Исследование рекомбинантных штаммов Saccharomyces cerevisiae и разработка технологических приёмов глубокой переработки их биомассы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Гордонова, Ирина Константиновна

• Гордонова, Ирина Константиновна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гордонова, Ирина Константиновна

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Saccharomyces cerevisiae как объект получения рекомбинантных белков.

1.1.1. Технология экспрессии гетерологичных протеинов в S. cerevisiae.

1.1.2. Влияние питательной среды на рост и продуктивность S. cerevisiae.

1.2. Основные сведения об эпидермальном факторе роста человека.

1.2.1. Структурам механизм действия ЭФР.

1.2.2. Физиологическая роль чЭФР и перспективы его использования.

1.2.3. Биотехнологические способы получения чЭФР.

1.3. Основные подходы к созданию безотходного производства.

1.3.1. Основы комплексного использования Saccharomyces cerevisiae.

1.3.2. Основные направления создания безотходных технологий.

1.4. Получение дрожжевых полисахаридов и их использование.

1.4.1. Открытие биологически активных полисахаридов.

1.4.2. Свойства зимозана.

1.4.3. Механизмы действия полисахаридов S. cerevisiae.

1.4.3.1. Механизмы активации макрофагов.

1.4.3.2. Механизм стимуляции гемопоэза.

1.4.3.3. Усиление функциональной активности гранулоцитов.

1.4.3.4. Стимуляция и регуляция Т- и В-лимфоцитов.

1.4.4. Способы получения зимозана.

1.4.5. Применение полисахаридов S. cerevisiae.

1.5. Получение дрожжевой РНК и ее использование.

1.5.1. Препараты на основе РНК.

1.5.2. Биологические эффекты и механизм действия дрожжевой РНК.

1.5.3. Получение низкомолекулярной дрожжевой РНК.

1.5.4. Применение препаратов низкомолекулярной дрожжевой РНК.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Культивирование различных штаммов S. cerevisiae.

2.2. Получение ЭФР-обогащенной фракции из культуральной жидкости

S. cerevisiae.

2.3. Хроматографические методы очистки ЭФР-обогащенной фракции.

2.4. Получение полисахаридных препаратов из дрожжевых клеток

S. cerevisiae.

2.5. Получение компонентов питательных сред.

2.5.1. Получение препарата из культуральной жидкости S. cerevisiae.

2.5.2. Получение препарата из продуктов ферментативного гидролиза клеток S. cerevisiae.

2.6. Получение препаратов РНК из препаратов ПФГ клеток S. cerevisiae.

2.7. Определение подлинности полисахаридных препаратов.

2.7.1. Микроскопия.

2.7.2. Качественная реакция на мукополисахариды.

2.8. Испытание суспендирующей способности полисахаридных препаратов.

2.9. Определение потери в весе при высушивании полисахаридных препаратов.

2.10. Качественное определение свободных моносахаров.

2.11. Гидролиз полисахаридных препаратов.

2.12. Качественный анализ структурных компонентов полисахаридных препаратов.

2.13. Количественное оределение моносахаров.

2.14. Определение содержания восстанавливающих веществ в полисахаридных препаратах.

2.15. ИК-спектроскопия.

2.16. Определение общего электроотрицательного азота в полисахаридных препаратах.

2.17. Определение биологической активности полисахаридных препаратов.

2.17.1. Определение количества лейкоцитов в периферической крови.

2.17.2. Определение розеткообразующей способности лимфоцитов.

2.17.3. Оценка фагоцитарной активности гранулоцитов.

2.18. Определение серологической активности полисахаридных препаратов.

2.19. Диск-электрофорез.

2.19.1. Диск-электрофорез препаратов чЭФР.

2.19.2. Диск-электрофорез препаратов РНК.

2.20. Определение нукпеотидного состава препаратов РНК.

2.21. Определение белка.

2.21.1. Качественное определение.

2.21.2. Количественное определение по J.J. Sedmak и S.E. Grossberg.

2.21.3. Количественое определение по О.Н. Lowry.

2.22. Аминокислотный анализ.

2.23. Определение ДНК.

2.24. Определение РНК.

2.25. Определение свободных аминогрупп.

2.26. Определение триптофана.

2.27. Статистическая обработка результатов.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Глава 3. Получение полисахаридных препаратов из клеток S. cerevisiae.

3.1. Разработка метода выделения полисахаридных препаратов.

3.2. Изучение физико-химических и фармакологических свойств полисахаридных препаратов из рекомбинантных штаммов.

3.3. Разработка тест-систем для дополнительной оценки иммуномодулирующей активности полисахаридных препаратов.

3.3.1. Тест-система для изучения фагоцитарной активности гранулоцитов.

3.3.2. Тест-система для изучения розеткообразующей способности лимфоцитов.

Глава 4. Получение препаратов РНК из технологических отходов, образующихся при выделении полисахаридных препаратов.

4.1. Разработка способа выделения РНК из препарата ПФГ.

4.2. Характеристика препаратов РНК из различных штаммов дрожжей.

Глава 5. Повышение эффективности технологии получения ЭФР путём использования технологических отходов в качестве компонентов питательных сред.

5.1. Получение и характеристика препаратов на основе культуральной жидкости рекомбинантных штаммов S. cerevisiae.

5.2. Характеристика препаратов ПФГ из рекомбинантных штаммов

S. cerevisiae.

5.3. Изучение основных закономерностей роста и синтеза чЭФР рекомбинантными штаммами S. cerevisiae.

5.4. Использование препаратов КЖ при культивировании рекомбинантных штаммов.

5.5. Использование препаратов ПФГ при культивировании рекомбинантных штаммов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование рекомбинантных штаммов Saccharomyces cerevisiae и разработка технологических приёмов глубокой переработки их биомассы»

Актуальность работы. Дрожжи Saccharomyces cerevisiae в качестве средства производства широко используются в различных отраслях промышленной биотехнологии. В последние десятилетия область их применения значительно расширилась в связи с созданием рекомбинантных штаммов S. cerevisiae - продуцентов биологически активных веществ. Выбор указанных дрожжей в качестве рецепиента обусловлен тем, что эти микроорганизмы хорошо изучены, непатогенны и крайне удобны для экспрессии гетерологичных протеинов благодаря особенностям системы секреции, позволяющим конструировать рекомбинантные штаммы, секретирующие продукты трансляции чужеродных генов в культуральную жидкость. Большинство работ с использованием плазмидсодержащих штаммов S. cerevisiae акцентирует внимание на проблемах достижения сверхсинтеза гетерологичных белков, не уделяя должного внимания переработке не утилизирующихся в технологическом процессе дрожжевых клеток, поэтому задача разработки способов использования биомассы рекомбинантных штаммов - продуцентов до настоящего времени не решена.

Технологические приёмы использования генетически неизменённой отработанной биомассы целиком, например, в качестве кормовых добавок, разработаны в России достаточно хорошо. Однако, в настоящее время для создания рентабельного производства существует настоятельная необходимость разработки биотехнологических процессов нового поколения, направленных на углубление переработки биомассы на основе дифференцированного выделения из неё различных биологически активных составляющих. При этом чрезвычайно важным оказывается выбор оптимальных направлений комплексной переработки рекомбинантных штаммов S. cerevisiae.

Одним из наиболее перспективных способов использования биомассы дрожжевых клеток может являться получение фармакологически активных полисахаридов. Их выраженная биологическая активность обуславливает возможность широкого клинического применения таких полисахаридных препаратов в качестве неспецифических иммуномодуляторов [43].

Другим перспективным способом использования биомассы S. cerevisiae считается получение биологически активных препаратов на основе низкомолекулярной дрожжевой РНК и её компонентов, стимулирующих гуморальный и клеточный иммунитет [49].

Важным направлением комплексной переработки продуцентов также может оказаться выделение стимуляторов продуктивности и скорости роста рекомбинантных штаммов, основанное на изучении биологических свойств микроорганизмов. Использование стимуляторов, полученных из промежуточных продуктов технологического процесса в качестве компонентов питательных сред создаёт предпосылки для осуществления замкнутого производственного цикла.

В качестве модели для создания технологии, позволяющей осуществлять глубокую комплексную переработку рекомбинантных штаммов дрожжей, использованы плазмидсодержащие штаммы S. cerevisiae -продуценты эпидермального фактора роста человека, для которых в настоящее время уже разработаны методы выделения и очистки ростового фактора из культуральной жидкости [26]. В случае разработки такой технологии, она также может быть использована и для бесплазмидных штаммов S. cerevisiae.

В связи с этим целью настоящего диссертационного исследования являлось сравнительное изучение биологических особенностей рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae и разработка на этой основе способов увеличения глубины переработки указанных плазмидсодержащих продуцентов.

В задачи настоящего исследования вошли:

1. Изучение биологических особенностей рекомбинантных штаммов S. cerevisiae с целью выявления перспективных биологически активных веществ в биомассе продуцентов.

2. Разработка системы физико-химических, химических и биологических методов анализа, позволяющая оценить биологически активные вещества S. cerevisiae (полисахаридные препараты, РНК, стимуляторы продуктивности и роста дрожжей) и провести их стандартизацию.

3. Сравнительное изучение полисахаридных препаратов, полученных из нерекомбинантных и рекомбинантных штаммов S. cerevisiae с целью выявления принципиальной возможности использования последних для выделения высокоактивных иммуномодулирующих препаратов.

4. Модификация способа получения иммуномодулирующих полисахаридных препаратов с целью повышения их биологической активности.

5. Разработка метода выделения препаратов РНК из продуктов, образующихся в процессе получения полисахаридных препаратов.

6. Сравнительное исследование свойств препаратов РНК, полученных из рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae и их стандартизация.

7. Изучение параметров экзогенной биорегуляции S. cerevisiae и разработка приёмов получения стимуляторов продуктивности и скорости роста рекомбинантных штаммов для оптимизации состава питательных сред. Основные положения, выносимые на защиту.

1. Предложенная схема комплексной переработки рекомбинантных штаммов S. cerevisiae обеспечивает одновременное получение различных биологически активных веществ: чЭФР, иммуномодулирующих полисахаридов, РНК и компонентов питательных сред.

2. Модификация стадии ферментативного гидролиза дрожжей позволяет увеличить степень депротеинизации и биологическую активность получаемых полисахаридных препаратов.

3. Иммуномодулирующие полисахаридные препараты, выделенные из различных рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae идентичны по химическим, физико-химическим и биологическим свойствам.

4. Разработанный метод получения высокоочищенных препаратов РНК позволяет использовать продукты ферментативного гидролиза клеток рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов дрожжей в качестве источника нуклеиновой кислоты.

5. Предложенные на основании изучения способов экзогенной биорегуляции рекомбинантных штаммов S. cerevisiae рецептуры питательных сред, содержащих препараты на основе технологических отходов, обеспечивают повышение скорости роста и продуктивности дрожжей.

Научная новизна. В работе впервые установлена принципиальная возможность комплексной переработки рекомбинантных штаммов S. cerevisiae - продуцентов чЭФР для одновременного получения нескольких биологически активных веществ. Предложена модификация способа выделения иммуномодулирующих полисахаридов из отработанной биомассы дрожжевых клеток, обеспечивающая увеличение их активности. Усовершенствована система методов анализа полисахаридных препаратов, предложены тест-системы для оценки действия этих препаратов на розеткообразующую активность лимфоцитов и фагоцитарную активность гранулоцитов (с использованием латексов). Разработан оригинальный метод выделения препаратов РНК из продуктов ферментативного гидролиза дрожжей. Проведена оценка свойств биологически активных препаратов, полученных из различных рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов. Доказана возможность использования отходов, образующихся на различных этапах выделения и очистки биологически активных веществ из культуральной жидкости и дрожжевых клеток в качестве компонентов питательных сред, и разработаны рецептуры питательных сред на их основе,

11 основе, обеспечивающие значительное увеличение скорости роста и продуктивности дрожжей.

Практическая значимость. Разработанные научно-методические подходы комплексного использования рекомбинантных штаммов S. cerevisiae позволяют осуществлять одновременное получение чЭФР, полисахаридных препаратов и препаратов РНК в препаративных количествах со степенью чистоты, соответствующей мировым стандартам, что обеспечивает возможность создания на основе этих биологически активных веществ различных лекарственных и диагностических средств. Разработанная технология предусматривает также получение препаратов, использующихся в качестве компонентов питательных сред, которые значительно увеличивают скорость роста продуцентов и выход чЭФР. Разработан лабораторный регламент комплексного получения указанных биологически активных веществ, позволяющий создать на его основе малоотходное производство чЭФР и повысить его рентабельность. Предложенные технологические приёмы глубокой переработки микроорганизмов могут быть применены при использовании в качестве средства производства различных рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Гордонова, Ирина Константиновна

выводы.

1. Разработана новая^ модификация способа выделения полисахаридных препаратов из дрожжевых клеток, включающая их ферментативный гидролиз проназой и обеспечивающая повышение степени депротеинизации препаратов с одновременным увеличением их биологической активности.

2. Предложен комплекс показателей, позволяющий оценить химические, физико-химические и биологические свойства иммуномодулирующих полисахаридов. Разработаны тест-системы для оценки влияния указанных препаратов на фагоцитарную активность гранулоцитов и розеткообразующую способность лимфоцитов.

3. Показано, что полисахаридные препараты из рекомбинантных штаммов идентичны по химическим, физико-химическим и биологическим свойствам препаратам, выделенным из нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae.

4. Разработан способ получения аффинного сорбента и условия хроматографии, позволяющие из сложных многокомпонентных смесей выделять препараты РНК со степенью чистоты не менее 99%, с молекулярной массой и нуклеотидным составом близкими к аналогичным показателям суммарной дрожжевой тРНК.

5. Установлено, что препараты РНК, полученные из рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae не различаются по физико-химическим свойствам.

6. На основе изучения биологических особенностей и параметров экзогенной биорегуляции рекомбинантных штаммов S. cerevisiae разработаны составы питательных сред, обеспечивающие увеличение скорости роста культур и их продуктивности в 2,2-2,8 раза.

7. Предложена схема одновременного получения нескольких биологически активных веществ из рекомбинантных штаммов S. cerevisiae, позволяющая увеличить глубину переработки продуцентов и повысить эффективность технологического процесса, которая может быть применена при

167 использовании в качестве средств производства различных рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae. Разработан и апробирован лабораторный регламент получения иммуномодулирующих полисахаридных препаратов, препаратов РНК и компонентов питательных сред одновременно с чЭФР.

Глава 6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

В последние годы большой научный интерес вызывают ростовые факторы, среди которых одним из наиболее известных является эпидермальный фактор роста, обладающий широким спектром действия на большинство органов и тканей человека. Изменение концентрации ЭФР в тканях и биологических жидкостях при различных патологичеких состояниях, а также связь его рецептора с протоонкогенами являются вескими основаниями для многочисленных попыток создания на основе ЭФР различных лекарственных и диагностических средств. В целях обеспечения достаточных количеств чЭФР, необходимых при проведении подобного рода работ, в нашей стране созданы перспективные рекомбинантные штаммы дрожжей S. cerevisiae, способные синтезировать указанный ростовой фактор, На их основе разработана технология получения высокоочищенного биологически активного препарата чЭФР [26]. Одним из приоритетных направлений развития современной биотехнологии является комплексный подход, обеспечивающий переработку продуцентов с целью минимизации затрат на сырьё, энергию и природоохранительные ресурсы. Поэтому данная работа имела своей целью повышение эффективности и снижение себестоимости процесса получения чЭФР путём создания комплексной безотходной технологии одновременного выделения нескольких биологически активных веществ на основе использования в качестве модели рекомбинантных штаммов S. cerevisiae, содержащих ген чЭФР.

Поскольку рекомбинантные штаммы S. cerevisiae - продуценты чЭФР секретируют ростовой фактор в культуральную жидкость, а биомасса дрожжевых клеток, содержащая его в крайне незначительных количествах, в процессе получения ЭФР не используется, для выполнения поставленных задач была предпринята попытка выделения биологически активных веществ из отработанных дрожжевых клеток. Анализ литературных данных показал, что, по-видимому, наиболее перспективным способом использования биомассы может являться получение фармакологически активных полисахаридных препаратов подобных зимозану, биологическое действие которого связано с активацией макрофагов, альтернативного пути комплемента, стимуляцией гемопоэза, фагоцитоза и противоопухолевой активности гранулоцитов, а также с регуляцией и активацией Т- и В-лимфоцитов [43]. Для выделения указанных веществ была разработана новая модификация стадии ферментативного гидролиза дрожжей, которая позволила получать из нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae препараты с большей степенью депротеинизации и приводила к увеличению их их биологической активности. Поскольку по литературным данным было известно, что биологическая активность полисахаридных препаратов в значительной степени зависит от свойств дрожжевых штаммов и параметров их культивирования, которые в случае использования плазмидсодержащих штаммов жестко определялись условиями, позволяющими добиться максимального выхода ростового фактора, далее была осуществлена проверка возможности выделения фармакологически активных полисахаридных препаратов из нескольких рекомбинантных штаммов -продуцентов ЭФР. Для этого было проведено сравнительное изучение физико-химических и биологических свойств полисахаридных препаратов, полученных из различных рекомбинантных штаммов и фармакологически активных препаратов из нерекомбинантных штаммов S. cerevisiae. В связи с тем, что полисахаридные препараты дрожжевых клеток являются препаратами мультимодального действия, для более полной оценки их иммуномодулирующих свойств были разработаны дополнительные тест-системы, характеризующие фагоцитарную активность гранулоцитов с использованием латексов и розеткообразующую активность лимфоцитов. В результате проведенных исследований была показана принципиальная возможность получения из рекомбинантных штаммов S. cerevisiae -продуцентов ЭФР высоко активных полисахаридных препаратов, являющихся неспецифическими стимуляторами иммунной системы.

При выделении полисахаридных препаратов непереработанной оставалась жидкая субстанция, содержащая продукты ферментативного гидролиза дрожжевых клеток, на основе который был получен препарат ПФГ. Химический анализ препаратов ПФГ из различных рекомбинантных и нерекомбинантных штаммов показал, что помимо значительных количеств нингидринположительного материала и белков, они содержат также нуклеиновые кислоты, что делало их перспективными для получения РНК и/или её компонентов. Получение препаратов на основе низкомолекулярной дрожжевой РНК и её компонентов в настоящее время весьма актуально, поскольку такие препараты (нукпеинат натрия, энкад) обладают выраженной фармакологической активностью, стимулируя гуморальный и клеточный иммунитет [49]. Для выделения препаратов РНК была разработана методика получения аффинного сорбента, обладающего высокой биоспецифичностью и позволяющего достаточно эффективно отделять РНК-содержащий материал от других соединений компонентов смеси. В качестве такого сорбента использовали CNBr-активированную сефарозу с присоединённым к ней в качестве лиганда бромистым этидием. Предложенная методика позволяет выделять препараты РНК с молекулярной массой и нуклеотидным составом, близкими к таковым тРНК дрожжей, с чистотой не менее 99%, которые в дальнейшем могут быть использованы в медицинских целях.

Таким образом, была показана возможность последовательного выделения ЭФР, полисахаридных препаратов и препаратов РНК из различных рекомбинантных штаммов S. cerevisiae, позволяющая значительно увеличить степень переработки продуцентов.

На следующем этапе работы для дальнейшего увеличения эффективности технологии были предприняты попытки утилизации непереработанных отходов технологического процесса в качестве компонентов питательных сред, заменяющих дорогостоящий импортный Casein hydrolysate acids ("Difco"). Для этого были выделены и охарактеризованы два вида препаратов: препараты на основе отработанной культуральной жидкости после выделения из неё ЭФР (препараты КЖ) и препараты, содержащие продукты ферментативного гидролиза дрожжевых клеток (препараты ПФГ), которые, как отмечалось выше, могут использованы для получении РНК. Проведённые исследования показали принципиальную возможность использования указанных препаратов в качестве компонентов питательных сред не только для нерекомбинантных штаммов S. cerevisie, но и для рекомбинантных штаммов - продуцентов ЭФР. Изучение основных закономерностей роста и синтеза чЭФР рекомбинантными штаммами S. cerevisiae на различных питательных средах позволило осуществить выбор оптимальных условий ферментации. Найдены концентрации препаратов КЖ и ПФГ, обеспечивающие по сравнению со стандартными условиями культивирования сокращение лаг-фазы роста, нормализацию скорости экспоненциального роста и увеличение продуктивности культур более, чем в два раза. При этом препараты ЭФР, полисахаридные препараты и препараты РНК, полученные на основе дрожжевых клеток, выращенных на модифицированных питательных средах, содержащих препараты КЖ или ПФГ, и на стандартной среде по свойствам не различались.

В результате проведенных исследований разработана схема комплексной технологии получения биологически активных веществ на основе рекомбинантных штаммов S. cerevisiae [Рис. 24]. Поскольку установлена возможность использования разработанной технологии для рекомбинантных штаммов S. cerevisiae - продуцентов ЭФР с различными плазмидами, с разной степенью их копийности, а также для различных нерекомбинантных штаммов, основные предлагаемые подходы комплексной переработки дрожжей можно рекомендовать и при создании биотехнологических производств на основе других рекомбинантных штаммов S. cerevisiae, секретирующих гетерологичные белки в культуральную жидкость. В связи с этим предлагаемая схема включает как общие, так и изменяющиеся в зависимости от использующегося продуцента стадии технологического процесса. Разработанная комплексная технология в случае использования рекомбинантных штаммов - продуцентов чЭФР даёт возможность осуществлять последовательное получение эпидермального фактора роста, полисахаридных препаратов и препаратов РНК, а также компонентов питательных сред, применение которых в результате экзогенной биорегуляции повышает продуктивность штаммов более, чем вдвое. В результате, усовершенствованная технология позволяет с 1 л культуральной жидкости вместо 2 мг чЭФР получить около 5 мг чЭФР, 250 мг полисахаридного препарата, 54 мг препарата РНК или 4,5 г препарата ПФГ и 6,7 г препарата КЖ, что свидетельствует о значительном увеличении эффективности технологии и ведёт к снижению её себестоимости. культивирование рекомбинантных штаммов S.cerevisiae I выделение реком-бинантного продукта из культураль-ной жидкости ферментативный гидролиз биомассы стандартизация рекомбинантного продукта получение препарата КЖ из культуральной жидкости без рекомбинантно-го продукта получение препарата ПФГ из супернатанта суспензии клеток выделение полисахаридных препаратов оптимизация условий культивирования стандартизация полисахаридных препаратов стандартизация РНК

Рис. 24. Схема комплексной технологии получения биологически активных веществ на основе рекомбинантных штаммов S. cerevisiae.

1 - технологические этапы, изменяющиеся в зависимости от продуцента;

2 - универсальные технологические этапы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гордонова, Ирина Константиновна, 2001 год

1. Амиров Н.Ш., Кольцов П.А., Трубицина И.Е., Шабанова М.Е., Аронов. Л.С. Энкад в лечении язвенной болезни //Тез. докл. Перв. Рос. нац. конгрес. "Человек и лекарство"- М.:1992.-С.355.

2. Барай В.Н., Кухарская Т.А., Зинченко А.И. Получение высокоочищенной РНК из дрожжей с помощью ионов кальция //Прикладная биохимия и микробиол.-1995.-Т.31 .-№5.-С.494-497.

3. Барсуков А.А. Новые данные о тахифилаксических и адъювантных свойствах препаратов РНК//Дисс. . канд. мед. наук.-М.:1978.-С.136.

4. Басс-Шадхан Х.Ф. Зимозан: Методы получения, биохимическая характеристика и перспективы применения.-Рига:"Зинатне".-1970.-31 ЗС.

5. Батчикова Н.Б., Альтман И.Б., Луценко С.В., Смирнов В.А., Назимов И.В., Эшкинд Л.Г., Ситегина Е.А., Ажаев А.В. Секреция в периплазму рекомбинантного эпидермального фактора роста человека в клетках Е. coli //Биорг.химия.-1992.-Т. 18.-С.767-776.

6. Безбородое А.Н. Ферменты микроорганизмов, их ингибиторы и биокаталитические процессы в биотехнологии //Прикл. биохимия и микробиол.-1995.-Т.31.-№1 .-С.21-26.

7. Безруков М.Г. Принципы выделения и регулирования свойств белка из биомассы одноклеточных//Дисс. . докт.хим.наук.-М:1988.-С.301.

8. Бем Э. Метод розеток //Иммунологические методы /Ред. Фримель X.-М.:"Мир".-1987.-С.31-37,

9. Белозерский А.Н., Проскуряков Н.И. Практическое руководство по биохимии растений.-М.:1951 .-С. 16.

10. Белоусова Н.И., Гордиенко С.В., Ерошин В.К. Влияние условий автолиза на характеристики аминокислотных смесей, полученных с использованием этанолассимилирующих дрожжей //Прикл. биохимия и микробиол.-1995.-Т.31 .-№4.-С.458-462.

11. Берри Д. Биология дрожжей /Пер. с англ. Горбулева В.Г., ред. Мейсель М.Н.-М.:"Мир".-1985.-96С.

12. Бограчева Т.Я., Браудо Е.Е., Гринберг В.Я. Способ получения белка из дезинтеграта биомассы дрожжей //А.с.№ 1333286 (СССР), А230. 1/18. Опубл. 17.07.89.

13. Болобова А.В. Новая технология получения экологически чистых строительных материалов на основе ферментативной биодеструкции древесных отходов //Прикл. биохим. и микробиол.-1999-Т.35.-№5.-С.590-593.

14. Болобова А.В., Кондращенко В.И. Последрожжевая барда модификатор бетона //Прикл. биохим. и микробиол.-2000.-Т.36.-№3. - С.243-253.

15. Бояндин А.Н., Попова J1.Ю., Печуркин Н.С. Плазмидный и бесплазмидный штаммы Bacillus subtilis при изменении источников углеродного питания //Биотехнол.-2000.-№3.-С.40-41.

16. Бревнова Е.Э., Козлов Д.Г., Ефремов Б.Д., Беневоленский С.В. Штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae продуцент фруктозы из инулина //Биотехнол.-1998.-№1 .-С. 12-30.

17. Бринкманис Р.А., Иргена A.M., Рубенис О.С., Лиепиня В.А. Способ получения биологически активных веществ //А.с.№465417 (СССР), C12D. 13/06. Опубл. 12.05.1985.

18. Василенко С.К., Камзолова С.Г., Кнорре Д.Г. Прямой спектрофотометрический метод количественного определения нуклеотидного состава рибонуклеиновых кислот //Биохимия.-1962.-Т.27-Вып.1-С.142-148.

19. Вайон С. Питательная среда для бактериальных культур //Патент №2044072 (В) (Франция).-1971.

20. Векслер И. Г. Сравнительное изучение влияния некоторых неспецифических стимуляторов на иммунный ответ организма //Бюл.эксперим.биол. и медиц.-1980.-Т.89,- №7.-С.64-67.

21. Векслер Х.М., Тимошенко Ж.Ц., Кейш А.И. Неспецифические стимуляторы реактивности организма и их применение в онкологии.-Рига:1977.-С. 104-107.

22. Величко Б.А., Абрамова Г.В., Шутова А.А., Венсковский Н.У., Кулаков В.М., Рудак Э.Г., Каполеау П.A.M. Результаты и перспективы применения биосорбентов при решении некоторых экологических проблем //Экол.пром.произв.-1998.-№1-2.-С.12-17.

23. Вещикова Е.В. Разработка комплексной технологии получения высокоочищенного препарата эпидермального фактора роста на основе рекомбинантных штаммов Saccharomyces cerevisiae //Дисс . канд.биол.наук,-М.:1999.-136С,

24. Винаров А.Ю., Семенцов А.Ю., Иатова Т.В., Соловьев В.И., Сидоренко Т.Е. Биоорганическое удобрение //Пат.2141932 (Россия). Заяв. №98123358/13. Опубл. 27.11.1999.- Бюл.№33.

25. Вершигора А.Е. Основы иммунологии.-Киев:"Вища школа".-1980.-504С.

26. Волина Г.Е., Саруханова Е.Л., Левина Л.Ф., Кравцов Э.Г., Яшина Н.В., Прокопов Н.И., Ермолаев А.В. Разработка лептоспирозной латексной тест-системы //Биомедиц. технологии.-М.-1997.-Вып.8.-С.68-73.

27. Волынец В.Ф., Волынец М.В. Аналитическая химия азота.-М.:"Наука".-1977.-205С.

28. Временная фармакопейная статья на зимозан 42 401 - 75.-1975.-9С.

29. Государственная фармакопея.-М.:"Медицина".-1968.-1078С.

30. Гринио Л.П., Шабанова М.Е. Применение отечественного препарата энкад при лечении нервно-мышечных расстройств //Тез. докл. Перв. Росс. нац. конгрес. "Человек и лекарство".-М.:1992.-С.3.

31. Гусаров Ю.П. Фагоцитарная активность и показатели щелочной и кислой фосфатазы нейтрофильных лейкоцитов у больных раком желудка, леченных 5-фторурацилом и зимозаном //Клин. лаб. диагностика.-1995.-№2.- С.36-37.

32. Дебабов В.Г. Метаболическая инженерия микробной клетки //Микробиология.-1999.-Т.68.-№6.-С.823-833.

33. Деев С.В., Буторова И.А., Авчиева П.Б. Выделение убихинонов из биомассы гриба Blakeslea trispora //Биотехнол.-2000.-№5.-С.36-46.

34. Джалкалов Т.Д., Кудеярова Л.М., Нурмухамедова Х.Н., Ходжибаева С.М. Биотехнология приготовления биоконцентрата в лабораторных и производственных условиях //Биология и биотехнология микроорганизмов.-Ташкент:"Фан".-1992.-С. 178-181.

35. Дэвидсон Дж. Биохимия нуклеиновых кислот /Ред. Борисов В.В.-М.:"Мир".-1976.-415С.

36. Блинов Н.П. Основы биотехнологии.-М.:"Наука".-1995.-599 С.

37. Блинов Н.П., Турина С.В., Ананьева Е.П. Иммунобиологическая активность дрожжевых гликанов в эксперименте //Миколог, и фитопатолог,-1995.-Т.29.-№2.-С.39-43.

38. Ефремова Н.Б., Быков В.А., Козловская Л.В., Мирошниченко Н.Г., Ерёмин

39. B.И., Решилов Л.Н., Логинова Т.М. Разработка диагностического набора для оценки фагоцитарной активности полиморфно-ядерных лейкоцитов на основе функциональных полимерных микросфер (латексов) //Биомедицинские технологии.- М.:1994.- Вып.1 -С.76-84.

40. Закенфельд Г.К. Иммунологические аспекты действия полисахаридов дрожжевых клеток Saccharomyces cerevisiae.-Рига: "Зинатне".-1990.-152С.

41. Звягинцева Т.А., Елякова Л.А., Исаков В.В. Ферментативное превращение ламинаринов в 1-3;1-6-бета-0-глюканы, обладающие иммуностимулирующим действием //Биоорган.хим.-1995.-Т.23.-№3.-С.218-225.

42. Земсков A.M., Земсков В.М., Золоедов В.И. Иммунокоррекция при заболеваниях легких //Иммунология.-№4.-1998.-С.40-45.

43. Земсков A.M., Земсков В.М., Петров А.В., Никитин А.В. К механизму стимуляции иммуногенеза нуклеинатом натрия //Иммунология.-1981.-№1,1. C.52-55.

44. Земсков A.M., Передерий В.Г., Земсков В.М. и др. Вторичные иммунодефицитные состояния и их коррекция нуклеинатом натрия //Терапевтический архив.-1982.-№4.-С.55-58.

45. Земсков A.M., Передерий В.Г., Земсков В.М., Бычков Н.Г. Иммунокоррегирующие нуклеиновые препараты и их применение в медицине.-Киев: 1994.-138С.

46. Земсков В.М., Лидак М.Ю., Земсков A.M., Микстайс У .Я. Низкомолекулярная РНК. Получение, гидролиз и применение в медицине.-Рига:"Зинатне".-1985.-191 С.

47. Земсков В.М., Рацино Е.В., Хаитов П.М., Кирюхин А.Ю., Николаева Е.Н., Соколов Е.А., Тюрина Е.Д., Даниленко С.В. Анализ иммуностимулирующей активности стимадена (с-замещенного аналога аденозина) //Иммунология.-1998.-№1.-С.24-28.

48. Канаев П.А. Влияние модифицированного аубазидана на некоторые клеточные и гуморальные компоненты макроорганизма //Автореф. . канд. биол. наук.-Санкт-Петербург:1995.-22С.

49. Канарский А.В., Макарова Г.П., Избранова С.И. Обогащение отходов переработки крахмалсодержащего сырья белком одноклеточных микроорганизмов //Биотехнолог.-2000.-№3.-С.42-47.

50. Карманова З.П. Способ получения зимозана //А.с.№138334 от 10.08.1961г.

51. Карпов А.В., Антоненко С.В., Барбашева Е.В., Спивак Н.Я. Изучение механизма ингибирующего действия молекулярных комплексов дрожжевая РНК-тилорон на репродукцию ВИЧ-1 in vitro //Бюл.экс.биол. и медиц.-1998,-Т. 126.-№10.-С.433-435.

52. Карпов А.В., Жолобак Н.М. Интерферониндуцирующий эффект молекулярного комплекса дрожжевая РНК-тилорон //Вопр.вирус.-1996.-Т.41 .-№1.-С.13-16.

53. Квасников Е.И., Щелокова И.Ф. Дрожжи. Биология. Пути использования.-Киев:"Наукова думка".-1991 .-326С.

54. Кит Ю.А., Кулишна Е.В., Онищенко A.M., Юрченко Л.В., Романникова И.В., Рихтер В.А., Власов В.В. Эндогенные олигонуклеотиды молока человека и их возможная биологическая активность //Биохим.-1999.-Т.64.-Вып.8.-С.1067-1072.

55. Козлов Л.В. Белки системы комплемента: активация и регуляция //Иммунология.-1997.-№2.-С.8-13.

56. Коновалов С.А. Биохимия дрожжей.-М.:"Пищепромиздат".-1962.-270С.

57. Коновалова Н.А., Исакова Е.П., Бирюков В.В. Выделение и изучение термофильных анаэробных бактерий, утилизирующих целлюлозсодержащие материалы //Прикп. биохим. и микробиол.-1998.-Т.34.-№4.-С.388-393.

58. Кремерман И.Б., Приймяги Л.С. Экспериментальное изучение интерферониндуцирующих и противовирусных средств бактериального полисахарида зимозана //Индукторы интерферона.-М.:1982.-С.135-140.

59. Кросс А. Введение в практическую инфракрасную спектроскопию.-М.:1961.-С.506.

60. Круглова Г.Ф., Финогенова И.А. Цитозар в лечении гематосарком //Тер. арх.-1988.-№5.-С.47-50.

61. Крупнова О.Ф., Сизова Н.И., Смоляницкий А.Г. Повышение выхода рекомбинантных белков в дрожжах Saccharomyces cerevisiae в результате оптимизации условий их культивирования //Прикл. биохимия и микробиол,-1995-№3.-С.311-315.

62. Крылов И.А. Основы комплексной переработки биомассы промышленных организмов //Дисс. . докт. хим. наук.-М.:РГТХУ.-1998,- 328С.

63. Лакин Г.Ф. Биометрия.-М.:"Высшая школа".-1980.-1 ЭОС.

64. Лалова И.В., Градова Н.Б., Давидова Е.Г., Сазонова Л.П. Изучение стабильности свойств промышленных штаммов дрожжей при длительном непрерывном культивировании //Биотехнология.-1996.-№8.-С.31 -37.

65. Лидак М.Ю., Гиллер С.А., Лукевиц Э.Я. Химия противоопухолевых веществ //Химиотерапия злокачественных опухолей. /Ред. Блохин Н.И.-М."Медицина".-1977.-С. 10-60.

66. Луста К.А., Решетилов А.Н. Физиолого-биохимические особенности Gluconobacter oxydans и перспетивы использования в биотехнологии исенсорных системах //Прикл. биохим. и микробиол.-1998.-Т.34.-№4.-С.339-353.

67. Маянский Д.Н., Щербаков В.И., Правоторов Г.В. Растормаживание системы мононуклеарных фагоцитов микробными стимуляторами //Патол. физиол. и эксперим. терапия.-1983.-№5.-С.621-624.

68. Международная гистологическая номенклатура /Ред. Семченок В.В., Самусев Р.П., Моисеев М.В., Колосова З.Л.-Омск:1999.-155С.

69. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П., Андреева З.М., Анкирская А.С. Лабораторные методы исследования в клинике М.:"Медицина".-1987.-С.122-124.

70. Микунис Р.И., Беленький Е.Е., Серпова Е.К. Опыт применения рибоксина в комплексном лечении больных хронической ишемической болезнью сердца /Новые лекарственные препараты.-1981 .-№2.-0.13-17.

71. Неживец Г.Г., Подгорный Ю.В. Способ регенерации дрожжей при производстве пива //Пат.№2144067 (Россия). Заяв. №99107439/13. Опубл 10.01.2000. Бюл.изобр. №1.

72. Неклюдов А.Д., Иванкин А.Н., Бердутина А.В. Получение и очистка белковых гидролизатов //Прикл. биохим. и микробиол.-2000.-Т.36.-№5-С.525-534.

73. Неустроева Е.Л., Коляда Т.И., Конгаров Н.С., Паршута Л.И. Влияние гетерологичной РНК на некоторые показатели противоопухолевой резистентности в эксперименте //Бюл. Сиб. отделения АМН СССР.-1989,-№2.-С.73-75.

74. Никольский Н.Н., Сорокин А.Д., Сорокин А.Б. Эпидермальный фактор роста. Л.:"Наука" Ленингр. отд-ние.-1987,- 200С.

75. Одинцова С.В. Иммунокоригирующая терапия в комплексном лечении гнойного перитонита //Автореф. . канд. мед. наук.-М.: 1995.-20С.

76. Орех Г.Т., Воскресенский С.А., Казанцев Ю.Е. Способ получения эргостерина из дрожжей //А.с.№1251537 (СССР). Заявл. 26.12.84. №38300020/28-13.

77. Орлова B.C., Орлова Е.В., Уваров Л.А., Евстигнеев А.А. Способ получения пищевых дрожжей рода сахаромицетов //Пат.№2128702 (Россия). Заяв. №94031719/13. Опубл. 10.04.99,- Бюл. №10.

78. Остерман Л.А. Аминокислотный анализ /Хроматография белков и нуклеиновых кислот.-М.:"Наука" Ленингр. отд-ние.-1987.-200С.

79. Подгорный В.Ф., Гурьев В.П., Клименко В.П. Способ получения высокополимерной РНК из дрожжей //А.с. 936701 (СССР), C01N 33/48. Опубл.05.03.85.

80. Пономарева Л.В., Яковлев В.И., Цветкова Н.П., Крунчак В.Г. Мицелиальные отходы производства тетрациклина как компонент питательной среды //Антибиотики и химиотерапия.-1999.-Т.44-№1.-С.11-13.

81. Практикум по биохимии для биофизического и медкибернетического отделений МБФ.М.:Второй Московский институт им. Н.И. Пирогова.-1977.-С.57-58.

82. Реестр лекарственных средств России.-М.:1999.- Изд.6.-1070 С.

83. Рогожин С.В., Вальковский Д.Г., Мамцис A.M. Способ последовательного выделения липидов нуклеиновых кислот и белков из клеток микроорганизмов //А.с.№274059 (СССР). C12N 1/00. Опубл. 17.03.1975.

84. Розенфельд Е.Л., Преображенская М.Е. Изучение строения биологически активных дрожжевых гликанов //Биохимия.-1962.-Т.27.-№2.-С.214-218.

85. Романцев М.К, Ершов Ф.Н, Коваленко А.А Индукторы интерферона: перспективы применения в клинике //Врач.-1999.-№2.-С.36 -39.

86. Селеменев В.Ф., Орос Г.Ю., Руденко И.В., Стукалов О.И., Цюрюпа М.П., Даванков В.А. Способ получения нуклеиновых кислот из автолизатов пекарских дрожжей //Пат.№2129614 (Россия). Заявл. №9303252/13. Опубл.27.04.99.-Бюл. №12.

87. Сибирный А.А., Титоренко В.И. Молекулярные механизмы катаболитной регуляции у дрожжей //Итоги науки и техники. Сер. Молекулярная биология. ВИНИТИ-1990.-Т.ЗЗ.-С.1-214.

88. Скардс И.В., Виюма Э.А., Скарда А.Я., Зуева Р.А. Реакция лейкоцитов на введение зимозана в организме больных туберкулезом /Клиническое применение зимозана и изучение его действия.-Рига:РМИ.-1982.-С. 124-134.

89. Смирнова И.Г. Синтез, строение и биологическая активность производных маннана из Rhodotorula rubra //Автореф. . канд. фарм. наук.-Санкт-Петербург:Хим.-фарм. институт.-1994.-20С.

90. Телишевская Л.Я. Методические рекомендации по контролю пептидного состава гидролизатов для выращивания бактериальных культур.-М:Всерос. Гос.НИИ контроля, стандартизации и сертификации вет. препаратов.-1994,-7С.

91. Тиёкити И. Способ искусственного выращивания съедобных грибов //Заявка №53-42704 (Япония).-1971.

92. Уолфорд Р., Меридит Р., Чини К. Иммуноинженерия: Перспективы коррекции возрастных иммунодефицитных состояний //Иммунология и старение./Ред. Микинодан Т., Юниса Э.-М.:"Мир".-1980.-С.242-267.

93. Уразгалиев К.Х. Характеристика системы мнонукпеарных фагоцитов при холодовом стрессе и применении дрожжевых гликанов //Автореф. . канд. мед. наук.-Новосибирск:1992.-23С.

94. Федорова Н.В., Неклюдов А.Д. Влияние концентрации дрожжевой биомассы и экзогенных протеолитических ферментов на интенсивность порцесса автолиза пекарских дрожжей //Прикл. биохимия и микробиол.-1985.-Т.21.-№6.-С.714-718.

95. Феофилова Е.П., Терещенко В.М., Меморская А.С. Новая отрасль биотехнологии ранозаживляющие препараты на основе полиаминосахаридов //Микробиология.-1999.-Т.68.-№6.-С.834-837.

96. Фукс Б.Б. Материалы к анализу патогенеза наследственных зхаболеваний сетчатки //Вест. АМН СССР.-1978.-№10.-С.29-35.

97. Хаитов P.M., Некрасов А.Б., Атауллаханов Р.И. Полимерные иммуностимуляторы //Тез. докл. Первого Рос. нац. конгресса "Человек и лекарство".-М:1992.-С.108.

98. Хефтман Э. Хроматография: практическое приложение метода.-М.:"Мир".-1986.-Т.2.-С.63.

99. Циоменко А.Б. Секреция белков у дрожжей //Автореф. . доктора биол. наук.-Пущино:1998.-73С.

100. Шадхан Х.Ф. Способ получения зимозана //А.с.№141920 (СССР) от 16 IX 1961 г.//Бюл. изобретений.-1961 .-№20.

101. Шарпенак А.Э., Конышев В.А. Практикум по биологической химии. Учеб. пособие для мед. инстит.-М.:"Высшая школа".-1969.-С.8-9.

102. Шаткин А. Колориметрические способы определения ДНК, РНК и белка. //Методы вирусологии и молекулярной биологии /Ред. Хабель К., СалзманН.П.-М.:"Мир".-1972.-С. 184-193.

103. Шахова Т.В., Хомякова Г.И., Фридман Т.Ф. Способ получения нуклеозидов //А.с.№947186 (СССР).-Бюл.изобр.-1982.-№28.-С.121.

104. Шевченко Н.М. Неотложная терапия пароксизмальных тахиаритмий //Кардиология.-1987.-№9.-С. 114-115.

105. Шишов А.С., Лещинская Е.В., Мартыненко И.Н. Ацикловир в лечении тяжелых генерализованных форм опоясывающего герпеса //Клин. мед.-1991,-№6.-С.110-112.

106. Шлегель Г. Общая микробиология /Ред. Кондратьева Е.Н.-М.:"Мир".-1987.-568С.

107. Юлдашева Л.С., Халмурадов А.Г. Убихинон-Ою и его содержание вбиомассе различных видов микроорганизмов //Биология и биотехнология микроорганизмов.-Ташкент:"Фан".-1992.-С.51 -52.

108. Юшков В.В., Юшкова Т.А. Экологическая биотехнология: состояние и перспективы //Химия, технол., пром. экол. неорган. соед.-1998.-№1.-С.29-31.

109. Adachi Y., Suzuki У., Ohno N., Yadomae Т. Adjuwant effect of grifolan on antibody production of mice //Biol, and Pharm. Bull.-1998.-V.21.-№9.-P.974-977.

110. Alvarez R., Aguila B. Cinetica de liberacion de acidos nucleicos у proteunas durate el tratamiento termico con hidroxido de amonio en levadura panadera //Rev. cienc. biol.-1983.-V.14.-№2.-P.345-354.

111. Axen R., Porath J., Ernback S. Chemical coupling of peptides and proteins to polysaccharides by means of cyanogen halides //Nature.-1967.-V.214.-P.1302.

112. Baidwin R.S., Byers V.S. Immunoregulation by bacterial organisms and their role in the immunotherapy of cancer.//Springer Seminars Immunophatol. 1996. -V.76. - P.13-20.

113. Baldwin G.S., Gasson I.C., Quan S.G., Fleisehman I. Granulocyte macrofage colony stimulating factor enhances neutrophil function in acquired immunodeficiency syndrom patients //Proc.Nat.Acad.Sci.USA. -1988.-V.85.-№8.-P.2763-2766.

114. Baldwin R.W., Byers V.S. immunoregulation by bacterial organisms and their role in the immunotherapy 6f ещрег //Springer seminars lmmunopathol.-1979.-V.2.-№1.-P.79-100.

115. Barr P.J., Power M.D., Lee-Ng C.T., Gibson H.L., Luciw P.A. Expression of active human immunodeficiency virus reverse transcriptase in Saccharomyces cerevisiae //BioTechnology-1987.-V.5. N5.-P.486-489.

116. Bell G.Y. Hibrid DNA synthesis of epidermal growth factor // Пат.№4783412 (США) МКИ C12 N5/00. Заявл. 3.06.87. Опубл. 8.11.88.

117. Biozzi G., Steffel C., Mouton D., Bouthillier Y., Decreuserfond C. A kinetic study of antibody production cells in the spleen of mice immunized intravenously with sheep erythrocytes //Immunology.-1968.-V.14.-P.7-20.

118. Braga P.C., Sala M.T., Dalsasso M., Pecile A., Annoni G., Vergani C. Age assotiated differences in neutrophil oxidative burst (chemiluminescence) //Experimental herontology.-1998.-V.33.-№5.-P.477-484.

119. Brown G.L., Nanney L.B., Griffen J. Enhancement of wound healing by topical treatment with epidermal growth factor//N.Engl.J.Med.-1989.-V.321 .-P.76.

120. Buret A., Hardin J.A., Olson M.E., Chin A., Gall D.G. Effects of oraly administrated epidermal growth factor during E.coli infection in rabbits //Gastroenty.-1996.-V.110.-N4.-A793.

121. Burger M., Hess M.W., Cottier H. The in vitro response in the absense of serum and its proteins: stimulating activiti of zymosan //Europ. J. Immunol.-1980.1. V.10.-№10.-P.796-798.

122. Burgess A.W., Lloyd C.J., Nice E.C. Murine epidermal growth factor heterogenity on high resolution exchange chromatography //EMBO J.-1983.-V.2.-P.2065-2069.

123. Burton K. Stady of conditions and mecanism of the difenilamine reaction for the colorimetric estimation of deoxyribonucleuc acid //Biochem.J.-1956.-V.62.-№2.-P.315-323.

124. Bussineau C.M., Shuster J.R. Genetic stability of protein expression systems in yeast //Dev.Biol.Stand.-1994.-V.83.-P.13-19.

125. Calabro A., Milani SM Paladini I., Orsini В., Savadori. G., Surrenti C. Role of epidermal growth factor in peptic ulcer healing //Dig.Dis.Sci.- 1995.-V.40.-N11,-P.2497-2504.

126. Carbohydrates in drag design /Eds. Witezak Z.J., Nieforth K.A.-New York:1997.-703P.

127. Caro F., Fiore I. On the composition of zymosan //Science.-1958.-V. 127,-№3301 .-P.756-757.

128. Carpenter G. Regulation of epidermal growth factor receptor activity during the modulation of protein synthesis //J.Cell.Physiol.-1979.-V.99.-P.101-106.

129. Caruso A., Cutuli V.M.C., de Bernardis E., Amico-Roxas M. Protective action of epidermal growth factor and A fraction from Triticum vulgare extract in mouse tail necrosis //Pharmacology Lett.-1997.-V.60,- N11 .-P.L175-L180.

130. Chao T.C., Chao H.H., Lin J.D., Chen M.F. Somatostatin and octreotide modulate the function of Kupffer cells in liver cirrhosis //Regulatory peptides.-1999,-V.79.-№2-3.-P.117-124.

131. Chen J.Т., Hasumi I. Activation of peritoneal macrophages in patients with ginecological malignancies by shizofillan and recombinant interferon //J. Biotherapy.-1993.-V.6.-P.189-197.

132. Chen Y.P., Kirk N., Piper P.W. Effects of medium composition on Mf-alpha-1 promoter directed secretion of a small protease inhibitor in Saccharomyces cerevisiae batch fermentation //Biotechnol.Lett.-1993.- V.15.-N3.-P.223-228.

133. Clark R.A., Klebanoff S.I. Neutrophil-mediated tumor cell cytotoxicity: role of the peroxidase system //J. Experimental Med.-1975. V.141.-P.1442-1447.

134. Clarke S.E. In vitro assessment of human cytochrome-P450. //Xenobiotica.-1998.-V.28.-№12.-P.1167-1202.

135. Cohen I.K., Crossland M.C., Garrett A., Diegelmann R.F. Topical application of epidermal growth factor onto partial thikness wounds in human volunteers does not enhance reepithelization //Plastic and Reconstructive Surgery.-1995.-V.96,-N2.-P.251-254.

136. Cooper T.G. Metabolism and gene expression /Molecular biology of the yeast Saccharomyces cerevisiae /Eds. Strathern J.N., Jones E.W., Broach J.R.-N.Y.:Cold Spring Harbor.-1982.-P.399-461.

137. Coppella S.J., Dhuriati P. a-factor directed expression of the human epidermal growth factor in Saccharomyces cerevisiae // Biotechnology and Bioingeneering.-1989.-V.33.-N7.-P.976-983.

138. Cseh G., Szabo I., Bagdy D. Procedure for the production of yeast cell wall polysaccharides //Pat.№ 1477911 (Hung.).-1959.

139. Cui T.X., Iwai M., Yamauchi Т., Shimazu T. Aggraviting action of zymosan on acute liver-demage in perfused liver of rate treated with D-galactosamine //Amer. J. of Phisiology-Gastrointestinal and Live Phisiology.-1999.-V.3.-№6.-P.G1361-G1366.

140. Czop J.P., Austen K.F. A (3-glucan inhibitable receptor on human monocytes: its identity with phagocytic receptor for particulate activators of the alternative complement pathway//J.Immunol.-1985.-V. 134.-№4.-P.2588-2593.

141. Damadaran S., Kinsella S.E. The use Chaotropic salts for separation of ribonucleic acids and proteins from yeasts nucleoproteins //Biotechnology and Bioengeneering.-1983.-V.25.-P.761 -770.

142. Di Carlo F.J., Fiore J.V. On the composition of zymosan //Science.-1958.-V.127.-№3301 .-P.756-757.

143. Ebisu S., Takagi H., Kadawaki K., Yamagata H., Udaka S. The efficient of human epidermal growth factor by Bacillus brevis // Ann.NY.Acad.-1996.-V.782.-P.115-122.

144. Elson D., Cargaff E. Evidence of common regularities in the composotion of RNA//Biochem. Biophys. Acta.-1955.-V.17.-P.347-352.

145. Engl A., Kunz B. Biosorption of heavy metals by Saccharomyces cerevisiae //J.Chem.Technol. and Biotechnol.-1995.-V.63.-P.257-261.

146. England D., Roloff I.S., Lukens I.N. Regulation of human polymorphonuclear leucocyte superoxide release by cellular responses to chemotactic peptides //J. Immunol.-1981 ,-V.128.-№1 .-P.165-171.

147. Estrada A., Yun C., Van-Kessel A., Li В., Huata S., Laarveld B. Immunomodulatory activities of oat beta-glucan in vitro and in vivo //Microbiol. lmmunol.-1997.-V.42.-№12.-P.991-998.

148. Fieschko J.C., Egan K.M., Ritch Т., Koski R.A., Jones M., Bitter G.A. Controlled expression and purification of human immune interferon from high cell density fermentation of Saccharomyces cerevisiae //Biotechnol.Bioing.-1987.-V.29.-N9.-P.1113-1121.

149. Filkins J.P., Lubitz J.H., Smith J.J. The effect of zymosan and glucan on the reticuloendothelial system and on resistence to traumatic shock //Angiology.-1964.-V.15.-№11-P.465-470.

150. Firatli E., Gurel N., Efuoglu A. Cebeci I. Generalized prepubertal periodontitis a report of 4 cases with the immunological findings //J. of Clinical Periodontology.1996.-V.23.-№12.-P.1104-1111.

151. Folcik V.A., Aamir R., Cathcart M.K. Cytokine modulation of LDL oxidation by activated human monocytes //Arteriosclerosis, thrombosis and vascular biology.1997.-V.17.-№10.-P.1954-1961.

152. Fries G., Perneczky A., Kempski O. Glioblastoma associated circulating monocytes and the realease of EGF //J.Neurosurgery-1996.-V.85.-N4.-P.642-647.

153. Gijon M.A., Leslie С.С. Regulation of arachidonic acid release and cytosolic phospholipase A(2) activation //J.Leukocyte.-1999.-V.65.-№.3.-P.330-336.

154. Gopal C.V., Broad D., Lloyd D. Bioenergetic consequences of protein overexpression in Saccharomyces cerevisiae //Appl.Microbiol.Biotechnol.-1989.-V.30.-N2.-P.160-165.

155. Guogiang D.,Benhura M., Kaul R., Mattiasson B. Affinity thermoprecepitation of yeast alcohol dehydrogenase though metal ion-promoted binding with Cibarcon Blue 3GA//Biotechnol. Progr.-1995.-V.11 .-P.187-193.

156. Gustafsson M.K.S. Never ending growth and GF2 Icytoche evidence for the presence of epidermal growth factor in tapeworm //Hydrobiol.-1995.-V.305.-N1-3.-P.229.

157. Gustin M. Microorganisms and methods for their use //Biotechnol. Adv.-1997.-V.15.-№2.-C.411-412.

158. Hachicha M., Rathanaswami P., Naccache P.H., Macoll S.R. Regulation of chemokinegene expression in human peripheral blood neutrophils phagocytosing microbial pathogens //J.lmmunol.-1998.-V.160.-№1.-P.449-454.

159. Hammer C., Mancell P., Lewis M. The role of glucan in immunoregulation //J. Reticuloendotheliol Soc.-1976.-V.20.-№5.-P.38a.

160. Hansen J., Kielland-Brandth M.C. Inactivation of MET10 in breweris yeast specifically increase SO2 formation during beer production //Nature Biotechnol.1996.-V.14.-P. 1587-1591.

161. Hartmann G., Bidlingmaier M., Jahrsdoerfer В., Endres S. Oligonucleotides:extropolating from in vitro to in vivo //Nature Medicine. -1997,-V.3.-№7.-P.702.

162. Haynie S.L., Wagner L.W. Process for making 1,3-propanediol from carbohydrates using mixed microbial cultures //Patent №5.599,689. (USA). Febr.4.1997.

163. Heller J.H. Non-toxic RES stimulatory lipids //Ann.N.Y.Acad.Sci.-1960.-V.88.-P.116-121.

164. Herberman R.B. Immunoregulation and natural killer cells //Molecular lmmunol.-1982.-V.19.-№10.-P.1313-1321.

165. Herbert D., Phipps P.S., Strange R.E. Chemical analysis of microbial cells //Methods Microbiol.-1971 .-V.58.-P.209-344.

166. Hisayoshi K., Ikemoto J., Okuma H. Ribonucleic acid isolation from yeast //Pat. 61-181394 (Japan). 1986.

167. Hitzeman R.A., Hagie F.E., Levine H.L., Goeddel D., Ammerer G., Hall B.D. Expression of human gene interferon in yeast //Nature.-1981.-V.293.-717-722.

168. Hodgson J. Expression systems a users guide //BioTechnology.- 1993.-V.11.-N8.-P.887-893.

169. Holliday L.A., Savage C.R., Cohen S., Pueit D. Conformation and folding thermodynamics of epidermal growth factor and derivatives // J.Biochem.-1976.-V. 15.-P.2624-2633.

170. Homeister J.W., Zhang M.K., Frenette P.S., Hynes R.Q.Wagner D.D., Lowe J.В., Marks R.M. Overlapping functions of E-celectin and P-selectin in neutrophil recruitment during acute inflamination //Blood.-1998.-V.92.-№7.-P.2345-2352.

171. Horn M.J., Jones D.B. A rapid colorimetric method for the determination of tryptophane in proteins and food //J.Biol.Chem.-1945.- V.157.-N1.-P.153-160.

172. Ibaraki Y.N., Banno I., Suita M.K. Process for prepearing yeast cells contaning an enhanced amount of ribonucleic acid //Pat. 3411989 (USA). 1968.

173. Ichikawa K., Komiya K., Suzuki K., Nakahara Т., Jigami Y. The effects of culture conditions on the secretion of human lysozyme by Saccharomyces cerevisiae //Agric.Biol.Chem.-1989.-V.53.-N10.-P.2687-2694.

174. Isliker H.C. The properdin system /A/ox sanguinis.-1956.-V.1.-№1.- P.8-26.

175. Jaeger L. The new world of ribozymes //Current opinion in structural biology.-1997-V.7.-№3.-P.324-335.

176. Jansen M.J., Hendriks Т., Hermsen R., Vadermeer J.W., Goris R.J. A monoclonal-antibody against tumor-necrosis-factor-alpha improves survival inexperimental multiple organ dusfunction syndrome //Cytokine.-1998.-V.10.-№11.-P. 904-910.

177. Jin K.H., McCarey B.E., Schultz G.S. In vivo fluoremetric measurment of epidermal growth factor-FITC binding to rabbit corneas // lnv.Ophtal.Vis.Sci.-1995.-V.36.-N4.-P.800.

178. Jones R.P., Gadd G.M. Ionic nutrition of yeast physiological mechanisms involved and implications for biotechnology //Enzyme Microb.Technol.-1990.-V.12.-N6.-P.402-418.

179. Juhl C.O. Epidermal growth factor as adjunctive treatment in relation to sclerothrapy in the esophagus an experimental study in minipigs //Dan.Med. B.-1996.-V.43.-N3.-P.286

180. Kanaii F., Sato S., Imamura S. Extraction of yeast ribonucleic acid //Japan, Kondai 7673192, C.A.-1976.-V.85.-P.157973.

181. Kikuchi M., Ikehara M. Conformational features of singal seguences and folding of secretory proteins in yeasts //Trends Biotechnol.-1991.-V.9.-№6.-P.208-211.

182. Kohjin Co., Ltd. Highly purified and lightly colored ribonucleic acid //Pat. №57202299 (Japan). 1982.

183. Kokohoshis P., Cook I.A., Di Luzio N.R. Spesifity of glucan-induced elevation in serum lysozyme activity//Reticuloendothelial Soc.-1977.-V.22.-№6.-Suppl. 40a.

184. Komoriya A., Hortsch M., Meyers C., Smith M., Kanety H., Shlessenger J. Biologically active synthetic fragments of epidermal growth factor: localization of major receptore-binding region //Proc.Nat.Acad.Sci.USA.-1984.-V.81 .-P.1351-1355.

185. Konturek P.C., Dembinski A., Ernst H., Warzecha Z., Konturek S.J., Hahn E.G. Transforming growth factor type (31 and epidermal growth factor in cerulin induced pancreatits in rat //Gastroenty.-1996.-V.110.-N4.-P.A407.

186. Kotula L., Curtis P.J. Evalution of foreign gene codon optimization in yeast: expression of a mouse Ig kappa chain //BioTechnology.-1991.- V.9.-N12.-P.1386-1389.

187. Kreutzfeldt C., Witt W. Structural Biochemistry //Biotechnology Handbooks Saccharomyces. /Ed. Tuite M.F., Oliver S.G.-New York, London: Plenum Press.-1991.-V.4.-P.5-58.

188. Kwong-Y Tsang, Gnagy M.J., Phillips C.B. In vitro effects of isoprinosine (Iso) on the immune responses of cancer patients /Abstr. 13th intern, cancer congr.-San Francisco.-1982.-P.164.

189. Lanfranco L., Santucci L., Calabro A., Orsini В., Federici В., Morelli A. EGF modulates pepsinogen secretion in guinea pig gastric chief cells //Gastroenty.-1996.-V.11 .-N4.-P.945-958.

190. Lawford G.R., Hewis P.N. Isolation of microbiae protein with reduced nucleic content //Пат. 281632, кл. 260/112 (США) (R. George Weston Ltd.). Опубл. 18.05.1982.

191. Lee Y.P., Tarahashi T. An improved colorimetric determination of amino acids with the use ninhydrin //Anal.Biochem.-1966.-V.14.-№1.-P.71-76.

192. Leibovich S.I., Denon D. Promotion of wound repair in mice by application of glucan //J. Reticuloendothelial Soc.-1980.-V.27.-P.1-11.

193. Leoni RO., Dean R.T. Cell suphase events which may initiate lysosomal enzyme secretion by human monocytes.//Europ. J. Immunol.-1984.-V.14.-№11,-P.997-1002.

194. Lim L.M.K., Solito E., Russomarie F., Flower R.J., Peretti M. Promoting detachment of neutrophils adherent to murine postcapillary venules to control inflamination effect of lipocortin 1 //Proc.Nat.Acad. USA.-1998.-V.95.-№24.-P.14535-14539.

195. Loening U.E. The fractionation of hidh-molecular weight ribonucleic acid by polyacrylamide gel electroforesis //Biochem.J.-1967.-V. 102.-251 -257.

196. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent//J.Biol.Chem.-1951.-V. 193.-№1.-P.265.

197. Luongo C., Imperatore F., Cuzzocrea S., Fillipelli A., Scafuro M.A., Mangoni G., Portolano F., Rossi F. Effects of hyperbaric oxygen exposure on a zymosan induced shock model //Critical care medicine.-1998.-V.26.-№12.-P.1972-1976.

198. Masahiro N., Daijiro H., Keiji H., Masashi H. Total synthesis of urogastrone (human epidermal growth factor, hEGF). 2. Synthesis of urogastrone having the structure proposed for natural compound //J.Chem.Soc.Perkin.Trans.Pt1.-1989,-N12.-P.2199-2205.

199. Matthews T.M., Webb C. Culture systems //Saccharomyces /Ed. Tuite M.F. , Oliver S.G.-New York-London: 1991 .-P.249-282.

200. Minami S., Suzuki H., Okamoto Y., Fujinaga Т., Shigemasa Y. Chitin and chitozan activate complement via the alternative pathway //Carbohydrate Polymers.-1998.-V. 136.-№2-3.-P. 151-155.

201. Miotla J.M., Jeffery P.K., Hellewell P.G. Platelet-activating factor plays a pivotal role in the induction of experimental lung injury //Amer. J. of respiratory cell and molecular biology.-1998.-V.18.-№2.-197-204.

202. Mistry F.R., Cooney C.L. Production of ethanol by Clostridium thermosaccharolyticum. 1. Effect of cell recycle and environmental parametres //Biotechnol. and Bioeng.-1989.-V.34.-№10.-P. 1295-1304.

203. Miura N.M., Miura Т., Ohno N., Adachi Y., Watanabe M., Tamura H., Tanaka S., Yadomae T. Gradual solubilisation of Candida, cell-wall beta-glucan by oxidative degradation in mice //FEMS Immunology and Medical. Microbiology.-1998.-V.21 .-№2.-P.123-129.

204. Morfort A., Blasco A., Sanz P., Prieto J.A. Expression of Lip1 and Lip 2 genes from Geotrichim species in bakers yeast strains and their application to the bread-making process //J. of Agricultural and Food chemistry.-1999.-V.47.- №2.- P.803-808.

205. Mork A.C., Helmke R.J., Martinez J.R., Michalek M.T. Effects of particulate and soluble (1-3)-beta-glucans on Ca2+ influx in Nr8383 alveolar macrophages //lmmunopharmacol.-1998.-V.40.-№1 .-P.77-89.

206. Nakabayshi Y. Method for treatment of microorganisms. (Dai-Nippon Sugar Manufacturing Co., Ltd.). //Пат. №402103 (США). A23j 3/00. Опубл. 23.07.85.

207. Nascimento C.G., Gyenes A., Halloran M.S., Merryweather J., Valenzuela P., Stkimer V.S., Masianz F.R., Randolph A. Characterization of recombinant human epidermal growth factor in yeast // J.Biochem.-1988.-V.27.-P.797-802.

208. Noronha S.B., Wagner L.M., Matheson N.H., Shiloach J. Use of ethanol sensor for feedback-control of growth and expression of Tbv25H in Saccharomyces cerevisiae //Biotechnol. and Bioeng.-1999.-V.63.-№3.-P.285-289.

209. Nygren H., Kanagaraja S., Braide M., Eriksson C., Lundstrom I. Characterization of cellular responce to thiol modified gold surfaces implanted in mouse peritoneal cavity //J. of biomedical materials.-1999.- V.45.-№2.-P.117-124.

210. O'Floberty S.T., Showeii H.S., Ward P.A. Neutropenia induced by systemic infusion of chemotactic factors //J.Immunol.-1977.-V.118.-P.1568.

211. Ohga S., Kitamoto T. Future of muchroom production //Food Rev. Int.-1997.-V.13.-№3.-P.461-469.

212. Ohman M.G., Blind P.J., Holmerg S.B., Naredi P.L., Lindner P.G. Hafstrom L.R. The influence of zymosan and indomethacin on liver and kidney tumor growth. An experimental study in rats //J.Exp.Clin.Cane.Res. -1997.-V.16.-№3.-P.243-247.

213. Ohno N., Miura Т., Miura N.N., Chiba N., Uchiyama M., Adachi Y., Yadomae T. //Inflammatory and immunopharmacological activities of metaperiodate oxidated zymosan. 1999. - V.289. - №1. - P.63-77.

214. Olstad R., Selielid R. The sellular reaction in normal and tumor-bearing mice following intraperitoneal glucan infection //Acta Patol.Microbiol.Scand.-1980,-V.C83.-№2.-H.97-101.

215. Osawa S. Preparation and some properties of a soluble ribonucleic acid from yeast//Biochem.Biophys.Acta.-1960a.-V.43.-№1.-P.110-122.

216. Pachen M.L., MacVittie T.J., Brook I. Glucan-induced hemopoetic and immunostimulation: therapeutic effects in sublethally irradiated mice //Meth. Find. Experimen.Clin. Pharmacol.-1986.-V.8.-№3.-P.151 -155.

217. Pearson N.D., Prescott C.D. RNA as a drug target //Chemistry and biology.-1997.-V.4.-№6.-P.409-414.

218. Pena A., Pardo J.P., Ramirez J. Early metabolic effects and mechanism of ammonium transport in yeast //Arch.Biochem.Biophys.-1987.-V.253.-N2.-P.431-438.

219. Persidis A. Ribozime therapeutics: These versalite molecules are emerging as a potential new class of drugs //Nature Biotechnology (lndia).-1997.(Sep.).-V.15.-№9.-P.921-922.

220. Pillemer L., Blum L., Lepov I., Wurz L., Todd E. The properdin system and immunity. III. The zymosan assay of properdin //J.Exp.Med.-1956.-V.103.-№1.-P.1-13.

221. Pillemer L., Blum L., Pensky J., Lepow I. The requirement for Mg ions in the inactivation of the third component of complement (C'3) by insoluble residues of yeast cells (zymosan) //J.lmmunol.-1953.-V.71.-№5.-P.331-338.

222. Pillemer L., Lepow I.H., Blum L. The requiment for a hydrasin-sensetive serum factor and heat-labile serum factors in the inactivation of human C'3 by zymosan //J.lmmunol.-1953.-V.71.-№5.-P.339-345.

223. Pillemer L., Ross O.A. Alterations in serum properdin levels following injections of zymosan //Science.-1955.-V. 121.-P.732-733.

224. Rados G. Eleszto vertikalis feldolgozasa //Szeszipar.-1960.-№6.-P.62-63.

225. Raptis J., Muller A., Rice P.J. Binding of an immunomodulator to the humas (1,3)-p-D-glucan monocyte/macrofage receptor //FASEB J.-1997.-V.11.-№3.-P.118.

226. Raue H.A. Metabolic stability of messenger DNA in yeast a potential target for modulating productivity //Trends Biotechnol.-1994.- V.12.-N11.-P.444-449.

227. Rehakova Z., Trebichavsky I., Sinkora J., Splihal I., Sinkora M. Early ontogeny of monocytes and macrofages in the pig sourse //Phisiological Research.-1998,-V.47.-№5.-P.357-363.

228. Riggi S.I., Di Lusio N.R. Identification of a reticuloendothelial agent in zymosan //Amer.J.Phisiol.-1961.-V.200.-№2.-P.397- 400.

229. Rollins Th. E.,Springer M.S. Identification of the polymorphonuclear leukocyte C5a receptor //J.Biol.Chem.-1985.-V.260.-№12.-P.7157-7160.

230. Romanos M.A., Scorer C.A., Clare J.J. Foreign gene expression in yeast // Yeast.-1992.-V.8.-N6.-P.423-488.

231. Rossini D., Porro D., Brambilla L., Venturini M., Ranzi B.M., Vanoni M., Alberghina L. In Saccharomyces cerevisiae, protein secretion into the growth medium dependes on environmental factors //Yeast.-1993.- V.9.-N1 .-P.77-84.

232. Rzucidlo L., Stachow A., Nowakowska A., Kubica I. Chemical and biological properties of cell walls of Candida krusei, Trichiphyton gypseum and Penicillium notatum //Bull.Acad.Polon.sci.-1958.-V.6.-№1.-C.15-20.

233. Sabbadini E., Berczi I. The submandibular gland: a key organ in the neuroimmuno-regulatory network? //Neuroimmunomodulation.-1995.-V.2.-N4.-P.184-202.

234. Savage C.R., Cohen S. Epidermal growth factor and a new derivative: rapid isolation prosedures and biological and chemical characterization //J.Biol.Chem.-1972.-V.247.-P.7609-7611.

235. Scevola M.E. Sulla preparazione e caratteristiche di un fattore anticomplementare presente nel lievito (zymosan) //Boll.Soc.ltal.Biol. Sperim.-1957-1958.-V.33.-№1789-1792.

236. Schenkein H.A., Ruddy D. The role of immunoglobulins in alternative complement pathway activation by zymosan. 1. Human IgG with specifity for zymosan enhances alternative pathway activation by zymosan //J.Immunol.-1981,-V.126.-№1.-P.7-10.

237. Sedmak J.J., Grossberg S.E. A rapid, sensevite and versatile assay for protein using coomassie brilliant blue G-250 //Analyt.Biochem.-1977.-V.79.-P.544-552.

238. Seljelid R., Bogwald I., Lundwall A. Glucan stimulation of marcofages in vitro //Experimental Cell Research.-1981.-V.131.-№1.-P.121-129.

239. Sherrill J.M., Kyte J. Activation of epidermal growth factor receptor by epidermal growth factor //Biochem.-1996.-V.35.-N18.-P.5705-5718.

240. Shuster J.R., Moyer D.L., Lee H., Dennis A., Smith В., Merryweather J.P. Yeast mutants conferring resistance to toxic effects of cloned human insulin like growth factor-1 //Gene.-1989.-V.83.-N1.- P.47-55.

241. Speiers A.S.D., Goldman J.M., Catovsky D. Multiple drug chemotherapy for acute leukemia //Cancer.-1977.-V.40.-P.20.

242. Stouthamer A.H., Van Verseveld H.W. Microbial energetics should be considered in manipulating metabolism for biotechnological purposes //Trends Biotechnol.-1987.-V.5.-N5.-P.149-155.

243. Sun Lun-Quan, Ely J.A., Gerlach W., Symonds G. Anti-HIV ribozymes //Mol.Biotechnol.(Australia).-1997.-V.7.-№3.-P.241-251.

244. Suzaki E., Kobayashi H., Kodama Y., Masujima Т., Terakawa S. Video-rate ionics of exocytotic events associated with phagocytosis in neutrophils //Cell Motility and the Cytoskeleton.-1997.-V.38.-№3.-P.215-228.

245. Suzuki M., Kikuchi Т., Takatsuki F., Hamaro J. Curative effects of combinative therapy with lentinan and interleukin-2 against established murine tumors and the role of CD8-positive T-cells //Cancer Immunol. lmmunother.-1994.-V.38.-P.1-9.

246. Swank R.T., Munkres K.D. Molecular weight analysis of olygopeptides by electrophoresis in polyacrilamide gel with dodecyl sulfate //Anal.Biochem.-1971,-V. 39.-N2.-P.462-477.

247. Tadashi K., Mitsuhiro M., Shigeyuki U., Shiglo U. Biological activities of (1,3)-(3-D-glucans with reducing glucose side chains //Biosci., Biotechnol. and Biochem.-1998.-V. 62.-№3,-P.570-572.

248. Tajima M., Yoshikawa S. Changes of nucleic acids in the preparation process of the cell protein isolates from yeast (Sacch. serev.) //Agr. and Biol. Chem.-1975.-V. 39.-№3.-P.345-354.

249. Tebar D., Soley M., Ramirez I. The antilipolytic effects of insulin and EGF in rat adipocytes are mediated by different mechanisms // Endocrinol.-1996.-V. 137,-N10.-P.4181-4188.

250. Tiute M.F., Oliver S.G. Biochemical Technigues //Saccharomyces. Biotechnology Handsbook /Ed. Tiute M.F., Oliver S.G.-N.Y.-London:Plenum Press.-1991 .-V.4.-P.283-329.

251. Thomas K.A., Scherhter F.N. Direct phisical measurements on substituted agarose gels: evidance for intercalation of gel-bound ethidium into transfer RNA //Anal. Biochem.-1978.-V.91 -P.209-223.

252. Thornton B.P., Vetvicka V., Pitman M., Goldman R.C., Rose G.D. Analysis of the sugar specifity and molecular location of the beta-glucan-binding lectin site of complement receptor type 3 (CD11b/CD18) //J.lmmunol.-1996.-V.156.-P.1235-1246.

253. Urclea M.S. Design chemical synthesis and molecules cloning of a gene for human epidermal growth factor /Methods in enzymology.- Academic Press.Inc.:1987.-V.146.-P.22-41.

254. Utsunomiya I., Ito M., Ohishi S. Generation of inflammatory cytokines in zymosan-induced pleurisy in rats TNF induces IL-6 and cytokine-induced neutrophil chemoattractant (Cine) in vivo //Cytokine.-1998.-V.10.-№12.-P.956-963.

255. Van der Sande C.A.F.W, Kwa M., van Heerikhuizen H., Raue H.A., Planta R.J. Functional analysis of internal trancribed spacer 2 of Saccharomyces cerevisiae ribosomal DNA//J.Molec.Biol.-1992.-V.223.-N4.-P.899-910.

256. Vandenberghe L.P.S., Soccol C.R., Pandey A., Lebeault J.M. Microbial production of citric acid //Braz.Arch.Biol, and Technol.-1999.-V.42.-№3.-P.263-276.

257. Vasavada A. Improving productivity of heterologous proteins in recombinant Saccharomyces cerevisiae fermentations //Adv.Appl.Microbiol.-1995.-V.41.-P.25-54.

258. Wichmann R., Wandrey C., Grasse-Wiesmann J. Continuous microbial production of L-leucine with cell retention //Appl. Microbiol, and Biotechnol.-1990,-V. 32.-№4.-P. 373-379.

259. Wiener G.J., Liu Hsin-Ming, Wooldridge J.E., Dahle C.E., Krieg A.M. Immunostimulatory oligodeoxynucleotides contaning the CpG motif //Proceedings of the national Academy of sciences. USA.-1997.-V.94.-№20.-P. 10833- 10837.

260. Wilson J.D. The relationship of antibody-forming cells to rosette-forming cells //Immunol.-1991 .-V.42-P.233-245.

261. Wittrup K.D., Robinson A.S., Parker R.N., Forrests K.J. Existence of an optium expression level for secretion foreign proteins in yeast // Ann.NY Acad.-1994.-V.745.-P.321-330.197

262. Yoshioka S., Ohno N., Miura Т., Adachi Y., Yadomae T. Immunotoxity of soluble beta-glucans induced by indomethacin treatment //FEMS Immunol, and Microbiol.-1998.-V.21 ,-№3.-P.171 -179.

263. Yeaton K.A. Food supplements from yeast RNA //BioTechnology.-1990.-V.8-№8.-P.715.

264. Zaalberg O.B. A simple method for delecting single antibody-forming cells //Nature.-1964.-V.202.-P. 1231.

265. Zhao Ming, Duncan J.R. Colomn corption of Cr(IV) from electroplating effluent using formaldegide cross-linked Saccharomyces cerevisiae //Biotechnol.Lett.-1998.-V.20.-№6.-P.603-608.