Создание и разработка схем применения диагностических биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, доктор биологических наук Золотухин, Сергей Николаевич

• Золотухин, Сергей Николаевич
• доктор биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации доктор биологических наук Золотухин, Сергей Николаевич

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Биологические свойства энтеробактерий и их роль в патологии животных и человека.

Биологические свойства и практическое применение бактериофагов.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Материалы и методы.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Выделение бактериофагов и селекция клонов фагов.

Морфология негативных колоний селекционированных бактериофагов.

Литическая активность.

Изучение диапазона литической активности.

Иммуногенные свойства бактериофагов.

Взаимодействие селекционированных бактериофагов с индикаторными культурами энтеробактерий.

Изучение действия инактивирующих факторов на бактериофаги.

Определение типа нуклеиновой кислоты и молекулярной массы генома.

Изучение морфологии фаговых корпускул.

Изменение литической активности бактериофагов при хранении.

Разработка оптимальных количественных параметров соотношния фаговых корпускул к клеткам хозяев для приготовления препаратов с высоким титром

Изготовление и контроль индикаторных фагов.

Разработка схем исследования материала с целью выделения и ускоренной идентификации энтеробактерий видов Y. enterocolitica, М. morganii, Е coli (сероваров 0157:Н7 и 0157:Н-), родов Proteus, Klebsiella, Citrobacter и Enterobacter.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Создание и разработка схем применения диагностических биопрепаратов на основе выделенных и изученных бактериофагов энтеробактерий»

Актуальность темы.

Всесторонние исследования по изучению бактериофагов, выполненные за последние 40-45 лет, позволили широко использовать их для решения многих задач в микробиологии, вирусологии, генетике, биохимии, иммунологии, радиобиологии, биотехнологии и других областях биологических исследований. Поэтому учение о фагах, развивающееся вначале как узкая область медицинской и ветеринарной микробиологии, в настоящее время приобрела общебиологическое значение.

Фаги являются одним из наиболее подходящих объектов для глубокого изучения ряда вирусологических проблем и, в частности, взаимоотношения вируса с клеткой-хозяином. При их использовании, возможно, моделировать как явно выраженную продуктивную инфекцию, так и потенциальное вирусоноси-тельство в форме лизогении. Успешно разрабатывается проблема лизогении, имеющая общебиологическое значение для понимания молекулярных механизмов вирусного канцерогенеза и латентных вирусных инфекций.

С 1940 годов бактериофаги стали одним из наиболее популярных объектов молекулярной биологии. Исследования с использованием фагов позволили раскрыть механизмы таких фундаментальных биологических процессов, как репликация ДНК, рекомбинация, транскрипция и генная регуляция. Благодаря х изучению фагов открылись также возможности разработки многих важных методов и направлений генной инженерии (И. Лейгнер и др., 2005).

С помощью фагов проводятся широкие радиобиологические исследования, а также первичный отбор химиотерапевтических средств и некоторых антибиотиков против вирусных болезней и злокачественных опухолей.

С выходом человека на космические орбиты фаги стали использовать для важнейших биологических исследований космического пространства.

Одним из центральных разделов современной биологии бактерий является проблема устойчивости или «надежности» наследственной информации. В настоящее время установлено, что после внедрения в клетку фаг вызывает хромосомные перестройки, что приводит к общей нестабильности наследственного материала (В.Я. Ганюшкин, 1988). В ветеринарии практическое использование фагов связано с изучением наследственной изменчивости бактерий (трансдук-ция, фаговая конверсия), индикацией патогенных бактерий и диагностикой инфекционных заболеваний, а также фаготерапией и фагопрофилактикой.

В течение двух последних десятилетий преобладало мнение, что изучение фагов уже не может дать науке ничего принципиально нового. В России при возникновении и развитии генной инженерии произошла утрата интереса к изучению фагов, и лишь единичные научные лаборатории в настоящее время продолжают заниматься фундаментальными исследованиями бактериофагов. Однако, несмотря на накопленный большой научный материал по изучению биологических свойств бактериофагов, многие вопросы требуют дополнительных исследований. Так, например, у большинства, как считалось ранее, глубоко изученных модельных эшерихиозных фагов Т-серии, так и не удалось выяснить функцию двух третей синтезируемых ими продуктов (В.Н. Крылов, 2003). Кроме того, нет единой схемы таксономии и морфологической классификации этих микроорганизмов, отсутствуют стандартные наборы бактериофагов многих возбудителей заболеваний животных и человека, а также схемы и регламенты их применения (B.C. Русалеев, 1990).

Интерес к фагам у отечественных исследователей возродился сравнительно недавно по ряду причин и, прежде всего, прежде всего с возникновением множественно-устойчивых к антибиотикам возбудителей разных болезней. Кроме того, в настоящее время в результате молекулярно-генетических исследований была выявлена связь генома патогенности бактерий с профагом и отмечена возможность генетического обмена не только между бактериями и фагами, но и между фагами и эукариотами (В.Н. Крылов, 2003).

Кафедра микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы УГСХА определила одно из приоритетных научных направлений - выделение и изучение бактериофагов малоизвестных в ветеринарной практике микроорганизмов. На кафедре в сотрудничестве с ведущими научными центрами страны (ВНИИВСГЭ, ВГНКИ, ВНИИЗЖ, ВНИИВиМ) более тридцати лет проводиться научно-исследовательская работа по этой проблеме, в частности, изучение бактериофагов ранее малоизвестных в ветеринарии патогенных энтеробактерий - возбудителей желудочно-кишечных заболеваний молодняка животных и пищевых токсикоинфекций человека.

Выбор данного направления связан с тем, что в последние годы, благодаря работам многих отечественных и зарубежных исследователей, расширилось представление об этиологической роли ранее неизвестных бактерий семейства Enterobacteriaceae в патологии животных и человека, которые широко распространены в природе и большая часть из них часто обитает в составе нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта животных и человека. Однако, среди этих микроорганизмов имеются виды, варианты и штаммы, способные вызывать у животных и людей как самостоятельные заболевания (эшерихиоз, сальмонеллез, иерсиниоз, клебсиеллезную и морганеллезную инфекцию и др.), так и совместно с другими микробами различные воспалительные процессы (энтериты, нагноение ран, абсцессы, маститы, эндометриты, менингиты, пневмонии, сепсис и т.п.), а также пищевые и кормовые токсикозы и токсикоинфек-ции. Особого внимания заслуживают работы разных ветеринарных исследователей по изучению роли этих микроорганизмов в этиологии инфекционной диареи молодняка животных.

До начала 90-х годов прошлого столетия ветеринарные лаборатории нашей страны бактериологические исследования патологического материала от больного и павшего молодняка животных сводили к выявлению в нем только патогенных эшерихий, сальмонелл, клостридий перфрингенс, стафилококков, диплококков не принимая во внимание многих представителей других родов и видов семейства Enterobacteriaceae ввиду отсутствия нормативных документов по диагностике болезней, вызываемых этими микроорганизмами. Последние были впервые разработаны и утверждены лишь в конце 1991 года (Методические указания по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями) изатем переработаны в 1999 году, согласно которым бактерии родов Proteus, Morganella, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Providencia, Yersinia и др. получили официальное признание возбудителей болезни.

В конце прошлого и начале настоящего века также было установлено, что диарею у молодняка животных с признаками геморрагического гастроэнтерита, а также отечную болезнь у поросят могут вызывать отдельные штаммы эшери-хий серогруппы 0157 (серовары 0157:Н7 и 0157Н-), ранее не принимавшиеся во внимание как непатогенные для животных (О.А. Тугаринов, М.К. Пирожков, Ю.А. Малахов, 2001).

Контаминируя пищевое сырье и продукты питания, вышеуказанные энте-робактерии представляют большую опасность для людей, вызывая у них тяжело протекающие токсикоинфекции и септический процесс.

Известно что, эффективность лечебных мероприятий во многом зависит от своевременной диагностики болезни, поэтому совершенствование методов лабораторной диагностики заболеваний, вызываемых представителями патогенных энтеробактерий или протекающих с их участием, имеет важное практическое значение.

При постановке диагноза бактериологическим методом нередко возникает ряд трудностей, связанных с тем, что основой идентификации этих бактерий являются их биохимические (ферментативные) свойства, изучение которых не позволяет быстро и всегда идентифицировать названные микроорганизмы. Современные методы лабораторной диагностики (ПЦР, ИФА, РИА), которые могут быть использованы для их индикации и идентификации, хотя и являются высокоспецифичными и чувствительными, но сложность методик, высокая стоимость оборудования и реактивов для постановки этих реакций, делает их пока недоступными для большинства диагностических ветеринарных лабораторий.

В связи с этим возникла необходимость поиска альтернативных методов лабораторной диагностики, которые были бы менее трудоёмкими, более быстрыми и доступными для лабораторий любого уровня. Одним из таких методовявляется фагодиагностика. Специфичность бактериофагов позволяет использовать их с диагностической целью для ускоренной индикации и идентификации гомологичных бактерий.

Методы фагодиагностики, разработанные в середине прошлого века, являются специфичными, не требует больших затрат времени, материалов и общедоступны лабораториям всех уровней (В.В. Аврех, 1954; Д.М. Гольдфарб, В.Н. Кузнецова, 1957; И.В. Домарадский и др., 1957; Ф.И. Ершов, 1959; Адаме М., 1961; Н.Д. Мазурин и др., 1963; B.JI. Тимаков, Д.М. Гольдфарб, 1962; Абду-саматовМ.А., 1962; В.Г. Арский, 1961; З.И. Быкова, 1964; Т.С. Вилькомирской, 1971; В.Я Ганюшкин, 1968, 1984,1988, 1991; B.C. Русалеев, 1990; И.Н. Хайрул-лин, 1990; Т.И. Кольпикова, И.А. Бакулов, В.М. Котляров, 1990, 1992 и др.).

Диссертационная работа является разделом комплексной темы кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии: «Усовершенствование методов диагностики, профилактики и лечения болезней молодняка сельскохозяйственных животных и пищевых токсикоинфекций людей», имеющую государственную регистрацию (№ 01200.203524).

Цель и задачи исследований. Целью наших научных исследований явилось конструирование диагностических фаговых препаратов на основе выделенных и селекционированных бактериофагов малоизвестных ранее в ветеринарии патогенных энтеробактерий и разработка методов индикации и идентификации вышеуказанных микроорганизмов.

Для достижения указанной перед нами цели стояли следующие задачи:1.Выделить из объектов внешней среды бактериофаги, активные в отношении энтеробактерий родов Proteus, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, видов Morganella morganii, Yersinia enterocolitica и Escherichia coli сероваров 0157:H7 и 0157:H-.

2.Изучить основные биологические свойства изолятов фагов (литическую активность, антигенные свойства, интенсивность адсорбции, длительность латентного периода внутриклеточного развития, урожайность, диапазон литической активности, специфичность, множественность инфекции, морфологию негативных колоний, морфологию фаговых корпускул, тип и размер нуклеиновой кислоты) и дать сравнительную характеристику селекционированным штаммам.

3.Отобрать штаммы фагов с заданными биологическими свойствами для конструирования диагностических препаратов.

4.0пределить таксономическое положение этих фагов в соответствии с современной Международной классификацией и номенклатурой вирусов.

5.Определить оптимальные параметры культивирования бактериофагов для изготовления диагностических препаратов.

6.Разработать технологию получения и контроля фагодиагностикумов.

7. Разработать схемы и условия ускоренной идентификации патогенных энтеробактерий с применением сконструированных диагностикумов.

8.Разработать схемы и технологические параметры индикации вышеуказанных микроорганизмов с помощью РНФ.

Научная новизна.

Выделены и селекционированы специфические фаги, лизирующие патогенные для животных и человека энтеробактерии, в результате чего создана коллекция новых штаммов фагов.

Изучены основные биологические свойства выделенных фагов (литиче-ская активность, антигенные свойства, интенсивность адсорбции, длительность латентного периода внутриклеточного развития, урожайность, диапазон лити-ческой активности, специфичность, множественность инфекции, морфология негативных колоний, морфология фаговых корпускул, тип и размер нуклеиновой кислоты) и дана их сравнительная характеристика. Определено классификационное положение изученных изолятов по биологическим свойствам согласно современной классификации и таксономии вирусов.

Разработаны технологические режимы и условия изготовления и контроля диагностических биопрепаратов из селекционированных изолятов фагов.

Впервые разработаны методы фагоиндикации и фагоидентификации энтеробактерий родов Proteus, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, видов Morgan-ella morganii,Yersinia enterocolitica и Escherichia coli сероваров 0157:H7 и 0157:H- в объектах ветеринарного надзора. Доказана возможность использования созданных биопрепаратов с диагностической целью.

Практическая значимость.

Четырнадцать выделенных и изученных штаммов бактериофагов депонированы в коллекции Всероссийского государственного центра качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов, признаны перспективными и рекомендованы для изготовления диагностических и лечебно-профилактических препаратов:• Штамм бактериофага Phagum Morganella morganii Ml7 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 11.02.1999 г.• Штамм бактериофага Phagum Morganella morganii М-20 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 11.02.1999 г.• Штамм бактериофага Phagum Escherichia coli 0157 Е-61 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 29.05.2002 г.• Штамм бактериофага Phagum Escherichia coli 0157 Е-67 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 29.05.2002 г.• Штамм бактериофага Phagum Citrobacter С-61 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 23.04.04 г.• Штамм бактериофага Phagum Citrobacter С-66 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 23.04.04 г.• Штамм бактериофага Phagum Citrobacter С-52 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 23.04.04 г.• Штамм бактериофага Phagum Yersinia enterocolitica Y/9 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 23.04.04 г.• Штамм бактериофага Phagum Proteus П-16 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 21.02.06 г.• Штамм бактериофага Phagum Proteus П-261 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 21.02.06 г.• Штамм бактериофага Phagum Enterobacter Еп-2 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 21.02.06 г.• Штамм бактериофага Phagum Enterobacter En-13 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 21.02.06 г.• Штамм бактериофага Phagum Klebsiella К-10 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 21.02.06 г.• Штамм бактериофага Phagum Klebsiella К-81 УГСХА - ДЕП.

Справка о депонировании от 21.02.06 г.

Разработаны нормативно-технические документы по изготовлению диагностических фаговых препаратов:1.Инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии эшери-хиозных бактериофагов E.coli 0157, Е-61 УГСХА и Е-67 УГСХА, утверждена ученым советом и ректором УГСХА 16.02.2004 г.

2. Инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Citrobacter С-52 УГСХА, С-61 УГСХА и С-66 УГСХА, утверждена ученым советом и ректором УГСХА 16.02.2004 г.

3.Инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Morganella morganii Ml 7 УГСХА, и М20 УГСХА, утверждена ученым советом и ректором УГСХА 16.02.2004г.

4.Инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофага Yersinia enterocolitica Y/9 УГСХА, утверждена ученым советом и ректором УГСХА 17.01.2005 г.

5.Инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Proteus П-16 УГСХА и П-261 УГСХА, утверждена ученым советом и ректором УГСХА 17.01.2006 г.

6. Инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Enterobacter Еп-2 УГСХА и Еп-13 УГСХА, утверждена ученым советом и ректором УГСХА 17.01.2006 г.

7.Инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Klebsiella К-10 УГСХА и К-81 УГСХА, утверждена ученым советом иректором УГСХА 17.01.2006 г.

Результаты исследований по разработке методов фагодиагностики вошли в следующие нормативные документы:1. Методические рекомендации по ускоренной индикации и идентификации энтерогеморрагической кишечной палочки в Е. coli 0157:Н7 и 0157:Н- в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов, утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 4 октября 2004 года;2.Методические рекомендации по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий вида Morganella morganii в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов, утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 4 октября 2004 года;3.Методические рекомендации по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Citrobacter в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов, утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 4 октября 2004 года;4.Методические рекомендации по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий вида Yersinia enterocolitica в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфического бактериофага, утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 26 июня 2006 года;5.Методические рекомендации по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Proteus в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов, утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 26 июня 2006 года;6.Методические рекомендации по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Klebsiella в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов, утверждены Отделением ветеринарной медицины РАСХН 26 июня 2006 года;7.Методические рекомендации по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Enterobacter в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов, утвержденных Отделением ветеринарной медицины РАСХН 26 июня 2006 года.

Реализация результатов исследования. Выделенные и селекционированные штаммы фагов серии УГСХА родов Citrobacter (С-66, С-61, С-52), Enterobacter (En-2, En-13), Klebsiella (К-10, K-81), Proteus (П-16, П-261), видов Morganella morganii (М-17, М-20), Yersinia enterocolitica (Y/9) и Escherichia coli сероваров 0157:H7 и 0157:Н- (Е-67, Е-61), депонированные в ФГУ «ВГНКИ», используются для изготовления диагностических бактериофагов.

Часть результатов диссертационной работы вошла в монографию: «Малоизученные энтеробактерии и их роль в патологии животных» (С.Н. Золотухин, 2004) и два учебных пособия: «Роль Morganella morganii в этиологии кишечной инфекции телят и поросят» (JT.C. Каврук, С.Н. Золотухин, В.Я. Ганюш-кин, Д.А. Васильев, 1998), «Смешанная кишечная инфекция телят и поросят, вызываемая патогенными энтеробактериями» (С.Н. Золотухин, JLC. Каврук, Д.А. Васильев, 2005).

Материалы диссертационных исследований используются в учебном процессе на лекциях и лабораторно-практических занятиях со студентами и слушателями ФПК по микробиологии, вирусологии, биотехнологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизе продуктов животноводства в Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии, на факультете ветеринарной медицины и биотехнологии Оренбургского государственного аграрного университета, Кубанского государственного аграрного университета, Воронежского государственного аграрного университета им. К.Д. Глинки, Башкирского государственного аграрного университета, Алтайского государственного аграрного университета, Мордовского государственного университета им. Н.П. Огарева, Санкт-Петербургской государственной академии ветеринарной медицины, Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана, Чувашской государственной сельскохозяйственной академии, Ивановской государственной сельскохозяйственной академии, Самарской государственной сельскохозяйственной академии, Брянской государственной сельскохозяйственной академии, Пермской государственной сельскохозяйственной академии, Ижевской государственной сельскохозяйственной академии, Вологодской государственной молочно-хозяйственной академии им. Н.М. Верещагина.

Апробация работы.

Результаты основных исследований подтверждены актами комиссионных испытаний в ФГУ «ВГНКИ» (от 11.02.1999 г.; 30.05.02 г.; 23.04.04 г.; 21.02.06 г.), УГСХА (от 5.06.03 г.); актами испытаний в условиях производства, Чердак-линской районной ветеринарной лаборатории Ульяновской области (от 24.08.04г.,2005), в Сергиевской районной ветеринарной лаборатории (от 30.08.04г.) и в ЗАО «СВ-Поволжское» Самарской области.

Материалы диссертации доложены и одобрены на научно-практических конференциях: «Аграрная наука в условиях разнообразных форм общественной собственности и регионального хозрасчета», (Ульяновск, 1990) и «Экологические проблемы сельскохозяйственного производства» (Ульяновск, 1992); XII научно-практической конференции молодых ученых «Пути повышения производства и резервы повышения качества сельскохозяйственной продукции» (Оренбург, 1993); Межгосударственных научных конференциях «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (Санкт-Петербург, 1995, 1997); Международной научной конференции «Инфекционные болезни молодняка сельскохозяйственных животных» (Москва, 1996); научной конференции посвященной 50-летию Краснодарской НИВС «Состояние и перспективы развития научных исследований по профилактике и лечению болезней сельскохозяйственных животных и птиц» (Краснодар, 1996); Межгосударственных научныхконференциях: «Актуальные проблемы ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции» (Москва, 1995, 1997); научно-практической конференции «Проблемы экологии Ульяновской области» (Ульяновск, 1997); Международной научной конференции «Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве на современном этапе» (Москва, 1999); Международной научной конференции «Современные вопросы ветеринарной медицины и биологии» (Уфа, 2000); Международной научно-практической конференции (Воронеж, 2002); Всероссийской научно-производственной конференции (Ульяновск, 2003); Международном научно-практическом семинаре: «Перспективы использования препаратов бактериофага для превенции и лечения инфекций, вызываемых патогенными и условно-патогенными микроорганизмами» (Тбилиси, 2005); Международной научной конференции: «Диагностика, профилактика и лечение инфекционных болезней, общих для человека и животных» (Ульяновск 2006 г.).

Основные материалы диссертации заслушаны и одобрены на заседаниях Отделения ветеринарной медицины РАСХН (4.10.04 г. и 26.06. 06 г.), на расширенном межкафедральном совещании сотрудников факультета ветеринарной медицины ФГОУ ВПО УГСХА (31.10.2006 г.).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 303 страницах компьютерного текста и состоит из общей характеристики работы, обзора литературы, описания собственных результатов исследований, обсуждения, выводов и практических предложений, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 74 таблицами, 35 рисунками. Список литературы включает 354 источников.

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 80 работ в центральных журналах, в трудах и сборниках Международных и Всероссийских совещаний, симпозиумов, конференций.

Основные положения, выносимые на защиту:1.Схемы позволяющие выделить из объектов внешней среды бактериофаги малоизученных в ветеринарии родов и видов энтеробактерий.

2.Биологические свойства выделенных фагов и их сравнительная характеристика.

3.Таксономическое положение изученных фагов согласно современной классификации и номенклатуры вирусов.

4.Параметры конструирования из отобранных фагов новых диагностических биопрепаратов.

5.Биотехнологические режимы, условия изготовления и контроля диагностических фаговых биопрепаратов.

6.Схемы и методы идентификации энтеробактерий с помощью специфических бактериофагов.

7.Схемы и методы ускоренной индикации гомологичных фагам энтеробактерий в объектах санитарного надзора с помощью РНФ из созданных диаг-ностикумов.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Золотухин, Сергей Николаевич

ВЫВОДЫ

1. Из объектов внешней среды и материала от животных было выделено 121 изолят бактериофагов, лизирующих патогенных энтеробактерий родов Proteus, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella; видов Morganella morganii,Yersinia enterocolitica, E. coli сероваров 0157:H7 и 0157:H-, которые имели литическую активность в пределах 102 - 109 корпускул в 1,0 см3 (по о методу Грациа) и 10" - 10" (по методу Аппельмана).

2. Выделенные и селекционированные бактериофаги обладали разным диапазоном литической активности по отношению к гомологичным энтеробактериям и выраженной специфичностью. Эшерихиозные бактериофаги активны только в отношении штаммов Е. coli 0157:Н7 и 0157:Н-, морганеллезные и иерсиниозные бактериофаги лизировали представителей только своего вида, а энтеробактерные, клебсиеллезные и протейные фаги имели межвидовые перекрестные реакции в пределах родов. Сектор лизиса составил от 7 до 100% из числа изученных гомологичных фагам штаммов энтеробактерий.

3. Изоляты фагов серии УГСХА Morganella morganii М-17 и М-20; Escherichia coli 0157 Е-61 и Е-67; Citrobacter С-61, С-66 и С-52; Yersinia enterocolitica Y/9; Proteus П-16 и П-261; Enterobacter Еп-2 и Еп-13; Klebsiella К-10 и К-81, обладающие высокой литической активностью, широким диапазоном литической активности и специфичностью были отобраны для конструирования диагностических препаратов, депонированы в коллекции

Всероссийского государственного центра качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов, признаны перспективными для изготовления диагностических и лечебно-профилактических препаратов. Они не снижали свою литическую активность при хранении в течение 12 месяцев, большинство были термостабильными и хлороформоустойчи-выми.

4. Получены гипериммунные сыворотки на производственные штаммы фагов, которые проявляли нейтрализующую активность в разведениях от 1:5 до 1:640. Наибольшее разведение, при котором происходила нейтрализация 100% фаговых корпускул, у всех сывороток было 1:80. Константы скорости нейтрализации были в пределах 20,79±0,6 -72,05±0,82 мин"1. Изучение антигенного родства фагов в перекрестных реакциях нейтрализации показало, что гетерологичные сыворотки нейтрализовали цитробактерные бактериофаги С-61 и С-66 на 52,7 и 52,2% и по этому показателю фаги являются отдаленно родственными. Близкородственные антигенные связи имели протейные бактериофаги П-16 и П-261, так как степень их нейтрализации гетерологичными сыворотками равна 74,7 и 78,7%. Остальные изоляты фагов имели перекрестный процент нейтрализации от 0 до 20,7, что свидетельствует об отсутствии у них родственных антигенных связей.

5. Селекционированные бактериофаги проявили разную адсорбционную способность. Наиболее активно на клетках-хозяев адсорбировались фаг П-261 и энтеробактерный - Еп-2, константы скорости адсорбции у коЛ | торых были в пределах К= 5,6 - 7,1 см /мин'. Менее активно адсорбировались эшерихиозные фаги Е-61 и Е-67, цитробактерный фаг С-52, энтеробактерный фаг Еп-13, иерсиниозный фаг Y/9, протейный фаг П-16, клебси-еллезные фаги К-10 и К-81 константа скорости адсорбции у них составила л |

К=3,8 - 4,6 см /мин". Самую низкую скорость адсорбции из изученных

-j | изолятов имел цитробактерный фаг С-61 (К=2,9 см /мин").

6. Изучение показателей внутриклеточного развития фагов показало, что наиболее короткий латентный период длительностью 19-22 минуты обладали изоляты фагов М-20 М. morganii, Е-61 Е. coli 0157:Н7, С-66 С. freundii, С-52 С. amalonaticus, En-2 Е. cloacae, П-261 P. vulgaris, К-81 К1. pneumoniae. Фаги Еп-13 Е. cloacae, П-16 P. vulgaris и К-10 Kl. pneumoniae имели латентный период в пределах 24-26 минут. Самый длинный латентный период от 36 до 45 минут был у фагов Ml7 М. morganii, С-61 С. freundii и Y/9 Y.enterocolitica. Наибольшую урожайность имели бактериофаги Ml7, М20 Е-61,С-66, С-52, Еп-2, П-261, К-10, которая насчитывала от 126 до 239 фаговых корпускул на одну микробную клетку. Бактериофаги Е-67, С-61, Y/9, Еп-13, П-16 и К-81 имели средний выход фаговых частиц на одну микробную клетку в пределах от 50 до 101.

7. Проведенные молекулярно-биохимические исследования бактериофагов свидетельствуют о том, что нуклеиновые кислоты всех изучен

8. В результате определения таксономического положения выделенных бактериофагов было установлено, что 10 изученных фагов: морганел-лезные (М-17 и М-20), цитробактерные (С-52, С-61 и С-66), эшерихиозные (Е-61 и Е-66), иерсиниозный (Y/9), клебсиеллезный (К-81) и энтеробактер-ный (Еп-13) в соответствии с Международной классификацией и номенклатурой вирусов относятся к морфологическому семейству Myoviridae, а по классификации А.С.Тихоненко - к V морфологической группе «Фаги с отростком сложного строения, чехол которого способен к сокращению». Два фага - один клебсиеллезный (К-10) и один энтеробактерный (Еп-2), были отнесены нами к семейству Siphoviridae и к IV морфологической группе «Фаги с несокращающимся отростками». Оба протейных бактериофага (П-16 и П-261) по морфологическим показателям относятся к семейству Pododoviridae и ко II морфологической группе «Фаги с аналогом отростка».

9. Разработаны оптимальные биотехнологические параметры производства и контроля фаговых препаратов, которые позволяют получить специфические диагностические бактериофаги для индикации и идентификации энтеробактерий родов Proteus, Morganella, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, видов Yersinia enterocolitica и Escherichia coli сероваров 0157.-H7 и 0157:H- с литической активностью не ниже 10"7(по Аппельма-ну) и не ниже 109 фаговых корпускул в 1,0 см3 (по Грациа).

Ю.Разработанные схемы и методики выделения и фагоидентификации энтеробактерий с помощью позволяет выделить и идентифицировать гомологичные бактерии за 48 часов.

11. Разработанные схемы и методики ускоренной индикации энтеробактерий с помощью РНФ в объектах санитарного надзора с использованием набора фагов позволяет обнаружить гомологичных бактерий за 18-24 часов.

12.Проведенные исследования по фагоиндикации энтеробактерий в условиях производства, показали, что в сточных водах животноводческих помещений, неблагополучных по желудочно-кишечным заболеваниям молодняка животных, а также в фекалиях больных диареей телят и поросят частота обнаружения энтеробактерий рода Proteus увеличивается на 19%, рода Klebsiella - на 23%, рода Citrobacter - на 34,1%, рода Enterobacter - на 18% и вида М. morganii - на 25%, вида Y. enterocolitica - на 48-52,5,5% случаев в сравнении с результатами бактериологического метода исследований. Время на исследования при этом сокращается с 96-120 до 18-35 часов.

1. Для изготовления диагностических фаговых препаратов предложено четырнадцать перспективных штаммов, депонированных в коллекции Всероссийского государственного центра качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов: Phagum Morganella morganii Ml7 УГСХА - ДЕП; Phagum Morganella morganii М-20 УГСХА -ДЕП; Phagum Escherichia coli 0157 Е-61 УГСХА - ДЕП; Phagum Escherichia coli 0157 Е-67 УГСХА - ДЕП; Phagum Citrobacter С-61 УГСХА -ДЕП; Phagum Citrobacter С-66 УГСХА - ДЕП; Phagum Citrobacter C-52 УГСХА - ДЕП; Phagum Yersinia enterocolitica Y/9 УГСХА - ДЕП; Phagum Proteus П-16 УГСХА - ДЕП; Phagum Proteus П-261 УГСХА - ДЕП; Phagum Enterobacter En-2 УГСХА - ДЕП; Phagum Enterobacter En-13 УГСХА -ДЕП; Phagum Klebsiella К-10 УГСХА - ДЕП; Phagum Klebsiella K-81 УГСХА -ДЕП.

2. Изготовление и контроль фаговых диагностических препаратов рекомендуем производить в соответствие с разработанными нами нормативно-техническими документами:

- «Инструкцией по изготовлению и контролю лабораторной серии эшерихиозных бактериофагов E.coli 0157, Е-61 УГСХА и Е-67 УГСХА», утвержденной ученым советом и ректором УГСХА 16.02.2004 г.

- «Инструкцией по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Citrobacter С-52 УГСХА, С-61 УГСХА и С-66 УГСХА», ут

- «Инструкцией по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Morganella morganii ml7 УГСХА, и М20 УГСХА», утвержденной ученым советом и ректором УГСХА 16.02.2004г.

- «Инструкцией по изготовлению и контролю бактериофага Yersinia enterocolitica Y/9 УГСХА», утвержденной ученым советом и ректором УГСХА 17.01.2005 г.

- «Инструкцией по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Proteus П-16 УГСХА и П-261 УГСХА», утвержденной ученым советом и ректором УГСХА 17.01.2006 г.

- «Инструкция по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Enterobacter Еп-2 УГСХА и Еп-13 УГСХА», утвержденной ученым советом и ректором УГСХА 17.01.2006 г.

- «Инструкцией по изготовлению и контролю лабораторной серии бактериофагов Klebsiella К-10 УГСХА и К-81 УГСХА», утвержденной ученым советом и ректором УГСХА 17.01.2006 г.

3. Фагоиндикацию и фагоидентификацию энтеробактерий рекомендуем проводить в соответствии с разработанными нами:

- «Методическими рекомендациями по ускоренной индикации и идентификации энтерогеморрагической кишечной палочки в Е. coli 0157:Н7 и 0157:Н- в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов»,

- «Методическими рекомендациями по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий вида Morganella morganii в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов», утвержденными Отделением ветеринарной медицины РАСХН 4 октября 2004 года;

- «Методическими рекомендациями по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Citrobacter в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов», утвержденными Отделением ветеринарной медицины РАСХН 4 октября 2004 года;

- «Методическими, рекомендациями по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий вида Yersinia enterocolitica в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфического бактериофага», утвержденными Отделением ветеринарной медицины РАСХН 26 июня 2006 года;

- «Методическими рекомендациями по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Proteus в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов», утвержденными Отделением ветеринарной медицины РАСХН 26 июня 2006 года;

- «Методическими рекомендациями по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Klebsiella в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов», утвержденными Отделением ветеринарной медицины РАСХН 26 июня 2006 года;

- «Методическими рекомендациями по ускоренной индикации и идентификации энтеробактерий рода Enterobacter в патологическом материале, кормах, пищевом сырье и объектах внешней среды с применением специфических бактериофагов», утвержденными Отделением ветеринарной медицины РАСХН 26 июня 2006 года.

4. Материалы диссертационных исследований используются в учебном процессе на лекциях и лабораторно-практических занятиях со студентами и слушателями ФПК по микробиологии, вирусологии, биотехнологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизе продуктов животноводства в 16 Вузах РФ.

5. Создана новая коллекция штаммов бактериофагов, которые могут быть использованы в научных, производственных и учебных учреждениях для прикладных и фундаментальных исследований в области микробиологии, вирусологии, биотехнологии, биологии, ветеринарии и медицины.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Золотухин, Сергей Николаевич, 2007 год

1. Адаме М. Бактериофаги. // М., Изд-во иностр. литература, 1961.

2. Абдусаматов М.А. Сравнительное изучение реакции нарастания титра фага и бактериологического метода при диагностике брюшного тифа у больных и рековалесцентов // ЖМЭИ. 1960. - № 1. - С. 23 - 27.

3. Аврех В.В. О применении бактериофагов в диагностике сальмо-неллезов // ЖЭМИ. 1954. - № 7. - С. 93 - 96.

4. Адельсон Л.И., Гуторова В.Д., Ключарева Г.Г. Современное состояние проблемы теории бактериофага и его практическое применение // Тез. докл. юбилейной научной сессии Ленинградского сан.-гиг. мед. ун-та. -Л., 1958.-С. 123-131.

5. Адельсон Л.И. Бактериофаги, активные по отношению к энтеропатогенным кишечным палочкам. -Труды Ленинградского санитарно-гигиенического медицинского института, т.66: Вопросы микробиологической диагностики и бактериофагии. Л., 1962, с. 184.

6. Артющенко И.И., Коновалов B.C. //Кишечные инфекции. М.,1987,с.70-73.

7. Алымова А.Ф., Гортинская В.В., Кузнецова А.П., Логинова Л.Л., Смирнова Е.А. Применение реакции нарастания титра фага в очагах брюшного тифа // Тр. Горьковского гос. мед. ин-та им. С.М. Кирова. -1964.-Т. 18.-С. 10-12.

8. Арский В.Г., Ахметов 3.3., Ясенский А.В. Применение реакции нарастания титра фага для диагностики хронической дизентерии // Здравоохранение Таджикистана. — 1961. — № 2. — С. 5 — 11.

9. Архангельский И.И., Степанов Б.А. Фаготипирование патогенных стафилококков, выделенных из молока коров // Ветеринария. 1966. -№ 3. - С. 27.

10. Бабков В.В. Биологическая характеристика умеренных бактериофагов Е. coli 0124:В17 // Проблемы бактериофагии и биология кишечных бактерий: сб. кафедры микробиологии I Лен. мед. ин-та им. акад. И.П. Павлова Л., 1973. 53 с.

11. Бакулов И.А., Смирнов A.M., Васильев Д.А. Токсикоинфекции и токсикозы. Вопросы профилактики. Ульяновск,2003. - С.26-28.

12. Белоусов Ю.Б., Комарова В.Г., Ефременкова О.В. Выбор антибактериальной терапии при лечении инфекций у лиц пожилого возраста // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - № 10. - С. 19-23.

13. Блохина И.Л., Соколова К.Я., Левалова Г.Ф. Новое в классификации энтеробактерий // ЖМЭИ. 1992. — №1. - С.49-52.

14. Батуро А.П., Рагинская В.П., Романенко Э.Е. и др.//Этиология острых кишечных заболеваний. Сб. научн. тр., М., 1988, с. 79-82.

15. Бабков В.В. Биологическая характеристика умеренных бактериофагов E.coli 01246:В17. Сб. кафедры микробиологии Ленинградского медицинского института им. Академика И.П. Павлова «Проблемы бактериофагии и биология кишечных бактерий». Л., 1973, с. 53.

16. Барков А.В., Ленченко Е.М. Патогенные и вирулентные свойства иерсиний. // Ветеринария. 1997. №6. с. 20-22.

17. Борисова М.А., Николаевский В.В., Генералов О.В. и др. //Условно-патогенные микробы и их бактериофаги. Нальчик, 1985, с. 9699.

18. Борисов Л.Б., Могучий A.M. Биологическая характеристика фагов энтеропатогенных кишечных бактерий. Сообщ. 1 .- Ж. Микробиология, 1962, №3, с. 94.

19. Борисов Л.Б., Хан-Фимина В.А. Биологическая характеристика фагов энтеропатогенных кишечных палочек. Сообщ,-1. Ж. Микробиология, 1970, №6, с.34.

20. Бондаренко В.М. и др. // Способность штаммов Citrobacterfreindii, выделенных при острых кишечных инфекциях, к LT-энтеротоксинообразованию. // ЖМЭИ №12 - 1986, с. 12-15.

21. Бритова С.В. //Повышение эффективности ветеринарного обеспечения промышленного свиноводства. Матер, научно-практ. респ. конф, Киев, 1987, с.34-35.

22. Бритова С.В., Каврук JI.С.//Эпизоотология, эпидемиология, средства диагностики, терапии и специфической профилактики инфекционных болезней, общих для человека и животных. Матер. Всесоюзн. конф., Львов, 1988, с.343-344.

23. Бритова С.В. //Биологические особенности бактерий рода Мог-ganella и ускоренная индикация их в объектах ветеринарного надзора. Ав-тореф. Канд. Дисс., М., 1997.

24. Башмаков Г.А. Индикация дизентерийных бактерий на поверхности методом реакции нарастания титра фага // Военно-медицинский журнал. 1961. - № 4. - С. 39 - 42.

25. Беркли Р., Бок Э., Буль Д., Бреннер Д., Васильева Л.В., Видель Ф., Грунт У., Гудселлоу М. Определитель бактерий Берджи // Под редакцией Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уильяме. М.: Мир, 1997.-432 с.

26. Бондаренко В.М., Баркус М.М. Энтеротоксигенная способность штаммов рода Klebsiella и Enterobacter, выделенных при острых кишечных заболеваниях у детей // Журн. микробиол. 1986. - № 7. - С. 28 - 32.

27. Бондаренко В.М., Баккус М.М., Брилис В.И. Гемаглютинирую-щая и адгезивная способность штаммов клебсиелл и энтеробактер // Журн. микробиол. 1987. - № 7. - С. 3 - 6.

28. Бутакова Л.Ю., Илинская Б.В., Юрова В.А. Эпидемиология госпитальной инфекции в травматологическом стационаре // Тез. докл. 6 Все-рос. съезда микробиологов, эпидемиологов и паразитологов. М.,1991. -. Т.1. -С.161-162.

29. Воронин Е.С., Девришов Д.А., Ставцева Л.Я. // Лечение и профилактика диарей телят у новорожденных телят с использованием неспецифических препаратов и бактериофагов. Вестник с.-х. науки. 1989. - № 9.-С. 105-110.

30. Воронин Е.С. Дервишшов Д.А., Ставцева Л.Я., Бедоева З.М. Экспериментальное воспроизведение диареи у новорожденных телят. / Вестник с.-х. науки. 1990. -№ 10. - с. 5-10.

31. Ворошилова Н.Н., Васяева Е.В. Вопросы таксономии фагов Ньюкастл. ЖМЭИ, 1974, №6, с. 32-35.

32. Ворошилова Н.Н. Конструирование биопрепарата бактериофага для лечение инфекции, вызванной клебсиеллами пневмонии // Иммунологические препараты для лечения нинфекционных заболеваний. Уфа, 1985 -С.60-62.

33. Вартанян, Г.Г. //Факторы патогенности энтеробактерий, выделенных при диареях новорожденных телят // Автореферат канд. дисс., АН Армении им. Абовяна, 1991.

34. Ващенок Г.И., Андрейчик Э.П. Иерсиниозы в Ленинграде. // Болезни с природной очаговостью. Тр. Ин-та Пастера. Л., 1983. т.60, с. 82-87.

35. Габрилович И.М. Основы бактериофагии. // Минск: «Высшая школа», 1973.

36. Габрилович И.М., Базиев В.Б. //Бактериальные токсины. Матер. Всесоюзн. конф., Юрмола, 1989, т. 5, с. 24.

37. Галаев Ю.В. //Патогенные ферменты бактерий. Изд. "Медицина", М., 1968.

38. Гаффаров Х.З, Иванов А.В., Непоклонов Е.А., Равилов А.З. Моно- и смешанные инфекционные диареи новорожденных телят и поросят. Казань, 2002, Издательство "Фэн"

39. Габидуллин З.Г., Ишкильдан Б.И. Морфологические свойства и адгезивность бактерий рода Proteus // ЖМЭИ 1989. - №6. - С.83-86.

40. Габрилович И.М. Биологические свойства бактериофагов Serratia marcences // ЖМЭИ. 1992. - №6. - С.10-12.

41. Горденко В.А., Шустрова Н.М. Иерсинии в растениях. ЖМЭИ, 1990, №11, стр. 16-17.

42. Гурлева Г.Г., Григорян Э.Г., Шошиев JI.H. О бактериофагии и бактериоциногении. // ЖМЭИ. 1979. №4 с.9-10.

43. Гамизаев П.А., Гасанзаде Н.П., Джагапов М.М., Табылов А.Н. О свойствах бактериофага, изолированного из культуры кишечного иерси-ниоза. // Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций. Тез. докл. Ставрополь, 1991. с. 209-211.

44. Гордейко В.А., Пушкарёва В.И. Иерсинии в воде колодцев вблизи зоны орошения стоками свиноводческих комплексов. // ЖМЭИ. 1990 №10 с.64-65.

45. Габрилович И.М., Азаматова А.Б., Хакешева Т.А. Об использовании бактериофагов для идентификации клебсиелл // Проблемы клинической микробиологии в неинфекционной клинике. М., 1983. С. - 139 -140.

46. Газиев Г.М., Батуро А.П., Плетнев А.А. Определение факторов патогенности клебсиелл // Этиология острых кишечных заболеваний: сб. науч. трудов. М., 1988. - С. 86 - 90.

47. Ганюшкин В.Я. Реакция нарастания титра фага при диагностике паратифа поросят // Ветеринария. 1967. - № 3. - С. 69 - 71.

48. Ганюшкин В.Я. Бактериофаги Salmonella choleraesuis, сравнительная характеристика и практическое применение: Автореф. дис. . докт. вет. наук. Ульяновск, 1984. - 84 с.

49. Ганюшкин В.Я. Бактериофаги сальмонелл и их применение в ветеринарии. Ульяновск, 1988.

50. Ганюшкин В.Я. Обследование свиней на носительство сальмонелл и фагопрофилактика // Вопросы ветеринарной микробиологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы. Ульяновск, 1990. - С. 20 -28.

51. Гольдфарб Д.М. Бактериофагия. М.: Медгиз, 1961. - 299 с.

52. Гольдфарб Д., Островская З.С. Индикация брюшнотифозной палочки в воде с помощью реакции нарастания титра фага // ЖМЭИ. 1957. -№5.-17 с.

53. Гольдфарб Д.М., Кузнецова В.Н. Опыт применения реакции нарастания титра фага для диагностики дизентерии // ЖМЭИ. 1957. - № 8.-С. 90-94.

54. Гордина Р.П. Фаготипирование паратифозных бактерий и действие на них бактериофагов: Автореф. дис. . докт. биол. наук. М., 1954.-52 с.

55. Дайтер А.Б., Полоцкий Ю.Е., Ценева Г.Я. Патогенные свойства иерсиний и их роль в патологии иерсиниозов. // ЖМЭИ. 1987. №2 с. 108

56. Довгаль Г.Д. Биологические свойства Yersinia enterocolitica в зависимости от источников выделения. Автореф. дис. на соиск. уч. степ, канд. мед. наук. Алма-Ата, 1988.

57. Дулатова М.В. Кишечный иерсиниоз. // JL, 1989.

58. Дунаев В.И. Оценка антигенов Yersinia enterocolitica и сывороток к ним, полученных разными способами. // Микробиология и иммунология иерсиниозов. Сб. науч. трудов т. 84. Рязань. 1985. с. 13-16.

59. Домарадский И.В., Мосолова О.Н., Денисенко JI.K. Методика быстрого обнаружения чумного микроба при помощи бактериофага. -Иркутск, 1957.- 18 с.

60. Емельяненко П.А. Энтеротоксины кишечных бактерий. Ветеринария, 2000, №2., стр. 25-27.

61. Ершов Ф.И. Индикация дизентерийных бактерий с помощью РНФ // В кн.: Изменчивость микроорганизмов и иммунитет. М., 1959. -С. 188-191.

62. Жугова Т.Ч. Бактериофаги Yersinia enterocolitica. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. наук. Минск, 1985.

63. Жугова Т.Ч., Габрилович И.М., Ющенко Г.В. Фаготипирование культур Yersinia enterocolitica. // Тез. докл. VI Всероссийского съезда микробиологов, эпидемиологов и паразитологов. Нижний Новгород. 1991 т.1 с.78.

64. Зароза В.Г. Эшерихиоз телят// Всесоюзн. Акад. Сельхоз наук им

65. В.И. Ленина, М.: Агропромиздат, 1991,238 с.

66. Зыкин Л.Ф., Щербаков А.А., Хапцев З.Ю. Иерсиниоз и псевдотуберкулез сельскохозяйственных животных // Саратов, 2002.

67. Ивашура А.И. Патогенные бактерии в молоке здоровых и больных маститом коров и методы их индикации: Автореф. дис. . канд. биол. наук. М., 1967.-20 с.

68. Иллютович А.Ю., Петрова З.С., Голубева Е.Е., Четверкина Р.С. Применение РНФ для индикации дизентерийных бактерий флекснера в организме зараженных кроликов // Бюлл. эксп. биол. и мед. 1958. - № 6. -78 с.

69. Каврук Л.С. // Тесты, критерии и методы ускоренной санитарно-бактериологической оценки репродуктивных помещений животноводческих ферм и пути оптимизации в них микробиоценоза, дисс. в форме науч.докл. на соискание учен. степ. докт. ветер, наук М., 1994.

70. Каврук JI.C. Роль Morganella morganii в этиологии инфекционной диареи молодняка // Ветеринария. 1986. - №3. - С.56-58.

71. Каврук JI.C. Ж-л "Ветеринария", 1987, №3, с.76-78.

72. Ковальчук В.П., Пархоменко Л.В. Особенности инициального звена при поражении кишок условно-патогенными бактериями Proteus mir-abilis // Микробиологический журнал. 1991. - №6. - С.78-82.

73. Казановский A.M. //Врачебное дело, 1975, №2, с. 146-148

74. Курашвилли Т.К. Адгезивный антиген K88ad Е. coli. Ветеринария, 1991, №3, стр. 26-27. Мнацаканов С.Т. //ЖМЭИ, 1983, №6, с. 53-55.

75. Коляков Я.Е., Гительсон С.С., Каврук Л.С.// Колибактериоз телят, М. "Колос",1970,223 с.

76. Красноголовец В.Н., Киселева Б.С. // Клебсиеллезная инфекция, Москва «Медицина», 1996,356 е.

77. Климанова Е.М., Белая О.Ф., Лаврова К.В., Белая Ю.А. Использование реакции коаглютинации в диагностике иерсиниозов у детей. // Педиатрия. 1993. №4 с.48-49.

78. Колос Е.Н., Гнутов И.Н., Ющенко Г.В. Сельскохозяйственные животные как источник иерсиниоза. // ЖМЭИ. 1985 №4 с. 77-79.

79. Коршунов В.М. Проблема регуляции микрофлоры кишечника. //ЖМЭИ. 1995. №3 с.48-55.

80. Крылов В.Н. Роль горизонтального переноса генов бактериофагами в возникновении патогенных бактерий. // Генетика, том №5, 2003, с. 595-620.

81. Кудрякова Т.А., Македонова Л.Д., Мишанькин Б.Н., Казакова

82. Кузнецов В.Г. Заселённость овощей и внешней среды овощехранилищ Приморского края бактериями рода Yersinia. // Гигиена и санитария. 1986. №5 с.59.

83. Кузнецов В.Г., Багрянцев В.Н. Пастеризованное молоко как фактор передачи возбудителей иерсиниозов. // ЖМЭИ. 1992. №4 с.22-26.

84. Кузнецов В.Г., Тимченко Н.Ф. Взаимодействия между бактериями рода Yersinia в водной среде. // ЖМЭИ. 1998. №6 с26-29.

85. Камбаратов П.И. Клиническая оценка РНФ как метода лабораторной диагностики острой дизентерии // ЖМЭИ. 1963. - № 4. -С. 29.

86. Капырина Н.А., Бакулов И.А. Идентификация возбудителя листериоза с помощью бактериофага // Профилактика и меры борьбы с лептоспирозом и листериозом с/х животных: матер, симпозиума. -Новочеркасск, 1972. С. 76 - 78.

87. Кац-Чернохвостова Л.Я. Проблема фаготипирования брюшнотифозных и паратифозных микробов и ее эпидемиологическое значение // ЖМЭИ. 1947. - № 8. - С. 312 - 315.

88. Квеситадзе И.Ф. Михайлова И.Ф. Установления сроков выявления в крови антител при разных методах дачи фага. ЖМЭИ, 1957, №1, с. 99-104.

89. Кебу Т.И., Стасюлевич З.К., Джикидзе Э.К., Крылова Р.И. Условно-патогенные энтеробактерии у здоровых и больных острыми кишечными инфекциями обезьян // Микробиология. 1998. - № 3. - С. 177 -182.

90. Килессо В.А. Идентификация сальмонеллезных культур с помощью О-бактериофага // Тез. докл. конф. Таллин, научн.-иссл. ин-та эпидемиол., микробиол. и гигиены. Таллин, 1960. - С. 5 - 6.

91. Киселева Б.С. Род Klebsiella // Энтеробактерии: Руководство / Под ред. В.И. Покровского. М.: Медицина, 1985. - С. 171 - 172.

92. Киселева Б.С. Гедзе Г.И., Солодова T.JI. Результаты идентификации клебсиелл при различных заболеваниях новорожденных и детей раннего возраста // Журн. микробиол. 1982. - № 7. - С. 52 - 57.

93. Киселева Б.С. Капсульные антигены как основа для разработки диагностических и профилактических препаратов // Бактериальные антигены / Под ред. Семенова. М.: МНИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, 1982. - С. 15 - 24; 30 - 39.

94. Киселева Б.С., Дусмухамедов Н.С., Голубева И.В. О выделении бактерий трибы Klebsiella при диарее у полярников // Журн. микробиол. -1978.-№12.-С. 49-52.

95. Ковалева Е.П., Рейзис А.Р. Инфекции, вызванные условно-патогенными микроорганизмами // Профилактика внутрибольничных инфекций / Под ред. Е.П. Ковалевой, Семиной: руководство для врачей. М.,1993.-С. 56-69.

96. Козловский Ю.Е., Плугина И.В., Серебряков С.Н., Барановская О.П., Тихонова Н.Б. Анализ токсигенности штаммов энтеробактерий, изолированных в зверохозяйствах России // Доклады Российской академии с.-х. наук. 2002. - № 3 - С. 44 - 46.

97. Кольпикова Т.И., Бакулов И.А., Котляров В.М. Перспективы практического применения листериозных бактериофагов // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии: матер, научн. конф. ВНИИВиМ. Покров, 1992. - Ч. 11. - С. 211 - 212.

98. Кольпикова Т.И., Бакулов И.А., Котляров В.М. Фаготипирование листерий // Ветеринария. 1990. - № 6. - С. 31 - 32.

99. Корнилова Г.В. РНФ при индикации дизентерийных бактерий в воде в сопоставлении с бактериологическим методом // Материалы 16 межоб-ластн. научно-практ. конф. лабор. работников Зап. Сибири. -Томск, 1960.-С. 20-21.

100. Корольков В.Ф., Колков В.Ф., Перепелкин B.C., Мандрик В.А. Анализ причин заболеваемости кишечными инфекциями личного состава // Военно-медицинский журнал. 1992. - № 6. - С. 54 - 57.

101. Красноголовец В.Н., Киселева Б.С. Клебсиеллезные инфекции. М.: Медицина, 1996. - С.256.

102. Кременчук Г.А., Гицевич М.А., Бояршинова К.П. Применение реакции нарастания титра фага для исследования объектов внешней среды //ЖМЭИ.-1961.-№ 7.-С. 124.

103. Крылова М.Д. Применение бактериофагов для типирования бактерий // В кн.: Бактериофагия. М.: Медгиз, 1961. - С. 220 - 257.

104. Крылова М.Д. Фаготипы бактерий. М., 1963. - 97 с.

105. Крылова М.Д. Схема фаготипирования нетоксигенных дифтерийных бактерий типа gravis // ЖМЭИ. 1970. - № 12. - С. 16 - 22.

106. Кривиский А.С. Вирусы против микробов. М., - 1962.

107. Куваева И.Б., Ладодо К.С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей. М., 1991. - 250 с.

108. Кузнецова В.Н., Хазанов М.И., Ремова Т.Н. Применение реакции нарастания титра фага для индикации дизентерийных бактерий в условиях внешней среды // ЖМЭИ. 1960. - № 6. - С. 59.

109. Кукава Г.Г., Джикидзе Э.К., Стасилевич З.К., Крылова Р.И., Кебу Т.И. Биологическая характеристика клебсиелл, выделенных от обезьян в норме и при патологии // Bait. J. Lab. Anim. Sci. 1998. - № 4. - С. 231 -237.

110. Лебедев В.И. Опыт применения РНФ в эпидемиологической практике // ЖМЭИ. 1963. - № 12. - С. 29.

111. Лебедев В.И. РНФ как ранний метод индикации дизентерии в детских учреждениях // Тр. науч. конф. аспирантов и ординаторов. М., 1964.-С. 105- 107.

112. Ленченко Е.М., Куликовский А.В. Сравнительная оценка биологического и химического методов изучения вирулентности иерсиний. // Сельскохозяйственная биология. 1997. №2 с.83-85.

113. Ленченко Е.М., Павлова И.Б. Электронно-микроскопическое исследование антагонизма бактерий. // Ветеринария. 1998. №7 с. 24-28.

114. Литвин В.Ю., Пушкарёва В.И. Возможный механизм формирования эпидемических вариантов возбудителей сапронозов в почве или воде. // ЖМЭИ. 1994. №5 с. 5-9.

115. Ленев С.В. Способ выделения и свойства бактериофагов // Сб. науч. трудов Всеросс. науч. ин-та вет. препаратов. М., 1991. - С. 24.

116. Лешкович Н.Л., Ермилова В.П. О диапазоне и специфичности действия чумных фагов 1701, 1710 и их мутантов // В кн.: Проблемы особо опасных инфекций. М., 1974. - С. 38-41.

117. Лихачев Н.В. Метод диагностики паратифа свиней при помощи бактериофага // Ветеринария. 1948. - № 7. - С. 32.

118. Лурия С., Дарнелл Д. Общая вирусология. М.: Мир, 1970.397 с.

119. Мазурин Н.Д., Розина-Япкина Ц.С. РНФ при диагностике дизентерии // ЖМЭИ. 1963. - № 1. - С. 113 - 115.

120. Мамонтова Л.М., Савилов Е.Д., Рахманин Ю.А. Условно-патогенные микроорганизмы и их распространение в водных экосистемах Сибири // Гигиена и санитария. 2005. - № 3 - С. 13-17.

121. Миляева Е.Н. Определение зараженности предметов бытовой обстановки дизентерийными микробами с помощью реакции нарастаниятитра бактериофага // ЖМЭИ. 1958. - № 12. - 34 с.

122. Марченков В.И., Зюзина В.П., Бородина Т.Н., Новосельцев Н.Н. Чувствительность иерсиний, выращенных в разных температурных условиях, к бактериофагам. // Сб. науч. трудов вып. 1. Новороссийск. 1994.

123. Методические указания по выявлению Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis в пищевых продуктах животного происхождения. // ДВ МСХиП РФ 23.09.1998.

124. Милько Е.С., Егоров Н.С. Гетерогенность популяций бактерий и процесс диссоциации. // М., 1991.

125. Морозов А.А,, Маевский М.П. Выделение и идентификация возбудителей псевдотуберкулёза и кишечного иерсиниоза из биологического материала и объектов внешней среды. // Сб. науч. трудов вып. 1. Новороссийск, 1994 с.287-290.

126. Методические указания по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции, вызываемой патогенными энтеробакте-риями. М.:- 1999, 20 с.

127. Методические указания по бактериологической диагностике колибактериоза (эшерихиоза) животных // М.:-2000.

128. Методы выделения и идентификации энтерогеморрагическойкишечной палочки 0157:Н7 //Методические указания МУК 4.2.992-00. -М.: Федеральный центр Госсанэпиднадзора Минздрава России, 2001. 28 с.

129. Мищенко В.А. и др. Некоторые аспекты патогенеза диареи новорожденных телят. Ветеринария, 1999, №9, стр. 20-23.

130. Наттерман X., Хорш Ф. Этиология и патогенез иерсиниоза. // Ветеринария. 1987. №10 с. 76-78.

131. Никитюк Н.М. Фаготипирование Styfimurium, выделенных на различных территориях СССР // ЖМЭИ. 1970. - № 1. - 53 с.

132. Николаенко Н.И., Тутов И.К. Изучение активности бактериофага Salmonella abortus ovis после длительного хранения его // Диагностика, лечение, профилактика заболеваний сельскохозяйственных животных. Тр.

133. Ставропольск. с/х ин-та. 1970. - Т. 33. - № 4. - С. 221 - 224.

134. Нурызгалиев С.Н. Фаготипирование стафилококков, выделенных от больных гнойными инфекциями // Материалы 10 науч. сем. Алма-Атин. гос. мед. ин-та. Алма-Ата, 1978. - С. 55 - 57.

135. Островская Н.Н., Гольдфарб Д.М. К использованию метода нарастания титра фага для выявления бруцелл во внешней среде // ЖМЭИ. 1961. -№ 5. - С. 145.

136. Островская З.С., Папкова Б.Н. Ускоренный метод диагностики брюшного тифа Vi-фагом // ЖМЭИ. 1951. - № 2. - С. 37 - 40.

137. Пушкарёва В.И. Патогенные бактерии в почвенных и водных сообществах (экспериментально-экологическое исследование). Автореф. дис. д-ра биол. наук. М., 1994.

138. Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных: Сб. санитарных и ветеринарных правил. М., 1996 с. 173-189.

139. Прошутинская М.А. //О-антигены бактерий рода Morganella и их серологическая идентификация. Автореферат канд. дисс., М., 1992.

140. Потапова Т.А. и др. О выделении Е. coli 0157:Н7 возбудителя ОКИ с гемолитико-уремическим синдромом в Тульской области. ЖМЭИ, 2000, №5, стр.115-116.

141. Парайко Е.Т., Парайко И.Н. Серологические варианты и группы протея у поросят при желудочно-кишечных болезнях // Биопрепараты, методы их стандартиз. и контроля: Всерос. гос. науч.- контр, ин-т вет. препаратов.-М., 1990. -С.157-160.

142. Ковальчук В.П., Пархоменко JI.B. Особенности инициального звена при поражении кишок условно-патогенными бактериями Proteus mir-abilis // Микробиологический журнал. 1991. - №6. - С.78-82.

143. Покровский В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология. -М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999.

144. Белоусов Ю.Б., Комарова В.Г., Ефременкова О.В. Выбор антибактериальной терапии при лечении инфекций у лиц пожилого возраста // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - № 10. - С. 19 - 23.

145. Петровская В.Г. Факторы патогенности энтеробактерий и их генетический контроль // Актуальные вопросы гигиены и краевой инфекционной патологии. Душанбе, 1981. - С. 194 - 200.

146. Петровская В.Г. Генетические основы вирулентности патогенных и условно-патогенных бактерий // Журн. микробиол. 1984. - № 7. -С. 77-85.

147. Петрушина Л.И. Фаготипирование стафилококков, выделенных от больных маститом коров ЖМЭИ. 1967. -№ 5. - 128 с.

148. Поддубный Ф.Н. Изучение специфичности и чувствительности РНТФ при индикации дизентерийных бактерий в воде // ЖМЭИ. 1962. № 1.-С. 29-31.

149. Покровский В.И., Поздеев O.K. Медицинская микробиология. -М.: Медицина, 1999. С. 389 - 393.

150. Покровский В.И. Проблемы внутрибольничных инфекций // Эпидемиология и инфекционные болезни. 1996. - № 2. - С. 4.

151. Покровский В.И., Дунаевский О.А. Современные принципы и методы диагностики инфекционных болезней // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2001. - № 4. - С. 5 - 7.

152. Покровский В.И. Энтеробактерии. М.: Медицина, 1985. - С. 171-192.

153. Поликарпов Н.А., Шилов В.М., Красноголовец В.Н. и др. Биологические свойства патогенных энтеробактерий, выделенных из крови больных // Журн. микробиол. 1985. - № 10. - С. 15-19.

154. Пономарев А.П., Андреева О.Г., Артамонова Т.Н. Электронно-микроскопическое выявление вирусов животных в неконцентрированных вирусосодержащих суспензиях // Вестник РАСХН. 2002. - № 2. - С. 74

155. Пономарев А.П., Мищенко В.А. Электронная микроскопия вирусов животных и некоторых условно-патогенных микроорганизмов //В.: Фолиант.-2005.- 160 с.

156. Понявин Б.Я. Изучение реакции нарастания титра фага в условиях практической лаборатории // ЖМЭИ. 1960. - № 6. - 135 с.

157. Попхадзе М.З. Использование бруцеллезного фага для диагностики бруцелл // ЖМЭИ. 1968. - № 2. - С. 119 - 124.

158. Ратинер Ю.А., Канарейкина С.К., Бондаренко В.М. // Журнал микробиологии. -1976. № 5. - С. 117-121.

159. Ревенко И.П. Бактериофаги и их использование в ветеринарной практике. Киев: Урожай, 1978. - С. 88.

160. Ревенко И.П. К диагностике рожи свиней // Ветеринария. 1970. -№6.-34 с.

161. Рубашкина Б.К., Казакова С.Ф. Применение метода нарастания титра фага для исследования объектов внешней среды // ЖМЭИ. 1959. -№ 6. - С. 110-112.

162. Русалеев B.C. Фагочувствительность аэробных спорообразую-щих бактерий // Ветеринария. 1990. - №8. - С.29-30.

163. Русалеев В.С Фагочувствительность консервированных культур Bacillus anthracis // Ветеринария. 1990. - №9. - С.39.

164. Русалеев B.C. Таксономия вирусов бактерий// Ветеринария1990

165. Свержко А.С., Седзинский М., Книрель Ю.А., Сенченкова С.Н.,

166. Комарова Н.А., Шашков А.С., Амано К. И., Кионо К., Каца В. Структурное и серологическое исследование О-антигена бактерии Proteus mirabilis ОХК (серогруппа 03), используемого в тесте Вайля-Феликса // Биохимия. №1. -1997. - С.28-35.

167. Сельников О.П., Фролов А.Ф., Авдеева J1.B., Лукач И.Г. // Гос-пит. инфек. и лекарств, устойчивые микроорганизмы / ЦНИИ эпидемиол. -М., 1992.-С. 46-47.

168. Сельников О.П., Персидский Ю.В., Барштейн Ю.А. Микробиологическая и патоморфологическая характеристика клебсиеллезной инфекции // Журн. микробиол. 1992. - Т. 54. - № 2. - С. 75 - 80.

169. Сергевнин В.И. Эпидемиологическая структура и экологическая классификация острых кишечных инфекций // Эпидемиол. и инфекционные болезни. 1997. - № 6. - С. 8 - 9.

170. Сергиенко Ф.Е. Новый метод бактерюлопчно! д!агностики за допомогою бактерюфага // Мжробюл. журнал А.Н. УССР. 1936. - № 1. -С. 85-112.

171. Сиволодский Е.П., РовновН.В., Петров Л.Н. Механизм специфической хромогенной реакции Klebsiella spp. на питательной среде с 5-аминосалициловой кислотой // Жур. микробиол. 1994 - № 3 - С. 489 -494.

172. Сиволодский Е.П., Герасименко Л.М., Копейка А.А. Питательная среда Proteus PPM для одноэтапного выделения и идентификации

173. Смирнова Е.Ю, Рыбакова И.А., Евсюкова Н.А. Эпидемиологическое распространение Y. enterocolitica в окружающей среде // Метериаля 8-го съезда ВНОЭМП. М., 2002. - Т.1 - С.З 89-399.

174. Ставцева Л.Я., Федорова М.К., Павлова Г.В. //Вестн. с-х науки, 1992, №5-6, с. 149-152.

175. Сидоров М.А. Колибактериоз (колиинфекция, колидиарея) новорожденных телят// ВИНИТИ. Серия животноводство и ветеринария: Инф. Бол. При пром. Скотоводстве, М., 1980, Том 13, с 114-112.

176. Скрыпник В.Г. Распространение бактерий рода иерсиния среди КРС. // Матер, междунар. науч. конф. "Общая эпизоотология: иммунология, экология и методологические проблемы". Харьков, 1995. с. 131-133.

177. Скрыпник В.Г., Митрофанов А.В. Роль Yersinia enterocolitica в патологии КРС. // Проблемы инфекционной патологии сельскохозяйственных животных. Владимир, 1997 с.210.

178. Смирнов И.В. О значении температуры инкубирования при идентификации кишечных иерсиний. // Микробиология и иммунология иерсиниозов. Сб. науч. трудов т. 84. Рязань. 1985. с. 22-26.

179. Собакин А.С., Зыкин Л.Ф., Хапцев З.Ю., Оркин В.Ф. Выявление кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулёза у животных. // Ветеринария. 1998. № 8 с.15-16.

180. Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б. // Определитель зоопатогенных микроорганизмов. Справочник. М.: Колос - 1995. - 320.

181. Стронговская Н.В. Сравнительное изучение РНФ для выявления носительства дизентерийных бактерий: Автореф. дис. . канд. мед. наук.

182. Тарарышкин А.П. Экспериментальный иерсиниоз вызванный Yersinia enterocolitica водного происхождения. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук. Алма-Ата, 1988.

183. Тимченко Н.Ф. Генетико-биохимические механизмы патоген-ности бактерий и перспективы их изучения. // Бюлл. АМН СССР. 1986. №4 с.66-71.

184. Тугаринов О.А. Колибактериоз телят и ягнят// Справочник

185. Тугаринов О.А., М.К.Пирожков, Ю.А.Малахов Сборник научных трудов. М.:ВГНКИ. - 2001. - Т.62. - С.68-75.

186. Тимаков В.Д., Гольдфарб Д.М. Реакция нарастания титра фага (РНФ).-М., 1962.-32 с.

187. Тимаков В.Д., Гольдфарб Д.М. Экспериментальное обоснование нового принципа обнаружения дизентерийных и брюшнотифозных бактерий с помощью фага // ЖМЭИ. 1956. - № 10. - С. 3 - 7.

188. Тихоненко А.С. Ультраструктура вирусов бактерий. М.: Hay

189. Трухина Г.М. Оценка методов выделения и циркуляции клебси-елл в объектах окружающей среды // Методы индикации биоценоза патогенных и потенциально патогенных микроорганизмов в объектах окружающей среды. М., 1985. - С. 63 - 69.

190. Ухо в Ю.И., Тарарышкин А.П. Патоморфология экспериментального иерсиниоза. // Микробиология и иммунология иерсиниозов. Сб. науч. трудов т. 84. Рязань. 1985. с. 39-43.

191. Хейс У. Генетика бактерий и бактериофагов. Основы генетики и молекулярной биологии. М.: Мир, 1965. - С. 275 - 368.

192. Хоменко И.М., Конюхова Н.А. Энтеротоксигенная и адгезивная активность клебсиелл // Молекулятная структура бактериальных токсинов и генитический контроль их биосинтеза: Тез. Всесоюз. конф. М., 1985. -С. 128-129.

193. Ценева Г.Я. Иерсиниоз и псевдотуберкулез // Пособие для врачей. С.-Петербург, - 1992.

194. Цветков К.И. Применение специфического бактериофага для диагностики паратифозного аборта кобыл // Ветеринария. 1941. - № 6. -С. 4-6.

195. Чанишвили Т.Г., Чанишвили Н.А. Научные и методологические основы практического применения бактериофагов// Перспективы использования препаратов бактериофага для превенции и лечения инфекции, вы

196. Черкасский Б.Л, Подунова Л.Г., Акулова Н.К. Пищевые зоонозы у людей в России. // Пищевые зоонозы сальмонеллёзы, кампилобактери-оз, иерсиниозы, листериоз. Методы и средства диагностики, лечения и профилактики: Тез. докл. М., 1995 с. 18-19.

197. Черневская О.М. Биологическая характеристика условно-патогенных энтеробактерий, выделенных в промышленных животноводческих комплексах. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук. М., РУДН. 1995.

198. Чистякова И.С. О некоторых биологических свойствах иерсиний энтероколитика и псевдотуберкулёзис. // Микробиология и иммунология иерсиниозов. Сб. науч. трудов т. 84. Рязань. 1985. с. 27-30.

199. Чиракадзе Л.Г. Чинашвили Т.Г. Типирование S. typhimurium при помощи селекционированных фагов // ЖМЭИ. 1974. - № 3. - С. 72 - 78.

200. Ценева Г.Я., Бондаренко В.М., Полоцкий Ю.Е. и др. Инвазив-ность и цитотоксичность как критерий оценки аттенуации иерсиний. // ЖМЭИ. 1988 №9 с.10-15.

201. Хакешева Т.А. Фаги цитробактера // Автореферат канд. дис. -М. 1985.

202. Холодкова Е.В., Романенко Э.В., Рагинская В.П. // Моргана бактерии. ЖМЭИ, 1976, №6, с. 11-16.

203. Шантаренко И.В. Изучение РНФ как метода индикации бактерий дизентерии во внешней среде // Тез. докл. и выступл. на 5 Всес. научн. конф. по санитарн. микробиол. М. - 1962. - С. 89 - 93.

204. Шахов А.Г. Этиология и профилактика желудочно-кишечных и респираторных болезней телят и поросят // Ветеринарный консультант. -2003. -№ 1.-С.4-5.

205. Швиденко И.Г. Сравнительное изучение биологических свойств чувствительности и устойчивости к антибиотикам Proteus // ЖМЭИ. -1986.-№10.-С. 18-20.

206. Шипицын А.Г., Басова Н.Ю. Роль микробного фактора в возникновении респираторных болезней телят // Ветеринарный консультант. -2003.-№4.-С. 6.

207. Шкиль Н.А., Нестерова И.с., Коптев В.Ю. Особенности распространения, патогенность и чувствительность к антибиотикам Е. coli 0157:Н7 // Профилактикак, диагностика и лечение инфекционных болез

208. Шумилов К.В., Мельниченко Л.П. Значение диссоциации культуры Y.enterocolitica 09. // Ветеринария. 1996. №10 с. 26-28.

209. Эпидемиология, лабораторная диагностика иерсиниозов, организация и проведение профилактических и противоэпидемиологических мероприятий. // Инструкция МЗ СССР от 30.10.1990.

210. Ющенко Г.В., Дунаев В.М. Методика выделения и идентификации Yersinia pseudotuberculosis и Yersinia enterocolitica. // Лаб. дело 1980. №6 с.367-369.

211. Ющенко Г.В. Актуальные вопросы эпидемиологии и клиники иерсиниоза. // ВНИИМиМТИ Обзорная информация. Вып №4. М., 1984.

212. Ющенко Г.В. Иерсиниозы. // Руководство по эпидемиологии инфекционных болезней. М., 1993 с. 133-148.

213. Ющенко Г.В. Иерсиниозы в России. // Пищевые зоонозы -сальмонеллёзы, кампилобактериоз, иерсиниозы, листериоз. Методы и средства диагностики, лечения и профилактики: Тез. докл. М., 1995 с. 72.

214. Ющук Н.Д., Ценева Г.Я., Алёнушкина Т.В., Куляшова Л.Б. Эффективность применения тимогена при экспериментальной инфекции, вызванной Yersinia enterocolitica. //ЖМЭИ. 1995. №3 с. 106-108.

215. Щеглова М.К. Некоторые свойства листериозного бактериофага //ЖМЭИ.-1962.-№ 1.- С. 99- 102.

216. Ackermann -H.-W., DuBow M.S., Gershman M. Taxonomic changes in tailed of enterobacteria // Archies of virology. 1997. - № 142. - P. 1381 -1390.

217. Atreyee M., Nirmolendu R. Pevisent structure of the capsular polysaccharide of Klebsiella serotype 15 // Syst. and Appl. Microbiol. 1992. - V. 15,№4.-P. 505-512.

218. Abrams H.L. New England J. Med., 1948, v.238, p. 185.

219. Alexander D.M. Rep. Loc. Gov. Bd. Publ. Hlth., 1911/12, №4, p.288.

220. Bahr L., Thomsen A. Zbl. Bact. I. Orig., 1912, v. 66, p.365.

221. Bergey, s Manual of Systematis Bacteriology. 8 Ed., Baltimore,

222. Bagley S.T., Seidler R.J., Talbot H.W.J., Morrow J.E. Isolation of Klebsiellae from within living wood // Appl. Environ. Microbiol. 1978. - V. 36.-P. 178- 185.

223. Coetzee J. N. Nature, 1967, v. 213, p. 614616.

224. Chow J., Yu V., Shiaes D. Epidemiologic perspectives on Enterobacter for the infection control professional //Amer. S. Infec. Control. 1994. - V. 22,№4.-P. 195-201.

225. De Cheldre Y., Rost F., Struelens M.J. Вклад лабораторной диагностики в изучение вспышек, вызванных мультирезистентными штаммами E.aerogenes // Acte clin. belg. 1995. - № 1. - P. 54 - 56.

226. Donaldson S.G, Azizi O., Nogare dal R. Anthony Characteristics of aerobic gram-negative bacteria colonizing critically ill patients //Amer. Rev. respire. Disease. -1991. V. 144, № 1. - P. 202 - 207.

227. Donaldson Scott G., Azizi S.Q., R. dal Nogare Anthony Characteristics of aerobic gram-negative bacteria colonizing critically ill patients // Amer. Rev. Respir. Diseases. 1991. - V. 144, № 1. - P. 202 - 207.

228. Duguid J.P. Old D.C. Adhesive properties of Enterobacteriaceae // Bacterial Adherence / ed. E.H. Beachey. London: Chapman and Hall, 1980. -P. 187-215.

229. Edberg S.C., Piscitelli V., Cartter M. Phenotypic characteristics of coliform and noncoliform bacteria from a public water supply compared with regional and national clinical species // Appl. Environ. Microbiol. 1986. - V. 52.-P. 474-478.

230. Edwards P.R., Ewing W.N. Identification of Enterobacteriaceae // Burgess publ. Co., Minneeaprolis, 1972.

231. Ewing W.H., Edwards P.R., Ewings Identification of Enterobacteriaceae. 4 th ed. - New York; Amsterdam; Oxford; Elsevier. - 1986. - V. 536.

232. Edwards P. R., Ewing W.N. Identification of Enterobacteriaceae. Burgess publ. Co., Minneeapolis, 1955.

233. Edwards P. R., Ewing W.N. Identification of Enterobacteriaceae. Burgess publ. Co., Minneeapolis, 1962, 223-227.

234. Emody L., Voros S., Pal T. Microbiology Letters, 1982, v. 13, p.229264. Ewing W. N., Edwards P. R. Intern. Bull. Of Bact. a. Nomemenclat., 1962, v. 12, p. 93.

235. Eorsi M., jablonszky L., Milch H., Barsy G. significance of bacteriophage in infantile enteric infections. Acta microbiol. Acad. Scihung., 1957, v.4. #2, p. 209.

236. Gaston M.A., Ayling-Smith B.A., Pitt T.L. New bacteriophage tiping scheme for subdivision of the frequent capsular serotypes of Klebsiella spp. // J. clin. Microbiol.- 1987.-V. 117,№2.-P. 1228-1232.

237. Gragia J., Yan G. Demonstration of types of tyfosus by means of preparation of type // Canad. publ. hith. J. 1938. - V. 29, № 9. - P. 448.

238. Graigie J., Felix A. Typing of typhoid bacilli with Vi bacteriophage, suggestions for its standardization // Lancet. 1947. - № 14. - P. 823.

239. Ivanof A., Serban D., Joneseu O. Enterotoxigenic bacteria in infantile diarrheal disease // Arch. roum. Path. exp. Microbiol. 1983. - V. 42, № 2 - 3. -P. 147- 153.

240. Ivanovics G., Alfoldi L. //Acta Microbiol. Acad. Sci. hung., 1955,v.2, p.

241. Jhanjee A., Asnani P.J. Klebsiella pneumoniae enterotoxin // Acta Microbiol. Hung. 1982. - V. 29, № 1. - P. 1 - 7.

242. Jacob F., Wollman E.L., C.R. Acad. // Sci., Paris, 1958, v. 247, p.154.1

243. Jordan E.O., Crawford R.R., McBroom J. J. Bact., 135, v.29, p. 131.

244. Kahlich R., Palecek A., Korych B. Nalez enterobakterove toxikose v Ramcidiagnostiky strevnich epidemii // Voj. Zdrav. Listy. 1982. - V. 51. - P. 260-263.

245. Katznelson H., Sutton M. Rapid phage plague count method for the detection of bacteria as applied to the demonstration of intern along borne bacterial infection of seed // J. Bact. 1951. - V. 61, № 1. - P. 689.

246. Kauffmann F. On the classificacion and nomenclature of family Enterobacteriaceae // Intern. Bull. bact. Nomencl. a. Tacsonom., 1963. V. 13. - P. 187-193.

247. Kauffmann F. On the serology of the Klebsiella group // Acta Pathol. Scand. 1949. - V. 26. - P. 381 - 406.

248. Kaur K., Kaul M., Chhiber S. Enterotoxigemicity, klebocinogeny and antibiotic resistance pattern of food isolated of Klebsiella pneumoniae // Folia Microbiol. 1988. - V. 3, № 6. - P. 500 - 506.

249. Ketti I. A study of Escherichia coli from farm animals during // Acta. Microbiol. Acad. Sci. Hung. 1981. -V. 28. - P. 393-398.

250. Kauffmann F. Enterobacteriaceae. 2 Ed., Copengagen, 1954.p.1-8.

251. Lautrop H //Bergey,s manual of determinantive bacteriology. 8 Ed., Baltimore, 1974, p. 327-330.

252. Lewis С. I. // Great. Brit. Rep. Loc. Gvt. Bd. Suppl. Med. Off., 1911/12, v.41, p.319.

253. Lowel R. //J. Path. Bact., 1929, v.32, p.79.

254. Lindberg R.B., Latta R.L. Phage tuping of Ps. aeruginosa chinical and epidemiologi considerations // J. Infect. Diseases. 1974. - V. 130, № 5. -P. 32-34.

255. Lee C.J., Jung D.S., Jung S.H., Baik J.H., Lee J.H., Cho Y.R., Go B.S., Lee S.W., Han S.Y., Lee D.H. Comparison of Liver Abscess between Diabetic Patients and Non-Diabetic Patients // J Hepatol. Korean. 2005. - V. 11, №4.-P. 339-449.

256. Levintal C., Fisher A. Structural developmet of a bacteriae virus // Biochim. Biophys. Acta. 1952. - V. 9, № 4. - P. 419.

257. Martin W.J., Washington J.A. Enterobacteriaceae // Manual of clinical microbiology. 3rg ed. / Eds. E.H. Lennette et al. - Washington D.S.: ASM, 1980.-P. 195-209.

258. Matsen J.M., Spindler J.A., Blosser R.O. Characterization of Klebsiella isolates from natural receiving waters and comparison with human isolates // Appl. Microbiol. 1974. - V. 28. - P. 672 - 678.

259. Mukherjee Atreyee, Roy Nirmolendu Pevisend serotipe 15 // Syst. and Appl. Vicrobiol. 1992 - V. 15, № 4 - P. 505 - 512.

260. Mollaret H.H., Alonso J.M., Bercovier H. Aspects biologiques et ecologiques des Yersiniosis. // Med. et malad. Infec. 1982. T. 12 p. 664-667.

261. Magheru A. /1С. R. Soc. Biolo., Paris, 1923, v.89, p.643.

262. Mc Futon D. // J. Bact., 1943, №46, p.79-82.

263. Mc Millan S.A. //Lancet, 1972, №2,p.452-455.

264. Morgan H.R. //Brit. Med. J., 1906, №1, p. 908-912.

265. Morrison V. //Pig Farm., 1984, v. 32, №9,p. 116-121.

266. Nicolle, LE Minor S, LE Minor L., Buttiaux R. Lysotipie von Escerichia coli isolirt aus dympeptichen Stiihlen von Negebornen. Zbl. Bakt., I Abt. Orig., 1957, B.t. 168, S.512.

267. Nicolle P., Mollaret H.H., Brault J. Nouveaux resultats sur la lyso-typie de Yersinia enterocolitica portant sur plus de 4000 souches d'origins di-verses // Revue d'epidemiologie et de sante publique. Paris. 1976. - № 24. -P.479-496.

268. Nicolle P., Mollaret H.H., Brault J. Recherches sur la lysogenie, la lysosensibilite, la lysotypie et la serologie de Yersinia enterocolitica // In: Con-tribs. Microbiol, and Immunol. 1973. - № 2. - P.54-58.

269. Nicolle P., Mollaret H.H., Hamon., Vieu J.-F. Etude lysogenique,

270. Nielsen B. and Wegener H.C. Public health and pork and pork products: regional perspectives of Denmark // Rev. Sci. Tech. Off. Int. Epiz. 1997.- №16.-P.513-524.

271. Nilehn B. Electron microscopic studies on flagellation in different strains of Yersinia enterocolitica // Acta Path. Microbiol. Scand. 1969. - № 77. - P.527-541.

272. Nilehn B. Studies on Yersinia enterocolitica. Characterisation of 26 strains from human and animal sources // Acta Path. Microbiol. Scand. 1967.- № 69. -P.83-91.

273. Nilehn B. Studies on Yersinia enterocolitica. Growth on various solid media of 37° and 25°C // Acta Path. Microbiol. Scand. 1969. - №77. -P.685-697.

274. Nilehn В., Ericson C. Studies on Yersinia enterocolitica. Bacteriophages liberated from chloroform treated cultures // Acta Path. Microbiol. Scand. 1969. - №75. - P.177-187.

275. Nilehn, B. Studies on Yersinia enterocolitica with special reference to bacterial diagnosis and occurrence in human acute enteric disease // Acta Path. Microbiol. Scand. Suppl. 1969. - №206. - P. 1-48.

276. Nilehn B. Host range, temperature characteristics and serologic relationship among Yersinia phages // In: Contribs. Microbiol, and Immunol.313.0rscov I., and 0rscov F. Serotyping of Klebsiella // Methods Microbiol. 1984. - V. 14. - P. 143 - 164.

277. Ozeki H., Stocker B.A., Margerie H. // Nature, 1959, v. 189, p.337.

278. Penner J.L., Hennesy J.N. //J. Clin. Microbiol., 1979, v. 10, №1, p. 89.

279. Pieroni P., Rennie R.P., Ziola В., Deneer H.G. The use of bacteriophages to differentiate serologically cross-reactive isolates of Klebsiella pneumoniae // J. Med. Microbiol. 1994. - V. 41, № 6. - P. 423 - 429.

280. Podschun R., Heineken P., Sonntag H.G. Haemogglutinins and adherence properties to HeLa and intenstine 407 cells of K. pneumoniae and K. oxytoca isolates // Zbl. Bakt. Hyg., 1 Abt. Orig. 1987. - Bd 255, № 4. - P. 585 -593.

281. Podschun R., Penner I., Ullmann U. Interaction of Klebsiella capsule type 7 with human polymorphonuclear leucocytes // Microb. Pathog. 1992. -V. 13.-P. 371 -379.

282. Podschun R., Ullmann U. Klebsiella spp. as Nosocomial Pathogens: Epidemiology, Taxonomy, Typing Methods, and Pathogenicity Factors // Clinical Microbiol, reviews. 1998. - V. 11, № 4. - P. 589 - 603.

283. Przondo-Hessek A. Bacteriophages of Klebsiella bacilli. Isolation properties and use in typing. Arch. Immunol. Ther. Exp. 1966. - V. 14. - P. 413-435.

284. Rauss K.//J. Path. Bact., 1936, v.42,183-192.

285. Rauss K., Voros S. //Acta microbiol. Sci hund., 1959, v. 6, p. 232248.

286. Rauss K., // Internat. Bull. bact. Nmencl. A. Taxonom., 1962, v. 12, p. 53-63.

287. Rauss K, Voros S. //Acta microbiol. Sci hund., 1967, v. 14, p. 195198.

288. Rauss K. // Enterobacteriaceae Infectionen, Leipzig, 1968, p. 581594.

289. Rauss K., Putzova H., Dubay L. Et. Al. // Acta microbiol. Acad. Sei. Hung, 1975, v.22, p. 315-321.

290. Report of the Enterobacteriaceae Subcommittee of the Nomenclatur Committee of the Internatil Assoc. Of Microbiologgical Socicieties Intern. Bui. Bact. Nomencl. a. Taxonom., 1958, v. 8, №1, p. 25-70.

291. Report of the Enterobacteriaceae Subcommittee of the Nomenclatur Committee of the Internatil Assoc. Of Microbiologgical Socicieties Intern. Bui. Bact. Nomencl. a. Taxonom, 1963, v. 13, №2, p. 69-63.

292. Reers P.I, Fex B.A. Structure and properties of t the rapidy sedi-menting replicaciong complex staphylococcal phage К DNA. // J. Gen. Virol, 1983, 64, №1, p. 191-198.

293. Riser E, Noone P, Howard F.M. Epidemiological studi of Klebsiella

294. Senior B.W. // J. Med. Microbiol., 1987, v. 23, p. 33-39.

295. Spittel J.A., Martin W. // Proc. Saff Meet. Mayo Clin., 1954, №29, p. 235-237.

296. Sutter V., Foecking S., // J. Bact., 1962, v. 83, p. 933-935.

297. Schindler P.R.G., Metz H. Coliform bacteria in drinking water from South Bavaria: identification by the API 20 E system and resistance patterns // Lentralbl. Hug. Und Umweftmed. 1990. - V. 190, № 5 - 6. - P. 436.

298. Seidler R.J., Knittel M.D., Brown C. Potential pathogens in the environment: cultural reactions and nucleic acid studies on Klebsiella pneumoniae from clinical and environmental sources // Appl. Microbiol. 1975. -V. 29.-P. 819-825.

299. Simoons-Smit A.M., Verweij-van Vught A.M.J.J, Kanis I.Y.R., MacLaren D.M. Chemiluminescence of human leucocytes stimulated by clinical isolates of Klebsiella // J. Med. Microbiol. 1985. - V. 19. - P. 333 - 338.

300. Simoons-Smit A.M., Verweij-van Vught A.M.J.J., MacLaren D.M. The role of К antigens as virulence factors in Klebsiella // J. Med. Microbiol. -1986.-V. 21.-P. 133- 137.

301. Slopek S. Phage typing of Klebsiella // Methods Microbiol. 1978. -V. 11.-P. 193-222.

302. Slopek S., Przondo-Hessek A., Milch H., Deak S. A working scheme

303. Slopek S. Phage typing of Klebsiella // Methods Microbiol. 1978. -V. 11.-P. 193-222.

304. Thjotta T.// J. Bact., 1919, №4, p. 355.

305. Thjotta T.// J. Bact, 1920, №5, p. 67-69.

306. Tucci V, Isenberg H.D. // J. Clin. Micobiol, 1981, v. 14, p. 563-566.

307. Vail M. // Bergeu,s Manual of determinative Bacteriologi. Baltimore, 1939, p. 430-436.

308. Vernet V, Philippon A, Madoulet C., Vistelle R, Jaussand R, Chippaux C. // FEMS Vicrobiol. Lett 1995 - V. 130, № 1. - P. 51 - 57.

309. Ullmann U. Pattern of microbial isolates in hospitalized patients // Zentbl. Bakteriol. Mikrobiol. Hyg. Ser. 1986. - P. 103 - 113.

310. Weiss R. Klebsiella // Handbuch der bakteriellen Infectionen bei Tieren / Hrsg. Von H. Blobel, T. Schlisser.- Jena 1981. - P. 453 - 479.

311. Williams P., Lambert P.A, Brown M.R.W., Jones R.J. The role of the О and К antigens in determining the resistance of Klebsiella aerogenes to serum killing and phagocytosis // J. Gen. Microbiol. 1983. - V. 129. - P. 2181 -2191.

312. Williams E.W, Hawkey p.M. Penner J.L. et al. J. Clin. Micobiol, 1983, v.18, p. 5-9.

313. Wong S.H, Cullimore D.R, Bruce D.L. Selective medium for the

314. Yanagawa Y., Maruyama Т., Sakai S. Isolation of Yersinia enterocolitica and Yersinia pseudotuberculosis from apparently healthy dogs and cats // Microbiology and Immunology. 1978. - №22 - P. 643-646.

315. Yokochi Т., Nakashima I., Kato N. Effect of capsular polysaccharide of Klebsiella pneumoniae on the differentiation and functional capacity of macrophages cultured in vitro // Microbiol. Immunol. 1977. - V. 21. - P. 601 -610.

316. Yokochi Т., Nakashima I., Kato N. Further studies on generation of macrophages in in vitro cultures of mouse spleen cells and its inhibition by the capsular polysaccharide of Klebsiella pneumoniae // Microbiol. Immunol. -1979.-V. 23.-P. 487-499.