Системные биомаркеры сыворотки крови у больных хронической обструктивной болезнью легких тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.43, кандидат медицинских наук Поливанова, Анна Эдуардовна

• Поливанова, Анна Эдуардовна
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Поливанова, Анна Эдуардовна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Определение ХОБJT.

1.2. Эпидемиология и факторы риска ХОБЛ.

1.3. Течение заболевания.

1.4. Патологоанатомические изменения при ХОБЛ и фенотипы ХОБЛ.

1.5. Патогенез ХОБЛ.

1.6.1. Воспаление дыхательных путей.

1.6.2. Оксидативный стресс.

1.6.3. Роль протеазно-антипротеазного статуса, цитокинов, факторов роста.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Дизайн исследования.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Общеклиническое обследование.

2.2.2. Функциональная диагностика.

2.2.3. Рентгенологические методы.

2.2.4. Лабораторные и иммунологические методы

2.3. Общая характеристика пациентов.

2.4. Статистическая обработка.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Уровень биомаркеров системного воспаления в сыворотке крови в группе больных ХОБЛ и в контрольной группе.

3.1.1. Корреляционные взаимосвязи системных биомаркеров в сыворотке крови и клинико-функциональных показателей у больных ХОБЛ.

3.1.2. Корреляционные взаимосвязи системных биомаркеров в сыворотке крови в группе больных ХОБЛ и в контрольной группе.

3.2. Различие концентраций системных биомаркеров в сыворотке крови у больных ХОБЛ 1-4 стадий.

3.3. Уровень системных биомаркеров в сыворотке крови у больных с разными фенотипами ХОБЛ.

3.3.1. Корреляционные взаимосвязи системных биомаркеров в сыворотке крови и клинико - функциональных показателей при разных фенотипах ХОБЛ.

3.3.2. Корреляционные взаимосвязи системных биомаркеров в сыворотке крови при гетерогенных фенотипах ХОБЛ.

3.4. Уровень и корреляционная взаимосвязь системных биомаркеров в сыворотке крови у больных ХОБЛ с эмфиземой разной степени выраженности.

3.4.1. Уровень системных биомаркеров ХОБЛ в сыворотке крови в группах больных с эмфиземой разной степени выраженности.

3.4.2. Корреляционные взаимосвязи системных биомаркеров ХОБЛ в сыворотке крови и клинико - функциональных показателей в группах больных с эмфиземой разной степени выраженности.

3.4.3. Корреляционные взаимосвязи системных биомаркеров ХОБЛ в сыворотке крови в группах больных с эмфиземой разной степени выраженности.

3.5. Уровень и корреляционные взаимосвязи системных биомаркеров в сыворотке крови у больных ХОБЛ с наличием и отсутствием буллезной эмфиземы.

3.5.1. Уровень систменых биомаркеров в сыворотке крови в группах больных ХОБЛ с буллезной эмфиземой и эмфиземой без булл.

3.5.2. Корреляционные взаимосвязи системных биомаркеров

ХОБЛ в сыворотке крови в группах больных с буллезной эмфиземой и с эмфиземой без булл.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Системные биомаркеры сыворотки крови у больных хронической обструктивной болезнью легких»

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

Современная концепция хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) трактует ее как заболевание с системными проявлениями, при котором даже поражение легких рассматривается как один из компонентов болезни (GOLD, 2006, 2007).

В определении ХОБЛ появились новые положения: 1) заболевание можно предупредить и лечить; 2) заболевание имеет системные проявления. К основным системным проявлениям ХОБЛ относятся: снижение питательного статуса, дисфункция скелетных мышц, остеопороз, анемия и сердечнососудистые эффекты. Механизмы, лежащие в основе данных системных проявлений, достаточно многообразны и пока изучены недостаточно (Agusti А, 2007; van Eeden S.F., Sin D.D., 2008). Важное место среди них занимают гипоксемия, курение, малоподвижный образ жизни и системное воспаление (ATS/ERS, 2004).

Концепция системной воспалительной реакции, или системного воспаления, у больных ХОБЛ относительно нова. Как подчеркивается в определениях заболевания, ХОБЛ характеризуется хроническим воспалением дыхательных путей. На ранних стадиях заболевания воспалительный процесс, который чаще всего вызывается ингаляцией табачного дыма, может быть обратимым. Однако со временем воспаление дыхательных путей становится хроническим, персистирующим, даже после прекращения курения. Основная локализация воспаления при ХОБЛ — малые дыхательные пути, но активное воспаление присутствует также и в крупных бронхах, и в легочной паренхиме, и в легочных сосудах (GOLD, 2005). При ХОБЛ частой находкой является повышение уровня биологических маркеров воспаления в периферической крови (СРБ, фибриноген, лейкоциты, провоспалительные цитокины - ИЛ 113,

ИЛ 6, ИЛ 8, фактор некроза опухолей — ФНО-а) (Agusti А., 1997; Hoidal J.R., 2001;Henson P.M., 2006).

Биологические маркеры - это количественно определяемые биологические параметры, которые как индикаторы опредляют здоровье, риск заболевания, эффекты окружающей среды, диагностику заболевания и т.д. (Национальная медицинская библиотека США, 1996).

Предполагается, что взаимосвязь между местным (т.е. бронхолегочным) и системным воспалением осуществляют: 1) выход стрессиндуцированных цитокинов и свободных радикалов из бронхолегочной системы в системную циркуляцию; 2) активация лейкоцитов периферической крови или клеток-предшественников в костном мозге; 3) стимуляция костного мозга и печени провоспалительными медиаторами, высвобождаемыми воспалительными и структурными клетками (Barnes P.J., 2000). Однако точные механизмы системного воспаления при ХОБЛ изучены недостаточно.

Существует классическое деление больных ХОБЛ по клинической симптоматике на два фенотипа: преимущественно эмфизематозный и бронхитический. Предполагается, что при эмфизематозном фенотипе ХОБЛ основную роль в легочной деструкции играют некоторые матриксные металлопротеиназы, нейтрофильная эластаза, а при бронхитическом фенотипе -эндотелиальный фактор роста, способствующий выраженному ремоделированию легочных сосудов и, как следствие, легочной гипертензии (Rovina N. et al, 2007; Kanazawa H. et al, 2007).

В настоящее время имеется ряд исследований, посвященных изучению системных биомаркеров ХОБЛ непосредственно в ткани легкого, мокроте, бронхо-альвеолярной жидкости, однако работ об изучении биомаркеров протеолиза-антипротеолиза, регенерации, воспаления в сыворотке больных ХОБЛ недостаточно для понимания их роли в патогенезе данного заболевания (Finlay G.A. et al, 1997; Betsuyaku Т. Et al, 1999; Tanino M. Et al, 2002).

Таким образом, остается еще ряд нерешенных вопросов о роли протеаз-антипротеаз и воспаления в патофизиологии эмфиземы, о взаимосвязи между воспалением, протеазной активностью и ремоделированием экстрацеллюлярного матрикса у больных ХОБЛ, о взаимосвязи протеаз, ангиогенных и фиброгенных факторов в системном воспалении, решение которых, поможет как в понимании патогенеза ХОБЛ, так и в дальнейшей тактике ведения этих больных.

На основании вышеизложенного, изучение фенотипических особенностей системных биомаркеров, как патогенетических факторов развития эмфиземы, у больных ХОБЛ является актуальной проблемой и обусловливает цель и задачи настоящего исследования.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:

Изучить взаимосвязь биомаркеров системного воспаления и регенерации с клинико — функциональными параметрами у больных с гетерогенными фенотипами хронической обструктивной болезни легких. ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ:

1. Изучить концентрации биомаркеров системного воспаления и регенерации в сыворотке крови у больных ХОБЛ стабильного течения.

2. Установить взаимосвязи системных биомаркеров ХОБЛ с клинико-функциональными характеристиками больных.

3. Изучить клинические, функциональные особенности и дать характеристику системных биомаркеров воспаления и регенерации у больных с гетерогенными фенотипами ХОБЛ.

4. Уточнить роль системных биомаркеров воспаления и регенерации' в развитии отдельных форм эмфиземы легких.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА: В представленной работе впервые:

1. Установлено, что у больных ХОБЛ в начальных стадиях значительно повышен уровень ТФР-р в сыворотке крови, что свидетельствует о регенеративной активности легких.

2. Выявлены значимые корреляционные взаимосвязи уровня систолического давления в легочной артерии с ТФР - (3, ИЛ-8, ФНО-а, ММП-9 у больных ХОБЛ в фазе стабильного течения, что свидетельствует о роли данных биомаркеров в формировании легочной гипертензии.

3. Обнаружена достоверная корреляционная взаимосвязь ЭФР и ТИМП-1 в группе больных ХОБЛ в фазе стабильного течения, что свидетельствует о зависимости процессов ангиогенеза и антипротеолиза.

4. Установлено, что эмфизематозный и бронхитический фенотипы ХОБЛ достоверно отличаются по концентрациям ММП-9, ММП-9/ТИМП-1 и НЭ в сыворотке крови.

5. Обнаружено, что в группе больных ХОБЛ с тяжелой степенью выраженности эмфиземы число взаимосвязей НЭ с другими биомаркерами системного воспаления в 4 раза превышает таковое в группе больных с нетяжелой эмфиземой, что подтверждает участие данного биомаркера в развитии эмфиземы.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ:

1. Выявленные взаимосвязи между клинико-функциональными параметрами и системными биомаркерами у больных ХОБЛ позволяют уточнить отдельные звенья патогенеза данной болезни.

2. Исследование системных биомаркеров ХОБЛ позволяет определить фенотип ХОБЛ, прогнозировать течение заболевания, провести раннюю диагностику молекулярного дисбаланса, который может привести к прогрессированию болезни.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.

Основные положения работы доложены и обсуждены на: -15-м, 16-м, 17-м Национальных Конгрессах по болезням органов дыхания, (Москва, 2005; Санкт-Перербург, 2006; Казань, 2007 гг.);

-Ежегодных Конгрессах Европейского Респираторного Общества (Мюнхен, 2006; Стокгольм, 2007);

-Научной сессии ФГУ НИИ Пульмонологии Росздрава 2007г. (Москва); -Совместном заседании ФГУ НИИ Пульмонологии Росздрава и кафедры госпитальной терапии педиатрического факультета ГОУ ВПО РГМУ Росздрава (Москва, 2007 г).

ПУБЛИКАЦИИ.

По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из которых 4 журнальные статьи (в ведущих рецензируемых журналах согласно перечню ВАК Минобразования и науки РФ), 8 тезисов национальных и европейских конгрессов, из них 3 - в зарубежной печати (European Respiratory Journal).

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА РАБОТЫ.

Диссертация изложена на 118 страницах машинописи. Состоит из

Заключение диссертации по теме «Пульмонология», Поливанова, Анна Эдуардовна

выводы

1. Установлено достоверное увеличение уровней ИЛ-8 и НЭ в сыворотке крови у больных ХОБЛ по сравнению с курильщиками без ХОБЛ, что свидетельствует о сохраняющихся процессах воспаления и протеолиза в фазу стабильного течения болезни.

2. Выявлены достоверные корреляционные взаимосвязи уровня СДЛА с ТФР-р (г—0,58), ИЛ-8 (г=-0,66), ФНО-а (г=0,61), ММП-9 (г=-0,58), что свидетельствует о роли данных биомаркеров в регуляции давления в легочной артерии у больных ХОБЛ.

3. Высокая концентрация ТФР-р на ранних этапах болезни (1-2 стадии) и незначительная при тяжелом и крайне тяжелом течениях (3-4 стадии) ХОБЛ, свидетельствует об истощении его протективной функции на поздних стадиях заболевания.

4. Эмфизематозный фенотип при ХОБЛ характеризуется наличием достоверно более высоких концентраций ММП-9, ММП-9/ТИМП-1, НЭ и НЭ/ААТ в сыворотке крови.

5. Эмфизематозный фенотип при ХОБЛ характеризуется более низким ИМТ, DLCO и низкой толерантностью к физической нагрузке в отличие от больных ХОБЛ с бронхитическим фенотипом.

6. У больных ХОБЛ с тяжелой эмфиземой выявлены высокие корреляционные взаимосвязи концентраций ЭФР с НЭ (г=0,79), ТФР-р (г=Ю,97) в сыворотке крови, доказывающие взаимосвязь процессов ангиогенеза с протеолизом и фиброгенезом у данной категории больных.

7. Больные с тяжелой эмфиземой характеризуются более высокими концентрациями ММП-9 и ММП-9/ТИМП-1 в сыворотке крови по сравнению с пациентами с нетяжелой эмфиземой, что подтверждает роль данных маркеров в формировании эмфиземы.

8. При буллезной эмфиземе выявлены более высокие концентрации ММП-9 и ММП-9/ТИМП-1 в сыворотке крови, свидетельствующие о их участии в развитии булл.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Выявление у больных ХОБЛ высокого сывороточного уровня ТФР и низких уровней ИЛ-8, ФНО, ММП-9 в стабильном состоянии являются фактором риска развития легочной гипертензии и требуют мониторирования уровня давления в легочной артерии.

2. Низкий ИМТ и низкие показатели диффузионной способности легких характерны для больных эмфизематозным фенотипом ХОБЛ и требуют более углубленного обследования пациентов с применением метода компьютерной томографии для выявления форм, тяжести и распространенности эмфиземы.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Поливанова, Анна Эдуардовна, 2008 год

1. Авдеев С.Н. Хроническая обструктивная болезнь легких. Карманное руководство для практических врачей. -М.: Издательство« Атмосфера». -2006.- с.6-7.

2. Авдеев С.Н. Обострение ХОБЛ: значение инфекционного фактора и антибактериальная терапия. // Рус. Мед. Журнал.-2003.-т.11.-№22.-с.1205-1212.

3. Авдеев С.Н. Хроническая обструктивная болезнь легких как системное заболевание. // Пульмонология. 2007.-№2

4. Веремеенко К.Н., Семенюта О.С., Кизим А.И., Лобунец К.А.-Макроглобулин: структура, свойства и физиологическая роль //Украинский биохимический журнал. 1983.-Т.55.-2.-С.218-233.

5. Гриппи М.А. Патофизиология легких. М.: Издательство «БИНОМ». -1997.-с. 111-112.

6. Респираторная медицина. Под редакцией академика РАМН Чучалина А.Г. -М.: Издательство «ГЭОТАР-Медиа».-2007.-с.215.

7. Самильчук Е.И. Автореферат дисс. докт. мед. наук. Москва.-1997.

8. Соодаева С.К. Оксидантные и антиоксидантые системы легких при хронических обструктивных заболеваниях. «Хронические обструктивные болезни легких». Под редакцией академика РАМН Чучалина А.Г. -М.: Издательство «БИНОМ». 2000. - с. 92-111.

9. Стандарты по диагностике и лечению больных Хронической Обструктивной Болезнью Легких. Пересмотр 2004г. Перевод с англ. -М.:Издательство «Атмосфера».- 2005.- стр. 16-19.

10. Ю.Чучалин А.Г. Хроническая обструктивная болезнь легких. Клинические рекомендации. М.: Издательство « Атмосфера».-2003.11 .Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология. -М. .'Издательство « Медицина».-2000.-с.198-201.

11. Чучалин А.Г. Эмфизема. Передовая статья «Пульмонология».-1998 -стр. 6-13.

12. Юдин А.Л., Абович Ю.А. Медицинская Визуализация. -2001.-№2,-стр.30-33.

13. Aaron S.D., Angel J.B., Lunau М. et al. Granulocyte inflammatory markers and airway infection during acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -2001.-vol. 163- p.349-355.

14. Agusti A. Systemic effects of chronic obstructive pulmonary disease: what we know and what we dint know (but should) // Proc Am Thorac Soc. -2007.-vol. 4(7)- p.522-555.

15. Anant Mohan, Randeep Guleria, Charu Mohan, Surya P. Bhatt, Sneh Arora, Ravinder M. Pandey. Role of inflammatory mediators as markers of severity and outcome in acute exacerbation of COPD // Chest Meeting Abstracts.- 2007.-vol. 132-p. 480a.

16. Anthonicen N.R., Conett J.E., Kiley J.P. et al. Effects of smoking intervention and the use of an inhaled anticholinergic bronchodilator on the rate of decline of FEVI // JAMA 1994.- vol. 272- p.1497-1505.

17. Ashkenazi A., Marsters S.A., Capon D.J. et al. Protection against endotoxic shock by a tumor necrosis factor receptor immunoadhesin // Procl. Natl. Acad. Sci. USA -1991.- vol.88- p.10535-10539.

18. ATS/ERS. Standards for the diagnosis and treatment of patients with COPD: a summary of the ATS/ERS position paper // Eur. Respir. J. ■— 2004; 23:932—946.

19. Banda M.J., Rice A.G., Griffin G.L., Senior R.M. Alpha.-proteinase inhibitor is a neutrophil chemoattractant after proteolytic inactivation by macrophage elastase // J. Biol. Chem. -1988.- vol.263- p.4481-4484.

20. Bank F., Kiipper В., Reinhold D. et al. Evidence for crucial role of neutrophil-derived serine proteases in the inactivation of interleukin-6 at sites of inflammation // FEBS Lett -1999.- vol.461- p.235-240.

21. Baraldo S., Bazzan E., Turato G. Decreased expression of TGFI31 type II receptor in bronchial glands of smokers with COPD // Eur. Respir. J.-2004.- vol.24 (S48) :98S.

22. Barnes P.J., Ito K., Adcock I.M. A mechanism of corticosteroid resistance in COPD: inactivation of histone deacetylase // Lancet -2004.- vol.3 63-p.731-733.

23. Barnes P.J. Chronic obstructive pulmonary disease // N. Engl. J. Med. -2000.- vol.343- p.269-280.

24. Bedard M., McCLure C.D., Schiller N.L. et al. Release of interleukin-8, interleukin-6, and colony-stimulating factors by upper airway epithelial cells: implications for cystic fibrosis // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -1993.- vol.9- p.455-462.

25. Beeh K.M., Kornmann O., Buhl R. et al. Neutrophil chemotactic activity of sputum from patients with COPD: role of interleukin 8 and leukotriene B4 // Chest.- 2003.-vol,123-p. 1240-1247.

26. Beghe В., Bazzan E., Baraldo S. Transforming growth factor-B type II receptor in pulmonary arteries of patients with very severe COPD // Eur. Respir. J.- 2006. vol.28-p.556-562.

27. Betsuyaku Т., Nishimura M., Takeyabu K. et al. Neutrophil granule proteins in bronchoalveolar lavage fluid from subjects with subclinical emphysema// Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1999,- vol.159- p.l985-1991.

28. Beutler В., Grau G.E. Tumor necrosis factor in the pathogenesis of infectious diseases // Crit. Care Med. -1993.- vol.21- p.23-435.

29. Beutler B. Cachectin: more than a tumor necrosis factor // N. Engl. J. Med. -1987.-vol.316-p.379-385.

30. Boudier C., Bieth J.G. Oxidized mucus proteinase inhibitor: a fairly potent neutrophil elastase inhibitor // Biochem. J. -1994.- vol.303- p.61-68.

31. Calabrese F., Giacometti C., Beghe B. Marked alveolar apoptosis/proliferation imbalance in end-stage emphysema // Respir. Res.-2005.-vol.6-p. 14.

32. Caramon G., Romagnoli M., Casolari P. et al. Nuclear localisation of p65 in sputum macrophages but not in sputum neutrophils during COPD exacerbations // Thorax -2003.- vol.58-p.348-351.

33. Carstensen J.M., Pershagen G., Eklund G. Mortality in relation to cigarette and pipe smoking: 16 years' observation of 25,000 Swedish men // J. Epidemiol. Community Health.-1987.-vol.41-p.l66 172.

34. Carter A.B., Monick M.M., Hunninghake G.W. Lipopolysaccharide-induced NF-k|3 activation and cytokine release in human alveolar macrophages is PKC-independent and TK- and PC-PLC-dependent // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -1998.- vol.18- p.384-391.

35. Cataldo D., Munaut C., Noel A.et al. MMP-2- and ММР-9-linked gelatinolytic activity in the sputum from patients with asthma and chronicobstructive pulmonary disease // Int. Arch. Allergy Immunol. -2000.-vol.123- p.259-267.

36. Cederlund K, Bergstrand L, Hogberg S, et al. Visual classification of emphysema heterogeneity compared with objective measurements: HRCT vs spiral CT in candidates for lung volume reduction surgery// Eur Radiol 2002; 12:1045-1051.

37. Champagne В., Tremblay P., Cantin A., St. Pierre Y. Proteolytic cleavage of ICAM-1 by human neutrophil elastase // J. Immunol. -1998.- vol.161- p. 6398-6405.

38. Chung Y., Kercsmar C.M., Davis P.B. Ferret tracheal epithelial cells grown in vitro are resistant to lethal injury by activated neutrophils // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol -1991.- vol.5- p.125-132.

39. Cosio M., Ghezzo H., Hogg J.C. et al. The relations between structural changes in small airways and pulmonary-function tests // N. Engl. J. Med. -1978.- vol. 298 p.1277-1281.

40. Culpitt S.V., Nightingale J.A., Barnes PJ. Effect of high dose inhaled steroid on cells, cytokines and proteases in induced sputum in chronic obstructive pulmonary disease // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1999.-vol.160- p.1635-1639.

41. Demoly P., Simony-Lafontaine J., Chanez P. et al. Cell proliferation in the bronchial mucosa of asthmatics and chronic bronchitics // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1994.- vol.150 p.214-217.

42. De Serres F.J. Worldwide racial and ethnic distribution of alphal-antitrypsindeficiency : summary of an analysis of published genetic epidemiologic surveys // Chest. -2002.- vol.122- p. 1818-1829.

43. Di Francia M., Barbier D., Mege J.L., Orehek J. Tumor necrosis factor-л-levels and weight loss in chronic obstructive pulmonary disease // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1994,- vol.150- p. 1453-1455.

44. Dirkje S. P., Timens W. Remodeling in Asthma and Chronic Obstructive Pulmonary Disease // The Proceedings of the American Thoracic Society.-2006,-vol. 3-p.434-439.

45. Di Stefano A., Maestrelli P., Roggeri A. et al. Upregulation of adhesion molecules in the bronchial mucosa of subjects with chronic obstructive bronchitis //Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1994.- vol.l49-p.803-810.

46. Di Stefano A., Capelli A., Lusuardi M. et al. Severity of airflow limitation is associated with severity of airway inflammation in smokers // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1998.- vol.158- p.1277-1285.

47. Di Stefano A., Caramori G., Capelli A. et al. Increased expression of NF-kB in bronchial biopsies from smokers and patients with COPD // Eur. Respir. J. -2002.- vol.20- p.556-563.

48. Doll R., Peto R., Wheatley K. et al. Mortality in relation to smoking:40 years' observations on male British doctors (see comments) // Br. Med. J. -1994.- vol. 309-p. 901-911.

49. Donald A. Mahler, Saling Huang, Mohammad Tabrizi, Gregory M. Bell. Efficacy and Safety of a Monoclonal Antibody Recognizing lnterleukin-8 in COPD // Chest. 2004.-vol .126-p.926-934.

50. Drost E. M., Skwarski К. M., Sauleda J., Soler N., Roca J., Agusti A., MacNee W. Oxidative stress and airway inflammation in severe exacerbations of COPD // Thorax.- 2005.-vol. 60-p. 293 300.

51. Fera Т., Abboud R.T., Richter A. et al. Acute effect of smoking on elastaselike esterase activity and immunologic neutrophil elastase levels in-bronchoalveolar lavage fluid // Am. Rev. Respir. Dis. -1986.- vol. 133-p.568-573.

52. Finlay G.A., Russel K.G., McMahon K.J. et al. Elevated levels of matrix metalloproteinases in bronchoalvoelar lavage fluid of emphysematous patients // Thorax -1997.- vol.52- p.502-506.

53. Finkelstein R., Fraser R.S., Ghezzo H., Cosio M.G. Alveolar inflammation and its relation to emphysema in smokers // Am. J. Respir. Cri. Care Med. -1995.- vol.152-p.1666-1672.

54. Fletcher C., Peto R. The natural history of chronic airflow obstruction // Br. Med. J. 1977.- vol. 1- p.1645-1648.

55. Floreani A.A., Wyatt T.A., Stoner J. et al. Smoke and C5a induce airway epithelial ICAM-1 and cell adhesion // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -2003,- vol.29- p.472-482.

56. Franklin W.A., Veve R., Hirsch F.R. et al. Epidermal growth factor receptor family in lung cancer and premalignancy // Semin. Oncol. -2002.- vol.29- p. 3-14.

57. Gan W. Q., Man S. F., Senthilselvan A., Sin D. D. The association between chronic obstructive pulmonary disease and systemic inflammation: a systematic review and a meta-analysis // Thorax. 2004,-vol. 59- p.574-580.

58. Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Diseases (GOLD). Global strategy for diagnosis, management, and prevention of chronic obstructivepulmonary disease. NHLBI/WHO workshop report. Publication Number 2701, Updated 2005.

59. Guest P.J., Hansell D.M. High resolution computed tomography (HRCT) in emphysema associated with alpha-1-antitrypsin deficiency // Clin. Radiol.-1992.- vol.45- p.260-266.

60. Harlan J.M., Killen P.D., Harker L.A. et al. Neutrophil-mediated endothelial injury in vitro // J. Clin. Invest. -1981.- vol.68- p. 1394-1403.

61. Harpel P.S. Human alpha-2-macroglobulin //Ed. L. Lorand. -New York. -Acad. Press, -1975.-vol.45.- p.639-653.

62. Hautamaki R.D., Kobayashi D.K., Senior R.M., Shapiro S.D. Requirement for macrophage metalloelastase for cigarette smoke-induced emphysema in mice // Science (Wash DC) -1997.- vol.277- p.2002-2004.

63. Hellermann G.R., Nagy S.B., Kong X. et al. Mechanism of cigarette smoke condensate-induced acute inflammatory response in human bronchial epithelial cells // Respir. Res. -2002.- vol.3- p.22-28.

64. Henson P. M., Vandivier R. W., Douglas I. S. Cell Death, Remodeling, and Repair in Chronic Obstructive Pulmonary Disease? // Proceedings of the ATS. -2006,-vol. 3(8)-p. 713-717.

65. Hodge S.J., Hodge G.L., Reynolds P.N. et al. Increased production of TGF-P and apoptosis of T lymphocytes isolated from peripheral blood in COPD // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. -2003.- vol.l285-L492-L499.

66. Hoidal J.R. Genetics of COPD: present and future // Eur. Respir. J. -2001.-vol.18.- p.- 741-743.

67. Home C.H.W., Armstrong S.S., Thomson A.W., Thomson W.D. Detection of pregnancy-associated alpha-2-macroglobulin, an immunosupressive agent, in IgA producing plasma cells and bodi secretions // Clin.Exp. Immunol. -1983.- vol.5L- p.634-638.

68. Jasvir S. Parmar, Mahadeva R., Benjamin J. Reed. Polymers of ctr Antitrypsin Are Chemotactic for Human Neutrophils. A New Paradigm for the Pathogenesis of Emphysema // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -2002.-vol.26- p.723-730.

69. Jeon S.H., Chae B.C., Kim H.A. Mechanisms underlying TGF-{beta}l-induced expression of VEGF and Flk-1 in mouse macrophages and their implications for angiogenesis // J. Leukoc. Biol. -2007.-vol.81(2)-p.557 -566.

70. Johnston S.L., Papi A., Bates P.J. et al. Low grade rhinovirus infection induces a prolonged release of IL-8 in pulmonary epithelium // J. Immunol. -1998,- vol.160- p.6172-6181.

71. Joos L., He J.Q., Shepherdson M.B. et al. The role of matrix metalloproteinase polymorphisms in the rate of decline in lung function // Hum. Mol. Genet. -2002.- vol.11- p.569-576.

72. Kanazawa H., Asai K., Hirata K., Yoshikawa J. Possible effects of vascular endothelial growth factor in the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease // Am. J. Med. -2003.- vol.114- p.354-358.

73. Kanazawa H., Hirata К., Yoshikawa J.Imbalance between vascular endothelial growth factor and endostatin in emphysema // Eur. Respir. J. -2003.- vol.22-p.609-612.

74. Kanazawa H., Asai K., Nomura S. Vascular endothelial growth factor as a non-invasive marker of pulmonary vascular remodeling in patients with bronchitis-type of COPD \H Respir. Res. J. -2007.-vol.8- p.8-22.

75. Kang M.J., Oh Y.M., Lee J.C. et al. Lung matrix metalloproteinase-9 correlates with cigarette smoking and obstruction of airflow // J. Korean Med. Sci. -2003.- vol.18- p.821-827.

76. Kasahara Y., Tuder R.M., Taraseviciene-Stewart L. et al. Inhibition of VEGF receptors causes lung cell apoptosis and emphysema // J. Clin. Investig. -2000.- vol. 106- p. 1311 -1319.

77. Keatings V.M., Barnes P.J. Granulocyte activation markers in induced sputum: comparison between chronic obstructive pulmonary disease, asthma and normal subjects // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1997.-vol.155- p. 449-453.

78. King M.A., Stone J.A., Diaz P.T. et al. Alpha 1-antitrypsin deficiency: evaluation of bronchiectasis with CT // Radiology. -1996.- vol.199- p. 137141.

79. Kitabatake A., Inoue M., Asao M. et al. Noninvasive evaluation of pulmonary hepertension by a pulsed Doppler technicue. // Curculation. -1983.- vol.68(2)- p.302-309.

80. Kwon O.J., Au B.T., Collins P.D. et al. Tumor necrosis factor-induced interleukin 8 expression in cultured human epithelial cells // Am. J. Physiol. -1994.- vol.11-L398-L405.

81. Lacoste J.Y., Bousquet J., Chanez P. Eosinophilic and neutrophilic inflammation in asthma, chronic bronchitis and chronic obstructive pulmonary disease // J. Allergy Clin. Immunol. 1993.- vol. 92-p.537-548.

82. Langen R.C., Schols A.M., Kelders M.C. et al. Inflammatory cytokines inhibit myogenic differentiation through activation of nuclear factor-«В // FASEB J. -2001.- vol.15- p.l 169-1180.

83. Le-Barillec K., Si-Tahar M., Balloy V., Chignard M. Proteolysis of monocyte CD 14 by human leukocyte elastase inhibits lipopolysaccharide-mediated cell activation//J. Clin. Invest. -1999.-vol.103-p. 1039-1046.

84. Lieberman J., Winter В., Sastre A. Alpha 1-antitrypsin Pi-types in 965 COPD patients // Chest .-1986.- vol.89- p.370-373.

85. MacCallum Peter K. Markers of Hemostasis and Systemic Inflammation in Heart Disease and Atherosclerosis in Smokers // Proceedings of the ATS.-2005. vol. 2-p. 34-43.

86. Machler D.A., Rosiello R.A., Harver A., Lentine Т., Me Govern J.F. Comparison of clinical dyspnea ratings and psychophysical measurementson respiratory sensation in obstructive airway disease. // Am. Rev. Respir. Dis. -1987.-vol.135-p.1229-1233.

87. MacNee W., Rahman I. Is oxidative stress central to the pathogenesis of chronic obstructive pulmonary disease? // Trends Mol. Med. -2000.- vol.7-p. 43-62.

88. Meshi В., Vitalis T.Z.,. Ionescu D. et al. Emphysematous lung destruction by cigarette smoke // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -2002,-vol.26-p.52-57.

89. Minematsu N., Nakamura H., Tateno H. et al. Genetic polymorphism in matrix metalloproteinase-9 and pulmonary emphysema // Biochem. Biophys. Res. Commun. -2001.- vol.289- p. 116-119.

90. Mio Т., Romberger D.J., Thompson A.B. et al. Cigarette smoke induces interleukin-8 release from human bronchial epithelial cells // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1997.-vol.155-p. 1770-1776.

91. Morrison H.M., Welgus H.G., Stockley RA. et al. Inhibition of human leukocyte elastase bound to elastin: relative ineffectiveness and two mechanisms of inhibitory activity // Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. -1990.-vol.2- p.263-269.

92. Mukaida N. Pathophysiological roles of interleukin-8/CXCL8 in pulmonary diseases // Am. J. Physiol. -2003.- vol.284- L566-L577.

93. Mulgrew A.T., Taggart С. C., Lawless M.W. o.i-Antitrypsin Polymerizes in the Lung and Acts as a Neutrophil Chemoattractant // Chest. -2004.-vol. 125- p.1952-1957.

94. Munck-Petersen C., Christiansen B.S., Heickendorff L., Ingerslev I. Syntesis and secretion of alpha-2-macroglobulin by human hepaticytes in culture //Eur. J. Clin. Invest.-1988,- vol,18.-p.543-551.

95. Nadel J.A. Role of neutrophil elastase in hypersecretion during COPD exacerbations and proposed therapies // Chest -2000.- vol.117(2)-386S-389S.

96. Nagai M., Saigusa Т., Shimada Y. et al. Antibody to tumor necrosis factor reduces endotoxin fever // Experementia -1998.- vol.44- p.606-607.

97. Nakamura H., Yoshimura К., Jaffe H.A., Crystal R.G. Interleukin-8 gene expression in human bronchial epithelial cells // J. Biol. Chem. -1991.-vol.266- p.19611-19617.

98. Nakamura H., Yoshimura K., Jaffe H.A., Crystal R.G. Transcriptional regulation of interleukin-8 gene expression by tumor necrosis factor-x in bronchial epithelial cells //Am. Rev. Respir. Dis. -1991.- vol.143- A201.

99. Nocker R.E., Schoonbrood D.F., Van de Graaf E.A. et al. Interleukin-8 in airway inflammation in patients with asthma and chronic obstructive pulmonary disease // Int. Arch. Allergy Immunol. -1996.- vol.109- p. 183191.

100. Ohnishi K., Takagi M., Kurokawa Y. et al. Matrix metalloproteinase-mediated extracellular matrix protein degradation in human pulmonary emphysema// Lab. Investig. -1998.- vol.78- p. 1077-1087.

101. Owen C.A., Campbell M.A., Boukedes S.S., Campbell E.J. Cytokines regulate membrane-bound leukocyte elastase on neutrophils: a novel mechanism for effector activity // Am. J. Physiol. -1997.- vol.272- L385-L393.

102. Owen C.A., Hu Z., Barrick В., Shapiro S.D. Inducible expression of tissue inhibitor of metalloproteinases-resistant matrix metalloproteinase-9 on the cell surface of neutrophils // Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. -2003.-vol.29- p.283-294.

103. Pauwels R.A., Buist A.S., Calverley P.M. Global Strategy for the Diagnosis, Management and Prevention of Chronic Obstructive Pulmonary Disease. NHLBI/WHO GOLD // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2001.-vol.163.- 1256-1276.

104. Pinto-Plata V., Toso J., Lee K., Park D., Bilello J., Mullerova H., De Souza M. M., Vessey R., Celli B. Profiling serum biomarkers in patients with COPD: associations with clinical parameters // Thorax.-2007.-vol. 62(7).-p.595-601.

105. Pitsiou G., Kyriazis G., Hatzizisi O. et al. Tumor necrosis factor-n- serum levels, weight loss and tissue oxygenation in chronic obstructive pulmonary disease // Respir. Med. -2002.- vol.96- p.594-598.

106. Pons A.R, Sauleda J., Noguera A. Decreased macrophage release of TGF-B and TIMP-1 in chronic obstructive pulmonary disease // Eur. Respir. J.-2005.-vol.26- p.60-66.

107. Popa C., Netea M. G., van Riel P. L., van der Meer J. W., Stalenhoef A. F. 2007

108. Punturieri A., Filippov S.,' Allen E. et al. Regulation of elastinolytic cysteine proteinase activity in normal and cathepsin K-deficient human macrophages // J. Exp. Med. -2000.- vol.192- p.789-800.

109. Rennard S.I. Inflammation and repair processes in chronic obstructive pulmonary disease // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1999.- vol.160- S 1216.

110. Repine J.E., Bast A., Lankhorst I. Oxidative stress in chronic obstructive pulmonary disease. Oxidative Stress Study Group // Am. J. Respir. Crit. Care Med .-1997.- vol.156- p. 341-357.

111. Retamales 1., Elliott W.M., Meshi B. et al. Amplification of inflammation in emphysema and its association with latent adenoviral infection // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -2001.- vol.164- p.469-473.

112. Rice W.G., Weiss S.J. Regulation of proteolysis at the neutrophil-substrate interface by secretory leukoprotease inhibitor // Science -1990.-vol.249- p. 178-181.

113. Richter A., Yeager M.E., Zaiman A., Cool C.D., Voelkel N.F., Tuder R.M. Impaired transforming growth factor-B signaling in idiopathic pulmonary arterial hypertension // Am. J. Respir. Crit. Care Med.- 2004. vol. 170-p. 1340-1348.

114. Rodriguez-Roisin R., MacNee W. Pathophysiology of chronic obstructive pulmonary disease // Eur. Respir. Mono. -1998.- vol.3- p. 107-126.

115. Russell R.E, Thorley A., Culpitt S.V. et al. Alveolar macrophage-mediated elastolysis: roles of matrix metalloproteinases, cysteine and serine proteases // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. -2002.- vol.283: L8

116. Rutgers S.R., Timens W., Kaufmann H.F. et al Comparison of induced sputum with bronchial wash, bronchoalveolar lavage and bronchial biopsies in COPD // Eur. Respir. J.- 2000.-vol.l5-p.l09-l 15.

117. Rubio F., Cooley J., Accurso F., J Remold-O'Donnell E. Linkage of neutrophil serine proteases and decreased surfactant protein-A (SP-A) levels in inflammatory lung disease // Thorax -2004.- vol.59- p.318-323.

118. Sadallah, Hess C., Miot S., Spertini O. et al. Elastase and metalloproteinase activities regulate soluble complement receptorl release // Eur. J. Immunol .-1999.- vol.29- p.3754-3761.

119. Saetta M., Di Stefano A., Maestrelli P. et al. Airway eosinophilia in chronic bronchitis during exacerbations // Am. J. Respir. Cri.t Care Med. -1994.-vol.150- p.1646-1652.

120. Saunders W.B., Bayless K.J., Davis G.E. MMP-1 activation by serine proteases and MMP-10 induces human capillary tubular network collapse and regression in 3D collagen matrices // J. Cell. Sci. -2005.- vol.118( 10)-p.2325-2340.

121. Schulz C., Kratzel K., Wolf K., Schroll S. et al. Activation of bronchial epithelial cells in smokers without airway obstruction and patients with COPD // Chest. -2004.- vol.l25-p .1706-1713.

122. Selman M., Cisneros-Lira J., Gaxiola M. et al. Matrix metalloproteinases inhibition attenuates tobacco smoke-induced emphysema in guinea pigs // Chest -2003.- vol. 123- p. 1633-1641.

123. Senior R.M., Griffin G.L., Mecham R.P. Chemotactic activity of elastin-derived peptides // J. Clin. Invest. -1980.- vol.66- p.859-862.

124. Senn O., Russi E.W., Imboden M. alpha 1-Antitrypsin deficiency and lung disease: risk modification by occupational and environmental inhalants // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -2000.- vol. 161(1)- p.81-84.

125. Shapiro S.D., Senior R.M. Matrix metalloproteinases. Matrix degradation and more //Am. J. Respir. Cell .Mol. Biol. -1999.- vol.20- p.l 100-1102.

126. Shapiro S.D. The macrophage in chronic obstructive pulmonary disease // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1999.- vol.160: S29-S32.

127. Shapiro S.D. Elastolytic metalloproteinases prodused by human mononuclear phagocytes. Potential roles in destructive lung disease // Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1994.- voU50-S160-S164.

128. Shigeoka J.W., Hall W.J., Hyde R.W. The prevalence of alphar antitrypsinheterozygotes (PiMZ) in patients with obstructive pulmonary disease //Am. Rev. Respir. Dis.-1976.- vol.114- p. 1077-1084.

129. Smedly L.A., Tonnesen M.G., Sandhaus R.A. et al. Neutrophil-mediated injury to endothelial cells-enhancement by endotoxin and essential role of neutrophil elastase //J. Clin. Invest -1986,- vol.77- p.1233-1243.

130. Sommerhoff C.P., Nadel J.A., Basbaum C.B. et al. Neutrophil elastase and cathepsin G stimulate secretion from cultured bovine airway gland serous cells // J. Clin. Invest. -1990.- vol. 85-p.682-689.

131. Soler N., Ewig S., Torres A. et al. Airway inflammation and bronchial microbial patterns in patients with stable chronic obstructive pulmonary disease//Eur. Respir. J. -1999.- vol.14- p. 1015-1022.

132. Spruit M.A., Gosselink R., Troosters T. et al. Muscle force during an acute exacerbation in hospitalised patients with COPD and its relationship with CXCL8 and IGF-I // Thorax. -2003.- vol.58- p.752-756.

133. Stanescu D., Sanna A., Veriter C., Kostianev S. et al. Airways obstruction, chronic expectoration and rapid decline in FEV) in smokers are associated with increased levels of sputum neutrophils // Thorax -1996.-vol.51-p.267-271.

134. Strnadel J., Kverka M., Horak V., Vannucci L. Multiplex analysis of cytokines involved in tumour growth and spontaneous regression in a rat sarcoma model // Folia Biol. -2007.-vol.53(6)- p.216-219.

135. Taggart C., Cervantes-Laurean D., Kim G. Oxidation of either Methionine 351 or Methionine 358 in apAntitrypsin Causes Loss of Antineutrophil Elastase Activity // J. Biol. Chem. -2000.- vol.275(35)- p.27258-27265.

136. Takeyama K., Agusti C., Ueki I., Lausier J. et al. Neutrophil-dependent goblet cell degranulation: role of membrane-bound elastase and adhesion molecules //Am. J. Physiol. -1998,- vol.275- L294-L302.

137. Tanino M., Betsuyaku Т., Takeyabu K. et al Increased levels of interleukin-8 in BAL fluid from smokers susceptible to pulmonary emphysema// Thorax -2002.- vol.57- p.405-411.

138. The Alpha 1-Antitrypsin Deficiency Registry Study Group. Survival and FEV1 decline in individuals with severe deficiency of alpha 1-antitrypsin //Am. J. Respir. Crit. Care Med. -1998.- vol.158- p.49-59.

139. Tracey K.J., Fong Y., Hesse D.G. et al. Anti-cachectin/TNF monoclonal antibodies prevent septic shock during lethal bacteraemia // Nature -1987.-vol.330- p.662-666.

140. Traves S.L., Culpitt S., Russell R.K. et al. Elevated levels of the chemokines GRO-a and MCP-1 in sputum samples from COPD patients // Thorax -2002.- vol.57- p.590-595.

141. Turato G., Zuin R., Saetta M. Pathogenesis and pathology of COPD // Respiration -2001.- vol.68- p. 117-128.

142. Vandivier R.W., Fadok V.A., Hoffmann P.R. et al. Elastase-mediated phosphatidylserine receptor cleavage impairs apoptotic cell clearance in cystic fibrosis and bronchiectasis // J. Clin. Invest. -2002.- vol.109- p.661-670.

143. Van Eeden S.F., Sin D.D Chronic obstructive pulmonary disease: a chronic systemic inflammatory disease // Respiration-2008.- vol.75(2) p.224-238.

144. Vignola A.M., Chanez P., Chiappara G., et al. Transforming growth factor-beta expression in mucosal biopsies in asthma and chronic bronchitis // Am. J. Respir. Crit. Care Med.- 1997.-vol.156-p.591-599.

145. Wagner P.D. Vascular endothelial growth factor and the pathogenesis of emphysema. // Am. J. Med. -2003.- vol.114- p.413-414.

146. Wallace A.M., Sandford A.J. Genetic polymorphisms of matrix metalloproteinases: functional importance in the development of chronic obstructive pulmonary disease? // Am. J. Pharmacogenomics. -2002.- vol.2-p.167-175.

147. Warner R.L, Lewis C.S., Beltran L. et al. The role of Metalloelastase in Immune Complex-Induced Acute Lung Injury // Am. J. Path. -2001.-vol.158 p.2139-2144.

148. Woolhouse I.S., Bayley D.L., Stockley R.A. Sputum chemotactic activity in chronic obstructive pulmonary disease: effect of -antitrypsin deficiency and the role of leukotriene B4 and interleukin 8 // Thorax, -2002.-vol.57-p.709-714.

149. Yamamoto C., Yoneda Т., Yoshikawa M. et al. Airway inflammation in COPD assessed by sputum levels of interleukin-8 // Chest. -1997.- vol.112-p.505-510.

150. Zakrzewski J.T., Barnes N.C., Costello J.F. et al. Lipid mediators in cystic fibrosis and chronic obstructive pulmonary disease // Am. Rev. Respir. Dis. -1987.- vol.136- p.779-782.

151. Zhu Y., Liu X., Skold C.M. et al. Collaborative interactions between neutrophil elastase and metalloproteinases in extracellular matrix degradation in three- dimensional collagen gels // Respir Res. -2001.-vol.2(5)- p.300-305.

152. Zimmer M., Medcalf R. L., Fink T.M. et al. Three human elastase-like genes coordinately expressed in the myelomonocyte lineage are organized as a single genetic locus on 19pter // Proc. Natl. Acad. Sci. USA -1992.-vol. 89- p.8215-8219.

153. Yamada E., Tobe Т., Yamada H., Okamoto N., Zack D.J., Werb Z., Soloway P.D., Campochiaro P.A. TIMP-1 promotes VEGF-induced neovascularization in the retina // Histol. Histopathol. -2001.-vol. 16(1)-p.87-97.

154. Yoshioka A., Betsuyaku Т., Nishimura K., Miyamoto T. Kondo, Kawakami Y. Excessive neutrophil elastase in bronchoalveolar lavage fluid in subclinical emphysema // Am. J. Respir. Crit. Care Med.-1995.-vol.152,-p. 2127-2132.

155. Yu Q., Stamenkovic I. Cell surface-localized matrix metalloproteinase-9 proteolytically activates TGF-(3 and promotes tumor invasion and angiogenesis // Genes. Dev. -2000.- vol.14- p. 163-176.