Синтез полимерных суспензий медико-биологического назначения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Лобанов, Андрей Николаевич

• Лобанов, Андрей Николаевич
• кандидат химических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат химических наук Лобанов, Андрей Николаевич

Введение.

Глава I. Литературный обзор.

1.1. Полимерные микросферы как носители биолигандов для создания тест-систем.

1.2. Синтез полимерных суспензий методом затравочной полимеризации.

Глава И. Экспериментальная часть.

II. 1 Исходные вещества.

II.2 Методы исследования.

Глава III. Результаты и их обсуждение.

XII. 1. Состояние проблемы по синтезу полимерных суспензий биомедицинского назначения.

III.2. Синтез затравочных полистирольных частиц методом полимеризации стирола в отсутствие эмульгатора.

III.2.1. Проблемы удаления остаточного мономера из объёма полимерных микросфер.

111.3. Затравочная полимеризация мономеров различной природы.

III.3.1. Рентгеноэлектронное исследование межфазного слоя полимерных микросфер.

111.4. Создание тест-систем на фибронектин.

111.5. Получение антительных диагностических тест-систем

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез полимерных суспензий медико-биологического назначения»

Полимерные микросферы нашли широкое применение в качестве носителей биолигандов при создании диагностических тест-систем, принцип работы которых основан на специфической иммунохимической реакции между антителом и антигеном. В этом случае полимерные микросферы должны содержать на поверхности специальные метки (флуоресцентные, хромофорные), быть окрашенными, иметь функциональные группы для ковалентного связывания с соответствующими группами биолиганда, либо на их поверхности должны содержаться специально добавленные лиганды для аффинного связывания с биолигандом и т.д. Кроме того, они должны обладать биологической, химической и коллоидной устойчивостью в физиологических растворах и биологических средах, иметь узкое распределение частиц по размерам и содержать специфический биолиганд на поверхности в определенной оптимальной концентрации для обеспечения высокой чувствительности реакции.

Сочетание таких свойств требует специального подхода к их синтезу, в процессе которого многие из выше указанных требований должны быть удовлетворены.

Выполнение высоких требований к полимерным микросферам, особенно возросших в последние годы в связи с решением сложных биологических проблем, требует нахождения пути к регулированию формирования состава межфазного слоя частиц, который определяет их устойчивость, возможный способ иммобилизации биолиганда.

Для решения этого вопроса необходимо систематическое исследование свойств частиц полимерных суспензий различной природы и изучение влияния состава их межфазного слоя на устойчивость частиц, иммобилизацию биолигандов и чувствительность биохимической реакции.

Цель работы состояла в синтезе полимерных суспензий с определенным строением межфазного слоя частиц для их использования в качестве носителей биолигандов и создания систем различного биомедицинского назначения.

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Лобанов, Андрей Николаевич

128 Выводы

1. Определены условия синтеза полимерных микросфер, отвечающих требованиям, предъявляемым к носителям биолигандов, и на их основе созданы тест-системы на фибронектин и на различные инфекционные и вирусные заболевания.

2. Впервые методом рентгеноэлектронной спектроскопии проанализирован состав межфазного слоя полимерных микросфер различного строения. Показано, что в межфазном адсорбционном слое частиц содержатся функциональные группы сомономеров, входящих в состав сополимерной цепи, инициатора, ПАВ-поливинилпирролидона и додецилсульфата натрия.

3. Проведено сопоставление различных методов удаления остаточного мономера из полимерных микросфер. Показано, что наиболее эффективная очистка полимерных суспензий от остаточного мономера происходит при радиационном облучении.

4. Установлено, что исключить агрегацию полимерных микросфер, полученных затравочной сополимеризацией стирола, стиролсульфоната натрия и акролеина, в буферных растворах возможно, если в их межфазном слое содержаться взятые в определенном массовом соотношении альбумин и поливинилпирролидон с молекулярной массой

10

40000 и их число не превышает 10 на мл суспензии.

5. Определены оптимальные условия совместной адсорбции желатины и альбумина на поверхность полистирольных микросфер, обеспечивающих получение высокоспецифичной и высокочувствительной тест-системы на фибронектин.

6. Проведена апробация синтезированных тест-систем в лабораторных условиях с положительным результатом.

Заключение.

Синтез полимерных суспензий проводили эмульсионной полимеризацией в отсутствие эмульгатора, затравочной сополимеризацией мономеров различной природы в присутствии растворимых и нерастворимых в воде ПАВ. Добавление флуоресцентной метки или окрашивание полимерной суспензии проводили в процессе их синтеза, а также после полной конверсии мономера. Основной особенностью всех видов полимеризации было создание условий для формирования устойчивых в процессе синтеза частиц с диаметрами в интервале 09-1,5 мкм. и узким распределением по размерам. Получены таким образом полимерные микросферы с различным составом межфазного адсорбционного слоя; межфазным слоем, состоящим только из полимера и ионогенных фрагментов молекул инициатора (персульфата калия), содержащим функциональные группы полимера, способные непосредственно взаимодействовать с функциональными группами биолиганда (альдегидные группы), и после их активирования (карбоксильные), функциональные группы молекул ПАВ (карбоксильные), а также молекулы полимерных ПАВ-поливинилпирролидона и альбумина.

Замена водной фазы на физилогический раствор показала, что поведение полимерных суспензий различно и зависит от строения межфазного слоя частиц. Частицы, содержащие в межфазном слое поливинилпирролидон, были устойчивы, но на их поверхность не происходило физической адсорбции таких биолигандов как желатина, протеин А, столбнячный анатоксин и их использование в качестве носителей биолигандов оказалось возможным только в присутствии в межфазном слое частиц альдегидных или карбоксильных групп, к которым было возможно ковалентно присоединить функциональные группы биолиганда.

Частицы, несодержащие поливинилпирролидон в межфазном слое, образовывали в физиологическом растворе и других биосредах агрегаты, т.е. не обладали необходимой для дальнейшего использования устойчивостью.

Их применение в биоанализе оказалось возможным только после дополнительной адсорбции на поверхность частиц полимерного ПАВ-альбумина в определенной концентрации.

Частицы синтезированных полимерных суспензий были использованы для создания тест-систем различного биомедицинского назначения.

При создании тест-системы на фибронектин в межфазном слое полимерных микросфер должна была находится желатина в определенной концентрации, физически сорбированная или ковалентно связанная для аффинного взаимодействовия с фибронектином. Предварительный анализ желатины различного производства (костно-щелочной, костно-щелочной, модифицированной путем добавления формальдегидного дубителя ЛИКИ-1, или алкильного радикала С8) позволил выбрать для исследований костно-щелочную желатину. Ее физически сорбировали на поверхность частиц и ковалентно связывали с поверхностными карбоксильными группами полимера. Подробные исследования по влиянию состава межфазного слоя частиц, способа иммобилизации на их поверхность желатины и температуры (определяющей ее конформацию "клубок", "спираль") на чувствительность РЛА, показали, что для создания теста на фибронектин предпочтительно использовать полимерные микросферы, содержащие в межфазном слое альбумин и желатину в определенном массовом соотношении, и карбоксильные или альдегидные группы полимера для ее ковалентного связывания.

В этих исследованиях была обнаружена причина, не позволяющая создавать антительные тест-системы с использованием специфического у-глобулина. Эта причина состояла в том, что в общем пуле содержание специфического у-глобулина было мало по сравнению с неспецифическим. В этом случае на поверхность микросфер сорбировался в основном неспецифический у-глобулин и чувствительность РЛА была ничтожной.

Решить проблему создания антительной тест-системы удалось путем использования сывороток с высоким титром специфического у-глобулина.

В процессе решения этой задачи были решены и другие проблемы, такие как выделение у-глобулина из биосреды за счет аффинного взаимодействия его с протеином А, ковалентно связанным с поверхностными функциональными группами полимера микросфер; и создание антительной тест-системы на столбнячный анатоксин с использованием очищенного от других сывороточных белков у-глобулина, несодержащего Fc-фрагмент, ковалентно связанного с поверхностными карбоксильными группами полимера микросфер.

Полученные антительные диагностикумы оказались высоко чувствительны.

Полимерные микросферы, межфазный адсорбционный слой которых состоял из желатины, желатины с аффинно связанным фибронектином, протеином А, были использованы для детекции поверхностных клеточных рецепторов (клеточного фибронектина, фибронектинового клеточного рецептора, иммунных комплексов).

Полученные результаты отличались от известных в литературе. Было показано, что лиганды, иммобилизированные на микросферах, взаимодействуют с клеточными рецепторами лейкоцитов

Для создания антительных тест-систем путем затравочной сополимеризазии стирола, стирлсульфоната натрия и акролеина были синтезированы полимерные микросферы, стабилизированные поливинилпирролидоном, альбумином и полидиметилсилоксаном. Обоснована целесообразность иммобилизации иммуноглобулина на поверхность полимерных микросфер через спейсор протеин А.

С использованием этих частиц созданы высокочувствительные тест-системы разной специфичности : иерсиниозный - к Yersinia enterocolitica серотипа 03, сальмонелезный к S. pulorum, к вирусу ИБК штамм HI20.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Лобанов, Андрей Николаевич, 2003 год

1. Singer J.M, Plotz С. The latex fixation test. I.Application to the serologis diagnosis of rheumatoid arthritis. // Am. J.Med.-1956. v.21 - p.888 - 893.

2. Чайка H.А. Применение реакции агглютинации латекса для диагностики паразитарных болезней. // Мед.паразитол. 1982. - №2. — с.65 - 72.

3. Демина А.А., Ильина Т.В. Специфические латекс-препараты в этиологической диагностике гнойных бактериальных менингитов. // Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. — 1985. №11. с.3-6.

4. Александрова И.А., Анцифирова Н.Г., Александров А.Д., Мороз А.Ф. Разработка метода латекс-агглютинации для диагностики синегнойной инфекции. // Ж-л микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. — 1986. -№4. -с. 10 -14.

5. Ruggeri F.M. Laboratory diagnosis of rotavirus infection in Diarrhoeal patienta by Immunoenzymatic and Latex agglutination assays. // Microbiol. -1992.- v.15. - №3. - p.249-257.

6. Temstet A. Evaluation of a monoclonal Antibody -Based Larex -agglutination Test for diagnosis of Cruptococ-cosis Comparison with two test using Polyclonal ant: - bodies. // J.Clin. Microbiol. - 1992. v.30. №10. - p.2544 -2550.

7. Hirschl A.M., Hirschl M.M., Berger J., Boffer M.L. Evaluation of a commercial latex test for serological diagnosis of helicobacter Pylor: infection in freated and untreafed patients. // Eur. J. Clin. Microbiol. - 1991. - v. 10. - №11. -p.971-974.

8. Leinonen M., Herva E. The latex agglutination test for the diagnosis of meningococcal and haemophilus influenzae meningitis. // Scand. J.Infect. Dis. -1977. v.9. - №3. -p.187-191

9. Severin W.P.J. Latex agglutination in the diagnosis of meningococcal meningitis.// J.Clin.Path. 1972. - v.25. - p. 1079 - 1982.

10. Bernard A., Vyskogil, Lauwerys R. Determination of a micraglobuline in human urine and serum by latex immunoassay. // J.Clin. Chem. -1982. - v.:27. -№6. -p.832 - 837.

11. Bernard A., Lauwerus R. Latex immunoassay of urinary albumin.// J.Clin. ' ~ Chem. Clin. Biochem. 1983. - v.21 -p.25-30.

12. Чайка H.А. Реакция агглютинации латекса. В кн.: серологическая диагностика паразитарных болезней. - М.: ВНИИМИБ 1982. - с. 14-25

13. Duagn. Latex agglutination test for cytomegalovirus antibody screening of transplant donors-impotant aspects. // Microbiol. Infect Dis. 1992. - v. 15 - №5. -p.407 - 409

14. Richardson I.R. Latex 34 Legionella pneumoplua species inentification using a commercial latex agglutination kit a potential gross-reaction problem with serogroup -12 //Med.Lab.Sci. 1992.-1992. - v.49. - №2. - p.144 - 146

15. Antifungal action of Carica -Papaya latex-isolation of fungal Cell Wall hydrolyzing enzymes.// Mycoses. 1991.-v.34. - №2. - 1.- p.469 - 477

16. Characteristics of inert beads provoking humoral immune responses in gallerin Mellonella Larval. // J.Insect Physiol. 1992. - v.38 - №7, - p.533-541

17. Misengard R.J. Development of rapid latex agglutination test for Periodontel Pathogens.// J.Periodontal. 1992. - v.63 - №7 - p.611-617

18. Parker S.P. Modified latex agglutination test for antibodies of Toxo plasma gondii in eluates from Guthrie cards.//J.Clin. Pathol. - 1992. - v.45 - №10 -p.907-909

19. Hazeleger W.C., Beumer R.R., Rombouts F.M. The use of latex agglutination test for determining Campylobacter species. //Microbiol. 1992.-apl. V.14 - №4-p.l81-184

20. Kanl R., Read J., Mattiasson B. Screening for plant lectins latex agglutination test.// Phytochemistry. -1991.-v.30 №12 - p.4005-4009

21. Гуркова E.M. Аффинная хромотография. // M., Мир. 1980. с. 174

22. Nathan C.F., Cohn Z.A.// J.Exp. Med., vol. 1981 №154.-p. 1539-1553

23. De Coster, Cambiaso, Masson. Immunological diagnosis of pregnancy in the mare agglutination of latex particles.// The riogenology.1980.-v.13 №6 -p.433-440

24. Singer J.M., The latex fixation test in rheumatoid disease/// AmJmed/-1961-v.31 p.766-775

25. Цанчев В., Повов н., Каларов С., Каракашов А. Лабораторная диагностика ревматических заболеваний. // София, 1964

26. Sam W.C. Latex agglutination assay for Delection of Cholera Toxin.// J.Clin.Microbiol.-1992-v.30 №9 - p.2518-2520

27. Sada E. Delection of Lipoarabinomannan as a diagnostic test for Tuberculosis.//.!.Clin.Microbiol.- 1992 v.30 - №9 - p.2415-2418

28. Перфдзе T.B., Халонен П. Иммунологическая диагностика вирусных инфекций. — М.: Медицина, 1985,-с,250

29. Evaluation of two Colored Latex kits the well colex Colour Salmonella test and the Well colex colour Shigella species.// J. Clin.Microbiol.-1992,-v.30 -p.2184-86

30. Hartig W., Paulke B.R., Bruckher G. Fiuorescent latex microspheres for rethograde tracing of neurons in mouse basal forebrain combines with immunocytochemistry a methodical approach.//Acta Histochem.-1992-v.42.-p.261-265

31. Heizmann W.R. Detection of Salmonella in Human Faeces by Rambach Agar and a Color latex agglutination assay.// Med.Microbiol. Lett.-1993.-May.-v.1.,2 №3 -p.131-137

32. Bernard A., Lauwerys R. Turbidimetric latex immunoassay for serum ferritin.// J.Immunol. Meth.-1984.-v/71 ,-pЛ41 -147

33. Delarrea L.B. Automated determination of streptolysin — 0 antibodies by a turbidimetric latex immunoassay method. //J.Clin.Immunoassay.-1992-v. 15-№3 -p. 182-186

34. Saada E. Detection of lipoarobinomannau as a diagnostic test for tuberculosis // J.Clin. Microbiol.-1992.-v.30-№9 p.2415-2418

35. Borque L. Automated quantition nephelometric latex immunoassay for determining Ferritin in human serum // J.Clin.Lab. Anal.-1992-v.6 №4 p.239-244

36. Collet-Cassart, Masson, Cambiaso. Automated particle-counting immunoassay for a-feroprotein. //J.Clin.Chem.-1981-v.27- №1-3,64-67

37. Limet, Collet-Cassart, Magnusson, Sauvage. Particle-counting immunoassay (PACIA) of ferritin. // J.Clin. Biochem. 1982-v.20 - p.141-147

38. Collet-Cassart, Magnusson,Lesne, Masson. Automated particle-counting immunoassay for digoxine. // Clin.Chem. 1981-v.27 -№7 - p.l205-1209

39. Polesky H., Hanson S. Comparison of viral hepatitis marker test methods based on AABB-Cap survey data.// Amer. J.Clin.Path.-1981-v.76-№4-p.521-524

40. Kario K., Matsuo Т., Kabayashi H., Matsuo M. Rapid quantitative evaluation of plazma D-Dimer levels in Thrombotic states using an automated latex photometric immunoassay.//Thromb.Res.-1992- May.- v.166- №2-3 p.179-189

41. Norde W. Adsorption of proteins from solution at the solid-liquid // Advan/ Colloid and Interface Sci. 1986. - v.25. No 4. P. 267-340

42. Камышный A.JI. Адсорбция глобулярных белков на твердых носителях: некоторые физико-химические характеристики // Ж. физ. химии. -1981.-т. 55.-Вып. З.-С. 562-580.

43. De Baillou N., Voegel J.C., Schmitt A. Adsorption of human albumin and librinogen onto heparin-like materials. Adsorption isoterms // Colloids and Surfaces. 1985. - v. 16. - P. 271-288.

44. Van Dulm P., Norde W. The adsorption of human plasma albumin on solid surfaces, with special attention to the kinetic aspects. // J. Colloid and Interface Sci. 1983. -v.91. -No. 1. -P. 248-255.

45. Ivarsson B.A., Hegg P.O., Lundstrom K.I., Jansson V. Adsorption of proteins on metal surfaces studied by ellipsometric and capacitance measurements. // Colloids and Surfaces. 1985. - v. 13. - P. 169-192.

46. Norde W., Fraaye J.G.E.M., Lyklema J. Protein adsorption at solid-liquid interfaces: a colloid-chemical approach. // ASC Symposium Series. 1987. No. 343.-P. 36-47.

47. Norde W., Mac Ritchie F., Nowicka G., Lyklema J. Protein adsorption at solid-liquid interfaces: reversibility and conformation aspects. // J. Colloid and interfaces Sci. 1986. - v. 112. -No.2. - P. 447-456.

48. Norde W., Lyklema J. The adsorption of human plasma albumin and bovine pancreas ribonoclease at negatively charged polystyrene surfaces. // J. Colloid and Interface Sci. 1978. - v.66. - No. 2. - P. 257-302.

49. Lyklema J., Norde W., Biopolymer adsorption with special reference to the serum albumin-polystyrene latex system. // Croat. Chem. Actia. 1973. - v.45. -No. l.-P. 67-84.

50. Fair B.D., Jamieson A.M. Studies of protein adsorption on polystyrene latex surfaces. // J. Colloid and Interface Sci. 1980. - v.11. - No. 2. - P. 525-534.

51. Kawaguchi H., Amagasa H., Hagiya T., Kimura N., Ohtsuka Y. Interaction between proteins and latex particles having different surface structures. // Colloids and Surfaces. 1985. - v. 13. - P. 295-311.

52. Bagchi P., Birnbaum S.M. Effect of pH on the adsorption of immunoglobulin G on anionic polyvinyl toluene model latex particles. // J. Colloid and Interface Sci. 1981. - v.83. - No. 2. - P. 460-478.

53. Kondo A., Kawanot Т., Higashitani K. Immunological agglutination kinetics of latex particles with covalently immobilized antigens. // J. Ferment Boieng. 1992. - v.73. - No. 6. - P. 435-439.

54. Kasuya Y., Fujimota K., Miyamoto M., Jujit Т., Otaka A. Preparation of peptide-carrying microspheres with bioactivity on platelets. // J. Biomater Sci-Polym. Ed. 1993. - v.4. - No. 4. - P. 369-380.

55. Yamada Т., Muzamatsu N., Kondo T. Phagocytosis of monosaccharide-Binding latex particles by buinea Pig Poly

56. Kondo A., Yamasaki R., Higashitani K. Affinity purification of antibodies using immunomicrospheres. //J.Ferment Bioeng.-1992-v.74-№4 -p.226-232

57. Nathar C.F., Cohn Z.A. // J.Exp.Med. vol.1981 - №154-p.l539-1553

58. Quash G., HagerH.//U.S.Pat. 3857931(1974).

59. Dorman L.C. // U.S.Pat. 4045384(1977).

60. Srere P.A., Uyeda K. «Methode in enzimology» v.XLIV., acad. Press. N.Y. - №2.-P.l 1-19., 1976.

61. Molday and Coll.//J. of cellular biology, vol.64.-1975.

62. Conda Met. And Coll.//J.Virology v.36 - p.572-576.-1978.

63. Harkins W.D. General theory of the reaction loci in emulsion polymerization. -Y.Chem.Phys., v.69, 1954, №6, p.1428-1444

64. Smith W., Ewart R. Kinetics of emulsion polymerization. Y.Chem.Phys., v.l6, 1948, №6, p.592-599

65. Медведев C.C., Хомиковский П.М., Шейнкер А.П., Заболоцкая Е.В., Бережной Г.Д. Закономерности эмульсионной полимеризации. Проблемы физической химии, 1958, вып.1, с.5-17

66. Ugelstad I., Mork Р.С. Kinetics and mechanism of emulsion polymerization.- Amer.Chem.Soc.Polym.Prepr., 1980, v.21, №2, p.291

67. Ширман П. Эмульсиию Перевод под редакцией Абрамзона А.А., Л., Химия, 1972, 448 с.

68. Prince Z.M. The theory of emulsion/ The negative surface tension on the oil/ water interfase. -I.Coll.Interf.Sci., 1967, v.23? №2, p.165-173

69. Ugelstad t. ,E1-Asser M.S., Vanderhoff I.W. Emulsion polymerization: initiation of polymerization in monomer droplets.- I.Polym. Sci. Polym.Zett.Ed., 1973, v.ll, №8, p.503-513

70. Ugelstad I., Hansen F.K. Kinetics and mechanism of emulsion polymerization Rubber Chem.and Technol., 1976, v.49, №3, p.536-609

71. Грицкова И.А., Седакова Л.И., Мурадян Д.С, Синекаев БМБ, Павлов А.В., Праведников А.Н. Топохимия и массоперенос при эмульсионной полимеризации. ДАН СССР, 1978, Т.243, №2, С.403-406

72. Hagiopol С., Dimonil V. Some aspects of suded emulsion polymerization of water soluble and non - soluble vinil monomers. - Acta Polym., 1981, №7, v.32, p.390-397

73. Chamber I.S., Smitham I.B., Napper D. H. Theoretical study of effects of surfactants on suded polymerization. T.Appl Polym. Sci.Polym. Symp., 1975, v. №49, p. 169-174

74. Hawkett B.S., Napper D.H., Gibbert R.G. Suded polymerization of styrene T.Chem. Soc.Faraday Trans, 1980, v.76, Part 1, №6, p. 1323-1343

75. Grancio M.R., Williams D.T. The morphology of the mononer polymer particles instyrene emulsion polymerization T.Polym.Sci., 1970, v.8, №9

76. Grancio M.R., Williams D.T. Molecular weight development in constant rate styrene emulsion polymerization T.Polym.Sci., 1970, №10, p.2733-2745

77. Tee D.T. Morphology of two-stage latex particles. Polystyrene and styrene-butadiene copolymer pair systems in Emulsion polymer and Emulsion polymerization ACS Symp. Ser., 1981, p.405-414

78. Okuba M., Katsuta Т., Matsumoto I. Rubture of anomalous composite particles prepared bysteden emulsion polymerization in aging period — T.Polym.Sci. Polym. Tett Ed.,1980, v.18, № 7

79. Okuba M., Ando M. Anomalous composite polymer emulsion partcles with voids produced by suded emulsion polymerization. -T.Polym.Sci. Polym Tett.Ed., 1981, v.18, №3,p.l43-147

80. Chainey M., Hearn Т. Preparation of overcoateed polymer lattices by a «short-growth» technique Brit. Polym Т., 1981, v. 13, №3, p. 132-186

81. Chainey M., Wilkinson M.C.Preparation of overcoated polymer lattices by a «short-growth» technique Lnd.Eng.Chem.Prod.Res.Dev., 1982, v.21, №2, p.171-176

82. Елисеева В.И., Титова H.B., Чалых A.E., Сломинский Г.Д. Структурно-морфологические превращения латексных частиц в процессе двухстадийной эмульсионной полимеризации. ДАН СССР, 1981, т.261, №2, с.402-405.

83. Грицкова И.А., Прокопов Н.И., Э. Гжива, И. Гжива-Никсиньска, E.H. Звонкова, В.А. Быков Способ получения монодисперсных полистирольных суспензий. Патент Республики Польша № 179375 от 31.08.2000г.

84. Басырева Л.Ю. Создание диагностических тест-систем на основе полимерных суспензий и факторы, определяющие их чувствительность и специфичность: Дисс.канд. хим. наук Москва, 1994г., 127 стр.

85. Прокопов Н.И. Синтез полимерных суспензий с узким распределением частиц по размерам методом гетерофазной полимеризации: Дисс.доктора хим. наук., Москва 1999г.,

86. J С Daniel Makromol. Chem., Suppl. 10/11 359 (1985)

87. ALL Palluel, M J Westly, С W A Bromley, S P Davies, A J Backhouse Makromol. Chem., Suppl. 35/36 509 (1990)

88. Y S Kim, M Ballauff Morfology of Composite Latex Particles of poly(styrene) and poly(methyl methacrylate). FRG, Karlsuhe: Polymer-Institut

89. VI Eliseeva Progress in Organic Coatings 13 195 (1985)

90. E В Brandford, J W Vanderhoff J. Polymer Sei. С 3 41 (1963)

91. T J Min, A Klein, M S El Aasser, J W Vanderhoff J. Polym. Sei., Polym. Chem. Ed. 21 2845(1983)

92. К Kato Kolloid Z. Z. Polym. 220(1) 24 (1967) Polymer 8 33 (1967).

93. T Matsumoto, M Okubo, T Tmai Kobunshi Ronbunshu 36( 17) 459 (1979)

94. G Kanig, H Neff J. Colloid Polymer Sei. 253 29 (1975)

95. T Paxton J. Colloid Interface Sei. 31(1) 19 (1969)

96. L R Erickson, K L Hoy ACS Symposium Series 165 (1981)

97. R Arshady Suspension, Emulsion, and Dispersion Polymerization -A Methodological Survey Colloid and Polymer Science 270 717(1992)

98. J-E L Jonsson, H Hassander, L H Jansson, B Tornel Macromolecules 24 126(1991)

99. Yi-Chern Chen, V L Dimonie, S El Aasser J. Appl. Polym. Sei. 42 1049 (1991)

100. S A Chen, ST Lee, S J Lee Polymer International 30 461 (1992)

101. A Okubo Appl. Polym. Sei. 39 1453 (1987)

102. L Rios, M Hidalgo, J Y Cavaille, J Guillot, A Guyot, C Pichot Colloid Polym Sei. 269 812(1991)

103. A Cruz-Rivera, L Rios, C Monnet, B Schlund, J Guillot, C Pichot Polymer 60 1873 (1989)

104. V Dimonie, M S EL Aasser, A Klein, J W Vanderhoff AICHE Meeting Houston (1983)

105. WD Hergert, K Schmutzler, S Wartevig Macromol. Chem., Macromol. Symp. 31 123 (1990)

106. J Y Cavalle, C Jourdan, J Peres, J Guillot J. Macromol. Chem., Macromol. Symp. 23 123 (1990)

107. M J Devon, J I Gardon, G Roberts, A Rudin J. Appl. Polym. Sei. 39 2119 (1990)

108. D Y Lee, T Ishikava J. Polym Sei., Polym. Chem. Ed. 21 147 (1983)

109. I W Choi, K WLee J. Appl. Polym. Sei. 30 1903 (1985)

110. M Okuba, N Miyachi, Y Lu Colloid Polymer Sei. 272 270(1994)

111. T Matsumoto, M Okubo, S Shibao Ibid 33(10) 575 (1976)

112. M Okubo, Y Katsuto, T Matsumoto J. Polym. Sei., Polym. Lett Ed. 18 478 (1980)

113. M Okubo, M Ando, A Yamada,Y Katsuada, T Matsumoto J. Polym. Sei., Polym. Lett Ed. 19 143 (1981)

114. M Okubo, Y Katsuada, T Matsumoto J. Polym. Sei., Polym. Lett Ed. 20 45 (1982)

115. G E Molau J. Polym. Sei. Part A 3 1267 (1965)

116. GE Molau J. Polym. Sei. Part A 3 4235 (1965)

117. Y Ikada, F Horii, I Sakurada J. Polym. Sei., Polym Chem. Ed. 11 27 (1973)

118. F Horii, Y Ikada, I Sakurada J. Polym. Sei., Polym Chem. Ed. 11 27 (1973)

119. GE Molau Kolloid Z.Z. Polym.238 493 (1970)

120. R H Somani, M T Shaw Macromolecules 14 1549 (1981)

121. S Krause Colloidal and Morphological Behavior of Block and Graft Copolymer Plenum, New York (1971)

122. C H Bamford, G C Eastmond, D Whittle Polymer 12 141 (1977)

123. L H Sperling J. Polym. Sei., Macromolecul. Rev. 11 122 (1977)

124. L M Shevchuk, Ye N Milchenko, A V Zaitseva, A Ye Kulikova Vysokomol. Soedin., Ser. B 20 897 (1978)

125. LH Sperling, T W Chiu, C P Hartman, D A Thomas Intern. J. PolymericMater 1 333 (1972)

126. LH Sperling, T W Chiu, D A Thomas J. Appl. Polym. Sei. 17 2443 (1973)

127. JE Lorentz, D A Thomas, L H Sperling ACD Symp. Series 24 (1976)

128. V Huelk, D A Thomas, L H Sperling Macromolecules 5 340 (1972)

129. JA Grates, D A Thomas, Hickey, L H Sperling J. Appl. Polym. Sei. 19 1731 (1975)

130. J E Lorentz, D A Thomas, L H Sperling Ibid 19 2225 (1975)

131. J Sionakidis, LH Sperling, D A Thomas Ibid 24 1179 (1979)

132. J W Vanderhoff J. Polymer Sei. 72 161 (1985)

133. C Pichot Macromol. Chem., Macromol. Symp. 35/36 327 (1990)

134. M Lamia, B Schlund, E Lazarus, T Pith Macromol. Chem., Suppl. 10/11 463 (1985)

135. J Barton Macromol. Chem., Macromol. Symp. 35/36 41 (1990)

136. J Guillot Macromol. Chem., Macromol. Symp. 35/36 369 (1990)

137. S С Misra, С Pichot, M S El Aasser, J W Vanderhoff Polym. Lett. 17 567(1979)

138. К Chujo, Y Harada, К Tanaka J. Polym. Sci. C27 3321 (1969)

139. S Nishida, M S El Aasser, A Klein, J W Vanderhoff ACS Symp. Series 165 (1981)

140. A Guiot, J Guillot, С Pichot, L Rios ACS Symp. Series 165 415(1981)

141. DC Blackey, S Andries, R D Sebastian J. British Polymer 19 25 (1987)

142. L F Antonova, EI Abljakimov Vysokomol. Soed. A-14 881 (1972)

143. L F Antonova, E E Zaev, S R Rafikov Vysokomol. Soed. A-20 687 (1987)

144. J H Kim, M Chainey, M S El Aasser, J W Vanderhoff J. Polym. Sci., Part A: Polym. Chem. Ed. 27 3187 (1989)

145. В.И.Елисеева, T.P Асламазова Успехи химии 2 398 (1991)

146. X. Бахарванд, А.А. Капустина, И. Гжива-Никсиньска, А.А Оганесян, И.А. Грицкова, П.В. Нусс, В.Н. Измайлова Коллоидный журнал 59(3) 299 (1997)

147. S A Chen, S Т Lee Macromolecules 25 1530 (1992)

148. Н.П. Блинов Химическая микробиология Высшая школа, Москва, 1984.

149. Н.И. Прокопов, И.А. Грицкова, В.Р. Черкасов, А.Е. Чалых Синтез монодисперсных функциональных полимерных микросфер для иммунодиагностических исследований МИТХТ, Москва (1995)

150. L В Bangs, Ph.D. Diagnostic Application of Latex Technology. Theory & Practice. Bangs Laboratories, Inc., Carmel IN (1997)

151. И.П. Тыщенко Ветеринария 7/8 26(1992)

152. LB Bangs Med. Diagn. Fpplic. of Latexes Course Orlando (1989)

153. V Hoopwood, D W Warnock, J D Milne . J. Clin. Microbiol. 6(4)392 (1987)

154. А. Дарбре Практическая химия белка Москва, Мир (1989)

155. Н.П. Блинов Химическая микробиология. Москва, Химия (1989)

156. У. Пол Иммунология Москва, Мир (1987)

157. Almog Y, Reich S, Levy M. Br Polym J 1987;14:131.

158. Шервурд П.М. Обработка данных в рентгеновской фотоэлектронной спектроскопии. В сб. Анализ поверхности методами Оже- и рентгеновской фотоэлектронной спектроскопии. Под ред. Бриггса Д. и Сиха М.П. пер. с англ. Москва: Мир, 1987, с. 497.

159. Анализ поверхности методами Оже- и рентгеновской фотоэлектронной спектроскопии. Под ред. Бриггса Д. и Сиха М.П. пер. с англ. Москва: Мир, 1987, с. 406,407.

160. Yamada К., Olden К. Fibronektins- adhesive glycoproteins of cell surfase and blood//Nature.- 1978.- v.275.-p. 179-184.

161. Mosseson M., Amrani D. The strukture and biological aktiveties of plasma fibronektin // Blood.-1980.- v.56.-p.l45-158.

162. Златопольский А.Д., Мазуров В.И. Строение фибронектинов: сходство и различие. // Вопросы мед. химии.- 1985.- Т. 31.-№ 6.- с. 2-14.

163. Любимов А.В., Глейберман А.С. Поверхностные белки клеток и их изменения при нормальном развитии и опухолевом росте // в "Явления индукции и дифференцировки при опухолевом росте".- М. : Наука, 1981. с.171-258.

164. Титов В.Н., Сапфирова В.М. Фибронектин крови : биологическая и диагностическая значимость. Обзор//Тер. архив.- 1984.-Т.56. с. 147-149.

165. Mcdonagh J. Plasma fibronektin. Strukture and function //Hematology.- N.Y., 1985. v. 5.-p. 1-4.

166. Clark R., DellePella P., Manseau E. Blood vessel fibronektin increases in conjunction with endothelial cell proliferation and capillary ingrowith during wound healing // J. Invest. Dermat.- 1982.-v.79.-p.269-276.

167. Mosseson M., Amrani D. Interactions with glicosaminoglicans // in "Plasma Fibronektin. Structure and function". Hematology.- N.Y., 1985.-v.5.-p.77-98.

168. Hormann H. Iteraction with fibrinogen and fibrin // in "Plasma fibronektin. Strukture and funktion". Hematology.- N.Y., 1985.- v.5.-p. 99-120.

169. Keski- Oja J., Yamada K.M. Isolation of an actin-binding fragment of fibronektin // Biochem. J.- 1981.- v.- 193.-p. 615-620.

170. Pande H., Shvely J. NH2 -terminal seguences of DNA-, heparin- and gelatin binding tryptic fragments from human plasma fibronectin // Arch. Biochem. Biophys.-1982.- v.213.- p. 258-265.

171. Pierschbacher M., Ruoslahti E., Sundelin J. The cell attachment domein of fibronektin. Determination of the primary strukture // J. Biol. Chem.- 1982,- v. 257.-p. 9593-9597.

172. VanDeWater L. Phagocytosis // in "Plasma fibronektin. Strukture and function". Hematology.-N.Y., 1985.- v.5.-p. 175-196.

173. Pearlstein E. Substrate activation of cell adhesion factor as a prerequisite for cell attachment // Int. J. Cancer.- 1978.- v.22.- p. 32-35.

174. Rocco M., Carson M., Hantgan R. Dependense of the shape of the plasma fibronektin molecule on solvent composition : ionic strength and glycerol content // J. Biol. Chem.-1983.- v.258.- p. 14545-14549.

175. Измайлова B.H., Ребиндер П.А. Структурообразование в белковых системах. М.: Химия, 1974.

176. Bernstein F.C., Kaetzle T.F. ed al.// J. Mol. Biol. 1977. V. 112. P.535.

177. Sayle R. // Molecular Grafics Visualisation Tool, RasMol. 2.1.2.В. UK: University Edinburgh, 1991.

178. Измайлова B.H. Ямпольская Т.П., Сумм Б.Д. Поверхностные явления в белковых системах. М.: Химия, 1988 с. 240.

179. Алентьев А.Ю., Измайлова В.Н., Ямполльская Т.П. // Коллоид, журн. 1991. Т. 53. №4. с. 609.

180. Левачев С.М., Измайлова В.Н.// Коллоид, журн. 1994. Т.56. № 2. с. 193.

181. Бусол Т.Ф., Письменная Г.М., Жиглецова С.К., Тарасевич Б.Н., Измайлова В.Н. Адсорбция желатины на жидких границах раздела фаз. // Коллоидн. журн. 1979. Т. 41. № 6. С. 1055-1060.

182. Бусол Т.Ф. Исследование межфазных адсорбционных слоев желатины методом спектроскопии внутреннего отражения. // Дисс. . канд. хим. наук. М. 1980.

183. Ребиндер П.А. Поверхностные явления в дисперсных системах. Коллоидная химия. // Избр. тр. М.: Наука, 1978. Т.1.

184. Измайлова В.Н., Ямпольская Г.П., Туловская З.Д. // Коллоид, журн.1998. Т.60. № 5.с. 598.

185. А.М.Королюк, В.Б.Сбойчаков. Медицинская микробиология.-Учебное пособие. Санкт-Петербург 1999г.

186. S Torza, S Mason J. Colloid Interface Sci. 33 67 (1970)

187. Yi-Chern Chen, V L Dimonie, О L Shaffer, S El Aasser J. Polymer International 30 185 (1993)

188. D Sundberg, A P Casassa, J Pantazopoulos, M R Muscato J. Appl. Polym. Sci. 41 1429(1990)

189. Y С Chen Ph Thesis Lehigh University, Bethlehem, PA, USA (1991)

190. J-E L Jonsson, H Hassander, L H Jansson, В Tornel Macromolecules 24 126(1991)