Продукция в растениях биологически активных миелоцитокинов человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.06, кандидат биологических наук Зверева, Анна Сергеевна

• Зверева, Анна Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Зверева, Анна Сергеевна

ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ СОКРАЩЕНИЯ.

I. ВВЕДЕНИЕ.

II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ПРОИЗВОДСТВО РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ В РАСТЕНИЯХ.

II. 1. Экспрессия рекомбинантных белков в трансгенных растениях.

Продукция рекомбинантных антител в трансгенных растениях.

Недостатки трансгенной технологии.

II.2. Системы экспрессии на основе вирусов-векторов растений.

Типы вирусных веторов.

Продукция антител с помощью вирусов-векторов в растениях.

Продукция антигенов с помощью вирусов-векторов в растениях.

Применение вирусов-векторов растений в нанотехнологии.

III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Создание конструкций для экспрессии миелоцитокинов в растениях.

Экспрессия hG-CSF в листьях N. benthamiana.

Определение биологической активности phG-CSF.

Экспрессия hGM-CSF в листьях N. benthamiana.

Определение биологической активности phGM-CSF.

БЛАГОДАРНОСТИ.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Зверева, Анна Сергеевна

1. Впервые получены вирусные векторы на основе тобамовирусов для продукции рекомбинантных цитокинов hG-CSF и hGM-CSF в растениях.2. Разработана методика заражения и культивирования зараженных растений Nicotiana benthamiana. Установлено, что максимальный уровень синтеза рекомбинантных цитокинов наблюдается на пятые сутки после заражения.3. Разработана методика выделения рекомбинантных цитокинов из растений, позволяющая получать биологически активные препараты hG-CSF и hGM-CSF с высоким выходом.4. Показано, что синтезированные в растениях hG-CSF и hGM-CSF обладают такой же колониестимулирующей активностью, как и аналогичные препараты, уже применяемые в медицине.БЛАГОДАРНОСТИ Хочу поблагодарить людей, с помощью которых состоялась эта работа.В первую очередь своих научных руководителей: Атабекова Иосифа Григорьевича за ценные советы и направление в нужное русло, Долгих Дмитрия Александровича за помощь в интерпретации результатов и написании работы, Кирпичникова Михаила Петровича за сотрудничество, Дорохова Юрия Леонидовича за формирование моей стойкости. Особую признательность выражаю Петровской Ладе Евгеньевне за многочисленные обсуждения, тщательное редактирование данной работы и моральную поддержку. Большое спасибо Иванову Петру Алексеевичу за обучение хитростям молекулярной методологии и внимательную правку работы.Благодарю Фролову Ольгу Юрьевну за бесчисленные консультации в проведении экспериментов, Шварца Антона Марковича, Комарову Татьяну Валерьевну и Шевелеву Анну Александровну за дружескую атмосферу и поддержку в сложных ситуациях. Отдельная благодарность Скулачеву Максиму Владимировичу за разжигание интереса к науке, помощь и оптимизм и Пугину Михаилу Михайловичу за придание этой работе ускорения и конструктивные советы и замечания.Большая благодарность Дризе Нине Иосифовне и Шипуновой Ирине Николаевне за определение биологической активности phG-CSF, Родиной Алле Валерьевне за определение биологической активности phGM-CSF, Гаспарян Марине Эдуардовне за предоставленный препарат энтеропептидазы и Сухачевой Елене Александровне за препарат мышиных антител к rhG-CSF.