Сочетанное действие противоопухолевых препаратов и антибиотиков на микроорганизмы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат медицинских наук Шаповал, Ольга Георгиевна

• Шаповал, Ольга Георгиевна
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шаповал, Ольга Георгиевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ:

ГЛАВА 1. Основные сведения о противоопухолевых химиопрепаратах.

ГЛАВА 2. Частота и этиологическая структура инфекционных осложнений в онкологии.

ГЛАВА 3. Изучение влияния ДНК-тропных соединений на микроорганизмы.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ:

ГЛАВА 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

ГЛАВА 5. ВЛИЯНИЕ ДОКСОРУБИЦИНА НА УРОВЕНЬ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ И ФОРМИРОВАНИЕ УСТОЙЧИВОСТИ ОПЫТНЫХ ШТАММОВ К АНТИБИОТИКАМ:

5.1. Антимикробная активность цефтриаксона и амикацина.

5.2. Антимикробная активность доксорубицина

5.3. Влияние доксорубицина на чувствительность штаммов S. aureus и Е. coli к антибиотикам.

5.4. Влияние доксорубицина на развитие устойчивости штаммов

S. aureus и Е. coli к антибиотикам.

ГЛАВА 6. ВЛИЯНИЕ ДОКСОРУБИЦИНА И АНТИБИОТИКОВ НА ДИНАМИКУ РАЗВИТИЯ ПОПУЛЯЦИЙ ОПЫТНЫХ ШТАММОВ 6.1. Влияние доксорубицина и цефтриаксона на динамику развития популяций штаммов S. aureus.

6.2. Влияние доксорубицина и амикацина на динамику развития популяций штаммов Е. coli.

ГЛАВА 7. ВЛИЯНИЕ ДОКСОРУБИЦИНА И АНТИБИОТИКОВ НА НЕКОТОРЫЕ БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ОПЫТНЫХ ШТАММОВ

7.1. плазмокоагулазная активность опытных штаммов S. aureus и их пассажных вариантов

7.2. гемолитическая активность опытных штаммов S. aureus и их пассажных вариантов

7.3. Адгезивные свойства опытных штаммов Е. coli и их пассажных вариантов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сочетанное действие противоопухолевых препаратов и антибиотиков на микроорганизмы»

В настоящее время отмечается увеличение числа онкологических заболеваний, которые наряду с сердечно-сосудистой патологией и травмами занимают ведущие места среди причин инвалидизации и смертности населения [88, 108]. В России в 2000 г. злокачественные новообразования стали причиной смерти 13,8% мужского и 12,7% женского населения. По данным ВОЗ за 2005 год ежегодно в мире от онкозаболеваний умирает 7 млн. человек, что на 2 млн. больше, чем 10 лет назад. К 2020 году, по мнению экспертов ВОЗ, этот показатель может достигнуть 20 млн. Постепенное возрастание количества новых случаев злокачественных новообразований отмечается и в России: в 2002 г. их число составило 453256, что на 10,7% больше, чем в 1993 г. [31]. У мужчин преобладают поражения органов дыхания, желудка и кожи, у женщин - молочных желез, кожи и матки [30]. Среди детей ведуш^ патологией с высоким процентом летальности (до 50,5%) являются гемобластозы [13].

Актуальность проблемы

Современные методы терапии в онкологии достигли, особенно за последние десятилетия, несомненных успехов, в том числе и возможности полного клинического выздоровления при более широком диапазоне нозологических форм. Это стало возможным благодаря широкому применению радио- и химиотерапии [107]. Отдавая должное этим методам, нельзя забывать об их иммуносупрессивном действии, усугубляющим иммуносупрессивное влияние самой опухоли. В связи с этим существенной проблемой в терапии злокачественных новообразований продолжает оставаться развитие инфекционных осложнений. По данным РОНЦ им. Н. Н. Блохина (2001) они являются причиной летальных исходов у 1/3 онкологических больных. Одними из основных возбудителей в этиологической структуре гнойной инфекции в онкологии среди грамположительных микроорганизмов являются стафилококки, среди грамотрицательных - энтеробактерии.

Специфическая химиотерапия онкологических заболеваний обычно имеет цикловой характер и достаточно продолжительна. Поэтому проявления инфекции на фоне проводимой противоопухолевой химиотерапии достаточно часты, что требует одновременного назначения противоопухолевых и антимикробных химиопрепаратов. В связи с этим изучение влияния противоопухолевых химиопрепаратов и антибиотиков на биологические свойства микроорганизмов представляет большой теоретический и практический интерес.

Целью работы явилось исследование сочетанного действия противоопухолевых препаратов и антибиотиков на биологические" свойства стафилококков и кишечных палочек.

Из цитостатиков мы выбрали доксорубицин - препарат с широким спектром противоопухолевой активности из группы антрациклинов, а из антибиотиков цефалоспорин III поколения - цефтриаксон и аминогликозид III поколения - амикацин.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие задачи:

1. Определить антимикробную активность доксорубицина в отношении клинических и стандартных {Staphylococcus aureus АТСС 29213 и Escherichia coli АТСС 25922) штаммов стафилококков и кишечных палочек.

2. Изучить влияние доксорубицина:

- на уровень чувствительности взятых в опыт штаммов S.aureus к цефтриаксону и E.coli — к амикацину;

- на развитие лекарственной устойчивости штаммов S. aureus к цефтриаксону и E.coli - к амикацину.

3. Изучить влияние сочетаний доксорубицина и цефтриаксона, доксорубицина и амикацина на динамику развития популяции стандартных и клинических штаммов S. aureus и E.coli.

4. Изучить влияние сочетаний доксорубицина и цефтриаксона, доксорубицина и амикацина на экспрессию факторов вирулентности стандартных и клинических штаммов S. aureus (плазмокоагулаза, гемолизин) и E.coli (адгезивная активность).

Научная новизна работы

Впервые проведено изучение влияния используемого в клинической практике препарата с ДНК-тропным действием - доксорубицина на уровень и формирование устойчивости стафилококков к цефтриаксону, кишечных палочек - к амикацину, а также факторы вирулентности этих микроорганизмов.

Практическая значимость работы

Результаты проведенных исследований формируют представление о влиянии противоопухолевых препаратов и антибиотиков на биологические свойства (устойчивость к антимикробным препаратам, вирулентность) микроорганизмов-возбудителей инфекции, а также служат дополнением к имеющимся сведениям по данному вопросу. Полученные данные позволят скорректировать методы ведения онкологических больных, в частности оптимизировать дозы назначаемых антимикробных препаратов, что снижает лекарственную нагрузку на детоксицирующие системы макроорганизма (ткань печени, почек) и имеет экономическую выгоду в связи со снижением расходов на антибиотики.

По материалам диссертации подготовлены и изданы методические рекомендации «Сочетанное действие цитостатиков и антибиотиков на биологические свойства микроорганизмов» (утверждены ЦКМС СГМУ, выписка из протокола № 7 от 20. 03. 08).

Результаты исследований внедрены в учебный процесс кафедр микробиологии, вирусологии и иммунологии, онкологии ФПК и ППС, профпатологии и гематологии, а также в лечебную работу клиники гематологии и профпатологии СГМУ (акты внедрения прилагаются).

Положения, выносимые на защиту

1. Доксорубицин обладает умеренной антимикробной активностью в отношении S.aureus и не проявляет ее в отношении E.coli.

2. Доксорубицин оказывает потенцирующее действие на антимикробную активность цефтриаксона в отношении опытных штаммов S.aureus и амикацина - в отношении опытных штаммов E.coli.

3. Доксорубицин как препарат с ДНК-тропным действием существенно не влияет на развитие устойчивости опытных штаммов к испытуемым антибиотикам.

4. Доксорубицин способен оказывать влияние на вирулентность опытных штаммов S.aureus (продукцию плазмокоагулазы и гемолитическую активность) и E.coli (адгезивные свойства), однако этот эффект носит штаммовый характер.

Апробация работы

Материалы настоящего исследования представлены на конференциях студентов и молодых ученых Саратовского государственного медицинского университета в 2006-2007 гг., в материалах IX Съезда всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2007 г), XII Международной научной конференции и III Международной научной онкологической конференции (Эйлайт, 2008).

Основные положения диссертации опубликованы в 7 печатных работах.

Структура и объём работы

Диссертационная работа изложена на 123 страницах машинописного текста и состоит из введения, 3 глав обзора литературы, 3 глав собственных исследований, заключения, выводов, списка использованной литературы, включающего 117 отечественных и 55 иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Шаповал, Ольга Георгиевна

ВЫВОДЫ

1. Доксорубцин - противоопухолевый препарат из группы антрациклинов проявил достаточную антимикробную активность в отношении опытных штаммов S. aureus. В отношении опытных штаммов Е. coli данный препарат не обладал антимикробным действием.

2. Доксорубицин в опытных концентрациях оказывал потенцирующее влияние на антимикробную активность цефтриаксона в отношении опытных штаммов S. aureus и амикацина в отношении опытных штаммов E.coli, что следует учитывать при совместном использовании этих препаратов.

3. Присутствие доксорубицина существенно не влияло на развитие устойчивости опытных штаммов S. aureus к цефтриаксону и Е. coli - к амикацину, что позволяет использовать эти комбинации в лечебной практике.

4. Доксорубицин в опытных концентрациях способен усиливать подавляющее действие цефтриаксона на динамику развития популяции штаммов S. aureus и амикацина - на динамику развития популяции штаммов E.coli.

5. Пассажи на средах с Уг и Ул МИК доксорубицина в сочетании с цефтриаксоном существенно не изменяли плазмокоагулазную и гемолитическую активность пассажных вариантов S.aureus .

6. Пассажи на средах с неингибирующими концентрациями доксорубицина в сочетании с амикацином разнонаправленно влияли на адгезивную активность опытных штаммов Е. coli.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На современном этапе развития противоопухолевой терапии в арсенале врачей имеется более десятка различных по химическому строению соединений, среди которых имидазотетразины, таксаны и камптотецины начали использоваться на практике совсем недавно, с конца XX века [67, 68]. Благодаря развитию и усовершенствованию основных методов лечения в онкологии удалось достигнуть значительных успехов -высокого процента длительных ремиссий и полного выздоровления при нозологических формах, ранее считавшихся прогностически неблагоприятными [28]. В частности современная терапия позволяет получить ремиссии 65-75% больных острым нелимфобластным лейкозом и 85% больных острым лимфобластным лейкозом [63]. Однако существенной проблемой химиотерапии как одного из базовых методов лечения злокачественных опухолей является ее иммуносупрессивный эффект, следствие которого - развитие инфекционных осложнений у онкологических больных. Этиологическая структура инфекций в онкологии с течением времени претерпевает изменения, выражающиеся в чередовании лидирующего положения грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов. В начале XXI века ведущие позиции в ней начали занимать грамотрицательные бактерии. Тем не менее, согласно литературным данным, можно проследить стойкую взаимосвязь между рядом нозологических форм инфекции и их основными возбудителями. В частности грамотрицательным бактериям ведущее значение принадлежит в этиологии инфекций мочевыводящих путей, а за грамположительными остается главная роль в этиологии бактериемий. Среди грамотрицательных бактерий одним из основных возбудителей инфекции являются кишечные палочки, среди грамположительных -стафилококки. Из 360 штаммов, выделенных из мочи больных, перенесших онкогинекологические операции, 19,2% идентифицированы как E.coli [25]. А среди гемокультур, выделенных от онкобольных, 17 — 21% идентифицированы как S.epidermidis и 9% - как S. aureus [96, 124]. Анализируя данные РОНЦ им. H.H. Блохина за 2003-2004 гг., можно сделать вывод, что общая частота выделения энтеробактерий и стафилококков при разных формах инфекции составляет 22 и 12% соответственно [44].

Течение инфекций у онкологических больных обладает рядом особенностей, одной из которых являются возможность быстрого прогрессирования на фоне состояния миелосупрессии и отсутствие клинически документированого очага при наличии общей интоксикации [19, 23, 34, 55]. Это обуславливает необходимость назначения антибиотиков на фоне проведения противоопухолевой химиотерапии. В литературе в связи с этим нередко используется термин «профилактическое назначение антибиотиков» в онкологии [3, 75, 122, 128, 147, 164]. С таким подходом согласны не все авторы, учитывая возможность развития антибиотикоустойчивых форм и материальные затраты на антимикробные препараты [2, 138, 149, 150]. Однако подобная практика назначения антибиотиков в ряде случаев может иметь жизненно важное значение, поскольку предотвращает развитие или тяжелое течение инфекции [44, 79, 129, 130, 132, 161]. Например, в онкогематологии существует понятие деконтаминации кишечника от грамотрицательной микрофлоры у больных острыми лейкозами для предупреждения развития инфекционных осложнений и эмпирического назначения антимикробных препаратов на фоне состояния фебрильной нейтропении [2, 23].

Сами противоопухолевые химиопрепараты способны проявлять антимикробную активность, поскольку в механизме их действия подразумевается прямое и(или) опосредованное влияние на нуклеиновые кислоты клеток. В частности ее наличие было установлено для антрациклинов, препаратов платины, ряда антиметаболитов фторурацила, метотрексата) и алкилирующих соединений (циклофосфамида) [121, 130]. Однако интерес к проблеме воздействия противоопухолевых химиопрепаратов на микроорганизмы ограничивается их высокой органотоксичностью. По этой причине не представляется возможным использование этих препаратов в целях этиотропной терапии инфекций. Но, учитывая возможность одновременного назначения антибиотиков и антинеопластических химиопрепаратов, большое значение приобретает изучение их сочетанного действия на микроорганизмы. В нашей работе оно было изучено на примере широко применяемых в клинической практике антибиотиков цефтриаксона и амикацина и цитостатического препарата доксорубицина из группы антрациклинов в отношении стандартных и клинических штаммов S. aureus и E.coli. Антрациклины используются при многих нозологических формах злокачественных новообразований [43, 47, 54]. Цефтриаксон и амикацин применяются в лечении инфекций у больных с различной патологией, в том числе и с онкологической [26, 80, 101]. В частности комбинации цефтриаксона и амикацина рекомендуются для лечения больных с фебрильными нейтропениями [5].

Предварительно методом двукратных серийных разведений в мясо-пептонном бульоне определяли чувствительность испытуемых штаммов к опытным препаратам. Результаты этих экспериментов послужили очередным подтверждением широкого распространения устойчивости штаммов S. aureus к ß-лактамным антибиотикам. 86,5% опытных штаммов были устойчивыми к цефтриаксону (МИК 3,1 и более мкг/мл). Из них для 34,6%) величина МИК равнялась 3,1, 21,2% - 6,2 мкг/мл. МИК50 составила 4,6 мкг/мл. Эти результаты соответствуют данным РОНЦ им. H.H. Блохина (2003-2004), согласно которым количество MRS, выделенных из различного клинического материала, достигло 77%. При этом доля MRS А составляла 24%, a MRCNS-53% [78].

Большая часть опытных штаммов E.coli была чувствительна к амикацину: МИК50 - 2,8 мкг/мл. Лишь для 29,6% штаммов значение МИК составило 3,1, для 27,3%-6,2 мкг/мл. Имеющиеся литературные данные также свидетельствуют о пока еще высокой чувствительности грамотрицательных бактерий к аминогликозидам последних поколений. По данным РОНЦ им. H.H. Блохина 75% всех штаммов различных видов, выделенных из разного клинического материала, были чувствительны к амикацину, в то время как к гентамицину чувствительными оказались только 37% штаммов [78]. Однако эта чувствительность может иметь «местные» особенности, тесно связанные с ротацией антибиотиков в данном стационаре или регионе [48, 81, 111]. В частности уровень резистентности энтеробактерий, выделенных из различного патологического материала онкобольных трех стационаров г. Москвы, к амикацину составил 59-81%, тобрамицину - 61-87% [77]. Изучение чувствительности к аминогликозидам возбудителей инфекций у больных без онкопатологии также приводит к различным результатам. Многоцентровое исследование чувствительности грамотрицательных бактерий к аминогликозидам показало, что в фенотипе резистентности к этим антибиотикам амикацин был представлен у 1,7-49,9% культур в зависимости от стационара [81]. В исследовании других авторов резистентными к этому антибиотику были 36% грамотрицательных культур [11]. Разные виды бактерий кишечной группы, выделенные от больных хирургических стационаров Санкт-Петербурга были чуствительны к амикацину в 56-58% случаев [109].

Изучение антимикробной активности доксорубицина показало, что ее уровень достаточно высок для опытных штаммов S.aureus (МИК5о 7,08 мкг/мл при диапазоне значений от 25 до 1,5 мкг/мл).

В отношении опытных штаммов E.coli доксорубицин не проявил антимикробного действия (МИК для 93,2% штаммов 1000 мкг/мл), что оказалось достаточно неожиданным. Это может быть обусловлено незначительным проникновением препарата внутрь клеток данного вида микроорганизмов. Известно, что поступление ряда препаратов (в том числе противоопухолевого антибиотика - актиномицина) в грамотрицательные бактерии затруднено за счет большого количества липополисахаридов в составе клеточной стенки [102]. Это подтверждают литературные и наши данные о наличии антимикробной активности у антрациклинов в отношении грамположительных микроорганизмов, не имеющих богатой липидами клеточной стенки. Согласно исследованиям ряда авторов значения МИК различных препаратов антрациклиновой группы для стандартных штаммов S. aureus составляют от 2,5 до 60 мкг/мл [82, 115]. По вопросу антимикробной активности антрациклинов в отношении грамотрицательных бактерий информация в литературе противоречива. Одни авторы свидетельствуют о ее отсутствии, по данным других она достаточно выражена [27, 82]. Эти расхождения могут быть обусловлены испытанием препаратов, имеющих отличия в химической структуре.

Большой интерес представляет собой наличие синергидного эффекта при сочетании доксорубицина во взятых концентрациях с цефтриаксоном в отношении опытных штаммов S. aureus и амикацином - в отношении опытных штаммов E.coli.

В присутствии доксорубицина чувствительность 70% штаммов обоих видов (S. aureus к цефтриаксону, Е. coli - к амикацину) возросла в 2 -32 раза. При этом необходимо отметить, что ее значительное увеличение (в 8-16 раз) наблюдалось для 12% опытных штаммов S.aureus и 38% - E.coli. Потенцирующее действие доксорубицина на антимикробную активность цефтриаксона и амикацина в отношении опытных штаммов следовало ожидать, учитывая разный механизм их действия. Проявление данного эффекта у нечувствительных к доксорубицину опытных штаммов E.coli обусловлено, очевидно, достаточным поступлением этого препарата в микробную клетку при сочетании с амикацином, играющим роль проводника». Проникновение аминогликозидов внутрь микробных клеток осуществляется через поры с последующим энергозависимым транспортом при участии пермеаз, синтез которых индуцируется самим антибиотиком [14]. При этом пермеазы не проявляют высокой специфичности именно к этой группе препаратов, что не исключает возможности их участия в транспорте антрациклинов. К тому же в литературе имеются сведения о способности аминогликозидов вызывать частичную деструкцию цитоплазматической мембраны микроорганизма [29], что также может способствовать поступлению доксорубицина. В этом отношении по всей вероятности решающую роль играет проникновение аминогликозидов через цитоплазматическую мембрану за счет взаимодействия со свободными радикалами - продуктами работы протонного насоса [14], что и приводит к ее повреждению. Антрациклины сами обладают способностью индуцировать процессы свободно-радикального окисления и в свою очередь могут способствовать проникновению аминогликозидов. В литературе также имеется информация об изменении физико-химических параметров клеточной поверхности у резистентных к антибиотикам микроорганизмов. Так у резистентных к пенициллинам стафилококков и эшерихий она становится менее гидрофильной, у резистентных к стрептомицину - более гидрофильной [70]. Возможно, что в условиях контакта опытных штаммов с амикацином и доксорубицином проницаемость клеточной стенки повысилась, что способствовало их поступлению внутрь микробной клетки.

Наличие потенцирующего эффекта со стороны доксорубицина на антимикробную активность цефтриаксона и амикацина имеет большое значение при проведении антибиотикотерапии и антибиотикопрофилактики у онкологических больных. Возможность снижения дозы антибиотика даже на позволит уменьшить его расход и снизить нагрузку на детоксицирующие органы. Для практической реализации этого эффекта существенное значение имеют концентрации опытных препаратов в сыворотке крови.

Литературные данные о концентрации антрациклинов противоречивы. По данным ряда авторов концентрация этих препаратов в плазме крови животных и человека становится низкой (1-3 мкг/мл) уже через несколько минут после внутривенного введения, а далее в течение часа отмечается ее дальнейшее снижение до десятых долей мкг [52, 69, 71, 76]. При этом следует отметить, что эти значения соответствуют неингибирующим концентрациям доксорубицина для трети опытных штаммов S.aureus. При более высоких дозах доксорубицина у онкогематологических больных его концентрация в крови будет очевидно выше, что подтверждают использованные нами в опыте литературные сведения [42]. В любом случае фармакокинетические параметры антрациклинов могут предполагать реализацию их антимикробного эффекта в зоне локального воспаления, поскольку накопление их в количествах, близких опытным, происходит в тканях [76]. Однако введение в практику липосомальных форм цитостатиков, способствующих сохранению препарата в крови в более высоких концентрациях и преимущественному проникновению в опухолевый и воспалительный очаги, в данной ситуации имеет несомненную перспективу [41, 42]. К тому же доксорубицин при сравнительной характеристике с другими антрациклинами обладает высокой кумулятивной способностью, что может способствовать повышению его концентрации в крови [94]. Анализ фармакокинетических параметров амикацина позволяет сделать вывод, что его остаточные концентрации (не более 10 мкг/мл) в сыворотке крови мало отличаются от пиковых (20-30 мкг/мл), создающихся через час после внутривенного введения терапевтической дозы [90]. Наиболее низкие концентрации цефтриаксона в сыворотке крови создаются через 12 часов и 24 часа (28 и 9 мкг/мл) после внутривенного введения терапевтических доз [92]. Таким образом, приведенные значения наименьших концентраций обоих препаратов в крови соответствуют опытным неингибирующим концентрациям для штаммов, устойчивых к амикацину и цефтриаксону. Теоретически это предполагает реализацию системного, совместного антимикробного действия опытных препаратов в отношении антибиотикоустойчивых культур, высоко чувствительных к доксорубицину.

Влияние доксорубицина на развитие устойчивости опытных штаммов S.aureus к цефтриаксону и E.coli к амикацину после проведенных 10 пассажей оказалось несущественным. Варианты S.aureus, пассированные в неингибирующих концентрациях доксорубицина с постоянной и возрастающими концентрациями цефтриаксона, по значению Кад не отличались от вариантов, пассированных без цитостатика. Подобные результаты были получены и для опытных штаммов E.coli в отношении амикацина.

Формирование индуцированной антибиотикоустойчивости по данным литературы связано с действием антибиотика как фактора отбора спонтанных мутантов или размножением исходно инфицированных R-плазмидой клеток [97]. Очевидно, доксорубицин в опытных концентрациях не препятствовал распространению R-плазмид в микробной популяции E.coli, трансдукции генов устойчивости у S.aureus и значимо не влиял на выживаемость мутантных клеток обоих видов. Указанные положения подтверждают данные, полученные Г.Н. Нещадимом, в отношении отсутствия влияния антрациклина брунеомицина на передачу R-плазмид у E.coli [53].

Отсутствие влияния доксорубицина на развитие устойчивости опытных штаммов к испытуемым антибиотикам имеет практическое значение в плане прогноза формирования устойчивости данных видов микроорганизмов к соответствующим антибиотикам при их применении на фоне терапии доксорубицином. Однако это не позволяет думать об отсутствии необходимости в проведении постоянного микробиологического мониторинга за устойчивостью к антибиотикам у штаммов, выделенных от больных, получающих противоопухолевую терапию.

Снижение чувствительности к цефтриаксону (в 2-4 раза) по сравнению с контролем у вариантов S.aureus, пассированных только в максимальной концентрации доксорубицина (1/2 МИК), может быть обусловлено взаимодействием цитостатика с ДНК микробной клетки в локусах, которые ответственны за синтез белковых структур, связывающих антибиотик. В дополнение следует заметить, что антрациклины не обладают четко выраженной специфичностью в отношении нуклеотидного состава ДНК [17]. Например, множественное интеркалирование ДНК клеток могло привести к изменению структуры и конформации протеиновых пор наружней мембраны, через которые диффундируют гидрофильные антибиотики, в том числе р~лактамы [14]. При сочетании опытных концентраций цефтриаксона и доксорубицина снижение чувствительности опытных штаммов оказалось более выраженным, чем при отдельном использовании каждого из препаратов: Мы полагаем, что это обусловлено прямым вмешательством самого цефтриаксона как главного селективного фактора. Кривые роста микробной популяции, построенные по данным измерения оптической плотности, подтверждают этот результат.

Изучение плазмокоагулазной и гемолитической активности пассажных вариантов штаммов S. aureus показало, что цефтриаксон и доксорубицин в опытных концентрациях как отдельно, так и при сочетании друг с другом способны изменять продукцию этих факторов. Варианты штаммов, пассированные только в постоянной и возрастающих концентрациях цефтриаксона, а также х/г МИК доксорубицина по плазмокоагулазной активности превзошли контрольные варианты, пассированные без препаратов. У вариантов, пассированных в сочетаниях Уг, 'Л МИК доксорубицина и цефтриаксона в постоянной и возрастающих концентрациях, плазмокоагулазная активность преимущественно снижалась по сравнению с вариантами, пассированными в одном антибиотике.

Повышение плазмокоагулазной активности у большинства вариантов S. aureus, пассированных при постоянной и возрастающих концентрациях цефтриаксона, по сравнению с контрольными свидетельствует о воздействии данного антибиотика на этот процесс. Известно, что гены, ответственные за синтез плазмокоагулазы, локализованы в бактериальной хромосоме [95]. Формирование индуцированной антибиотикоустойчивости в данном случае могло привести и к отбору клонов, обладающих более высокой плазмокоагулазной активностью. Будучи хромосомным, этот признак прочно закрепился у потомства при пассажах.

В литературе имеются сведения о снижении вирулентности, в том числе образования плазмокоагулазы, тест-штаммов различных микроорганизмов под влиянием макролидов. Считают, что подобное воздействие этих антибиотиков в субингибиторных концентрациях связано со сдерживанием развития микробной популяции на уровне, недостаточном для экспрессии клеточных белков и непосредственным повреждением факторов вирулентности белковой природы [51]. Полученные результаты в отношении снижения плазмокоагулазной активности соответствуют этим данным.

Сочетание цефтриаксона с Уг и Ул МИК доксорубицина снижало плазмокоагулазную активность штаммов. Поскольку локусы, ответственные за синтез факторов вирулентности, находятся в разных участках ДНК [87], то можно предположить, что под влиянием доксорубицина произошло их интеркалирование, что «выключило» часть генов из функционально активного состояния. Повышение плазмокоагулазной активности штаммов, пассированных на среде только с Уг МИК доксорубицина связано, очевидно, с лучшей адаптацией стафилококков в отсутствие антибиотика к его ДНК-тропному действию. В литературе есть сведения, что индуцируемые карминомицином однонитевые разрывы ДНК в клетках Micrococcus luteus, быстрее восстанавливаются по мере увеличения сроков инкубации культуры с этим антрациклином [98, 99]. То есть по мере пассажей в данной концентрации доксорубицина повышаются репаративные возможности клеточного генома. Следствием этого может явиться усиление экспрессии восстановленных фрагментов, в том числе и кодирующих плазмокоагулазу.

Гемолитическая активность вариантов S.aureus, пассированных в среде с постоянной и возрастающими концентрациями цефтриаксона, Vi МИК доксорубицина была ниже, чем у вариантов, пассированных без препаратов. Гемолитическая активность контрольных вариантов, была выше, чем у исходных штаммов. Сочетание обоих препаратов разнонаправлено влияло на ее динамику по сравнению с вариантами, пассированными без доксорубицина.

Превосходство по гемолитической активности контрольных штаммов S. aureus над исходными свидетельствует о «реанимировании» образования гемолизинов при улучшении условий питания микроорганизмов. К тому же имеются данные о повышении гемолитической активности стафилококков по мере роста и размножения микробной популяции, накопления в среде кислых продуктов обмена [95]. Гемолизины в этих условиях очевидно представляют собой лишний балласт, сбрасываемый при ухудшении условий культивирования. Более низкая, чем у контрольных вариантов гемолитическая активность штаммов, пассированных на среде с цефтриаксоном, является положительным моментом для клинической практики, в частности терапии стафилококковых инфекций. Вероятно, цефтриаксон как препарат без ДНК-тропного действия не оказывает прямого влияния на синтез гемолизинов, но не исключено, что ингибирование им синтеза пептидогликана определенным образом задерживает транспорт данного экзотоксина в окружающую среду. Снижение гемолитической активности вариантов, пассированных на среде с Vi МИК доксорубицина, может быть результатом его ингибирующего действия на Н1у-плазмиды опытных штаммов или взаимодействием с ответственными за синтез гемолизинов хромосомными генами. Снижение гемолитической активности у вариантов, пассированных в сочетаниях обоих препаратов, может быть обусловлено их синергидным эффектом. Возрастание этого признака характерно для вариантов, обладающих высокими адаптационными способностями в этих условиях пассажа.

Однако данные статистической обработки полученных значений титра гемолизинов и плазмокоагулазы показали, что совокупные изменения данных титров существенны только в отношении гемолитической активности вариантов, пассированных в одном антибиотике. Это позволяет сделать вывод об отсутствии значимого влияния самого доксорубицина в опытных концентрациях на эти вирулентные признаки. Это имеет положительное значение для его использования в клинике.

Изучение адгезивной активности пассажных вариантов E.coli показало, что варианты, пассированные в постоянной и возрастающих концентрациях амикацина, имели более высокую адгезивную активность, чем контроли. Адгезивная активность контрольных вариантов разнонаправлено изменялась по сравнению с исходными штаммами. Варианты, пассированные при сочетании постоянной концентрации амикацина и CK доксорубицина, имели более высокую адгезивную активность, чем варианты, пассированные без доксорубицина. Варианты, пассированные при сочетании возрастающих концентраций амикацина и CK доксорубицина по адгезивной активности уступали вариантам, пассированным без цитостатика. Пассажи в CK доксорубицина без антибиотика привели к изменению (увеличению) адгезивной активности только у одного штамма.

Изменение адгезивной активности контрольных вариантов 3 пассажных штаммов E.coli по сравнению с исходными больше в сторону снижения свидетельствует о нестабильности данного признака. Синтез адгезинов у бактерий является процессом, зависящим от многих факторов внешней среды, и кодируется хромосомными генами [12]. Видимо не у всех штаммов после «отрыва» от макроорганизма произошло полное восстановление адгезивной активности при контакте с мишенями эритроцитов. Усиление адгезивной активности вариантов 3 штаммов, пассированных в возрастающей и постоянной концентрациях амикацина, как и в случае плазмокогулазной активности у стафилококков, вероятно явилось результатом селекции антибиотиком потомства клеток с большей степенью выраженности этого хромосомного признака. Имеющиеся в литературе данные также свидетельствуют об увеличении адгезивной активности грамотрицательных бактерий (шигелл и энтероинвазивных Е. coli) в присутствии субминимальных ингибирующих концентраций тетрациклина и хлорамфеникола [56]. В этом случае интересен тот факт, что оба антибиотика, как и амикацин, нарушают синтез белка, что объединяет их по механизму действия.

Изменение адгезивной активности штаммов, пассированных при возрастающей и постоянной концентрациях амикацина в присутствии CK доксорубицина как в сторону ее снижения, так и в сторону увеличения, возможно отражает итог конкурентных взаимоотношений между доксорубицином и клетками E.coli за связывание с ионами Fe (II). Известно, что их концентрация является одним из основных факторов, влияющих на адгезию. Взаимодействие с этими ионами ряда интеркалирующих соединений ведет к превращению их в Fe (III) и инициации в результате этого процесса свободно-радикального окисления

18, 60, 61, 145]. Не исключено, что доксорубицин выступает в роли конкурента с E.coli за связывание ионов Fe (II) эритроцитов. В этих условиях бактериальные клетки должны более активно связывать железо, что приводит к увеличению их адгезивной активности.

Полученные результаты еще раз свидетельствуют о мозаичности генетической регуляции вирулентности, что является причиной лабильности и штаммового характера данного признака.

Таким образом, присутствие двух «неблагоприятных факторов»-антибиотика и доксорубицина в опытных концентрациях обнаружило тенденцию к отсутствию изменений плазмокоагулазной и гемолитической активности штаммов S.aureus и разнонаправленным изменениям адгезивной активности штаммов E.coli. Отсутствие однонаправленного механизма во влиянии опытных препаратов на изучаемые вирулентные признаки по нашему мнению может быть обусловлено сложностью механизмов регуляции коммуникативных сигналов у бактерий. Известно, что за синтез ряда факторов вирулентности, в том числе и синтез гемолизинов у стафилококков, отвечают гены, активация которых обусловлена межклеточными сигналами, «доходящими» до генома с помощью специфических пептидов [22]. Поэтому можно предположить, что микробная популяция, находясь в разных условиях культивирования, имеет неодинаковую численность и поэтому находится на разных этапах «кворум-сенсинга». Соответственно активация транскрипици и трансляции соответствующих оперонов будет происходить у разных популяций неодинаково. Данные, полученные Nalca Y. et al. (2006) о подавляющем влиянии азитромицина на кворум-сенсинг и, как следствие, продукцию факторов вирулентности у P.aeruginosa [162], свидетельствуют о возможном влиянии и других препаратов на этот процесс, в том числе и противоопухолевых.

Выявленные изменения данных факторов могут иметь значение при формировании и циркуляции госпитальных штаммов во нутрибольничной среде онкостационаров, т.е. способствовать возникновению популяции микроорганизмов с высокой или низкой вирулентностью. Формирование микробных сообществ с низкой вирулентностью является эпидемиологически благоприятным фактором.

Поскольку химиотерапия инфекционных и опухолевых заболеваний постоянно развивается, синтезируются новые химиотерапевтические средства с оптимизированными фармакологическими параметрами, оригинальной или модифицированной структурой, изучение сочетанного действия антибиотиков и противоопухолевых препаратов на микроорганизмы не потеряет своей актуальности и в дальнейшем.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шаповал, Ольга Георгиевна, 2009 год

1. Адгезивные свойства лактобактерий и эшерихий в различных отделах желудочно-кишечного тракта человека в норме и патологии / Е.А. Богданова, Ю.В. Несвижский, A.A. Воробьев, М.В. Брюхова // Вестник РАМН. - 2006. - № 1. - С. 35-38.

2. Алексеев, Г.К. Профилактическое применение антибактериальных препаратов / Г.К. Алексеев // Антибиотики. — 1982. — Т. 27. № 16. — С. 456-465.

3. Антибактериальная химиотерапия при операциях на желудочно-кишечном тракте у онкологических больных / А.П. Кубашева, Э.П. Сорокин, П.Р. Шилов и др.// Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2005. - Т. 7. - № 2. - Приложение 1. - С. 38.

4. Антибиотикопрофилактика при плановых операциях в хирургии / Н.М. Кузин, Н.В. Ефимова, М.И. Сорокина, С.А. Дадвани // Актуальные проблемы химиотерапии бактериальных инфекций: Сб. науч. тр. — М., 1991. С.341-343.

5. Антибиотикотерапия фебрильной нейтропении низкого риска инфекции / C.B. Колобов, Л.Д. Школьник, Г.В. Варлан и др. // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. — 2005. — Т. 7. — № 2. — Приложение 1. С. 35.

6. Астапов, A.A. Подавление акрихином передачи RTF-фактора / A.A. Астапов // Антибиотики. 1970. - Т. 15. - № 1. - С. 46-49.

7. Афиногенов, Г.Е. Алкилсульфонаты и алкиларилсульфонаты как ингибиторы пенициллиназы / Г.Е. Афиногенов, Е.Ф. Панарин // Антибиотики. 1976. - Т. 21. - № ю. - С. 876-880.

8. Ашмарин, И.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях / И.П. Ашмарин, A.A. Воробьев. Ленинград: Медгиз, 1962. - 180 с.

9. Багирова, Н.С. Бактериемии у больных гемобластозами / Н.С. Багирова, Н.В. Дмитриева // Проблемы гематологии и переливания крови. — 2002. — № 4. — С. 21-33.

10. Багирова, Н.С. Инфекции в онкогематологии / Н.С. Багирова // Новое в онкологии / Под ред. И.В. Поддубной, H.A. Огнерубова. — Воронеж, 2001. С. 366-380.

11. Белобородова, Н.В. Сравнительная активность in vitro цефепима и других антибиотиков в отношении клинических штаммов грамотрицательных бактерий / Н.В. Белобородова, Т.Ю. Вострикова, А.И. Мелько // Антибиотики и химиотерапия. — 2003. — № 7. — С. 12-15.

12. Билалов, Ф.С. Особенности некоторых биологических свойств штаммов Escherichia coli, выделенных от онкологических больных с инфекционными осложнениями: Автореф. дис.канд. мед. наук / Ф.С. Билалов. — Челябинск, 2007. — 23 с.

13. Бондарь, И.В. Злокачественные новообразования у детей: заболеваемость, смертность, продолжительность жизни / И.В. Бондарь // Российский онкологический журнал. — 2002. — № 1. С. 43-44.

14. Бриан, JI.E. Бактериальная резистентность и чувствительность к химиопрепаратам / JI.E. Бриан. М.: Медицина, 1984. - 272 с.

15. Бродинова, Н.С. Устранение множественной лекарственной устойчивости у культур кишечной палочки аурантином и УФ-лучами / Н.С. Бродинова, А.Ф. Мороз, Л.И. Шатман // Антибиотики. 1970. - Т. 14.- № 3. С. 244-247.

16. Волкова, З.В. Причины развития инфекции у онкологических больных / З.В. Волкова // XI Российский онкологический конгресс. 2007.- Режим доступа: http//www.rosoncoweb.ru/library/congress/09/09.htm.

17. Гаузе, Г.Ф. Исследование молекулярных механизмов действия и применения противоопухолевых антибиотиков в СССР / Г.Ф. Гаузе, Ю.В. Дудник // Антибиотики. 1982. - Т. 27. - № 12. - С. 889-898.

18. Гершанович, M.JI. Кардиоксан: профилактика кардиотоксичиости антрациклинов / M.JI. Гершанович // Вопросы онкологии. 2004. - Т. 50. - № 4. - С. 482-491.

19. Глаузер, М. Лечение фебрильной нейтропении / М. Глаузер // Современная онкология. 2001. - Т.З. - № 3. - С. 100-102.

20. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц. — М.: Практика, 1999.-459 с.

21. Глухов, Н.В. Влияние фуразолидона на экспериментальную дизентерийную инфекцию: Дис. канд. мед. наук / Н.В. Глухов; Саратовский мед. ун-т. Саратов, 1965. - 179 с.

22. Грузина, В.Д. Коммуникативные сигналы бактерий / В.Д. Грузина // Антибиотики и химиотерапия. 2003. - Т. 48. - № 10. - С. 3239.

23. Гусева, С.А. Фебрильная нейтропения: методы профилактики и терапии / С.А. Гусева, А.О. Петрушина // Украинский журнал гематологии и трансфузиологии. 2006. - Т. 6. - № 1. - С. 48-57.

24. Давиденко, И.С. Сравнительный анализ комбинаций интаксел+доксорубицин и CAF в первой линии терапии метастатического рака молочной железы / И.С. Давиденко, М.В. Казанцева, O.A. Гончарова // Российский онкологический журнал. 2006. - № 4. - С. 36-39.

25. Дмитриева, Н.В. Лечение и профилактика инфекционных осложнений при расширенных комбинированных операциях у онкогинекологических больных / Н.В. Дмитриева, И.Н. Петухова // Русский медицинский журнал. 2003. - Т. 11. - № 18. - С. 1032-1036.

26. Дмитриева, Н.В. Преимущества цефтриаксона при лечении инфекций у онкобольных / Н.В. Дмитриева // Сопроводительная терапия в онкологии. 2005. - № 2. - С. 29-33.

27. Дудник, Ю.В. Усиление бактерицидного действия митомицина С и УФ-облучения некоторыми антрациклиновыми антибиотиками /

28. Ю.В. Дудник, JI.H. Останина, М.И. Резникова // Антибиотики. 1976. -Т. 21.-№ 9.-С. 798-800.

29. Дурнов, JI.A. Детская онкология / JI.A. Дурнов, Г.В. Голдобенко, В .И. Курмашов. М.: Литера, 1997. - 400 с.

30. Егоров, A.M. Развитие антимикробной терапии и новые парадигмы / A.M. Егоров, Ю.О. Сазыкин, В.П. Иванов // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. — 2001. Т.З. - № 2. - С. 98-104.

31. Заболеваемость населения России злокачественными новообразованиями в 2000 г. / В.В. Старинский, Г.В. Петрова, В.И. Чиссов и др. // Российский онкологический журнал. — 2002. № 3. - С. 39-44.

32. Иванова, Л.Ф. Диагностика и лечение инфекционных осложнений при фебрильных нейтропениях у детей, больных острыми лейкозами / Л.Ф. Иванова, Н.В. Дмитриева, Л.А. Дурнов // Современная онкология. 2001. - Т.З. - № 3. - С. 106-108.

33. Инвазивный аспергиллез у иммунокомпрометированных больных / Г.А. Клясова, H.A. Петрова, Г.М. Галетян и др. // Терапевтический архив. 2003. - Т. 75. - № 7. - С. 63-68.

34. Инфекционные осложнения после трансплантации аутологичных гемопоэтических клеток при гемобластозах / Л.П. Менделеева, Н.Е. Митин, Г.А. Клясова и др. // Терапевтический архив. — 2005. Т. 77.7. С. 33-39.

35. Информация для профессионалов здравоохранения: Онкология / Подробно о лекарствах. Bristol-Myers-Squibb. - Режим доступа: http//medi .ru/doc/001 oncop.htm.

36. Клясова, Г.А. Инвазивные микозы в онкогематологии: современное состояние проблемы / Г.А. Клясова // Современная онкология. 2001. - Т. 3. - № 2. - С. 61-65.

37. Клясова, Г.А. Эмпирическая монотерапия цефепимом при фебрильной нейтропении / Г.А. Клясова // Антибиотики и химиотерапия. -2003. Т. 48. - № 7. - С.33-37.

38. Коррекция вторичных иммунодефицитных состояний, индуцированных химиолучевой терапией у онкологических больных / Е.Г. Кузьмина, Г.С. Неприна, O.E. Ватин и др. // Российский онкологический журнал. 2003. - № 2. - С. 32-36.

39. Котельников, А.Г. Инфекционные осложнения при раке органов панкреатодуоденальной зоны / А.Г. Котельников // Сопроводительная терапия в онкологии. — 2005. № 4. - С. 2-8.

40. Левашов, A.B. Факторы индивидуализации лечения послеоперационных раневых осложнений у больных раком желудка / A.B. Левашов // Вопросы онкологии. 2001. - Т. 47. - № 4. - С. 475-477.

41. Липосомальный даунорубицин (даунозом) в лечении рецидива острого промиелобластного лейкоза / A.B. Пивник, Д.Л. Строяковский, П.В. Медведев и др. // Терапевтический архив. — 1999. Т. 71. - № 7. - С. 24-27.

42. Липосомы и другие наночастицы как средство доставки лекарственных веществ / А.П. Каплун, Ле Банг Шон, Ю.М. Краснопольский, В.И. Швец // Вопросы медицинской химии. — 1999. — Т.45. № 1.-С. 3-12.

43. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: Пособие для врачей / М.Д. Машковский. 14-е изд. - М.: Новая волна, 2002. - Т. 2. - 608 с.

44. Меропенем в лечении тяжелых инфекций у онкологических больных / Н.В. Дмитриева, И.Н. Петухова, Н.С. Багирова и др.// Сопроводительная терапия в онкологии. 2005. - № 4. - С. 8-13.

45. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов / В.И. Брилис, Т.А. Брилене, Х.П. Ленцнер, A.A. Ленцнер // Лабораторное дело. 1986. - № 4. - С. 210-212.

46. Микробиологические аспекты инфекционных осложнений в онкологической клинике / Н.В. Дмитриева, А.З. Смолянская, И.Н. Петухова и др.// Антибиотики и химиотерапия. — 1999. Т. 44. — № 10. — С. 16-19.

47. Минимальные клинические рекомендации Европейского общества медицинской онкологии (ESMO) / Под ред. С.А. Тюляндина, Н.И. Переводчиковой, Д.А. Носова. М.: Издательская группа РОНЦ им. H.H. Блохина РАМН, 2003. - 80 с.

48. Мороз, А.Ф. Предупреждение развития лекарственноустойчивых форм у стафилококков комбинациями антибиотиков с ДНК-тропными веществами / А.Ф. Мороз, Н.С. Бродинова, В.М. Подборнов // Антибиотики. 1971. - Т. 16. -№ 5. - С. 405-408.

49. Навашин, С.М. Макро- и микроорганизм взаимодействие в инфекционном процессе при антибактериальной терапии / С.М. Навашин // Антибиотики и химиотерапия. - 1998. - Т. 43. — № 11. — С. 3-5.

50. Наседкин, Д.С. Разработка способов определения антибиотиков антрациклинового ряда: Автореф. дис. . канд. фарм. наук / Д.С. Наседкин. Пермь, 2001. - 23 с.

51. Нещадим, Г.Н. Изучение путей ограничения антибиотикорезистентности у энтеробактерий в эксперименте: Автореф. дис. . канд. М., 1972.

52. Новые цитостатики в лечении злокачественных опухолей / В.А. Горбунова, М.Б. Бычков, Э.К. Возный и др. М.: УРСС, 1998. -128 с.

53. Нозокомиальные инфекции в онкологической клинике: современное состояние проблемы / А.А. Соколов, С.Д. Митрохин, В.И. Минаев, А.Н. Махсон // Российский онкологический журнал. — 2007. — № 1.- С. 29-37.

54. Норман, Л.Л. Изменение вирулентности и выживаемости шигелл в присутствии антибактериальных препаратов: Автореф. дис. канд. мед. наук / Л.Л. Норман; НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера. — СПб, 2003.

55. Оловникова, Н.И. Терапевтические моноклональные антитела и механизмы их действия / Н.И. Оловникова, Г.Ю. Митерев // Терапевтический архив. 2007. — Т. 79. — № 7. — С. 87-96.

56. О механизме действия карминомицина / Ю.В. Дудник, Л.Н. Останина, Л.И. Козьмян, Г.Г. Гаузе // Антибиотики. 1974. — Т. 19. -№6.- С. 514-517.

57. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: Методические указания. МУК 4.2.1890-04.-91 с.

58. Орел, Н.Ф. Кардиотоксичность антрациклинов: возможности преодоления / Н.Ф. Орел // Современная онкология. — 2004. Т. 6. - № 3. — С. 121-124.

59. Основные клинические данные по препарату КАРДИОКСАН® (дексразоксан). Режим доступа:http//www.cscшssia.ru/шs/publications/cardioxane6.shtml#2.

60. Особенности течения инфекционных процессов у детей с онкологической патологией / Цикл лекций по детской онкологии. — Российский биомедицинский журнал. Т. 2, ст.38. - С. 176-178.

61. Переводчикова, Н.И. Место химиотерапии в системе лечения онкологических больных и выбор терапевтической тактики / Н.И. Переводчикова// Современная онкология. 2001. - Т. 3. - № 2. — С. 66-69.

62. Петухова, И.Н. Антибиотикопрофилактика послеоперационных раневых инфекций / И.Н. Петухова // Сопроводительная терапия в онкологии. 2005. - № 1. - С. 2-10.

63. Подборнов, В.М. Предупреждение развития лекарственноустойчивых форм Е. coli В антибиотиками в сочетании с ДНК-тропными веществами / В.М. Подборнов // Антибиотики. 1972. -Т. 17.-№6. -С. 539-546.

64. Поддубная, И.В. Достижения современной химиотерапии / И.В. Поддубная // Современная онкология. 2003. - Т. 5. — № 2. - С. 49-58.

65. Поддубная, И.В. Химиотерапия злокачественных опухолей на рубеже веков / И.В. Поддубная // Терапевтический архив. 1999. - Т. 71. - № 10.- С. 12-17.

66. Пономарева, Т.Р. Влияние антибиотиков антрациклиновой группы, митомицина и брунеомицина на трансдукцию лекарственной устойчивости у стафилококков / Т.Р. Пономарева, А.З. Смолянская // Антибиотики. 1978. - Т.23. - № 10. - С. 896-901.

67. Попова, H.A. Физико-химические параметры поверхности бактерий и способность связывать пенициллин в связи счувствительностью к пенициллинам и стрептомицину /

68. H.A. Попова // Антибиотики. 1976. - Т. 21. - № 10. - С. 897-902.

69. Предварительные результаты кооперированного клинического изучения нового противоопухолевого антибиотика карминомицина / В.И. Борисов, A.M. Липатов, Н.И. Переводчикова и др.// Антибиотики. — 1976. -Т.21.-№ 11.-С. 1026-1030.

70. Птушкин В.В. Лечение и профилактика инфекций у больных с нейтропенией. Материалы III ежегодной Российской онкологической конференции 29 ноября 1 декабря 1999 г., Санкт-Петербург.

71. Распределение ЗН-карминомицина в организме мышей / М.И. Резникова, В.Л. Карпов, Ю.В. Дудник, B.C. Бажанов // Антибиотики. -1978. Т. 23. -№ 7. - С. 609-611.

72. Резистентность грамотрицательных возбудителей в онкологическом стационаре / З.В. Волкова, И.Н. Петухова, Г.В. Варлан идр.// Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. — 2003. Т. 5. - Приложение 1. - С. 15.

73. Резистентность микроорганизмов возбудителей инфекции у онкологических больных / Н.В. Дмитриева, И.Н. Петухова, Н.С. Багирова и др. // Сопроводительная терапия в онкологии. — 2005. — № 1. — С. 17-25.

74. Рехтина, И.Г. О трудностях диагностики туберкулеза у больных с системными заболеваниями крови / И.Г. Рехтина, С.М. Щекочихин // Терапевтический архив. — 1998. Т. 70. - № 4. - С. 60-62.

75. Решедько, Г.К. Значение ферментативной модификации аминогликозидов в развитии резистентности у бактерий / Г.К. Решедько // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 1999. — Т. 1. - № 1.-С. 40-50.

76. Рубомицин (^1 — антрациклиновый метаболит из рубомицин С-продуцирующего штамма 81тер1:отусе5 соегШеотЫёш 2679 / Г.Б. Федорова, Т.П. Голова, Н.М. Архангельская и др.// Антибиотики и химиотерапия. 1996. - Т. 41. - № 3. - С. 3-8.

77. Святославов, Д.С. Антибактериальная профилактика и лечение раневых инфекций у больных опухолями головы и шеи: Автореф. дисс. канд. мед. наук / Д.С. Святославов; Москва, 2007.

78. Севостьянова, Н.В. Особенности иммунологических показателей у онкобольных / Н.В. Севостьянова, Т.М. Исаева, Л.Н. Уразова // Вопросы онкологии. 2001. - Т. 47. -№ 4. - С. 446-448.

79. Сепсис у онкологических больных в раннем послеоперационном периоде: взгляд клинициста / И.В. Нехаев, С.П. Свиридова, О.Г. Мазуринаи др.// Инфекции и антимикробная химиотерапия. 2003. — Т. 5. - №1. -С. 18-21.

80. Сивашинский, М.С. Некоторые пути повышения эффективности химиотерапии больных с диссеминированными солидными опухолями / М.С. Сивашинский // Вопросы онкологии. — 2004. Т. 50. — № 2. - С. 237- 242.

81. Сидоренко, C.B. Инфекционный процесс как «диалог» между хозяином и паразитом / C.B. Сидоренко // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. -2001. Т. 3. — № 4. — С. 301-315.

82. Смертность населения России от злокачественных новообразований в 2000 г. / Н. В. Харченко, В.В. Старинский, Г.В. Петрова, О.П. Грецова // Российский онкологический журнал. 2002. - № 4. - С. 37-40.

83. Смолянская, А.З. Действие 5-фторурацила на передачу фактора множественной лекарственной устойчивости у бактерий / А.З. Смолянская // Антибиотики. 1970. - Т.15. - №1. - С. 38-46.

84. Современная антимикробнная химиотерапия: Руководство для врачей / Под ред. Л.С. Страчунского, С.Н. Козлова. М., Боргес, 2002.

85. Соколов, A.A. Практические рекомендации по оптимизации антибактериальной терапии онкобольных с госпитальной инфекцией / A.A. Соколов, С.Д. Митрохин, А.Н. Махсон // Российский онкологический журнал. 2006. - № 5. - С. 41-45.

86. Справочник лекарств, гомеопатии, БАД / Лекарства с действующим веществом цефтриаксон. — Режим доступа: http//amt.allerg}st.ru/product/ceflri akson-akos.html.

87. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / Под ред. М.О. Биргера. М.: Медицина, 1982. — 464 с.

88. Сравнительное изучение кардиотоксичности антрациклинового антибиотика карминомицина и адриамицина на белых мышах / Л.Е.

89. Гольдберг, Н.Г. Шепелевцева, И.П. Белова, Т.П. Вертоградова // Антибиотики. 1976.- Т. 21. - № 12.- С. 1106-1113.

90. Стафилококки и стафилококковая инфекция: Коллективная монография / Под ред. Н.Р. Иванова, А.К. Акатова, Н.Н. Блохина, В.В. Игнатова, Н.А. Зайцевой. — Саратов: Изд-во Саратовского ун-та, 1980. — 320 с.

91. Таксономическая структура возбудителей инфекции в онкологической клинике / Н.В. Дмитриева, А.З. Смолянская, И.Н. Петухова и др.// Современная онкология. 2001. - Т. 3. - № 3. - С. 93-96.

92. Терешин, И.М. Преодоление лекарственной устойчивости возбудителей инфекционных заболеваний / И.М. Терешин. — Ленинград: Медицина, 1977. 184 с.

93. Тренин, А.С. Индукция карминомицином однонитевых разрывов ДНК клеток Micrococcus luteus / А.С. Тренин // Антибиотики. 1979. - Т. 24. -№ 11.-С. 841-846.

94. Тренин, А.С. Исследование индукции карминомицином однонитевых разрывов ДНК в нормальных и опухолевых клетках мыши при внутривенном ведении антибиотика / А.С. Тренин // Антибиотики. — 1980. Т. 25. - № 10. - С. 764-769.

95. Федеральное руководство для врачей по использованию лекарственных средств / Общероссийский общественный фонд «Здоровье человека». М.: ГЭОТАР Медицина, 2000. - 975 с.

96. Фомина, И.П. Антибиотики в профилактике хирургической инфекции (микробиологические и клинические аспекты) / И.П. Фомина, Л.Б. Смирнова, Е.Б. Гельфанд // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - № 9.-С. 35-43.

97. Франклин, Т. Биохимия антимикробного действия / Т. Франклин, Дж. Сноу. М.: Мир, 1984. - 240 с.

98. Цитомегаловирусная инфекция в практике трансплантации костного мозга / С.И. Моисеев, M.JI. Нуйя, В.Н. Чеботкевич и др. // Терапевтический архив. — 2002. Т. 74. - № 7. — С. 44-48.

99. Цитомегаловирусная инфекция у больных гемобластозами / В.Г. Савченко, В.В. Троицкая, А.В Мисюрин и др. // Терапевтический архив. — 2003. Т. 75. - № 7. - С. 52-58.

100. Чеботкевич, В.Н. Респираторные вирусные инфекции у онкогематологических больных (обзор) / В.Н. Чеботкевич, Н.Б. Румель, K.M. Абдулкадыров // Терапевтический архив. 2001. - Т. 73. - № 11.— С. 11-15.

101. Челышева, Г.М. Влияние производных гидроакридина на чувствительность полирезистентных штаммов S. aureus и Е. coli к антибиотикам / Г.М. Челышева, H.A. Заикина, O.A. Малюга // Антибиотики. 1978. - Т. 23. - № 9. - С. 805-809.

102. Чиссов, В.И. Лечение больных со злокачественными новообразованиями в России в 1998 г. / В.Н. Чиссов // Российский онкологический журнал. 2000. - № 4. - С. 38-43,

103. Чиссов, В.И. Современное состояние онкологии и перспективы её развития / В.И. Чиссов // Российский онкологический журнал. 1999. -№ 4. - С. 50-54.

104. Чуданова, Т.В. Особенности применения цефепима в комбинации с амикацином в режиме эмпирической антибиотикотерапии у больных различными формами гемобластозов / Т.В. Чуданова, K.M.

105. Абдулкадыров, В.Н. Чеботкевич // Антибиотики и химиотерапия. -2003. Т. 48. - № 7. - С. 29-32.

106. Швиденко, И.Г. Биологические свойства и лекарственная устойчивость возбудителей протейной инфекции: Дис. докт. мед. наук; Саратовский мед. ин-т. Саратов, 1985. - 259 с.

107. Шендеров, Б.А. Трансмиссивная лекарственная устойчивость бактерий (микробиологические и эпидемиологические аспекты): Дис. докт. мед. наук. / Б.А. Шендеров; Саратовский мед. ин-т. — Саратов, 1975. -374 с.

108. Шильникова, И.И. Анаэробные возбудители инфекций человека / И.И. Шильникова // Сопроводительная терапия в онкологии. — 2005. — № 2.-С. 9-17.

109. Шорин, В.А. Изучение перекрестной устойчивости у опухолевых клеток и стафилококков в отношении противоопухолевых антибиотиков из группы антрациклинов / В.А. Шорин, JI.A. Авербух // Антибиотики. 1976. - Т. 21. - № 10. - С. 914-919.

110. Эмпирическая антибиотическая терапия у больных острыми лейкозами: итоги многоцентрового исследования / Клясова Г.А., Савченко В.Г., Паровичникова E.H. и др. // Терапевтический архив. 1998. - Т. 70. - № 7.-С. 15-21.

111. Юлдашева, Н.Э. Клиническая картина и течение туберкулеза при сочетании с гемобластозами / Н.Э. Юлдашева, М.А. Карачунский, A.B. Пивник // Терапевтический архив. 2004. - Т. 76. - № 3. - С. 49-51.

112. Adderson, Е.Е. Infections caused by coryneform bacteria in pediatric oncology patients / E.E. Adderson, J.W. Boudreaux, R.T. Hayden //

113. The Pediatric infectious disease journal. 2008. - V. 27. - № 2. -P. 136-141.

114. Advances in the serological diagnosis of invasive Aspergillus infections in patients with haematological disorders / J. Maertens, K. Theunissen, T. Lodewyck et al. // Mycoses. 2007. - № 50. - Suppl. 1. — P. 2-17.

115. Analysis of risk factors for postoperative infectious complications. / E. Lohde, S. Muller, M. Luck et al. // Recent advances in Chemotherapy: Proc. 18-th. Intern. Congress Chemotherapy. Stockholm, 1993. - P. 728-729.

116. Antibacterial prophylaxis after chemotherapy for solid tumors and lymphomas / M. Cullen, N. Steven, L. Billingham et al. // New England Journal of Medicine. 2005.- V. 353. - № 10.- P. 988-998.

117. Bacteraemia in febrile neutropenic cancer patients / J. Klastersky, L. Ameye, J. Maertens et al. // International journal of antimicrobial agents. 2007. - V. 30. - Suppl. 1. - P. 51-59.

118. Antimicrobial agents and chemotherapy. — 1998.- V. 42. №7.- P. 1762-1770.

119. Bow, E.J. Considerations in the approach to invasive fungal infection in patients with haematological malignancies / E.J. Bow // British journal of haematology. 2008. - V. 140. - № 2. - P. 133-152.

120. Caspofungin as primary antifungal prophylaxis in stem cell transplant recipients / L.S. Chou, R.E. Lewis, C. Ippoliti et al. // Pharmacotherapy. 2007.- V. 27. -№ 12.- P. 1644-1650.

121. Clinical features of late cytomegalovirus infection after hematopoietic stem cell transplantation / Y. Asano-Mori, Y. Kanda, K. Oshima et al. // International journal of hematology. 2008. - V. 87. - № 3. -P. 310-318.

122. Clostridium difficile colitis associated with cisplatinbased chemotherapy in ovarian cancer patients / M. Emoto, T. Kawarabayashi, M.D. Hachisuga et al. // Gynecologic oncology. 1996.- V. 61.- № 3.- P. 369372.

123. Cytomegalovirus infection in paediatric haemopoietic stem cell transplantation / A.L. Chong, F. Clinton, F. Breatnach et al. // Irish medical journal. 2008.- V. 101.-№ 1.- P. 17-21.

124. Cytomegalovirus oesophagitis in a patient with non-hodgkin's lymphoma / S.S. Hingmire, G. Biswas, A. Bakshi et al. // Indian journal of medical microbiology. 2008. - V. 26. - № 1. - P. 79-80.

125. Denning, P.W. Invasive aspergillosis / P.W. Denning // Clinical infectious diseases: an official publication of the Infectious Diseases Society of America.- 1998.- V. 26. № 6.- P. 781-805.

126. Duedrago, M. Active tuberculosis in a patient with Hodgkin disease. A case report / M. Duedrago, S.M. Duedrago // Revue de pneumologie clinique. 2000. - V. 56. - № 1. - p. 33-35.

127. Effectiveness of antibiotic prophylaxis in critically ill adult patients: systematic review of randomized controlled trials / R. D' Amico, S. Rifferi, C. Leonetti et al. // British medical journal. 1998. - V. 316. - № 7140. - P. 1275-1285.

128. Epidemiological surveillance of surgical wound infections / A. Giacometti, O. Cirioni, A. M. Schimizzi et al. // 3-rd Intern Meeting on the Therapy of Infections. Florence, 2000. - Abstr. B 40.

129. Evaluation of a screening strategy after occurence of two simultaneous contaminating tuberculosis cases in a pediatric oncology department / A. Gauchon, N. Andre, A. Rome et al. // Archives of pediatrics. -2008. V. 15. - № 3. - P. 236-244.

130. Fungal infections after haematology unit renovation: evidence of clinical, environmental and economical impact / R. Araujo, A. Carneiro, S.

131. Costa-Oliveira et al. // European journal of haematolology. 2008. -V. 80.-№5.- P. 436-443.

132. Influenza-associated morbidity in children with cancer / S.K. Tasian, J.R. Park, E.T. Martin, J.A. Englund // Pediatric blood & cancer. — 2008.- V. 50.- № 5.- P. 983-987.

133. Kruger, A. Kardiotoxizität von Anthrazyklinen ein ungelöstes Problem / A. Kruger, L. Wojnowski // Deutsches Ärzteblatt. - 2006. - H. 37. - A. 2393-2397.

134. Levofloxacin to prevent bacterial infection in patients with cancer and neutropenia / G. Bucaneve, A. Micozzi, F. Menichetti et al. // New England Journal of Medicine. 2005. - V. 353. - № 10. - P. 977-987.

135. Lin, M.Z. The evolution of antibodies into versatile tumor-targeting agents / M.Z. Lin, M.A. Teitell, G.J. Schiller // Clinical cancer research: an official journal of the American Association for Cancer Research. 2005. -V. 11.-№ l.- P. 129-138.

136. Lo, N. Antibiotic prophylaxis in chemotherapy-induced neutropenia: time to reconsider / N. Lo, M. Cullen // Hematolgical oncology. 2006. - V. 24. - № 3. - P. 120-125.

137. Maertens, J. Caspofungin: an advanced treatment approach for suspected or confirmed invasive aspergillosis / J. Maertens // International journal of antimicrobial agents. 2006. - V. 27. - № 6. - P. 457-467.

138. Observational study on candidaemia at a university hospital in southern Italy from 1998 to 2004 / G. Caggiano, R. Iatta, A. Laneve et al. // Mycoses. 2008.- V. 51.-№2. - P. 123-128.

139. Patel, R. Acute myeloidleukaemia complicated by antrgic tuberculosis / R. Patel, P.R. Relsey // Clinical and laboratory haematolology. -1996.- V. 18.- № 1.- P. 53-54.

140. Pathogen spectrum and drug resistance of spit samples from cancer patients / X.P. Wu, L. Zhang, X.L. Tan et al. // Ai zheng (Chinese journal of cancer). 2007. - V. 26. - № 12. - P. 1336-1338.

141. Petropoulos, P. Antibiotic prophylaxis in elective colorectal surgery / P. Petropoulos, B. Roche, I. Kuttel // Antibiotic prophylaxis in Surgery. 32 nd World Congress of Surgery. - 1987, Sydney. - P. 61- 68.

142. Pyrgos, V. Pulmonary zygomycosis / V. Pyrgos, S. Shoham, T.J. Walsh // Seminars in respiratory and critical care medicine. — 2008. V. 29. — №2.- P. 111-120.

143. Quorum-sensing antagonistic activities of azithromycin in Pseudomonas aeruginosa PAOl: a global approach / Y. Nalca, L. Jansch, F. Bredenbruch et al. // Antimicrobial agents and chemotherapy. 2006. - V. 50. - №5. - P. 1680-1688.

144. Reduction of chemotherapy-induced febrile leucopenia by-prophylactic use of ciprofloxacin and roxithromycin in small-cell lung cancer patients: an EORTC double-blind placebo-controlled phase III study / V.C.

145. Tjan-Heijnen, P.E. Postmus, A. Ardizzoni et al. // Annals of oncology: official journal of the European Society for Medical Oncology. 2001. - V. 12.- № 10.-P. 1359-1368.

146. Risk index for prediction of surgical site infection after oncology operations / E. Velasko, Th. Santos, M. de Souza et al. // American journal of infection control. 1998. - V. 26. - № 3. - P. 217-223.

147. Schimpf, S.C. Gram-negative bacteremia / S.C. Schimpf // Supportive care in cancer: official journal of the Multinational Association of Supportive Care in Cancer. 1993. - № 1. - P. 5-18.

148. Spencer, R.C. Cross-susceptibility of cefpirome and four other beta-lactams against isolates from haematology/oncology and intensive care units / R.C. Spencer // Scandinavion journal of infectious diseases. 1993. -№91 (Suppl.). - P. 25-32.

149. Taylor, E. W. Surgical Infection: Current Concerns / E. W. Taylor // The European journal of surgery.- 1997.- № 163. Suppl. 578. - P. 5-9.

150. The timing of prophylactic administration of antibiotics and risk of surgical wound infection / D. C. Classen, R. S. Ewans, S. L. Restotnik et al. // New England Journal of Medicine. 1992. - V. 326. - № 5. - P. 281-286.

151. Thielman, N.M. Antibiotics-associated colitis / N.M. Thielman // Principles and practice of infectious diseases / G.L. Mandell, I.E. Bennet, R. Dolin (ed.). Philadelphia: Churchill Liwingstone, 2000. - P. 1111- 1126.

152. VIDAL: Лекарственные препараты в России. М.: АстраФармСервис, 2004. - 1488 с.