Теоретический конформационный анализ ди- и трифукозидов, соответствующих основным структурным фрагментам фукоиданов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат химических наук Гербст, Алексей Генрихович

• Гербст, Алексей Генрихович
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Гербст, Алексей Генрихович

Оглавление.

1. Введение.

2. Методы. конформационного анализа углеводов. (Литературный обзор.).

2.1 Введение.

2.2 Общие положения конформационного анализа углеводов.

2.3 Обзор силовых полей, применяющихся для конформационного анализа углеводов.

2.4 Применение методов квантовой механики для моделирования конформаций углеводов.

2.5 Сопоставление методов молекулярной и квантовой механики.

2.6 Методы изучения конформационного равновесия.

2.7 Молекулярная динамика (МД).

2.8 Особенности моделирования углеводов в растворах.

2.9 Исследования ионных углеводных структур.

2.10 Практически полезные результаты, которые можно получить методами теоретического моделирования углеводов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Теоретический конформационный анализ ди- и трифукозидов, соответствующих основным структурным фрагментам фукоиданов»

Актуальность данной работы определяется фундаментальной задачей современной химии природных соединений, состоящей в выявлении взаимосвязи структуры и свойств природных макромолекул, в частности, природных полисахаридов.

Фукоиданы представляют собой класс природных полисахаридов, встречающихся в морских беспозвоночных, а так же в водорослях. Они построены преимущественно из остатков а-Ь-фукозы, и могут иметь нерегулярные разветвления. Для фукоиданов характерна высокая степень сульфатирования, при этом сульфатные группы в цепи молекулы также могут располагаться нерегулярно. Несмотря на то, что эти биополимеры известны уже несколько десятков лет, имеются лишь фрагментарные сведения об их структуре. Это вызвано тем, что установление структуры фукоиданов классическими методами часто бывает затруднено вследствие их высокой лабильности.

Для фукоиданов характерна разнообразная физиологическая активность, в частности: противоопухолевая [1], антикоагулянтная [2] и антивирусная [3]. Наличие такой активности связано с тем, что эти биополимеры способны мимикрировать углеводные лиганды природных рецепторов, например, белков селектинов. При этом способность к мимикрированию очевидно определяется конформацией полимерной цепи. Для выяснения особенностей конформационного поведения фукозидной связи в данной работе проведено систематическое изучение синтетических олигофукозидов, представляющих наиболее характерные структурные фрагменты природных фукоиданов. Изучение проводилось как с использованием методов теоретического молекулярного моделирования, так и ЯМР экспериментов1, Другой целью работы являлась систематизация спектральных (ЯМР 13С) эффектов

1 Эксперименты по ЯМР проводились A.A. Грачевым (лаборатория химии гликоконъюгатов, ИОХ РАН). сульфатирования и гликозилирования для фукозидов и их объяснение в свете результатов теоретического конформационного анализа. В дальнейшем эти эффекты могут быть использованы при установлении структуры природных фукоиданов по данным ЯМР 13С.

2. МЕТОДЫ

КОНФОРМАЦИОННОГО АНАЛИЗА УГЛЕВОДОВ. (ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.)

2.1 Введение.

Одна из ветвей теоретического конформационного анализа связана с представлением о молекуле как о механической системе, в которой атомы рассматриваются в виде точечных масс. Такая модель основывается на приближении Борна — Оппенгеймера, согласно которому потенциальная энергия молекулы с хорошей точностью описывается непрерывной функцией координат ядер. Основы этого направления молекулярного моделирования были заложены Хиллом [4], Уэстхаймером [5] и Китайгородским [6]. По идее авторов, химические связи характеризуются некоторыми «естественными» длинами и валентными углами, а конформации реальных молекул устанавливаются такими, чтобы по возможности сохранить эти величины. Стерические эффекты моделируются ван-дер-ваальсовыми взаимодействиями.

Если система напряжена, то молекула деформируется в предсказуемом направлении согласно градиенту энергии «напряжения», и эта деформация может быть рассчитана. Этот метод называется молекулярной механикой, подробно его теория изложена в монографии [7].

Молекулярная механика относится к группе эмпирических методов. В ней используется понятие силового поля, которое представляет собой набор уравнений, описывающих изменения энергии молекулы при отклонении ее геометрии от «идеальной», и параметров, входящих в эти уравнения. Эти параметры являются эмпирическими и могут быть найдены путем калибровки при сопоставлении расчетных данных с экспериментальными результатами, или же под результаты расчета методом более высокого уровня теории -неэмпирическим или полуэмпирическим. В данном обзоре вначале рассматривается применение методов молекулярной механики для конформационного углеводов, а затем так же обсуждается использование методов более высокого уровня теории.

Заключение диссертации по теме «Органическая химия», Гербст, Алексей Генрихович

4. ВЫВОДЫ

1. Методами молекулярной механики и методом функционала плотности, а также экспериментами по ядерным эффектам Оверхаузера, изучены конформации гликозидных связей в ди- и трифукозидах, отвечающих основным структурным фрагментам природных полисахаридов фукоиданов, в результате чего создан базис для дальнейшего изучения более сложных олигофукозидов.

2. Исследованы основные конформеры для а-(1—>2)-, -(1-»3)- и -(1->4)-дифукозидных звеньев и впервые показано, что соотношение конформеров в ряду а-(1-»3)-связанных соединений изменяется при переходе от ди- к трисахаридам.

3. При сопоставлении данных для исследованных олигосахаридов показано, что введение 4-О-сульфо-группы вызывает изменение соотношения конформеров для а-(1-»3)-, но не а-(1-»2)-фукобиозидов, а также не влияет на конформации обоих дисахаридных фрагментов в составе 2,3-разветвленного трисахарида.

4. Найдено, что в ряду исследованных олигосахаридов введение 2-0-сульфо-группы не влияет на соотношения конформеров а-(1—>3)- и -(1—>4)-фукобиозидных звеньев.

5. Показано, что методы молекулярной механики некорректно описывают распределение конформеров вокруг а-(1-»2)-связи в фукобиозидах, но дают удовлетворительные результаты при исследовании 2,3-разветвленных трисахаридов, в то время как метод функционала плотности в обоих случаях корректно предсказывает единственный доминирующий конформер а-(1->2)-связанного звена.

6. Конформационное поведение три-О-сульфатированных трифукозидов может быть корректно промоделировано методами молекулярной и квантовой механики только в приближении ионизации двух из трех сульфатных групп.

2.11 Заключение.

Таким образом, из имеющихся литературных данных можно сделать несколько выводов.

1) Силовое поле ММЗ является одним из наиболее часто использующихся в конформационном анализе углеводов.

2) В некоторых случаях результаты расчетов, проведенных с его помощью, могут требовать уточнения методами квантовой механики.

3) Конформация низкомолекулярных многозарядных структур может зависеть от рН среды. В расчетах этот эффект моделируется неполной диссоциацией.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

3.1 Исследованные структуры.

Проведенные ранее исследования структуры фукоиданов показывают, что основные структурные мотивы их цепей можно разделить на две группы. К первой относятся фукоиданы, скелет которых представляет собой гомогенную а-(1—>3)-связанную цепочку фукозных остатков. В эту группу входят, в частности, фукоиданы, выделенные из водорослей Laminaria saccharina и С. okamuranus.

Вторую группу представляют фукоиданы с основной цепыо, построенной из чередующихся а-(1—>3)- и а-(1—^-связанных остатков фукозы. К этой группе относятся полимеры, выделенные из водорослей Fucus evanescens и Fucus distichus.

В цепях обоих типов сульфаты располагаются чаще всего в положениях 0-4 и/или 0-2. Кроме того, в них могут присутствовать 2,3- и 3,4-разветвления. Таким образом, в данной работе мы поставили перед собой задачу изучить конформационное поведение ди- и трифукозидов, содержащих а-(1—К3)-связь с различным размещением сульфатных групп при 0-4 (соединения 1-3 и 7, 8), а-(1—>2)-связь с различной степенью сульфатирования, а так же в присутствие или в отсутствие 2,3-разветвления (соединения 10-16), и изомерные трисахариды 19 и 21, содержащие а-(1—>3)- и а-(1—>4)-связи. Влияние 2-0-сульфатирования на конформацию гликозидных связей изучалось на примере соединений 4, 9, 18 и 20. Моносахариды 5 и 6 были изучены для сопоставления их ЯМР-характеристик с таковыми для олигосахаридов3.

3 Синтез соединений проведен к.х.н. Н.Е. Устюжаниной (лаборатория химии глюкоконъюгатов, ИОХ РАН).

MeZ^OR>

I?

R10

MeZ^OR3 MS R4oh ro

1 R1 = SO-jNa, R2=H, R3=H

2 R1 = R2 = SO,Na, R3=H

3 R1 = R2 = R3= H

4 Ri = R2 = H, R' = SOjNa

OPr

Й^он [oh

5 R= H 6 R = S03Na

OPr

OR2

Me о

Ri£°H i eS^OR2

R10 I

MSZ^OR2

I OH R10

7R1=R2=H

8 R1 = SOjNa, R2 = H

9 R1 = H, R2 = SOjNa

Me

OR2

10 R1 = R2 = H

11 R1 = S03Na, R2=H

12 R1 = R2 = SOjNa

13 R1= R2 = R'= H

14 R1 = S03Na , R2 = R3 = H 14 R1 = R2 = SOjNa, R3 = H 16 R1 = R2 = R3 = S03Na

I OH HO

17

I OH H0

18 toH HO

19 R= H

20 R = SO,Na

Me

OPr OH Ш

I он о

HOI eZ^OH Гон

HO

21

3.2 Конформационный анализ a-(l—>3)-связи в дисахаридах.

В данном разделе обсуждается изучение а-(1—>3)-фукозидной связи и влияния сульфатирования на ее конформацию на примере серии дифукозидов 1-3. Для изучения спектральных эффектов сульфатирования и гликозилирования здесь обсуждаются так же моносахариды 5 и 6.

Данные спектров ЯМР соединений 1-3 и 5, 6. В Таблицах 1—3 представлены данные по химическим сдвигам ЯМР 13С и 'н для сульфатированных соединений 1, 2 и 4 и их несульфатированных предшественников 3 и 5, а также внутрициклические константы спин-спинового взаимодействия 'Н-'Н. Отнесение сигналов !Н к структуре было сделано на основании данных экспериментов 'Н-'Н COSY и 2D TOCSY. Сигналы ЯМР С были отнесены на основании данных 2D !H-I3C HMQC экспериментов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Гербст, Алексей Генрихович, 2006 год

1. Preobrazhenskaya, М.Е., Berman, А.Е., Mikhailov, V.I., Ushakova, N.A., Mazurov, A.V., Semenov, A.V., Usov, A.I., Nifant'ev, N.E., Bovin, N.V. Biochem. Mol. Biol. Int., 1997,43(2), 443-451.

2. Nagumo, T.; Nishino, T. Fucan Sulfates and Their Anticoagulant Activities. В Polysaccharides in Medicinal Applications', Dumitriu, S., Ed.; Marcel Dekker: New York, 1996, 545-574.

3. Schaeffer, D.J.; Krylov, V.S. Ecotoxicol. Environ. Safety, 2000,45(3), 208-227.

4. Hill, T.L. J. Chem. Phys., 1948,16, 938-949.

5. Westheimer, F.N. J. Chem. Phys., 252, 15,1947.

6. А.И. Китайгородский, Органическая кристаллохимия, Москва, Изд-во Акад. Наук СССР, 1955.

7. У. Буркерт, Н. Эллинджер, Молекулярная механика, Москва, Мир, 1986.

8. Lemieux, R.U., Koto, S. Tetrahedron, 1974, 30, 1933-1944.

9. Woods, RJ. Glycoconjugate J. 1998, 15, 209-216.

10. Bock, K. Pure Appl. Chem., 55, 605-622.

11. Thogersen, H., Lemieux, R.U., Bock, K., Meyer, B. Can. J. Chem., 60,44-57.

12. Peters, T., Meyer, В., Stuike-Prill, R., Somoijai, R., Brisson J.-R. 1993, Carbohydr. Res., 238,49-73.

13. Weimar, T., Meyer, В., Peters, T. 1993, J Biomol NMR 3, 399-414.

14. Zsiska, M., Meyer, B. Carbohydr. Res., 1993, 243, 225-258.

15. Mimura, M., Kitamura, S., Gotoh, S., Takeo, K., Urakawa, H., Kajiwara, K. Carbohydr. Res., 1996,289, 25-37.

16. Stuike-Prill, R., Pinto, B.M. Carbohydr. Res. 1995, 279, 59-73.

17. Hôôg, С., Widmalm, G. Glycoconjugate J., 1998, 15,183-186.

18. Lemieux, R.U., Bock, K. Arch. Biochem. Biophys., 1983, 221, 125-134.

19. Woods, R.J., Dwek, R.A., Edge, C.J., Fraser-Reid, B. J. Phys. Chem., 1995, 99, 3832-3846.

20. Glennon, T.M., Zheng, Y.-J., LcGrand, S.M., Shutzberg, B.A., Merz, K.M., Jr. J. Comput. Chem. 1994, 15, 1019-1040.

21. Homans, S.W. Biochemistry, 1990,29, 9110-9118.

22. Ha, S.N., Giamonna, A., Field, M., Brady, J.W. Carbohydr. Res., 1988, 180, 207221.

23. Rasmusen, K. Acta Chem. Scand. 1982, A36, 323-327.

24. Koehler, J.E.H., Saenger, W., van Gunstersen, W.F. Eur. Biophys. J., 1987, 15, 197-210.

25. Clark, M., Cramer R.D., Van Opdenbosch, N. J. Comput. Chem., 1989, 10, 9821012.

26. Hagler, A.T., Lifson S., Dauber, P. J. Am. Chem. Soc., 1979, 101, 5122-5130.

27. Prabhakaran, M., Harvey, S.C. Biopolymers, 1987, 26, 1087-1096.

28. Allinger, N.L. J. Am. Chem. Soc., 1977,99, 8127-8134.

29. AllingerN.L., Yuh Y.H., Lii J.-H. J. Am. Chem. Soc. 1989, 111, 8551-8566.

30. HyperChem™, Hypercube, Inc., 1115 NW 4th Street, Gainesville, Florida 32601, USA.

31. Groothenius, P.D.J., Haasnoot, C.A.G. Mol. Simul, 1993, 10, 75-95.

32. Kouwijzer, M.L.C.E., Groothenius, P.D.J. J. Phys. Chem., 1995, 99, 13426-13436.

33. Kouwijzer, M.L.C.E., Schrijvers, R., Haasnoot, C.A.G., Groothenius, P.D.J. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1997, 395-396, 201-210.

34. Almond, A. Carbohydr. Res., 2005, 340, 907-920.

35. Imberty, A., Gerber, S., Tran, V., Pérez, S. Glycoconjugate, 1990, 7, 27-41.

36. Tripos Associates Inc., 1699 South Hanley Road, Suite 303, St. Louis, Missouri 63144, USA (314 647 1099).

37. Reinhardt, R., Richter, M., Mager, P. Carohydr. Res., 1996, 291, 1-9.

38. Le Questel, J.-Y., Mouhous-Riou, N., Pérez, S. Carbohydr. Res., 1996, 284, 35-49.

39. Lakin, M.T., Mouhous-Riou, N., Lorin, C., Rollin, P., Kroon, J., Pérez, S. Carbohydr. Res., 1996,290,125-136.

40. Imberty, A., Gruza, J., Mouhous-Riou, N., Bachet, B., Pérez, S. Carbohydr. Res., 1998,311,135-146.

41. P. Klewinghaus, B.P. van Eijck, M.L.C.E. Kouwijzer, J. Kroon, J. Mol. Struct. (Theochem), 1997, 395-396, 289-295.

42. P.H. Kruiskamp, PhD thesis, University of Utrecht, 1998.

43. Spieser, S.A.H., van Kuik, J.A., Kroon-Batenburg, L.M.J., Kroon, J. Carbohydr. Res., 1999, 322, 264-273.

44. Poveda, A., Santamaría, M., Bernabé, M., Prieto, A., Bruix, M., Corzo, J., Jiménez-Barbero, J. Carbohydr. Res., 1997, 304, 209-217.

45. Hóóg, C., Rotondo, A., Johnston, B.D., Pinto, B.M. Carbohydr. Res., 2002, 337, 2023-2036.

46. A.E. Smith, H.J. Lindner, J. Comput. Aided Mol. Des., 1991, 5, 235-262.

47. Immel, S., Schmitt, G.E., Lichtenthaler, F.W. Carbihydr. Res., 1998,313, 91-105.

48. Weimar, T., Kreis, U.C., Andrews, J.S., Pinto, M.B. Carbohydr. Res., 1999, 315, 222-233.

49. Box, V.G.S. J. Mol. Struct., 2000, 522, 145-164.

50. Box, V.G.S. Heterocycles, 1982, 1939.

51. Tvaroska, T. Bleha, Adv. Carbohydr. Chem. Biochem., 1989, 47, 45.

52. E. Juaristi, G. Cuevas, Tetrahedron, 1992,48.

53. Glennon, T.M., Merz, K.M. Jr. J. Molec. Struct. (THEOCHEM), 1997, 395-396, 157-171.

54. Montero, E., Vallmitjana, M., Pérez-Pons, J.A., Querol, E., Jiménez-Barbero, J., Javier Cañada, F. FEBS Lett., 1998,421, 243-248.

55. Poveda, A., Jiménez-Barbero, J. Chem. Soc. Rev., 1998, 27, 133-143

56. Momany, F.A., Willet, J.L., Carbohydr. Res., 2000, 326, 194-209.

57. Dejoux, A., Cieplak, P., Hannick, N., Moyna, G., Dupradeau, F.-Y. J. Mol. Model., 2001, 7,422-432.

58. Bernabé, M., Jiménez-Barbero, J., Gil-Serrano, A.M., González-Jiménez, I., Tejero-Mateo, P., Magias, M. Carbohydr. Res., 1995,279, 339-352.

59. Monteagudo, E., Madami, A., Animati, F., Lombardi, P., Arcamone, F. Carbohydr. Res., 1997,300,11-16.

60. Durier, V., Tristram, F., Vergoten, G. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1997, 395396,81-90.

61. Molina, J.M., Olea, D.P., Baer, H.H. Carbohydr. Res., 1995, 273, 1-10.

62. Lankhorst, P.P., Smeets, J.W.H., Haasnoot, C.A.G. Carbohydr. Res., 1995, 269, 17-27.

63. Ferro, D.R., Gajdos, J., Ragazzi, M., Ungarelli, F., Piani, S. Carbohydr. Res., 1995, 277,25-38.

64. Espinoza, J.-F., Martín-Pastor, M., Asensio, J.L., Dietrich, H., Martín-Lomas, M., Schmidt, R.R., Jiménez-Barbero, J. Tetrahedron Lett., 1995, 36(35), 6329-6332.

65. Parrill, A.L., Mamuya, N., Dolata, D.P., Gervay, J. Glycoconjugate J., 1997, 14, 523-529.

66. Asensio, J.L., Martín-Pastor, M., Jiménez-Barbero, J. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1997, 395-396, 245-270.

67. French, A.D., Dowd, M.K., Reilly, P.J. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1997, 395396, 271-287.

68. Robijn, G.W., Imberty, A., van den Berg, D.J.C., Ledeboer, A.M., Kamerling, J.P., Vliegenthart, J.F.G., Pérez, S. Carbohydr. Res., 1996, 288, 57-74.

69. Mazeau, K., Pérez, S. Carbohydr. Res., 1998, 311, 203-217.

70. Rosen, J., Robobi, A., Nyholm, P.-G. Carbohydr. Res., 2002, 337, 1633-1640.

71. Rockey, W.M., Dowd, M.K., Reilly, P.J., French, A.D. Carbohydr. Res., 2001, 335, 261-273.

72. Yamada, H., Harada, T., Takahashi, T. Tetrahedron Lett., 1995, 36(18), 31853188.

73. Aguilera, B., Jiménez-Barbero, J., Fernández-Mayoralas, A. Carbohydr. Res., 1998, 308, 19-27.

74. Gruza, J., Koca, J., Pérez, S., Imberty, A. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1998, 424, 269-280.

75. Tvaroska, I., Gajdos, J. Carbohyd. Res., 1995, 271, 151-162.

76. Tvaroska, I., Taravel, F.R., Utille, J.P., Carver, J.P. Carbohyd. Res., 2002, 337, 353-367.

77. Wolfe, S. Acc. Chem. Res., 1972, 5,102-111.

78. Tvaroska, I., Carver, J.P. J. Phys. Chem., 1994,98, 9477-9785.

79. Tvaroska, I., Carver, J.P. J. Phys. Chem., 1995, 99, 6234-6241.

80. Tvaroska, I., Carver, J.P. J. Mol. Struct (THEOCHEM)., 1997, 395-396, 1-13.

81. Tvaroska, I., Carver, J.P. Carbohyd. Res., 1998, 309, 1-9.

82. Cramer, C.J., Truhlar, D.G., French, A.D. Carbohyd. Res., 1997, 298, 1-14.

83. Whitfield, D.M. J. Mol. Struct (THEOCHEM)., 1997, 395-396, 53-59.

84. Swalina, C.W., Zauhar, R.J., DeGrazia, M.J., Moyna, G. J. Biomol. NMR, 2001, 21,49-61.

85. Buist, P.H., Behrouzian, B., Maclsaac, K.D., Cassel, S., Rollin, P., Imberty, A., Gautier, C., Pérez, S., Genix, P. Tetrahedron: Asymmetry, 1999, 10,2881-2889.

86. Gascón-López, M., Motevalli, M., Paloumbis, G., Bladon, P., Wyatt, P.B. Tetrahedron, 2003, 59, 9349-9360.

87. Barrows, S.E., Dulles, F.J., Cramer, C.J., French, A.D., Truhlar D.G. Carbohyd. Res., 1995,276,219-251.

88. Stortz, C.A., Maier, M.S. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 2000, 1832-1836.

89. Martín-Pastor, M., Espinoza, J.-F., Asensio, J.L., Jiménez-Barbero, J. Carbohydr. Res., 1997, 298, 15-49.

90. Kawakami, J., Kawakami, Y., Nakamura, K., Kojima, H., Ito, S., Tamai, Y. Glycoconjugate J., 1998,15, 107-113.

91. Thibodeaux, D.P., Johnson, G.P., Stevens, E.D., French A.D. Carbohyd. Res., 2002, 337, 2301-2310.

92. Engelsen, S.B., Koöa, J., Braccini I., du Penhoat, C.H., P Pérez, S. Carbohydr. Res., 1995, 276, 1-29.

93. Koca, J. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1995, 343, 125-132.

94. Stortz, C.A. Carbohydr. Res. 1999, 322, 77-86.

95. Stortz, C.A., Cerezo, A.S. Carbohydr. Res., 2002,337, 1861-1871.

96. Stortz, C.A., Cerezo, A.S. Carbohydr. Res., 2003,338, 95-107.

97. Stortz, C.A. Carbohydr. Res. 2001, 337, 2311-2323.

98. Stortz, C.A., Cerezo, A.S. J. Carboh. Chem., 2002, 21(5), 355-371.

99. Stortz, C.A., Cerezo, A.S. Carbohydr. Res., 2003, 338, 1679-1689.

100. Verl et, I. Phys. Rev., 1967, 159, 98.

101. Dodziuk, H., Lukin, O. Chem. Phys. Lett., 2000, 327, 18-22.

102. Kriss, C.T., Lou, B.-S., Szabó, L.S., Mitchell, S.A., Hruby, V.J., Polt, R. Tetrahedron: Asymmetry, 2000, 11, 9-25.

103. Frecer, V., Ho, B., Ding, J.L. Biochim. Biophys. Acta, 2000, 1466, 87-104.

104. Bruix, M., Jiménez-Barbero, J., Cronet, P. Carbohydr. Res., 1995, 273, 157-170.

105. Widmalm, G., Byrd, R.A., Egan, W. Carbohydr. Res. 1992, 229, 195-211.

106. Klein, R.A., Hartmann, R., Egge, H., Behr, T., Fischer, W. Carbohydr. Res., 1996,281,79-98

107. Poveda, A., Asensio, J.L., Martín-Pastor, M., Jiménez-Barbero, J. Biomol. NMR, 1997, 10,29-43.

108. González, L., Asensio, J.L., Ariosa-Alvarez, A., Verez-Bencomo, V., Jiménez-Barbero, J. Carbohydr. Res., 1999, 321, 88-95.

109. Blanco, J.L.J., van Rooijen, J.J.M., Erbel, P.J.A., Leeflang, B.R., Kamerling, J.P., Vliegenthart, J.F.G. J. Biomol. NMR, 2000, 16, 59-77.

110. Kozar, T., Tvaroska, I., Carver, J.P. Glycoconjugate J., 1998, 15, 187-191.

111. Spronk, B.A., Rivera-Sagredo, A., Kamerling, J.P., Vliegenthart, J.F.G. Carbohydr. Res., 1995,273, 11-26.

112. Eklund, R., Widmalm, G. Carbohydr. Res., 2003, 338, 393-398.

113. Cheetham, N.W.H., Dasgupta, P., Ball, G.E. Carbohydr. Res., 2003, 338, 955962.

114. Horita, D.A., Hajduk, P.J., Lerner, L.E. Glycoconjugate J., 1997,14, 691-696.

115. Stenutz, R., Widmalm, G. Glycoconjugate J., 1997, 14, 973-981.

116. Söderman, P., Jansson, P.-E., Widmalm, G. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 1998, 639-648.

117. Lycknert, K., Höög, C., Widmalm, G. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 2002, 416421.

118. Chandrasekhar, S. Rev. Mod. Phys., 1943,15, 1.

119. Hardy, B.J., Egan, W., Widmalm, G. Int. J. Biol. Macromol., 1995,17, 149-157.

120. Peterson, M.A., Lipkowitz, K.B. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1997, 395-396, 411-423.

121. Fadrná, E., Koca, J. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1997,398-399, 523-528.

122. Brady, J.W. Chem. Phys., 1997, 263-273.

123. Leroux, B., Bizot, H., Brady, J.W., Tran, V. Chem. Phys., 1997, 216, 349-363.

124. Fringant, C., Tvaroska, I., Mazeau, K., Rinaudo, M., Desbrieres, J. Carbohydr. Res., 1995, 278,27-41.

125. Bonanno, G., Noto, R., Fornili, S.L. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 1998, 94, 2755-2762.

126. Kozar, T., von der Leith, C.-W. Glycoconjugate J., 1997, 14, 925-923.

127. Braccini, I., Grasso, R.P., Pérez, S. Carbohydr. Res., 1999, 317, 119-130.

128. Bauman, A.T., Chateauneuf, G.M., Boyd, B.R., Brown, R.E., Murthy, P.P.N. Tetrahedron Lett., 1999,40,4489-4492.

129. Morris, G.M., Goodsell, D.S., Halliday, R.S., Huey, R., Hart, W.E., Belew, R.K., Olson, A.J. J. Comp. Chem., 1998, 19, 1639-1662.

130. Bungay, S.D., Poirier, R.A., Charron, R.J. J. Math. Chem., 2000, 28(4), 389-401.

131. Box, V.G.S., Evans-Lora, T. J. Mol. Struct., 2000, 516, 203-214.

132. Box, V.G.S. J. Mol. Struct., 2001, 569, 167-178.

133. Kurahashi, T., Mizutani, T., Yoshida, J. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1999, 465-473.

134. Jónsdóttir, S.Ó., Cooke, S.A., Macedo, E.A. Carbohydr. Res., 2002, 337, 15631571.

135. Casset, F., Imberty, A., du Penhoat, C.H., Koca, J., Pérez, S. J. Mol. Struct. (THEOCHEM), 1997, 395-396, 211-224.

136. Bock, K.; Pedersen, C. Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy of Monosaccharides. B Advances in Carbohydrate Chemistry and Biochemistry, Horton, D., Tipson, R.S., Eds.; Academic Press: New York, 1983; Vol. 41, 27-66.

137. Lamba, D., Glover, S., Mackie, W., Rashid, A., Scheldrick, B., Perez, S. Glycobiology 1994, 4, 151-163.

138. Bundle, D.R., Baumann, H., Brisson, J.-R., Gagné, S.M., Zdanov, A., Cygler, M. Biochemistry 1994, 33, 5183-5192.

139. Stortz, C.A., Cerezo, A.S. J. Carbohydr. Chem. 1998, 17(9), 1405-1420.

140. Grant, D.M., Cheney, B.V. J. Am. Chem. Soc. 1967, 89(21), 5315-5319.

141. Laikov, D.N. Chem. Phys. Lett., 1997, 281, 151-156.

142. Heatley, F., Akhter, L., Brown, R.T. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 2, 1980, 919924.