Трансформированные клетки с различным метастатическим потенциалом: анализ дифференциально экспрессирующегося гена shMDG1 тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Исаченко, Надежда Александровна

• Исаченко, Надежда Александровна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Исаченко, Надежда Александровна

Основные обозначении и сокращения

Введение

Обзор литературы

Глава 1.

1. Основные свойства трансформированной клетки, обеспечивающие процесс метастазирования

1.1. Потеря зависимости от ростовых факторов

1.2. Нечувствительность к ингибиторам роста

1.3. Уклонение от клеточной гибели

1.4. Способность к бесконечному делению

1.5. Способность к стимуляции ангиогенеза

2. Изменение клеточной алгезии - необходимое свойство метаетазирующен клетки

Глава 2.

3. Молекулярные шапероны в процессе канцерогенеза

3.1. Классификация шаперонов

3.2. Регуляция экспрессии шаперонов

3.2.1 Экспрессия шаперонов в опухолях

3.3. Роль шаперонов в индукции пролиферации и угнетении апоптоза

3.3.1. Шапероны плазматической мембраны

3.3.2. Шапероны цитозоля

3.3.3. Митохондриальные шапероны

3.3.4. Ядерные шапероны

3.3.5. Шапероны эндоплазматического ретикулума

3.4. Роль кошаперонов в определение специфичности и интеграции шаперонов НБРЭД и НБР

3.4.1. Молекулярные кошапероны класса НБр40 (\1DG1)

3.4.2. Открытие и исследования функций кошаперона ЕКф4/МОС

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Трансформированные клетки с различным метастатическим потенциалом: анализ дифференциально экспрессирующегося гена shMDG1»

Несмотря на огромные успехи в исследовании механизмов канцерогенеза, на сегодняшний день мстастазирование изучено далеко не полностью. Одним из наиболее значимых методом при изучении канцерогенеза является анализ клеточных линий, полученных из клеток опухолей или трансформацией in vitro. Метод трансформации клеточных культур вот уже 50 лет считается одним из самых действенных в отношении поиска генов, вовлеченных в канцерогенез. В изучении процесса метастазирования в физиологических условиях значимые результаты могут быть получены при введении полученных клеточных линий сингенным животным или бестимусным мышам. Для этой цели животному ортотопично вводится исследуемая клеточная линия. При моделировании поздних стадий метастазирования клетки вводятся непосредственно в кровеносное русло. Данные методы классифицируются как анализ спонтанного и экспериментального метастазирования, соответственно.

Наиболее адекватное исследование метастазирования включает введение подопытным животным пары клеточных линий, отличающихся по метастатическому потенциалу, но близких по остальным биологическим характеристикам, например, клеточных линий, полученных из опухолей схожей этиологии, но отличающихся по уровню метастазирования.

Одной из самых перспективных клеточных моделей для изучения метастазирования является система клеточных линий, полученных в результате инфицирования первичных эмбриональных фибробластов сирийского хомячка (HEF) различными изолятами штамма Schmidt-Rupin D (SR-D) вируса саркомы Рауса (RSV) в лаборатории противоопухолевого иммунитета НИИ Канцерогенеза РОНЦ РАМН под руководством д.б.н. Галины Исааковны Дейчман. Все полученные линии имеют типично трансформированный фенотип и являются высокотуморогеннымн для сингенпых животных. При внутривенном введении взрослым хомячкам, клетки всех линий проявляют высокую экспериментальную метастатическую активность (ЭМА). Значительные отличия выявлены при исследовании спонтанной метастатической активности (С\1А) при подкожном введении исследуемых клеточных культур. Следует отметить, что условия СМА-теста более приближены к естественным процессам метастазирования, чем тест ЭМА.

В представленной работе использовались две линии этой серии - иизкометастазная HET-SR и высокометастазная HET-SR1, согласно тесту СМА. Линии HET-SR и HET-SR1 отличаются по последовательности v-src, введенного при инфекции различными изолятами RSV-SR-D. Клеточная линия HET-SR содержит низкометастазный вариант vsrcLM (low metastasis), а высокометастазная линия HET-SRl - v-srcHM (high metastasis). При подкожном введении животным опухолевых клеток HET-SR, метастазы либо не формировались вообще (50% случаев), либо образовывались в количестве 1-20 у одного животного. Клетки линии HET-SR1 формировали от 30 до 300 метастазов в легких животных.

Для сравнения экспрессии генов в клетках с различным метастатическим потенциалом в лаборатории регуляции клеточных и вирусных онкогенов НИИ Канцерогенеза использовали метод дифференциального дисплея, с помощью которого получены фрагменты кДНК генов, высоко экспрессирующиеся в низкометастазной HET-SR или в высокометастазной HET-SRI линиях. Один из фрагментов, длиной в 365 пуклеотидов, выделенный из линии HET-SR, проявил гомологию с геном дифференцировки эндотелия 1 -MDG1 (microvascular differentiation gene 1), относящимся к 40-му классу белков теплового шока (Hsp40).

Целью данной работы являлось изучение участия гена дифференцировки эндотелия 1 в реализации метастатического фенотипа различных клеточных линий. В ходе исследования предполагалось решить следующие задачи:

1) Получить полноразмерную копию хомячкового гена дифференцировки эндотелия 1- shMDGl (Syrian hamster homologue of MDG1);

2) Подтвердить диффсренциальность экспрессии гена shMDGl в клеточных линиях HET-SR и HET-SRl; г

3) Получить модельную систему клеточных культур, стабильно экспрессирующую кДНК гена shMDGl;

4) Изучить влияние экзогенной экспрессии гена shMDGl на способность клеточных линий образовывать метастазы в легких сингенныч животных;

5) Оценить уровень экспрессии человеческого гена ERdj4/MDGl в опухолевых и нормальных тканях.

В результате исследований впервые получена и депонирована в GenBank последовательность открытой рамки считывания хомячкового гена дифференцировки эндотелия 1 - shMDGl. Показано, что экспрессия гена shMDGl повышена в иизкометастазирующей линии HET-SR по сравнению с высокометастазирующсй HET-SRl. Методом трансформации получены клеточные культуры, стабильно экспрессирующие кДНК гена shMDGl. При введении последних сингенным животным , показано снижение метастатической активности исходных родительских культур. Более того, мы впервые показали, что инъекция ДНК гена shMDGl в опухоль, сформированную i высокометастатической клеточной линией, снижает её метастатическую активность.

Изучено влияние продукта гена $ЬМ001 на пролиферацию клеток с различным метастатическим фенотипом. Также впервые показано негативное влияние экспрессии этого гена на Аэп-зависимое Р(1,6)-гликозилироваиие, характеризующие клетки с высоким уровнем метастазирования.

Изучение механизмов профессии модельных клеточных линий является фундаментальной проблемой современной онкологии и может способствовать разработке новых методов терапии злокачественных новообразований. В ходе работы сконструирован набор генно-инженерных векторов, содержащих ген зЫШХМ, а также получена панель ЯБУ-трансформированных клеточных культур с высокой экзогенной экспрессией данного гена, которые могут быть использованы в дальнейших исследованиях в области экспериментальной онкологии.

Обзор литературы.

На сегодняшний день принято считать, что для образования злокачественной и активно метастазирующей опухоли у человека, клеткам необходимо накопить не менее 6-10 генетических нарушений определенного спектра [Hanahan et al., 2000].

В ходе развития первичной опухоли отдельные клетки приобретают способность к отрыву от неё и образованию новых колоний в другом микроокружении, т.е. метастазированию. Rene Bernards и Robert Weinberg выдвинули гипотезу о появлении метастатических детерминант не только в процессе профессии, но и на самых ранних стадиях канцерогенеза [Bernards et al., 2002].

Таким образом, во-первых, объясняется тенденция некоторых опухолей метастазировать достаточно рано в процессе канцерогенеза (например, рак молочной железы). Во-вторых, не существует генов, ответственных исключительно за метастазирование, а ряд нарушений онкогенов и генов-супрессоров ассоциированы не только с трансформацией, но и с дальнейшим озлокачествлением клеток. Наиболее ярким подтверждением этой гипотезы является анализ ДНК опухолей с помощью технологии микрочипов. Kang и van't Veer продемонстрировали, что экспрессия генов в первичной опухоли и в произошедших от неё метастазах практически идентична [van't Veer et al., 2002; Kang et al., 2003]. Безусловным подтверждением гипотезы являются также изучение индукции метастазирования онкогенами ras, туе, sre в клеточных линиях грызунов. В частности, в представленной работе исследуется генная экспрессия двух клеточных линий с различной метастатической активностью, полученных введением двух мутантов онкогена v-sre.

Первая глава данного литературного обзора посвящена краткому описанию признаков, необходимых для формирования метастатического фенотипа. Во второй главе обзора обобщены данные по изучению роли молекулярных шаперонов в канцерогенезе и, в частности, в процессах метастазирования.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Исаченко, Надежда Александровна

Выводы.

1) Впервые получена полноразмерная копия микроваскулярного гена дифференциации 1 хомячка - shMDGl (зарегистрирована в GenBank под номером AY532644).

2) С использованием двух независимых методов (Нозсрн-блот гибридизация, RT-PCR) показано, что эндогенная экспрессия гена shMDGl повышена в низкометастазной клеточной линии HET-SR по сравнению с высокометастазной линией HET-SR 1.

3) Получены клеточные культуры, стабильно экспрессирующие продукт гена shMDGl.

4) Обнаружено подавление способности клеточных линий HET-SR и HET-SR1 образовывать метастазы в легких сингенных животных под действием экзогенной экспрессии гена shMDGl.

5) shMDG не влияет на пролиферацию и миграцию клеток in vitro

6) Показано, что экспрессия Р(1,6)-гликозилированных белков коррелирует с метастатическим потенциалом - в высокометастазной линии HET-SR 1 наблюдается повышенная экспрессия Р-(1,6)-гликозилированных белков, а в низкометастазных клеточных линиях HET-SR и HET-SRl/shMDGl она практически не наблюдается;

7) Первичный скрининг опухолей человека различного гистогенеза в отношении активности человеческого гомолога гена shMDGl показал снижение его экспрессии в ряду норма-опухоль-метастаз при раке желудка.

Заключение.

Молекулярные шапероны являются типом клеточных белков, участвующих во всех клеточных процессах - от синтеза белка до дифференциации клетки. В настоящее время » накопилось достаточно фактов, демонстрирующих вовлеченность шаперонов в процессы канцерогенеза и метастазирования. Шапероны препятствуют запуску программы клеточной смерти и способствуют проведению митогенного сигнала. Повышенная экспрессия отдельных представителей классов Hsp70, Hsp90 наблюдается во многих типах опухолей. Более того, такие опухолевые клетки становятся резистентными к хемотерапевтическим лекарствам.

Перспективным направлением в данной области является изучение механизма подавления опухолевыми клетками апоптотической программы в результате индукции деградации ЭПР белков (ERAD).

Нами впервые выделен и охарактеризован представитель генов дифференцировки эндотелия хомячка - shMDGl, относящийся к семейству молекулярных шаперонов Hsp40, локализованных в эндоплазматическом ретикулуме. Двумя независимыми методами (Нозерн-блот гибридизация, RT-PCR) мы показали, что экспрессия гена shMDGl повышена в низкометастатической клеточной линии HET-SR по сравнению с , высокометастатической линией HET-SR1. Более того, экзогенная экспрессия данного гена в изучаемых клеточных линиях HET-SR и HET-SR1 снижает их метастатический потенциал при внутривенном и подкожном введении сингенным животным.

Кроме того, в данной работе была предпринята попытка ДНК-вакцинации с использованием плазмиднои конструкции, несущей ген shMDGl. Данный эксперимент является незавершенным, и многое остается невыясненным, однако полученные результаты о снижении метастазирования в легких подопытных животных, на наш взгляд, свидетельствуют о целесообразности ведения дальнейшей разработки генотерапевтических подходов к лечению таких опухолей человека, как рак желудка. Это подтверждается проведенным нами первичным скринингом условно нормальных, опухолевых и метастатических тканей, взятых у пациентов, страдающих раком желудка.

Способность подавлять метастатическую активность является впервые охарактеризованным свойством не только для данного класса молекулярных шаперонов, но и для системы деградации белков эндоплазматического ретикулума, в котором, по-видимому, участвует shMDGl.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Исаченко, Надежда Александровна, 2005 год

1. Akalin A., Elmore L.W., Forsythe Н. L., Amaker В. A., McCollum E. D., Nelson P. S., Ware J. L., Holt S. E. (2001). A novel mechanism for chaperonc-mediated telomerasc during prostate cancer progression. Cancer Res. 61, 4791-4796.

2. Aldrian S., Trautinger F., Fröhlich I., Berger W., Micksche M., Kindas-Mugge I. (2002). Overexpresston of Hsp27 affects the metastatic phenotype of human melanoma cells in vitro. Cell Stress Chaperones 7, 177- 185.

3. Altmeyer A, Maki RG, Feldweg AM, Heike M, Protopopov V, Masur S, et al. (1996) Tumor-specific cell surface expression of the KDEL-contalning, endoplasmic reticular heat shock protein gp96. Ini J Cancer 69:340-9.

4. Beere HM, Green DR (2001) Stress management heat shock protein-70 and the regulation of apoptosis. Trends Cell Biol. Jan. 11(1): 6-10.

5. Berger B.J.; Müller T.S.; Buschmann I.R.; Peters К.; Kirsch M.; Christ В.; Pröls F. (2003) High levels of the molecular chaperone Mdgl/ERdj4 reflect the activation state of endothelial cells. Exp Cell Res, 290,1,82-96

6. Bernards R.; Weinberg R. A. (2002) A progression puzzle. Nature, 418, 823.

7. Bies C., Guth S., Janoschek K., Nastainczyk W., Volkmer J., Zimmermann R. (1999) A Scjlp homolog and folding catalysts present in dog pancreas microsomes. Biol. Client. 380, 1175-1182

8. Brightman S. E., Blatch, G. L., and Zetter B, R. (1995) Isolation of a mouse с DNA encoding MTJ1, a new murine member of the DnaJ family of proteins. Gene (Amst.) 153, 249-254

9. Buckhaults P.; Chen L.; Fregien, N.; Pierce M., (1997), Transcriptional regulation of N-acetylglucosaminyltransferase V by the sre oncogene, J Biol Chem, 272, 19575-19581.

10. Bukau В., Honvich A.L. (1998) The Hsp70 and Hsp60 chaperone machines. Cell 92, 351-366

11. Cantley L.C., and Necl B.G. (1999). New insights into tumor suppression: PTEN suppresses tumor formation by restraining the phosphoinositide 3-kinase/AKT pathway. Proc. Natl. Acad. Sei. USA 96,4240-4245.

12. Caplan A.J. (1999). Hsp90's sccrcts unfold: new insights from structural and functional studies. Trench Ceil Biol 9, 262- 268.

13. Cardozo C., Michaud C., Ost M., Fliss A., Yang E., Patterson C., Hall, S., Caplan A. (2003). C-terminal Hsp-interacting protein slows androgen receptor synthesis and reduces its rate of degradation. Arch Biochem Biophys 410, 134- 140.

14. Cavallaro U., Christofori G. (2004) Cell adhesion and signaling by cadherins and 1G-CAMS in cancer. Nat Rev Cancer 4, 118-132.

15. Charette SJ, Landry J. (2000) The interaction of HSP27 with Daxx identifies a potential regulatory role ofHSP27 in Fas-induced apoptosis. Ann N YAcadSci. 926:126-31

16. Chavany C, Mimnaugh E, Miller P et al. (1996) pl85ccrt,B2 binds to GRP94 in vivo. JBC. 271,4974.

17. Coussens L., Werb Z. (2002) Inflammation and cancer. Nature, 420, 860-866.

18. Csermely P., Schnaider T., Soti C., Prohaszka Z„ Nardai G. (1998) Pharmacol. Ther., 79, 129-168.

19. Csermely P. (2001). Chaperone overload as a possible contributor to civilization diseases. Trends Genet 17, 701- 704.

20. Cutress R., Townsend P., Brimmell M., Bateman A., Hague, A., Packham G. (2002). BAG-1 expression and function in human cancer. Br J Cancer 87, 834- 839.

21. Davis RJ (1994) MAPKs: New JNK Expands the Group. TIBS 19, 470.

22. De Maio A (1999) Heat shock proteins. Facts, Thoughts Dreams. Shock 11, 1.

23. Dennis J.W.; Laferte, S.; Waghorne C.; Breitman M.; Kerbel, R.S. (1987) Beta 1-6 branching of Asn-Iinked oligosaccharides is directly associated with metastasis. Science, 236, 582-585.

24. Donze, O., Abbas-Tcrki, T., Picard, D. (2001). The Hsp90 chapcrone complex is both a facilitator and a repressor of the dsRNA-dependent kinase PKR. EMBO 20,3771- 3780.

25. Downward J. (1998). Mechanisms and consequences of activation of protein kinase B/Akt. Carr. Opin. Cell Biol. 10, 262-267.

26. Dyson N., How ley P.M., Munger K., Harlow E. (1989). The human papillomavirus-16 E7 oncoprotein is able to bind to the retinoblastoma gene product. Science 243, 934-937.

27. Ellgaard L., Helenius A. (2003) Quality control in the ER, Nat Rev Mol Cell Biol 4, 181191.

28. Eustace B., Jay D. (2004) Extracellular Roles for the Molecular Chaperone, hsp90. Cell Cycle. 14; 3(9).

29. Evan G., Littlewood T. (1998). A matter of life and cell death. Science 281, 1317-1322.

30. Fang S.; Lorick K. L.; Jensen JP.; Weissman A. M. (2003) RING finger ubiquitin protein ligases: implications for tumorigenesis, metastasis and for molecular targets in cancer, Semin Cancer Biol, 13, 5-14.

31. Fedi P., Tronick S.R., Aaronson S.A. (1997). Growth factors. In Cancer Medicine, pp. 41-64.

32. Ferrarini M, Heltai S, Zocchi MR, Rugarii C. (1992) Unusual expression and localization of heat-shock proteins in human tumor cells. Int J Cancer; 51: 613-9.

33. Fewell S\V, Travers KJ, Weissman JS, Brodsky JL. (2001) The action of molecular chaperones in the early secretory pathway. Annu Rev Genet; 35: 149-191.

34. Friedlander R, Jarosch E, Urban J, Volkwein C, Sommer T. A regulatory link between ER-associated protein degradation and the unfoldedprotcin response. (2000) Nat Cell Biol; 2: 379-384.

35. Fink A. L. (1999). Chaperone-mediated protein folding. Pliys.Rev. 79,425-449.

36. Finlay C., Hinds P., Tan T., Eliyahu D, Oren M, Levine A. (1988) Activating mutations for transformation by p53 produce a gene product that forms an HSC70-p53 complex with an altered halfe-life. Mol. Cell. Biol. 8, 531.

37. Frisch, S.M. (1999). Evidence for a function of death-receptor-related, death-domain-containing proteins in anoikis. CurrBiol 9, 1047-1049.

38. Frydman J., Hohfeld J. (1997). Chaperones get in touch: the Hip-Hop connection. Trends Biochem Sci 22, 87- 92.

39. Foley K.P., and Eisenman R.N. (1999). Two MAD tails: what the recent knockouts of Madl and Mxl tell us about the MYC/MAX/ MAD network. Biochim. Biophys. Acta 1423, 37-47.44.47.50,51,52,53,5455,56

40. Funasaka T, Haga A, Raz A, Nagase H. (2001) Tumor autocrine motility factor is an angiogenic factor that stimulates endothelial cell motility. Biochem Biophys Res Commun, 285: 118-28.

41. Gabai VL, Mabuchi K, Mosser DD, Sherman MY, (2002) Hsp72 and stress kinase c-jun N-terminal kinase regulate the bid-dependent pathway in tumor necrosis factor-induced apoptosis. Mol Cell Biol.; 22 (10): 3415-24.

42. Gupta S, Knowlton AA. (2005) HSP60, Bax, apoptosis and the heart J Cell Mol Med.; 9(1): 51-8.

43. Harding IL; Calfon M.; Urano F.; Novoa I.; Ron D., (2002) Transcriptional and translational control in mammalian unfolded protein response Anna Rev Cell Dev Biol 18: 575-99.

44. Hayflick L. (1965) The limited in vitro lifetime of human diploid cell strains. Exp. Cell Res., 37, 614—636.

45. Hershko A., Ciechanovcr, A. (1998) The ubiquitin system. Anna. Rev. Biochem. 67, 425479.

46. Hettinga JV, Lcmstra W, Meijer C, Los G, de Vries EG, Konings AW and Kampinga HH. (1996). Heat-shock protein expression in cisplatin-sensitive and -resistant human tumor cells Int. J. Cancer, 67, 800-807.

47. Holt S.E., Aisner D.L., Baur J., Tesmer V.M., Dy M., Ouellelte M., Trager J.B., Morin G.B., Toft D., Shay J.W., Wright W.E., White M. A. (1999). Functional requirement of p23 and Hsp90 in telomerase complexes. Genes Dev 13, 817-826.

48. HShfeld J. (1998). Regulation of the heat shock conjugate Hsc70 in the mammalian cell: the characterization of the anti-apoptotic protein BAG-1 provides novel insights. Biol Chem 379, 269-274.

49. Hynes R.O. (2003) Metastatic Potential: Generic Predisposition of the Primary Tumor or Rare, Metastatic Variants Or Both? Cell, 113, 821-823.

50. Jeon E, Kim HD, Kim JS (2003) Pluronic-grafted poly-(L)-lysine as a new synthetic gene carrier. J Biomed Mater Res. 15; 66(4):854-9.

51. Johnson J., Corbisier R., Stcnsgard B., Toft D. (1996). The involvement of p23, hsp90, and immunophilins in the assembly of progesterone receptor complexes. J Steroid Biochem Afol Biol 56, 31-37.

52. Jolly C.J, Morimoto R.I. (2000). Role of the heat shock response and molecular chapcrones in oncogenesis and cell death. J Natl Cancer Res Inst 92, 1564- 1572.

53. Kang Y., Siegel PM, Shu W, Drobnjak M, Kakonen SM, Cordon-Cardo C, Guise TA, Massague J. (2003). A mucigenic program mediating breast cancer metastasis. Cancer Cell 3, 537-549.

54. Kang Y., Siegel P., Shu W., Drobnjak M., Kakonen S., Cordon-Cardo C., Guise T., Massague J. (2003). Cancer stromal cells interact and influence one another Cell 3, 537549.

55. Kaufman R. (2002) Orchestrating the unfolded protein response in health and disease J. Clin. Invest. 110: 1389-1398.

56. Kelley WL (1998) The J-domain family and the recruitment of chaperone power Trends Biochem Sci. 23(6):222-7.

57. Kerr J.F., Wyllie A.H., Currie A.R. (1972). Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics. Dr. J. Cancer 26, 239-257.

58. Kinzler KW., Vogelstein B. (1996). Lessons from hereditary colorectal cancer. Cell 87, 159-170.

59. Kurisu J., Honma A., Miyajima H., Kondo S., Okumura M., Imaizumi K., (2003) MDGl/ERdj4, an ER-resident DnaJ family member, suppresses cell death induced by ER-stress, Genes Cells 8 189-202.

60. Lee Ann-Hwee, Iwakoshi NN., Glimcher, LH., (2003), XBP-1 regulates a subset of endoplasmic reticulum resident chaperone genes in the Unfolded Protein Response. MCB, 23, 7448-7459.

61. Levine AJ. (1997) p53, The cellular gatekeeper for growth and division. Cell-, 88: 323-31.

62. Lorick KL, Jensen JP, Fang S, Ong AM, Hatakeyama S, Weissman AM. (1999) RING fingers mediate ubiquiiin-conjugating enzyme (E2)-dcpendent ubiquitination. PNAS; 96: 11364-9.

63. MacRae T.H. (2000) Structure and function of small heat shock/alpha-crystallin proteins: established concepts and emerging ideas. Cell Mol. Life Sci., 57, 899-913.

64. Manjili M, Wang X, MacDonald I, Arnouk H, Yang G, Pritchard M, Subjcck JR. (2004) Cancer immunotherapy and heat-shock proteins: promises and challenges. Expert Opin Biol 77;er.;4(3):363-73.

65. Malumbres M, Barbacid M. (2003) RAS oncogenes: the first 30 years. Nat Rev Cancer. 3(6):459-65.

66. Molinari M, Helenius A. (2000) Chaperone selection during glycoprotein translocation into the endoplasmic reticulum. Science; 288: 331-333.

67. Morimoto, R. I. (2002). Dynamic remodeling of transcription complexes by molecular chaperones. Cell 110,281-284.

68. Murakami Y, Fukazawa H, Mizuno S, Uehara Y (1994) Conversion of epidermal growth factor (EGF) into a stimulatory Iigand for A431-ccll growth by herbimycin A by decreasing the level of expression of EGF receptor. Biochem. J. 301, 57.84.