Синтез и исследование лактонов полисахаридкарбоновых кислот и ацилирование ими низкомолекулярных БАВ тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат химических наук Соколов, Виталий Борисович

• Соколов, Виталий Борисович
• кандидат химических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат химических наук Соколов, Виталий Борисович

1. ВВЕДЕНИЕ:.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ПО ТЕМЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 ОСНОВНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ

ДЕКСТРАНА И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ В МЕДИЦИНЕ И

ФАРМАЦИИ.

2.2 ОСНОВНЫЕ СВЕДЕНИЯ ОБ АЦИЛИРОВАНИИ АМИНОВ КАРБОНОВЫМИ КИСЛОТАМИ И ИХ

ЭФИРАМИ.

2.3 МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ КАРБОКСИМЕТИЛЬНЫХ ЗАМЕСТИТЕЛЕЙ ПО ПОЛОЖЕНИЯМ МОНОМЕРНОГО ЗВЕНА В ПОЛИСАХАРИДАХ.

2.3.1 Хроматографические методы исследования распределения карбоксиметильных заместителей в целлюлозе.

2.3.2 Спектроскопические методы исследования распределения карбоксиметильных заместителей в целлюлозе.:.

3. ОБСУЖДЕНИЕ

РЕЗУЛЬТАТОВ.

3.1 ИССЛЕДОВАНИЕ РЕАКЦИИ АЦИЛИРОВАНИЯ АРОМАТИЧЕСКИХ И АЛИФАТИЧЕСКИХ АМИНОВ СМЕШАННЫМ АЦИЛИРУЮЩИМ АГЕНТОМ: КАРБОКСИМЕТИЛПОЛИСАХАРИД-КЙСЛОТОЙ, СОДЕРЖАЩЕЙ СЛОЖНОЭФИРНЫЕ * ;

ГРУППЫ.1л.:.

3.2 ИССЛЕДОВАНИЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ ЗАМЕСТИТЕЛЕЙ И МОНОМЕРНОГО СОСТАВА КАРБОКСИМЕТИЛДЕКСТРАНА.

3.2.1 Карбоксиметилирование декстрана и других полисахаридов.

3.2.2 Исследование распределения карбоксиметильных заместителей в КМД методом 1Н-ЯМР спектроскопии.

3.2.3 Исследование распределения карбоксиметильных заместителей в КМД методом периодатного окисления.

3.2.4 Определение мономерного состава карбоксиметилдекстрана с использованием вероятностной модели и сравнение с результатами периодатного окисления.

3.3 ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОЦЕССА ОБРАЗОВАНИЯ ВНУТРИМОЛЕКУЛЯРНЫХ СЛОЖНЫХ ЭФИРОВ КАРБОКСИМЕТИЛДЕКСТРАНОМ И ДРУГИМИ

КАРБОКСИМЕТИЛПОЛИСАХАРИДАМИ.

3.3.1 Влияние физико-химических факторов на процесс образования лактонов карбоксиметилполисахаридами.

3.3.2 Исследование структуры лактонов карбоксиметилполисахаридов.

3.3.3 Определение кажущейся энергии активации процесса лактонообразования.

3.4 ИССЛЕДОВАНИЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ АМИДНЫХ ГРУПП В АМИДАХ КАРБОКСИМЕТИЛДЕКСТРАНА.

3.5 СИНТЕЗ АМИДОВ ДЛЯ БИОЛОГИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ И РЕЗУЛЬТАТЫ

ИСПЫТАНИЙ.

3.5.1 Синтез амидов карбоксиметилдекстрана.

3.5.2 Биологические испытания.

4, ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ

ЧАСТЬ.

4.1 ПРИБОРЫ И МАТЕРИАЛЫ ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В

ИССЛЕДОВАНИИ.

4.2 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4.2.1 Выделение индивидуальных полисахаридов.

4.2.2 Синтез карбоксиметилполисахаридов.

4.2.3 Получение карбоксиэтилдекстрана.

4.2.4 Синтез лактонов карбоксиметилполисахаридов.

4.2.5 Определение содержания сложноэфирных групп в карбоксиметилполисахаридах. i

4.2.6 Аналитическое периодатное окисление декстрана и карбоксиметилдекстрана.

4.2.7 Синтез амидов, выделение очистка.

4.2.8 Синтез амидов с лекарственными веществами, содержащими аминогруппу.

4.2.9 Синтез модельных амидов.

4.2.10 Определение степени аминокарбонилметилирования амидов карбоксиметилполисахаридов.

4.2.11 Определение коэффициентов экстинкции модельных амидов.

4.2.12. Определение распределения карбоксиметильных заместителей в КМД методом 1Н-ЯМР спектроскопии.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтез и исследование лактонов полисахаридкарбоновых кислот и ацилирование ими низкомолекулярных БАВ»

Полисахариды находят широкое применение во многих отраслях промышленности, а также в медицине и фармации. Во всем мире проводятся активные исследования по поиску новых соединений этого класса и химической модификации известных полисахаридов. В Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии уже более 30 лет ведется работа по созданию новых биологически активных веществ на основе полисахаридов. Одним из направлений этой работы является химическая модификация микробного полисахарида декстрана (а-1,6-глюкан), продуцируемого микроорганизмом ЬеисопоБШс тезеп1его1ёе8. Декстран широко используется как основа плазмозамещающих растворов (полиглюкин, реополиглюкин, рондекс, реомакродекс, полифер и др.). Благодаря уникальному набору качеств (биосовместимость, вязкость, растворимость) он является перспективным субстратом для использования в качестве носителя лекарственных веществ. Комплексы декстрана с железом, платиной, декстрановые гидрогели, сульфаты декстрана - это уже промышленно производимые лекарственные вещества на основе декстрана. Активно исследуются конъюгаты декстрана с антибиотиками и ферментами.

В недавно вышедшей монографии, посвященной использованию углеводов в конструировании новых лекарств, большое внимание уделяется глюканам, как основе новых противоопухолевых лекарственных средств и средств для лечения Н1У-инфекции [77Р]. При этом рассмотрены особенности структуры и биологической активности производных декстрана.

На кафедре ХТЛВ Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии были исследованы различные методы введения карбоксильной группы в полисахариды. Активированные таким образом полисахариды использовали для получения амидов, гидразидов, сложных эфиров, азометинов и т.д. Некоторые из этих веществ проявляли биологическую активность. Применительно к декстрану были разработаны методы получения карбоксиметильных и карбоксиэтильных производных [79]. Сложные эфиры этих производных с низкомолекулярными спиртами использовали для ацилирования биологически активных аминов [27], гидразинов. Азиды карбоксиметилдекстрана применяли для получения ковалентно связанных соединений с ферментами и антибиотиками [41]. Полученные вещества сохраняли присущую своим низкомолекулярным аналогам биологическую активность [76].

В структуру полисахарида может вводиться низкомолекулярный фрагменту сам по себе не обладающий биологической активностью. Однако полученный при этом конъюгат может проявить интересные виды активности. Примером успешного воплощения этой концепции является амид карбоксиметилдекстрана с бензиламином и п-сульфобензиламином (названный СМ1)В8), более 15 лет назад синтезированный и запатентованный во Франции [90].

Первоначально исследователи обнаружили антикоагулянтное действие препарата, но в течение последующих лет были открыты другие виды биологической активности этого вещества. Оказалось, что оно проявляет комплементактивирующую, антивирусную, Ж противоопухолевую, противовоспалительную активность, способствует регенерации мышечной и костной ткани, может быть использовано как заменитель плазмы крови

56,57,58,59,62,79,88,90,91,96,110]. Очевидно, что и другие соединения похожей структуры (а именно амиды карбоксиметилдекстрана с ароматическими и алифатическими аминами) могут проявить интересные виды биологической активности.

Поскольку низкомолекулярные алифатические и ароматические амины - в большинстве случаев более реакционоспособные и стабильные вещества чем, например, антибиотики и ферменты, нет необходимости применять дорогостоящие и труднодоступные ацилирующие агенты. Поэтому мы решили исследовать эффективность применения карбоксиметилдекстрана для получения амидов. Показано, что полисахаридкарбоновые кислоты при нагревании с аминами могут образовывать амиды [16,22,18]. Кроме того в работе Т.Ю. Ильиной было показано, что при нагревании карбоксиметилдекстран способен к образованию сложноэфирных групп - лактонов (образующихся за счет внутримолекулярной этерификации гидроксилов полисахарида карбоксиметильными группами), которые также являются перспективными ацилирующими агентами [16,20,22,23].

Большой интерес для исследования представляет сам карбоксиметилдекстран как ацилирующий агент, ибо, несмотря на его широкое применение, до сих пор неизвестно, как распределены карбоксиметильные заместители в этом полисахариде и какова его ацилирующая активность. Что касается лактонов карбоксиметилдекстрана, то о структуре этих соединений вообще нет никаких сведений.

Таким образом, в свете изложенного определились следующие задачи диссертационной работы.

- Исследовать процесс ацилирования алифатических и ароматических аминов Н+-формой карбоксиметилдекстрана, и карбоксиметилдекстраном, содержащим сложноэфирные группы. На основе полученных результатов разработать методики и рекомендации для получения замещенных амидов с желаемой степенью замещения.

- Разработать методы анализа структуры исходных, промежуточных и конечных продуктов в^схеме получения амидов карбоксиметилполисахаридов.

- Исследовать структуру карбоксиметилдекстрана, лактонов карбоксиметилдекстрана и амидов карбоксиметилдекстрана с ароматическими и алифатическими аминами

- С использованием разработанных методик и рекомендаций синтезировать ряд амидов карбоксиметилдекстрана с низкомолекулярными аминами для изучения биологической активности синтезированных производных.

В представленной работе впервые подробно изучено распределение карбоксиметильных заместителей по трем положениям монозвена декстрана и мономерный состав этого модифицированного полисахарида. Определены константы активности гидроксилов декстрана в реакции алкилирования его монохлоруксусной кислотой в среде водного изопропилового спирта. Проведено исследование структуры и свойств внутримолекулярных сложных эфиров (лактонов) карбоксиметилдекстрана и некоторых других карбоксиметилполисахаридов. Определена кажущаяся энергия активации процесса лактонообразования при нагревании в вакууме. Показано влияние ряда физико-химических факторов на процесс образования лактонов. Изучены особенности ацилирования ароматических и алифатических аминов смешанным ацилирующим

8 „ агентом - карбоксиметилполисахаридом, содержащим карбоксильные ^ и сложноэфирные группы. Предложена методика и проведено определение распределения амидных групп по разным положениям монозвена декстрана.

Разработан метод анализа, позволяющий определить распределение заместителей и мономерный состав карбоксиметилдекстрана. Выработаны рекомендации по использованию карбоксиметилполисахарида в синтезе амидов с ароматическими и алифатическими аминами. С использованием этих рекомендаций синтезирован ряд веществ, обладающих биологической активностью.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Соколов, Виталий Борисович

5. Выводы

1. Карбоксиметилполисахариды при нагревании образуют лактоны, количество которых, при прочих равных условиях, зависит от структуры полисахарида, степени замещения и взаимного расположения карбоксиметильных групп.

2. Большая часть лактонов представляет собой циклические шестичленные сложные эфиры, образующиеся в результате ацилирования гидроксила полисахарида соседней с ним карбоксильной группой. Межмолекулярные эфиры КМП в исследованных нами условиях образуются в количестве 7-8% от числа карбоксиметильных групп.

3. Карбоксиметилполисахарид-кислоту, содержащую лактоны целесообразно использовать для получения амидов с ароматическими и алифатическими аминами. Ацилирование водорастворимых алифатических аминов целесообразно проводить лактонными группами в водной среде и при комнатных температурах; амиды с ароматическими аминами могут быть получены с хорошим выходом при ацилировании свободными карбоксильными группами в диоксане при нагревании (70-100°С).

4. Установленное нами распределение карбоксиметильных групп по трем гидроксилам ангидроглюкопиранозного звена декстрана позволяет утверждать, что активность гидроксильных групп убывает в ряду ОН2>ОНЗ>ОН4.

5. Знание распределения карбоксиметильных заместителей в модифицированном декстране позволяет анализировать структуру продуктов ацилирования - распределение введенных низкомолекулярных фрагментов по карбоксильным группам в различных положениях.

6. Ацилирование аминов карбоксиметилполисахаридами является эффективным методом синтеза новых БАВ. В частности,

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Соколов, Виталий Борисович, 1999 год

1.A.C. 21119 НРБ, МКИ5 С08 В 11/14 6-о-хидразидметилцелулоза и метод за получаването й / Дмитров Д.Г. РЖ Химия. 1982. реф.№ 6Т35П

2. А.С. 43745 НРБ, МКИ5 С 08 В 37/00. Амиди на киселе полизахариди, метод за тяхното получаване и приложението им. / Георгиева С.С., Караколева М.Ж., Георгиева М.П., Кабаиванов B.C. РЖ Химия. 1982. реф.№ 23031П

3. Альберт А., Сержент Е., Константы ионизации кислот и оснований //М.: Химия. 1964. 179 с.

4. Бородин Ю.И., Зыков A.A. Фармакологические средства, стимулирующие дренажную функцию лимфатической системы.// Фармакология и токсикология. 1989. Т.52. №2. С.106-110.

5. Бохински Р. Современные воззрения в биохимии //М.: Мир. 1987. 544 с.

6. Васильев Н.В., Луцюк Н.Б., Палий Т.К. Биохимия и иммунология микробных полисахаридов // Томск: Изд. университета, 1984. 303 с.

7. Вейганд-Хильгетаг Методы эксперимента в органической химии // М.: Химия. 1968. 944 с.

8. Вирник А.Д., Хомяков К.П., Скокова И.Ф. Декстран и его производные// Успехи химии. 1975. Т.44. Вып.7. С.1280-1307.

9. Ю.Ворожцов H.H. Основы синтеза промежуточных продуктов и красителей // М.: ГХИ, 1995, 839 с.11 .Государственная Фармакопея СССР. Изд. XI. М.: Медицина. 1989. Вып.1. 334 е., Вып. 2. 398 с.

10. Демлов Э., Демлов 3. Межфазный катализ // М.: Мир. 1987. 485 с.

11. Днепровский A.C., Темникова Т.И., Теоретические основыорганической химии // Л.: Химия. 1979. 520 с.

12. Блинов Н.П. Фармакологическая активность микробных полисахаридов в зависимости от их структуры / Исследования по изысканию лекарственных средств природного происхождения: Тез. докл. Всесоюзн. научн. конф. JL: 1981. С. 50-51

13. Жоров Ю.М. Кинетика промышленных органических реакций. Справочник//М.:Химия. 1989. 384 с.

14. Ильина Т.Ю. Синтез и исследование замещенных амидов карбоксиметилдекстрана //Дисс. на соиск. учен. степ. канд. фарм. наук.- СПб.: СПХФИ. 1995. 206с.

15. П.Ильина Т.Ю., Сибикина О.В., Иозеп A.A. Новый подход к химической модификации декстрана //Ж. Орг. Хим. 1994. Т.30. Вып. 9 С.1326-1330

16. Иозеп А.А, Сибикина О.В., Кузнецова Т.Е., Пассет Б.В. Реакции карбоксиметилдекстрана и его сложных эфиров с ароматическими аминами //ЖПХ, 1995, Т.68. Вып.2 С.307-311

17. Иозеп A.A., Бессонова Н.К., Пассет Б.В. Синтез карбоксиэтилдекстрана//ЖПХ. 1998. Т.71. Вып.2 С.320-323.

18. Иозеп A.A., Ильина Т.Ю., Кузнецова Т.Е., Пассет Б.В. Устойчивость декстрана в химических реакциях и особенности выделения целевых продуктов // ЖПХ. 1994. Т. 67. № 6. С. 10121016

19. Иозеп A.A., Ильина Т.Ю., Пассет Б.В. Исследование ацилирующей способности сложных эфиров карбоксиметилдектрана в реакциях с первичными и вторичными алифатическими аминами.//ЖПХ. 1995. Т.68. Вып.1 С. 106-109

20. Иозеп A.A., Ильина Т.Ю., Пассет Б.В. Синтез замещенных амидов карбоксиметилдекстрана// ЖПХ. 1994. Т.67. Вып. 3. С.470-474.

21. Иозеп A.A., Ильина Т.Ю., Пассет Б.В. Лактоны карбоксиметилдекстрана.//ЖПХ. 1993. Т.66. №5. С. 1106-1110

22. Иозеп A.A., Кузнецова Т.Е., Ильина Т.Ю., Пассет Б.В. Влияние условий реакции на степень аминокарбонилметилирования полисахаридов// ЖПХ. 1997. Т.70. Вып. 9 С.1548-1551

23. Иозеп A.A., Куприянова Л.Н., Пономаренко М.Н., Ивин Б.А., Пассет Б.В. Синтез и анализ гидразидов карбоксиметилпроизводных некоторых микробных полисахаридов //ЖПХ. 1996. Т.69. Вып.9 С.1537

24. Иозеп A.A., Сибикина О.В., Кузнецова Т.Е., Пассет Б.В. Реакции карбоксиметилдекстрана и его сложных эфиров с ароматическими аминами//ЖПХ. 1995. Т.68. вып.2. С.307-311

25. Капуцкий Ф.Н., Юркштович Т.Л. Лекарственные препараты на основе целлюлозы. //Минск: Университетское. 1989. 111 с.

26. Кириллова Л.Е. Химическая модификация и биологическая активность маннана из Rhodotorula rubra и его аналогов: Дисс. . канд. хим. наук.Л.: ЛХФИ, 1987. 138 с.

27. Крешков А.П. Основы аналитической химии, Т.2. М.:Химия. 1976. 480 с.

28. Лившец А.Б., Васильев А.Е., Кольцова Г.Н., и др. Производные декстрана.VI. Синтез амидов азидным методом и методом активированных эфиров // Ж. общ. химии. 1977. Т.47. №3. С. 699-709.

29. Марч Дж. Органическая химия. Реакции механизмы и структура. М.: Мир 1987 Т.1, 2. 136 с.

30. Методы исследования углеводов: пер. с англ.//Под. ред. А.Я. Хорлина. М.:Мир, 1975. С. 293-294

31. Методы химии углеводов //под ред. Н.К. Кочеткова. М.: Мир. 1967. 512 с.

32. Нейланд О.Я. Органическая химия // М.: Высшая школа. 1990. 751с.

33. Некрасов C.B. Межфазный катализ и его применение в синтезе биологически активных веществ //СПб,: ЛХФИ. 1992. 50с.

34. Панченков Р.Т., Ярема И.В., Сильманович H.H. Лимфостимуляция.-//М. .'Медицина. 1986. 147 с

35. Петропавловский Г.А., Васильева Г.Г., Юрьева М.К. Взаимодействие Н+-КМЦ с гидроксилами спиртов и ее лактонизация // ЖПХ. 1974. Т.47 С.1106

36. Райхардт X. Растворители в органической химии// JL: Химия. 1973.150 с.

37. Снежко В.А. Исследования в области синтеза производных декстрана: Автрореферат дис. канд. хим наук. М., 1973. 25 с.

38. Справочник химика, Т.З. Л.:Химия. 1964. 1008 с.

39. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды)//М.: Высшая школа, 1978. 256 с.

40. Тарасов В.Н., Трухманова Л.Б., Кропачев В.А. Новое в диагностике и лечении вирусных заболеваний// Л.: 1967. 227с

41. Усманов Т.И., Каримова У.Г., Сарымсаков А. Исследование распределения заместителей в карбоксиметиловых эфирах полисахаридов методом ЯМР13С. // ' Высокомолекулярные соединения А 1990. Т.32 С.1176

42. Фаттахов И.Ф., Нумганов O.K., Шипина О.Т., Сопин В.Ф.Структурно-химические превращения целлдлозы при карбоксиметилировании твердофазным методом // Химическая промышленность. 1998. №2, С.3-7

43. Цивина Н.С. Исследование механизма и кинетики синтеза производных бензимидазола// Дисс. на соиск. учен. степ. канд. хим. наук. Л.: ЛХФИ. 1972. 130 с.

44. Шишлянникова Н.Ю., Лихачева Н.П., Вирник А.Д. Синтез производных целлюлозы, содержащих химически связанные антимикробные вещества, присоединенные амидной связью, и исследование их свойств // М., 1984, 8с. Рукопись деп. в ОНИИТЭХим г. Черкассы.-РЖХимия.

45. Эмануэль Н.М., Кнорре Д.Г. Курс химической кинетики //М.: Высшая школа. 1969. 432 с.

46. Эфрос Л.С., Горелик М.В. Химия и технология промежуточных продуктов //Л.: Химия. 1980. 554 с.

47. Amato K.U., Analysis of carbohydrates in coffee with pulsed amperometric detection.// J. AOAC Int. 1995 V.78 N3 P.768

48. Austin D.S., Polta J.A., Johnson D.C. Method for carbohydrates analysis in food with pulsed amperometric detection // Journal of electroanal. chem. 1984 V.168 P.227

49. Bamford C.H., Middelton I.P., Al-Lamee K.G. Studies of the esterification of dextran: Routes to bioactive polymers and graft copolymers // Polymer. 1986. V.27. N12. P.1981-1985.

50. Barritault D., Caruelle J.P, Hornebeck W., Meddahi A. Use of growth factor-protecting polymer for treating inflammation.// PCT Int. Appl. WO 95 26,738 (CI. A61/K31/ 725) 12 Oct 1995,FR Appl. 94/3,805 30 Mar 1994;61 pp

51. Barritault D., Caruelle J.P., Aamiri A., Gautron J. Use of substituted dextran for treating nervouse system damage and heparin sulfate enriched fractions// PCT Int. Appl. WO 95 26,739 (CI. A61/K31/ 725) 12 Oct 1995,FR Appl. 94/3,806 30 Mar 1994; 53 pp

52. Barritault D., Caruelle J.P., Desgrange P., Gautron J.,Meddahi A. Use of growth factor-protective biopolymer for treatment of skeletal or cardiac muscle // PCT Int. Appl. WO 95 26,736 (CI. A61/K31/ 725) 12 Oct 1995,FR Appl. 94/3,803 30 Mar 1994; 58 pp

53. Barritault D., Caruelle J.P., Meddahi A. Use of growth factor-protecting biopolymer for treatment of digestive tract injuries // PCT Int. Appl. WO 95 26,737 (CI. A61/K31/ 725) 12 Oct 1995,FR Appl. 94/3,804 30 Mar 1994; 49 pp

54. Berrada S., Amedee T., Avramoglou T., Jozefonvicz J., Harmand M.F. Effect of a derivatized dextran on human osteoblast growth and phenotype expression //J. Biomater. Sci., Polymer. Ed. 1994 V.6 N2, P.211-222

55. Blake J.D., Richards G.N., Problem of lactonisation in the analysis of uronic acids // Carbohydr. Res. 1968 N8 P.375-381

56. Blanquaert F., Barritault D., Saffar J.L., Jozefonvicz J., Caruelle J.P. CMDBS, functional analog of heparin sulfates used as bone healing agents// Ann. Endocrinol. 1994. V.55 N2. P.121-123 (FR)

57. Brondsted H., Hovgaard L., Simonsen L. Dextran hydrogels for colon-specific drug delivery. Syntheses and characterization// Eur. J. Pharm. and Biopharm. 1996. N1. C.85-89

58. Buytenhuys, F.A.; Boun, R. Distribution of substitutes in CMC // Papier ( Darmstadt ),1977 V.31 N.12 P.525-527

59. Chaubet F., de Raucourt E., Maiga-Revel O., Mauray S., Champion J., Fischer A.M., Jozefonvicz J. Structure-Anticoagulant Activity

60. Relationships of Derivatized Dextrans: CMDBS. // Scientific program 5th world biomaterials congress, Toronto, Canada, May 2

61. Chaubet, F., Champion, J., Maiga, O., Mauray, S., Jozefonvicz, J. Synthesis and structure-anticoagulant property relationships of functionalized dextrans: CMDBS // Carbohydrate Polymers 1995. V. 28. N2, P. 145-152.

62. Chaudhari S.N.K., Gouden K.C., Srinivasan G., Ekkundi V.S. High resolution 13C-NMR spectroscopy of sodium carboxymethylcellulose// Journal of Polymer Sei. Part A. 1987. V.25. N1. P.337

63. Choksakulnimitr S., Musuda S., Tokuda H., Takakura Y., Hashida M In vitro cytotoxicity of macromolecules in different cell culture systems)// J. Controlled Release 1995. V. 34 N.3 P. 233-241

64. Corradini C. Resent advances in carbohydrate analysis by HPAEC coupled with pulsed amperometric detection. // Ann. Chem.(Rome) 1994 V.84 N.9-10 P.385-396

65. Croon I., Purves C.B. The distribution of substituents in partially substituted carboxymethylcellulose // Sven. Papperstidn., 1959 V.62 P.876

66. Fakuma F. Active ester of carboxymethylcellulose // J. Appl. Polym. Sei. 1986. V.32. N6. P.5657-5659.

67. Floyd F.-L. Ho, Klosievicz D.W. Proton NMR spectrometry for determination of substituents and their distribution in CMC.// Analit. Chemistry. 1980. V.52 P.913-916

68. Gruning B. Stickstoff enthaltende Derivate der Carboxymethylcellulose, deren Herstellung und deren Vervendung in Kosmetische Zubereitungen / Заяв. 3820031 ФРГ, МКИ5 C08 В 11/15. РЖ Химия. 1991. реф. №21Р2063П.

69. Heinze T.J., Liebert T.F. et al. Studies on unconventional synthesis of carboxynethylcellulose //Polym. Mater. Sei. Eng. 1995 V.72 P.96-98

70. Heinze,T., Erler,U., Nehls,I., Klemm,D. Determination of substituent pattern of heterogeneously and homogeneously synthesised carboxymethylcellulose by using HPLC// Die angewandte Makromolekulare Chemie. 1994 V.215 P. 93-106

71. Herr D., Mueller C.Dr. Verwendung polysulfatierter niedermolekularer Dextransulfate //Пат. 3634392 ФРГ, МКИ4 A61K31/725.-3c

72. Ito M., Babe M., Sato A. Inhibitory effect of dextran sulfate and heparin on the replication of human immunodeficiency virus (HIV) invitro // Antiviral Res. 1987. Vol.7.N6. P.361-367.

73. Jalpani M. Polisaccharides syntheses, modification and structure/property relation.// Studies in Organic Chemistry. V. 36. Amsterdam; Oxford; New-York; Tokyo; Elsevier, 1988. P. 469.

74. Jozefonwicz J., Jacqueline E. New anticancer derivative from dextran // PCT Int. Appl. WO 91 1,201 (CI. A61/K31/ 72,735) 22 Aug 1991,FR Appl. 90/0,143 06 Feb 1990

75. Kamath K. R., Park K. Hydrogels from biopolymers: preparation, characterization and drug release studies // Int. J. Pharm. Adv. 1996, V.l. N3 P.268-269

76. Klemm D., Heinze T., Stein A., Liebert T. Poliglucane derivatives with regular substitute distribution// Macromol. symp. 1995, V.99 P.129-149

77. Klug E.D., Winquist D.P., Lewis C.A. Distribution of substitutes in hydroxyethyl- and carboxymethylcellulose // American Chem. Soc.,Div Org.Coanings Plast. Chem., Pap 1972 V.32 N2 P.319-325

78. Kragten E.A., Kamerling J.P. Composition analysis of carboxymethylcellulose by high-pH chromatography with pulsed amperometric detection // Journal of Chromatography 1992 V.623 N.l P.49-53

79. Kragten E.A., Leefland B.R., Kamerling J.P. Proton NMR spectroscopy of O-CM-glucose derivatives//Carbohydrate Res. 1992. V.228 N2. P.433-437

80. Krentsel L., Chaubet F., Rebrov A., et al. Anticoagulant activity of functionalized dextrans. Structure analyses of carboxymethylated dextran and first Monte Carlo simulations// Carbohydrate Polymers. 1997/ V.33, N 1, P.63-71

81. Kurisawa M., Terano M., Yui N. Double-stimuli-responsiv degradable hydrogels for drug delivery: interpenitrating polymer networks composed of olygopeptide-terminated Polyethylen glycol and dextran // Macromol. Rapid. Commun. 1995, V.16. N9, 663-666

82. Liama K., Lam Thi B.T. Analysis of substituents distribution and sugar composition in carboxymethylated lignocellulose materials // Cellulose 1990. V.43. P. 257-262.

83. Lin J. Modulation of breast fibroblast and carcinoma cell interaction by dextran derivative (CMDB7)//Anticancer. Res. 1997. V.323 (Pt. 3) P.859-861

84. Maiga-Revel, O., Chaubet, F., Jozefonvicz, J New investigations on heparin-like derivatized dextrans: CMDBS, synergistic role of benzylamide and sulfate substituents in anticoagulant activity // Carbohydrate Polymers 1997. V. 32. N 2, P. 89-93

85. Massut M., Dorgebray J. Dextran derivatives with anticoagulant and antiflamminatory activity and their uses as aticoagulants and for blood replaysments. // FR 2,555,589 (CI. CO 8B 37/02) 31 May 1985, Appl. 83/19, 110, 30 Nov. 1983; 17 pp.

86. Mauzac M., Jozefonwicz J. Antycoagulant acttivity of dextran derivatives. I. Syntesis and characteryzation // Biomaterials. 1984. V.5.N5. P.301-304

87. McBurney L.F. Distribution of substitutes in cellulose and cell, deriv.// Intersci. Publishers, New York. 1954. P.130

88. Meddahi A, Lemdjabar H, Caruelle JP, Barritault D, Hornebeck W. FGF protection and inhibition of human neutrophil elastase by carboxymethyl benzylamide sulfonate dextran derivatives. //Int. J. Biol. Macromol.1996. V.18. N1,2. P.141-145.

89. Moriyama K., Yui N. Regulated insulin release from biodegradable dextran hydrogels, containing poly(ethylenglycol) //J. Controlled Release. 1996. V.42. N.3. P.237-248.

90. Nagasawa K., Harada H., Hajashi S., Misawa T. Sulfation of dextran with piperidin-N-sulfonic acid //Carbohydr. Res. 1972. N21. P.420-426

91. Neyts J., Reymen D., Letourneur D., Jozefonvicz J., Schols D., et al. Differential antiviral activity of derivatized dextran // Biochem. Pharmacol. 1995, V.50 N6, P.743-751.

92. Niemela K., Sjostrom E. Characterisation of hard-wood-derived carboxymethylcellulose by gas-liquid chromatography and mass-spectrometry// Polymer communication 1989 V.30 N8 P. 254-256

93. Parfondry A., Perlin A.S. 13C NMR spectroscopy of cellulose ethers// Carbohydrate Res. 1977 V.57 P. 39-49

94. Parish C., Goulburn S., Snowden J. Sulfated polysaccharides having anti-metastatic and/or amti-inflamatory activity /М.З. 88/05301 PCT, МКИ 4 A61K31/725, 45/05.(Австралия).- Бюл.ИСМ.-1989.-№5.

95. Perlin A.S., Casu В., C13-NMR studies of O-carboxymethylglucose derivatives // Tetrahydron Lett. 1969. P. 2921-2924

96. Pospisilik K. Determination of CM-D-glucose in the product of hydrolytic depolymerization of carboxymethylcellulose by isotachophoresis // Electrophoresis (Weinhem,FRG) 1989 V.10 N.l P.20-22

97. Reuben J., Conner H.T. Analysis of the C13 NMR spectrum of hydrolyzed 0-(CM)-cellulose: monomer composition and substitution pattern// Carbohydrate Research. 1983. V.l 15. P. 1-13

98. Ricketts C.R., The distribution of ester groups in dextran sulfate stability towards hydrolytic reagents// J.Chem.Soc. 1956. P.3752-3756

99. Ricketts C.R., Walton W.W.K. Dextran sulfate as anticoagulant, process of prepearing same, and sterile solution thereof // Пат. 2715091 США.(Вел). РЖХим. 1957. 28434П

100. Rydbolm,S. Studies of partially substituted carboxymethylcellulose// Svensk Papperstidn. 1950. V53 P.561

101. Shyluk W.P., Timell Т.Е. Synthesis of four carboxymethyl ethers of glucose // Can. J. Chem. 1956 V.34 P.575

102. Simonsen L. Hovgaard L., Mortensen P.B., Brondsted H., Dextran hydrogels for colon-specific drug delivery V. Degradation in humanintestinal incubation model. // Eur. J. Pharm. Sci. 1995 V.3. N6 329337

103. Thomas H., Maillet F, Letourneur D, Jozefonvicz J, Kazatchkine M.D. Effect of substituted dextran derivative on complement activation in vivo// Biomaterials. 1995. V.16 N.15 P. 1163-1167

104. Touflk J., Carreno M-P., Jozefonvicz M., Libarre D Activation of the complement system by polysaccharide surface bearing carboxymethyl, carboxymethylbenzilamide and carboxymethylbenzilamide sulfanate groups// Biomaterials 1995. V.16 N3. P. 993-1002

105. H7.Ukai S., Honda A., Nagat K. Gas-liquid chromatographic analysis of CMC and CM starch// Journal of Chromatography 1990 V.513 P. 338-343

106. Ukai S., Honda A., Nagat K., Kiho T. Gas-liquid chromatography of acid hydrolysates of hydroxyethylstarch and hydroxyethylcellulose// Journal of Chromatography 1988 V.435 P.374

107. Witezak Z.J., Nieforth K.A. Carbohydrates in drug design// Marsel Dekker, nk, New York, 1997, 703p

108. Yokota ,Hiroshi Determination of carboxymethyl substitution ratios in CM cellulose.// Jpn Kokai Tokkyo Koho. Jp 62, 157.56 87.157.560. (Cl.GOI N 27/26),13 Jul 1987,Appl 85/289.991, 28 Dec 1985 ;5pp

109. Yui N. Drug release systems, containing water-soluble polymer domain and biodegradable hydrogel as matrix.// Пат: CA V.125 P309046g

110. Для изучения антимикробной активности были использованы штаммы бактерий, относящихся к разным семействам: Escherichia Coli (семейство Enterobactericae). Mycobacterium tuberculosis ATCC-607 (семейство Mycobactericae) и Staphylococcus aureus.

111. Изученные вещества не влияли на рост бактерий всех перечисленных семейств при концентрации веществ 100 мкг/мл.

112. Противогрибковая активность была изучена в отношении родов Aspergillus (Aspergillus niger) и Candida (Candida albicans).Для исследуемых веществ не была отмечена противогрибковая активность.

113. Антивирусная активность была изучена в отношении вирусов простого герпеса (VPG). Концентрация препаратов составляла 100 мкг/мл. Вещества 4 и 5 подавляли размножение вируса на 15 и 20% соответственно.

114. Способностью индуцировать интерферон в культуре обладали соединения 4 и 5.

115. Таким образом синтезированные вещества обладают несколькими видами биологической активности, из которых наиболее интересны для дальнейшего изучения вещества 4 и 5.кафедрой микробиологии, иммунологии.1. В.В. Тец