Строение, свойства и биологическая активность продуктов ацилирования гидразидов и тиогидразидов карбоновых кислот оксалил- и малонилдихлоридами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат химических наук Кузьмич, Николай Николаевич

• Кузьмич, Николай Николаевич
• кандидат химических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат химических наук Кузьмич, Николай Николаевич

1. Введение

2. Обзор литературы

3. Обсуждение результатов

3.1 Взаимодействие гидразидов и ароматических карбоновых кислот, и 8-алкил-№-фенилдитиокарбазатов с оксалилхлоридом

3.1.1 Синтез АН-1,3»4-окса(тиа)диазин-5,6-дионов

3.1.2 Строение 2-алкилсульфанил- и 2-арил-4/7-1,3,4-окса(тиа)диазин-5,6-дионов

3.1.3. Реакции 2-арил(гетерил)-4#-1,3,4-оксадиазин-5,6-дионов с О-и N-нуклеофильными реагентами

3.1.4. Реакции 2-алкилсульфанил- и 2-арил-4#(фенил)-1,3,4-тиадиазин-5,6-дионов с О-и iV-нуклеофильными реагентами

3.1.5. Квантово-химическое изучение реакционной способности 2-алкилсульфанил- и 2-арил-4//-1,3,4-окса(тиа) диазин-5,6-дионов в реакциях с нуклеофильными реагентами

3.2. Взаимодействие гидразидов ароматических карбоновых кислот с мало-нилдихлоридами

3.3. Реакции тиогидразидов ароматических карбоновых кислот с малонилди-хлоридами. Строение продуктов реакций

3.4. Реакции N'- фенилгидразидов ароматических тионокарбоновых кислот с малонилдихлоридами. Строение продуктов реакций

3.5. Взаимодействие S-метил N'-фенилдитиокарбазатов с малонилдихлоридами. Строение продуктов реакций

3.6. Квантово-химическое изучение реакционной способности гидразидов, тиогидразидов и дитиокарбазатов в реакциях с малонилдихлоридами

3.7. Некоторые виды биологической активности полученных соединений

3.7.1. Антимикробная активность

3.7.2. Острая токсичность

3.7.3. Противовирусная активность 2-бензилсульфаншт-4-фенил-4//-1,3,4-тиадиазин-5,6-диона и 1-тиобензоил-4,4-диэтилпиразолидин-3,5-диона

3.7.4. Изучение влияния 2-бензилсульфанил-4-фенил-4Я-1,3,4-тиадиазин-5,6-диона и 1-тиобензоил-4,4-диэтилпиразолидин-3,5-диона на функциональную активность нейтрофилов крови крыс in vitro

3.7.5. Изучение цитопротекторной активности 2-бензилсульфанил-4~фенил-4Н-1,3,4-тиадиазин-5,6-диона и 1 -тиобензоил-4,4-диэтилпиразолидин-3,5-диона

4. Выводы

5. Экспериментальная часть

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Строение, свойства и биологическая активность продуктов ацилирования гидразидов и тиогидразидов карбоновых кислот оксалил- и малонилдихлоридами»

Актуальность темы. Гидразиды и тиогидразиды широко используются в получении различных гетероциклических соединений. Они служат источниками различных оксопиразолинов, окса- и тиадиазолов и -диазинов и их бензо(гетеро)конденсированных аналогов.

Известно, что представители этой группы-гетероциклических соединений обладают разными видами биологической активности. Известны» вещества с кардиотоническим, антибактериальным, фунгицидным, противовирусным, противопаразитарным, противоопухолевым действием, имеются ингибиторы моноаминооксидаз. Многие АН-1,3,4-окса(тиа)диазины используются в качестве исходных соединений для получения разнообразных ациклических и гетероциклических систем, синтез которых другими методами .невозможен или многостадиен. Сами тиогидразиды, дитиокарбазаты и их комплексы с ионами металлов обладают антибактериальным и фунгицидным действием, однако они не нашли применения в медицине по причине невысокой* избирательности действия и высокой системной токсичности, что вызывает необходимость их химической модификации-. Уместно заметить, что среди соединений, имеющих фрагмент NH-NH-C=0(S), тиогидразиды распространены значительно-меньше в отличие от тиосемикарбазидов. В'литературе отсутствуют упоминания и о взаимодействии гидразидов, тиогидра-зидов и дитиокарбазатов с малонилдихлоридами, а о реакциях гидразидов и тиогидразидов с оксалилхлоридом, приводящих к получению некоторых производных 1,3,4-окса(тиа)диазинов в литературе имеются лишь единичные упоминания.

Поэтому реакции ацилирования гидразидов и тиогидразидов этими реагентами представляют несомненный интерес как с точки зрения теоретической и синтетической органической химии, так и с точки зрения поиска новых эффективных и малотоксичных лекарственных субстанций.

Цель работы заключалась в разработке удобных методов синтеза новых биологически активных производных 1,3,4-гетеродиазинов и (гете-ро)диазолов на основе взаимодействия гидразидов и тиогидразидов карбоно-вых кислот с оксалил- и малонилдихлоридами.

Задачи работы включали:

1. Комплексное изучение закономерности процессов гетероциклизации гидразидов, тиогидразидов и дитиокарбазатов с оксалил- и малонилдихлоридами.

2. Исследование взаимодействия 1,3,4-гетеродиазинов с некоторыми нук-леофильными реагентами.

3. Доказательство строения полученных соединений.

4. Квантово-химическая интерпретация экспериментальных результатов, определение возможностей и границ применения статических индексов реакционной способности в прогнозировании синтеза новых 1,3,4-гетеродиазинов и (гетеро)диазолов с заданным строением и свойствами.

5. Исследование антимикробной и некоторых других видов биологической активности и их связи со строением исследуемых веществ. Научная новизна. Настоящая работа является первым целенаправленным исследованием реакций гидразидов и тиогидразидов ароматических и гетероароматических карбоновых кислот с оксалил- и малонилдихлоридами, в ходе которого было синтезировано около 50 ранее неизвестных гетероциклических и ациклических соединений, изучены их строение и свойства.

Впервые показано, что: Взаимодействие N'-незамещенных гидразидов, тиогидразидов и дитиокарбазатов с оксалилхлоридом приводит к 4£Г-1,3,4-окса- и тиадиазин-5,6-дионам. Причем в кристаллическом состоянии, газовой фазе и в диметил-сульфоксидном растворе окса- и тиадиазины существуют преимущественно в 5,6-диоксо-форме; при действии О- и iV-нуклеофильных реагентов оксадиазины подвергаются расщеплению в результате атаки нуклеофилом атома С5. В аналогичных условиях тиадиазины проявляют устойчивость к действию воды и спиртов, что хорошо согласуется с данными квантово-химических расчетов электронных структур этих соединений. Под действием /V-нуклеофилов тиадиазино-вый цикл разрушается с образованием диамидов щавелевой кислоты, исходных тигидразидов(дитиокарбазатов) и продуктов их деградации; взаимодействие N'-незамещенных гидразидов с малонилдихлоридами, в зависимости от строения последних в среде малополярных инертных растворителей. приводит к образованию 1-ароил-4,4-диалкилпиразолидин-3,5

1 о дионов и ациклических 2,2-диалкил- N1 ,7V -бис(ароил)пропандигидразидов;

Направление реакций тиобенгидразида с малонилдихлоридами существенно зависит от строения последних и природы растворителя. В зависимости от строения малонилдихлоридов при взаимодействии с N'-фенилтиобензгидразидом образуются хлориды 2-[(г)-1-(3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-2(ЗЯ)-илиден)алкил]-3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-3-ия и* 1-тиобензоил-2-фенилпиразолидин-3,5-дионы. В результате реакции S-метил-N'-фенилдитиокарбазата с малонилдихлоридами образуются метил 3,5-диоксо-2-фенилпиразолидин-1 -карбодитиоаты;

Полученные соединения проявляют умеренную антимикробную активность, однако хлорид 2-[(Z)-1 -(3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-2(ЗЯ)~ илиден)метил]-3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-3-ия обладает высокой антибактериальной и фунгицидной активностью, причем минимальные ингибирую-щие концентрации находятся на уровне препаратов, использующихся в терапевтической-практике (ванкомицин, линезолид, флуконазол). Подана заявка на изобретение;

1-тиобензоил-4,4-диэтил-пиразолидин-3,5-дион оказывает выраженное противовирусное действие в отношение штамма Виктория/35/72 A(H3N2) вируса гриппа А. 2-бензилсульфанил-4-фенил-1,3,4-тиадиазин-5,6-дион обладает иммунотропным и цитопротекторным действием, что было показано на модели- панцитопении токсического генеза.

Практическая значимость. В ходе проведенных исследований разработаны препаративные методы синтеза новых 1,3,4-окса- и тиадиазин-5,6-дионов, 1-тиобензоил- и 1-(алкилсульфанилтиокарбонил)пиразолидин-3,5дионов, бис-(5-фенил-2-1,3,4--тиадиазолил)алканов и ранее не описанных хлоридов 2-[(Z)-1 -(3,5-дифенил- 1!Д4-тиадиазол-2(ЗД)-илиден)метил(этил)]-3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-3-ия и 2,2,3,3-тетра(5-фенил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)бутана. Обнаружены новые классы антибактериальных, фунгицистатиче-ских, противовирусных агентов, а также индукторов неспецифического иммунитета и цитопротекторов. По итогам работы оформлены акты внедрения полученных результатов в учебный процесс ГОУ ВПО СПХФА и в научно-исследовательскую работу ГУ НИИ Гриппа РАМН:

Положения, выносимые на защиту.

1. Реакции гидразидов и тиогидразидов карбоновых кислот с оксалил-хлоридом - эффективный метод синтеза 1,3,4-окса(тиа)диазин-5,6-дионов.

2. При ацилировании гидразидов ароматических кислот малонилди-хлоридами образуются 1-ароил-4,4-диалкилпиразолидин-3,5-дионы и 2,2-диалкил- АГ',Д^3-бис(ароил)пропандигидразиды. Взаимодействие N'-незамещенных тиобензгидразидов с малонилдихлоридами - путь к получению новых бис(5-фенил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)метанов и 1-тиоароилпиразолидин-3,5-дионов, обладающих высокой противовирусной активностью.

3. Реакции N'-фенилтиобензгидразидов с моно- и незамещенным малонилдихлоридами - удобные одностадийные методы получения хлоридов 2-[(г)-1-(3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-2(3//)-илиден)метил(алкил)]-3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-3-ия, обладающих высокой антимикробной активностью.

4. Квантово-химические методы* DFT, МР2 и CBS-4M расчетов электронной структуры и термохимических параметров исследуемых соединений для понимания и объяснения их реакционной способности.

5. Иммунотропная, цитопротекторная и умеренная антибактериальная активность 2-бензилсульфанил-4-фенил-4.#-1,3,4-тиадиазин-5,6-диона.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим пла-ном научно-исследовательских работ ГОУ ВПО СПХФА "Исследование путей синтеза, строения, физических и химических свойств, биологической активно-сти и связи между ними в ряду N-, О-, S-содержащих гетероциклических со-единений с целью поиска новых лекарственных средств" (№ государственной регистрации 01200852357).

Апробация работы. Материалы диссертации прошли апробацию на международной конференции по органической химии «Органическая химия со времен Бутлерова и Бейлыдтейна по настоящее время», Санкт-Петербург, 2006; на региональной научной конференции, студентов и аспирантов СПХФА "Молодые ученые - практическому здравоохранению", Санкт-Петербург, 2007; на межрегиональной конференции Пятигорской фармацевтической академии "Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции", Пятигорск, 2007; на международной научно-практической конференции «Стратегические вопросы мировой науки 2007», Днепропетровск, 2007; на межрегиональной конференции- Пятигорской фармацевтической академии "Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции", Пятигорск,2008; на межрегиональной конференции СПХФА "Фармация из века в век", Санкт-Петербург, 2008; на международной научно-практической конференции «Динамика научных исследований», София, 2008; на конференции «Фармация в XXI веке: эстафета поколений», Санкт-Петербург, 2009 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 статей: 2 в Журнале Общей Химии, в журнале Butlerov Communications, в 62-м и 63-м сборниках трудов Пятигорской фармацевтической академии, тезисы 6 докладов. Подана заявка на изобретение (имеется регистрационный номер).

Объём и структура диссертации. Диссертация изложена на 153 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературных данных, обсуждения результатов собственных экспериментов, экспериментальной части и выводов, содержит 32 таблицы и 30 рисунков. Библиография включает 170 ссылок.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Кузьмич, Николай Николаевич

4. ВЫВОДЫ

1. Реакция гидразидов, тиогидразидов и дитиокарбазатов с оксалилхлоридом - путь получения новых 1,3,4-окса(тиа)диазин-5,6-дионов.

2. В кристаллическом состоянии, в растворе1 ДМСО и газовой фазе 2-арил-4#-1,3,4-окса(тиа)диазин-5,6-дионы существуют главным образом в 5,6-диоксотаутомерной форме, что подтверждается данными^ ЯМР- и- ИК-спектроскопии; термохимическими расчетами методом CBS-4M.

3. 1,3,4-Оксадиазин-5,6-дионы при действии О- и iV-нуклеофильных реагентов подвергаются расщеплению по связи С6-0 гетероцикла с образованием оксо(2-бензоилгидразинил)этановой кислоты, её метилового эфира и амидов. В отличие от них 1,3,4-тиадиазин-5,6-дионы с О-нуклеофильными реагентами не реагируют, а под действием JV-нуклеофилов тиадиазиновый цикл разрушается с образованием диамидов щавелевой кислоты, исходных тиогидразидов(дитиокарбазатов) и продуктов их деградации. Химическое поведение 1,3,4-гетеродиазин-5,6-дионов хорошо согласуется с данными квантово-химических расчетов их электронных структур.

4. В реакции с моно- и незамещенным малонилдихлоридом бензгидразиды

1 3 дают только N1 -бис(ароил)пропандигидразиды, а ацилирование гидразидов дизамещенными малонилдихлоридами приводит к образованию Л^1,А^,3-бис(ароил)пропандигидразидов и 1-ароилпиразолидин-3,5-дионов.

5. Взаимодействие тиобензгидразида с малонилдихлоридами - перспективный метод синтеза 2,2,3,3-тетра(5-фенил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)бутанов, бис-(5-фенил-2-1,3,4-тиадиазолил)метанов и 1 -тиобензоилпиразолидин-3,5-дионов.

6. Простой путь синтеза хлоридов 2-[^)-1-(3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-2(ЗЯ)-илиден)алкил]-3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-3-ия и 1-тиобензоил-2-фенил-4,4-диалкилпиразолидин-3,5-дионов - ацилирование N'-фенилтиобензгидразида малонилдихлоридами.

7. Реакции 8-метил->Г-фенилдитиокарбазата с различными малонилдихлоридами протекают с образованием исключительно 1-метилсульфанил-тиокарбонил-3,5-пиразолидиндионов.

8. Продукты взаимодействия гидразидов, тиогидразидов и дитиогидразидов с оксалил- и малонилдихлоридами обладают антимикробной, противовирусной, иммунотропной и цитопротекторной активностью.

9. Присутствие электорноакцепторных групп в фенильном заместителе при атоме С" гетероцикла увеличивает антимикробную активность 1,3,4-оксадиазинов. Токсичность 1,3,4-окса(тиа)диазинов определяется природой атома халькогена в цикле и природой заместителя при атоме N4 гетероцикла.

5: ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Методы установления строения

1 1 о ,

Спектры ЯМР Ни "С растворов веществ (Ша-м, IV, Va, б, г, д, VI) в DMSO-^б записаны на спектрометре Bruker АМ-500 (рабочая частота 500.17 и 125 МГц соответственно) Подкорытовым И: С. В качестве внутреннего-стан

I 17 дарта использовался ГМДС. Спектры ЯМР Ни С растворов веществ (Шн-ф, VIII; IX, XI-XV) в DMSO-J6, CDC13 и GF3COOD записаны на спектрометрах Bruker WM-400 (рабочая частота 400 МГц) и Bruker АС-200 (рабочая частота 50 МГц) соответственно Захаровым Вг. И. В качестве внутреннего стандарта использовался ГМДС.

Электронные спектры веществ в 96% этаноле записаны на спектрофотометре СФ-2000 в кварцевых кюветах толщиной 1 см.

ИК спектры веществ в таблетках КВг получены на спектрометре ИК-Фурье ФСМ-1201 Стрелковой Л.Ф. ИК спектр веществ.(Шо), (ХПг) в»раство-ре ДМСО (концентрация 0.02М) записаны, на-спектрометре ИК-Фурье ФСМ-1201 в кюветах из CaF2 при-толщине поглощающего слоя 100 мкм Стрелковой Л.Ф.

Масс-спектры получены на спектрометре MX-1321 с ионизационным напряжением 70 В, температурой, ионизирующей камеры 200°С, в- режиме прямого ввода Мишаревым А.Д:

Кристаллы соединения (XIII) были выращены из раствора ТГФ+ДМСО путем медленного испарения при 18-20 °С. Монокристальный рентгеност-руктурный анализ (РСА) осуществляли на дифрактометре Bruker SMART 1000 CCD (МоКа излучение). Кристалл C36H26N8S4 относится к триклинной сингонии, пространственная группа Р21/п, а=6.4715(16) А, Ь= 10.558(3) А, с=12.717(3) А, а=76.67(2)°, р= 82.058(19), у= 80.495(19), Z=2, Dx=1.399 г/см3, Ri=0.0862 (1>2а1), wR2=0.0796, 2102 ненулевых независимых отражений.

Кристаллы соединения (XVa), прозрачные желтые иглы, были выращены из раствора хлороформ+ДМСО путем медленного испарения при 18-20 f

C. Монокристальный рентгеноструктурный анализ (РСА) осуществляли на дифрактометре Bruker SMART 1000 CCD (МоКа излучение). Кристалл ч

C29H21CIN4S2 относится к моноклинной сингонии, пространственная группа г

Р21/п, <7=14.3931(16) А, 6=14.4841(17) А, с=27.348(2) A, Z= 8, Д,= 1.544 г/см3, i?7=0.1411 (I>2oI), wR2=0.3446, 2102 ненулевых независимых отражений.

Элементный анализ веществ выполнен в лаборатории микроанализа СПХФА.

Интерпретацию ИК, УФ, ЯМР и масс-спектров проводили по [8, 53, 61, 63, 68].

Методы исследования реакционной способности

Квантово-химические расчеты проведены методами CBS-4M (Complete Basis Set Method), DFT с использованием гибридного функционала B3LYP, также с использованием теории пертурбации Мёллера-Плессета (МР2), при помощи программ Gaussian 98W и Gaussian 03W, анализ электронной плотности по теории AIM проводили с использованием программы AIMAU 09.02.01. Для интерпретации расчетов использовали [74, 96].

Методы определения чистоты соединений

Чистоту полученных соединений и контроль протекания реакций осуществляли хроматографически на пластинах Sorbfil. В качестве элюентов использовали ТГФ-Ас0Н-Н20 40:4:3, AcOEt-MeOH 2:1, н-С6Н14-СС14 2:1, AcOEt, h-C6Hi4-Me2CO 4:1, СНСЬ-МсОН 2: Г. Детекцию проводили в УФ-свете и парами йода.

Температуры плавления веществ определяли капиллярным методом и не корректировали.

Температуры плавления полученных соединений, выходы, данные ТСХ и элементного анализа представлены в таблице 32.

Методы получения соединений

Все растворители, используемые для синтетических и спектральных работ, очищали и сушили известными методами [12].

Гидразиды (I а-н) получали гидразинолизом соответствующих сложных эфиров [7]. Тиогидразиды (Io-с, ф) получали тиоароилированием соответствующих гидразинов [99, 100] с помощью тиоароилтиогликолятов натрия. Тиоароилтиогликолевые кислоты получали по методам, описанным в [98]. Их важными предшественниками были дитиокарбоновые кислоты, которым посвящены статьи и обзоры [106, 125, 131]. S-метил и S-6eromi-N'-фенилдитиокарбазаты (1т, у) были получены по видоизмененному нами методу [38].

Оксалилхлорид использовали промышленного производства (Merck).

Малонилдихлориды (Ха-е) получали реакцией малоновых кислот с тионилхлоридом [7].

2-Арил(гетарил)-4//-1,3>4-оксадиазин-5,6-дионы (Щ а-м). Смесь 0.20 моль безгидразида (I а-г) и 0.22 моль оксалилхлорида II в 30 мл безводного бензола кипятили в течение 3.5 часов до прекращения выделения хлороводо-рода. Осадок, выпавший после охлаждения, отфильтровывали, перекристал-лизовывали из бензола или толуола. Выходы 74-85%.

2,4-дифенил-4//-1,3,4-оксадиазин-5,6-дион (Ш н). Смесь 0.20 моль N'-фенилбензгидразида (1н) и 0.22 моль оксалилхлорида (II) в 30 мл безводного бензола кипятили в течение 3.5 часов до прекращения выделения хло-роводорода. Осадок, выпавший после охлаждения, отфильтровывали и сушили. Выход 91%.

2-фенил-4Дг-1,3>4-тиадиазин-5,6-дион (Ш о) и 2-(4-фторфенил)-4Н-1,3,4-тиадиазин-5,6-дион (Ш п). К предварительно охлажденному до 0°С и перемешиваемому, раствору Ch02 моль тиогидразида (1а и 16) в 40 мл сухого СНС1з добавляли раствор0.023'моль (2.0 мл) оксалилхлорида (И) в 15 мл сухого CHCI3, перемешивали при комнатной температуре 2.5 ч, затем кипятили 0,5ч. Реакционную* смесь охлаждали, осадок отфильтровывали и перекри-сталли'зовывали дважды из ацетонитрила. Выходы 338 г (84 %) и 4.13 г (92%).

2,4-дифенил-4//-1,3;4-тиадиазин-5,6-дион (Шр) и? 2-(4-фторфенил)-4-фенил-4Н-1,354-тиадиазин-5,6-дион (111с); К предварительно охлажденному до 0°С и перемешиваемому раствору 0.02 моль тиогидразида (1в и 1г) в 30 мл сухого бензола1 добавляли,раствор-0.022 моль (1.9 мл) оксалилхлорида (П) в 15 мл сухого^ бензола, перемешивали при комнатнойтемпературе 2.5 ч, затем кипятили 0;5ч. Реакционную смесь охлаждали; осадок отфильтровывали и-перекристаллизовывали из смеси бензол-MeCN 2: Г. Выходы 5.25 г (93 %), Шрки'5.11 г (85%), 111с.

2-(метилсульфанил)-4-феннл-4Я-1,3,4-тиадиазин-5,6-дион (Шт). К предварительно охлажденной и перемешиваемой суспензии 8.34 г метил 2-фенилгидразинкарбодитиоата (1а) в 75 мл сухого CCI4 добавляли- раствор 5.88 г (4.0 мл) оксалилхлорида (II) в 15 мл сухого CCU , перемешивали при комнатной температуре 0.5 ч, затем кипятили 3,5ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме досуха. Затем добавлялось -30 мл смеси н-гептана и CCI4 (3:1.), нагревали и кипятили 3 мин, а желтый раствор декантировали. Операцию повторяли 3-4 раза. Из декантата при охлаждении выпадал целевой продукт. Смесь охлаждали до 0°С, осадок отфильтровывали, промывали холодным н-гексаном и сушили. Выход 1,79 г (83 %).

2-(бензилсульфанил)-4-фенил-4Я-1,3>4-тиадиазин-5,6-дион (Шу). К предварительно охлажденной и перемешиваемой суспензии 5.49 г S-бензил

3-фенилдитиокарбазата (Iy) в 30 мл сухого бензола добавляли раствор 1.9 мл оксалилхлорида (II) в 15 мл сухого бензола, затем кипятили 5ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме до 5 мл и охлаждали до 5-10 °С, в 2-3 приема отфильтровывая осадок, который промывали холодным эфиром и сушили. Выход 5.93 г (82 %).

2-фенил-4-бензил-4//-1,3,4-тиадиазин-5,6-дион (Шф). К перемешиваемой суспензии 4.84 г (20 ммоль) тиогидразида 1д в 30 мл сухого бензола добавляли раствор 2.79 г (22 ммоль) оксалилхлорида (II) в 5 мл сухогобензо-ла затем кипятили 3,5ч. Реакционную смесь охлаждали, растворитель удаляли в вакууме, осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали дважды из смеси бензол-гексан 2:3. Выход 5.57 г (85 %).

Оксо(2-бензоилгидразинил)уксусная кислота (IVa). 1.14г (6 ммоль) 2-фенил-4#-1,3,4-оксадиазин-5,6-диона кипятили в течение Зч с 1мл воды в 10 мл тетрагидрофурана. Растворитель удаляли отгонкой в вакууме, осадок отфильтровывали и сушили. Выход 1.28г (88%).

Метил оксо(2-бензоилгидразинил)ацетат (IV6). 1.14г (6 ммоль) 2-фенил-4//-1,3,4-оксадиазин-5,6-диона кипятили в течение 2ч с 10мл метанола. Растворитель удаляли отгонкой в вакууме, осадок отфильтровывали и сушили. Выход 1.28г (96%).

N-бутил 2-оксо(2-бензоилгидразинил)ацетамид (Va). 1.14г (6 ммоль) 2-фенил-4£/-1,3,4-оксадиазин-5,6-диона перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч с 0.44 г (6 ммоль) н-бутиламина в 10мл метанола. Растворитель удаляли отгонкой в вакууме, осадок отфильтровывали и сушили. Выход 1.45 г (92%).

Л^'-[2-(морфолин-4-ил)-2-оксоацетил]бензгидразид (V6). 1.14г (6 ммоль)-2-фенил-4//-Г,3,4-оксадиазин-5,6--диона перемешивали при комнатной температуре в^ течение 5 чс 0.52г (6 ммоль) морфолина в 10мл метанола. Растворитель удаляли отгонкой в вакууме, осадок отфильтровывали и сушили. Выход 1.51 г (91%).

1/ 2

N-- -фенил-А^1 -(бензоил)этандигидразид (Ув). 1.14г (6 ммоль) 2-фенил-4Я-1,3,4-оксадиазин-5,6-диона перемешивали при комнатной температуре в течение 8ч с 0.65 г (6 ммоль) фенилгидразина в 6 мл метанола:, Растворитель удаляли отгонкой в вакууме, осадок отфильтровывали, перекри-сталлизовывали из этанола и сушили. Выход 1.48 г (83%).

1 "У

N- ^'"-бис(бензоил)этандигидразид (Уг). 1.Г4г. (6 ммоль)' 2-фенил-4Н-1,3,4-оксадиазин-5,6-диона перемешивали при комнатной температуре в течение 4ч с 0.82 г (6 ммоль) бензгидразида в 10мл метанола. Растворитель удаляли отгонкой .в вакууме, осадок отфильтровывали и сушили: Выход (94%).

N' -(бензоил)-^' -(пиридин-4-илкарбонил)этандигидразид (Уд). 1.14г (6 ммоль) 2-фенил-4#-Г,3-4-оксадиазин-5,6-диона перемешивали при комнатной температуре в течение 4ч с 0:82 г (6 ммоль) гидразида изоникоти-новой кислоты в 10мл метанола: Растворитель удаляли отгонкой в вакууме, осадок отфильтровывали и сушили. Выход 91%.

I ^,

N* -бис(бензоил)пропандигидразид (Х1а). Т.Збг (10 ммоль) бензгидразида кипятили в течение 4ч с 1.48г (10.5 ммоль) малонилдихлорида в 30мл хлороформа. Осадок отфильтровывали, перекристаллизовывали из спирта и сушили. Выход 73%.

1 1,' " '

2-метил-Л7' fN' -бис(бёнзоил)пропандигидразид (XI6). 1.71г (10 ммоль) 4-хлорбензгидразида кипятили в течение 4ч с Г.бЗг (10.5 ммоль) ме-тилмалонйлдихлорида в 10мл . бензола. Осадок отфильтровывали; перекри-сталлизовьтвали из спирта и сушили. Выход 84%.

2тбутил-Л? ,/V' -бис(бёнзоил)пропандигидразид! (Х1в). 1.71т (10 ммоль) 4-хлорбензгидразида кипятили:в течение 4ч с 2'.07г (10.5 ммоль). бу-тилмалонилдихлорида в 10мл бензола. Осадок отфильтровывали, перекри-сталлизовывали из спирта и сушили. Выход 84%.

2,2-димстил-Л^' ,Лт,*-бис(бензоил)пропандигидразид (Х1г) и 1-бензоил-4,4-диметилпиразолидин-3,5-дион (ХПа). 1.36г (10 ммоль) бенз-гидразида кипятили в течение 4ч с 1.77г (10:5 ммоль) диметилмалонилдихло-рида в 10мл бензола: Осадок отфильтровывали, 2,2-д иметил-yV1 ,7V3-бис(бензоил)пропандигидразид (Х1г) и 1-бензоил-4,4:-диметилпиразолидин-3,5-дион (ХПа)» разделяли дробной' кристаллизацией; из толуола и сушили. Выходы 43 и 38% соответственно.

2,2-Диэтил-Л^'Д'-бис(бензоил)пропандигидразид (Х1д) и 1бензоил-4,4-диэтилпиразолидин-3,5-диот(ХПб). Г.Збг (10 ммоль) бёнзгидразида кипятили в течение 4ч с 2.07г (10.5 ммоль) диметилмалонилдихлори

1 ^ да В- 10мл бензола. Осадок ■ отфильтровывали, 2,2-диэтил-А? ,Л/1'-бис(бензоил)пропандигидразид (Х1д) и 1-бензоил-4,4-диметилпиразолидин-3,5-дион (ХПб)> разделяли дробной кристаллизацией из толуола и сушили. Выходы- 45 и 37% соответственно.

1-тиобензоил-4у4-диметилпиразолидин-3,5-дион (ХПв). 4.56 г (0,030 моль) тиобензгидразида,кипятят с 5.41 г (0,032 моль) диметилмалонилдихло-рида в 35 мл безводного дихлорметана в течение 5ч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший желто-оранжевый кристаллический осадок отфильтровывают, промывают холодной смесью гексан-СН2С12 2:1. Выход 74%.

1-тиобензоил-4,4-диэтилпиразолидин-3,5-дион (ХПг). 4,56 г (0,030 моль) тиобензгидразида кипятят с 5,5 мл (0,032 моль) диэтилмалонилдихло-рида в 50 мл безводного бензола в течение Зч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший ярко-оранжевый кристаллический осадок отфильтровывают, промывают холодной смесью* гексан-СН2С12 2:1. Затем осадок перекристаллизовывают из смеси гексан-тетрахлорметан 3:1', промывают небольшим количеством холодной смеси гексан-бензол 2:1 и сушат при комнатной температуре. Выход 83%.

1-тиобензоил-2-фенил-4,4-диметилпиразолидин-3,5-дион (ХПд).

4,56 г (0,030 моль) N'-фенилтиобензгидразида кипятят с 5.41 г (0;032 моль) диметилмалонилдихлорида в 50 мл безводного бензола в течение 5ч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший рубиновый кристаллический осадок отфильтровывают, затем перекристаллизовывают из смеси гексан-тетрахлорметан 3:1, промывают небольшим количеством холодной смеси гексан-бензол 2:1 и сушат при комнатной температуре. Выход 76%.

1-тиобензоил-2-фенил-4,4-диэтилпиразолидин-3,5-дион (ХПе). 4,56 г (0,030 моль) N'-фенилтиобензгидразида кипятят с 6.30 г (0,032 моль) ди-этилмалонилдихлорида в 50 мл безводного бензола в течение 5ч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший рубиновый кристаллический осадок отфильтровывают, затем перекристаллизовывают из смеси гексан-тетрахлорметан 3:1, промывают не I I большим количеством холодной смеси гексан-бензол 2:1 и сушат при комнатной температуре. Выход 78%. метил 3,5-диоксо-2-фенилпиразолидин-1-карбодитиоат* (ХПж). 1.84 г (9,3 моль) S-метил N'-фенилдитиокарбазата кипятяли с 1.45 г (10.3 ммоль) малонилдихлорида в 30 мл безводного бензола в. течение 4ч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают холодной' смесью бензол-гексан 1:1. Затем осадок дважды перекристаллизовывают из смеси бензол-гексан 2:1 и сушат при комнатной температуре. Выход 62%. метил 4-метил-3,5-диоксо-2-фенилпиразолидин-1-карбодитиоат (ХПз). 1.68 г (8.5 моль) S-метил N'-фенилдитиокарбазата кипятяли с 1.44 г (9.3 ммоль) метилмалонилдихлорида в 10 мл безводного бензола в течение 4ч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали холодной смесью бензол-гексан 1:2. Затем осадок перекристаллизовывают из гептана и сушат при комнатной температуре. Выход 78%. метил 4-бутил-3,5-диоксо-2-фенилииразолидии-1-карбодитиоат (ХПи). 1.68 г (8.5 моль) S-метил N'-фенилдитиокарбазата кипятяли с 1.83 г (9.3 ммоль) бутилмалонилдихлорида в 10 мл безводного бензола в течение 4ч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали холодной смесью бензол-гексан 1:2. Затем осадок перекристаллизовывают из гептана и сушат при комнатной температуре. Выход 69%. метил 4,4-диметил-3,5-диоксо-2-фенилпиразолидин-1-карбодитиоат (ХПк). 1.68 г (8.5 моль) S-метил N'-фенилдитиокарбазата кипятяли с 1.57 г

9.3 ммоль) диметилмалонилдихлорида в 10 мл безводного бензола в течение 4ч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали холодной смесью бензол-гексан 1:2. Затем осадок перекристаллизовывают из гептана и сушат при комнатной температуре. Выход 83%. метил 4,4-диэтил-3,5-диоксо-2-фенилпиразолидин-1-карбодитиоат (ХПл). 1.68 г (8.5 моль) S-метил N'-фенилдитиокарбазата кипятили с 1.83 г (9.3 ммоль) диэтилмалонилдихлорида в 10 мл безводного бензола в. течение 4ч, реакционную смесь. охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали холодной смесью бензол-гексан 1:2. Затем осадок перекристаллизовывают из гептана и сушат при комнатной температуре. Выход 87%. метил 3,5-диоксо-2,4-дифенилпиразолидин-1-карбодитиоат (Х11м).

1.68 г (8.5 моль) S-метил N'-фенилдитиокарбазата кипятяли с 2.02 г (9.3 ммоль) фенилмалонилдихлорида в 10 мл безводного бензола в течение 4ч, реакционную смесь охлаждали, большую часть растворителя удаляли в вакууме. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали холодной смесью бензол-гексан 1:2. Затем осадок перекристаллизовывают из гептана и сушат при комнатной температуре. Выход 75%.

2,2гЗ,3-Тетра(5-фенил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)бутан (ХШ). К 2.02 г (13.3 ммоль) тиобензгидразида в 11.0 мл сухого хлороформа добавляли 2.40 г (15.5 ммоль) метилмалонилдихлорида и кипятили 6ч. Охлажденную реакционную массу фильтровали через бумажный фильтр, и при испарении фильтрата выпадали бесцветные октаэдры. Выход 2.41 г (52 %).

Бис(5-фенил-1;3;4-тиадиазол-2-ил)метан (XlVa)* К раствору 2.02 г (13.3 ммоль) тиобензгидразида в 11.0 мл сухого ТГФ при охлаждении и перемешивании1 прикапывали 2.18 г (15.5 ммоль) малонилдихлорида в 5:5 мл ТГФ с такой скоростью, чтобы температура реакционной, массы была'не выше1 30°С, после добавления премешивали ещё 4 ч и оставляли на ночь. Выпавший^ осадок отфильтровали, промыли холодным'дихлорметаном, дважды перекристаллизовывали из толуола. Выход 1,25 г (56 %).

1Д-бис(5-фенил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)этан (XIV6) К раствору 2.02 г (13.3 ммоль) тиобензгидразида в41.0 мл сухого ТГФ при охлаждении и перемешивании прикапывали 2.40 г (15.5 ммоль) метилмалонилдихлорида в 5.5 мл ТГФ с такой скоростью? чтобьг температура реакционной-массы была не выше 30°С, после добавления'перемешивали ещё 4 ч и оставляли на ночь. Затем,большую часть растворителя отгоняли, выпавший осадок отфильтровали и подвергали очистке на хроматографической колонке. Выход 2,37 г (51 %).

2,2-бис(5-фенил-Г,3,4-тиадиазол-2«ил)пропан (XIVb) К раствору 2.02 г (13.3 ммоль) тиобензгидразида в 11.0 мл сухого ТГФ при охлаждении на водяной бане при перемешивании прикапывали 2.62 г (15.5 ммоль) диметил-малонилдихлорида в 5.5 мл ТГФ с такой скоростью, чтобы температура реакционной массы была не выше 30°С, после добавления перемешивали ещё 5 ч и оставляли на ночь. Растворитель удаляли в вакууме, и через некоторое время продукт закристаллизовывался в1 виде бесцветных игл, которые отфильтровывали, промывали холодной смесью бензол-ТГФ 2:1 и сушили. Выход 1,55 г (64 %).

Хлорид 2-[^)-1-(3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-2(3^-илиден)метил]-3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-3-ия (ХУа). К охлажденной суспензии 4.56г (20 ммоль) N'-фенилтиобензгидразида в 50 мл сухого бензола осторожно добавляют 2.12г (15 ммоль) малонилдихлорида и кипятят в течение Зч. Желто-коричневый осадок отфильтровывают и промывают бензолом, затем нагревают со смесью бензол-ацетонитрил 3:1, теплый раствор фильтруют и желтый осадок промывают небольшим количеством холодного ацетонитрила. Желтый порошок сушили и перекристаллизовывали из воды, удаляя нерас-творяющуюся взвесь фильтрацией через бумажный фильтр. При медленном охлаждении чистый продукт выпадал в виде ярко-желтых игл. Выход 3.89 г (74%).

Хлорид 2-[^)-1-(3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-2(3/7)-илиден) этил]-3,5-дифенил-1,3,4-тиадиазол-3-ия (XV6). К охлажденной суспензии 4.56г (20 ммоль) N'-фенилтиобензгидразида в 50 мл сухого бензола добавляют 2.33г (15 ммоль) метилмалонилдихлорида и кипятят в течение Зч. Оранжево-коричневый осадок отфильтровывают и промывают бензолом, затем нагревают со смесью бензол-ацетонитрил 3:1, теплый раствор фильтруют и желтый осадок промывают небольшим количеством холодного ацетонитрила. Оранжевый порошок сушили и перекристаллизовывали из воды, удаляя не-растворяющуюся взвесь фильтрацией через бумажный фильтр. Чистый продукт отфильтровывали и сушили. Выход 4.04 г (75%).

Методыбиологических исследований.

Антимикробная активность.

Исследования проводили на кафедре микробиологии СПХФА, совместно, с доцентом, к. биол. н., Е. П. Ананьевой; Минимальные подавляющие концентрации (МПК) определяли методом серийных разведений в жидкой питательной среде - мясопептонном бульоне (МПБ) или: среде Сабуро: с последующим высевом на агаризованные среды. Йсследуемые соединения не растворяются в воде, поэтому в качестве растворителя* использовали 20% водный раствор ДМСО, не подавляющий рост ни одной из использованных» тест-культур в концентрациях более 1000 мкг/мл. В качестве тест-микроорганизмов были выбраны», грамположительные бактерии Staphylococcus aureus штамм Р 209 и грамотрицательные бактерии Escherichia coli А ТСС 25922, а: также: дрожжи Candida albicans ' АТСС 885-653: Штаммы тест-организмов были выбраны в соответствии с рекомендациями ГФ XI [13]. Микробная; нагрузка составляла 1000 клеток/мл. Для достижения соответст- ■ вующей^концентрации, микробных клеток; готовили суспензию микроорганизмов; в физиологическом растворе в соответствии со стандартом мутности 10 ЕД (1 млрд., клеток/мл), затем через ряд последовательных разведений получали-конечную концентрацию микробньгх клеток. :

В ряд пробирок наливали по 1 мл МПБ или среды- Сабуро, соответственно для; бактерий и грибов. В первую пробирку вносили 1 мл раствора исследуемого соединения и проводили последовательные; разведения; в ряду пробирок, (перенося; по 1 мл из предыдущей в последующую), после; чего в каждую пробирку ряда вносили по 0.1 мл микробной взвеси (104 клеток/мл), пробирки культивировали при 37°С для бактерий и при 24°С для грибов 24 ч.

Из пробирки, где не наблюдали роста культуры (помутнения среды), делали высев в чашки Петри на мясопептонный агар (МПА) для стафилококка и кишечной палочки и на агаризованную среду Сабуро для С. albicans. Чашки культивировали при 37°С для бактерий и при 24°С для грибов 24 ч.

Исследование токсичности

Острую токсичность была исследована на? 300 белых нелинейных мышах-самцах массой 18-22 г, выращенных в питомнике Рапполово. Вещества вводили внутрибрюшинно в виде суспензии в физиологическом^ растворе (0,9% NaCl), стабилизированной твином-80. Контрольным животным вводили физиологический раствор с твином-80 в той же концентрации. Наблюдение за животными осуществляли в течение 72 часов. Расчет токсикометриче-ских показателей проводили по методу Миллера-Тейнтера.

Острую токсичность при пероральном (р.о.) введении исследуемых веществ крысам-самцам с массой тела 160-180 г оценивали на 40 крысах-самцах. Растворы и суспензии изучаемых соединений приготовлял» на воде очищенной и вводили однократное помощью атравматического желудочного зонда. Гибель животных регистрировали в течение 14 дней от момента затравки. Токсикометрические показателю рассчитывали с помощью метода Миллера-Тейнтера. Опыты поставлены на 40 крысах-самцах, результаты отражены в таблице.

Исследование противовирусной активности Материалы и методы. Вирусы и клетки. Исследования проводились на первичной культуре клеток почек собаки (MDCK). Для оценки противовирусной активности препаратов использовали референс - вирус A(H3N2) А/Виктория/35/72. Данный штамм обладает достаточной гемагглю-тинирующей (1:128) и инфекционной активностью (6,5 lg ИД50/20мкл).

Изучение токсичности препаратов. Клетки MDCK сеяли в 96-луночные планшеты и культивировали при 37°С в среде MEM с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота до состояния монослоя. Из исследуемых препаратов готовили маточные растворы концентрации 10 мг/мл в диметилсульфоксиде, после чего готовили серию двукратных разведений препаратов в среде MEM от 500, до 1,92 мкг/мл. Растворённые препараты вносили в лунки планшетов и инкубировали 48 часов при 37°С. Оценку степени повреждения клеточного монослоя проводили визуально.

На основании полученных данных определяли минимальную токсическую и рабочую дозу препаратов.

Оценка противовирусного действия препаратов. Определение противовирусной активности препаратов в отношении вируса гриппа А/Виктория/35/72 A(H3N2) проводили на клетках MDCK в 96-луночных планшетах для клеточных культур. Из исходной вируссодержащей алланто

1 т иеной жидкости готовили серию десятикратных разведений от 10" до 10" и вносили в соответствующие лунки с клеточным монослоем. После часового контакта при 36-37° С в лунки добавляли препарат в рабочей концентрации. Результаты-учитывали через 48 часов по реакции гемагглютинации (ГА) со взвесью 0,5% куриных эритроцитов. Вирусингибирующее действие препарата оценивали по снижению титра вируса в опыте по сравнению с контролем.

Изучение влияния соединений (Illy) и (ХПг) на функциональную активность нейтрофилов крови крыс in vitro

Методика. К пробам крови крыс, взятой с антикоагулянтом ЭДТА дикалия, прибавляли 10% раствор желатина, приготовленный на фосфатно-солевом буфере с рН7.4, и инкубировали в термостате при температуре 37°С в течение 1 часа. После инкубации слой плазмы-со значительным количеством лейкоцитов и лимфоцитов крови наслаивали в пробирках на систему фи-колл-гипак для разделения лейкоцитов и лимфоцитов в градиенте плотности и центрифугировали 40 минут при 2000 об/мин.

Интерфазу с содержащимися в ней лимфоцитами отделяли. Осадок лейкоцитов отмывали от незначительного количества эритроцитов и тромбоцитов с помощью 0.4% раствора аммония хлорида в физиологическом растворе с добавлением 25 ЕД гепарина. Осадки ресуспензировали в 5 мл физиологического раствора и исследовали.

Цитохимические показатели лейкоцитов определяли с помощью рутинных методов, описанных в литературе [24].

Фосфатазная активность нейтрофилов (ФАН). Суспензию нейтро-филов крови крыс преинкубировали с растворами изучаемых соединений. Через 10 минут к пробам добавляли субстратную смесь. Перемешивали и инкубировали в термостате в течение 2 часов.

Пробы центрифугировали при 3000 об/мин 5 минут и осадки лизиро-вали 300 мкл чистого ДМСО с добавлением 20 мкл 10% гидроксида натрия. Измеряли абсорбцию проб при 570 нм на планшетном фотометре против контроля на реактивы (ДМСО и гидроксид натрия).

За 100% принимали значение абсорбции контрольных проб без добавления изучаемых соединений. Рассчитывали, насколько изменяется фосфатазная активность нейтрофилов при добавлении соединений (Illy) и (ХПг). Данные отражены в таблице 27.

2.9. Заключение.

Вышеприведенный обзор показывет, что гидразиды, тиогидразиды и дитиокарбазаты являются удобными синтонами для получения практически всех известных типов N, О, S— содержащих гетероциклических соединений; Реакции гидразидов, тиогидразидов и дитиокарбазатов интересны не только с теоретической точки зрения, но и имеют большое значение для синтеза новых практически значимых ациклических и гетероциклических структур. 1,3,4-Гетеродиазины и -диазолы, а также пиразолы, являясь распространенными продуктами реакций гидразидов, тиогидразидов и дитиокарбазатов, обладают труднообозримым многообразием видов физиологической активности и играют огромную роль в медицинской химии. Вместе с тем в литературе отсутствуют сведения о реакциях гидразидов, тиогидразидов и дитиокарбазатов с малонилдихлоридами, о реакциях с оксалилхлоридами для гидразидов и N'-незамещенных тиогидразидов имеются лишь единичные упоминания. Исследование реакций N'-незамещенных гидразидов ароматических и гетероарома-тических карбоновых кислот с оксалилхлоридом и вовсе осталось за пределами внимания ученых.

Таким образом, реакции гидразидов, тиогидразидов и дитиокарбазатов с оксалил- и малонилдихлоридами представляют несомненный интерес для синтетической органической химии и в области создания новых эффективных биологически активных веществ с различным спектром биологической активности.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

3.1. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ АРОМАТИЧЕСКИХ ГИДРАЗИДОВ, ТИОГИДРАЗИДОВ И S-АЛКИЛДИТИОКАРБАЗАТОВ С ОКСАЛИЛХЛОРИДОМ.

Первые представители 4/7-1,3,4-оксадиазин-5,6-дионов были получены в конце 20-х годов [91, 163] взаимодействием оксалилхлорида с различными N'-арилгидразидами алифатических и ароматических карбоновых кислот. Однако ни тогда, ни позже не1 были предприняты попытки синтеза производных 1,3,4-оксадиазин~5,6-дионов, не содержащих заместителя в положении N4 гетероцикла.

3.1.1. Синтез 4/7-1,3,4-окса(тиа)диазин-5,6-дионов.

1,3,4-Оксадиазины (Ша-м) были получены нами взаимодействием соответствующих гидразидов (Ia-м) с оксалилхлоридом (II) в кипящем бензоле, хлороформе или тетрахлорметане (рисунок 1) [28, 33]. Реакцию проводили с 15% избытком оксалилхлорида при концентрации реагентов 5-10% в гетерогенных условиях вследствие невысокой растворимости гидразидов в вышеупомянутых растворителях. Взаимодействие протекало с бурным выделением НС1. Протекание реакции контролировали методом ТСХ.

Аналогично были получены 1,3,4-тиадиазин-5,6-дионы реакцией соответствующих тиогидразидов и S-алкил-З-фенилдитиокарбазатов с оксалилхлоридом при перемешивании в среде слабополярных растворителей при температуре 40-80°С [26]. Выход окса- и тиадиазинов составили 74-94%.

HN N

A + L -нсГ X la-y II IIIa-y

X=0 (а-н), X=S (о-ф); R=Ph, R2=H (a); R^-NCb-CeH^ R2=H (6); R'=4-N02-C6H4, R2=H (b); R1=3,5-]ЧС)2-СбНз, R2=H (r); R^-Cl-CeHi, R2=H (д); R=4-C1-C6H4 , R2=H (e); R1=3-Br-C6H4, R2=H (ж); R1=2,4-C1-C6H3, R2=H (з); R=3-MeO-C6H4, R2=H (и); R1=4-MeO-C6H4, R2=H (k); К1=2-фурил, R2=H (л); ^=2-тиенил, R2=H (м); R'=R2=Ph (н); R=Ph, R2=H (o); R1=4-F-C6H4, R2=H (n); R'=R2=Ph (p); R1=4-F-C6H4, R2=Ph (c); RA=MeS, R2=Ph (т);

R!=BnS, R2=Ph (y); R!=Ph, R2=Bn (ф). Рисунок 1 - Схема взаимодействия гидразидов и тиогидразидов с оксалилхлоридом

3.1.2. Строение 4/зГ-1,3,4-окса- и тиадиазин-5,6-дионов.

Оксадиазины (Ша-м) и тиадиазины (IIIo, п), не имеющие заместителей в положении 4 гетероцикла, потенциально таутомерны и могут теоретически существовать в четырех таутомерных формах (рисунок 2): 4//-5,6-диоксо (А),

5-гидрокси-6-оксо (В), 2#-5,6-диоксо (С) и 6-оксо-3-ий-5-олатной (D). н

N N Т^ =.

АЛ,-АЛ

Ar ^Г ^О Ar X ^О Аг в а Ж nx' н с

VV0 аЛХА d

Рисунок 2 - Схема таутомерного равновесия 2-арил-1,3,4-окса(тиа)диазин-5,6-дионов Для определения строения окса- и тиадиазинов (Ша-м, о, п) в кристаллической форме изучались ИК-спектры веществ в таблетках КВг. В спектрах оксадиазинов (Ша-м) в области; 1680-1810 см"1 присутствуют полосы, которые можно отнести к валентным колебаниям связей соответственно С5=О амид-ных и С6=0 сложноэфирных карбонильных групп (таблица 2); следовательно можно отвергнуть таутомерные формы (В и D), имеющие лишь одну карбонильную группу. Аналогично, в ИК-спектрах тиадиазинов (IIIo, п) имеются две близколежащие полосы (1680 - 1695 см"1) в области, характерной для валентных колебаний связи С=0, которые могут принадлежать только тауто-мерным формам (С) или (D). В ИК-спектрах 2Я-5,6-диоксотаутомерных структур (С) окса- и тиадиазинов (Ша-м, о, п) должны были бы отсутствовать полосы колебаний-в области 3200-3250'см"1, относящиеся к валентным» колебаниям связей N-H, однако данные полосы присутствуют в спектрах соединений (III а-м, о, п), что позволяет отвергнуть структуру (С) [25].

Таким образом, по данным ИК-спектроскопии можно сделать предположение, что 1,3,4-оксадиазин-5,6-дионы (Ша-м и 1,3,4-тиадиазин-5,6-дионы (IIIo, п) в кристаллическом> состоянии существуют в 4Н-5,6-диоксоформе (А).

В ИК-спектрах 2,4-дифенил-1,3,4-оксадиазина (Шн) и 2-замещенных-4-фенил(бензил)-1,3,4-тиадиазинов (Шр-ф), не способных к таутомерии, также имеются две полосы (1705 и 1810 см"1 для 1Пн и 1660 - 1695 см"1 для Шр-ф) в области, характерной для валентных колебаний связи С=0. Это сходство является ■ дополнительным подтверждением предпочтительности АН-5,6-диоксоформы (А).

Строение 4#-1,3,4-окса(тиа)диазин-5;6-дионов в диметилсульфоксид-ных растворах изучалось методами ЯМР- и ИК-спектроскопии. В спектрах ЯМР 'Н растворов оксадиазинов-(IIIa-м) (рисунок 3) и тиадиазинов (IIIo, п) характеристическим является узкий синлет в слабом поле (8 12.20 - 12162 м. д. для соединений Ша-м и 12.90 - 12.96 м. д. для IIIo, п), который может относиться как к NH-, так и ОН-группе. Установление его принадлежности было произведено на примере тиадиазина (Шо) с помощью спектра НМВС.

Известно [57], что. величина константы скалярных взаимодействий между атомами зависит от числа связей между ними. Так как при расположении атомов водорода и углерода через четыре и более связей скалярные взаимодействия между ними в спектрах ЯМР обычно не видны, то присутствие в спектре-НМВС (Heteronuclear MultiBond Coherence), оптимизированного на величину скалярной константы /(С-Н) 8 Гц, раствора тиадиазина (Шо) в ДМСО-^б (рис. 4) интенсивного кросс-пика между сигналами протона при 5 12.90 м. д. и углерода С" гетероцикла свидетельствует о наличие сильных скалярных взаимодействий между ними и является доказательством наличия трех (а не четырех) связей между этими атомами, что соответствует 477-5,6-диоксотаутомерной форме (А) тиадиазина (IIIo).

ИК-спектроскопическое изучение гетеродиазинов в диметилсульфок-сидных растворах было проведено на веществах (Ша) и (Шо), которые имеют одинаковые заместители в положении 2. В их спектрах наиболее характеристической является область 1800 - 1680 см"1, где присутствуют 2 полосы поглощения, соответствующие валентным колебаниям связей С=0. Следовательно, в растворах ДМСО для данных гетеродиазинов преобладающей является 477-5,6-диоксоформа.

В спектрах ЯМР гетеродиазинов (Ша-ф) также имеются мультипле-ты протонов бензольных и гетероциклических колец (5 6.69 - 9.02 м: д.), синглеты метиленовых протонов бензильных заместителей тиадиазинов (Illy, ф) 5 4.32 и 5.23 м. д., синглеты в области 3.93-3.95 м. д., относящиеся к протонам метоксигрупп соединений (Ши, к). Химический сдвиг протонов метил-сульфанильной- группы вещества (Шт) имеет значение 8 2.51 м. д. Важно отметить, что соотношения интегральных интенсивностей различных типов протонов в ЯМР ^-спектрах точно соответствуют соотношениям протонов, принадлежащих к разным функциональным группам в рассматриваемых структурах.

1 1

В спектрах ЯМР С для оксадиазинов (Ша-н) (таблица 2) характерны сигналы в области 5 149.6 - 152.4 м. д., принадлежащие углеродам С5 и С6 л цикла, сигналы углеродов С гетероциклов находятся в диапазоне 8 143.5

13

146.8 м. д. У тиадиазинов (Шо-ф) в спектре ЯМР С в растворе ДМСО-^6 имеются характерные сигналы ядер углерода С6 тиолактонных групп (5 174.5

SO

- 176.6 м. д.), сигналы атомов С и С гетероцикла (5 147.9 - 148.5 м. д. и 8 141.0 - 141.9 м. д. соответственно). Следует заметить, что сигналы ядер углерода гетероциклов при замене водорода при N4 на Ph и Вп практически не смещаются (рисунок 5, 6). Сигналы ядер углерода ароматических заместителей находятся в области 8 112.2-160.4 м. д. aee

Рисунок 3 - Спектры ЯМР 'Н соединения (ITIa) и (Шо)в ДМСО-й?6

1k-hmbc.2rr.esp t t it

AL

Е- 0

E- 20

F 40

60

E- 80

100

CO 03

120 §

140

F-160

E-180

200 с 220 г И I I II I II J I || I I J | I N I I I I I I | I I I I II II I I I I и I I I M | I И Ч II N | I I I 4 M I I | J n I I I 1 I 1 | I II I | I I I 1 I I I I I | I 1 1 I I I i I I I ■ I I ' | I M I I M I I | I I 4 I I*

13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2

F2 Chemical Shift (ppm)

Рисунок 4 - Спектр ЯМР HMBC раствора 2-фенил-4Я-1,3,4-тиадиазин-5,6-диона (Шо) в ДМССМй

JNK-40. INVGATP AU

-» о

KS

Is? 3 SS15S1S6 a? 4 s' я й я я' й а я

II ТГ^ЭДТ

Ш Щ РЪ ^ г^

U-UJU jilL

Jl i П1111mrii»mn111 ini n iTTTrn r

100 90 ppm)

Рисунок 5 - Спектры ЯМР 13C соединений (Ша(вверху) и Шн (внизу)) в ДМСО-с/6 Ijlj. С» jjj

I SSI I ч *4

О № Ф n л

1UI

Jl

11 ггуп Г11 П11| HI l*n 111 111 ppm)

Г", Mjii/llfttflNKt^r-ti^ij^i frp'p

Ч-*

Mb

St'S! lll|lllllllll|lUllllll|lllllllll|IIIIIHIIllllllllM|IHIIIIIIHIIIIIIII|inHIIII|lllll|llltlllllllll|nllll"lllllllllll|n>MIH»|lllllllll|lllllllll|IIUinil|ll

220 200 180 1W 140 120 100 SO 60 ppm)

И|11|Ц1111|1И111111|МЧЧ1Ч|Ч111|1И|1|||И>11ЦЧ|И

40 20 0

Рисунок 6 - Спектры ЯМР 13С и 1Н соединения (Шо(вверху) и Шр(внизу)) в ДМСО-de

Шр - СБС13+ДМСО-d6)

Исследование таутомерного равновесия в газовой фазе было проведено термохимическими расчетами с использованием комплексного метода CBS-4М [130] на примере 2-фенил-477-1,3,4-окса(тиа)диазин-5,6-дионов (Ilia, о) (таблица 1) при помощи программы Gaussian 03W. Этот метод является весьма-точным (среднее абсолютное отклонение от экспериментальных результатов находится в пределах 2.0 ккал/моль) и в отличие от других методов ah initio не является столь затратным по времени. Результаты1 вычислений представлены в таблице 1.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Кузьмич, Николай Николаевич, 2009 год

1. Алексеев, В. В. Кольчатое равновесие тиобензоилгидразинопирано-зида 1,3,4-тиадиазол-2-ина для тиобензоилгидразона глюкозы / В. В. Алексеев, К. Н. Зеленин // Химия гетероциклических соединений. - 1992. - №4. - Р. 571-572.

2. Бабичев, Ф.С. Реакция 2-хлорметилбензонитрила с гидразидами кислот / Ф. С. Бабичев, Ю. JL Брике, Н. Н. Романов // Украинский химический журнал. 1981. - №7. - С. 735-738.

3. Базавова; И. М. Арилтиокарбогидразиноилирование карбоновых кислот / И. М. Базавова, Р. Г. Дубенко, П. С. Пелькис // Журнал органической химии. 1981. -№1. - С. 200-201.

4. Базавова, И. М. Изучение производных дитиокарбаминовой кислоты. IX. Арилтиокарбогидразиноилированные с активным атомом водорода / И. М. Базавова, Р. Г. Дубенко, П. С. Пелькис // Журнал органической химии. -1982.-№1.-С. 213-217.

5. Беленький, M.JI. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М. JI. Беленький. Рига, 1963. - 130 с.

6. Вейганд, К. Методы эксперимента в органической химии / К. Вей-ганд, Г. Хильгетаг. М.: Химия, 1968. - 944 с.

7. Вульфсон, Н. С. Масс-спектрометрия органических соединений / Н. С. Вульфсон, В. Г. Заикин, А. И. Микая. М.: Химия, 1986. - 312 с.

8. Глотова, Т. Е. Взаимодействие 2-ацил-1-бромацетиленов с тиобенз-гидразидом / Т. Е. Глотова, А. С. Нахманович, Т. Н. Комарова, М. В. Сигалов // Известия Академии Наук СССР, серия «Химия». 1988. - №11. - С. 2637-2638.

9. Глотова,, Т. Е. Синтез и туберкулостатическая активность 3,5-дизамещенных-2-ацилметилг1,314-тиадиазолов / Т. Е. Глотова, А. Е. Александрова, А. С. Нахманович, Т. И. Виноградова // Химико-фармацевтический^ журнал. 1990. - №11. - С. 48-50.

10. Глотова, Т. Е. Синтез производных 1,3,4-тиадиазола по. реакции тиобензгидразида с: некоторыми аци л ацетиленами / Т. Е. Глотова, А. С. Нахманович, М. В. Сигалов // Химия Гетероциклических соединений. 1989. -№5. - С. 680-682.

11. Гордон, А. Спутник химика / А. Гордон, Р. Форд. М.: Мир, 1976. -541 с.

12. Государственная фармакопея СССР. Выпуск 1. Общие методы анализа. 11-е изд-е. -М. : Медицина, 1987. - 335 с.

13. Заявка № 2005281 Швейцария, МКИ А61 КЗ 1/00. A Preparation of ру-razolidinedione derivatives, useful as platelet ADP receptor antagonists / O. Houille et air, заявл. 24.06.03; опубл. 06.01.05. 131 c.

14. Заявка № 90202889 Япония, МКИ C07D495/14. Preparation of triazo-lopyridazine compounds as anxiolytics, antidotes and dementia agents / T. Nakao et al.; заявл. 01.02:89; опубл. 10.08.90. 6 c.

15. Зеленин, К. Н. 2,3-дигидро-1,3,4-тиадиазолы как продукты» конденсации тиобензгидразида с карбонильными соединениями / К. Н. Зеленин, В. А. Хрусталев, В. В. Пинсон, В. В. Алексеев // Журнал органической химии. -1980. №Ю. - С. 2237-2238.

16. Зеленин, К. Н. 2-фенил-1,3,4-тиадиазол-5-ины / К. Н. Зеленин, В. А. Хрусталев, В. В. Алексеев, П. А*. Шарбатян // Журнал органической химии. -1982.-№7.-С. 904-910.

17. Зеленин, К. Н. 5-Гидразино-2-пиразолиньь / К. Н. Зеленин, МГ Ю. Малов, И. В. Зерова, П. Б. Терентьев, А. Г. Каландаришвили // Химия гетероциклических соединений. 1987. - №9. - С. 1210-1218.

18. Клиническая лабораторная аналитика. Том 2. Частные аналитические технологии в клинической лаборатории / под редакцией Меньшикова В .В.; М.: Лабинформ-РАМЛД, 1999. - 352 с.

19. Кузьмич, Н.Н. Изучение строения 2-фенил-4Н-1,3,4-окса- и тиадиа-зин-5,6-дионов / Н. Н. Кузьмич, Лалаев Б.Ю:, И.П. Яковлев // Бутлеровские сообщения. 2008. - Т. 13. - № 3. - С. 19-22.

20. Кузьмич Н.Н. Поиск потенциальных лекарственных субстанций в ряду 1,3,4-окса- и тиадиазин-5,6-дионов. / Региональная научная конференция студентов и аспирантов «Молодые ученые практическому здравоохранению». Санкт-Петербург 2007. - С. 128-129.

21. Кузьмич, Н.Н. Синтез, антимикробная активность и острая токсичность 1-тиобензоил- и 1-метилсульфанилтиокарбонил-3,5-пиразолидиндионов.

22. Hi H. Кузьмич, М.В. Архипова, Б.Ю: Лалаев, И:П.Яковлев, Е.П. Ананьева // Материали за IV международна научна практична; конференция! «Динамика изследвания 2008», София, 2008. - Т. 24. - С. 72-74.

23. Липунова, Г. Н. Синтез фторированных 1,3,4-оксадиазино6,5,4-//.хинолинов / Г. Н. Липунова, Е. В. Носова, В. Н. Чарушин, О. М. Часовских// Химия гетероциклических соединений. 2001. - №10. - С. 1278-1288.

24. Малов, М. Ю. Структура несимметричных 5-гидразинил-2-пиразолинов / М. Ю. Малов, К. Н: Зеленин, С. И. Якимович // Химия гетероциклических соединений. 1988. - №10. - С. 1358-1361.

25. Николаев, В. Н. Кольчато-цепная таутомерия тиобензоилгидразо-нов (3-кетоэфиров / В. Н. Николаев, С. И: Якимович, Н. В. Кошмина, К. Н. Зеленин, В. В. Алексеев, В. А. Хрусталев // Химия гетероциклических соединений. 1983. - №8. - С. 1048-1051.

26. Пат. 152552 ГДР; CI. C07D251/52. 6-Alkylthio-l-aroylamino-2,4-diimino-1,2,3,4-tetrahydro-1,3,5-triazines.

27. Синтезы гетероциклических соединений / под. ред. А. Л. Мнджояна. Вып. 5. Ереван, 1960. - 85 с. - (Издательство АН Армянской ССР).

28. Томчин, А. Б. Строение продуктов конденсации 1-алкилизатинов с тиобензоилгидразином / А. Б. Томчин // Журнал органической химии. — 1981. — №7.-С. 1561-1562.

29. Тюрин, Р. В. Альтернативные пути к пиразоло4,3-е.[1,2,4]триазоло-[1,5-с]пиримидиновым системам / Р. В. Тюрин et al. // Журнал органической химии. 2005. - №6. - С. 916-921.

30. Фармакологические методы в токсикологии, т. 3 / Издательство Института Токсикологии Минздрава СССР. 1981. - 255 с.

31. Хрусталев, В. А. Кольцевой таутомеризм в 1-тиоацил-5-гидрокси-2-пиразолине (5-(2-оксоалкил)- Д21,3,4-тиадиазолине) / В. А. Хрусталев, К. Н. Зеленин, В. В. Алексеев // Журнал органической химии. 1981. - №11. - С. 2451-2452.

32. Юсковец, В. Н. Азины и азолы: СХХП. Новый региоселективный синтез 1-замещенных-б-метилурацилов,/ В. Н. Юсковец, А. В. Москвин, JI. Е. Михайлов, Б. А. Ивин // Журнал'общей химии. 2005. — №1. - С. 134-146.

33. Якимович, С. И. Таутомеризм в ряду продуктов конденсации фторированных 1,3-дикетонов с ароилгидразинами / С. И. Якимович, И. В: Зерова, К. Н. Зеленин, В. В. Алексеев, А. Р. Тугушева // Журнал органической химии. 1997. - №3. - С. 370-374.

34. Якимович, С. И. Таутомерия в ряду ацилгидразонов ацетилпинако-лина / С. И: Якимович, И. В. Зерова // Журнал органической химии. 1985. -№12.-С. 2493-2502.

35. Яковлев, С. В. Линезолид первый препарат нового класса-антимикробных средств оксазолидинонов: перспективы лечения грамположитель-ных инфекций / С. В. Яковлев // Инфекции и антимикробная терапия. - 2001. — Т.З - №6. - С. 5-14.

36. Ainsworth, С. The condensations of aryl carboxylic acid hydrazides with ortho esters / C. Ainsworth // Journal of the American Chemical Society. 1955. -P. 1148-1150.

37. Amir, M. Non-carboxylic analogues of naproxen: design, synthesis, and pharmacological evaluation of some 1,3,4-oxadiazole/thiadiazole and 1,2,4-triazole derivatives / M. Amir , H. Kumar, S. A. Javed // Archiv ,der Pharmazie. 2007. -№11.-P. 577-585.

38. Anderson, P. N. Synthesis of 2-substituted-3,4-dihydro-l,2-diazepines by the reactions of unsaturated ketones with hydrazides / P. N. Anderson, С. B. Argo, J. T. Sharp // Journal of Chemical Society, Perkin Transactions 1. 1981. - №11. -P: 2761-2763.

39. Anderson, P. N. The preparation of isoquinoline-N-imines by the reaction of l-acyl-2-(2'-oxoalkyl)arenas with hydrazides / P. N. Anderson, J. T. Sharp, H. R. Sood // Synthesis. 1985. - №1. - P. 106-107.

40. Bader, R. F. W. A quantum theory of molecular structure and its applications / R. F. W. Bader // Chemical Reviews. 1991. -№ 5. - P. 893-928.

41. Barnes. B. J. Cytotoxicity and mode of action of l-(l -cyclohexenyl) and 1-unsubstituted 3,5-pyrazolidinedioncs in human гпоЩ T ccll leukemia / B. J. Barnes, R. A. Izydore, L Hi Hall // Anticancer Research. 2001'. - №3B. - P: 18571868.

42. Barton, D. H. R. Reactions of thiohydrazides and related compounds / D. H. R: Barton, J. W. Ducker, W. A. Lord, P. D. Magnus // Journalof Chemicals Society, Perldn Transactions 1. 1976. - №1-C. 38-42.

43. В ecke, A. D. Density-functional exchange-energy approximation; with correct asymptotic behavior / A. D. Becke // Physical Review A. 1988. - Vol. 38. -P. 3098-3100. ' ' .

44. Beckcr E. D. High Resolution NMR Theory and Chemical Applications / E. D. Beckcr. 3-d ed. - Academic Press, 2000. - P. 122.

45. Breitmaier, E. Structure Elucidation by NMR in Organic Chemistry: A Practical Guide / E. Breitmaier. John Wiley & Sons Ltd., 2002. - 258 p.

46. Brown; D. W. Product Class 15: Isothiazoles-/ D. W. Brown; M. Sains-bury // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 11. Georg Thieme Verlag, 2001. - P. 507-572.

47. Bruno, T. J. Handbook of basic tables for chemical analysis / T. J. Bruno, P. D. N. Svoronos. CRC Press, USA, 2003. - 621 p."

48. Collier, C. J. Product Class 12: 1,3,4-Thiadiazoles / C. J: Collier // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 13.- Georg Thieme Verlag, 2003. P. 349-414.

49. Di Braccio, M. 1,5-Benzodiazepines XIV. Synthesis of new substituted* 9H-bis-l,2,4.triazolo[4,3-a:3',4'-d][l,5]benzodiazepines / M. Di, Braccio et al. // Farmaco. 2005. - №2. - P. 113-125.

50. Donohoe, T. J. Product Class 14: 1H- and 2H-Isoindoles / T. J. Donohoe // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 10. Georg Thieme Verlag, 2000. - P. 653-692.

51. Elguero, J'. Prototropic Tautomerism of Heterocycles: Heteroaromatic Tautomerism-General Overview and Methodology / J. Elguero // Advances in Heterocyclic Chemistry, vol. 76. San Diego, CA, 2000. - P. 2-85.

52. El-Rayyes, N. R. Synthesis of 2-pyrazolines and 3,5-pyrazolidinediones / N. R. El-Rayyes, N. A. Al-Awady // Synthesis. 1985. - №11. - P. 1028-1042.

53. El-Sebai, I. Synthesis of some dibenzazepines of possible therapeutic interest / I. El-Sebai, A. M. Farghaly, H. M. Salama // Pharmazie. 1977. - №6. - P. 329-331.

54. Foresman, J. B. Exploring Chemistry with Electronic Structure Methods / J. B. Foresman, A. Frisch. Gaussian Inc., Pittsburg, USA, 1996. - 179 p.

55. Frisch, M. J. Semi-direct algorithms for the MP2 energy and gradient / M. J. Frisch, M! Head-Gordon, J. A. Pople // Chemical Physics Letters. 1990. - Vol. 166.-№3.-P. 281-289.

56. Fukuda, H. Syntheses and reactions of functional polymers. XC. Activation of acyl groups by oxadiazoline and thiadiazoline derivatives / Hi Fukuda, T. Endo, M. Okawara// Nippon.Kagaku Zasshi. 1976. - №2. - P. 315-321.

57. Gilbert, A. M. Pyrazolidine-3,5-diones and' 5-hydroxy-lH-pyrazole-3(2H)-ones, Inhibitors of UDP-N-acetylenolpyruvyl Glucosamine Reductase / A. M. Gilbert et al. // Journal of Medicinal Chemistry. 2006. - №20. - P. 6027-6036.

58. Gohee, Y. New anorectical 1,3,4-oxadiazines / Y. Gohee, A. Boucherle, M. Robin // European Journal of Medicinal Chemistry. 1986. - Vol. 21. - P. 403410.

59. Haider, N. Product Class 10: Phthalazines / N. Heider, W. Holzer // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 16.- Georg Thieme Yerlag, 2003. P. 315-372.

60. Haider, N. Product Class 8: Pyridazines / N. Heider, W. Holzer // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 16.- Georg Thieme Yerlag, 2003. P. 125-250.

61. Hall, I. H. The cytotoxic activity of 1-acyl- and l,2-diacyl-4,4-diethyl-3,5-pyrazolidinediones. / I. H. Hall et al. // Anticancer Research. 1995. - №1. - P. 199-204.

62. Heindel, N. D. Thiohydrazides and acetylene esters a new route to 1,3,4-thiadiazoles / N. D. Heindel, G. Friedrich, M. C. Tsai // Journal of Heterocyclic Chemistry. - 1980. - №1. - P. 191-193.

63. Heydenhauss, D. Substituted 1-acylamino-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-2-thiones / D. Heydenhauss, F. Hofmann, G. Jaenecke, H. Voigt // Zeitschrift der Chemie. 1975. - №12. - P. 476-477.

64. Holla, B. S. The reaction of a, p-acetylenic ketones with aroylhydrazines / B. S. Holla, К. V. Udupa, K. R. Spidhar // Bulletin of Chemical Society of Japan. -1989.-P. 3409-3411.

65. Holmberg, B. Benzoyl- and thobenzoylthoglycolic acids and thiobenzo-hydrazides / B. Holmberg // Arkiv Kemi. 1944. - Vol. 17A. - №23. - P. 1-10.

66. Holmberg, B. Information on thiobenzoic acid hydrazide / B. Holmberg // Arkiv Kemi. 1947. - Vol. 25A. - №18. - P. 1-18.

67. Holmberg, B. Reactions of methyl- and methylenethiobenzohydrazides / B. Holmberg // Arkiv Kemi. 1955. - C. 65-80.

68. Holmberg, B. Reactions of methyl- and methylenethiobenzohydrazides / B. Holmberg // Arkiv Kemi. 1955. - P. 47-64.

69. Hoppenbrouwers, W. J. 1,3,4-Oxdiazines / W. J. Hoppenbrouwers // Re-cueil de Travaux de Chimie. 1934. - P. 325-354.

70. Ivarez, M. Product Class 5: Isoquinolines / M. Ivarez, J. A. Joule I I Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 15.- Georg Thieme Verlag, 2004. P. 661-838.

71. Izydore, R. A. Reaction of 4,4-diethyl-3,5-pyrazolidinedione with- car-boxylic acid anhydrides. N-acylation vs O-acylation / R. A. Izydore, J. A. Bernal-Ramirez, P. Singh // Journal of Organic Chemistry. 1990. - №12. - P. 376Г-3767.

72. Jaenecke, G. Substituted l-acylamino-2-oxo-l,2,3,4-tetrahydropyrimidines / G. Jaenecke, R. Richter, H. Voigt, D. Heydenhauss // Zeit-schrift der Chemie. 1982. - №12. - P. 446.

73. Jain, S. Synthesis and antibacterial activity of 5-aryl-2-acylthio-1,3,4-oxadiazoles / S. Jain, P. Mishra // Indian Journal of Heterocyclic Chemistry. 2004.- №4. P. 307-310.

74. Jensen, F. Introduction to Computational Chemistry / F. Jensen. John Wiley & Sons Ltd., 2007. - 599 p.

75. Jensen, K.-A. Formation of thiadiazoles and tetrazines in the preparation of thiohydrazides / K.-A. Jensen, C. Pedersen // Acta Chemica Scandinavica: 1961. -C. 1124-1129.

76. Jensen, K.-A. Studies of Thioacids and Their Derivatives. П. Carbox-ymethyl Dithioesters / K.-A. Jensen, C. Pedersen // Acta Chemica Scandinavica. -1961.-C. 1087-1096.

77. Jensen, K.-A. Studies of Thioacids and Their Derivatives. III. Methods for the Preparation of Thiohydrazides / K.-A. Jensen, C. Pedersen // Acta Chemica Scandinavica. 1961. - C. 1097-1103.

78. Jensen, K.-A. Studies of Thioacids and Their Derivatives. V. N-Substi-tuted Thiohydrazides / K.-A. Jensen, C. Pedersen // Acta Chemica Scandinavica. -1961.-C. 1109-1123.

79. Jochheim, M. Reactions of l,3-Dithietane-2,4-diylidenebis(cyanoacetic Acid Alkyl Esters) and 2-Cyano-3,3-bis(methylsulfanyl)acrylic Acid Ethyl Ester / M. Jochheim, H. G. Krug, R. Neidlein, C. Klaus // Heterocycles. 1995. - №6. - P. 1235-1250.

80. Joule, J. A. Product Class 13: Indole and Its Derivatives / J!. A. Joule // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 10.- Georg Thieme Verlag, 2000. P. 361-652.

81. Kartrizky, A. Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Vol.5. Elsevier Science Ltd., 1997. - P. 1-344.

82. Kato, S. Ghalcogenocarboxylic Acid Derivatives / S. Kato // Topics in Current Chemistry, Vol. 251. Springer, 2005. - 272 p.

83. Keller, P. A. Product Class 2: Pyridinones and Related Systems / P. A. Keller // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 15. Georg Thieme Verlag, 2004. - P. 285-388.

84. Kikelj, D. Product Class 17: Thiazoles / D. Kikelj, U. Urleb // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 11. Georg Thieme Verlag, 2001. - P. 627-834.

85. Koutentis, P. A. 1,3,4-Thiadiazoles / P. A. Koutentis, C. P. Constanti-nidcs // Comprehensive Heterocyclic Chemistry III, Vol.5. Elsevier, 2008. - P. 568-605.

86. Larsen, R. D. Product Class 3: Quinolines / R. D. Larsen, D. Cai // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 15.- Georg Thieme Verlag, 2004. P. 389-495.

87. Larsen, R. D. Product Class 4: Quinolinones and Related Systems / R. D. Larsen // Science of Synthesis: Houben-Weyl Methods of Molecular Transformations, vol. 15. Georg Thieme Verlag, 2004. - P. 551-660.

88. Li, Z. Microwave-accelerated solvent-free synthesis of 1,3,4-oxadiazoles using polymer-supported dehydration reagent / Z. Li, J. Yu, R. Ding, Z. Wang, X. Wang // Synthetic Communications. 2004. - №16. - P. 2981-2986.

89. Lieber, E. 5-Aryl and 5-alkyl-l,2,3,4-thiatriazoles / E. Lieber, C. N. R. Rao, R. C. Orlowski // Canadian Journal ofrChemistry. 1963. - C. 926-931.

90. Liu, F. Synthesis of 1,3,4-oxadiazoles derivatives containing quinoxaline moiety / F. Liu, Z. Zhang, C. Zhang, Y. Liu // Huaxue Shiji. 2000. - №1. - P. 1517.

91. Loetchutinat, C. Synthesis and Evaluation of 5-Aryl-3-(4-hydroxyphenyl)-l,3,4-oxadiazole- 2-(3#)-thiones as P-Glycoprotein Inhibitors / C. Loetchutinat, F. Chau, S. Mankhetkorn // Chemical-Pharmaceutical Bulletin. 2003.- №6. P. 728-730.

92. Manetti, F. F Combination of Docking/Dynamic Simulations and Phar-macophoric Modeling To Discover New Dual c-Src/Abl Kinase Inhibitors / F. Manetti et al. // Journal of Medicinal Chemistry. 2006. - №11. - P. 3278-3286.

93. Mashraqui, S. H. An expeditious and'convenient one-pot synthesis of 2,5-disubstituted-l,3,4-oxadiazoles / s. H. Mashraqui, S. G. Ghadigaonkar, R. S.

94. Kenny // Synthetic Communications. 2003. - №14. - P. 2541-2545.

95. Matsubara, Y. Synthesis of 2,4-diphenyl-5-oxo-4,5-dihydro-l,3,4-thiadiazole and 2,4-diphenyl-5-oxo-5,6-dihydro-l,3,4-thiadiazine / Y. Matsubara, K. Kitano, T. Kashimoto, S. Yamada, M. Yoshihara, T. Maeshima // Chemical Express. 1991.-№6.-P. 411-414.

96. Matysiak, J. 2-(2,4-Dihydroxyphenyl)-l,3,4-thiadiazole analogues: antifungal activity in vitro against Candida species / J. Matysiak , Z. Malinski // Bioor-ganicheskaia Khimia. 2007. - №6. - P. 640-647.

97. Mayer, R. Dithiocarbonsauren, deren Salze und Ester / R. Mayer, S. Scheithauter // Houben-Weyl Methods of Organic Chemistry, Vol. E05b. Georg Thieme Verlag, 1985. - P. 891-933.

98. Melin, J. Is the Fukui Function a Right Descriptor of Hard-Hard .Interactions? / J. Melin, F. Aparicio, V. Subramanian, M. Galvan, P. K. Chattaraj // Journal of Physical Chemistry A. 2004. - №13. - P.! 2487-2491.

99. Mogilaiah, K. Synthesis and antibacterial activity of some new l,8naphthyridinylaminophenyl-l,3,4-oxadiazoles / K. Mogilaiah, G. R. Sudhakar // Indian Journal of Heterocyclic Chemistry. 2001. - №2. - P. 163-166.

100. Molina, P. Pyrido2,l-/.[l,2,4]triazine derivatives from 2-(ethoxycarbonyl)-4,6-diphenylpyrilium salts and hydrazides / P. Molina, A. Tarraga, M. Lorenzo Pena // Synthesis. 1986. - №3. - P. 234-237.f

101. Montgomery Jr., J.A. A complete basis set model chemistry. VII. Use ofi the minimum population localization method / J. A. Montgomery, Jr., M. J. Frisch, J.

102. W. Ochterski // Journal of Chemical Physics. 2000: - Vol. 112. - № 15. - P. 65326542.

103. Murai, T. Functions with Two Chalcogens Other Than Oxygen-/ T. Mu-rai // Comprehensive Organic Functional Group Transformations II, Vol 5. Elsevier, 2004. -Pi 493-518:

104. Mutreja, H. C. Synthesis of some analogs of naturally occurring biologically active pyrazoles / H. C. Mutreja, G. S. Saharia, H. R. Sharma // Indian Journal of Forestry. 1978. - №3. - P. 234-236.

105. Najdenski, H. In vitro study of antiyersiniosis effect of Oxadin / H. Naj-denski, Y. Michailov, S. Nikolova, A. Vesselinova // Die Pharmazie. 2000. - №7. -P. 548-549.

106. Ojha, А. С. Synthesis of 2-pyrazoline-5-ones and them medicinal properties / A. C. Ojha, R. K. Jain, Ml Agrawal // National Academy of Science Letters. -1983.-№5.-P. 157-158.

107. Pandey, V. K. Synthesis and antiviral activity of l-(oxoalkyl/aryl)-3-methyl-4-arylamidoalkyl-5-oxopyrazoles / V. K. Pandey, P. Garg, В/ L/ Chowdhury // Biological Memoirs. 1987. - № 1. - P. 83-87.

108. Pandey, V. K. Synthesis of l-arylamido-2-oxo-4-methylpyrido&. phe-nothiazines / V. K. Pandey, M. M. Gupta // Indian Journal1 of Chemistry, Section B.- 1997.-№1.-P. 70-72.

109. Peet, N. P. The first authentic synthesis of the previously reported 2-phenyl-3,4-dihydro-5H-l,3,4-benzotriazepine-5-one / N. P. Peet // Synthesis. 1984. -№12.-P. 1065-1068.

110. Pfeiffer, W.-D. 1,3,4-Oxadiazines and 1,3,4-Thiadiazines / W.-D. Pfeif-fer // Comprehensive Heterocyclic Chemistry III, Vol.9. Elsevier, 2008. - P. 402455.

111. Purohit, D. M. Novel method of synthesis and antimicrobial evaluation of 2-aroyl-6-hydroxy/chloro/hydrazine/carboxymethoxy-3(2H)-pyridazinones / D. M. Purohit, V. H. Chah // Heterocyclic Communications. 1997. - №3. - P. 267271.

112. Rao, M. S. Benzoxadiazines. Part IV. Synthesis of some novel 3,8-diarylbenzol,2-e:4\5V.bis[T,3;^^ S:

113. Rzeski,.W. Anticancer, neuroprotective activities and^ computational studies of 2-amino-13i4-thiadiazole based): compound / W. Rzeski, J; Matysiak, M. Kandefer-Szerszen // Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2007. - №9. - P. 32013207. .

114. Scherowsky, G. Synthesis of 2,4-diaryl-1,3,4-thiadiazolium salts / G. Scherowsky // Tetrahedron betters. 1971. - P. 4985-4988.

115. Shaban, M. A. E. Synthesis of Condensed 1,2,4-triazolо3,4-z. Hetero-cycles / M. A. E. Shaban; A. Z. NasrV/ Advances in Heterocyclic Chemistry, vol. 49. -San Diego, С A, 1990: P. 279-384.t '