Пептидная регуляция старения эндотелия сосудов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат наук Гутоп, Екатерина Олеговна

• Гутоп, Екатерина Олеговна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Гутоп, Екатерина Олеговна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ЭНДОТЕЛИЙ СОСУДОВ И СТАРЕНИЕ

1.1. Старение сердечно-сосудистой системы

1.2. Молекулярные механизмы сердечно-сосудистой патологии

1.3. Пептидная регуляция функций сосудов при возрастной патологии

1.3.1. Пептид КЕБ (Везуген)

1.3.2. Полипептидный комплекс сосудов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Характеристика исследуемого материала

2.2. Приготовление раствора пептидов для введения в культуру

2.3. Метод клеточных культур

2.4. Иммуноцитохимическое исследование

2.5. Иммунофлуоресцентная конфокальная микроскопия

2.6. Морфометрические исследования и компьютерный анализ микроскопических изображений

2.7. Метод молекулярного моделирования

2.8. Статистическая обработка результатов

3.1. Исследование влияния пептидов на экспрессию сигнальных молекул в культуре клеток эндотелия человека

3.1.1. Влияние пептидов на экспрессию К167 в культуре клеток эндотелия человека

3.1.2. Влияние пептидов на экспрессию р53 в культуре клеток эндотелия человека

3.1.3. Влияние пептидов на экспрессию Сх43 в культуре клеток эндотелия человека

3.1.4. Влияние пептидов на экспрессию УЕОБ в культуре клеток эндотелия человека

3.2. Исследование влияния пептидов на экспрессию сигнальных молекул в культуре клеток сосудов крыс

3.2.1. Влияние пептидов на экспрессию К167 в культуре сосудов крыс

3.2.2. Влияние пептидов на экспрессию р53 в культуре сосудов крыс

3.2.3. Влияние пептидов на экспрессию Сх43 в культуре сосудов крыс

3.2.4. Влияние пептидов на экспрессию УЕОБ в культуре сосудов крыс

3.3. Модель взаимодействия вазопротекторных пептидов с ДНК

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ЛИТЕРАТУРА

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АД - артериальное давление

АЧТВ - активированное частичное тромбопластиновое время

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения

ГМК - гладкомышечные клетки

ИМ- инфаркт миокарда

ИБС - ишемическая болезнь сердца

КИМ - комплекс интима-медиа

КМЦ - кардиомиоцит

мРНК - матричная РНК

ММ- молекулярная медицина

ОНП - однонуклеотидные полиморфные маркеры

ПКС - полипептидный комплекс сосудов

ПМ - предиктивная медицина

ССЗ- сердечно-сосудистые заболевания

ССП - сердечно-сосудистая патология

ССС - сердечно-сосудистая система

ХСН- хроническая сердечная недостаточность

AngII - ангиотензин-II

API-2 - активатор плазминогена

CD - кластер дифференцировки (cluster of differentiation)

Сх43 - коннексин

DS - пептид Asp-Ser

EDR - пептид Glu-Asp-Arg (Пинеалон)

FGF - фактор роста фибробластов

ICAM - молекула межклеточной адгезии (intercellular adhesion molecule)

IFN-Y - у -интерферон IL-2 - интерлейкин-2 INF - интерферон

KED - пептид Lys-Glu-Asp (Везуген) NO - оксид азота NOS - NO-синтаза

PDGF - тромбоцитарный фактор роста

TF - фактор свёртывания крови III (tissue factor)

TNF - фактор некроза опухолей

TSP-1 - тромбоспондин-1

VEGFR - рецептор фактора роста эндотелия сосудов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Пептидная регуляция старения эндотелия сосудов»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Сердечно-сосудистая патология (ССП) одно из самых распространенных заболеваний с высоким уровнем риска смертности у лиц пожилого и старческлого возраста. Основными причинами смертности являются ишемическая болезнь сердца (ИБС) и атеросклероз [World Health Statistics, 2008]. Согласно статистике Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) более чем в 30% случаев причиной смерти является инфаркт миокарда (ИМ). В России ССП составляет примерно 55% в структуре причин общей смертности.

На сегодняшний день наблюдается тенденция к снижению среднего возраста манифестации ССП. Особенностью течения ССП у пожилых людей является сочетание патологии различных систем организма, что обуславливает применение различных фармацевтических препаратов. Существующие лекарственные средства, применяемые в терапии ССП у лиц старших возрастных групп имеют ограничения вследствие побочных эффектов. Например, одним из самых современных препаратов для лечения атеросклероза, аторвастатин и ловастатин, могут вызывать нарушения функции желудочно-кишечного тракта, повышение синтеза печеночных ферментов, помутнение хрусталика, нарушения в системе кроветворения, психические расстройства, миопатию.

В связи с этим поиск новых эффективных и безопасных средств лечения ССП особенно актуален для лиц пожилого и старческого возраста. Ранее в Санкт-Петербургском институте биорегуляии и геронтологии был разработан и изучен подипептидный комплекс сосудов, обладающей вазопротекторными свойствами в доклинических исследованиях и при пероральном применении. Однако, полипептидные комплексы могут вызывать аллергические реакции, что ограничивает их применение, в

особенности у лиц пожилого возраста со сниженной функцией иммунной системы. Короткие пептиды, являясь естественными метаболитами, не обладают иммуногенностью и другими побочными эффектами. Изучение процессов старения клеток сосудов и возможности регуляции этого процесса с помощью коротких вазопротекторных пептидов открывает новые перспективы разработки вазо- и геропротекторных лекарственных препаратов, обладающих высокой эффективностью и отсутствием побочных эффектов, направленных на лечение патологии ССП [Хавинсон В.Х. Молекулярные основы пептидергической регуляции старения. СПБ.: Наука. -2011. - 50 а]. Вазопротекторный пептид КЕD обладает широким спектром действия. Его успешно применяют при атеросклерозе в сочетании со стандартной терапией для улучшения мозгового кровообращения, нормализации памяти, повышения умственной способности, также при эректильной дисфункции [Башкирёва А.С., Артамонова В.Г. Пептидергическая коррекция невротических состояний у водителей грузового автотранспорта// Успехи геронтологии. - 2012. - Т. 25. - № 4. - С. 718; Китачёв К. В., Сазонов А. Б., Козлов К. Л., Петров К. Ю., Слюсарев А. С., Седова Е. В. Роль вазоактивного пептида в лечении хронической артериальной недостаточности нижних конечностей // Успехи геронтологии.

- 2013. - Т. 26, № 2. - С. 292-296; Китачёв К. В., Сазонов А. Б., Козлов К. Л., Петров К. Ю., Слюсарев А. С., Седова Е. В. Эффективность пептидного биорегулятора сосудов в комплексной терапииваскулогенной эректильной дисфункции у лиц старших возрастных групп // Успехи геронтологии. - 2014.

- Т. 27, № 1. - С. 156-159]. Также при применении пептида выявлено увеличение резистентности капилляров кожи у пациентов с гиповитаминозом. Кроме того, было показана нормализация микроциркуляции у крыс с пародонтитом при инъекциях пептида KED. В Санкт-Петербургском институте биорегуляции и геронтологии недавно был синтезирован пептид DS, который в предварительных экспериментах обладал

вазопротекторными свойствами. Однако молекулярные механизмы действия пептидов KED и DS до сих пор достаточно не изучены.

Цель и задачи исследования

Целью диссертационного исследования явилось изучение молекулярных механизмов действия коротких пептидов на процессы старения клеток сосудов человека и животных. Для достижения указанной цели поставлены и последовательно решены следующие задачи:

1. Изучить влияние пептидов KED и DS на экспрессию пролиферативного протеина Ю67 в культурах эндотелия сосудов человека и животных при их старении.

2. Оценить влияние пептидов KED и DS на экспрессию маркера клеточного старения и апоптоза p53 в культурах клеток сосудов человека и животных при их старении.

3. Изучить влияние пептидов KED и DS на экспрессию коннексина Cx43 в культурах клеток сосудов человека и животных при их старении.

4. Оценить влияние пептидов KED и DS на экспрессию фактора роста эндотелия сосудов VEGF в культурах клеток сосудов человека и животных при их старении.

5. Создать молекулярную модель взаимодействия пептидов KED и DS с промоторными зонами генов белков Ю67, p53, Cx43, VEGF и оценить, для какого из изученных пептидов взаимодействие с ДНК будет более энергетически выгодным.

6. Провести сравнительную оценку биологической активности пептидов KED и DS и выявить их молекулярные фармакологические мишени.

Степень разработанности темы исследования

Основанием для диссертации служат успешный опыт перорального применения препарата, действующим веществом которой является пептид

KED. В исследованиях Башкиревой А.С. и Китачева К.В. была показана высокая эффективноть этого биологически активного пептида у пациентов среднего и пожилого возраста с атеросклерозом нижних конечностей, эректильной дисфункцией и у лиц, работающих во вредных производственных условиях (электромонтеры и водители автотранспорта). Установлено, что пероральное применение пептида KED способствует улучшению мозгового и системного кровообращения, нормализации памяти, повышению внимания и работоспособности [Башкирёва А.С., Артамонова В.Г. Пептидергическая коррекция невротических состояний у водителей грузового автотранспорта// Успехи геронтологии. - 2012. - Т. 25. - № 4. - С. 718-728; Китачёв К. В., Сазонов А. Б., Козлов К. Л., Петров К. Ю., Слюсарев А. С., Седова Е. В. Роль вазоактивного пептида в лечении хронической артериальной недостаточности нижних конечностей // Успехи геронтологии.

- 2013. - Т. 26, № 2. - С. 292-296; Китачёв К. В., Сазонов А. Б., Козлов К. Л., Петров К. Ю., Слюсарев А. С., Седова Е. В. Эффективность пептидного биорегулятора сосудов в комплексной терапииваскулогенной эректильной дисфункции у лиц старших возрастных групп // Успехи геронтологии. - 2014.

- Т. 27, № 1. - С. 156-159]. В органотипических культурах сосудов молодых и старых крыс было показано, что пептид KED активирует их пролиферацию [Хавинсон В.Х. Молекулярные основы пептидергической регуляции старения. СПБ.: Наука. - 2011. - 50 а]. Также в предарительном эксперименте на органотипических культурах сосудов крыс установлено, что пептид DS стимулирует рост эксплантатов сосудов.

Однако молекулярный механизм вазпротекторного действия пептидов KED и DS до настоящего времени оставался неизученным.

Методология и методы исследования

Объектами для морфофункционального исследования явились первичные культуры ткани сосудов молодых крыс линии Wistar и культуры

клеток сосудов пуповины человека. В работе была исследована диссоциированная культура сосудов крыс линии Вистар и диссоциированная культура клеток эндотелия пуповины человека, 3 и 14 пассажи: 1- контроль (без добавления пептидов), 2 -добавление пептида EDR в концентрации 20 нг/мл, 3 - добавление пептида DS в концентрации 20 нг/мл, 4 - добавление пептида KED в концентрации 20 нг/мл. Для иммуноцитохимического исследования использовали следующие первичные антитела: Ki67, p53, VEGF, Cx43. Для оценки результатов иммуноцитохимического окрашивания проводили морфометрическое исследование с использованием программы «Vidеotest Morphology 5.0». Для построения пространственных структур пептидов и ДНК, а также расчета их низкоэнергетических конформаций и энергии образования комплексов использовали компьютерное программное обеспечение Molecular Operating Environment 2012. Далее проводили статистическую обработку всех полученных результатов.

Научная новизна

Впервые проведено сравнительное изучение влияния пептидов KED и DS на экспрессию сигнальных молекул (Ki67, p53, Сх43 и VEGF) в диссоциированных первичных культурах клеток эндотелия пуповины человека и сосудов крыс при их старении. Установлено, что короткие пептиды KED и DS снижают уровень апоптоза в клетках пуповины человека и сосудов крыс при их старении. При этом в «молодой» культуре эндотелия пуповины человека под действием пептидов KED, DS площадь экспрессии пропапототозного белка p53 достоверно не изменялась. Пептиды KED и DS способствуют повышению пролиферативной активности эндотелиоцитов. Впервые показано, что пептиды KED и DS повышают синтез пролиферативного маркера Ki67 в «молодых» и «старых» культурах клеток эндотелия пуповины человека и сосудов крыс, повышают экспрессию фактора роста эндотелия сосудов в «молодых» и «старых» культурах

эндотелиоцитов крыс и снижают уровень экспрессии протапоптотического протеина р53 в «молодых» и «старых» культурах клеток эндотелия пуповины человека. При этом пептид DS в большей степени влияет на культуру эндотелиоцитов крыс, а пептид KED на культуру клеток эндотелия пуповины. Поскольку при старении процессы апоптоза преобладают над пролиферацией, данный эффект указывает на геропротекторное действие пептидов KED и DS в отношении ткани сосудов. Способность пептидов KED и DS повышать пролиферацию эндотелия сосудов, показанная с импользованием маркеров Ю67 и VEGF, может служить предпосылкой для изучения их антиатеросклеротического действия. Поскольку одной из причин развития атеросклероза является нарушение целостности эндотелиального слоя, этот эффект может способствовать восстановлению эндотелия при данной патологии. Также, поскольку VEGF является маркером ангиогенеза, повышение его экспрессии под действием коротких пептидов указывает на их способность улучшать кровообращение в различных органах и тканях. Впервые высказано предположение, что регуляция синтеза белков Ю67, p53, Cx43 под действием пептидов KED и DS может быть связана с влиянием этих пептидов на экспрессию генов и создана молекулярная модель взаимодействия пептидов KED и DS с промоторными зонами гена белка Ю67, подтвреждающая эту гипотезу.

Практическая значимость

Полученные результаты позволили провести сравнительный анализ молекулярных механизмов биологической активности пептидов KED и DS. Эти данные свидетельствуют о том, что использование пептида KED или сочетания пептидов KED и DS может являться эффективным методом стимулирования сниженной с возрастом функциональной активности эндотелиоцитов сосудов. Подобный подход сравнительного изучения

биологической активности вазопротекторных препаратов может успешно

применяться и для других биологически активных веществ.

Кроме того, выявленно влияние пептида KED и DS на молекулярные

мишени-маркеры пролиферации и апоптоза клеток сосудов.

Положения, выносимые на защиту

1. При старении эндотелия сосудов его пролиферативная активность, оцениваемая, по экспрессии белка Ki67, снижается. Пептиды KED и DS стимулируют экспрессию пролиферативного протеина Ki67 в «молодых» и «старых» культурах клеток эндотелия человека и в «молодых» культурах сосудов крыс в 1,6-2,0 раза. При этом экспрессия фактора роста эндотелия сосудов, VEGF, не изменяется с возрастом и не поддается пептидной регуляции.

2. При старении эндотелия сосудов в культурах экспрессия проапоптотического протеина р53 возрастает. Пептиды DS и KED снижают уровень экспрессии проапоптотического протеина р53 в «старых» культурах эндотелия человека соответственно в 2 и 1,3 раза, что указывает на геропротектроное действие этих пептидов.

3. По данным молекулярного моделирования пептиды KED и DS способны связываться с промоторными зонами гена Ki67 и имеют одинаковый сайт связывания - CATC.

4. Пептиды KED и DS обладают выраженным геропротекторными и вазопротекторными свойствами, а в основе молекулярного механизма их действия лежит регуляция синтеза белков - маркеров функциональной активности эндотелия.

Связь с научно-исследовательской работой института

Диссертационная работа является темой, выполняемой по основному плану Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии.

Публикации по теме диссертации

По материалам диссертации опубликовано 1 7 научных работ, в том числе 3 статьи в журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для опубликования материалов диссертационных исследований, 1 глава в монографии, 1 статья в другом журнале и 12 тезисов докладов.

Апробация и реализация диссертации

Основные материалы диссертации доложены на международной конференции «Пушковские чтения» (Санкт-Петербург, 2014); на конференции «Фундаментальные проблемы геронтологи и гериатрии (Санкт-Петербург, 2014); на международной конференции «Актуальные аспекты геронтологии и гериатрии: от теории к практике» (Киев, 2014); на конгрессе «Пожилой больной. Качество жизни» (Москва, 2014); на Всероссийской конференции с международным участием «Фундаментальные аспекты старения. Хрупкость: модели, маркеры, фенотипы. Результаты проекта «Хрусталь» (Санкт-Петербург, 2013); на Межрегиональной научно-практической конференции «Медицинские проблемы пожилых» (Казань, 2013).

Личный вклад автора

Личный вклад автора в диссертационное исследование состоял в составлении плана исследования, проведении опытов, статистической обработке и анализе данных сравнительного молекулярного механизма действия вазопротекторных пептидов KED и DS. В ходе выполнения исследования автором освоена методика диссоциированного культивирования эндотелиоцитов человека и животных, метод иммуноцитохимического исследования, метод иммунофлуоресцентной

конфокальной микроскопии. Автор принимала участие во всех экспериментах, включавших в себя культивирование клеток, иммуноцитохимическое окрашивание, микроскопию, морфометрию, молекулярное моделирование взаимодействия пептидов KED и DS с ДНК и статистический анализ данных.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания результатов собственных исследований, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы. Текст диссертации изложен на 113 страницах, содержит 1 таблицу, иллюстрирован 27 рисунками. Список литературы содержит 170 источников, из них на русском языке - 46, на английском - 124.

Благодарности

Автор и научные руководители работы выражают благодарность з.д.н. РФ, профессору, доктору медицинских наук, руководителю отдела патоморфологии НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта Игорю Моисеевичу Кветному за консультации по выбору молекулярных маркеров функциональной активности эндотелия; профессору РАН, профессору, доктору биологических наук, руководителю лаборатории клеточной биологии отдела патоморфологии НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта Виктории Олеговне Поляковой за консультации по выделению и ведению клеточных культур, помощь в освоении методов иммуноцитохимии и морфометрии; кандидату биологических наук, старшему научному сотруднику лаборатории эпигенетики, биоинформатики и молекулярного моделирования Санкт-Петербургсокого института биорегуляции и геронтологии Светлане Игоревне Тарновской за консультации и помощь в освоении метода молекулярного моделирования ДНК-пептидных взаимодействий.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ЭНДОТЕЛИЙ СОСУДОВ И СТАРЕНИЕ 1.1. Старение сердечно-сосудистой системы

ССП занимает первое место в мире среди заболеваний с высоким уровнем риска смертности. В экономически развитых странах основной причиной смертности является ИБС (12,2%), на втором месте (9,7%) -атеросклероз [World Health Statistics, 2008]. Также согласно статистике ВОЗ более чем в 30% случаев причиной смерти является ИМ. В России ССП составляет примерно 55% в структуре причин общей смертности.

На сегодняшний день наблюдается тенденция к снижению среднего возраста манифестации ССП. За последние годы наибольший рост заболеваемости ССП в России наблюдается у лиц старше 25 лет [Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза. Российские рекомендации. Секция атеросклероза. ВНОК. - 2005. - 32 c.; Диагностика и лечение стабильной стенокардии. Российские рекомендации. Секция ишемической болезни сердца. ВНОК. - 2004. - 37 c.; Национальные рекомендации по профилактике, диагностике и лечению артериальной гипертонии, 2-й пересмотр. ВНОК. -2004. - 28 c.].

Интерес к исследованию возрастных особенностей сердечнососудистой системы (ССС) - структуры, функции и регуляции ее деятельности - объясняется прежде всего тем, что развивающиеся возрастные изменения в системе кровообращения, не являясь первичными в генезе старения, в значительной мере определяют характер и темп старения организма. Они, во-первых, значительно ограничивают адаптационные возможности стареющего организма, во-вторых, создают предпосылки для

развития патологии, являющейся основной причиной смерти человека: атеросклероза, артериальной гипертензии, ишемической болезни сердца и мозга [Bertini M., Ng A.C., Antoni M.L., Nucifora G., Ewe S.H. Global longitudinal strain predicts long-term survival in patients with chronic ischemic cardiomyopathy. // Circ Cardiovasc Imaging . - 2012. - № 5. - P. 383-391].

Наиболее распространенной формой ССП является атеросклероз -заболевание артерий эластического и мышечно-эластического типа, возникающее вследствие нарушения липидного обмена и сопровождающееся отложением холестерина и некоторых фракций липопротеидов в интиме сосудов [Pеаrson T.A., Mensah G.A., Alexander R.W. et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease: application to clinical and public health practice // Circulation. - 2003. - Vol. 107. - P. 499-511.]. Диагностика заболевания заключается в определении липидного баланса крови и концентрации холестерина и использовании физических методов исследования сосудов (рентгенологическое, ультразвуковое и др.).

Патологические изменения сердечно-сосудистой системы, характеризующиеся атеросклеротическим поражением сосудистой стенки, гипертрофией стенок полостей сердца, расширением полостей сердца носят последовательный, непрерывный и прогрессирующий. При ССП ослабляется сократительная функция мышцы сердца и прежде всего расслабляющая (диастолическая) функция. В первую очередь нарушается диастолическая функция у больных с артериальной гипертензией в виде дисфункции миокарда левого желудочка. Она встречается в 50-90% случаях и зависит от степени повышения артериального давления и давности заболевания. Повышенное артериальное давление, гипотрофия левого желудочка, диастолическая дисфункция левого желудочка приводят к хронической сердечной недостаточности, которая резко увеличивается с возрастом. Вначале изменения сердца носят приспособительный характер и не проявляются клинически. Клинические симптомы (одышка) отмечаются

сначала при физических нагрузках, затем толерантность к ним снижается и одышка возникает при небольших нагрузках, затем в покое и даже в положении лежа.

Хроническая сердечная недостаточность (ХСН) - это синдром, развивающийся в результате различных заболеваний сердечно-сосудистой системы, приводящих к снижению насосной функции сердца и недостаточному кровоснабжению органов и тканей, который проявляется одышкой, сердцебиением, утомляемостью, ограничением физической активности и избыточной задержкой жидкости в организме. ХСН резко ухудшает качество жизни больных и в 4 раза повышает риск смерти. У больных ХСН одышка является показателем их функционального потенциала. Эта взаимосвязь легла в основу классификации сердечной недостаточности на функциональные классы [Home S.G., Belenkie I., Tyberg J.V., Smith E.R. Pericardial pressure in experimental chronic heart failure. // Can J Cardiol. - 2000. - № 5. - P. 607-613.]. Появление одышки при сердечной недостаточности связано с нарушением циркуляции крови по сосудам легких (малом круче кровообращения). Застой крови в легких, кроме одышки, вызывает сухой кашель. Обычно кашель, как и одышка, возникает при физической нагрузке или в положении лежа. В некоторых случаях сильные приступы сердечного кашля и одышки переходят в приступ удушья (сердечная астма), что является признаком развития острой сердечной недостаточности.

Факторами риска для развития сердечно-сосудистых заболеваний является курение, повышенный холестерин плазмы крови, повышение артериального давления (АД). Все большее значение приобретают избыточная масса тела, ожирение, сахарный диабет, психосоциальный стресс, избыточное потребление алкоголя.

Поздние стадии атеросклероза коронарных артерий сердца являются причиной развития ИБС, патологического состояния, характеризующегося

абсолютным или относительным нарушением кровоснабжения миокарда.

Пожилые люди составляют большинство больных ИБС. Почти 3/4 случаев смерти от ИБС происходит среди лиц старше 65 лет, и почти 80% лиц, умерших от инфаркта миокарда, относятся к этой возрастной группе. Вместе с тем более чем в 50% случаев смерть лиц старше 65 лет наступает от осложнений ИБС. Распространенность ИБС (и, в частности, стенокардии) в молодом и среднем возрасте выше среди мужчин, чем среди женщин, однако к 70-75 годам частота ИБС среди мужчин и женщин сравниваются (25-33%). Ежегодная смертность среди больных этой категории составляет 2-3%, кроме этого, еще у 2-3% больных может развиться нефатальный инфаркт миокарда. Острой стадией ИБС является ИМ. Диагностика ИБС включает в себя неинвазивные (эхокардиография, холтеровское мониторирование, нагрузочные тесты и др.) и инвазивные методы (селективная коронарография) [Gyntelberg F., Meyer J. Relationship Between Blood Pressure and Physical Fitness, Smoking and Alcohol Consumption in Copenhagen Male Aged 40-59. // Acta med. scand. - 2004. - V .195. - N 5. - P. 375-380].

При терапии атеросклеротического поражения сосудов широкое применение получили препараты, относящиеся к группам статинов, фибратов, секвестрантов жирных кислот и др. Для профилактики и лечения ИБС и ИМ применяют различные антигипертензивные средства, к которым относятся блокаторы рецепторов ангиотензина, ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента, блокаторы ß-адренорецепторов, блокаторы кальциевых каналов, сердечные гликозиды и др. Применение лекарственной терапии оказывает выраженный профилактический и терапевтический эффекты. Тем не менее, медикаментозное лечение не является универсальным и корректным для всех пациентов, что выражается в значительном снижении терапевтического действия препарата при длительном применении и возникновении побочных эффектов [Пальцев М.А., Кветной И.М., Полякова В.О., Линькова Н.С., Костылев А.В.

Сигнальные молекулы: место и роль в персонифицированной диагностике, лечении и профилактике социально значимых заболеваний. // Молекулярная медицина. - 2012. - № 5. - С. 3-8].

Интегральным показателем функционирования ССС является артериальное АД. В рассмотрении отношения АД и возраста существует несколько подходов. Одни авторы указывают, что с возрастом давление крови значительно повышается. Другие авторы считают это увеличение незначительным, объясняя механизм повышения АД у людей пожилого и старческого возраста потерей эластичности крупных артериальных сосудов. Повышение давления рассматривается при таком подходе, как реакция компенсации, необходимая для поддержания перфузии жизненно важных органов при изменениях сосудистого русла [Tumer N., Toklu H.Z., MullerDelp J.M., Oktay S., Ghosh P., Strang K., Delp M.D., Scarpace P.J.The effects of aging on the functional and structural properties of the rat basilar artery. // Physiol. Rep. - 2014. - V. 6. - N 2(6). - P. 12031].

Повышение АД может быть вызвано снижением эластичности периферических артерий вследствие склеротических и дегенеративных изменений, происходящих в них в процессе старения [Chang W.T., Chen J.S., Hung Y.K., Tsai W.C., Juang J.N., Liu P.Y. Characterization of aging-associated cardiac diastolic dysfunction. // PLoS One. - 2014. - V. 28. - N 9(5). - P. e97455]. При физиологическом старении среднее АД у здоровых людей 60-69 лет составляет 130/80 - 135/85, у людей 70-79 лет - 135/80 - 140/85 мм рт. ст. [Van Empel V.P., Kaye D.M., Borlaug B.A. Effects of healthy aging on the cardiopulmonary hemodynamic response to exercise. // Am. J. Cardiol. - 2014. -V. 1. - N 114(1). - P. 131-135].

У здоровых людей выявляется тенденция к повышению АД в старших возрастных группах [Patel V.B., Zhong J.C., Fan D., Basu R., Morton J.S., Parajuli N., McMurtry M.S., Davidge S.T., Kassiri Z., Oudit G.Y. Angiotensin-converting enzyme 2 is a critical determinant of angiotensin II-induced loss of

vascular smooth muscle cells and adverse vascular remodeling. // Hypertension. -2014. - V. 64. - N 1. - P. 157-164]. Эта закономерность в большей степени выражена со стороны систолического и среднединамического давления, в то время, как минимальное давление остается более стабильным. В связи с тем, что максимальное и минимальное давления изменяются неравномерно, с возрастом повышается пульсовое давление. О том, что высокий уровень АД не является результатом естественного старения, свидетельствуют длительные (5-13 лет) наблюдения, указывающие на некоторое снижение максимального и минимального давления у долгожителей по сравнению с контрольной группой лиц молодого возраста [Ohanian J., Liao A., Forman S.P., Ohanian V. Age-related remodeling of small arteries is accompanied by increased sphingomyelinase activity and accumulation of long-chain ceramides. // Physiol. Rep. - 2014. - V. 28. - N 2(5). - P. e12015]. В процессе старения не происходят существенные сдвиги среднединамического давления. В возрасте 50-79 лет оно соответствует 85-100 мм рт. ст., превышение этих величин рассматривается как проявление патологических изменений.

При физиологическом старении АД существенно не повышается, несмотря на увеличение упругого напряжения крупных артериальных сосудов и потерю ими эластичности. Эти изменения происходят на фоне снижения сердечного выброса, увеличения объема аорты и других отделов сосудистой системы, а также повышения сосудистого сопротивления [Ma L., Wang K., Shang J., Cao C., Zhen P., Liu X., Wang W., Zhang H., Du Y., Liu H. Anti-Peroxynitrite Treatment Ameliorated Vasorelaxation of Resistance Arteries in Aging Rats: Involvement with NO-sGC-cGKs Pathway. // PLoS One. - 2014. -V. 12. - N 9(8). - P. e104788].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Гутоп, Екатерина Олеговна, 2017 год

ЛИТЕРАТУРА

1. Автандилов Г.Г. Диагностическая медицинская плоидометрия. - М.: Медицина, 2006. - 192 с.

2. Агеев Ф.Т. Роль эндотелиальной дисфункции в развитии и прогрессировании сердечно-сосудистых заболеваний. Сердечная недостаточность. - 2003, № 4. - 22 с.

3. Алдаяров Н.С., Жумаканова З.Т., Марасулов А.А. Сравнительная морфология пролиферации и апоптоза в небной миндалине у собак // Наука вчера, сегодня, завтра. 2016. № 8-1 (30). С. 103-113.

4. Башкирёва А.С., Артамонова В.Г. Пептидергическая коррекция невротических состояний у водителей грузового автотранспорта// Успехи геронтологии. - 2012. - Т. 25. - № 4. - С. 718-728.

5. Белоусов С.С., Новиков И.И. Роль молекулярно-иммунологических нарушений в патогенезе инфакркта миокарда и их модуляции в клинической практике // Медицинский альманах. - 2010. - Т. 11. - № 2. - С. 66-69.

6. Бувальцев В.И. Дисфункция эндотелия как новая концепция профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний. Междунар. мед. журнал. -2001. - № 3. - С. 202-209.

7. Ванюшин Б.Ф. Материализация эпигенетики, или небольшие изменения в ДНК с большими последствиями // Химия и жизнь. - 2004. - № 2. - С. 32-37.

7. Владимирская Т.Э., Швед И.А., Криворот С.Г. Апоптоз клеток стенки коронарных артерий как фактор развития и прогрессирования коронаросклероза // Актуальные вопросы кардиологии. - 2013. - N 9. - Р. 2226.

8. Воевода М.И, Казаринова Ю.Л., Максимов В.Н., Куликов И.В., Малютина С.К., Никулина С.Ю., Ромащенко А.Г., Исаченко О.О., Чернова А.А.,

Шульман В.А. Роль транскрипционного фактора БР4 и коннексина-40 в генезе суправентрикулярных аритмий // Вестник Аритмологии. - 2011.- № 63. С.32-35.

9. Гаврилова Н.Е., Метельская В.А., Перова Н.В., Яровая Е.Б., Мазаев В.П., Уразалина С.Ж., Бойцов С.А. Взаимосвязь между выраженностью коронарного атеросклероза, факторами риска и маркерами атеросклеротического поражения каротидных и периферических артерий // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2013. - Т. 12. - № 1. - С. 4045.

10. Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза. Российские рекомендации. Секция атеросклероза. ВНОК. - 2005. - 32 с.

11. Диагностика и лечение стабильной стенокардии. Российские рекомендации. Секция ишемической болезни сердца. ВНОК. - 2004. - 37 с.

12. Звездина И.В. Возрастные особенности сердечно-сосудистой системы у подростков. Вопр. совр. пед. Материалы VIII конгресса педиатров России. М. - 2003. - 125 с.

13. Камышова Т.В., Неберидзе Д.В., Константинов В.В. Связь различных факторов риска с состоянием эндотелиальной функции. Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2003. - № 2 (2). - С. 23-26.

14. Китачёв К.В., Сазонов А.Б., Козлов К.Л., Петров К.Ю., Слюсарев А. С., Седова Е.В. Роль вазоактивного пептида в лечении хронической артериальной недостаточности нижних конечностей // Успехи геронтологии. - 2013. - Т. 26, № 2. - С. 292-296.

15. Китачёв К.В., Сазонов А.Б., Козлов К.Л., Петров К.Ю., Слюсарев А. С., Седова Е.В. Эффективность пептидного биорегулятора сосудов в комплексной терапииваскулогенной эректильной дисфункции у лиц старших возрастных групп // Успехи геронтологии. - 2014. - Т. 27, № 1. - С. 156-159.

16. Коробов Г.А., Сазонова М.А., Собенин И.А. Ишемическая болезнь сердца: регулирование с помощью микроРНК // Кардиологический вестник. -2011. - Т. 6. - N. 18. - С. 5-10.

17. Кузник Б.И., Витковский Ю.А., Люлькина Е.В. Возрастные особенности системы гемостаза у людей. // Успехи геронтологии. - 2005. -Вып. 16. - С. 38-47.

18. Морозов В.Г., Рыжак Г.А., Малинин В.В., Рутковская В.Н. Цитогены. Биологически активные добавки к пище // Методические рекомендации. -СПб.: Коста. - 2011. - 40 с.

19. Национальные рекомендации по профилактике, диагностике и лечению артериальной гипертонии, 2-й пересмотр. ВНОК. - 2004. - 28 с.

20. Остроумова О.Д., Дубинская Р.Э. Старение и дисфункция эндотелия. // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2004. - Т. 3. - № 4. - С. 83-89.

21. Пальцев М.А., Кветной И.М., Полякова В.О., Линькова Н.С., Костылев А.В. Сигнальные молекулы: место и роль в персонифицированной диагностике, лечении и профилактике социально значимых заболеваний. // Молекулярная медицина. - 2012. - № 5. - С. 3-8.

22. Петросян К.Р., Автандилов А.Г. Структурно-функциональные изменения артерий у курящих мужчин в возрастном аспекте. // Российский кардиологический журнал. - 2008. - Т. 71. - № 3. - С. 35-40.

23. Пинтус С.С. Коэволюция доменов в ключевых белах апоптоза Р53 и Мёп2// Вестник ВОГиС. - 2009. - Т. 13, № 1. - С. 128-136.

24. Рыжак А. П., Кузник Б. И., Рутковская В. Н. Антиатеросклеротическое действие пептидного геропротектора // Успехи геронтологии. - 2012. - Т. 25. № 1. - С. 139-143.

25. Титов В.Н. Атеросклероз - проблема общей биологии: нарушение биологических функций питания и экологии // Успехи соврем. биологии. -2009. - Т. 129. - № 2. - С. 124-143.

26. Умнов Р.С., Линькова Н.С., Хавинсон В.Х. Пептиды стимулируют экспрессию сигнальных молекул в культурах клеток нейронов животных разного возраста // Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2014. -№ 2. - С. 123-126.

27. Уразалина С.Ж., Бойцов С.А. Взаимосвязь между выраженностью коронарного атеросклероза, факторами риска и маркерами атеросклеротического поражения каротидных и периферических артерий // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2013. - Т.-1. - № 12. - С. 4045.

28. Ус А.Д. Бальнеотерапия и возраст // Киев: Наук, думка. - 1985. - 136 с.

29. Федореева Л.И., Киреев И.И., Хавинсон В.Х., Ванюшин Б.Ф. Проникновение коротких флуоресцентно-меченных пептидов в ядро в клетках HeLa и специфическое взаимодействие пептидов с дезоксирибонуклеотидами и ДНК in vitro // Биохимия. 2011. - Т. 76. - Вып. 11. - С. 1505-1516.

30. Федореева Л.И., Смирнова Т.А., Коломийцева Г.Я. Взаимодействие коротких пептидов с FITC-меченными гистонами пшеницы и их комплексами с дезоксирибонуклеотидами // Биохимия. - 2013. - Т. 78. - Вып. 2. - С. 230-242.

31. Хавинсон В.Х. Молекулярные основы пептидергической регуляции старения. СПБ.: Наука. - 2011. - 50 с.

32. Хавинсон В.Х. Тканеспецифическое действие пептидов // Бюллютень экспериментальной биологии и медицины - 2001. - Т. 132. - № 8. - С. 228229.

33. Хавинсон В.Х. Цитогены. Биологически активные добавки к пище // Методические рекомендации. - СПб: "Издательско-полиграфическая компания "КОСТА"". - 2011. - 40 с.

34. Хавинсон В.Х., Бондарев И.Э., Бутюгов А.А., Смирнова Т.Д. Пептид способствует преодолению лимита деления соматических клеток человека //

Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2004. - Т. 137. - № 5. -С. 613-616.

35. Хавинсон В.Х., Григорьев Е.И., Малинин В.В., Рыжак Г.А. Пептид, повышающий резистентность капилляров, фармацевтическая композици яна его основе, и способ ее применения// Патент РФ №2295970. 2006.

36. Хавинсон В.Х., Григорьев Е.И., Малинин В.В., Рыжак Г.А. Пептид, стимулирующий регенерацию нейронов центральной нервной системы, фармацевтическая композиция на его основе и способ ее применения. Патент РФ № 2301678. 27.06.2007.

37. Хавинсон В.Х., Линькова Н.С., Морозова Е.А., Гутоп Е.О., Елашкина Е.В. Молекулярные механизмы сердечно-сосудистой патологии. // Успехи физиологических наук. - 2014. - N 3. - С. 56-65.

38. Хавинсон В.Х., Линькова Н.С., Полякова В.О. Пептиды тканеспецифически стимулируют дифференцировку клеток при их старении // Клеточные технологии в биологии и медицине. - 2012. - № 1. - С. 34-37.

39. Хавинсон В.Х., Малинин В.В., Рыжак Г.А. Средство, нормализующее функции кровеносных сосудов, и способ его получения. - Патент РФ. ЯИ 2301072. - 20.06.2006.

40. Хавинсон В.Х., Соловьёв А.Ю., Жилинский Д.В., Шатаева Л.К., Ванюшин Б.Ф. Эпигенетические аспекты пептидергической регуляции старения // Успехи геронтологии. - 2012. - Т. 25. - № 1. - С. 11-23.

41. Хавинсон В.Х., Соловьев А.Ю., Линькова Н.С., Тарновская С.И., Шатаева Л.К. Механизм биологической активности коротких пептидов: проникновение в клетку и эпигенетическая регуляция экспрессии генов // Успехи современной биологии. - 2013. - Т. 133. - № 3. - С. 310-316.

42. Хельтье, Х.-Д., Зиппль В., Роньян Д., Фолькерс Г. Молекулярное моделирование. Теория и практика, Медицинская химия. Бином. Лаборатория знаний, 2010. 320 с.

43. Черепахин Д.И., Базылев В.В., Евтюшкин И.А., Сучков С.В., Богопольская О.М., Чарчян Э.Р., Белов Ю.В., Пальцев М.А. Современные маркеры в диагностике атеросклероза // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2012. - № 3. - С. 26-29.

44. Шайхутдинова Э.Р. Экспериментальное исследование кардиопротекторных эффектов новых синтетических аналогов энкефалинов. Автореф. дис. канд. мед. наук. Томск: Институт биоорганической химии им. Академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН. - 2013. - 21 с.

45. Шайхутдинова Э.Р., Боброва И.А., Хохлова О.Н. Фармакологические подходы к повышению устойчивости миокарда на модели острого инфаркта у крыс CD // Биомедицина. - 2012. - № 1. - С. 102-105.

46. Andrawis N., Jones D.S., Abernethy D.R. Aging is associated with endothelial dysfunction in the human forearm vasculature. // J. Am. Geriatr. Soc. -2000. - V. 48. - N 2. - P. 193-198.

47. Anisimov V. N., Khavinson V. Kh. Peptide bioregulation of aging: results and prospects // Biogerontology. - 2010. - Vol. 11. N 2. - P. 139-149.

48. Anteby E.Y., Greenfield C., Natanson-Yaron S. Vascular endothelial growth factor, epidermal growth factor and fibroblast growth factor-4 and -10 stimulate trophoblast plasminogen activator system and metalloproteinase-9 // Mol. Hum. Reprod. — 2004. — V. 10. — №4. — P. 229-235.

49. Arshad H., Ahmad Z., Hasan S.H. Gliomas: correlation of histologic grade, Ki67 and p53 expression with patient survival // Asian Pac J Cancer Prev. - 2010. - Vol. 11. - N 6. - P. 1637-1640.

50. Arunachalam G., Samuel S.M., Marei I., Ding H., Triggle C.R. Metformin modulates hyperglycaemia-induced endothelial senescence and apoptosis through SIRT1. // Br. J. Pharmacol. - 2014. - V.171 - N 2. - P. 523-535.

51. Bertini M., Ng A.C., Antoni M.L., Nucifora G., Ewe S.H. Global longitudinal strain predicts long-term survival in patients with chronic ischemic cardiomyopathy. // Circ Cardiovasc Imaging . - 2012. - № 5. - P. 383-391.

52. Bonauer A., Carmona G., Iwasaki M. et al. MicroRNA-92a Controls angiogenesis and functional recovery of ischemic tissues in mice // Science. -2009. - T. 324. - № 5935. - P. 1710-1713.

53. Bullwinkel J., Baron-Luhr B., Ludemann A., Wohlenberg C., Gerdes J., Scholzen T. Ki-67 protein is associated with ribosomal RNA transcription in quiescent and proliferating cells. // J. Cell. Physiol. - 2006. - V. 206. - N 3. - P. 624-635.

54. Butler J., Kalogeropoulos A., Georgiopoulou V., Belue R., Rodondi N. Incident heart failure prediction in the elderly: the health ABC heart failure score. // Circ Heart Fail. - 2008. № 1. - P. 125-133.

55. Chan J., Bayliss P.E., Wood J.M., Roberts T.M. Dissection of angiogenic signaling in zebrafish using a chemical genetic approach // Cancer Cell. -2002. - № 1. - P. 257-267.

56. Chang W.T., Chen J.S., Hung Y.K., Tsai W.C., Juang J.N., Liu P.Y. Characterization of aging-associated cardiac diastolic dysfunction. // PLoS One. -2014. - V. 28. - N 9(5). - P. e97455.

57. Cobble M. Coronary heart disease in women // J. Fam Pract. - 2014. - Vol. 63. - № 2. - P. 9-14.

58. Coleman P.R., Chang G., Hutas G., Grimshaw M., Vadas M.A., Gamble J.R. Age-associated stresses induce an anti-inflammatory senescent phenotype in endothelial cells. // Aging (Albany NY). - 2013. - V. 5. - N 12. - P. 913-924.

59. Cournot M., Taraszkiewicz D., Cambou J.P. et al. Additional prognostic value of physical examination, exercise testing, and arterial ultrasonography for coronary risk assessment in primary prevention // AHJ. - 2009. - Vol. 158. - № 5. -P. 845-851.

60. Crampton S.P., Davis J., Hughes C.C. Isolation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). // J Vis Exp. - 2007. - № 3. - P. 183.

61. Day K., Waite L.L., Thalacker-Mercer A., West A., Bamman M.M., Brooks J.D., Myers R.M., Absher D. Differential DNA methylation with age

displays both common and dynamic features across human tissues that are influenced by CpG landscape // Genome Biol. - 2013. - Vol. 14. - P. 102.

62. de Fougerolles A.R., Springer T.A. Intercellular adhesion molecule 3, a third adhesion counter-receptor for lymphocyte function-associated molecule 1 on resting lymphocytes. // J. Exp. Med. - 1992. - V. 175. - N 1. - P. 185.

63. De Maziere A., Parker L., Van Dijk S., Ye W., Klumperman J. Egfl7 knockdown causes defects in the extension and junctional arrangements of endothelial cells during zebrafish vasculogenesis // Dev Dyn. - 2008. - № 237. - P. 580-591.

64. Dejana E., Taddei A., Randi A.M. Foxs and Ets in the transcriptional regulation of endothelial cell differentiation and angiogenesis. // Biochim Biophys Acta. - 2007. - № 1775. -P. 298-312.

65. Dickson E.W., Ludwig P.S., Ackermann L.W. Met5-enkephalin-Arg6-Phe7 (MEAP): a cardioprotective hormonal opioid // Acad Emerg Med. 2006. - T. 13. - № 8. - P. 813-819.

66. Douvaras P., Antonatos D.G., Kekou K. Association of VEGF gene polymorphisms with the development of heart failure in patients after myocardial infarction // Cardiology. - 2009. - Vol. 114. - № 1. - P. 11-18.

67. Eisenach J.H., Gullixson L.R., Allen A.R., Kost S.L., Nicholson W.T. Cyclooxygenase-2 inhibition and endothelium-dependent vasodilation in younger versus older healthy adults. // Br. J. Clin. Pharmacol. - 2014. - doi: 10.1111/bcp.12397.

68. Epelman S., Lavine K.J., Randolph G.J. Origin and functions of tissue macrophages //Immunity. - 2014. - № 41. - P. 21-35.

69. Falato C., Lorent J., Tani E., Karlsson E., Wright P.K., Bergh J., Foukakis T. Ki67 measured in metastatic tissue and prognosis in patients with advanced breast cancer. // Breast Cancer Res Treat. - 2014. - Vol. 147. - P. 407-414.

70. Fedoreyeva L.I., Kireev I.I., Khavinson V.Kh., Vanyushin B.F. Penetration of short fluorescence labelled peptides into the nucleus in HeLa cells and in vitro

specific interaction of the peptides with deoxyribooligonucleotides and DNA // Biochemistry. - 2011. - Vol. 76, - N. 11. - P. 1505-1516.

71. Ferrara N., Gerber H.P. The role of vascular endothelial growth factor in angiogenesis. // Acta Haematol. - 2002. - V. 106. - N 4 - P. 148-156.

72. Firouzi M., Ramanna H., Kok B. Association of Human Connexin40 Gene Polymorphisms With Atrial Vulnerability as a Risk Factor for Idiopathic Atrial Fibrillation// Circulation Research. - 2004. - Vol.95. - P. 29.

73. Fish J.E., Santoro M.M., Morton S.U. Deepak Srivastava miR-126 regulates angiogenic signaling and vascular integrity // Dev Cell. - 2008. -Vol. 15. - № 2. - P. 272-284.

74. Furghott R.F., Zawadzki J.W. The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine. // Nature. - 1980. - N 288. -P. 373-376.

75. Gahmberg C.G., Tolvanen M., Kotovuori P. Leukocyte adhesion—structure and function of human leukocyte beta2-integrins and their cellular ligands. // Eur. J. Biochem. - 1997. - V. 245. - N 2. - P. 215-232.

76. Galkina E, Ley K. Immune and inflammatory mechanisms of atherosclerosis // Annu Rev Immunol. - 2009. - № 27. -P. 165-197.

77. Gardin J.M., Bartz T.M., Polak J.F., O'Leary D.H., Wong N.D. What do carotid intima-media thickness and plaque add to the prediction of stroke and cardiovascular disease risk in older adults? The cardiovascular health study. // J. Am. Soc. Echocardiogr. - 2014. - Vol. 27. - N 9. - P. 998-1005.

78. Geissmann F, Manz MG, Jung S, Sieweke MH, Merad M, Ley K (2010) Development of monocytes, macrophages, and dendritic cells // Science. - 2010. -№ 327. - P. 656-661.

79. Ghosh G., Indira V. Subramanian, Neeta Adhikari et al. Hypoxia-induced microRNA-424 expression in human endothelial cells regulates HIF-a isoforms and promotes angiogenesis // J. Clin. Invest. - 2010. - Vol. 120. - № 11. - P. 41414154.

80. Gross G. Role of opioids in acute and delayed preconditioning // J. Mol. Cell. Cardiol. - 2003. - Vol. 5. - P. 709-718.

81. Guan A., Gong H., Ye Y., Jia et al. Regulation of p53 by jaggedl contributes to angiotensin II-induced impairment of myocardial angiogenesis// PLoS One. - 2013. - Vol 8. - № 10. - P. 1345-1349.

82. Gyntelberg F., Meyer J. Relationship Between Blood Pressure and Physical Fitness, Smoking and Alcohol Consumption in Copenhagen Male Aged 40-59. // Acta med. scand. - 1974. - Vol. 195. - N 5. - P. 375-380.

83. Hagendorff A., Schumacher B., Kirchhoff S. Conduction disturbances and increased atrial vulnerability in Connexin 40-defi cient mice analyzed by transesophageal stimulation // Circulation. - 1999. - Vol. 99. - № 11. - P.1508-1515.

84. Harada M., Luo X., Murohara T. MicroRNA Regulation and Cardiac Calcium Signaling: Role in Cardiac Disease and Therapeutic Potential // Circ Res. - 2014. - Vol. 114. - № 4. - P. 689-705.

85. Hayashi T., Kotani H., Yamaguchi T., Taguchi K., Iida M., Ina K., Maeda M., Kuzuya M., Hattori Y., Ignarro L.J. Endothelial cellular senescence is inhibited by liver X receptor activation with an additional mechanism for its atheroprotection in diabetes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2014. - V. 21. - N 111(3). - P. 1168-1173.

86. Hayes E.M., Tsaousi A., Di Gregoli K., Jenkinson S.R., Bond A.R., Johnson J.L., Bevan L., Thomas A.C., Newby A.C. Classical and alternative activation and metalloproteinase expression occurs in foam cell macrophages in male and female apoe null mice in the absence of t and b lymphocytes // Front Immunol. - 2014. - № 5. - P.537.

87. Hilgendorf I., Theurl I., Gerhardt L.M. Innate response activator b cells aggravate atherosclerosis by stimulating t helper-1 adaptive immunity // Circulation. - 2014. - № 129. - P. 1677-1687.

88. Hock A.K., Vigneron A.M., Carter S., Ludwig R.L., Vousden K.H. Regulation of p53 stability and function by the deubiquitinating enzyme USP42. // EMBO J. - 2011. - V. 30. - P. 4921-4930.

89. Horne S.G., Belenkie I., Tyberg J.V., Smith E.R. Pericardial pressure in experimental chronic heart failure. // Can J Cardiol. - 2000. - № 5. - P. 607-613.

90. Hu S., Huang M., Li Z. MicroRNA-210 as a novel therapy for treatment of ischemic heart disease // Circulation. - 2010. - № 122. - P. 124-131.

91. Hua Z., Qing Lv., Ye W. MiRNA-directed regulation of VEGF and other angiogenic factors under hypoxia // PLoS One December. - 2006. - № 1. P. 1-13.

92. Huang H., Kozekov I. D., Kozekova A., et al. Minor groove orientation of the KWKK peptide tethered via the N-terminal amine to the acrolein-derived 1, N2-gamma-hydroxypropanodeoxyguanosine lesion with a trimethylene linkage // Biochemistry. - 2010. - Vol. 27, N. 49. - P. 6155-6164.

93. Jackson K.E., Farias M., Stanfill A.S. Transient arterial occlusion in the canine sinoartrial node and improves vagal bradicardia // Auton. Neurosci.Basic Clin. - 2001. - Vol. 256. - P. 84-92.

94. Ji R., Cheng Y., Yue J. Dean and chunxiang zhang microRNA expression signature and antisense-mediated depletion reveal an essential role of microRNA in vascular neointimal lesion formation // Circ Res. - 2007. - Vol. 100. - P. 15791588.

95. Jin S.W., Herzog W., Santoro M.M., Mitchell T.S., Frantsve J., Jungblut B., Beis D., Scott I.C., D'Amico L.A., Ober E.A. A transgene-assisted genetic screen identifies essential regulators of vascular development in vertebrate embryos. // Dev Biol. - 2007. № 307. - P. 29-42.

96. Juonala M., Kuhunen M. Effect of age and sex on carotid intima-media thickness, elasticity and brachial endothelial function in healthy adults: The Cardiovascular Risk in Young Finns Study. // Eur Heart J. - 2007. - V. 12. - N 3. - P. 645-658.

97. Khavinson V. Kh., Malinin V. V. Gerontological aspects of genome peptide regulation. Basel (Switzerland): Karger AG. - 2005. - 104 p.

98. Khavinson V. Kh., Solov'ev A. Yu., Tarnovskaya S. I., Lin'kova N. S. Mechanism of biological activity of short peptides: cell penetration and epigenetic regulation of gene expression // Biology Bulletin Reviews. - 2013. - Vol. 3, № 6. -P. 451-455.

99. Khavinson V.Kh., Grigoriev E.I., Malinin V.V., Ryzhak G.A., Peptide enhancing capillary resistancy, pharmacological substance based thereon and method of its application. - Patent. Eurasia. EA 010157. - 06.2008.

100. Khavinson V.Kh., Lin'kova N.S., Polyakova V.O. Tetrapeptide H-Ala-Glu-Asp-Arg-OH Stimulates Expression of Cytoskeletal and Nuclear Matrix Proteins. // Bulletin of Experimental Biology and Medicine (Cell Technologies in Biology and Medicine). - 2012. - № 2. - P. 559-562.

101. Khavinson V.Kh., Linkova N.S., Pronyaeva V.E., Chalisova N.I., Koncevaya E.A., Polyakova V.O., Kvetnaya T.V., Kvetnoy I.M., Yakovlev G.M. Method of Creating a Cell Monolayer Based on Organotypic Culture for Screening of Physiologically Active Substances // Bull. Exp. Biol. Med. -2012. - Vol. 153, N.5. - P. 795-799.

102. Khavinson V.Kh., Solovyova D.V. Genetic predisposition to the ischemic heart disease in the elderly. // The Gerontologist. Special issue 1. - 1999. - Vol. 39. - P. 150.

103. Kilgannon P., Turner T., Meyer J., Wisdom W., Gallatin W.M. / Mapping of the ICAM-5 (telencephalin) gene, a neuronal member of the ICAM family, to a location between ICAM-1 and ICAM-3 on human chromosome 19p13.2. // Genomics. - 2009. - V. 54. - N 2. - P. 328-330.

104. Kim I., Ryu Y.S., Kwak H.J., Ahn S.Y., Oh J.L., Yancopoulos G.D., Gale N.W., Koh G.Y. EphB ligand, ephrinB2, suppresses the VEGF- and angiopoietin 1-induced Ras/mitogen-activated protein kinase pathway in venous endothelial cells.// Faseb J. - 2002. - № 16. - P. 1126-1128.

105. Koga C., Adati N., Nakata K., Mikoshiba K., Furuhata Y., Sato S., Tei H., Sakaki Y., Kurokawa T., Shiokawa K., Yokoyama K.K. Characterization of a novel member of the FGF family, XFGF-20, in Xenopus laevis. // Biochemical and Biophysical Research Communications. - 1999. - V. 261. - N 3. - P. 756765.

106. Korkushko, O.V., Khavinson, V.Kh., Shatilo, V.B., Antonyk-Sheglova I.A. Peptide geroprotector from the pituitary gland inhibits rapid aging of elderly people: results of 15-year follow-up// Bull. Exp. Biol. Med. - 2011. - № 151. - P. 366-369.

107. Kuznik B.I., Linkova N.S., Tarnovskaya S.I. Cytokinis and Regulatory Peptides: Age-Related Changes, Atherosclerosis, and Thrombotic Diseases. // Advances in Gerontology. - 2013. - Vol. 3. - N 4. - P. 243-254.

108. Kvetnoy I.M., Paltsev M.A., Polyakova V.O., Kvetnaia T.V., Linkova N.S., Paltseva E.M. Tau-Protein Expression in Human Buccal Epithelium: A Promising Non-Invasive Marker for Life-Time Diagnosis of Alzheimer's Disease // Journal of Advanced Biomarkers Research. - 2015. - N1. - P. 1-6.

109. Lagos-Quintana M., Rauhut R., Yalcin A. Identification of tissue-specific microRNAs from mouse. Curr. Biol. - 2002. - T. 12. - № 9. - P. 735-739.

110. Lamarche, J., et al. Molecular analysis of connexin 40 in the familial form of atrial fibrillation / Eur. Heart J. - 2001. - Vol.22. - P.1511-1512.

111. Lee W.H., Ko Y.H., Kim D.I., Lee B.B., Park J.E. Prevalence of foam cells and helper-T cells in atherosclerotic plaques of Korean patients with carotid atheroma // The Korean J. of Int. Med. - 2000. - Vol. 15. - № 2. - P.117-121.

112. Lejeune C., Laporte M., Musette S., Petein M., Heenen M. Interest of immunohistochemic markers (Ki67, HMB45, p53) in risk analysis of congenital naevi of little and middle size // Rev. Med. Brux. - 2009. - Vol. 30, N 5. - P. 47782.

113. Leuschner F., Rauch P.J., Ueno T. Rapid monocyte kinetics in acute myocardial infarction are sustained by extramedullary monocytopoiesis // J Exp Med. - 2012. - № 209. - P. 123-137.

114. Li H., Fredriksson L., Li X., Eriksson U. PDGF-D is a potent transforming and angiogenic growth factor. // Oncogene. - 2003. - № 22. - P. 1501-1510.

115. Li Y., Song Y.-H., Li F. MicroRNA-221 regulates high glucose induced endothelial dysfunction // Biochem Biophys Res Commun. - 2009. - Vol. 381. - № 1. - P. 81-83.

116. Lu Y., Thomson J.M., Yuen H., Wang F. Hogan Transgenic overexpression of the microRNA miR-17-92 cluster promotes proliferation and inhibits differentiation of lung epithelial progenitor cells // Dev Biol. - 2007. - Vol. 310. -№ 2. - P. 442-453.

117. Lukowicz T.V., Fischer M., Hense H.W., Döring A., Stritzke J. BNP as a marker of diastolic dysfunction in the general population: importance of left ventricular hypertrophy. // Eur J Heart Fail. - 2005. - № 4. - P. 525-531.

118. Ma L., Wang K., Shang J., Cao C., Zhen P., Liu X., Wang W., Zhang H., Du Y., Liu H. Anti-Peroxynitrite Treatment Ameliorated Vasorelaxation of Resistance Arteries in Aging Rats: Involvement with NO-sGC-cGKs Pathway. // PLoS One. - 2014. - V. 12. - N 9(8). - P. e104788.

119. Mathers P., Loncar D. Projections of global mortality and burden of disease from 2002 to 2030 // PLoS Med. - 2006. - T. 3. - №. 11. - P. 1655-1661.

120. Mattern H. Der alte Mensch in der Allgemeinpraxis. // Z. Allgemeinmed. -1977. - V. 53. - N 21. - S. 1206-1211.

121. Miyasaki H., Matsuoka H., Cooke J.P. Endogenous nitric oxide synthase inhibitor: a novel marker of atherosclerosis. // Circulation. - 1999. - Vol. 99. - P. 1141-1146.

122. Moore E.E., Bendele A.M., Thompson D.L., Littau A., Waggie K.S., Reardon B., Ellsworth J.L. Fibroblast growth factor-18 stimulates chondrogenesis

and cartilage repair in a rat model of injury-induced osteoarthritis. // Osteoarthritis and Cartilage. - 2005. - Vol. 13. - N 7. - P. 623-631.

123. Mor-Avi V., Lang R.M., Badano L.P., Belohlavek M., Cardim N.M. Current and evolving echocardiography techniques for the quantitative evaluation of cardiac mechanics: ASE/EAE consensus statement on methodology and indications endorsed by the Japanese Society of Echocardiography// Eur J Echocardiogr. - 2011. - № 12. - P. 167-120.

124. Ohanian J., Liao A., Forman S.P., Ohanian V. Age-related remodeling of small arteries is accompanied by increased sphingomyelinase activity and accumulation of long-chain ceramides. // Physiol. Rep. - 2014. - Vol. 28. - N 2(5). - P. e12015.

125. Olivieri F., Recchioni R., Marcheselli F. Cellular senescence in cardiovascular diseases: potential age-related mechanisms and implications for treatment // Curr. Pharm. Des. - 2013. - Vol. 19. - N. 9. - P. 1710-1719.

126. Orekhov A.N., Andreeva E.R., Bobryshev Y.V. Cellular mechanisms of human atherosclerosis: Role of cell-to-cell communications in subendothelial cell functions // Tissue Cell. - 2016. - V. 48. - N 1. - P. 25-34.

127. Paar M., Pavenstadt H., Kusche-Vihrog K., Druppel V., Oberleithner H., Kliche K. Endothelial sodium channels trigger endothelial salt sensitivity with aging. // Hypertension. - 2014 - Vol. 64. - N 2. - P. 391-396.

128. Park T.J., Boyd K., Curran T. Cardiovascular and craniofacial defects in Crk-null mice // Mol Cell Biol. - 2006. - № 26. - P. 6272-6282.

129. Patel V.B., Zhong J.C., Fan D., Basu R., Morton J.S., Parajuli N., McMurtry M.S., Davidge S.T., Kassiri Z., Oudit G.Y. Angiotensin-converting enzyme 2 is a critical determinant of angiotensin II-induced loss of vascular smooth muscle cells and adverse vascular remodeling. // Hypertension. - 2014. - Vol. 64. - N 1. - P. 157-164.

130. Pei D.-S., Qian G.-W., Tian H. Analysis of human Ki-67 gene promoter and identification of the Sp1 binding sites for Ki-67 transcription // Tumour Biol. -2012. - Vol. 33. - N. 1. - P. 257-266.

131. Pfenniger A., Chanson M., Kwak B.R. Connexins in atherosclerosis. // Biochim Biophys Acta. - 2013. - Vol. 1828 - N 1. - P. 157-166.

132. Pfenniger A., Chanson M., Kwak B.R. Connexins in atherosclerosis. // Biochim Biophys Acta. - 2013. - Vol. 1828 - N 1. - P. 157-166.

133. Procter N.E., Chong C.R., Sverdlov A.L., Chan W.P., Chirkov Y.Y., Horowitz J.D. Aging of Platelet Nitric Oxide Signaling: Pathogenesis, Clinical Implications, and Therapeutics. // Semin. Thromb. Hemost. - 2014 - Vol. 124. - P. 1345-1349.

134. Pearson T.A., Mensah G.A., Alexander R.W. et al. Markers of inflammation and cardiovascular disease: application to clinical and public health practice // Circulation. - 2003. - Vol. 107. - P. 499-511.

135. Rahman M.M., Laher I. Structural and functional alteration of blood vessels caused by cigarette smoking: an overview of molecular mechanisms. // Curr. Vasc. Pharmacol. - 2007. - № 5. - N 4. - P. 276-292.

136. Robbins C.S., Hilgendorf I., Weber G.F. Local proliferation dominates lesional macrophage accumulation in atherosclerosis// Nat Med. - 2013. - № 19. -P. 1166-1172.

137. Roldán V., Vílchez J.A., Manzano-Fernández S. Usefulness of N-Terminal Pro-B-Type Natriuretic Peptide Levels for Stroke Risk Prediction in Anticoagulated Patients With Atrial Fibrillation // Stroke. - 2014. - P. 2457-463.

138. Romero Q., Bendahl P.O., Ferno M., Grabau D., Borgquist S. A novel model for Ki67 assessment in breast cancer. // Diagn Pathol. - 2014. - Vol. 16. - N 9. - P. 118.

139. Russo L.C., Asega A.F., Castro L.M., Negraes P.D., Cruz L., Gozzo F.C., Ulrich H., Camargo A.C., Rioli V., Ferro E.S. Natural intracellular peptides can

modulate the interactions of mouse brain proteins and thimet oligopeptidase with 14-3-3s and calmodulin // Proteomics. - 2012. - Vol. 12. - N 17. - P. 2641-2655.

140. Sato H., Usuda N., Kuroda M., Hashimoto S., Maruta M., Maeda K. Significance of serum concentrations of E-selectin and CA19-9 in the prognosis of colorectal cancer. // Jpn. J. Clin. Oncol. - 2010. - Vol. 40. - N 11. - P. 1073-1080.

141. Satterthwaite A.B., Burn T.C., Le Beau M.M., Tenen D.G. Structure of the gene encoding CD34, a human hematopoietic stem cell antigen. // Genomics. -1992. - Vol. 12. - N 4. - P. 788-794.

142. Satterthwaite et al., Blaber M., DiSalvo J., Thomas K.A. X-ray crystal structure of human acidic fibroblast growth factor. // Biochemistry. - 1996. - Vol. 35. - N 7. - P. 2086-2094.

143. Scott-Burden T., Vanhoutte P.M. The endothelium as a regulator of vascular smooth muscle proliferation. // Circulation. -1993. - Vol. 87. - P. V51-55.

144. Shahbazi J., Lock R., Liu T. Print 2013. Tumor Protein 53-Induced Nuclear Protein 1 Enhances p53 Function and Represses Tumorigenesis // Front Genet. -2013. -Vol. 4. - P. 80.

145. Shao X.H., Yang Y.M., Zhu J., Zhang H., Liu Y., Gao X., Yu L.T., Liu L.S., Zhao L., Yu P.F., Zhang H., He Q., Gu X.D. Comparison of the clinical features and outcomes in two age-groups of elderly patients with atrial fibrillation. // Clin. Interv. Aging. - 2014. - Vol. 12. - N 9. - P. 1335-1342.

146. Sikora E., Bielak-Zmijewska A., Mosieniak G. Cellular Senescence in Ageing, Age-Related Disease and Longevity // Curr. Vasc. Pharmacol. - 2013. -P. 33-40.

147. Sohn E.H., Flamme-Wiese M.J., Whitmore S.S., Wang K., Tucker B.A., Mullins R.F. Loss of CD34 expression in aging human choriocapillaris endothelial cells. // PLoS One. - 2014. - Vol. 21. - N 9(1). - P. e86538.

148. Somers W.S., Tang J., Shaw G.D., Camphausen R.T. Insights into the molecular basis of leukocyte tethering and rolling revealed by structures of P- and

E-selectin bound to SLe(X) and PSGL-1 // Cell. - 2000. - Vol. 103. - N 3. - P. 467-479.

149. Taddei S., Virdis A., Ghiadoni L. Age-related reduction of NO availability and oxidative stress in humans // Hypertension. - 2001. - Vol. 38. - P. 274-279.

150. Taddei S., Virdis A., Mattei P. Hypertension causes premature aging of endothelial function in humans // Hypertension. - 1997. - Vol. 29. - P. 736-743.

151. Taguchi A., Yanagisawa A., Tanaka M. Identification of hypoxia-inducible factor-1a as a novel target for miR-17-92 MicroRNA Cluster // Cancer Res. - 2008. - №. 68. - P. - 5540-5545.

152. Trogan E., Feig J.E., Dogan S., Rothblat G.H., Angeli V., Tacke F., Randolph G.J., Fisher E.A. Gene expression changes in foam cells and the role of chemokine receptor ccr7 during atherosclerosis regression in apoe-deficient mice // Proc Natl Acad Sci. - 2006. - № 103. - P. 3781-3786.

153. Tumer N., Toklu H.Z., Muller-Delp J.M., Oktay S., Ghosh P., Strang K., Delp M.D., Scarpace P.J. The effects of aging on the functional and structural properties of the rat basilar artery. // Physiol. Rep. - 2014. - Vol. 6. - N 2(6). - P. e12031.

154. Van Empel V.P., Kaye D.M., Borlaug B.A. Effects of healthy aging on the cardiopulmonary hemodynamic response to exercise. // Am. J. Cardiol. - 2014. -Vol. 1. - N 114(1). - P. 131-135.

155. Vanhoutte P.M. Endothelial dysfunction: the first step toward coronary arteriosclerosis // Circ J. - 2009. - Vol. 73, № 4. - P. 595-601.

156. Vanhoutte P.M., Endothelium dysfunction and atherosclerosis // Eur Heart J. - 1997. - Vol. 18. - P. E19-29.

157. Vanhoutte P.M., Endothelium-derived free radicals: for worse and for better. // J Clin Invest. - 2001. - Vol. 107. - P. 23-25.

158. Vanhoutte P.M., Other endothelium-derived vasoactive factors. // Circulation. - 1993. - Vol. 87. - P. 9-17.

159. Vanhoutte P.M. Say NO to ET. // J Auton Nerv Syst. - 2000. - Vol. 81. - N 3. - 271-277.

160. Wang M., Jiang L., Monticone R.E., Lakatta E.G. Proinflammation: the key to arterial aging. // Trends Endocrinol. Metab. - 2014. - Vol. 25. N 2. - P. 72-79.

161. Wang M., Monticone R.E., Lakatta E.G. Proinflammation of Aging Central Arteries: A Mini-Review. // Gerontology. - 2014a. - P. 519-529.

162. Wang P.H., Lee D.Y., Deng Z. et al. MicroRNA miR-328 regulates zonation morphogenesis by targeting CD44 expression. // PLoS One June. - 2008. - Vol. 3. -№ 6. - P. 1-14.

163. Wang S., Aurora A.B., Johnson B.A. An endothelial-specific microRNA governs vascular integrity and angiogenesis // Dev Cell. - 2008. - T. 15. - № 2. - P. 261-271.

164. Wang Z., Luo X., Lu Y., Yang B. MiRNAs at the heart of the matter // J. Mol. Med. - 2008. - N 86. - P. 771-783.

165. Weber P., Meiler S., Döring Y. et al. CCL17-expressing dendritic cells drive atherosclerosis by restraining regulatory T cell homeostasis in mice // J Clin Invest. - 2011. - T. 121. - № 7. - P. 2898-2910.

166. Wu F., Yang Z., Li G. Role of specific microRNAs for endothelial function and angiogenesis // Biochem Biophys Res Commun. - 2009. - T. 386. - № 4. - P. 1-11.

167. Xiao X., Mruk D.D., Cheng C.Y. Intercellular adhesion molecules (ICAMs) and spermatogenesis. // Human Reproduction Update. - 2013. - Vol. 19. - N 2. -P. 167-186.

168. Yano Y., Ning H., Allen N., Reis J.P., Launer L.J., Liu K., Yaffe K., Greenland P., Lloyd-Jones D.M. Long-Term Blood Pressure Variability Throughout Young Adulthood and Cognitive Function in Midlife: The Coronary Artery Risk Development in Young Adults (CARDIA) Study. // Hypertension. -2014. - P. 983-989.

169. Yu S., Li G. MicroRNA expression and function in cardiac ischemic injury // J. CardiovasP. Transl. Res. - 2010. - T. 3. - № 3. - P. 241-245.

170. Zaman A.G., Helft G., Worthley S.G., Badimon J.J. The role of plaque rupture and thrombosis in coronary artery disease // Atherosclerosis. - 2000. - Vol. 149. - № 2. - P. 251-266.