Поведение опухолевых и неопухолевых рекомбинантных клонов, индуцированных генотоксическими канцерогенами и промоторами опухолевого роста в имагинальных дисках Drosophila melanogaster тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Сидоров, Роман Александрович

• Сидоров, Роман Александрович
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Сидоров, Роман Александрович

СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Основные классы химических канцерогенов.

2.1.1. Полихлорированные диоксины и дибензофураны.

2.1.2. Полихлорированные бифенилы.

2.1.3. Полициклические ароматические углеводороды и их производные.

2.1.4. Афлатоксины.

2.1.5. Хлорорганические пестициды.

2.1.6. Нитрозамины.

2.1.7. Тяжёлые металлы.

2.1.8. Мутагенные лекарственные средства (на примере препаратов платины).

2.2. Методы детекции мутаций у дрозофилы.

2.2.1. Тесты на рецессивные летали.

2.2.1.1. Метод С1В.

2.2.1.2. Метод "Мёллер-5".

2.2.1.3. Метод сцепленных X-хромосом,.

2.2.1.4. Определение рецессивных леталей в аутосомах.

2.2.2. Методы учёта делеций и дупликаций.

2.2.3. Методы учёта инверсий.

2.2.4. Методы учёта транслокаций.

2.2.5. Тесты на соматические мутации.

2.2.5.1. Мозаичный гинандроморфизм.

2.2.5.2. Тесты на индукцию анеуплоидии в соматических клетках.

2.2.5.3. Соматическая рекомбинация.

2.2.6. Предпосылки к построению теста, моделирующего возникновение опухолей у дрозофилы.

2.2.6.1. Механизмы, препятствующие формированию опухолевых клонов.

2.2.6.2. Гены-супрессоры имагинальных опухолей.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Химические канцерогены.

3.2. Drosophila melanogaster.

3.3. Сканирующая электронная микроскопия.

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4.1. Действие мутагенных канцерогенов на гетерозигот wt/2/+.

4.2. Токсическое действие мутагенных канцерогенов на гетерозигот wtsP2/+.

4.3. Частоты опухолевых и неопухолевых клонов у особей Fi скрещивания ^ у w; wtsxl ГГМ6В Х^с? w sn . Изучение действия гена wts на соматический мозаицизм по другим локусам.

4.4. Модифицирующее действие гена Р53 на частоты опухолевых клонов.

4.5. Частоты опухолевых клонов у особей, имеющих мутации Р53 и wts в цис-положении. Влияние Р53 на частоты неопухолевых клонов jy, sn и y-sn.

4.5.1. Действие Р53 в цис-положении по отношению к wts.

4.5.2. Влияние Р53 на частоты неопухолевых клонов.

4.6. Влияние хромосомы-балансера ТМ6В на частоты опухолей.

4.7. Распределение опухолей по областям тела мухи.

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

5.1. Создание системы скрининга канцерогенов на дрозофиле, позволяющей регистрировать опухоли у имаго.

5.2. Чувствительность системы, основанной на мутантном супрессоре опухолевого роста wts, к химическим канцерогенам различных классов.

5.3. Материнский эффект в наследовании гена wt^2.

5.4. Сравнение эффективности тест-системы, основанной на индукции опухолей у гетерозигот wtsP2/+, с традиционными тестами на соматический мозаицизм по неопухолевым маркерам у дрозофилы.

5.4.1. Сравнение общей эффективности тестов.

5.4.2. Сравнение орган-специфических частот клонов различных типов.

5.4.2.1 .Сравнение частот опухолей wts с частотами мозаичных клонов mwh и fir на крыле.

5.4.2.2. Сравнение частот опухолей wts с частотой мозаицизма по неопухолевым маркерам у и sn на абдомене.

5.4.2.3. Сравнение частот опухолей wts с частотами клонов jy и sn в классическом SMART-тесте на нотуме, голове и гумерусах.

5.5. Сравнение частот опухолевых и неопухолевых клонов в комбинированном эксперименте.

5.6. Анализ распределения опухолей по поверхности тела мухи.

5.7. В комбинированном тесте ген wts не влияет на неопухолевые клоны.

5.8. Генетические влияния на частоту опухолей wts: мутация Р53.

5.9. Генетические влияния на частоту опухолей wts: супрессор кроссинговера, балансер хромосомы III - ТМбВ.

6. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Поведение опухолевых и неопухолевых рекомбинантных клонов, индуцированных генотоксическими канцерогенами и промоторами опухолевого роста в имагинальных дисках Drosophila melanogaster»

Актуальность темы. Количество синтезируемых промышленностью новых химических соединений непрерывно растёт, значительная их часть представляет опасность в канцерогенном отношении. Канцерогенную активность веществ принято выявлять в тестах на млекопитающих, которые наряду с неоспоримыми достоинствами имеют и существенные недостатки - низкую пропускную способность, высокую стоимость и трудоёмкость. В связи с этим в тестах на млекопитающих возможна своевременная оценка лишь небольшой части новых веществ. Поэтому предварительную оценку канцерогенной опасности проводят с помощью скрининговых тестов на мутагенность, в основе которых лежит тот факт, что мутагенез в большинстве случаев является основной и необходимой составляющей химического канцерогенеза. Тесты на соматический мутагенез, широко применяемые на дрозофиле, наиболее близко подходят к моделированию процесса канцерогенеза, поскольку в его основе также лежат соматические мутации.

Однако получаемые в таких тестах данные о мутагенной активности веществ нельзя в полном объёме переносить на их бластомогенную активность, поскольку рост и прогрессия опухолевых клонов обладают спецификой, которой нет у неопухолевых клонов, регистрируемых в тестах на соматический мутагенез.

В последние годы появились предпосылки к созданию системы для моделирования процессов бластомогенеза на дрозофиле. В частности, в геноме дрозофилы определён ряд генов, рецессивные мутации в которых приводят в гомозиготном состоянии к формированию новообразований, характеризующихся, как и опухоли человека, неконтролируемым ростом, инвазивностью и, в ряде случаев, способностью к метастазированию. Некоторые из них трансплантабельны.

Большинство этих генов является рецессивными эмбриональными, личиночными или куколочными деталями, поскольку формирующиеся опухолевые массы вызывают нарушения морфогенеза. Это существенно затрудняло исследования канцерогенеза у дрозофилы. Позволяет преодолеть данное затруднение использование особей, гетерозиготных по рецессивной мутации в гене-супрессоре опухолевого роста. Клоны клеток имагинальных дисков, ставшие в результате мутации или рекомбинации гомозиготными по данному гену, как правило, не проявляют летального эффекта, имеют опухолевый фенотип и визуализируются у имаго в виде легко регистрируемых кутикулярных разрастаний.

Гены-супрессоры опухолевого роста дрозофилы зачастую демонстрируют яркую структурную и функциональную гомологию с соответствующими генами человека и млекопитающих [Rijsewijk et al., 1987; Larsson C. et al., 1994; Barth A.I., Nelson W.J., 2002; Ramakrishna N.R., Brown A.M., 1993; The I. et al., 1997; Nemani M. et al., 1996]. В частности, нормальные аллели исследуемого в настоящей работе гена дрозофилы warts так же, как и его человеческого гомолога h-lats, являются супрессорами опухолевого роста. Его мутации имеют следствием у дрозофилы опухоли имагинальных дисков, а у человека ассоциированы с опухолями яичников и молочной железы. Продукт человеческого h-lats способен восстанавливать жизнеспособность и предотвращать формирование опухолей у гомозиготных по warts особей дрозофилы, что свидетельствует о высокой степени эволюционной консервативности данного гена.

В связи с изложенными фактами, представляется актуальной разработка тест-системы скрининга канцерогенов, основанной на использовании мутации гена-супрессора опухолевого роста warts (wts), в которой показателем активности изучаемых веществ станет индукция ими опухолей у дрозофилы.

Основные задачи исследования. Фундаментальные: показать возможность индукции опухолей, образованных производными имагинальных дисков, у имаго дрозофилы; изучить бластомогенное действие активных канцерогенов млекопитающих и их слабо- и неканцерогенных аналогов на дрозофиле; изучить влияние мутаций и структурных перестроек хромосом, затрагивающих митотический кроссинговер (инверсии в хромосоме-балансере ТМ6В) и индуцированный мутагенами апоптоз (Р53), на частоты опухолевых клонов wts и неопухолевых клонов у и sn; сравнить частоты опухолевых клонов в производных различных имагинальных дисков дрозофилы. Прикладные: на основе результатов фундаментальных исследований создать тест-систему скрининга канцерогенов, ответом в которой служила бы индукция опухолей; сравнить ряд канцерогенных соединений различных классов по их способности индуцировать опухоли у особей дрозофилы, гетерозиготных по мутациям в генах-супрессорах опухолевого роста; сопоставить частоту опухолей с частотой мозаицизма в классической системе видимых маркеров у и sn.

Научная новизна. Впервые разработана методика скрининга канцерогенов на дрозофиле, где ответом является индукция опухолей. Впервые изучена сравнительная способность ряда канцерогенных соединений различных классов индуцировать опухоли у особей дрозофилы, гетерозиготных по мутации в гене-супрессоре опухолевого роста. Сопоставлена канцерогенная активность химических соединений у млекопитающих с их бластомогенностью для дрозофилы. Впервые изучены генетические влияния на частоту опухолей у дрозофилы. Впервые сравниваются частоты опухолевых и неопухолевых клонов у дрозофилы. Также впервые произведена оценка чувствительности производных 7 различных имагинальных дисков дрозофилы к бластомогенному действию химических веществ.

Научно-практическая значимость работы. Теоретическая значимость работы заключается в доказательстве возможности индукции опухолевых клонов у имаго дрозофилы, изучении действия генотоксических канцерогенов и их слабоканцерогенных аналогов на возникновение, рост и визуализацию опухолевых клонов, выявление чувствительных к индукции опухолей закладок органов мухи. Кроме того, теоретическую ценность представляет изучение генетических факторов, понижающих или повышающих частоту опухолей, сравнение поведения опухолевых и неопухолевых клонов в различной генотипической среде. Практическая значимость работы заключается в создании методики скрининга канцерогенов на дрозофиле, где в качестве ответа возникали бы опухоли, более чувствительной, нежели применяющиеся в настоящее время тесты на соматический мутагенез с использованием неопухолевых маркеров. Материалы данного исследования послужат также разработке комбинированных тестов, сочетающих мутации в нескольких генах-супрессорах опухолевого роста, а также специализированных тестов для выявления вклада соматических мутаций и рекомбинации в частоту опухолей. Результаты работы имеют существенное значение для оптимизации мониторинга загрязнения окружающей среды канцерогенами и могут быть внедрены в практику в виде методических рекомендаций и научных публикаций.

2. Обзор литературы

Заключение диссертации по теме «Онкология», Сидоров, Роман Александрович

6. Выводы

1. Впервые разработана система скрининга канцерогенных соединений на дрозофиле, имеющая показателем бластомогенной активности образование опухолей у взрослых насекомых.

2. На примере канцерогенов 5 различных классов показано, что система чувствительна как к канцерогенам прямого действия, так и к проканцерогенам, требующим предварительной метаболической активации.

3. На материале 10 веществ показано хорошее соответствие вызываемого этими веществами бластомогенного эффекта у дрозофилы с их канцерогенной активностью у млекопитающих.

4. Чувствительность разработанной системы к действию канцерогенных ПАУ, а также к ацетиламинофлуоренам, превосходит чувствительность всех известных ранее методов, основанных на соматическом мозаицизме у дрозофилы.

Р7

5. Чувствительность к химическим канцерогенам гетерозигот wts /+, получивших

Р2 ген wts по отцовской линии, превосходит таковую гетерозигот, получивших этот ген по материнской линии. В связи с этим первых целесообразнее использовать в скрининговых целях.

6. Чувствительность закладок различных органов к мутагенному действию химических канцерогенов неодинакова. Наибольший вклад в суммарное количество опухолей вносили опухоли на крыльях, нотуме и ногах; наименьший - на абдомене и гумерусах.

7. Доминантная мутация в гене Р53, вызывающая отмену индуцированного мутагенами апоптоза, не влияет на частоту неопухолевых клонов у и sn, но многократно увеличивает частоту опухолей wts. Эффект проявляется при действии мутагенов, вызывающих апоптоз по Р53-зависимому механизму (оксоплатин), и не проявляется при действии мутагенов, вызывающих апоптоз по Р55-независимому механизму (бенз(а)пирен, другие ПАУ). Усиливающее влияние мутации Р53 распространяется как на соматическую рекомбинацию, так и на точковые мутации и делеции в локусе wts'.

8. Сопоставление частот опухолей у /иранс-д и гетерозигот Р53 + / + wts и цис-дигетерозигот Р53 wts / + + даёт основание для вывода, что мутация Р53 действует до образования опухолевого клона, понижая вероятность апоптоза клеток с предмутационными повреждениями ДНК.

9. Мутация Р53 изменяет органное распределение опухолей у гетерозигот wts/+ при индуцированном мутагенезе, резко увеличивая вклад опухолеобразования на ногах и, отчасти, голове, тогда как вклад опухолей на нотуме снижается. В случае спонтанного

144 мутагенеза у дигетерозигот по генам Р53 и wts распределение опухолей по наружным органам остаётся прежним.

10. Митотический кроссинговер является преобладающей причиной возникновения опухолей у гетерозигот wts/+ сравнительно с точковыми мутациями и делециями в нормальном аллеле локуса wts. Введение хромосомы-балансера ТМ6В гетерозиготам по гену wts, запирающей кроссинговер в хромосоме III, существенно снижает частоту опухолей. То же справедливо для дигетерозигот по генам wts и Р53.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Сидоров, Роман Александрович, 2002 год

1. Ауэрбах Ш. Проблемы мутагенеза. - М - Мир - 1978. - 463 с.

2. Грушко Я. М. Вредные неорганические соединения в промышленных сточных водах. -Л.-Химия.- 1979.- 160 С.

3. Добровольская М.А. Чувствительность геномных последовательностей D. melanogaster к мутагенному действию химических канцерогенов. Дис. канд. биол. наук. М. - РОНЦ РАМН. - 1998. 119 С.

4. Загрязнение атмосферы и почвы. М. - Гидрометеоиздат- 1977. - Вып. 7(76). - 150 С.

5. Захаренко Л.П., Захаров И.К. Проблема истинных и ложных мутантных пятен типа mwh в методе соматических мозаиков на клетках крыла Drosophila melanogaster // Генетика. -1996. Т. 32. - N 6. - С. 755-758.

6. Зигель X. (Ред.) Некоторые вопросы токсичности ионов металлов. М. - Мир. -1993.-368 с.

7. Крыжановская М. В., Широкая Л. Г. Последствия поступления дибензодиоксинов и дибензофуранов для окружающей среды и живых организмов: Науч. Обзор. М.— 1983.-35 С.

8. Крятов И. А., Авхименко М. М., Цапкова Н. Н. Полихлорированные бифенилы и диоксины опасные и персистентные загрязнители окружающей среды // Гигиена и санитария. - 1991. - № 12. - С. 68 - 72.

9. Майстренко В. Н., Хамитов Р. 3., Будников Г. К. Эколого-аналитический мониторинг супертоксикантов. М. - Химия. - 1996. - 319 С.

10. Оксенгендлер Г. И. Яды и организм. СПб. - Наука. - 1991. - 320 С.

11. Орлова Н.Н. Генетический анализ. М. - Изд-во МГУ. - 1991. - 318 С.

12. Перельман. В.И. (Сост.) Краткий справочник химика М. - Гос. Научно-техническое изд-во хим. лит-ры. - 1963. - 620 с.

13. Ровинский Ф. Я., Теплицкая Т. А., Алексеева Т. А. Фоновый мониторинг полициклических ароматических углеводородов.-Л- Гидрометеоиздат. -1988 224 С.

14. Сальникова JI. С. Нитрозамины. М - Центр междунар. проектов ГКНТ. - 1983. - 27 С.

15. Тинсли И. Поведение химических загрязнителей в окружающей среде. М. - Мир. -1982.-280 С.

16. Тупицына Е. М. Изучение природы соматического мозаицизма Drosophila melanogaster. // Генетика. № 1. - 1965.

17. Тутельян В. А., Лашнева Н. В. Полихлорированные бифенилы. М. - 1988. - 302 С.

18. Уотсон Дж. Молекулярная биология гена. М - Мир, 1967. - 540 С.

19. Фукс С.Ю. Особенности метаболизма ароматических проканцерогенов у чувствительных и резистентных к бенз(а)пирену линий дрозофилы. Дис. канд. биол. наук,- М.- РОНЦ РАМН,- 1991,- 119 С.

20. Хованова Е.М. Необычный характер соматического мозаицизма у гетерозиготных по гену yellow самок Drosophila simulans // Генетика.- 1977.- Т.13, N.11.- С.1966-1971.

21. Хованова Е.М. О роли пропионовой кислоты, дрожжей и этилового спирта в регуляции активности Н-фактора у Drosophila simulans// Генетика.- 1977.- Т.13, N.12-C. 2173-2179.

22. Хованова Е.М.,Смирнова С.Г. Об особенностях проявления действия Н-фактора в производных различных имагинальных дисков Drosophila simulans// Генетика. -1984,-Т.20, N.2. С.254-259.

23. Худолей В.В. Канцерогены: характеристики, закономерности, механизмы действия. С.-Петербург,- НИИ Химии СпбГУ. 1999. - 419 стр.

24. Шарупич Е.Г. Соматический мутагенез у Drosophila melanogaster, индуцированный канцерогенными и неканцерогенными N-нитрозосоединениями- Дис. канд. биол. наук. М - Всесоюзный онкологический научный центр АМН СССР - 1980.- 154 С.

25. Янышева Н. Я., Киреева И. С. Гигиенические проблемы охраны окружающей среды от загрязнения канцерогенами. Киев. - Здоровья. - 1985. - 103 С.

26. Abbadessa R., Burdick А.В. The effect of X-irradiation on somatic crossing-over in D. melanogaster. //Genetics. 1963. - v. 48, N 10. - p. 1345 - 1356.

27. Achmed M., Focht D.D. Degradation of polychlorinated biphenyls by two species of Achromobacter. // Can. J. Microbiol. 1973. - N 19. - P. 47 - 52.

28. Adams J.D., Lavoie E.J., O'Donnell M., Hoffmann D. Pharmacokinetics Of Tobacco-Specific N-nitrosamines // N-nitroso Compounds: Occurrence, Biological Effects and Relevance to Human Cancer, IARC Scientific Publication. 1984. - No. 57. - p. 779-785.

29. Ashburner M. Drosophila: a laboratory handbook. Cold Spring Harbor Laboratory Press.- 1989. p. 211 - 212.

30. Baetjer A.M. In: Udy J. (ed.) Chromium. V.l Chemistry of chromium and its compounds. - New York: Reinhold Public Corp. - 1956. - P. 76.

31. Baker B.S., Smith D.A. The effects of mutagen-sensitive mutants of Drosophila melanogaster in nonmutagenized cells. // Genetics. 1979. - 92. - p. 833 - 847.

32. Ball R.W., Wilson D.W., Coulombe R.A. Jr. Comparative formation and removal of aflatoxin В 1-DNA adducts in сultured mammalian tracheal epithelium. // Cancer Res. -1990. Aug 15;50(16). - p. 4918-4922.

33. Bangs P., White K. Regulation and Execution of Apoptosis During Drosophila Development.//Dev. Dynamics. 2000.-218. - p. 68 - 79.

34. Barth A.I., Nelson W.J. What can humans learn from flies about adenomatous polyposis coli? // Bioessays. 2002. - Sep;24(9). - p. 771-774.

35. Batiste-Alentorn M., Xamena N., Creus A., Marcos R. Genotoxic evaluation of ten carcinogens in the Drosophila melanogaster wing spot test // Experientia. -1995 51(1). -p. 73-76.

36. Becker H.J. X-ray and TEM-induced mitotic recombination in Drosophila melanogaster: unequal and sister-strand recombination // Mol. Gen. Genet. -1975. 138. - p. 11-24.

37. Belitsky G.A., Khovanova E.M., Budunova I.V., Sharuptis H.G. Mycotoxin induction of somatic mosaicism in Drosophila and DNA repair in mammalian liver cell cultures. // Cell. Biol. Toxicol. 1985. - Jun;l(3).- p.133-143.

38. Blair E.H. (Ed.) Chlorodioxins origins and fate, - Washington (D. C.): Amer. Chem. Soc.- 1973,- 150 p.

39. Bridges C.B. Elimination of chromosome due to a mutant (Minute-n) in D. melanogaster. -Proc. Nat. Acad. Sci., USA. 1925. - 11. - p. 701-706.

40. Brodsky M.H., Nordstrom W., Tsang G., Kwan E., Rubin G.M., Abrams J.M. Drosophila p53 binds a damage response element at the reaper locus // Cell. 2000. - Vol. 101. - P. 103-113.

41. Brown S.W., Welschons W.J. Maternal aging and somatic crossing-over of attached X-chromosomes. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1955. - v. 41. - N 4. - p. 209 - 215.

42. Browning E. Toxicity of industrial metals. London- Butterworth. - 1969. - 383 P.

43. Bryant et al. Mutations at the fat locus interfere with cell proliferation control and epithelial morphogenesis in Drosophila. // Dev. Biol. 1988. - 129. - p. 541 - 554.

44. Bryant P.J., Watson K.L., Justice R.W., Woods D.F. Tumor suppressor genes encoding proteins required for cell interactions and signal transduction in Drosophila. // Dev. Suppl. -1993. p.239-249.

45. Campesato V.R., Graf U., Reguly M.L., de Andrade H.H. Recombinagenic activity of integerrimine, a pyrrolizidine alkaloid from Senecio brasiliensis, in somatic cells of Drosophila melanogaster. // Environ. Mol. Mutagen. 1997. -29(1). - p. 91-97.

46. Diaz-Benjumea F.J., Hafen E. The sevenless signalling cassette mediates Drosophila EGF receptor function during epidermal development. // Development. 1994. - Mar;120(3). -p. 569-578.

47. Dickinson W.J., Thatcher J.W. Morphogenesis of denticles and hairs in Drosophila embryos: involvement of actin-associated proteins that also affect adult structures. // Cell. Motil. Cytoskeleton. 1997.- 38(1). p. 9-21.

48. Fingerhut M.A., Halperin W.E., Marlow D.A. Cancer mortality in workers exposed to 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin // N. Eng. J. Med. 1991. -N 324. - p. 212-218.

49. Fisher G., Stephenson D.A., West J.D. Investigation of the potential for mitotic recombination in the mouse. // Mutat. Res. 1986. - Dec; 164(6). - p.381-388.

50. Foreign Compound Metabolism in Mammals. Volume 3. London. - The Chemical Society.- 1975.-364 p.

51. Freeman M. Reiterative use of the EGF receptor triggers differentiation of all cell types in the Drosophila eye. // Cell. 1996. - Nov 15;87(4). - p.651-660.

52. Frei H., Wiirgler F.E. Induction of somatic mutation and recombination by four inhibitors of eukaryotic topoisomerases assayed in the wing spot test of Drosophila melanogaster. // Mutagenesis. 1996. - Jul;l 1(4). - p. 315-325.

53. Frei H., Wiirgler F.E. Statistical methods to decide whether mutagenicity test data from Drosophila assays indicate a positive, negative, or inconclusive result. // Mutat. Res. -1988. Aug;203(4). - p. 297-308.

54. Frolich A., Wiirgler F.E. Drosophila wing-spot test: improved detectability of genotoxicity of polycyclic aromatic hydrocarbons. // Mutat. Res. 1990. - 234(2). - p.71-80.

55. Frolich A., Wiirgler F.E. New tester strains with improved bioactivation capacity for the Drosophila wing-spot test. // Mutat. Res. 1989. - 216(3). -p. 179-187.

56. Garcia-Bellido A., Cortes F., Milan M. Cell interactions in the control of size in Drosophila wings. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1994. Vol. 94. - p. 10222 - 10226.

57. Garcia-Bellido A., Ripoll P., Morata G. Developmental compartmentalization in the dorsal mesothoracic disc of Drosophila. // Developmental Biology. 1976,- 48. - p. 132 - 147.

58. Gardner A.M., Chen J.F, Roach J.A.G., Raeglis E.P. Polychlorinated bifenils. Hydroxylated urinary metabolites of 2,5,2\5'-tyetrachlorobiphenil identified in rabbits. // Biochem. Biophys. Rec. Commun. 1973. - 55. - P. 1377 - 1384.

59. Gateff E. Tumor suppressor and overgrowth suppressor genes of Drosophila melanogaster: developmental aspects. // Int. J. Dev. Biol. 1994. - Dec;38(4). - p. 565-590.

60. Gateff E., Wismar J., Habtemichael N., Loffler Т., Dreschers S., Kaiser S., Protin U. Functional analysis of Drosophila developmental genes instrumental in tumor suppression. // In Vivo. 1996. - 10(2). - p. 211-215.

61. Golic K.G., Lindquist S. The FLP recombinase of yeast catalyzes site-specific recombination in the Drosophila genome. // Cell. 1989. - Nov. - 3;59(3). - p. 499-509.

62. Graf U., Moraga A. A., Castro R., Diaz Carrillo E. Genotoxicity testing of different types of beverages in the Drosophila wing Somatic Mutation And Recombination Test. // Food Chem. Toxicol. 1994. - May 32(5). - p. 423-433.

63. Hall J.C., Gelbart W.M., Kankel D.R. Mosaic systems. // M. Ashbumer, E. Novitsky (Eds.), The Genetics and Biology of Drosophila. London, -la Academic Press. -1976. -376 p.

64. Henderson D.S., Grigliatti T.A. A rapid somatic genotoxicity assay in Drosophila melanogaster using multiple mutant mutagen-sensitive (mus) strains. // Mutagenesis. -1992. Nov;7(6). - p. 399-405.

65. Hirono Y., Redei G.P. A comparison of the somatic effects of X-rays and ethyl methanesulfonate // Arabid. Inf. Serv. 1964. -1.- p. 21.

66. Hisaoka M., Tanaka A., Hashimoto H. Molecular alterations of h-warts/LATS 1 tumor suppressor in human soft tissue sarcoma. // Lab. Invest. 2002. - 0ct;82(10). - p.1427-1435.

67. Hollstein M., McCann J., Angelosanto F.A., Nichols W.W. Short-term tests for carcinogens and mutagens. // Mutat. Res. 1979. - Sep;65(3). - p. 133-226.

68. Hsing A., Faller D.V., Vaziri C. DNA-damaging aryl hydrocarbons induce Mdm2 expression via p53-independent post-transcriptional mechanisms // The Journal Of Biological Chemistry. 2000. - Vol. 275. - No. 34. - Issue of August 25. - p. 2602426031.

69. IARC. Monographs on the Evaluation of the Carcinogenic Risk of Chemicals to Man. -1978. V.17. p. 140.

70. IARC. Monographs on the Evaluation of the Carcinogenic Risk of Chemicals to Man. -1981.-V26.-p. 155.

71. IARC. Monographs on the Evaluation of the Carcinogenic Risk to Humans. 1983. - Vol. 31 (Some Food Additives, Feed Additives and Naturally Occurring Substances). - p. 239245.

72. IARC. Monographs on the Evaluation of the Carcinogenic Risk of Chemicals to Man. -1987. -S7.- p. 85.

73. IARC. Monographs on the Evaluation of the Carcinogenic Risk of Chemicals to Man. -1993. V. 56 p. 362.

74. Jowett Т., Wajidi M.F., Oxtoby E., Wolf C.R. Mammalian genes expressed in Drosophila: a transgenic model for the study of mechanisms of chemical mutagenesis and metabolism. // EMBO J. 1991. - May;10(5). -p.1075-1081.

75. Kaiser K.L., Wang P.T.S. Bacterial degradation of polychlorinated biphenyls. I. Identification of some metabolic products from Arochlor 1242. // Bull. Environ. Contam. Toxicol.- 1974,-N. 11.-P. 291 -296.

76. Kaplan W.D. The influence of minutes upon somatic crissing-over in D. melanogaster. // Genetics. 1953. - v. 38. - p. 630 - 651.

77. Katz A.J., Foley T.A. Effect of temperature on frequencies of spots in Drosophila wing-spot assay. // Environ. Mol. Mutagen. 1993. - 22(1). - p. 54-58.

78. Kaya В., Creus A., Yanikoglu A., Cabre O., Marcos R. Use of the Drosophila wing spot test in the genotoxicity testing of different herbicides. // Environ. Mol. Mutagen. 2000. -36(1).-p. 40-60.

79. Kaya В., Yanikoglu A., Creus A., Marcos R. Genotoxicity testing of five herbicides in the Drosophila wing spot test. // Mutat. Res. 2000. - 465. - p. 77-84.

80. Kieth L.H., Rappe C., Choudhary G. (Eds.) Chlorinated dioxins and dibenzofurans in the total environment. Stoneham. - Butterworth. - 1985. - 354 p.

81. Konovalova A.L., Presnov M.A., Zheligovskaya N.N., Trestchalina E.M. Antitumor effect of tetravalent platinum coordination complexes // Dokl. AN SSSR. 1977. - N 234. - p. 233 -226.

82. Kurada P., White K. Ras promotes cell survival in Drosophila by down-regulating hid expression. // Cell. 1998. - 95. - p.319-329.

83. Lam G., Hall B.L., Bender M., Thummel C.S. DHR3 is required for the prepupal-pupal transition and differentiation of adult structures during Drosophila metamorphosis. // Dev. Biol. 1999. - Aug 1;212(1). -p. 204-216.

84. Larsson C., Lardelli M., White I., Lendahl U. The human NOTCH1, 2, and 3 genes are located at chromosome positions 9q34, lpl3-pll, and 19pl3.2-pl3.1 in regions of neoplasia-associated translocation. // Genomics. 1994. - Nov 15;24(2). - p. 253 - 258.

85. Lawrence P.A., Johnston P., Morata G. Methods of marking cells. // D.B. Roberts (Ed.), Drosophila a practical approach. Oxford, Washington DC. - IRL Press. -1986. - 295 p.

86. Leng M., Brabec V. DNA Adducts of cisplatin, transplatin and platinum-intercalatin drugs // International Agency for Research on Cancer. 1994. - N. 125. - p. 339 - 348.

87. Lindsley D. L., Zimm G. The genome of Drosophila melanogaster // Dros. Inf. Serv. -1985 1990.-No. 62, 64, 65,68.

88. Little A.D. Water quality criteria data book. Washington. - U. S. Environmental protection agency. Water pollution control series. - 1971. - 273 p.

89. Madhavan M.M., Schneiderman H.A. Histological analysis of the dynamics of growth of imaginal discs and histoblast nests during the larval development of Drosophila melanogaster. // Wilhelm Roux's Archives. 1977. - 183. -p. 269 - 305.

90. Mahoney P.A., Weber U., Onofrechuk P., Biessmann H., Bryant P.J., Goodman C.S. The fat tumor suppressor gene in Drosophila encodes a novel member of the cadherin gene superfamily. // Cell. 1991. - 67(5). p. 853 - 868.

91. Manz A., Berger J., Dwyer J.H. Cancer mortality among workers in chemical plant contaminated with dioxin // Lancet. 1991. - N. 338. - p. 959 - 964.

92. Marec F., Kollarova I., Jegorov A. Mutagenicity of natural anthraquinones from Rubia tinctorum in the Drosophila wing spot test. // Planta Med. 2001,- Mar;67(2). - p.127-131.

93. Mason J.M., Green M.M., Shaw K.E., Boyd J.B. Genetic analysis of X-linked mutagen-sensitive mutants of Drosophila melanogaster. // Mutat. Res. 1981. - 81(3). - p. 329 -343.

94. Mechler B.M., McGinnis W., Gehring W.J. Molecular cloning of lethal(2)giant larva, a recessive oncogene of Drosophila melanogaster. // EMBO J. -1985. 4. - p. 1551—1557.

95. Milan M., Campuzano S., Garcia-Bellido A. Cell cycling and patterned cell proliferation in the Drosophila wing during metamorphosis. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. Vol. 93. -1996.-p. 11687- 11692.

96. Miller D.T., Cagan R.L. Local induction of patterning and programmed cell death in the developing Drosophila retina. // Development. 1998. - Jun;125(12). - p. 2327-2335.

97. Morata G., Ripoll P. Minutes: mutants of Drosophila autonomously affecting cell division rate. // Dev. Biol. -1974. 42. - p. 211-221.

98. Morinaga N., Shitara Y., Yanagita Y., Koida Т., Kimura M., Asao Т., Kimijima I., Takenoshita S., Hirota Т., Saya H., Kuwano H. Molecular analysis of the h-warts/LATSl gene in human breast cancer. // Int J Oncol. 2000. - Dec;17(6). -1125-1129.

99. Moses K., Rubin G.M. glass encodes a site-specific DNA-binding protein that is regulated in response to positional signals in the developing Drosophila eye // Genes-Dev- 1991.-5. -P. 583-593.

100. Muller H.J. Mutation rate in Drosophila. // Genetics. -1928. -13. -p. 279 357.

101. Murphy C., Tokunaga C. Cell lineage in the dorsal mesothoracic disc of Drosophila. // Journal of Experimental Zoology. -1970. 175(2). - p. 197-219.

102. Mc. Cann J., Choi E., Yamasaki E., Ames B.N. Detection of carcinogens as mutagens in the Salmonella/microsome test: assay of 300 chemicals: discussion. // Proc Natl Acad Sci USA.- 1976. Mar;73(3). - p. 950-954.

103. Nahon E., Best-Belpomme M., Saucier J.M. Analysis of the DNA topoisomerase-II-mediated cleavage of the long terminal repeat of Drosophila 1731 retrotransposon // Eur. J. Biochem. -1993. -V. 218. -Nl. -P. 95-102.

104. Nashed N., Chandra P. An in vivo-in vitro short term carcinogenicity test using rat peritoneal cells. // Cancer Lett. 1980. - Aug;10(2). p. 95-107.

105. Neufeld T.P., de la Cruz A.F., Johnston L.A., Edgar B.A. Coordination of growth and cell division in the Drosophila wing. // Cell. 1998. - Jun 26;93(7). - p. 1183-1193.

106. Nibset I.C.Т., Sarofim A.E. Rates and routs of transport of PCBs in the environment // Environ. Health Perspect. 1972. - N 1. - p. 21 -38.

107. Nothiger R. The larval development of imaginal disks. // H. Ursprung, R. Nothiger (Eds.) The Biology of Imaginal Disks. -New York, Berlin, Heidelberg. Springer. - 1972. - p. 1 -34.

108. Parkinson A., Safe S. Mammalian Biologic and Toxic Effects of PCBs. // Environmental Toxin Series. 1987. - Vol. 1. - p. 49 - 60.

109. Patterson J.T. Proof that the entire chromosome is not eliminated in the production of somatic variations by X-rays in Drosophila. // Genetics. 1930. - v. 15. -N 2. - p. 141 -149.

110. Patterson J.T. Somatic segregation produced by X-ray in D. melanogaster. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1930a.-v. 16,-N2.-p. 109-111.

111. Patterson J.T. The effects of X-rays in producing mutations in the somatic cells of D. melanogaster. // Science. 1928. - v. 68. - p. 41 - 43.

112. Potter C. J., Xu T. Mechanisms of size control // Current Opinion in Genetics & Development 2001. - 11. - p. 279-286.

113. Potter C.J., Turenchalk G.S., Xu T. Drosophila in cancer research. An expanding role. // Trends Genet. 2000. - Jan;16(l). - p. 33-39.

114. Presnov M.A., Konovalova A.L., Kozlov A.M., Brovtsyn V.K., Romanova L.F. // Antitumor properties of cis-dichlorodiammine-dihydroxoplatinum (IV) // Izvestia AN SSSR, ser. Biol. 1986. - N 3. - p. 417 - 428.

115. Presnov M.A., Zheligovskaya N.N., Konovalova A.L., Babkov A.V., Budanova N.S. Studies on antitumor activity of some platinum (IV) complexes // Dokl. AN SSSR. 1976. -N 5.-p. 226-229.

116. Ramakrishna N.R., Brown A.M. Wingless, the Drosophila homolog of the proto-oncogene Wnt-1, can transform mouse mammary epithelial cells. // Dev. Suppl. 1993. -p. 95-103.

117. Ramel C., Magnusson J. Modulation of genotoxicity in Drosophila. // Mutat. Res. -1992. -Jun; 267(2). p. 221 - 227.

118. Ramos-Morales P., Rodriguez-Arnaiz R. Genotoxicity of two arsenic compounds in germ cells and somatic cells of Drosophila melanogaster. // Environ. Mol. Mutagen. 1995. -25(4). -p. :288 - 299.

119. Ransom R. A handbook of Drosophila development. Amsterdam - New York - Oxford. - Elsevier Biomedical Press. - 1982. - 289 p.

120. Rijsewijk F., Schuermam M., WagenaarE., ParrenP., Weigel D., Nusse R. The Drosophila homolog of the mouse mammary oncogene int-1 is identical to the segment polarity gene wingless. // Cell. -1987. Aug 14;50(4). - p. 649-657.

121. Robinow S., Talbot W.S., Hogness D.S., Truman J.W. Programmed cell death in the Drosophila CNS is eccK'sone-regulated and coupled with a specific ecdysone receptor isoform. // Development -1993. -Dec;119(4). p. 1251-1259.

122. Ronen A.I. Induced somatic recombination in the third chromosome of D. melanogaster. // Drosophila Inform. Sew. -1962. v. 36. -p. 112-113.

123. Ronen A.I. The effect of heterologous inversions on spontaneous and induced somatic recombination. // Drosophila Inform. Serv. 1963, - v. 38. - p. 40 - 41.

124. Saracci R., Kogevinas M., Beitazzi P.A. Cancer mortality in workers exposed to chlorophenoxy herbicides and chlorophenols. // Lancet 1991. - N 338. - p. 1027-1032.

125. Searle C.E. (ed). Chemical Carcinogens. ACS Monograph 173. Washington, DC. - American Chemical Society. - 1976. - 398 p.

126. Shibahara Т., Ogawa H.I., Ryo H., Fujikawa K. DNA-damaging potency and genotoxicity of aflatoxin Ml in somatic cells in vivo of Drosophila melanogaster. // Mutagenesis. 1995. -May;10(3).-p. 161-164.

127. Sidorov R.A., Ugnivenko E.G., Khovanova E.M., Belitsky G.A. Induction of tumor clones in D. melanogaster wts/+ heterozygotes with chemical carcinogens. // Mutat Res. -2001. Nov 15 ;498(1 -2).-p. 181-191.

128. Slaga T J., Jecker L., Bracken W.M., Weeks C.E. The effects of weak or non-carcinogenic polycyclic hydrocaibons on 7,12-dimethylbenza.anthracene and benzo[a]pyrene skin tumor-initiation. // Cancer Lett. -1979. Jun;7(l). -p.51-59.

129. Sobels F.H. Eeken J. C. J. Influence of the MR (mutator) factor on X-ray-induced genetic damage. // Mutat Res. -1981. 83. -p. 201 -206.

130. Sobels F.H., Vogel E. Assaying potential carcinogens with Drosophila. // Environ. Health Perspect -1976a-Jun; 15.-p. 141-146.

131. Sobels F.H., Vogel E. The capacity of Drosophila for detecting relevant genetic damage. // Mutat Res. 1976-Nov 1;41(1 speIno).-p. 95-106.

132. Sodeigren A. Chlorinated hydrocaibon residues in airbornt fallout. // Nature (Lond.). -1972. N 236. -P. 395-397.

133. Sodeigren A. Transport, distribution, and degradation of DDT and PCB in a south Swedish lake ecosystem. // Vatten. 1973. -N 2.-P. 90 - 108.

134. Southgate B.A. Polluting effects of sewage and industrial wastes // Toxicity of substances to fish. Report of the water pollution research for the year 1950 Washington. -1950. - p. 124 -136.

135. Spano M.A., Frei H., Wurgler F.E., Graf U. Recombrnagenic activity of four compounds in the standard and high bioactivation crosses of Drosophila melanogaster in the wing spot test. // Mutagenesis 2001 - Sep;16(5). -p. 385-394.

136. St. John M.A., Tao W., Fei X., FukumotoR., Carcangiu M.L., Brownstein D.G., Parlow A.F., McGrath J., Xu T. Mice deficient of Latsl develop soft-tissue sarcomas, ovarian tumours and pituitary dysfunction. // Nat Genet 1999. - Feb;21 (2). - p. 182 -186.

137. St. John M.A., Xu T. Understanding human cancer in a fly? // Am. J. hum. Genet 1997. - 61(5). -p. 1006—1010.

138. Stem C. Ein Genetischer und Zytologischer Beweis fur Veibung im Y-chromosom von D. melanogaster. // Induct Abstamm. Vererb. 1927. - В 44. - S. 187 - 231.

139. Stem C. further studies on somatic crossing-over and segregation (Abstr.) // Amer. Nat. 1935. - v. 69.-p. 81 -82.

140. Stem C. Somatic crossing-over and segregation in D. melanogaster. // Proc. Nat Acad Sci. USA. -1936,-v. 21.-p. 625-730.

141. Stem C., Rentshler V. The effect of temperature on the frequency of somatic crossing-over in D. melanogaster. // Proc. Nat Acad Sci. USA. 1936a. - v. 22. - N 7. - p. 451 - 453.

142. Talbot W.S., Swyryd E.A., Hogness D.S. Drosophila tissues with different metamorphic responses to ecdysone express different ecdysonereceptor isoforms. // Cell- 1993.-Jul 2;73(7).-p. 1323-1337.

143. Tao W., Zhang S., Turenchalk G.S., Stewart R.A., St. John M.A., Chen W., Xu T. Human homologue of the Drosophila melanogaster lats tumour suppressor modulates CDC2 activity. // Nat Genet -1999. Feb;21 (2). - p. 177-181.

144. The I., Hannigan G.E., Cowley G.S., Reginald S., Zhong Y., Gusella J.F., Hariharan I.K., Bernards A. Rescue of a Drosophila NF1 mutant phenotype by protein kinase A. //Science. 1997. - May 2;276(5313). - p. 791-794.

145. TimofeelF-Ressovsky N.W. The effects of X-rays in producing somatic genovariations of a definite locus in different directions in D. melanogaster. // Amer. Nat 1929. - v. 63. - N. 685. - p. 118 124.

146. Tucker R.E., Young A.L., Gray A.P. (Eds.) Human and environmental risks of chlorinated dioxins and related compounds. New-York. - Plenum press.-1983.-236p.

147. Turenchalk G.S., St. John M.A., Tao W., Xu T. The role of lats in cell cycle regulation and tumorigenesis // BiocMrn Biophys Acta. 1999. - Oct 29;1424(2-3). - p. M9-M16.

148. Varentsova E.R, Khromykh I.M. Interaction of mutations of the genes for mutagen sensitivity mei-9, mei-41 and rad201 as affected by ionizing radiation, (in Russian). // Genetika. 1997. - Mar,33(3). -p. 328-332.

149. Vaziri C., Fallcr D.V. A Benzoa.pyrene-induced cell cycle checkpoint resulting in p53-independent G1 arrest in 3T3 fibroblasts // The Journal Of Biological Chemistry. 1997. - Vol. 272. - No. 5. Issue of January 31. - P. 2762-2769.

150. Vogel E.W., Graf U., Frei H.J., Nivard M.M. The results of assays in Drosophila as indicators of exposure to carcinogens. // IARC Sci Publ. 1999. -146. - p. 427-470.

151. Vogel E.W., Nivard M.J. A novel method for the parallel monitoring of mitotic recombination and clastogenicity in somatic cells in vivo. //Mutat. Res. -1999. -Dec 16;431(1). -p. 141-153.

152. Vogel E.W., Nivard M.J. Parallel monitoring of mitotic recombination, clastogenicity and teratogenic effects in eye tissue of Drosophila. // Mutat Res. 2000. - Nov 20;455(1 -2). -p. 141 - 153.

153. Vogel E.W., Zijlstra J.A. Mechanistic and methodological aspects of chemically-induced somatic mutation and recombination in Drosophila melanogaster. // Mutat Res -1987. 182. - p. 243-264.

154. Vogel E.W., Zijlstra J.A., Blijleven W.G. Mutagenic activity of selected aromatic amines and polycyclic hydrocarbons in Drosophila melanogaster. //Mutat Res. -1983. Jan;107(l). - p. 53-77.

155. Voronov V.V. A bioindicator of the environmental mutagenicity hazard, Ph. D. Thesis. In Russian.,- Tula. Tula State University. - 1998.

156. Watson K.L. Drosophila warts tumor suppressor and member of the myotonic dystrophy protein kinase family. // Bioessays. - 1995. - Aug; 17(8). - p. 673 - 676.

157. Watson K.L., Justice R.W., Bryant P.J. Drosophila in cancer research: the first fifty tumor suppressor genes. // J. Cell Sci. Suppl. -1994. -18. p. 19 33.

158. Weaver E. Somatic crossing-over and its genetic control on Drosophila. // Genetics 1960. - v. 45. -p. 345-357.

159. Weigmann K., Cohen S.M., Lehner C.F. Cell cycle progression, growth and patterning in imaginal discs despite inhibition of cell division after inactivation of Drosophila Cdc2 kinase. // Development.- 1997. -Sep;124(18).-p. 3555-3363.

160. Wigglesworth V.B. The physiology of insect metamorphosis. Cambridge. - Cambridge Univ. Press. -1954.-352 p.

161. Xia H., Qi H., Li Y., Pei .J, Barton J., Blackstad M., Xu Т., Tao W. LATS1 tumor suppressor regulates G2/M transition and apoptosis.// Oncogene. 2002. - Feb 14;21(8). -p. 1233-1241.

162. Xu Т., Wang W., Zhang S., Stewart R. A., Yu W. Identifying tumor suppressors in genetic mosaics: the Drosophila lats gene encodes a putative protein kinase // Development. -1995. -121. P. 1053 -1063.

163. Yang X., Li D.M., Chen W., Xu T. Human homologue of Drosophila lats, LATS1, negatively regulate growth by inducing G(2)/M arrest or apoptosis. // Oncogene. 2001. - Oct 4;20(45). - p. 6516-6523.

164. Zilian O. Molecular characterization of the l(3)discs overgrown locus in Drosophila melanogaster. // Experientia.- 1993. -49. -p. A30.

165. Zimmering S., Cruces M.P., Pimentel E., Arceo C., Cairasco G., Olvera O. On the recovery of single spots with the fir phenotype in the wing spot test in Drosophila. // Mutat Res. 1997. - Sep 5;379(1). -p. 77-82.

166. Zober A., Messerer P., Huber P. Thirty-four- year mortality follow-up of BASF employees exposed to 2,3,7,8- TCDD after the 1953 accident. // Int. Arch. Occup. Environ. Health. 1990. - N 62. - p. 139-157.