Разработка биологически активной добавки на основе пробиотических культур, лизоцима и лактоферрина для обогащения молочной продукции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.18.07, кандидат наук Рогожина, Татьяна Николаевна

• Рогожина, Татьяна Николаевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Рогожина, Татьяна Николаевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1 .СИСТЕМНЫЙ АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ ПРОБЛЕМЫ

1.1. Анализ рынка функциональных продуктов питания

1.2. Биологически активные белки молока

1.2.1. Краткая характеристика биологически активных белков молока

1.2.2. Факторы, влияющие на биологически активные белки при производстве молочных продуктов

1.3. Пробиотические микроорганизмы

1.3.1. Микроорганизмы, используемые в продуктах питания

1.3.2. Продукты жизнедеятельности пробиотических микроорганизмов

1.4. Перспективные пути получения молочных продуктов, обогащенных функциональными компонентами

1.4.1. Применение микрокапсулированной формы пробиотических микроорганизмов

1.4.2. Совместное применение компонентов, обладающих функциональными свойствами, в технологии молочной продукции

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Препаративные методы

2.2.2 Аналитические методы

2.2.3. Микробиологические методы исследования

2.2.4. Биохимические методы

2.2.5. Определение органолептических показателей

2.2.6. Приготовление питательных сред и реактивов для проведения исследований

2.2.7. Математическая обработка экспериментальных данных

3. ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КУЛЬТУР С ЛИЗОЦИМОМ

3.1. Контроль технологических свойств штаммов

3.2 Исследование пробиотических свойств нового штамма L.acidophilus 887

3.3 Изучение влияния лизоцима на пробиотические культуры

3.3.1 Определение оптической плотности питательной среды при развитии пробиотических культур

3.3.2 Определение влияния лизоцима на развитие штаммов пробиотических культур на среде MRS

3.3.3 Определение влияния лизоцима на развитие штаммов пробиотических молочнокислых палочек на среде - обезжиренное молоко

3.3.4 Исследование антагонистической активности пробиотических культур в модельных композициях с лизоцимом по отношению к тест-микроорганизмам E.coli 0147 и Staph.aureus 209-Р

3.4 Изучение сочетаемости штаммов молочнокислого термофильного стрептококка, обладающего высокой ß-галактозидазной активностью с бифидобактериями

4. ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ ПРОБИОТИЧЕСКИХ КУЛЬТУР С ЛАКТОФЕРРИНОМ

4.1. Выделение лактоферрина

4.2. Изучение влияния лактоферрина на пробиотические бактерии

4.3 Исследование антагонистической активности пробиотических

культур в отношении тест-микроорагнизмов Е. Coli 0147 и Staph.aureus 209-Р в модельных системах с лактоферрином

5. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ СХЕМЫ БАД И ХАРАКТЕРИСТИКА ИХ СВОЙСТВ

6. РАЗРАБОТКА ПУТЕЙ ПРИМЕНЕНИЯ БАД ДЛЯ ОБОГАЩЕНИЯ МОЛОЧНОЙ ПРОДУКЦИИ

6.1 Применение БАД «БифиЛакто-ЛФ-ЛЦ» для обогащения ряженки

6.2 Применение Б АД «БифиЛакто-ЛФ-ЛЦ» для обогащения напитка сывороточного низколактозного

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка биологически активной добавки на основе пробиотических культур, лизоцима и лактоферрина для обогащения молочной продукции»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность работы.

В Распоряжении Правительства РФ №1873-р от 25.10.2010г. «Основы государственной политики в области здорового питания населения на период до 2020 года» поставлена задача развивать «производство пищевых продуктов, обогащенных незаменимыми компонентами, продуктов функционального назначения, диетических (лечебных и профилактических) пищевых продуктов и биологически активных добавок к пище». Это обусловлено тем, что в настоящий период, более чем у трети населения, обнаруживается снижение иммунологической резистентности организма; наблюдаются случаи острых инфекционных заболеваний, в т.ч. заболеваний желудочно-кишечного тракта; отмечается появление синдрома хронической усталости и снижается работоспособность и др. Одним из путей оздоровления населения и поддержания его в активной форме является потребление продуктов питания профилактической направленности.

Теоретические и практические основы названных выше направлений представлены в научных трудах отечественных и зарубежных ученых: С.И. Артюховой, Н.Б. Гавриловой, В.И. Ганиной, М.В. Гернет, Л.В. Голубевой, Г.А. Донской, И.А. Евдокимова, А.И. Жаринова, Л.А. Забодаловой, З.С. Зобковой,

И.И.Ионовой, Г.С. Комоловой, A.A. Кочетковой, Л.А. Оганесянц, O.E.

Овчинниковой,) И.А. Рогова, С.А. Рябцевой, В.Ф. Семенихиной, H.A. Тихомировой, И.В. Толокновой, В.Д. Харитонова, А.Г. Храмцова, В.П. Шидловской, Т.М. Эрвольдер, S.A. Gonzälez-Chäveza, В. Lönnerdal, W.-S. Kim, К.-I. Shimazaki и других.

Расширение линейки новых продуктов с направленными функциональными свойствами, а также повышение эффективности действия существующих продуктов относится к одной из актуальных проблем современной пищевой биотехнологии. Однако современные технологические приемы, используемые при производстве молочных продуктов, приводят к инактивации или значительному

снижению исходного содержания биологически активных веществ в молочном сырье. В этой связи рациональное использование сырьевых ресурсов, более глубокая и полная их переработка, а также поиск новых подходов сохранения биологически активных веществ в готовой продукции являются приоритетными направлениями в науке и технологии.

Полагаем, что одним из направлений решения данной проблемы может быть применение в питании биологически активных компонентов, которые мягко воздействуют на организм и повышают его сопротивляемость к негативным факторам. К таким соединениям относят биологически активные белки молока, которые обладают целым рядом уникальных функций: противоинфекционной, иммуномодуляторной, противовоспалительной, антиоксидантной, регенеративной и другими. Пробиотические бактерии — естественные обитатели кишечника человека, - не только способствуют нормализации микрофлоры кишечника, но также обладают рядом других функций, влияющих на обмен веществ, укрепление иммунитета, улучшение общего самочувствия и другими.

В этой связи актуальными представляются исследования в области более широкого использования пробиотических культур и биологически активных белков молока для получения продуктов профилактической направленности.

Цель настоящей работы - разработать биологически активную добавку, состоящую из природных GRAS - компонентов, на основе изучения взаимодействия пробиотических культур, лизоцима и лактоферрина для обогащения молочной продукции.

Для достижения поставленной цели решали следующие задачи:

1. Теоретически и экспериментально обосновать состав биологически активной добавки.

2. Изучить действие разных доз лизоцима и лактоферрина на штаммы пробиотических бактерий.

3. Определить антагонистическую активность штаммов пробиотических бактерий различных таксонов совместно с модельной композицией лизоцима, лактоферрина в отношении патогенных и условно-патогенных тест-культур.

4. Разработать рецептуры и схему биотехнологии биологически активной добавки.

5. Обосновать сроки годности Б АД на основании изучения показателей качества и безопасности.

6. Показать пути её применения в технологии ферментированных молочных продуктов и провести промышленную апробацию.

Научная новизна

• Теоретически и экспериментально обоснован состав биологически активной добавки на основе пробиотических культур (Bifidobacterium adolescentis BGV-11 (ВКПМ Ac-1742), L.fermentum LFM-2 (ВКПМ B-10368), Lactobacillus rhamnosus LC-52GV (ВКПМ B-9475), Lactobacillus plantarum ГВИ-1 (ВКПМ-8556), Lactobacillus acidophilus ACT-41 (ВКПМ B-9644) или Lactobacillus acidophilus 887, Str.thermophilus CT-95 (ВКПМ B-7646)) и биологически активных веществ молока - лизоцима и лактоферрина.

• Получены математические зависимости, адекватно описывающие интегральное поведение групп пробиотических штаммов как при их стимулировании, так и при ингибировании лизоцимом и лактоферрином. Определены рациональные концентрации лизоцима и лактоферрина для введения в состав биологически активных добавок, которые составляют 75,0±1,0 г на 1000,0 г БАД и 500,0±20,0 г на 1000,0 г БАД соответственно.

• Выявлен синергетический эффект при совместном действии изученных штаммов пробиотических культур и установленных концентраций лизоцима и лактоферрина в отношении ингибирования роста условно-патогенных микроорганизмов E.coli 0147 и Staph.aureus 209-Р.

• Выявлены зависимости изменения показателей качества и безопасности в условиях хранения и обоснован срок годности БАД.

• Обоснованы методологические подходы использования разработанной БАД в технологии ферментированных молочных продуктов профилактической направленности.

Практическая значимость.

• Разработаны рецептуры и технологическая схема получения БАД различного состава.

• Разработан проект технических условий ТУ 9222-00.. .-58693373-2011 и ТИ на напиток низколактозный из сыворотки с применением штамма термофильного молочнокислого стрептококка с высокой р-галактозидазной активностью.

• В условиях ОАО «Тульский молочный комбинат» проведена производственная проверка применения БАД при выработке низколактозного напитка из сыворотки, что подтверждено положительным актом.

• Результаты исследований внедрены в учебный процесс: использованы в дисциплине «Биотехнологические процессы в производстве молока и молочных продуктов» - разработаны и опубликованы Методические указания к выполнению лабораторных работ для студентов направления 260200.68 Продукты питания животного происхождения.

Работа выполнялась в рамках Гранта Президента Российской Федерации по государственной поддержке ведущих научных школ Российской Федерации НШ-3245.01.4 «Разработка новых пищевых технологий с участием живых систем на основе нетрадиционных подходов к управлению их жизнедеятельности и обеспечению качественных показателей готовой продукции».

Апробация.

Результаты исследований обсуждены и получили одобрение на Международных научных конференциях: VII международной научной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (Москва, 2008), Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Экологически безопасные ресурсосберегающие технологии и средства переработки сельскохозяйственного сырья и производства продуктов питания» (Москва, 2009), Международной научно-практической

конференции «Инновационные технологии и оборудование в молочной промышленности» (Воронеж, 2010), II Международной конференции Российского Химического общества имени Д.И. Менделеева «Инновационные химические технологии и биотехнологии материалов и продуктов» (Москва, 2010), VIII Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (Москва, 2010), VII Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2011), Международной научно-технической конференции «Современные достижения биотехнологии» (Ставрополь, 2011), IX Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (Москва, 2011).

Результаты исследований были доложены на II Международной конференции Российского Химического общества имени Д.И. Менделеева «Инновационные химические технологии и биотехнологии материалов и продуктов», 2010, получен диплом II степени (Приложение 1); IX Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения», 2011, получена грамота (Приложение 2).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, в том числе 3 статьи в рецензируемых журналах по перечню ВАК, 1 методическое указание для студентов.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, аналитического обзора литературы, объектов и методов исследования, экспериментальной части, содержащей 4 главы, выводов, библиографического списка, приложений. Основной текст работы изложен на 122 страницах машинописного текста, содержит 41 таблицу и 38 рисунков. Библиография представлена 136 источниками, в том числе 70 зарубежных авторов, количество приложений - 9.

1.СИСТЕМНЫЙ АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ ПРОБЛЕМЫ

1.1. Анализ рынка функциональных продуктов питания Функциональные продукты питания и напитки в настоящее время являются одним из самых быстрорастущих сегментов пищевой промышленности на мировом рынке. Так, согласно отчетам «Центра инвестиционно-промышленного анализа и прогноза», до 2015 года ожидается ежегодный устойчивый рост спроса на продукты здорового питания в США, Японии, Великобритании, Франции, Германии, Италии и Испании - от 4 до 6%. При этом, прирост объемов потребления продуктового рынка в развитых странах не будет превышать 1%.

В связи с тем, что средний возраст населения в развитых странах увеличивается, а проблема лишнего веса становится все более острой, ситуация в индустрии здоровых продуктов питания характеризуется стабильностью, несмотря на продолжающуюся неустойчивость в экономике. По всему миру потребители предъявляют все более высокие требования к питанию, отдавая предпочтение продуктам, улучшающим состояние желудочно-кишечного тракта, поддерживающим иммунную систему и здоровье сердечно-сосудистой системы, регулирующим вес.

В России наблюдается та же тенденция. В последнее десятилетие, ввиду роста числа хронических заболеваний и установления их причинной связи с несбалансированным питанием, к пищевым продуктам стали относиться как к эффективному средству для поддержания физического и психического здоровья, а также снижения риска возникновения многих заболеваний. Все большее число потребителей понимают, что приверженность к здоровым продуктам питания в конечном итоге способствует снижению риска заболеваний, поэтому россияне приобретают продукты и напитки со специальными свойствами.

Ожидается, что растущий спрос на здоровые продукты питания продолжится в России до 2014 года. Устойчивый рост объемов потребления показывают продукты, обогащенные пробиотиками, пребиотиками, растительными стеролами и пищевыми волокнами.

Повышающийся спрос на функциональные и обогащенные продукты питания способствует значительному росту потребности в физиологически функциональных ингредиентах, к которым относят: аминокислоты, пептиды, нуклеиновые кислоты, гликозиды, цитамины, органические кислоты, лектины, различные фитосоединения и другие [66]. По мере накопления научных данных спектр функциональных ингредиентов постоянно увеличивается.

Поскольку молоко - это продукт, предназначенный для вскармливания новорожденного организма, в молоке присутствуют функциональные ингредиенты, представляющие большой интерес для использования в качестве отдельных БАД.

1.2. Биологически активные белки молока

Молоко - это не только ценнейшее сырье при производстве продуктов питания, но и кладезь природных веществ, таких как витамины, ферменты, микро-и макронутриенты, иммуноглобулины и другие биологически активные вещества.

Следует отметить, что биологическая ценность молока определяется главным образом белками. При этом сывороточные белки характеризуются более высокой ценностью [59].

1.2.1. Краткая характеристика биологически активных белков молока.

Р-лактоглобулин (р-ЛГ) и а-лактальбумин (а-ЛА) являются основными компонентами белковой фракции молочной сыворотки (50-54 и 20-25 % соответственно), а-лактальбумин - самый термостабильный сывороточный белок (в структуре белка присутствуют 4 дисульфидных связи), а Р-лактоглобулин относится к термолабильным белкам.

Полагают, что Р-лактоглобулин может участвовать в передаче пассивного иммунитета новорожденным, а также в регуляции метаболизма фосфора молочных желез. Показано, что а-лактальбумин способствует заживлению язв слизистой оболочки желудка, причем его действие является дозозависимым.

Недавно установлено, что Р-лактоглобулин наряду с а-лактальбумином ингибирует действие ферментов (протеазы и интегразы) вируса иммунодефицита человека, являющихся критическими для жизненного цикла вируса.

Шведские ученые установили, что а-лактальбумин предотвращает развитие злокачественных образований в пищеварительном тракте младенцев, поддерживая тем самым нормальный рост клеток кишечника[59]. Кроме того, при переваривании а-лактальбумина образуются пептиды, обладающие антимикробной и иммуностимулирующей активностью, пребиотическим действием, а также способностью усиливать минеральную абсорбцию [101].

Таким образом, ß-лактоглобулин и а-лактальбумин, способные оказывать положительное действие на организм человека, могут широко применяться в пищевых продуктах функционального назначения, медицинских препаратах, косметических средствах [59].

Иммуноглобулины - это высокомолекулярные белки, имеющие общие физико-химические свойства и выполняющие функции антител.

Антитела в организме выполняют 2 основные функции. Первая -распознавание и специфическое связывание соответствующих антигенов, вторая -эффекторная, заключающаяся в индукции важнейших физиологических процессов, направленных на уничтожение антигена: лизис чужеродных клеток через активацию системы комплемента, стимуляция специализированных иммунокомпетентных клеток, выделение фармакологически активных веществ и Т.д.

Из пяти известных классов иммуноглобулинов человека (IgM, IgG, IgA, IgD и IgE) в коровьем молоке найдено четыре - IgM, IgG, IgA и IgE. В коровьем молоке в норме содержание иммуноглобулинов составляет 1,9 - 3,3 % от общего содержания белка. Однако в молозиве эта величина составляет 50-70 %, что обусловлено весьма значительной ролью этих белков в механизмах пассивной защиты потомства в ранний период постнатального развития.

Наиболее представленным и физиологически значимым в молоке коров является IgG, содержание которого в молоке доходит до 70 % от общего содержания иммуноглобулинов. Следует отметить, что только иммуноглобулины класса G способны проникать через плаценту и обеспечивать иммунную защиту новорожденных.

При переработке молока и молозива можно получить белковый концентрат, богатый иммуноглобулинами, на основе которого могут быть получены ценные лекарственные средства и пищевые добавки [59].

Лактоферрин (ЛФ) - железосвязываюший гликопротеин, присутствующий в основном в молоке, но также обнаруживающийся и в других экзокринных жидкостях организма [59,81,79,103].

Рисунок 1.1- Трехмерная структура коровьего лактоферрина с разрешением 2,8 ангстрем [85].

Лактоферрин относится к семейству трансферринов, по структуре состоит из одной полипептидной цепи, состоящей из 703 аминокислотных остатков. Его молекула организована в 2 домена (С- и N-), каждый из которых имеет сайт связывания железа [59,81,94,106,111]. Молекулярная масса лактоферрина 78-80 кДа [59], белок существует в двух формах - холо-форма (насыщенная железом) и апо-форма (железоненасыщенная). Первая форма закрытая, стабильная, относительно жесткая, устойчивая к действию протеиназы, вторая форма -открытая, гибкая, более чувствительная к протеиназе [12,29,30].

Лактоферрин часто называют полифункциональным белком, он проявляет бактериостатическую, бактерицидную, противопаразитарную, противогрибковую и антивирусную активности [29,30,59,79,84,88,93,98,99,101,105,130,134] (Таблица

1.1), обладает бифидогенным [32,94,109,110,117], противовоспалительным [56,124], ранозаживляющим [66] и иммуномодулирующим [85,111] действиями. Таблица 1.1 - Микроорганизмы, чувствительные к лактоферрину человека и коровьему

лактоферрину или к их природным (Lfcine) и синтетическим (Lfampine) пептидам [29,30,59,79,84,88,93,98,99,101,105,130,134]

Бактерии Вирусы Грибы Простейшие

1 2 3 4 5

Actinobacillus spp. Аденовирус Aspergillus fumigates Babesia caballi

Actinomycetemcomitans Цитомегаловирус Aspergillus niger Eimeria stiedai

(CMV)

Bacillus Энтеровирус Candida albicans Entamoeba

stearothermophilus histolytica,

Bacillus subtilis Хантавирус Candida glabrata Plasmodium

berghei

Bacillus Полиовирус Candida krusei Plasmodium

stearothermophilus falciparum

Bortedella pertussis Полиомавирус Phoma exigua Toxoplasma

gondii

а Burkholderia gladioli Ротавирус Sclerotinia Tritrichomonas

и и sclerotiorum foetus

« о ч Burkholderia Вирус гепатита В Sclerotium rolfsii Trypanosoma

<l> V cenocepacia (HBV) brucei

и s Carnobacterium viridans Вирус гепатита С Rhizoctonia solani Trypanosoma

fr (HCV) cruzi

(ü Q Clamydophila psittaci Вирус простого Trichoderma viride

У герпеса 1 (HSV-1)

сз ч Clostridium spp. Вирус простого Trychophyton

«ч и к герпеса 2 (HSV-2) mentagrophytes

а л Escherichia coli spp. Вирус простого

кошачьего

О У герпеса (FSV-1)

ч « к Enterococcus spp. Вирус

а о иммунодефицита

р. з человека (HIV)

Haemophilus influenzae

Helicobacter felis

Helicobacter pylori

Klebsiella pneumoniae

Legionella pneumophila

Listeria monocytogenes

Micrococcus spp.

Mycobacterium

tuberculosis

Neisseriaceae

Pasteurellacea

Pseudomonas aeruginosa

Окончание таблицы 1.1

2 3 4 5

Salmonella typhimurium Shigella dysenteriae Shigella flexneri Staphylococcus aureus Staphylococcus spp. Streptococcus spp. Vibrio cholerae Vibrio parahaemolyticus Yersinia pseudotuberculosis

Лактоферрицин В, лактоферрицин Н Bacillus subtilis Clostridium Corynebacterium Enterococcus Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Lactobacillus Listeria monocytogenes Proteus vulgaris Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas fluorescens Salmonella enteriditis Staphylococcus aureus Staphylococcus spp. Streptococcus spp. Yersinia enterocolitica Аденовирус CMV VIH HSV Candida spp. Eimeria stieda Giardia lamblia Toxoplasma gondii

Лактофер рампин "г» ____ Bacillus subtilis Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa Candida albicans

Полагают, что бактериостатическое действие лактоферрина основано на его способности связывать из окружающей среды железо и другие металлы переменной валентности, что приводит к ингибированию роста бактерий и их способности к вирулентности [29,30,59,93].

Бактерицидное действие лактоферрина связано с его прямым действием на клеточную стенку бактерий. Было доказано, что лактоферрин, взаимодействуя с липополисахаридами наружной клеточной мембраны грамотрицательных бактерий, вызывает увеличение проницаемости мембраны и последующее

повреждение бактерии [29,30,59,93,130]. Механизм действия лактоферрина на грамположительные бактерии идет по ионному принципу: связываясь с отрицательно заряженным липидным матриксом, белок, в результате гидрофобных взаимодействий, разрушает неполярный слой клеточной мембраны, что приводит к гибели бактерии [93,130].

Известно, что лактоферрин способен предотвращать адгезию некоторых бактерий к клеткам хозяина, тем самым препятствуя образованию биопленок [93,130].

Противопаразитарную активность лактоферрина объясняют его способностью присоединять липиды мембраны паразитов, что приводит к нарушению мембраны и гибели паразита.

Противогрибковое действие лактоферрина основано на его способности изменять проницаемость клеточной мембраны [93,130].

Одной из наиболее распространенных гипотез антивирусной активности лактоферрина является то, что он связывает и блокирует вирусные рецепторы гликозаминогликана, особенно гепарансульфата. Связывание лактоферрина и гепарансульфата предотвращает первый контакт между вирусом и клетками хозяина и тем самым позволяет избежать инфекции [131].

В литературе имеется немало свидетельств о том, что лактоферрин обладает бифидогенным действием. Механизм действия ЛФ на бифидобактерии объясняют наличием на клеточной стенке бактерий рецепторов, способных связывать ЛФ. Так, сообщалось, что обнаружение подобных рецепторов у штаммов бифидобактерий соотвествовало увеличению количества клеток бифидобактерий в присутствии лактоферрина, и, наоборот, при отсутствии лактоферрин-связывающих рецепторов стимулирование роста клеток бифидобактерий не наблюдалось [83,94,95,99]. Исследователи отмечают, то такое воздействие лактоферрина является штаммозависимым. В то же время имеются работы, указывающие на то, что ростостимулирующее действие лактоферрина на бифидобактерии не зависит от наличия на клеточной стенке бактерий лактоферрин-связывающих рецепторов [114,111]. Rahman и соавторы обнаружили, что лактоферрин-связывающие

рецепторы бифидобактерий находятся в N-доле лактоферрина, в то время как ростостимулирущее действие на бифидобактерии проявляет С-доля лактоферрина [114].

В работах зарубежных авторов описано воздействие различных форм коровьего ЛФ на бифидобактерии. В качестве объектов исследований были выбраны следующие штаммы: В. breve АТСС 15700, В. longum АТСС 15707, В. infantis АТСС 15697, В. bifidum АТСС 15696, которые культивировали в анаэробных условиях в течение 24 ч при t = 37 °С в MRS-бульоне, содержащем 0,05 % цистеина. В результате было выяснено, что коровий апо- и холо-ЛФ обладали умеренным ростостимулирующим действием на В. breve, В. infantis и В. bifidum в концентрациях: 0,01, 0,1 и 1 мг/мл. На рост В. longum ЛФ не влиял в выбранном диапазоне концентраций. Представленная картина свидетельствует о том, что степень железонасыщенности белка ЛФ не важна для его воздействия на бифидобактерии [95,117].

Таким образом, можно сказать, что механизм действия лактоферрина на бифидобактерии полностью не изучен и требуются дальнейшие исследования в этой области.

В литературе имеется мало данных о действии лактоферрина на другие пробиотические микроорганизмы. Так, проведенные исследования по влиянию различных по насыщенности железом форм лактоферрина на L.acidophilus являются неоднозначными. В некоторых работах сообщается о положительном влиянии холо-формы лактоферрина на исследуемый вид микроорганизма [117], в других - отрицательное [94]. Апо-форма ЛФ ингибировала рост изученных штаммов L.acidophilus в обоих исследованиях [94,117]. По результатам исследований зарубежных ученых [94], было выявлено, что при развитии L. acidophilus СН-2 при культивировании данного штамма на жидкой питательной среде MRS-бульоне в течение 16 ч при t = 37 °С действие коровьего ЛФ было неоднозначным. Апо-ЛФ никак не влиял на рост L. acidophilus, но холо-ЛФ и нативный ЛФ оказывали стимулирующее действие в сравнении с контролем в выбранном диапозоне концентраций ЛФ - 0,5, 1и 2 мг/мл. Ученые в данной статье

связывали положительное действие холо-ЛФ на L. acidophilus с возможностью усваивания L. acidophilus ионов железа посредством потребления самого белка в данной форме. Различное действие апо-ЛФ и холо-ЛФ на рост микроорганизмов, по-видимому, связано с конформационным отличием этих двух форм белка.

О действии лактоферрина на другие виды лактобактерий информации не обнаружено, поэтому исследования в этом направлении являются актуальными.

Антиоксидантное действие ЛФ объясняется тем, что он связывает (инактивирует) железо, которое является сильным окислителем, делая его недоступным для микроорганизмов [29,30,59].

ЛФ обладает способностью соединяться со многими типами клеток, включая макрофаги, моноциты, активированные лимфоциты, которые являются ключевыми компонентами в реакции иммунной системы человека [59].

Результаты in vivo показывают, что ЛФ защищает от аллергии кожные покровы и легкие [76,100], способствует более быстрому заживлению роговичного эпителия [67].

Как показано во многих публикациях, ЛФ, помимо прямого антимикробного действия, может влиять на воспалительный процесс. ЛФ регулирует воспалительный процесс, препятствуя выделению цитокинов из моноцитов и регулируя пролиферацию и дифференцировку клеток иммунной системы [5]. Это подтверждается экспериментами, в которых присутствие ЛФ защищает от гастритов, индуцируемых Helicobacter pylori, поддерживает целостность слизистой кишечника от воздействия бактериального липополисахарида, снижает токсичность и уровень смертности при высоком инфицировании энтеротоксичным штаммом Е. coli [85,98,105,121,130].

В последние годы активно ведутся исследования в области противоопухолевой и антиканцерогенной активностей лактоферрина [74,78,119,128,129].

Первое предположение о возможной антиканцерной активности ЛФ было высказано после того, как было установлено, что в опухолевых клетках ген лактоферрина не экспрессируется или вообще отсутствует [108,125]. При изучении

t

противоопухолевой активности ЛФ также необходимо учитывать его иммуномодуляционные свойства. В ряде экспериментов было показано, что ЛФ стимулирует пролиферацию и активацию таких иммунных клеток, как лимфоциты и нормальные клетки-киллеры, а с другой стороны, увеличивает чувствительность и доступность раковых клеток к атаке защитных клеток. Исследования механизма действия ЛФ против развития раковых клеток позволили установить, что важную роль в этом процессе играет интерлейкин-18, который является мощным активатором клеток иммунной системы. Экспрессия именно этого цитокина усиливается в присутствии ЛФ в клетках кишечного эпителия, а также происходит активация протеазы - каспазы-1, которая необходима для ферментативного процессинга интерлейкина-18. Считается, что именно секреция интелейкина-18 в кишечнике и крови играет центральную роль в координации системного и локального иммунного ответа [97].

В ходе испытаний на животных, было выявлено, что лактоферрин обладает чрезвычайно низкой токсичностью, мутагенного действия белка на бактерии не обнаружили. С 1996 года лактоферрин официально разрешен в качестве безопасной пищевой добавки в Японии, а с 2001 г. - в США. В промышленных масштабах лактоферрин производится в Японии, США и Океании [57].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Рогожина, Татьяна Николаевна, 2013 год

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Амерханова А. М. Перспективы препаратов - пробиотиков / A.M. Амерханова , Е.С. Зубкова, О.Г. Жиленкова, С.А. Ленукова, A.A. Кураленко // Материалы Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 75-летию со дня создания отдела физиологии и биохимии растений ВНИИССОК. -М.:РУДН, 2007. - С. 104 - 109.

2. Ананьева, Н. В. Капсулированные микроорганизмы - активные пробиотики/ Н.В. Ананьева, В.И. Ганина, А.Н. Соловьева // Переработка молока. -2007.-№11.-С. 30-31.

3. Ананьева, Н.В. Совершенствование технологии пробиотических культур прямого внесения для молочных продуктов: дисс.... канд. техн. наук:

4. Артюхова, С.И. Значение функционального биопродукта «Целебный» для здоровья человека / С.И. Артюхова, Т.Т. Толстогузова // Современные наукоемкие технологии. -2012.-№7.-С. 19-20.

5. Бабина, С.Е. Лактоферрин как полифункциональная гидролаза молока человека: автореф. дис.... канд. хим. наук: 03.00.04 / Бабина Светлана Евгеньевна. - Новосибирск, 2006. - 25 с.

6. Балышева, В. И. Иммобилизация клеток животных в микрогранулы и микрокапсулы / В.И. Балышева, Е.А. Марквичева, Б.В. Новиков, Р.Б. Аронов, A.B. Балышев // Доклады РАСХН - 2007. - №3. - С. 48 - 50.

7. Банникова, Л.А. Микробиологические основы молочного производства / Л.А. Банникова, Н.С. Королева, В.Ф. Семенихина. - М.: Агропромиздат, 1987 -400 с.

8. Баранов, A.A. Лизоцим: теория и практика / A.A. Баранов, В.Г. Дорофейчук. - Н.Новгород : Информатик, 1999. - 126с.

9. Барбашина, М.А. Совершенствование технологии молока питьевого пастеризованного длительного срока хранения / М.А. Барбашина, Г.П. Шуваева, О.С. Корнеева // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2005.- №1. - С.29-30.

10. Баснакьян, И.А. Культивирование микроорганизмов с заданными свойствами. - М: Агропромиздат. - 1992. - 150 с.

11. Башаева, Д.В. Изменения белков молока при тепловой обработке / Д.В. Башаева, Р.Р. Хаертдинов // Молочная промышленность. - 2008. - №7. - С.74-75.

12. Бейкер, E.H. Лактоферрин: свойства и применение / E.H. Бейкер, Х.М. Бейкер, Н. Кун, Р. Д. Кидд; пер.с англ. A.B. Бережной // Молочная промышленность. - 2006. - № 2. - С.38-39.

13. Блинкова, Л. П. Биотехнологические условия синтез бактериоцинов / Л.П. Блинкова, Н.Г. Машенцева, В.В. Хорольский, О.Б. Горобец, Е.С. Дорофеева // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. -2006. - № 2. - С. 83 - 89.

14. Блинкова, Л.П. Молекулярные основы продукции и действия бактериоцинов / Л.П. Блинкова, М.Л. Альтинзлер, Е.С. Дорофеева, О.Б. Горобец // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 2007. - №2. - С. 97 -103.

15. Бойцов, А.Г. Как победить дисбактериоз у детей и взрослых / А.Г. Бойцов, В.Г. Лифляндский. - М.: Олма-Пресс, 2002. - 100 с.

16. Ботина, Г.С. Синтез витаминов стартовыми культурами молочнокислых бактерий Streptococcus thermophilus / С. Г. Ботина, И. В. Рожкова, В. Ф. Семенихина // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2010. - № 3. - С. 5456.

17. Бурыкина, И.М. Адгезивные свойства микроорганизмов / И.М. Бурыкина // Лактоза и её производные : Международный симпозиум ММФ (14-16 мая 2007, Москва) и Кисломолочные продукты -технологии и питание : региональная конференция ММФ (17 мая 2007, Москва) : сб. тезисов - М.: Образовательный научно-технический центр молочной промышленности, 2007 . - С. 270.

18. Гаврилова, Н. Б. Десертные продукты с иммобилизованными пробиотиками / Н.Б. Гаврилова, О.В. Пасько, Т.А. Назаренко // Молочная промышленность. - 2008. - №7. - С. 68 - 69.

19. Гаврилова, Н. Б. Аналитические исследования и подбор метода включения клеток пробиотических микроорганизмов в полимеры различной природы / Н.Б .Гаврилова, О.В. Пасько // Инновационные технологии производства

t

и переработки сельскохозяйственной продукции. Материалы научно-практической конференции. - Омск: Изд-во ФГОУ ВПО ОмГАУ. - 2006. - С. 249 - 250.

20. Ганина, В.И. Биоконверсия молочной сыворотки для использования в ЗЦМ/ В.И. Ганина, И.В. Ким, Т.Н. Данильчук, Я.А. Лобышева // Молочная промышелнность. - 2009. - №12. - С. 46.

21. Ганина, В.И. Микрокапсулирование как способ зашиты пробиотических культур от неблагоприятных условий / В.И. Ганина, Н.В. Ананьева, Л.В. Калинина // Перспективы производства продуктов питания нового поколения. Сборник материалов II международной научно-практической конференции. - Омск: Изд-во ФГОУ ВПО ОмГАУ. - 2005. - С. 100 - 102.

22. Ганина, В.И. Стартовые культуры в технологии продуктов питания и кормов // Методические указания к выполнению лабораторных и научно-исследовательских работ - М: МГУПБ, 2005. - 31с.

23. Ганина, В.И. Пробиотики. Назначение, свойства и основы биотехнологии: монография / В.И. Ганина. -М.: МГУПБ, 2001. 169с.

24. Горбатова, К.К. Биохимия молока и молочных продуктов / К.К. Горбатова. - СПб.: ГИОРД, 2004. - 319 с.

25. Горелова, Н.Ф. Бактериальный препарат для сыров с лечебно-профилактическими свойствами / Н.Ф. Горелова, Т.М. Эрвольдер, И. Л. Остроухова и др. // Сыроделие. - 1999. - №2. - С.11-12.

26. Гудков, A.B. Сыроделие: технологические, биологические и физико-химические аспекты / A.B. Гудков. - М: ДеЛи принт, 2004. - 804с.

27. Данилов, М.Б. Теоретическое обоснование и разработка технологии пробиотических продуктов с использованием бифидо- и лактобактерий: автореф. дисс. ... д.т.н.: 05.18.04 / Данилов Михаил Борисович. - Улан-Удэ. - 2004. - 27 с.

28. Егоров, Н.С. Бактериоцины. Образование, свойства, применение: статья / Н.С. Егоров, И.П. Баранова // Антибиотики и Химиотерапия - 1999. - №6. -С.33-40.

29. Звездин, A.B. Краткий обзор биологических и целебных свойств белка лактоферрина. Методы получения ЛФ / A.B. Звездин. - М.: Институт ядерных исследований РАН, 2009. - 155 с.

30. Звездин, A.B. Лактоферрин / A.B. Звездин. - М.: Институт ядерных исследований, 2008. - 150 с.

31. Зобкова, З.С. Антибактериальные вещества сырого молока и стойкость молочных продуктов в хранении / З.С. Зобкова, A.B. Мишина // Материалы Международной научно-практической конференции посвященной 90-летию Омского госудраственного аграрного университета: "Современные технологии производства продуктов питания: состояние, проблемы и перспективы развития". -Омск: "Вариант-Омск", 2008. - С.73-76.

32. Зобкова, З.С. О бифидогенных свойствах лактоферрина / З.С. Зобкова, A.B. Мишина, A.B. Бегунова // Молочная промышленность. - 2008. - №7. - С.64-65.

33. Зобкова, З.С. О роли антибактериальных факторов в повышении стойкости молока / З.С. Зобкова, A.B. Мишина, В.В. Смолянинов, Г.В. Шехватова //Молочная промышленность. - 2007. - №8.- С. 37-38.

34. Зобкова, З.С. Реологические показатели кисломолочного продукта с лактоферрином / З.С. Зобкова, A.B. Мишина // Молочная промышленность. — 2009. -№2. -С.74-75.

35. Иванова, Е.В. Разработка технологии пищевой добавки с пробиотическими свойствами: автореф. дис.... канд. техн. наук: 05.18.07/ Иванова Елена Вячеславовна. - М.: МГУПБ, 2003. - 28 с.

36. Калмыкова, А. И. Клеточные и системные механизмы действия пробиотиков. / А.И. Калмыкова, В.Г. Селятицкая, H.A. Пальчикова, Н.П. Бгатова — Новосибирск, 2007. - С. 16 - 22.

37. Калмыкова, А.И. Системные эффекты действия пробиотиков: автореф.

дис____док. биол. наук: 14.00.16/ Калмыкова Анна Ивановна. - Новосибирск, 2006.

-24 с.

38. Кащеева, Н.Л. Ферментированный продукт для функционального

питания / H.J1. Кащеева, Н.Б. Гаврилова // Молочная промышленность. - 2010. - № 1.-С. 67-68.

39. Комолова, Г.С. Ангиогенин - активная основа лечебных средств / Г.С. Комолова, H.A. Тихомирова, О.И. Андреев // Молочная промышленность. - 2007. -№ 2.

40. Конь, И.Я. Пробиотические и кисломолочные продукты в питании детей раннего возраста/ И.Я. Конь// Лечащий врач. - 2007. - № 1. - С.37-39.

41. Куркина, О.С. Разработка технологии стерилизованного молока, обогащенного ангиогенином: автореф. дис. ... канд.техн. наук: 05.18.04 / Куркина Ольга Сергеевна. - М., 2002. - 20 с.

42. Лепихина, O.E. Активность катионных сывороточных ферментов молока в составе композиции с С-лизоцимом в процессе хранения / O.E. Лепихина, Г.С. Комолова // Живые системы и биологическая безопасность населения: Материалы IV Международной научной конференции студентов и молодых ученых. - М.: МГУПБ. - 2005. - С. 5-6.

43. Лепихина, O.E. Влияние технологических факторов производства молочных продуктов на нативность биологически активных белков комплекса «Катионные белки молока + куриный лизоцим» / O.E. Лепихина, H.A. Тихомирова, Г.С. Комолова // Хранение и переработка сельхозсырья. - 2008. - № 5. - С. 40-42.

44. Лепихина, O.E. Влияние условий замораживания и лиофильной сушки на сохранность ферментов защитного комплекса молока в составе композиции с куриным лизоцимом / O.E. Лепихина, Г.С. Комолова, О.М. Степовая // Сборник научных трудов. Проблемы совершенствования холодильной техники и технологии. Энергосбережение. Выпуск 3, М.: МГУПБ. - 2006. - С.60-62.

45. Мишина A.B. Минорные фракции сывороточных белков как основа для создания новых видов функциональных продуктов // Материалы Международной научно-практической конференции «Совершенствование технологий производства продуктов питания в свете государственной программы развития с-х на 2008-2012 гг." 18-19 июня 2008 г. г. Волгоград, часть 2 - Переработка с-х сырья и пищевая технология. - М.: Из-во Вестник РАСХН., 2008.- С. 133 - 136.

46. Мишина, A.B. Влияние технологических параметров обработки молока-сырья на количественный состав лактоферрина / A.B. Мишина // Сборник докладов Конференции - конкурса научно-инновационных работ молодых ученых и специалистов за 2008г. "Отделения хранения и переработки сельскохозяйственной продукции Россельхозакадемии".- М., 2008.-С.78-80.

47. Нечаев, А.П. Пищевые и биологически активные добавки, ароматизаторы и технологические вспомогательные вещества / А.П. Нечаев, A.A. Кочеткова // Учебное пособие. Спб: ГИОРД. - 2007 - 248с.

48. Овчинникова, O.E. Разработка технологии биологически активного препарата на основе защитного комплекса молока и куриного лизоцима: автореферат к.т.н. / O.E. Овчинникова. - М.: МГУПБ, 2008. - 25 с.

49. Остерман, JI.A. Хроматография белков и нуклеиновых кислот // М.:

50. Перковец, М. Про-, пре- и синбиотические молочные продукты/ М. Перковец // Переработка молока. - 2007. - №11. - С. 16 - 18.

51. Рогов, H.A. Синбиотики в технологии продуктов питания: монография / H.A. Рогов, Е.И. Титов, В.И. Ганина, Н.В. Нефёдова, Г.В. Семёнов, С.И. Рогов. -М.: МГУПБ, 2006. -218с.

52. Рожкова, Т.В. Биотехнология стартовых культур на основе молочнокислых бактерий, синтезирующих полисахариды: автореф. дис. ... канд. техн. наук: 05.18.07 / Рожкова Татьяна Вячеславовна. - М., 2007. - 23с.

53. Рустамьян, Ю.Л. Исследование биологических свойств ангиогенина молока - полифункциональной рибонуклеазы: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.00.04 / Рустамьян Юлия Леонидовна. - М., 2005. - 34 с.

54. Рябцева, С.А. Влияние лактулозы на заквасочную микрофлору / С.А. Рябцева, М.А. Брацихина // Молочная промышленность. - 2010. - № 4. - С.56.

55. Рябцева, С.А. Сохранение жизнеспособности заквасочной микрофлоры / С.А. Рябцева, В.И. Ганина, М.А. Брацихина // Молочная промышленность. - 2010. -№ 1. - С.22-23.

56. Семенов, С. Влияние лизоцима на качество молока / С. Семенов, Н. Суркова, А. Пономарев // Молочное и мясное скотоводство. - 2006. - № 2. -С. 3031.

57. Тамура, И. Производство лактоферрина / И.Тамура; пер.с англ. A.B. Бережной // Молочная промышленность. - 2006. - № 2. - С.39-40.

58. Твердохлеб, Г.В. Технология молока и молочных продуктов / Г.В. Твердохлеб, Г.Ю. Сажинов, Р.И. Раманаускас. - М.: ДеЛи принт, 2006. - С. 60-62.

59. Тихомирова, H.A. Биологически активные белки молока: учебное пособие / H.A. Тихомирова, Г.С. Комолова, И.И. Ионова. - М.: МГУПБ, 2004. - 80 с.

60. Тихомирова, H.A. Технология и организация молока и молочных продуктов / H.A. Тихомирова. - М.: ДеЛи принт, 2007. - С. 17-19

61. Тихомирова, H.A. Технология продуктов лечебно-профилактического назначения на молочной основе: учебное пособие / H.A. Тихомирова. - Санкт-Петербург, 2010. - 350 с.

62. Толокнова, И.В. Обогащение жидких детских адаптированных кисломолочных продуктов лизоцимом: автореф. дис.... канд. техн. наук: 05.18.04 / Толокнова Ирина Владимировна. - М., 1988. - 23 с.

63. Федеральный закон от 12 июня 2008 г. N 88-ФЗ "Технический регламент на молоко и молочную продукцию".

64. Федеральный закон от 22 июля 2010 г. N 163-Ф3 "О внесении изменений в Федеральный закон "Технический регламент на молоко и молочную продукцию".

65. Храмцов, А.Г. Технологическая платформа отечественного пребиотика лактулозы / А.Г. Храмцов, И.А. Евдокимов, С.А. Рябцева, A.B. Серов, Б.М. Синельников, Ю.И. Филатов, В.Д. Харитонов, Л.Г. Андреенко, Т.А. Антипова, Н.Г. Кроха, И.И. Бурачевский, В. А. Поляков, В.В. Ким, H.A. Киселёв // Молочная промышленность. - 2009. - № 12. - С. 53-56.

66. Шендеров, Б. А. Микробиоценозы человека и функциональное питание // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. Приложение №14. - т. XI. - 2001. - С. 78 - 90.

67. Ashby, В. Bovine lactoferrin structures promoting corneal epithelial wound healing in vitro / B. Ashby, Q.Garrett, M.Willcox // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 2011.

- №52(5).-P.2719-2726.

68. Bezault, J. Human lactoferrin inhibits growth of solid tumors and development of experimental metastases in mice / J. Bezault, R.Bhimani, J. Wiprovnick, P. Furmanski // Cancer Res. - 1994. - №54. - P.2310-2312.

69. Chen, P.W. Antimicrobial potential for the combination of bovine lactoferrin or its hydrolysate with lactoferrin-resistant probiotics against foodborne pathogens / P.W. Chen, T.T. Jheng, C.L. Shyu, F.C. Mao // J Dairy Sci. - 2013.

- 96(3). - P. 1438-1446.

70. Coppa, G.V. Prebiotics in human milk: a review / G.V. Coppa, L. Zampini, T. Galeazzi, O. Gabrielli // Digestive and Liver Disease. - 2006. - 38. - P.291-294.

71. De Vuyst, L. Resent developments in the biosynthesis and heteropolysaccharide from lactic acid bacteria / L. de Vuyst, F.de Vin, F. Vaningelgem, B. Degeest // International dairy Journal. - 2001. - 11. - P.678-707.

72. Degeest, B. Exopolysacharide (EPS) biosynthesis by Lactobacillus sakei 01: production kinetics, enzyme activities and EPS yield / B. Degeest, B. Janssens, L. de Vuyst // Journal of applied microbiology. - 2001. - 91. - P.470-477.

73. Degeest, B. Microbial physiology, fermentation kinetics, and process engineering heteropolysaccharide production by lactic acid bacteria / B. Degeest, F. Vaningelgem, L. de Vuyst // International dairy Journal. - 2001. - 11. - P.747-757.

74. Duarte, D.C. The effect of bovine milk lactoferrin on human breast cancer cell lines / D.C. Duarte, A. Nicolau, J.A. Teixeira, L.R. Rodrigues // J Dairy Sci. - 2011.

- №94(1). -P.66-76.

75. Ellison, R.T. Killing of gram-negative bacteria by lactoferrin and lysozyme/ R.T. Ellison, T.J. Giehl // J. Clin. Invest. - 1991. - Vol. 88 - P. 1080-1091.

76. Elrod K. C., Moore W. R., Abraham W. M. and Tanaka R. D. (1997) Lactoferrin, a potent tryptase inhibitor, abolishes latephase airway responses in allergic sheep / K.C. Elrod [et al] // Am. J. Respir. Crit. Care Med. - 1997. - №156. - P. 375381.

77. Embleton, N.D. Lactoferrin: Antimicrobial activity and therapeutic potential / N.D. Embleton, J.E. Berrington, W. McGuire, C.J. Stewart, S.P. Cummings // Semin Fetal Neonatal Med. - 2013 Mar. - P. 9-16.

78. Gibbons, J.A. Lactoferrin and cancer in different cancer models / J.A. Gibbons, R.K. Kanwar, J.R. Kanwar // Front Biosci (Schol Ed). - 2011. - S3. - P. 10801088.

79. Gifford, J.L. Lactoferricin : a lactoferrin-derived peptide with antimicrobial, antiviral, antitumor and immunological properties / J.L. Gifford, H.N. Hunter, H.J. Vogel // Cell Mol Life Sci. - 2005. - №62. - P.2588-2598.

80. Goldman I.L. Production of human lactoferrin in animal milk / I.L.Goldman, S.G.Georgieva, Ya.G.Gurskiy, A.N.Krasnov, A.V.Deykin, A.N.Popov, T.G.Ermolkevich, A.I. Budzevich, A.D.Chernousov, E.R.Sadchikova // Biochemistry and Cell Biology. - 2012. - 90(3). - P.513-519.

81. González-Cháveza, S.A. Lactoferrin: structure, function and applications / S. Arévalo-Gallegosa , Q. Rascón-Cruz // Int J Antimicrob Agents. - 2009. - №33. -P.301.el-8.

82. Griffiths, C.E. Exogenous topical lactoferrin inhibits allergen-induced langerhans cell migration and cutaneous inflammation in humans / C.E. Griffiths, M.Cumberbatch, S.C.Tucker, RJ.Dearman, S.Andrew, D.R.Headon, I.Kimber // Br. J. Dermatol. - 2001. - № 144. - P.715-725.

83. Griffiths, E.A. In vitro growth responses of bifidobacteria and enteropathogenes to bovine and human lactoferrin / E.A. Griffiths, L.C.Duffy, F.L. Schanbacher, D. Dryja, A. Leavens, R.L. Neiswander, H. Qiao, D. DiRienzo, P. Ogra // Digestive Diseases and Sciences. - 2003. - Vol.48. - №7. - P. 1324-1332.

84. Haney, E.F. Novel lactoferrampin antimicrobial peptides derived from human lactoferrin / E.F. Haney, K. Nazmi, F. Lau, J.G. Bolscher, H.J.Vogel Biochem. -2009. -№91. -P.141-154.

85. Hellweg, P. Effects of bovine lactoferrin on the immune system and the intestinal microflora of adult dogs / P.Hellweg, S. Krammer-Lukas, A. Strasser, J. Zentek //Archives of Animal Nutrition. - 2008. - Vol.62 (2). -P.152-161.

86. Iacono, V.J. Lytic sensitivity of Actinobacillus actinomycetemcomitans Y4 to lysozyme/ V.J. Iacono, P.R. Boldt, B.J. MacKay, M.I. Cho, J.J. Pollock // Infect Immun. - 1983.- №40(2). - P.773-784.

87. Iigo, M. Inhibitory effects of bovine lactoferrin on colon carcinoma 26 lung metastasis in mice / M. Iigo, T. Kuhara, Y. Ushida, K. Sekine, M.A.Moore, H. Tsuda // Clin. Exp. Metastasis. -1999. - №17. - P.35-40.

88. Ishikawa, H. The protective effects of lactoferrin against murine norovirus infection through inhibition of both viral attachment and replication / H. Ishikawa, N. Awano, T.Fukui, H. Sasaki, Sh. Kyuwa // Biochem Biophys Res Commun. - 2013. Apr. -P.639- 645.

89. Jäkälä P. Antihypertensive Peptides from Milk Proteins / P. Jäkälä, H. Vapaatalo // Pharmaceuticals. - 2010. - 3. - P. 251-272.

90. Jauhiainen T. Blood pressure lowering effects of Lactobacillus helveticus fermented milk containing bioactive peptides ILE-PRO-PRO and VAL-PRO-PRO: mechanistic, kinetic and clinical studies/ T. Jauhiainen // Helsinki - 2007. - 100 p.

91. Jauhiainen, T. Milk peptides and blood pressure / T. Jauhiainen, R. Korpela // The Journal of nutrition. - 2007. - 137. - P. 825S-829S.

92. Jauhiainen, T. Milk products containing bioactive tripeptides have an antihypertensive effect in double transgenic rats (dDTR) harbouring human renin and human angiotensinogen genes/ T. Jauhiainen, T. Pilvi, Z.J. Cheng, H. Kautiainen, D.N.Muller, H. Vapaatalo, R. Korpela, E. Mervaala // Journal of Nutrition and Metabolism. - 2010. - Vol. 6. - P.66-74.

93. Jenssen, H. Antimicrobial properties of lactoferrin / H. Jenssen, R.E. Hancock // Biochem. - 2009. - № 91. - P. 19-29.

94. Kim, W-S. Growth-promoting effects of lactoferrin on L.acidophilus and Bifidobacterium spp. / W-S. Kim, M. Ohashi, T.Tanaka, H.Kumura, G.Y.Kim, I.K.Kwon, J.S.Goh, K. Shimazaki // BioMetals. - 2004. - №17. - P.279-283.

95. Kim, W-S. Lactoferrin-binding proteins in Bifidobacterium bifidum / W.-S. Kim, T. Tanaka, H. Kumura, K. Shimazaki // Biochem. Cell. Biol. - № 80. - P.91-94.

96. Knoshaug, E.P. Growth associated exopolysaccharide expression in Lactococcus lactis subspecies cremoris ropy 352 / E.P. Knoshaug, J.A. Ahlgrent, J.E. Trempy // Journal of dairy science. - Vol. -No.4. - 2000. - P.633-640.

97. Kuhara, T. Orally administered lactoferrin exerts an antimetastatic effect and enhances production of IL-18 in the intestinal epithelium / T. Kuhara, M.Iigo, T.Itoh, Y.Ushida, K.Sekine, N.Terada, H.Okamura, H.Tsuda // Nutr. Cancer. - 2000. - №38. - P. 192-199.

98. Kutila, T. Antibacterial effects of bovine lactoferrin against pathogens/ T.Kutila, S.Pyorala, H.Saloniemi, L.Kaartinen// Acta. Vet. Scand.-2003.-Vol.44.- №1.-P.35-42.

99. Lactoferrin a multiple bioactive protein: An overview / I.A. Garcia-Montoya [et al.] // Biochim. Biophys. Acta. - 2012. - 1820(3). - P.226-236.

100. Li, D. Binding of lactoferrin to IGBP1 triggers apoptosis in a lung adenocarcinoma cell line / D. Li, S.Sakashita, Y. Morishita, J. Kano, A. Shiba, T. Sato, M. Noguchi//Anticancer Res. - 2011 -№31(2). -P.529-534.

101. Lonnerdal, B. Biological effects of novel bovine milk fractions / B. Lonnerdal // Nestle Nutr Workshop Ser Pediatr Program. - 2011. - №67. - P.41-54.

102. Lonnerdal, B. Lactoferrin: molecular structure and biological function / B. Lonnerdal, S. Iyer // Annu Rev Nutr. - 2005. - №15. - P.93-100.

103. Lonnerdal, B. Nutritional roles of lactoferrin / B. Lonnerdal // Curr Opin Clin Nutr Metab Care. - 2009. - №12. - P. 293-297.

104. Looijesteijn, P.J Physiological function of exopolysaccharides produced by Lactococcus lactis/ P.J. Looisteijn, L. Trapet, E.de Vries, T. Abee, J.Hogenholdz // International journal of food microbiology. - 2001. - 64. - P.71-87.

105. Manzoni, P. Lactoferrin for prevention of neonatal infections / P. Manzoni, M. Mostert, M. Stronati // Curr Opin Infect Dis. - 2011. - № 24(3). - P. 177-182.

106. Moore, S.A. Three-dimensional structure of diferric bovine lactoferrin at 2.8 A resolution / S.A. Moore, B.F. Anderson, C.R. Groom, M. Haridas, E.N. Baker // J Mol Biol. - 1997. - V.274. -1.2. - P.222 - 236.

107. Nandi, S. Expression of human lactoferrin in transgenic rice grains for the application in infant formula / S.Nandi, Y.A.Suzuki, J.Huang, D. Yalda, Ph. Pham, L.Wu, G.Bartley, N. Huang, B.Lonnerdal // Plant Sci. - 2002. - №163. - P.713-722.

108. Panella, T.J. Polymorphism and altered methylation of the lactoferrin gene in normal leukocytes, leukemic cells and breast cancer / T.J. Panella, Y.H. Liu, A.T.Huang, C.T. Teng// Cancer Res. - 1991. -№51. -P. 3037-3043.

109. Petschow, B.W. Ability of lactoferrin to promote the growth of Bifidobacterium spp. in vitro is independent of receptor binding capacity and iron saturation level / J. Med. Microbiol. - 1999. - Vol.48. - P.541-549/

110. Petschow, B.W. Response of bifidobacterium species to growth promoters in human and cow milk / B.W. Petschow, R.D. Talbott // Pediatr Res. - 1991. - №29. -P.208-213.

111. Pierce, A. La lactoferrine: une proteine multifonctionelle / A. Pierce, D. Legrand, J. Mazurier // Med Sci (Paris). - 2009 - №25. - P.361-369.

112. Pulusani S. R., Rao D. R. and Sunki G. R. Antimicrobial activity of lactic cultures, partial purification and characterization of antimicrobial compounds produced by streptococcus thermophilus .-J. Food Sci. -1979.-Vol.44.-P.575-578.

113. Rada, V. Susceptibility of bifidobacteria to lysozyme as a possible selection criterion for probiotic bifidobacterial strains / V. Rada, I. Splichal, S. Rockova, M. Grmanova, E. Vlkova // Biotechnology Letters. - 2010. - 32(3). - P.451-455.

114. Rahman, M. Bovine lactoferrin region responsible for binding to bifidobacterial cell surface proteins / M. Rahman, W-S. Kim, H. Kumura, K.Shimazaki // Biotechnol Lett. - 2009. -№31.- P.863-868.

115. Rahman, M. In vitro effects of bovine lactoferrin on autoaggregation ability and surface hydrophobicity of bifidobacteria / M. Rahman, W-S. Kim, H. Kumura, K. Shimazaki // Anaerobe. - 2008. - №14. - P.73-77.

116. Rahman, M.M. Examination of bovine lactoferrin binding to bifidobacteria / M.M. Rahman, W-S. Kim, T.Ito, H.Kumura, K.Shimazaki // Prikl Biokhim Mikrobiol. - 2008. - №44. - P.529-532.

117. Rahman, M.M. Growth-promotion and cell binding ability of bovine lactoferrin to Bifidibacterium longum / M.M. Rahman, W-S. Kim, T.Ito, H. Kumura, K. Shimazaki // Anaerobe. - 2009. - №15. - P.133-137.

118. Ruas-Madeido, P. An overview of the functionality of exopolysaccharides produced by lactic acid bacteria / P. Ruas-Madeido, J.Hogenholdz, P.Zoon // International dairy journal. - 2002. - 12. - P. 163-171.

119. Shimamura, M. Bovine lactoferrin inhibits tumorinduced angiogenesis / M.Shimamura, Y.Yamamoto, H.Ashino, T.Oikawa, T.Hazato, H.Tsuda, M.Ligo // Int. J. Cancer. - 2004. - №111. - P.l 11-116.

120. Shimazaki Kei-Ichi. Lactoferrin: A marvelous protein in milk? / K.-I. Shimazaki // Anim Sci J. - 2000. - Vol.71 - №4. - P.329-347.

121. Shin, K. Antibacterial activity of bovine lactoferrin and its peptides against enterohaemorrhagic Escherichia coli 0157:H7 / K.Shin, K.Yamauchi, S.Teraguchi, H.Hayasawa, M.Tomita, Y.Otsuka, S.Yamazaki // Letters in Applied Micribiology. - 1998. - №6. - P.407-411.

122. Sipola M. Effects of milk products and milk protein-derived peptides on blood pressure and arterial function in rats / M. Sipola // Helsinki. - 2002. - 85 p.

123. Steijns, J.M. Occurrence, structure, biochemical properties and technological characteristics of lactoferrin/ J.M. Steijns, A.C.M. van Hooijdonk // British Journal of Nutrition.- 2000.-Vol.84.- Suppl. l.-P. SI l-sl7.

124. Suzuki, Y.A. Mammalian lactoferrin receptors: structure and function / Y.A. Suzuki, V.Lopez, B.Lonnerdal // Cell. Mol. Life Sci. - 2005. - Vol.62. - P.2560-2575.

125. Teng C. Methylation and expression of the lactoferrin gene in human tissues and cancer cells/ C.Teng, W.Gladwell, I.Raphiou, E.Liu // Biometals - 2004.- №17. - P. 317-323.

126. Tinson M. P-Galactosidase of Streptococcus thermophilus / Tinson M., Wagner M. // Can. Inst. Food Sci. and Technol. J. -1985.-Vol.l5.-No.4.-P.26-28.

127. Torino, M.I. Heterofermentative pattern and exopolysaccharide production by Lactobacillus helveticus ATCC 15807 in response to environmental pH / M.I. Torino, M.P. Taranto, F. Sesma, G. Font de Valdez // Journal of applied microbiology. - 2001. -91.-P. 846-852.

128. Tsuda, H. Cancer prevention by bovine lactoferrin and underlying mechanisms - a review of experimental and clinical studies / H. Tsuda, K.Sekine, K.Fujita, M. Ligo // Biochem. Cell Biol. - 2002. - №80. - P. 131-136.

129. Tung, Y.T. Bovine lactoferrin inhibits lung cancer growth through suppression of both inflammation and expression of vascular endothelial growth factor / Y.T. Tung, H.L. Chen, C.C. Yen, P.Y. Lee, H.C. Tsai, M.F. Lin, C.M. Chen // J Dairy Sci. -2013. - 96(4). -P.2095-2106.

130. Valenti, P. Lactoferrin : an important host defence against microbial and viral attack / P. Valenti, G. Antonini // Cell Mol Life Sci. - 2005. - №62. - P. 2576-2587.

131. Van der Strate, B.W. Antiviral activities of lactoferrin / B.W. van der Strate, L.Beljaars, G.Molema, M.C.Harmsen, D.K.Meijer // Antiviral Res. - 2001. -№52.-P. 225-239.

132. Varadhachary, A. Oral lactoferrin inhibits growth of established tumors and potentiates conventional chemotherapy / A. Varadhachary, J.S. Wolf, K. Petrak, B.W. Jr. O'Malley, M. Spadaro, C. Curcio, G. Forni, F. Pericle // Int. J. Cancer. - 2004. -№111. -P.398-403.

133. Vorland, L.H. Lactoferricin of bovine origin is more active then lactoferricins of human, murine and caprine origin/ L.H. Vorland, H.S. Vivante, J. Andersen, J. Haukland// Scand.J.Infect.Dis.-1998.-Vol.30.-P.513-517.

134. Yamauchi, H. Bovine lactoferrin: benefits and mechanism of action aganst infections / K.Yamauchi, H. Wakabayashi, K. Shin, M. Takase // Biochem. Cell Biol. -2006. - №8. - P.291-296.

135. Zavaleta, N. Efficacy of rice-based oral rehydratation solution containing recombinant human lactoferrin and lysozyme in Peruvian children with acute diarrhea / N. Zavaleta, D.Figueroa, J.Rivera, J. Sánchez, S. Alfaro, B. Lonnerdal // Journal of pediatric gastroenterology and nutrition . - 2007. - №44. - P.258-264.

136. Zhang J. Expression of active recombinant human lactoferrin in the milk of transgenic goats / J.Zhang, L.Li, Y.Cai, X.Xu, J.Chen, Y.Wu, H.Yu, G.Yu, S.Liu, A.Zhang, J.Chen, G.Cheng // Protein Expression and Purification. - 2008. - 57(2). -P.127-135.

ДИПЛОМ

НАГРАЖДАЕТСЯ

$040 жима Зсшпь^ыои

Т^и/солаеома

Моссобекии гоша-рв/пШкн^и мибгреимелг

у^д^Ш ЬиотемолЪгигс

лауреат II ПРЕМИИ КОНКУРСА ПРОЕКТОВ МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ

\мши

Президент Российского

химического общества им Д И Менделеева

П Д Саркисов

ЭКСПОЦЕНТР

Генеральный директор ЦБК "Экспоцентр" В.Л. Малькевич

а:.

IX международной конференции студентов и молодых ученых «ЖИВЫЕ СИСТЕМЫ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ НАСЕЛЕНИЯ»

НАГРАЖДАЕТСЯ

Р0Г0ЖИНа Т.Н. (аспирант)

за участие в IXмеждународной конференции и научный доклад

«Инновационные пути повышения функциональных свойств продуктов»

Таблица 1 - Данные для построения калибровочной кривой определения концентрации

лизоцима

экстинкция Концентрация лизоцима, мкг/мл

40 80 120 160 200

Е0(15с) 0,3700 0,3400 0,3300 0,3500 0,3700

Ее(180 с) 0,0925 0,1000 0,1275 0,1750 0,2000

Ее — Ео 0,2775 0,2400 0,2025 0,1750 0,1700

Ео(15с) 0,3500 0,3200 0,3300 0,3350 0,3600

Ее(180 с) 0,0900 0,1050 0,1325 0,1750 0,2500

Ее — Ео 0,2600 0,2150 0,1975 0,1600 0,1100

Ео(15 с) 0,3500 0,3400 0,3100 0,3350 0,3500

Ее(180 с) 0,0900 0,1400 0,1250 0,1730 0,2100

Ее — Ео 0,2600 0,2000 0,1850 0,1620 0,1400

Ео (15 с) 0,3400 0,3200 0,3200 0,3300 0,3500

Ее(180 с) 0,0875 0,1000 0,1250 0,1700 0,2100

Ее — Ео 0,2525 0,2200 0,1950 0,1600 0,1400

среднее 0,2625±0,0185 0,2188±0,0287 0,1950±0,0130 0,1643±0,0127 0,1400±0,0425

Таблица 1 - Изменение оптической плотности и количества клеток при развитии культур на ___МЯЗ-бульоне__

Ь. ас1с1ор1Шиз АСТ-41 Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм Активная кислотность, ед. рН Количество клеток, ^ КОЕ/см3

0 0.0375±0.0018 6.60±0.02 5.62±0.32

8 0.5000±0.0015 6.41±0.02 6.39±0.11

14 0.8315±0.1025 5.16±0.11 7.04±0.11

24 1.5500±0.0707 4.35±0.10 8.14±0.14

Ь. аасЬрЬПиэ АЕ-5 Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм Активная кислотность, ед. рН Количество клеток, КОЕ/см3

0 0.0192±0.0070 6.52±0.02 5.85±0.11

8 0.535±0.0637 5.45±0.11 7.02±0.32

14 1.0970±0.3391 4.63±0.08 8.04±0.11

24 1.4363±0.1183 4.27±0.04 8.44±0.14

г- 00 00 VI Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм Активная кислотность, ед. рН Количество клеток, КОЕ/см3

з я 0 0.0775±0.0066 6.35±0.66 6.03±0.15

л а 4 0.4320±0.0093 5.52±0.66 7.06±0.10

о -а 8 0.9710±0.0479 4.64±0.02 7.78±0.09

о а 12 1.3638±0.1183 4.25±0.03 8.63±0.05

нЗ 16 1.5000±0.0025 4.03±0.02 8.63±0.11

1-Н 1 а и и Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм Активная кислотность, ед. рН Количество клеток, ^ КОЕ/см3

0 0.2100±0.0015 5.51±0.02 6.66±0.11

4 0.9980±0.0020 4.75±0.02 7.43±0.11

В з 6 1.6300±0.0583 4.52±0.03 8.17±0.12

ь я 8 2.4000±0.0125 4.32±0.02 8.64±0.05

а а 10 2.8200±0.0125 4.19±0.02 8.78±0.06

а 12 3.3000±0.0125 4.15±0.02 8.62±0.06

16 3.8640±0.0517 4.12±0.02 8.45±0.12

20 4.1976±0.0128 4.03±0.02 8.40±0.15

гч Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм Активная кислотность, ед. рН Количество клеток, ^ КОЕ /см3

г ^ 0 0.1692±0.0026 5.67±0.02 6.97±0.11

4 0.8224±0.0346 5.55±0.02 7.23±0.12

В Я я о 6 1.5000±0.0025 5.19±0.02 8.15±0.18

8 2.1040±0.1050 4.91±0.03 8.50±0.10

10 2.4000±0.0125 4.73±0.03 8.97±0.11

12 2.6000±0.0125 4.57±0.02 8.88±0.12

16 2.6800±0.0125 4.53±0.02 8.71±0.04

20 2.7600±0.0128 4.51±0.02 8.65±0.11

Приложение 4 Продолжение таблицы 1

> о Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм Активная кислотность, ед. рН Количество клеток, КОЕ / см3

N »Л и VI 3 сю О 0 0.0400±0.0020 5.80±0.04 6.81±0.12

4 0.0995±0.0026 5.70±0.02 7.00±0.11

6 0.2635±0.0043 5.54±0.03 7.41±0.02

8 0.6358±0.0130 5.16±0.02 7.95±0.40

а а я л 10 0.9230±0.0049 4.94±0.03 8.22±0.11

12 1.4400±0.0226 4.68±0.02 8.33±0.41

и -3 16 1.7775±0.0269 4.45±0.02 8.94±0.09

20 2.3000±0.0141 4.14±0.02 8.83±0.06

а _ ^ 1-Н Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм Активная кислотность, ед. рН Количество клеток, 1§ КОЕ/см3

0 0.0363±0.0018 5.65±0.02 6.65±0.10

и . 1 £ > £ ^ « и 8 0.1527±0.0076 5.50±0.03 7.39±0.19

12 0.5747±0.0142 5.14±0.06 8.57±0.18

м 18 1.5514±0.0776 4.51±0.10 8.67±0.05

24 1.8476±0.0920 4.35±0.10 8.65±0.19

Таблица 1 - Влияние лизоцима на развитие L. acidophilus АСТ-41 в среде MRS

Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм РН

Концентрация лизоцима, мг/см3 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1

0 0.055 0.0495 0.05 0.0425 6.69 6.71 6.71 6.72

8 0.7 0.52 0.05 0.2 5.35 5.55 5.87 5.94

И4 tlf35##Sf 10.9991$ юш 4.59 4.56 4.82 4.99

24 1.6 1.6 1.599 1.5 4.12 4.11 4.19 4.30

Таблица 2 - Влияние лизоцима на развитие L. acidophilus АЕ-5 в среде MRS

Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм РН

Концентрация лизоцима, мг/см3 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1

0 0.025 0.018 0.0246 0.005 6.71 6.73 6.73 6.73

8 0.4 0.03 0.0195 0.010 5.74 6.41 6.52 6.59

0Я5ШШ -0127 !0:0459§ 0.031 i 4.88 5.67 6.34 6.48

24 1.0 0.95 0.14 0.05 4.68 4.93 5.93 6.26

Таблица 3 - Влияние лизоцима на развитие L. acidophilus 887 в среде MRS

Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм РН

Концентрация лизоцима, мг/см3 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1

0 0.08 0.0745 0.095 0.075 6.47 6.48 6.48 6.47

4 0.35 0.369 0.371 0.370 5.62 5.61 5.60 5.62

18 г т^мъ Ш 10:89611 10.9085; «01902« 4.78 4.72 4.70 4.74

12 1.3 1.2 1.27 0.96 4.42 4.46 4.40 4.45

16 1.36 1.3 1.5 1.075 4.15 4.18 4.12 4.26

Таблица 4 - Влияние лизоцима на развитие L. plantarum ГВИ-1в среде MRS

Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм РН

Концентрация лизоцима, мг/мсм3 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1

0 0.2100 0.2040 0.2000 0.1700 5.51 5.52 5.51 5.52

4 0.9980 1.0632 1.0820 1.1200 4.75 4.75 4.65 4.75

6 1.6260 1.8000 1.6300 1.7000 4.52 4.52 4.52 4.53

8 2.4000 2.6060 2.6000 2.6000 4.32 4.30 4.30 4.26

тшшшш Ш18200Ш taioooof 3*.0000t 13-102001 4.19 4.18 4.17 4.17

12 3.0000 3.0200 3.0100 3.2000 4.15 4.14 4.15 4.12

16 3.8640 4.2126 3.9870 3.9300 4.15 4.10 4.09 4.04

20 4.1976 4.5000 4.2000 4.26 3.91 3.91 3.91 3.88

Таблица 5- Влияние лизоцима на развитие L. fermenum LFM-2 в среде MRS

Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм РН

Концентрация лизоцима, мг/мсм3 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1

0 0.1692 0.1500 0.1600 0.1620 5.59 5.58 5.58 5.56

4 0.8224 0.8844 0.8816 0.9200 5.01 5.05 4.97 4.88

6 1.5000 1.6200 1.7800 1.6000 4.73 4.70 4.65 4.71

8 2.1040 2.2000 2.4000 2.0800 4.60 4.54 4.50 4.61

¿2.'4000Й!Й >'2:5000$ 12:боооШ 12Г60001' 4.48 4.46 4.45 4.47

12 2.6000 2.7800 2.7800 2.7800 4.47 4.44 4.42 4.45

16 2.6150 2.8200 2.8160 2.8090 4.43 4.42 4.40 4.44

20 2.6888 2.8800 2.8500 2.8688 4.36 4.36 4.36 4.36

Таблица 6 - Влияние лизоцима на развитие L. г

Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм РН

Концентрация лизоцима, мг/смЗ Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1

0 0.0200 0.0150 0.0200 0.0200 5.78 5.78 5.78 5.78

4 0.0950 0.0700 0.1010 0.0950 5.67 5.68 5.66 5.66

8 0.8000 0.7200 0.8500 0.7800 4.98 5.01 4.99 4.97

10 0.9640 1.1000 1.1800 1.3500 4.80 4.79 4.75 4.70

Ш000ШМ 1212000$ £11995» ¡2:2080.« 4.62 4.41 4.40 4.38

16 2.8000 2.7600 2.6800 2.8000 4.37 4.24 4.24 4.20

20 2.8500 3.0400 3.1000 3.2000 4.30 4.05 4.02 4.01

lamnosus LC-52GV в среде MRS

Таблица 7 - Влияние лизоцима на развитие В. adolescentis BGV-11 в среде MRS

Часы Оптическая плотность (Д), 670 нм РН

Концентрация лизоцима, мг/см3 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1 Контроль 0.00 0.05 0.075 0.1

0 0.0100 0.0200 0.0150 0.0100 5.70 5.72 5.70 5.70

8 0.5200 0.0475 0.0450 0.0480 5.10 5.15 5.17 5.17

$12t-й' ШОООЩ ffiOOOOt ЖОООО» fllOOOOf 4.70 4.79 4.81 4.85

18 1.4100 1.4900 1.5000 1.5000 4.41 4.44 4.43 4.44

24 1.4900 1.5500 1.5600 1.5600 4.35 4.34 4.35 4.35

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ и НАУКИ

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального

образования

«Московский государственный университет прикладной биотехнологии»

(ГОУВПОМГУЛБ)

Группа Н 17

аучной

. Семёнов 2011г.

ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ ИНСТРУКЦИЯ

ПО ПРОИЗВОДСТВУ НАПИТКА НИЗКОЛАКТОЗНОГО ИЗ МОЛОЧНОЙ СЫВОРОТКИ по ТУ 9222-00.. .-58693373-2011

Разработано:

Зав. каф.,

д.т.н., проф. В.И. Ганина

Аспирант Т.Н. Рогожина

Москва 2011г.

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ и НАУКИ

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального

образования

«Московский государственный университет прикладной биотехнологии»

(ГОУ ВПО МГУПБ)

Группа Н 17

аучнои

Семёнов # 201Хг,

ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ ИНСТРУКЦИЯ

ПО ПРОИЗВОДСТВУ НАПИТКА НИЗКОЛАКТОЗНОГО ИЗ МОЛОЧНОЙ СЬЮОРОТКИ по ТУ 9222-00...-58693373-2011

Разработано: Зав.каф., -

д.т.н., проф. в.И. Ганина

Аспирант ^_Т.Н. Рогожина

Москва 2011г.