Сульфатированные производные на основе порошковых целлюлоз и кооперативные взаимодействия с их участием тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.04, кандидат химических наук Торлопов, Михаил Анатольевич

  • Торлопов, Михаил Анатольевич
  • кандидат химических науккандидат химических наук
  • 2009, Уфа
  • Специальность ВАК РФ02.00.04
  • Количество страниц 143
Торлопов, Михаил Анатольевич. Сульфатированные производные на основе порошковых целлюлоз и кооперативные взаимодействия с их участием: дис. кандидат химических наук: 02.00.04 - Физическая химия. Уфа. 2009. 143 с.

Оглавление диссертации кандидат химических наук Торлопов, Михаил Анатольевич

Список основных сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Целлюлоза и ее структурные производные

1.2 Анионные производные целлюлозы и физико-химические свойства их водных растворов

1.2.1 Карбоксиметилцеллюлоза

1.2.2 Сульфаты целлюлозы

1.2.3 Смешанные сульфатированные эфиры целлюлозы

1.2.4 Фосфорилированные производные полисахаридов

1.2.5 Физико-химические свойства растворов анионных производных целлюлозы

1.3 Кооперативные процессы в растворах углеводсодержащих поли- 25 меров

1.3.1 Кооперативный конформационный переход полимеров в растворе

1.3.2 Интерполимерные взаимодействия с участием углеводсодержащих полимеров

1.3.3 Взимодействие анионных полисахаридов с белком 34 1.5 Биологическая активность сульфатированных полисахаридов, связанная с кооперативными взаимодействиями

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Физическая химия», 02.00.04 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сульфатированные производные на основе порошковых целлюлоз и кооперативные взаимодействия с их участием»

Актуальность темы. На сегодняшний день подтверждена высокая и разнообразная биологическая активность сульфатированных полисахаридов как природных (гепарин, фукоидан) так и полусинтетических - производных хи-тозана, полигалактоуронана, целлюлозы и некоторых других. Благодаря высокой биосовместимости, доступности, целлюлоза, и особенно ее структурные модификации - порошковые целлюлозы, являются перспективной основой для получения сульфатированных полисахаридов и их последующего внедрения.

В целях повышения эффективности применения производных целлюлозы, понимания их физиологической активности необходимо глубокое изучение физико-химических свойств этих веществ, поведения этих полимеров в водной среде, ионизационных равновесий и термодинамических параметров кооперативных конформационных переходов макромолекул сульфатированых полимеров в растворе.

Поэтому, исследование физико-химических свойств этих соединений, установление их связи со структурой, природой дополнительных заместителей и молекулярной массой, приобретает особое значение.

Различными исследованиями установлено, что биологическая активность сульфатированных полисахаридов во многом связана с кооперативными реакциями комплексообразования между отрицательно заряженной цепью сульфатированного полисахарида (макроанионом) и положительно заряженными поверхностями белков. По этой причине актуальным для целенаправленного создания препаратов медицинского назначения на основе сульфатированных полисахаридов остается исследование их комплексообразующей способности с биологическими объектами, белками, синтетическими и полусинтетическими поликатионами, исследование факторов влияющих на образование и устойчивость подобных комплексов методами физической хиI мии. Эти исследования имеют значение для создания на основе полимер полимерных комплексов с участием сульфатированных полисахаридов и средств транспорта лекарств, и самостоятельных лекарственных средств.

Работа выполнена в соответствии с тематическими планами НИР Института химии КНЦ УрО РАН по теме «Структурная организация и физико-химические свойства природных полисахаридов и лигнинов - перспективных биополимеров для создания новых материалов» и при частичной финансовой поддержке программы «Фундаментальные науки - медицине».

Цель работы. Изучение влияния структуры продуктов деструкции целлюлозы на их реакционную способность в полимераналогичных превращениях, физико-химические свойства их полифункциональных сульфатированных производных и кооперативных взаимодействий с их участием.

Основные задачи: 1) Изучить строение, физико-химические свойства продуктов деструкции и полимераналогичных превращений целлюлозы. 2) Исследовать изменения термодинамических параметров при кооперативных конформационных переходах сульфатированных сульфатированных производных целлюлозы содержащих дополнительные (карбоксильные, фосфатные) функциональные группы. 3) Исследовать интерполимерные кооперативные реакции полифункциональных сульфатированных производных целлюлозы с полиэтиленгликолем и белковым полимером. 4) Исследовать связь между структурой полученных полимеров, их способностью к кооперативным взаимодействиям с белоксодержащими объектами природного происхождения и их биологической активностью.

Научная новизна. Изучены физико-химические свойства впервые синтезированных препаратов сульфата цианоэтил-, амидоэтилцеллюлозы, сульфата фосфорилированной целлюлозы, а также сульфатов целлюлозы на основе порошковых целлюлоз, полученных методом каталитической деструкции в среде органических растворителей. Показано влияние способа получения и надмолекулярноной структуры порошковых целлюлоз на их активность в реакциях сульфатирования, физико-химические свойства получаемых производных.

Методами потеициометрического титрования и капиллярной вискозиметрии показано образование компактных вторичных структур в растворах сульфатированных производных целлюлозы; дана количественная оценка изменения энергии Гиббса, энтальпии и энтропии кооперативного конфор-мационного перехода сульфатированных производных целлюлозы;

Установлено, что сульфаты целлюлозы, содержащие дополнительные (карбоксилметильные, амидоэтильные, фосфатные) группы участвуют в интерполимерных реакциях с препаратами полиэтиленгликоля и белковых полимеров. Показано влияние молекулярной массы поликатионов и температуры на степень превращения этих реакций.

Определено, что сульфаты целлюлозы с дополнительными функциональными группами на основе порошковых целлюлоз способны к комплексообра-зованию со сложными белковыми структурами и обладают свойствами гипо-липидеметиков, а также обладают способностью избирательному ингибиро-ванию клеточной адгезии в зависимости от природы дополнительного заместителя.

Практическая значимость работы. Получены высокозамещенные сульфатированные производные на основе порошковых целлюлоз включающие в свою структуру различные дополнительные (карбоксиметильные, эми-доэтильные, фосфатные) группы. Показана перспективность использования ПЦ, полученных различными методами, для синтеза сульфатированных производных целлюлозы. Показано, что полианионы на основе целлюлозы являются перспективными компонентами гидрофильных полиэлектролитных комплексов. Комбинированные сульфатированные производные целлюлозы, содержащие дополнительные (карбоксильные, амидоэтильные, фосфатные) группы, полученные на основе ПЦ, могут служить основой для производства препаратов медицинского назначения.

На защиту выносятся:

1. Результаты изучения влияния структуры ПЦ на их активность в процессах полимераналогичных реакций целлюлозы и физико-химические свойства получаемых продуктов.

2. Результаты определения изменения энергии Гиббса, энтальпии и энтропии кооперативных конформационных переходов сульфатированных производных.

3. Результаты исследования интерполимерных взаимодействий сульфатированных производных целлюлозы с полиэтиленгликолем, белковым полимером.

4. Результаты исследования комплексообразования сульфатированных производных целлюлозы с белоксодержащими объектами природного происхождения.

Апробация работы и публикации. Материалы диссертации были доложены на 15 Коми республиканской молодежной научной конференции (г. Сыктывкар, 2004 г.); на 11 международной научно-технической конференции «эфиры целлюлозы и крахмала: синтез, свойства, применение» (г. Владимир, 2007 г.); III Всероссийской конференции «новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья» (г.Барнаул, 2007 г.); 4th Saint-Petersburg Young Scientists Conference (with international participation) «Modern problems of polymer polymerscinse». Saint-Petersburg, 2008; на симпозиуме с международным участием «проблемы адаптации человека к экологическим и социальным условиям севера». По результатам проведенных исследований опубликовано 6 статей (из них 4 в журналах, рекомендованных ВАК) и тезисы трех докладов.

Структура и объем работы Диссертационная работа общим объемом 144 страниц состоит из введения, 3 глав: литературного обзора, экспериментальной части, результатов и их обсуждения, а также выводов и приложения; содержит 23 таблицы, 53 рисунка. Список литературы включает 127 наименований.

Похожие диссертационные работы по специальности «Физическая химия», 02.00.04 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Физическая химия», Торлопов, Михаил Анатольевич

Выводы

1. Показано, что физико-химические свойства (растворимость, вязкость растворов) сульфатированных производных целлюлозы на основе ПЦ, полученных методом каталитической деструкции целлюлозы кислотами Льюиса в апротонных растворителях, могут быть заданы условиями получения ПЦ на этапе деструкции целлюлозы.

2. Определены константы диссоциации карбоксильных и фосфатных групп в препаратах СКМЦ и СФЦ. Показано уменьшение рКа этих производных при увеличении ионной силы раствора и степени сульфатирования. Установлено падение вязкости растворов с увеличением содержания с! — металлов в № - солях сульфатированных производных целлюлозы содержащих Со2+ и Си2+.

3. Показано образование в растворе компактных структур полифункциональными сульфатированными производными целлюлозы стабилизированных кооперативными взаимодействиями в области низких степеней ионизации. Установлено, что энергия Гиббса конформационного перехода сульфатированных производных целлюлозы ограничена пределами от 0 до 3 кДж/моль и обладает тенденцией к повышению при увеличении концентрации постороннего электролита в растворе.

4. Впервые показано, что сульфатированные производные карбоксиметил-целлюлозы и фосфата целлюлозы образуют гидрофильные интерполимерные комплексы с препаратами ПЭГ стабилизированные как водородными связями, так и электростатическими взаимодействиями, вклад которых увеличивается с увеличением степени сульфатирования производного целлюлозы.

5. Установлено, что в результате интерполимерной реакции сульфатированных производных целлюлозы с деструктированным белком наблюдается образование гидрофильных комплексов стабилизированных электростатическими кооперативными взаимодействиями.

6. Показано комплексообразование сульфатированных производных целлюлозы с белоксодержащими объектами: липопротеидами, клеточной стенкой. Показана способность этих производных связывать липиды крови, ингибировать спонтанную и активированную клеточную адгезию. Ком-плексообразующая способность этих производных по отношению к биологическим объектам может быть задана степенью замещения по сульфатным группам и типом дополнительного (карбоксиметильного, амидно-го или фосфатного) заместителя.

Заключение

Тенденции применения целлюлозы в настоящее время связаны не только с химической функционализацией этого полимера, но и с модификацией его надмолекулярной структуры: получением различных порошковых, нанокри-сталличеких целлюлоз. Причем, именно изменение надмолекулярной структуры во многом расширяет возможности дальнейшей химической модификации целлюлозы и, что не менее важно, оказывает влияние на конечные физико-химические свойства получаемых производных.

Разработка новых и более эффективных путей применения биологически активных агентов на основе сульфатированных полисахаридов связана с исследованием физико—химии кооперативных процессов, в первую очередь, касающихся образования надмолекулярных структур в растворе в результате кооперативных взаимодействий.

Анализ литературных источников, осуществленный нами, показал, что исследования в области кооперативных конформационных переходов полисахаридов в растворах практически отсутствуют. Вместе с тем, в этой области разработаны и могут быть использованы доступные методики, применяемые для исследования кооперативных формационныхе переходов синтетических полимеров. Одним из наиболее информативных методов в настоящее время остается метод потенциометрического титрования.

Обзор тенденций по исследованию механизмов биологического действия сульфатированных полисахаридов показал, что в значительной мере их действие на живые системы может объясняться физико-химическими взаимодействиями с макромолекулярными биологическими объектами, а именно кооперативными взаимодействиями между макромолекулой анионного полисахарида и биологической структурой (клеточной мембраной, оболочкой вируса, макролипидом). Вместе с тем, имеются пробелы в сфере понимания физико-химических основ биологического действия сульфатированных полисахаридов. В этой связи актуальными целями исследований в этой области становятся механизмы взаимодействия сульфатированных полисахаридов с поликатионами. Особенный интерес здесь представляют синтетические поли-каоны. Реакции с ними обладают значением и для моделирования природных процессов, и для разработки новых интерполимерных транспортных систем.

ГЛАВА 2 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 2.1 Общие методы анализа целлюлозы и ее производных

2.1.1. Среднюю степень полимеризации (Р) образцов целлюлозы определяли вязкозиметрическим методом (растворитель кадоксен, вискозиметр Оствальда с диаметром капилляра 0.82 мм) [102].

2.1.2. Содержание сульфатных групп в сульфатированных образцах целлюлозы определяли двумя методами:

Гравиметрическим методом [28], после десульфатирования образцов в 1 н растворе соляной кислоты (3 ч, 50° С).

Определяли содержание серы методом элементного анализа на приборе ЕА-1110 фирмы «CE instruments».

Степень замещения в препаратах СЦ-Na (C3S) находили по уравнению:

162 , .

C3S =---, где cos — содержание серы (масс. %)

3200 - û)s • 103

2.1.3. Определение карбоксильных групп в карбоксиметилцеллюлозе осуществляли ацидиметрически. КМЦ-Na обрабатывали избытком 0.4 н раствора НС1 в 70 % -ном этаноле. Полученную свободную поликислоту отделяли центрифугированием, промывали водно-этанольной смесью и сушили в вакууме при 60 °С. Затем навеску 1.00 г поликислоты нейтрализовали избытком титрованного раствора NaOH оттитровывая избыток NaOH 0.1 н НС1. Степень замещения СЗсоон в препаратах КМЦ рассчитывали по формуле: СЗсоон =162п/4500-58п, где п - содержание карбоксильных групп (масс. %) п = (0.00045 - VUC[ ■ 0.1/1000) • 45/тн, где т„ - масса сухой, навески КМЦ.

2.1.4. Содержание азота в образцах определяли методом элементного анализа на приборе ЕА-1110 фирмы «CE instruments».

2.1.5. Содержание фосфора в образцах производных целлюлозы осуществляли фотометрически в виде фосфорномолибденовой сини [103].

2.1.6. ИК - спектры пропускания получены на ИК-Фурье спектрометре MIR-8000 (ORIEL) в таблетках КВг.

2.1.7. Рентгенофазовый анализ проведён на рентгеновском дифрактометре ДРОН-3 (начальный угол 5.00 град., шаг измерения 0.05 град., конечный угол 40.00 град.). Индекс кристалличности (1кр) рассчитан по отношению интен-сивностей рефлекса при углах 22° и 19° с использованием метода Сегала [104].

2.1.8 Молекулярная масса и ММР водорастворимых производных целлюлозы изучены методом гель - проникающей хроматографии: колонка Shodex Asahipak GS—620HQ (7.6 мм х 30 см, «Shimadzu», Япония) и предколонка Shodex GS-26 7В (7.6 мм х 5 см, «Shimadzu»), термостат СТО - 10AS («Shimadzu»), детектор-рефрактометр RID G136A («Shimadzu»). Элюирование проводили 0.15 М NaCl при 40 °С со скоростью элюента 0,5 мл/мин. Для калибровки колонки использовали декстран сульфаты с молекулярной массой в диапазоне

36 -40, 100, 400 - 600- 10J («Sigma», США). Процентное содержание определяли от общей площади пиков.

2.1.9 ЯМР !Н, 13С, 31Р спектры получены на приборах Brucker АМХ - 400 и Brucker - 300; растворитель D20, 30 °С; время релаксации 3.5 с.

2.1.10 Вязкость водных растворов определена с помощью вискозиметра Оствальда с диаметром капилляра 0.56 мм, при температуре 30°С.

2.2 Методы модификации целлюлозы 2.2.1 Порошковые целлюлозы

Деструкцию целлюлозы, выделенной из древесины лиственных пород, осуществляли в водном растворе состава 1.0 % пероксида водорода, 10 % серной кислоты, целлюлозы выделенной из льна - перуксусной кислотой (10 %-ный водный раствор). Деструкцию проводили при температуре кипения смеси в течение двух часов. Затем полученные препараты отделяли на фильтре, промывали до нейтральной реакции дистиллированной водой, инк-людировали ацетоном и сушили на воздухе при комнатной температуре.

Для получения ПЦ каталитической деструкцией с использованием кислот Льюиса использовали метод, подробно изложенный в [105].

ПЦ-МКЦ представляет собой коммерческий препарат, полученный кислотным гидролизом волокон хлопковой целлюлозы. Данный препарат выпускается для пищевых и медицинских целей ЗАО «Полиэкс» г. Бийск, под торговой маркой «Анкир-Б», согласно ТУ 64-11-124-90.

Лиственная сульфатная целлюлоза (ВЦ) производства ОАО «МБП Сыктывкарский ЛПК». Предварительная подготовка целлюлозных препаратов к работе состояла в удалении минеральных соединения обработкой 1 н соляной кислотой, а затем водой до нейтральной реакции. Препарат обезвоживали ацетоном и сушили до постоянной массы при 103°С.

2.2.2 Получение промежуточных производных целлюлозы

Карбоксиметилцеллюлоза (КМЦ)

Карбоксиметилцеллюлозу (КМЦ) получали по модифицированному методу [106]. Типовая процедура состояла в следующем: о

МКЦ (10 г, 61.73 ммоль) активировали в 20 см 40 %-го раствора ЫаОН. Суспензию перемешивали и оставляли на 10 мин при комнатной температуре. Затем прибавляли 20 см изо-пропанола и термостатировали смесь 30 мин о при 55°С. После этого вносили раствор монохлоруксусной кислоты в 20 см изо-пропанола. Продолжительность реакции: 3 ч при 55 °С или 2 ч при 80 °С. Продукт отфильтровывали на стеклянном фильтре, промывали водным этанолом. Полученную КМЦ-Ка очищали в аппарате Сокслета (экстракция 60 %-ным водным этанолом до нейтральной реакции промывных вод и отрицательной реакции на ионы СГ). В форму свободной кислоты (КМЦ-Н) натриевую соль КМЦ переводили обработкой 10 %-ным раствором соляной кислоты с последующей отмывкой продукта дистилированной водой, иклюдирова-ли ацетоном и сушили в вакууме при 60 °С. Цианэтилцеллюлоза (ЦЭЦ)

Целлюлозу (10 г., 61.73 ммоль) диспергировали в 4 % -ном водном растворе NaOH и термостатировали 30 мин. при 40 °С. Суспензию охлаждали до 5 °С, при перемешивании вносили акрилонитрил. Реакцию проводили в течение 3 ч при постепенном повышении температуры до 40 °С, после чего продукт отделяли на фильтре, промывали большим количеством воды, затем этанолом и сушили в вакууме при 60 °С.

2.2.3 Получение сульфатированных производных целлюлозы

Сульфат целлюлозы получали сульфатированием в системе пиридин -хлорсульфоновая кислота. Образец порошковой целлюлозы (1.00 г; 6.17 ммоль), предварительно высушенный до постоянной массы при 103 °С суспендировали в пиридине при 0 °С. Охлаждая и интенсивно перемешивая ре-акционнонную смесь, в нее по каплям вносили хлорсульфоновую кислоту (3 экв. на ангидроглюкозную единицу). После термостатирования в течении 1 ч при 90 °С реакцию продолжали в течении 2 ч при 80 °С. Продукт отфильтровывали на стеклянном фильтре, промывали 20 см ацетона и растворяли в 50 см 4 %-го NaOH. Образовавшуюся натриевую соль сульфата целлюлозы л

СЦ-Na) осаждали 100 см этанола, промывали водно-этанольной смесью от неорганических солей и сушили в вакууме.

Сульфат карбоксиметилцеллюлозы (СКМЦ) получали модификацией метода [33]. Высушенный до постоянной массы образец КМЦ-Na (1.0 г) суспендировали в 10 см ДМФА. При интенсивном перемешивании и охлаждении до 5 °С добавляли безводную и-толуолсульфоновую кислоту (1 экв. на карбоксильную группу полимера) и термостатировали 0.5 ч при 60 °С. Затем колбу с сильно набухшим полимером охлаждали до 0 °С, добавляли по каплям хлорсульфоновую кислоту (2 экв. на мономерное звено) и оставляли на 3 ч при комнатной тепературе. Для выделения полимера к охлаждённой реакционной смеси прибавляли 20 см3 безводного ацетона. Осадок отфильтровывали, обрабатывали водным раствором гидроксида натрия. Из полученного раствора этанолом осаждали СКМЦ-Na, полимер отделяли, промывали водно - этанольной смесью для очистки от неорганических солей и сушили в вакууме при 60 °С.

Сульфат цианоэтилцэллюлозы (СЦЭЦ) и амидоэтилцеллюлозы (САЭЦ).

Для сульфатирования цианэтилцеллюлозы (C3cn= 0.36) 1.0 г сухого обо разца растворяли в 10 см ДМФА и оставляли на 1 ч при комнатной температуре. Колбу с сильно набухшим и частично растворившимся полимером охлаждали до О °С, по каплям прибавляли хлорсульфую кислоту (2 экв. на мономерное звено) и термостатировали при 20 °С. По окончании реакции, охлаждая и перемешивая, реакционную смесь нейтрализовали насыщенным раствором ацетата натрия в этаноле. Осажденный полупродукт отделяли на фильтре, растворяли в 20 см3 раствора 3 %-го Н2О2 при рН = 10. Гидролиз нитрильных групп проводили в течение суток при комнатной температуре, после чего полимер осаждали этанолом (100 см ), отделяли на стеклянном фильтре и очищали диализом на целлофановых мембранах. Полученную о

САЭЦ-Na осаждали этанолом (150 см ) отделяли, промывали водно - этанольной смесью, инклюдировали ацетоном и сушили в вакууме при 60 °С.

Сульфат фосфата целлюлозы (СФЦ-Na). л

1.0 г (6.17 ммоль) целлюлозы суспендировали в 10 см сухого ДМФА и оставляли на ночь. Отдельно готовили этерифицирующую смесь, для чего в 20 см3 сухого ДМФА растворяли 0.90 г (6.34 ммоль) Р2О5 и при охлаждении добавляли 0.22 г воды (12.22 ммоль). После перемешивания полученной смеси к ней по каплям прибавляли 1.43 г (12.27 ммоль) CISO3H обеспечивая хорошее перемешивание и охлаждение до 0 - 5 °С. Полученный раствор оставляли на 5 - 6 ч, после чего этерифицирующую смесь вносили к набухшей целлюлозе, перемешивали и термостатировали 1.5 ч при 50 °С. По истечении этого строка, гомогенную реакционную смесь охлаждали до -10 °С, дисперо гировали в 250 см холодного ацетона. Осадок отфильтровывали, диспергио ровали в 100 см холодной воды и нейтрализовали 4 %-ным ИаОН по фенолфталеину. Полученный раствор диализовали на целлофановых мембранах против дистиллированной воды (до отрицательной реакции на сульфат - ионы); полимер осаждали этанолом и сушили в вакууме при 60 °С.

Поучение солей производных целлюлозы с катионами Са2+, Си2+, Со2+.

Для получения катионных форм различных производных целлюлозы использовали обработку № - солей целлюлозных поликислот насыщенными растворами солей Са2+, Си2+, Со2+. Типовая процедура: 1.00 г СЦ-Иа оставляли в 5 см дистиллированной воды для набухания. Затем порциями прибавляли насыщенный раствор хлорида двухвалентного металла (так что бы общий о объем смеси составил 30 см ). Катионообменную реакцию продолжали в течение 15 мин. при перемешивании, после чего полученную соль осаждали этанолом (50 см ), отделяли от избытка смеси, промывали водно-этанольным раствором от неорганических солей, инклюдировали ацетоном и сушили в вакууме при 60 °С. При необходимости, процедуру катионного обмена повторяли несколько раз.

2.3 Исследование кооперативных взаимодействий сульфатированных производных целлюлозы

2.3.1 Исследование конформаций цепи в растворе сульфатированных производных целлюлозы

Потенциометрическое титрование производных целлюлозы и других полисахаридов выполняли на рН - метре рН-410 «Аквилон», используя комбинированный электрод марки ЭСК-10601/7 в термостатированной ячейке при 20 и 50 ±0.2 °С Раствор гидроксида натрия С = 0.05 моль/дм3 готовили из стандарт-титра. Титрование проводили при постоянном перемешвании

Препараты СКМЦ, СФЦ соответственно, карбоксильные и фосфатные группы которых представлены натриевыми солями, обрабатывали в растворе расчетным количеством и-толуолсульфокислоты для получения указанных анионных групп в Н*- форме. Поликислоту осаждали этанолом (70 % об.), промывали 70 %-ным этанолом и лиофильно высушивали. Для последующих потенциометрических исследований использовали растворы полисахаридов концентрацией 0.25 г/дл.

Расчет изменения энергии Гиббса (АО) осуществляли общепринятым методом (см. например [49, 55]). Выражение для изменения энергии Гиббса: где рК(а)— константа диссоциации при ] данном значении а; рК0 - истинная кон- АО = 2.3КТ/[рК(а)-рКо]ёа (1.1) станта диссоциации полиэлектролита.

Для нахождения рКа решали эмпирическое уравнение Гендерсона-Хессельбаха: рН = рКа+ п ^(а/1-а) (1.2) где а - степень ионизации полиэлектролита; принимали значения а = 0 в отсутствие щелочи и а = 1 в точке нейтрализации поликислоты; рКа и п-некоторые постоянные для данной системы полимер-растворитель. Полное изменение Аву определяли согласно уравнению (1.1) решением интеграла графическим методом. 1

АС1 = 2.3Ят1[рК(а) - рК0]с!а (1.3) о

Изменение энергии Гиббса при конформационном переходе упорядоченной формы поликислоты АОа: АОа = Ав^ - Авь (1.4) где АОь - полное изменение энергии Гиббса при конформационном переходе неструктурированной формы поликислоты; подставляя выражение 1.4 в уравнение 1.3 получаем: АСа = 2.3КТ(АО£ - АОьКОнф) (1.5)

Значение Ава рассчитывается графическим методом, по площади ограниченной двумя кривыми (экспериментальной кривой потенциометрического титрования соответствующей конформационным изменениям структурированной формы поликислоты и гипотетической кривой для неструктурированной формы поликислоты). Гипотетическую кривую для неструктурированной формы поликислоты строили методом экстраполяции прямолинейного участка из области высоких значений а в область а = 0.05^0.3 на кривой рН = рКа+ п ^(а/1-а), откуда рассчитывали значения рН экстр и рК экстр.

Изменение и энтропии (А8К0Нф) при конформационном переходе рассчитывали по уравнению (1.6): (Дв1 - АО2) (1 6) где АСконф = изменение энергии Гиббса А8К0Нф =

Т'-Т2) при конформационном переходе структурированной формы поликислоты (Ава) при данной температуре. Изменение энтальпии рассчитывали из выражения: АОа = ДНа - ТД8К01,ф (1-7).

2.3.2 Исследование интерполимерных реакций о

Готовили основные растворы полимеров с концентрацией 0.2-10"*" г/см . Смеси полимеров заданного соотношения готовили смешением основных о растворов. Для этого к 3.0 см основного раствора анионного полимера прибавляли соответствующий объем основного раствора поликатионита. Полуп ченную смесь разбавляли водой до объема 10.0 см . Измерения времени истечения растворов полимеров выполняли с помощью капиллярного вискозиметра Оствальда, с1—0.56 мм, при температурах 30 и 50 °С ±0.1 °С. Значения приведенной вязкости рассчитывали: цпр = т/^/С; где цуд — (^-т0)/т0; С -концентрация анионного полисахарида, г/см ; то - время истечения чистого растворителя, [с]; время истечения раствора полимера, [с].

2.4.1 Исследование комплексообразования анионных полисахаридов с биологическими объектами

Для определения гиполипидемической активности полисахаридов применяли турбидиметрический метод, предложенный авторами работы [107]. Использовали 0.5 % водный раствор полисахарида. В качестве положительного контроля применяли нефракционированный гепарин.

Для определения влияния анионных полисахаридов на адгезивность фагоцитирующих клеток использовали перитониальные макрофаги белых лабораторных мышей. Суспензию макрофагов (2-10 кл/см ) в среде Хэнкса, содержащей 10 % эмбриональной телячьей сыворотки, инкубировали в лунках плоскодонного планшета (ICN Biomedicals, США) с растворами полисахаридов 1.0 мг/см в течение 20 мин. при 37 °С. Количество прикрепившихся клеток определяли колориметрическим методом, используя краситель Рома-новского-Гимзы [108]. После полного растворения красителя измеряли поглощение (А) раствора при длинне волны 650 нм с помощью спектрофотометра PowerWawe 200 (BioTek Instruments, США). Адгезию выражали в процентах от поглощения лунок с контрольным раствором: Адгезия = (А0-А;/АО-100.

2.4.2 Определение ЛД50 и стистическая обработка результатов

Острую токсичность определяли с помощью экспресс-метода Прозоровского при однократном внутрибрюшинном введении растворов полисахаридов мышам [109].

Статистическая обработка данных выполнена по рекомендациям, изложенным в работе [110].

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ 3.1 Модификация целлюлозосодержащих материалов 3.1.1 Исходные целлюлозные материалы

В исследовании были использованы ПЦ, полученные различными методами деструкции целлюлозных волокон. Все образцы ПЦ, за исключением ПЦ-МКЦ, получены обработкой древесной волокнистой целлюлозы (ВЦ, табл. 3.1).

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Торлопов, Михаил Анатольевич, 2009 год

1. Czaja W. К., Young D. J., Kawecki M., et. all. The future prospects of microbial cellulose in biomedical applications (Review) // Biomacromolecules. -2007. -V.8. N.l. -P.1-12.

2. Mora P., Wood J. W. Synthetic polysaccharides. I. Polycondensation of glucose //J.Am.Chem.Soc.-1958. -V.3. -P. 685-697.

3. Mora P., Wood J. W. Synthetic Polysaccharides. 111. Polyglucose Sulfates // J.Am.Chem.Soc.-1958.-V.80.-P. 3700-3702.

4. Роговин З.А. Химия целлюлозы. M., Химия, 1972. с. 231.

5. Целлюлоза и её производные / под ред. Байклза Н., Сегала Л. пер. с англ. под ред. З.А.Роговина, Т. 2, М: Мир, 1974.

6. Патент РФ 2163945. А.В.Кучин, А.В.Попов, М.В.Сазонов, В.А.Демин. Способ получения микрокристаллической целлюлозы. Опуб. 10.03.2001, БИ № 7.

7. Sarybaeva I., Sultankulova A.S. et al., Physico-chemical and technological properties of powdery celluloses, obtained by the Lewis acids // Cellulose Chem. and Technol.-1991.-V.24.-P. 199-210.

8. Ardisone S., Dioguardi F.S., Mussini T., et. al. Microcrystalline cellulose powders: structure, surface feature sand water sorption capability // Cellulose.-1999.-N.6.-P. 57-69.

9. Thummler K., Fischer S., Pfeiffer K. et. al. Evaluation of molten inorganic salt hydrates as reaction medium for the derivatization of cellulose // Cellulose.2002.-N. 9.-P. 293-300.

10. З.Петропавловский Г.И. Гидрофильные частично замещённые эфиры целлюлозы и их модификация путём химического сшивания. Ленинград, Наука,-1988. с. 297.

11. Chauvelon G., Buleon A., Thibault J.-F., Saulnie L. Preparation of sulfoacetate derivatives of cellulose by direct esterification // Carbohydrate Research.-2004.- N. 8.-P. 743 -750.

12. Chauvelon G., Doublier J.-L., Buleon A., Thibault J.-F., Saulnie L. Rheological properties of sulfoacetate derivatives of cellulose // Carbohydrate Research.2003.- V. 338.- N. 8.-P. 751 759.

13. Heinze T., Liebert T., Klufers P. Carboxymethylation of cellulose in unconventional media//Cellulose 1999.-N. 6.-P. 153-165.

14. Berthold J., Olsson R. Water sorbtion for hydroxy 1 and carboxylyc acid groups in CMC stdied with NIR-spectroscopy // Cellulose.-1998.-№ 5.- P. 281 298.

15. КМЦ техническая. Технические условия ТУ 6-55-40-90. М.,1990.

16. Карпова Е.В., Базарнова Н.Г., Маматюк В.И. Определение содержания карбоксиметильных групп в карбоксиметилированной древесине методом ИК-спектроскопии // Химия растительного сырья. -2002. -№2.- С 33-38

17. Saake В., Horner S., Puis J., Heinze Th. A new approachin the analysis of the substituent distribution of Carboxymethylcelluloses // Cellulose.- 2001.-N. 8.-P. 59-67.

18. Петропавловский Г.А., Крунчак M. M. Сернокислые эфиры целлюлозы (сульфатцеллюлоза) // ЖПХ. 1967.-Т. 38.-№ 10.-С. 2209-2220.

19. Takano R., Nagaim Т., Wu J.X. Sulfation of polysaccarides using monometyl sulfate // J. Carbohydrate chemistry.- 2000.-Vol.l9.-№ 9.-. P.l 185-1190.

20. Wang Z. M., Li L., Zheng В., Hamatov N. N. Preparation and anticoagulation activity of sodium cellulose sulfate // International Journal of Biological Ma-cromolecules . 2007. N. 41. - P. 667-678.

21. Fhilipp В., Wagenknecht W., Nehls I. Untersuhungen zur sulfatirung von cellu-loseformiat im vergleich zu cellulose acetat unter homogen reaktionbedingungen // Cellulose chem. and tech.-1990.-N.24.-P. 667-678.

22. Schuldt U., Wagenknecht W., Richter A. Electrosorption of sodium cellulose sulfates with different substitution patterns // Cellulose.- 2002. N 9.-P.271-282.

23. Gohes M., Mischnick P. Determination of the substitution pattern in the poly-merchain of cellulose sulfates // Carbohydrate Research.-1998. N. 309. -P. 109— 115.

24. Основы аналитической химии / В.И. Фадеева, Т.Н. Шеховцева и др.; под. ред. Ю.А.Золотова.-М.: Высш. шк., 2001.- 463 с.

25. Malhner С., Dieter М. Lechner, Nordmeier Е. Synthesis and characterisation of dextran and pullulan Sulphate // Carbohydrate Research. -2001.-Vol. 331.-P. 203-208.

26. Richter A., Wagenknecht W. Synthesis of amylose acetates and amylose sulfates with high structural uniformity // Carbohydrate Research. -2003. Vol. 338. -P. 1397-1401.

27. Groth Th., Wagenknecht W. Anticoagulant potential of regioselective deriva-tized cellulose // Biomaterials.- 2001. N.22. -P.2719-2729.

28. Liu C., Baumann H. Exclusive and complete introduction of aminogroups and thier N-sulfo and N-carboxymethyl groups into the 6-position cellulose with out the use of protecting groups // Carbohydrate Research. -2002. N.337, -P. 1297— 1307.

29. Baumann H., Liu C., Faust V. Regioselectively modified cellulose and chitosan derivatives for mono-and multilayer surface coatings of hemocompatible biomaterials // Cellulose,-2003. N.10. -P.65-74.

30. Vogt S., Heinze T. Preparation of carboxymethylcellulose sulfate of high degree of substitution // Carbohydrate Research. 1995. V.266. -P. 315-320.

31. Miyamoto К., Shimizu P., Tokita M. Adhesion of 3-carboxymethyl-cellulose-6-sulfate to extra domain A-containing fibronectin: development of ligands for cry о gel removal // J. Artif. Organs -2002. V.5. -P.132-135.

32. Тимохин И.М., Прокофьева M.B. и др. Получение и свойства некоторых смешанных эфиров целлюлозы // Химия и технология производных целлюлозы. Владимир. 1971. с. 223-227.

33. Shashkov A.S., Senchenkova S.N. et. all. u. Structure of a phosphorylated poly-saccaride from Shewanellaputretacies strain S 29. // Carb. res. 1997, N.303 -P. 333-338.

34. Fricain J.C., Granja P.L., Barbosa M.A. Cellulose phosphates as biomaterials. In vivo bi©compatibility studies // Biomaterials, -2002. N.23. -P. 971-980.

35. The use of starch in meat products // by A.C.Payn. A dissertation in partial fulfillment of the requirments for the doctor of philosophy degree. Kentucky. 1993.

36. E.Tarelli, X. Lemercinier, S. Wheler. Direct preparation of cyclodextrin monophosphates // Carb. Res., -1997. N.302. -P.27-34.

37. Петров K.A., Нифантьев Э.Е., Сопикова И.И. и др. Метод фосфорилирова-ния целлюлозы фосфористой кислотой // выс. мол. соед. Целлюлоза и ее производные, 1963. С. 90-93.

38. Петров К.А., Нифантьев Э.Е., Сопикова И.И. и др. Фосфорилирования целлюлозы диалкил-(арил) фосфитами // выс. мол. соед. Целлюлоза и ее производные, 1963. С.86-89.

39. Reid J., Viazzeno L. Preparation and Properties of cellulose Phosphates // Ind. Eng. Chem. 1949. Vol. 41. N. 12. -P. 2828-2831.

40. Tian C.M., Xie X.J. et. al. The Effect of metal ions on thermal oxydative degradation of cotton cellulose ammonium phosphate // J. of thermal analysis and ca-lorymetry. 2003. -N. 73. -P. 827.

41. Петропавловский Г.А., Котельникова H.E. Дегидратация и фосфорилиро-вание целлюлозы оксидом фосфора (5) в среде диметилформамида // Cellulose chemistry and technology,-1985. N.19.-P. 591-600.

42. Farriol X., Barba C., Montane D. Synthesis and characterization of carboxyme-thylcelluloses from non-wood pulps II. Rheological behavior of CMC in aqueous solution // Cellulose, 2002. N.9. -P.327-335.

43. A. Katchalsky, H. Eisenberg //J. Polymer Sci. -1951.N.6, P. 145.

44. Mandel M., Leyte J. C., Stadhouder M. G. The conformational transition of poly(methacrylic acid) in solution // The Journal of Physical Chemistry, -1967.-V. 71, N. 3.- P.603 612.

45. Kawaguchi S., Nishikawa Y., KitanoT. Dissociation behavior of poly(itaconic acid) by potentiometric titration and intrinsic viscosity // Macromolecules, 1990, N. 23. -P.2710-2714.

46. Byoung S.K., Li С., Jianping G., Titration behavior and spectral transitions of water-soluble polythiophene carboxylic acids // Macromolecules, 1999.N. 32. -P.3964-3969.

47. Poly(methacrylic acid) derivatives. 5. microcalorimetric study of poly(N-methacryloyl-L-alanine) and poly(N-methacryloyl-co-alanine-co-N-phenylmethacrylamide) in aqueous solutions // Macromolecules. 1982. N. 15. -P. 890-894.

48. Leclercq L., Pollet A., et. all. Conformation of water soluble copolymers of methacrylic acid and bensyl methacrylat // Eur. Polym. J. -1999. N. 35. -P. 185193

49. McDiarmid R., Doty P. The spectrophotometric titration of polyacrylic, poly-L-aspartic, and poly-L-glutamic acids // The Journal of Physical Chemistry,-1966. -V. 70. N. 8,- P.2620-2627.

50. Godecand A., Skerjanc J. Enthalpy changesupon dilutionand ionization of poly (L-glutamicacid) in aqueous solutions //J.Phys.Chem.B 2005, N.109, -P.13363-13367.

51. Wangand C., Tam K.C. Dissolution behavior of HASE polymer in presence of salt: potentiometric titration, isothermal titration calorimetry, and light scattering studies//J.Phys.Chem.B, 2002, N.106, -P. 1195-1204.

52. Morcellet M., Wozniak M. Analysis of the potentiometric titration curves of some polyacids using polymeric subunits// Macromolecules, 1991, N.24, -P. 145-148.

53. Ravi P., Wang C., Tam K.C., Gan L.H. Association behavior of poly(methacrylicacid)-block-poly(methylmethacrylate) in aqueous medium: potentiometric and laser light scattering studies // Macromolecules, -2003, N.36. -P.173-179.

54. Groot J., Koper G.J.M., Borkovec M., Bleijser J. Dissociation behavior of poly(maleic acid): potentiometric titrations,viscometry, pulsed field gradient NMR, and model calculations// Macromolecules, -1998. N.31, -P.4182-4188.

55. Bongaertsand K., Reynaers H. On the molar mass of carrageen an in the course of conformational transition from the disordered to the fundamental ordered form//Macromolecules,- 1999. N. 32. P. 675-682.

56. Кабанов B.A. Физико-химические основы и перспективы применения растворимых интерполиэлектролитных комплексов (обзор) // Высокомолекулярные соединения, 1994. Т. 36. № 2. С. 183-197.

57. Кабанов В.А., Зезин А.Б. Водорастворимые нестехиометричные полиэлектролитные комплексы — новый класс синтетических полиэлектролитов // Итоги науки и техники. Сер. "Органическая химия". М., 1984. Т. 5. С. 131189.

58. Philippova О. Е., Karibyants N. S., Starodubtzev S. G. Conformational Changes of Hydrogels of Poly(methacrylic acid) by interaction with Polyethylene glycol) induced // Macromolecules 1994. -V.27, -P. 2398-2401.

59. Bergbreiter D. E., Hein M. D., and Huang K. J. Chain-Length Effects of Poly(ethylene glycol) on a Monolayer of a Poly(methacrylic acid)-Based Amphiphile at the Air-Water Interface // Macromolecules 1989, V.22, P. 46504652.

60. Huangand X.D., Goh S.H. Interpolymer complexes through hydrophobic Interactions: C-End-capped 60 poly(ethyleneoxide) / poly(methacrylicacid) complexes // Macromolecules 2000. -V. 33. -P. 8894-8897.

61. Fredheim G.E. Polyelectrolyte complexes: interactions between lignosulfonate and chitosan // Biomacromolecules. -2003. -V. 4. -P. 232-239.

62. Паламарчук И.А., Макаревич H.A., Бровко O.C. Кооперативные взаимодействия в системе лигносульфонат-хитозан //Химия растительного сырья -2008.- №4. С. 29-34.

63. S. Nath, С. S. Patrickios, T.Hatton. Turbidimetric titration study of the interaction of proteins with acrylic polyampholytes // Biotechnol. Prog. -1995, -V. 11, -P. 99-103.

64. Dubolazov A.V., Nurkeeva Z.S., Muni G.A. Design of mucoadhesive polymeric films basedon blends of poly(acrylicacid) and (hydroxypropyl)cellulose // Biomacromolecules. 2006. -V. 7. - P. 1637-1643.

65. Lu X., Hu Z., Schwartz J. Phase transition behavior of hydroxypropylcellulose under interpolymer complexation with poly(acrylic acid) // Macromolecules, -2002.-V. 35.-P. 9164-9168.

66. Schatz C., Lucas J-M., Viton C. Formation and Properties of Positively Charged Colloids Basedon Polyelectrolyte Complexes of Biopolymers // Langmuir. 2004. -V. 20. - P. 7766-7778.

67. Arguelles-Monal W., Peniche C., Rinaudo M. Conductimetric study of the in-terpolyelectrolyte reaction between chitosan and polygalacturonic acid // Polymer. 2000. - V.4. -P. 12373-2378.

68. Yakovlev S., Gorlatov S., Ingham K. et. all Interactionof fibrin(ogen) with heparin: further characterization and localization of the heparin-dinding site // Biochemistry. 2003. -V. 42. - P. 7709-7716.

69. Kunou M., Koizumi M., Shimizu K., et. al. Synthesis of sulfated colominic acids and their interaction with fibroblast growth factors // Biomacromolecules. -2000, -V. 1.-P. 451-458.

70. Matsudo Т., Ogawa K., Kokufuta E. Complex formation of protein with different water-soluble synthetic polymers // Biomacromolecules. -2003, -V. 4. -P. 1794-1798.

71. De Angelis P. L., Glabe C. G. Role of basic amino acids in the interaction of bindin with sulfated fucans // Biochemistry. 1988. -V. 27. -P. 189-194.

72. Wang X., Li Y., Wang Y. Microstructure of lactoglobulin / pectin coacervates studiedby small-angle neutron scattering // J.Phys.Chem. 2007, V. Ill, P. 515-520.

73. Zhu Ai, Fang N. Adhesion dynamics, morphology, and organization of 3T3 fi-broblaston chitosan and its derivative: the effect of O-carboxymethylation // Biomacromolecules. -2005. -V. 6, -P. 2607 -2614.

74. Weinbreck F., Nnieuwenhuije H., et. all Complexation of whey proteins with carrageenan // J. Agric. Food Chem. 2004. - V. 52. -P. 3550-3555.

75. Grymonpre K. R., Staggemeier B. A., Dubin P. Identification by integrated computer modeling and light scattering studies of an electrostatic serum albu-min-hyaluronic acid binding Site // Biomacromolecules. 2001, -V. 2, -P. 422429.

76. Jeon K-J., Katsuraya K., Kaneko Y. et. all. NMR spectroscopic detection of interactions betweena HIV protein sequence and a highly anti-HIV active curdlan sulfate // J.Am.Chem. Soc. -2000. -V. 122. -P. 12536 12541.

77. Gekk K., Noguchi H. Effects of ionic dextran derivatives on heat precipitation of protein // J. Agric. Food Chem. 1978. -V. 26, N. 6. -P. 1409-1413.

78. Poortinga A., Boos R. et all. Electric double layer interactions in bacterial adhesion to surfaces // Surface Science report. 2002. -V. 47. - P. 1-32.

79. Lipolsky R. Domain sand raftsin membranes-hidden dimensions of selforgani-zation // J. of Biol. Physics. 2002. -V. 28. -P. 195-210.

80. Grootenbuis P.D. J., van Boeckel C. A. A. Constructing a molecular model of the interaction between antithrombin III and a potent heparin analogue // J. Am. Chem. SOC. -1991, -V. 113. N. 7. -P. 2743-2747.

81. Rabenstein D.L. Heparin and heparan sulfate: structure and function // Nat. Product report. -2002. -V. 19. N 3. -P. 312-331.

82. Побочные эффекты введения гепарина // нефрология и диализ 2005 № 5. -с. 69-72.

83. Хотимченко Ю.С., Ермак И.М., Бедняк А.Е. Фармакология некрахмальных полисахаридов // Вестник ДВО РАН. -2005. № 1.- С. 72-82.

84. Усов А.И. Строение и биологическая активность сульфатированных полисахаридов бурых водорослей // Информационный бюллетень РФФИ 1998. № 6. -С. 104.

85. Matsui S., Muizzudin N. et. all. Sulfated polysaccarides from red microalgae have antiinflamatory properties in vitro and in vivo // Applied biochemistry and biotechnology. -2003. -V. 104. -P. 13-21.

86. Kolender A., Matulewicz M., Cerezo A. Structural analysis of antiviral sulfated a -D-(l—>3)-linked mannans// Carb. Res. -1995. -V. 273. P. 179-185.

87. Nishimura S-I., Kai H., Shinada K. Regioselective syntesis of sulfated polysaccharides: specific anti HIV-1 activity of novel hitosan sulfates // Carb. Res. -1998.-V. 306.-P. 427-433.

88. Yoshida Т., Yasuda Y., Mimura T. Synthesis of curdlan sulfates having inhibi-tyory effects in vitro against AIDS viruses HIV-l and HIV-2 // Carb. Res. -1995.-V. 276. -P. 425-436.

89. Matsuda M., Shigeta S., Okutani K. Antiviral activities of Marine Pseudomonas polysaccharides and their oversulfated derivatives // Marine biotechnology. -1999. -V. l.-P. 68-73.

90. Ono L., Wollinge W., Rocco I. In vitro and in vivo antiviral properties of sulfated galactomannans against yellow fevervirus (BeH lllstrain) and den-guelvirus (Hawaii strain) // Antiviral Research. -2003. -V. 60. P. 201-208.

91. Петров P.B., Хаитов P.M. Искусственные антигены и вакцины /АМН СССР. М.: Медицина, 1988, 288 с.

92. Belyaev E.Yu. New medical materials based on modified polysaccharides // Pharmaceutical Chemistry Journal. -2000. -V. 34, N.l 1. P. 36-41.

93. Fukuda C., Kollmar O., Schafer T. Anionic polysaccharides: a class of substances with hepatoprotective and antiadhesive // Transpl. Int. -2002. -V. 15. -P. 17-23.

94. Dedgumjorn A.C., Toyoda H., Woo E. Effect of (1—>3)-and (1—>4)-linkages of fully sulfated polysaccharides on the ir anticoagulant activity // Carbohydrate Research .-2002. -V. 337. -P. 925-933.

95. Болотникова Л.С., Данилов C.H., Самсонова Т.И. Метод определения вязкости и степени полимеризации целлюлозы // ЖПХ. 1966. № 1. С. 176-180.

96. Основы аналитической химии / В.И. Фадеева, Т.Н. Шеховцева и др.; под. ред. Ю.А.Золотова.-М.: Высш. шк., 2001,- с .463. С. 418.

97. Синицын А.В., Черноглазов В.М., Гусаков А.В. Методы изучения и свойства целлюлолитических ферментов «Биотехнология», (Итоги развития науки и техники АН СССР) М., 1990. №. 25. с.152.

98. Торлопов М.А., Фролова С.В., Демин В.А. Сульфатирование порошковых материалов, полученных деструкцией целлюлозы тетрахлоридом титана // Химия в интересах устойчивого развития, 2007. №4. с. 491-496.

99. Юб.ВагЬа С., Montan D., Rinaudo М. Synthesis and characterization of carbox-ymethylcelluloses (CMC) from non-wood fibers I. Accessibility of cellulose fibers and CMC synthesis // Cellulose. 2002 V. 9. P. 319-326.

100. Климов A.H., Ловягина Т.Н., Баньковская Э.Б. Турбидиметрический метод определения (3-липопротеидов и хиломикронов в сыворотке крови и тканях // Лабораторное дело. 1966. Т.5. С. 276-279.

101. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология. М., 1995. 219 с. С.147-148.

102. Прозоровский В., Прозоровская М., Демченко В. // Фармакол. токсикол. 1978. №4. С. 497-502.

103. Лакин Г.Ф. Биометрия.-4-е изд. перераб. и доп. -М.: Высш. шк., 1990. -352 с.

104. Льноводство / Отв. ред. А. Р. Рогаш. М. : Колос, 1967. - 583с.

105. Оболенская A.B., Ельницкая З.П., Леонович A.A. Лабораторные работы по химии древесины и целлюлозы. -М., 1991.- 319 с.

106. ПЗ.Сиггиа С., Ханна Г. Количественный органический анализ по функциональным группам / пер. с англ. М.: Химия, 1983. с. 294.

107. Алексеев Ю.Е, Гарновский А.Д., Жданов Ю.А. Комплексы природных углеводов с катионами металлов // Успехи химии. 1998. №8 С. 723-744.

108. Физер Л., Физер М. Реагенты для химического синтеза // пер. с англ. под ред. д.х.н. Л.Н.Зефирова., -М.: Мир, 1970, 282 с.

109. Изумрудов В.А., Зезин А.Б., Кабанов В.А. Равновесие интерполиэлек-тролитных реакций и явление молекулярого «узнавания» в растворах Интерполиэлектролитных комплексов // Усп. хим. -Т. 60, вып. 7. -1991. С. 1534- 1570.

110. Володин В.В., Шупик А.Н. Строение координационных центров и молекулярная подвижность цепей в гель иммобилизованных каталитических системах // Высокомол. соед. -1987. -Т. 34. С. 469-498.

111. Томас X. Карбоксиметилированные эфиры целлюлозы и крахмала (обзор) // Эфиры целлюлозы и крахмала: синтез свойства, применение. Владимир, 2007. 19 с.

112. Mun G.A., Nurkeeva Z.D., Krutoryaskiy V.K. et.al. Interolymer complexes of copolymers of vinil ether diethylen glycol with poly (acrylic acid). // Colloid Polym. Sci.-2002. N. 280 . -P.282-289.

113. Кабанов B.A., Мустафьев В.И., Некрасов A.B. и др. Критический характер степени полимеризации полиэлектролитов и его влияние их иммуностимулирующие свойства // Докл. АН СССР.-1984. Т. 274, № 4. -С. 9981001.

114. V.B.Galazka, D.A.Ledward, I.G.Sumner and all. Influence of high pressure on bovine serum albumin and its complex with dextran sulfate // J.Agric.Food Chem.-1997. N. 45. -P. 3465-3471.

115. Климов A.H., Никульчева Н.Г. Липиды, липопротеиды и атеросклероз. СПб: Питер Пресс. 1995. С. 156-159.

116. Климов А.Н. Никульчева Н.Г. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения. СПб. Питер Ком. 1999. С. 512.

117. Рыженков В.Е., Соловьева М.А., Ремезова О.В., Окуневич И.В. Гиполи-пидемическое действие сульфатированных полисахаридов. // Вопросы медицинской химии. 1996. - Т. 42. № 2. — С. 115 - 118.

118. Геннис Р. Биомембраны: молекулярная структура и функции // пер. с англ. М.: Мир, 1997 624 с.

119. Попов C.B., Оводова Р.Г. и др. Ингибирующее действие пектиновых га-лактоуронанов на адгезию нейтрофилов // Биоорг. Химия. 2007. - Т 33. №1.-С. 187-192.

120. Linnemann. G., Reinhard. К., Parade. U. The effects of ingibition leukocyte migration wiht fucoidin in rat peretonitis model // Intensiwe care med. -2000, N.26. -P. 1540-1546.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.