Синтез иммуноактивных фрагментов белков внешней мембраны менингококка-потенциальных компонентов искусственной противоменингококковой вакцины тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.10, кандидат химических наук Короев, Дмитрий Отарович

• Короев, Дмитрий Отарович
• кандидат химических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат химических наук Короев, Дмитрий Отарович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

РОЛЬ БЕЛКОВ НАРУЖНОЙ МЕМБРАНЫ БАКТЕРИИ NEISSERIA MENINGITIDIS В ФОРМИРОВАНИИ ИММУННОГО ОТВЕТА.

1. Эпидемиология менингококковой инфекции.

2. Проблемы противоменингококковой иммунопрофилактики.

3. Участие белков наружной мембраны Neisseria meningitidis в индукции антибактериального иммунитета.

3.1. Белок структурного класса 1 - РогА.

3.1.1. Структура белка РогА и его расположение в наружной мембране

Neisseria meningitidis

3.1.2. Антигенные и иммуногенные свойства белка РогА.

3.1.3. Картирование В-эпитопов белка РогА.

3.1.4. Картирование Т-хелперных эпитопов РогА.

3.1.5. Изучение иммуногенных свойств белка РогА с помощью синтетических пептидов.

3.2. Белки структурного класса 2/3 - РогВ.

3.2.1. Структура белков РогВ и их расположение в наружной мембране Neisseria meningitidis.

3.2.2. Антигенные и иммуногенные свойства белков РогВ.

3.2.3. Картирование Т-эпитопов белка РогВ.

3.3. Белок структурного класса 4 — Rmp.

3.3.1. Структура и расположение белка Rmp в наружной мембране Neisseria meningitidis.

3.3.2. Антигенные и иммуногенные свойства белка Rmp.

3.4. Белки структурного класса 5.

3.4.1. Семейство белков Ора.

3.4.1.1. Структура и расположение белков Ора в наружной мембране Neisseria meningitidis.

3.4.1.2. Картирование В-эпитопов белков Ора.

3.4.1.3. Картирование Т-хелперных эпитопов белков семейства Ора.

3.4.2. Белок Орс.

3.4.2.1. Структура, расположение белка Орс в наружной мембране Neisseria meningitidis и его функции.

3.4.2.2. Антигенные и иммуногенные свойства белка Орс.

3.5. Железорегулируемые белки.

3.5.1. Белки ТЬр трансферринового рецептора.

3.5.1.1. Структура белка ТЪрВ и его расположение в наружной мембране Neisseria meningitidis.

3.5.1.2. Антигенные и иммуногенные свойства белка ТЬрВ.

3.5.1.3. Структура белка ТЬрА и его расположение в наружной мембране Neisseria meningitidis.

3.5.1.4. Антигенные и иммуногенные свойства белка ТЬрА.

3. б. Белок NspA.

3.6.1. Структура белка NspA и его расположение в наружной мембране Neisseria meningitidis.

3.6.2. Антигенные и иммуногенные свойства белка NspA.

3.7. Белок GNA33.

ГЛАВА II. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

1. Выбор фрагментов белков наружной мембраны Neisseria meningitidis. I. Выбор фрагментов белка Рог А.

1.2. Выбор фрагментов белка ОраВ.

1.3. Выбор фрагментов белка NspA.

2. Синтез фрагментов белков наружной мембраны PorA, ОраВ и NspA Neisseria meningitidis.

3. Изучение иммуногенных, антигенных и протективных свойств синтетических фрагментов белка PorA.

4. Изучение иммуногенных, антигенных и протективных свойств синтетических фрагментов белка ОраВ Neisseria meningitidis.

5. Изучение иммуногенных, антигенных и протективных свойств синтетических фрагментов белка NspA Neisseria meningitidis.

ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез иммуноактивных фрагментов белков внешней мембраны менингококка-потенциальных компонентов искусственной противоменингококковой вакцины»

Бактерия Neisseria meningitidis вызывает инфекционное заболевание, которое приводит к высокой смертности среди заболевших людей, а в случае выздоровления - к частым осложнениям, связанным с поражениями центральной нервной системы. Без оказания: своевременной медицинской помощи смертность от менингококковой инфекции достигает 80%. Для лечения этого заболевания используют антибиотики, при этом смертность снижается до 10%, однако более эффективной и с экономической точки зрения выгодной мерой борьбы с менингококковой инфекцией на сегодняшний день является вакцинация.

По специфичности полисахаридной капсулы менингококков делят на несколько серогрупп, причем наиболее частой причиной менингококковой инфекции являются три серогруппы - А, В и С. Против инфекции, обусловленной менингококками серогрупп А и С, разработаны довольно эффективные вакцины на основе капсульного полисахарида, которые, однако, обладают определенными недостатками (непродолжительность защитного действия и неэффективность при использовании на малолетних детях). Кроме того, вакцина против менингококка одной серогруппы не может защищать от заболевания, вызванного менингококком другой серогруппы.

Для производства вакцины против бактерии серогруппы В полисахарид не используют по причине низкой иммуногенности данного полисахарида, который индуцирует образование только лишь IgM-антител в малых количествах, не защищающих от заболевания менингококковой инфекцией. Кроме того, антигенное сходство с молекулярными структурами эмбриональной нервной и некоторых других тканей делает полисахарид В опасным для применения в вакцине из-за вероятности развития аутоиммунных заболеваний.

В настоящий момент актуальной является задача поиска новых, отличных от полисахарида, протективных антигенов N. meningitidis с целью разработки эффективного им-мунопрофилактического препарата, защищающего в первую очередь от инфекции, вызываемой менингококком серогруппы В.

Наружная мембрана бактерии //, meningitidis содержит множество белков, к которым: во время инфекции образуются протективные и опсонизирующие антитела. Чем больше этих антител у человека, тем менее он восприимчив к менингококковой инфекции. Идея использования белков наружной мембраны менингококка для индукции протектив-иого гуморального иммунного ответа прочно утвердилась за последние 30 лет.

Новый и перспективный подход к созданию противоменингококковой вакцины заключается в синтезе фрагментов белков наружной мембраны менингококка и в создании на их основе искусственного вакцинирующего препарата. Такой подход дает возможность проводить вакцинацию «неинфекционными» химически индивидуальными соединениями, индуцирующими строго направленный протективный иммунный ответ.

С целью выявления пептидных компонентов потенциальной искусственной вакцины против менингококка серогруппы В в рамках настоящей работы была поставлена задача выбора иммуноактивных участков трех белков наружной мембраны менингококка: РогА, ОраВ и NspA, химического синтеза этих участков и изучения их иммуногенных, антигенных и протективных свойств.

Заключение диссертации по теме «Биоорганическая химия», Короев, Дмитрий Отарович

выводы

1. На основе данных литературы и теоретических методов анализа осуществлен выбор потенциально иммуноактивных фрагментов белков наружной мембраны менингококка Осуществлен синтез 14 фрагментов белка РогА, И фрагментов белка ОраВ и 4 фрагментов белка NspA внешней мембраны менингококка.

2. Установлено, что большинство синтетических фрагментов белков РогА, ОраВ и NspA способно проявлять иммуногенную активность в свободном виде, без конъюгации с белковым носителем.

3. Выявлены фрагменты 178-199, 306-332 белка РогА, связывающиеся с противоменин-гококковыми антителами животных, зараженных бактериями N. meningitidis, и являющиеся В-эпитопами.

4. Показано, что синтетические фрагменты 32-51, 118-143, 178-199, 273-292, 306-332, 346-363 белка РогА, 30-51, 64-83, 74-93, 109-130 белка ОраВ и 40-62 белка NspA обеспечивают индукцию протективного иммунитета у лабораторных животных при их экспериментальном заражении менингококком штамма Н44/76.

5. Установлено, что синтетические фрагменты 32-51, 273-292, 306-332, 346-363 белка РогА, 30-51 ОраВ и 40-62 белка NspA наиболее эффективно индуцируют защиту при экспериментальном заражении лабораторных животных менингококком штамма В2394.

6. Выявленные иммуноактивные синтетические фрагменты белков РогА, ОраВ и NspA являются компонентами разрабатываемой в настоящее время искусственной противоменингококковой вакцины.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Короев, Дмитрий Отарович, 2004 год

1. Weichselbaum A. Uber die Aetiologie der akuten Meningitis cerebro-spinalis // Fortschr. Med. 1887. V.5. P.573-583.

2. Peltola H. Meningococcal disease: still with us // Rev. Infect. Dis. 1983. V.5. P.71-91.

3. Poolman J.T. Development of a meningococcal vaccine // Infect. Agents Dis. 1995. V.4. P.13-28.

4. Schwartz В., Moore P.S., Broome C.V. Global epidemiology of meningococcal disease // Clin. Microbiol. Lett, (suppl.) 1989. V.2. P.S118-S124.

5. Дельвиг А. А., Семенов Б.Ф. Перспективы разаботки везикулярной менингококковой вакцины серогруппы В // Журн. мкробиол. 1998. №1. С.91-96.

6. Achtman М., van der Ende A., Zhu P., Koroleva I.S., Kusecek В., Morelli G., Schuurman

7. G.A., Brieske N., Zurth K., Kostyukova N.N., Platonov A.E. Molecular Epidemiology of Serogroup A Meningitis in Moscow, 1969-1997 // Emerging Infectious Diseases. 2001. V.7. P.420-427.

8. Frasch C.E. Vaccines for prevention of meningococcal disease // Clin. Microbiol. Rev. 1989. V. 2 (suppl.). P. S134-S138.

9. Romero D.J., Outschoorn I.M. Current status of meningococcal group В vaccine candidates: capsular or noncapsular? // Clin. Microbiol. Rev. 1994. V. 7. P. 559-575.

10. Jay D., Wenger M.D. Serogroup В meningococcal disease. New outbreaks, new strategies//JAMA. 1999. V. 281. P. 1541-1543.

11. Goldschneider I., Lepow M.L., Gotsclich E.C., Mauck F.T., Bachl F., Randolph M. Immunogenicity of group A and group С meningococcal polysaccharides in human infants // J. Infect. Dis. 1973. V. 128. P. 769-776.

12. Hankins W.A., Gwantley G.M., Hendley J.O., Farquhar J.D., Samuelson J.S. Clinical and serological evaluation of a meningococcal polysaccharide vaccine groups A, C, Y and W135 // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1982. V. 169. P. 54-57.

13. Mandrell R.E., Zollinger W.D. Measurement of antibodies to meningococcal serogroup В polysaccharide: Low avidity binding and equilibrium binding constants // J. Immunol. 1982. V. 129. P. 2172-2177.

14. VVyle F.E., Artenstein M.S., Brandt B.L., Tramont E.C., Kasper D.L., Altieri P.L., Berman S.L., Lowenthal J.P. Immunological response in man to group В meningococcal polysaccharide vaccines//J. Infect. Dis. 1972. V. 126. P. 514-522.

15. Jarvis G.A., Vedros N.A. Sialic acid of group В Neisseria meningitidis regulates alternative complement pathway activation// Infect. Immun. 1987. V. 55. P. 174-180.

16. Rieger F.M., Grumet M., Edelman G.M. N-CAM at the vertebrate neuromuscular junction//J. Cell. Biol. 1985. V. 101. P. 285-293.

17. Филатова Т.Н., Гамзулииа JI.H. Антитела к белкам менингококков в сыворотках больных и доноров // Журн. Микробиол. 2000. № 3. С. 58-65.

18. Verheul A.F.M., Snippe Н., Poolman J.T. Meningococcal Lipopolysaccharides: Virulence Factor and Potential Vaccine Component // Microbiol. Rev. 1993. V. 57. P. 34-49.

19. Tinsley C.R., Nassif X. Analysis of the genetic differences beetwen Neisseria meningitidis and Neisseria gonorrhoeae: Two closely related bacteria expressing two different pathogenicities//PNAS. 1996. V. 93 P. 11109-11114.

20. Goldschneider I., Gotschlich E.C., Artenstein M.S. Human immunity to the meningococcus. I. The role of humoral antibodies // J. Exp. Med. 1969. V. 129. P. 1307-1326.

21. Goldschneider I., Gotschlich E.C., Artenstein M.S. Human immunity to the meningococcus. II. Development of natural immunity//J. Exp. Med. 1969. V.129. P.1327-1378.

22. Gotschlich E.C., Goldschneider I., and Artenstein M.S. Human immunity to the meningococcus. IV. Immunogenicity of serogroup A and serogroup С polysaccharides in human volunteers//J. Exp. Med. 1969. V. 129. P. 1367-1384.

23. Frasch C.E. Status of a group-B Neisseria meningitidis vaccine // Eur. J. Clin. Microbiol. 1985. V.4. P.533-536.

24. Frasch C.E., Tsai C.-M., Mocca L.F. Outer membrane proteins of Neisseria meningitidis: structure and importance in meningococcal disease // Clin. Invest. Med. 1986. V. 9. P. 101-107.

25. Tsai С.М., Frasch С.Е., Mocca L.F. Five structural classes of major outer membrane proteins in Neisseria meningitidis // J. Bacterid. 1981. V.146. P.69-78.

26. Costantino P., Viti S., Podda A., Velmonte M.A., Nencioni L., Rappuoli R. Development and phase 1 clinical testing of a conjugate vaccine against meningococcus A and С // Vaccine. 1992.V. 10. P. 691-698.

27. Jennings H.J., and Lugowski C. Immunochemistry of groups A, B, and С meningococcal polysaccharide-tetanus toxoid conjugates.//J. immunol. 1981. V. 127. P.1011-1018.

28. Anderson E.L., Bowers Т., Mink C.M., Kennedy D.J:, Belshe R.B;, Harakeh H., Pais L., Holder P., Carlone G.M. Safety and immunogenicity of meningococcal A and С polysaccliaride conjugate vaccine in adults // Infect. Immun. 1994. V. 62. P. 3391-3395.

29. Fairley C.K., Begg N., Borrow R. , Fox A.J., Jones D.M., Cartwright K. Conjugate meningococcal serogroup A and С vaccine: reactogenicity and immunogenicity in United Kingdom infants // J. Infect. Dis. 1996. V. 174. P. 1360-1363.

30. Bjune G., Gronnesby J.K., Hoiby E.A., Closs O., Nokleby H. Results of an efficacy trial with an outer membrane vesicle vaccine against systemic serogroup В meningococcal disease in Norway//NIPH Ann. 1991. V. 14. P. 125-130.

31. Tommassen J., Vermeij P., Struyve M., Benz R., Poolman J.T. Isolation of Neisseria meningitidis mutants deficient in class I (PorA) and class 3 (PorB) outer membrane proteins // Infect Immun. 1990. V. 58. P. 1355-1359.

32. Barlow A.K., Heckels J.E., Clarke I.N. The class 1 outer membrane protein of Neisseria meningitidis: gene sequence and structural and immunological similarities to gonococcal porins // Mol. Microbiol 1989. V. 3. P. 131-139.

33. Poolman J.T., Timmermans Н.А.М., Teerlink Т., Seid R.C.Jr. Purification, cyanogen bromide cleavage, and amino terminus sequencing of class 1 and class 3 outer membrane proteins of meningococci // Infect. Immun. 1989. V. 57. P. 1005-1007.

34. Ulmer J.B., Burke C.J., Shi C., Friedman A., Donnelly J.J., Liu М.А. Pore formation and mitogenicity in blood cells by the class 2 protein of Neisseria meningitidis II J. Biol. Chem. 1992. V. 267. P. 19266-19271.

35. Murakami K., Gotschlich E.G., Seiff M.E. Cloning and characterisation of the structural gene for the Class 2 protein of Neisseria meningitidis. Infect. Immun. 1989. V. 57. P. 2318-2323.

36. Gotschlich E.C., Seiff M.E., Blake M.S., Koomey M. Porin protein of Neisseria gonorrhoeae-, cloning and gene structure // PNAS. 1987. V. 84. P. 8135-8139.

37. Carbonetti N.H., Sparling P.F. Molecular cloning and characterization of the structural gene for protein I, the major outer membrane protein of Neisseria gonorrhoeae II PNAS 1987. V. 84. P. 9084-9088.

38. Hitchcock P.J. Unified nomenclature for pathogenic Neisseria species // Clin. Microbiol. Rev. 1989. V. 2(Suppl.). P. S64-S65.

39. Derrick J.P., Urwin R., Suker J., Feavers I.M., Maiden M.C.J. Structural and Evolutionary Inference from Molecular Variation in Neisseria Porins // Infect. Immun. 1999. V. 67. P. 2406-2413.

40. Maiden M.C.J., Suker J., McKenna A.J., Bygraves J.A., Feavers I.Mi Comparison of the class 1 outer membrane proteins of 8 serological reference strains of Neisseria meningitidis И Mol. Microbiol. 1991. V. 5. P. 727-736.

41. E. Wedege, Freholm L.O. Human antibody response to a group-B serotype 2a meningococcal vaccine determined by immunoblotting // Infect. Immun. 1986. V. 51. P. 571-578

42. Saukkonen K., Leinonen M., Abdillahi H., Poolman J.T. Comparative evaluation о potential components for group В meningococcal vaccine by passive protection in the infant rat in vitro bactericidial assay // Vaccine. 1989. V. 7. P. 325-328.

43. Abdillahi: H., Poolman J.T. Whole-cell ELISA for typing Neisseria meningitidis with monoclonal antibodies // FEMS Microbiol. Lett. 1987. V. 48. P. 367-371.

44. Suker J., Feavers I.M., Achtman M., Morelli G., Wang J.-F., Maiden M.C.J.The porA gene in serogroup A meningococci: evolutionary stability and mechanism of genetic variation 11 Mol. Microbiol. 1994. V. 12. P. 253-265.

45. Geysen H.M., Meloen R.H., Barteling S.J. Use of peptide synthesis to probe viral antigens for epitopes to resolution of a single amino acid // PNAS. 1984. V. 81. P. 3998-4002.

46. Geysen H. M., Rodda S.J., Mason T.J., Tribbick G., Schoofs P.G. Strategies for epitope analysis using peptide synthesis // J. Immunol. Methods. 1987. V. 102. P. 259-724.

47. Jeanteur D., Lakey J.H.,. Pattus F. The bacterial porin superfamily: sequence alignment and structure prediction//Mol. Microbiol. 1991. V. 5: P. 2153-2164.

48. Amon R. Synthetic peptides as the basis for vaccine design // Mol. Immunol. 1991. V. 28. P. 209-215.

49. Christodoulides M., Heckels J.E. Immunization with a multiple antigen peptide containing defined B- and T-cell epitopes: Production of bactericidal antibodies against group В Neisseria meningitidis II Microbiology. 1994. V. 140. P. 2951-2960.

50. Wolff K., Stern A. The class 3 outer membrane protein (PorB) of Neisseria meningitidis: gene sequence and homology to the gonococcal porin PIA // FEMS Microbiol. Lett. 1991. V. 83. P. 179-186.

51. Minetti C.A.S.A., Blake M.S., Remeta D.P. Characterization of the Structure, Function, and Conformational Stability of PorB Class 3 Protein from Neisseria meningitidis И J. Biol. Chem. 1998. V. 273. P. 25329-25338.

52. Mandrell R.E., Zollinger W.D. Use of a zwitterionic detergent for the restoration of the antibody-binding capacity of electroblotted: meningococcal outer membrane proteins // J. Immunol. Methods. 1984. V. 67. P. 1-11.

53. Poolman J.T., Hopman C.T.P., Zanen H.C. Immunogenicity of meningococcal antigens as detected in patient sera // Infect. Immun. 1983. V. 40. P. 398-406.

54. Frasch С.E., Peppier M.S. Protection against group В Neisseria meningitidis disease: preparation of soluble protein and protein polysaccharide immunogens // Infect. Immun. 1982. V. 37. P. 271-280.

55. Wright J.C., Williams J.N., Christodoulides M., Heckels J.E. Immunization with the Recombinant PorB Outer Membrane Protein Induces a Bactericidal Immune Response against Neisseria meningitidis II Infect. Immun. 2002. V. 70. P. 4028-4034.

56. Guttormsen H.-K., Wetzler L.M., Nasss A. Humoral immune response to the class 3 outer membrane protein during the course of meningococcal disease // Infect. Immun. 1993. V. 61. P. 4734-4742.

57. Guttormsen H.-K., Wetzler L.M., Solberg C.O. Humoral immune response to class I outer membrane protein during the course of meningococcal disease // Infect. Immun. 1994. V. 62. P. 1437-1443.

58. Brodeur B.R., Larose Y., Tsang P., Hamel J., Ashton F., Ryan A. Protection against infection with Neisseria meningitidis group В serotype 2b by passive immunization with serotype-specific monoclonal antibody// Infect. Immun. 1985. V. 50. P. 510-516.

59. Michaelsen Т.Е., Aase A., Kolberg J., Wedge E., Rosenqvist E. РогВЗ outer membrane protein on Neisseria meningitidis is poorly accessible for antibody binding on live bacteria// Vaccine. 2001. V.19. P.1526-1533.

60. Naess M.L., Oftung F., Aase A., Wetzler L.M., Sandin R., Michaelsen Т.Е. Human T-cell responses after vaccination with the Norwegian group В meningococcal outer membrane vesicle vaccine. 1988 // Infect. Immun. V. 66. P. 959-965.

61. Дельвиг Л.Л., Семенов Б.Ф., Розенквист Э., Робинсон Д.Г. Neisseria meningitidis: от антигенной структуры к новому поколению вакцин // Москва. «Медицина». 2000. С. 5763.

62. Lytton E.J., Blake M.S. Isolation and partial characterization of the reduction-modifiable protein of Neisseria gonorrhoeae II J. Exp. Med. 1986. V. 164. P. 1749-1759.

63. Newhall W.J., Sawyer W.D., Haak R.A. Cross-linking analysis of outer membrane proteins of Neisseria gonorrhoeae И Infect. Immun. 1980 V. 28. P. 785-790.

64. Prinz Т., Tommassen J. Association of iron-regulated outer membrane proteins of Neisseria meningitidis with the RmpM (class 4) protein // FEMS Microbiol. Lett. 2000. V. 183 P. 49-53

65. Blake M.S., Wetzler L.M., Gotschlich E.C., Rice P.A. Protein III: structure, function, and genetics // Clin. Microbiol. Rev. 1989. Rev. 2 (Suppl.). P. S60-S63.

66. Sugawara E., Steiert M., Rouhani S., Nikaido H. Secondary structure of the outer membrane proteins OmpA of Escherichia coli and OprF of Pseudomonas aeruginosa И J. Bacterid. 1996. V. 178. P. 6067-6069.

67. Ried G., Koebnik R., Hindennach I., Mutschler В., Henning U. Membrane topology and assembly о ft he о uter m embrane p rotein О mpA of E scherichia с oli К12 // Mol. G en. G enet. 1994. V. 243. P. 127-135.

68. Viqi M., Heckels J.E. Location of a blocking epitope on outer membrane protein III of Neisseria gonorrhoeae by synthetic peptide analysis // J. Gen. Microbiol; 1989. V. 135. P. 18951899.

69. Koebnik R. Proposal for a peptidoglycan-associating alpha-helical motif in the C-terminal regions of some bacterial cell-surface proteins // Mol. Microbiol. 1995. V. 16. P. 12691270.

70. Rice P.A., Vayo H.E., Tarn M.R., Blake M.S. Immunpglobulin G antibodies directed against protein III block killing of serum-resistant Neisseria gonorrhoeae by immune serum // J. Exp. Med. 1986. V. 164. P. 1735-1748.

71. Joiner К., S cales R .A., Warren K. A., F rank M .M., Rice P .A. M echanism о faction о f blocking immunoglobulin G for Neisseria gonorrhoeae II J. Clin. Invest. 1985. V. 76. P. 17651772.

72. Gotschlich E.C. The meningococcal; serogroup В vaccine protection trials: concluding remarks at the report meeting second day // NIPH Ann. 1991. V. 14. P. 247-250.

73. Nassif X., Pujol C., Morrand P., Eugene E. Interactions of pathogenic Neisseria with host cells. Is it possible to assemble the puzzle // Mol. Microbiol; 1999. V. 32. P. 1124-1132.

74. Sarkari J., Pandit N., Moxon E.R:, Achlman M. 1994. Variable expression of the Opc outer membrane protein in Neisseria meningitidis is caused by size variation of a promoter containing poly-cytidine//Mol. Microbiol. 1994. V. 13. P. 207-217.

75. Viiji M., Makepeace K., Moxon R. Distinct mechanisms of interactions of Opc-expressing meningococci at apical and basolateral surfaces of human endothelial cells; the role of integrins in apical interactions // Mol. Microbiol. 1994. V. 14. P. 173-184.

76. Chen Т., Gotschlich E.G. CGMla antigen of neutrophils, a receptor of gonococcal opacity proteins // PNAS 1996. V. 93. P. 14851-14856.

77. Viiji M., Watt S.M., Barker S., Makepeace K., Doyonnas, R. The N-domain of the humain CD66a adhesion molecule is a target for Opa proteins of Neisseria meningitidis and Neisseria gonorrhoeae I/ Mol. Microbiol. 1996. V. 22. P. 929-939.

78. Viiji M„ Makepeace K., Ferguson D.J.P., Watt S.M. Carcinoembryonic antigens (CD66) on epithelial cells and neutrophils are receptors for Opa proteins of pathogenic neisseriae // Mol. Microbiol. 1996. V. 22. 941-950.

79. DeVries F.P., van der Ende A., van Putten J.P.M;, Dankert J. Invasion of Primary Nasopharingeal Epithelial Cells by Neisseria meningitidis Is Controlled by Phase Variation of Multiple Surface Antigens // Infect. Immun. 1996. V. 64. P. 2998-3006.

80. Sacchi C.T., Gorla M.C.O., de Lemos A.P.S., de Cunto Brandileone M.C. Considerations on the use of Neisseria meningitidis class 5 proteins as meningococcal ВС vaccine components // Vaccine. 1995. V. 13. P. 112-118.

81. Blake M.S., Blake C.M., Apicella M.A., Mandrell R.E. Iron acquisition systems in the pathogenic Neisseria // Infect. Immun. 1995. V. 63. P. 1434-1439.

82. Malorny В., Morelli G., Kusecek В., Kolberg J., Achtman M. Sequence diversity, predicted two-dimensional protein structure, and epitope mapping of neisserial Opa proteins // J. Bacterid. 1998. V. 180. P. 1323-1330.

83. Stern A., and Meyer T.F. Common mechanism controlling phase and antigenic variation in pathogenic neisseriae// Mol. Microbiol. 1987. V. 1. P. 5-12.

84. Olyhoek A.J., Sarkari J., Bopp M., Morelli G., Achtman M. Cloning and expression in Escherichia coli of Opc, the gene for an unusual class 5 outer membrane protein from Neisseria meningitidis II Microbiol. Pathog. 1991. V. 11. P. 249-257.

85. Rosenquist E., Hoiby E.A., Wedege E., Kusecek В., Achtman M. The 5С protein of Neisseria meningitidis is highly immunogenic in humans and induces bactericidial antibodies // J. Infect. Dis. 1993. V. 167. P. 1065-1073.

86. Seiler A., Reinhardt R., Sarkari J., Caugant D.A., Achtman M. Allelic polymorphism and site-specific recombination in the opc locus of Neisseria meningitidis // Mol. Microbiol. 1996. V. 19. P. 841-856.

87. Thiesen В., Greenwood В., Brieske N., Achtman M. Persistence of antibodies IgAl protease versus decay of antibodies to group A polysaccharide and Opc protein // Vaccine. 1997. V. 15. P. 209-219.

88. Carmenate Т., Mesa С., Menendez Т., Falcon V.,. Musacchio A. Recombinant Opc protein from Neisseria meningitidis reconstituted into liposomes elicits opsonic antibodies following immunization // Biotechnol. Appl. Biochem. 2001. V. 34. P. 63-69.

89. Musacchio A., Carmenate Т., Delgano M., Gonzalez S. Recombinant Opc meningococcal protein, folded in vitro, elicits bactericidal antibodies after immunization// Vaccine. 1996. V. 15. P. 751-758.

90. Griffiths E., Stevenson P., Ray A. Antigenic and molecular heterogeneity of the transfernn-binding protein of Neisseria meningitidis IIFEMS Microbiol. Lett. 1990. V. 69. P. 3136.

91. Mickelsen P.A; and Sparling P.F. Ability of Neisseria gonorrheae, Neisseria meningitidis, and commensal Neisseria species to obtain iron from transferrin and iron compounds// Infect. Immun. 1981. V. 33. P. 555-564.

92. Simonson C., Brener D., DeVoe I.W. Expression of a high-affinity mechanism for acquisition of transferrin iron by Neisseria meningitidis 11 Infect. Immun. 1982. V. 36. P. 107113.

93. Schryvers A.B., Morris L.J. Identification and characterization of the transferrin receptor from Neisseria meningitidis. 11 Mol. Microbiol. 1988. V. 2. P. 281-288.

94. Schryvers A.B., Morris L.J. Identification and characterization of the human lacloferrin-binding protein from Neisseria meningitidis II Infect. Immun. 1988. V. 56. P. 1144-1149.

95. Ala'Aldeen D.A., Davies H.A., Wall R.A., Borrielio S.P, The 70 Kilodalton iron regulated protein of Neisseria meningitidis is not the receptor for human transferrin7/ FEMS. Microbiol. Lett. 1990. V. 69. P. 37-42.

96. Schryvers A.B., Gonzalez G.C. Comparison of the abilities of different protein sources of iron to enhance Neisseria meningitids infection in mice // Infect. Immun. 1989. V. 57. P. 24252429;

97. Evans R.W., Oakhill J.S. Transferrin-mediated iron acquisition by pathogenic Neisseria И Biochemical Society Transactions. 2002. V. 30. Part 4. P. 705-707.

98. Schryvers A.B., Stojiljkovic I. Iron acquisition systems in the pathogenic Neisseria II J. Mol. Microbiol. 1999. V. 32. P. 1117-1123.

99. Ferreiros C.M., Criado M.T., Pinto M., Ferron L. Analysis of the molecular mass heterogeneity of the transferrin receptor in Neisseria meningitidis and commensal Neisseria II FEMS Microbiol. Lett. 1991. V. 83. P. 247-254.

100. Legrain M., Mazarin V., Irwin S.W., Bouchon В., Quentin-Millet M.-J;, Jacobs E., Schrivers A.B. Cloning and characterization of Neisseria meningitidis genes encoding the transferring-binding protein Tbpl and Tbp2 // Gene. 1993. V. 130. P. 73-80.

101. Gorringe A.R., Borrow R., Fox A.J., Robinson A. Human antibody response to meningococcal transferrin binding proteins: evidence for vaccine potential // Vaccine. 1995. V. 13. P. 1207-1212.

102. Pintor, M., Ferron L., Gomez J.A., Gorringe A., Criado M.T., Ferreiros C.M. Blocking of iron uptake by monoclonal antibodies specific for the Neisseria meningitidis transferrin-binding protein 2 // J. Med. Microbiol. 1996. V. 45. P. 252-257.

103. Pintor M., Gomez J.A., Ferron L., Ferreiros C.M., Criado M.T. Analysis of TbpA and TbpB functionality in defective mutants of Neisseria meningitidis II J. Med. Microbiol. 1998. V. 47. P. 757-760.

104. Rokbi В., Mignon M., С augant D .A., Quentin-Millet M.-J. Heterogeneity of tbpB, the transferrin-binding protein В gene, among sero-group В Neisseria meningitidis strains of the ET-5 complex // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 1997. V. 4 P. 522-529.

105. Rokbi В., Mazarin V., Maitre-Willmotte G., Quentin-Millet M.-J. Identification of two major families of transferrin receptors among Neisseria meningitidis strains based on antigenic and genomic features // FEMS Microbiol. Lett. 1993. V. 110. P. 51-58.

106. Ala'Aldeen D.A., Borriello S.P. The meningococcal transferrin-binding proteins I and 2 are both surface exposed and generate bactericidal antibodies capable of killing homologous and heterologous strains // Vaccine. 1996. V. 14 P. 49-53.

107. Coppens I., Alonso S., Antoine R., Jacob-Dubuisson F., Renauld-Mongenie G., Jacobs E., Locht C. Production of Neisseria meningitidis Transferrin-Binding Protein В by Recombinant Bordetella pertussis // Infect. Immun. 2001. V. 69. P. 5440-5446.

108. Pajon R., Chinea G., Marrero E., Gonzalez D., Guillen G. Sequence analysis of the structural tbpA gene: protein topology and variable regions within neisserial receptors for transferrin iron acquisition // Microb. Pathog. 1997. V. 23. P.71-84.

109. Johnson A.S., Gorringe A.R., Fox A.J., Borrow R., Robinson A. Analysis of the human' Ig isotype response to individual transferrin binding proteins A and В from Neisseria meningitidis И FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1997. V. 19. P. 159-167.

110. Martin D., Cadieu N., Hamel J., Brodeur B.R. Highly conserved Neisseria meningitidis surface protein confers protection against experimental infection // J. Exp. Med. 1997. V. 185. P. 1173-1183.

111. Plante M., Cadieux N., Rioux C.R., Hamel J., Brodeur B.R., Martin D. Antigenic and molecular conservation of the gonococcal NspA protein // Infect. Immun. 1999. V. 67. P. 28552861.

112. Cadieux N., Plante M., Rioux C.R., Hamel J., Brodeur B.R., Martin D. Bactericidial and cross-protective activity of a monoclonal antibody directed against Neisseria meningitidis NspA outer membrane protein// Infect. Immun. 1999. V. 67. P. 4955-4959.

113. Мое G.R., Tan S., Granoff D.M: Differences in surface expression of NspA among N. meningitidis group В strains // Infect. Immun. 1999. V. 67. P. 5664-5675.

114. Martin D., Brodeur B.R., Hamel J., Couture F., de Alvis U., Lian Z., Martin S., Andrews D., Ellis R.V. Candidate Neisseria meningitidis NspA vaccine // J. Biotecnol. 2000. V. 83. P. 2731.

115. Вольпина O.M., Титова M.A., Жмак M.H., Короев Д.О., Обозная М.Б., Волкова Т.Д., Иванов В.Т. Предсказание струткуры петидов, способных индуцировать образование антител у мышей // Биоорг. химия. 2002. Т. 28. № 5. С. 387-395.

116. Rammensee H.-G., Friede Т., Stevanovic S. МНС ligands and peptide motifs: first listing // Immunogenetics. 1995. V. 41. P. 178-228.

117. Udenfriend S., Meienhofer J. The Peptides. Analysis, Synthesis, Biology // London. Academic Press, Inc. 1987. V.9. P. 27-30.

118. Fontenot J.D., Ball J. M., Miller M.A., David C.M., Montelaro R.C. A survey of potential problems and quality control in peptide synthesis by the fluorenylmethoxycarbonyl procedure // Pept. Res. 1991. V. 4. P. 19-25.

119. Головина Л.И., Кувакина В.И., Аллилуев А.П., Баснакьян И.А., Сивко Р.И. Реакция иммунного бактериолиза для оценки иммунологической эффективности менингококковой вакцины серогруппы В // Клинич. лаборат. диагностика. 1995. Т. 1. С. 26-29.

120. Perrin D.D. Purification of Laboratory Chemicals. // N.Y.: Pergamon Press. 1980. P. 1563.

121. Sarin V.K., Kent S.B.H., Tam J.P., Merrifield R.B. Quantitative monitoring of solid phase peptide synthesis by the ninhydrin reaction // Anal. Biochem. 1981. V. 117. P. 147-157.

122. Gisin B.F. The monitoring of reactions in solid-phase peptide synthesis with picric acid // Anal. Chim. Acta. 1972. V. 58 P. 248-249.

123. Агафонова С. А., Аллилуев А.П., Котельникова O.B. Формирование иммунологической памяти у мышей при экспериментальной менингококковой инфекции // Иммунология. 1997. С. № 1. 39-41.

124. Mishel В.В., Shady С.М. Selected methods in cellular immunology // Ed. W.H. Freeman. San Francisko, 1979, ch. 1,281-296.