Новые дисахаридные блоки, подходы к предшественникам агликона OSW-1 и синтез конъюгатов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат наук Хасанова, Лидия Семеновна

• Хасанова, Лидия Семеновна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Хасанова, Лидия Семеновна

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ 4 ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Полный синтез стероидного сапонина

OSW-1 и его аналогов

1.1. Полные синтезы OSW-1

1.1.1 Синтез агликона OSW-1

1.1.2 Синтез дисахаридного блока OSW-1

1.1.3 Синтез OSW-1

1.2 Синтез аналогов OSW-1

1.3 Противоопухолевая активность OSW-1 и аналогов 40 ГЛАВА 2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

2.1 Моносахаридные блоки на основе D-ксилозы и L-арабинозы

2.1.1 Синтез арабинозного фрагмента OSW-1

2.1.2 Блоки для OSW-1 и аналогов на основе D-ксилозы

2.1.3 Новые трифторацетимидатного и 1,2-ортоэфирного типа гликозид-доноры для дисахаридов

2.2 Синтез новых дисахаридных блоков для OSW-1 и его аналогов

2.3 Подходы к синтезу агликона OSW-1

2.4 Необычная реакция фрагментации в ряду 16-ацетокси-22-оксохоле-стерола

2.5 Синтез конъюгата веспертилина с дисахаридным блоком 64 Глава 3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1 Экспериментальная часть к разделу 2.1

3.2 Экспериментальная часть к разделу 2.2

3.3 Экспериментальная часть к разделу 2.3

3.4 Экспериментальная часть к разделу 2.4

3.5 Экспериментальная часть к разделу 2.5 104 ВЫВОДЫ 108 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

АсОН - уксусная кислота MS - молекулярная сита

Ас - ацетил NMO - N-окись морфолина

Вп - бензил NBS - N-бромсукцинимид

Bz - бензоил NIS - N-иодсукцинимид

Ср - циклопентадиенил PDC - пиридиния дихромат

CSA - камфорсульфокислота РМВ - и-метоксибензил

w-CPBА - л/-хлорнадбензойная Ру - пиридин

кислота ТСХ - тонкослойная хроматография

DMDO - диметилдиоксиран ТВАВ - тетрабутиламмонийбромид

DBU- 1,8-диазобицикло[5.4.0]-7- TBAF - тетра-я-бутиламмоний-

ундецен фторид

DAST - (диэтиламино)сульфотри- TBDMS (TBS) - т/?еш-бутилдиметил-

фторид силил

DDQ - 2,3-дихлор-5,6-дициан-1,4- TBDPS - гареш-бутилдифенилсилил

бензохинон Tf- трифторметансульфонил

DMAP - 4-диметиламинопиридин Tf^O - трифлатный ангидрид

DMF (ДМФА) - диметилформамид TFA - трифторуксусная кислота

DMSO - диметилсульфоксид THF - тетрагидрофуран

DPPA - дифенилфосфорилазид ТНР (ТГП) - тетрагидропиранил

DMPU - А^'-диметил- N,N'- TMS (ТМС) - триметилсилил

триметиленмочевина TES - триэтилсилил

HMDS (ГМДС) - гексаметил- TESOTf - триэтилсилилтрифлат

дисилазид TP АР - н-тетрапропиламмония

НМРА - гексаметилфосфорамид перрутенат

LDA - диизопропиламид лития p-Ts - ияра-толуолсульфонил

Im - имидазол p-TsOH - /7<я/?а-толуолсульфокислота

Ms - метансульфонил

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Новые дисахаридные блоки, подходы к предшественникам агликона OSW-1 и синтез конъюгатов»

ВВЕДЕНИЕ

Выделенный из клубней южноафриканского растения Omithoga.htm ясшпс1ег81ае холестановый гликозид 08\У-1 показал экстремально высокую цитотоксичность по отношению ко многим видам раковых клеток. Сапонин ОЭММ состоит из 1бр-,17а-дигидроксихолестан-22-онового агликона, ацилированного по 16-гидроксильной группе функционализированным по 2-и 2'-0-положению дисахаридом - Р-0-ксилопиранозил-(1—>3)-а-Ь-арабинопиранозидом.

Содержание 08\У-1 в клубнях Ornithogalllm 5аипс1ег81ае крайне низкое, поэтому требуемые для широких биохимических и медицинских исследований количества данного стероидного гликозида могут быть получены только путем химического синтеза. В настоящее время учеными разных стран ведутся интенсивные исследования по синтезу и изучению механизма противоопухолевой активности 08\У-1.

Целью настоящей работы является разработка новых путей синтеза ключевых блок-синтонов для 08\У-1 и конструирование сходной с «лидером» топологии более доступных структур.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи: синтез новых дисахаридных блоков - синтетических эквивалентов дисахаридной части 08\\М;

изучение превращений диосгенина в направлении выхода к перспективным для дальнейшей работы структурам агликонов;

синтез веспертилина и его конъюгатов с дисахаридными блоками

Работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ИОХ УНЦ РАН по теме: «Дизайн и направленный синтез органических молекул с заданными свойствами» (номер государственной регистрации 0120.0801447), программой Президиума РАН «Направленный синтез веществ с заданными свойствами и создание функциональных

материалов на их основе», а также при финансовой поддержке РФФИ (проект №11-03-00780_а), ФЦП Федерального Агентства по Науке и Инновациям «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2012 годы» (госконтракт № 02.512.12.2015) и ФЦП Министерства образования и науки «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 20092013 годы» (госконтракт №14.740.11.0367).

Автор выражает глубокую благодарность заведующему лабораторией Мифтахову Мансуру Сагарьяровичу за постоянное внимание и помощь в ходе выполнения и оформления работы; всем сотрудникам лаборатории синтеза низкомолекулярных биорегуляторов, в особенности, к.х.н. Валиуллиной З.Р., к.х.н. Торосян С.А., к.х.н. Селезневой Н.К. и др. за помощь в выполнении работы и ценные советы; всем сотрудникам аналитической лаборатории, в частности, зав. лабораторией к.х.н. Спирихину Л.В., к.х.н. Фатыхову A.A., к.х.н. Галкину Е.Г., к.х.н. Ерастову А., к.х.н. Лобову А.Н. и др. за помощь в установлении структуры и интерпретации спектральных данных синтезированных соединений.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Полный синтез стероидного сапонина

OSW-1 и его аналогов

Сапонины представляют собой структурно и биологически разнообразный класс молекул, который широко распространен в наземных растениях и в некоторых морских организмах [1]. Они относятся к большому семейству стероидных или тритерпеноидных гликозидов с огромным структурным многообразием. В последнее время эти соединения привлекли большой интерес из-за широкого диапазона биологической и фармакологической активности [2-6]: иммуностимулирующей, противоопухолевой, а также антиоксидантной, антигрибковой и антивирусной [7-14].

В 1992 г. Сашида и Мимаки с сотрудниками сообщили о новом типе холестановых гликозидов из луковицы Ornithogalum saimdersiae многолетнего садового растения семейства лилейных, культивируемого в Южной Африке, которые показали высокую цитотоксичность к клеткам NCI 60 в испытаниях in vitro (IC50 0.78 нМ) [15, 16]. Эти холестановые гликозиды 1-5 содержат одинаковую стероидную единицу, а их структурное разнообразие основано на различии заместителей в 2-О-положении дисахаридной части или в З-Оположении агликона. Ксилозная часть сапонина 1, названного OSW-1, в положении С-2 имеет /7-метокси-бензоильную группу. При удалении ацильной функции в 1 отмечается сильная потеря биологической активности. С другой стороны, у соединений 2-5, которые отличаются вариациями в этом ацильном остатке, также наблюдается усиление активности. Для указанных ацильных остатков характерно наличие электронно-обогащенных ароматических заместителей, как /7-метоксибензоил, циннамоил или вератрил. Все сапонины, представленные на рис. 1, показывают мощную цитотоксичность против лейкемии HL-60 (1С50 0.1-0.3 нм). [17,18].

Основным компонентом луковицы Ornithogalum saimdersiae является сапонин OSW-1, а именно Зр,1бр,17а-тригидроксихолест-5-ен-22-он-16-0-

[0-(2-0-(4-метоксибензоил)-Р-0-ксилопиранозил-(1->3)-2-0-ацетил-Ь-ара-бинопиранозид] 1 [15, 17]. Этой молекуле было уделено огромное внимание, поскольку об ее чрезвычайно мощной противоопухолевой активности было доложено на 210-м Национальном собрании Американского химического общества (1995, Чикаго, Иллинойс) [3]. Исследования in vitro показали, что OSW-1 оказался чрезвычайно токсичным против широкого спектра злокачественных опухолевых клеток, таких как клетки лейкемии HL-60, мышиной мастрокарциномы, человеческой легочной аденокарциномы, крупноклеточного и плоскоклеточного рака легких человека, в том числе устойчивых к адриамицину и к камптотецину клеток лейкемии Р388, с 1С50 от 0,1 до 0,7 нм. Это примерно в 10-100 раз более мощная активность, чем у клинически применяемых противоопухолевых агентов, таких как митомицин С, адриамицин, цисплатин, камптотецин, и таксол [3, 14, 17, 19-21].

Особенно чувствительными к OSW-1 оказались линии клеток меланомы. Кроме того, OSW-1 показал низкую in vitro токсичность к нормальным клеткам. Например, он проявлял низкую токсичность к нормальным легочным клеткам человека и не оказывает значительный

о

1, R1 = Н, R2 = ¿>-МеОС6Н4СО (OSW-1);

1 2

2, R = Н, R = 3,4-диметоксибензоил;

3, R1 = Н, R2 = (Е)-С6Н5СН=СНСО;

4, R1 = Glc, R2 = /?-МеОС6Н4СО;

5, R1 = Glc, R2= (Е)-С6Н5СН=СНСО

гемолитический эффект на человеческие эритроциты в концентрации 100 мг/мл.

Предыдущие исследования взаимосвязи структура-активность (SAR) показали, что обе части - стероидный агликон и сахарная часть - важны для биологической активности OSW-1 [17, 18, 21]. Например, удаление ацетильной или 4-метоксибензоильной групп дисахаридной части уменьшает цитотоксичность в 1000 раз [17, 22]. Стероидные гликозиды, имеющие дисахаридный фрагмент OSW-1 в других положениях, оказались, по крайней мере, в 10 000 раз менее активными, чем OSW-1. Кроме того, синтетические аналоги агликона показали лишь незначительную цитотоксичность (ED50 ~10 цМ) к опухолевым клеткам [23], а синтетические гликозиды, имеющие дисахаридную часть OSW-1, но совершенно разные стероидные агликоны, не показывают цитотоксичность при концентрациях ниже 10 шМ [24-27]. Другой структурной необходимостью для исключительной противоопухолевой активности OSW-1 является ß-ориентация С16-0-сахарного компонента [24,28].

Механизм активности OSW-1 еще до конца не выяснен. Однако, поскольку цитотоксическое поведение OSW-1 по отношению к различным раковым линиям является очень похожим с таковым цефалостатина [29], он мог бы иметь аналогичный механизм активности. Активным интермеди атом, как полагают, является ион оксония, который может образоваться из обоих этих соединений (схема 1). К тому же, дисахаридный компонент OSW-1 может служить в качестве распознающего элемента или полярного модулятора. В целом, присутствие обоих 16В,17а-гидроксильных групп и C-22-карбонильной группы является существенным для биологической активности OSW-1.

1.1. Полные синтезы 08\У-1

Описано несколько синтетических путей к агликону ОБ\\М или к самому 08\¥-1, а также несколько синтетических подходов к модифицированию агликона 08\¥-1 [1, 23, 24, 28].

Для всех этих синтезов 08\¥-1 ретросинтетический анализ приводит к двум фрагментам - холестановому агликону 6 и дисахаридной части 10 (схема 2).

О

1.1.1. Синтез агликона OSW-1

Для синтеза OSW-1 основной проблемой является создание структуры 16р,17а-дигидроксихолестан-22-она 6. Большинство опубликованных синтезов исходят из коммерчески доступного (+)-дегидроизоандростерона, который может быть получен расщеплением недорогого диосгенина с общим выходом от 25 до 50%.

Дисахаридная часть может быть получена из функционализированных остатков D-ксилозы и L-арабинозы.

Первый синтез агликоновой части OSW-1 был осуществлен Fuchs и сотрудниками [23]. Вначале ими была предпринята попытка синтеза агликона на основе 16-дегидропрегнанолона, что не увенчалось успехом.

ОРМВ

НО'

15

-С

16,Я = Н,

17, Я = ТВОРБ

ОРМВ

ОРМВ

ТВЭРБО

ТВОРБО'

18Ь

18а

1 : 2.5

а) СН3СН=РРЬ3, Ь) Ас20-Ру; с) ¡-С6Н13СНО, Ме2А1С1; (!) РМВОС(1МН)СС13, ТГОН; е) 0з04, Ру, Е120, 80%; О (СОС1)2, 0М80, СН2С12, -70°С, затем Е^Ы; ё) К2С03, МеОН; Ь) ТВОР8С1, Ае>Ю3, 90%; \) NaBH4, СеС13*7Н20, 90%.

Поэтому авторы [23] исходили из кетона 9, олефинирование которого по Виттигу этилидентрифенилфосфораном [30] приводило к диену 13 (схема 3). Дальнейшие стадии конденсации защищенного по ОН-группе диена 13 с 4-метилпентаналем в присутствии Ме2А1С1 [31] и окисление двойной связи 14 (после защиты ОН-группы в виде РМВ-эфира) ОвС^ в смеси Ру-Е^О приводят к диолу 15. Для инверсии вторичной ОН-группы соединение 15 окислено до гидроксикетона 16 по реакции Сверна и далее восстановлено реагентом Луче [32], что приводит к смеси а,Р-изомеров соединения 18 с высоким выходом, однако соотношение было не в пользу нужного [3-изомера 18а (1:2,5).

23, R = Ас Л е f

24, R = TBDS г '

а) Н2СЮ4, Ме2СО, 0°С, 93%; b) (СН2ОН)2, p-TsOH, CH(OEt)3, 90%; с) 0s04, Ру, Et20, 80%; d) (СОС1)2, DMSO, СН2С12, -70°С, затем Et3N; е) К2СОэ, МеОН; i) TBDPSC1, AgN03, 90%; g) NaBH4, CeC!3*7H20, 90%.

Удачной оказалась последовательность, исходящая из кетона 20, защищенного в виде этиленкеталя 21, из которого диол 22 получен аналогично 16 с выходом 81%. Сходные для соединения 16 процедуры стереоселективно приводят только к диолу 25 с выходом 95% на стадии восстановления (схема 4).

В 1998 году Hui с сотрудниками завершили первый полный синтез OSW-1 (схема 5) [1]. Их стратегия в синтезе агликона была схожей с подходом Фуча [23]. После олефинирования по Виттигу [33] кетона 9 в (+)-дегидро-изоандростерон 13а в положение С22 диастереоселективно была введена функционализированная боковая цепь присоединением параформа.

НО'

О

a, b

TBDPSO'

TBDPSO'

TBDPSO

27 TBDPSO'

TBSO'

22b

TBSO

24b

TBSO1

25a

OSW-1 (14-стадий, 6%)

a) Ph3P EtBr", t-BuOK, THF, кипячение, 4ч, 78%; b) TBDPSC1, Im, DMF, 24ч, 20°C, 100%; c) (CH20)n, BF3*Et20 (0.05 экв ), CH2C12, 20°C, 10 мин, 75%,d) реагент Десс-Мартина, CH2C12,20°C, Зч, 86%, e) CII3CHCH3CH2CH2MgBr, EbO, 20°C, 1ч, 96%, f) PDC,CH2C12, DMF, 20°C, 24ч, 83%, g) (CH20H)2, CH(OEt)3, p-TsOH, CH2C12) 20°C, 4 д; h) TBAF, THF,20°C, 10 ч, 95%; i) TBSC1, имидазол, DMF, 20°C, 24 4, 96%, j) 0s04 (1.2 экв ), Py, Et2O,-20°C, Зч, 41%; k) (COCl)2, DMSO, Et3N, C1I2C12, -78°C, 1ч, 78% ; 1) NaBH4, CeCl3*7H20, THF, 0°C, Зч, 93%

Последующие стадии удлинения боковой цепи окислением по Десс-Мартину [34] и конденсации полученного альдегида с соответствующим реагентом Гриньяра приводят к кетону 20Ь. Карбонильная группа в 20Ь была далее защищена в виде кеталя 21Ь, после чего окисление по С=С-связи OSO4 в смеси Py-Et20 при -20°С приводит к 16аД7а-диолу 22Ь (41%). Инверсия конфигурации у С-16 была достигнута осуществлением последовательности

окисления по Сверну и восстановления реагентом Луче. Таким образом, холестановый агликон 25а был получен в 12 стадий с общим выходом 10%.

В 2001 году Jin с сотр. представили другой полный синтез OSW-1 (схема 6) [35], в котором для синтеза агликона также исходили из гидроксикетона 9 через диен 13а.

Схема 6

О

OSW-1

10-стадий 28%

a) TBSC1,1т, СН2С12, 25°С, 12 ч, 99%; b) СН3СН2Р Ph3Br THF, кипячение, 36 ч, 95%; с) Sе02 (0.5экв.), t-Bu02H (1.2 экв), 0°С, 2 ч, 97%; d) (СОС1)2, DMSO, СН2С12, -70°С, 96%; е) (i) Me3SiCl, 31, -78°С, 0.5 ч; (ii) EtOK, THF, 0°С; (iii) AcCl; f) (CH2OH)2, p-TsOH, CH2C12, 25°C, 5 ч, 75% из 30; g) t-BuOK, 0°C, THF, реагент Девиса, -78°C, 76%; h) LiAlH4, THF, -78°C, 0.5 ч, 97%; i) 4A° MS, CH2CI2, TMSOTf, -20°- 0°C, 0.5 ч, 71%; k) DDQ, CH2C12-H20, 25 °C, затем Pd(CN)2Cl2, ацетон-вода, 25°C, 2 ч, 81%.

В последнем была введена С16а-гидроксигруппа и затем окислена до кетона 30. Боковая цепь была введена 1,4-присоединением а-алкокси-винилкупрата 31 к 30, что дало силиленоловый эфир 32. Последний был превращен в енолацетат 33 ацетилированием кетогруппы при атоме С22 с помощью AcCl. Последующее генерирование енольной формы 34 действием

1-ВиОК [37,38], окисление реагентом Девиса и стереоселективное восстановление действием ЫА1Н4 при -78°С привело к требуемому транс-1613,17а-диолу 25а с выходом 97%. Таким образом, защищенный агликон 08"\У-1 был синтезирован в восемь стадий с общим выходом 48% [36].

Как показано, все синтезы агликона ОБММ включают интермедиа™ типа 21 и 25, имеющие структуру холест-16(17)-ен-22-она для дальнейшего превращения в желаемый т/?а//с-16,17-диол.

В 2001 г. Моггуску и сотр. сообщили о синтезе 08>¥-1 [39, 40], который был первым примером использования 16,17-эпоксида для построения транс-16,17-диола.

Схема 7

Однако исследования подтвердили, что общие методы раскрытия эпоксида не дают желаемых продуктов. Например, 16,17-эпоксидо-холестановое производное 35 претерпевает перегруппировку Вагнера-Меервейна при обработке муравьиной кислотой (схема 7).

При щелочных условиях раскрытия эпоксида 38 при участии аниона у атома С20 образуется основной продукт 40 (схема 8). Указанные 16а, 17а-

эпоксидные производные 38, 35 также резистентны к другим нуклеофилам в нейтральных условиях.

Схема 8

ОМе ОМе

В другой работе Моггус1а с сотр. [41] реализовали раскрытие оксиранового цикла 35 с использованием ЫОН/НгОг с образованием лактона 41, который затем превратили в целевой диол 43 в 3 стадии (схема 9).

Схема 9

СООС2Н5

СН2ОН*

43 ОМе

ОМе

В 2003 году Тиан с сотрудниками сообщили об еще одном синтетическом пути к агликону 08\У-1 с использованием диосгенинового скелета (схема 10) [42].

^ 15 стадий 9,5%

АсО

твяо

25а

a) РЬБН, ВР3* Е120, СН2С12, 20°С, 88%; Ь) Ренея N1, ЕЮН, кипячение, 93%; с) ¡. ТбСЬ Ру, 20°С; и. КОАс, ацетон-Н20, кипячение; Ш. Ас20, Ру, ЭМАР, 20°С, 75%; ё) ДМДО , ЫаНС03, 4 ч, 57%; е) ТбОН, диоксан- Н20, кипячение, 0.5 ч, 97%; 0 Н8СН2СН28Н, ВР3*Е120, АсОН, 2.5 ч, затем Ас20, 20 мин, 63%; и) Ренея N1;

b) (СН2ОН)2, НС(ОЕ% р-ТвОН, 20°С,6.5 ч, 85%; ¡) ОяС^, Ру, -78°С; .¡) (СОС1)2, ОМЭО, Et3N, -78°С до 20°С; к) К2С03, МеОН, 100%; 1) ТВ8С1, имидазол, ОМЕ, 87%; ш) ЫаВН4, СеС !3*7 Н20, ТОТ, 94%.

Раскрытие колец ЕЛ7 диосгенина 45 было реализовано методом Вудварда [43], что привело к С26-тиоацеталю 46. После восстановительной десульфуризации действием никелем Ренея и подходящей защиты 5(6)-двойной связи и СЗ гидроксильной группы в кольцах А/В, Е кольцо в 48 было раскрыто с помощью диметилдиоксирана (ДМДО) в 1,4-дикетон 49. Последующее деблокирование 5(6)-двойной связи и СЗ гидроксильной

группы в А/В кольцах и защита С 16-кетогруппы в соединении 49 этандитиолом привели к тиоеноляту 50. После десульфуризации 50 был получен указанный на схеме 4 интермедиат 21. Дальнейшие трансформации проведены аналогично приведенным в работе [1]. В итоге агликон 08\\М 25а получен с общим выходом 9,5% на 15 стадий (схема 10).

В более поздних работах вио с сотрудниками [44] в синтезе агликона в качестве исходного также использовался кетоспирт 9 (схема 11).

Схема 11

а) ЮА, СН3СН2С>}, -78°С; Ь) (СН3)2СН(СН2)2М§Вг, СбН6, кипячение; затем №ОН, МеОН, 20°С; с) ТВ8С1,1т, ЭМР; д) (СН2ОН)2, НС(ОЕ% р-ТэОН; е) 0з04, Ру, 0°Сдо 20°С; 0 (СОС1)2, ЭМБО, EtзN, -78°С до 20°С; ^ КаВН4, СеС13*7 Н20, ТНР.

Для введения боковой цепи вначале синтезирован циангидрин 51, действием на который изоамилмагнийбромида в бензоле с последующей обработкой ЫаОН в МеОН получен указанный выше кетон 20Ь с ТВ8-защитной группой. Дальнейшие превращения последнего в целевой диол 25а аналогичны описанным в схемах 3-5.

В статье [45] описывается подход к конструированию агликона 08"\У-1 стереоселективной альдольный конденсацией 16К-гидрокси-5-андростен-17-она и пропионатов. Необходимые производные 16а-гидрокси-5-андростен-17-она 59 и 60, защищенные по 3-ОН в виде устойчивых трет-бутилдифенилсилил- и /ярет-бутилдиметилсилиловых эфиров, соответственно, были легко получены из промышленно доступного ацетата 55 модификацией известной в литературе процедуры (схема 12) [46].

Схема 12

.О

СиВг2(3.0 экв)

АсО

МеОН, кипячение,

91%

. Вг

твоРБа или твза

———-

1т, СН2С12, П, 96%

55

56

№ОН (1.3 экв)

0МР/СН2С12/Н20 (3:2:1, у:У:У), Л, 95% к0)

57 11=ТВ08

58 11=ТВ8

ТВ8С1,1т, СН2С12, П, 86%

ОЯ,

/ 59 Я=ТВ08, Я1=Н Г 60 Я=ТВ8, Я,=Н Х61 Я=ТВР8, Я1=ТВ8

Таким образом, бромированием кетона 55 с помощью 3 экв. СиВг2 кипячением в метаноле был получен 16а-бромид 56 с выходом 91%, при этом снимается ацетатная защитная группа при атоме СЗ. Защита 3-ОН-группы с помощью ТЕШР8С1 или ТВ8С1 в присутствии имидазола в ДМФА приводит к силиловым эфирам 57 и 58. Эпимеризация 16а-бромида и его 16(3-изомера легко происходит в щелочных условиях, в которых они подвергаются 8и2-замещению гидроксид-ионом, что ведет стереоспецифически (только из 16а-бромида) к 16а-спиртам 59 и 60 с 95% выходом. Наблюдаемая ранее [20] кетольная перегруппировка с образованием соответствующего 17а-гидрокси-16-оксостероида не была обнаружена. Блокирование 16а-ОН-группы спирта 59 ТВ8С1 привело к 61.

Альдольная конденсация кетонов 59-61 с литиевым Е-енолятом этилпропионата, генерированным LDA в смеси НМРА-ТГФ, была проведена по методу Ireland [47] быстрым добавлением небольшого избытка (1,05-1,10 экв) сложного эфира к раствору основания, в результате образуется в основном Е-изомер [48-50]. Как и ожидалось, были выделены только 17а-гидрокси(бутилдиметилсилилокси),205'-продукты 62а, 63а, 64а (с выходом 41%, 63% и 43% соответственно). Блокирование соседней 16а-ОН-группы для осуществления конденсации не требовалось.

Схема 13

62a/b R = TBDPS, R,=H, R2 = ethyl 63a/b R = TBS, Ri = H, R2 = ethyl 64a/b R = TBDPS, R, = TBS, R2 = ethyl 65a/b R = TBS, R] = H, R2 = isobutyl

a): i) /-Pr2NH, «-BuLi (1.6 M в гексане), -78°C, 15 мин; затем упаривание гексана; ¡i) -78°С, НМРА,

THF; затем пропионат, 0.5 ч; iii) 62-65, -78°С; b): i) i-Pr2NH, и-BuLi (1.6 M), -78°С, 15 мин;

И) пропионат, НМРА, THF, -78°С, 0.5 ч; с): аналогично Ь, но без НМРА.

Однако на этом этапе стереохимия у С20 в альдольных аддуктах не может быть установлена точно. По литературным данным конденсация стероидных 17-кетонов с этил-а-бром(йод)пропионатами в условиях реакции Реформатского приводит к образованию природных 205'-изомеров в качестве основного продукта [51,52]. Эти результаты были подтверждены однозначно данными NOE-корреляции и рентгеноструктурного анализа трансформированных соединений. При сравнении спектров ЯМР 'Н пары 20S- и 207?-изомеров сигналы протонов С21-метила 20£'-изомеров 62а и 63а наблюдались в относительно более сильном поле, то есть при 1.26 и 1.29 м.д. соответственно, по сравнению с сигналами протонов С21-метальной группы 207?-изомеров 62Ь и 63b с химсдвигами 1.30 и 1.32 м.д.

Далее для введения изоамиловой боковой цепи и синтеза агликона 08\У-1 эфир 63а по указанной на схеме 14 последовательности превратили в триол 70 - предшественник диола 60. Окисление ОН-группы до кетона было осуществлено на последних стадиях после присоединения дисахаридной части.

Схема 14

Реагенты и условия: а) ТРАР, NMO, CH2C12,4A MS, rt, 93%; b)NaBH4, СеС13х7Н20, THF, -10°С; с) СН3ОН, Н20, rt, 92%, d) NaBH4, СеС13х7Н20, THF, -10°С; е) СН3ОН, -40°С до -78°С, затем Н20, rt, 92%; f) i-C6HuLi (8.0 экв), THF, rt, 100%; g) LiAH4, Et20, 0°C, 87% на 2 стадии.

Таким образом, из имеющих в литературе данных следует что, существует несколько подходов к синтезу агликона OSW-1. Однако многостадийность и низкие общие выходы целевого продукта делают их непрактичными, поэтому разработка новых, более удобных и технологических способов синтеза агликона OSW-1 и его аналогов, безусловно, актуальна.

1.1.2. Синтез дисахаридного блока OSW-1

Для синтеза дисахаридной части OSW-1 очень важен разумный выбор защитных групп, особенно из-за присутствия двух неустойчивых ацильных групп в целевом синтоне, что требует близких к нейтральным условий для финального деблокирования. Другой важной проблемой в построении

08\¥-1 является гликозилирование пространственно затрудненного С16-гидроксила агликона, что также должно быть проведено в мягких условиях, чтобы избежать затрагивания других функциональных групп агликона [53].

В приведенной выше работе Ни! [1] для синтеза дисахаридного фрагмента использовали производные Б-ксилозы 71 и Ь-арабинозы 72. Синтезы этих составляющих продемонстрированы на схемах 15 и 16. Ксилозный донор - имидат 71 получен в 5 стадий последовательным введением бензильной, /?-метоксибензоильной и триэтилсилильной защитных групп и превращением гликозидной гидроксильной групп в трихлорацетимидатную. При этом р-метоксибензоильная группа была региоселективно введена обработкой триола 74 р-МеОСбН4СОС1 в пиридине с выходом 65%. Бис-триэтилсилиловый эфир 75 получен с отличным выходом действием Е1381С1 в ДМФА в присутствии имидазола.

Схема 15

Д "Д с! ТЕ80^\-Д

V—""Г—\^ОН -у^-Т-Ал^ОВп -^ \----—-Х^ОЯ

ПО/ Ьн К'° ОЯ те8° ОСС6Н4ОМе

О

о-к™ ьг7за=а' = н ?бК = н

£ 74Я=СОС6Н4ОМе,Я'=Н е я = (С=>Ш)СС1з

с ^ 75 Я = СОС6Н4ОМе, Я'=ТЕ8

а) ВпОН, НС1 (газ), 20°С, 24 ч; Ь) р-МеОВгС1, Ру, -35°С до 20°С, 24 ч, 65%; с) ТЕ8С1,1т, ЭМР, 20°С 93%; с!) 10%-ный Рс1/С, Н2 (40 атм.), ЕЮАс, 40°С, 24 ч, 76%; е) СС13СЫ, БВи, СН2С12, 3 ч, 79%.

Арабинозный акцептор - диол 72 - синтезирован из Ь-арабинозы в 4 стадии с выходом 67% через стадии бензилирования ОН-группы при С1, получения ацетонида 78, ацетилирования С -ОН и последующим гидролизом изопропилиденовой защитной группы соединения 79 [54-57].

Ь-арабиноза Ь С 11 =К"=Н

^ 78 Я, Я-изоропилиден, Я'-Н с Ч 79 Я, Я-изоропилиден, Л"=Ас

а) ВпОН, НС1 (газ), 20°С, 24 ч; Ь) Ме2С(ОМе)2, р-Тз0Н*Н20 (кат.), ЭМЕ, 20°С, 5 ч; с) Ас20, Ру, 20°С, 24 ч; с!) 70%-ная НОАс в Н20, 70°С, 1 ч.

На стадии гликозилирования диола 72 имидатом 71 при катализе ВР3*Е120 [58] в качестве основного образуется целевой продукт 1—>3 сочетания дисахарид 80, который легко отделяется от минорного продукта 1 —»4-сочетания 83 колоночной хроматографей на 8Ю2 (схема 17).

Схема 17

71 + 72

а) ВР3*ОЕ12, СН2С12, -60°С; Ь) Ас20, Ру; с) ТЕЗСЛТ, 2,6-лутидин, СН2С12; (1) Р<3/С, Н2, ЕЮН, 50°С; е) СС13СЫ, ЭВи, СН2С12, 6 ч.

План синтеза дисахарида 10 в работе [34] состоял в том, чтобы использовать соединение 86 в качестве гликозидного акцептора и ксилозилфторид 87 в качестве донора (схемы 18, 19).

а) 30% НВг-НОАс, СН2С12, 4 ч; Ь) МеОН, 2,6-лутидин, МеШ2; с) №ОМе, МеОН, 4 ч; с!) №Н, ТГФ; р-МеОС6Н4СН2С1, кипячение, 6 ч, 70% на 4 стадии; е) ОАБТ, СН2С12, 10 ч; 0 №ОМе, МеОН; ё) р-МеОС6Н4СОС1, ОМАР, Е^И, 2 д, 83% на 3 стадии; 11) (¡) AgC104, БпС14, МеСЫ-Н20, 84%; (И) СС13С1^ ОВи, СН2С12, 12 ч, 94%;

Метилортоэфир 89 был получен через гликозилбромид из ацетата Э-ксилозы 88. Манипуляции защитных групп, последующее раскрытие кольца действием ЭАЗТ и фторирование ортоэфира 90 дали фторгликозид 91 с хорошим выходом. После дезацетилирования действием МеОЫа-МеОН была введена /?-метоксибензоильная группа в положении С2 с получением 87.

Схема 19

97 10Ь

а) РЬ8Н, БпСЦ, СН2С12, -78°С до 25°С, 75%; Ь) ЫаОМе, МеОН; с) Ме2С(ОМе)2, СБА, СН2С12; (1) Ас20, ОМАР, Ру, СН2С12; е) Амберлит Н+, МеОН, 65% на 4 стадии; 0 ТЕБОТ^ 2,6-лутидин, СН2С12, -60°С, 87%; ё) ВР3*ЕЬО, 4 А МБ, СН2С12, -78°С до -20°С, 3 ч, 92% Ь) ИВБ, СН2С12-Н20 (10:1), 3 ч, 63%; ¡) СС13СЫ, ОВи, СН2С12.

Соединение 86 синтезировано из тетрацетата Ь-арабинозы 93 согласно схеме 19 [35, 36]. Хотя 86 имеет две гидроксильные группы, ожидалось региоселективное гликозилирование по СЗ, поскольку известно, что экваториальная СЗ-гидроксигруппа является намного более реакционноспособной, чем аксиальная С4-гидроксильная группа [57].

Однако, гликозилирование диола 86 фторидом 87 с использованием AgC104/Cp2HfCl2 (2:1) в качестве промотора дает р-(1 —>3)-дисахарид с очень низким выходом (приблизительно 12%), причем не удалось отделить от Р-(1—>-4)-связанного изомера и 3,4-ди-О-ксилозилированного продукта. О такой низкой региоселективности сообщали и другие группы исследователей [24]. Поэтому 87 и 86 были превращены в донор 92 и полностью защищенный акцептор 96 соответственно. Гликозилирование 96 с помощью 92 в присутствии ВРз*ЕьО давало Р-(1—>3)-дисахарид 97 с высоким выходом (92%) (схема 19). Дисахарид 97 был превращен в трихлорацетимидат 10Ь в две стадии (окислительный гидролиз и получение трихлорацетимидата), после чего интермедиат 10Ь был готов для сочетания с защищенным стероидным агликоном.

В упомянутых работах [35,36] имидат 92 был синтезирован через тиоэтильное производное 101 (схема 20). Вначале из триацетата Б-ксилозы 98 был получен тиоортоэфир 99.

Схема 20

ОАс АсСУ

ДгГГ X к0 О? РМВСК о ^

Ас0 98 ОН 99 Д' 100 ^

БМе 8Ме

М ---- ™

101

т осссь

РМВО^ ОАс РМВО"^ ^ Цг-Т^ ""

102 0 ^^ОМе 92 О ^ДоМе

а) 30% НВг-НОАс, СН2С12, 4 ч; Ь) Е1БН, 2,6-лутидин, MeN02, 12ч, 83%; с)ШОМе, МеОН, 3 ч; с!) №Н, ТГФ; р-МеОСбН4СН2С1, кипячение, 6 ч, 70% на 4 стадии; е) гпС\2 (5%), СН2С12, 60° до 0°С;

0 ИаОМе, МеОН, 4 ч; g) р-МеОС6Н4СОС1, ЭМАР, Е13Ы, СН2С12, 24 ч, 97%; Ь) N68, Н20, СН2С12,

1 ч, 88%; ¡) СС13СЫ, БВи, СН2С12, 3 ч, 95%.

В дальнейшем манипуляции защитными группами и раскрытие цикла тиоортоэфира 100 действием ZnCb приводят к тиогликозиду 101 с высоким выходом. После дезацетилирования, введения /?-метоксибензоильной группы соединение 102 был превращен в имидат 92.

На схеме 21 представлен еще один из вариантов синтеза арабинозного фрагмента. Для его осуществления тетраацетат L-арабинозы 93 превращали в аллилокситриацетат 103а (или в тиоэфир 103b, или бензиловый эфир 103с), и далее схожими для схемы 18 манипуляциями в ацетониды 105 а-с [60]. Гидролиз ацетонидной защиты с помощью уксусной кислоты разной концентрации и при разных температурах приводил к соответствующим диолам 107а-с.

Схема 21

а: X=OCH2CH=CH2; с: X=OBn; b: X=SMe.

a) Ac20, NaOAc, 28% (после перекр. из EtOII); b) CH2= СНСН2ОН, BF3*OEt2 или TMSSMe, TMSOTf или BnOH, BF3*OEt2, СН2С12; с) NaOMe/MeOH; d) Ме2С(ОМе)2, p-TsOH, СН2С12; е) Ас20, Ру; 0 60 %-ный АсОН, 50°С или 60 %-ный АсОН, 20°С или 80%-ный АсОН, 35°С или 70%-ный АсОН, 50°С.

Дальнейшая трансформация диола 107а в соединение 108, подходящее для превращения в дисахарид, осуществлена согласно схеме 22.

ОН

О

он

0-

ОАс

107а

ОРМВ

о

НО_V—^Л^сг

ОАс

108

О-

ОАс

109 (43% из 105а)

Следует отметить, что для защиты 3,4-диольных функций в ксилозном фрагменте были опробованы бензильная, силильная, /?-метоксибензильная и хлорацетильная защитные группы [61-63].

Давно известная в литературе бензильная защитная группа ставится без проблем и подходит для обоих тиоэфиров 111 и 113. Таким образом, действием ВпВг в присутствии NaH в ДМФА и дальнейшими процедурами снятия метилтиоэтильной защитной группы и ацетилирования был получен диацетат 114.

л-7

НзС ж

а, Ь, с Вп0 -

ВпО

114

ОАс

d,e

ВпО

ВпО

ОАс

ОН

Схема 23 f

SMe

115

110 R=Ac, X=0; 111 R=Ac, X=S и;

о

112 R=H, X=0; 113 R=lCx=XS=S^ Me0Na" Mc0H

BnO BnO

BnO BnO

о

p-MeOBzO 116

SMe

BnO

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Хасанова, Лидия Семеновна, 2013 год

Список литературы

1. Deng S., Yu В., Lou Y., Hui Y. First total synthesis of an exceptionally potent antitumor saponin OSW-1 // J. Org. Chem. - 1999. - V.64. - P.202-208.

2. Hostettmann K., Marston A. Saponins // Cambridge University Press: Cambridge, UK, - 1995.

3. Rouhi A.M. Researchers unlocking potential of diverse, widely distributed saponins//Chem. Eng. News - 1995. -V. 73. -No.37. - P.28-43.

4. Waller G.R., Yamasaki K. (Eds.) Saponins used in traditional and modern medicine // In: Advances in experimental Medicine and biology, Plenum Press: New York - 1996. - V.404.

5. Francis G., Kerem Z., Makkar H.P.S., Becker K. The biological action of saponins in animal systems: a review // British J. Nutrition - 2002. -V.88. - P.587-605.

6. Ma X., Yu В., Hui Y., Miao Z., Ding J. Synthesis of steroidal glycosides bearing the disaccharide moiety of OSW-1 and their antitumor activities //Carbohydrate Res. - 2001. - V - 334. - P. 159-164.

7. Ganesan A. The Dimeric Steroid-Pyrazine Marine Alkaloids: Challenges for Isolation, Synthesis, and Biological Studies // Angew. Chem., Int. Ed. - 1996. -V.35.-P.611-615.

8. Pettit G.R., Inoue M., Kamano Y., Herald D.L., Arm C., Dufresne C., Christie N.D., Schmidt J.M., Doubek D.L., Krupa T.S. Antineoplastic agents. 147. Isolation and structure of the powerful cell growth inhibitor cephalostatin 1 // J. Am. Chem. Soc. - 1988. - V.l 10. - P.2006-2007.

9. Glauert A.M., Dingle J.Т., Lucy J.A. Action of saponin on biological cell membranes //Nature. - 1962. -V. 196. - P. 953-955.

10. Delay C., Gavin J.A., Aumelas A., Bonnet, P.-A., Roumestand C. Isolation and structure elucidation of a highly hemolytic saponin from the Merck saponin extract using high-field gradient-enhanced NMR techniques // Carbohyd. Res. - 1997. - V. 302. - P.67-78.

11. Marciani D.J., Press J.B., Reynolds R.C., Pathak A.K., Pathak V., Gundy L.E., Fanner J.T., Koratich M.S., May R.D. Development of semisynthetic triterpenoid saponin derivatives with immune stimulating activity // Vaccines - 2000. - V. 18. - P.3141-3151.

12. Marciani D.J., Reynolds R.C., Pathak A.K., Pathak V., Finley-Woodman K., May R. D. Fractionation, structural studies, and immunological characterization of the semi-synthetic Quillaja saponins derivative GPI-0100 // Vaccines - 2003. - V.21. - P.3961-3971.

13. Al-Habori M., Raman A. Antidiabetic and hypocholesterolaemic effects of fenugreek // Phytotherapy Res. - 1998. - V.12. - P.233-242.

14. Jayatilake G.S., Freeberg D.R., Liu Z., Richheimer S.L., Blake M.E., Bailey D.T., Haridas V., Gutterman J.U. Isolation and structures of Avicinss D and G: In vitro tumor-inhibitory saponins derived from Acacia victoriae II J. Nat. Prod. - 2003. - V.66. - P.779-783.

15. Kubo S., Mimaki Y., Terao M., Sashida Y., Nikaido T., Ohmoto T. Acylated cholestane glycosides from the bulbs of Ornithogalum saundersiae II Phytochemistry. - 1992. - V.31. - P. 3969-3973.

16. Sakurai N., Wu J.-PI., Sashida Y., Mimaki Y., Nikaido T, Koike K., Itokawa H., Lee K.-H. Anti-AIDS agents. Part 57: Actein, an anti-HIV principle from the rhizome of Cimicifuga racemosa (black cohosh), and the anti-HIV activity of related saponins // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2004. - V.14. -P. 1329-1332.

17. Mimaki Y., Kuroda M., Kameyama, A., Sashida Y., Hirano T., Oka K., Maekawa R., Wada T., Sugita K., Beutler A.J. Cholestane glycosides with potent cytostatic activities on various tumor cells from Ornithogalum saundersiae bulbs // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 1997. - V.7 - P.633-636.

18. Kuroda M., Mimaki Y., Yokosuka A., Hasegawa F., Sashida Y. Cholestane glycosides from the bulbs of Ornithogalum thyrsoides and their cytotoxic activity against HL-60 leukemia cells // J. Nat. Prod. - 2002. - V.65. -P. 1417-1423.

19. Kingston D.G.I. Taxol, a molecule for all seasons // Chem. Commun.

- 2001. - P.867-880.

20. Schiff P.B., Fant J., Horwitz S.B. Promotion of microtubule assembly in vitro by taxol //Nature. - 1979. - V. 277. - P.665-667.

21. Tamura K., Honda Ii., Mimaki Y., Sashida Y., Kogo H. Inhibitory effects of a new steroidal saponin, OSW-1, on ovarian function in rats // British J. Pharm. - 1997. - V.121. - P.1796-1802.

22. Kuroda M., Mimaki Y., Yokosuka A., Sashida Y., Beutler A.J. Cytotoxic cholestane glycosides from the bulbs of Omithogalum saundersiae II J. Nat. Prod. -2001.- V.64. - P.88-91.

23. Guo C., Fuchs P.L. The first synthesis of the aglycone of the potent antitumor steroidal saponin OSW-1 // Tetrahedron Lett. - 1998. - V.39. -P. 1099-1102.

24. Ma X., Yu B., Hui Y., Xiao D., Ding J. Synthesis of glycosides bearing the disaccharide of OSW-1 or its 1-4 linked analogue and their antitumor activities // Carbohydr. Res. - 2000. - V.329. - P.495-505.

25. Mimaki Y., Kuroda M., Kameyama A., Sashida Y., Hirano T., Oka K., Dobashi A., Koike K., Nikaido T. A new rearranged cholestane glycoside from Omithogalum saundersiae bulbs exhibiting potent cytostatic activities on leukemia HL-60 and molt-4 cells// Bioorg. Med. Chem. Lett. - 1996. - V.6. -P.2635-2638.

26. Kuroda M., Mimaki Y., Sashida Y., Nikaido T., Ohmoto T. Structure of a novel 22-homo-23-norcholestane trisaccharide from Omithogalum saundersiae II Tetrahedron Lett. - 1993. - V.34. - P.6073-6076.

27. Ma X., Yu B., Hui Y., Miao Z., Ding J. Synthesis of OSW-1 analogues and a dimer and their antitumor activities // Bioorg. Med. Chem. Lett.

- 2001. - V.l 1. - P.2153-2156.

28. Deng L., Wu IT, Yu B., Jiang M., Wu J. Synthesis of OSW-1 analogs with modified side chains and their antitumor activities // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2004. - V.14. - P.2781-2785.

29. Guo C., LaCour T.G., Fuchs P.L. Cephalostatin support studies. 15. On the relationship of OSW-1 to the cephalostatins // Bioorg. Med. Chem. Lett. -1999.-V.9.-P.419-424.

30. Williams D. R., Kingler F. D., Dabral V. Synthesis of the optically active hexahydrobenzofuran nucleus of the avermectins // Tetrahedron Lett. -1988. - V.29. - P.3415-3418.

31. Houston T.A., Tanaka Y., Koreeda M. Stereoselective construction of 22-oxygenated steroid side chains by dimethylaluminum chloride-mediated ene reactions of aldehydes // J. Org. Chem. - 1993. - V.58. - P.4287 - 4292.

32. Luche J.L. Lanthanides in organic chemistry. 1. Selective 1,2-reductions of conjugated ketones // J. Amer. Chem. Soc. - 1978. - V.100. -P.2226-2227.

33. Batcho A.D., Berger D.E., Davoust S.G., Wovkulich P.M., Uskokovic M.R. Stereoselective Introduction of Steroid Side Chains at C (17) and C (20) // Helv. Chim. Acta. - 1981. - V.64. - P. 1682-1687.

34. Dess D.B., Martin J.C. Readily accessible 12-1-5 oxidant for the conversion of primary and secondary alcohols to aldehydes and ketones // J. Org. Chem. - 1983. - V.48. - P.4155-4156.

35. Yu W.S., Jin Z.D. A new strategy for the stereoselective introduction of -alkoxy vinyl cuprates: steroid side chain via Total synthesis of a highly potent antitumor natural product OSW-1 // J. Am. Chem. Soc. - 2001. -V.123. - P.3369-3370.

36. Yu W.S., Jin Z.D. Total synthesis of the anticancer natural product OSW-1 //J. Am. Chem. Soc. - 2002. - V. 124. - P.6576-6583.

37. Yu W.S., Jin Z.D. A facile generation of enolates from silyl enol ethers by potassium ethoxide // Tetrahedron Lett. - 2001. - V.42. - P.369-372.

38. Duhamel P., Cahard D., Poirier J. M. Unprecedented route to enolates from silyl enol ethers and enol acetates: reaction with hard and soft electrophiles // J. Chem. Soc., Perkin Trans.I. - 1993. - V. - 21. - P.2509 - 2511.

39. Morzycki J., Gryszkiewicz A., Jastrzebska I. Some reactions of

16a,17a-oxido-steroids: a study related to the synthesis of the potent anti-tumor Saponin OS W-1 aglycone // Tetrahedron - 2000. - V.41 - P.3751- 3754.

40. Morzycki J., Gryszkiewicz A., Jastrzebska I. Neighboring group participation in epoxide ring cleavage in reactions of some 16a,17a-oxidosteroids with lithium hydroperoxide // Tetrahedron - 2001. - V.57 - P.2185-2193.

41. Morzycki J., Wojtkielewicz A. Synthesis of a cholestane glycoside OSW-1 with potent cytostatic activity // Carbohydr. Res. - 2002. - V.337. -P.1269-1274.

42. Xu Q., Peng X., Tian W. A new strategy for synthesizing the steroids with side chains from steroidal sapogenins: synthesis of the aglycone of OSW-1 by using the intact skeleton of diosgenin // Tetrahedron Lett. - 2003. - V.44. -P.9375-9377.

43. Woodward R.B., Sondheimer F., Mazur Y. The mechanism of the isomerization of steroidal sapogenins at C-25 // J. Am. Chem. Soc. - 1958. -V.80. - P.6693-6694.

44. Xue J., Liu P., Pan Y., Guo Zh. A Total Synthesis of OSW-1 // J. Org. Chem. - 2008. - V.73. - P.157-161.

45. Shi B., Tang P., Hu X., Lu J.O., Yu B. OSW Saponins: Facile Synthesis toward a New Type of Structures with Potent Antitumor Activities // J. Org. Chem. - 2005. - V. 70. - P. 10354-10367.

46. Numazawa M., Nagaoka M., Osawa Y. Stereospecific Synthesis of 16a-Hydroxy-17-oxo Steroids by Controlled Alkaline Hydrolysis of Corresponding 16-Bromo 17-Ketones and Its Reaction Mechanism // J. Org. Chem. - 1982. -V.47. - P.4024-4029.

47. Ireland R.E., Mueller R.H. The Claisen Rearrangement of Allyl Esters //J. Am. Chem. Soc. - 1972. - V.94. -No. 17. - P.5897-5898.

48. Ireland R.E., Wipf P., Armstrong J.D. Ill Stereochemical Control in the Ester Enolate Claisen Rearrangement. 1. Stereoselectivity in Silyl Ketene Acetal Formation // J. Org. Chem. - 1991. - V. 56. - P.650-657.

49. Oare D.A., Heathcock C.H. Stereochemistry of the Michael Addition

of Ester and Ketone Enolates to a,ß-Unsaturated Ketones // J. Org. Chem. - 1990. - V.55. - P.157-172.

50. Corey E.J., Gross A.W. Higly selective, kinetically controlled enolate formation using lithium dialkylamides in the presence of trimethylchlorosilane // Tetrahedron Lett. - 1984. - V.25. - P.495-498.

51. Mazur Y., Danieli N., Sondheimer F. The Synthesis of the Steroidal Sapogenins // J. Am. Chem. Soc. - 1960 - V.82. - P.5889-5908.

52. Oka K., Hara S. Synthesis of y-Lactone Ring Fused to Steroidal Ring D of Salamander Alkaloids//J. Org. Chem. - 1978. -V. 43. -P.4408-4410.

53. Zhu X., Schmidt R.R. New Principles for Glycoside-Bond Formation //Angew. Chem. Int. Ed. - 2009. - V.48. -P.1900 -1934.

54. Baer H. H., Abbas S. A. Synthesis of O-a L-fucopyranosyl-(l-*3)-0-ß-D-galactopyranosyl-(l—>4)-D-glucose (3'-0-a-L-fucopyranosyllactose), and an Improved Route to its ß-(l"—>3')-linked Isomer // Carbohydr. Res. - 1980. -V.84. - P.53-60.

55. Paulsen Ii., Paal M. Synthese der tetra- und trisaccharid-sequenzen von asialo-GMi und -GM2- Lenkung der regioselektivität der glycosidierung von lactose // Carbohydr. Res. - 1985. - V.137. - P.39-62

56. Ogawa T. Haworth Memorial Lecture. Experiments directed towards glycoconjugate synthesis // Chem.Soc. Rev. - 1994. - V.23. - P.397 -407.

57. Windmuller R., Schmidt R.R. Efficient Synthesis of Lactoneo Series Antigens H, Lewis X (Lex), and Lewis Y (Ley) // Tetrahedron Lett. - 1994. - V.35. -P.7927-7930.

58. Schmidt R.R., Michel J. Facile Synthesis of a- and P-0-Glycosyl Imidates; Preparation of Glycosides and Disaccharides // Angew. Chem., Int. Ed. Engl. - 1980,-V. 19.-P.731-732.

59. Jin Z., Yu W. Process for preparing saponin compounds // U.S. Pat. 2003069214 Al. Appl. Publ. 04.2003.

60. Clode D.M. Carbohydrate cyclic acetal formation and migration // Chem. Rev. - 1979. - V.79. - P.491-513.

61. Lee E.E., Wood J.O. Partial acetylation of ß-L(and L)-arabinose and

1 7

methyl ß-L(and L)-arabino-pyranoside and related C NMR studies // Carbohydr. Res. - 1981.- V.89.-P.329-333.

1

62. Bock K., Pedersen C. A Study of CH coupling constants in pentopyranoses and some of their derivatives // Acta Chem. Scand. - 1975. -V.29B. - P.258-264.

63. Feier H., Westphal O. Über die p-Aminophenyl-a- und -ß-glykoside von L- und D-Arabinose // Chem. Ber. - 1956. - V.89. - P.589-593.

64. Krog-Jensen C., Oscarson S. Efficient synthesis of differently protected methyl (ethyl l-thio-D-glucopyranosid)uronates and their evaluation as glucuronic acid donors and acceptors // Carohydr. Res. - 1998. - V.308. - P.287-296.

65. Shi B., Wu H., Yu B., Wu J. 23-Oxa-analogues of OSW-1: Efficient synthesis and extremely potent antitumor activity // Angew. Chem., Int. Ed. 2004. - V.43. - P.4324-4327.

66. Shi B, Tang P., Hu X, Liu J.O., Yu B. OSW Saponins: Facile synthesis toward a new type of structures with potent antitumor activities // J. Org. Chem. - 2005. - V.70. - P.10354-10367.

67. Qin H.-J., Tian W.-S., Lin C.-W. A highly efficient synthesis of 22-deoxy-OSW-1 by utilizing the intact skeleton of diosgenin // Tetrahedron Lett. -2006.-V. 47. - P.3217-3219.

68. Morzycki J. W., Wojtkielewicz A. Synthesis of a highly potent antitumor saponin OSW-1 and its analogues // Phytochem. Rev. - 2005. - V.4. -P.259-277.

69. Matsuya Y., Itoh T., Nemoto H. Total Synthesis of A-Nor B-Aromatic OSW-1 Aglycon: A Highly Effective Approach to Optically Active trans-4,5-Benzhydrindane // Eur. J. Org. Chem. - 2003. - V.2003. - No. 12. - P. 2221-2224.

70. Zheng D., Zhou L., Guan Y., Chen X., Zhou W., Chen X., Lei P. Synthesis of cholestane glycosides bearing OSW-1 disaccharide or its 1—>4-linked analogue and their antitumor activities // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2010. - V.20.

- P. 5439-5442.

71. Guan Y., Zheng D., Zhou L., Wang H., Yan Zh., Wang N., Chang Ii., She P., Lei P. Synthesis of 5(6)-dihydro-OSW-l analogs bearing three kinds of disaccharides linking at 15-hydroxy and their antitumor activities // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2011. - V.21. - P. 2921 -2924.

72. Tang P., Mamdani F., Hu X., Liu J.O., Yu B. Synthesis of OSW saponin analogs with modified sugar residues and their antiproliferative activities // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2007. - V. 17. - P. 1003-1007.

73. Morzycki J.W., Wojtkielewicz A., Wolczynski S. Synthesis of analogues of a potent antitumor saponin OSW-1 // Bioorg. Med. Chem. Lett. -2004. - V. 14. - P.3323-3326.

74. Kruszewska A., Wilczewska A.Z., Wojtkielewicz A., Morzycki J.W. Synthesis of 23-oxa-22-deoxo analogues of OSW-1 aglycone // Pol. J. Chem. -2006.-V.80.-P.611-615.

75. Wojtkielewicz A., Dtugosz M., Maj J., Morzycki J.W., Nowakowski M., Renkiewicz J., Strnad M., Swaczynova J., Wilczewska A.Z., Wojcik J. New Analogues of the Potent Cytotoxic Saponin OSW-1 // J. Med. Chem. - 2007. -V.50. -P.3667-3673.

76. Tsubuki M., Matsuo S., Honda T. A new synthesis of potent antitumor saponin OSW-1 via Wittig rearrangement // Tetrahedron Lett. - 2008. - V.49. -P.229-232.

77. Kessar S.V., Rampal A.L. Synthetic studies in steroidal sapogenins and alkaloids III: The synthesis and stereochemistry of isomeric 16-hydroxy- and 16-0x0-5,17(20)-pregnadien-3(3-ols // Tetrahedron Lett. - 1968. - V.24. - P. 887892.

78. Hanessian S., Delorme D., Dufresne Y. Mild cleavage of methoxymethyl ethers with trimethylsilyl bromide // Tetrahedron Lett. - 1984. -V.25.-P.2515-2518.

79. Heatcock C.H., Vong S.D., Hagen J.P., Pilli R.3 Badertcher U. Acyclic stereoselection. 25. Stereoselective synthesis of the C-l to C-7 moiety of erythronolide A // J. Org. Chem. - 1985. - V.50. - P.2095-2105.

80. Ley S.V., Baeschlin D.K., Dixon D.J., Foster A.C., Ince S.J., Priepke

H.W.M. 1,2-Diacetals: A New Opportunity for Organic Synthesis Reynolds D.J. // Chem. Rev. - 2001. - V. 101. - P. 53-80.

81. Barlow J.S., Dixon D.J., Foster A.C., Ley S.V., Reynolds D.J. New building blocks for efficient and highly diastereoselective polyol production— synthesis and utility of (R',R',S,S) and (S',S',R,R)-2,3-butane diacetal protected butane tetrol derivatives // J. Chem. Soc. Perkin Trans I. - 1999. - P. 1627-1630.

82. Ley S.V., Polara A.A Fascination with 1,2-Diacetals // J. Org. Chem. -2007.-V.72. - P. 5943-5959.

83. Yu B., Tao H. Glycosyl trifluoroacetimidates. Part 1: Preparation and application as new glycosyl donors // Tetrahedron Lett. - 2001. - V.42. - P.2405-2407.

84. Tamura K., Mizukami PI., Maeda K., Watanabe H., Uneyama K. One-pot synthesis of trifluoroacetimidoyl halides // J. Org. Chem. - 1993. - V.58. -P.32-35.

85. Kochetkov N.K., Khorlin A.J., Bochkov A.F. New syntesis of glycosides // Tetrahedron Lett. - 1964. - V.5. - P.289-293.

86. Uriel C., Ventura J., Gomez A.M., Lopez J.C., Fraser-Reid B. Methyl

I,2-Orthoesters as Useful Glycosyl Donors in Glycosylation Reactions: A Comparison with n-Pent-4-enyl 1,2-Orthoesters // Eur. J. Org. Chem. - 2012. -P.3122-3131.

87. Pedersen C.M., Nordstrom L.U., Bols M. "Super Armed" Glycosyl Donors: Conformational Arming of Thioglycosides by Silylation // J. Am. Chem. Soc. - 2007. - V. 129. - P. 9222-9235.

88. Mydock L.K., Demchenko A.V. Mechanism of chemical O-glycosylation: from early studies to recent discoveries // Org. Biomol. Chem. -2010.-V. 8.-P. 497-510.

89. Bock K., Pedersen C.A Study of 13CIi Coupling Constants in Hexopyranoses //J. Chem. Soc. Perkin Trans 2. - 1974. - P. 293-297.

90. Yan L., Kahne D. Generalizing Glycosylation: Synthesis of the Blood Group Antigens Lea, Leb, and Lex Using a Standard Set of Reaction Conditions // J. Am. Chem. Soc. 1996. - V.l 18. - P. 9239-9248.

91. Chaosuancharoen N., Kongkathip N., Kongkathip B. A Novel Synthetic Approach from Diosgenin to a 17a-Hydroxy Orthoester via a Regio- and Stereo-Specific Rearrangement of an Epoxy Ester // Synthetic Commun. - 2004. -V.34. - P.961-983.

92. Fernández-Herrera M. A., López-Muñoz H., Hernández-Vázquez J.M.V., López-Dávila M.,. Escobar-Sánchez M. L, Sánchez-Sánchez L., Mario Pinto B., Sandoval-Ramírez J. Synthesis of 26-hydroxy-22-oxocholestanic frameworks from diosgenin and hecogenin and their in vitro antiproliferative and apoptotic activity on human cervical cancer CaSki cells // Bioorg. Med. Chem. -2010. - V. 18. - P.2474-2484.

93. Micovic I.V., Ivanovic M.D., Piatak D.M. Simplified Preparation of 16-Dehydropregnenolone Acetate // Synthesis. - 1990. -N.7. - P.591-592.

94. Marker R.E., Wagner R.B., Ulshafer P.R., Wittbecker E.L., Goldsmith D.P.T., Ruof C.H. Steroidal Sapogenins // J. Am. Chem. Soc. - 1947. - V.69. -P.2167.

95. Julian P.L., Meyer E.W., Karpel W.J., Ryden Waller I. Sterols. XI. 17a-Hydroxy-11-desoxycorticosterone (Reichstein's Substance S) // J. Am. Chem. Soc. - 1950. - V.72. - N.l 1. - P.5145-5147.

96. Shingate B.B., Hazra B.G., Pore V.S., Gonnade R.G., Mohan M. Bhadbhade Stereoselective syntheses of unnatural steroidal C(20R) aldehydes by ionic hydrogenation of C-20 tertiary alcohols // Tetrahedron Lett. - 2006. - V.47. - P.9343-9347.

97. Shingate B.B., Hazra B.G., Pore V.S., Gonnade R.G., Mohan M. Bhadbhade Stereoselective syntheses of 20-epi cholanic acid derivatives from 16-dehydropregnenolone acetate // Tetrahedron. - 2007. - V.63. - P.5622-5635.

98. Ахрем А.А., Дубровский В.А., Камерницкий А.В., Скорова А.В. Ацетолиз ацетата 16а,17а-окисидегидропрегненолона и синтез Д5-прегнентриол-3р,16р,17<х-она-20 // Изв. АН ССР. Сер. хим. - 1969. - №.12. -С.2782-2800.

99. Rincón S, Rosa E.R., Sandoval-Ramirez S, Meza-Reyes S., Montiel-Smith S., Fernandez M.A., Farfan N., Santillan R. A new route for the preparation of the 22,23-dioxocholestane side chain from diosgenin and its application to the stereocontrolled construction of the 22/?,23<S'-diol function // Tetrahedron. - 2006.

- V.62.-P.2594-2602.

100. Sandoval-Ramírez J., Castro-Méndez A., Meza-Reyes S., Reyes-Vázquez F., Santillán R., Farfá N. Preparation of 22,26-epoxycholest-22-ene steroids. Novel transformation of the side chain in sapogenins // Tetrahedron Lett.

- 1999.- V.40.-P.5143-5146.

100. Maereker A. The Wittig Reaction // Organic Reactions. - 1965. -V. 14. - P.270.

101. Maryanoff B.E., Reitz A.B. The Wittig Olefination Reaction and Modifications Involving Selected Synthetic Aspects Phosphoryl-Stabilized Carbanions. Stereochemistry, Mechanism, and Selected Synthetic Aspects // Chem. Rev. - 1989. - V.8. - P. 863-927.

102. Pine S.H., Shen G.S., Hoang H. Ketone Methylenation Using the Tebbe and Wittig Reagents - A Comparison // Synthesis. - 1991. - P. 165-166.

103. Ghosh A., Chakraborty I., Adarsh N.N., Lahiri S. Wittig-selectivity in mixed ketones: exploring 1,3-interaction and enolization. // Tetrahedron. - 2010. -V.66. - P.164-171.

104. Clawson L., Buchwald S.L., Grubbs R.H. The methylenation of enolizable ketones and esters using organotitanium chemistry // Tetrahedron Lett. -1984.-V.25.-P. 5733-5736.

105. Corey E.J., Kang J., Kyler K. Activation of methylenetriphenylphosphorane by reaction with t-butyl- or sec-butyllithium // Tetra hedron Lett. - 1985. - V.26. - P. 555-558.

106. Keuss H.A.C.M., Lakeman J. Some rearrangements initiated by methylene triphenylphosphorane // Tetrahedron. - 1976. - V.32. - P. 1541-1548.

107. Okuma K., Tsubakihira K., Tanaka Y., Koda G., Ohta H. Novel reaction of methylenetriphenylphosphorane with epichlorohydrin leading to alkylidenecyclobutanols // Tetrahedron Lett. - 1995. - V.36. - N.31. - P.5591-5594.

108. Aitken R.A., Cleghom L.P., Leitr R.M., Morril L.C., Slawin A.M.Z. Unexpected Rearrangement Leading to Formation of a 1,3-Bis(triphenylphosphonio)prop-l-en-3-idyl Carboxylate // European J. Org. Chem. -2010,-V.17. -P. 3211-3214.

109. Bestmann H.J., Kranz E.A. New Ring-Closure Reaction // Angew. Chem. Int. Ed. Engl. - 1967. - V.6. - P.81-82.

110. Sato Y., Ikekawa N. The Chemistry of the Spiroaminoketal Side Chain of Solasodine and Tomatidine. III. The Reaction of 0,N-Diacetylsolasodine in Acidic Media // J.Org.Chem. - 1960. - V.25. - P.789-791.

111. Gonzalez A.G., Freire R., Francisco C.G., Salazar J.A., Suarez E. New sources of steroid sapogenins-XIX. 1. 20S-hydroxyvespertilin, a new steroid lactone from Solarium vespertilio II Tetrahedron. - 1973. - V. 29. - P. 1731-1734.

112. Gonzalez A.G., Darias V., Suarez M.C., Janssen K. Preliminary pharmacobiological study of new steroidal sapogenins // II Farmaco Ed. Sci. -1983.-V.38.-P.3-8.

113. Mola Garate J.L., Suarez Garcia L., Perez Martinez C.S., Iglesias-Artega M.A., Coll Herrera D., Coll Manchado F. Synthesis of a New Bisnorcholanic Lactone // Synth.Commun. - 2003. - V.33. - P.1203-1209.

114. Rosado-Abon A., de Dios-Bravo G., Rodriguez-Sotres R., Iglesias-Arteaga M.A. Synthesis and plant growth promoting activity of dinorcholanic lactones bearing the 5_-hydroxy-6-oxo moiety // J. Steroid Biochem. Molec. Biol. -2013.- V.134.-P. 45-50.