Регуляция экзоцитоза фактора Виллебранда в эндотелиальных клетках тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат наук Цитрина Александра Андреевна
Цитрина Александра Андреевна
кандидат наук
2020
- Специальность ВАК РФ03.03.04
- Количество страниц 153
Оглавление диссертации кандидат наук Цитрина Александра Андреевна
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность и современное состояние проблемы
Цели и задачи исследования:
Научная новизна исследования
Практическая значимость
Положения, выносимые на защиту
Методы исследования
Степень достоверности и апробация работы
Перечень публикаций
Личный вклад автора
Структура и объем диссертации
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Эндотелий и его функции
1.2 Реакция гемостаза и ее этапы
1.2.1 Вазоконстрикция
1.2.2 Адгезия тромбоцитов в месте повреждения
1.2.3 Формирование тромба
2. Структура и функции фактора Виллебранда
3. Формирование ТВП в эндотелии
3.1 Три режима секреция ФВ из эндотелиальных клеток
3.2 Варианты экзоцитоза ТВП
3.3 Молекулярные механизмы экзоцитоза
3.4 Регуляция секреции ФВ
4. Перекись водорода - потенциальный вторичный мессенджер
4.1 Кох - ферменты, продуцирующие АФК
4.2 Н202-зависимый сигнальный путь
4.3 Регуляция функциональной активности эндотелия с помощью Н2О2
5. Серотонин и его сигнальный каскад в регуляции функции эндотелия
5.1 Классификация 5ИГ рецепторов
5.2 Роль 5-ИГ и его рецепторов в развитии сердечно-сосудистой системы
5.3 Физиологические эффекты 5-НТ
5.4 Активация 5НТ рецепторов в эндотелии сопровождается увеличением продукции активных форм кислорода
6. Факторы роста активируют продукцию АФК эндотелием
6.1 Активность VEGF-сигнального пути и уровень АФК
6.2. TGF-beta сигнальный каскад активирует NADPH-оксидазы
эндотелия
6.3 TNF-alpha активирует NADPH-оксидазы эндотелия
7. Краткий итог
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
8.1 Выделение первичной культуры клеток эндотелия НиУЕС
8.2 Условия стимуляции ЭК различными агонистами
8.3 Измерение концентрации растворимого ФВ
8.4 Фиксация и иммуноцитохимическое окрашивание
8.5 Флуоресцентная микроскопия
8.6 Анализ изображений с помощью программного инструмента CeПProШer
8.7 Регистрация внутриклеточной концентрации Н2О2 с помощью флуоресцентного зонда H2DCF-DA
8.8 Статистическая обработка полученных данных
РЕЗУЛЬТАТЫ
9.1 Разработка методики регистрации количества ФВ-положительных структур на поверхности ЭК
9.2 Оценка влияния гистамина на фенотип ЭК
9.3 Оценка влияния Н^2 на экзоцитоз ФВ
9.4 Ингибирование NADPH-оксидаз подавляет гистамин-индуцированную активацию экзоцитоза ФВ
9.5 Агонисты 5НТШ и 5КГЖ рецепторов
9.6 Сравнительный анализ действия TNF-alpha, TGF-beta и VEGF на экзоцитоз фактора Виллебранда
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
10.1 Сравнение разработанного метода анализа с методами, описанными в литературе
10.2 Оценка иммуногистохимического окрашивания фактора Виллебранда в стимулированных клетках НиУЕС
10.3 Перекись водорода -важный активатор и регулятор экзоцитоза фактора Виллебранда
10.4 VAS2870 ингибирует гистамин-индуцированный экзоцитоз фактора Виллебранда
10.5 5-НТ рецепторы активируют экзоцитоз воспалительного типа
10.6 Факторы роста как агонисты экзоцитоза фактора Виллебранда
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ А
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Клеточная биология, цитология, гистология», 03.03.04 шифр ВАК
Частота встречаемости и клиническое значение генетических полиморфизмов у пациентов с болезнью Виллебранда2020 год, кандидат наук Чернова Екатерина Владимировна
Роль тучных клеток и факторов воспаления в регуляции трансэндотелиального транспорта липопротеинов низкой плотности in vitro2023 год, кандидат наук Мальцева Ольга Николаевна
Молекулярные механизмы демаскировки вазоконстрикторного действия 5-HT2B рецепторов2018 год, кандидат наук Миронова, Галина Юрьевна
Воздействие митохондриально-направленного антиоксиданта SKQ1 на острое воспаление и активацию тучных клеток2018 год, кандидат наук Челомбитько, Мария Александровна
Роль пероксида водорода в регуляции функциональной активности эндотелиальных клеток2020 год, кандидат наук Надеев Александр Дмитриевич
Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Регуляция экзоцитоза фактора Виллебранда в эндотелиальных клетках»
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность и современное состояние проблемы
Эндотелиальные клетки (ЭК), выстилающие просвет кровеносных и лимфатических сосудов, играют ключевую роль в таких важных процессах как гемостаз, контроль тонуса кровеносных сосудов, воспаление, регенерация и ангиогенез. ЭК продуцируют N0 -ключевой вазодилататор, а также факторы, необходимые для инициации реакции гемостаза (фактор Виллебранда) и воспаления (P-селектин) [1]. В отличие от N0, простой молекулы синтез которой осуществляется на мембране ЭК, фактор Виллебранда и P-селектин представляют собой сложные белковые молекулы, синтезирующиеся и накапливающиеся внутриклеточно в специализированных везикулах - тельцах Вейбеля-Паладе (ТВП) [2]. ТВП - это уникальные секреторные органеллы сигарообразной формы, характерные только для эндотелиальных клеток и играющие центральную роль в инициации реакции гемостаза и воспаления. Экзоцитоз содержимого ТВП строго контролируется и регулируется клетками в зависимости от условий внешней среды. Так, при активации реакции гемостаза происходит выброс преимущественно «длинных» (> 2 мкм) ТВП, содержащих до 80% всего внутриклеточного пула ФВ, который под действием гидростатических сил, формирует специфические структуры - «струны» на поверхности ЭК. «Струны» инициируют адгезию и активацию тромбоцитов и запускают тромбогенез. При стимуляции воспалительными медиаторами, такими как липополисахариды бактерий, секретируются преимущественно «короткие» (< 2 мкм) ТВП, чье содержимое усиливает адгезию лимфоцитов к эндотелию и активирует иммунные клетки [3]. Описан механизм частичного экзоцитоза ТВП, при котором ФВ остается внутри везикулы, а низкомолекулярные вещества выходят наружу [4]. Можно сказать, что молекулярные механизмы, регулирующие генерацию и
экзоцитоз ТВП, определяют пластичность эндотелия и опосредуют переключение между воспалительным и гемостатическим режимом функционирования ЭК [3, 5]. Изучение этих путей регуляции представляет собой фундаментальную задачу.
Концепция о сигнальной роли активных форм кислорода широко обсуждается в литературе. Эндогенные АФК задействованы в регуляции всех аспектов биологии клетки наряду с кальцием и cAMP. Источниками АФК в ЭК могут быть ферменты дыхательной цепи митохондрий, ксантиноксидаза, оксигеназы арахидоновой кислоты и разобщенная NO-синтаза, которые производят O2- [6, 7]. В норме, основными продуцентами АФК в клетках являются NADPH-оксидазы (Nox), уникальные ферменты, основной функцией которых является перенос электрона через липидный бислой с молекулы NAD(P)H на молекулу О2. Nox оксидазы - основные регуляторы окислительно-восстановительного сигнального пути в ЭК и, в зависимости от изоформы и набора регуляторных субъединиц, продуцируют О2- или Н2О2 [8]. Супероксиданион может взаимодействовать с NO либо разлагается с образованием H2O2 под действием супероксиддисмутазы [7]. По данным Augsburger с соавторами, Н2О2 является преобладающей внутриклеточной формой АФК [9]. Имеющиеся в литературе данные позволяют сказать, что H2O2 является вторичным мессенджером, который задействован во множестве сигнальных путей [7] и регулирует все аспекты биологии ЭК. Усиленная продукция АФК вносит весомый вклад в развитие патологического процесса и оказывает негативное влияние на эндотелий, снижая продукцию NO и увеличивая секрецию фактора Виллебранда и P-селектина на клеточную поверхность [10]. В то же время, роль низких, физиологических концентраций АФК, в первую очередь H2O2, описана в литературе фрагментарно [7]. Данных об участии H2O2 в регуляции экзоцитоза ТВП крайне мало, в литературе обнаруживается лишь одна публикация, посвященная этому вопросу [11].
Поэтому, целью данной работы было изучение влияния экзогенной Н202, а также агонистов, усиливающих продукцию внутриклеточных АФК, на процесс экзоцитоза ТВП и секрецию ФВ на поверхность ЭК. В качестве таких агонистов, были выбраны биогенные амины гистамин [12] и серотонин [13], и три ключевых цитокина: УЕОБ, ТОБ-Ье1а и ТКР-а1рИа, регулирующих рост, дифференцировку и воспалительный ответ эндотелия [14-16]. Для того, чтобы достичь поставленной цели необходимо было разработать метод количественной оценки экзоцитоза ТВП на поверхность ЭК, который бы учитывал модальность (гемостатическая или воспалительная) реакции эндотелия.
Цели и задачи исследования:
Целью данного исследования было изучение влияния экзогенной перекиси водорода, а также агонистов продукции эндогенных активных форм кислорода на процесс экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе и секрецию фактора Виллебранда в эндотелиоцитах Задачи:
1. Разработать метод регистрации количества событий экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе на поверхность эндотелиоцитов.
2. Оценить влияние экзогенно добавленной Н202 на экзоцитоз телец Вейбеля-Паладе и секрецию фактора Виллебранда.
3. Оценить возможную роль ферментов синтеза АФК в гистамин-индуцированном экзоцитозе фактора Виллебранда из телец Вейбеля-Паладе.
4. Исследовать влияние активации 5-НТ1Б/2Б-рецепторов на экзоцитоз фактора Виллебранда из телец Вейбеля-Паладе.
5. Провести сравнительное исследование факторов роста и цитокинов на экзоцитоз фактора Виллебранда из телец Вейбеля-Паладе.
Научная новизна исследования
В ходе выполнения данной работы был разработан оригинальный количественный метод оценки активации экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе, основанный на иммуноцитохимической детекции основного их содержимого - фактора Виллебранда. В сочетании с методами высокопроизводительного скрининга, сегментации и анализа изображений, а также последующей статистической обработки полученных данных, разработанный подход позволяет проводить точную количественную оценку изменений поверхности ЭК под действием тех или иных веществ. С помощью данного метода впервые показано, что физиологически релевантная концентрация Н2О2 стимулирует экзоцитоз телец Вейбеля-Паладе и образование тромбогенных мультимерных «струн» фактора Виллебранда на поверхности ЭК. В то же время, впервые продемонстрирована роль NADPH-оксидаз в гистамин-индуцированном ответе ЭК, более того, впервые показано, что ингибирование активности NADPH-оксидаз угнетает не только индуцированную, но и базальную секрецию ТВП и фактора Виллебранда. Впервые описано изменение поверхности ЭК в ответ на стимуляцию 5-НТ1В и 5-НТ2В рецепторов. Полученные данные говорят о том, что 5-КГ сигнальный каскад вовлечен преимущественно в реализацию воспалительного ответа ЭК. Также впервые проведено сравнительное исследование влияния трех цитокинов, регулирующих рост, пролиферацию, миграцию и воспалительный ответ ЭК. Показано, что стимуляция эндотелиоцитов с помощью VEGF приводила к усилению базальной секреции фактора Виллебранда из телец Вейбеля-Паладе, в то время как TGF-beta и Т№-а^а подавляют экзоцитоз ТВП.
Практическая значимость
Разработанный в ходе выполнения данной работы метод позволяет проводить быструю и точную оценку влияния различных веществ на состояние ЭК и не требует наличия дорогого узкоспециализированого оборудования, что может существенно облегчить поиск и описание новых лекарственных средств для коррекции эндотелиальной дисфункции. Выявлены новые данные о связи окислительного стресса и усиленного экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе и фактора Виллебранда из ЭК. Эти результаты вносят вклад в понимание патогенеза тромботических микроангиопатий, в основе которых лежит нарушение обмена этого фактора свёртывания крови. Более того, особую актуальность полученные данные приобретают в условиях пандемии короновирусной инфекции. Последние клинические данные напрямую связывают тяжесть течения болезни, вызванной С0УГО-19, с уровнем фактора Виллебранда в крови зараженных [17].
Показано, что стимуляция 5-НТ рецепторов ЭК активирует провоспалительный путь экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе, эти данные необходимо учитывать при использовании фармакологических препаратов, являющихся лигандами этих рецепторов.
В настоящей работе показано участие NADPH-оксидаз в вызываемой гистамином секреции ФВ. Это свидетельствует о том, что NADPH-оксидазы могут служить новой, ранее неизвестной мишенью для поиска новых антигистаминных фармакологических препаратов, которые могут быть использованы для предотвращения тромбоза глубоких вен, инициируемого гиперсекрецией гистамина тучными клетками [18] Более того, возможность использования VAS2870 и других ингибиторов NADPH-оксидаз для коррекции ряда патологических состояний обсуждается в литературе [19], а полученные результаты расширяют спектр их возможного применения.
Положения, выносимые на защиту.
1. Перекись водорода является физиологическим активатором экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе, ее воздействие активирует формирование тромбогенных «струн» полимерного фактора Виллебранда на поверхности эндотелиальных клеток.
2. NADPH-оксидазы вовлечены в реализацию ответа эндотелиальных клеток на гистамин, в том числе, в экзоцитоз фактора Виллебранда.
3. Активация 5-HT рецепторов эндотелиальных клеток стимулирует экзоцитоз телец Вейбеля-Паладе и фактора Виллебранда по воспалительному типу.
4. Воздействие ростовых факторов TGF-beta и TNF-alpha подавляет базальную секрецию телец Вейбеля-Паладе и фактора Виллебранда, в то время как VEGF стимулирует его.
Методы исследования.
Для оценки секреции фактора Виллебранда в культуральную жидкость использовали метод ELISA. Для оценки экзоцитоза телец Вейбеля-Паладе и фактора Виллебранда использовали метод, разработанный нами на основе методов иммунохимического окрашивания, флуоресценой микроскопии, высокопроизводительного скрининга и компьютерной сегментации полученных изображений с помощью программного пакета CellProfiler 3.0 и последующей статистической обработки полученных данных. Для оценки проникновения перекиси водорода внутрь эндотелиальных клеток использовали спектрофлуориметрию.
Степень достоверности и апробация работы.
Достоверность полученных результатов обеспечивается использованием стандартизированных методик и протоколов, качественных реактивов и материалов. Все эксперименты проведены со всеми надлежащими техническими контролями и биологическими
повторами. Полученные данные обрабатывались соответствующими статистическими методами.
Основные материалы, изложенные в диссертации, были доложены и обсуждены на 2 конференциях:
1. Конференция с международным участием «Физиология и биохимия сигнальных систем» посвященная 100-летию со дня рождения академика Т.М. Турпаева.Москва, 23-25 октября 2018 г.
2. Международная конференция «Рецепторы и внутриклеточная сигнализация». Пущино, 22-25 мая 2017 г.
Перечень публикаций.
По материалам диссертации опубликовано 4 печатных работ, из них в журналах, соответствующих перечню ВАК - 4 (в том числе статей в иностранных журналах - 2), тезисов докладов и материалов конференций -2.
Список публикаций:
1. Авдонин П.В., Цитрина А.А., Миронова Г.Ю., Авдонин П.П., Жарких И.Л., Надеев А.Д., Гончаров Н.В. Пероксид водорода стимулирует экзоцитоз фактора Виллебранда эндотелиальными клетками пупочной вены человека. Известия академии наук. Серия биологическая. 2017. № 5. С. 549-556.
2. Авдонин П.В., Надеев А.Д., Цитрин Е.Б., Цитрина А.А., Авдонин П.П., Миронова Г.Ю., Жарких И.Л., Гончаров Н.В. Участие двупоровых каналов в вызываемом пероксидом водорода подъеме уровня ионов кальция в цитоплазме эндотелиальных клеток пупочной вены человека. Доклады Академии Наук. 2017. Т. 474. № 4. С. 501-504.
3. Avdonin P.V., Rybakova E.Yu., Avdonin P.P., Trufanov S.K., Mironova G.Yu., Tsitrina A.A., Goncharov N.V. VAS2870 Inhibits Histamine-Induced
Calcium Signaling and vWF Secretion in Human Umbilical Vein Endothelial Cells // Cells. 2019. V. 8 P. 196. D01:10.3390/cells8020196. 4. Trufanov S.K., Rybakova E.Yu., Avdonin P.P., Tsitrina A.A., Zharkikh I.L., Goncharov N.V., Jenkins R.O., Avdonin P.V. The Role of Two-Pore Channels in Norepinephrine-Induced [Ca2+]i Rise in Rat Aortic Smooth Muscle Cells and Aorta Contraction // Cells. 2019. V. 8. P. 1144. DOI: 10.3390/cells8101144. Личный вклад автора
Все разделы диссертации были написаны лично автором или при его непосредственном участии. Описанный в данной работе метод детекции экзоцитоза фактора Виллебранда был разработан лично автором. Автором выполнялись все экспериментальные процедуры, фиксация, иммунохимическое окрашивание, микроскопическая съемка и обработка полученных изображений, а также иммуноферментный анализ. Статистический анализ полученных данных также проводился лично автором.
Структура и объем диссертации
Текст диссертации приведен на 153 страницах, содержит 32 рисунка, 9 таблиц и дополнен 1 приложением. В работе процитирован 191 литературный источник.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1. Эндотелий и его функции
Эндотелий представляет собой внутреннюю выстилку сосудов и сердца и состоит из одного слоя плоских эпителиальных клеток, апикальная часть которых непосредственно контактирует с кровью. Эндотелиальные клетки (ЭК)- эндотелиоциты, происходят из мезодермы, их промежуточные филаменты состоят в основном из виментина [20].
Эндотелий обеспечивает выполнение важных для сердечно-сосудистой системы и всего организма в целом функций.
1. Барьерная функция эндотелия. ЭК контролируют обмен различными веществами между кровью и межтканевой жидкостью, а также регулируют выход лейкоцитов из кровяного русла в окружающие ткани.
2. Регуляция системы свертывания крови (гемостаз). В норме, поверхность ЭК обладает антикоагулирующими свойствами из-за присутствия гепаран-сульфата и антитромбина - протеазы, расщепляющей белки системы свертывания крови.
3. Регуляция воспалительного ответа.
4. Формирование новых сосудов.
5. Вазоконстрикция и вазодилатация и участие в регуляции кровяного давления.
Дисфункция эндотелия лежит в основе многих заболевания сердечнососудистой системы [21]. Нарушение функциональной активности эндотелия ведет, в первую очередь, к гипертензии и тромбозам за счет снижения выработки N0 и увеличенной продукции АФК.
1.2 Реакция гемостаза и ее этапы
Гемостаз - это комплекс реакций организма, направленный на остановку кровотечения и сохранения крови внутри поврежденного сосуда. Реакция гемостаза инициирует первый этап регенерации тканей после повреждения. В основе реакции гемостаза лежит процесс коагуляции факторов свертываемости крови. В нормальных сосудах, эндотелий секретирует различные антикоагулянты, в частности, различные гепариноподобные молекулы и тромбомодулин, а также NO и простациклин для предотвращения агрегации тромбоцитов. При повреждении сосуда, эндотелиальные клетки начинают секретировать ФВ, который запускает каскад коагуляции и является одним из важнейших белков системы гемостаза. [22] В реакции гемостаза выделяют три основных этапа (Рис.1): вазоконстрикция, адгезия тромбоцитов в месте повреждения и непосредственно коагуляция крови и формирование тромбинового сгустка - тромба. Реакция гемостаза развивается очень быстро, чтобы необходимо для снижения потери крови. Рассмотрим каждый этап чуть подробней.
1.2.1 Вазоконстрикция
Осуществляется гладкомышечными клетками сосуда и является первым этапом ответа сосудистого русла на повреждение (Рис. 1А). Тонус гладкой мускулатуры сосудов находится под контролем эндотелиальных клеток. В случае повреждения сосудистой стенки, симпатическая система инициирует рефлекторный стимул, направленный на сужение диаметра сосуда. Такая реакция резко снижает количество протекающей через место повреждения крови, что способствует снижению кровопотери. В месте повреждения происходит обнажение коллагена базальной мембраны эндотелиоцитов (internal elastic lamina), который инициирует адгезию тромбоцитов в месте повреждения. Адгезированные тромбоциты
запускают реакцию экзоцитоза аир -гранул, содержащих в первую очередь 5-HT, ATP и тромбоксан А2 - все эти вещества усиливают вазоконстрикцию [23].
1.2.2 Адгезия тромбоцитов в месте повреждения
При контакте с коллагеном, ФВ и поврежденными эндотелиальными клетками, тромбоциты прикрепляются в месте повреждения и формируют первичную тромбоцитарную пробку (первичный гемостаз (Рис.1В-4) -Рис.1В-5). Решающую роль в этом процессе играет ФВ (Рис. 1B). По мере адгезии, тромбоциты теряют свою округлую форму, становятся звездчатыми (Рис.1В-2) и запускают секрецию своих гранул (Рис.1В-3) становятся "липкими" для других тромбоцитов. Содержимое гранул привлекает к месту повреждения еще больше тромбоцитов (Рис.1В-5), активирует их адгезию и дегрануляцию, тем самым формируя петлю положительной обратной связи [23].
1.2.3 Формирование тромба
После формирования тромбоцитарной пробки, происходит активация факторов свертывания крови - белков, постоянно присутствующих в плазме крови в неактивном виде. Последовательная активация факторов свертывания крови называется каскад коагуляции (Рис.1С-1-4). Конечный результат активации этого каскада - это формирование нерастворимого фибрина из фибриногена плазмы крови (Рис.1С). Фибриновая сеть формируется вокруг и внутри тромбоцитарной пробки, удерживает ее в месте повреждения (вторичный гемостаз) и формирует непосредственно тромб. По мере развития реакции, в формирующийся тромб включаются эритроциты и лейкоциты, придавая дополнительную жесткость конструкции.
Нарушения и сбои в регуляции системы гемостаза приводят к различным патологическим состояниям: геморрагиям или тромбозам. Неспособность
крови к свертыванию, так же, как и спонтанная коагуляция, представляют собой состояния опасные для жизни.
Рис. 1 Основные этапы формирования тромба и активации системы гемостаза. А - В ответ на повреждение, ЭК выделяют эндотелин, стимулирующий вазоконстрикцию в месте повреждения. В - Развитие реакции первичного гемостаза что сопровождается адгезией и активацией экзоцитоза гранул тромбоцитов в месте повреждения. С - Развитие реакции вторичного гемостаза, характеризующейся активацией тромбина и полимеризацией фибрина. [23]
2. Структура и функции фактора Виллебранда
Фактор фон Виллебранда (ФВ) представляет собой мультимерный гликопротеин, играющий ключевую роль в системе поддержании гемостаза крови. ФВ детектируется в плазме крови, эндотелиальных клетках и а-гранулах тромбоцитов [24]. Выделяют две основных функции ФВ, а именно:
• Агрегация и адгезия тромбоцитов в месте повреждения сосудистого русла
• ФВ является белком-носителем другого крайне важного для системы гемостаза белка - фактора свертываемости VIII.
В эндотелиальных клетках и мегакариоцитах, ФВ синтезируется как единая полипептидная цепь длинной 2813 аминокислот (ак), содержащая в своем составе сигнальный пептид (22 ак), про-пептид (741 ак) и нативный белок (2050 ак). Аминокислотная последовательность ФВ была опубликована в 1986 в работе Pannekoek c соавт. [25]. Белок богат цистеином (8,3% ак), что в 4 раза выше, чем среднее его содержание в белках человека [26]. Цистеин (Cys) принимает участие в формировании как внутри-, так и межмолекулярных дисульфидных связей, тем самым определяя фолдинг и мультимеризацию ФВ [27].
После отщепления сигнального пептида, образуется пробелок, содержащий несколько доменов (Рис. 2А). Во время синтеза, две субъединицы про-ФВ формируют три межмолекулярных Cys-Cys связи в CK-домене (C-terminal cysteine knot domain) [28]. Эти три связи стерически защищены от восстановления и обеспечивают стабильность димера ФВ (Рис. 2В-1). Этот процесс происходит в цистернах эндоплазматического ретикулума. Дальнейшая полимеризация, гликозилирование, а также протеолитическое отщепление сигнального про-пептида происходит в аппарате Гольджи (Рис. 2В-2,3). Показано, что полимеризация, протеолиз и конформационные изменения ФВ, критически зависят от специфических
условий, существующих внутри аппарата Гольджи (низкий рН, низкая
+ 2~ь
концентрация Na и высокая концентрация Са ) [29, 30]. Димеры
полимеризуются в мультимерные комплексы, используя остатки Cys,
локализованные на Оконце белка, в D-доменах. (Рис.2В-3). Таким образом
создается пул различных молекул, имеющих в составе от 2 до 60 и больше
димерных комплексов. По мере синтеза, ФВ подвергается
гликозилированию. Известно, как минимум, 17 сайтов ^гликозилирования
и 10 сайтов О-гликозилирования внутри субъединицы ФВ [31, 32].
По мере синтеза, ФВ транспортируется в специализированные органеллы - а-гранулы мегакариоцитов и тельца Вейбеля-Паладе (ТВП) эндотелиальных клеток [33, 34], где происходит его компактизация и окончательная упаковка (Рис. 2В-4). Несмотря на схожую функцию, эти органеллы принципиально отличаются: а-гранулы могут формироваться в отсутствии ФВ, а ТВП - нет. [35, 36]. Процесс формирования ТВП будет рассмотрен подробно в следующей главе.
Рис. 2 Доменная структура и этапы созревания фактора Виллебранда. А - Доменная структура ФВ (Э1-С), домены, вовлеченные в димеризацию белка (Э'-СК). В - Процесс полимеризации и мультимеризации ФВ по мере его продвижения в везикулярном компартменте. 1 - Димеризация начинается в ЭПР (ЕЯ), где происходит образование дисульфидных связей между С-концевыми доменами. 2 - при переходе из ЭПР в цис-полюс аппарата Гольджи, происходит формирование К-концевых внутримолекулярных дисульфидных связей. 3 -в транс-полюсе аппарата Гольджи образуются межмолекулярные дисульфидные связи и отщепляется про-пептид. 4 - при созревании ТВП, происходит компактизация полимеризованного ФВ и про-пептида. [2]
3. Формирование ТВП в эндотелии
ТВП представляют собой специализированные органеллы сигарообразной формы, специфичные для эндотелиальных клеток. Основным содержимым ТВП является ФВ и P-селектин [2]. Согласно общепринятой точке зрения, процесс формирования ТВП начинается в транс-полюсе аппарата Гольджи и зависит от полимеризации мультимеров ФВ в геликоидную тубулярную структуру. Благодаря этому достигается практически 100-кратная компактизация ФВ, без которой внутриклеточное хранение такого большого белка было бы невозможно [37]. Это также позволяет избежать запутывания формирующихся длинных полимерных нитей, так называемых «струн» ФВ. Полимеризация происходит при умеренно низких значениях pH порядка 5.5. Показано, что при нейтрализации кислого содержимого формирующихся ТВП, в дальнейшем, на поверхности эндотелия обнаруживаются относительно короткие, запутанные между собой нити ФВ, обладающие сниженной способностью связывать тромбоциты [37].
В работе Ferrara с соавт., [38] было показано, что размер будущих органелл предопределен структурой аппарата Гольджи и не может превышать размер его структурной единицы - министэка, имеющего диаметр 0,5 мкм. В транс-полюсе аппарата Гольджи министэки, содержащие ФВ, упаковываются вместе и формируют органеллы-предшественники ТВП дискретного размера, их диаметр варьирует от 0,5 до 5 мкм с шагом в 0,5 мкм [38]. В это же время тубулы ФВ формируют мембранные выпячивания, которые отпочковываются от транс-АГ в виде незрелых ТВП [39].
Рис. 3 Этапы формирования телец Вейбеля-Паладе. 1 - Биогенез ТВП начинается в транс-АГ, где зрелые полимеры ФВ упаковываются в формирующиеся ТВП. Этот процесс зависит от присутствия белка клатрина и AP-1, который привлекает некоторые другие белки, отвечающие за регулировку экзоцитоза ФВ. 2 - Незрелые ТВП транспортируются по микротрубочкам с помощью кинезиновых белков на периферию клетки. 3 - Незрелые ТВП заякориваются в кортикальном актиновом цитоскелете с помощью Rab27a, MyRIP и миозинов, где происходит дальнейшее созревание ТВП и дополнительная упаковка, и полимеризация ФВ. На этом этапе может происходит спонтанное слияние незрелых ТВП с мембраной путем базальной секреции. [40].
Формирование ТВП зависит от цитоплазматического белка клатрина и гетеродимерного адаптерного комплекса AP-1 [41]. Клатрин и AP1 принимают участие в формировании везикул, транспортирующих
различные белки в клетке [42, 43]. Незрелые ТВП локализуются в перинуклеарной области клетки (Рис.3-1) где происходит их интенсивное покрытие клатрином и AP-1. При нарушении формирования клатринового слоя не происходит формирования типичных больших ТВП сигарообразной формы. Вместо этого формируются небольшие округлые везикулы, чье содержимое быстро реализуется через конститутивную секрецию [41]. По-видимому, клатриновое покрытие необходимо для правильного фолдинга мультимеров ФВ в тубулы и формировании сигарообразных ТВП.
Белок AP-1 крайне важен для формирования ТВП. Ассоциация AP-1 с тубулами ФВ усиливает взаимодействие с клатрином, а также стимулирует связывание тройного белкового комплекса, состоящего из p200, афтифилина и у-синергина. Структурная роль данного комплекса пока еще не совсем ясна. При его отсутствии, AP-1 связывается с клатрином на поверхности тубул ФВ, происходит формирование морфологически типичных ТВП, однако наблюдается значительное ингибирование регулируемой и увеличение конститутивной секреции ФВ [44].
После отделения от транс-полюса аппарата Гольджи ТВП направляются к периферии клетки по микротрубочкам и актиновым филаментам [40] (Рис.3-2). Помимо описанного выше способа, описан феномен формирования более крупных секреторных везикул (secretory pods) атипичной формы путем слияния типичных сигарообразных ТВП [45]. Параллельно, в состав ТВП включаются такие важные компоненты как трансмембранный белок CD63 и малые ГТФазы Rab [46].
Достигая кортикального актинового цитоскелета, ТВП заякориваются в нем с помощью комплекса, состоящего из трех белков: малой ГТФазы Rab27a и двух ее эффекторов MyRIP и миозина Va [47]. После заякоривания происходит финальное созревание ФВ, необходимое для создания длинных мультимерных "струн" на поверхности эндотелия
Похожие диссертационные работы по специальности «Клеточная биология, цитология, гистология», 03.03.04 шифр ВАК
Взаимодействие клеток крови с адгезивной белковой поверхностью в условиях контролируемого потока и разработка методики диагностики нарушений клеточного гемостаза на основе микрофлюидной технологии2022 год, кандидат наук Автаева Юлия Николаевна
Внутриклеточное содержание белков теплового шока 70 КДА и его взаимосвязь с продукцией активных форм кислорода в нейтрофилах человека при старении2015 год, кандидат наук Бойко, Анна Александровна
Изменение организации цитоскелета эндотелиальных клеток при индукции экзоцитоза телец Вейбеля-Палада2004 год, кандидат биологических наук Виноградова, Татьяна Михайловна
Клиническое значение эндотелиальных факторов и мутаций в генах свертывающей системы крови в восстановительном периоде ишемического инсульта у детей2013 год, кандидат медицинских наук Нечаева, Надежда Леонидовна
Клинико-диагностическое значение эндотелиальной дисфункции у больных хронической болезнью почек2015 год, кандидат наук Курапова, Марина Владимировна
Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Цитрина Александра Андреевна, 2020 год
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Esper R.J. Endothelial dysfunction: A comprehensive appraisal / Esper R.J., Nordaby R.A., Vilarino J.O., Paragano A., Cacharron J.L., Machado R.A. // Cardiovascular Diabetology - 2006. - Т. 5 - С.1-18.
2. Metcalf D.J. Formation and function of Weibel-Palade bodies. / Metcalf D.J., Nightingale T.D., Zenner H.L., Lui-Roberts W.W., Cutler D.F. // Journal of cell science - 2008. - Т. 121 - № Pt 1 - С.19-27.
3. Nightingale T.D. Tuning the endothelial response: differential release of exocytic cargos from Weibel-Palade bodies / Nightingale T.D., McCormack J.J., Grimes W., Robinson C., Lopes da Silva M., White I.J., Vaughan A., Cramer L.P., Cutler D.F. // Journal of Thrombosis and Haemostasis - 2018. - Т. 16 - № 9 - С. 1873-1886.
4. Babich V. Selective release of molecules from Weibel-Palade bodies during a lingering kiss / Babich V., Meli A., Knipe L., Dempster J.E., Skehel P., Hannah M.J., Carter T. // Blood - 2008. - Т. 111 - № 11 - С.5282-5290.
5. Ferraro F. Weibel-Palade body size modulates the adhesive activity of its von Willebrand Factor cargo in cultured endothelial cells / Ferraro F., Silva M.L. Da, Grimes W., Lee H.K., Ketteler R., Kriston-Vizi J., Cutler D.F. // Scientific Reports - 2016. - Т. 6 - № March - С.1-15.
6. Craige S.M. Reactive Oxygen Species in Endothelial Function: From Disease to Adaptation / Craige S.M., Kant S., Keaney J.F. // Circulation Journal - 2015. - Т. 79 - № 6 - С.1145-1155.
7. Cai H. Hydrogen peroxide regulation of endothelial function: Origins, mechanisms, and consequences / Cai H. // Cardiovascular Research - 2005. - Т. 68 - № 1 - С.26-36.
8. Cave A.C. NADPH Oxidases in Cardiovascular Health and Disease / Cave A.C., Brewer A.C., Narayanapanicker A., Ray R., Grieve D.J., Walker S., Shah A.M. // Antioxidants & Redox Signaling - 2006. - Т. 8 - № 5-6 - С.691-728.
9. Augsburger F. Pharmacological characterization of the seven human NOX isoforms and their inhibitors / Augsburger F., Filippova A., Rasti D., Seredenina T., Lam M., Maghzal G., Mahiout Z., Jansen-Dürr P., Knaus U.G., Doroshow J., Stocker R., Krause K.H., Jaquet V. // Redox Biology - 2019. - T. 26 - № July - C.101272.
10. Thomas S.R. Redox control of endothelial function and dysfunction: Molecular mechanisms and therapeutic opportunities / Thomas S.R., Witting P.K., Drummond G.R. // Antioxidants and Redox Signaling - 2008. - T. 10 - № 10 - C.1713-1765.
11. Matsushita K. Hydrogen peroxide regulation of endothelial exocytosis by inhibition of N-ethylmaleimide sensitive factor / Matsushita K., Morrell C.N., Mason R.J.A., Yamakuchi M., Khanday F.A., Irani K., Lowenstein C.J. // Journal of Cell Biology - 2005. - T. 170 - № 1 - C.73-79.
12. Hu Q. Critical role of NADPH oxidase-derived reactive oxygen species in generating Ca2+ oscillations in human aortic endothelial cells stimulated by histamine / Hu Q., Yu Z.X., Ferrans V.J., Takeda K., Irani K., Ziegelstein R.C. // Journal of Biological Chemistry - 2002. - T. 277 - № 36 - C.32546-32551.
13. Avdonin P. V. Enhancement by Hydrogen Peroxide of Calcium Signals in Endothelial Cells Induced by 5-HT1B and 5-HT2B Receptor Agonists / Avdonin P. V., Nadeev A.D., Mironova G.Y., Zharkikh I.L., Avdonin P.P., Goncharov N. V. // Oxidative Medicine and Cellular Longevity - 2019. - T. 2019.
14. Monaghan-Benson E. The regulation of vascular endothelial growth factor-induced microvascular permeability requires Rac and reactive oxygen species / Monaghan-Benson E., Burridge K. // Journal of Biological Chemistry - 2009. -T. 284 - № 38 - C.25602-25611.
15. Li J.-M. Acute Tumor Necrosis Factor Alpha Signaling via NADPH Oxidase in Microvascular Endothelial Cells: Role of p47phox Phosphorylation and Binding to TRAF4 / Li J.-M., Fan L.M., Christie M.R., Shah A.M. //
Molecular and Cellular Biology - 2005. - T. 25 - № 6 - C.2320-2330.
16. Mohamed R. ROS directly activates transforming growth factor ß type 1 receptor signalling in human vascular smooth muscle cells / Mohamed R., Cao Y., Afroz R., Xu S., Ta H.T., Barras M., Zheng W., Little P.J., Kamato D. // Biochimica et Biophysica Acta - General Subjects - 2020. - T. 1864 - № 1 -
C.129463.
17. Aksenova A.Y. von Willebrand factor and endothelial damage: a possible association with COVID-19 / Aksenova A.Y. // Ecological genetics - 2020. - T. 18 - № 2.
18. Ponomaryov T. Mast cells granular contents are crucial for deep vein thrombosis in mice / Ponomaryov T., Payne H., Fabritz L., Wagner D.D., Brill A. // Circulation Research - 2017. - T. 121 - № 8 - C.941-950.
19. Ma M.W. NADPH oxidases in traumatic brain injury - Promising therapeutic targets? / Ma M.W., Wang J., Dhandapani K.M., Wang R., Brann
D.W. // Redox Biology - 2018. - T. 16 - № February - C.285-293.
20. Kovacic J.C. Epithelial-to-mesenchymal and endothelial-to-mesenchymal transition from cardiovascular development to disease / Kovacic J.C., Mercader N., Torres M., Boehm M., Fuster V. // Circulation - 2012. - T. 125 - № 14 -C.1795-1808.
21. Lenasi H.Endothelial Dysfunction: Old Concepts and New Challenges / H. Lenasi - IntechOpen, 2018.
22. Foley J.H. Cross Talk Pathways between Coagulation and Inflammation / Foley J.H., Conway E.M. // Circulation Research - 2016. - T. 118 - № 9 -C.1392-1408.
23. Salvatore Cito, Marco Domenico Mazzeo L.B. A Review of Macroscopic Thrombus Modeling Methods / Salvatore Cito, Marco Domenico Mazzeo L.B. // Thrombosis Research - 2013. - T. 131 - № 2 - C.116-124.
24. Sadler J.E. BIOCHEMISTRY AND GENETICS OF VON WILLEBRAND FACTOR / Sadler J.E. // Annu. Rev. Biochem. 1998. - 1998. - T. 67 - C.395-
25. Pannekoek H. Molecular cloning, expression and assembly of multimeric von Willebrand factor / Pannekoek H., Voorberg J. // Bailliere's clinical haematology - 1989. - T. 2 - № 4 - C.879—896.
26. Shapiro S.E. The von willeb teines are essential for secretion / Shapiro S.E., Nowak A.A., Wooding C., Birdsey G., Laffan M.A., Mckinnon T.A.J. // Journal of Thrombosis and Haemostasis - 2014. - T. 12 - № 2 - C.246-254.
27. Moake J.L. Covalent Regulation of Ulvwf String Formation and / Moake J.L., Dong J. // J Thromb Haemost. - 2008. - T. 6 - № 7 - C. 1135-1143.
28. Katsumi A. Localization of disulfide bonds in the cystine knot domain of human von Willebrand factor / Katsumi A., Tuley E.A., Bodo I., Sadler J.E. // Journal of Biological Chemistry - 2000. - T. 275 - № 33 - C.25585-25594.
29. Huang R.H. Assembly of Weibel-Palade body-like tubules from N-terminal domains of von Willebrand factor / Huang R.H., Wang Y., Roth R., Yu X., Purvis A.R., Heuser J.E., Egelman E.H., Sadler J.E. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America - 2008. - T. 105 - № 2 - C.482-487.
30. Zhou Y.F. A pH-regulated dimeric bouquet in the structure of von Willebrand factor / Zhou Y.F., Eng E.T., Nishida N., Lu C., Walz T., Springer T.A. // EMBO Journal - 2011. - T. 30 - № 19 - C.4098-4111.
31. Canis K. The final version of record is available at: Mapping the N-glycome of Human Von Willebrand Factor / Canis K., Mckinnon T.A.J., Nowak A., Haslam S.M., Panico M., Morris H.R., Laffan M.A., Dell A. // Biochem J - 2012. - T. 447 - № 2 - C.1-21.
32. Samor B. Primary structure of the majorO-glycosidically linked carbohydrate unit of human von Willebrand factor / Samor B., Michalski J.-C., Mazurier C., Goudemand M., Waard P. De, Vliegenthart J.F.G., Strecker G., Montreuil J. // Glycoconjugate Journal - 1989. - T. 6 - № 3 - C.263-270.
33. Schmugge M. Platelets and von Willebrand factor / Schmugge M., Rand
M.L., Freedman J. // Transfusion and Apheresis Science - 2003. - T. 28 - № 3
- C.269-277.
34. Rondaij M.G. Dynamics and plasticity of Weibel-Palade bodies in endothelial cells / Rondaij M.G., Bierings R., Kragt A., Mourik J.A. Van, Voorberg J. // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology - 2006. - T. 26 - № 5 - C. 1002-1007.
35. Denis C. A mouse model of severe von Willebrand disease: Defects in hemostasis and thrombosis / Denis C., Methia N., Frenette P.S., Rayburn H., Ullman-Cullere M., Hynes R.O., Wagner D.D. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America - 1998. - T. 95 - № 16 -
C.9524-9529.
36. Haberichter S.L. Re-establishment of VWF-dependent Weibel-Palade bodies in VWD endothelial cells / Haberichter S.L., Merricks E.P., Fahs S.A., Christopherson P.A., Nichols T.C., Montgomery R.R. // Blood - 2005. - T. 105
- № 1 - C. 145-152.
37. Michaux G. The physiological function of von Willebrand's factor depends on its tubular storage in endothelial Weibel-Palade bodies / Michaux G., Abbitt K.B., Collinson L.M., Haberichter S.L., Norman K.E., Cutler D.F. // Developmental Cell - 2006. - T. 10 - № 2 - C.223-232.
38. Ferraro F. A two-tier Golgi-based control of organelle size underpins the functional plasticity of endothelial cells / Ferraro F., Kriston-Vizi J., Metcalf
D.J., Martin-Martin B., Freeman J., Burden J.J., Westmoreland D., Dyer C.E., Knight A.E., Ketteler R., Cutler D.F. // Developmental cell - 2014. - T. 29 - № 3 - C.292-304.
39. Valentijn K.M. A new look at Weibel-Palade body structure in endothelial cells using electron tomography / Valentijn K.M., Valentijn J.A., Jansen K.A., Koster A.J. // Journal of Structural Biology - 2008. - T. 161 - № 3 - C.447-458.
40. Nightingale T. The secretion of von Willebrand factor from endothelial
cells; an increasingly complicated story / Nightingale T., Cutler D. // Journal of Thrombosis and Haemostasis - 2013. - T. 11 - № SUPPL.1 - C.192-201.
41. Lui-Roberts W.W.Y. An AP-1/clathrin coat plays a novel and essential role in forming the Weibel-Palade bodies of endothelial cells / Lui-Roberts W.W.Y., Collinson L.M., Hewlett L.J., Michaux G., Cutler D.F. // Journal of Cell Biology - 2005. - T. 170 - № 4 - C.627-636.
42. Edeling M.A. Life of a clathrin coat: insights from clathrin and AP structures / Edeling M.A., Smith C., Owen D. // Nature Reviews Molecular Cell Biology - 2006. - T. 7 - № 1 - C.32-44.
43. Traub L.M. Common principles in clathrin-mediated sorting at the Golgi and the plasma membrane / Traub L.M. // Biochimica et Biophysica Acta -Molecular Cell Research - 2005. - T. 1744 - № 3 SPEC. ISS. - C.415-437.
44. Winnie W.Y. Lui-Roberts,* Francesco Ferraro, Thomas D. Nightingale and D.F.C. Aftiphilin and D-Synergin Are Required for Secretagogue Sensitivity of Weibel-Palade Bodies in Endothelial Cells / Winnie W.Y. Lui-Roberts,* Francesco Ferraro, Thomas D. Nightingale and D.F.C. // Molecular biology of the cell - 2008. - T. 19 - № December - C.5072-5081.
45. Valentijn K.M. Weibel-Palade bodies: A window to von Willebrand disease / Valentijn K.M., Eikenboom J. // Journal of Thrombosis and Haemostasis -2013. - T. 11 - № 4 - C.581-592.
46. Harrison-Lavoie K.J. P-selectin and CD63 use different mechanisms for delivery to Weibel-Palade bodies / Harrison-Lavoie K.J., Michaux G., Hewlett L., Kaur J., Hannah M.J., Lui-Roberts W.W.Y., Norman K.E., Cutler D.F. // Traffic - 2006. - T. 7 - № 6 - C.647-662.
47. Rojo Pulido I. Myosin Va acts in concert with Rab27a and MyRIP to regulate acute von-Willebrand factor release from endothelial cells / Rojo Pulido I., Nightingale T.D., Darchen F., Seabra M.C., Cutler D.F., Gerke V. // Traffic - 2011. - T. 12 - № 10 - C.1371-1382.
48. Nightingale T.D. Rab27a and MyRIP regulate the amount and multimeric
state of VWF released from endothelial cells. (Blood (2009) 113, 20, (50105018)) / Nightingale T.D., Pattni K., Hume A.N., Seabra M.C., Cutler D.F. // Blood - 2011. - T. 117 - № 12 - C.3476.
49. Burgoyne R.D. Secretory granule exocytosis / Burgoyne R.D., Morgan A. // Physiological Reviews - 2003. - T. 83 - № 2 - C.581-632.
50. Pickett J.A. Compound exocytosis: Mechanisms and functional significance / Pickett J.A., Edwardson J.M. // Traffic - 2006. - T. 7 - № 2 - C.109-116.
51. Valentijn K.M. Multigranular exocytosis of Weibel-Palade bodies in vascular endothelial cells / Valentijn K.M., Driel L.F. Van, Mourik M.J., Hendriks G.J., Arends T.J., Koster A.J., Valentijn J.A. // Blood - 2010. - T. 116 - № 10 - C.1807-1816.
52. Berriman J.A. Structural organization of Weibel-Palade bodies revealed by cryo-EM of vitrified endothelial cells / Berriman J.A., Li S., Hewlett L.J., Wasilewski S., Kiskin F.N., Carter T., Hannah M.J., Rosenthal P.B. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America - 2009. - T. 106 - № 41 - C.17407-17412.
53. Holthenrich A. Regulation of von-willebrand factor secretion from endothelial cells by the annexin a2-s100a10 complex / Holthenrich A., Gerke V. // International Journal of Molecular Sciences - 2018. - T. 19 - № 6.
54. Pulido I.R. VAMP3 is associated with endothelial Weibel-Palade bodies and participates in their Ca2+-dependent exocytosis / Pulido I.R., Jahn R., Gerke V. // Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Cell Research - 2011. - T. 1813 -№ 5 - C.1038-1044.
55. Hooren K.W.E.M. Van The Epac-Rap1 signaling pathway controls cAMPmediated exocytosis of Weibel-Palade bodies in endothelial cells / Hooren K.W.E.M. Van, Agtmaal E.L. Van, Fernandez-Borja M., Mourik J.A. Van, Voorberg J., Bierings R. // Journal of Biological Chemistry - 2012. - T. 287 -№ 29 - C.24713-24720.
56. Bierings R. The interplay between the Rab27A effectors Slp4-a and MyRIP
controls hormone-evoked Weibel-Palade body exocytosis / Bierings R., Hellen N., Kiskin N., Knipe L., Fonseca A.V., Patel B., Meli A., Rose M., Hannah M.J., Carter T. // Blood - 2012. - T. 120 - № 13 - C.2757-2767.
57. Chehab T. A novel Munc13-4/S100A10/annexin A2 complex promotes Weibel-Palade body exocytosis in endothelial cells / Chehab T., Santos N.C., Holthenrich A., Koerdt S.N., Disse J., Schuberth C., Nazmi A.R., Neeft M., Koch H., Man K.N.M., Wojcik S.M., Martin T.F.J., Sluijs P. Van Der, Brose N., Gerke V. // Molecular Biology of the Cell - 2017. - T. 28 - № 12 -C.1688-1700.
58. Eijnden-Schrauwen Y. Van Den Involvement of calcium and G proteins in the acute release of tissue- type plasminogen activator and von Willebrand factor from cultured human endothelial cells / Eijnden-Schrauwen Y. Van Den, Atsma D.E., Lupu F., Vries R.E.M. De, Kooistra T., Emeis J.J. // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology - 1997. - T. 17 - № 10 -C.2177-2187.
59. Rickles F.R. The effects of epinephrine infusion in patients with Von Willebrand's disease / Rickles F.R., Hoyer L.W., Rick andAhr M.E.D.J. // Journal of Clinical Investigation - 1976. - T. 57 - № 6 - C.1618-1625.
60. Özgönenel B. How do you treat bleeding disorders with desmopressin? / Özgönenel B., Rajpurkar M., Lusher J.M. // Postgraduate Medical Journal -2007. - T. 83 - № 977 - C.159-163.
61. Kaufmann J.E. Vasopressin-induced von Willebrand factor secretion from endothelial cells involves V2 receptors and cAMP / Kaufmann J.E., Oksche A., Wollheim C.B., Günther G., Rosenthal W., Vischer U.M. // Journal of Clinical Investigation - 2000. - T. 106 - № 1 - C.107-116.
62. Vischer U.M. Regulated von Willebrand factor secretion is associated with agonist- specific patterns of cytoskeletal remodeling in cultured endothelial cells / Vischer U.M., Barth H., Wollheim C.B. // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology - 2000. - T. 20 - № 3 - C.883-891.
63. Wojciak-Stothard B. Rho and Rac but not Cdc42 regulate endothelial cell permeability / Wojciak-Stothard B., Potempa S., Eichholtz T., Ridley A.J. // Journal of Cell Science - 2001. - T. 114 - № 7 - C.1343-1355.
64. Kooistra M.R.H. Epac1 regulates integrity of endothelial cell junctions through VE-cadherin / Kooistra M.R.H., Corada M., Dejana E., Bos J.L. // FEBS Letters - 2005. - T. 579 - № 22 - C.4966-4972.
65. Grueb M, Rohrbach J, M, Schlote T M.J. Serotonin (5-HT7) Receptor-Stimulated Activation of cAMP-PKA Pathway in Bovine Corneal Epithelial and Endothelial / Grueb M, Rohrbach J, M, Schlote T M.J. // Cells. Ophthalmic Res - 2012. - T. 48 - C.22-27.
66. Ullmer C. Expression of serotonin receptor mRNAs in blood vessels / Ullmer C., Schmuck K., Kalkman H.O., Lübbert H. // FEBS Letters - 1995. -T. 370 - № 3 - C.215-221.
67. Tatsuro Ishida, Ken-ichi Hirata, Tsuyoshi Sakoda, Seinosuke Kawashima H.A. Identification of mRNA for 5-HT and 5-HT receptor subtypes in human 12 coronary arteries / Tatsuro Ishida, Ken-ichi Hirata, Tsuyoshi Sakoda, Seinosuke Kawashima H.A., Yokoyama M. // Cardiovascular Research 41 -1999. - T. 41 - C.267-274.
68. Veal E.A. Hydrogen Peroxide Sensing and Signaling / Veal E.A., Day A.M., Morgan B.A. // Molecular Cell - 2007. - T. 26 - № 1 - C.1-14.
69. Li X. Mesosomes associated with hydrogen peroxide in bacteria / Li X., Tang Z., Pang X., Zhang M., Liu Y. // Microbiology - 2017. - T. 86 - № 6 -C.692-697.
70. Geiszt M. The Nox family of NAD(P)H oxidases: Host defense and beyond / Geiszt M., Leto T.L. // Journal of Biological Chemistry - 2004. - T. 279 - № 50 - C.51715-51718.
71. Foreman J. Reactive oxygen species produced by NADPH oxidase regulate plant cell growth / Foreman J., Demidchik V., Bothwell J.H.F., Mylona P., Miedema H., Torres M.A., Linstead P., Costa S., Brownlee C., Jones J.D.G.,
Davies J.M., Dolan L. // Nature - 2003. - T. 422 - № 6930 - C.442-446.
72. Leitch J.M. The right to choose: Multiple pathways for activating copper, zinc superoxide dismutase / Leitch J.M., Yick P.J., Culotta V.C. // Journal of Biological Chemistry - 2009. - T. 284 - № 37 - C.24679-24683.
73. Lacy F. Plasma hydrogen peroxide production in hypertensives and normotensive subjects at genetic risk of hypertension / Lacy F., O'Connor D.T., Schmid-Schönbein G.W. // Journal of Hypertension - 1998. - T. 16 - № 3.
74. Dröge W. Free radicals in the physiological control of cell function / Dröge W. // Physiological Reviews - 2002. - T. 82 - № 1 - C.47-95.
75. Paul A. Hyslop, Zhiyuan Zhang, Donavan V. Pearson L.A.P. Measurement of striatal H2O2 by microdialysis following global forebrain ischemia and reperfusion in the rat: correlation with the cytotoxic potential of H2O2 in vitro / Paul A. Hyslop, Zhiyuan Zhang, Donavan V. Pearson L.A.P. // Brain Research - 1995. - T. 647 - № 2 - C.181-186.
76. Sznajder J.I. Increased Hydrogen Peroxide in the Expired Breath of Patients with Acute Hypoxemic Respiratory Failure / Sznajder J.I., Fraiman A., Hall J.B., Sanders W., Schmidt G., Crawford G., Nahum A., Factor P., Wood L.D.H. // CHEST - 1989. - T. 96 - № 3 - C.606-612.
77. Suematsu M. In vivo visualization of oxidative changes in microvessels during neutrophil activation / Suematsu M., Schmid-Schonbein G.W., Chavez-Chavez R.H., Yee T.T., Tamatani T., Miyasaka M., Delano F.A., Zweifach B.W. // American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology -1993. - T. 264 - № 3 - C.H881-H891.
78. Drummond G.R. Endothelial NADPH oxidases: which NOX to target in vascular disease? / Drummond G.R., Sobey C.G. // Trends in Endocrinology & Metabolism - 2014. - T. 25 - № 9 - C.452-463.
79. Oliveira-Junior E.B. de The human NADPH oxidase: Primary and secondary defects impairing the respiratory burst function and the microbicidal ability of phagocytes / Oliveira-Junior E.B. de, Bustamante J., Newburger P.E.,
Condino-Neto A. // Scandinavian Journal of Immunology - 2011. - T. 73 - № 5 - C.420-427.
80. Wind S. Oxidative stress and endothelial dysfunction in aortas of aged spontaneously hypertensive rats by NOX1/2 is reversed by NADPH oxidase inhibition / Wind S., Beuerlein K., Armitage M.E., Taye A., Kumar A.H.S., Janowitz D., Neff C., Shah A.M., Wingler K., Schmidt H.H.H.W. // Hypertension - 2010. - T. 56 - № 3 - C.490-497.
81. Manea S.A. Regulation of Nox enzymes expression in vascular pathophysiology: Focusing on transcription factors and epigenetic mechanisms / Manea S.A., Constantin A., Manda G., Sasson S., Manea A. // Redox Biology -2015. - T. 5 - C.358-366.
82. Banfi B. Mechanism of Ca2+ Activation of the NADPH Oxidase 5 (NOX5) / Banfi B., Tirone F., Durussel I., Knisz J., Moskwa P., Molnar G.Z., Krause K.H., Cox J.A. // Journal of Biological Chemistry - 2004. - T. 279 - № 18 -
C.18583-18591.
83. Guzik T.J. Coronary artery superoxide production and nox isoform expression in human coronary artery disease / Guzik T.J., Sadowski J., Guzik B., Jopek A., Kapelak B., Przybylowski P., Wierzbicki K., Korbut R., Harrison
D.G., Channon K.M. // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology -2006. - T. 26 - № 2 - C.333-339.
84. Roberts C.K. Oxidative stress and dysregulation of NAD(P)H oxidase and antioxidant enzymes in diet-induced metabolic syndrome / Roberts C.K., Barnard R.J., Sindhu R.K., Jurczak M., Ehdaie A., Vaziri N.D. // Metabolism -Clinical and Experimental - 2006. - T. 55 - № 7 - C.928-934.
85. Matsuno K. Nox1 is involved in angiotensin Il-mediated hypertension: A study in Nox1-deficient mice / Matsuno K., Yamada H., Iwata K., Jin D., Katsuyama M., Matsuki M., Takai S., Yamanishi K., Miyazaki M., Matsubara H., Yabe-Nishimura C. // Circulation - 2005. - T. 112 - № 17 - C.2677-2685.
86. Wang H. Di Role of NADPH oxidase in the vascular hypertrophic and
oxidative stress response to angiotensin II in mice / Wang H. Di, Xu S., Johns D.G., Du Y., Quinn M.T., Cayatte A.J., Cohen R.A. // Circulation Research -2001. - T. 88 - № 9 - C.947-953.
87. Schröder K. Nox4 Is a protective reactive oxygen species generating vascular NADPH oxidase / Schröder K., Zhang M., Benkhoff S., Mieth A., Pliquett R., Kosowski J., Kruse C., Luedike P., Michaelis U.R., Weissmann N., Dimmeler S., Shah A.M., Brandes R.P. // Circulation Research - 2012. - T. 110 - № 9 - C.1217-1225.
88. Buul J.D. Van Expression and Localization of NOX2 and NOX4 in Primary Human Endothelial Cells / Buul J.D. Van, Fernandez-Borja M., Anthony E.C., Hordijk P.L. // Antioxidants & Redox Signaling - 2005. - T. 7 - № 3-4 -C.308-317.
89. William M. Nauseef Detection of superoxide anion and hydrogen peroxide production by cellular NADPH oxidases / William M. Nauseef // Biochim Biophys Acta. - 2014. - T. 840 - № 2 - C.1-7.
90. Denu J.M. Specific and Reversible Inactivation of Protein Tyrosine Phosphatases by Hydrogen Peroxide: Evidence for a Sulfenic Acid Intermediate and Implications for Redox Regulation / Denu J.M., Tanner K.G. // Biochemistry - 1998. - T. 37 - № 16 - C.5633-5642.
91. Finkel T. From Sulfenylation to Sulfhydration: What a Thiolate Needs to Tolerate / Finkel T. // Science Signaling - 2012. - T. 5 - № 215 - C.pelO LP-pe10.
92. Bretón-Romero R. Hydrogen peroxide signaling in vascular endothelial cells / Bretón-Romero R., Lamas S. // Redox Biology - 2014. - T. 2 - № 1 -C.529-534.
93. Holmgren A. Thiol redox control via thioredoxin and glutaredoxin systems / Holmgren A., Johansson C., Berndt C., Lönn M.E., Hudemann C., Lillig C.H. // Biochemical Society transactions - 2005. - T. 33 - № Pt 6 - C.1375—1377.
94. Biteau B. ATP-dependent reduction of cysteine-sulphinic acid by S.
cerevisiae sulphiredoxin / Biteau B., Labarre J., Toledano M.B. // Nature -2003. - T. 425 - № 6961 - C.980-984.
95. Knock G.A. Redox Regulation of Protein Kinases as a Modulator of Vascular Function / Knock G.A., Ward J.P.T. // Antioxidants & Redox Signaling - 2010. - T. 15 - № 6 - C.1531-1547.
96. Qi M. MAP kinase pathways / Qi M., Elion E.A. // Journal of Cell Science -2005. - T. 118 - № 16 - C.3569-3572.
97. Ago T. NAD(P)H oxidases in rat basilar arterial endothelial cells / Ago T., Kitazono T., Kuroda J., Kumai Y., Kamouchi M., Ooboshi H., Wakisaka M., Kawahara T., Rokutan K., Ibayashi S., Iida M. // Stroke - 2005. - T. 36 - № 5 -
C.1040-1046.
98. Takac I. The E-loop is involved in hydrogen peroxide formation by the NADPH oxidase Nox4 / Takac I., Schröder K., Zhang L., Lardy B., Anilkumar N., Lambeth J.D., Shah A.M., Morel F., Brandes R.P. // Journal of Biological Chemistry - 2011. - T. 286 - № 15 - C.13304-13313.
99. Price D.T. Redox Control of Vascular Nitric Oxide Bioavailability / Price
D.T., Vita J.A., Keaney J.F. // Antioxidants & Redox Signaling - 2000. - T. 2 -№ 4 - C.919-935.
100. Ray R. Endothelial Nox4 NADPH oxidase enhances vasodilatation and reduces blood pressure in vivo / Ray R., Murdoch C.E., Wang M., Santos C.X., Zhang M., Alom-Ruiz S., Anilkumar N., Ouattara A., Cave A.C., Walker S.J., Grieve D.J., Charles R.L., Eaton P., Brewer A.C., Shah A.M. // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology - 2011. - T. 31 - № 6 - C.1368-1376.
101. Hiroaki Shimokawa T.M. Hydrogen peroxide as an endothelium-derived hyperpolarizing factor / Hiroaki Shimokawa T.M. // Pharmacological Research - 2004. - T. 49 - № 6 - C.543-549.
102. Iida Y. Mechanisms of cerebral arterial relaxations to hydrogen peroxide / Iida Y., Katusic Z.S., Wei E.P. // Stroke - 2000. - T. 31 - № 9 - C.2224-2230.
103. Cai H. Akt-Dependent Phosphorylation of Serine 1179 and Mitogen-
Activated Protein Kinase Kinase/Extracellular Signal-Regulated Kinase 1/2 Cooperatively Mediate Activation of the Endothelial Nitric-Oxide Synthase by Hydrogen Peroxide / Cai H., Li Z., Davis M.E., Kanner W., Harrison D.G., Dudley S.C. // Molecular Pharmacology - 2003. - T. 63 - № 2 - C.325 LP -331.
104. Thomas S.R. Hydrogen peroxide activates endothelial nitric-oxide synthase through coordinated phosphorylation and dephosphorylation via a phosphoinositide 3-kinase-dependent signaling pathway / Thomas S.R., Chen K., Keaney J.F. // Journal of Biological Chemistry - 2002. - T. 277 - № 8 -C.6017-6024.
105. Searles C.D. Transcriptional and posttranscriptional regulation of endothelial nitric oxide synthase expression / Searles C.D. // American Journal of Physiology - Cell Physiology - 2006. - T. 291 - № 5 - C.347-354.
106. Burgoyne J.R. Cysteine Redox Sensor in PKGIa Enables Oxidant-Induced Activation / Burgoyne J.R., Madhani M., Cuello F., Charles R.L., Brennan J.P., Schröder E., Browning D.D., Eaton P. // Science - 2007. - T. 317 - № 5843 -C.1393 LP - 1397.
107. Dikalov, Sergey I., Anna E. Dikalova., Alfiya T. Bikineyeva., Harald H.H.W. Schmidt., David G. Harrison. K.K.G. Distinct Roles of Nox1 and Nox4 in Basal and Angiotensin II- Stimulated Superoxide and Hydrogen Peroxide Production Sergey / Dikalov, Sergey I., Anna E. Dikalova., Alfiya T. Bikineyeva., Harald H.H.W. Schmidt., David G. Harrison. K.K.G. // Free Radic Biol Med. - 2008. - T. 45 - № 9 - C.1340-1351.
108. Schoonbroodt S. Crucial Role of the Amino-Terminal Tyrosine Residue 42 and the Carboxyl-Terminal PEST Domain of iKBa in NF-kB Activation by an Oxidative Stress / Schoonbroodt S., Ferreira V., Best-Belpomme M., Boelaert J.R., Legrand-Poels S., Korner M., Piette J. // The Journal of Immunology -2000. - T. 164 - № 8 - C.4292-4300.
109. Chen X.-L. Rac1 and Superoxide Are Required for the Expression of Cell
Adhesion Molecules Induced by Tumor Necrosis Factor-a in Endothelial Cells / Chen X.-L., Zhang Q., Zhao R., Ding X., Tummala P.E., Medford R.M. // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics - 2003. - T. 305 - № 2 - C.573 LP - 580.
110. Park H.S. Role of NADPH oxidase 4 in lipopolysaccharide-induced proinflammatory responses by human aortic endothelial cells / Park H.S., Chun J.N., Jung H.Y., Choi C., Bae Y.S. // Cardiovascular Research - 2006. - T. 72 -№ 3 - C.447-455.
111. Cook-Mills J.M. Hydrogen peroxide activation of endothelial cell-associated MMPS during VCAM-1-dependent leukocyte migration / Cook-Mills J.M. // Cellular and Molecular Biology - 2006. - T. 52 - № 4 - C.8-16.
112. Oshikawa J. Extracellular SOD-derived H2O2 promotes VEGF signaling in caveolae/lipid rafts and post-ischemic angiogenesis in mice / Oshikawa J., Urao N., Kim H.W., Kaplan N., Razvi M., McKinney R., Poole L.B., Fukai T., VEGFR-2 A. // PLoS ONE - 2010. - T. 5 - № 4.
113. Urao N. Critical Role of Endothelial Hydrogen Peroxide in Post-Ischemic Neovascularization / Urao N., Sudhahar V., Kim S.J., Chen G.F., McKinney R.D., Kojda G., Fukai T., Ushio-Fukai M. // PLoS ONE - 2013. - T. 8 - № 3.
114. Craige S.M. NADPH oxidase 4 promotes endothelial angiogenesis through eNOS activation / Craige S.M., Kai C., Pei Y., Chunying L., Xiaoyun H., Christine C., Shibata R., Sato K., Walsh K., Keaney J.F. // Circulation - 2011. -T. 124 - № 6 - C.731-740.
115. Chu Chang Chua, Ronald C. Hamdy B.H.L.C. Upregulation of vascular endothelial growth factor by H2O2 in rat heart endothelial cells / Chu Chang Chua, Ronald C. Hamdy B.H.L.C. // Free Radical Biology and Medicine -1998. - T. 25 - № 8 - C.891-897.
116. Abid M.R. Vascular endothelial growth factor induces manganese-superoxide dismutase expression in endothelial cells by a Rac1-regulated NADPH oxidase-dependent mechanism. / Abid M.R., Tsai J.C., Spokes K.C.,
Deshpande S.S., Irani K., Aird W.C. // The FASEB journal: official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology - 2001. - T. 15 - № 13 - C.2548-2550.
117. Nieves García-Quintans, Ignacio Prieto, Cristina Sánchez-Ramos, Alfonso Luque, Elvira Arza, Yolanda Olmos M.M. Regulation of endothelial dynamics by PGC-1a relies on ROS control of VEGF-A signaling / Nieves García-Quintans, Ignacio Prieto, Cristina Sánchez-Ramos, Alfonso Luque, Elvira Arza, Yolanda Olmos M.M. // Free Radical Biology and Medicine - 2016. - T. 93 -C.41-51.
118. Peshavariya H. NADPH oxidase isoform selective regulation of endothelial cell proliferation and survival / Peshavariya H., Dusting G.J., Jiang F., Halmos L.R., Sobey C.G., Drummond G.R., Selemidis S. // Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology - 2009. - T. 380 - № 2 - C.193-204.
119. Chen K. Regulation of ROS signal transduction by NADPH oxidase 4 localization / Chen K., Kirber M.T., Xiao H., Yang Y., Keaney J.F. // Journal of Cell Biology - 2008. - T. 181 - № 7 - C.1129-1139.
120. Maggiorani D. Monoamine Oxidases, Oxidative Stress, and Altered Mitochondrial Dynamics in Cardiac Ageing / Maggiorani D., Manzella N., Edmondson D.E., Mattevi A., Parini A., Binda C., Mialet-Perez J. // Oxidative Medicine and Cellular Longevity - 2017. - T. 2017 - № 3.
121. Muma N.A. Serotonylation and Transamidation of Other Monoamines / Muma N.A., Mi Z. // ACS Chemical Neuroscience - 2015. - T. 6 - № 7 -C.961-969.
122. Daniel Hoyer, Jason P Hannon G.R.M. Molecular, pharmacological and functional diversity of 5-HT receptors / Daniel Hoyer, Jason P Hannon G.R.M. // Pharmacology Biochemistry and Behavior - 2002. - T. 71 - № 4 - C.533-554.
123. John R. Raymond, Yurii V. Mukhin, Andrew Gelasco, Justin Turner,
Georgiann Collinsworth, Thomas W. Gettys, Jasjit S. Grewal M.N.G. Multiplicity of mechanisms of serotonin receptor signal transduction / John R. Raymond, Yurii V. Mukhin, Andrew Gelasco, Justin Turner, Georgiann Collinsworth, Thomas W. Gettys, Jasjit S. Grewal M.N.G. // Pharmacology & Therapeutics - 2001. - T. 92 - № 2-3 - C.179-212.
124. Alberto J. Kaumann F.O.L. 5-Hydroxytryptamine receptors in the human cardiovascular system / Alberto J. Kaumann F.O.L. // Pharmacology & Therapeutics - 2006. - T. 111 - № 3 - C.674-706.
125. Ishida T. Nitric oxide is produced via 5-HT1B and 5-HT2B receptor activation in human coronary artery endothelial cells / Ishida T., Kawashima S., Hirata K., Yokoyama M. // The Kobe journal of medical sciences - 1998. - T. 44 - № 2 - C.51—63.
126. F. De Clerck, B. Xhonneux, J. Leysen P.A.J.J. Evidence for functional 5-HT2 receptor sites on human blood platelets / F. De Clerck, B. Xhonneux, J. Leysen P.A.J.J. // Biochemical Pharmacology - 1984. - T. 33 - № 17 -C.2807-2811.
127. Bard J.A. Cloning of a Novel Human Serotonin Receptor (5-HT7) Positively Linked to Adenylate Cycla / Bard J.A., Zgombick J., Adham N., Vaysse P., Branchek T.A., Weinshank R.L. // THE JOURNAL OF BIOWCICAL CHEMISTR - 1993. - T. 268 - № 31 - C.23422-23426.
128. Bruheim S. Unaltered agonist potency upon inducible 5-HT7(a) but not 5-HT4(b) receptor expression indicates agonist-independent association of 5-HT7(a) receptor and Gs / Bruheim S., Krobert K.A., Andressen K.W., Levy F.O. // Receptors & channels - 2003. - T. 9 - № 2 - C.107—116.
129. Andressen K.W. Activation of Adenylyl Cyclase by Endogenous Gs-Coupled Receptors in Human Embryonic Kidney 293 Cells Is Attenuated by 5-HT7 Receptor Expression / Andressen K.W., Norum J.H., Levy F.O., Krobert K.A. // Molecular Pharmacology - 2006. - T. 69 - № 1 - C.207 LP - 215.
130. Côté F. Disruption of the nonneuronal tph1 gene demonstrates the
importance of peripheral serotonin in cardiac function / Côté F., Thévenot E., Fligny C., Fromes Y., Darmon M., Ripoche M.A., Bayard E., Hanoun N., Saurini F., Lechat P., Dandolo L., Hamon M., Mallet J., Vodjdani G. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America - 2003. - T. 100 - № 23 - C.13525-13530.
131. Nebigil C.G. Serotonin 2B receptor is required for heart development / Nebigil C.G., Choi D.S., Dierich A., Hickel P., Meur M. Le, Messaddeq N., Launay J.M., Maroteaux L. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America - 2000. - T. 97 - № 17 - C.9508-9513.
132. Nebigil C.G. 5-hydroxytryptamine 2B receptor regulates cell-cycle progression: Cross-talk with tyrosine kinase pathways / Nebigil C.G., Launay J.M., Hickel P., Tournois C., Maroteaux L. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America - 2000. - T. 97 - № 6 -C.2591-2596.
133. Nebigil C.G. Serotonin is a novel survival factor of cardiomyocytes: mitochondria as a target of 5-HT2B receptor signaling. / Nebigil C.G., Etienne N., Messaddeq N., Maroteaux L. // The FASEB journal : official publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology - 2003. - T. 17
- № 10 - C.1373-1375.
134. Kaumann A.J. Variable participation of 5-HT1-like receptors and 5-HT2 receptors in serotonin-induced contraction of human isolated coronary arteries: 5-HT1- like receptors resemble cloned 5-HT(1DP) receptors / Kaumann A.J., Frenken M., Posival H., Brown A.M. // Circulation - 1994. - T. 90 - № 3 -C.1141-1153.
135. Verheggen R. Functional 5-HT receptors in human occipital artery / Verheggen R., Meier A., Werner I., Wienekamp A., Kruschat T., Brattelid T., Levy F.O., Kaumann A. // Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology
- 2004. - T. 369 - № 4 - C.391-401.
136. Karlsson C. 5-Hydroxytryptamine contracts human uterine artery smooth
muscle predominantly via 5-HT2 receptors / Karlsson C., Bodelsson G., Bodelsson M., Stjernquist M. // Human Reproduction - 1997. - T. 12 - № 2 -C.361-367.
137. Hamel E. Expression of mRNA for the serotonin 5-hydroxytryptamine(1Dß) receptor subtype in human and bovine cerebral arteries / Hamel E., Fan E., Linville D., Ting V., Villemure J.G., Chia L.S. // Molecular Pharmacology - 1993. - T. 44 - № 2 - C.242-246.
138. Elhusseiny A. Sumatriptan elicits both constriction and dilation in human and bovine brain intracortical arterioles / Elhusseiny A., Hamel E. // British Journal of Pharmacology - 2001. - T. 132 - № 1 - C.55-62.
139. Schoeffter P. Functional, endogenously expressed 5-hydroxytryptamine 5-ht7 receptors in human vascular smooth muscle cells / Schoeffter P., Ullmer C., Bobirnac I., Gabbiani G., Lübbert H. // British Journal of Pharmacology - 1996. - T. 117 - № 6 - C.993-994.
140. Ullmer C. 5-HT2B receptor-mediated calcium release from ryanodine-sensitive intracellular stores in human pulmonary artery endothelial cells / Ullmer C., Boddeke H.G.W.M., Schmuck K., Lübbert H. // British Journal of Pharmacology - 1996. - T. 117 - № 6 - C.1081-1088.
141. Glusa E. Further evidence that 5-HT-induced relaxation of pig pulmonary artery is mediated by endothelial 5-HT(2B) receptors / Glusa E., Pertz H.H. // British Journal of Pharmacology - 2000. - T. 130 - № 3 - C.692-698.
142. Hood K.Y. Serotonin Signaling Through the 5-HT1B Receptor and NADPH Oxidase 1 in Pulmonary Arterial Hypertension / Hood K.Y., Mair K.M., Harvey A.P., Montezano A.C., Touyz R.M., MacLean M.R. // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology - 2017. - T. 37 - № 7 -C.1361-1370.
143. Matsumoto T. VEGF Receptor Signal Transduction / Matsumoto T., Claesson-Welsh L. // Science's STKE - 2001. - T. 2001 - № 112 -C.re21 LP-re21.
144. Kim Y.M. ROS-induced ROS release orchestrated by Nox4, Nox2, and mitochondria in VEGF signaling and angiogenesis / Kim Y.M., Kim S.J., Tatsunami R., Yamamura H., Fukai T., Fukai M.U. // American Journal of Physiology - Cell Physiology - 2017. - T. 312 - № 6 - C.C749-C764.
145. Kenji Matsushita, Munekazu Yamakuchi, Craig N. Morrell, Michitaka Ozaki, Brian O'Rourke, Kaikobad Irani and C.J.L. Vascular endothelial growth factor regulation of Weibel-Palade— body exocytosis / Kenji Matsushita, Munekazu Yamakuchi, Craig N. Morrell, Michitaka Ozaki, Brian O'Rourke, Kaikobad Irani and C.J.L. // Blood - 2005. - T. 105 - № 1 - C.207-214.
146. Matsushita K. Nitric Oxide Regulates Exocytosis by S-Nitrosylation of N-ethylmaleimide-Sensitive Factor / Matsushita K., Morrell C.N., Cambien B., Yang S., Bao C., Hara M.R., Quick R.A., Cao W., Rourke O., Lowenstein J.M., Pevsner J., Wagner D.D., Charles J. // Cell. - 2003. - T. 115 - № 2 - C.139-150.
147. Meeteren L.A. Van Regulation of endothelial cell plasticity by TGF-ß / Meeteren L.A. Van, Dijke P. Ten // Cell and Tissue Research - 2012. - T. 347 -№ 1 - C.177-186.
148. Goumans M.J. Balancing the activation state of the endothelium via two distinct TGF-ß type I receptors / Goumans M.J., Valdimarsdottir G., Itoh S., Rosendahl A., Sideras P., Dijke P. Ten // EMBO Journal - 2002. - T. 21 - № 7 - C.1743-1753.
149. Wong S.H. Endoglin expression on human microvascular endothelial cells association with betaglycan and formation of higher order complexes with TGF-ß signalling receptors / Wong S.H., Hamel L., Chevalier S., Philip A. // European Journal of Biochemistry - 2000. - T. 267 - № 17 - C.5550-5560.
150. Moustakas A. The regulation of TGFß signal transduction / Moustakas A., Heldin C.H. // Development - 2009. - T. 136 - № 22 - C.3699-3714.
151. Itoh S. Negative regulation of TGF-ß receptor/Smad signal transduction / Itoh S., Dijke P. ten // Current Opinion in Cell Biology - 2007. - T. 19 - № 2 -
C.176-184.
152. Goumans M.J. Activin receptor-like kinase (ALK)1 is an antagonistic mediator of lateral TGFß/ALK5 signaling / Goumans M.J., Valdimarsdottir G., Itoh S., Lebrin F., Larsson J., Mummery C., Karlsson S., Dijke P. Ten // Molecular Cell - 2003. - T. 12 - № 4 - C.817-828.
153. Peter J Wermuth, Kellan R Carney, Fabian A Mendoza, Sonsoles Piera-Velazquez S.A.J. Endothelial cell-specific activation of transforming growth factor-ß signaling in mice induces cutaneous, visceral, and microvascular fibrosis / Peter J Wermuth, Kellan R Carney, Fabian A Mendoza, Sonsoles Piera-Velazquez S.A.J. // Lab Invest. - 2017. - T. 97 - № 7 - C.806-818.
154. Negro A. TGF-ß signaling mediates endothelial to mesenchymal transition (EndMT) during vein graft remodeling / Negro A., Fang F., Chen G., San H., Walts A.D., Robin L., Taylor B., Lanzer J.D., Wragg A., Elagha A., Beltran L.E., Berry C., Feil R., Virmani R., Ladich E., Jason C., Boehm M. // Science Translational Medicine - 2014. - T. 6 - № 227 - C. 1-22.
155. Ishikawa F. A mitochondrial thioredoxin-sensitive mechanism regulates TGF-ß-mediated gene expression associated with epithelial-mesenchymal transition / Ishikawa F., Kaneko E., Sugimoto T., Ishijima T., Wakamatsu M., Yuasa A., Sampei R., Mori K., Nose K., Shibanuma M. // Biochemical and Biophysical Research Communications - 2014. - T. 443 - № 3 - C.821-827.
156. Liu R.M. Reciprocal regulation of TGF-ß and reactive oxygen species: A perverse cycle for fibrosis / Liu R.M., Desai L.P. // Redox Biology - 2015. - T. 6 - C.565-577.
157. Thannickal V.J. Enhanced rate of H2O2 release from bovine pulmonary artery endothelial cells induced by TGF-beta 1. / Thannickal V.J., Hassoun P.M., White A.C., Fanburg B.L. // The American journal of physiology - 1993. - T. 265 - № 6 Pt 1 - C.L622-6.
158. Hu T. Reactive oxygen species production via NADPH oxidase mediates TGF-ß-induced cytoskeletal alterations in endothelial cells / Hu T.,
RamachandraRao S.P., Siva S., Valancius C., Zhu Y., Mahadev K., Toh I., Goldstein B.J., Woolkalis M., Sharma K. // American Journal of Physiology -Renal Physiology - 2005. - T. 289 - № 4 58-4 - C.816-825.
159. Boustani M.R. Transforming growth factor B1 decreases uptake of glutathione precursor amino acids in bovine pulmonary artery endothelial cells. / Boustani M.R., Hertig I.A., Maloney E.K., Fanburg B.L., White A.C. // Endothelium: journal of endothelial cell research - 1997. - T. 5 - № 1 - C.1-10.
160. Goldblum S.E. Tumor necrosis factor alpha-induced pulmonary vascular endothelial injury. / Goldblum S.E., Hennig B., Jay M., Yoneda K., McClain C.J. // Infection and Immunity - 1989. - T. 57 - № 4 - C.1218 LP - 1226.
161. Bertok S. Characterization of TNF receptor subtype expression and signaling on pulmonary endothelial cells in mice / Bertok S., Wilson M.R., Dorr A.D., Dokpesi J.O., O'Dea K.P., Marczin N., Takata M. // American journal of physiology. Lung cellular and molecular physiology - 2011. - T. 300 - № 5 -C.L781-L789.
162. Chen X. Role of Reactive Oxygen Species in Tumor Necrosis Factor-alpha Induced Endothelial Dysfunction / Chen X., Andresen B., Hill M., Zhang J., Booth F., Zhang C. // Current Hypertension Reviews - 2008. - T. 4 - № 4 -C.245-255.
163. Muzaffar S. Nitroaspirins and morpholinosydnonimine but not aspirin inhibit the formation of superoxide and the expression of gp91phox induced by endotoxin and cytokines in pig pulmonary artery vascular smooth muscle cells and endothelial cells / Muzaffar S., Shukla N., Angelini G., Jeremy J.Y. // Circulation - 2004. - T. 110 - № 9 - C.1140-1147.
164. Schulze-Osthoff K. Cytotoxic activity of tumor necrosis factor is mediated by early damage of mitochondrial functions. Evidence for the involvement of mitochondrial radical generation / Schulze-Osthoff K., Bakker A.C., Vanhaesebroeck B., Beyaert R., Jacob W.A., Fiers W. // Journal of Biological
Chemistry - 1992. - Т. 267 - № 8 - С.5317-5323.
165. Poll T. van der Tumor Necrosis Factor Induces von Willebrand Factor Release in Healthy Humans / Poll T. van der, Deventer S.J.H. van, Pasterkamp G., Mourik J.A. van, Buller H.R., Cate J.W. ten // Thromb Haemost - 1992. -Т. 67 - № 06 - С.623-626.
166. Li Y. Plasma von Willebrand factor level is transiently elevated in a rat model of acute myocardial infarction / Li Y., Li L., Dong F., Guo L., Hou Y., Hu H., Yan S., Zhou X., Liao L., Allen T.D., Liu J. // Experimental and Therapeutic Medicine - 2015. - Т. 10 - № 5 - С.1743-1749.
167. Maciag T. An endothelial cell growth factor from bovine hypothalamus: identification and partial characterization. / Maciag T., Cerundolo J., Ilsley S., Kelley P.R., Forand R. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America - 1979. - Т. 76 - № 11 - С.5674-8.
168. Bray M.A. Using Cellprofiler for automatic identification and measurement of biological objects in images / Bray M.A., Vokes M.S., Carpenter A.E. // Current Protocols in Molecular Biology - 2015. - Т. 2015 -№ January - С.14.17.1-14.17.13.
169. Авдонин П.В., Цитрина А.А., Миронова Г.Ю., Авдонин П.П., Жарких И.Л., Надеев А.Д. Г.Н.В. Пероксид водорода стимулирует экзоцитоз фактора Виллебранда эндотелиальными клетками пупочной вены человека / Авдонин П.В., Цитрина А.А., Миронова Г.Ю., Авдонин П.П., Жарких И.Л., Надеев А.Д. Г.Н.В. // Известия академии наук. Серия биологическая. - 2017. - Т. 5 - С.549-556.
170. Кудрявцев И.В. Зинченко В.П. Серебрякова М.К. Надеев А.Д. Гончаров Н.В. Авдонин П.В. Терпиловский ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ МОЩНОСТЬ ПЕРОКСИДА ВОДОРОДА ПО ОТНОШЕНИЮ К ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫМ КЛЕТКАМ IN VITRO / Кудрявцев И.В. Зинченко В.П. Серебрякова М.К. Надеев А.Д. Гончаров Н.В. Авдонин П.В. Терпиловский // Биологические мембраны: Журнал мембранной и
клеточной биологии - 2018. - Т. 35 - № 1 - С.16-26.
171. Moreno J.M. Mechanisms of Hydrogen Peroxide-Induced Vasoconstriction / Moreno J.M., Gomez I.R., Wangensteen R., Duarte J., Osuna A., Vargas F., Jaen D., Nefrologia S. De, Experimental U. - 2010. - № 24 -С.325-332.
172. Forman H.J. What is the concentration of hydrogen peroxide in blood and plasma? / Forman H.J., Bernardo A., Davies K.J.A. // Archives of Biochemistry and Biophysics - 2016. - Т. 603 - С.48-53.
173. Krizhevsky A. ImageNet Classification with Deep Convolutional Neural Networks / под ред. F. Pereira, C.J.C. Burges, L. Bottou, K.Q. Weinberger. Curran Associates, Inc., 2012. - 1097-1105с.
174. Mcquin C. CellProfiler 3.0: Next-generation image processing for biology Claire / Mcquin C., Goodman A., Chernyshev V., Kamentsky L., Cimini A., Karhohs K.W., Doan M., Ding L., Rafelski S.M., Thirstrup D., Wiegraebe W., Singh S., Becker T., Caicedo J.C., Carpenter A.E. // PLoS Biol - 2018. - Т. 6 -№ 7 - C.e2005970.
175. K.M. Valentijn, J.A. Valentijn, K.A. Jansen A.J.K. A new look at Weibel-Palade body structure in endothelial cells using electron tomography, / K.M. Valentijn, J.A. Valentijn, K.A. Jansen A.J.K. // Journal of Structural Biology -2008. - Т. 161 - № 3 - С.447-458.
176. Groeneveld D.J. Storage and secretion of naturally occurring von Willebrand factor A domain variants / Groeneveld D.J., Wang J.W., Mourik M.J., Dirven R.J., Valentijn K.M., Voorberg J., Reitsma P.H., Eikenboom J. // British Journal of Haematology - 2014. - Т. 167 - № 4 - С.529-540.
177. Marjon J. Mourik, Frank G.A. Faas, Karine M. Valentijn, Jack A. Valentijn, Jeroen C. Eikenboom A.J.K. Correlative Light Microscopy and Electron Tomography to Study Von Willebrand Factor Exocytosis from Vascular Endothelial Cells / Marjon J. Mourik, Frank G.A. Faas, Karine M. Valentijn, Jack A. Valentijn, Jeroen C. Eikenboom A.J.K. // Methods in Cell
Biology - 2014. - Т. 124 - С.71-92.
178. Pratico D. Hydrogen peroxide triggers activation of human platelets selectively exposed to nonaggregating concentrations of arachidonic acid and collagen / Pratico D., Iuliano L., Pulcinelli F.M., Bonavita M.S., Gazzaniga P.P., Violi F. // The Journal of laboratory and clinical medicine - 1992. - Т. 119 - № 4 - С.364—370.
179. Sanjana Dayal, Katina M. Wilson, David G. Motto, Francis J. Miller Jr, Anil K. Chauhan S.R.L. Hydrogen Peroxide Promotes Aging-Related Platelet Hyperactivation and Thrombosis / Sanjana Dayal, Katina M. Wilson, David G. Motto, Francis J. Miller Jr, Anil K. Chauhan S.R.L. // Circulation - 2013. - Т. 127 - № 12 - С.1308-1316.
180. Leoncini G. Increased hydrogen peroxide formation in platelets of patients affected with essential thrombocythaemia (ET) / Leoncini G., Maresca M., Colao C., Piana A., Armani U. // Blood Coagulation & Fibrinolysis - 1992. - Т. 3 - № 3.
181. Alessandro Finazzi-Agro, Adriana Menichelli, Mauro Persiani, Giuseppino Biancini D.D.P. Hydrogen peroxide release from human blood platelets / Alessandro Finazzi-Agro, Adriana Menichelli, Mauro Persiani, Giuseppino Biancini D.D.P. // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - General Subjects -1982. - Т. 718 - № 1 - С.21-25.
182. Avdonin P. V Hydrogen peroxide stimulates exocytosis of von Willebrand factor in human umbilical vein endothelial cells / Avdonin P. V, Tsitrina A.A., Mironova G.Y., Avdonin P.P., Zharkikh I.L., Nadeev A.D., Goncharov N. V // Biology Bulletin - 2017. - Т. 44 - № 5 - С.531-537.
183. Panula P. International union of basic and clinical pharmacology. XCVIII. histamine receptors / Panula P., Chazot P.L., Cowart M., Gutzmer R., Leurs R., Liu W.L.S., Stark H., Thurmond R.L., Haas H.L. // Pharmacological Reviews -2015. - Т. 67 - № 3 - С.601-655.
184. Silke Beermann, Guenther Bernhardt, Roland Seifert, Armin Buschauer
D.N. Histamine H1- and H4-receptor signaling cooperatively regulate MAPK activation / Silke Beermann, Guenther Bernhardt, Roland Seifert, Armin Buschauer D.N. // Biochemical Pharmacology - 2015. - T. 98 - № 3 - C.432-439.
185. Monczor F. Current knowledge and perspectives on histamine H1 and H2 receptor pharmacology: Functional selectivity, receptor crosstalk, and repositioning of classic histaminergic ligands / Monczor F., Fernandez N. // Molecular Pharmacology - 2016. - T. 90 - № 5 - C.640-648.
186. Mitsuhashi M. Multiple signaling pathways of histamine H2 receptors / Mitsuhashi M., Payan D.G. // Agents and Actions - 1991. - T. 33 - № SUPPL.
- C.289-294.
187. Rocha S.M. Histamine induces microglia activation and dopaminergic neuronal toxicity via H1 receptor activation / Rocha S.M., Saraiva T., Cristovao A.C., Ferreira R., Santos T., Esteves M., Saraiva C., Je G., Cortes L., Valero J., Alves G., Klibanov A., Kim Y.S., Bernardino L. // Journal of Neuroinflammation - 2016. - T. 13 - № 1 - C.1-16.
188. Avdonin P. VAS2870 Inhibits Histamine-Induced Calcium Signaling and vWF Secretion in Human Umbilical Vein Endothelial Cells / Avdonin P., Rybakova E., Avdonin P., Trufanov S., Mironova G., Tsitrina A., Goncharov N. // Cells - 2019. - T. 8 - № 2 - C.196.
189. Palmer D.S. Adenosine nucleotides and serotonin stimulate von Willebrand factor release from cultured human endothelial cells / Palmer D.S., Aye M.T., Ganz P.R., Halpenny M., Hashemi S. // Thrombosis and haemostasis
- 1994. - T. 72 - № 1 - C. 132—139.
190. Koppenol H. Nitric oxide, superoxide, and peroxynitrite: the good, the bad, and the ugly / Koppenol H., Koppenol H. // Am J Physiol - 1996. - T. 271 - № Cell Physiol. 40 - C.1424-37.
191. Behzadian M.A. TGF-ß increases retinal endothelial cell permeability by increasing MMP-9: Possible role of glial cells in endothelial barrier function /
ПРИЛОЖЕНИЕ А
РББ Гистамин
Количество Минимум 0 0
ФВ- 25 процентиль 8 14
позитивных Медиана 14 21
структур 75 процентиль 20 29
Максимум 40 58
Краевая Минимум 1.78 4.678
интегральная 25 процентиль 16.24 26.73
интенсивность Медиана 20.83 33.27
ФВ 75 процентиль 26.53 40.96
Максимум 44.23 68.35
Интегральная Минимум 8.467 27.46
интенсивность 25 процентиль 131.7 229.7
клетки по ФВ Медиана 171.7 290.4
75 процентиль 217.1 357.8
Максимум 378.5 622.5
РББ Гистамин
Интегральная Минимум 0.21 0.28
интенсивность 25 процентиль 0.75 1.76
ФВ-позитивной Медиана 1.29 2.09
структуры 75 процентиль 2.26 3.71
Максимум 4.57 7.58
РББ Гистамин Н2О2
Количество Минимум 0 0 0
ФВ- 25 процентиль 1. 3.3 3
позитивных Медиана 3 5.5 5.3
структур 75 процентиль 5 7.7 8
Максимум 16 19 23
Краевая Минимум 21,6 30,69 26.31
интегральная 25 процентиль 40.51 47.27 48.76
интенсивность Медиана 45.44 52.36 54.02
ФВ 75 процентиль 50.7 58.15 60.64
Максимум 68.92 77.55 82.08
Интегральная Минимум 105.1 72.3 114.6
интенсивность 25 процентиль 340.9 400 420.2
клетки по ФВ Медиана 394.6 461.4 489.4
75 процентиль 458 533.4 564.2
Максимум 784.1 899.9 1031
Основные статистические характеристики распределения ФВ-позитивных структур при стимуляции 100 мкМ гистаминаи 100 мкМ Н2О2.
РББ Гистамин Н2О2
Интегральная Минимум 0.67 0.843 0.859
интенсивность 25 процентиль 1.59 1.98 2,2
ФВ-позитивной Медиана 2.165 2.694 2.91
структуры 75 процентиль 2.84 3.56 3.77
Максимум 5.71 7.38 7.87
РББ Гистамин УЛБ Гист. +УЛБ
Количество Минимум 0 0 0 0
ФВ- 25 процентиль 3 11 2.5 7.5
позитивных Медиана 6 17.3 7 14.5
структур 75 процентиль 11.3 24.7 14 23
Максимум 22.3 49 27 45.5
Краевая Минимум 10.15 11.26 8.38 9.76
интегральная 25 процентиль 17.04 19.46 15.48 19.16
интенсивность Медиана 18.71 21.62 17.44 21.61
ФВ 75 процентиль 20.44 23.9 19.46 24.19
Максимум 26.96 33.16 26.62 33.96
Интегральная Минимум 155.5 165.3 120.8 143.3
интенсивность 25 процентиль 292.3 315.1 263 312.3
клетки по ФВ Медиана 340 370.1 321.3 375.6
75 процентиль 392.7 433.7 388.7 455.1
Максимум 576.9 667.8 595.7 703.4
РББ Гистамин УЛБ Гист. +УЛБ
Интегральная Минимум 0.59 0.53 0.34 0.6
интенсивность 25 процентиль 1.87 2.44 1 2.05
ФВ-позитивной Медиана 2.57 3.44 1.56 3.1
структуры 75 процентиль 3.48 4.8 2.36 4.54
Максимум 5.99 8.46 4.32 8.25
5м§О Б^30 БШ00
Минимум 0 0 0
Количество ФВ- 25 процентиль 8 10 9
позитивных Медиана 14 15 15
структур 75 процентиль 20 22 23
Максимум 40 42 44
Минимум 1,78 5.52 2.82
Краевая 25 процентиль 16.24 17.15 15.71
интегральная Медиана 20.83 21.5 20.2
интенсивность ФВ 75 процентиль 26.53 26.85 25.9
Максимум 44.23 43.44 43.08
Минимум 8.47 51.65 22.44
Интегральная 25 процентиль 131.7 160.4 152.5
интенсивность Медиана 171.7 199.7 198.5
клетки по ФВ 75 процентиль 217.1 250.5 254.5
Максимум 378.5 411.8 430.1
DMSO BW30 BW100
Минимум 0.21 0.28 0.34
25 процентиль 0.75 0.95 0.88
Медиана 1.29 1.64 1.52
75 процентиль 2.25 2.87 2.68
Максимум 4.57 5.79 5.43
Интегральная интенсивность ФВ-позитивной структуры
ЭМБО СОБ
Количество ФВ- Минимум 0 0
позитивных 25 процентиль 7 15
структур Медиана 13 24
75 процентиль 22 35
Максимум 47 70
Краевая Минимум 0 3.26
интегральная 25 процентиль 19.54 21.21
интенсивность Медиана 24.47 26.56
ФВ 75 процентиль 30.78 32.92
Максимум 50.05 54.27
Интегральная Минимум 0 14.45
интенсивность 25 процентиль 220.5 197.2
клетки по ФВ Медиана 284.3 259.9
75 процентиль 357.7 329.1
Максимум
617.3
587.6
позитивных структур при стимуляцииагонистом 5-НТ1В рецептора
БМБО СОБ
Интегральная Минимум 0,3686 0,3843
интенсивность 25 процентиль 0,9569 1,102
ФВ-позитивной Медиана 1,651 1,929
структуры 75 процентиль 2,890 3,369
Максимум 5,890 6,714
РББ таБ-р ТОТ-а УЕОБ
Количество Минимум 0 0 0 0
ФВ- 25 процентиль 4.5 4 4.3 4
позитивных Медиана 9.5 7 7.3 6.3
структур 75 процентиль 16.5 11.5 11.7 9.7
Максимум 34 22 23 24
Краевая Минимум 10.56 13.78 17.02 17.68
интегральная 25 процентиль 31.4 32.04 35.01 35.64
интенсивность Медиана 37.37 39.9 41.28 41.27
ФВ 75 процентиль 44.9 4912 47.61 47.29
Максимум 77.57 90.73 80.32 73.89
Интегральная Минимум 43.8 88.8 101 129
интенсивность 25 процентиль 272 231 257 267
клетки по ФВ Медиана 325 285 307 314
75 процентиль 387 351 361 367
Максимум 1149 754 802 773
РББ таБ-р ТОТ-а УБОБ
Количество Минимум 0 0 0 0
ФВ- 25 процентиль 8.7 5.7 6 9
позитивных Медиана 13.3 9.7 9 13.3
структур 75 процентиль 19.3 14.3 12.7 18
Максимум 35 28 24 33
Краевая Минимум 14.87 17.02 16.7 19.26
интегральная 25 процентиль 35.35 35.01 37.42 44.81
интенсивность Медиана 41.64 41.28 42.78 51.09
ФВ 75 процентиль 48.25 47.61 49.14 58.01
Максимум 81.79 80.32 91.67 100.2
Интегральная Минимум 103 103 127 126
интенсивность 25 процентиль 290 261 294 340
клетки по ФВ Медиана 338 311 349 399
75 процентиль 396 371 411 464
Максимум 735 806 815 977
РББ ТОБ-Р ЮТ-а УЕОБ
Интегральная Минимум 0.11 0.158 0.133 0.165
интенсивность 25 процентиль 0.577 0.817 0.967 1.16
ФВ-позитивной Медиана 1.078 1.328 1.578 1.85
структуры 75 процентиль 1.796 2.05 2.38 2.75
Максимум 3.614 3.933 4.621 5.204
Основные статистические характеристики распределения ФВ-позитивных структур при стимуляции факторами роста, 60 мин.
РББ ТОБ-Р ЮТ-а УЕОБ
Интегральная Минимум 0.137 0.145 0.194 0.196
интенсивность 25 процентиль 0.982 1.02 1.579 1.759
ФВ-позитивной Медиана 1.578 1.574 2.44 2.759
структуры 75 процентиль 2.35 2.297 3.575 4.178
Максимум 4.52 4.328 6.763 7.965
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.