkamwmS;, Harada N. et al. Identification of a functional receptor for granulocyte colony-stimulating factor on platelets//J. Clin. Invest.-1993 .-Vol .91 ,№4.-P. 1310-1313.

150. Schmitz Ni,. Linch D.C., Dreger Pi et all Randomized trial of filgrastim-mobilized peripheral blood progenitor cell transplantation versus autologous bone-marrow transplantation in lymphoma patients//Lancet.-1996.-Vol.347,№8998.-P.353-357.

151. Serefhanoglu S., Goker II., Buyukasik Y. et al. Changes in vascular endothelial growth factor, angiopoietins, and Tie-2 levels with G-CSF stimulation in healthy donors//Ann. Hematol.-2009.-Vol.88,№7.-P.667-671.

152. Sezer O., Niemoller K., Eucker J. et al. Bone marrow microvessel density is a prognostic factor for survival in patients with multiple myeloma//Ann. Hematol.-2000.-Vol.79,№10.-P.574-577.

153. Sezer O., Niemoller K., Kaufmann O. et al. Decrease of bone marrow angiogenesis in myeloma patients achieving a remission after chemotherapy//Eur. J. Haematol.-2001.-Vol.66,№4.-23 8-244.

154. Sharp J.G., Kessinger A., Mann S. et al. Outcome of high-dose therapy and autologous transplantation in non-Hodgkin's lymphoma based on the presence of tumor in the marrow or infused hematopoietic harvest//J. Clin. Oncol.-1996.-Vol. 14,№1.-P.214-219.

155. Sheridan W.P., Begley C.G., Juttner C.A. et al. Effect of peripheral-blood progenitor cells mobilized by filgrastim (G-CSF) on platelet recovery after high-dose chemotherapy//Lancet.-1992.-Vol.339,№8794.-P.640-644.

156. Schimoda K., Okamura S., Harada N. et al. High-frequency granuloid colony-forming ability of G-CSF receptor possessing CD34 antigen positive human umbilical cord blood hematopoietic progenitors//Exp. Hematol.-1992.-Vol.23,№3.-P.226-228.

157. Shinjo K., Takeshita A., Ohnishi K. et al. Expression of granulocyte colony-stimulating factor receptor increases with differentiation in myeloid cells by a newly devised quantitative flow-cytometric assay//Br. J. Haematol.-1995.-Vol.91,№4.-P.783-794.

158. Shintani S., Murohara T., Ikeda H. et al. Augmentation of postnatal neovascularization with autologous bone marrow transplantation//Circulation.-2001 .-Vol. 103,№6.-P.897-903.

159. Shpall E.J., Wheeler C.A., Turner S.A. et al. A randomized phase 3 study of peripheral blood progenitor cell mobilization with stem cell factor and filgastim in high-risk breast cancer patients//Blood.-1999.-Vol.93,№8.-P.2491-2501.

160. Siena S., Schiavo R., Pedrazzoli P. et al. Therapeutic relevance of CD34 cell dose in blood cell transplantation for cancer therapy//J. Clin. Oncol.-2000.-Vol. 18,№6.-P. 1360-1377.

161. Sonneveld P., van der Holt B., Segeren C.M. et al. Intermediate-dose melphalan compared with myeloablative treatment in multiple myeloma: long term follow-up of the Dutch Cooperative Group Hovon 24 trial// Haematologica.-2007.-Vol.92,№7.-P.928-935.

162. Srivastava A., Laidler P., Davies R. et al. The prognostic significance of tumor vascularity in intermediate-thickness (0.76-4.0 mm thick) skin melanoma: a quantitative histological study//Am. J. Pathol.-1988.-Vol.l33,№2.-P.419-423.

163. Starckx S.} Van den Steen P.E., Wuys A. et al!. Neutrophil gelatinase B and chemokines in leukocytosis and stem cell mobilization//Leuk. Lymphoma.-2002.-Vol.43,№2.-P.233-241.

164. Steidl U., Fenk R., Bruns I. et al. Successful transplantation of peripheral blood stem cells mobilized by chemotherapy and a single dose of pegylated G-CSF in patients with multiple myeloma/ZBone Marrow Transplant.-2005.-Vol.35,№l.-P.33-36.

165. Steidl U., Kronewett R., Rohr U.P. et al. Gene expression profiling identifies differences between the molecular phenotypes of bone marrow-derived and circulating human CD34+ hematopoietic stem cells/ZBlood.-2002.-Vol.99,№6.-P.2037-2044.

166. Stockerl-Goldstein K.E., Reddy S.A., Horning S. J. et al. Favorable treatment outcome in non-Hodgkin's lymphoma patients with 'poor' mobilization of peripheral blood progenitor cells//Biol. Blood Marrow Transplant.-2000.-Vol.6,№5.-P.506-512.

167. Stroncek D., Shawker T., Follmann D. et al. G-CSF-induced spleen size changes in peripheral blood progenitor cell donors//Transfusion.- 2003.-Vol.43,№5.-P.609-613. ;

168. Sugrue M.W., Williams K., Pollack B.H. et al. Characterization and outcome of 'hard to mobilize' lymphoma patients undergoing autologous stem cell transplantation//Leuk. Lymphoma.-2000.-Vol.39,№ 5-6.-P.509-519.

169. Sutherland H.J., Eaves C .J., Lansdorp P.M. et al. Kinetics of committed and primitive blood progenitor mobilization after chemotherapy and growth factor treatment and their use in autotransplants//Blood.-1994.-Vol.83,№12.-P.3808-3814.

170. Tegg E.M., Tuck D.M., Lowenthal R.M. et al. The effect of G-CSF on the composition of human bone marrow//Clin. Lab. Haematol.-1999.-Vol.21,№4.-P.265-270.

171. The International Myeloma Working Group. Criteria for the classification of monoclonal gammopathies, multiple myeloma and related disorders: a report of the International Myeloma Working Group//Br. J. Haematol.-2003.-Vol.l21,№5.-P.749-757.

172. To L.B., Haylock D.N., Simmons P.J. et all The biology and clinical uses of blood stem cells//Blood.-1997.-Vol.89;№17.-P.2233-2258.

173. Travlos G.S. Normal Structure, Function, and Histology of the Bone Marrow//Toxicologic. Pathology.-2006.-Vol.34,№5.-P.548-565.

174. Tricot G., Jagannath S., Vesole D. et al. Peripheral blood stem cell transplants for multiple myeloma: identification of favorable variables for rapid engraftment in 225 patients//Blood.-1995.-Vol.85,№2.-P.588-596.

175. Uchida N., He D., Friera A.M. et al. The unexpected Go/Gj cell cycle status of mobilized hematopoietic stem cells from peripheral blood//Blood.-1997.-Vol.89,№4.-P. 1189-1196.

176. Vacca A., Ribatti D., Roncali L. et al. Bone marrow angiogenesis and progression in multiple myeloma//Br. J. Haematol.-1994.-Vol.87,№ 1 .-P.503-508.

177. Van de Velde H. J., Liu X., Chen G. et al. Complete response correlates with long-term survival and-progression-free survival in high-dose therapy in multiple myeloma//Haematologica.-2007.-Vol.92,№10.-P. 1399-1406.

178. Vertaillie C.Ml, Bhatia R., Steinbuch M. et al. Comparative analysis of autografting in myelogenous leukemia: effects of priming regimen and marrow or blood origin of stem cells//Blood.-1998.-Vol.92,№5.-P.1820-1831.

179. Villeval J., Duhrsen U., Morstyn G. et al. Effect of recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, on progenitor cells in patients with advanced malignancies//Br. J. Hematol.-1990.-Vol.74,№ 1 P.36-44.

180. Wahlin A., Eriksson M., Hultdin M. Relation between harvest success and outcome after autologous peripheral blood stem cell transplantation in multiple myeloma//Eur. J. Haematol.-2004.-Vol.73,№4.-P.263-268.