Биохимические характеристики нативных и модифицированных форм IgG некоторых представителей семейства псовых тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Нестерова, Ольга Юрьевна

• Нестерова, Ольга Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Нестерова, Ольга Юрьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Структура и молекулярно-биологические свойства иммуноглобулина G.

1.2. Методология иммобилизации (модификации) белков, пептидов и физиологически активных веществ.

1.3. Общетеоретические принципы модификации IgG.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Используемые в экспериментальной работе материалы.

2.1.1. Сырье для изготовления особо чистых форм IgG.

2.1.2. Хроматографические сорбенты для выделения особо чистых форм IgG.

2.1.3. Материалы для проведения электрофореза и иммуноэлектрофореза.

2.1.4. Материалы и реактивы, использованные для проведения нехроматографического фракционирования.

2.1.5. Материалы, использованные при изготовлении лабораторных ИФА тест-систем.

2.1.6. Материалы и реагенты для проведения иммунизации и взятия крови.

2.2. Фракционирование образцов плазмы крови.

2.2.1. Нехроматографическое фракционирование.

2.2.2. Хроматографическое фракционирование.

2.3. Иммунизация и взятие образцов крови животных реципиентов.

2.4. Изготовление основных иммунореагентов.

2.4.1. Выделение IgG из антисыворотки, специфичной к IgG собаки.

2.4.2. Получение адсорбционно-иммобилизованных иммунореагентов.

2.4.3. Изготовление пероксидазных коньюгатов.

2.5. Химическая модификация IgG.

2.5.1. Активация водорастворимого сополимера.

2.5.2. Синтез химерных конструкций IgG и совиаля.

2.6. Физико-химические методы анализа.

2.6.1. Определение концентрации белка.

2.6.1.1 .Спектрофотометрический метод.

2.6.1.2. Биуретовый метод.

2.6.2. Электрофорез в ПААГ.

2.7. Биохимические методы анализа.

2.7.1. Преципитационные методы.

2.7.1.1. Двойная иммунодиффузия.

2.7.2. Методы иммуноферментного анализа.

2.7.3. Иммуноэлектрофорез.

2.8. Статистическая обработка результатов.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Выделение биохимически гомогенных и конформационно нативных IgG из плазмы (сыворотки) крови собаки, песца, лисицы.

3.2. Определение качества иммуносывороток и конструирование лабораторного набора для индикации IgG собаки.

3.3. Влияние состава инкубационной среды на титр антител из класса IgG собаки.

3.4. Исследование антигенной структуры видовых IgG в гомологичной системе анализа (IgG собаки - aHTnlgG собаки).

3.5. Оптимизация реакции сополимерной модификации IgG собаки

3.6. Исследование биохимических и биологических свойств нативных и сополимерно модифицированных форм IgG собаки.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биохимические характеристики нативных и модифицированных форм IgG некоторых представителей семейства псовых»

Актуальность проблемы. Прогресс в секвенировании нуклеиновых кислот позволил разработать исследовательский подход, с помощью которого фактологию" палеонтологии, сравнительную и онтогенетическую биохимию, можно увязать с особенностями первичной структуры ДНК и, тем самым, корректно обсуждать время и направление молекулярной эволюции живых систем [Киселев, 2000]. Функциональный подход к организации генома клетки предполагает перевод одномерного (линейного) кода ДНК в трехмерную структуру белка. При этом разнообразие белковых вариантов и всевозможных комплексов на их основе значительно больше количества генов, кодирующих их полипептидную цепь [Baker, Sali, 2001; Arnason et ah, 2004; Карелин, Иванов, 2005]. С учетом обобщенной проблематики, объемлющей направления исследований, касающихся полиморфизма генов, степени их консерватизма и закономерностей фолдинга, фундаментальная концепция «в гомологии структур зашифрована аналогия функций» оказалась весьма плодотворной и в настоящее время [Hegyi, Gerstcin, 1999; Свердлов, 2000]. Принципиальные закономерности фолдинга в общих чертах будут раскрыты в ближайшие десятилетия [Иванов, Вьюгин, 2000; Березовский, 2001]. Однако, с методологических позиций секвепирование белков является более трудоемким процессом по сравнению с секвенированием ДНК и, следовательно, процесс создания «каталога протеинов» отодвигается на неопределенный период. Согласно теоретическим воззрениям [Огиевецкая, 1978; Колчанов с соавт., 2003; Татаринов, 2004; Татаринов, 2005] полагают, что для достоверной реконструкции филогенетического древа необходимо сравнивать структуру 15-30 видоспецифических белков различных биологических видов. Вместе с тем, интегральные результаты такого рода исследований не позволяют взаимоувязывать результаты молекулярно-биологических подходов для описания антигенных особенностей белковой макромолекулы.

Теоретической основой для предсказания антигенного строения белка является выяснение аминокислотной последовательности и принципиальная расшифровка закономерностей фолдинга. Следовательно предсказательный потенциал современной биоинформатики не в состоянии даже па теоретическом уровне разработать принципы моделирования антигенных детерминант (их представительства) конформационной природы в составе белковой глобулы. Очевидно также, что традиционные методы исследования конформации белка - РСА или ЯМР - мало информативны для описания антигенного своеобразия функционально-сходиых макромолекул и, тем более неприемлемы, с учетом описания антигенных различий в ряду вид -род - семейство - отряд - класс [Христофоров с соавт., 1987; Ширяев, 2006]. Именно поэтому в сравнительных и онтогенетических исследованиях целесообразно развивать технологии «мокрой биохимии», в т.ч. для формирования конкретных представлений функциональной гепомики во всем ее разнообразии и, в частности, за счет развития методологии иммунохимического анализа функционально-сходных белков. Иммунологические подходы для изучения этих белков в пределах одного семейства используются, как правило, в рамках проблематики филогении и совершенствования систематики.

В настоящей работе обсуждаются результаты исследования антигенного своеобразия IgG семейства псовых. Для получения результатов с надлежащим уровнем качества были выполнены необходимые исследования с целью обеспечения принципа адекватности метода и модели. В последующих сериях экспериментов изучалась возможность конструирования сополимерно модифицированных форм IgG. Актуальность такого рода исследований обусловлена теорией искусственных иммуногенов и ориентацией полученных результатов на создание предметного задела для изучения возможности:

- технологического совершенствования производства направленных (специфических) иммуноглобулиновых биопрепаратов с удлиненным периодом полувыведения;

- использования гетерологичных IgG в медико-ветерипарпой практике без индукции иммунного ответа на парэнтеральное введение чужеродной генетической информации.

Цель исследования - получение и характеристика нативпых и модифицированных сополимером поливинилпирролидоиа с диацеталем акролеина (совиаль) образцов IgG собаки в рамках проблемы инфекционной и биологической безопасности иммуноглобулиновых биопрепаратов

Задачи исследования:

В связи с поставленной целью решались следующие задачи:

1) Разработать лабораторную схему препаративной наработки IgG некоторых представителей из семейства псовых в электрофоретически гомогенной и конформационно нативпой (хроматографически мопомерной) форме.

2) Оптимизировать методы ИФА для индикации IgG и выявления антител в составе специфического IgG собаки.

3) Провести сравнительное исследование антигенных свойств видовых IgG из семейства псовых.

4) Синтезировать сополимерно модифицированные формы IgG собаки и изучить их некоторые биохимические и биологические свойства.

Научная новизна. Создана универсальная исследовательская технология получения биохимически гомогенных и конформационно нативиых форм IgG. Предложен адекватный методологический подход для описания антигенного своеобразия IgG животных, принадлежащих к одному и тому же семейству. Впервые в объективных количественных критериях выявлены различия антигенного строения при сравнении образцов IgG собаки, песца и лисы. Получены также оригинальные данные в отношении образцов IgG других животных, принадлежащих к разным отрядам. Оптимизирована реакция поликонденсации в системе взаимодействия IgG с активированной формой совиаля (сополимер винилпирролидона с диацетальакролеином). Установлен избирательный эффект модификации IgG совиалем. Есть все основания полагать, что в наибольшей степени сополимерная матрица экранирует N—терминал IgG и Fab-фрагменты молекулы. В процессе циркуляции гомологичных IgG в составе химерного комплекса зарегистрирована его устойчивость к ингибиторным системам организма. Тенденцию к увеличению активности антител в сыворотке крови подопытных животных возможно объяснить постепенной элиминацией сополимера из состава модифицированной формы специфического IgG.

Практическая значимость. Результаты исследования послужили основой для разработки, согласования и утверждения в соответствии с порядком, действующим в РФ, нормативно-технической и технологической документации на производство иммуноглобулинового биопрепарата: технические условия на препарат «Иммуно С» (ТУ 9382-002-43683877-03), 27 стр.; технологический регламент производства на препарат «Иммуно С» (№ 001516-0п), 300 стр.; наставление по применению препарата «Иммуно С» (№ 13-4-03/0690; № 001516-0п), 2 стр.

В рамках университетско-академического кластера в гермозопе GMP на заводских площадях организовано серийное производство препарата «Иммуно С» в рамках требований широких производственных испытаний (федеральный аттестат № 886 от 2 апреля 2003 года), продукция сертифицирована (№ РОСС RU. ФБ01. В08840). По совокупным показателям качества препарата «Иммуно С» и его клиническому эффекту аналогов в России нет.

Исследовательская технология препаративной наработки IgG собаки, песца и лисы в биохимически гомогенной и копформациопно пативной форме заложена в «Инструкции по изготовлению и контролю видовых IgG человека и животных». В настоящее время указанный документ и натуральные образцы проходят согласование и испытания в ФГУ «Центр качества лекарственных средств и кормов для животных».

Апробация работы.

Результаты исследований представлены на Региональной конференции биохимиков Урала, Поволжья и Западной Сибири, 20-21 сентября 2001 г., г. Ижевск; на 5-ой Российской университетско-академической научно-практической конференции, г. Ижевск, 2001 г.; на 6-ой Российской университетско-академической научно-практической конференции, г. Ижевск, 2003 г.; на I съезде физиологов СНГ, Сочи, 2005; на Международной конференции инженерного образования, 25-29 июля 2005 г., г. Гливиц (Польша); на XIX Международной научно-технической конференции «Химические реактивы, реагенты и процессы малотоннажной химии», Уфа, 2006; на Третьей международной научно-практической конференции «Исследование разработка и применение высоких технологий в промышленности», Санкт-Петербург, 2007; на Четвертой международной научно-практической конференции «Исследование, разработка и применение высоких технологий в промышленности», Санкт-Петербург, 2007; па VI конференции иммунологов Урала, Ижевск, 2007.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ. В соответствии с порядком, действующим в РФ, разработан, согласован и утвержден комплект нормативно-технической и технологической документации на ветеринарный иммуноглобулиновый препарат нового поколения «Иммуно С», включающий технические условия ТУ (ТУ 9382-002-43683877-03), технологический регламент производства на препарат «Иммуно С» (№ 001516-0п) и наставление по применению препарата «Иммуно С» (№ 13-4-03/0690; № 001516-0п).

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, раздела экспериментальных исследований и обсуждения результатов, заключения, выводов и списка использованной литературы. Работа изложена на 134 страницах машинописного текста, включает 19 таблиц, 10 рисунков. Библиография содержит 206 наименований российских и зарубежных авторов.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Нестерова, Ольга Юрьевна

выводы

1. Установлено, что 2-х стадийный хроматографический процесс, выполненный на слабом анионообменном сорбенте (типа DEAE) и эксклюзионная хроматография" на геле типа сефадекс G-200 (S-200), обеспечивает изготовление электрофоретически гомогенных образцов IgG без олигомеров и фрагментов целевого белка.

2. Разработана исследовательская технология выявления антигенных свойств IgG среди животных из семейства псовых. Предлагается на основе электрофоретически гомогенных образцов в прямом и прямом конкурентном методах иммуноферментного анализа воспроизводить градуировочные зависимости и по контрольным точкам вычислять уровень иммунологического сродства.

3. Оптимизирована реакция поликонденсации на основе индукции альдегидных групп в составе сополимера винилпирролидона с диацеталем акролеина и свободных е-аминогрупп лизина IgG. Отработана электрофоретическая система анализа для определения соотношений нативного и модифицированного IgG в составе коньюгированных форм.

4. Методом скрининга модифицированных IgG выявлен экранирующий эффект сополимерной матрицы: с увеличением мольного соотношения совиаль/белок происходит уменьшение иммунологического сходства модифицированных IgG по сравнению с нативной формой на 75,8 -97,5 % (в прямом ИФА) и на 56,9 - 87,9 % в (конкурентном ИФА). Комплексы IgG-совиаль термостабильны (60 °С).

5. Разработана, согласована и утверждена нормативно-техническая и технологическая документация в соответствии с порядком, действующим в РФ, на производство и исследование экспериментальных серий иммуноглобулинового биопрепарата «Иммуно С» нового поколения.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На основе анализа данных литературы и полученных экспериментальных результатов была создана исследовательская технология получения стандартизованных форм видовых IgG, значимых для обеспечения биотехнологических нововведений. С использованием стандартизованных образцов разработана технология изучения антигенного своеобразия IgG среди животных одного и того же семейства. В частности, воспроизводство градуировочных зависимостей в конкурентной системе ИФА позволяет обсуждать проблематику антигенных различий IgG собаки, песца и лисицы. По нашему мнению конкуретные методы исследования позволяют адекватно оценивать гомологию антигенного строения IgG близкородственных видов. С учетом фундаментальной неопределенности, касающейся генома псовых и «протеома слазмы (сыворотки) крови собаки» содержательный смысл разработанной технологии сводится к исследованию образцов IgG с надлежащим уровнем чистоты (гомогенным в ПААГ-электрофорезе) и представленным мономерной формой целевого белка. Полагаем, что полученные нами данные могут быть основой промышленного производства гетерологиченых иммуноглобулиновых биопрепаратов с надлежащей биологической безопасностью. Очевидно также и то, что препаративная и аналитическая биохимия, на основе которой производятся стандартизованные образцы, являются достаточной для сопровождения промышленного фракционирования плазмы (сыворотки) крови с целью производства иммуноглобулиновых биопрепаратов. Внедрение в систему контроля теста на молекулярные параметры целевых белков актуализировано проблематикой реактогенности олигомерных форм IgG [Панов, 2004].

Разделы исследования, касающиеся конструирования сополимерно модифицированных форм IgG, в том числе IgG, специфичных к чужеродной генетической информации, нацелены на создание терморезистентных субстанций целевого белка. Предварительные результаты, полученные нами свидетельствуют, что сополимер в составе IgG выполняет роль экранирующей матрицы. В условиях инактивирующих воздействий (концентрация гентамицина 10 мг/мл, 10-ти часовой режим термоинактивации при температуре 60 °С) показана остаточная активность антител из сополимерных комплексов IgG. Отметим, что химерная конструкция IgG реализуется за счет азометиновых связей, а собственно комплекс стабилизирован не прочностью, но множеством шиффовых оснований. Об этом свидетельствует факт повышения активности антител по окончании процесса физико-химической инактивации нативных и модифицированных форм IgG собаки, специфичного к яичному альбумину. Ранее отмечалось, что полученные нами данные позволяют в определенной степени представить некоторые соображения о структуре сополимеров IgG. По-видимому, сополимерная матрица не выполняет роль носителя, вокруг которой формируется белковый комплекс. Об этом свидетельствуют результаты поликлонального эпитопного картирования, выполненного в сравнительных исследованиях нативных и модифицированных IgG. Полученные химеры не обладают свойством искусственных антигенов, в т.ч. не несут на своей поверхности антигенных детерминант, индуцирующих антителогенез. Их полезное свойство определяется резистентностью к денатурирующим воздействиям. В сравнительном аспекте антигенсвязывающая активность химерных IgG при 2-5-ти кратном мольном избытке совиаля существенно возрастает после инактивирующих процедур. Последнее обстоятельство — обеспечение вирусной безопасности биопрепаратов за счет модернизации стадии инактивации в последнее время приобретает все большую актуальность [Панов, 2004].

Биохимическая составляющая исследований является основой технологических нововведений на производство иммуноглобулинового биопрепарата «Иммуно С» из трупной крови песца и лисицы. На препарат

Иммуно С» в соответствии с порядком, действующим в РФ, разработана, согласована и утверждена нормативно-техническая и технологическая документация: ТУ 9382-002-43683877-03 (27 стр.), технологический регламент производства №001516-0п (300 стр.) и наставление по применению препарата «Иммуно С» № 13-4-03/0690 (2 стр.).

На основании результатов исследований, предусмотренных требованиями широких производственных испытаний, получено экспертное заключение. В частности отмечается, что по совокупным показателям качества «Иммуно С» представляет собой иммуноглобулиновый биопрепарат нового поколения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Нестерова, Ольга Юрьевна, 2009 год

1. Ануфриева Е.В. Химическая модификация лизоцима водорастворимыми полимерами, структура и свойства конъюгата / Е.В. Ануфриева//Высокомолекулярные соединения.- 1989.-№ 1.-С. 100-103.

2. Баранов B.C. Молекулярная медицина: молекулярная диагностики, превентивная и генная терапия / B.C. Баранов // Молекулярная биология.-2000.- Т. 34.- № 4.- С. 684-695.

3. Баранов O.K. Эволюционная иммуногенетика сывороточных белков животных / O.K. Баранов // Новосибирск.- Наука.- 1981.- 226 с.

4. Березин И.В. Иммобилизованные ферменты / И.В. Березин, Н.Л. Клячко, А.В. Левашов, К. Мартинек, В.В. Можаев, Ю.Л. Хмельницкий // М.-Высшая школа.- 1987.- 159 с.

5. Березовский И.Н. Эволюционные аспекты структуры и фолдинга белков / И.Н. Березовский // Молекулярная биология.- 2001.- Т.35.- № 2.- с. 278-284.

6. Бобровник С.А. Недостатки традиционного метода определения аффинности антител и их устранение / С.А. Бобровник, М.А. Демченко, С.В. Комисаренко //Укр. бкгам. журн.- 2009.- Т. 81.- № 3.- С. 66-76.

7. Буркин А. А. Иммуноферментная тест-система определения афлатоксина В1 / А.А. Буркин // Прикладная биохимия и микробиология.-2000.- Т.36.-№1.- с. 93-97.

8. Варфоломеев С. Д. Биокинетика: Практический курс / С. Д. Варфоломеев, К.Г. Гуревич // М. ФАИР-ПРЕСС,- 1999.- 720 с.

9. Вербов В.Н. Принципы твердофазного иммуноферментного анализа / В.Н. Вербов // Твердофазный иммуноферментный анализ. Сборник научных трудов.- Л. Издательство Института им. Л. Пастера.- 1988.- С. 3-27.

10. Войцеховский Б. Л. Математическая обработка результатов гетерогенного иммуноферментного анализа / Б.Л. Войцеховский // Твердофазный иммуноферментный анализ. Сборник научных трудов.- Л. Издательство Института им. Л. Пастера.- 1988.- С. 42-58.

11. Волков ГЛ. Технология получения иммуноглобулинов. I. Технологические аспекты очистки / Г.Л. Волков // Украинский биохимический журнал.- 2006.- Т. 78.- №3.- с.88-98.

12. Володькин Д.В. Включение белков в полиэлектролитные микрочастицы путем послойной адсорбции полиэлектролитов на агрегатахбелка // Д.В. Володькин, Н.Г. Балабушевич, Г.Б. Сухоруков, Н.И. Ларионова / Биохимия.- 2003.- Т. 68.- №2,- С. 283-289.

13. Вьюгин В.В. Идентификация горизонтально перенесенных генов на основе филогенетических данных. / В.В. Вьюгин, М.С. Гельфанд, В.А. Любецкий // Молекулярная биология.- 2003.- Т. 37.- №4.- С. 673-687.

14. Вьюгин В.В. Согласование деревьев: реконструкция эволюции видов по филогенетическим деревьям генов. / В.В. Вьюгин, М.С. Гельфанд, В.А. Любецкий //Молекулярная биология,- 2002,- Т. 36.- № 5.- С. 807-816.

15. Гааль Э. Электрофорез в разделении биологических макромолекул / Э. Гааль, Г. Медьеши, Л. Верецкеи // М. Мир.- 1982.- 448 с.

16. Гаврилин М.В. Применение полимеров и сополимеров производных акриловой кислоты и этиленоксида в фармации / М.В. Гаврилин // Химико-фармацевтический журнал.- 2001.- Т.35.- №1.- С. 33-37.

17. Галактионов В.Г. Эволюция суперсемейства иммуноглобулинов / В.Г. Галактионов // Успехи современной биологии.- 1992.- Т.112.- № 1,- С. 29-43.

18. Гамаюрова B.C. Иммобилизация и стабилизация ферментных препаратов липаз / B.C. Гамаюрова, М.Е. Зиновьева, Е.В. Елизарова, К.Л. Васина // Вестник Казанского технологического института.- 2007.- №2.- С. 103-108.

19. Геккелер К. Аналитические и препаративные лабораторные методы / Геккелер К., Экштайн X. // М.Химия,- 1994. 327 с.

20. Гельфанд М.С. «ДНК: от молекулы до генома, от биохимических озарений к алгоритмическому анализу» / Гельфанд М.С. Любецкий В.А. // Вестник РАН,- 2003.- № 11,- С. 963-970.

21. Герман А.Б. Получение и свойства иммобилизованной аминоацилазы Streptoverticillium olivoreticuli / А.Б. Герман, А.Д. Неклюдов // Прикладнаябиохимия и микробиология.- 2001.- Т. 37.- № 1.- С. 63-66.

22. Деев С.М. Иммуноглобулины / С.М. Деев // Белки и пептиды / Под ред. Иванова В.Т., Липкина В.М. М.- Наука. - 1995.- 448 с.

23. Деев С.М. Молекулярная иммунология. От генов иммуноглобулинов — к искусственным антителам, от антител к биомедицине / С.М. Деев // Биоорганическая химия.- 2000.- Т.26.- №10.- с. 784-786.

24. Детерман Г. Гель-хроматография / Г. Детерман // М. Мир.- 1970.- 250 с.

25. Джеске Д.Д. Иммуноглобулины: Строение и функции / Д.Д. Джеске, Д.Д. Кепра // Иммунология: в 3-х т. / Под. Ред. У. Пола // М. Мир.- 1987-1988.-Т. 1.-С. 204-254.

26. Дзантиев Б.Б. Современное состояние и перспективы развития иммуноферментного анализа / Б.Б. Дзантиев, A.M. Егоров // Журн. Всесоюз. хим. общ-ва им. Д.И. Менделеева.- 1982.- Т. 24.- №4.- С. 442-449.

27. Дзантиев Б.Б. Комплексы вирусов с синтетическими полиэлектролитами и их взаимодействие с антителами / Б.Б. Дзантиев, А.Н., В.А. Изумрудов, А.Б. Зезин, А.Ф. Бобкова, A.M. Егоров И.Г. Атабеков, В.А. Кабанов//ДАН СССР.- 1990.- Т. 311.-№6.- С. 1482-1486.

28. Евстигнеева Р.П. Методы поиска антигенных детерминант для белков с известной первичной структурой / Р.П. Евстигнеева, М.Е. Палькеева // Биоорганическая химия.- 2000.- Т. 26.- № 4.- С. 243-262.

29. Егоров A.M. Теория и практика иммуноферментного анализа / A.M. Егоров, А.П. Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М. Гаврилова // М. Высш. шк.- 1991.278 с.

30. Еремин А. Н. Стабилизация разбавленных водных растворов пероксидазы / А.Н. Еремин // Прикладная биохимия и микробиология.- 2002.Т. 38,-№2.-С. 174-181.

31. Жоров О.В., Кириллова Н.М., Марцев С.П. Окислительное иодирование IgG кролика: локализация метки в Fc-фрагменте и эффекты модификации / О.В. Жоров, Н.М.Кириллова, С.П. Марцев // Биохимия.-1991.- вып. 5.-С. 828-837.

32. Закиров У.Б. Физиологичеки активные полимеры / У.Б. Закиров // Медицинский журнал Узбекистана.- 1984.- №9.- С. 54-60.

33. Иванов В.Т. Молекулярная биология в 2000 году: прогнозы, реальность и снова прогнозы / Иванов В.Т., Вьюгин Ю.А. // Биоорганическая химия.- Т. 26.-№10.- С.643-654.

34. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля /М. Медицина.-1987.- 742 с.

35. Кабанов В.А. Физико-химические основы и перспективы применения растворимых интерполиэлектролитных комплексов / Кабанов В.А. // Высокомолекулярные соединения.- 1994,- Т. 36.- №2.- С. 183-197.

36. Канюков В.Н. Материалы для современной медицины / В.Н. Канюков, А.Д. Стрекаловская, В.И. Килькинов //Оренбург. ГОУ ОГУ.- 2004.- Хс.

37. Карелин А.А. Пептидомика новое направление постгеномных технологий / А.А. Карелин, В.Т. Иванов // Вестник Российской академии наук.- 2005.- Т. 75.- № 2.- С. 139-156.

38. Кирш Ю.Э. Поли-Ы-винилпирролидон и другие поли->1-виниламиды / Ю.Э. Кирш // М. Наука.- 1998.- 210 с.

39. Киселев JI.JI. Геном человека и биология XXI века / Л.Л. Киселев // Вестник РАН.- 2000.- Т. 70.- №5.- С. 412-424.

40. Киселев Л.Л. Молекулярная биология от 1970 до 2000 и дальше. / Киселев ЛЛ. // Биоорганическая химия. 2000 г.- Т. 26,- №10.- С. 874-881.

41. Климович В.Б. Моноклональные антитела к подклассам IgG человека: получение и исследование их специфичности / В.Б. Климович, М.П. Самойлович, И.Ю. Крутецкая, С.Ф. Пашкова, Т.С. Котова // Иммунология.-1998.-№4.- С. 27-31.

42. Климович В.Б. Моноклональные антитела к подклассам IgG человека: эпитопная специфичность и применение в иммуноанализе / В.Б. Климович, М.П. Самойлович, И.Ю. Крутецкая, С.Ф. Пашкова // Иммунология.- 1998.- № 4,-С. 31-34.

43. Ковалев Е.И. Биохимические основы иммунитета к низкомолекулярным химическим соединениям / Е.И. Ковалев, О.Ю. Полевая //М.: Наука.- 1985.- 304 с.

44. Колчанов Н.А Молекулярная эволюция генетических систем / Н.А. Колчанов, В.В. Суслов, В.К. Шумный // Палеонтологический журнал.- 2003.-№6.- С. 58-71.

45. Коршак В.В. Полимеры в процессах иммобилизации и модификации природных соединений /В.В. Коршак, М.И. Штильман // М.: Наука.- 1984.261 с.

46. Кульберг А.Я. Антииммуноглобулины / А.Я. Кульберг // М. Медицина.- 1978.- 184 с.

47. Кэтти Д. Антитела. Методы. / Д. Кэтти, Ч. Райкундалия, Дж. Браун, Н.Р. Линг, Д. Гордон, Ж. Арвие, А.Ф. Уильяме. Под ред. Д. Кэтти. // Кн. 1,2. М.-Мир,- 1991.

48. Лакин Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин // М. Высшая школа.- 1980.- 280 с.

49. Ларионова Н.И. Разработка микро- и наносистем доставки лекарственных средств / Н.И. Ларионова, Д. Дюшен, П. Кувре, М. Олливон, Р. Греф // Российский химический журнал.- 2008.- Т. LII.- № 1,- С. 48-56.

50. Любарев А.Е Изучение необратимой тепловой денатурации белков методом дифференциальной сканирующей калориметрии / А.Е. Любарев, Б.И. Курганов // Успехи биологич. химии.- 2000.- Т. 40.- С. 43-84.

51. Макс Э.Э. Иммуноглобулины: молекулярная генетика / Э.Э. Макс // Иммунология: в 3-х т. / Под. Ред. У. Пола // М.Мир.- 1987- 1988. Т. 1- С. 255-315.

52. Маурер Г. Диск-электрофорез. Теория и практика электрофореза в полиакриламидном геле / Г. Маурер // М. Мир.- 1971.- 247 с.

53. Можаев В.В. Химические, физические и биологические подходы к созданию стабилизированных ферментных катализаторов для биотехнологии /В.В. Можаев // Успехи химии.- 1987.- Вып. 10.- С. 1659 1692.

54. Москвичев Б.В. Иммобилизованные ферменты / Б.В. Москвичев, М.С. Поляк // Серпухов.- 1991.- 112 с.

55. Николаев А.Ф. Водорастворимые полимеры / А.Ф. Николаев, Г.И. Охрименко // Л. Химия.- 1979.- 56 с.

56. Огиевецкая М.М. Скорость эволюции белков и индукция иммуноглобулинов / М.М. Огиевецкая // Молекулярная биология.- 1978.-Т.12.- № 4.- С. 829-835.

57. Остерман JI. А. Исследование биологических макромолекул э л ектро фокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами / Л.А. Остерман // М. Наука.- 1983.- 304 с.

58. Панарин Е.Ф. Синтез и иммуномодулирующие свойства сополимеров N-винилпирролидона с винилсахаридами / Панарин Е.Ф., Иванова Н.П., Б.елохвостова А.Т., Потапенкова Л.С. // Химико-фармацевтический журнал.-2002.- Т. 36.- №4.- С. 19-22.

59. Панарин Е.Ф. Биологически активные полимерные наносистемы / Е.Ф. Панарин // Инновации.- 2008.- № 6(116).- С. 50-53.

60. Панов В. П. Принципы обеспечения вирусной безопасности продуктов крови / В.П. Панов // Химико-фармацевтический журнал.- Т. 38.- № 3.- С. 3947.

61. Петров Р.В. Иммунология и иммунохимия / Р.В. Петров, И.В. Березин // Журн. Всесоюз. хим. общ-ва им. Д.И. Менделеева.- 1982.- Т.24.- №4.- С. 362-368.

62. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика / Р.В. Петров // М. Медицина.- 1976.- 338 с.

63. Петров Р.В. Иммунный ответ к искусственным антигенам / Р.В. Петров, P.M. Хаитов // Успехи современной биологии.- 1976.- Т. 88,- Вып. 3.- №6.- С. 330-342.

64. Петров Р.В. Иммуногенетика и искусственные антигены / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, Р.И. Атауллаханов // М. Медицина,- 1983.- X с.

65. Петров Р.В. Искусственные антигены и вакцины / Р.В. Петров, В.А. Кабанов, P.M. Хаитов //Журнал всесоюзного химического общества им. Д.И. Менделеева.- 1988.- Т. XXXIII.- № 5.- С. 502-522.

66. Платэ Н.А. Физиологически активные полимеры и макромолекулярные терапевтические системы / Н.А. Платэ // Высокомолекулярные соединения. 1982.-№4.- С. 675-696.

67. Платэ Н.А. Физиологически активные полимеры. / Н.А. Платэ // М. Химия.- 1986.- 84 с.

68. Практическая химия белка / Под ред. А. Дарбре // М. Мир.- 1989.- 623с;

69. Ратнер В.А. Проблемы теории молекулярной эволюции / В.А. Ратнер,

70. A.А. Жарких, Н.А. Колчанов // Новосибирск.- Наука.- 1985.- 264 с.

71. Родионов С.Ю. Оптимизация процесса технологического выделения фльфа-фетопротеина человека и методы идентификации изоформ белка /С.Ю. Родионов, Д.А. Суховая, JI.P. Хорошева, Е.Г. Орлова, В.А. Черешнев,

72. B.В. Стариков // Биотехнология.- 2007.- № 2.- С. 8-12.

73. Свердлов Е.Д. ДНК в клетке: от молекулярной иконы к проблеме «Что есть жизнь?». / Свердлов Е.Д. // Вестник РАН.- 2003 г.- Т. 73.- №6,- С.- 497505.

74. Сидельковская Ф.П. Исследование гидратации поли-N-винилпирролидона методом ИК-спектроскопии. / Ф.П. Сидельковская, A.M. Сахаров, В.П. Панов // Химико-фармацевтический журнал.- 2000.- №8.1. C. 18-21.

75. Скоробогатько О.В. Влияние условий синтеза иммунолакказных коньюгатов на характеристики и состав получаемых соединений / О.В. Скоробогатько // Прикладная биохимия и микробиология.- 1994.- Т.ЗО.- №3.-С. 477-482.

76. Татаринов Л.П. Контуры современной теории биологической эволюции / Л.П. Татаринов //Вестник РАН.- 2005.- Т.75,- №1.- С. 36-39.

77. Татаринов JI.П. Современные тенденции в развитии филогенетических исследований / Л.П. Татаринов // Вестник РАН.- 2004.- Т.74.- №6.- С. 515523.

78. Тенникова Т.Б. Изучение физико химических свойств протеолитического фермента террилитина, модифицированного сополимером на основе винилпирролидона / Т.Б. Тенникова // Биохимия.-1980.- Т. 45.- №3.- С. 438 - 445.

79. Тернер М. Структура и функции антител / М. Тернер, Ф. Ричарде, Дж. Варга, Р. Розенстайн, У. Конигсберг, М. Стьюард, А. Файнстайн, Д. Бил // Под общей ред. Л. Глина, М. Стьюарда / М. Мир.- 1983.- 200 с.

80. Топчиева И.Н. Комплексы ПЭГа с белками / И.Н. Топчиева // Биохимия.- 1998.- Т. 63.-№11.-С. 1543-1546.

81. Тяги Р. Использование химической модификации и химического сшивания для стабилизации белков / Р. Тяги, М. Н. Гупта // Биохимия.- 1998.-№3 С. 395-407.

82. Флайшман Д.Б. Иммуноглобулины: аллотипы и идиотипы / Д.Б. Флайшман, Д.М. Дейви // Иммунология: в 3-х т. / Под. Ред. У. Пола // М.Мир.- 1987- 1988. Т. 1- С. 313-335.

83. Фомичева И.И. Иммуноглобулины американской норки: генетика, экспрессия, эволюция / И.И. Фомичева, О.Ю. Волкова // Новосибирск. Наука.- 1992.- 159 с.

84. Хаитов P.M. Вакцины нового поколения и проблемы биобезопасности / P.M. Хаитов // Цитокины и воспаление.- 2005.- №3.- С. 24-26.

85. Хохлова Т.Д. Влияние химии поверхности и размеров пор модифицированных силикагелей на адсорбцию овальбумина / Т.Д. Хохлова // Вестник Московского университета.- Сер. 2 Химия.- 2002.- Т.43.- №3.- С. 144-146.

86. Христофоров B.C. Исследование структурно-функциональных свойств иммуноглобулинов G и их фрагментов методом 'Н-ЯМР / B.C. Христофоров,

87. В.П. Кутышенко, В.П. Завьялов // Биоорганическая химия.- 1987.- Т. 13.- № 11.-С. 1446-1464.

88. Чард Т. Радиоиммунологические методы / Т. Чард // М. Мир.- 1981.248 с.

89. Чекнев С.Б. Конформационное состояние и антигенные характеристики у-глобулина человека, модифицированного связыванием катионов меди и цинка / С.Б. Чекнев, Е.А. Денисова, Е.Е. Бабаева, У.А. Воробьева, Э.М. Монгуш //Иммунология,- 2007.- №5.- С.274-280.

90. Ширяев Н.В. Эволюционное прошлое IgG млекопитающих в свете современных знаний о структуре и функционировании данной белковой молекулы /Ширяев Н.В. //Иммунология.- 2006.- №1.- С.58-60.

91. Штильман М.И. Полимеры в биологически активных системах / М.И. Штильман // Соросовский образовательный журнал.- 1998.- №5,- С. 48-53.

92. Штильман М.И. Полимерные селективные мембраны в медицине и биотехнологии / М.И. Штильман //М. ВНТИЦ.- 1987,- 101 с.

93. Arnason U. Mitogenopmic analyses provide new insights into cetacean origin and evolution / U. Arnason, A. Gullberg, A. Janke// Gene.- 2004.- V. 333.-P. 27-34.

94. Baker D. Protein structure prediction and structural genomics / D. Baker, A. Sali // Science.- 2001.- V. 294.- P. 93-96.

95. Balabushevich N.G. Polyelectrolyte assembling for protein microencapsulation / N.G. Balabushevich, O.V. Lebedeva, O.I. Vinogradova, N. I. Larionova // J. Drug Delivery Sci. Tech.- 2006.- V. 16 (4).- P. 315-319.

96. Berzofsky J.A. The concepts of crossreactivity and specificity in immunology / J.A. Berzofsky, A.N. Schechter // Molecular Immunology. 1981. -Vol.18.-№8.-P. 751-763.

97. Black C.M. Cross-reactivity of 75 monoclonal antibodies to human immunoglobulin to sera of non-human primates / C.M. Black, J.S. McDougal, R.C. Holman, B.L. Evatt, C.B. Reimer // Immunol. Lett.- 1993.- V. 37.- P. 207-213.

98. Blanden R. V. A Unifying Hypothesis for the Molecular Mechanism of Somatic Mutation and Gene Conversion in Rearranged Immunoglobulin Variable Genes / R. V.Blanden, E. J. Steele // Immunology, and Cell Biology.- 1998.- V. 76.-P. 288-293.

99. Burnouf T. Assessment of the viral safety of antivenoms fractionated from equine plasma / T. Burnouf, E. Griffiths, A. Padilla, S. Seddilc, M.A. Stephano, J.-M. Guetierrez // Biologicals.- 2004.- V. 32.- P. 115-128.

100. Casadevall A. New Concepts in Antibody-Mediated Immunity / A. Casadevall, L.-A Pirofski // Infect. Imrnun.- 2004.- V. 72.- № 11,- P. 6191- 6196.

101. Chen C. Immunoglobulin Heavy Chain Gene Replacement: A Mechanism of Receptor Editing / C.Chen, Z. Nagy, E. L. Prak, M. Weigert // Immunity.-1995.- V. 3.-P. 747-755.

102. Chersi A. Partial primary structure of the immunoglobulin light chain constant region of a single rabbit of b5 allotype / A. Chersi, C.B. Alexander, R. Mage // Mol. Immunol.- 1980.- V.-17.-P. 1515-1523.

103. Chothia C. Canonical structures for the hypervariable loops of immunoglobulins / C. Chothia, A.M. Lesk // J. Mol. Biol.- 1987,- V. 196,- P. 901917.

104. Chothia С. Conformations of immunoglobulin hypervariable regions / C. Chothia, A.M. Lesk, A. Tramontano, M. Levitt, S.J. Smith-Gill, G. Air, S. Sheriff, E.A. Padlan, D. Davies, W.R. Tulip //Nature.- 1989.- V. 342.- P.877-883.

105. Coloma M.J. The hinge as a spacer contributes to covalent assembly and is required for function of IgG / Coloma M.J., Trinh K.R., Wims L.A., Morrison S.L. // The Journal of Immunology.- 1997. V. 158.- Issue 2.- P. 733-740.

106. Copestake D.E. Affinity liquid chromatography method for the quantification of immunoglobulin G in bovine colostrum powders / D.E. Copestake, H.E. Indyk, D.E. Otter // J. AOAC Int.- 2006.- V. 85.- № 5.- P. 12491256.

107. Curling J.M. Methods of Plasma Protein Fractionation / J.M. Curling, L.-G. Falksveden, H. Suomela, G.H. Berglof, R. Eketorp, M.J. Harvey // London: Acad. Press.- 1980.- 326 p.

108. Curtain C.C. Evolution of the immunoglobulin antigens in the ruminantia / C.C. Curtain, H.H. Fudenberg // Biochemical Genetics. 1973. - Vol.8. - №3. -P. 301-308.

109. Dall'Acqua W.F. Modulation of the Effector Function of a Human IgGi through Engineering of Its Hinge Region / W.F. Dall'Acqua, K.E. Cook, M.M. Damschroder, R.M. Woods, H. Wu // J. Immunol.- 2006.- V. 177.- P. 1129-1138.

110. Dangl J.L. Segmental flexibility and complement fixation of genetically engineered chimeric human, rabbit and mouse antibodies / J.L. Dangl, T.G Wensel, S.L. Morrison, L. Stryer, L.A. Herzenberg, V.T. Oi //EMBO J.- 1988.- V.7.- № 7.-P. 1989-1994.

111. De Genst E. Chemical basis for the affinity maturation of a camel single domain antibody / E. De Genst, F. Handelberg, A. Van Meirhaeghe, R. Vynck, R. Loris, L. Wyns, S. Muyldermans // J. Biol. Chem.- 2004.- V. 279.- P. 5359353601.

112. Dresser D.W. Immunization of experimental analysis / D.W. Dresser // J. Immunol. Meth.- 1987.- V. 97.- №1.- P. 765-798.

113. Duncan A.R. The binding site for Clq on IgG / A.R. Duncan, G. Winter //Nature.- 1988.- V. 332.- № 6166.- P. 738-740.

114. Duncan A.R. Localization of the binding site for the human high-affinity Fc receptor on IgG / A.R. Duncan, J.M. Woof, L.J. Partridge, D.R. Burton, G. Winter // Nature.- 1988.- V. 332.- № 6164,- P. 563-564.

115. Ellison J. Linkage and sequence homology of two immunoglobulin у heavy chain constant region genes / J. Ellison, L. Hood // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1982.-V. 79,-P. 1984- 1988.

116. Foote J. Conformational isomerism and the diversity of antibodies / J. Foote, C. Milstein // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1994.- V. 91.- №22.- P. 1037010374.

117. Frangione B. Structural studies of immunoglobulin G / B. Frangione, C. Milstien, J.R.L. Pink // Nature.- 1969.- V. 221.- P. 145 148.

118. Garfin D.E. One-Dimensional Gel Electroforesis / D.E. Garfm // Meth. Enzymol.- 1990.- V. 182,- P. 425-441.

119. Goel M. Plasticity within the antigen-combining site may manifest as molecular mimicry in the humoral immune response / M. Goel, L. Krishnan, S. Kaur, K.J. Kaur, D.M. Salunke // J. Immunol.- 2004.- V. 173.- P. 7358-7367.

120. Gombotz W.R. Biodegradable Polymers for Protein and Peptide Drug Delivery / W.R. Gombotz, D.K. Pettit // Bioconjugate Chem.- 1995.- V. 6.- № 3.-P. 332-351.

121. Graaf A.J. Nonnatural Amino Acids for Site-Specific Protein Conjugation / A.J. Graaf, M. Kooijman, W.E. Hennink, E. Mastrobattista // Bioconjugate Chem.-2008,- V. 15.- № 10.- P. 451-456.

122. Greiner A. Biohybrid nanosystems with polymer nanofibers and nanotubes / A. Greiner . J. H. Wendorff. A. L. Yarin . E. Zussman // Applied Microbiology and Biotechnology.- 2006.- V. 71.- №4.- P. 387-393.

123. Guddat L.W. Intramolecular signaling upon complexation / L.W. Guddat, L. Shan, Z.-Ch. Fan, K.N. Andersen, R. Rosauer, D.S. Linthicum, A.B. Edmundson // Faseb J.- 1995.- V. 9.- P. 101-106.

124. Hadge D. Evolution of low molecular weight immunoglobulins / D. Hadge, H. Ambrosius // Developmental and comparative immunology.- 1986.-V.10.-P. 377-385.

125. Hansen G. Structural Isomers of bis-PNA Bound to a Target in Duplex DNA / G. Hansen, T. Bentin // J. Mol. Biol.- 2001.- V.307.- P. 67-74.

126. Hegyi H. The relationship between protein structure and function: a comprehensive survey with application to the yeast genome / H. Hegyi, M. Gerstein // J. Mol. Biol.- 1999.- V. 288.- P. 147-164.

127. Hober S. Protein A chromatography for antibody pyrification / S. Hober, K. Nord, M. Linhult // J. Chromatogr. Analyt. Technol. Biomed. Life Sci.- 2006.-V.51.- № 3.- P. 154-161.

128. Horgan C. Effect of H chain V region on complement activation by immobilized immune complexes / C. Horgan, K. Brown, S.H. Pincus // J. Immunol.- 1992.-V. 149.-P. 127-135.

129. Josic D. Analytical and Preparative Methods for Purification of Antibodies / D. Josic, Y.-P. Lim // Food technol. Biotechnol.- 2001,- V. 39.- № 3.- P. 215-226.

130. Kaivarainen A.I. Hapten-induced changes in pig anti-dansyl antibodies revealed by EPR spectra of spin-labelled antibodies / A.I. Kaivarainen, S.P. Rozhkov, Yu.K. Sykulev, V.V. Lavrent'yev, F. Franek // Immunol. Lett.- 1981.- V. 3.-№l.-P. 5-11.

131. Keitel T. Crystallographic analysis of anti-p24 (HIV-1) monoclonal antibody cross-reactivity and polyspecificity / T. Keitel, A. Kramer, H. Wessner, C. Schlotz, J. Schneider-Mergener, W. Hohne // Cell.- 1997,- V. 91.- P. 811-820.

132. Khalikova E. Microbial Dextran-Hydrolyzing Enzymes: Fundamentals and Applications / E. Khalikova, P. Susi, T. Korpela // Microbiol. Mol. Biol. Rev.-2005.- V. 69.- № 2.- P. 306-325.

133. Komatsu T. Self-organized lipid-porphyrin bilayer membrance in vasicular form: nano-structure, photophysical properties and dioxygen coordination / T. Komatsu, A. Nakagawa, E. Tsuchida // Chem. Eur. J.- 2002,- V. 8.- P. 5469-5480.

134. Krishnan L. Paratope Plasticity in Diverse Modes Facilitates Molecular Mimicry in Antibody Response / L. Krishnan, S. Lomash, B.P.J. Raj, K.J. Kaur, D.M. Salunke // J. Immunol.- 2007.- V. 178.- P. 7923-7931.

135. Kurosawa Y. Organization, structure and assembly of immunoglobulin heavy chain diversity DNA segments / Y. Kurosawa, S. Tonegawa // J. Exp. Med.-1982.-V. 155.- P. 201.

136. Kurstak E. Enzyme Immunodiagnosis / E. Kurstak // London: Acad. Press.- 1986.-235 p.

137. Kwas M. Use of electrophoresis in polyacrylomide gel (SDS-PAGE) for evaluating IgG structure the main component of human intravenous immunoglobulin // M. Kwas, D. Buchole, J. Slusarzyk // Med. Dosw Mikrobiol.-2000.- V. 52.- № 3.- P. 301-309.

138. Li S. Liposome-encapsulated actin-hemoglobin (LEAcHb) articial blood substitutes / S. Li, J. Nickels, A.F. Palmer // Biomaterials.- 2005.- V. 26.- P. 37593769.

139. Lopes de Menezes D.E. Selective targeting of immunoliposomal doxorobicin against human multiple myeloma in vitro and ex vivo / D.E. Lopes de Menezes, L.M. Pilarski, A.R. Belch, T.M. Alien // Biochim. Biophys. Acta.- 200.-V. 1466 (1-2): 205-20.

140. Manivel V. Maturation of an antibody response is governed by modulations in flexibility of the antigen-conbining site / V. Manivel, N.C. Sahoo, D.M. Salunke, K.V. Rao // Immunity.- 2000.- V. 13.- P. 611-620.

141. Martin L.G. Serum antibodies against human albumin in critically ill and healthy dogs / L.G. Martin, T.Y. Luther, D.C. Alperin, J.M. Gay, S.A. Hines // J. Am. Vet. Med. Assoc.- 2008.- V. 232.- № 7.- P. 1004-1009.

142. Mc Kinney M.M A sempl, non-chromatographic procedure to purify immunoglobulins from serum and ascites fluid / M.M. Mc Kinney, A. Parkinson // J. Immunol. Meth.- 1987.- V. 96.- № 2.- P. 271-278.

143. Mathews K.A. The therapeutic use of 25% human serum albumin in critically ill dogs and cats / K.A. Mathews // Vet. Clin. North. Am. Small. Anim. Pract.- 2008.- V. 38.- № 3.- P. 595-605.

144. Michaelson Т.Е., Frangione В., Franklin E.C. Primary structure of the "hindge" region of human IgG3 / Т.Е. Michaelson, B. Frangione, E.C. Franklin // J. Biol. Chem.- 1977.- V. 252.- P. 883-889.

145. Mimura Y. Role of oligosaccharide residues of IgGl-Fc in Fc gamma Rllb binding / Y. Mimura, P. Sondermann, R. Ghirlando, J. Lund, S.P. Young, M. Goodall, R. Jefferis // J. Biol. Chem.- 2001.- V. 276.- № 49.- P. 45539-45547.

146. Montoya A. Long-term storage of peroxidase-labeled immunoglobulins for use in enzyme immunoassay / A. Montoya, J.V. Castell // J. Immunol. Methods.- 1987.- V. 99.- № 1.- P. 13-20.

147. Nakagawa A. O2 binding to human serum albumin incorporating iron porphyrin with a covalently linked metyl-L-histidine isomer / A. Nakagawa, T. Komatsu, M. Iizuka, E. Tsuchida // Bioconjugate Chem.- 2008.- V. 19.- P. 581584.

148. Nakane P. K. Peroxidase-labeled antibody a new method of conjugation / P. K. Nakane, A. ICawaoi // J. Histochem. Cytochem.- 1974.- V. 22.- № 12.- P. 1084-1091.

149. Nisonoff A. Allotypes of rabbit, human ana mouse immunoglobulins / A. Nisonoff, J.E. Hopper, S.B. Spring // Antibody Molecule / N.-Y. Academic Press.-1975.-P. 346-406.

150. Nollens H.H. Cross-Reactivity between Immunoglobulin G Antibodies of Whales and Dolphins Correlates with Evolutinary Distance // H.H. Nollens, C.

151. Ruiz, M.T. Walsh, F.M.D. Gulland, G. Bossart, E.D. Jensen, J.F. McBain, J.F.X. Wellehan // Ciin. Vaccine Immunol.- 2008.- V. 15.- № 10,- P. 1547-1554.

152. Olio R. Mouse immunoglobulin allotypes: Postduplication divergence of y2a and y2b chain genes / R. Olio, F. Rougeon // Nature.- 1982.- V.- 296.- P. 761763.

153. Pace C.N. How to measure and predict the molar absorption coefficient of a protein / C.N. Pace // Protein Sci.- 1995.- № 4.- P. 2411-2423.

154. Pessela B.C. Simple pyrification of immunoglobulins from whey proteins concentrate / B.C. Pessela, R. Torres, P. Batalla, M. Fuentes, C. Mateo, R. Fernandez-Lafuente, J.M. Guisan // Biotechnol. Prog.- 2006.- V. 22.- № 2.- P. 590594.

155. Poljak R.J. X-ray diffraction studies of immunoglobulins I R.J. Poljak II Adv. Immunol.- 1975.- 21.- P. 1-33.

156. Porter R.R. The hydrolysis of rabbit y-globulin and antibodies with crystalline papain / R.R. Porter // Biochemistry.- 1959.- № 73.- P. 119-126.

157. Putnam F.W. The Plasma Proteins: Structure, Function and Genetic Control. Vol. 3, 2d ed., Academic Press, NY 1977

158. Qi Y. Chromatography on DEAE ion-exchange and Protein С affinity columns in tandem for the separation and purification of proteins / Y. Qi, Z. Yan, J. Huang//J. Biochem. Biophys. Methods.- 2001.- V.49.~ № 1-3.- P. 263-273.

159. Rameez S. Biocompatible and biodegradable polymersome encapsulated hemoglobin: a potential oxygen carrier / S. Rameez, H. Alosta, A.F. Palmer // Bioconjugate Chem.- 2008.- V. 19.- P. 1025-1032.

160. Rhodes D.G. Determination of Purity / D.G. Rhodes, T.M. // Laue Methods Enzymol. / Ed. M.P. Deutscher. London. Acad. Press.- 1990.- V. 182.- P. 555-586.

161. Sazinsky S.L. Aglycosylated immunoglobulin Gj variants productively engage activating Fc receptors / S.L. Sazinsky, R.G. Ott, N.W. Silver, B. Tidor, J.V. Ravetch, K.D. Wittrup //PNAS.- 2008.- V. 105.- № 51.- P. 20167-20172.

162. Shimizu M. Comparative studies on molecular stability of immunoglobulin G from different species/ M. Shimizu, H. Nagashima, K. Hashimoto // Сотр. Biochem. Physiol.- 1993.-V. 106B.-№2.-P. 255-261.

163. Shneider R. The HSSP database of protein structure-sequence aligments / R. Shneider, A. de Daruvar, C. Sander // Nucl. Acids Res.- 1997.- V. 25.- P. 226230.

164. Schreiber A. Artiodactylan phylogeny: An immunogenetic study based on comparative determinant analysis / A. Schreiber, D. Erker // Expl. Clin. Immunogenet.- 1990.- № 7.- P. 234-243.

165. Sisti A.M. Preparation of lyophilized and liquid intravenous immunoglobulin G: development and scale-up / A.M. Sisti, M.S. Vitali, M.J. Manfredi, J.A. Zarzur // Vox Sang.- 2001.- V. 80.- № 4.- P. 216-224.

166. Steele E. J. Mechanism of Antigen-Driven Somatic Hypermutation of Rearranged Immunoglobulin V(D)J Genes in the Mouse / E. J. Steele, H. S. Rothenfluh, R. V. Blanden // Immunology and Cell Biology.- 1997.- V. 75.- P. 8295.

167. Steele E. How Have Antibody Genes Evolved? / E. Steele, R. Blanden, H. Rothenfluh // Australasian Science.- 1996.- V. 17.- №4.- P. 46-49.

168. Steinbuch M. Protein Fractionanion by Ammonium Silphate Rivanol and Caprylic Acid Precipitation / M. Steinbuch// Methods of Plasma Protein Fractionation / Ed. J. M. Curling. London: Acad. Press.- 1980.- P. 35-56.

169. Shtilman M.I. Immobilization on Polymers / M.I. Shtilman // Utreht. Tokyo.VSP.- 1993.- 496 p.

170. Shtilman M.I Polymeryc fungicides (Review) / M.I. Shtilman, M. Tzatzarakis , M.M. Lotter //Polymer Sci.- Ser. В.- № 41,- P. 1367-1375.

171. Fractionation / Ed. J. Curling London. Acad. Press.- 1980.- P. 107-116.

172. Tanaka K. High quality human immunoglobulin G purified from Cohn fractions by liquid chromatography / K. Tanaka, E. Sawatani, G.A. Dias, E.M. Shigueoka, T.C. Campos, H.C. Nakao, F. Arashiro // Braz. J. Med. Biol. Res.-2000,- V. 33.-№ l.-P. 27-30.

173. Teichmann S.A. Determination of protein function, evolution and interaction by structural genomics / S.A. Teichmann, A.G. Murzin, C. Chothia // Curr. Opin. Struct. Biol.- 2001.- V. 11,- P. 354-363.

174. The Human IgG Subclasses. Molecular Analysis of Structure, Function and Relation / Ed. F. Shakib.- Oxford.- 1990.

175. Tijssen P. Practice and Theory of Enzyme Immunoassays / P. Tijssen // Amsterdam. Elsevier.- 1985.- 548 p.

176. Tonegawa S. Somatic recombination and mosaic structure of immunoglobulin gene / S. Tonegawa// Harvey. Lectures.- 1981.- P. 61-75.

177. Tonegawa S. Somatic Generation of Antibody Diversity / S. Tonegawa// Nature.- 1983.- V. 302.- P. 575-581.

178. Veerassamy S. A transition probability model for amino acid substitutions from blocks / S. Veerassamy, A. Smith, E.R. Tillier // J. Comput. Biol.- 2003.- V. 10.-P. 997-1010.

179. Verkhovsky O.A. Determination of cross-reactive (common) epitopes of animal and human immunoglobulins using monoclonal antibodies / O.A. Verkhovsky, Yu.N. Fedorov // Russian Journal of Immunology.- 1997.- V. 2. № l.-P. 24-28.

180. Vidarte L. Serine 132 Is the C3 Covalent Attachment Point on the CHI Domain of Human IgGl / L. Vidarte, C. Pastor, S. Mas, A.B. Blazquez, V. de los Rios, R. Guerrero, F. Vivanco // J. Biol.Chem.- 2001.- V. 276.- № 41.- P. 3821738223.

181. Vlugt-Wensink K.D.F. Preclinical and Clinical In Vitro In Vivo Correlation of an hGH Dextran Microsphere Formulation / K.D.F. Vlugt-Wensink, R. de Vrueh // Pharm. Res.- 2007.- V.24.- № 12,- P. 2239-2248.

182. Von Behren L.A. Protective effect of poly-2-vinylpyridine-N-oxide on susceptibility of silica-treated mice to experimental histoplasmosis / L.A. Von Behren, S. Chaudhary, S. Rabinovich // Infect. Immun.- 1983.- V. 42.- №2.-P. 818-823.

183. Wang J. Functional Activities and Immunoglobulin Variable Regions of Human and Murine Monoclonal Antibodies Specific for the PI.7 PorA Protein Loop of Neisseria meningitides / J. Wang, G.A. Jarvis, M. Achtman, E.

184. Rosenqvist, Т.Е. Michaelsen, A. Aase, J.M. Griffiss // Infect. Immun.- 2000.- V. 68.- №4.- P. 1871- 1878.

185. Wedemayer G.J. Structural Insights into the Evolution of an Antibody Combining Site / Wedemayer G.J., Pattern P.A., Wang L.H., Schultze P.G., Stevens R.C. // Science.- 1997.- V. 276.- P. 1665-1669.

186. Weiller G. F. Recombination Signature of Germline Immunoglobulin Variable Genes / G. F. Weiller, H. S. Rothenfluh, P. Zylstra, L. M. Gay, H. Averdunk, E. J. Steele, R. V. Blanden // Immunology and Cell Biology.- 1998.- V. 76.- P. 179-185.

187. Yarin A. L. / Material encapsulation and transport in core-shell micro/nanofibers, polymer and carbon nanotubes and micro/nanochannels / A.L. Yarin, E. Zussman, J. H. Wendorff, A. Greiner // Journal of Materials Chemistry.-2007.- V.17.-P. 2585-2599.

188. Zubtsov D.A. Effect of mixing on reaction-diffusion kinetics for protein hydrogel-based microchips / D.A. Zubtsov, S.M. Ivanov, A.Yu. Rubina, E.I. Dementieva, V.R. Chechetkin, A.S. Zasedatelev //Journal of Biotechnology.-2006.- V. 122.-P. 16-27.