Изучение структуры замещенных β-маннанов семян бобовых и синтез их биологически активных сульфатированных производных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Егоров, Александр Владимирович

• Егоров, Александр Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Егоров, Александр Владимирович

ф Введение.

Раздел I. Обзор литературы.

Глава 1. Запасные галактоманнаны семян бобовых.

1.1. Запасные полисахариды семян бобовых.

1.2. Галактоглюкоманнаны семян бобовых.

1.3. Общая характеристика галактоманнанов семян бобовых.

1.4. Строение галактоманнанов.

1.4.1. Моносахаридный состав.

1.4.2. Структура макромолекул. ф 1.5. Физико-химические свойства водных растворов галактоманнанов.

1.6. Функции галактоманнанов. с 1.7. Промышленное получение галактоманнанов.

I 1.8. Применение галактоманнанов.

Глава 2. Сульфатированные галактоманнаны бобовых потенциальные гепариноиды.

Раздел II. Экспериментальная часть.

Глава 3. Материалы и методы исследования.

3.1. Растительный материал.

3.2. Методы выделения и очистки галактоманнанов.

3.3. Выделение и очистка галактоглюкоманнанов.

3.4. Методы установления состава и структуры полисахаридов.

3.4.1. Химические методы.

3.4.2. Хроматографические методы.

3.4.3. Спектральные методы.

3.5. Методы исследования физико-химических свойств растворов галактоманнанов.

3.6. Методика сульфатирования галактоманнанов.

3.7. Методика определения сульфогрупп в ф полисахаридах.

Глава 4. Изучение галактоманнанов семян Lotus corniculatus L.,

Gleditsia triacanthos f. inermis L., Gleditsia ferox Desf. ч 4.1. Выделение и очистка галактоманнанов.

4.2. Моносахаридный состав галактоманнанов.

4.3. Установление структуры галактоманнанов.

4.3.1. Анализ восстановленных фрагментов галактоманнанов

L. corniculatus и G. triacanthos f inermis.

4.3.2. Ферментативный гидролиз галактоманнанов ф L. corniculatus и G. triacanthos f inermis.

4.3.3. ИК-спектроскопия галактоманнанов.

4.3.4. Положительный знак оптического вращения растворов галактоманнанов.

4.3.5. С-ЯМР-спектроскопия галактоманнанов.

4.3.6. Первичное строение молекулы галактоманнана G. ferox.

4.3.7. Тонкая структура галактоманнана G. ferox.

4.3.8. ,3С-ЯМР

-спектроскопия галактоманнанов G. triacanthos f inermis и L. corniculatus.

4.4. Изучение физико-химических свойств растворов галактоманнанов.

4.4.1. Вязкость и молекулярная масса галактоманнанов.

4.4.2. Оптическая активность.

Глава 5. Изучение галактоглюкоманнанов из семян Cercis canadensis L.

5.1. Моносахаридный состав семян С. canadensis.

5.2. Галактоглюкоманнан, выделенный из эндосперма семян С. canadensis.

5.3. Галактоглюкоманнан, выделенный из кожуры семян С. canadensis.

Глава 6. Сульфатированные галактоманнаны.

6.1. Синтез сульфатированных галактоманнанов.

6.2. Биологическая активность сульфатированных галактоманнанов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение структуры замещенных β-маннанов семян бобовых и синтез их биологически активных сульфатированных производных»

Актуальность проблемы. Гетерополисахариды — замещенные 0-ман-наны бобовых - относятся к группе запасных полисахаридов. Они локализованы в клеточных стенках эндосперма и являются углеводным энергетическим резервом семян. Замещенные маннаны способны удерживать значительное количество воды и, благодаря этому, служат регулятором водного баланса семени при прорастании. У бобовых эта группа полисахаридов представлена исключительно галактоманнанами. Наличие близких им по структуре галактоглюкоманнанов, распространенных в семенах других семейств, например, ирисовых и лилейных, для бобовых оказалось уникальным, и к началу нашей работы такой полисахарид был изолирован из семян только одного вида. Помимо академического интереса эта группа полисахаридов имеет важное прикладное значение. По масштабу использования в различных отраслях промышленности галактоманнаны и их производные уступают только целлюлозе и крахмалу. Уникальные реологические свойства галактоманнанов в совокупности с отсутствием токсичности и наличием биологической активности позволяют применять их в пищевой, фармацевтической, медицинской промышленности, косметике и др. Следует отметить, что наряду с природными галактоманнанами используются и полусинтетические производные — например, этил-, карбоксиметил-, карбокси-, оксипропилгалактоманнаны (Cheng et al., 2002) и ряд других.

Особый интерес представляют сульфатированные галактоманнаны. К началу нашей работы исследования их не носили систематического характера. Известно, что три полученных деривата проявляли антикоагуляционную активность (Bode, Franz, 1989; Lima et al, 1996; Pires et al., 2001). Между тем, поиски и создание альтернативы гепарину признано в мировой науке важной областью исследования (Gunay, Linhardt, 1999; Yoshida, 2001). Причиной этого являются серьезные недостатки препаратов гепарина - естественного антикоагулянта прямого действия, используемого в клинике. Одним из путей создания т.н. «гепариноидов» является сульфатирование полисахаридов растительного происхождения. Для построения обоснованных выводов относительно биологической (в том числе, антикоагуляционной) активности сульфатов галактоманнанов необходимо получение и исследование серии препаратов, различающихся своими характеристиками. Это необходимо для выявления корреляции структура - функция и направленного синтеза активных препаратов.

Изложенное выше определяет актуальность изучения новых замещенных Р-маннанов, а также получение сульфатированных производных, обладающих антикоагуляционной активностью.

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы - исследование новых замещенных р-маннанов семян бобовых и синтез сульфатов галактоманнанов, обладающих антикоагуляционной активностью.

Эта цель в рамках диссертационной работы диктовала следующие задачи:

Изолирование и исследование структуры галактоманнанов, представляющих научный и практический интерес. ф ■ Выделение и характеристика новых галактоглюкоманнанов из разных частей семени Cercis canadensis L. (багрянника канадского).

Разработка условий синтеза сульфатированных галактоманнанов с разными параметрами структуры. Тестирование их биологической активности.

Научная новизна работы. Выделены и изучены состав и структура галактоманнанов Gleditsia ferox Desf., Gleditsia triacanthos f. inermis L., Lotus corniculatus L. У первых двух галактоманнанов охарактеризовано тонкое % строение, т.е. распределение остатков а-галактозы вдоль главной цепи.

Определены параметры структуры макромолекул и их физико-химические свойства. Выделены и охарактеризованы галактоглюкоманнаны из эндосперма и кожуры семян Cercis canadensis L. Впервые обнаружено, что замещенные Р-маннаны аналогичного строения и близкого состава могут иметь различную локализацию в семени (эндосперм и кожура) и, соответственно, выполнять две разные функции — запасную и структурную. Проведено сульфатирование 4-х галактоманнанов с разным соотношением Ман:Гал (1.1-5.2) и примерно равной молекулярной массой (ок. 100 кДа). Полученная высокая степень замещения не зависит от структурных параметров полисахаридов. В двух тестах in vitro — определение тромбинового времени и ингибирование агрегации тромбоцитов — установлено, что полученные производные обладают антикоагуляционной активностью. Найдено, что величина эффекта находится в прямой зависимости от содержания галактозы в галактоманнане.

Практическая ценность работы. Получены новые сведения о строении и свойствах замещенных Р-маннанов - полисахаридов с широкими возможностями применения.

Разработаны условия и осуществлен синтез сульфатированных ф производных галактоманнанов.

Положительный результат тестирования биологической активности синтезированных сульфатов галактоманнанов дает основание для расширения работ по созданию активных гепариноидов.

Апробация работы. Основные положения работы были представлены на V Международном симпозиуме «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования» (Пущино, Россия, 2003) и на III Всероссийской школе-конференции «Химия и биохимия углеводов» ф (Саратов, Россия, 2004).

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Егоров, Александр Владимирович

выводы

Из семян Gleditsia ferox Desf., Gleditsia triacanthos f. inermis L., Lotus corniculatus L. выделены галактоманнаны с различным молярным соотношением мономеров (Ман:Гал) 2.54, 2.42 и 1.22 соответственно.

С помощью химических, физико-химических методов и

11 спектроскопии (ИК- и С-ЯМР) установлено строение полисахаридов. Их макромолекулы представляют собой основную цепь из 1,4-fi-D-маннопиранозных звеньев, определенная часть которых в положении С-6 замещена единичными остатками а-галактопиранозы. Для двух первых галактоманнанов установлена тонкая структура, т.е. распределение галактозы вдоль основной цепи.

Галактоманнаны обладали оптической активностью: положительное удельное вращение [a]D находилось в интервале 30.5 - 84.1°. Водные растворы полисахаридов отличались высокой вязкостью ([rj] = 559 — 1430 мл/г), свойственной фибриллярным макромолекулам. На основе значений характеристической вязкости рассчитаны величины их молекулярной массы: 600 — 1660кДа.

Из эндосперма и кожуры семян Cercis canadensis L. впервые выделены галактоглюкоманнаны, определен их мономерный состав. Для одного из них с помощью ,3С-ЯМР-спектроскопии установлена первичная структура: его главная цепь представлена l,4-P-D-niK)KO- и маннопиранозными остатками, последние замещены по С-6 единичными остатками a-галактопиранозы. Впервые обнаружено, что аналогичные по составу и строению полисахариды локализованы в разных частях семени (эндосперм и кожура) и имеют, по-видимому, разные функции - запасную и структурную.

Найдены условия синтеза, контролирующие степень сульфатирования галактоманнанов и установлено, что существует прямая корреляция между количеством инкорпорированных сульфогрупп и температурой проведения реакции.

Получены сульфатированные производные 4-х галактоманнанов с разным соотношением Ман:Гал (1.1 - 5.2). Установлено, что степень замещения в разработанных условиях реакции не зависит от содержания галактозы в полисахаридах.

В двух анализах in vitro показано, что полученные сульфаты галактоманнанов обладают антикоагуляционной активностью. Они увеличивают тромбиновое время и снижают функциональную активность тромбоцитов. При этом установлено, что величины обоих эффектов зависят от содержания галактозы в галактоманнанах.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Егоров, Александр Владимирович, 2004 год

1. Липкинд Г.М., Шашков А.С., Кочетков Н.К. Структурный анализ полисахаридов с линейным повторяющимся звеном на ЭВМ по данным спектров 13С-ЯМР // Биоорганическая химия. 1987.Т.13. № 6. С. 833-841.

2. Местечкина Н.М., Анулов О.В., Смирнова Н.И., Щербухин В.Д. Изучение галактоманнана семян Ttifolium hybridum L. // Прикладная биохимия и микробиология. 1996. Т. 32. № 6. С. 656-659.

3. Местечкина Н.М., Анулов О.В., Смирнова Н.И., Щербухин В.Д. Состав и структура макромолекулы галактоманнана семян Astragalus lehmannianus Bunge // Прикладная биохимия и микробиология. 2000. Т. 36. № 5. С. 582-587.

4. Методы химии углеводов / Ред. Кочетков Н.К. Москва: изд-во «Мир», 1967а. С. 286-288.

5. Методы химии углеводов / Ред. Кочетков Н.К. Москва: изд-во «Мир», 1967в. С. 261-262.

6. Методы химии углеводов / Ред. Кочетков Н.К. Москва: изд-во «Мир», 1967с. С. 466-467.ф 7. Наканиси К. Инфракрасные спектры и строение органическихсоединений. Москва: изд-во «Мир». 1965. С. 66-67.

7. Пономаренко С.Ф. Порядок 86. Fabales. Семейство Fabaceae // Сравнительная анатомия семян. Т. 5. СПб. 1996. С. 264-298.

8. Попцов А.В. Биология твердосемянности. М.: Наука, 1976. 156 с.

9. Рапопорт С.М. Медицинская биохимия. Москва: изд-во «Медицина». 1966. С. 548-549.

10. Смирнова Н.И., Щербухин В.Д. Структура и ,3С-ЯМР-спектроскопия галактоманнана семян Indigofera tinctoria II Прикладная биохимия иф микробиология. 1989. Т. 25. № 2. С. 226-231.

11. Степаненко Б.Н. Резервные галактоманнаны и глюкоманнаны семян, луковиц и корневищ // Успехи химии. 1961. Т. 30. № 5. С. 626-644.

12. Титова М.И., Никулин В.И., Самыкин П.М. Изменения системы гемостаза при ожогах и пути ее коррекции. Москва: изд-во Центрального ордена Ленина института усовершенствования врачей. 1989. С. 3-10.

13. Чижов О.С., Шашков А.С. Прогресс химии углеводов / Ред. Торгов И.В. Москва: изд-во «Наука». 1985. С. 30-54.

14. Щербухин В.Д. Галактоманнаны отечественной флоры // Прикладная биохимия и микробиология. 1993. Т. 29. № 6. С. 803-813.

15. Щербухин В.Д. Галактоманнаны семян некоторых видов порядка Fabales, произрастающих в СССР // Растительные ресурсы. 1991. Т. 27. №2. С. 1-8.

16. Щербухин В.Д. Применение инфракрасной спектроскопии к изучению углеводов // Успехи биологической химии. 1968. Т. 9. С. 198-219.

17. Щербухин В.Д., Анулов О.В. Галактоманнаны семян бобовых (обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. 1999. Т. 35. № 3. С. 257274.

18. Щербухин В.Д., Местечкина Н.М., Шиманова Н.И. Способ получения препарата галактоманнана. Патент 2077224. Изобретения. 1997. №11.

19. Щербухин В.Д., Смирнова Н.И., Довлетмурадов К. Изучение структуры и свойств галактоманнана семян Lagonychium farctum И Прикладная биохимия и микробиология. 1987. Т. 23. № 4. С. 467-471.

20. Abatangelo G., Barbucci R., Brun P., Lamponi S. Biocompatibility and enzymatic degradation studies on sulfated hyaluronic acid derivatives // Biomaterials. 1997. V. 18. P. 1411-1415.

21. Akashi M., Sakamoto N., Suzuki K., Kishida A. Synthesis and anticoagulant activity of sulfated glucoside-bearing polymer // Bioconjug. Chem. 1996. V. 7. № 4. P. 393-395.

22. Alban S., Franz G. Characterization of the Anticoagulant Actions of a Semisynthetic Curdlan Sulfate // Thrombosis Research. 2000. V. 99. P. 377-388.

23. Alban S., Franz G. Gas liquid chromatographymass spectrometry analysis of anticoagulant active curdlan sulfates // Semin. Thromb. Hemost. 1994. V. 20. P. 152-158.

24. Alban S., Franz G. Partial synthetic glucan sulfates as potential new antithrombotics: a review // Biomacromolecules. 2001. V. 2. № 2. P. 354361.

25. Alban S., Kraus J., Franz G. Synthesis of laminarin sulfates with anticoagulant activity // Arzneimittelforschung. 1992. V. 42. № 8. P. 10051008.

26. Alban S., Schauerte A., Franz G. Anticoagulant sulfated polysaccharides: Part I. Synthesis and structure-activity relationships of new pullulan sulfates // Carbohydrate Polymers. 2002 V. 47. P. 267-276.

27. Al-Kaisey M.T., Wilkie C.B. The polysaccharides of agricultural lupin seeds//Carbohydrate Research. 1992. V. 227. P. 147-161.

28. Ben-Zion O., Nussinovitch A. Adhesion-strength characteristics of double-layered // Food Hydrocolloids. 1997. V. 11. № 4. P. 373-384.

29. Bjorndal H., Lindberg В., Svensson S. Gas-liquid chromatography of partially methylated alditols as their acetates. // Acta Chem. Scand. 1967. V. 21. № 7. P. 1801.

30. Blumencrantz N., Asboe-Hansen G. New method for quantitative determination of uronic acids. // Analyt. Biochem. 1973. V. 54. № 2. P. 484-489.

31. Воск К., Pederson Ch. 13C-NMR spectroscopy of Monosaccharides // Advances Carbohydr. Chem. and Biochem. 1983. V. 41. P. 27-66.

32. Bock K., Pederson Ch., Pederson H. Carbon-13 nuclear magnetic resonance data for oligosaccharides // Advances Carbohydr. Chem. and Biochem. 1984. V. 42. P. 193-225.

33. Bode V., Franz G. Physiological activity of new heparinoids derived from plant polysaccharides // Arch. Pharm. 1991. V. 324. № 6. P. 363-365.

34. Bode V.V., Franz G. Heparinoide — ihre antikoagulierende Wirkung // Deutsche Apotheker Zeitung. 1989. V. 129. № 14. P. 672-675.

35. Boziek S., Izzard M., Morrison A. The 13C-n.m.r. spectra of (1—>6)-a-D-galactosyl-(l—»4)-J3-D-mannans. // Carbohydrate Research. 1981. V. 93. № 2. P.279-283.

36. Bresolin Т. M., Sander P.C., Reicher F., Sierakowski M.R., Rinaudo M., Ganter J. L. M. S. Viscometric studies on xanthan and galactomannan systems // Carbohydrate Polymers. 1997. T.33. № 2-3. C. 131-138.

37. Brillouet J.M., Riochet D. Cell Wall polysaccharides and lignin in cotyledons and hulls of seeds of various lupin (Lupinus L.) species // J. Sci. Food Agric. 1983. V. 34. P. 861-868.

38. Buckeridge M.S., Reid J.S.G. Major cell wall storage polysaccharides in legume seeds: Structure, catabolism and biological functions // Ciencia e Cultura. 1996. V. 48. № 3. P. 153- 162.

39. Buckeridge M.S., Rosha D.C., Reid J.S.G., Dietrich S.M.C. Xyloglucan structure and post-germinative metabolism in seeds of Copaifera langsdorfii from savanna and forest population // Physiologia Plantarum. 1992. V. 86. P. 145-151.

40. Burgermeister J., Paper D.H., Vogl H., Linhardt R.J., Franz G. LaPSvSl, a (1—>3)-p-galactan sulfate and its effect on angiogenesis in vivo and in vitro // Carbohydrate Research. 2002. V. 337. P. 1459-1466.

41. Сарек P., Alfoldi J., Liskova D. An acetylated galactoglucomannan from Picea abies L. Karst. II Carbohydrate Research. 2002. V. 337. P. 10331037.

42. Chaidedgumjorn A., Toyoda H., Woo E.R., Lee K.B., Kim Y.S., Toida Т., Imanari T. Effect of (1—>3)- and (1—>4)-linkages of fully sulfated polysaccharides on their anticoagulant activity // Carbohydrate Research. 2002. V. 337. № 10. P. 925-933.

43. Cheng Y., Brown K.M., Prud'homme R.K. Preparation and characterization of molecular weight fractions of guar galactomannans using acid and enzymatic hydrolysis // J. Biol. Macromol. 2002. V. 31. P. 29-35.

44. Courtois J.E., Le Dizet P Recherches sur les galactomannanes. III. — Sur quelques proprietes des galactomannanes des graines de Gleditschia ferox II Bull. Soc. Chim. Biol. 1963a. V. 45. № 7-8. P.731-741.

45. Courtois J.E., Le Dizet P. Recherches sur les galactomannanes. IV. — Action de quelques preparations enzymatiques sur les galactomannanes de Trefle et Gleditschia // Bull. Soc. Chim. Biol. 1963в. V. 45. №7-8. P. 743747.

46. Courtois J.E., Le Dizet P. Recherches sur les galactomannananes. V. — Etude de Taction d'une preparation commerciale d'hemicellulase // Bull. Soc. Chim. Biol. 1968. V. 50. № 10. P. 1695-1710.

47. Daas P.J.H., Schols H.A., Jongh H.H.J. On the galactosyl distribution of commercial galactomannans // Carbohydrate Research. 2000. V. 329. P. 609-619.

48. Dace R., McBride E., Brooks K., Gander J., Buszko M., Doctor V.M. Comparison of the anticoagulant action of sulfated and phosphorylated polysaccharides //Thrombosis Research. 1997. V. 87. № 1. P. 113-121.

49. Davis A.L., Hoffmann R.A., Russell A.L., Debet M. 'H and l3C-NMR characterization of the digalactosylmannopentaose liberated from legumeseed galactomannan by P-mannanase action // Carbohydrate Research. 1995. V. 271. № 1. P. 43-54.

50. Dea I.C.M., Morrison A. Chemistry and interaction of seed galactomannans //Advances Carbohydr. Chem. and Biochem. 1975. V. 31. P. 241-312.

51. Dey P. Biochemistry of plant galactomannanas // Advances Carbohydr. Chem. and Biochem. 1978. V. 35. P. 341-376.

52. Dey P. Biochemistry of a-D-dalactosidic linkages in the plant kingdom // Advances Carbohydr. Chem. and Biochem. 1980. V. 37. P. 283-372.

53. Dodgson B.K.S. Determination of Inorganic Sulfate in Studies on the Enzymic and Non-Enzymic Hydrolysis of Carbohydrate and Other Sulphate Esters // Biochem. J. 1961. V. 78. P. 312-319.

54. Dodgson B.K.S., Price R.G. A Note on the Determination of the Ester Sulphate Content of Sulphated Polysaccharides // Biochem. J. 1962. V. 84. P. 106-110.

55. Doublier J.L., Launay B. Proprietes rheologiques des solutions aqueuses de galactomannanes: role de la masse moleculaire mayenne et de la concentration // Cahiers Croupe Franc. Rheol. 1977. V. 4 № 5. P. 191-198.

56. Dubois M., Gilles K.A., Hamilton J.K., Rebers P.A., Smith F. Colorimetric method for determination of sugars and related substances. // Analyt. Chem. 1956. V 28. № 3. P. 350-356.

57. Franz G., Alban S. Structure activity relationship of antithrombotic polysaccharide derivatives // Int. J. Biol. Macromol. 1995. V. 17. № 6. P. 311-314.

58. Garti N., Pinthus E.J. Fenugreek gum. The magic fiber for an improved glucose response and cholesterol reduction // NutraCos. 2002. V. 1. № 3. P. 1-10.

59. Geresh S., Mamontov A., Weinstein J. Sulfation of extracellular polysaccharides of red microalgae: preparation, characterization, and properties //J. Biochem. Biophys. Methods. 2002. V. 50. P. 179-187.

60. Gidley M. J., McArtur A., Underwood D. R. ,3C NMR characterization of molecular structures in powder, hydrates and gels of galactomannans and glucomannans // Food Hydrocolloids. 1991. V. 5. № 1-2. P. 129-140.

61. Glicksman M. Gum Technology in the Food Industry. N.Y.: Acad. Press, 1969. P. 144-183.

62. Grasdalen H., Painter T. N.M.R. studies of composition and sequence in legume-seed galactomannans // Carbohydrate Research. 1980. V. 81. № 1. P. 59-66.

63. Gunay N.S., Linhardt R.J. Heparinoids: structure, biological activities and therareutic applications // Planta Med. 1999. V. 65. № 4. P. 301-306.

64. Gupta A.K, BeMiller J.N. A galactomannan from Crotalaria medicaginea seeds // Phytochemistry. 1990. V. 29. № 3. P. 853-855.

65. Gupta A.K., Bose S. Structure of the D-galacto-D-mannan isolated from the seeds of Melilotus indica All // Carbohydrate Research. 1986. V. 153. № 1. P. 69-77.

66. Hegnauer R., Grayer-Barkmeijer R.J. Relevance of seed polysaccharides and flavonoids for the classification of the leguminosae: a chemotaxonomic approach // Phytochemistry. 1993. V. 34. № 1. P. 3-16.

67. Huynh R. Chaubet F., Jozefonvicz J. Anticoagulant properties of dextranmethylcarboxylate benzylamide sulfate (DMCBSu); a new generation of bioactive functionalized dextran // Carbohydrate Research. 2001. V. 332. №1. P. 75-83.

68. Kapoor V.P., Taravel F.R., Joseleau M.M., Chanzy H., Rinaudo M. Cassia spectabilis DC seed galactomannan: Structural, crystallographical and rheological studies // Carbohydrate Research. 1998. V. 306. P. 231-241.

69. Kato K., Nitta M., Mizuno T. Infrared spectroscopy of some mannas // Agric. Biol. Chem. 1973. V. 37. № 2. P. 433-435.

70. Kawanaka S., Nakai M., Naito N., Wada S. Galactomannan-based sheet wound dressings and their manufacture dressings // Pat. JP. 2002. № 2002052077.

71. Kim H.J., Choi S.J., Shin W.S., Moon T.W. Emulsifying properties of bovine serum albumin-galactomannan conjugates // J. Agric. Food Chem. 2003. V. 51. № 4. P. 1049-1056.

72. Kooiman P. On the occurrence of amyloids in plant seeds // Acta Bot. Neeland. 1960. V. 9. № 2. P. 208-219.

73. Kooiman P. The relation between monosaccharide composition and specific optical rotation of galactomannans from plant seeds // Carbohydrate Research. 1972. V. 25. P. 1-9.

74. Lima M.M.S., Ono L., Reicher F., Sierakowski M.-R. Natural and sulfated polysaccharides from Caesalpiniaceae seeds // Lat. Am. Appl. Res. 1996. V. 26. P. 1-3.

75. Lipkind G.M., Shaskov A.S., Knirel Y.A., Vinogradov E.V., Kochetkov N.K. A computer assisted structural analysis of regular polysaccharides on the basis of ,3C-NMR date // Carbohydrate Research. 1988. V. 175. № 1. P. 59-76.

76. Mahner G., Lechner M.D., Nordmeier E. Synthesis and characterization of dextran and pullulan sulphate // Carbohydrate Research. 2001. V. 331. P. 203-208.

77. Mallet I., McCleary B.V., Matheson N.K. Galactomannan changes in developing Gleditsia triacantos seeds // Phytochemistry. 1987. V. 26. № 7. P. 1889-1894.

78. Manzi A.E., Ancibor E., Cerezo A.S. Cell-Wall carbohydrates of the endosperm of the seed of Gleditsia triacanthos II Plant Physiol. 1990. V. 92. №4. P. 931-938.

79. Manzi A.E., Cerezo A.S., Shoolery J.N. High resolution ,3C-N.M.R. spectroscopy of legume-seed galactomannans // Carbohydrate Research. 1986. V. 148. № 2. P. 189-197.

80. McCleary B.V., Matheson N.K. Action patterns and substrate-binding requirements of P-D-mannanase with mannosaccharides and mannan-type polysaccharides // Carbohydrate Research. 1983. V. 119. P. 191-219.

81. McCleary B.V., Matheson N.K., Small D.M. Galactomannans and a galactoglucomannan in legume seed endosperms: structural, requirements for P-mannanase hydrolysis // Phytochemistry. 1976. V. 15. P. 1111-1117.

82. McCleary B.V., Nurten E., Taravel F.R., Joseleau J.-P. Characterisation of oligosaccharides prodused on hydrolysis of galactomannan with P-D-mannanase // Carbohydrate Research. 1983. V. 118. P. 91-109.

83. Merce A.L.R., Fernandes E., Mangrich A.S., Sierakowski M.-R. Szpoganicz B. Fe(III) galactomannan solid and aqueous compexes // Journal of the Brazilian Chemical Society. 2001. V. 12. № 6. P. 791-798.

84. Misra A.N., Baweja J.M. Modified guar gum as hydrophilic matrix for controlled release tablets // Indian Drugs. 1997. V. 34. № 4. P. 216-223.

85. Naito N., Kawanaka S., Nakai M., Wada S., Yoshino T. Biodegradable highly absorptive absorbents containing crosslinked galactomannan and their manufacture // Pat. JP. 2002. № 2002265672.

86. Nakamura S., Gohya Y., Losso J.N., Nakai S., Kato A. Protective effect of lysozyme-galactomannan or lysozyme-palmitic acid conjugates against Edwardsiella tarda infection in carp, Cyprirtus carpio L. // FEBS Letters. 1996. V. 383. P. 251-254.

87. Navarro D.A., Cerezo A.S., Stortz C.A. NMR spectroscopy and chemical studies of an arabinan-rich system from the endosperm of the seed of Gleditsia triacanthos II Carbohydrate Research. 2002. V. 337. P. 255-263.

88. Ouchi Т., Matsumoto M., Ihara K., Ohya Y. Synthesis and cytotoxic activity of oxidized galactomannan / adriamycin conjugate // J. Macromol. Sci., Pure Appl.Chem. 1997. V. 34(A). № 6. P. 975-989.

89. Parker M.L. Cell Wall storage polysaccharides in cotyledons of Lupinus angustifolius L. I. Deposition during seed development // Protoplasma. 1984. V. 120. № 3. P. 224-232.

90. Petkowicz C.L.O., Sierakowski M.-R., Ganter J.L.M.S. Reicher F. Galactomannans and arabinans from seeds of Caesalpiniaceae II Phytochemistry. 1998. V. 49. № 3. P. 737-743.

91. Pires L., Gorin P.A.J., Reicher F., Sierakowski M.-R. An active heparinoid obtained by sulphation of a galactomannan extracted from the endosperm of Senna macranthera seeds // Carbohydrate Polymers. 2001. V. 46. P. 165-169.

92. Rayment P., Ross-Murphy S.B., Ellis P.R. Rheological properties of guar galactomannan and rice starch mixtures. I. Steady shear measurements // Carbohydrate Polymers. 1996. V. 28. № 2. P. 121-130.

93. Rees D., Scott W. Conformational analysis of polysaccharides: stereochemical significance of different linkage positions in linked polysaccharides //J. Chem. Soc. Chem. Comm. 1969. V. 18. P. 1037-1038.

94. Reid J.S.G., Bewley J.D. A dual role for the endosperm and its galactomannan reserves in the germinative physiology of fenugreek

95. Trigonella foenum-graecum L.), an endospermic leguminous seed // Planta. 1979. V. 147. № 2. P. 145-150.

96. Reid J.S.G., Edwards M. Galactomannans and other cell wall storage polysaccharides in seeds in book: Food Polysaccharides and their application (Ed. A. Stephen). N.Y.: Marcel Dekker, Inc., 1995. P. 155-185.

97. Reid J.S.G., Edwards M.E., Gidley M.J., Clark A.H. Mechanism and regulation of galactomannan biosynthesis in developing leguminous seeds //Biochemistry Soc. Transaction. 1992. V. 20. № 1. P. 23-26.

98. Reid J.S.G., Meier H. Chemotaxonomic aspects of the reserve galactomannans in leguminous seeds // Z. Pflanzenphysiol. 1970. V. 62. P. 89-92.

99. Schorsch C., Gamier C., Doublier J.-L. Microscopy of xanthan / galactomannan mixtures // Carbohydrate Polymers. 1996. V. 28. № 4. P. 319-323.

100. Shcherbukhin V.D. Galactomannans from seeds of the leguminous plants in the Soviet Union // Food Hydrocolloids. 1992. V. 6. № 1. P. 3-7.

101. Slavin J.L., Greenberg N.A. Partially hydrolyzed guar gum: clinical nutrition uses // Nutrition. 2003. V. 19. № 6. P. 549-552.

102. Soni S.K., Bose S. Seed galactomannans and their structure // J. Scientific Industrial Research. 1985. V. 44. № 10. P. 544-547.

103. Spyropoulos C.G., Reid J.S.G. Water stress and galactomannan breakdown in germinated fenugreek seeds. Stress affect the production and the activities in vivo of galactomannan-hydrolysing enzymes // Planta. 1988. V.174. № 4. P. 473-478.

104. Sudhakar V., Singhal R.S., Kulkarni P.R. Starch-galactomannan interactions: functionality and rheological // Food Chem. 1996. V. 55. № 3. P. 259-264.

105. Tanaka M., Thananunkul D., Lee T-C., Chichester C.O. A simplified method for the quantitative determination of sucrose, raffinose and stachyose in legume seeds // J. Food Science. 1975. V. 40. P. 1087-1088.

106. Tewary K., Khare N., Singh V., Gupta P.C. A non-ionic seed-gum from Cassia corymbosa II Carbohydrate Research. 1984. V. 135. № 1. P. 141146.

107. Unrau A.M., Chloy Y.M. Identification of linkages of a galactomannan isolated from seed of Caesalpinia pulcherima // Carbohydrate. Research. 1970. V. 14. P. 151-158.

108. Varma R., Wardi A.N., Varma R.S. Separation of aldononitryl acetates of neutral sugars by GLC and its application to polysaccharides. // J. Chrom. 1973. V. 77. № 1. P. 222.

109. Viebke C. A light scattering study of carrageenan / galactomannan interactions // Carbohydrate Polymers. 1996. V. 28. № 2. P. 101-105.

110. Viebke C., Piculell L. Adsorption of galactomannans onto agarose // Carbohydrate Polymers. 1996. V. 29. № 1. P. 1-5.

111. Whistler R.L. Solubility of polysaccharides and their behavior in solution // Advances Chem. Series. 1973. № 117. P. 242-254.

112. Whistler R.L., BeMiller J. Industrial Gums. N.Y.: Acad. Press, 1959. 642 p.

113. Yakimov-Barras N. Les polysaccharides des graines de quelques Liliacees et Iridacees II Phytochemistry. 1973. V. 12. P. 1331-1339.

114. Yang L., Chu J.S., Fix J.A. Colon-specific drug delivery: new approaches and in vitro / in vivo evaluation // International Journal of Pharmaceutics. 2002. V. 235. №1-2. P. 1-15.

115. Yoshida T. Synthesis of polysaccharides having specific biological activities // Progress in Polymer Science. 2001. V. 26. P. 379-441.