Получение трансгенных кроликов с геном интерферона-β1 человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Мартиросян, Валентина Владимировна

• Мартиросян, Валентина Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Мартиросян, Валентина Владимировна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Методологические основы получения трансгенных животных.

1.1.1. Микроинъекция рекомбинантной ДНК в пронуклеус зиготы, значение метода.

1.1.2. Другие перспективные методы переноса чужеродной генетической информации в организм млекопитающих.

1.2. Методы анализа интеграции чужеродных генов.

1.2.1. Метод дот- и блот-гибридизации по Саузерну.

1.2.2. Метод полимеразной цепной реакции в применении к анализу трансгенных животных.

1.2.3. Визуализация чужеродных генов при использовании генов-маркеров.

1.3. Особенности экспрессии чужеродных генов в организме трансгенных животных.

1.3.1. Значение регуляторных последовательностей целевых генов для экспрессии в организме животного.

1.3.2. Использование металлотиониинового промотора при создании экспрессирующихся векторов для трансгенных животных.

1.4. Возможности практического использования трансгенных сельскохозяйственных животных.

1.4.1. Трансгенные сельскохозяйственные животные как продуценты биологически активных веществ.

1.4.2. Изменение хозяйственно-полезных признаков у трансгенных животных.

1.4.3. Трансгенез как способ повышения устойчивости животных к неблагоприятным условиям, болезням и другим стресс-факторам.

1.5. Кролики в биотехнологии: лабораторные животные в изучении трансгенеза и трансгенные животные-продуценты биологически активных веществ.

1.6. Значение исследования и применения интерферонов для молекулярной биологии, медицины, сельского хозяйства, биотехнологии.

1.7. Общие сведения о структурной организации гена интерферона-pl человека и некоторых физико-химических свойствах.

1.8. Перспективы получения и использования трансгенных сельскохозяйственных животных с генами интерферонов, и, в частности, с геном интерферона-(31 человека.

2. Материалы и методы.

2.1. Бактериальные штаммы.

2.2. Плазмиды.

2.3. Кролики.

2.4. Трансформация.

2.5. Выделение ДНК.

2.5.1. Выделение ДНК кролика.

2.5.2. Аналитическое выделение ДНК плазмид.

2.5.3. Препаративное выделение ДНК плазмид.

2.5.4. Элюция фрагментов ДНК плазмид.

2.6. Конструирование вектора pMTIFNP 1.

2.7. Препараты ферментов.

2.8. Олигонуклеотидные праймеры.

2.9. Микроинъекция.

2.10. Трансплантация эмбрионов.

2.11. Полимеразная цепная реакция.

2.12. Электрофоретическое разделение фрагментов ДНК.

2.13. Блот-гибридизация.

2.14. Внутрикожное заражение кроликов вирусом миксоматоза.

2.15. Заражение кроликов лапинизированным вирусом классической чумы свиней.

2.16. Размножение трансгенных кроликов.

2.17. Определение активности интерферона в сыворотке крови

2.18. Изучение индуцированной экспрессии гена интерферона.

3. Результаты исследований.

3.1. Конструирование вектора с геном интерферона-pi человека под контролем металлотиониинового промотора , потенциально способного экспрессироваться в клетках млекопитающих.

3.2. Проведение микроинъекций плазмидной ДНК в оплдотворенные яйцеклетки кролика и пересадка их животным-реципиентам.

3.3. Анализ родившихся крольчат на наличие гена интерферона-pi человека в геноме.

3.4. Определение титра интерферона-|31 человека в сыворотке крови трансгенов.

3.5. Изучение устойчивости к вирусным заболеваниям особей с установленной интеграцией целевого гена.

3.5.1. Устойчивость к заболеванию миксоматозом.

3.5.2. Иммунный статус кроликов при заражении классической чумой свиней и вирусом миксомы.

3.6. Воспроизводительная способность трансгенных кроликов с геном (31-интерферона человека путем разных форм скрещивания.

3.7. Изучение возможности передачи чужеродного гена потомству.

4. Обсуждение результатов исследований.

5. Выводы.

7. Практические предложения.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение трансгенных кроликов с геном интерферона-β1 человека»

Актуальность проблемы.

Интеграция чужеродного генетического материала в геноме животных и экспрессия целевых генов позволяет решать разнообразные задачи научного и прикладного характера. Разработка технологий трансгенеза стала возможной благодаря успехам молекулярной биологии и генной инженерии. В результате были созданы принципиально новые механизмы введения в популяцию животных признаков, которые в ней полностью отсутствовали. Новые генетические конструкции, потенциально способные экспрессироваться в организме млекопитающих, предназначаются для изменения физиологического статуса трансгенного животного или для получения продукта экспрессии целевого гена.

Использование в генных конструкциях сильных тканеспецифичных промоторов и энхансеров не всегда обеспечивает желаемый уровень экспрессии, поэтому работы по трансгенезу животных в известной степени носят эмпирический характер (Gandolf! et al., 1989). Для получения необходимого фенотипического эффекта приходится получать достаточное количество первичных трансгенных животных, последовательное изучение которых позволяет по мере накопления информации отобрать среди трансгенных особей лучших для размножения, скрещивания и создания гомозиготных форм. В связи с тем, что решение этих задач требует проведения продолжительных по времени и дорогостоящих экспериментов (Гольдман и др., 1996, Gange et al., 1991, Hochi et al., 1990), трансгенные технологии разрабатываются и совершенствуются на лабораторных животных.

Практическая ценность работы определяется выявленным повышением устойчивости кроликов к инфекционным заболеваниям вирусной этиологии, а также возможностью получать фибробластный интерферон из сыворотки крови трансгенных животных.

Цель работы.

1. Создание генной конструкции, включающей ген интерферона-Р 1 человека, получение трансгенных животных, несущих этот ген.

2. Изучение экспрессии данного гена; исследование возможности трансгенов противостоять инфекционным заболеваниям вирусной этиологии, а также формирование популяции трансгенных животных.

Задачи исследования.

1. Сконструировать вектор с геном интерферона-Р 1 человека под контролем металлотионеинового промотора, потенциально способным экспрессироваться в клетках млекопитающих.

2. Провести микроинъекцию плазмидной ДНК в оплодотворенные яйцеклетки кролика и пересадить их животному-реципиенту.

3. Проанализировать родившихся крольчат на наличие в их геноме целевого гена.

4. Провести опыты по определению устойчивости полученных трансгенных особей к заболеваниям вирусной этиологии.

5. Изучить возможность передачи гена интерферона-Р 1 человека потомству; сформировать популяцию трансгенных животных с использованием разных вариантов скрещивания.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Конструирование вектора, содержащего ген интерферона-pi человека под контролем индуцибельного металлотионеинового промотора.

2. Получение трансгенных кроликов методом микроинъекций в зиготы.

3. Установление интеграции целевого гена в их геноме методом цепной полимеразной реакции.

4. Изучение индуцированной экспрессии вектора в организме трансгенных особей.

5. Показана наследственная устойчивость трансгенных особей к инфекционным заболеваниям вирусной этиологии, обусловленной введением в их геном гена интерферона-pi человека.

6. Наследование гена интерферона-Р 1 человека у кроликов I и II поколения первичных трансгенных особей.

1. Обзор литературы.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Мартиросян, Валентина Владимировна

Выводы.

1. Сконструирован вектор pMTIFNpl с геном интерферона-pl человека, экспрессирующийся в организме млекопитающих под контролем индуцибельного металлотионеинового промотора.

2. Продемонстрирована возможность получения трансгенных кроликов с геном интерферона-pl человека методом микроинъекции в пронуклеус зиготы. Эффективность интеграции целевого гена составила 1,7% от числа инъецированных зигот (8 из 476) и 10% от числа родившихся крольчат (8 из 80).

3. Показано, что ген интерферона-pl человека под контролем металлотионеинового промотора передается по наследству потомству. Эффективность наследования гена интерферона-pi человека у кроликов первого поколения после спаривания обоих трансгенных родителей составила 38,5% (5 из 13), и после спаривания трансгенного с нетрансгенным родителем 18,9% (7 из 37). Более низкий по сравнению с теоретически ожидаемым процент наследования гена объясняется, по-видимому, мозаицизмом у первичных трансгенов.

4. Воспроизводительная способность у трансгенных кроликов первого поколения после спаривания обоих трансгенных родителей по числу крольчат в помете была примерно вдвое ниже, чем после спаривания трансгенного с нетрансгенным родителем (4,3± 2,2) против 7,6±1,4).

5. Выживаемость новорожденных крольчат при близкородственном спаривании трансгенных родителей различалась в зависимости от тепени родства: после спаривания потомков с их родителями смертность составила 60%, а после спаривания потомков одних родителей лишь 15,3%.

6. Трансгенные кролики с геном интерферона-pl человека обладали большей устойчивостью к заражению лапинизированным вирусом классической чумы свиней и вирусом миксомы.

7. Сформирована популяция трансгенных кроликов с геном интерферона-pl человека с использованием разных вариантов спаривания.

Практические предложения.

1. Получена плазмида pMTIFN(31 - вектор, потенциально способный экспрессироваться в организме млекопитающих, содержащий ген интерферона-pi человека под контролем металлотионеинового промотора; данная генная конструкция предназначена для изменения физиологического статуса трансгенного животного или для получения продукта экспрессии целевого гена.

2. Продемонстрирована возможность получения наследственной устойчивости кроликов к инфекционным заболеваниям путем введения в их организм гена интерферона-pi человека.

3. Представленные результаты позволяют использовать данную конструкцию для получения других сельскохозяйственных животных. Впоследствии с применением данного вектора были получены трансгенные свиньи.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Мартиросян, Валентина Владимировна, 2005 год

1. Баурин В.В., Мирошниченко О.И., Захарченко В.И., Прокофьев М.И., Эрнст Л.К., Тихоненко Т.И., «Генноинженерные сельскохозяйственные животные. Вып. 1», М., 1995, 154-165.

2. Брем Г., Кройслих X., Штранцингер Г. Экспериментальная генетика в животноводстве // М.: РАСХН, 1995, 326 .

3. Волкова Н.А., Волкова Л.А., Эрнст Л.К., Зиновьева Н.А., III Московский международный конгресс. Биотехнология: состояние и перспективы развития, 2005, 238.

4. Глик Б., Пастернак Дж., Молекулярная биотехнология, М., «Мир», 2002,419-435.

5. Гоголевский П.А., Гольдман И.Л., Гусев В.В. Докл. ВАСХНИЛ.-(1991), 10,38-42.

6. Гольдман И.Л., Захарова Е.С., Якубовская Р.И., Кадулин С.Г., Гнучев Н.В., Биотехнология, 1998, №4, 3-1.

7. Гольдман И.Л., Комолов И.С., Кадулин С.Г., Гнучев Н.В., 1998, Биотехнология, №2, 3-17.

8. Гольдман И.Л., Кадулин С.Г., Разин С.И., 1996, Биотехнология, №9, 323.

9. Гольдман И.Л., Попов Л.С., Кадулин С.Г., Островский М.В., Грибановская Т.Е., Гнучев Н.В., 1998, Биотехнология, №3, 43-61.

10. Гольдман И.Л., Эрнст Л.К., Гоголевский П.А., 1993, Докл. ВАСХНИЛ, №1,58-71.

11. Гольдман И.Л., Эрнст Л.К., Гоголевский П.А., Семенова В.А., Кадулин С.Г., Жаданов А.Б., Дворянчиков Г.А., Разин С.В., Кузнецов А.В., Афанасьев В.М. «Генноинженерные сельскохозяйственные животные. Вып. 1», М., 1995, 93-103.

12. Городецкий С.И., Дыбан А.П., Вайсман Б.Л., 1986, Бюл. эксперим. биол. и мед., № 9? 299-342.

13. Ениколопов Г.Н., Захарченко В.И., Гращук М.А. и др. Доклады АН СССР, 1988, т. 299, № 5, 1246-1249.

14. Захарченко В.И., Лакиза О.В., Хорошилова Т.В., Перетокина И.С., Прокофьев М.И., 1989. Онтогенез, т.20, №5, 553-557.

15. Зиновьева Н.А., Волкова Н.А., Волкова Л.А., Эрнст Л.К., III Московский международный конгресс. Биотехнология: состояние и перспективы развития, 2005, 247.

16. Зиновьева Н.М. Автореф. дисс. канд. биол. наук. -Дубровицы: ВИЖ, 1994.

17. Зиновьева Н., Безенфельдер У., Мюллер С. и др. Биотехнология, 1998а, № 1, с. 3-11

18. Зиновьева Н., Безенфельдер У., Мюллер С. и др. С.-х. биология, 19986, №6, с. 31-34.

19. Зиновьева Н.М., Безенфельдер У., Мюллер М., Эрнст JI.K., Брем Г., 1998в, Биотехнология, №4, 17-31.

20. Зиновьева Н.А., Эрнст JI.K., Брем Г. Трансгенные животные и возможности их использования: молекулярно-генетические аспекты трансгенеза в животноводстве // Дубровицы, 2000, 128 с.

21. Лебедева М.И. Дисс. на соискание учен. степ. канд. биол. наук. М., 1986.

22. Кузнецов А.В., Биотехнология, 1995, №3-4, 3-6.

23. Козикова Л.В., Медведев С.Ю., Булла И., Росохатский С.И., Яковлев А.Ф.,2000, II Международная научная конференция «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», М., с. 160-161.

24. Козикова Л.В., Росохатский С.И., Душевска A.M., Яковлев А.Ф., 2000, II Международная научная конференция «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», М., с. 142-144.

25. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование. М., Мир, 1984, - С. 480.

26. Манухина А.И., Рябых В.П., Фофана Н.Ф., 1994, Междунар. симп. «Молекулярная генетика и биотехнология в оценке и изменении геномов сельскохозяйственных животных», Санкт-Петербург, Пушкин, -с. 13-14.

27. Медведев С.Ю., Козикова JI.B., Босак Н.П., Бавин В.Г., Яковлев А.Ф., 1995, «Генноинженерные сельскохозяйственные животные. Вып. 1», М., 1995, 104-110.

28. Мирошниченко О.И., Захарченко В.И., Прокофьев М.И. и др. Доклады ВАСХНИЛ, 1988, №5, 31-32.

29. Мясников Ю.В., Супрун А.П., Милованов О.В., Бавин В.Г., Захарченко В.И., Прокофьев М.И., 1995, «Генноинженерные сельскохозяйственные животные. Вып. 1», М., 166-172.

30. Попова Е.А., Дворянчиков Г.А., Иванова Л.Б., Рябых В.П., 2000, II Международная научная конференция «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», М., с. 156-157.

31. Попов Л.С., Гольдман И.Л., Гнучев Н.В., 1998, Биотехнология, 5, 311.

32. Попов Л.С., Языков А.А., 1999, Успехи современной биологии, 119, №1,30-41.

33. Попов Л.С., Языков А.А., 2000, Успехи современной биологии, 120, №4, 329-339.

34. Прокофьев М.И., Ларионов О.А., Мезина М.Н. и др. «ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2001, с. 114-115.

35. Рябых В.П., 2003, II Московский международный конгресс «Биотехнология: состояние и перспективы развития», 4.1, 242.

36. Рябых В.П., Сапунова Е.Г., Трубицына Т.П., Междунар. симп. «Молекулярная генетика и биотехнология в оценке и изменении геномов сельскохозяйственных животных», Санкт-Петербург, Пушкин, -с. 12-13.

37. Рядчиков В.Г., Солодухина Л.И., Соколов Н.В. « Генноинженерные сельскохозяйственные животные», Москва, 1995, с. 73-84.

38. Сураева Н.М., Трухан Р.С., «Генноинженерные сельскохозяйственные животные. Вып. 1», М., 1995, 227-243.

39. Титова В.А., Зиновьева Н.А., Савченкова И.П. и др. // Доклады РАСХН, 2001, № 6, с. 29-31.

40. Чистяков Д.А., Захарченко В.И., Мезина М.Н., Прокофьев М.И., Эрнст Л.К., «Генноинженерные сельскохозяйственные животные. Вып. 1»,М., 1995.,127-137.

41. Эрнст Л.К. Генная инженерия важный фактор селекции сельскохозяйственных животных. «ДНК-технологии в клеточной инженерии и маркировании признаков сельскохозяйственных животных», Дубровицы, 2001, 7-18.

42. Эрнст JT.K., 2002, II Московский международный конгресс «Биотехнология: состояние и перспективы развития», 4.1, 241.

43. Эрнст Л.К., Брем Г., Махаев Е.А. « Генноинженерные сельскохозяйственные животные», Москва, 1995а, с.48-53.

44. Эрнст Л.К., Георгиев Г.П., Ениколопов Г.Н., Прокофьев М.И., Захарченко В.И., Секирина Г.Г. Вестник с.-х. науки, 1987, №9 (370), 68-73.

45. Эрнст Л.К., Гольдман И.Л., Кадулин С.Г. Биотехнология, 1993, №5, 214.

46. Эрнст Л.К., Некрасов А.А., Зиновьева Р.А., 1994, Междунар. симп. «Молекулярная генетика и биотехнология в оценке и изменении геномов сельскохозяйственных животных», Санкт-Петербург, Пушкин, -с.З.

47. Юткин Е.В., Дисс. на соискание учен. степ. канд. биол. наук. М., 1999.48. Яковлев А.Ф., Козикова Л.В., Попов А.В., Медведев С.Ю., 2000, II

48. Междунар. научн. конф. «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», с.69.

49. Acsadi G., Jiao S., Jani A., Duke D., Williams P., Chong W., Wolff J. A., 1991, New Biologist, 3,71-81.

50. Adams J.M., Harris A.W., Pinknet C.A., Corcoran L.M., Alexander W.S., Cory S., Palmiter R.D., Brinster R.L., 1985, Nature, 318, 533-538.

51. Adelstein S., Pritchard-Briscoe H., Anderson T.A., Crosbie J., Gammon G., Loblay R.H., Baasten A., Goodnow C.C., 1991, Scienct, 251, 12231225.

52. Aldrich С J., Hammer R.E., Jones-Youngblood S., Kosinowski U., Hood L., Stroynowski I., Forman J., 1991, Nature, 352, 718-721.

53. Anders A.-C., Schonenberger C.-A., Gronner В., Hennighausen L., LeMeurM., GerlingerB., 1987, Pros. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 1299-1303.

54. Anders A.-C., van der Valk M.A., Schonenberger C.A., Fluckiger F., LeMeur M., Gerlinger P., Groner В., 1988, Genes Dev., 2, 1486-1495.

55. Amendola R., Haendel S., Heinz-Ulrich W., Pallavicini M. DNA and Cell Biology, Vol. 10, №4, 1991,311-317.

56. Archibald A.L., McClenaghan V., Hornsey V., Simons J.H., Clark A.J. 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87, 5178-5182.

57. Arezzo F., 1989, Cell Biol. Int. Rep., 13, 391-404.

58. Arnheiter H., Skuntz S., Noteborn M., Chang S., Meier E., 1991, Cell, 62, 51-61.

59. Atkinson P.W., Hines E.R., Beaton S., Mattahei К.Г., Reed K.S., Bradley M.P., 1991, Mol. Reprod. Dev., 29, 1-5.

60. Babinet C., Farsa H., Morello D., Hadchouel M., Pourcel C., 1985, Science, 230, 1160-1163.

61. Babinet C., Morello D., Renard J.P., 1989, Genome, 31, 938-949.

62. Bachiller D., Schellander K., Peli J. Mol. Reprod. Dev., 1991, 30, 194200.

63. Baltimore D., 1988, Nature, 335, 395-396.

64. Barinaga M., 1989, Science, 246, 446.

65. Bayna E.M., Rosen J.M., 1990, Nucleic Acids Res., 18, 2977-2985.

66. Bcini O., Anders A.C., Schubaur В., Mentali M., LeMeur M., Lathe R., Gerlinger P., 1991, Endocrinology, 128, 539-546.

67. Beddington R.S.P., Martin P., 1989, Mol. Biol. Med., 6, 263-274.

68. Beddington R.S.P., Morgenstern J., Land H., Hogan A., 1989, Development, 106, 37-46.

69. Biery U., Bondioli K.R., De Mayo F.J., 1988, Theriogenology, 29, 224.

70. Birnstiel M.L., Chipchase M., 1977, Trends Biochem. Sci., 2, 149-152.

71. Bluthmann H., 1991, Experientia, 47, 884-890.

72. Bonifier С., Vidal M., Grosveld F., Sippl A., 1990, EMBO J., 9, 28432848.

73. Borsze Z., Hiripi L., Carnwath J.W., Niemann H., 2003, Transgenic Res., Oct. 12: 541-553.

74. Bowerman В., Brown P.O., Bishop J.M., Varmus H.E., 1989, Genes Dev., 3, 469-478.

75. Bradley A., 1990, Cell Biol., 2, 1013-1017.

76. Bradley A., Robertson E.J., 1986, in : Current Topics in Developmental Biology, Vol. 2, New York, Academic Press.

77. Braskett B.G., Baranska W., Savicki W., Koprovski H., 1971, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 68, 353-357.

78. Breitman M.L., Clapoff S., Rossant J., Tsui L.-C., Glode M., Maxwell I.H., Bernstein A., 1987, Sciense, 238, 1563-1565.

79. Brem G. 1990, Animal Res. And Devel., 31,98-111.

80. Brem G., Brenig В., Goodman H.M., Selden R.C., Graf F., Kruff В., Spigmann K., Hondele J., Meyer J., Winnacker E.L., Kraublich H., 1985, Zuchthygiene, 20, 251-252.

81. Brem G., Brenig В., Muller M., 1993, Occas. Publ. Br. Soc. Anim. Prod., 12, 15-31.

82. Brem G., Muller M., 1994, Animal with Novel Genes, Cambrige Univ. Press, 179-283.

83. Brem G., Wanke R., Wolf E., Buchmuller Т., Muller M., Brenig В., Hermanns W., 1989, Mol. Biol. Med., 6, 531-547.

84. Brinster R. Science, 1989, 245, 590-591.

85. Brinster R.L., Allen K.M., Behringer R.R., Gelinas R.E., Paimiter R.D. 1988, Pros. Natl. Acad. Sci. USA, 85, 836-840.

86. Brinster R., Avarbock M., Pros. Natl. Acad. Sci. USA, 1994, 91,1130311307.

87. Brinster R.L., Chen H.Y., Trumbauer M., Senear A.W., Warren R., Paimiter R.D., 1981, Cell, 27, 223-231.

88. Brinster R., Zimmermann J., Pros. Natl. Acad. Sci. USA, 1994, 91,1129811302.

89. Chesne P., Adenot P., Viglietta C., Baratte M., Boulanger L., Renard J.-P., 2002, Nature Biotechnology, 20, №4, 366-369.

90. Clark A.J., 1996, Am. J. Clin. Nutr., 63, 633-638.

91. Clark A.J., Ali S., Archibald A.L., Bessos H., Brown P., Harris S., McCleneghan M., Prowse C., Simons J.P., Whitelaw C.B.A., Wilmut I., 1989, Biotechnology, 7, 487-492.

92. Clark A.J., Simons P., Wilmut I., Lathe R., 1987, Tibtech, 5, 20-24.Ш

93. Clouthiers D., Avarbock R., Maika S. e.a. Nature, 1996, 381, 418-421.94 . Costantini F., Lacy E., 1981, Nature, 294, 92-94.

94. Coulibaly S., Besenfelder U., Fleischmann M., Zinovieva N., Grossmann A., Wozny M., Bartke I., Togel M., Muller M., Brem G., 1999, FEBS Letters, 444, 1, 111-116.

95. Damaks., Su H., Jay N.P., Bullosk D.W., 1996, Bio/Technology, 14, 185-ф 188.

96. Dent L.A., Strath M., Mellor A.L., Sanderson C.J., 1990, J. Exp. Med., 172, 1425-1431.

97. DePamphilis M.L., Herman S.A., Martines-Salas E., Chalifour L.E., Wirak D.O., Cupo D.Y., Miranda M., 1988, BioTechniques, 6, 662-680.

98. Diamond L.E., McCurry K.R., Martin M.J., McClean S.B., Oldham E.R., Ф Piatt J.I., Logan J.S. 1996, Transplantation, 61, 1241-1249.

99. DiTullio P.S., Cheng S.H., Marshall J., Gregory R.J., Ebert K., Meadle H.M., Smith A.E., 1992, Bio/Technology, 10, 74-77.1.l

100. Dobrovolsky V.N., Lagutin O.V., Vinogradova T.V. et al. FEBS Lett, 1993,319(1-2), 181-184.

101. Dynan W.S., 1986, Trends Genet., 2, 196-197.

102. Dynan W.S., 1989, Cell, 58, 1-4.

103. Ebert K.M., Low M.J., Overstrom E.W., Buonomo F.C., Baile C.A., Roberts T.M., Lee A., Mandel G., Goodmann R.H., 1988, Mol. Endocrinol., 2, 227-283.

104. Ebert K.M., Selgrath J.P., DiTullio P., Denman J/. Smith Т.Е., Memon M.A., Schindler J.E., Monastersky G.M., Vitale J.A., Gordon K., 1991, Biotechnology, 9, 835-838.

105. Eglitis M.A., Anderson W.F., 1988, BioTechniques, 6, 608-614.

106. Ernst L.K., Goldman I.L., Zinov'eva N.A., Bashkeev E.D., Gogolevskij P.A., Kadulin S.G., Brem G., Official English translation of Doklady Acad. Nauk of Russia, 1995, V.345, 187-189.

107. Ernst L.K., Zakcharchenko V.I., Suraeva N.M., Ponomareva T.I., Mirochnichenko O.I., Prokof ev M.I., Tichonenko T.I., 1991, Theriogenology, 35, 1257-1271.

108. Fan J., Watanabe Т., 2003, Pharmacol. Ther., 99, 261-282.

109. Fishwild D.M., O'Donnell S.L., Bengoechea Т., Hudson D.V., Harding F., Bernhard S.L., Jones D., Kay R.M., Higgins K.M., Schramm S.R., LonbergN., 1996, Nat. Biotechnol., 14, 845-851.

110. Fodor W.L., Williams B.L., Matis L.A., Madri J.A., Rollins S.A., Knight J.W., Velander W., Squinto S.P., 1994, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91, 11153-11157.

111. Gagne M.B., Portier F., Sirard M.A., 1991, Mol. Reprod. Dev., 29, 6-15.

112. Galet C., Menck Le Bourhis C., Chopineau M., Le Griec G., Perrin A., Magallon Т., Attal J., Viglietta C., Houdebine L.M., Guillou F., 2001, Mol. and Cell. Endocrinology, 174, 31-40.

113. Games D., Adams D., Alssandrini R., Barbour R/. Berhellette P., Blackwell C., 1995, Nature, 373, №6513, 523.

114. Gandolfi. F. Trans. Res., 1998, 7, 147-155.

115. Gandolfi F., Lavitrano M., Camaioni A., Spadafora C., Siracusa G., Laruria A., 1989, J. Reprod. Fert. Abstr., 4, 21.

116. Goldman I.L., Cadulin S.G., Razin S.V., Russian J. of Genetic, 2000, 36, №11, 1211-1219.

117. Goldman I.L., Prokofiev M.I., Ernst L.K., Proceedings of the First Korea-Russia joint simp, on bioresurses and biotechnol., 1996, 57-74.

118. Gordon J.W., Ruddle R.H., 1981, Science, 214, 1244-1246.

119. Gordon J.W., Scandos G.A., Plotkin D.J., Barbosa A., Ruddle F.H., 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77, 7380-7384.

120. Gordon K., Lee E., Vitale J.A., Smith A.E., Westphal H., Hennighausen L., 1987, Biotechnology, 5, 1183-1187.

121. Hammer R.E., Pursrl V.G., Rexroad C.E., Wall R.J., Bolt D.J., Ebert K.M., Paimiter R.D., Brinster R.L., 1985, Nature, 315, 115-122.

122. Hammer R.E., Pursel V.G., Rexroad C.E., Wall R.J., Bolt D.J., Paimiter R.D., Brinster R.L., 1986, J. Anim. Sci., 63. 269-278.

123. Hennighausen L., 1990, Protein Expression Purif., 1, 3-8.

124. Hinrchs S.H., Nerenberg M., Reynolds R.K., Khoury G., Jay A., 1987, Science, 237, 1340-1343.

125. Hiripi L., Makovics F., Halter R., Baranyi M., Paul D., Carnwath J.W., Bosze Z., Niemann H.,2003, DNA Cell. Biol., 22, 41-45.

126. Hochi S.I., Ninomina Т., Mizuno A., Honma M., Yuki A., 1990, Anim. Biotechnol., 1, 21-31.

127. Hooper M., Hardy К., Handyside A., Hunter S., Monk M., 1987, Nature, 326, 292-295.

128. Hsiao K., Chapman P., Nilsen S., Eckman C., Harigaya Y., Younkin S., Yang F., Cole G., 1996, Science, 274, 99-102.

129. Huguet E., Esponda P. Mol. Reprod. Dev., 1998, 51, 42-52.

130. Humpries M.M., Rancourt D., Farrar G.J., Kenna P., Hazel M., Bush R.A., Sielving P.A., Sheils D.M., McNally N., Creighton P., Erven A., Boros A., Gulya K., Capecchi M.R., Humphries P., 1997, Nat. Genet., 15, 216-219.

131. Iglesias A., 1991, Experientia, 47, 878-884. « 134. Inoye К., 1988, Gene, 72, 25-34.

132. Ishida Y., 1989, Int. Immunol., 1, 113-120.

133. Iwakura Y., Saijo S., Holland S., 1995, J.Immunol., 155, 4, 1588.

134. Jaenisch R., 1988, Science, 240, 1468-1474.

135. Janne J., Hyttinen J.-H., Peura Т., Tolvanen M., Alhonen L., Sinervirta ^ R., Halmekyto M., 1994, Int. J. Biochem., 26, 859-870.

136. Jeffreys A.J., Wilson W., Neumann R, 1988, Nucleic Acids Res., v. 16, 10963-10971.

137. Jonson-Wood К., Lee M., Motter R., Ни K., Gordon G., Barbour R., Khan K., Gordon M., Tan H., Games D., Lieberburg I., Schenk D., Seubert P., McConlogue L., 1997, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94, 1550-1555.

138. Keffer J., Probert J.M., Gazlaris H., 1991, EMBO J., 10, 10, 4025.

139. Kim J., Jung-Ha H., Lee H. e.a. Mol. Reprod. Dev., 1997, 46, 515-526.

140. King D., Wall R.J., 1988, Mol. Reprod. Dev., 1, 57-62.

141. Knight K.L., Spieker-Polet H., Kadzin D.S., Oi V.T., 1988, Proc. Natl. Acad. USA, 85,3130-3134.

142. Krimpenfort P., Rademakers A., Eyestone W., van der Broek S., Kooiman P., Kootwijk E., Platenburg G., Pieper F., Strijker R., der Boer H., 1991, Biotechnology, 9 844-847.

143. Kuehn M.R., Bradley A., Robertson E.J., Evans M.J., 1987, J.Virol., 56, 201-206.

144. Lagutin O.V., Dobrovolsky V.N., Vinogradova T.V. et al. J. Interferon Cytokine Res., 1999, 19(2), 137-144.

145. Lavitano M., Camaioni A., Fasio V.M., Dolci S., Farace M.G., Spadafora C., 1989, Cell, 57,717-723.

146. Limonta J., Castro F., Rebeca M., Ramos В., Ancelmo A., Ricardo L., Fluente J., 1995, J. Biotechnology, 40, №1,49-58.

147. Lipinski D., Jura J., Kalak R., Plawski A., Kala M., Szalata M., Jarmuz ML, Korcz A., Slomska K., Gronek P., Smorag Z., Pienkowski M., Slomski R., 2003, J. Appl. Genet., 44, 165-174.

148. Lo D., Pursel V., Linton P.J., Sandgren E., Behringer R., Rexroad C., Palmiter R.D., Brinster R.L., 1991, Eur. J. Immunol., 21, 1001-1006.

149. Maiore В., Lavitrano M., Spadatora C., Mol. Reprod. Dev., 1998, 50, 406-409.

150. Masliah E., Sisk A., Mallory M., Mucke L., Shenk D., Games D., 1996, J. Neurosci., 16,5795-5811.

151. Maurer R.R., 1978, in : Methods in Mammalian Reproduction, New York, San Francisco, London : Academic Press, 259-272.

152. McCurry K.R., Kooyman D.L., Alvardo C.G., Cotterell A.H., Martin M.J., Logan J.S., Piatt J.P., 1995, Nat. Med., 1, 423-427.

153. Melton D.A., 1988, Mol. Biol. -Cold Spring Harbor Lab., New York.

154. Meyer Т., Horisberger M.A., 1984, J. Virol., 49, 709-716.

155. Miroshnichenko O.L., Borisenko A.S., Ponomareva T.L., 1990, Biomed. Sci., 1,267-273.

156. Muller M., Brem G., 1991, Experientia, 47, 923-934.

157. Murray J.D., Nancarrow C.D., Marshall J.T., Hazelton I.C., Ward K.A., 1989, Reprod. Fertil. Dev., 1, 147-155.

158. Nagano M., Brinster R. APMIS, 1998, 106, 1,47-57.

159. Nagano M., Shinohara Т., Avarbock M., FEBS Lett., 2000, 475 (1), 710.

160. Nagueh S.F., Tsyboulev N., Patel R., Kopelen H., Hadler Т., Lutucuta S., Salek L., Zoghbi W., Quinones M., Entman M., Roberts R., Marian A., 2002, J. of the Am. College of Cardiology, 39, 170.

161. Nancarrow C.D., Marchall J.T., Clarkson J.L., Murray J.D., Millard R.M., Shanahan C.M., Wynn P.C., Ward K.A., 1991, J. Reprod. Fert. Suppl., 43, 277-291.

162. Oster-Granite M.L., McPhie D.L., Greenan J., Neve R.L., 1996, J. Neurosci., 16, 6732-6741.

163. Palmiter R/D., Brinster R.L., 1986, Annu. Rev. Genet., 20, 465-499.

164. Palmiter R.D., Brinster R.L., Hammer R.E., Trumbauer M.E., Rosenfeld M.G., Birnberg N.C., Evans R.M., 1982, Nature, 300, 611-615.

165. Palmiter R.D., Norstedt G., Gelinas R.E., Hammer R.E., Brinster R.L., 1983, Science, 222, 809-814.

166. Palmiter R.D., Wilkie T.M., Chen H.Y., Brinster R.L., 1984, Cell, 36, 869-877.

167. Palmiter R.D., Chen H.Y., Messing A., Brinster R.L., 1985, Nature, 316, 457-460.

168. Palmiter R.D., Behringer R.R., Qualife C.J., Maxwell F., Maxwell I.H., Brinster R.L., 1987, Cell, 50, 435-443.

169. Palmiter R.D., Sandgrem E.R., Avarbock M.R., Allen D.D., Brinster R.L., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 478-482.

170. Patel R., Nagueh S.F., Tsybouleva N., Abdellatif M., Lutucuta S., Kopelen H.A., Quinones M.A., Zoghbi W.A., Entman M.L., Roberts R., Marian A.J., 2001, Circulation, 104, 317-324.

171. Perry A.C., Wakayama Т., Kishikawa H., Science, 1999, 284, 1180-1183.

172. Piedrahita J.A., Anderson G.B., Martin G.R., Boundrant R.H., Pasen R.L., 1988, Theriogenology, 29, 296.

173. Pines O., Inouye M., 1986, Trends Genet., 2, 284-287.

174. Pittus C.W., Hennighausen L., Lee E., Westphal H., Nicols E., Vitale J., Gordon K., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85, 5874-5878.

175. Polge E.J., Barton S.C., Surani M.A.H., Miller J.R., Wagner Т., Rottman F., Camper S.A., Elsone K., Davis A.J., Goode J.A., Foxfort G.R., Heap R.B., 1989, Biotechnology in Growth Regulation, London : Butterworth, 189-199.

176. Powell B.C., Rogers G.E., 1990, EMBO J., 9 (5), 1485-1493.

177. Prusiner S.B., 1991, Science, 252, 1515-1522.

178. Pursel V.G., Pinkert C.A., Muller K.F., Bolt D.J., Campbell R.G., Palmiter R.D., Brinster R.L., Hammer R.E., 1989, Science, 244, 1281-1288.

179. Pursel V.G., Wall R.L., Hennihghausen L., Pittius C.V., King D., 1990, Theriogenology, 33, 302.

180. Qaife C.J., Mathews L.S., Pinkert C.A., Hammer R.E., Brinster R.L., Palmiter R.D., 1989, Endocrinology, 124,40-48.

181. Qon D., Wang Y., Catalano R., Scarina J.M., Murakami K., Cordell В., 1991, Nature, 352, 239-241.

182. Rasin S.V., Verbovaia L.V., Goldman I.L., Russian J.of Genetic, 2000, 36,№ 11, 1211-1219.

183. Reddy V.B., Vitale J.A., Wei C., Montoya-Zavala M., Stice S.L., Balise J., Robi J.M., 1991, Anim. Biotechnol., 2, 15-29.

184. Reed M.L., Roessner C.A., Womack J.E., Dorn C.G., Kraemer D.C., 1988, Theriogenology, 29, 293.

185. Rexroad C.E., Hammer R.E., Behringer R.R., Palmiter R.D., Brinster R.L., 1990, J. Reprod. Fert. Suppl., 41, 119-124.

186. Rizzo M., Taylor J.M., Barbagallo C.M., Berneis K., Blanche P.J., Krauss R.M., 2004, Arterioscer. Tromb. Vase. Biol., 24, 141-146.

187. Robertson E„ Braedly A., Kuehn M., Evans M., 1986, Nature, 323, 445448.

188. Robertson E.J., 1986, Trends. Genet., 2, 9-13.

189. Rogaev E.I., Sherrington R, Rogaeva E.A., Levsque G., Ikeda M., Liang Y., Chi H., Lin C., Kolman K., 1995, Nature, 371, №6498, 775.

190. Rogers G.E., 1990, Trends Biotechnol., 8, 6-11.

191. Rochlau K., 1991, J. Reprod. Fert. Suppl., 43, 751-758.

192. Rusconi S., 1991, Experientia, 47, 866-877.

193. Saeki K., Matsumoto K., Kinoshita M., Suszuki Y., Капо K., Taguchi Y., Mikami K., Hibayashi M., Kashiwasaki N., Hosoi Y., Murata N., Iritani A., 2004, Pros. Natl. Acad. Sci. USA ,101,7, 6361-6366.

194. SarvetnickN., 1988, Cell, 52, 773-782.

195. Sato M., Jwase R., Kasai K., Anim. Biotechnol., 1994, 5, 19-31.

196. Schelander K., Peli J., Small F., Anim. Biotechnol., 1995, 6, 41-50.

197. Schorle H., Holtschke Т., Hunig Т., Schimpl A., Horak I., 1991, Nature, 352, 621-624.

198. Simons J.P., McClenagnan M., Clark A.J., 1987, Nature, 328, 530-532.

199. Simons J.P., Wilmut I., Clark A.J., Archibald A.L., Bishop J.O., Lathe R., 1988, Biotechnology, 6, 179-183.

200. Sharma A., Martin M.J., Okabe J.F., Truglio R.A., Dhanjal N.K., Logan J.S., Kumar R., 1994, Biotechnology, 12, 55-59.

201. Sherrington R., Rogaev E.I., Liang Y., Rogaeva E.A., Levesque G., Ikeda M., Chi H., Lin C., 1995, Nature, 375, №6532, 754.

202. Sperandio S., Lulli V., Bacci M.,Anim. Biotechnol., 1996, 7, 59-77.

203. StelleN.C., Pursel V.G., 1990, Annu. Rev. Nutrit., 10, 213-232.

204. Stinnakre M.G., Vilotte J.L., Soulier S., Haridon R.L., Charlier M., Gaye P., Mercier J.C., 1991, Fed. Eur. Biochem. Soc., 284, 19-22.

205. Storb U., 1987, Annu. Rev. Immunol., 5 151-174.

206. Southern E.M., 1975, J. Mol. Biol., 98, 503-517.

207. Swanson M.E., Martin M.J., O'Donn K., Hoover K., Lago W., Hantress V., Parsons C.T., Pinkert C.A., Pilder S., Logan J.S., 1992, Bio\Technology, 12, 55-59.

208. Thomas K.R., Folger K.R., Capecchi M.R., 1986, Cell, 44, 419-428.

209. Vise P.D., Michalska A.E., Ashman R., Lloyd В., Stone B.A., Quinn P., Wells J.R.E., Seamark R.F., 1988, J. Cell Sci., 90, 295-300.

210. Wagner Т.Е., Hoppe Р.С., Jollick J.D., Scholl D.R., Hodinka R.L., Gault J.B., 1981, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78, 6376-6380.

211. Walder J., 1988, Genes Dev., 2, 502-505.

212. Wall R.J., Pursel V.G., Shamay A., McKnight R.A., Pittus C.W., Hennighausen L., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 1696-1700.

213. Walton J.R., Murray J.D., Marshall J.T., Nancarrow C.D., 1987, Biol. Reprod., 37, 957-967.

214. Ward R., Nancarrow C.D., 1991, Experienta, 47, 913-922.

215. Weidle U.H., LenzH., Brem G., 1991, Gene, 98, 185-191.

216. Wilkie T.M., Brinster R.L., Palmiter R.D., 1986, Dev. Biol., 118, 9-18.

217. Williams R.S.„ Jonston S.A., Riedy M., DeVit M.J., McEliott S.G., Sanford J.C., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88, 2726-2730.

218. Wilmut I., Archibald A.L., McClenaghan M., Simons J.P., Whitelaw C.B.A., Clark A.J., 1990, J. Reprod. Fert. Suppl., 41, 135-146.

219. Wilmut I., Schnieke A.E., McWhir J., Kind A.J., Camphell K.H.S., 1997, Nature, 385, 810-813.

220. Wolf E., Wanke R., Hermanns W., Brem G., Pirchner F., von Butler-Wenken I., 1991, Growth, 55, 225-235.

221. Woychik R.P., Stewart C.L., Davis L.G., D'eustachio P., Leder P., 1985, Nature, 318, 36-40.

222. Yamazaki Y., Fujimoto H., Ando H , Biol. Reprod., 1998, 59, 1439-1444.

223. Yang M., Baranov E., Moossa A.R., Penman S., Hoffman R.M., 2000, Pros. Natl. Acad. Sci. USA , 97, 22, 12278-122282.

224. Yu S.-H., Deen K.S., Lee E., Hennighausen L., Sweet R. W., Rosenberg M., Westphal H., 1989, Mol. Biol. Med., 6, 255-261.