Сравнительное изучение и прикладная биохимия иммуноглобулина G куньих тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Кузнецов, Александр Иванович

• Кузнецов, Александр Иванович
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кузнецов, Александр Иванович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ 5 I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Биохимия и молекулярная биология ^О представителей 14 семейства куньих

1.2. Препаративная и аналитическая биохимия выделения 1^

1.3. Биохимические основы биотехнологических нововведений для 31 обеспечения инфекционной и биологической безопасности иммуноглобулинов

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Оборудование и реактивы

2.2. Получение плазмы (сыворотки) крови

2.3. Биохимические методы

2.4. Иммунологические методы

2.5. Микробиологические методы

2.6. Способы расчета показателей

2.7. Статистическая обработка результатов

III РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3. Схема выделения и сравнительное изучение гомологии ^О 48 человека и животных

3.1. Получение видовых

3.2. Разработка лабораторного набора для определения ^О норки

3.3. Исследование антигенной структуры видовых в 70 гомологичной системе анализа (^О норки - анти-^О норки)

4. Прикладная биохимия фракционирования плазмы (сыворотки) 84 крови норки с целью получения биопрепаратов на основе

4.1. Способ получения и хранения фракции

§0 из плазмы сыворотки) крови

4.2 Характеристика ^О фракции, полученной с помощью риванола

4.3. Характеристика фракции, полученной с помощью 95 каприловой кислоты

4.4. Изучение инфекционных и антигенных свойств 97 экспериментальных серий иммуноглобулинового биопрепарата ЗАКЛЮЧЕНИЕ 99 ВЫВОДЫ 104 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ДИД - двойная иммунодиффузия

ИПК - иммуннопероксидазный конъюгат ИФА - иммуно ферментный анализ МПА - мясопептонный агар

ОП493 - оптическая плотность при длине волны 493 нм

ПААГ - полиакриламидный гель

ПЭГ - полиэтиленгликоль

САН - сывороточный альбумин норки

А - иммуноглобулин класса А

О - иммуноглобулин класса О

М - иммуноглобулин класса М

ТУ - технические условия

ФС - фармакопейная статья

ФСП - фармакопейная статья предприятия

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительное изучение и прикладная биохимия иммуноглобулина G куньих»

Актуальность проблемы.

В 21 веке стало понятно, что 1014 клеток человеческого организма, в т.ч. организмы высших млекопитающих, представляют собой регулируемую биологическую систему, воспринимающую внеклеточные сигналы от лигандов белковой, пептидной или биоорганической природы. При этом белки-регуляторы как управляющие сигналы обладают множественной спецификой в отношении клеток-мишеней. Так, например, трансферрин помимо функции белка-переносчика имеет свойство фактора роста. Полагают, что практически всем белкам присущ такой множественный регуляторный эффект, за исключением антител [Зинченко с соавт., 2003]. С этих позиций актуальный интерес представляет международный исследовательский проект «Протеом плазмы крови». Наличие в составе плазмы от 3020 до 9504 индивидуальных белков позволяет рассматривать этот сложный коллоидный раствор как обобщенную многофакторную субстанцию, в которой только' иммуноглобулины имеют четко выраженную направленность в отношении чужеродной генетической информации [States D.J., et ciL, 2006; Omenn G S.,. 2006].

Изложенное выше имеет непосредственное отношение к прикладным исследованиям и научно-техническим разработкам биотехнологического характера. В частности, к описанию в объективных количественных критериях качества гемостатических, иммуноглобулиновых, комплексных, ферментных биопрепаратов, производство которых базируется на получении целевых белков из тканей и органов животных и человека. Отметим, что международный исследовательский проект «Протеом плазмы крови» касается, прежде всего, изучения структуры-функции и физиологической активности белков человека. В отдаленном будущем новые сведения о физиологической активности белков плазмы будут учитываться при проектировании технологий и соответствующих фармакопейных стандартов или технических условий. В настоящее время такого рода фундаментальной 5 информации нет. Из-за отсутствия основополагающей фактологии в фармакопейных стандартах либо ТУ вносятся разного рода неопределенности, касающиеся наличия примесных белков с неопределенными физиологическими свойствами. Например, в составе медицинских иммуноглобулинов допускается 2-3 белка не иммуноглобулиновой природы в качестве примесей. В иммуноглобулиновых препаратах ветеринарного назначения в описательной части ТУ допускается присутствие практически всех белков плазмы (сыворотки), включая альбумин.

В соответствии с содержанием ФС, ФСП и ТУ в части, касающейся требований, предъявляемых к белковому спектру иммуноглобулиновых биопрепаратов, можно выделить два научно-теоретических направления, обеспечивающих реальное качество прошлых и современных биотехнологических нововведений. Первое направление в современных условиях, по сути, нацелено на неопределенное расширение нормативно-технической (приборно-методической) базы с целью обеспечения, биологической безопасности иммуноглобулиновых биопрепаратов с гетерогенным электрофоретическим спектром примесных белков, имеющих неопределенные физиологические свойства. Второе направление целесообразного развития науки и научно-технических разработок в области Фарминдустрии базируется на создании принципиальных технологических схем, позволяющих производить гомогенные в электрофорезе субстанции целевых белков. Именно это направление науки и технологии позволяет совершенствовать прикладную биохимию для обеспечения биологической безопасности конечной продукции. Имеется в виду контролировать в составе биопрепаратов предельно-допустимые концентрации физиологически активных белков. Полагаем, что достаточно общая информация, согласно которой «целевой белок биопрепарата должен иметь надлежащий уровень очистки и нативную конформацию» необходимо в качестве требований заложить в ФС, ФСП и ТУ. Предлагаемая конкретика, по нашему мнению, должна сводиться к решению прикладных задач биохимии и разработке производственных технологий, позволяющих достигать хотя бы 80% уровня чистоты целевого белка. При наличии примесных белков в объеме не более 20% еще возможно адаптировать методы аналитической биохимии к выявлению в составе конечной продукции нежелательную физиологическую активность и совершенствовать прикладную составляющую биохимии технологических нововведений.

В информации фундаментального и прикладного характера обсуждается состав иммуноглобулиновых биопрепаратов, производимых промышленным способом из плазмы (сыворотки) крови человека и животных. На основании фундаментальных представлений о роли антител в элиминации бактерий в составе IgG полагают целесообразным присутствие IgM [Garbett et al., 1989; Werdan et al., 1996]. Структурно-функциональные особенности IgA и его присутствие в составе иммуноглобулиновых биопрепаратов также учитывается прикладной наукой при проектировании научно-технических нововведений в технологии фракционирования плазмы (сыворотки) крови* [Wadsworth et al., 1976]. Вместе с тем медицинской генетикой выявлены индивидуальные особенности, согласно которым в человеческой популяции всегда присутствуют отдельные индивидуумы, неспособные к биосинтезу IgA. В клинической практике такое генетическое своеобразие выявляется по биосинтезу антител, специфичных к IgA, после парэнтерального введения иммуноглобулина, в составе которого присутствует IgA [Eijkhout et al., 2003].

Известно, что олигомеры индивидуальных белков, в частности IgG, способны к активации системы комплемента [Boughton et al., 1990; Nachbaur et al., 1997]. Опубликован целый ряд работ о фракционировании плазмы с целью обеспечения инфекционной безопасности конечного продукта [Burnouf et al., 2000; Horowitz et al., 2004; Панов, 2004; Klein et al 2005]. Однако процессы инактивации инфекционных агентов, как правило, влияют на конформацию белка, что в конечном итоге выражается в олигомеризации и фрагментации молекулы IgG [ Hetherington et al., 1984; Le Moli et al., 1989]. С точки зрения экономических подходов актуальным вопросом является изучение возможности использования межвидовых субстанций IgG в клинической практике с минимизированным и нежелательным (антитело-индуцирующим) эффектом. К настоящему времени стало возможным компьютерно-аналитическое сопоставление нуклеотидных и аминокислотных последовательностей, кодирующих и составляющих IgG млекопитающих, в т.ч. на уровне выявление межвидовых особенностей их строения [Naumoff, 2005; Finn et al.,. 2006; Abhiman et al., 2006]. Однако для практической биохимии методы информатики имеют определенные ограничения. Во-первых, невозможно однозначно предсказать ориентацию экспонированных участков пептидных цепей IgG, поскольку проблематика фолдинга до настоящего времени не полностью раскрыта [Dill et al., 2007; Moore, 2007]. Во-вторых, при сопоставлении нуклеотидных последовательностей геномов не учитываются посттранскрипционные модификации и последствия, обусловленные белок-денатурирующим эффектом, присущим схемам выделения и очистки IgG. Следовательно, актуален прямой иммунохимический подход, позволяющий по совокупности эпитопов проводить сравнительный анализ видовых IgG. Очевидно также, что схема выделения образцов IgG должна обеспечивать препаративную наработку индивидуальных белков без использования агентов и приемов, обладающих денатурирующим эффектом.

С учетом изложенного, экспериментальная составляющая работы представлена нижеследующими взаимовложенными направлениями:

- получение электрофоретически гомогенных и хроматографически мономерных образцов видовых IgG для определения олигомеров и фрагментов целевого белка в составе иммуноглобулиновых биопрепаратов, производимых промышленными предприятиями России;

- создание схемы анализа видовых IgG для совершенствования научно-практических представлений об антигенных характеристиках белков, включая уровень иммунологического сходства близкородственных ^С; - совершенствование препаративной и аналитической биохимии для получения в заводских условиях с учетом требований производственного характера. Цель и задачи исследования.

Цель - изучить в сравнительном аспекте ^С куньих для разработки технологии производства иммуноглобулинового биопрепарата с надлежащим уровнем инфекционной и биологической безопасности.

В связи с поставленной целью решались следующие задачи:

- Разработать лабораторную схему получения электрофоретически гомогенных человека и животных без олигомеров и фрагментов для обеспечения контроля качества производственных серий иммуноглобулиновых биопрепаратов.

- Изготовить иммунореагенты и оптимизировать анализ для выявления антигенных свойств видовых 1^0, включая образцы из семейства куньих, и определения норки в составе технологических полупродуктов.

- Апробировать приемы дробного фракционирования плазмы крови норки в заводских условиях и создать принципиальную биохимическую основу для выпуска экспериментальных серий препарата «Иммуно Н». Научная новизна.

Разработаны оригинальные схемы выделения видовых 1^0 и условия их хранения с минимальным уровнем (до 3%) образования олигомерных форм индивидуальных белков.

Создана исследовательская схема для оценки антигенных свойств ^С близкородственных видов.

Определены приемы крупномасштабного фракционирования гемолизной плазмы (сыворотки), полученной из трупной крови норки, при которых сохраняется нативная конформация

Подобраны условия и определены концентрации риванола и каприловой кислоты, позволяющие проводить очистку 1§0 из полуфабриката, обогащенного целевым белком.

Отсутствие передачи вирусного начала в составе иммуноглобулинового биопрепарата «Иммуно Н» подтверждено клинико-лабораторными исследованиями экспериментальных серий, изготовленных из инфекционно-опасного сырья.

Практическая значимость.

Результаты исследований легли в основу разработки нормативно-технической и технологической документации на изготовление экспериментальных серий препарата «Иммуно И», ее согласование и утверждение в соответствии с порядком, действующим в Российской Федерации:

- технические условия (ТУ 9382-003-43683877-03) на препарат «Иммуно Н», 27 стр.;

- экспериментально-производственный регламент на технологию производства фармацевтического биопрепарата «Иммуно Н», №001515-0п, 300 стр.;

- наставление по применению препарата «Иммуно Н» для норок № 13-4-03/0692; № 001515-0п от 06.03.03 г., 2 стр.

На пилотный проект по производству экспериментальных серий препарата «Иммуно Н» был получен федеральный аттестат № 886 от 02.04.03 г. Из экспертного заключения ФГУ «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ») следует, что по показателям качества экспериментальные серии препарата «Иммуно И» аналогов в России не имеют. Результаты проведенных исследований по разработке схем получения стандартизованных форм видовых иммуноглобулинов заложены в проект «Инструкции по изготовлению и контролю видовых ^О человека и животных». В настоящее время материалы и натуральные образцы проходят согласование и испытания в ФГУ «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГУ «ВГНКИ»).

На предложенный способ хранения и получения ^в-обогащенной фракции для изготовления биопрепаратов крови выдан патент на изобретение №2338375 «Способ хранения плазмы или сыворотки крови для получения иммуноглобулиновых и альбуминовых биопрепаратов». Положения, выносимые на защиту:

- Разработка биохимических основ получения электрофоретически гомогенных форм ^О без олигомеров и фрагментов необходима для целесообразного развития нормативно-технической (приборно-методической) базы и обеспечения биологической безопасности иммуноглобулиновых биопрепаратов.

- Выявление уровня иммунологического сходства видовых ^О является основой для создания перспективной технологии производства гетерологичных иммуноглобулинов с надлежащим уровнем биосовместимости.

- Совершенствование подходов препаративной и аналитической биохимии в условиях крупномасштабного фракционирования плазмы (сыворотки) крови представляет собой одну из составляющих обеспечения инфекционной и биологической безопасности производства иммуноглобулиновых биопрепаратов.

Апробация работы.

Результаты исследований представлены на Региональной конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири, 20-21 сентября 2001 г., г. Ижевск; на Международной конференции «Биотехнология на рубеже тысячелетия», 12-15 сентября 2001 года, г. Саранск; на 5-ой Российской укиверситетско-академической научно-практической конференции, г. Ижевск, 2001 г.; на 6-ой Российской университетско-академической научно-практической конференции, г. Ижевск, 2003 г.; на II Евразийском конгрессе по медицинской физике и инженерии "Медицинская физика - 2005", г.

Москва, 2005 г.; на I съезде физиологов СНГ, г. Сочи, 2005 г.; на Международной конференции инженерного образования, 25-29 июля 2005 г., г. Гливиц (Польша); на II Всероссийском форуме «Здоровье нации - основа процветания России», г. Москва, 2006 г.; на Второй международной научно-практической конференции «Исследование, разработка и применение высоких технологий в промышленности», г. Санкт-Петербург, 2006 г.; на XIX Международной научно-технической конференции «Химические реактивы, реагенты и процессы малотоннажной химии», г. Уфа, 2006 г.; на Третьей международной научно-практической конференции «Исследование, разработка и применение высоких технологий в промышленности», г, Санкт-Петербург, 14-17 марта 2007 г.; на Четвертой международной научно-практической конференции «Исследование, разработка и применение высоких технологий в промышленности», г. Санкт-Петербург, 2-5 октября 2007 г.; на VI конференции иммунологов Урала, г. Ижевск, 2007 г.

Публикации результатов исследований.

По материалам диссертации опубликовано 10 работ. В соответствии с порядком, действующим в РФ, разработан, согласован и утвержден комплект нормативно-технической и технологической документации на производство экспериментальных серий иммуноглобулинового препарата нового поколения «Иммуно Н»: технические условия на препарат «Иммуно Н» (ТУ 9382-00343683877-03, 27 стр.), экспериментально-производственный регламент производства на препарат «Иммуно Н» (№001515-0п, 300 стр.) и наставление по применению препарата «Иммуно Н» (№ 13-4-03/0692; № 001515-0п, 2 стр.).

Структура и объем диссертационной работы.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 125 страницах, содержит 10 рисунков и 19 таблиц. Список

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Кузнецов, Александр Иванович

выводы

1. Разработана универсальная схема получения электрофоретически гомогенного и хроматографически мономерного ^С человека и животных, основанная на осаждении ПЭГ 4000 с последующими 2 циклами анионообменной хроматографии на ДЕАЕ-целлюлозе и заключительной гель-хроматографией на сефадексе С-200.

2. Оптимизированы два варианта ИФА на основе прямого и прямого конкурентного методов для определения норки. Чувствительность прямого метода 9,8 нг/мл, прямого конкурентного 39,1 нг/мл. Определены уровни иммунологического сродства соболя и хорька, которые по отношению к норки в прямом методе ИФА составили 73% и 44%, а в прямом конкурентном 62% и 31%, соответственно.

3. Разработан способ хранения и получения 1§С-обогащенных фракций из плазмы (сыворотки) крови (патент №2338375) который заложен в основу постадийной схемы экстрагирования и дробного осаждения целевого белка с помощью риванола, три-н-бутилфосфата/(твин-80 или тритон X-100), каприловой кислоты и этанола. Результаты исследований апробированы в заводских условиях и являются основой технологических нововведений: ТУ 9382-003-43683877-03 на препарат «Иммуно Н», экспериментально-производственный регламент на технологию производства №001515-ОП; наставление по применению № 13-4-03/0692; №001515ЮП от 06.03.03 г.

4. Экспериментальная технология изготовления иммуноглобулинового биопрепарата позволяет получать из инфицированной вирусом алеутской болезни норок сырьевой заготовки конечный продукт, не обладающий способностью переноса вирусной инфекции.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На основе анализа данных литературы и полученных экспериментальных результатов была создана схема получения и исследования стандартизованных форм видовых 1^0 и альбуминов. Разработан исследовательский подход изучения антигенных свойств видовых в т.ч. среди животных близкородственных видов из семейства куньих. Сравнительные характеристики иммунологического и иммунохимического сродства свидетельствуют об общих принципах антигенного строения норки, соболя и хорька. Однако в иммуноферментном анализе и, в частности, с помощью прямого конкурентного метода выявляются индивидуальные особенности антигенного строения 1^0, характерные для указанных зоологических видов. Фундаментальная наука (междисциплинарная область знаний, объемлющая достижения молекулярной биологии, физической, биоорганической химии, иммунологии и технологии эпитопного картирования белков) позволяет всего лишь обсуждать антигенные детерминанты с точки зрения их идентичности либо структурного подобия. Предлагаемые нами подходы выявляют «обобщенную гомологию антигенного строения» близкородственных видов ^О, которая выражается в численных значениях. Так уровень антигенного подобия ^С норки с соболя составляет 44-73%. Установленные нами различия позволяют утверждать, что иммуноглобулиновые биопрепараты, изготовленные из плазмы крови норки, при введении их в организм соболя будут вызывать нежелательный иммунный ответ. С аналогичных нежелательных позиций оцениваются нами потенциальные возможности индукции иммунной реакции в организме хорька. Уровень иммунологического сродства между 1§0 норки и ^О хорька составил 31-62%.

Для совершенствования теоретических воззрений эволюционной биохимии основной фактологической составляющей являются результаты секвенирования геномов и сопряженная биоинформатика. В нашем исследовании предлагается исследовательская схема для фрагментарного описания видовых и функционально аналогичных белков на уровне их иммунологического сродства. Такой подход имеет в т.ч. и прикладной характер, т.к. направлен на предсказание потенциально возможной реактогенности, свойственной гетерологичным биопрепаратам фармацевтического назначения. Именно разработка теоретических принципов препаративной и аналитической биохимии в рамках создания предметного задела в области фракционирования плазмы крови близкородственных видов для получения иммуноглобулиновых биопрепаратов требовала численной определенности для проектирования иммунологической совместимости ^С близкородственных видов, формирующих семейство куньих.

Очевидно также, что фракционирование плазмы крови возможно только при крупномасштабном получении боенской крови. Такое возможно в условиях концентрированного разведения животных и прежде всего в наиболее крупных хозяйствах, специализированных на получении пушнины норок. В сравнительном аспекте проблематика обеспечения инфекционной безопасности сырьевых заготовок животного происхождения носит принципиально неопределенный характер. Имеется в виду отсутствие оптимальной комбинации скрининговых тестов и сопряженных диагностических наборов для выявления вирус безопасных индивидуальных кроводач. Поэтому целесообразность научных исследований, направленных на обеспечение инфекционной безопасности наиболее актуально для фармацевтических биопрепаратов, изготовленных из сырья животного происхождения. С учетом изложенного наиболее приоритетным направлением исследований и разработок следует считать физико-химические приемы, инактивирующие инфекционные агенты в сложных по составу индивидуальных белков коллоидных растворов. Остается отметить, что методы инактивации вирусов в нативной плазме и в полупродуктах плазмы в т.ч. сопровождаются денатурацией целевых белков в составе конечных биопрепаратов.

В опубликованных исследованиях [Тегрв^а а1., 2006; ТеэсЬпег е1 а1., 2007] отмечалось, что обеспечение инфекционной безопасности биотехнологических продуктов обусловлено, по-видимому, комплексным эффектом, основанном и на инактивации вирусов и на удалении инфекционных вирусов из состава целевых белков, формирующих субстанцию фармацевтических биопрепаратов. В наших исследованиях мы исходили из возможности получения очищенной субстанции ^О норки и апробации сопряженного иммуноглобулинового биопрепарата («Иммуно Н», ТУ 9382-003-43683877-03), изготовленного из плазмы крови норок -вирусоносителей алеутской болезни. Предложенный нами принцип постадийного фракционирования плазмы основан на использовании химических реагентов, обладающих белок-денатурирующими свойствами: фенол, риванол, каприловая кислота, этанол. В предметно-конкретные задачи целесообразного развития препаративной и аналитической биохимии входило масштабирование фракционирования от 50 до 200 литров плазмы крови норок с целью получения субстанции и препарата «Иммуно Н», отвечающих ранее выдвинутым нам требованиям. В частности, белковый спектр иммуноглобулинового биопрепарата предлагается оценивать в электрофорезе в градиентном ПААГ с целью определения электрофоретической гомогенности целевого белка. Полагаем, что степень очистки в составе иммуноглобулиновых биопрепаратов является в т.ч. и показателем его инфекционной безопасности. Очевидно также, что такое направление развития прикладной биохимии обеспечивает и биологическую безопасность фармацевтических биопрепаратов, поскольку в составе минимизировано количество примесных белков с неопределенной физиологической активностью. В нашем понимании, потенциально возможная физиологическая активность неопределенных примесных белков является основой биологической опасности фармацевтических биопрепаратов. В фундаментальной биохимии не вызывает сомнений методологический стандарт, согласно которому исследуется максимально очищенная и хроматографически мономерная (конформационно нативная) форма индивидуального белка. В прикладной биохимии, касающейся разработки технологий производства фармацевтических биопрепаратов плазмы аналогичный стандарт заложен в систему контроля качества образцов производственных серий на наличие в них олигомеров и фрагментов целевого белка. Однако до настоящего времени отечественные научно-производственные объединения, задействованные в производстве биопрепаратов плазмы человека, не имеют стандартных образцов для контроля собственных серий иммуноглобулинов на наличие в них олигомеров и фрагментов. Полагаем, что лабораторная схема получения стандартизованных форм человека и животных может стать основой микротоннажной технологии производства стандартов для биотехнологических предприятий России. Отметим, что данное направление выполненных нами исследований является актуальной задачей в масштабах России, поскольку направлено на устранение в т.ч. антикомплементарной активности, индуцированной олигомерными формами В опубликованных нами материалах приводятся биохимические критерии качества серийных образцов иммуноглобулиновых и альбуминовых биопрепаратов отечественного производства. С методологических позиций современной биохимии можно утверждать, что исследование серийных образцов производственной продукции с целью определения, например, качества иммуноглобулиновых биопрепаратов по наиглавнейшим критериям их безопасности невозможно. Наличие в составе иммуноглобулиновых биопрепаратов до 8-12 примесных белков, выявленных нами при электрофорезе в ПААГ, не позволяет проектировать инфекционную безопасность серийной продукции. Наличие в составе серийных образцов все тех же примесных белков делает принципиально невозможной количественную оценку олигомеров и фрагментов в составе иммуноглобулиновых биопрепаратов. Полагаем, что для устранения инфекционной и биологической опасности биопрепаратов плазмы необходим избыток результатов фундаментальных исследований с надлежащим уровнем качества. В настоящем диссертационном исследовании получение безопасных форм иммуноглобулинов основано на создании технологии сравнения иммунологической совместимости близкородственных видов животных из семейства куньих с целью проектирования биотехнологических нововведений с учетом реактогенности гетерологичных субстанций. Второе взаимовложенное направление фундаментально ориентированных исследований касалось поведения белков в растворах белок-денатурирующих реагентов. В прикладных исследованиях нами подобраны конкретные условия, позволяющие выпускать иммуноглобулиновые биопрепараты, в которых степень чистоты не ниже 80%, а уровень олигомеризации индивидуальных молекул ^О не превышает - 15 % (по ТУ 9382-00343683877-03). Изложенные достижения позволили по разрешению ВГНКИ апробировать биохимические нововведения в технико-технологической и клинико-лабораторной практике. В частности, апробировались серии иммуноглобулинового биопрепарата «Иммуно Н», изготовленного из плазмы крови норок с идентифицированным носительством вируса алеутской болезни (семейство Парвовирусы (Рагуоутёае)), обладающей повышенной резистентностью к физико-химическим инактивирующим воздействиям. Его аналог - парвовирус человека - является одним из этиологических агентов гемотрансфузионной передачи вирусной инфекции с биопрепаратами плазмы [Воб а1., 1998; Маш et а1., 2007]. По предварительным данным, обобщенным на результатах клинико-лабораторных исследований 3000 норок-реципиентов, вирус алеутской болезни норок не передается препаратом «Иммуно Н» при его внутримышечном и внутрибрюшинном введении. Последнее обстоятельство мы оцениваем только с биохимических позиций. Полагаем, что очищенные формы менее инфекционны, в т.ч. позволяют производить серии иммуноглобулинов без нежелательной антикомплементарной активности.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кузнецов, Александр Иванович, 2009 год

1. Баранов O.K. Эволюционная иммуногенетика сывороточных белков животных. Новосибирск.- Наука.- 1981.- 226 с.

2. Барсуков А. К. Стандартизация биопрепаратов крови / А.К. Барсуков, A.B. Бармин, Ф.М. Касимов, А.И. Кузнецов, О.Ю. Нестерова, Г.Н. Бурдов, А.Н. Панин, В.И. Смоленский, В.И. Уласов, B.JI. Свидерский, А.Е. Хованских // Ветеринария.- 2005.- №7.- С. 43-48.

3. Битюков И.П. Практикум по физиологии сельскохозяйственных животных / И.П. Битюков, В.Ф. Лысов, H.A. Сафонов // М.: Агропромиздат.- 1990. 256 с.

4. Бобровник С.А. Специфичные и неспецифичные взаимодействия антител и иммуноглобулинов с антигенами и способы анализа этих взаимодействий // Укр. 6ioxiM. журн,- 2004.- т.76.- №5.- С. 132-139.

5. Вербов В.Н. Принципы твердофазного иммуноферментного анализа / Твердофазный иммуноферментный анализ // Сб. научных трудов.- Л.-Изд. Института им. Пастера.-1988.- С. 3-27.

6. Войцеховский Б.Л. Математическая обработка результатов гетерогенного иммуноферментного анализа / Твердофазный иммуноферментный анализ // Сб. научных трудов.- Л.- Изд. Института им. Пастера.-1988.- С. 42-58.

7. Глин Л. Структура и функции антител. / Л. Глин, М. Стьюард // М.-Мир.- 1983.-200 с.

8. Гордиенко А.И. Взаимодействие хаотропно модифицированных иммуноглобулинов с белковыми и гликолипидными антигенами / А.И. Гордиенко, Н.В. Химич // Укр. 6ioxiM. журн,- 2006.- т. 78,- № 6.- С.78-85.

9. Джеске Д.Д. Иммуноглобулины: строение и функции / Д.Д. Джеске, Д.Д. Кепра//Иммунология.-М.- 1987.- т.1.- С. 204-254.

10. Дзантиев Б.Б. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа / Б.Б. Дзантиев, A.M. Егоров // Журн. Всесоюз. хим. общ-ва им. Д.И. Менделеева.- 1982.- Т. 24.- №4,- С. 442449.

11. Егоров A.M. Теория и практика иммуноферментного анализа / A.M. Егоров, А.П. Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М. Гаврилова // М.- Высш. шк.-1991.- 278 с.

12. Зинченко В.П., Долгачева Л.П. Внутриклеточная сигнализация. Пущино.- 2003.- 84 с.

13. Камышников B.C. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика // в 2 т.- Минск.- Интерпрессервис.- 2003.- 958 с.

14. Кэтти Д. Антитела. Методы. / Д. Кэтти, Ч. Райкундалия, Дж. Браун,

15. H.Р. Линг, Д. Гордон, Ж. Арвие, А.Ф. Уильяме. Под ред. Д. Кэтти. // Кн.1.- М.-Мир.- 1991.287 с.

16. Макс Э.Э. Иммуноглобулины: молекулярная генетика // Иммунология.-М.- 1987.- т.1.- с. 255-312.

17. Остерман Л.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. М.-Наука.- 1985,- 536 с.

18. Панов В. П. Принципы обеспечения вирусной безопасности продуктов крови (обзор). // Хим.-фарм. Журнал.- 2004.- т.38.- №3.- с. 39-47.

19. Петров Р.В. Иммунология и иммунохимия / Р.В. Петров, И.В. Березин // Журн. Всесоюз. хим. общ-ва им. Д.И. Менделеева.- 1982.- Т.24.- №4.-С. 362-368.

20. Пол У. Иммунология / в 3 т. под ред. У. Пола // М.- Мир,- 1989.- 1 292 с.

21. Ройт А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл // М.- Мир.-2000.- 592 с.

22. Русанов В.М. Фракционирование белков плазмы в производстве препаратов крови / В.М. Русанов, Л.И. Скобелев // М.- Медицина.- 1983.223 с.

23. Русанов В.М. Лечебные препараты крови / В.М. Русанов, И. Левин // М.: Медпрактика, 2004. 284 с.

24. Самарцев М.А. Современное состояние патентных разработок в области твердофазного иммуноферментного анализа / М.А. Самарцев, Н.В. Беляков // Твердофазный иммуноферментный анализ.- Сб. научных трудов.- Л,- Изд. Института им. Пастера.-1988.- С. 28-41.

25. Скоупс Р. Методы очистки белков. М.: Мир.- 1985.- 358 с.

26. Сюрин В.М. Вирусные болезни животных / В.М. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомина // Москва.- ВНИТИБП.- 1998.928 с.

27. Тукачинский С.Е. Физико-химические основы риванольного метода фракционирования белков // Биохимия.- 1961. т.26. - вып. 1. - с. 133136.

28. Фомичева И.И. Иммуноглобулины американской норки; генетика, экспрессия, эволюция / И.И. Фомичева, О.Ю. Волкова, Л.В. Мечетина, A.M. Наякшин // Новосибирск.- Наука.- 1991.- 160 с.

29. Христофоров B.C. Исследование структурно-функциональных свойств иммуноглобулинов G и их фрагментов методом 'Н-ЯМР / B.C.

30. Христофоров, В.П. Кутышенко, В.П. Завьялов // Биоорганическая химия.-1987.- т.13.- №11.- С. 1446-1464.

31. Чард Т. Радиоиммунологические методы // М.- Мир.- 1981.- 248 с.

32. Abhiman S. Prediction of function divergence in protein families using the substitution rate variation parameter alpha / S. Abhiman, C.O. Daub, E.L. Sonnhammer // Mol. Biol. Evol.- 2006.- V. 23.- №7.- P. 1406-1413.

33. Amzel L.M. The three dimensional structure of a combining region-ligand complex of immunoglobulin NEW at 3.5-A resolution / L.M. Amzel, R.J. Poljar, F. Saul, J.M. Varga, F.F. Richards // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1974.- V. 71.- №4.- P. 1427-1430.

34. Arouri A. Hydrophobic interactions are the driving force for the binding of peptide mimotopes and Staphylococcal protein A to recombinant human IgGl / A. Arouri, P. Garidel, W. Kliche, A. Blume // Eur. Biophys. J.- 2007.- V.36.-№6.-P. 647-660.

35. Benammar A. Genetic polymorphism of rabbit immunoglobulins: description of b98, a nineth allele at the к b-locus / A. Benammar, P.-A. Gazenave //Molec. Immunology.- 1982а,- V. 19.- №4.- P. 565-570.

36. Bertolini J. Purification of immunoglobulins / J. Bertolini, J. Davies, J. Wu, G. Coppola // WO 98/05686.

37. Black C.M. Cross-reactivity of 75 monoclonal antibodies to human immunoglobulin to sera of non-human primates / C.M. Black, J.S. McDougal, R.C. Holman, B.L. Evatt, C.B. Reimer //Immunol. Lett.- 1993.- V. 37.- № 2-3.-P. 207-213.

38. Bloom M.E. Characterization of Aleutian disease virus as a parvovirus / M.E. Bloom, R.E. Race, J.B. Wolfmbarger // J. Virol.- 1980.-V. 35.- №3.- P. 836-843.

39. Bloom M.E. Characterization of the Aleutian disease vims genome and its intracellular forms / M.E. Bloom, L.W. Mayer, C.F. Garon // J. Virol.- 1983.-V.45.-№3.- P. 977-984.

40. Blumel J. Inactivation of parvovirus B19 during pasteurization of human serum albumin / J. Blumel, I. Schmidt, H. Willkommen, J. Lower // Transfusion.-2002.-V. 42.- №8.- P. 1011-1018.

41. Blumel J. Parvovirus B19 transmission by heat-treated clotting factor concentrates / J. Blumel, I. Schmidt, W. Effenberger, H. Seitz, H. Willkommen, H.H. Brackmann, J. Lower, A.M. Eis-Hubinger // Transfusion.-2002.-V.42.-№ll.-P. 1473-1481.

42. Bos O.J. Virus validation of pH 4-treated human immunoglobulin products produced by the Cohn fractionation process / O.J. Bos, D.G. Sunye, C.E. Nieuweboer, F.A. van Engelenburg, H. Schuitemaker, J. Over // Biologicals.-1998,- V. 26.-P. 267-276.

43. Brezin C. Allotypes of the a series and their variants in rabbit immunoglobulins / C. Brezin, P.-A. Cazenave // An. Immunol. (Inst. Pasteur).-1976.- V. 127.- №3-4.- P. 333-346.

44. Buchacher A. Purification of intravenous immunoglobulin G from human plasma aspects of yield and virus safety / A. Buchacher, G. Iberer // Biotechnology Journal.- V.I.- №2.-P. 148-163.

45. Burnouf M. Reducing the risk of infection from plasma products: specific preventative strategies / M. Burnouf, M. Radosevich //Blood rev.- 2000.-V.14.-№2.- P. 94-110.

46. Burnouf T. Affinity chromatography in the industrial purification of plasma proteins for therapeutic use / T. Burnouf, M. Radosevich // J. Biochem. Biophys. Methods.- 2001.- V. 49.-№l-3.- P. 575-586.

47. Burnouf T. Assessment of viral inactivation during pH 3.3 pepsin digestion and caprylic acid treatment of antivenoms / T. Burnouf, F. Terpstra, G. Habib, S. Seddik //Biologicals.- 2007.- V.35.- №4.- P.329-334.

48. Burnouf T. Assessment of the viral safety of antivenoms fractionated from equine plasma / T. Burnouf, E. Griffiths, A. Padilla, S. Seddik, M.A. Stephano, J.-M. Guetierrez // Biologicals.- 2004.- V. 32.- P. 115-128.

49. Busch M.P. Current and emerging infectious risks of blood transfusions / M.P. Busch, S.H. Kleinman, G.J. Nemo // JAMA.- 2003.- V.289.- №8,- P. 959-962.

50. Butler J.E. Bovine immunoglobulins // Vet. Immuniology and Immunopathology.- 1983.- V. 4.- P. 43-152.

51. Chapman M.S. Structure, sequence, and function correlations among parvoviruses / M.S. Chapman, M.G. Rossmann // Virology.- 1993.- V.194.-№2.-P. 491-508.

52. Chen J. Comparison of standard and new generation hydrophobic interaction chromatography resins in the monoclonal antibody purification process / J. Chen, J. Tetrault, A. Ley // J. Chromatogr. A.- 2008.- V. 1177- №2.- P. 272281.

53. Chen K.C. Complete nucleotide sequence and genome organization of bovine parvovirus / K.C. Chen, B.C. Shull, E.A. Moses, M. Lederman, E.R. Stout, R.C. Bates // J. Virol.- 1986.- V. 60.- №3.- P. 1085-1097.

54. Chothia C. Genomic and structural aspects of protein evolution / C. Chothia, J. Gough // Biochem J.- 2009.- V. 419.- №1,- P. 15-28.

55. Colombo M. Transmission of non-A, non-B hepatitis by heat-treated factor VIII concentrate / M. Colombo, P.M. Mannucci, V. Carnelli, G.F. Savidge, C. Gazengel, K. Schimpf// Lancet.- 1985,- V.2.- P. 1-4.

56. Committee for Proprietary Medicinal Products (CPMP). Note for guidance on plasma-derived medicinal products // CPMP/BWP/269/95.- London: The European Agency for the Evaluation of Medicinal Products.-1998.

57. Corthier G. Improved method for IgG purification from various animal species by ion exchange chromatography / G. Corthier, E. Boschetti, J. Charley-Poulain // J. Immunol. Methods. 1984.- V.66.-№1.- P. 75-79.

58. Cotmore S.F. The autonomously replicating parvoviruses / S.F. Cotmore, P. Tattersall // Adv. Virus Res.- 1987.- V. 33.- P. 91-174.

59. Crispin M. Carbohydrate and domain architecture of an immature antibody glycoform exhibiting enhanced effector functions / M. Crispin, T.A. Bowden,

60. C.H. Coles, K. Harlos, A.R. Aricescu, D J. Harvey, D.I. Stuart, E.Y. Jones // J. Mol. Biol.- 2009.- V.387.- №5.- P. 1061-1066.

61. Deisenhofer J. Crystallographic refinement and atomic models of a human Fc fragment and its complex with fragment B of protein A from Staphylococcus aureus at 2.9- and 2.8-Ä resolution // Biochemistry.- 1981.-V.20.- №9.- P. 2361-2370.

62. Dieterle M. Microcalorimetric study of adsorption of human monoclonal antibodies on cation exchange chromatographic materials / M. Dieterle, T. Blaschke, H. Hasse // J. Chromatogr A.- 2008.- V.1205.- №1-2.- P. 1-9.

63. Dill K.A. The protein folding problem: when will it be solved? / K.A. Dill, S.B. Ozlcan , T.R. Weikl, J.D. Chodera, V.A. Voelz // Curr. Opin. Struct. Biol.- 2007,- V.17.- №3,- P. 342-346.

64. Dresser W.D. Immunization of experimental animals. / Immunochemistry.-Ed. D.M. Waire. London: Blackwell Scientific Publications.- 1986.- P. 8.7 -8.27.

65. Dry S. Allogroups rabbit Ig heavy chains / S. Dry, B.S. Kim, A. Gilman-Sachs // An. Immunol. (Inst. Pasteur).- 1974.- 125c.- №1-2.- P. 41-47.

66. Dyson H.J. Coupling of folding and binding for unstructured proteins / H.J. Dyson , P.E. Wright // Curr. Opin. Struct. Biol.- 2002.- V.12.- №1.- P. 54-60.

67. Eijkhout H.W. Substitution therapy in immunodeficient patients with anti-IgA antibodies or severe adverse reactions to previous immunoglobulin therapy / H.W. Eijkhout, P.J. Broek, J.W.M. Meer // Netherlands J. Med. -2003.-V. 61.-№6.-P. 213-217.

68. Ey P.L. Isolation of pure IgGl, IgG2a, and IgG2b immunoglobulins from mouse serum using protein A-sepharose / P.L. Ey, S. J. Prowse, C. R. Jenkin // Immunochemistry.- 1978.- V.15.- P. 429-436.

69. Feige M.J. Structure of the murine unglycosylated IgGl Fc fragment. / M.J. Feige, S. Nath, S.R. Catharino, D. Weinfurtner, S. Steinbacher, J. Buchner // J. Mol. Biol.- 2009,- V. 391.- №3.- P. 599-608.

70. Franek F. Purification of IgG monoclonal antibodies from ascetic fluid based on Rivanol precipitation // Methods in enzymology.- 1986.- N-Y: Acad. Press.-V.121.- P.631-638.

71. Friesen A. // Process for preparing purified immune globulin (IgG). 1986,-CA 1 201 063.

72. Fudenberg H.H. Overview: Allotypes //Handbook of experimental immunology.- Oxford: Blackwell Scientific Publications.- 1986.- V.3.: Genetics and molecular immunology.- P. 93.1-93.4.

73. Garbett N.D. Opsonic activity of a new intravenous immunoglobulin preparation: Pentaglobin compared with sandoglobulin / N.D. Garbett, C.S. Munro, PJ. Cole // Clin. Exp. Immunol.- 1989.- V.76.- №1,- P.8-12.

74. German Federal requirements ' 'Requirements of validation studies for demonstrating the virus safety of medicinal products derived from human blood plasma" (Bundesanzeiger № 84, Mai 1994).-1994.

75. Ghose S. Protein interactions in hydrophobic charge induction chromatography (HCIC) / S. Ghose, B. Hubbard, S.M. Cramer // Biotechnol. Prog.- 2005.- V.21.- №2.- P. 498-508.

76. Guidelines on viral inactivation and removal procedures intended to assure the viral safety of human blood plasma products. // WHO Technical Report, Series №. 924.- 2004. P. 151-219.

77. Gutman G. Structure and regulation of immunoglobulins: kappa allotypes in the rat have multiple amino-acid differences in the constant regions / G.

78. Gutman, E. Loh, L. Hood // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1975.- V.72.- №> 12.-P.5046-5050.

79. Habeeb A.F. Preparation of human immunoglobulin by caprylic acid precipitation / A.F. Habeeb, R.D. Francis // Prep. Biochem.- 1984.- V.14.-№1.- P.1-17.

80. Hahn R. Bovine whey fractionation based on cation-exchange chromatography. / R. Hahn, P.M. Schulz, C. Schaupp, A. Jungbauer // j. Chromatogr. A.- 1998.- V.795.- №2.- P. 277-287.

81. Hale J.E. Purification of humanized murine and murine monoclonal antibodies using immobilized metal-affinity chromatography / J.E. Hale, O.E. Beidler // Anal. Biochem.- 1994.- V. 222.- №1.- P. 29-33.

82. Hamers-Casterman C., Loo W. Pronolagns: a lagomorph with d-locTis allotypic specificity / C. Hamers-Casterman, W. Loo // Archives Internat. Physiol. Biochimie.- 1979.- V. 87.- №1.- P. 181-182.

83. Harada S. Evaluation of production and characterization of monoclonal antibodies to human IgG of four subclasses / S. Harada, S. Nishimura, A. Saiga, S. Hosoi, H. Mikawa // Microbiol. Immunol.- 1989.- V.- 33.- №7.- P. 579-592.

84. Hao Y.L. Fractional Precipitation of Proteins with Polyethylene Clycol / Y.L. Hao, K.C. Ingham, M. Wickerhauser // Methods of Plasma Protein Fractionation. Ed. J.M. Curling.- 1980.- N.-Y.:Academic Press.- P. 57-70

85. Henzler-Wildman K.A. A hierarchy oftimescales in protein dynamics is linked to enzyme catalysis. / K.A. Henzler-Wildman, M. Lei, V. Thai, S.J. Kerns, M. Karplus, D. Kern // Nature.- 2007.- V.450. P. 913-916.

86. Hermanson G.T. Immobilized Affinity Ligand Techniques / G.T. Hermanson, A. K. Mallia, P. K. Smith // San Diego, CA: Academic Press.-1992.- 454 p.

87. Hetherington S.V. Opsonic activity of immunoglobulin prepared for intravenous use / S.V. Hetherington, G.S. Giebink // J. Lab. Clin. Med.- 1984-.-V.104, №6.- P. 977-86.

88. Holgate R.G. Circumventing immunogenicity in the development of therapeutic antibodies / R.G. Holgate, M.P. Baker // IDrugs.- 2009.- V. 12.-№4.- P. 233-237.

89. Horsjsi J. The isolation of gamma globulin from bloodserum by Rivanol / J. Horsjsi, R. Smetana//Acta Med. Scand.- 1956.- vol.155.- №1.- P.- 65-70.

90. Horowitz B. WHO Expert Committee on Biological Standardization / B. Horowitz, P. Minor, J.J. Morgenthaler, T. Burnouf, R. Mclntoch, A. Padilla, R. Trorpe., W.G. van Aken // World Health Organ Tech Rep Ser.- 2004.- №924.-P. 1-232.

91. Jendeberg L. The mechanism of binding staphylococcal protein A to immunoglobin G does not involve helix unwinding / L. Jendeberg, M. Tashiro, R. Tejero, B.A. Lyons, M. Uhlen, G.T. Montelione, B. Nilsson // Biochemistry.- 1996.- V.35.- №1.- P. 22-31.

92. Jerne N.K. Towards a Network Theory of the Immune System // An. Immunol. (Inst. Pasteur).- 1974.- 125c.- №1-2.- P. 373-389.

93. Kabat E.A. The structural basis of antibody complementarity // Adv. Protein Chem.- 1978.- V. 32.-P. 1-75.

94. Kabir S. Immunoglobulin purification by affinity chromatography using protein A mimetic ligands prepared by combinatorial chemical synthesis // Immunol. Invest- 2002.- V.31.- №3-4.- P. 263-278.

95. Kistler P. Ethanol precipitation / P. Kistler, H. Friedli // Methods of plasma protein fractionation.- ed. J.M. Curling.- Academic Press: New Yorlc.-1980.-P. 3-15.

96. Klein H.G. Pathogen inactivation technology: cleansing the blood supply // Journal of Internal Medicine.- 2005.- V.237.- №3.- P. 224-237.

97. Krapp S. Structural analysis of human IgG-Fc glycoforms reveals a correlation between glycosylation and structural integrity / S. Krapp, Y. Mimura, R. Jefferis, R. Huber, Sondermann // J. Mol. Biol.- 2003.- V. 325.-№5.- P. 979-989.

98. Le Moli S. Intravenous immunoglobulin preparations: a comparative in vitro study of Fc mediated functions /S. Le Moli, R. Nisini, A. Fattorossi, P.M. Matricardi, R. D'Amelio ¿¿J. Clin. Lab. Immunol.- 1989.- V.29.- №2.-P.79-84.

99. Lienqueo M.E. Current insights on protein behaviour in hydrophobic interaction chromatography / M.E. Lienqueo, A. Mahn, J.C. Salgado, J.A. Asenjo // J. Chromatogr. B. Analyt. Technol. Biomed. Life Sci.- 2007,- V. 849.- №1-2.- P.53-68.

100. Lindmark R. Binding of immunoglobulins to protein A and immunoglobulin levels in mammalian sera. / R. Lindmark, K. Thoren-Tolling, J. Sjoquist // J. Immunol. Meth.- 1983.- V.62.- P. 1-13.

101. Liu C.C. Protein evolution with an expanded genetic code / C.C. Liu, A.V. Mack, M.L. Tsao, J.H. Mills, H.S. Lee, H. Choe, M. Farzan, P.G. Schultz, V.V. Smider // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 2008.- V. 105.- №46.- P. 17688-17693.

102. Lôchelt M. A novel replicative form DNA of Aleutian disease virus: the covalently closed linear DNA of the parvoviruses / M. Lôchelt, H. Delius, O.R. Kaaden//J. Gen. Virol.- 1989.- V.70.- Pt 5.- P. 1105-1116.

103. Mage R. Immunoglobulin allotypes / R. Mage, R. Lieberman, M. Potter, W.D. Terry // The Antigens.- N.Y.: Acad. Press.- 1973.- V.I.- P. 299376.

104. Mage R. Rabbit immunoglobulin allotypes // Handbook of experimental immunology.- Oxford: Blackwell Scientific Publications.- 1986.-V.3: Genetics and molecular immunology.- P. 99.1-99.25.

105. Majidi J. Production and purification of polyclonal antibody against bovine immunoglobulins in rabbits / J. Majidi, J. Abdolalizadeh, M.B. Amirkhiz, S. Majidi //African Journal of Biotechnology.-2007.- Vol. 6.- №12.-P. 1369-1372.

106. Manchini G. Immunochemical quantitation of antigens bay single radial immunodiffusion / G. Manchini, A.O. Carbonara, J.F. Heremans // Immunochemistry.-1965.-№3.- P. 235-254.

107. Mani B. Molecular mechanism underlying B19 virus inactivation and comparison to other parvoviruses / B. Mani, M. Gerber, P. Lieby, N. Boschetti, C. Kempf, C. Ros // Transfusion.- 2007.- V.47.- №10.- P. 1765-1774.

108. Marchalonis J.J. Shared antigenic determinants of immunoglobulins in phylogeny and in comparison with T-cell receptors / J.J. Marchalonis, V.S. Hohman, H. Kaymaz, S.F. Schluter // Comp. Biochem. Physiol. B.- 1993.- V. 105.-№3-4.- P. 423-441.

109. Martin L.G. Serum antibodies against human albumin in critically ill and healthy dogs / L.G. Martin, T.Y. Luther, D.C. Alperin, J.M. Gay, S.A. Hines //J. Am. Vet. Med. Assoc.- 2008.- V. 232.- №7.- P. 1004-1009.

110. Mathews K.A. The therapeutic use of 25% human serum albumin in critically ill dogs and cats / K.A. Mathews // Vet. Clin. North. Am. Small. Anim. Pract.- 2008.- V. 38.- № 3.- P. 595-605.

111. McKinney M.M. A simple, non-chromatographic procedure to purify immunoglobulins from serum and ascites fluid / M.M. McKinney, A. Parkinson // J. Immunol. Methods.- 1987.- V.96.- №2,- P. 271-278.

112. Moore P. Let's call the whole thing off: Some thoughts on the Protein structure initiative // Structure.- 2007.- V.15.- P. 1350-1352.

113. Morahan G. An idiotypic determinant formed by both immunoglobulin constant and variable regions / G. Morahan, C. Berek, G.F. Miller//Nature.- 1983.- V.301.- №5902.- P. 720-722.

114. Montoya A. Long-term storage of peroxidase-labelled immunoglobulins for use in enzyme immunoassay // A. Montoya, J.V. Castell / J. Immunol. Methods.- 1987.- V.99.- № 1.- P. 13-20.

115. Gächter, M. Pichl, D. Niederwieser //Immunology.- 1997.- V.90.- №2.- P. 212-218.

116. Naumoff D.G. GH97 is a new family of glycoside hydrolases, which is related to the a-galactosidase superfamily // BMC Genomics.- 2005.- V.6.-P. 112.

117. Neurath A.R. Fraction of proteins with different isoelectric point by Rivanol. / A.R. Neurath, R. Brunner // Experientia.- 1969.- V. 25.- P.668-671.

118. Nübling C.M. Hepatitis C transmission associated with intravenous immunoglobulins / C.M. Nübling, H. Willkommen, J. Löwer // Lancet.- 1995.-V.345.-P. 1174.

119. Nygren P.A. Species-dependent binding of serum albumins to the streptococcal receptor protein G / P.A. Nygren, C. Ljungquist, H. Tromborg, K. Nustad, M. Uhlen // Eur. J. Biochem.- 1990.- V. 193.- №1.- P. 143-148.

120. Omar A. Virus inactivation by pepsin treatment at pH 4 of IgG solutions:factors affecting the rate of virus inactivation / A. Omar, C. Kempf, A. Immelmann, M. Rentsch, J J. Morgenthaler // Transfusion.- 1996.- V. 36.-№10.- P. 866-872.

121. Omenn G S. Strategies for plasma proteomic profiling of cancers // Proteomics.- 2006,- V.6.- №20. P. 5662-5673.

122. Pace C.N. How to measure and predict the molar absorption coefficient of a protein / C.N. Pace, F. Vajdos, L. Fee, G. Grimsley, T. Gray // Protein Sei.- 1995.- V. 4.- №11.- P. 2411-2423.

123. Ouchterlony O. Diffusion-in-gel methods for immunological analysis.II //Prog. Allergy.- 1962.- №6.- P. 30-154.

124. Papoian G.A. The physics and bioinformatics of binding and folding-an energy landscape perspective / G.A. Papoian, P.G. Wolynes // Biopolymers.- 2003.- V.68.- №3.- P. 333-349.

125. Parson M. Mouse immunoglobulin allotypes / M. Parson, L.A. Herzenberg, A.M. Stall, L.A. Herzenberg // Handbook of experimental immunology.- Oxford: Blackwell Scientific Publications.- 1986.- V.3: Genetics and molecular immunology.- P. 97.1-97.17.

126. PervushinK. Structure and dynamics of a molten globular enzyme / K. Pervushin, K.Vamvaca, B Vogeli, D. Hilvert // Nat. Struct. Mol. Biol.-2007.- V. 14.- №12.- P. 1202-1206.

127. Phillips A.P. The choice of methods for immunoglobulin IgG purification: yield and purity of antibody activity / A.P. Phillips, K.L. Martin, W.H. Horton // J. Immunol. Methods.- 1984.- V.74.- №2.- P. 385-393.

128. Pillonel J. Trends in residual risk of transfusiontransmitted viral infections (HIV, HCV, HBV) in France between 1992 and 2002 and impact of Nucleic Acid Testing / J. Pillonel, S. Laperche // Transfus. Clin. Biol.- 2004.-V. 11.-№2.-P. 81-86.

129. Poison A. The Fractionation of Protein Mixtures by Linear Polymers of High Molecular Weight / A. Poison, G.M. Potgieter, J.F. Largier, G.E.F. Mears, F.J. Jourbet // Biochim. Biophys. Acta.- 1964.- V. 82, P. 463-475.

130. Prince A.M. Inactivation of hepatitis B and Hutchinson strain non-A, non-B hepatitis viruses by exposure to Tween 80 and ether / A.M. Prince, B. Horowitz, B. Brotman, T. Huima, L. Richardson, M.C. van den Ende // Vox Sang.- 1984.- V.46.-№1.- P. 36-43.

131. Protein Purification. Handbook. 18-1132-29 / Ed. AC. Upsala.-Amersham Biosci.- 2001.- P. 11-25.

132. Requirements for the collection, processing and quality control of blood, blood components and plasma derivatives (Requirements for Biological Substances №. 27, revised 1992). II In: WHO Expert Committee on Biological

133. Standardization. Forty-third report. Geneva, World Health Organization.-1994.- Annex 2 (WHO Technical Report Series, № 840).- 99 p.

134. Rollag H. Viral safety of blood derivatives by immune neutralization / H. Rollag, B.G. Solheim, J.L. Svennevig // Vox Sang.- 1998.- V.74.- P. 213217.

135. Roux K.H. Direct demonstration of multiple VH allotopes on rabbit molecules: allotrope characteristics and Fab arm rotational flexibility revealed by immunoelectron microscopy // Europ. J. Immunol.- 1984a.- V. 14.- №5.- P. 459-464.

136. Roux K.H. Immunoelectron microscopic localization of idiotypes and allotypes on immunoglobulin molecules / K.H. Roux, D.W. Metzger // J. Immunol.- 1982.- V. 129.- №6.- P. 2548-2553.

137. Salier J.-P. Quantitative studies of Gm allotypes. IV. Quantitative variation Gml(3) antigenicity in relation to light chain type and Vk sub-group/ J.-P. Salier, C. Rivat, L. Rivat // Mol. Immunol.- 1980a.- V. 17.- №2.- P. 229235.

138. Schanfield M.S. Human immunoglobulin allotypes / M.S. Schanfield, E. Loghem //Handbook of experimental immunology.- Oxford: Blackwell Scientific Publications.- 1986.- V.3: Genetics and molecular immunology.- P. 94.1-94.18.

139. Schaub A. Self-reactivity in the dimeric intravenous immunoglobulin fraction / A. Schaub, S. Wymann, M. Heller, M. Ghielmetti, Z. Beleznay, B.M. Stadler, R. Bolli, S. Miescher // Ann. N.-Y. Acad. Sci.- 2007.- V.1110.- P. 681-693.

140. Schur P. Human gamma-g subclasses // Prog. Clin. Immunol.- 1972.-№1.-P. 71-104.

141. Sela M. Antibodies to sequential and conformational determinants / M. Sela, B. Shechter, J. Shechter, F. Borek // Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol.- 1967.- V. 32.- P. 537-545.

142. Shade R.O. Nucleotide sequence and genome organization of human parvovirus B19 isolated from the serum of a child during aplastic crisis / R. O. Shade, M.C. Blundell, S.F. Cotmore, P. Tattersall, C.R. Astell // J. Virol.-1986.- V.58. -№3.- P. 921-936.

143. Siegl, G. Biology and pathology of autonomous parvoviruses // The parvoviruses. Ed. K. I. Berns.-N.-Y.: Plenum Press, 1984.- P. 297-348.

144. Sisti A.M. Preparation of lyophilized and liquid intravenous immunoglobulin G: development and scale-up / A.M. Sisti, M.S. Vitali, M.J. Manfredi, J.A. Zarzur // Vox Sang.- 2001.- V. 80.- № 4.- P. 216-224.

145. Specht K. The role of DNA damage in PM2 viral inactivation by methylene blue photosensitization // Photochemistry and Photobiology.- 1994.-V.59.- №5.- P. 506-514.

146. Spiegelberg H.L. Biological activities of immunoglobulins of different classes and subclasses // Adv. Immunol.- 1974.- V. 19.- P. 259-294.

147. Stein A. Cation exchange chromatography in antibody purification: pH screening for optimised binding and HCP removal / A. Stein, A. Kiesewetter // J. Chromatogr. B. Analyt. Technol. Biomed. Life. Sci.- 2007.-V.848.- №1.- P. 151-158.

148. Steinbuch M. Protein Fractionation by Ammonium Sulphate, Rivanol and Caprylic Acid Precipitation. // Methods of Plasma Protein Fractionation. Ed. J.M. Curling.- 1980.-N.-Y.:Academic Press.- P. 32-36.

149. Strosberg A.D. Multiple amino acid sequence differences between rabbit kappa light chain of allotype b4, b6 and b9 / A.D. Strosberg, J. Janssens, R. Zeeuws // Fed. Proc.- 1976.- V.35.- №3.- P. 629.

150. Suomela H. An Ion Exchange Method for Immunoglobulin Production. // Methods of Plasma Protein Fractionation. Ed. J.M. Curling.-1980.- N.-Y.:Academic Press.- P. 107-116.

151. Tabel H. Immunoglobulins of mink. Evidence for five immunoglobulin classes of 7S type / H. Tabel, D.G. Ingram // Immunology.-1972.- V.22.-P. 933-942.

152. Tchernov A.A. Method for B-phycoerythrin purification from Porphyidium cruentum / A.A. Tchernov, K.M. Minkova, D.I. Georgiev, N.B. Houbavenska //Biotechnol. Tech. 1993.- V.7.- P. 853- 885.

153. Tegerani J. Amino acid sequence of the CH2 domain from various lagomorph IgGs / J. Tegerani, J.D. Capra, W.J. Mandy / /Mol. Immunol. 1982.- V.19.- №7.- P. 841-846.

154. Terpstra F.G. Viral safety of CI-inhibitor NF / F.G. Terpstra, ML Kleijn, A.H.L. Koenderman, J. Over, F.A.C. van Engelenburg, H. Schuitemaker, A.B. van't Wout // Biologicals.- 2007.- V.35.- №3.- P. 173-181.

155. Tijssen P. Practice and Theory of Enzyme Immunoassays. Amsterdam: Elsevier.- 1985.- 549 p.

156. Vermeer A.W. The thermal stability of immunoglobulin: unfolding and aggregation of a multi-domain protein / A.W. Vermeer, W. Norde // Biophys. J.- 2000.- V.78.- №1,- P. 394-404.

157. Verkhovsky O.A. Determination of cross-reactive (common) epitopes of animal and human immunoglobulins using monoclonal antibodies / O.A. Verkhovsky, Yu.N. Fedorov // Russian Journal of Immunology.- 1997.- V. 2. — № 1.- P. 24-28.

158. Wadsworth C. IgA in commercial gamma-globulin preparations / C. Wadsworth, L.A. Hanson // Scand. J. Immunol. 1976. - V.5.- № 1-2. - P. 15-22.

159. Wagner S.J. Differential sensitivities of viruses in red cells suspensions to methylene blue photosensitization / S.J. Wagner, D. Robinette, J. Storry, X.Y. Chen, J. Shumaker, L. Benade // Transfusion.- 1994.- V.34.-№6.- P. 521-526.

160. Werdan K. Supplemental immune globulins in sepsis: a critical appraisal / K. Werdan, G. Pilz // Clin. Exp. Lmmunol.- 1996.- V.104 (suppl. 1).- P. 83-90.

161. Yokoyama T. Removal of small non-enveloped viruses by nanofiltration / T. Yokoyama, K. Murai, T. Murozuka, A. Wakisaka, M. Tanifuji, N. Fujii, T. Tomono // Vox Sang.- 2004.- V. 86.- P. 225-229.