Стандартизация количественного тестирования индивидуального и комбинированного токсического действия солей меди(II), серебра(I), цинка(II), никеля(II) и клотримазола тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Синюк, Татьяна Федоровна

• Синюк, Татьяна Федоровна
• кандидат фармацевтических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Синюк, Татьяна Федоровна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Современное состояние проблемы стандартизации количественного тестирования биологической активности химических веществ.

1.1.1. Стандартизация биологических тест-моделей, используемых для изучения биологической активности химических веществ.

1.1.2. Характеристика тест-объектов Saccaharomyces cerevisiae, Candida albicans, Paramecium caudatum.

1.1.3. Тесты для оценки биологической активности химических веществ.

1.1.4. Методы измерения биомассы клеточных тест- моделей.

1.2. Методы количественного прогнозирования комбинированного действия веществ. Понятие антагонизма и синергизма действия.

1.3. Математические модели роста биологических популяций.

1.4. Механизм биологической активности химических веществ в организме.

1.4.1. Биологическое действие ионов цинка, меди, серебра, никеля и противогрибковых препаратов на клетку.

Глава 2. Объекты и методы исследования

2.1. Объекты исследования.

2.2. Методы исследования.

Глава 3. Идентификация кинетических коэффициентов экотоксикологи-ческой модели.

3.1. Влияние концентрации глюкозы на кинетику роста дрожжей.

3.2.Влияние концентрации инокулята на кинетику роста дрожжей.

3.3. Определение стандартных параметров роста культуры Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans, Paramecium caudatum для количественного тестирования индивидуального действия биологически активных веществ

3.3.1. Определение параметров роста культуры Saccharomyces cerevisiae.

3.3.2. Зависимость кинетики роста культуры Saccharomyces cerevisiae от времени введения стандартных солей ZnS04, CuS04.

3.3.3. Определение параметров роста культуры Candida albicans.

3.3.4. Определение параметров роста культуры Paramecium caudatum.

Глам 4. Определение параметров роста культур Saccharomyces cerevisiae и Candida albicans для количественного тестирования комбинированного действия биологически активных веществ

4.1. Методы оценки комбинированного действия солей ZnS04 и CuS04 на культуре Saccharomyces cerevisiae.

4.2. Определение параметров роста культуры Saccharomyces cerevisiae в присутствии комбинаций солей ZnS04 и CuS04.

4.2.1. Исследование изменений распределения по размеру и объёму клеток Saccharomyces cerevisiae в процессе роста при индивидуальном и комбинированном воздействии стандартных солей ZnS04 и CuS04.

4.3. Определение стандартных параметров роста культуры дрожжей Candida albicans в присутствии клотримазола.

4.4. Определение стандартных параметров роста культуры дрожжей Candida albicans в присутствии смеси клотримазола и AgN03.

4.5 Расчёт цитостатических, цитоцидных и ингибирующих концентраций ZnS04 и CuS04 для культуры Saccharomyces cerevisiae. Расчёт диаграмм «концентрации химических агентов - эффект» для прогнозирования комбинированного действия ZnS04 и CuS04.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Стандартизация количественного тестирования индивидуального и комбинированного токсического действия солей меди(II), серебра(I), цинка(II), никеля(II) и клотримазола»

Актуальность темы. Одним из направлений получения новых лекарственных препаратов является создание многокомпонентных форм, что требует разработки объективных методов оценки активных компонентов в комбинациях и их оптимального соотношения. Изучение индивидуального действия компонентов и их комбинаций требует большого числа экспериментов в широком интервале концентраций с использованием лабораторных животных. В связи с этим представляется перспективной разработка способов предварительных исследований на модельных объектах, не требующих использования лабораторных животных, в частности, на микробных культурах.

Число известных разработок стандартных методик биотестирования химических веществ на микробных культурах пока невелико. В качестве показателей биологической активности различных веществ, как правило, используют суммарные характеристики, такие, как лаг-период, максимальная скорость роста, предельная ёмкость. При использовании таких величин количественная оценка биологической активности веществ затруднительна, особенно при изучении комбинированного действия двух и более веществ.

Поэтому стандартизация количественного тестирования биологически активных веществ на микробных культурах представляется актуальной.

Проблема взаимодействия одновременно назначенных лекарств, изменение характера действия лекарственных веществ как компонентов лекарств, так же, как и возможность прогнозирования реакций организма, составляет важную часть биофармацевтического поиска. Теоретически эти вопросы изучены недостаточно. Существующие взгляды на принципы количественной оценки комбинированного действия противоречивы. Особенно большие трудности представляет прогнозирование зависимости доза - эффект. В связи с этим разработка теории комбинированного действия и её экспериментальная апробация также актуальна.

Цепь ■ основные задачи исследования.

Цель работы: разработка методики стандартизации количественного тестирования индивидуального и комбинированного действия веществ на микробных культурах Saccaharomyces cerevisiae, Candida albicans, Paramecium caudatum.

Поставленная цель определила следующие основные задачи исследования.

1. Обосновать выбор модельных микробных культур, осуществить выбор условий и способов тестирования.

2. Разработать методику стандартизации тестирования веществ на модельных микробных культурах.

3. Определить кинетические параметры экотоксикологической модели.

4. Исследовать влияние условий культивирования и активных добавок на параметры роста микробных культур.

5. Разработать количественные принципы оценки комбинированных эффектов на основе экотоксикологической модели. Установить эффекты комбинированного действия солей цинка и меди(П).

6. Для верификации предложенных принципов - разработать методы количественной оценки противогрибковой активности клотримазола и комбинации клотримазола с солью серебра(1) на рост Candida albicans.

7. Разработать метод расчёта цитоцидных, цитостатических и ингибирующих концентраций химических веществ.

8. Разработать метод расчёта диаграмм «концентрации химических агентов -эффект» для прогнозирования комбинированного действия химических веществ.

Научная новизна. Впервые на основе экотоксикологической модели проведена стандартизация тестирования на микробных культурах Saccaharomyces cerevisiae, Candida albicans, Paramecium caudatum.

Показано влияние условий культивирования микробных культур на кинетические параметры экотоксикологической модели.

Разработана ультразвуковая методика прип -овления стабильного гидрозоля клотримазола и проведена количественная оценка его биологической активности на культуре Candida albicans.

Апробированы оптические дифракционные методы для оценки биомассы, размеров и объёма клеток культуры Saccaharomyces cerevisiae.

Предложены количественные принципы оценки комбинированных эффектов: аддитивности, синергизма, антагонизма. Установлены эффекты действия комбинаций ZnS04+CuS04, клотримазола + AgN03.

Проведён теоретический расчёт цитоцидных, цитостатических и ингибирующих концентраций и расчёт диаграмм «концентрации химических агентов - эффект» для прогнозирования комбинированного действия солей ZnS04 и CuS04.

Практическая значимость. Разработана методика стандартизации тестирования на микробных культурах: Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans, Paramecium caudatum.

Разработана ультразвуковая методика приготовления стабильного гидрозоля клотримазола. Показана целесообразность предложенного метода испытания гидрозоля клотримазола и оценки его биологической активности на культуре Candida albicans по сравнению с существующими методами.

Разработанный способ расчёта цитоцидных, цитостатических и ингибирующих концентраций индивидуальных веществ и их смесей может использоваться для выбора дозы компонентов лекарственного препарата.

Предложенные диаграммы «концентрации химических агентов -эффект» целесообразно использовать для прогнозирования комбинированных эффектов лекарственных препаратов.

Показано, что когерентно-оптический метод и выведенные соотношения могут успешно использоваться для оценки биомассы микробных культур.

Апробация работы. Результаты исследований представлены и доложены на V Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 1998); на XVI Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Санкт-Петербург, 1998); на V Международной конференции «Биоантиоксидант» (Москва, 1998); на Международной конференции «Биохимическая физика на рубеже столетий» (Москва, 2000); на VII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2000); на Международной конференции молодых учёных «Химия и технология пищевых веществ. Экологически безопасные технологии на основе возобновляемых природных ресурсов» ( Москва, 2000); на IX

Международной конференции «Математика, компьютер, образование» (Дубна, 2002).

Публикации. Основные результаты работы отражены в 10 публикациях. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова (№ государственной регистрации 0910039990), соответствует проблеме совета АМН РФ №48 "Фармация".

Положения, выносимые на защиту.

Результаты определения стандартных параметров роста микробных культур Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans, Paramecium caudatum.

Результаты по оценке действия комбинаций солей ZnS04, C11SO4 и по исследованию влияния солей ZnS04 и CuS04 на изменение распределения по размеру и объёму клеток Saccharomyces cerevisiae. Результаты определения стандартных параметров роста культуры Candida albicans в присутствии клотримазола, комбинации клотримазола и соли AgN03. Методы прогнозирования комбинированного действия солей ZnS04 и CuS04.

Структура я объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, трёх глав, отражающих результаты экспериментальных исследований, общих выводов, списка цитированной литературы и приложения. Работа изложена на 125 страницах, содержит 29 таблиц, 28 рисунков. Список литературы включает 145 источников.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Синюк, Татьяна Федоровна

выводы

1. На основании проведённых испытаний солей биогенных элементов, четырёх питательных сред, различных условий, способов культивирования на дрожжах Saccharomyces cerevisiae 776 шт., Candida albicans АТСС 885-653 и инфузориях Paramecium caudatum предложены в качестве стандартов биологически активных веществ соли ZnS04, CuS04, AgN03, NiS04, а в качестве стандартной питательной среды - глюкозо-аммонийная среда и среда Лозина - Лозинского.

2. Проведён анализ кинетических коэффициентов экотоксикологической модели и дана оценка адекватности модели при расчёте эффектов, влияющих на кинетику роста популяций Saccharomyces cerevisiae 776 шт., Candida albicans АТСС 885-653, Paramecium caudatum.

3. Разработан метод определения концентрации биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae 776 шт. когерентно-оптическим методом. Получены соотношения, позволяющие оценивать концентрацию дрожжей в диапазоне

J О I разведений 1*10 - 1 * 10 мл с погрешностью ±9%.

4. На основе экотоксикологической модели разработан метод определения стандартных параметров роста тест-культуры в контроле и в присутствии биологически активных веществ.

5. Определены стандартные параметры роста культур Saccharomyces cerevisiae 776 шт., Candida albicans АТСС 885-653, Paramecium caudatum в присутствии ZnS04, CuS04, AgNCh, NiS04.

6. На основе экотоксикологической модели разработан метод определения стандартных параметров роста тест-культуры в присутствии комбинаций биологически активных веществ. Разработаны количественные принципы оценки комбинированных эффектов: аддитивный, ниже аддитивного, выше аддитивного.

7. Определены стандартные параметры роста культуры дрожжей Saccharomyces cerevisiae 776 шт. при комбинированном действии солей ZnS04 +C11SO4. Установлено, что эффекты комбинированного действия носят аддитивный характер или ниже аддитивного в зависимости от выбранного интервала концентраций.

8. Получены гистограммами распределения дрожжей Saccharomyces cerevisiae 776 шт. по размеру и «объёмной доле» в средах с добавками солей ZnS04, C11SO4 и их смесей. Показано, что ионы цинка защищают клетки дрожжей от разрушений, вызываемых ионами меди.

9. Разработана методика приготовления стандартного золя клотримазола на основе ультразвуковой обработки суспензии клотримазола с поверхностно активными веществами.

10. Определены стандартные параметры роста культуры Candida albicans АТСС 885-653 в присутствии золя клотримазола. Установлены минимальные цитоцидные и минимальные ингибирующие концентрации клотримазола.

11. Измерена противогрибковая активность смеси клотримазола и AgN03 на рост культуры Candida albicans АТСС 885-653. Установлено, что эффекты комбинированного действия смеси носят аддитивный характер или выше аддитивного, в зависимости от выбранного интервала концентраций.

12. Разработан метод расчёта ингибирующих, цитостатических и цитоцидных концентраций биологически активных веществ.

13. Разработан метод расчёта диаграмм концентрации химических агентов - эффект для прогнозирования комбинированного действия биологически активных веществ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Синюк, Татьяна Федоровна, 2002 год

1. Зигель X., Зигель А. Некоторые вопросы токсичности ионов металлов.-М.:Мир,1993.-С.229-232.

2. Ponz M.N., Chanel S. Effects of heavy metals volatiles production in alcoholic fermentation by Saccharomyces cerevisiae. // J. Ferment, and Bioentg.-1991.-V.72, №l.-P.61-63.

3. Meshitsuka S., Ishizawa M., Nose T. Uptake and toxic effects of heavy metal ions: interactions among cadmium, copper and zinc in cultured cells. // J. Experientia.-1987.-V.43, №2.-P. 151-156.

4. Линии лабораторных животных.-М.,1983.-С. 132-144.

5. Аксёнов В.И. Общие задачи контроля качества здоровья лабораторных животных. // Актуальные вопросы стандартизации лабораторных животных для медико биологических исследований.-М.,1988.-С.3-5.

6. Адаме Р. Методы культуры клеток для биохимиков.-М.,1983.-С. 18-21.

7. Государственная Фармакопея СССР. Т.2.-М.,1989.-С. 187-225.

8. Берри Д. Биология дрожжей.-М.,"Мир",1985,С. 12.

9. Коновалов С.А. Биохимия дрожжей.-М.,"Пищ. пром.", 1980, С. 14-20.

10. Бабьева И.П., Чернов И.Ю. Биология дрожжей.-М., 1992,С.20.

11. Альберте Б., Брей Д., Льюис Дж., Рофф М., Роберте К., Уотсон Дж. Молекулярная биология клетки.-М.,"Мир",1994,Т.1,С.407.

12. Джавец Э., Мельник Дж.Л., Эйдельберг Э.А. Руководство по медицинской микробиологии.- М.,"Медицина",1982,Т.2,С.45.

13. Шлегель Г. Общая микробиология.-М.,"Мир",1987,С.67.

14. Физиология и молекулярная биология болезнетворных микроорганизмов.- Горький, 1988,С. 11.

15. Квасников Е.И., Щелокова И.Ф. Дрожжи. Биология. Пути использования.-Киев,1991,С.115.

16. Сафронова М.М. Хронический кандидозный вульвовагинит.-М.,"Медицина", 1991,С.22.

17. Быков B.J1. Динамика инвазионного роста Candida albicans в тканях хозяина. // Вестник дерматологии и венерологии.-1990.-№4.-С.25-28.

18. Stenderup A. Pathogenic yeast. // Yeast.-1989.-№5 .-Р.25.

19. Разумовский П.А., Атаманюк Д.И., Златоуст М.А., Якимова Г.И. Действие биологически активных веществ на микроорганизмы.- Кишинёв, 1975,С.29-31.

20. Грин Н., Стаут У., Тейлор Д. Биология.-М.,"Мир",1990,Т.1, С.101-105.

21. Догель В.А. Зоология беспозвоночных.-М.,"Наука", 1975, С.627-629.

22. Барнс Р., Кейлоу П., Олив П., Голдинг Д. Беспозвоночные.-М.,"Мир", 1992,С.432.

23. Codina J.C., Perez-Garcia A, Romero Р, de Vicente A. A comparison of microbial bioassays for the detection of metal toxicity. // J. Arch. Environ. Contam. Toxicol.-1993.-V.25, №2.-P.250-254.

24. Guilhermino L, Diamantino T.C., Ribeiro R, Gonsalves F, Soares A.M. Suitability of test media containing EDTA for the evaluation of acute metal toxicity Dafnia magna straus. // J. Ecotoxicol. Environ. Saf.-1997.-V.38, №3.-P.292-295.

25. Biesinger K.E., Christensen G.M., Fiandt J.T. Effects of metal salt mixtures on Dafnia magna reproduction. // J. Ecotoxcicol. Environ. Saf. -1986.-V.11, №1.-P.9-14.

26. Иванов А.Ю., Фомченко B.M., Хасанова Л.А.,Курамшина З.М., Садиков М.М. Влияние ионов тяжёлых металлов на электро- физические свойства бактериальных клеток Anacystis nidulans и Esherichia coli. // Микробиология.-1992.-Т.61, №3.-С.455-463.

27. Skytta, Mattila Sadnolm.T. A quantitative methode for assesing bacteriocins and other food antimicrobials by automated turbidometry. // J. Microbiological Methods.-1991 .-V. 14, №2.-P.77-88.

28. Henryk R. A rapid agar diffusion test for quantifying the toxic effects of copper on microorganism.-1992.-V.41, №l-2.-P.57-64.

29. Чистякова Т.И., Дедюхина Э.Г., Ерошин B.K. Ингибирование роста Candida valida ионами меди. // Микробиология.- 1992.-Т.61, №4.-С.585-590.

30. Azenha М.Т., Cabral J.P.S. Organic ligands reduce copper toxicity in Pseudomonas syringae. //Environmental Toxicology and Chemystry.-1995.-V. 14, №3.-P.369-373.

31. Андреева E.A., Бирюк А.И., Ховрычев М.П., Работнова И.А. Химический состав и морфологические изменения клеток в хемостатной культуре Candida utilis, ингибированной ионами цинка. // Микробиология,-1983.-Т.52, №6.-С.585-590.

32. Herkovits J., Helguero L.A. Copper toxicity and copper-zinc interactions in amphibian embryos. // J. Sci. Total. Environs -1998.-V.221, №1.-P. 1-10.

33. Давыдова В.И., Рослый О.Ф., Герасименко Т.И., Пирогова Т.М. Экспериментальная оценка действия соединений меди и свинца. // Гигиена и санитария.- 1988.-Т.52 №4.-С.78-79.

34. Kwok Y.K.C., Tay Y.K., Goh C.L., Kamarudin A., Koh M.T., Seow C.S. Epidemiology and in vitro activity of antimycoticsagainst Candidal vaginal/skin/nail Infections in Singapor. // International journal of dermatology.-1998.-V.37, №2.-P. 145-149.

35. Siau H., Kerridge D. The effect of antifungal drugs in combination on the growth of Candida glabrata in solid and liquid media. // Journal of antimicrobial chemoterapy.-1998.-V.41, №3.-P.357-366.

36. Перт Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток.-М.,1978.-С.27-31.

37. Приезжее А.В., Тучин В.В., Шубочкин Л.П. Лазерная диагностика в биологии и медицине.- М.: Наука, 1989 с.240.

38. Козловская Л.В., Николаев А.Ю. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования.-М.: Медицина, 1984.- С.30-36.

39. Дубинин В.Н. Дифрактометрический метод оценки распределения популяции эритроцитов по диаметрам. // Анализ роста популяции биофизическими измерениями.-Н., 1984.-С.64-66.

40. Сафонова Л.П. Пространственно-частотный анализ форменных элементов крови: Автореф. дис. .канд. техн. наук. М: Моск. гос. техн. ун-т им. Н. Э. Баумана. 1998.-е. 16.

41. Safonova L. P., Spiridonov I. N. Blood analysis by coherent optical methods// Proceedings of SPIE.- 1997.- Vol. 2982.- P.232-238.

42. Begot C., Desnier I., Daudin J.D., Labadie J.C., Lebert A. Recommendations for calculating growth parameters by optical-density measurements. // Journal of microbiological methods.-1996.-V.25, №3.-P.225-232.

43. Работнова И.Л. Теория и практика непрерывного культивиро- вания.-М.,1980.-С.155-159.

44. Markx G.H., Davey C.L., Kell D.B. The permittistat: A novel type of tyrbidostat. // J. General Microbiology.-199l.-V. 137, №4.-P.735-743.

45. Taka H. Calorimetric analisis of microbial growth: with special reference to quantitative evaluation of drug action. // Tokai J. Experimental and Clinical Medicin.-1990.-V. 15, №5.-P.387-394.

46. Поглазова M.H. Определение концентрации эукариотных клеток по их интегральной флуоресценции. // Микробиология.-1995.-V.64, №5.-С.705-713.

47. Копанёв В.А., Гинзбург Э.Х., Семёнова В.Н. Метод вероятностной оценки токсикологического эффекта.-Новосибирск, 1988.-С.44-46.

48. Принципы и методы токсикологической оценки химических веществ. -Гигиенические критерии состояния окружающей среды, 6 ВОЗ.-Женева, 1981 .-С. 312.

49. Применение количественных методов в экологии. Под ред. Безель В.С.Свердловск, 1979.-С.23.

50. Кудрин А.Н., Пономарёва Г.Т. Применение математики в экспериментальной и клинической медицине.-М.,"Медицина",1967.

51. Сова Р.Е. Использование математической теории эксперимента при оценке комбинированного действия химических веществ. // Гигиена и санитария.-1984.-№1.-С.39-41.

52. Штабский Б.М., Федоренко В.И. О 2-х видах аддитивности комбинированного действия вредных веществ: определение понятий, способы оценки. // Гигиена и санитария.-1990.-№2.-С. 80-81.

53. Давыдова В.И., Рослый О.Ф., Герасименко Т.И., Пирогова Т.М. Экспериментальная оценка комбинированного действия соединений меди и свинца. // Гигиена и санитария.-1988.-№4.-С.78-79.

54. Тимофеевская J1.J1., Мельникова Н.Н. К вопросу об оценке комплексного действия химических соединений. // Гигиена и санитария.-1980.-№8.-С.50-51.

55. Беллман Р. Математические методы в медицине.-М., 1987.-С.20-25.

56. Антомонов М.Ю. Вероятностный подход к описанию зависимостей доза -время эффект. // Гигиена и санитария.-1991.-№8.-С.76-77.

57. Кадыров Х.К., Антомолов Ю.Г. Синтез математических моделей биологических и медицинских систем.-Киев,"Наук, д.", 1974.

58. Полуэктов Р.А., Бых Ю.Г., Швытов И.А. Динамические модели экологических систем.-Л.,"Гидромет. издат.",1980.

59. Джефферс Дж. Введение в системный анализ: применение в экологии.-М., 1981 .-С.41 -51,69-78,94-99.

60. Вольтерра В. Математическая теория борьбы за существование.-М.,1976.

61. Gause G.F. The struggle for existence.-Baltimor., 1934.-P.6-35.

62. Абросов H.C., Ковров Б.Г. Анализ видовой структуры трофического уровня одноклеточных.-Новосибирск, 1977.

63. Романовский Ю.М., Степанов Н.В., Чернавский Д.С. Математическая биофизика.-М., Наука, 1984, С.56-80,139-158.

64. Фурляева А.В., Тушкова Г.И. Лимитирование и ингибирование роста микроорганизмов. Всесоюзн. конф. Тез. докл.-Пущино,1989,С.93.

65. Федосеев К.Г. Механизм переноса питательных веществ в клетку. В сб.: Математическое моделирование микробиологических процессов.-Пущино, 1973,С.30-56.

66. Печуркин Н.С., Терехов И.А. Анализ кинетики роста и эволюции микробных популяцию-Новосибирск,"Наука", 1975,С.23-37,42-55,84-91.

67. Соколов Д.П., Лирова С.А., Соколова Е.А. Влияние циклических изменений условий культивирования на кинетику роста дрожжей и физиологические особенности дрожжей. // Микробиология.-1983.-Т.52, №6.-С.705.

68. Wijtzes Т ., Mcclure P.J., Zwietering М.Н., Roberts Т.А. Modeling bacterial growth of Listeria monocytogenes as a function of water activity, pH and temperature. // International journal of food microbiology.-1993 .-V. 18, №2.-P.139-149.

69. Малашенко Ю.Р., Мучник Ф.В., Романовская B.A., Садовников Ю.С. Математические модели и ЭВМ в микробиологической практике.-Киев, "Наук, думка", 1980,С .88-91.

70. Иваницкая И.Г., Базыкин М.Н. Моделирование роста пекарских дрожжей в непрерывных культурах.-Пущино, 1988.

71. Работнова И.Л., Позмогова И.Н. Хемостатное культивирование и ингибирование роста микроорганизмов.-М.,"Наука",1979.

72. Заславский Б.Г. Математическое исследование возрастной структуры популяции микроорганизмов. В хн.: Модели структурно - функциональной организации биологических систем.-М.,,'Наука",1972,С.113.

73. Степанов Н.В. Математические модели непрерывной культуры микроорганизмов, распределение по возрастам и размерам.-ГГУ,1980.

74. Назаренко В.Г., Сельков Е.Е. Автоколебательные режимы роста клеточных популяций. —В сб.: Математическое моделирование микробиологических процессов.-Пущино,1973,С.113-119.

75. Минкевич И.Г. Базовая модель микробной культуры как распределённой системы. // Биофизика.-1992.-Т.З7, №2.-С.10-13.

76. Ершов Ю.А. Квазихимические модели роста биологических популяций под действием ингибиторов и промоторов. // Физ. химия.-1998.-Т.72, №3.-С.347-353.

77. Альберт А. Избирательная токсичность.- Москва,"Медицина", 1989.-Т. 1,С.15-30,261-262,332-338,Т.2,С.130-140.

78. Бинтам Ф., Коста М., Эйхенбергер Э. Некоторые вопросы токсичности ионов металлов.-М.,"Мир",1993.

79. Hultberg В., Andersson A., Isaksson A. Alterations of thiol metabolism in human cell lines induced by low amounts of copper, mercury or cadmium ions. // Toxicology.-1998.-V. 126, №3 .-P.203-212.

80. Venugopal В., Luckey T.D. Metal toxicity in mammals.- N.Y., 1978, P.409.

81. Хьюз M. Неорганическая химия биологических процессов,-М.,"Мир"1983,С.345.

82. Лебедева А.Ф., Саванина Я.В. Металлотионеины. // Вестник Московского университета.-1998.-Сер. 16, №2.-С.42-49.

83. Apostolova М., Bontchev P.R., Manchev Ch., Siracova J. Apometallothionein in rat liver. // Chromatogr. Biomed. Appl.-1993.-V.620,№2.-P.191-197.

84. Choudhuri S., McKim J.M., Klaassen C.D. Role of hepatic lysosomes in the degradation of metallothionein. // Toxicol. Appl. Pharmacol.-1992.-V.l 15,№1.-P.64-71.

85. Dameron C.T., Harrison M.D. Mechanisms for protection against copper toxicity. // Clin. Nutr.-1998.-V.67,№5.-P. 1091 -1097.

86. Tohoyama H., Inouhe M., Joho M., Murayama T. Production of metallothionein in copper- and cadmium resistant strains of Saccharomyces cerevisiae. // Industrial microbiology.-1995 .-V. 14,№2.-P. 126-131.

87. Butt T.R., Sternberg E.J., Gorman J.A., Clark P., Hamer D., Rosenberg M., Crooke S.T. Copper metallothionein of yeast, structure of the gene, and regulation of expression. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1984,81, №11.-P.3332-3336.

88. Wright C.F., Hamer D.H., McKenney K. Autoregulation of yeast copper metallothionein gene depends on metal binding. // Biological chemystry.-1988.-V.263,Jfe3.-P. 1570-1574.

89. Liu J., Kershaw W.C., Klaassen C.D. The protective effect of metallothionein on the toxicity of various metals in rat primary hepatocyte culture. // Toxicol. Appl. Pharmacol.-1991 .-V. 107,№ 1 .-P.27-34.

90. Sugawara N., Sugawara Ch. Relationship between ceruloplasmin and Cu status involving metallothionein induced by several heavy metals in the mouse. // Arch. Toxicol.-1987.-V.59,№6.-P.432-436.

91. Brewer G.J., Dick R.D., Johnson V.D., Brunberg J.A., Kluin K.J., Fink J.K. Treatment of Wilson's disease with zinc: XV long term follow - up studies. // Laboratory clinical medicin.-1998.-V.132,№4.-P.264-278.

92. Brouwer M., Brouwer T. Biochemical defense mechanisms against copper -induced oxidative damage in the blue crab, Callinectes sapidus. // Arch. Biochem. Biophis.-1998.-V.351,№2.-P.257-264

93. Okuyama M., Kobayashi Y., Inouhe M., Tohoyama H., Joho M. Effect of some heavy metal ions on copper induced metallothionein synthesis in the yeast Saccharomyces cerevisiae. // Biometals.-1999.-V.12,№4.-P.307-314.

94. Чистякова Т.И., Дедюхина Э.Г., Ерошин B.K. Влияние повышенных концентраций ионов цинка или марганца на показатели роста и состав биомассы дрожжей. // Микробиология.-1991.-Т.60, №6.-С.585-590.

95. Somashekar R.K., Kulashekaran M.D., Prabhu M.S. Toxicity of heavy metals to some fungi. // Int. J. Environ. Stud.-1983.-V.21,№3-4.-P.277-280.

96. Nies D.M., Silver S. Ion effux systems involved in bacterial metal resistances. // Industrial microbiology.-1995.-V. 14,№2.-P. 186-199.

97. Joho т., Inouhe M., Tohoyama H., Murayama Т. Nickel resistance mechanisms in yeast and other fungi. // Industrial microbiology.-1995.-V.l4,№2.-P. 164-168.

98. Микробиология.-М.,"Наука", 1973,C.20.

99. Каспарова С.Г., Давидова Е.Г., Дикаиская Э.М. Устойчивость к высоким концентрациям кобальта и его аккумуляция в клетках дрожжей. // Прикладная биохимия и микробиология.-1991.-Т.27, №6.-С.877-884.

100. Давидова Е.Г., Каспарова С.Г. О природе сорбции металлов клеточными стенками дрожжей. // Микробиология.-1992.-Т.61, №6.-С.685-687.

101. Fowler В.A., Nordberg G.F. Silver. In Hand book on the Toxicology of Metals, ed. By Friberg North - Holland Biomedical Press,-1979,-P.579.

102. Russel A.D., Hugo W.B. Antimicrobial activity and action of silver.-Progress in medicinal chemistry.-1994.-V.31 .-P.351-370.

103. Кореневский А.А., Сорокин B.B., Каравайко Г.И. Взаимодействие ионов серебра с клетками Candida utilis. // Микробиология.-1993.-Т.62, №6.-С.785.

104. Голубович В.Н. Ингибирующее действие серебра на Candida utilis: Автореф. дне. .канд. биол. наук.М.,1975.

105. Wells T.N., Scully P., Paravicini G., Proudfoot A.E., Payton M.A. Mechanism of irreversible inactivation of phosphomannose isomerase by silver ions and flamazine. // Biochemistry.- 1995.-У.34,№24.-Р.7896-7903.

106. ИЗ. Ершов Ю.А., Плетенёва Т.В. Механизмы токсичности неорганических соединений.- М.,"Медицина",1989,С.285.

107. Ershov Yu.A., Pleteneva T.V., Slonskaya Т.К. Evaluation of biological activity of the toxic agents in a unicellular model. // Bull. Exp. Biol. Med.-1997.-V.123,№5.-P.519-526.

108. Плетенева T.B., Глущенко H.H., Ольховская И.Н., Ершов Ю.А., Фаткулина Л.Д. Биологическое действие высокодисперсных порошков металлов. // Изв. АН СССР, Биол.-1989.-№ 3.-С. 11-16.

109. Stacey N.H., Klaasen C.D. Interaction of metal ions with cadmium-induced cellular toxicity. //J. Toxicol. Envir. Health.-1981.-V.7, № 1.-P.149-158.

110. Borenfreund Е., Puerner J.A. Cytotoxicity of metals, metel-metel and metal-chelator combinations assayed in vitro. // Toxicology.-1986.-V.39, № 2.-P.121-134.

111. Wataha J.C., Hanks C.T., Craig R.G. In vitro synergistic, antagonistic and duration of the exposure effects of metal cations on eucariotic cells. // J. Biomed. Mater. Res.-1992.-V.26,№ 10.-P. 1297-1309.

112. Егорова E.B., Минскер О.Б. Грибковые и некоторые паразитарные заболевания женских половых органов.-М./'Медицина", 1988,С.224.

113. Машковский М.Д. Лекарственные средства.- М.,"Медицина", 1988,Т.2.С.415.

114. Шеклаков Н.Д., Рукавишников В.М. Имидазольные препараты в микологии. // Вестник дерматолога.-1984.-№6.-С.51-57.

115. Туранова Е.Н., Мирходжаева И.Р. Терапевтическая эффективность канестена при лечении урогенитального кандидоза. // Вестник дерматолога.-1980.-№2.-С.51-53.

116. Ингибиторы патогеноспецифических механизмов биосинтеза в химиотерапии грибковых инфекций. // Biotech. Forum.-1989.-6 X94.-C.265.

117. Силин В. А., Мщенко В.М., Шеклаков Н.Д. Синтетические противогрибковые средства. // Вестник дерматолога.-1988.-№10.-С.26-32.

118. Antifungal drug clotrimazole inhibits cell divisions. // Chem. and Cug. News.-1995.-V.73,№24.-P.19.

119. Georgopapadakou N.M. Effects of drugs on lipids and membrane integrity of fungi. // Perspect. Antiinfec. Therapy: Bayer A G. Center. Symp.-1988-1989.-P.60-67.

120. Yang H.C., Taguchi H., Nishimura K., Miyaji M. Imidazole induced morphological mitochondria abnormalities of Candida albicans. //Mycoses.-1998.-V.41,№ll-12.-P.481-486.

121. Henry K. W., Nickels J.T., Edlind T.D. Up regulation of ERG genes in Candida species by azoles and other sterol biosynthesis inhibitors. // Antimicrobial agents and chemotherapy .-2000.-V.44,№ 10.-P.2693-2700.

122. Ahmed M.O., Elgibaly I., Ahmed S.M. Effect of cyclodextrins on the physicochemical properties and antimycotic activity of clotrimazole. // International journal of pharmaceutics.-1998.-V. 171 1 .-P. 111 -121.

123. Mastrolorenzo A., Scozzafava A., Supuran C.T. Antifungal activity of silver and zinc complexes of sulfadrug derivatives ioncorporating arylsulfonylureido moieties. // Europen journal of pharmaceutical sciences.-2000.-V.l 1,№2.-P.99-107.

124. Справочник по микробиологическим средам.- Махачкала, 1989.

125. Семёнов С.М. Лабораторные среды для актиномицетов и грибов.- М.,1990.

126. Руководство к практическим занятиям по микробиологии.-М.,''Наука", 1989,С.250.

127. Руководство к практическим занятиям по микробиологии под ред. Егорова И.С.-М.: Изд. МГУ, 1983,С.221.

128. Франк Н.А., Лопатин В.Н., Васильев В.А., Парамонов А.Е., Сидько Ф.Я. Экспресс анализ взвеси биочастиц с помощью поляриметра - гониометра. В кн.: Спектроскопические методы исследования в физиологии и биохимии.-Л.,"Наука", 1987,С. 198-201.

129. Сафонова Л.П., Спиридонов И.Н. Анализ морфологии форменных элементов крови когерентно оптическим методом. // Биомедицинская радиоэлектроника.-1999.-№4.-С.34-45.

130. Папулис А. Теория оптических систем и преобразований в оптике.-М.,"Мир", 1971,С.496.

131. Молчанов Г.И. Ультразвук в фармации.-М./'Медицина", 1980,С.69-81 .

132. Прозоровский А.С., Литвинова Т.Т. Ультразвук и его применение в фармацевтической практике.-М.,"Медицина", 1980,С.30.

133. Методические рекомендации по применению некоторых поверхностно активных веществ в технологии экстемпоральных лекарственных форм.-Минск, 1981.

134. ГОСТ 2874 82. Вода питьевая. Гигиенические требования и контроль за качеством.

135. В. Уильяме, X. Уильяме. Физическая химия для биологов.-М.,"Мир", 1976,С.341-348.

136. Coogan Т.Р., Latta D.M., Snow Е.Т., Costa M. Toxicity and carcinogenicity of nickel compound//Crit. Rev. Toxicology.-1989.-№19.-P.341.

137. Шоболов Д.JI. Разработка состава, технологии вагинальных лекарственных форм клотримазола и условий их функционирования in vitro: Автореф. дис. канд. фарм. наук. М: Моск. мед. академия им. И. М. Сеченова. 1998.