Синтез новых носителей лекарственных веществ на основе полисахаридов и фосфолипидов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат наук Кожихова, Ксения Вадимовна

• Кожихова, Ксения Вадимовна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Кожихова, Ксения Вадимовна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ............................................................................................4

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Методы поверхностной полимерной модификации липосомальных носителей как форм доставки лекарственных средств...........................................9

1.1. Классические стелс-липосомы.................................................................................................10

1.2. Модификация водорастворимыми синтетическими полимерами........................................13

1.3. Липосомы с полисахаридным покрытием..............................................................................20

1.3.1. Физическое покрытие немодифицированными полисахаридами..................................22

1.3.2. Физическое покрытие модифицированными полисахаридами......................................30

1.3.3. Химически сшитые полисахарид-липосомальные системы...........................................35

1.3.4. Сравнительная характеристика полисахарид-липосомальных систем.......................37

Заключение........................................................................................................................................39

2. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ. РАЗРАБОТКА КОМПЛЕКСНЫХ ПОЛИСАХАРИД-ЛИПОСОМАЛЬНЫХ НОСИТЕЛЕЙ В КАЧЕСТВЕ НАСТРАИВАЕМЫХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ СИСТЕМ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ДОСТАВКИ............................................40

2.1. Синтез липосомальных носителей...........................................................................................43

2.1.1. Оптимизация состава липидной композиции и методики получения монодисперсных липосом..........................................................................................................................................43

2.1.2. Синтез вспомогательных липидных компонентов.........................................................49

2.1.3. Нагрузка липосомальных носителей модельным АФИ...................................................51

2.2. Синтез модифицированных полисахаридов...........................................................................54

2.2.1. Синтез производных хитозана с помощью реакции Уги................................................54

2.2.2. Синтез амидных производных пектина...........................................................................56

2.2.3. Синтез производных на основе полигалакутронилгидразида с помощью реакции Уги .........................................................................................................................................................60

2.2.4. Нагрузка микрогелей модельным АФИ.............................................................................65

2.2.5. Синтез комбинаторных динамических библиотек на полисахаридном скелете........68

2.3. Получение комплексных полисахарид--липосомальных систем и изучение их возможностей....................................................................................................................................76

2.3.1. Полисахарид-липосомальные системы на основе производных хитозана...................76

2.3.2. Полисахарид -липосомальные системы на основе производных пектина...................80

2.4. Изучение биологических свойств полученных носителей....................................................84

2.4.1. Цитотоксичность..............................................................................................................84

2.4.2. Мукоадгезивные свойства носителей на основе полигалактуронилгидразида............85

2.4.3. Синтез флуоресцентной метки для липидного бислоя...................................................90

2.4.4. Синтез флуоресцентной метки для полисахаридных покрытий..................................92

2.4.5. Биологическое распределение............................................................................................93

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ................................................................................................98

3.1. Материалы..................................................................................................................................98

3.2. Оборудование.............................................................................................................................99

3.3. Общие методики......................................................................................................................100

3.3.1. Получение липосомальных суспензий..............................................................................100

3.3.2. Синтез производных хитозана........................................................................................100

3.3.3. Синтез полигалактуронилгидразидов............................................................................101

3.3.4. Микрогели на основе полигалактуронилгидразида........................................................101

3.3.5. Синтез ацилгидразонов и динамических комбинаторных библиотек........................102

3.3.6. Восстановление ацилгидразонов и динамических комбинаторных библиотек.........102

3.3.7. Определение степени связывания молекулярной мишени.............................................102

3.3.9. Мукоадгезивность............................................................................................................103

3.3.10. Нагрузка и высвобождение АФИ..................................................................................104

3.3.11. Цитотоксичность..........................................................................................................105

3.3.12. Биораспределение............................................................................................................105

3.3.13. Статистический анализ................................................................................................107

3.4. Характеристика полученных образцов.................................................................................107

ЗАКЛЮЧЕНИЕ..................................................................................................................................138

СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ.....................................................139

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ..................................................................................................................143

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность и степень разработанности темы исследования

Полисахариды и фосфолипидные структуры активно исследуются в качестве потенциальных носителей активных фармацевтических ингредиентов (АФИ), благодаря их природному сродству к биологическим тканям и способности регулировать фармакокинетические показатели препарата. Но их практическое использование имеет ряд ограничений, связанных с низкой стабильностью и недостаточной специфичностью взаимодействий природных молекул. Указанную проблему можно решить, используя возможности химической модификации, настройки поверхности и синтеза комплексных систем. Современные подходы по стабилизации лекарственных носителей гидрофильными синтетическими полимерами и модификации моноклональными антителами приводят к значительной себестоимости препарата и вероятности развития иммунного ответа, что отдаляет такие системы от клинического применения. Поэтому актуальность разработки новых способов модификации и нацеливания современных терапевтических систем, имеющих практический потенциал, непрерывно возрастает с ростом стандартов фармакотерапии. В решении обозначенной задачи инструменты органической химии приобретают новую значимость, позволяя науке приблизить реализацию идеального подхода к лечению заболеваний.

В настоящее время одно из основных направлений развития органической химии заключается в усложнении получаемых структур с использованием одностадийных стратегий. В этом контексте многокомпонентные реакции и методы динамической комбинаторной химии имеют огромный потенциал в синтезе новых биосовместимых биологически активных систем. Проведение таких реакций модификации в водной среде способствует самоорганизации процесса и сборке структур похожих на природные объекты, кроме того соответствует принципам «зеленой химии». Применение полимерных цепей в качестве основы для синтеза открывает еще более широкие возможности для получения носителей адресной доставки лекарственных средств. Реакция Уги позволяет синтезировать продукты с биоразрушаемыми пептидоподбными связями из неаминокислотных исходных реагентов, при этом ускорение данной реакции в водной среде делает выполнимой перекрестную сшивку водорастворимых полимеров с высокой эффективностью. Возможность использования обширного набора стартовых соединений многокомпонентной смеси обеспечивает значительную вариативность поверхности по сродству, амфифильности, заряду, которая важна для химической настройки поверхности под конкретные биологические цели.

Современная методология динамической комбинаторной химии представляет еще более комплексный подход к синтезу соединений, обладающих селективностью. Основу данного направления составляют самоорганизующиеся системы, образующиеся в результате обратимого связывания разнообразных строительных блоков под термодинамическим контролем. Такие системы обладают рядом преимуществ по сравнению с традиционным химическим синтезом, среди них: одновременный синтез целой библиотеки химических соединений различной уровневой организации и отбор наиболее эффективной структуры, в зависимости от целей скрининга. Сложность получаемых систем часто служит препятствием для развития этого перспективного подхода, особенно для динамических комбинаторных библиотек на полимерном скелете, но это в десятки раз дешевле и доступнее биосинтеза антител.

В настоящем исследовании два развивающихся направления органической химии (многокомпонентные реакции и динамическая комбинаторная химия) использованы для решения современных задач медицинской химии и фармакологии, заключающихся в разработке стабильных, биосовместимых, обладающих тканевой селективностью терапевтических систем адресной доставки.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез новых носителей лекарственных веществ на основе полисахаридов и фосфолипидов»

Цель работы

Целью данной работы является синтез комплексных терапевтических систем на основе полисахаридов и фосфолипидов, обладающих настраиваемыми физико-химическими, поверхностными и биологическими свойствами, с использованием вариаций многокомпонентной реакции Уги и подходов динамической комбинаторной химии.

Для реализации поставленной цели были сформулированы ключевые задачи исследования.

• Получение монодисперсной липосомальной основы с размерами менее 200 нм:

- синтез стабилизирующих компонентов липосом, влияющих на заряд и реологические свойства фосфолипидного бислоя;

- отработка оптимальных технологических параметров получения липосомальных суспензий.

• Синтез амидных производных полисахаридов:

- синтез полигалактуронилгидразидов;

- синтез положительно-заряженных производных пектина с четвертичной аммониевой группой.

• Синтез полисахаридных микрогелей с помощью реакции Уги:

- синтез микрогелей на основе хитозана;

- синтез микрогелей на основе полигалактуронилгидразида.

• Синтез полисахаридных динамических комбинаторных библиотек, обладающих повышенным сродством к низкомолекулярным биологическим мишеням:

- синтез индивидуальных полигалактуронилгидразонов;

- синтез комбинаторных динамических библиотек на полисахаридном скелете;

- переорганизация систем с внесением молекулы-мишени;

- стабилизация полученных рецепторных комплексов путем восстановления двойных связей.

• Отработка методики нагрузки терапевтических систем АФИ

• Синтез комплексных систем адресной доставки:

- поверхностная постмодификация липосомального носителя путем встраивания гидрофобных радикалов производных полисахарида;

- ковалентная сшивка полисахаридной микрокапсулы на поверхности липосомальных частиц.

• Изучение биосовместимости и биологических свойств:

- изучение мукоадгезивных свойств;

- исследование цитотоксичности;

- анализ сродства к тканям в ходе биологического распределения. Научная новизна

Разработан новый метод синтеза полисахаридных микрогелей с применением внутримолекулярной сшивки бифункционального полигалактуронилгидразида с помощью четырехкомпонентной реакции Уги.

Показано, что использование подхода динамической комбинаторной химии для синтеза динамических библиотек на основе полигалактуронилгидразонов позволяет получить полимеры, обладающие высокой селективностью связывания замещенных аминокислот.

Впервые осуществлена модификация липосомальных носителей производными хитозана и пектина, полученных с помощью реакции Уги.

Проведен синтез полимерных микрокапсул на поверхности сформированных липидных везикул, показана возможность получения композитных липосом с размерами 1 75-220 нм и низкой полидисперсностью.

Разработан метод получения липосом с хорошими мукоадгезивными свойствами с использованием производных полигалактуронилгидразида.

Теоретическая и практическая значимость

Разработан общий подход к синтезу субмикронных носителей лекарственных средств на основе фосфолипидов, пектина и хитозана с использованием методологии многокомпонентной реакции Уги.

В результате исследования предложена мукоадгезивная лекарственная форма для интраназальной доставки противовирусного препарата Триазавирин.

Предложена лекарственная форма для трансбуккальной доставки модельного локального анестетика, обладающая биосовместимостью и мукоадгезивностью.

Разработан новый метод стабилизации липосом, получены образцы липосом стабильные в течение 9 мес.

Методология и методы исследования: В процессе работы использовались стандартные методы органического синтеза. Выделение и очистка продуктов проводилась переосаждением, диализом и гель-фильтрацией. Для подтверждения структуры полученных в результате синтеза соединений использовались современные методы физико-химического анализа: ИК- и ЯМР-спектроскопии. Контроль протекания реакции и определение чистоты полученных веществ осуществляли с помощью качественных реакций на исходные продукты и тонкослойной хроматографией. Анализ физико-химических параметров высокомолекулярных производных проводили методами динамического рассеивания, pH-метрии и измерения динамической вязкости. Безопасность и сродство к тканям оценивалось рядом стандартизированных in vitro и in vivo методов, включающих МТТ-тест, оценку мукоадгезивных свойств и биораспределение.

Достоверность полученных результатов. Структура, чистота и физико-химические параметры были подтверждены с использованием современных валидированных методов анализа, испытания проводились не менее чем в трех параллелях с последующей статистической обработкой (p=0,05).

Личный вклад автора состоит в сборе, анализе и обобщении имеющихся литературных данных по способам химической модификации и адресного нацеливания лекарственных носителей на основе фосфолипидов и полисахаридов, изучении возможностей получения биосовместимых продуктов с помощью многокомпонентных реакций и подходов динамической комбинаторной химии, в формулировании научных гипотез и их проверки в результате проведения химических и биологических экспериментов, обработке, анализе и обобщению полученных спектральных данных и результатов исследований. Автором была выполнена

подготовка результатов научной работы к публикации и осуществлена презентация полученных данных на всероссийских и международных конференциях.

Положения и результаты, выносимые на защиту:

• синтез и оптимизация липосомальных носителей;

• синтез производных хитозана с помощью реакции Уги;

• синтез амидных производных пектина;

• синтез сшитых микрогелей на основе полигалактуронилгидразида;

• синтез динамических комбинаторных библиотек на полисахаридном скелете;

• получение комплексных полисахарид-липосомальных систем;

• нагрузка лекарственных форм модельными АФИ и высвобождение;

• изучение биологических свойств полученных носителей.

Публикации и апробация работы. Результаты работы опубликованы в 3 статьях в изданиях, рекомендуемых ВАК, в 3 тезисах докладов, входящих в международные базы цитирования, в 1 главе монографии и в 16 других сборниках тезисов докладов.

Основные результаты работы представлены в виде стендовых и устных докладов на 6-ой Международной конференции по наноматериалам «NANOCON 2014» (Брно, Чешская республика, 5-7 ноября 2014 г.), XXV Российской молодежной научной конференции, посвященной 95-летию основания Уральского университета (Екатеринбург, 22-24 апреля 2015 г.), III Международной конференции «Химия в Федеральных Университетах» (Екатеринбург, 14 ноября 2015 г.), I Международной школе-конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Биомедицина, материалы и технологии XXI века» (Казань, 25-28 ноября 2015 г.), Зимней конференции молодых ученых по органической химии «WS0C2016» (Красновидово, 16-21 января 2016 г.), XX Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Екатеринбург, 26-30 сентября 2016 г.), Первом русско-немецком междисциплинарном симпозиуме «Nanoscale interdisciplinary research: physics, chemistry, biology, mathematics» (Москва, 25-27 апреля 2017 г.).

Структура и объем работы. Материал диссертации изложен на 153 страницах и включает 20 схем, 17 таблиц, 47 рисунков. Работа состоит из введения, литературного обзора, обсуждения результатов, экспериментальной части и списка литературы из 159 наименований.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Методы поверхностной полимерной модификации липосомальных носителей как форм доставки лекарственных

средств

В течение нескольких последних десятилетий наблюдается значительный рост интереса к разработке биоразрушаемых нано- и микроносителей для доставки фармакологически активных соединений. Обладая огромными преимуществами, такие системы часто на практике демонстрируют неспецифические взаимодействия с белками, клетками и тканями. Однако с помощью поверхностной модификации коллоидных носителей можно изменять биораспределение нагруженных в них лекарств при внутривенном введении, обеспечивая адресное действие, и контролировать всасывание веществ, вводимых другими путями [ 1].

Как потенциальные системы адресной доставки липосомы обладают неоспоримыми преимуществами перед традиционными лекарственными формами. Они способны улучшать биодоступность инкапсулированных лекарственных средств; защищать нестабильные вещества от химической и биологической деградации при хранении и во время введения; снижать побочные эффекты и токсичность, тем самым повышая терапевтическую эффективность препарата; легко подвергаться химической модификации лигандами, обеспечивающими адресное нацеливание на клетки-мишени. Кроме того, компоненты липосом являются полностью биосовместимыми и биоразлагаемыми [2]. Однако у данной лекарственной формы есть и свои недостатки. Немодифицированные липосомы при хранении обладают низкой коагуляционной стабильностью, а при введении в организм очень быстро захватываются клетками мононуклеарной фагоцитарной системы (МФС) и выводятся из кровотока [3]. Основным недостатком этих носителей является их неспецифичное взаимодействие с клетками и белками, приводящие к накоплению препарата в нецелевых тканях [ 1 ]. Для решения данных проблем за последние несколько десятилетий разработано большое количество методов, таких как добавки определенных липидных компонентов, физическая и химическая модификации, поверхностное покрытие, новые технологические способы получения липосом, чувствительность к действию специального триггера и другие [4]. Благодаря научным достижениям, часть липосомальных препаратов уже находятся на фармацевтическом рынке (например, Myocet, Doxil, Lipodox, DaunoXome, Marqibo, Ambisome, Depocyt, Visudyne, DepoDur, Inflexal V), тогда как другие подвергаются лабораторным и биологическим испытаниям [2]. Липидные частицы являются первой системой доставки нового поколения, перешедшей от идеи до клинического применения, более того, в настоящее время для нее

утверждена стратегия подтверждения клинической эффективности и определена необходимая технологическая база. По этой причине в ближайшем будущем предсказывается лавинообразный рост подобных готовых клинических продуктов [4].

Поэтому актуальность разработки липосомальных носителей не вызывает сомнений, и далее будут рассмотрена модификация поверхности таких частиц различными способами для широкого круга целей биомедицинского применения.

1.1. Классические стелс-липосомы

Немодифицированные классические липосомы после внутривенного введения быстро выводятся из кровотока путем захвата клетками мононуклеарной фагоцитарной системы (МФС), находящимися в основном в печени и селезенке. Это приводит к резкому снижению распределения действующего вещества в остальных тканях и повышенной токсичности для органов МФС [4]. В качестве исключения такое свойство можно использовать как преимущество для пассивного нацеливания лекарств при лечении заболеваний с вовлечением органов данной системы. Ранние исследования по изучению стелс-липосом включали их покрытие с помощью натуральных клеточных полисахаридов (гликокаликс), используя моносиалотетрагексозилганглиозид, гидрированный фосфатидилинозитол, как химически инертные покрытия для липосом [5]. Трудность получения и высокая вероятность побочных реакций делают данные компоненты малоприменимыми в фармацевтической практике. В настоящее время разработано несколько стратегий уменьшения клиренса липосом в организме, которые будут рассмотрены ниже. Основной принцип данных подходов - это повышение гидрофильности фосфолипидной мембраны, позволяющее значительно изменить период полувыведения частиц.

Покрытие поверхности наночастиц с помощью полиэтиленгликоля (ПЭГ) является наиболее широко используемым методом улучшения эффективности доставки нагруженных липосом к целевым тканям. ПЭГ-модификация носителя позволяет предотвратить агрегацию, опсонизацию и фагоцитоз частиц, тем самым пролонгируя их действие [6]. Механизм действия такого покрытия связан с тем, что, благодаря своей гидрофильности, ПЭГ-цепи, привитые на наночастицы, образуют гидратированную оболочку с большим объемом, что стерически не позволяет липосомам взаимодействовать между собой и с компонентами крови [7]. В этом случае влияние на свойства одновременно оказывает большое количество факторов, такие как молекулярная масса (М^ ПЭГ, содержание, плотность покрытия поверхности, конформация полимера, способ введения [6], поэтому оценить индивидуальный вклад на практике довольно сложно. Общие принципы можно выразить следующим образом. Так как М¥ ПЭГ напрямую

зависит от длины цепи, она рассматривается как наиболее важный параметр при покрытии липосом. С небольшими различиями, большинство авторов [6, 8, 9] приходит к выводу, что при увеличении Mw полимера от 2 до 20 кДа наблюдается продление времени циркуляции частиц от нескольких минут до нескольких часов. При этом период полувыведения частиц, покрытых ПЭГ (350 Да - 2 кДа) практически не отличается от непокрытых липосом с теми же характеристиками [10]. Имеется ряд данных, что при повышении Mw до 5 кДа происходит заметное уменьшение адсорбции белков плазмы до 75 % снижения от уровня, демонстрируемого для частиц без покрытия, хотя при последующем увеличении молекулярной массы взаимодействие с белками остается на прежнем уровне [8]. Кроме того, плотность покрытия липосом оказывает решающее влияние на их стабильность in vivo. В работе [11] сообщается, что при содержании ПЭГ модифицированных липидов 10 мол. % предотвращается агрегация частиц в цельной крови, при этом носители, включающие меньшее количество полимера (3 и 5 мол. %), агломерируют в тех же условиях при хранении. В зависимости от соотношения радиуса Флори (RF) между цепями ПЭГ на поверхности наночастиц выделяют конформации "гриба"^Б/0 < 1) и "щетки" (RF/D > 1).

RF~aN3/5,

где а - эффективная длина мономера, N - степень полимеризации к среднему расстоянию

(D) [6].

В общем случае для липосомальных структур, чем больше это значение, тем лучше пролонгирующий эффект и меньше опсонизация [6, 12], но максимальное содержание полимера ограничено коллоидной нестабильностью частиц при избыточном количестве липидов, конъюгированных с ПЭГ [13]. При всех преимуществах и научных достижениях до сих пор не разработано наночастиц, полностью устойчивых при взаимодействии с компонентами крови [6]. Более того ПЭГ не является инертным для иммунитета и после первичного системного введения формируются антитела к полимеру, что существенно снижает эффективность при повторном применении [7, 14, 15]. Несмотря на наличие методов [15] снижения иммунного ответа на ПЭГ, данная причина обуславливает актуальность поиска других гидрофильных полимеров, способных увеличивать стабильность и время циркуляции частиц.

Существует несколько способов покрытия липосом полиэтиленгликолем (Л1), которые можно отнести к двум группам: самосборка из молекул, содержащих ПЭГ, и пост-модификация поверхности. В большинстве случаев получение липосом, покрытых ПЭГ, проводят с помощью первого варианта. Для этого в состав композиции вводят липиды, модифицированные полимером [16, 17], и формируют липосомы путем озвучивания, экструзии или "замораживания - оттаивания" суспензии везикул, полученных методом гидратации тонкой липидной пленки.

При таком способе введения ПЭГ-цепи встраиваются как во внешнюю, так и во внутреннюю сторону фосфолипидного бислоя [6]. Полимер, находящийся внутри липосомы, не способствует покрытию поверхности и может оказывать влияние на стабильность и загрузку действующего вещества. Тем не менее, плотность покрытия можно регулировать различным соотношением ПЭГ-липидов и немодифицированных молекул, типом конъюгата и молекулярной массой используемого полимера [10]. В большей части работ используют коммерчески доступные ПЭГ-модифицированные липиды [12, 15, 16, 17], однако встречаются примеры синтеза ПЭГ-производных с определенной функциональностью (Л2), (Л3) для дальнейшей модификации лигандами [18] (рис. 1.1).

т

о

Рис. 1.1. Синтез ПЭГ-липидных конъюгатов с аминной (Л2) или карбоксильной (Л3) функциональными группами.

ПЭГ-липидные конъюгаты могут быть включены в предварительно сформированные липосомы, поскольку гидрофобная часть компонента предпочтительно будет встраиваться в липидный бислой. Однако концентрация модифицированного липида должна быть ниже критической концентрации образования мицелл, при этом раствор конъюгата следует добавлять к липосомам медленно при температуре, близкой к точке фазового перехода липидного бислоя [19]. Данный подход позволяет избирательно модифицировать внешнюю поверхность носителя, в отличие от способа путем самосборки. Было показано, что такой метод в сравнении с первым способом позволяет использовать меньшую концентрацию коньюгата для достижения схожего пролонгирующего эффекта и обеспечивает большую стабильность частиц [20].

Для создания ПЭГ оболочки липосом также может быть использован пост-конъюгационный метод, особенно в случаях модификации поверхности нацеливающими лигандами. Очень чувствительные к окружающим условиям фосфолипидные везикулы требуют

мягких условий реакции, поэтому для модификации наиболее часто используют взаимодействие активированных карбоксильных и аминогрупп, реакции между пиридилдитиолами и тиолами, а также между малеимидом и тиолами [21]. Имеются примеры использования клик-химии [22] для пост-конъюгации с цепями ПЭГ через реакции между алкинильными группами на поверхности липосом и производными ПЭГ с функциональной азидной группой (Л4), (Л5) [23] (рис. 1.2).

о

= P>/VN3

J14

P>A/N3

фчА/ N3 -►

Cu+ Ascorbic acid

Г

N=N

Рис. 1.2. Синтез липосом (Л6), модифицированных лигандами через ПЭГ-спейсер, с помощью клик-химии

1.2. Модификация водорастворимыми синтетическими полимерами

Кроме ПЭГ в литературе представлены и другие гидрофильные полимеры для увеличения времени циркуляции лекарственных носителей, среди них: HPMA (поли-#-(2-гидроксипропил) метакриламид) [24, 25, 26], PVP (поливинилпирролидон)) [27, 28, 29], POX (поли-2-оксазолин) [30, 31, 32, 33], PDMA (поли-ЖД-(диметил)акриламид) [34], pNIPAAm (поли-#-(изопропил)акриламид) [35] и PAcM (поли-#-(акрилоил)морфолин))[36, 37] и некоторые другие. Из них для покрытия липосом исследовались HPMA (Л7), PVP (Л8), POX (Л9), PDMA (Л 10) и PAcM (Л 11), структурные формулы представлены на рис. 1.3. Преимущества покрытия

наночастиц другими полимерами, отличными от ПЭГ, могут включать следующие: улучшенные физические свойства, увеличенные функциональные возможности загрузки действующими веществами, более низкая вязкость и более разнообразная пост-полимеризационная функционализация. Структуры данных полимеров обладают возможностью дальнейшей модификации для получения триггер-чувствительных лекарственных носителей [38, 39]. Ряд препаратов, полученных с использованием некоторых описанных полимеров, в настоящее время подвергается клиническим испытаниям [6, 14, 40].

Рис. 1.3. Синтетические полимеры: (Л7) - поли-Д-(2-гидроксипропил)метакриламид, (Л8)

- поли-винилпирролидон, (Л9) - поли-2-оксазолин, (Л 10) - поли-Д,Д-диметилакриламид, (Л 11)

- поли-Д-акрилоилморфолин

Для синтеза полимеров в большинстве случаев используют методы контролируемой радикальной полимеризации или ионной полимеризации, что способствует получению узкодисперсных полимеров [41]. Так, в работе [42] для модификации поверхности липосом авторы сначала синтезировали моногидроксил поли-2-этил-2-оксазолин с помощью катионной полимеризации с раскрытием цикла, используя в качестве инициатора метил-п-толуолсульфонат. Далее полимер по концевой гидроксильной группе модифицировали остатком холестерина, и затем из него получали мицеллы, которые использовали для формирования оболочек липосом. Полученные липосомы в эксперименте демонстрировали рН-чувствительность и повышенное время циркуляции у крыс, в отличие от непокрытых носителей [42]. В более ранней работе [33] для получения РОХ-покрытых липосом были синтезированы метил- и этилпроизводные поли-2-оксазолина путем катионной полимеризации, однако в полимер были введены концевые карбоксильные группы для ковалентной сшивки с дистеароилфосфатидилэтаноламином. Полимер-модифицированные продукты различной молекулярной массы были непосредственно введены в состав липидной композиции на стадии формирования липидной пленки с последующей гидратацией и экструзией.

Модифицированные липосомы показали продление периода полувыведения и уменьшение преждевременного захвата клетками МФС у крыс и мышей, эффект полимерного покрытия зависел от концентрации и степени полимеризации и был сравним с таковым для ПЭГ [33]. Кроме того, в литературе известны клик-реакции для пост-полимеризационной модификации поли-2-оксазолинов (Л12) [32], что открывает широкие возможности для функционализации через боковые и концевые группы. Для клик-модификации через концевые группы используют инициатор или агент, обрывающий цепь, соответствующей функциональности (рис. 1.4). В данном случае в качестве инициаторов применяют различные алкинилтозилаты (Л13), (Л14), (Л15) или тозилаты с концевой азидной группой (Л16), для обрыва цепной реакции используют азид натрия (Л17), циклопентадиенид натрия (Л18), гексиновую (Л19) или акриловую (Л20) кислоты [32]. Наиболее часто исследования сосредоточены на свойствах синтезируемых материалов и способах их применения, используя продукты Си (I) - катализируемой реакции азид-алкилового циклоприсоединения, хотя встречаются варианты с участием стерически напряженных циклоалканов без использования катализатора. Однако, клик-реакции не всегда приводят к желаемым высоким выходам модифицированых полимеров по причине недостаточной растворимости компонентов или труднодоступности функциональных групп на полимерном скелете. Тем не менее, с помощью клик-химии удалось получить ряд сополимеров полиоксазолинов и поликапролактона, поли-треда-бутилакрилата и полисилоксана, способных образовывать самособирающиеся везикулы, позволяющие снизить клиренс лекарств в биологических моделях. Кроме того, клик-реакции можно использовать для покрытия липосомальных частиц, как описано в работе [43], где рН-чувствительный дистеароилфосфатидилэтанолами, модифицированный алкином, сшили с азид-функционализированным поли-2-этил-2-оксазолином.

гл

°ТК к ГП

<г-\ ^ Xе /Гс\ к к2 ^ | ^ а Т I_1к3 Л ,

№N3 Л17

Л19

Л20

- терминатор

Рис. 1.4. Схема синтеза полиоксазолинов (Л12). 1 - инициация, 2 - рост цепи, 3 - терминация.

Другим возможным гидрофильным и биосовместимым полимером является поливинилпирролидон (PVP). Одним из его преимуществ является то, что PVP при системном введении обладает большим периодом полувыведения из плазмы крови, чем ПЭГ. Так, в работе [29] с помощью PVP-покрытия было достигнуто контролируемое высвобождение модельного лекарства (гризеофульвина) в течение 12 дней. Как и в описанных ранее работах, для синтеза полимера применяли технологию радикальной полимеризации (мономер: 1-винил-2-пирролидон, инициатор - азо-бис-изобутиронитрил), с целью последующей сшивки в полимер была введена концевая аминогруппа путем добавки 2-меркаптоэтиламина. Для стабильного покрытия липосомальной поверхности использовали ковалентные коньюгаты (Л23) PVP и липидов (рис. 1.5), полученные с помощью реакции активированного сукцинилового эфира липида (Л22) с NH2-PVP (Л21) карбодиимидным методом. Стоит отметить, что липидные частицы в данном случае были получены диализом липидного раствора в тетрагидрофуране, и средний диаметр составил 60-80 нм. Тем не менее, существуют способы покрытия липосом с использованием коммерчески доступного PVP [44]. Лиу с коллегами [44] для стабилизации липосом, состоящих из фосфатидилхолина, холестерина и олеиновой кислоты, использовали в процессе гидратации 1% раствор PVP-K30 в фосфатно-солевом буфере (PBS) с добавкой дезоксихолата натрия. Липосомальную форму сравнивали с таблетками олеиновой кислоты при пероральном введении. В результате экспериментов авторам удалось достигнуть шестикратного повышения биодоступности биологически активного вещества (БАВ), что определялось как стабильностью в ЖКТ, так и увеличением адсорбции.

\Д0 8 А п°22 °

Л21 DCC / Пиридин / Хлороформ

-►

Комн. темп., N2 газ

О

О NaQ©

Vrbrbr^f^^r о

Рис. 1.5. Схема реакции получения конъюгата липид-PVP (Л23)

Поли-#-(2-гидроксипропил)акриламид (поли-HPMA) является одним из самых часто исследуемых гидрофильных полимеров для направленной доставки лекарств, однако в большинстве случаев он используется в виде конъюгатов с активными фармацевтическими ингредиентами (АФИ) для лечения злокачественных новообразований [26, 45]. Тем не менее, в

литературе встречаются примеры липосомальных форм с поли-HPMA покрытием [46]. В работе [46] был предложен способ заякоривания HPMA полимера в липидном бислое с помощью концевого остатка холестерина. Для достижения данной цели был синтезирован конъюгат поли-HPMA (Л26) радикальной полимеризацией по схеме реакции, представленной на рис. 1.6. В качестве мономерных блоков использовали моно- (Л24) и дилактаты (Л25) HPMAm в разных соотношениях, инициатора - азо-бис-изобутиронитрил (AIBN), агента передачи цепи -тиохолестерин. Полученный полимер включали в структуру будущих везикул на стадии образования липидной пленки, растворяя липиды и полимер в хлороформе с последующим упариванием растворителя. Использование данного полимера определяет термочувствительность покрытых липосом, что было продемонстрировано на примере высвобождения кальцитонина при нагревании от 25 до 50 °С.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Кожихова, Ксения Вадимовна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Lemarchand C. Polysaccharide-decorated nanoparticles / C. Lemarchand, R. Gref, P. Couvreur // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2004. - № 58. - P. 327-341.

2. Pattni B. S. New Developments in Liposomal Drug Delivery / B. S. Pattni, V. V. Chupin, V. P. Torchilin // Chemical Reviews. - 2015. - № 115. - P. 10938-10966.

3. Samad A. Liposomal drug delivery systems: An update review / Samad A., Sultana Y., Aqil M. // Current Drug Delivery. - 2007. - № 4 (4). - P. 297-305.

4. Allen T. M. Liposomal drug delivery systems: From concept to clinical applications / T. M. Allen, P. R. Cullis // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2013. - № 65. - P. 36-48.

5. Noble G. T. Ligand-targeted liposome design: challenges and fundamental considerations // G. T. Noble, J. F. Stefanick, J. D. Ashley, T. Kiziltepe, B. Bilgicer // Trends in Biotechnology. - 2014. -№ 32. - P. 32-45.

6. Suk J. S. PEGylation as a strategy for improving nanoparticle-based drug and gene delivery / J. S. Suk, Q. Xu, N. Kim, J. Hanes, L. M. Ensign // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2016. - № 99.

- P. 28-51.

7. Yang Q. Anti-PEG immunity: emergence, characteristics, and unaddressed questions / Q. Yang, S. K. Lai // WIREs Nanomed Nanobiotechnol. - 2015. - № 7. - P. 655-677.

8. Gref R. 'Stealth' corona-core nanoparticles surface modified by polyethylene glycol (PEG): influences of the corona (PEG chain length and surface density) and of the core composition on phagocytic uptake and plasma protein adsorption / R. Gref, M. Luck, P. Quellec, M. Marchand, E. Dellacherie, S. Harnisch, T. Blunk, RH. Muller // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2000.

- № 18. - P. 301-313.

9. Miteva M. Tuning PEGylation of mixed micelles to overcome intracellular and systemic siRNA delivery barriers / M. Miteva, K. C. Kirkbride, K. V. Kilchrist, T. A. Werfel, H. Li, C. E. Nelson, M. K. Gupta, T. D. Giorgio, C. L. Duvall // Biomaterials. - 2015. - № 38. - P. 97-107.

10. Santos N. D. Influence of poly(ethylene glycol) grafting density and polymer length on liposomes: relating plasma circulation lifetimes to protein binding / N. D. Santos, C. Allen, A. M. Doppen, M. Anantha, K. A. Cox, R. C. Gallagher, G. Karlsson, K. Edwards, G. Kenner, L. Samuels, M. S. Webb, M. B. Bally // Biochimica et Biophysica Acta - Biomembranes. - 2007. - № 1768. - P. 1367-1377.

11. Braeckmans K. Sizing nanomatter in biological fluids by fluorescence single particle tracking / K. Braeckmans, K. Buyens, W. Bouquet, C. Vervaet, P. Joye, F. DeVos, L. Plawinski, L. Doeuvre, E. Angles-Cano, N. N. Sanders, J. Demeester, S. C. De Smedt // Nano Letters. - 2010. - № 10. - P. 4435-4442.

12. Palchetti S. The protein corona of circulating PEGylated liposomes / S. Palchetti, V. Colapicchioni, L. Digiacomo, G. Caracciolo, D. Pozzi, A. L. Capriotti, G. La Barbera, A. Lagana // Biochimica et Biophysica Acta. - 2016. - № 1858. - P. 189-196.

13. Yang Q. Evading immune cell uptake and clearance requires PEG grafting at densities substantially exceeding the minimum for brush conformation / Q. Yang, S. W. Jones, Christina L. Parker, William C. Zamboni, James E. Bear, Samuel K. Lai // Molecular Pharmaceutics. - 2014. -№ 11. - P. 1250-1258.

14. Kierstead P. H. The effect of polymer backbone chemistry on the induction of the accelerated blood clearance in polymer modified liposomes / P. H. Kierstead, H. Okochi, V. J. Venditto, T. C.

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

Chuong, S. Kivimae, J. M.J. Frechet, F. C. Szoka // Journal of Controlled Release. - 2015. - № 213. - P. 1-9.

Ishida T. Accelerated blood clearance (ABC) phenomenon upon repeated injection of PEGylated liposomes /T. Ishida, H. Kiwada // International Journal of Pharmaceutics. - 2008. - № 354. - P. 56-62.

Vijayakumar M. R. Trans resveratrol loaded DSPE PEG 2000 coated liposomes: An evidence for prolonged systemic circulation and passive brain targeting / M. R. Vijayakumar, R. Kosuru, P. R. Vuddanda, S. K. Singh, S. Singh // Journal of Drug Delivery Science and Technology. - 2016. -№ 33. - P. 125-135.

Monteiro L. O. F. Paclitaxel-loaded folate-coated long circulating and pH-sensitive liposomes as a potential drug delivery system: A biodistribution study / L. O. F. Monteiro, R. S. Fernandes, C. M R. Oda, S. C. Lopes, D. M. Townsend, V. N. Cardoso, M. C. Oliveira, E. A. Leite, D. Rubello, A. L. B. de Barros // Biomedicine & Pharmacotherapy. - 2018. - № 97. - P. 489-495. Ewert K. K. Synthesis of linear and cyclic peptide-PEG-lipids for stabilization and targeting of cationic liposome-DNA complexes / K. K. Ewert, V. R. Kotamraju, R. N. Majzoub, V. M. Steffes, E. A. Wonder, T. Teesalu, E. Ruoslahti, C. R. Safinya // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. - 2016. - № 26. - P. 1618-1623.

Uster P. S. Insertion of poly(ethylene glycol) derivatized phospholipid into pre-formed liposomes

results in prolonged in vivo circulation time / P. S. Uster, T. M. Allen, B. E. Daniel, C. J. Mendez,

M. S. Newman, G. Z. Zhu // FEBS Letters. - 1996. - № 386. - P. 243-246.

Nakamura K. Comparative studies of polyethylene glycol-modified liposomes prepared using

different PEG-modification methods / K. Nakamura, K. Yamashita, Y. Itoh, K. Yoshino, S.

Nozawa, H. Kasukawa // Biochimica et Biophysica Acta. Biomembranes. - 2012. - № 1818. - P.

2801-2807.

Torchilin V.P. Recent advances with liposomes as pharmaceutical carriers / V.P. Torchilin // Nature Review. Drug Discovery. - 2005. - № 4. - P. 145-160.

Such G. K. Synthesis and functionalization of nanoengineered materials using click chemistry / G. K. Such, A. P.R. Johnston, K. Liang, F. Caruso // Progress in Polymer Science. - 2012. - № 37. -P. 985-1003.

Kumar A. 'Clickable'', polymerized liposomes as a versatile and stable platform for rapid optimization of their peripheral compositions / A. Kumar, U. J. Erasquin, G. Qin, K. Li, C. Cai // Chemical community. - 2010. - № 46. - P. 5746-5748.

Kopecek J. HPMA copolymers: Origins, early developments, present, and future / J. KopeCek, P. Kopeckova // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2010. - № 62. - P. 122-149. Duncan R. Do HPMA copolymer conjugates have a future as clinically useful nanomedicines? A critical overview of current status and future opportunities / R. Duncan, M. J. Vicent // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2010. - № 62. - P. 272-282.

Etrych T. Biodegradable star HPMA polymer-drug conjugates: Biodegradability, distribution and anti-tumor efficacy / T. Etrych, L. Kovar, J. Strohalm, P. Chytil, B. Rihova, K. Ulbrich // Journal of Controlled Release. - 2011. - № 154. - P. 241-248.

Liu X. Poly(N-vinylpyrrolidone)-Modified Surfaces for Biomedical Applications / X. Liu, Y. Xu, Z. Wu, H. Chen. Macromolecular Bioscience. - 2013. - № 13. - P. 147-154. Zelikin A. N. Poly(vinylpyrrolidone) for Bioconjugation and Surface Ligand Immobilization / A. N. Zelikin, G. K. Such, A. Postma, F. Caruso // Biomacromolecules. - 2007. - № 8. - P. 29502953.

29

30

31

32

33

34

35

36

37

38

39

40

41

42

43

Lee H. Y. Poly(vinylpyrrolidone) conjugated lipid system for the hydrophobic drug delivery / H. Y. Lee, S. A. Yu, K. H. Jeong, Y.J. Kim // Macromolecular Research. - 2007. - № 15(6). - P. 547-552.

Gaertner F. C. Synthesis, biodistribution and excretion of radiolabeled poly(2-alkyl-2-oxazoline)s // F. C. Gaertner, R. Luxenhofer, B. Blechert, R. Jordan, M. Essler // Journal of Controlled Release. - 2007. - № 119. - P. 291-300.

Rosa V. R. Poly(2-oxazoline)s as materials for biomedical applications / V. R. Rosa // Journal of Materials Science: Materials in Medicine. - 2014. - № 25. - P. 1211-1225. Lava K. Poly(2-oxazoline)s and click chemistry: A versatile toolbox toward multi-functional polymers / K. Lava, B. Verbraeken, R. Hoogenboom // European Polymer Journal. - 2015. -№ 65. - P. 98-111.

Zalipsky S. Evaluation of Blood Clearance Rates and Biodistribution of Poly(2-oxazoline)-Grafted Liposomes / S. Zalipsky, C. B. Hansen, J. M. Oaks, T. M. Allen // Journal of Pharmaceutical Sciences. - 1996. - № 85(2). - P. 133-137.

Kohori F. Control of adriamycin cytotoxic activity using thermally responsive polymeric micelles composed of poly(N-isopropylacrylamide-co-N,N-dimethylacrylamide)-b-poly(D,L-lactide) / F. Kohori, K. Sakai, T. Aoyagi, M. Yokoyama, M. Yamato, Y. Sakurai, T. Okano // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 1999. - № 16. - P. 195-205.

Ta T. Localized delivery of doxorubicin in vivo from polymer-modified thermosensitive liposomes with MR-guided focused ultrasound-mediated heating / T. Ta, E. Bartolak-Suki, E.-J. Park, K. Karrobi, N. J. McDannold, T. M. Porter // Journal of Controlled Release. - 2014. - № 194. - P. 71-81.

Torchilin V. P. New Synthetic Amphiphilic Polymers for Steric Protection of Liposomes in Vivo / V. P. Torchilin, V. S. Trubetskoy, K. R. Whiteman, P. Caliceti, P. Ferruti, F. M. Veronese // Journal of Pharmaceutical Sciences. - 1995. - № 84(9). - P. 1049-1053.

Drotleff S. Biomimetic polymers in pharmaceutical and biomedical sciences / S. Drotleff, U. Lungwitz, M. Breunig, A. Dennis, T. Blunk, J. Tessmar, A .Gopferich // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2004. - № 58. - P. 385-407.

Kanamala M. Mechanisms and biomaterials in pH-responsive tumor targeted drug delivery: A review / M. Kanamala, W. R. Wilson, M. Yang, B. D. Palmer, Z. Wu // Biomaterials. - 2016. - № 85. - P. 152-167.

Ramasamy T. Smart chemistry-based nanosized drug delivery systems for systemic applications: A comprehensive review / T. Ramasamy, H. B. Ruttala, B. Gupta, B. K. Poudel, H.-G. Choic, C. S. Yong, J. O. Kim // Journal of Controlled Release. - 2017. - № 258. - P. 226-253. Canal F. Polymer-drug conjugates as nano-sized medicines / F. Canal, J. Sanchis, M. J. Vicent // Current Opinion in Biotechnology. - 2011. - № 22. - P. 894-900.

Mastan E. Modeling and theoretical development in controlled radical polymerization / E. Mastan, X. Li, S. Zhu // Progress in Polymer Science. - 2015. - № 45. - P. 71-101.

Xu H. The Bifunctional Liposomes Constructed by Poly(2-ethyl-oxazoline)-cholesteryl Methyl Carbonate: an Effectual Approach to Enhance Liposomal Circulation Time, pH-Sensitivity and Endosomal Escape / H. Xu, W. Zhang, Y. Li, F. F. Ye, P. P. Yin, X. Yu, M. N. Hu, Y. S. Fu, C. Wang, D. J. Shang // Pharmaceutical Research. - 2014. - № 31. - P. 3038-3050. Xia G. Synthesis of a Novel Polymeric Material Folate-Poly(2-ethyl-2-oxazoline)-Distearoyl Phosphatidyl Ethanolamine Tri-Block Polymer for Dual Receptor and pH-Sensitive Targeting

Liposome / G. Xia, Z. An, Y. Wang, C. Zhao, M. Li, Z. Li, J. Mac // Chemical and Pharmaceutical Bulletin. - 2013. - № 61(4). - P. 390-398.

44. Liu Y. Preparation, characterization and in vivo pharmacokinetic study of PVP-modified oleanolic acid liposomes / Y. Liu, X. Luo, X. Xu, N. Gao, X. Liu // International Journal of Pharmaceutics.

- 2017. - № 517. - P. 1-7.

45. Ulbrich K. Structural and chemical aspects of HPMA copolymers as drug carriers / K. Ulbrich, V. Subr // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2010. - № 62. - P. 150-166.

46. Paasonen L. Temperature-sensitive poly(N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide mono/dilactate)-coated liposomes for triggered contents release / L. Paasonen, B. Romberg, G. Storm, M. Yliperttula, A. Urtti, W. E. Hennink // Bioconjugate Chemistry. - 2007. - № 18. - P. 2131-2136.

47. Chiang Y.-T. Polymer-liposome complexes with a functional hydrogen-bond cross-linker for preventing protein adsorption and improving tumor accumulation / Y.-T. Chiang, Y.-T. Cheng, C.-Y. Lu, Y.-W. Yen, L.-Y. Yu, K.-S. Yu, S.-Y. Lyu, C.-Y. Yang, C.-L. Lo // Chemistry of Materials. - 2013. - № 25(21). - P. 4364-4372.

48. Chiang Y.-T. pH-Responsive polymer-liposomes for intracellular drug delivery and tumor extracellular matrix switched-on targeted cancer therapy / Y.-T. Chiang, C.-L. Lo // Biomaterials.

- 2014. - № 35. - P. 5414-5424.

49. Romberg B. Effect of liposome characteristics and dose on the pharmacokinetics of liposomes coated with poly(aminoacid)s / B. Romberg, C. Oussoren, C. J. Snel, W. E. Hennink, G. Storm // Pharmaceutical Research. - 2007. - № 24 (12). - P. 2394-2401.

50. Metselaar J. M. A novel family of L-amino acid-based biodegradable polymer-lipid conjugates for the development of long-circulating liposomes with effective drug-targeting capacity / J. M. Metselaar, P. Bruin, L. W. T. de Boer, T. de Vringer, C. Snel, C. Oussoren, M. H. Wauben, D. J. Crommelin, G. Storm, W. E. Hennink. // Bioconjugate Chemistry. - 2003. - № 14. - P. 11561164.

51. Kaneda Y. The use of PVP as a polymeric carrier to improve the plasma half-life of drugs / Y. Kaneda, Y. Tsutsumi, Y. Yoshioka, H. Kamada, Y. Yamamoto, H. Kodaira, S. Tsunoda, T. Okamoto, Y. Mukai, H. Shibata, S. Nakagawa, T. Mayumi // Biomaterials. - 2004. - № 25. - P. 3259-3266.

52. Takeuchi H. Evaluation of circulation profiles of liposomes coated with hydrophilic polymers having different molecular weights in rats / H. Takeuchi, H. Kojima, H. Yamamoto, Y. Kawashima // Journal of Controlled Release. - 2001. - № 75. - P. 83-91.

53. Abu Lila A. S. Use of polyglycerol (PG), instead of polyethylene glycol (PEG), prevents induction of the accelerated blood clearance phenomenon against long-circulating liposomes upon repeated administration / A. S. Abu Lila, K. Nawata, T. Shimizu, T. Ishida, H. Kiwada // International Journal of Pharmaceutics. - 2013. - № 456. - P. 235-242.

54. Kohli A. G. Designer lipids for drug delivery: From heads to tails / A. G. Kohli, P. H. Kierstead, V. J. Venditto, C. L. Walsh, F. C. Szoka // Journal of Controlled Release. - 2014. - № 190. - P. 274-287.

55. Wang Q. P-Glucans: Relationships between Modification, Conformation and Functional Activities / Q. Wang, X. Sheng, A. Shi, H. Hu, Y. Yang, L. Liu, L. Fei, H. Liu // Molecules. - 2017. - № 22(2). - 257(1-13).

56. Schauer R. Sialic acids: fascinating sugars in higher animals and man / R. Schauer // Zoology. -2004. - 107. - P. 49-64.

57

58

59

60

61

62

63

64

65

66

67

68

69

70

71

Csaba N. Nanoparticles for nasal vaccination / N. Csaba, M. Garcia-Fuentes, M. Jose Alonso // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2009. - 61. - P. 140-157.

Hasan M. Chitosan-coated liposomes encapsulating curcumin: study of lipid-polysaccharide interactions and nanovesicle behavior / M. Hasan, G. Ben Messaoud, F. Michaux, A. Tamayol, C. J. F. Kahn, N. Belhaj, M. Linder, E. Arab-Tehrany // RSC Advances. - 2016. - № 6. - P. 4529045304.

Bugnicourt L. A close collaboration of chitosan with lipid colloidal carriers for drug delivery applications / L. Bugnicourt, C. Ladaviere // Journal of Controlled Release. - 2017. - № 256. - P. 121-140.

Lin J. Preparation and ocular pharmacokinetics of hyaluronan acid-modified mucoadhesive liposomes / J. Lin, H. Wu, Y. Wang, J. Lin, Q. Chen, X. Zhu // Drug Delivery. - 2016. - № 23(4). - P. 1144-1151.

Ravar F. Hyaluronic acid-coated liposomes for targeted delivery of paclitaxel, in-vitro characterization and in-vivo evaluation / F. Ravar, E. Saadat, M. Gholami, P. Dehghankelishadi, M. Mahdavi, S. Azami, F. A. Dorkoosh // Journal of Controlled Release. - 2016. - № 229. - P. 10-22.

Chen H. The potential use of novel chitosan-coated deformable liposomes in an ocular drug delivery system / H. Chen, H. Pan, P. Li, H. Wang, X. Wang, W Pan, Y. Yuan // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2016. -143. - P. 455-462.

Venkatesan N. Polysaccharide coated liposomes for oral immunization - development and characterization / N. Venkatesan, S.P. Vyas // International Journal of Pharmaceutics. - 2000. -203. - P. 169-177.

Shao Y. TPGS-chitosome as an effective oral delivery system for improving the bioavailability of Coenzyme Q10 / Y. Shao, L. Yang, H.-K. Han // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2015. - № 89. - P. 339-346.

Salva E. The enhancement of gene silencing efficiency with chitosan-coated liposome formulations of siRNAs targeting HIF-1a and VEGF / E. Salva, S. O. Turan, F. Eren, J. Akbuga // International Journal of Pharmaceutics. - 2015. - № 478. - P. 147-154.

Nguyen T. X. Chitosan-coated nano-liposomes for the oral delivery of berberine hydrochloride / T. X. Nguyen, L. Huang, L. Liu, A. M. Elamin Abdalla, M. Gauthiere, G. Yang // Journal of Materials Chemistry B. -2014. -№2. - P. 7149-7159.

Sonvico F. Formation of self-organized nanoparticles by lecithin/chitosan ionic interaction /

F. Sonvico, A. Cagnani, A. Rossi, S. Motta, M. T. Di Bari, F. Cavatorta, M. J. Alonso, A. Deriu,

P. Colombo // International. Journal of Pharmaceutics. - 2006. - № 324. - P. 67-73.

Otake K. One-step preparation of chitosan-coated cationic liposomes by an improved supercritical

reverse-phase evaporation method / K. Otake, T. Shimomura, T. Goto, T. Imura, T. Furuya, S.

Yoda, Y. Takebayashi, H. Sakai, M. Abe // Langmuir. - 2006. - № 22. - P. 4054-4059.

De Oliveira Tiera V. A. Interaction of amphiphilic derivatives of chitosan with DPPC (1,2-

dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine) / V. A. De Oliveira Tiera, F. M. Winnik, M. J. Tiera //

Journal of Thermal Analysis and Calorimetry. - 2010. - № 100. - P. 309-313.

Quemeneur F. Influence of molecular weight and pH on adsorption of chitosan at the surface of

large and giant vesicles / F. Quemeneur, M. Rinaudo, B. Pepin-Donat // Biomacromolecules. -

2008. - № 9. - P. 396-402.

Fang N. Interactions of phospholipid bilayer with chitosan: effect of molecular weight and pH / N. Fang, V. Chan, H Q. Mao, K.W. Leong // Biomacromolecules. - 2001. - № 2. - P. 1161-1168.

72

73

74

75

76

77

78

79

80

81

82

83

84

85

86

Mertins O. Binding of chitosan to phospholipid vesicles studied with isothermal titration

calorimetry / O. Mertins, R. Dimova // Langmuir. - 2011. - № 27. - P. 5506-5515.

Alavia S. Utilization of chitosan-caged liposomes to push the boundaries of therapeutic delivery /

S. Alavia, A. Haeria, S. Dadashzadeh // Carbohydrate Polymers. - 2017. - № 157. - P. 991-1012.

Negi L. M. Hyaluronan coated liposomes as the intravenous platform for delivery of imatinib

mesylate in MDR colon cancer / L. M. Negi, M. Jaggi, V. Joshi, K. Ronodip, S. Talegaonkar //

International Journal of Biological Macromolecules. - 2015. - № 73. - P. 222-235.

Nguyen S. Studies on pectin coating of liposomes for drug delivery / S. Nguyen, S. J. Alund, M.

Hiorth, A.-L. Kjoniksen, G. Smistad // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2011. - № 88. -

P. 664-673.

Lopes N. A. Pectin and polygalacturonic acid-coated liposomes as novel delivery system for nisin: Preparation, characterization and release behavior / N. A. Lopes, C. M. B. Pinilla, A. Brandelli // Food Hydrocolloids. - 2017. - № 70. - P. 1-7.

Chi Y. Redox-sensitive and hyaluronic acid functionalized liposomes for cytoplasmic drug delivery to osteosarcoma in animal models / Y. Chi, X. Yin, K. Sun, S. Feng, J. Liu, D. Chen, C. Guo, Z. Wu // Journal of Controlled Release. - 2017. - № 261. - P. 113-125. Yoo C. Y. Preparation of novel capsosome with liposomal core by layer-by-layer self-assembly of sodium hyaluronate and chitosan / C. Y. Yoo, J. S. Seong, S. N. Park // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2016. - № 144. - P. 99-107.

Kaminski G. A. T. Layer-by-layer polysaccharide-coated liposomes for sustained delivery of epidermal growth factor / G. A. T. Kaminski, M. R. Sierakowski, R. Pontarolo, L. Antoniacomi dos Santos, R. Alves de Freitas // Carbohydrate Polymers. - 2016. - № 140. - P. 129-135. Guo H. Theranostic magnetoliposomes coated by carboxymethyl dextran with controlled release by low-frequency alternating magnetic field / H. Guo, W. Chen, X. Sun, Y.-N. Liu, J. Li, J. Wang // Carbohydrate Polymers. - 2015. - № 118. - P. 209-217.

Menon P. Preparation and characterization of liposomes coated with DEAE-Dextran / P. Menon, T. Yin Yin, M. Misran // Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects. -2015. - № 481. - P. 345-350.

Duehrkop C. Development and characterization of an innovative heparin coating to stabilize and protect liposomes against adverse immune reactions / C. Duehrkop, G. Leneweit, C. Heyder, K. Fromell, K. Edwards, K. N. Ekdahl, B. Nilsson // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2016.

- № 141. - P. 576-583.

Ahmed T. A. Preparation, characterization, and potential application of chitosan, chitosan derivatives, and chitosan metal nanoparticles in pharmaceutical drug delivery / T. A. Ahmed, B. M. Aljaeid // Drug Design, Development and Therapy. - 2016. - № 10. - P. 483-507. Karewicz A. Modified polysaccharides as versatile materials in controlled delivery of anti-degenerative agents // A. Karewicz, D. Bielska, M. Nowakowska // Current Pharmaceutical Design. - 2012. - № 18. - P. 2518-2535.

Smistad G. Liposomes coated with hydrophobically modified hydroxyethyl cellulose: Influence of hydrophobic chain length and degree of modification / G. Smistad, B. Nystrom, K. Zhu, M. K. Gronvold, A. Rov-Johnsen, M. Hiorth // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2017. - № 156.

- P. 79-86.

Hassani L. N. Auto-associative amphiphilic polysaccharides as drug delivery systems / L. N. Hassani, F. Hendra, K. Bouchemal // Drug Discovery Today. - 2012. - № 17 (11-12). -P. 608-614.

87. Wu Y. Layered structures of hydrophobically modified chitosan derivatives / Y. Wu, T. Seo, T. Sasaki, S. Irie, K. Sakurai // Carbohydrate Polymers. - 2006. - № 63 (4). - P. 493-499.

88. Liang G. Preparation, characterization and pharmacokinetics of N-palmitoyl chitosan anchored docetaxel liposomes / G. Liang, Z. Jia-Bi, X. Fei, N. Bin // Journal of Pharmacy and Pharmacology. - 2007. - № 59(5). - P. 661-667.

89. Deng J. The studies of N-Octyl-N-Arginine-Chitosan coated liposome as an oral delivery system of Cyclosporine A / J. Deng, Z. Zhang, C. Liu, L. Yin, J. Zhou, H. Lv // Journal of Pharmacy and Pharmacology. - 2015. - № 67. - P. 1363-1370.

90. Qu G. N-octyl-O-sulfate chitosan-modified liposomes for delivery of docetaxel: Preparation, characterization, and pharmacokinetics / G. Qu, X. Wu, L. Yin, C. Zhang // Biomedicine & Pharmacotherapy. - 2012. - № 66(1). - P. 46-51.

91. Wang Y. Cholesterol succinyl chitosan anchored liposomes: preparation, characterization, physical stability, and drug release behavior / Y. Wang, S. Tu, R. Li, X.Y. Yang, L. Liu, Q. Zhang // Nanomedicine: Nanotechnology, Biology, and Medicine. - 2010. - № 6. - P. 471-477.

92. Sivakumar P.A. The use of cholesteryl pullulan for the preparation of stable vincristine liposomes / P.A. Sivakumar, K. Panduranga Rao // Carbohydrate Polymers. - 2003. - № 51. - P. 327-332.

93. Cosco D. Polysaccharide-coated liposomes by post-insertion of a hyaluronan-lipid conjugate / D. Cosco, N. Tsapis, T. L. Nascimento, M. Fresta, D. Chapron, M. Taverna, S. Arpicco, E. Fattal // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. - 2017. - № 158. - P. 119-126.

94. Bernkop-Schnurch A. Thiomers: A new generation of mucoadhesive polymers / A. Bernkop-Schnurch // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2005. - № 57(11). - P. 1569-1582.

95. Bernkop-Schnurch A. Thiolated chitosans / A. Bernkop-Schnurch, M. Hornof, D. Guggi // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2004. - 57(1). - P. 9-17.

96. Werle M. Thiolated chitosans: Useful excipients for oral drug delivery / M. Werle, A. Bernkop-Schnurch // Journal of Pharmacy and Pharmacology. - 2008. - № 60(3). - P. 273-281.

97. Li R. Liposomes coated with thiolated chitosan as drug carriers of curcumin / R. Li, L. Deng, Z. Cai, S. Zhang, K. Wang, L. Li, S. Ding, C. Zhou // Materials Science and Engineering C. - 2017.

- № 80. - P. 156-164.

98. Gradauer K. Liposomes coated with thiolated chitosan enhance oral peptide delivery to rats / K. Gradauer, J. Barthelmes, C. Vonach, G. Almer, H. Mangge, B. Teubl, E. Roblegg , S. Dünnhaupt, E. Fröhlich, A. Bernkop-Schnürch, R. Prassl // Journal of Controlled Release. - 2013. - № 172(3).

- P. 872-878.

99. Gradauer K. Tiomer-coated liposomes harbor permeation enchancing and efflux pump inhibitory properties / K. Gradauer, S. Dünnhaupt, C. Vonach, H. Szöllösi, I. Pali-Schöll, H. Mangge, E. Jensen-Jarolim, A. Bernkop-Schnürch, R. Prassl // Journal of Controlled Release. - 2013. - № 165. - P. 207-215.

100. Gradauer K. Chemical coupling of thiolated chitosan to preformed liposomes improves mucoadhesive properties / K. Gradauer, C. Vonach, G. Leitinger, D. Kolb, E. Fröhlich, E. Rodblegg, A. Bernkop-Schnürch, R. Prassl // International Journal of Nanomedicine. - 2012. - № 7. - P. 2523-2534.

101. Ran R. Enhanced gene delivery efficiency of cationic liposomes coated with PEGylated hyaluronic acid for anti P-glycoprotein siRNA: A potential candidate for overcoming multi-drug resistance / R. Ran, Y. Liu ,H. Gao, Q. Kuang, Q. Zhang, J. Tang, K. Huang, X. Chen, Z. Zhang, Q. He // International Journal of Pharmaceutics. - 2014. - № 477. - P. 590-600.

102. Ruttala H. B. Multiple polysaccharide-drug complex-loaded liposomes: A unique strategy in drug loading and cancer targeting H. B. Ruttala, T. Ramasamy, B. Gupta, H.-G. Choi, C. S. Yong, J. O. Kima // Carbohydrate Polymers. - 2017. - № 173. - P. 57-66.

103. Feng L. Roles of dextrans on improving lymphatic drainage for liposomal drug delivery system / L. Feng, L. Zhang, M. Liu, Z. Yan, C. Wang, B. Gu, Y. Liu, G. Wei, G. Zhong, W. Lu // Journal of Drug Targeting. - 2010. - № 18. - P. 168-178.

104. Caddeo C. Cross-linked chitosan/liposome hybrid system for the intestinal delivery of quercetin C / Caddeo, O. Diez-Sales, R. Pons, C. Carbone, G. Ennas, G. Puglisi, A. M. Fadda, M. Manconi // Journal of Colloid and Interface Science. - 2016. - № 461. - P. 69-78.

105. Wu J. Preparation and biological activity studies of resveratrol loaded ionically cross-linked chitosan-TPP nanoparticles / J. Wu, Y. Wang, H. Yang, X. Liu, Z. Lu // Carbohydrate Polymers. -2017. - № 175. - P. 170-177.

106. Joshi M. D. DC-SIGN mediated antigen-targeting using glycan-modified liposomes: Formulation considerations / M. D. Joshi, W. W. J. Ungerb, A. J. van Beelen, S. C. Bruijns, M. Litjens, L. van Bloois, H. Kalay, Y. van Kooyk, G. Storm // International Journal of Pharmaceutics. - 2011. - № 416. - P. 426-432.

107. Andrews G. P. Mucoadhesive polymeric platforms for controlled drug delivery / G. P. Andrews, T. P. Laverty, D. S. Jones // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2009. -№ 71. - P. 505-518.

108. Adamczak M. I. An in vitro study of mucoadhesion and biocompatibility of polymer coated liposomes on HT29-MTX mucus-producing cells. M. I. Adamczak, E. Hagesaether, G. Smistad, M. Hiorth // International Journal of Pharmaceutics. - 2016. - № 498. - P. 225-233.

109. Klemetsrud T. Polymer coated liposomes for use in the oral cavity - a study of the in vitro toxicity, effect on cell permeability and interaction with mucin / T. Klemetsrud, A. L. Kj0niksen, M. Hiorth, J. Jacobsen, G. Smistad // Journal of Liposome Research. - 2018. - № 28 (1). - P. 62-73.

110. Pistone S. Polysaccharide-coated liposomal formulations for dental targeting / S. Pistone, M. Rykke, G. Smistad, M. Hiorth // International Journal of Pharmaceutics. - 2017. - № 516. - P. 106-115.

111. Adamczak M. I. Polymer coated mucoadhesive liposomes intended for the management of xerostomia / M. I. Adamczak, O. G. Martinsen, G. Smistad, M. Hiorth // International Journal of Pharmaceutics. - 2017. - № 527. - P. 72-78.

112. Netsomboon K. Mucoadhesive vs. mucopenetrating particulate drug delivery / K. Netsomboon, A. Bernkop-Schnürch // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. - 2016. - № 98. - P. 76-89.

113. Luo G. F. Encapsulation of an adamantane-doxorubicin prodrug in pH-responsive polysaccharide capsules for controlled release / G. F. Luo, X. D. Xu, J. Zhang, J. Yang, Y. H. Gong, Q. Lei, X. Z. Zhang // ACS applied materials & interfaces. - 2012. - № 4 (10). - P. 5317-5324.

114. Saha S. Photochemical green synthesis of calcium-alginate-stabilized Ag and Au nanoparticles and their catalytic application to 4-nitrophenol reduction / S. Saha, A. Pal, S. Kundu, S. Basu, T. Pal // Langmuir. - 2009. - № 26 (4). - P. 2885-2893.

115. Munarin F. Structural properties of polysaccharide-based microcapsules for soft tissue regeneration / F. Munarin, P. Petrini, S. Fare, M. C. Tanzi // Journal of Materials Science: Materials in Medicine. - 2010. - № 21 (1). - P. 365-375.

116. Gao L. pH-and Redox-Responsive Polysaccharide-Based Microcapsules with Autofluorescence for Biomedical Applications / L. Gao, J. Fei, J. Zhao, W. Cui, Y. Cui, J. Li // Chemistry-A European Journal. - 2012. - №. 18 (11). - P. 3185-3192.

117. Hirsjarvi S. Surface modification of lipid nanocapsules with polysaccharides: from physicochemical characteristics to in vivo aspects / S. Hirsjarvi, S. Dufort, G. Bastiat, P. Saulnier, C. Passirani, J.L. Coll, J.P. Benoît // Acta biomaterialia. - 2013. - №. 9 (5). - P. 6686-6693.

118. Meier W. Polymer nanocapsules / W. Meier // Chemical Society Reviews. - 2000. - V. 29. - №. 5. - P. 295-303.

119. Liu Z. Polysaccharides-based nanoparticles as drug delivery systems / Z. Liu, Y. Jiao, Y. Wang, C. Zhou, Z. Zhang // Advanced drug delivery reviews. - 2008. - V. 60. - №. 15. - P. 1650-1662.

120. Patil Y. P. Novel methods for liposome preparation / Y. P. Patil, S. Jadhav // Chemistry and physics of lipids. - 2014. - V. 177. - P. 8-18.

121. Kumar A. Why chitosan? From properties to perspective of mucosal drug delivery / A. Kumar, A. Vimal, A. Kumar //International journal of biological macromolecules. - 2016. - V. 91. - P. 615622.

122. Fracasso A. F. Chemical modification of citrus pectin: Structural, physical and rheologial implications / F. Fracasso, C.A. Perussello, D. Carpiné, C.L. de Oliveira Petkowicz, C.W.I. Haminiuk // International journal of biological macromolecules. - 2018. - V. 109. - P. 784-792.

123. Noh J. Microencapsulation by pectin for multi-components carriers bearing both hydrophobic and hydrophilic active agents / J. Noh, J. Kim, J. S. Kim, Y. S. Chung, S. T. Chang, J. Park // Carbohydrate polymers. - 2018. - V. 182. - P. 172-179.

124. Li Y. Preparation, characterization and evaluation of bufalin liposomes coated with citrus pectin / Y. Li, H. Zhao, L.-R. Duan, H. Li, Q. Yang, H.-H. Tu, W. Cao, S.-W. Wang //Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects. - 2014. - V. 444. - P. 54-62.

125. Thirawong N. Viscometric study of pectin-mucin interaction and its mucoadhesive bond strength / N. Thirawong, R. A. Kennedy, P. Sriamornsak // Carbohydrate Polymers. - 2008. - V. 71. - №. 2. - P. 170-179.

126. Chéron N. Challenging 50 years of established views on Ugi reaction: A theoretical approach / N. Chéron, R. Ramozzi, L. E. Kaïm, L. Grimaud, P. Fleurat-Lessard //The Journal of organic chemistry. - 2012. - V. 77. - №. 3. - P. 1361-1366.

127. Alvim H. G. O. What do we know about multicomponent reactions? Mechanisms and trends for the Biginelli, Hantzsch, Mannich, Passerini and Ugi MCRs / H. G. O. Alvim, E. N. da Silva Júnior, B. A. D. Neto //RSC Advances. - 2014. - V. 4. - №. 97. - P. 54282-54299.

128. Medeiros G. A. Probing the mechanism of the Ugi four-component reaction with charge-tagged reagents by ESI-MS (/MS) / G. A. Medeiros, W. A. da Silva, G. A. Bataglion, D. A. C. Ferreira, H. C. B. de Oliveira, M. N. Eberlin, B. A. D. Neto // Chemical Communications. - 2014. - V. 50. - №. 3. - P. 338-340.

129. Pirrung M. C. Multicomponent reactions are accelerated in water / M. C Pirrung, K. D. Sarma // Journal of the American Chemical Society. - 2004. - V. 126. - №. 2. - P. 444-445.

130. Yang B. Introducing the Ugi reaction into polymer chemistry as a green click reaction to prepare middle-functional block copolymers / B. Yang, Y. Zhao, C. Fu, C. Zhu, Y. Zhang, S. Wang, Y. Weia, L. Tao //Polymer Chemistry. - 2014. - V. 5. - №. 8. - P. 2704-2708.

131. Bu H. Rheological and structural properties of aqueous alginate during gelation via the Ugi multicomponent condensation reaction / H. Bu, A.-L. Kj0niksen, K. D. Knudsen, B. Nystrom // Biomacromolecules. - 2004. - V. 5. - №. 4. - P. 1470-1479.

132. Werner B. Characterization of gelation of aqueous pectin via the Ugi multicomponent condensation reaction / B. Werner, H. Bu, A. L. Kj0niksen, S. A. Sande, B. Nyström // Polymer Bulletin. - 2006. - V. 56. - №. 6. - P. 579-589.

133. Parmentier J. Improved oral bioavailability of human growth hormone by a combination of liposomes containing bio-enhancers and tetraether lipids and omeprazole / J. Parmentier, G. Hofhaus, S. Thomas, L. C. Cuesta, F. Gropp, R. Schröder, ..., G. Fricker // Journal of pharmaceutical sciences. - 2014. - V. 103. - №. 12. - P. 3985-3993.

134. Benito C. ß-Amyloid exacerbates inflammation in astrocytes lacking fatty acid amide hydrolase through a mechanism involving PPAR-a, PPAR-y and TRPV1, but not CB1 or CB2 receptors / C. Benito, R. M. Tolón, A. I. Castillo, L. Ruiz- Valdepeñas, J. A. Martínez-Orgado, F. J. Fernández-Sánchez, ... & J. Romero //British journal of pharmacology. - 2012. - V. 166. - №. 4. - P. 14741489.

135. Xingnan L. I. Improved LC-MS Method for the Determination of Fatty Acids in Red Blood Cells by LC-Orbitrap MS / L.I. Xingnan, A.A. Franke // Analytical Chemistry. - 2011. - V. 83. - P. 3192-3198.

136. Pharmaceutical composition containing choline ester salts for enhancing gastrointestinal tract absorbtion [Text] : Pat. Appl. EP 1986/0401414 B1, US : Int. Cl. A 61 K 31/22 / Inventors Alexander Jose (US), Fix Joseph A (US); Merck &. Co. Inc. - EP 1992/0206947: filed 01.04.1986; publ. 15.04.1992 ; priority US 19850749696.

137. Чарушин В.Н. Триазавирин - противовирусный препарат нового поколения / В. Н. Чарушин, О. Н. Чупахин и др. - Екатеринбург: Изд-во Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, 2016. - С. 254. УДК: 615.038 + 315.281.8.

138. Mironov M. A. Synthesis of polyampholyte microgels from colloidal salts of pectinic acid and their application as pH-responsive emulsifiers / M. A. Mironov, I. D. Shulepov, V. S. Ponomarev, V. A. Bakulev // Colloid and Polymer Science. - 2013. - V. 291. - №. 7. - P. 1683-1691.

139. Sosnik A.. Mucoadhesive polymers in the design of nano-drug delivery systems for administration by non-parenteral routes: a review / A. Sosnik, J. das Neves, B. Sarmento // Progress in Polymer Science. - 2014. - V. 39. - №. 12. - P. 2030-2075.

140. Ciolacu D. Physically and chemically cross-linked cellulose cryogels: Structure, properties and application for controlled release / D. Ciolacu, C. Rudaz, M. Vasilescu, T. Budtova // Carbohydrate polymers. - 2016. - V. 151. - P. 392-400.

141. Pistone S. Formulation of polysaccharide-based nanoparticles for local administration into the oral cavity / S. Pistone, F. M. Goycoolea, A. Young, G. Smistad, M. Hiorth // European Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2017. - V. 96. - P. 381-389.

142. Budiasih S. Optimization of polymer concentration for designing of oral matrix controlled release dosage form / S. Budiasih, K. Jiyauddin, N. Logavinod, et al. // UK Journal of Pharmaceutical and Biosciences. - 2014. - V. 2. - № 5. - P. 54-61.

143. Fu Y. Drug release kinetics and transport mechanisms of non-degradable and degradable polymeric delivery systems / Y. Fu, W. J. Kao // Expert opinion on drug delivery. - 2010. - V. 7. - №. 4. - P. 429-444.

144. Herrmann A. Dynamic combinatorial/covalent chemistry: a tool to read, generate and modulate the bioactivity of compounds and compound mixtures / A. Herrmann // Chemical Society Reviews. - 2014. - V. 43. - №. 6. - P. 1899-1933.

145. Ji Q. Kinetically controlled phenomena in dynamic combinatorial libraries / Q. Ji, R. C. Lirag, O. S. Miljanic // Chemical Society Reviews. - 2014. - V. 43. - №. 6. - P. 1873-1884.

146. Marin L. Imino-chitosan biodynamers / L. Marin, B. Simionescu, M. Barboiu // Chemical Communications. - 2012. - V. 48. - №. 70. - P. 8778-8780.

147. Mahon C. S. Templating a polymer-scaffolded dynamic combinatorial library / C. S. Mahon, A. W. Jackson, B. S. Murray, D. A. Fulton //Chemical Communications. - 2011. - V. 47. - №. 25. -P. 7209-7211.

148. Ura Y. Self-assembling sequence-adaptive peptide nucleic acids / Y. Ura, , J. M. Beierle, , L. J. Leman, L. E. Orgel, M. R. Ghadiri // Science. - 2009. - V. 325. - №. 5936. - P. 73-77.

149. ISO 10993-5-2009. Biological evaluation of medical devices-Part 5: Tests for in vitro cytotoxicity, in vitro methods: 8.2 tests on extract // Geneva, Switzerland. - 2009.

150. Menchicchi B. Structure of Chitosan Determines Its Interactions with Mucin / B. Menchicchi, J. P. Fuenzalida, A. Hensel, et al // Biomacromolecules. - 2015. - V. 16 (3). - P. 924-935.

151. Hagesaether E. In vitro measurements of mucoadhesive properties of six types of pectin / E. Hagesaether, S. A. Sande // Drug development and industrial pharmacy. - 2007. - V. 33. - №. 4. -P. 417-425.

152. Villanova J. C. O. Design, characterization and preliminary in vitro evaluation of a mucoadhesive polymer based on modified pectin and acrylic monomers with potential use as a pharmaceutical excipient / J. C. O. Villanova, E. Ayres, R. L. Orefice // Carbohydrate polymers. - 2015. - V. 121.

- P. 372-381.

153. Leonaviciute G. Preactivated thiolated pullulan as a versatile excipient for mucosal drug targeting / G. Leonaviciute, W. Suchaoin, B. Matuszczak,et al // Carbohydrate polymers. - 2016. - V. 151.

- P. 743-751.

154. Qiang F. Enhanced systemic exposure of fexofenadine via the intranasal administration of chitosan-coated liposome / F. Qiang, H. J. Chin, B. J. Lee, H. K. Han // International Journal of Pharmaceutics. - 2012. - V. 430. - P. 161-166.

155. Mironov M. A. Novel synthesis of dihydrothiophene-2,5-diimine derivatives by the three-component reaction of isocyanides with enamines and arylisothiocyanates / M. A. Mironov, M. N. lvantsova, M. I. Tokareva, V. S. Mokrushin // Heterocycles. . - 2007. - V. 73. - P. 567-579.

156. Ugi I. Isonitrile Syntheses / I. Ugi, U. Fetzer, U. Eholzer, et al. // Angewandte Chemie International Edition. - 1965. - V.77. - P.492-504.

157. Alexander R.J. A laboratory manual of analytical methods of protein chemistry / R. J. Alexander // New York: Pergamon. - 1970. - pp. 234-256.

158. Bradford M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / M. M. Bradford // Analytical biochemistry.

- 1976. - V. 72. - №. 1-2. - P. 248-254.

159. Lee C. A. Quantitative evaluation of mucoadhesive polymers to compare the mucoadhesion / C. A. Lee, B. S. Kim, C. W. Cho // Journal of Pharmaceutical Investigation. - 2016. - V. 46. - №. 2.

- P. 189-194.