Синтез производных авермектина, ацилированных вицинальными дикарбоновыми и холеновыми кислотами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат наук Кулешова, Евгения Сергеевна

• Кулешова, Евгения Сергеевна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Кулешова, Евгения Сергеевна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Эпимеризация авермектина

1.2 Методы синтеза авермектина

1.3 Методы деградации молекулы авермектина

1.4 Получение 4 и 4а-производных авермектина

1.5 Получение 4"-производных авермектина

1.6 Получение оксо-соединений авермектина

1.7 Получение различных алкилпроизводных авермектина

2 ХИМИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ

2.1 Разделение метальной и этильной компонент авермектина ВЭЖХ

2.2 Ацилирование авермектина по 5-гидроксильной группе ангидридами дикарбоновых кислот

2.3 Силилирование авермектина по 5-гидроксильной группе

2.4 Ацилирование силильного производного авермектина по 4"-гидроксильной группе ангидридами дикарбоновых кислот

1.5 Ацилирование авермектина ангидридами холеновых кислот

1.6 Ацилирование авермектина по 4"—гидроксильной группе ангидридами холеновых кислот

3 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1 Исходные соединения

3.2 Применяемые методы анализа

3.3 Методики синтеза соединений

3.3.1 Ацилирование авермектина малеиновым ангидридом

3.3.2 Ацилирование авермектина ангидридом циклогексан-1,2-дикарбоновой кислоты

3.3.3 Ацилирование авермектина ангидридом 5-фенилбицикло[2.2.1 ]гептан-2,3-дикарбоновой кислоты

9

3.3.4 Ацилирование авермектина ангидридомтрицикло[3.2.2.0*" ]нон-8-ен-6,7-дикарбоновой кислоты

3.3.5 Ацилирование авермектина ангидридом циклогекс-4-ен-1,2-дикарбоновой кислоты

3.3.6 Ацилирование авермектина ангидридом бензол-1,2-дикарбоновой кислоты

3.3.7 Ацилирование авермектина ангидридом бицикло[2.2.1 ]гепт-5-ен-2,3-дикарбоновой кислоты

3.3.8 Ацилирование авермектина ангидридом 4,5-дибромбицикло[2.2.1] гексан-2,3-дикарбоновой кислоты

3.3.9 Ацилирование авермектина ангидридом 3,4,5,6-тетрахлорбензол-1,2-дикарбоновой кислоты

3.3.10 Силилирование 5-ОН группы авермектина трет-

бутилдиметилсилилхло ридом

3.3.11 Удаление силильной защиты

3.3.12 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом малеиновой к-ты

3.3.13 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом циклогексан-1,2-дикарбоновой к-ты

3.3.14 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом 5-фенилбицикло[2.2.1]гептан-2,3-дикарбоновой кислоты

3.3.15 Ацилирование авермектина ангидридом трицикло[3.2.2.0"' ]нон-8-ен-6,7-дикарбоновой кислоты

3.3.16 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом циклогексен-1,2-дикарбоновой кислоты

3.3.17 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом бензол-1,2-дикарбоновой кислоты

3.3.18 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2,3-дикарбоновой кислоты

3.3.19 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом 3,4,5,6-тетрахлорбензол-1,2-дикарбоновой кислоты

3.3.20 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом 4,5-дибромбицикло[2.2.1 ]гексан-2,3-дикарбоновой кислоты

3.3.21 Синтез ангидрида Д5-3(3-ацетоксихоленовой кислоты

3.3.22 Синтез ангидрида Д4-3-кето-холеновой кислоты

3.3.23 Синтез ангидрида дегидрохоленовой кислоты

3.3.24 Ацилирование авермектина ангидридом Д5-ЗР-ацетоксихоленовой кислоты

3.3.25 Окисление по Оппенауэру холеновой кислоты

3.3.26 Ацилирование авермектина ангидридом Д4-3-кето-холеновой кислоты

3.3.27 Ацилирование авермектина ангидридом дегидрохоленовой кислоты

3.3.28 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом Д5-ЗР-ацетоксихоленовой кислоты

3.3.29 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом дегидрохоленовой кислоты

3.3.30 Ацилирование силильного производного авермектина ангидридом Д4-3-кето-холеновой кислоты

3.3.31 Методика разделения метальной и этильной компонентов авермектина методом ВЭЖХ

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

104

105

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез производных авермектина, ацилированных вицинальными дикарбоновыми и холеновыми кислотами»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Основным методом борьбы с паразитарными болезнями животных является химиотерапия. Препараты на основе авермектинов, главным образом ивермектина, впервые появились на рынке более 25 лет назад. Они обладают высокой эффективностью, широким спектром действия (инсектицидная, акарицидная и нематоцидная активность), относительно низкой токсичностью для млекопитающих и хорошими экологическими свойствами. Одной из главных задач при использовании препаратов этого поколения было преодоление устойчивости паразитов к препаратам предыдущего поколения. Таким образом, при выборе направления, позволяющего получить перспективные противопаразитарные соединения, очевидным лидером являлись производные авермектина, новые модификации которого дадут возможность преодолеть резистентность к старым, привычным для паразитов лекарственным веществам. Противопаразитарной активностью обладают все индивидуальные авермектины, но сильнее всего она выражена у авермектина В]. Именно этот наиболее активный компонент представлялось целесообразным использовать в качестве исходного объекта для разработки перспективных препаратов. Следует также учесть, что в настоящее время авермектин В1 является легкодоступным относительно недорогим веществом и его модификация является одним из путей «малобюджетного» решения проблемы получения нового поколения эффективных противопаразитарных лекарственных средств. В молекуле авермектина В] имеется несколько реакционных центров, позволяющих проводить модификацию. Прежде всего, это гидроксильные группы в положениях 5, 4", три двойных связей в различных положениях цикла, а также двойных связи в положениях 4 и 22 боковых циклах. Наличие таких высокореакционных фрагментов позволяет использовать для модификации целый ряд химических превращений и выбрать из них направление, ранее не исследованное. В свою очередь, использование новых производных дает возможность получить

неизвестный ранее (и, следовательно, не использованный в качестве лекарственных препаратов) ряд производных авермектина В]. Синтез таких веществ позволяет предположить, что противопаразитарные препараты на их основе будут проявлять высокую активность при отсутствии резистентности и обеспечат высокую эффективность при практическом применении.

Настоящее исследование выполнено в соответствии с тематическим планом ЯГТУ, проводимым по заданию Федерального агентства по образованию РФ по темам: «Разработка методов синтеза ароматических, карбо- и гетероциклических полифункциональных органических соединений для получения композиционных материалов с использованием нанотехнологий» на 2008-2012 гг. (№ 0120.0 852836), «Разработка инновационных методов получения полифункциональных соединенений - биологически активных веществ, мономеров и высокомолекулярных соединений» на 2013 г. (№ 3.8513.2013), а также программой стратегического развития ФГБОУВПО «ЯГТУ» по теме «Материалы с новыми свойствами» 2012-2016 гг. (№ 0120 1275353).

Цель работы. Разработка методов синтеза новых 5-0 и 4"-0-производных авермектина, представляющих интерес в качестве противопаразитарных средств. Для достижения этой цели необходимо решить следующие задачи:

- синтезировать новые производные авермектина, ацилированные по 5- и 4"-положению гидроксильных групп ангидридами вицинальных дикарбоновых кислот;

- исследовать реакцию ангидридизации стероидных структур;

- синтезировать новые производные авермектина, ацилированные по 5- и 4"-положению гидроксильных групп ангидридами холеновых кислот;

- определить биологическую активность синтезированных соединений.

Научная новизна. Получены и идентифицированы новые

карбоксилсодержащие 5-0- и 4"-Оацилпроизводные авермектина -потенциальные противопаразитарные препараты. Разработан метод синтеза новых ангидридов холеновых кислот. С использованием

А^А^-дициклогексилкарбодиимида в сухом хлористом метилене впервые были получены ангидриды Д5-Зр-ацетоксихоленовой, Д4-3-кетохоленовой и дегидрохоленовой кислот. Получены и идентифицированы новые производные авермектина, содержащие стероидный фрагмент.

Практическая значимость работы. Разработаны методы синтеза новых соединений на основе авермектина, являющихся, в соответствии с проведенными исследованиями, перспективными биологически активными веществами для создания противопаразитарных препаратов. Получены индивидуальные метальная и этильная компоненты авермектина. Установлено, что противопаразитарная активность метильного и этильного авермектина производных одинаковы.

Положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Ацилирование авермектина ангидридами дикарбоновых кислот по 5-положению гидроксильной группы.

2. Ацилирование авермектина ангидридами дикарбоновых кислот по 4"-положению гидроксильной группы.

3. Синтез ангидридов Д5-3|3-ацетоксихоленовой, А4-3-кетохоленовой и дегидрохоленовой кислот путем ангидридизации соответствующих холеновых кислот под действием А^А^-дициклогексилкарбодиимида.

4. Метод получения новых производных авермектина, содержащих стероидный фрагмент.

Апробация работы. Основные результаты исследования докладывались на XIV молодежной конференции по органической химии, (Екатеринбург, 2011); XIX Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Волгоград, 2011); V молодежной конференции ИОХ РАН (Москва, 2012); VI всероссийской конференции молодых ученых, аспирантов и студентов с международным участием по органической химии (Санкт- Петербург, 2012); Международной междисциплинарной научной конференции «Биологически активные вещества и материалы: фундаментальные и прикладные вопросы получения и применения»

(Новый Свет, Крым, Украина, 2013); 65 и 66 всероссийских научно-технических конференциях студентов, аспирантов и магистрантов высших учебных заведений с международным участием (Ярославль, 2012, 2013); Всероссийской молодежной научной конференции «Актуальные проблемы органической химии» (Новосибирск, 2012); XVI Молодежной школе-конференции по органической химии (Пятигорск, 2013).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 3 статьи из списка журналов, рекомендованных ВАК, и 8 тезисов докладов конференций различных уровней, получен один патент РФ.

Личный вклад автора состоит в постановке задач, непосредственном участии во всех этапах работы, планировании и проведении экспериментальных исследований, обработке и интерпретации аналитических данных, обобщении и обсуждении полученных результатов, формулировании выводов, подготовке основных публикаций по диссертационной работе.

Структура работы. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, химической и экспериментальной частей, выводов, списка использованной литературы. Работа изложена на 120 страницах, содержит 3 таблицы, 28 рисунков. Список литературы включает 99 источников.

Автор выражает глубокую благодарность д-ру хим. наук И.В. Заварзину, канд. хим. наук Е.И Чернобуровой и канд. хим. наук М.Х. Джафарову за помощь и поддержку при выполнении данной работы.

1. ЛИТЕР АТУРНЫЙ ОБЗОР

В данной части работы рассмотрены известные пути химического синтеза авермектина и его производных, методы эпимеризации и деструкции молекулы авермектина.

Авермектин Bi (1) (рисунок 1.1) является двухкомпонентной смесью. Основной компонент (В1а, > 80%) содержит втор-бутильную группу у С25 атома углерода; вспомогательный компонент (В]Ь, < 20%) содержит изопропильную группу.

Авермектины - продукт ферментации почвенных стрептомицетов — почвенных актиномицетов $1гер1отусез ауегтШИБ. Впервые авермектины были выделены и идентифицированы в 1976 г. в Японии при проведении оценки антигельминтного потенциала образцов почвы. В процессе исследований было обнаружено, что авермектины имеют высокую активность и широкий спектр противопаразитарного действия. Культура 8&ер1отусез ауегтШШ продуцирует четыре основные формы авермектинов - Аь А2, Вь В2, которые отличаются алкильными радикалами. В свою очередь, каждый компонент имеет 2 формы

но

R = С , Н с огСН

Рисунок 1.1 - Авермектин В

изомеров: а и в. Комплекс, содержащий 8 авермектинов получил название -Аверсектин. Противопаразитарной активностью обладают все индивидуальные авермектины, но сильнее всего она выражена у авермектина В]. Одним из направлений в научной работе с авермектинами стала селекционная работа с Эи'ерЮтусея ауегтШИя и получение новых штаммов продуцента. Второе направление - получение синтетических авермектинов и их химическая модификация с целью снизить токсичность для теплокровных.

В настоящее время авермектины, продукты жизнедеятельности ахегтШИя, признаны самым эффективным средством борьбы с эндо- и эктопаразитами растений, животных и человека. Авермектины принадлежат к классу 16-членных макролидов, которые в положении атома С]3 имеют дисахарид,

состоящий из ¿-олеандрозы (2,6-дидезокси-3-0-метил-£-арабиногексозы). Культура продуцента синтезирует комплекс из восьми авермектинов. Структурная новизна авермектинов и их практическое значение, привлекли большое внимание исследовательских групп, занимающихся химической модификацией и «полным» синтезом авермектина [1].

1.1 Эпимеризация авермектина

Небольшие изменения, такие, как эпимеризация на атоме С13 [2], также эпимеризация на С2-С19-атомах [3] или перемещение С3-С| двойной связи в сопряженнее карбонильной группой, приводили к частичной или полной потере биологической активности авермектина [4]. Силилирование авермектина В] агликона приводило к силильному эфиру [2], он был преобразован в 13-эт*-аналог путем тозилирования, последующее замещение 13-О-тозилата с участием иодида калия в Л^ТУ-диметилформамиде (БМР) приводило к 13-Р-иодо-производному. С помощью серебряно-катализируемого сольволиза был получен 13-эш/-агликон авермектина (схема 1.1).

Схема 1.1

Гликозилирование агликона дисахаридом и последующее снятие защиты привело к 13-эяи-авермектину и 1'-Р-эпимеру (схема 1.2).

ОМе

НО 15 %

Схема 1.2

Другой путь получения 13-э/ш-агликона авермектина представлен в работе [5]. Авермектин агликон с защитными группами в 5 положении и свободной гидроксильной группой в положении 13 обрабатывали о-нитробензолсульфанилхлоридом в присутствии МД-диизопропиламина или

триэтиламина и тетрабутиламмонийиодидом. Полученный 13Р-иодо-13-дезокси-5-0-т/>ет-бутилдиметилсилил-22,23-дигидроавермектин-агликон растворяли в водном 2,6-лутидине и после выделения реакционной смеси в воду и фильтрования осадка получали 13р-5-0-т/?ет-бутилдиметилсилил-авермектин-агликон с выходом 97 %. Из данного продукта взаимодействием с хлорметилметиловым эфиром и снятием защиты получали 13Р-0-метоксиметил-22,23-дигидро-авермектин-агликон. Остальные производные, полученные на основе 13-эш^-авермектина, были описаны в патенте [6].

Отметим, что при эпимеризации 2, 17, 19 положения Р-Н в а-Н наибольший выход (96 %) был получен при использовании триэтиламина, 4-диметиламинопиридина (DMAP) или диазабициклоундецена (DBU) в СН2С12 при комнатной температуре в течение 24 ч [7-10].

В статье [11] авторы указывают два метода для получения желаемого 19-эии-авермектина из авермектина Bia. В первом случае, после силилирования вторичных гидроксильных групп, проводили гидролиз гидроксидом калия в водном метаноле в течение 26 часов с получением кислоты. Как и ожидалось, при гидролизе сложного эфира происходил сдвиг 3,4-двойной связи в 2,3-положение молекулы авермектина. Делактонизация в условиях реакции Мицунобу (трифенилфосфин (PPh3), диэтилазадикарбоксилат (DEAD), тетрагидрофуран (THF), 55 °С, 14 часов) гладко приводило к желаемому макролактону с инверсией на С19-атоме. Второй путь получения 19-эяи-авермектина представлен на схеме 1.3.

i

КОН/М сон

71% J

R - 4"-0-TBDM S-disaccharide

Схема 1.3

Для сдвига 2,3-двойной связи в 3,4-положение молекулы авермектина с сохранением конфигурации на С2-атоме, предварительно защищали 7-ОН группу уУ,/У-бис(триметилсшшл)трифторацетамидом (BSTFA). Реакцию проводили в THF с литий диизопропиламидом (LDA) при -78 °С, после обработки пивалиновой кислотой и снятия защиты был получен 19-эии-авермектин.

После исследования влияния ряда реагентов и растворителей, авторы работы [12] обнаружили, что имидазол в среде бензола является наиболее эффективным реагентом для частичной эпимеризации А -4 (Я)-авермектина В1а в авермектин В1а Исходный А -авермектин В1а был получен из 4',5-ди-[0-(диметил-трет - бутиле илил )] авср м ектииа В1а при обработке DBU в дихлорметане с выходом 93 %. Далее проводили деконъюгацию в 2-эим-авермектин В1а, при смешивании растворов н-бутиллития в гексане и диизопропиламшга в THF, а затем частичную эпимеризацию продукта в присутствии имидазола в среде бензола.

В работе [13] исследовали эпимеризацию молекулы авермектина в различных основных условиях реакции. При обработке А -авермектина ЗАс при -78 °С ди(триметилсилил)амидом лития/триметилсилилхлоридом (LiN(TMS)/ TMSCI) в THF или LDA/TMSCI в THF или LDA/TMSCI/ гексаметилфосфортриамидом (НМРА) в THF получали исходное вещество ЗАс (схема 1.4).

Схема 1.4

Однако было отмечено, что при небольшом изменении триметилсилилирующего агента в данном синтезе и аналогичной обработке уже получались продукты 2Ас (64 %) + ЗАс (30 %), а также смесь 2АЬ или ЗАЬ в различных соотношениях. Если охлажденную реакционную смесь LDA/TMSCI/HMPA/THF выливали в раствор уксусной кислоты комнатной температуры, то образовывалась смесь 2Ас + 4АЬ. Было отмечено, что изомеры, полученные путем эпимеризации соединения 2 и конъюгации соединения 3, а также ароматический продукт 4 обладали пониженной биологической активностью, по сравнению с исходным авермектином. Основно-катализируемое

2 3

образование 2-эпимеров и А ' -изомеров авермектина также было сообщено в статьях [14, 15].

1.2 Методы синтеза авермектина

В обзоре [16] рассматривался новый способ получения авермектина В1 из менее биологически-активного авермектина В2, отличающийся одной гидроксильной группой на С23-атоме (схема 1.5). Данный синтез включал в себя селективное силилирование гидроксильных групп при атомах С4> и С5, обработку группы С23-ОН мезилхлоридом (МзС1) и последующее региоселективное элиминирование промежуточного продукта тетра-и-бутиламмонийоксалатом с получением С22-С23-двойной связи. Данный способ являлся более легким и эффективным, чем сообщалось ранее [17], в связи с простотой и использованием недорогих и менее токсичных реагентов.

ОМе

11,0

Ме' "О' О

Ме" "О" О Ме

ОМе

ОМе

Я -К.-Я.-ТВОМБ

ОН

a) МбС1, рупёте, 20 °С, 7 ч, 81 %

b) 1) (п-Ви4>Г)2(С02')2, 1;-ВиОН, 20 °С, 15 ч 2) (Ш)„ Ру, МеСЪГ, 20 °С, 14 ч, 69 %

Схема 1.5

В статье [18] рассмотрены методы синтеза, в которых Л2-4 (Я)-авермектин

л

В]а, превращался в два этапа в авермектин В1а. Исходный А -авермектин В^, был получен из 4',5-ди-[0-(диметил-шрет-бутилсилил)] авермектина В1а при обработкеБВи в дихлорметане с выходом 93 %. Далее проводили деконъюгацию в 2- эим-авермектин В[а, при смешивании растворов »-бутиллития в гексане и диизопропиламина в ТИБ, а затем частичную эпимеризацию продукта в присутствии имидазола в среде бензола.

В статье [19] был показан стереоселективный синтез авермектина, меченного радиоактивным изотопом по С2з-атому. Двенадцатистадийный синтез включал в себя стереоселективную альдольную конденсацию, химическую деградацию молекулы авермектина в альдегид (промежуточное соединение). Конденсацию Виттига энантиомерно чистой меченой соли трифосфония с защищенной молекулой авермектина в метаноле и последующую спирокетализацию с восстановлением диоксоспирановой конфигурации, подобной в природном авермектине, проводили согласно схеме 1.6.

О Т В О М Б

ОН

Схема 1.6

Синтез агликона авермектина В! (2) (рисунок 1.2) был представлен в статье [20]. Авторы получали отдельные сегменты авермектина В[ спирокеталь (А) и оксагидринден (гексагидробензофуран) (В), с последующим связыванием с третьей субъединицей (С) и полным закрытием цикла с образованием макролида

(О-

с

яо

Ме

В

ОН

А

К-Ь-олеандрозил-Ь-олеандроза

Я-Н

Рисунок 1.2 - Синтез агликона авермектина В] по сегментам

Полный синтез авермектина был рассмотрен в статьях [21, 22]. Изначально также получали агликон из трех субъединиц, состоящих из фрагмента гексагидробензофурана (А), спирокеталя - сегмент (В), а также ациклической части (С), включающей атомы С9-С15. Каждый из сегментов синтезировали отдельно и затем соединяли. Присоединение осуществляли в последовательности В+С —> (В - С) + А, и полный синтез завершали путем присоединения к агликону дисахарида Ь-олеандрозил-Ь- олеандрозы.

Также 16-стадийный синтез единичного фрагмента спирокеталя молекулы авермектина В1 описан в статье [23]. В другой работе [24] синтезировали олигосахариды из тиофенилсахаров через гликозилфториды, которые затем использовали для синтеза авермектина В 1а.

В работе [25] сообщается о первом синтезе (+)-авермектина В1а. Его получение основано на стереоспецифическом полном синтезе "северного" С ц-С28 сегмента молекулы авермектина, полученного из (^-яблочной кислоты и Ь-изолейцина и последующим соединением с функционализированным "южным" сегментом, макролактонизации, стереоконтролируемого гликозилирования.

Важным фактором при планировании синтеза авермектина является наличие необходимых единиц дисахаридов. Данишевский с сотрудниками [26] решили эту проблему, разработав полный синтез олеандрозил-олеандрозы (10

стадий из ацетальдегида до гликаля - аналога 2-4"-ацетата). Другой полный синтез производных дисахаров был описан Николау [27], Вате [28] и Барретом [29]. Альтернативный метод состоял в получении олеандрозил-олеандрозы путем химической деструкции природного авермектина [30]. В другой работе [31] для получения желаемого дисахарида авторы предлагали двухстадийную деструкцию авермектина, используя озон, метилсульфид и далее ЭВи (схема 1.7).

Авермектин является одним из нескольких натуральных продуктов, который получают с помощью итерационного гликозилирования, то есть посредством образования связи с олигосахаридами. В работе [32] присоединение различных остатков Сахаров, катализируемое олеандрозил-дисахаридами, происходило тандемно без полного биохимического синтеза авермектина. Это исследование значительно расширило набор известных Б-сахаров нуклеотидных субстратов и обеспечило быстрый одностадийный синтез для создания 50 различных гликозилированных авермектинов.

ОМе

ТВЭМ

ОТВОМБ

Схема 1.7

1.3 Методы деградации молекулы авермектина

Помимо введения в структуру авермектина различных функциональных групп, ряд авторов [33, 34] также проводили и его деструкцию, чтобы получить соответствующие функциональные сегменты. Последние могут быть использованы для подтверждения структуры промежуточных соединений, а также в качестве прекурсоров гибридных или полусинтетических аналогов (схема 1.8).

Авермектин в а

Я О .

Ме1"

!) КОН ац , ОМЕ

2)

ОН

К = дисахарид

ОН О Я1

Ш-ВиМе Б! дисахарид

ОН

Ви М е, Б1

О Я'

Схема 1.8

В статье [35] рассмотрена деструкция авермектина с помощью БВи в метаноле с получением нескольких продуктов, основным из которых был дельта-2,3-секо-метиловый эфир кислоты, который может быть использован, как исходный материал для синтеза аналогов авермектина. При выборе в качестве растворителя диэтиламин был получен единственный продукт (выход 90 %) дельта-2,3-изомер авермектина В! (схема 1.9).

О Me

Схема 1.9

В работе [36] были рассмотрены несколько возможных путей деградации авермектинов, в том числе кислотно-катализируемое сольволитическое замещение группы олеандрозы, что приводило к моносахариду и агликону, а также присоединение молекулы растворителя к 22-23 двойной связи авермектина. При гидролизе авермектина в водном THF, содержащем 10 % концентрированной H2S04, получалась смесь моносахаридов 5 и 6 агликона (рисунок 1.3), из которой чистые агликоны были выделены только с помощью колоночной хроматографии. При применении кислотно-катализируемого метанолиза чистый агликон 6 также не был получен. Замена метанола на 2-пропанол привела к селективному расщеплению только олеандрозил-олеандрозы связи и получению моносахарида 7 с хорошим выходом.

Рисунок 1.3 - Продукты гидролиза авермектина в водном THF

1.4 Получение 4 и 4а-производных авермектина

В статье [37] авторы предложили способ окисления метальной С4а- группы оксидом селена и трет-бутилгидропероксидом (схема 1.10).

О Ме

Схема 1.10

Из полученного 4а-гидроксипроизводного авермектина получали другие продукты (рисунок 1.4), замещенные по 4а-положению авермектина [38].

ОМе

где Н, СН3СО, С6Н5СО, СзОДСО, С41ЧН5СО, СО(СН2)пСООН или -СО(СН2)пСООМ; п = 2-4; М - катион щелочного металла или аммония Рисунок 1.4 - Продукты, полученные из 4а авермектина В]

Авторы статьи [39] изначально ориентировались на сохранение одного С4-заместителя (например, эии-ацетиламино группы) варьируя при этом разнообразные группы на атоме С4а. Окисление метальной группы проводили, как указано выше, с получением 4а-гидрокси-авермектина, из которого несколькими путями получали соответствующие С4а-эфиры (схема 1.11) и (схема 1.12).

А а) ТВБСП, ¡тк1аго1е, ВМР, 20 °С; Ь) НР/руг, ТНР, 20 °С. с) ВБТРА, Н, О

Схема 1.11

''н D TBSCI, DMAP,

2) PhOCH COCI, pyr,

O TUS

TsOH, MeOH

77%

1) D H P, PPTs

2) NaOMe, MeOH

5 2%

OPh

Схема 1.12

В статье [40] рассматривали взаимодействие бромэтилсилильного эфира авермектина в присутствии трибутилхлорида олова (я-Ви38пС1), азодиизобутиронитрила (А1В]Ч) и цианоборогидрида натрия (ТЧаСМЗН3), и последующая обработка продукта перекисью водорода (окисление по Тамао). Авторы отмечали получение неожиданного продукта реакции - 17-членного циклического лактона 9, полученного с большим выходом (46 %), чем ожидаемый 16-членный лактон 8 (менее 5 %), и связывали это с тем, что происходила внутримолекулярная перегруппировка циклогексильного радикала в более устойчивый циклопентилметильный радикал (схема 1.13).

ОМе

О Ме

НО ,

ОМе

Ме О О

Мс О О

НО

И I ОМе

Ме*" "О 'О

Ме О О

,Ме 1) \aCNBHj

Ме пВ и3 Б пС 1 (еаО Н А1ВК 1ВиОН

2) КБ, Н202 КНС03 ТНР/МеОН П

ОМе

НО

ОМе

Мс О О

Ме О

О £ Н »

ОН

Схема 1.13

Первичный спирт (гидроксигруппа в положении 4а авермектина), продукт окисления авермектина диоксидом селена, после проведения защиты был восстановлен с получением аллильного спирта [41]. Для эндо-экзо-перегруппировки двойной связи (продукт 11 в 12) использовали ./У-(фенилселено)-фталимид и три-трет-бутилфосфат в хлористом метилене (схема 1.14).

Ме

Х-Н ОН О Т В Б ЬеРЬ Я-Н ОН МОМ ТВОРв

омом

1ю$о

, Ме

,Мс

'н

О Ас I он \С Н,0 Ас

омом

ОБ- дисахарид

Схема 1.14

Перегруппировка селеноксида в пиридине в присутствии перекиси водорода приводила к единственному изомеру 13. Примечательно, что оба синтеза (11 в 12 в 13) могут быть осуществлены в одну стадию с выходом более 90 %. Сульфонилирование продукта 14 и последующий бромонолиз гладко приводил к продукту 15 (схема 1.15).

RDSO ...

Me

ОМОМ

OCOCHOPh

Х-С11,ОАс, СН2ОН,СООН R2 = Ac R3= Н, ЕЕ

DS дисахарид

РА- феноксиацетил

Схема 1.15

В статье [42] авторы получали С4-экзометилен изомер авермектина В]а с выходом 93 %, используя обработку гидридом трет-бутиллития и AIBN в бензоле при 80 °С (схема 1.16).

он

ОБ- дисахарид

РЛС1/П С

М АР I 17 И

н2С12

-в

О Я' -ТВв, 1Г=Н

ОРА

N Р БР/пВ и Р

Я = Т В Б, Я'-РА

19 Х = ОН ►20 Х-БеРЬ

,= 1) пВи^пН/А^Ы 93% (2 ¡ирз) 2) N Н3/М еО Н 80%

ОН

Схема 1.16

Полученный авермектин В1а-Д ' проявил аналогичную антипаразитарную активность в сравнении с авермектином В^ и ивермектином против желудочно-кишечных гельминт.

Наиболее серьезными проблемами перед любым синтезом этих молекул являются контроль конфигурации и подавление подвижности С2-стереоцентра.

Производные авермектина, модифицированные по 3 и 4 положению, описаны в патенте [43]. З-Гидрокси- и 4-оксо-, эпокси- и гидрокси-(гидроксиметил-)-производные получали из природного авермектина путем экзоциклического смещения 3,4-двойной связи в 4,4а-положение и образованием 3-гидроксигруппы. 4а-метильную группу замещали на фенилселеногруппу используя 1Ч-(фенилселено)фталимид. Соединение 23 далее обрабатывали пероксидом водорода в пиридине с получением стереоизомерной пары 23Аи 23В (рисунок 1.5).

а4 Я4 ОН

26 25 24

Рисунок 1.5 - Производные авермектина, модифицированные по 3 и 4

положениям

Далее в реакции с тетраоксидом осмия использовали только Зр-гидрокси соединение 23В, поскольку За-стереохимия продукта 23А препятствовала правильному образованию продукта 24. Тригидроксисоединение24 обрабатывали ацетатом свинца в бензоле при 40-50 °Си получали 4-оксосоединение 25, которое преобразовывалось в продукт 26 в присутствии диметилсульфоксида (0М80). При воздействии на него 3-метил-1,3-бензотиазола-2-селона 26 соединение легко переходило в 23В.

1.5 Получение 4"-производных авермектина

Для синтеза 4"-0-ацетилпроизводных авермектина авторы сначала силилировали 5 гидроксильную группу объемным заместителем -третбутилдиметилсилил хлоридом. Ацетилирование уксусным ангидридом в пиридине [44] привело к 4"-<3-ацетил-авермектину В1а. Тест против желудочно-кишечных нематод у овец показал высокую активность 4"-0-ацетатов. В то же время было отмечено, что 5-<9-производные авермектина обладали меньшей противопаразитарной активностью, чем исходные соединения. Авторы расширили спектр 4"-0-производных авермектина [45]. Хотя 4"-гидроксильная

группа легко реагировала с ангидридом уксусной кислоты и хлорангидридом в основных условиях, но она не вступала в реакцию с янтарным ангидридом или изоцианатом калия, для этого использовали катализаторы 4-ОМАР или триизопропиламин. Из 5-0-(третбутилдиметилсилштхлорида)-авермектина и

оксокарбонилпроизводное, подходящее для промежуточного синтеза карбаматов. Использование 4-БМАР и 1Ч,1Ч-дициклогексилкарбодиимида (БСС) в метиленхлориде непосредственно в реакции с А^-ацетилглицином после удаления силильной защиты привело к ацетиламинопроизводному. Все полученные 4"-О-производные указаны ниже (рисунок 1.6).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Кулешова, Евгения Сергеевна, 2014 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авермектины [Электронный ресурс] - Режим доступа http://dimetrius.com.ua/site/all/avermectini

2. Blizzard, Т.А. Synthesis and Biological Activity of 13-epi-Avermectins: Potent Anthelmintic Agents with an Increased Margin of Safety [Текст] / G.M. Margiatto, H. Mrozik, W.L. Shoop, R.A. Frankshun, M.H. Fisher // J. Med. Chem. - 1992. - № 35. -P. 3873-3878

3. Hanessian, S. Synthesis of 19- epi- avermectinBl from avermectin Bla [Текст] / P. Chemla // Tetrahedron Lett. - 1991. - Vol. 32, № 24. - P. 2719-2722

4. Campbell, W.C. Ivermectin: a potent new antiparasitic agent [Текст] / M.H. Fisher, E.O. Stapely, G. Albers-Schotberg, T.A. Jacob // Science. - 1983. - № 221(4613). - P. 823-828

5. 13|3-0-methoxymethyl-22,23-dihydro avermectin В1 A/BIB aglycone / B.O. Linn, H. Mrozik. It is published 10.03.93 // Пат. 0530901(A1) Европа - 13 P. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

6. 13-epi-avermectin derivatives useful as antiparasitic agents / T.A. Blizzard, H. Mrozik. It is published US 08.10.91 // Пат. 5055454 (А) США - 14 p. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

7. Blizzard, T.A. Chemical degradation of avermectin B1 [Текст] / H. Mrozik, M.H. Fisher// Tetrahedron Lett. - 1988. - Vol. 29, № 26. - P. 3163 - 3166

8. Stong, J.D. Radical-induced oxidation of oxahydrindene (hexahydrobenzofiiran) portion of 22,23-dihydroavermectin bla: Identification of autooxidation products [Текст] / J.V. Pivnichny, H. Mrozik, F.S. Waksmunski // J. Pharm. Sci. - 1992. - Vol. 81, № 10. - P. 1000- 1003

9. Blizzard, T.A. Synthesis, reactivity, and bioactivity of avermectin В1-3,4-oxide [Текст] / H. Mrozik, F.A. Preiser, M.H. Fisher // Tetrahedron Lett. - 1990. - Vol. 31, № 35. - P. 4965 - 4968

10. Kenichiro, N. Synthesis and biological activities of novel 4"-alkylidene avermectin derivatives [Текст] / S. Toshiaki, S. Kazuro, H. Achim, A Turberg, O. Satoshi // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2003. - Vol. 13, № 22. - P. 3943 - 3946

11. Blizzard, T.A. Conversion of avermectin B1 to 19-epi-avermectin B1 [Текст] / L. Bostrom, G. Margiatto, H. Mrozik, M.H. Fisher // Tetrahedron Lett. - 1991. - Vol. 32, № 24. - P. 2723 - 2726

12. Hanessian, S. Studies on the Deconjugation-Epimerization Strategy en Route to Avermectin Bl: Problems and Solutions [Текст] / D. Dub, P.J. Hodges // J. Am. Chem. Soc. - 1987. - Vol. 109, № 23. - P. 7063 - 7067

13. Fraser-Reid, B. Avermectin Chemistry: Problems of Conjugation, Deconjugation, and Epimerization [Текст] / H. Wolleb, R. Faghih, J. Barchi // J. Am. Chem. Soc. - 1987. - № 109. - P. 933-935

14. Pivnichny, J.V. Direct determination of avermectins in plasma at nanogram levels by high-performance liquid chromatography [Текст] / J.-S.K. Shim, L. Zimmerman // J. Pharm. Sci. - 1983. - Vol. 72, № 12. - P. 1447-1450

15. Pivnichny, J.V. Base-catalyzed isomerization of avermectins [Текст] / B.H. Arison, F.A. Preiser, J.-S.K. Shim, H. Mrozik // J. Agric. Food Chem. - 1988. - Vol. 36, №4. - P. 826-828

16. Katoh, T. A Novel synthesis of avermectin Bla from avermectin B2a [Текст] / E. Itoh, S. Terashima // Heterocycles. - 2000. - Vol. 52, № 2. - P. 587 - 590

17. Mrozik, H. Partial synthesis of avermectin Bia and ivermectin from avermectin B2a [Текст] / P. Eskola, M.H. Fisher // Tetrahedron Lett. - 1982. - Vol. 23, № 23. - P. 2377-2378

18. Hanessian, S. Studies on the Deconjugation-Epimerization Strategy en Route to Avermectin Bja: Problems and Solutions [Текст] / D. Dube, P.J. Hodges // J. Am. Chem. Soc. - 1987. - Vol. 109, № 23. - P. 7063 - 7067

19. McKillican, B.P. Stereoselective synthesis of radio labelled avermectins [Текст] / J.W. Perine, D.P. Simmons, Т.Е. Wilson // J. Labelled Compd. Radiopharm. - 2005. -№ 48. - P. 25-30.

20. White, J.D. Synthesis of Avermectin Bi Aglycon. [Текст] / G.L. Bolton // J. Am. Chem. Soc. - 1990,- № 112. - P. 1626-1628

21. White, J.D. Total Synthesis of the Antiparasitic Agent Avermectin B)a. [Текст] / G.L. Bolton, A.P. Dantanarayana, C.M.J. Fox, R.N. Hiner, R.W. Jackson, K. Sakuma, U.S. Warrier // J. Am. Chem. Soc. - 1995. - № 117. - P. 1908-1939

22. Ley, S.V. Total Synthesis of the Anthelmintic Macrolide Avermectin Bla. [Текст] / A. Armstrong, D. Diez-Martin, MJ. Ford, P. Grice, J.G. Knight, H.C. Ко lb, A. Madin // J. Chem. Soc., Perkin Trans. - 1991. - P. 667-693

23. Crimmins, M. Synthesis of spiroketal fragment of avermectin Bi [Текст] / R. Mahony // Tetrahedron lett. - 1989. - Vol. 30, № 44. - P. 5993-5996

24. Nicolaou, K.C. Practical Synthesis of Oligosaccharides. Partial Synthesis of Avermectin Bla. [Текст] / R.E. Delle, D.P. Papahatjis, J.L. Randall // J. Am. Chem. Soc. - 1984. - № 106. - P. 4189-4192

25. Hanessian, S. Synthesis of (+)-Avermectin Bla. [Текст] / A. Ugolini, D. Dub, P. J. Hodges, C. Andre // J. Am. Chem. Soc. - 1986. - № 108. - P. 2776-2778

26. Danishefsky, S.J. The total synthesis of the aglicon of avermectin Ala [Текст] / H.G Selnick, D.M. Armistead, F.E. Wincott // J. Am. Chem. Soc. - 1987. - № Ю9. - P. 8117-8119.

27. Nicolaou, КС. Practical synthesis of oligosaccharides. Partial synthesis of avermectin Bla. [Текст] / R.E. Dolle, D.P. Papahatjis, J.L. Randall// J. Am. Chem. Soc. - 1984. - № 106. - P. 4189-4192.

28. Wuts, P.G.M. Total synthesis of oleandrose and the avermectin disaccharide, benzyl a-L-oleandrosyl-a-L-4-acetoxyoleandroside [Текст] / S.S. Bigelow // J. Org. Chem. - 1983. - № 48. - P. 3489-3493.

29. Barrett, A.G.M. Approaches to avermectin assembly - elaboration of an alpha-L-oleandrosyl-alpha-L-oleandroside derivative [Текст] / Т.A. Miller. // Tetrahedron Lett. - 1988. - № 29. - P. 1873-1874.

30. Hanessian, S. The controlled degradation of Avermectin Bla [Текст] / A. Ugolini, P.J. Hodges, D. Dube // Tetrahedron Lett. - 1986. - Vol. 27, № 24. - P. 26992702

31. Blizzard, T.A. An Improved Preparation of the Avermectin Disaccharide Unit. [Текст] / G. Marino, H. Mrozik, M.H. Fisher // J. Org. Chem. - 1989. - № 54. - P. 1756-1757

32. Zhang, C. The in Vitro Characterization of the Iterative Avermectin Glycosyltransferase AveBI Reveals Reaction Reversibility and Sugar Nucleotide Flexibility. [Текст] / С. Albermann, X. Fu, J.S. Thorson. // J. Am. Chem. Soc. - 2006.

- № 128. - P. 16420-16421

33. Smith, A.B. Avermectin-Milbemycin Studies. 2. An Efficient Chemical Degradation of Avermectin Bla. [Текст] / A.S. Thompson. // Tetrahedron Lett. - 1985.

- Vol. 26, № .36. - P. 4279-4282

34. Hanessian, S. The controlled degradation of Avermectin Bla. [Текст] / A. Ugolini, P.J. Hodges, D. Dubg. // Tetrahedron Lett. - 1986. - Vol. 27, № 24. - P. 26992702

35. Blizzard, T.A. Chemical degradation avermectin Bi. [Текст] / H. Mrozik, M. I. Fisher // Tetrahedron Lett. - 1988. - Vol. 29, № 26. - P. 3163-3166

36. Mrozik, H. Avermectin Aglycons [Текст] / P. Eskola, B.H. Arison, G. Albers-Schonberg, M.H. Fisher // J. Org. Chem. - 1982. - № 47. - P. 489-492

37. Fisher, M.H. The Avermectin Family of Macrolide Like Antibiotics In Macrolide Antibiotics [Текст] / H. Mrozik, S. Omura // Academic Press: New York, NY. - 1984. - № 14. - P. 553-606

38. 4a-Substituted avermectin compounds / H. Mrozik. It is published 07.03.84 // Пат. 4457920 США- 14 p. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

39. Jones, Т.К. Synthesis and Biological Activity of 4a,4'-Disubstituted Avermectins [Текст] / L. Chu, H. Mrozik, L. Slayton, B. Rafalko, M.L. Goldmann. // J. Agric. Food. Chem. - 1994. - № 42. - P. 1786-1790

40. Kessabi, F.M. Rearrangement of a Cyclohexyl Radical to a Cyclopentylmethyl Radical on the Avermectin Skeleton. [Текст] / Т. Winkler, J.A.R. Luft, K.N. Houk // Org. Lett. - 2008. - Vol. 10, № 11. - P. 2255-2258

41. Fraser-Reid, B. Avermectin Chemistry. A Secure and Flawless Strategy for the Final Synthetic Stages [Текст] / J. Barchi, R. Faghih // J. Org. Chem. - 1988. - Vol. 53; № 4. - P. 923 - 925

42. Fraser-Reid, B. The C4-Exo Methylene Isomer of Avermectin Bla: Synthesis via an Allylic Radical and Bioactivity [Текст] / J.C. Lopez, R. Faghih // Tetrahedron. -1992. - Vol. 48, № 33. - P. 6763-6168

43. Avermectin derivatives / A. Rosegay. It is published 31.08.93 // Пат. 5240915(A) США - 12 p. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

44. Mrozik, H. Avermectin Acyl Derivatives with Anthelmintic Activity [Текст] / P. Eskola, M.H. Fisher, J.R. Egerton, S. Cifelli, D.A. Ostlind // J Med. Chem. - 1982. -Vol. 25, № 6. - P. 658 - 663

45. Acyl derivatives of C-076 compounds / H.H. Mrozik, M.H. Fisher, P. Kulsa. It is published 06.05.80 // Пат. 4201861(A) США - 16 p. - Режим доступа -http://ep.espacenet.com

46. 23-Keto derivatives of C-076 compounds / H.H. Mrozik, J.G. MacConnell. It is published 15.09.81 // Пат. 4289760(A) США - 9 p. - Режим доступа -http://ep.espacenet.com

47. Kok, L.T. Residual foliar toxicity of 4"-epi-methylamino-4"-deoxyavermectin B1 hydrochloride (MK-243) and selected commercial insecticides to adult hymenopterous parasites, Pteromalus puparum (Hymenoptera: Pteromalidae) and Cotesia orobenae (Hymenoptera: Braconidae) [Текст] / J.A. Lasota, T.J. McAvoy, R.A. Dybas // J. Econ. Entomol. - 1996. - № 89. - P. 63

48. Shoop, W.L. Eprinomectin: A novel avermectin for use as a topical endectocide for cattle [Текст] / J.R. Egerton, C.H. Eaiy, H.W. I-Iaines, B.F. Michael, H. Mrozik, P. Eskola, M.H. Fisher // J. Parasitol. - 1996. - Vol. 26, № 11. - P. 1237-1242

49. Nagai, K. Synthesis of 4"-alkoxy avermectin derivatives using rhodium carbenoid-mediated O-H insertion reaction [Текст] / Т. Sunazuka, S. Omura // Tetrahedron Lett. - 2004. - Vol. 45. - P. 2507-2509

50. Nagai, K. Synthesis and Biological Activities of Novel 4"-Alkylidene Avermectin Derivatives [Текст] / Т. Sunazuka, К. Shiomi, A. Harder, A. Turberg, S. Omura // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2003. - Vol. 13. - P. 3943-3946

51. Dimeric avermectin and milbecin derivatives / C.Q. Meng, J. Creek. It is published 10.06.2010// Пат. 0144859(A) США - 83 p. - Режим доступа -http://ep.espacenet.com

52. Fluoroavermectin and fluoromilbemycin derivatives with antiparasitic and pesticidal properties / P. Escola, M.H. Fisher, H. Mrozik. It is published US 08.11.89 // Пат. 0340849(A2) Европа, 189445 США - 2 p. - Режим доступа -http://ep.espacenet.com

53. Thermodynamically stable crystal form of 4"-deoxy-4"-epi-methylamino avermectin B1 A/BIB benzoic acid salt and processes for its preparation /R. Cvetovich, J.A. McCauley, R. Demchak, R.J. Varsolona. / It is published 26.11.02 // Пат. 6486195(B1) США - 5 p. - Режим доступа - httpУ/ер.espacenet.com

54. Meinke, P.T. Affinity probes for the avermectin binding proteins [Текст] / S.P, Rohrer, E.C. Hayes, J.M. Schaeffer, M.H. Fisher, H. Mrozik // J. Med. Chem. - 1992. -№ 35(21). - P. 3879-3884

55. Tsukamoto, Y. Avermectin Chemistry and Action: Ester- and Ether-type Candidate PhotoafFmity Probes [Текст] / L.M. Cole, J.E. Casida. // Bioorg. Med. Chem. - 2000. - № 8. - P. 19-26

56. Blizzard, T.A. Chemical degradation avermectin Bl. [Текст] /Н. Mrozik, M.I. Fisher // Tetrahedron Lett. - 1988. - Vol. 29, № 26. - P. 3163-3166

57. Blizzard, Т.A. Synthesis, reactivity and bioactivity of avermectin Br3,4-oxide [Текст] / H. Mrozik, F.A. Preiser, M.H. Fisher // Tetrahedron Lett. - 1990. - Vol. 31, № 35. - P. 4965-4968

58. Mrozik, H. Mercuric Acetate Oxidation of Avermectin A2a as a Route to the Selective Cleavage of the Allylic C-5-Methoxy Group. [Текст] / P. Eskola, M.H Fisher // J. Org. Chem. - 1986. - Vol. 51, № 15. - P. 3058 - 3059

59. Chabala, J. C. Tritium labeling of avermectins Bla and B2a via stereoselective reduction of 5-ketoavermectins [Текст] / A. Rosegay, M.A. Walsh // J. Agric. Food. Chem.-1981. -№29.-P. 881.

60. C-8A-Oxo-avermectin and milbemycin derivatives, pharmaceutical compositions and method of use / H.H. Mrozik, F.S. Waksmunski. It is published 15.10.85 // Пат. 4547491(A) США- 10 p. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

61. Chabala, J. С. Ivermectin, a new broad-spectrum antiparasitic agent [Текст] / H. Mrozik, R.L. Tolman, P. Eskola, A. Lusi, L.H. Peterson, M.F. Woods, M.H. Fisher // J. Med. Chem. - 1980. - Vol. 23, № 10. - P. 1134-1136

62. Shih, T. L. N-Bromoacetamide as a Selective Reagent for the Functionalization of the 10,11 Double Bond of Avermectin Bla [Текст] / H. Mrozik, J. Ruiz-Sanchez, M.H. Fisher. // J. Org. Chem. - 1989. - Vol. 54. - P. 1459-1463

63. Alkyl avermectin derivatives / P. Escola, T.L. Shih, H. Mrozik. It is published 06.03.90 // Пат. 4906619(A) США - 17 p. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

64. 24-and 25-substituted avermectin and milbemycin derivatives / H. Mrozik. It is published US 03.11.1998 // Пат. 5830875(A) США - 21р. - Режим доступа -http://ep. espacenet.com

65. Avermectins and avermectin monosaccharides substituted in 4' and 4" - position having pesticidal properties / F.M. Kesaby, J. Cassayre, L. Quaranta, T. Pitterna, P. Maienfisch / It is published 19.08.2004 // Пат. 069853(A1) Европа - 101p. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

66. Derivatives of 3'- and 3"-0-desmethyl avermectin compounds, compositions and methods of treating melmintic and parasitic infections / B.O. Linn, H. Mrozik. / It is

published US 08.12.1992 // Пат. 5169839(A) США - 12р. - Режим доступа -http-y/ep.espacenet.com

67. Derivatives of 3'- and 3"-0-desmethyl avermectin compounds / B.O. Linn, H. Mrozik. / It is published US 27.06.1990 // Пат. 0375395(A2) Европа - 18p. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

68. 5-oxime avermectin derivatives / M.H. Fisher, H. Mrozik. It is published US 14.05.1991 // Пат. 5015630 (А) США -12p. - Режим доступа -httpy/ep.espacenet.com

69. Mrozik, H. Photoisomers of Avermectins. [Текст] / P. Eskola, G.F. Reynolds, B.H. Arison, G.M. Smith, M.H. Fisher // J. Org. Chem. - 1988. - № 53. - P. 1820-1823

70. Frei, В. Synthesis and Configuration of Some Hydroxymilbemycin Derivatives Including 22,23-Dihydroavermectin B1 Aglycone [Текст] / P. Huxley, P. Maienfisch, H.B. Mereyala, G. Rist, A.C.O'Sullivan. // Helv. Chim. Acta. - 1990. - Vol. 73. - P. 1905-1917

71. Active agent combinations / G. Baron, M. Kilian, F. Rosenfeldt / It is published 18.03.04 / Пат. 052878(A1) США - 14 p. - Режим доступа - http://ep.espacenet.com

72. Active compound combinations having insecticidal and acaricidal properties / R. Fischer, W. Andersch, T. König. It is published 12.08.10 // Пат. 0204167(A1) США-14 p. - Режим доступа - http У/ер. espacenet.com

73. Avermectin 8,9-cyclopropyl compounds, pharmaceutical compositions and therapeutic method of use / M.J. Wyvratt. It is published 08.04.86 // Пат. 4581345(A) США - 11 p. - Режим доступа - httpy/ep.espacenet.com

74. Antiparasitic agents / C.J. Dutton, S.P. Gibson, E.L. Shih-Jen. It is published 26.03.02 // Пат. 6362168(B1) США - 9 p. - Режим доступа - httpy/ep.espacenet.com

75. Способ лечения аспергиллеза у кроликов / В.А. Агольцев, И.П. Ноздрачев, В.И. Панферов, З.Д. Мошненко, В.Г. Бурлакова. // Пат. 2073512 Российская Федерация - опубл. 1997.

76. Вссслова, Т.П. Эффективность клозантела при фасциолезе овец / И.А. Архипов, М.В. Дорошина // Бюллетень Всесоюзного института гельминтологии им. К.И. Скрябина. - 1986. - Т. 42. С. 27-28.

77. Алексеев, М.А. Развитие резистентности к авермектинам Ai и А2 на примере комнатной мухи Musca domestica L. (Díptera: Muscidae) [Текст] / С.А. Рославцева// Агрохимия. - 2006. - № 1. С. 71-76

78. Гусейнов, Н.Г. Эффективность препарата Ниацид-К при стронгилятозах желудочно-кишечного тракта и гиподерматозе крупного рогатого скота [Текст] / С.А. Мельницкий, М.Н. Мирзаев, О.Х. Манджиев // Ветеринарная медицина. -2007. - № 2-3. - С. 34.

79. Echevarría, F. The prevalence of antihelmintic resistance in nematode parasites of sheep in southern Latin America: Brazil. [Текст] / M. Borba, A. Pinheiro, P. Waller, J. Hansen // Vet. Parasitol. - 1996. - № 62. - P. 199-206.

80. Hejmadi, M.V. L-glutamate binding sites of parasitic nematodes: an association with ivermectin resistance [Текст] / S. Jagannathan N.S., Delany G.C. Coles, A.J. Wolstenholme // Parasitology. - 2000. - № 120. - P. 535-545.

81. Wyk, J.A. Resistance of field strains of Haemon-chus contortus to ivermectin, closantel; rafoxanide and the benzimtda-zoles in South Africa [Текст] / F.S Malan. // Veterinany Record. - 1988. - Vol. 123, № 9. - P.226-228.

82. Wyk, J.A. Two field strains of Haemonchus contortus resistant to rafoxanide [Текст] /F.S. Malan, H.M. Gerber, R.M.R Alva // Onderstepoort J.Vet. Res. - 1987. -Vol.54. - P. 143-146.

83. Fairweather, I. Fasciolicides: efficacy, actions, resistance and its management Population genetics of anthelmintic resistance in parasitic nematodes [Текст] / J.S. Gilleard, R.N. Beech // Parasitology. - 2007. - № 8. - P. 40-47

84. Kotze, A.C. High-level ivermectin resistance in a field isolate of Haemonchus contortus associated with a low level of resistance in the larval stage: implications for resistance detection [Текст] / J. Robert, L. Dobson // Veterinary Parasitology. - 2002. - № 3. - P. 255-263

85. Prichard, R.K. Ivermectin resistance and overview of the Consortium for Anthelmintic Resistance SNPs [Текст] // Expert Opin Drug Discov. - 2007. - № 2. -P. 41-52.

86. Coles, G. The detection of anthelmintic resistance in nematodes [Текст] / F. Jackson, W.E. Pomroy // Veterinary Parasitology. - 2006. - № 8. - P. 167-185

87. Tyrell, K. Overcoming Macrocyclic lactone resistence in Haemonchus contortus with pulse dosing of Levamisole [Текст] / F. Leo // Veterinary Parasitology. - 2009. -№ 11. - P. 98-102

88. Varady, M. Comparison of two versions of larval development test to detect anthelmintic resistance in Haemonchus contortus [Текст] / J. Cobra, V. Letkova, G. Ко vac // Veterinary Parasitology. - 2009. - № 2-3. - P. 267-271

89. Мирзаев, M.H. Биотехнологические аспекты создания неинъекционных форм противопаразитарных препаратов на основе авермектинов [Текст] / С.Н.,Савченков, Т.П. Жарова, Д.А. Девришов, Е.С. Воронин // Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве на современном этапе. - М., 1999. - С. 272-273

90. Koichi, I. Preparative isolation of avermectin isomers by high-speed countercurrent chromatography coupled with electrospray mass spectrometry [Текст] / H. Yasuko, H. Tomoaki, O. Hisao //. Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies. - 2011. - № 34. - P. 2621-2628

91. Колобов, A.B. Исследование гидролиза 4^-фталевых ангидридов / А.В. Колобов, Г.Г. Красовская, Е.С. Кулешова, В.В. Плахтинский, А.А. Шетнев. // Изв. вузов. Химия и хим. технология. - 2010. - Т. 53. Вып. 4 - С. 94-95

92. Заварзин, И. В. Синтез и биологическая активность новых 5-О- и 4"-О-ацилпроизводныхавермектина/И.В. Заварзин, Е.С. Кулешова, Е.И. Чернобурова, М.А. Щетинина, А.В. Колобов, В.В. Плахтинский, М.Х. Джафаров. // Изв. АН. Сер. Хим.- № 2. - 2014. - С. 538-542

93. Способ определения нематоцидной активности авермектинов / В.А. Дриняев, В.Н. Чижов, В.Н. Ковалев, М.Н. Мирзаев. // Пат. 2013053 Российская Федерация. - 1994

94. [электронный ресурс] Режим доступа: http://OpenMOPAC.net/

95. Беллами, JI. Инфракрасные спектры молекул / Пер. с англ. Под ред. к.х.н. Д.Н. Шигоряна. //Издательство иностранной литературы. М. - 1957. - С. 444

96. Наканиси, К. Инфракрасные спектры и строение органических соединений / Практическое руководство. Пер. с англ. Н.Б. Куплетской, Э.М. Эпштейн. Под ред. A.A. Мальцева. М.: Мир. - 1965. - С. 216

97. Гордон, А. Спутник химика. Физико-химические свойства, методики, библиография (справочник) / Р. Форд // Издательство "Мир". М. - 1976. - С. 54.

98. Препаративная органическая химия / Пер. с польск. Под ред. Н.С. Вульфсона, Н.Ф. Цветкова. // Госзимиздат. М. - 1959. - С. 688

99. Колобов, A.B. Вицинальные дикарбоновые кислоты: синтез, структура, свойства: дис. ... д-ра хим. наук: 02.00.03 / Колобов Алексей Владиславович. -Ярославль. - 2007. - С. 281