Сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов и аллерген для его выявления тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Щипкова, Любовь Гавроловна

• Щипкова, Любовь Гавроловна
• кандидат биологических наук
• 1983

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Щипкова, Любовь Гавроловна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Сенсибилизирующее действие бактериальных токсинов и анатоксинов.

2. Бактериальные аллергены, их приготовление и применение.

3. Аллергодиагностика vitro

ГЛАВА П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

1. Описание и характеристика производственных штаммов.

2. Выбор среды и типа возбудителя для получения микробной массы Cl.botulinum.

3. Приготовление микробной массы Cl.botulinum.

4. Метод получения ботулинина.

5. Изучение некоторых биохимических показателей ботулинина.Т.

6. Контроль стерильности аллергена.

7. Контроль безвредности ботулинина.

8. Определение антигенных свойств ботулинина.

9. Изучение специфичности ботулинического ал -лергена.

10. Изучение типоспецифичности ботулинического аллергена.

11. Изучение сенсибилизирующих свойств ботули -нического аллергена.

12. Методы изучения сенсибилизирующего действия ботулинических антигенов.

13. Характеристика антигенов,схемы сенсибили -зации, сроки наблюдения.

14. Определение антитоксической активности про-тивоботулинической сыворотки.

15. Метод статистической обработки результатов исследования.

ГЛАВА Ш. ПРИГОТОВЛЕНИЕ АЛЛЕРГЕНА-БОТУЛИНИНА И ИЗУЧЕНИЕ ЕГО СВОЙСТВ

1. Выбор типа возбудителя и среды для его выращивания при получении микробной массы С1.Ъо-ЬиИпш

2. Получение ботулинического аллергена.

3. Изучение некоторых биохимических показателей ботулинина.

4. Определение оптимальной дозы ботулинина в кожно-аллергической пробе и реакции повреждения нейтрофилов.

5. Отработка схемы контроля аллергенных свойств ботулинина в кожно-аллергической пробе.

6. Специфическая активность ботулинина в кожно-аллергической пробе.

7. Реакция повреждения нейтрофилов с ботулинином у сенсибилизированных морских свинок и кроликов в динамике.

8. Изучение специфичности ботулинина.

9. Изучение типоспецифичности аллергена.

10. Антигенные свойства .ботулинина.

11. Изучение сенсибилизирующей активности ботули -нического аллергена.

ГЛАВА 1У. СЕНСИБИЛИЗИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ БОТУЛИНИЧЕСКИХ

АНТИГЕНОВ НА ОРГАНИЗМ ЖИВОТНЫХ

1. Сравнительное изучение иммуногенных и сенси -билизирующих свойств ботулинических анатоксинов.

2. Сенсибилизирующее действие ботулинических анатоксинов различной степени очистки.

3. Сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов при различных способах введения.

4. Изучение сенсибилизирующего действия ботули -нических антигенов на организм лошадей-продуцентов противоботулинической сыворотки в процессе эксплуатации.

ГЛАВА У. ВЫЯВЛЕНИЕ СЕНСИБИЖЗИРУЮЩЕГО ДЕЙСТВИЯ

БОТУЛИНИЧЕСКИХ АНТИГЕНОВ НА ДОБРОВОЛЬЦАХ

I. Изучение уровня антител у привитых ботулиниче скими антигенами.

2. Кожно-аллергические реакции с ботулинином у лиц, привитых ботулиническими антигенами.

3. Показатель повреждения нейтрофилов у много кратно привитых ботулиническими антигенами.

4. Использование ботулинина для постановки кожно-аллергической пробы и ППН при оценке иммунологического статуса у работающих в сфере производства ботулинических антигенов для решения вопроса об очередной ревакцинации.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов и аллерген для его выявления»

Одной из важнейших задач советского здравоохранения является профилактика заболеваний, в частности, инфекционных. При этом большое значение приобретают вопросы, связанные с даль -нейшим совершенствованием специфической профилактики, преду -преждением побочных эффектов вакцинации, прежде всего аллергической природы. В настоящее время наблюдается тенденция к росту аллергических заболеваний. В среднем 10% населения всего мира страдает от различных проявлений аллергии. Значительная роль в этом принадлежит сенсибилизирующему действию различных бактериальных и вирусных вакцин. Антигены, в том числе бакте -рийные токсины и анатоксины, обуславливая иммунологическую перестройку организма, одновременно вызывают и сенсибилизацию, в результате чего могут возникать различной интенсивности аллергические реакции (И.Н.Моргунов, 1959; А.Х.Канчурин, 1976; В.А. Евсеев, 1982; Н.Д.Беклемишев, 1983; &.га1оеа, в.СЬегшж, 1982; А.Небб1е , 1983; &.Та881,0.3ассЫ. ,1983 и др.).

Велика роль специфической профилактики в защите персонала предприятий НИИ вакцин и сывороток, который согласно инст -рукций по технике безопасности периодически прививается против различных инфекций, в том числе и ботулизма. В связи с этим значительный практический интерес представляет выяснение вопроса о влиянии на организм прививаемых длительных систематических вакцинаций, создающих условия перегрузки организма различными антигенами, разработка соответствующих экспериментальных моде -лей, клинико-лабораторных тестов для оценки аллергизирующих свойств вакцин. Большое значение имеет усовершенствование схем и календаря прививок, направленное на снижение возможности ал

- б лергизации организма прививаемых (В.В.Квирикадзе, 1976; С.Г. Дзагуров, 1976; А.Д.Адо, 1979; А.А.Воробьев с соавт., 1982 и до-).

Большое внимание в литературе уделяется изучению сенсибилизации при различных инфекционных заболеваниях. Мало изученным остается вопрос об аллергическом действии анатоксинов и других вакцинных препаратов при иммунизации, о взаимоотношении между аллергической перестройкой организма и наличием антитоксического и антиинфекционного иммунитета. Взаимосвязь между указанными показателями обнаружена в работах С.А.Шварца с соавт. (1974)при иммунизации столбнячным анатоксином, у привитых и переболевших сибирской язвой, чумой, туляремией (Т.А.Калитина, 1956; Е.И.Ко-робкова с соавт., 1961; Э.Н. Шляхов, 1970 и др.).

Следует отметить, что сенсибилизирующее действие ботулини-ческих антигенов изучено недостаточно. В этом плане мы можем привести лишь единичные исследования И.Н.Моргунова (1959), А.Т. Кравченко с соавт.(1968, 1971).

Поэтому актуальными являются исследования, направленные на изучение сенсибилизирующего действия ботулинических антигенов при иммунизации.

Цель работы. Целью исследований явилось изучение сенсиби -лизирующего действия ботулинических антигенов на модели мелких лабораторных животных, лошадях-продуцентах противоботулиничес -кой сыворотки и добровольцах, работающих в сфере производства ботулинических препаратов с помощью ботулинического аллергена.

Задачи исследования.

I. Разработать и получить ботулинический аллерген -ботулинин, изучить его физико-химические свойства, специфическую активность в кожно-аллергической пробе и реакции повреждения нейтрофилов.

2. Изучить сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов в эксперименте в зависимости от чистоты, иммуногенности, способа введения.

3. Определить с помощью кожно-аллергических проб с ботули -нином степень сенсибилизации лошадей-продуцентов противоботу -линической сыворотки в процессе эксплуатации и в зависимости от качества антигенов, используемых для иммунизации.

4. Оценить иммунологическую и аллергическую перестройку и проанализировать их соотношение у сотрудников производства ботулинических антигенов, которые согласно инструкций по технике безопасности периодически ревакцинируются.

Научная новизна> и практическая ценность.

Впервые изучено сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов при однократной, многократной и гипериммунизациях.

Впервые разработан и получен аллерген ботулинин для оценки сенсибилизации человека и животных к ботулиническим анти -генам. Разработана инструкция по изготовлению и контроля ал -лергена ботулинического очищенного сухого, утвержденная Ученым Советом Томского НИИ вакцин и сывороток 23.03.1978 г.

Ботулинин используется в тесте ППН для обнаружения специфической сенсибилизации у привитых ботулиническими антигенами в Харьковском НИИ микробиологии вакцин и сывороток (Акт внед -рения от 3 декабря 1979 г.).

Показана эффективность кожно-аллергического теста с боту-линином для оценки аллергической и иммунологической перестройки лошадей-продуцентов гипериммунной сыворотки. Сделаны реко -мендации по возможности использования кожно-аллергического теста с ботулинином при оценке иммунологической реактивности лошадей в подготовительном цикле иммунизации. Кожно-аллергический тест применяется в иммунотделе предприятия Томского НИИ вакцин и сывороток (Акт внедрения от II марта 1983 г.).

Обоснована возможность использования конского мяса, явля-ы ющегося отходом свороточного производства, взамен говяжьего, при изготовлении питательных сред, необходимых для получения ботулинических антигенов. Материалы исследования вошли в изменение № 103/4 к Регламенту производства на лечебно-профилактические и диагностические противоботулинические сыворотки от 29 марта 1966 г., утвержденному КВС МЗ СССР 17 ноября 1977 г., и использованы при разработке Регламента производства сыворо -ток противоботулинических типов А,В,С,Е, У , очищенных, кон -центрированных жидких и сухих (полуфабрикат) № 229, утвержденного МЗ СССР в 1981 г.

Установлена коррелятивная взаимосвязь аллергической и иммунологической перестройки добровольцев, привитых ботулиничес-кими антигенами. Использование теста ППН рекомендовано для оценки иммунологического статуса лиц, работающих в системе производства ботулинических антигенов и многократно ревакцинируе -мых, при решении вопроса о целесообразности очередной ревакцинации. Тест ППН внедрен на предприятии Томского НИИ вакцин и сывороток (Акт внедрения от 21 апреля 1983 г.).

На защиту выносятся следующие основные положения:

1. Разработка и получение ботулинического аллергена. Характеристика его физико-химических, биологических свойств, специфической активности.

2. Изучение в эксперименте сенсибилизирующего действия ботулинических антигенов в зависимости от их иммуногенности, степени очистки и способа введения.

3. Оценка сенсибилизирующего действия ботулинических антигенов на организм лошадей-продуцентов противоботулинической сы воротки в процессе иммунизации. Рекомендация кожно-аллергичес-кого теста с ботулинином для оценки иммунологической реактив -ности лошадей в подготовительном периоде гипериммунизации.

4. Обоснование возможности использования конского мяса, являющегося отходом сывороточного производства, для изготовления питательных сред при получении ботулинических антигенов.

5. Влияние многократной вакцинации брюшнотифозной вакциной с секстаанатоксином на сенсибилизацию организма сотрудников производства ботулинических антигенов. Использование теста ППН с ботулинином для оценки их аллергического и иммунологического состояния при решении вопроса об очередной ревакцинации.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Щипкова, Любовь Гавроловна

ВЫВОДЫ

1. Впервые изучено сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов на добровольцах, многократно ревакцинированных ботулиническими антигенами, лошадях-продуцентах противо -ботулинической сыворотки и мелких лабораторных животных.

2. Впервые разработан и получен б о тулиниче с кий аллерген-ботулинин для выявления специфической сенсибилизации к боту -линическим антигенам.

3. Не установлено зависимости уровня сенсибилизации животных от способа введения, иммуногенности и степени очистки ботулинических антигенов.

4. Для оценки иммунологической реактивности лошадей -продуцентов в подготовительном периоде гипериммунизации возможно применение кожно-аллергического теста с ботулинином.

5. Получено дополнительное обоснование возможности ис -пользования конского мяса, являющегося отходом сывороточного производства, при изготовлении питательных сред с целью получения ботулинических антигенов.

6. Установлен параллелизм выраженности аллергических реакций и уровня противоботулинических антител в сыворотке крови многократно привитых, работающих в сфере производства ботули -нических антигенов. Рекомендован показатель повреждения нейт -рофилов в качестве дополнительного теста оценки иммунологиче -ского состояния этого контингента лиц при решении вопроса о целесообразности очередной ревакцинации.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Современная аллергология рассматривает специфическую сенсибилизацию организма как результат взаимодействия иммуно компетентной системы с веществами антигенной природы. Антигены, в том числе и бактерийные токсины и анатоксины, обуславливая иммунологическую перестройку организма, одновременно вызывают и сенсибилизацию, в результате чего могут возникать раз -личной интенсивности аллергические реакции. Для выявления сенсибилизации широко применяются кожно-аллергические тесты (E.H. Белан, 1970; Е.Э.Бахрах с соавт., 1973; С.А.Шварц, В.Е.Букова, 1975 и др.), а также клеточные реакции in vitro . К разряду последних относится реакция повреждения нейтрофилов (В.А.Фрадкин, 1975), которая в настоящее время находит все большее применение с целью выявления многих аллергических состояний: при поллинозах (Н.В.Медуницын, В.Б.Гервазиева, 1967), токсоплазмо-зе (Ю.В.Скавинский, 1970), бруцеллезе (К.Б.Курманова,1974), клещевом энцефалите (С.П.Карпов с соавт., 1967, Н.Х.Ставицкая, 1974), у привитых столбнячным анатоксином (А.А.Сохин с соавт., 1976), сибиреязвенной вакциной (И.В.Шенцев с соавт., 1978) и др.

В настоящее время предложен целый ряд бактериальных аллергенов, которые готовят с помощью различных методических прие -мов либо в растворимой форме, либо в корпускулярной (Д.А.Цувер-калов, 1961; П.П.Сахаров и Е.И.Гудкова, 1963; Е.И.Коробкова с соавт., 1965; А.Д.Адо с соавт.,1968; В.Ф.Рунова, 1969; Э.Н. Шляхов, 1969; А.Е.Вершигора, 1971). Действующим началом аллергенов, как правило, является белок. Бактериальные аллергены находят широкое применение при диагностике заболеваний, оценке постинфекционного или поствакцинального иммунитета.

По мнению многих авторов существует взаимосвязь между аллергической перестройкой организма и наличием антитоксического и антиинфекционного иммунитета. Такая взаимосвязь обнаружена у иммунизированных столбнячным анатоксином (С.А.Шварц с соавт., 1974), у больных и переболевших сибирской язвой,чумой, туляремией и другими заболеваниями и у привитых против этих инфекций (Э.Н.Шляхов, 1970; Т.А.Калитина, 1956; Е.И.Коробкова с соавт., 1961 и др.). Это позволило указанным авторам выявить с помощью кожно-аллергических проб состояние иммунологического статуса обследуемых лиц.

Сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов изу -чено недостаточно. Можно привести лишь единичные эксперимен -тальные данные (И.Н.Моргунов, 1959; А.Т.Кравченко с соавт., 1968, 1971), касающиеся определения в основном анафилактоген -ных свойств указанных препаратов.

В связи с вышеизложенным изучение сенсибилизирующего влияния ботулинических антигенов на организм представляет теоретический и практический интерес. Поэтому обоснованным и актуальным является постановка исследований по изучению сенсибилизи -рующего действия ботулинических антигенов на лабораторных жи -вотных; выявление с помощью кожно-аллергических проб с ботули-нином аллергической перестройки у лошадей-продуцентов противо-ботулинической сыворотки и сопоставление ее с уровнем антите -лообразования. Представляется важным применение полученных в эксперименте данных на контингенте лиц, работающих в сфере производства ботулинических антигенов, для оценки их аллерги -зации и иммунологического статуса.

Поставленные задачи решались следующим образом. Был раз -работал и получен аллерген-ботулинин с использованием метода щелочного гидролиза. Изучены его свойства: биохимический со

- 146 ~ став, специфичность, типоспецифичность, антигенные и сенсибилизирующие свойства, специфическая активность в кожно-аллерги-ческой пробе и реакции повреждения нейтрофилов.

Сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов изучали: в зависимости от чистоты и иммуногенности анатоксинов на морских свинках; при различных способах введения (подкожно шприцем и иньектором, аэрозольно) на кроликах; при гиперимму -низации лошадей-продуцентов противоботулинической сыворотки в течение 15 циклов.

Изучено сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов на добровольцах, многократно ревакцинированных химической сорбированной брюшнотифозной вакциной с очищенным концентрироо ванным сорбированным сектаанатоксином, работающих в сфере производства ботулинических антигенов.

Для решения поставленных задач было использовано 541 морских свинок, 45 кроликов, 3303 белых мышей, 27 лошадей-проду -центов противоботулинической сыворотки. Полученные экспериментально производственные данные подтверждены в опыте на группе добровольцев (85 человек). В работе использовано 12 методик,выполнено 5277 анализов. Материалы исследования подвергнуты статической обработке путем вычисления и сравнения средних при помощи показателя достоверности разницы £ по Стьюденту (И.П.Ашмарин с соавт., 1962), вычисления коэффициента корреля -ции (Л.С.Каминский, 1964).

На первом этапе были проведены исследования по отработке метода приготовления аллергена. Изучены качественные и количественные показатели при изготовлении ботулинина по следующим технологическим схемам: а) методом уксусно-кислого гидролиза, примененным С.А.Шварц и Э.Н.Шляховым (1970) при получении столбнячного аллергена - тетанина, б) методом кислотного гид ролиза, используемого Д.А.Цуверкаловым (1961) для получения дизентерина и в) методом щелочного гидролиза, предложенным В.Ю.Гавриленковой и В.Ф.Руновой (1970) для получения бактериальных аллергенов.

Из используемых технологических схем наилучшим оказался метод щелочного гидролиза микробной массы Ol.botulinum Всего по этому способу получена 21 серия препарата, изучены его свойства. По химическому составу аллерген является белком с небольшим содержанием нуклеиновых кислот. Ультрафиолетовые спектры подтверждают данные химического анализа; имеется один пик при 275 нм, который соответствует белковому компоненту (Г.А.Максимова с соавт., 1970).

Метод щелочного экстрагирования обеспечивает получение препарата с достаточно постоянным химическим составом и биологической активностью. Он позволяет стандартизировать условия получения аллергена, что обеспечивается применением высушенных микробных клеток. Выделенный препарат подвергается высушиванию, и при изготовлении раствора используется точная навеска аллергена с учетом содержания белка.

На мелких лабораторных животных выявлено, что ботулинин безвреден при проверке на белых мышах и морских свинках, обладает слабыми сенсибилизирующими и антигенными свойствами, специфичен, типоспецифичными свойствами не обладает, выявляет сенсибилизацию животных к ботулиническим антигенам в реакции повреждения нейтрофилов и кожно-аллергической пробе. При отработке схемы контроля специфических свойств ботулинина установлено, что оптимальная интенсивность кожных реакций наблюдается у морских свинок при введении внутрикожно 100 мкг аллергена через 21 день после сенсибилизации моноанатоксином типа В в дозе 12 ЕС. Максимальной величины реакция достигает через 24 ч после постановки, к 48 часам она остается на прежнем уровне или несколько снижается. В реакции повреждения нейтрофилов увеличение индекса ППН происходит уже на 3 сутки после иммунизации, максимальное значение реакции обнаруживается на 7-14 сутки.

Ботулинин испытан в лабораторных условиях в Харьковском НИИМВС им.Мечникова для выявления состояния сенсибилизации к Ol.botulinum в реакции повреждения нейтрофилов. Получен акт внедрения ботулинина в лаборатории раневых инфекций Харькове -кого НИИМВС им. Мечникова от 3 декабря 1979 г.

Проведено изучение сенсибилизирующего действия ботулини -ческих анатоксинов на модели мелких лабораторных животных (морских свинках и кроликах) в зависимости от их иммуногенности, степени очистки и способа введения.

Сравнительное изучение интенсивности аллергических реак -ций (кожно-аллергической и ППН) выполнено на двух группах морских свинок, сенсибилизированных ботулиническими анатоксинами с различной иммуногенностью: в первой группе 20-63%, во второй - 70-100%. Полученные результаты свидетельствуют о том, что иммунизация морских свинок вызывает аллергизацию животных примерно на одном уровне. С помощью кожно-аллергической реакции и ППН не обнаружено достоверных различий в результатах реакции.

Наши данные согласуются с исследованиями Г.С.Неприной (1971) и Г.С.Неприной с соавт. (1972) по изучению иммуногенной и аллергенной активности различных препаратов столбнячного анатоксина. Авторами также не выявлена коррелятивная взаимо -связь между иммуногенными и сенсибилизирующими свойствами.

Для исследований по оценке степени сенсибилизации морских свинок в зависимости от чистоты ботулинических анатоксинов в реакции повреждения нейтрофилов и кожно-аллергической пробе использовали две группы морских свинок, сенсибилизированных производственными сериями ботулинических трианатоксинов типов А, В,Е различной степени очистки. Первой группе вводили анатоксины с содержанием белкового азота от 0,1277 до 0,1811 мг/мл, второй - от 0,2248 до 0,3358 мг/мл.

Показано, что иммунизация животных более очищенными антигенами в условиях наших экспериментов вызывает одинаковую сенсибилизацию по кожно-аллергической пробе и ППН с менее очищенными анатоксинами. Аналогичные данные получены Л.Г.Ковтунович, Е.А.Шаблонекой (1962), М.А.Фроловой, О.В.Протасовой (1965),которые не выявили отличий в сенсибилизации животных очищенными и нативными анатоксинами.

При проведении массовой вакцинации большое значение имеют вопросы снижения аллергизации населения. В связи с этим проводятся исследования по изучению сенсибилизации, зависящей не только от качества и степени очистки вакцинальных препаратов, но и от способа введения их в организм. Сравниваются подкож -ный, аэрозольный и другие методы введения вакцин (Н.И.Александров с соавт., 1972; Н.Б.Егорова с соавт., 1975,1977; Б.А.Бояри-нова с соавт., 1974 и др.). Отмечено, что при введении анатоксина в виде аэрозолей аллергические реакции немедленного и замедленного типов развиваются в меньшей степени, чем при под -кожном введении тех же антигенов.

В наших исследованиях сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов при различных способах введения изучено на трех группах кроликов, которых предварительно дважды иммунизировали подкожно в дозе I мл коммерческим препаратом - химической сорбированной брюшнотифозной вакциной с очищенным концентрированным сорбированным секстаанатоксином. Через 9 месяцев была проведена ревакцинация ассоцированным препаратом для аэрозольной иммунизации против брюшного тифа, газовой гангрены, ботулизма типов А,В,Е с использованием аэрозольного, подкожного шприцем и безыгольным инъектором методах введения.

Аллергическую перестройку животных на фоне иммунизации выявляли путем постановки внутрикожных проб и реакции повреждения нейтрофилов с ботулинином. Внутрикожные пробы ставили через 21 день после ревакцинации; ППН - перед ревакцинацией, на 5-ые, 7-ые, 21-ые, 28-ые сут. после нее. Достоверных отличий результатов кожно-аллергической реакции и ППН при подкожной и аэрозольной иммунизации не обнаружено. Отмечена взаимосвязь между проявлением аллергических реакций и уровнем антител: при содержании в крови антитоксина >0,01 МЕ/мл реакция ППН через 7 и 14 сут. после иммунизации и кожно-аллергическая проба были положительными в 100% случаев. У кроликов с титром антител < 0,01 МЕ/мл индекс ППН и внутрикожная проба были отрицательными.

Исследования по изучению сенсибилизирующего действия ботулинических антигенов были продолжены в производственных условиях на лошадях-продуцентах противоботулинической сыворотки.

Наблюдения проведены на 27 животных. Показано, что у ин-тактных животных кожно-аллергическая реакция отрицательна,утолщение кожной складки составляет для большинства животных 1-2мм. На первых этапах эксплуатации продуцентов (1-2 цикл) имеет место повышенная сенсибилизация животных, отмечаются выраженные кожно-аллергические реакции на введение ботулинина, что свидетельствует о глубокой двусторонней (аллергической и иммунологической) перестройке организма в ответ на введение антигена. У интактных животных при постановке кожно-аллергической реакции утолщение кожной складки равнялось в среднем 1,5+0,3 мм, к середине первого цикла - 5,5+0,6 мм (р < 0,001), перед кровопу еканием 2-го цикла - 6,5+1,0 мм (р < 0,01). К 4-му и II цик -лам интенсивность кожно-аллергической реакции снижается и вновь повышается к 15-му циклу, оставаясь во все периоды исследова -ния достоверно выше по сравнению с фоном.

У животных с высоким уровнем антитоксина в сыворотке крови (для типа В - от 400 до 1000 Щ/мл и для типа Е - от 500 до 1500 МЕ/мл) на протяжении всего периода исследования интенсивность кожно-аллергических реакций была достоверно выше, по сравнению с реакцией у животных с низким содержанием антител (для типа В - от 50 до 300 МЕ/мл, для типа Е - от 50 до 400 МЕ/мл). Отмечена коррелятивная взаимосвязь между титрами антитоксина и результатами внутрикожных проб в периоды повышенной сенсибилизации животных (1,2 и 15 циклы). Большая достоверность коэффициента корреляции наблюдается в группах животных с низким уровнем антител.

Таким образом, выраженность кожно-аллергической реакции связана с уровнем антитоксического титра сыворотки крови. Это позволяет с помощью внутрикожной пробы с ботулинином проводить оценку состояния иммунологической реактивности лошадей - продуцентов противоботулинической сыворотки на первых циклах иммунизации, когда происходит отбор рефрактерных к ботулиническим антигенам животных и перевод их под другой вид иммунизации. Этот тест внедрен на предприятии Томского НИИ вакцин и сывороток (Акт внедрения от II марта 1983 г.).

Сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов на организм лошади изучено в зависимости от используемого для приготовления питательных сред мяса. Предпосылкой для этих исследо -ваний послужили данные Г.Е.Синельникова с соавт.(1975) о том, что токсины, приготовленные на бульоне Глузмана из конского мяса, являющегося отходом сывороточного производства, по антигенным свойствам не уступают токсину, приготовленному на бульоне из говяжьего мяса. Для внедрения антигенов на основе конского мяса в практику производства противоботулинических сывороток проведены дополнительные наблюдения за состоянием лошадей -продуцентов в процессе их гипериммунизации. В частности решался вопрос о степени сенсибилизации продуцентов при длительном применении указанных антигенов. Сравнительное изучение прово -дилось путем постановки внутрикожной пробы с аллергенами, приготовленными из конского и говяжьего мяса, и с ботулиническим аллергеном. Исследования проведены на двух группах лошадей -продуцентов противоботулинической сыворотки, одна из которых получила антиген, приготовленный на питательной среде из говяжьего мяса, вторая - из конского. Показано, что аллергизация животных не связана с видом мяса, используемого для приготов -ления питательных сред как основы антигенов, что позволяет решить одновременно две проблемы: использовать наряду с говяжьим мясом конское, являющееся отходом сывороточного производства, и исключить важный пищевой продукт (мясо говядины).

Материалы исследования по применению конского мяса, являющегося отходом сывороточного производства, для приготовления ботулинических антигенов, вошли в изменение № 103/4 к Регламенту производства на лечебно-профилактические сыворотки, утверж -денному КВС МЗ СССР 17 ноября 1977 г., и использованы при разработке Регламента производства сывороток противоботулиниче -ских типов А,В,С,Е, Р , очищенных, концентрированных жидких и сухих (полуфабрикат) № 229, утвержденного МЗ СССР в 1981 г.

Все вышеизложенное позволило подойти к реализации полученных в эксперименте данных на контингенте лиц, работающих в сфере производства ботулинических антигенов, для возможности оценки их иммунологического статуса с помощью аллергена-ботулинина в кожно-аллергической пробе и реакции повреждения нейтрофилов при решении вопроса об очередной ревакцинации брюшно-тифозной вакциной с секстаанатоксином, обладающей значительными реакто-генными свойствами.

По программе, составленной и утвержденной на Ученом Совете Томского НИИ ВС, в ограниченном опыте были разрешены испы -тания (в кожно-аллергической пробе) аллергена-ботулинина на группе добровольцев (лица, работающие в производстве антигенов). Под наблюдением находилось 8 групп добровольцев, отличающихся по количеству полученных ревакцинаций и интервалу от момента последнего введения антигена.

Полученные нами данные говорят о том, что защитный уро -вень антитоксина в сыворотке большинства привитых сохраняется до 2-2,5 лет. Через 3 года титр антител у всех обследуемых лиц был меньше 0,1 МЕ/мл, следовательно, по истечении трех лет требуется обязательная ревакцинация.

С увеличением числа ревакцинаций интенсивность кожно-аллергических реакций возрастает. Это особенно видно в ранние сроки после прививки. Так, через 1-2 месяца после однократной ревакцинации результат реакции составил 15,6+2,4 мм, после 34 - 16,3+2,8 мм (р >0,5) и после 5-П - 28,7+0,8 мм( <0,001). С увеличением срока после ревакцинаций эти различия сглажива -ются. У лиц контрольной группы, привитых столбнячным анатоксином и убитой хроматографической гриппозной вакциной, кожно-аллергическая реакция была отрицательной.

Показатель повреждения нейтрофилов с увеличением числа ревакцинаций увеличивается. Так, через 1-6 месяцев после иммунизации для однократно ревакцинированных он равен 0,06+0,01 , для ревакцинированных 3-4 раза - 0,21+0,02 (р<0,001) и 5-11 раз - 0,23+0,05 (р<:0,01). У лиц контрольной группы ППН был отрицательным.

Таким образом, длительные систематические прививки со -здают условия перегрузки организма антигенами, вызывают усиленную аллергизацию организма, что согласуется с данными ряда авторов (А.Х.Канчурин, 1976; А.А.Воробьев с соавт., 1982 и др.).

Отмечен высокий процент совпадения результатов теста ППН и внутрикожной пробы. У лиц, ревакцинированных три и более раз, совпадающие положительные и отрицательные результаты составили 83%.

Сравнительное изучение интенсивности аллергических реакций и уровня титра антител в группе добровольцев показало следующее. У лиц с титром антитоксина ^-0,1 МЕ/мл по одному, двум или трем (А,В,Е) типам результат кожно-аллергической ре -акции был положителен в 100% случаев и составлял соответственно 15,7+1,4 мм, 18,4+1,6 мм и 19,4+3,4 мм. При низком уровне антител ( < 0,1 МЕ/мл по всем компонентам) результат реакции составил 9,0+0,8 мм.

Показатель повреждения нейтрофилов у добровольцев с титром антител ^0,1 МЕ/мл по одному, двум или трем типам был положителен в 100% случаев и равен соответственно 0,17+0,01, 0,21+0,03, 0,22+0,02. Значения ППН в группе лиц с низким защитным уровнем антител ( ¿.0,1 МЕ/мл по всем типам) составили 0,10+0,01.

Рассчитан коэффициент корреляции между содержанием антитоксина в сыворотке привитых и результатами внутрикожной пробы и ППН. Во всех случаях отмечена положительная корреляция с высокой степенью достоверности.

Таким образом, величина кожно-аллергической реакции и ППН у волонтеров, многократно привитых ботулиническими антигенами, находится в коррелятивной зависимости с уровнем антитоксина в сыворотке крови.

Все это позволило нам рекомендовать использование теста ППН для оценки иммунологического статуса у привитых при решении вопроса об очередной ревакцинации.

Указанный тест внедрен на предприятии Томского НИИ вакцин и сывороток ( акт внедрения от 21 апреля 1983 г.).

Резюмируя все вышеизложенное, следует сказать, что впервые изучено сенсибилизирующее действие ботулинических антигенов у добровольцев, многократно ревакцинированных ботулиническими антигенами, лошадей- продуцентов противоботулинической сыворотки и на модели мелких лабораторных животных. Впервые получен аллерген ботулинин, выявляющий сенсибилизацию к ботулиническим антигенам и обладающий специфической активностью в кожно-аллергической пробе и реакции повреждения нейтрофилов. В эксперименте на модели мелких лабораторных животных не выявлено различий сенсибилизирующего действия ботулинических анатоксинов в зависимости от способа их введения, иммуногенности и степени очистки. В производственном опыте на лошадях- продуцентах показана возможность исполь -зования кожно- аллергической реакции с ботулинином для прогнозирования иммунологической реактивности лошадей- продуцентов противоботулинической сыворотки и отстранения рефрактерных животных. Рекомендован тест ППН для оценки иммунологического статуса у привитых, работающих в производстве ботулинических анатоксинов.

В результате проведенных исследований сделаны следующие практические рекомендации:

I) Для оценки сенсибилизирующего действия ботулинических антигенов рекомендовано использование разработанного и полученного нами аллергена ботулинина, Инструкция на который утверждена Ученым Советом Томского НИИВС.

2) Использование конского мяса, являющегося отходом сывороточного производства, научно обосновано для приготовления ботули-нических антигенов.

3) В качестве оценочного теста иммунологической реактивности лошадей- продуцентов противоботулинической сыворотки может быть использована кожно- аллергическая реакция с ботулинином для выбраковки рефрактерных к ботулиническим антигенам животных.в первом цикле иммунизации. Внутрикожная проба, не превышающая

5 мм, характеризует низкую иммунологическую реактивность лошадей-продуцентов .

4) В качестве дополнительного теста оценки иммунологического статуса контингента лиц, работающих в сфере производства ботули-нических антигенов, для решения вопроса о целесообразности очередной ревакцинации, рекомендована реакция повреждения нейтрофи-лов с ботулинином. Лица, имеющие индекс ППН < 0,15 должны быть ревакцинированы. При значении ППН > 0,15 вопрос об очередной ревакцинации окончательно решается по результатам постановки реакции биологической нейтрализации.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Щипкова, Любовь Гавроловна, 1983 год

1. Абукова P.A.»Кузьменко В.В.,Фоменко 0.П.Изучение сенсибилизации к коринебактериям у носителей дифтерийных палочек.-В кн.: Вопросы эпидемиологии и прикладной иммунологии. Казань, 1976, ч.П, с. 96-98.

2. Авербах М.М., Гергерт В.Я., Литвинов В.И. В кн.повышенная чувствительность замедленного типа и инфекционный процесс. - М.: Медицина, 1974. - 248 с.

3. Адо А.Д. Аллергические реакции замедленного типа. -Врачебное дело, 1963, № 6, с. 11-16.

4. Адо А.Д. Общая аллергология. М. :Медицина, 1978. -- 427 с.

5. Адо А.Д. Задачи практической аллергологии на современном этапе. В кн.: Прикладная иммунология в профилактике бактериальных инфекций и аллергических заболеваний: Тезисы докладов Всесоюзного симпозиума (23-25 января). М., 1979, с. 5-6.

6. Акимович В.В.,Цзенцов С.А., Болобородов P.A. Кожная гиперчувствительность к фракции I чумного микроба у морских свинок, сенсибилизированных бактериями чумы. В кн.: Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1969, № 5, с. 18-23.

7. Аллергия и имь^шитет в отдаленные сроки после внутрикожной вакцинации БЦЖ / Кочнева И.Е., Генкина В.Н.,Перова Т.В., Кечемайкина В.И. В кн.: Вопросы патогенеза и клиники аллергических заболеваний. М., 1972, с. 44-49.

8. Апанащенко Н.И., Нехотенова Е.И. Экспериментальное изучение сенсибилизирующих свойств нативного и очищенного дифтерийных анатоксинов. Ж,микробиологии, 1955, № 7, с. 10-15.

9. Асатиани B.C. Методы биохимических исследований. -М.: Медгиз, 1956. 472 с.

10. Ашмарин И.П., Воробьев A.A. Статистические методы вмикробиологических исследованиях Л.: Медгиз, 1962. - 180 с.

11. Бахрах Е.Э., Егорова В.Д., Павлова Л.П. К характеристике полисахаридсодержащей фракции чумного микроба. Ж, микробиологии., 1962, № 6, с. 126-130.

12. Бахрах Е.Э., Тараненко Т.М. Изучение химического состава аллергена пестина ПЛ. Сообщение Ш. Характеристика поли-сахаридных компонентов. Ж.микробиологии,, 1969, № 4, с. 16-18.

13. Беклемишев Н.Д. Инфекционная аллергия. Алма-Ата, Наука, 1968. - 375 с.

14. Беклемишев Н.Д. Иммунитет и аллергия. Иммунология, 1983, № 6, с. 78-81.

15. Белан E.H. 0 выявлении больных со стертыми формами дизентерии в детских коллективах методом внутрикожной пробы с дизентерином. Ж. микробиологии,, 1968, № 6, с. 75-80.

16. Белан E.H. Эпидемиологическое значение кожно-аллерги-ческой пробы с дизентерином. Сообщение I. Значение кожно-аллер-гической пробы для выявления детей, больных дизентерией. Ж. микробиологии, 1969, № 7, с. 42-47.

17. Белан E.H. Эпидемиологическое значение кожно-аллер-гической пробы с дизентерином. Сообщение Ш. Значение кожно -аллергической пробы при комплексном профилактическом обследовании работников пищевых предприятий. Ж, микробиологии., 1970, № 4, с. 47-53.

18. Бодажкова К.Н. Материалы аллерго-иммунологического изучения дизентерина и вопросы совершенствования его производства. Автореф. дис.канд.мед.наук. Л., 1974, - 17 с.

19. Бодажкова К.Н. »Неверова Е.И., Триус М.Ф. Материалы к клинической оценке нативного и очищенного дизентерина и опре -делению критериев кожной реакции. В кн.: Вопросы прикладной иммунологии: Труды Лен.НИИВС. Л., 1967, т. 6, с. 82-83.

20. Бородиюк H.A., Смирнова М.Н., Прищеп М.К. Изучение антигенных субстанций, входящих в состав стрептококкового ал -лергена. Ж.микробиологии,, 1966, № II, с. 20-24.

21. Брондз Б.Д. Аспекты изучения гиперчувствительности замедленного типа и связанных с ней феноменов. Успехи современт биол., 1965, т.59, вып. 2, с. 257.

22. Брондз Б.Д., Сура С.H., Снегирева А.Е. Морфологические и авторадиографические изменения иммунных лимфоцитов при взаимодействии с аллогенными клетками-мишенями. Успехи совр. биол.,1972, т. 73, вып. I, с. 42-58.

23. Бузмаков И.Г. Способ получения листериозного аллер -гена. Авт. свид., 1973 № 398253.

24. Бурова Т.В. Кожная аллергическая проба и ее значение для диагностики дизентерии у детей. Ж. микробиологии., 1961, № 2, с. 117.

25. Васильева O.A.,Фрадкин В.А., Шипулина Н.И. О применении теста ППН (показателя повреждения нейтрофилов крови) для оценки сенсибилизации организма к вирусам оспы и клещевого энцефалита. Лабораторное дело, 1972, № 12, с. 730-733.

26. Вершигора А.Е. Микробная аллергия. Киев, I97I.-275c.

27. Вершигора А.Е. Обоснование метода изготовления и применения микробных аллергенов: Автореф. докт.дис. Львов,1969.

28. Вершилова П.А. ,Губина Е.А. Препараты, применяемые для профилактики, лечения и аллергодиагностики бруцеллеза. -В кн.: Справочник по применению бактерийных и вирусных препаратов. M., 1975, с. 89-90.

29. Внутрикожные реакции со стрептококковым аллергеном и антитела к нету / Яхнина H.A., Зарубина К.В. ,Евзович В.Л. и др. Ж.микробиологии,, 1971, № 6, с.87-90.

30. Внутрикожная аллергическая проба для выявления сен -сибилизации организма к холерным вибрионам / Рубцов И.В.,

31. Ефимов Д.Д., Белова Т.Н. и др. Ж.микробиологии., 1973, № 10, с. 28-33.

32. Войтаник Л.И. Результаты применения химического ант-раксина в Актгобинской области. В кн.: Вопросы иммунопрофи -лактики и иммунодиагностики: Материалы У1 научной конф.Молд. НИИ гигиены и эпидемиологии. Кишинев; Тимпул, 1970, с. 226-229.

33. Воробьев A.A., Афанасьев С.С., Воробьева М.А. Современные взгляды на побочное действие вакцинаций. Ж. микробиологии* 1982, № 8, с. 6-12.

34. Выгодчиков Г.В. Микробиология и иммунология стафило -кокковых заболеваний. М.: Медгиз, 1950, - 166 с.

35. Гавриленкова B.D., Прядкина М.Д. Изучение аллергенных фракций, выделенных из вакцинного чумного штамма ЕВ. Сообщение I. В кн.: Материалы Межинститутской научной конференции па -мяти Л.А.Тарасевича. M., 1965, с. 319-320.

36. Гавриленкова В.Ю., Рунова В.Ф., Прядкина М.Д. Сравнительное изучение антигенного состава аллергенов чумных бактерий. Ж. микробиологии,, 1968, № 4, с. 133.

37. Гавриленкова В.Ю., Прядкина М.Д.', Рунова В.Ф. Выделение и изучение аллергена из чумного микроба. В кн.: Вакциныи сыворотки. Материалы по производству: Труды МОсНИЙВС им. И.И.Мечникова. М., 1971, вып. 21, с. 138-142.

38. Гервазиева В.Б. Аллергическая альтерация лейкоцитов убольных поллинозами: Автореф.дис.канд.мед.наук. М.,1968.

39. Гиперчувствительность замедленного типа при иммунизации и инфекции Mycoplasma pneumoniae /Байжомартов М.С., Прозоровский С.В., Иржанов С.Д., Цой И.Т. Ж.микробиологии., 1975, № 12, с. 75-78.

40. Голюсова Е.В., Трохименко М.З. 0 значении пробы Цу -веркалова при диагностике острой дизентерии у детей. В кн.: Кишечные инфекции. Респ.межвед.сб., 1972, № 5, с. 97.

41. Денисова Н.П.Физико-химическая характеристика и молекулярные параметры препаратов очищенного дизентерина. В кн.: Вопросы прикладной иммунологии: Труды ЛенНИИВС. Л., 1967, т.6, с. 79-82.

42. Денисова Н.П., Шапиро Н.И. Материалы к физико-химической характеристике препаратов нативного и очищенного дизентерина. Ж. микробиологии., 1970, № 4, с. 72-77.

43. Дранкин Д.И. ,Абрамсон Л.А. Пробы с антраксином у переболевших по материалам Саратовской области. В кн. : Вопросы иммунопрофилактики и иммунодиагностики: Матер.УI научной конф. Молд. НИИ гигиены и эпидемиологии. Кишинев: Тимпул, 1970,с.230-233.

44. Дргоккер В.В. Повышенная чувствительность замедленного типа, индуцированная листерийным антигеном: Автореф.дис,. канд.мед.наук. Томск, 1967. - 15 с.

45. Дунаева Т.Н., Воронцова Т.А.»Мещерякова И.С. Некото -рые особенности серо-аллергического обследования людей на ту -ляремию. Ж.микробиологии,, 1971, № 4, с. 12-16.

46. Евсеев В.А.Имцунитет, аллергия, иммунопатология ( к проблеме взаимосвязи иммунитета и аллергии). Иммунология, 1982, № 3, с. 87-93.

47. Егорова Н.Б. Экспериментальное изучение динамики сенсибилизации немедленного типа при аэрозольном и подкожном введении столбнячного анатоксина. Ж, микробиологии,, 1973,№ 9, с. 134.

48. Егорова Н.Б., Ефремова В.Н.»Мирошниченко И.В. Экспе -риментальное изучение сенсибилизации организма в процессе вакцинации анатоксинами при разных путях их апликации. Журнал гигиены, эпидемиологии, микробиологии и иммунологии, 1977, 21,4, с. 410-412.

49. Егорова А.П., Мартыншин М.Я., Малышев А.Н. Диагностическое значение внутрикожной аллергической пробы при листериозе. Ж.микробиологии,, 1970, № 2, с. 62-67.

50. Задорожный В.Ф. »Калистру Н.К. Опыт определения иммунитета к столбняку с помощью кожно-аллергических реакций с те-танином. В сб.: Иммунодиагностика и специфическая профилактика инфекционных болезней. Кишинев: Штиинца, 1974, с.62-63.

51. Зарецкая И.В., Горчакова Г.А. Биохимические особенности некоторых бактериальных белков с различной аллергенной активностью. Ж,микробиологии,, 1963, № 8. с. I0I-I04.

52. Захарова Т.Р., Титова H.С., Болотовский В.M. Экспериментальное изучение коревого иммунитета по показателю по -вреждения нейтрофилов. Вопросы вирусологии, 1982, 27, № 5, с. 600-602.

53. Здродовский П.Ф. Аллергическая диагностика бруцеллеза у овец с помощью бруцеллизата и бруцеллина. В кн.: Бруцеллез: Труды экспедиции ВИЭМ. M., 1937, с. 257-293.

54. Здродовский П.Ф. Проблемы инфекции, иммунитета и аллергии. М.: Гос.изд.мед.лит., 1962 468 с.

55. Зеленова Е.Г. Выявление аллергии при стафилококковой инфекции: Автореф.канд.дис. Горький, 1971.

56. Зеличенко Л.И.Тучные клетки крыс в аллергических реакциях немедленного типа: Автореф.канд.дис. M., 1969.

57. Земсков М.В., Дьячкова С.Я. Дизентерийная аллергия в клинике и эксперименте. Ж.микробиологии* 1971, № 7, с. 145.

58. Иванова Л.Г., Булатова Т.И., Матвеев К.И. йммунохими-ческое исследование серологически активных веществ, выделенных из Cl.botulinum типов А и В. Ж. микробиологии* 1968, №1, с. 10-18.

59. Изучение сенсибилизирующих свойств очищенных концентрированных анатоксинов Cl. perfringens / Калиниченко Н.Ф., Старобинец 3.Г.,Подгорная Л.Г. »Бирюкова C.B.- Ж.микробиологии,, 1971, № 10, с . II3-II6.

60. Изучение дифференциально-диагностических возможностей дизентерина / Фрадкин В.А., Лодинова Л.М., Сахарова О.Г. и др., Сб.научн.трудов ГКИ им.Л.А.Тарасевича. M., 1968, с.328-332.

61. Изучение физико-химических свойств и аллергенной активности пептидов разных видов бактерий / Рунова В.Ф.,Гаври -ленкова В.Ю., Полякова Т.М., Цветкова Н.В. Ж. микробиологии,,1973, № I, с. 98-102.

62. Изучение фракций холерного вибриона. Сообщение I. Получение щелочных экстрактов холерного вибриона и изучение их биологических свойств / Рубцов И.В.»Горшкова В.И.»Ярослав-цева A.A. и др. Ж. микробиологии,, 1977, № 8, с. 67-71.

63. Иммуноаллергическая диагностика сибирской язвы человека с помощью антраксина / Шляхов Э.Н.,Шварц С.А., Груз Е.В., Катханова Т.М. Ж. микробиологии* 1970, № 6, с. 79-83.

64. Иммунизация людей против сибирской язвы безыгольным методом / Бургасов П.Н., Черкасский Б.Л., Адилов Д.А.ц др. -Ж.микробиологии* 1973, № 8, с. 23-26.

65. Иммунная альтерация лейкоцитов / Воробьев А.А.,Афа -насьева С.С., Патрикеев Г.Т. и др. Ж.микробиологии,, 1978,12, с. 21-28.

66. Использование реакции лейкоцитолиза в лабораторной диагностике лекарственной аллергии / Терехова Н.Я., Болотина Ю.Л., Гузенко A.B. и др. Лабораторное дело, 1977, № 5,с.311.

67. Использование теста дегрануляции тучных клеток для оценки качества растительных аллергенов / Райкис Б.Н. ^Доренко В.И., Курагина Р.В. и др. В кн.: Микробиология, эпидемиология и профилактика инфекционных заболеваний.Ставрополь,1971, ч. П, с. 124-128.

68. Ишимова JI.M., Зеличенко Л.И.Аллергические реакции форменных элементов крови и их значение для диагностики. В кн.: Аллергические заболевания у детей. М.: Медицина, 1971, с. 144-160.

69. К вопросу об этиологии и специфической диагностике инфекционно-аллергической бронхиальной астмы / А'до А.Д. ,Адри-анова Н.В., Довжик В.П., Федосеева В.Н. Советская медицина, 1968, № 9, с. 12.

70. К характеристике активности и уточнению спектра специфичности дизентерина / Бодажкова К.И., Кудякова Л.И., Коюко-ва Н.М., Шапиро Н.И. Ж.микробиологии., 1972, № 10, с.100 -105.

71. Каверзнева Е.Д., Максимова Г.Н. Разделение туберкуло-протеина на фракции на диэтиламиноэтил-целлюлозе. Биохимия, 1964, т. 29, вып. 3, с. 445-451.

72. Калиниченко Н.Ф., Подгорная Л.Г. Характеристика биологической активности аллергена Cl. perfringens типа А.-В кн.: Вакцины и сыворотки: Республиканский межведомственный сборник. Киев: Здоровья, 1973, вып. 7, с. 87-90.

73. Калитина Т.А. К изучению кожной аллергической реакции как показателя гощунитета при туляремии. Ж. микробиологии., 1956, № 6, с. 61-67.

74. Каминский Л.С. Статистическая обработка лабораторных и клинических данных. Л.: Медицина, 1964, 252 с.

75. Канчурин А.Х. Характеристика аллергических реакций организма на введение вакцинных препаратов. В кн.: Тезисы конф. "Критерии оценки иммун.эффективности и безопасности бактерийных вакцин": МосНИИВС (26-28 апреля 1976 г.). М., 1976, с. 38-39.

76. Канчурин А.Х., Петрова Н.С., Гликман М.В. Разработка и изучение аллергенов из муки и круп. Ж. микробиологии., 1982, № 12, с. 99-102.

77. Карапата А.П. Специфическая альтерация лейкоцитов in vitro . Лабораторное дело. 1971, № 5, с. 259-263.

78. Карпов С.П., Селезнева A.A., Галахарь Н.Л. Аллергия замедленного типа при клещевом энцефалите в эксперименте. -В кн.: Вопросы эпидемиологии, микробиологии и иммунологии: Труды ТомНИИВС и ТМИ. Томск, 1967, т. 19, с. 267-271.

79. Кириленко O.A. 0 сенсибилизирующих свойствах скарлатинозного стрептококкового аллергена и токсина. Ж.микробиологии., 1955, № 12, с. 44-50.

80. Ковалев Л.В. Способ изготовления бруцеллезного ал -лергена, Авт.свид. № 194264 . 1966.

81. Ковтунович Л.Г., Шабловская Е.А. Сравнительное изучение сенсибилизирующих свойств очищенных и сорбированных, а также нативных столбнячных анатоксинов. Ж. микробиологии., 1962, № П, с. 14-19.

82. Кожная аллергическая проба при дизентерии и ее да -агностическое значение / Коровицкий Л.К.,Цуверкалов Д.А.,3а-рецкая И.В. и др. Ж. микробиологии., 1954, № 12, с.76-81.

83. Кожная аллергическая реакция как показатель иммунитета против чумы. Сообщение У. Природа и механизм аллергии при чуме / Коробкова Е.И., Павлова Л.П., Самойлова Л.В. и др.- Ж. микробиологии., 1968, № 8, с. 125-130.

84. Кожная чувствительность морских свинок к различным фракциям пестина ПП при иммунитете к чуме /Бахрах Е.Э.Дара-ненко Т.М., Белобородов P.A. и др. В кн.: Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1973, вып. 1(29), с. 77-81.

85. Колесникова А.Ф. Значение исследования показателя повреждения нейтрофилов и активности фагоцитоза у больных острой дизентерией в прогнозировании ее затяжных форм. Ж. микробиологии., 1976, № 6, с. 136.

86. Коробкова Е.И. Кожная аллергическая реакция как показатель иммунитета при чуме. Ж. микробиологии., 1955, № 4, с. 40-47.

87. ПО. Коробкова Е.И., Павлова Л.П., Бахрах Е.Э. Внутрикож-ная аллергическая реакция как показатель иммунитета против чумы. Ж. микробиологии., 1961, № 9, с. 37-42.

88. Кравченко А.Т. О взаимодействиях состояния иммунитета и аллергии. Ж. микробиологии., 1975, № 4, с.11-17.

89. Кравченко А.Т., Фрадкин В.А. Общие вопросы аллергологии и оценка качества аллергенов. В кн.: Матер.симпозиума по вопросам изготовления, контроля, стандартизации аллергенов. М., 1965, с. 3-6.

90. Кравченко А.Т., Фирсанов В.И. Инфекционная аллергия. Сообщение ХШ. Роль гиперчувствительности аамедленного типа в развитии инфекционной аллергии к бактериальным экзотоксинам.-Ж. микробиологии., 1971, № 2, с. 98-103.

91. Кузнецов Ю.А., Усманова Ф.И. Получение бруцеллезных аллергенов с помощью ультразвука. Ауыл шаруашылык тылымынын Хабартысы. Вестн.С-Х науки, 1971, № б, с. 63-68.

92. Курманова К.Б. Реакция повреждения нейтрофилов у больных бруцеллезом. В кн.: Вопросы инфекционной патологии, Алма-Ата, 1974, с. 188-190.

93. Лабораторные методы исследования в инфекционной иммунологии / Под ред. проф. О.Е.Вязова. М.:Медицина, - 356 с.

94. Линникова М.А. Очищенный протеин дериват. - Про -блемы туберкулеза, 1939, № 12, с. 8-12.

95. Лодинова Л.М. Биологические свойства и результативность диагностических тестов с аллергеном дизентерином. В кн.: Актуальные вопросы иммунологии и аллергологии: Тез.докл. 1У научной конф., Ставрополь, 1978, с. 85-87.- 173

96. Лямперт И.М., Смирнова М.Н., Грызлова О.П. К вопросу о количественном определении стрептококкового аллергена в реакции связывания комплемента с сыворотками животных, иммунизированных этой фракцией. Ж.микробиологии., i960, № 4,с. 20-27.

97. Лямперт И.М., Смирнова М.Н., Семина H.A. Гиперчувствительность замедленного типа у экспериментальных животных, сенсибилизированных стрептококковым аллергеном. Ж.микробиологии. , 1965, № 12, с. I0I-I07.

98. Майорова Г.Ф. Сенсибилизирующие свойства различных по токсигенности штаммов стафилококка в реакции немедленной гиперчувствительности. Ж. микробиологии, 1976, № 9, с.108 -112.

99. Максимова Г.А., Рунова В.Ф. Влияние формальдегида на активность сибиреязвенного аллергена. Ж.микробиологии., 1970, № 10, с. 59-62.

100. Максимова Г.А., Рунова В.Ф. N ацетилирование сибиреязвенного аллергена. - Ж. микробиологии., 1971,№ 8, с.144.

101. Малородов И.П. Применение аллергической пробы с ди-зентерином с целью выявления больных дизентерией. Ж.микробиологии., 1970, № 10, с. 148.

102. Матвеев К.И.Эпидемиология и профилактика столбняка.-М.: Медгиз, i960, 338 с.

103. Материалы по изучению аллергенного препарата дизентерина / Бодажкова К.Н., Васильева Т.Г.,Гусарская И.Л. и др.-В кн.: йммунодиагностические препараты: Труды ЛенНИИВС. Л., 1966, т. 5, вып. 4, с. 131-137.

104. Мац А.Н. Изучение лейкергии при туберкулезе легких: Автореф.дис.канд.мед.наук. М., 1965.

105. Маянский А.Н. Аллергенные фракции бактерий семействакишечных. Ж. микробиологии., 1973, № 5, с. 14-18.

106. Маянский А.Н. Иммунологическая полифункциональность белков и ее значение для анализа аллергеноактивного субстрата бактерий. Ж. микробиологии., 1975, № 5, с. 127-132.

107. Маянский А.Н. Внутриклеточные белки аллергеноактивного комплекса энтеробактерий: Автореф.дис.докт. мед. наук. -Казань, 1976., 25 с.

108. Медуницын Н.В. Механизмы развития аллергии замед -ленного типа. В кн.: Вопросы современной аллергологии. Научный обзор. M., 1969, с. 3-48.

109. Медуницын Н.В. Замедленная аллергия к растворимым белкам: Автореф. дис.докт.мед.наук.- M., 1970.

110. Медуницын Н.В., Гервазиева В.Б. Аллергическая альтерация лейкоцитов у больных поллинозами. Бюлл.эксп.биологии и медицины, 1967, № 6, с. 77-80.

111. Медуницын Н.В., Нецрина Г.С., Голшмид В.К. Аллер -гия замедленного типа к фракциям столбнячного анатоксина. -В кн.: Вакцины и сыворотки. Материалы по производству: Труды МосНИИ ВС. M., 1973, вып. 16, с. I66-I7I.

112. Менявцева Т.А., Ставицкая Н.Х., Лепехин A.B. Применение клеточных тестов для выявления аллергии при клещевом энцефалите. В кн.: Научные основы произв.вирусных и бактерийных препаратов: Труды ТомНИИВС и ТМИ. Томск, 1977, т. 27,с. 273-282.

113. Минервин С.М., Жак С.П., Червякова К.И. Наблюдения над механизмом сенсибилизирующего действия ботулинового токсина. Ж. микробиологии., 1955, № 5, с. 48-53.

114. Митинская Л.А. Противотуберкулезная вакцинация вну-трикожным методом детей старшего возраста и подростков и вопросы ревакцинации: Автореф.дис.докт.мед.наук.-М. ,1966.

115. Михайлова Л.М. Динамика внутрикожной реакции с аллергеном Цуверкалова при острой дизентерии. Ж.микробиоло -гии., 1964, № 4, с. 139-140.

116. Моргунов И.Н. Токсинная анафилаксия. Ж. микробиологии., 1957, № 10, с. 59-66.

117. Моргунов И.Н. Бактерийные токсины и анатоксины. -Киев: Госмедиздат УССР, 1959. 281 с.

118. Неприна Г.С. Аллергия немедленного типа к различным типам препаратов столбнячного анатоксина.- В кн.: Вакцины и сыворотки. Материалы по производству: Труды МосНИИВС. М.,1971, вып. 14, с. I06-112.

119. Неприна Г.С., Медуницын Н.В.,Голшмид В.К. Сенсиби -лизирующие свойства фракций столбнячного анатоксина, выделенных ионообменной хроматографией. Бюлл.экспер.биологии и медицины, 1972, № 8, с. 70-73.

120. Николаева Н.В., Карибская A.B.,Човжик А.Г. Определение активности первичного туберкулеза у детей. Проблемы туберкулеза, 1972, № 2, с. 30.

121. Ойвин И.А. Статистическая обработка результатов экспериментальных исследований. Патологическая физиология и экспериментальная терапия, I960, № 4, с. 76.

122. Олсуфьев Н.Г. Препараты, применяемые для профилак -тики и диагностики туляремии. В кн.: Справочник по применению бактерийных и вирусных препаратов. М.: Медицина, 1975,с. I89-I9I.

123. Омарова A.A. Об антигенной структуре ботулиновых токсинов и анатоксинов типов А, В, С и Е. В кн.: Вакцины и сыворотки. Материалы по производству. М., 1968, вып. 9, с.17-21.

124. Оценка биологической активности аллергенов различ -ными иммунологическими методами in vivo и in vitro /Петрунов Б.H., Константинова Д.И., Станоева Е.Д. и др. Ж. микробиологии., 1983, №3, с. 71-75.

125. Павлова И.Б., Булатова Т.И. Субмикроскопическое изучение Cl.botulinum типа в в процессе токсиногенеза. Ж. микробиологии, 1970, № 7, с. I09-112.

126. Парнас Ю., Ладуга К. Новые аллергены бруцеллин РД и тулярин М. Ж. микробиологии, 1957, № 2, с. 92.

127. Пастрик Н.С. Роль аллергического компонента в диагностике и клинике дизентерии у детей: Автореф.дис.канд.мед.наук. Киев, 1977. - 25 с.

128. Перепечкина Н.П.,Протасова 0.В. Сенсибилизирующая активность компонентов дифтерийного анатоксина. Ж. микро -биологии., 1972, № 4, с.3-7.

129. Перетрухина А.Т., Менявцева Т.А. Дальнейшие наблюдения по получению культурального оспенного аллергена для реакции in vitro В кн.: Научные основы производства вирусных и бактерийных препаратов: Труды ТомНИИВС и ТМИ.Томск, 1977, т. 27, с. 170-177.

130. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика. М., 1976, - 338 с, ИЛ.

131. Петров Г.А. Аллергия при листериозе и разработка метода изготовления диагностического препарата: Автореф.дис. канд.мед.наук. Томск, 1965. - 16 с.

132. Пименов В.Н. Значение внутрикожной пробы с аллергеном Цуверкалова для ранней диагностики дизентерии у детей. -Ж. микробиологии, 1973, № 8, с. 133-134.

133. Показатель повреждения нейтрофилов (тест ППН) и реакция лейкоцитолиза в диагностике склеромы / Израитель H.A., Чащинская Т.И., Дальнова Т.С. и др. Ж. микробиологии.,1977, № 7, с. 120-123.

134. Показатель повреждения нейтрофилов крови у людей и животных, иммунизированных живой сибиреязвенной вакциной/Шен-цев И.В., Шумилов Г.П.Дарумов B.C., Дербин М.И. Ж.микро -биологии., 1978, № 6, с. 81-84.

135. Полисахаридсодержащая фракция чумного микроба как аллерген для выяснения активного иммунитета у морских свинок/ Бахрах Е.Э. ,Коробкова Е.И., Павлова Л.П., Егорова В.Д.- В кн.: Труды института "Микроб". Саратов, I960, вып.4, с. 63-68.

136. Полковникова Т.Ф., Бакулин М.П. Использование некоторых клеточных тестов для оценки специфической активности аллергенов. В кн.: Поствакцинальные аллергические реакции и аллергены: Сборник трудов МосНИИВС. М., 1974, с. I2I-I24.

137. Получение и иммунобиологическая характеристика очищенного дизентерина / Бодажкова К.Н., Дудкина М.И., Шапиро. Н.И., Денисова Н.П. В кн.: Вопросы прикладной иммунологии. Труды ЛенНИИВС, Л., 1967. т. 6, с. 78-79.

138. Польнер А.А. О некоторых видах антител к аллергенам растительной пыльцы: Автореф.дис.канд.мед.наук. М.,1971.

139. Полякова Т.М.,Рунова В.Ф. Фракционирование стафилококкового аллергена на сефадексе. Ж. микробиологии., 1975, № 3, с. 97-100.

140. Применение столбнячного аллергена для определения чувствительности людей к столбнячному анатоксину/ Быченко Б.Д., Строганова М.К., Матвеев К.И. и др.- Ж.микробиологии, 1971Д6, с. 83-87.

141. Протасеня С.Г. Выявление иммунных к столбняку людей с помощью столбнячного аллергена. В кн.: Иммунодиагностика и специфическая профилактика инфекционных болезней.Кишинев:1. Штиинца, 1974, с. 60-62.

142. Протченко П.З. Хроматография стрептококкового ал -лергена на ДЭАЭ-сефадексе. Ж.микробиологии., 1967, № 8,с.69-74.

143. Прядкина М.Д.,Гавриленкова В.Ю. »Лобанова А.В.Био-логические и химические свойства песталлергена ГКИ. Сообщение I. Ж. микробиологии., 1963, № 5, с. 72-77.

144. Прядкина М.Д., Гавриленкова В.Ю. »Чернова Э.А. Изучение пест-аллергена Государственного контрольного института им.Тарасевича на животных и добровольцах. Сообщение П. Ж. микробиологии., 1965, № 4, с. 27-33.

145. Пьянова P.E. Усовершенствование реакции повреждения нейтрофилов и ее апробация при токсоплазмозе. В кн.: Инфекционная и неинфекционная иммунология. Владивосток, 1973, с.65 - 67.

146. Прядкина М.Д., Фрадкин В. А. »Кузнецова Л.С.,Раецкая Э.К. Реакция нейтрофилов крови (тест ППН) на коклюшный аллерген у детей, больных коклюшем и привитых АКДС-вакциной. Ж. микробиологии, 1975, № 3, с. 78-80.

147. Реакция на стрептококковый аллерген у больных и здоровых людей / Фрадкин В.А., Соколова Г.С.»Прядкина М.Д. и др.-Ж. микробиологии.» 1973» № 12,с.86-91.

148. Резепов Ф.Ф.»Шаин Е.С.»Чеботарева C.B. Определение безвредности и специфической активности иммунных сывороток и глобулинов. В кн.: Методическое руководство по лабораторной оценке качества бактерийных и вирусных препаратов. M., 1972» с. 216-234.

149. Результаты многолетнего изучения реактогенности и эффективности ревакцинации против столбняка аэрозольным методом/ Александров Н.И.,Гефен Н.Е., Егорова Н.Б. и др. В кн.:

150. Материалы Мед.секции и секции "Аэрозольные баллоны": П Всесо-юзн.конф. по аэрозолям, Одесса. М., 1972, с. 125 126.

151. Рунова В.Ф.»Руднева O.A. О влиянии химического воздействия на биологическую активность сибиреязвенного и туля -ремийного аллергенов. Ж.микробиологии.,1968, № 12, с.90-93.

152. Рунова В.Ф. Физико-химические и биологические свойства бактериальных аллергенов: Автореф.дисс.докт.биол.наук. М., 1969.

153. Рунова В.Ф.,Гавриленкова В.Ю. Получение бактериальных аллергенов методом щелочного экстрагирования и изучение их физико-химических свойств. Ж.микробиологии., 1970,№ 10, с.72-77.

154. Рунова В.Ф., Уланова А.А.Методы очистки сибиреязвенного аллергена. В. кн.: Вакцины и сыворотки. Материалы по производству: Труды МосНИИВС. М., 1971, вып.10, с.45-50.

155. Рунова В.Ф.»Полякова Т.М. Характеристика биологической активности стафилококковых аллергенов, полученных из различных штаммов, на лабораторных животных. Ж.микробиоло -гии., 1978, № б, с. 92-95.

156. Рунова В.Ф.»Полякова Т.М., Лодинова Л.М. Сравнительное изучение аллергенных фракций, полученных из различных штаммов стафилококков. Ж.микробиологии,, 1978, № 8, с.96-100.

157. Русакова Е.В.Изучение сенсибилизирующих свойств стафилококкового д -токсина. Ж.микробиологии.,1970, № 4, с.77 - 81.

158. Сахаров П.П. ,Гудкова Е.И. Методы исследований при бактериальной аллергии. В кн.: Современная практическая ал -лергология. М.Шедгиз, 1963, с. 149-158.

159. Сафронова A.B. Иммунобиологическое изучение аллергенов из цитрусовых: Автореф.дис.канд.мед.наук. -М., 1983.- 24 с.

160. Сергеева Т.И., Соболева К.П.»Терещенко В.Ф. Применение столбнячного аллергена тетанина для определения иммунитета к столбняку. В кн.: Иммунодиагностика и специфическая профилактика инфекционных болезней. Кишинев: Штиинца, 1974, с. 58-60.

161. Скавинский D.B. К диагностике бруцеллеза методом определения повреждения нейтрофилов (ППН).- В кн.: Проблемы зоонозов: Материалы конференции. Пятигорск, 1964,с. 67.

162. Скавинский Ю.В. Материалы по изучению токсоплазмоза в Красноярском крае: Автореф.дис.докт.мед.наук.-Красноярск, 1970.

163. Скарлатинозно-стрептококковый токсин и единица из -мерения его/ Вержиковский H.A. Константинова О.М. ,Гороховни -кова А.И., Соловьев Е.Ф. В кн.: Проблемы эпидемиологии и иммунологии: Труды ВИЭМ. М., 1936, с. 211-230.

164. Сливко В.В. Листереллез (листериоз) сельскохозяйственных животных: Автореф.докт.дис. Вологда, 1959.

165. Смирнова М.Н. Использование метода пассивной гемаг-глютинации для определения антител к стрептококковому аллер -гену в сыворотках больных ревматизмом. Ж.микробиологии., 1964, № 9, с. 50-55.

166. Смирнова М.Н., Черкасов В.Л., Семина H.A. Антителак стрептококковому аллергену и внутрикожные пробы у больных рожей. Ж.микробиологии., 1971, № 10, с. 75-80.

167. Сопоставление иммунологических свойств туберкули -нов из атипичных микобактерий / Лазовская А.Л., Яблокова Т.Б., Белоусова В.П. и др.- Ж.микробиологии., 1973, № 5, с.94-97.

168. Специфическая трансформация in vitro лимфоцитов периферической крови людей, больных туберкулезом / Шмелев H.A., Авербах М.М., Гергерт В.Я., Литвинов В.И. Проблемы туберкулеза, 1973, № 5,

169. Спирин A.C. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот. Биохимия, 1958, 23, 5, с. 656-659.

170. Сравнительное изучение кожно-аллергических реакций и реакции пассивной гемагглютинации у больных дизентерией /Прядкина М.Д., Лодинова Л.М., Фрадкин В.А. и др. Ж.микробиологии, 1971, № 4, с. I40-141.

171. Сравнительное изучение физико-химических свойств и биологической активности аллергенов, полученных из различных штаммов стафилококков/ Полякова Т.М., Рунова В.Ф.,Прядкина М.Д.,Фрадкин В.А. Ж.микробиологии., 1974, №8, с. 134-135.

172. Ставицкая Н.Х. Сенсибилизирующие свойства вируса клещевого энцефалита. В кн.: Разработка препаратов против вирусных и анаэробных инфекций¡Материалы межинститут.конф., посвящ. 70-летию ТомНИИВСа. Томск, 1976, с. 64-66.

173. Старобинец З.Г. Значение некоторых функциональных групп аллергена Cl.perfringens типа д в проявлении биологической активности. В кн.: Вакцины и сыворотки. Республиканский межвед.сборник. Киев: Здоровья, 1973, вып.7.с.84-86.

174. Стенко М.И.,Фрадкин В.А.Изучение специфической чувствительности нейтрофилов крови in vitro для оценки аллергии. Лабораторное дело, 1963, № 9, с. 8-1I.

175. Тараненко Т.М., Филиппов А.Ф. Характеристика пести-на ПП изолированного из вакцинных штаммов чумного микроба ЕВи K-I. В кн.: Проблемы особо опасных инфекций. Саратов,1974, № 2 (36); с. 137-139.

176. Тетдоева М.Т. Изучение проявлений гиперчувствитель -ности анафилактического типа к белку сыворотки крови у морских •свинок при помощи теста повреждения нейтрофилов крови in vitro Ж.микробиологии, 1978, № 2, с. 80-82.

177. Тетдоева М.Т., Петрунов Б.Н.,Фрадкин В.А. Изучение сенсибилизации к домашней пыли путем определения показателя повреждения нейтрофилов. Лабораторное дело, 1982, № 7,с. 427-428.

178. Титова С.М. Лейкоциты, как объект для изучения специфичности пыльцевых аллергенов. В кн.: Материалы межинститутской научн.конф. памяти Л.А.Тарасевича. М., 1967, с. 277278.

179. Трухманов Б.Г., Триполитова A.A.,Василенко А.И.Сен-сибилизирующие свойства очищенных и концентрированных дифте -рийных анатоксинов. В кн.: Труды ТомНИИВС.Томск, 1955, т.6, с. 323-335.

180. Угловой Г.П. 0 биологической активности накожного тулярина различной давности изготовления. Ж.микробиологии., 1963, № 4, с. I28-I3I.

181. Умриха В.M.Диагностическая ценность аллергической пробы при хронической бактериальной дизентерии. Ж.микробиологии., 1970, № II, с. 143-144.

182. Файбич М.М.»Джарылгасов С.А. Определение невоспри -имчивости к чуме при помощи полисахаридного аллергена. Ж. микробиологии., 1962, № 2, с.48-52.

183. Фрадкин В.А. Реакция нейтрофилов крови как показа -тель инфекционной и лекарственной аллергии. Советская медицина, 1962, № 9, с. 41-47.

184. Фрадкин В.А. Реакция нейтрофилов крови in vitroкак метод изучения аллергии: Автореф.дис.докт.мед.наук.1. M., 1967.

185. Фрадкин В.А. Возможности изучения инфекционной ал -лергии реакцией нейтрофилов крови in vitro . В кн.: Сб. научн.трудов ГКИ им.Л.А.Тарасевича. M., 1968, с.320-324.

186. Фрадкин B.A.K изучению механизма реакции нейтрофилов крови на антиген. Ж.микробиологии., 1970, с. I19-124.

187. Фрадкин В.А.Аллергодиагностика in vitro.- M. : Меди -цина, 1975. 143 с.

188. Фрадкин В.А. Аллергены.- М.: Медицина, 1978.- 256с.

189. Фролова М.А.»Протасова О.В. Аллергенные свойства нативных, высокоочищенных и сорбированных дифтерийных анатоксинов. В кн.:Вакцины и сыворотки. Материалы по производству. М.» 1965, вып.З, с. 14-23.

190. Цуверкалов Д.А. Опыты по выделению и исследованию аллергенного начала дизентерийных бактерий. Ж.микробиологии., 1961, № I, с.85-89.

191. Черниговец Л.Ф., Тесля Л.М. Повышенная чувствительность замедленного типа к туберкулину ПЦЦ-Л-2ТЕ, как критерий изучения эффективности иммунизации БЩ.В кн.: Сб.трудов Ростовского мед.ин-та. Ростов, 1976, вып.2, с.21-22.

192. Черткова Ф.А.»Ушакова A.A. »Колчурина A.A.Белые мыши как экспериментальная модель для определения анафилактогенных свойств лечебных сывороток. Ж.микробиологии., 1959, № 12, с.33-36.

193. Шабадаш А.Л. Рациональная методика гистохимического обнаружения гликогена и ее теоретические обоснования. Известия Академии наук СССР. Серия биологии. 1947, № 6,с.745-758.

194. Шапиро Н.И.,Денисова Н.П. 0 наличии общих пептидных фрагментов в белках аллергенах энтеробактерий. Ж. микробиологии. , 1970, № 3, с. 77-80.

195. Шварц С.А., Шляхов Э.Н. Способ получения столбняч -ного аллергена. Авт.свид.№ 232469, 1970.

196. Шляхов Э.Н. Способ получения и применения сибиреязвенного аллергена. Авт.свид. № 113171. 1958.

197. Шляхов Э.Н. Сибиреязвенная аллергия. Кишинев, 1968. - 214 с.

198. Шляхов Э.Н.,Шварц С.А.Способ производства химического антраксина (сибиреязвенного аллергена). Авт.свид.№ 219753.1968.

199. Шляхов Э.Н.»Кебеджиев Г.Н. Результата от използува-нето на антраксиновата проба при епидемиологичните проувания на антрокса в СССР и НРБ. Эпидемиол.Микробная (София),1978,15, 2, с. 140-144.

200. Шмутер М.Ф., Лопатухина Л.Г. »Волосивец И.Ф. Харак -тер аллергической реакции на пестин у вакцинированных против чумы. В кн.: Труды Среднеазиатского НИ противочумного института. 1958, т.4, с. 107-109.

201. Шнырева Е.А. 0 возможности применения бруцеллизата для внутрикожной диагностики бруцеллеза у людей. Изв. АН Казахской ССР. Серия "Физиология и медицины". 1954, вып.З, с. 99-102.

202. Экспериментальное изучение сенсибилизирующих свойств дизентерина /Кравченко А.Т., Фрадкин В.А.,Лодинова Л.М.,Белоц-кий С.М. Ж.микробиологии., 1968, № 7, с. 32-35.

203. Экспериментальное изучение сибиреязвенных вакцино -препаратов /Шляхов Э.Н., Груз Е.В., Бурденко Т.А.»Присакарь В.И. В сб.: Иммунодиагностика и специфическая профилактика инфекционных болезней. Кишинев: Штиинца, 1974, с.64-79.

204. Элогивили Н.И., Захарьин Ю.А. Аллергизирующие свойства сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины при мно -гократной иммунизации в эксперименте. В кн.: Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1977, вып. 6 (58), с. 65-69.

205. A new leptospiral vaooine for use in man. Ц Clinical and serologic evaluation of a field trial with volunteer/Tor-ten M., Shenberg, Gerichter C.B. et all. « J. infect Dis., 1973, 128, N 5, P. 647-651.

206. Aas K4 Advances in allergen chemistry: definition of some terms and conditions. Allergy and Clin. Damunol., Amsterdam - Oxford, 1977, P. 149-150.

207. Ahdo К. Studies of toxins of hemolytic Streptococci.-J. Immunol., 1930, N 18, p. 257«

208. Augustin R. In vitro tests for reagins involving leucocytes estimation of reagins by double layer leuoocyte agglutination. V. Congr. mt. Allergol., Madrid, 1964, P» 159.

209. Balogh £., Meszaros Cs., Halmy K. Die Anwendung des Lymphocytentransformationstestes bei der Untersuchung der my« kotischen Sensibilisation. « Mykosen, 1971, 14, N 5, S. 208.

210. Beck I. Tuberkulose-Test und Impfung. Gelben H«, 1972, 12, N I, S. 14-16.

211. Bhongbhibhat N«, Sanforol, Chen T. Characterization of Brucella skin-test antigens. J. Infect. Dis., 1970, 122,1. H 1-2, p. 70-82. .

212. Cellular activities in hypersensitive reactions. 3. Specifically reactive cells in delayed hypersensitivity: tu« berculin hypersensitivity/Martins A.B., Moore W.D., Dickinson I.B. et al. J. Immunol., 1964, 93, P* 953-959*

213. Chaparas S.D., Thor D.E., Hedrick S JR. Comparison of lymphocyte transformation, inhibition of macrophage migration and skin tests using dialyzable and nondialyzable tuberculin fraotions from mycobacterium bovis (BCG). « Fed. Proo.,1971, 12, p. 352.

214. Diphtheria-tetanus-pertussis immunization by intradermal jet injection. Stanfield I.P., Bracken P.M., Waddell K.M., Gall D. Brit. Med. J., 1972, N 5807, p. I97~I99.

215. Empfehlungen zur DurchfCthrung und Bewertung des Epikutan-, mtracutan- und prioktests sowie des nasalen und inhalativen. Allergentests/Behrbohm E.P., Bergmann I., Bergmann K.et all. Allergie und njnmunol., 1981, 27, № 2, S. 75-86.

216. Gell P., Coombs R. Clinical aspects of immunology. Oxford, Edinburgh, 1963.267« G. Reactions to tetanus toxoid У White W.G., Barnes G.M. Barker E. et all. J. H^g., 1973, 71, N 2, p. 283-297.

217. Ha^os M. tfrtth- und SpStreakiionen mit Baoterienallerge-nen bei Bronchialasthma^ All. u. Asthma, 1959, b. 5, N 3,1. S. 331-335.

218. Heggie A. Immunization against infeotions diseases, practioe and problems. Med. Clin. N. Amer., 1983, 67, Ii I, p. 17-38.

219. Heilman D.H. in vitro studies on polysaccharides of Mycobacterium tuberculosis and delayed hypersensitivity. -Amer. Rev. Resp. Dis., 1967, 96, 2, p. 198.

220. Heilman D., MoFarland W. Mitogenic aotivity of bacterial fractions in lymphocyte cultures. I. Purified protein derivative and polysaccharides of tuberculin. j. Dmnunol., 1966, 96, 6, p. 938.

221. Hinz С.P., Daniel T.M., Baum G.L. Quantitative aspeots of the stimulation of lymphocytes by tuberculin purified protein derivative. Int. Arch. Aller., 1970, 38, 2, p. 119.

222. Leynadier P., Lyce H., Dry I. Methodologie simplifiée du. test-de degranulation des basophiles hiimains. Rev. franc, allergoln. et immunol. clin., 1981, 21, H 3, P. 173-175.

223. Morris A.M. belayed hypersensitivity response in malignant disease. Lanoet, 1972, ii, 981.

224. Howell P.C. Differentiation of human leucemic leucocytes in tissue oulture. Exp. Cell Res., I960, 19, IT 2, 267.

225. Pearmain G., Lycette R., Pitzgerald P. Tuberculin-induced mitosis in peripheral blood leucocytes. Lancet, 1963, I,637. -------

226. Pelikan Z., pelikan-pilipek M. A diagnostics study ofimmediate hypersensitivity in asthmatic patients: a comparison of.bronchial challenge and serum rast. Ann. Allergy, 1982, 49, N 2, p. II2-II7 •

227. Pettit H., Sullivan H., Hart E. Ш vitro leucooytolysis in presence of pollen and house dust antigen. — J. Allergy,1961, 31,-I, P.-30-36.

228. Protein measurement with the Folin phenol reagent/Loury O.H., Rosenbrough N.I., Parr A.L., Randall H.J. J. Biol. Chem., 1951, 193, I, P. 265-276.

229. Proucavonje alergogenih evoistava BCG vakcine domaoe proizvodnje promenjene u razlicitim uslovima/Kaleta J., Zega-rac D., G-rujic M. et al. pluone bol i tuberk., 1974, 26, Supl. N 2, 159-162.

230. Rausoh H.C., Raffel S. Immunofluorescent localisation on encephalitogenio protein in myelin. J. Immunol., 1964, 92, 452.

231. Rea T., Yoshida T. Serum macrophage migration inhibition activity in patients with leprosy. J. invest. Dermatol.1982, 79, N 5, P. 336-339.

232. Seibert F.B. Effect of sensitization with tuberculin protein upon development and course of experimental tuberculosis. proc. Soo. exp. Biol. (N.Y.),.1933, 30, 1274.

233. Sohwartz.G., Vardinon N. . in vitro prevention, of direct moist cell disruption by.specific antibody. internat. Arch. Allergy a Appl. Immunol., 1956, 30, 67-71.

234. Tassi G., Sacchi G. Enmunoterapia delle manifestazioni allergiche. Boll. 1st. sieroter. milan., 1983, 62, N I,p. 1-36

235. Test de degranulation des basophiles humains interpretation et analyse des facteurs de variabilitee en l'absenced'antigene/Mordelet-Dambrine M., Marrache P., leynadier p. et al. pathol. biol., 1983, 31, N I, 49-51»

236. The tuberculin skin test/Comstock G., Puroolow L., Greenberg A. et al. Amer. Rev, Respirât. Dis., 1971, 104, N 5, P. 769-775.

237. The cellular basis of immunological responses/Roitt J.M. jreaves M.P., Torrigiani H. et al. Lancet, 1969, II, 367.

238. Tsumita Toru, Kywabara Seishi. improvements in or relating to-tuberculin active proteins and peptides. (Mitsui pharmaceuticals, зло). Англ-пат.кл. A 58, (A 61 K37/02, С 07 С 103/52), заяв-TT 1430464, опубл. 4.02.74, N 35276/73, 31.03.76.

239. Tuboly S., Szent-Ivanyi т. Specificity of antigenic fractions of tuberculin. Acta miorobiol. Acad. Sei. bung., 23, N I, P. 23-28.

240. Turk J.L. DElayed hypersensitivity. Amsterdam, 1967.

241. Ulrich M., Convit I. Ш vitro studies of cellular immunity in leprosy. mt. J. Leprosy, 1973, 41, N 4, p. 541.

242. Utilisation du test d'inhibition de la migration des macrophages dans 1*etude des relations entre des antigenes mycobacteriens./Thorel M., Pekarek I., Svejoar J. et al. -Ann. immunol., 1982, 133, N 3, P. 325-332.

243. Vassalli p., McCluskeyR. Inflammation; immunity and Hypersensitivity. M.i Медицина, 1975, 169.

244. Witte S. Morphologische und serologisohe Studien Cfber Tuberkulinwirkungen und Leucocyten in vitro. Beitr. Klin. Tuberk., 1950, -104, S. - 3-4.- .