Оценка экологической опасности лигнинсодержащих соединений тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.16, кандидат биологических наук Яковлева, Юлия Николаевна

• Яковлева, Юлия Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Яковлева, Юлия Николаевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Оценка влияния антропогенных факторов на биологические системы.

1.2 Сточные воды целлюлозно-бумажной промышленности, их состав и влияние на гидробионтов.

1.3 Лигнин как природный биополимер и отход ряда производств

1.3.1 Структура лигнина.

1.3.2 Деградация лигнина.

1.4 Биологические эффекты лигиинсодержащих соединений.

1.5 Проблемы утилизации лигнина и возможности его применения

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объекты исследования.

2.2 Методики экспериментальной работы на моллюсках.

2.3 Методика экспериментальной работы на растениях.

2.4 Анафазный метод учета хромосомных аберраций.

2.5 Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ЛИГНИННЫХ ВЕЩЕСТВ БИОЛОГИЧЕСКИ ОЧИЩЕННЫХ СТОЧНЫХ ВОД ЦБП, НА ОРГАНИЗМЫ ЖИВОТНЫХ И РАСТЕНИЙ

ГЛАВА 4. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ГИДРОЛИЗНОГО ЛИГНИНА И ПРОДУКТОВ ЕГО МОДИФИКАЦИИ НА ОРГАНИЗМЫ ЖИВОТНЫХ И РАСТЕНИЯ

4.1. Сравнительная оценка влияния гидролизного лигнина и продуктов его модификации электрическим газовым разрядом на моллюсков и кукурузу.

4.2 Сравнительная оценка влияния гидролизного лигнина и продуктов его модификации электрогидравлическим ударом на кукурузу

4.3 Эффективность контактной обработки образцов гидролизного лигнина последрожжевой бражкой.

4.4 Испытания образцов гидролизного лигнина в нолевых экспериментах.

4.4.1 Оценка влияния гидролизного лигнина и продуктов его модификации на рост и урожайность пшеницы

4.4.2 Оценка эффективности предпосевной обработки семян гороха исходным гидролизным лигнином и модифицированным электрическим газовым разрядом.

ГЛАВА 5. ОЦЕНКА БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ГУМИНОВЫХ КИСЛОТ БУРЫХ УГЛЕЙ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка экологической опасности лигнинсодержащих соединений»

Актуальность темы. Резкое ухудшение экологической обстановки в основном связано с поступлением в окружающую среду большого количества отходов различных производств. Одним из приоритетных компонентов отходов целлюлозно-бумажного и гидролизного производства являются лигнинсодержащие соединения, которые, с одной стороны, сбрасываются со сточными водами в водоемы, а, с другой стороны, скапливаются в многотоннажных количествах в местах сброса или складирования. Наряду с этим, лигнинсодержащие соединения могут служить источником образования токсичных и мутагенных веществ. В связи с этим возникает и требует решения проблема утилизации лигнинсодержащих отходов. Одним из путей ее решения является использование лигнинсодержащих соединений в сельском хозяйстве в качестве органических удобрений. Однако по ряду причин применение их в натуральном виде нежелательно. Одной из таких причин является мутагенная активность, которая была установлена практически для всех видов технических лигнинов (Островская и Побережный, 1983; Островская и др., 1994; Новикова и др., 1994, 1996).

В экспериментах на байкальских эндемичных моллюсках было показано, что воздействие на лигносульфонат нейтронного облучения, приводящее в результате его деструкции к понижению молекулярной массы, сопровождалось снижением цитогенетической активности. На основании этого предполагают, что цитогенетическая активность лигнинсодержащих соединений может быть связана с величиной их молекулярной массы (Новикова и др. 1996). В связи с этим, представляет интерес проверка данного предположения, а также поиск других путей воздействия на J1CC с целыо снижения их генетической опасности и получения продуктов, обладающих положительной биологической активностью. Цель - оценка экологической опасности лигнинсодержащих соединений. Основные задпчи:

- определить степень экологической опасности лигнинных веществ сточных вод целлюлозно-бумажных предприятий, сбрасываемых в водоемы.

- провести сравнительную оценку влияния гидролизного лигнина и продуктов его модификации, на организмы животных и растений.

- провести агрохимические испытания образцов гидролизного лигнина - исходного и модифицированных - с целью выявления долговременности эффектов их воздействия на растения.

- оценить качество семян растении, обработанных лигнинсодержащими соединениями по показателям прорастания семян и роста главного корешка.

- оценить биологическую активность гуминовых кислот на семенах кукурузы.

Научная новизна. Впервые установлена мутагенная активность растворимых в воде лигнинных веществ, выделенных из биологически • очищенных сточных вод ЦБП, в составе которых они непосредственно сбрасываются в водоёмы на примере моллюсков и кукурузы.

Установлено, что обработка ГЛ электрическим газовым разрядом, электрогидравлическим ударом в водной среде и последрожжевой бражкой приводит к снижению его токсичности и мутагенности, а также появлению стимулирующей активности на прорастание семян и рост ^ сельскохозяйственных растений.

Установлено, что биологическая активность лигнинсодержащих соединений коррелирует с их молекулярной массой и общим содержанием кислых групп. Снижение молекулярной массы лигнинсодержащих соединений и увеличение в их составе общего содержания кислых групп приводит к снижению мутагенных эффектов и одновременному появлению рост-стимулирующей активности.

Оценка влияния гуминовых кислот бурых углей различного происхождения но цитогенетическому показателю на кукурузе показала, что ГК бурых углей не обладают мутагенной активностью.

Практическая значимость работы. Электрический газовый разряд при напряжении 30 и 40 кВ и электрогидравлический удар в водной среде снижают генетическую опасность лигшшсодержащих соединений и способствуют появлению биостимулнрующей активности. В связи с чем, их можно рекомендовать как эффективные способы воздействия на JICC.

Продукты модификации гидролизного лигнина, обладающие положительной биологической активностью, при условии их генетической безопасности могут быть использованы в качестве биостимуляторов в сельском хозяйстве. Рекомендуемые к применению концентрации образцов ГЛ - 4,0-16,1 мкг/мл.

Защищаемые положении.

1. Растворимые и нерастворимые в воде лигнинные вещества биологически очищенных сточных вод ЦБП обладают токсичностью и мутагенной активностью, что указывает на их опасность для водных экосистем.

2. Гидролизный лигнин обладает токсико-генетической активностью. Воздействие на гидролизный лигнин электрического газового разряда и электрогидравлического удара в водной среде снижает его мутагенную активность и приводит к появлению рост-стимулирующей активности.

3. Появление рост-стимулирующих эффектов и снижение цитогенетической активности гидролизного лигнина происходит с понижением его молекулярной массы, а также с увеличением в его составе общего содержания карбоксильных и фенольных гидроксильных групп. Апробацпя. Основное положения работы изложены в 11 публикациях. Результаты работы были представлены и обсуждены на: региональной конференции: "Биология-наука XXI века", Пущино, 2002; на Всероссийской конференции: "Экология Байкала и Прибайкалья, Иркутск, 2001; международном форуме: "Безопасное развитие регионов", Иркутск, 1997; международном симпозиуме: "Россия - Германия: История, Культура, Наука", Иркутск, 1999; международных конференциях: "Студент и научнотехнический прогресс", Новосибирск, 2002; "Проблемы экологии. Чтения памяти профессора М.М. Кожова, Иркутск 1995, 1999. Структура диссертации. Диссертация изложена на 125" страницах машинописного текста. Состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, обсуждения и выводов. Результаты работы проиллюстрированы 21 таблицами и 8 рисунками. Список цитируемой литературы включает 277 источников, из них 58 работы зарубежных авторов.

Заключение диссертации по теме «Экология», Яковлева, Юлия Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что как растворимые, так и нерастворимые в воде лигнинные вещества, выделенные из биологически очищенных сточных вод ЦБП (Байкальского целлюлозно-бумажного комбината и Братского целлюлозного завода №1 на БЛПК) обладают токсичностью и мутагеннной активностью, что может указывать на их опасность для водных экосистем.

2. Гидролизный лигнин Зиминского гидролизного завода токсичен для моллюсков и обладает мутагенной активностью при действии на моллюсков и кукурузу. Воздействие на ГЛ электрического газового разряда, электрогидравлического удара в водной среде, а также контактная обработка последрожжевой бражкой снижают его токсичность и устраняют генетическую активность.

3. Продукты модификации ГЛ электрическим газовым разрядом при напряжении 30 и 40 кВ и электрогидравлическим ударом в водной среде при концентрациях 4,0-16,1 мкг/мл обладают рост-стимулирующей активностью на растениях и могут быть рекомендованы к использованию в качестве экологически безопасных органических удобрений.

4. Гидролизный лигнин, модифицированный электрическим газовым разрядом при напряженни 40 кВ, при внесении под корни растений оказывает биостимулирующее действие на рост и урожайность пшеницы, а также способствует росту и развитию растений гороха в результате предпосевной обработки семян. Положительный эффект модифицированного ГЛ, а также отрицательный эффект (генотоксичность) исходного гидролизного лигнина сохраняются н на растениях в следующем поколении.

5. Биологическая активность лигнинсодержащих соединений зависит от таких физикохимических показателей как молекулярная масса и общее содержание кислых групп (фенольных гидроксильных и карбоксильных), а именно, уменьшение молекулярной массы веществ и увеличение содержания кислых групп приводит к снижению цитогенетических эффектов и появлению биостимулирующей активности.

6. Гуминовые кислоты, выделенные из бурых углей Хандинского, Щёткинского и монгольских (Адуунчулуунского, Тальбулагского, Увдугхудагского) месторождений не всегда оказывают биостимулирующее действие, а в некоторых случая ведут себя как ингибиторы роста растений. Исследованные образцы ГК не обладают мутагенной активностью.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Одним из приоритетных компонентов отходов целлюлозно-бумажных и гидролизных предприятий являются лигнинсодержащие соединения, которые в больших объемах поступают как в водоемы, так и складируются в многотоннажных количествах в местах их сброса, т.е. являются мощным загрязнителем водной и наземной среды. Сброс лигнинных веществ в водоёмы до последнего времени строго не нормировался, однако нормы сброса различных типов технических лигнинов всё же существуют и составляют от 0,1 до 10 мг/л (Новикова, 1986; Рудых, 1990; Калинкина, 1993).

Интерес к исследованию лигнинных веществ с точки зрения их экологической опасности связан как с выявлением различных патологических изменений у гидробионтов (Новикова и др., 1994 (а)), так и с установлением факта повышенной мутабильпости байкальских эндемичных моллюсков, обитающих в районе сброса промышленных стоков БЦБК и хронически подверженных их воздействию (Островская и др., 1983). Поэтому для объективной и всесторонней оценки возможной опасности для живых организмов поллютантов, поступающих в водоемы в составе сточных вод ЦБП, помимо выявления токсических эффектов, необходимо исследование также их мутагенности. На экологическую опасность лигнинных веществ для водоемов, в том числе для озера Байкал, указывают результаты настоящего исследования. Согласно полученным нами данным ЛВ, выделенные из биологически очищенных сточных вод ЦБП (как Байкальского целлюлозно-бумажного комбината, так и целлюлозного завода № 1 Братского лесопромышленного комплекса), оказывают токсикогенетические эффекты на байкальских эндемичных моллюсков и кукурузу. Токсичность нерастворимых в воде ЛВ (Mw до 30000) проявлялась на обоих объектах, тогда как образцы растворимых в воде ЛВ (Mw до 7500) в некоторых случаях были только фитотоксичны. Более высокая токсичность нерастворимых в воде ЛВ на других тест-объектах, таких как дафнии, водные растения, светящиеся бактерии была показана и ранее (Новикова, 1986, Новикова и др., 1994). Цитогенетическая активность образцов ЛВ обеих групп практически сходным образом проявлялась на половых клетках моллюсков и на меристематических клетках кукурузы: в том и другом случае после воздействия Л В хромосомные аберрации встречались в 2-5 раза чаще, чем в контроле. Необходимо отметить, что как токсичность, так и мутагенная активность ЛВ изучена нами в условиях кратковременного эксперимента при относительно малых концентрациях веществ (от 4.0 до 161 мкг/мл). В природных же условиях гидробионты подвергаются хроническому воздействию ЛВ, которые поступают в водоемы после биологической очистки в количестве в среднем до 398 мг/л (Номикос и др., 1979; Бейм, 1983, 1987). Несмотря на многочисленные мероприятия по снижению содержания поллютантов в сточных водах, сброс ЛВ БЦБК в оз. Байкал за период времени с 1999 по 2000 г. увеличился на 120 т/год (Государственный доклад ., 2001). В водоеме ЛВ могут не только разрушаться с образованием новых продуктов, но и переходить из твердого состояния в раствор и наоборот. Они могут накапливаться в количествах, превышающих предельно допустимые концентрации, а также, благодаря существующим в водоемах течениям, разноситься на большие расстояния от места сброса сточных вод. В результате, даже при относительно невысокой токсикогенетической активности роль мутагенов и генетический ущерб от их воздействия могут значительно усугубляться за счет накопления в среде. Такая ситуация не может быть приемлемой для уникальных экосистем, подобных экосистеме оз. Байкал.

Интересным фактом, выявленным в настоящем исследовании, является то, что у моллюсков и кукурузы имеет место сходная реакция на воздействие ЛВ по цитогенетическим показателям. Это указывает на возможность оценки мутагенности веществ, загрязняющих водоёмы, при использовании более доступного растительного объекта.

Токсико-генетические эффекты были установлены ранее и для других видов технических лигнинов, а именно, лигносульфоната (Коршунова 1990; Новикова и др., 1994 (а); Новикова и др., 1996), сульфатного лигнина, экстрагированного из сточных вод различных целлюлозно-бумажных предприятий (Островская и Побережный, 1983; Островская и др., 1994), а также гидролизного лигнина (Новикова и др., 1994 (а)). Доказательством того, что генетически активными являются молекулы самого лигнина, а не какие-либо иные компоненты сточных вод, которые могут связываться с лигнином в связи с его высокими сорбционными свойствами, является установление цитогенетической активности диоксан-лигнина, который был выделен из древесины и близок по своим свойствам к нативному лигнину (Новикова и др., 1994 (а)).

Поскольку лигнинсодержащие отходы применяются в сельском хозяйстве в качестве органических удабрений, необходимо предварительно исследовать их биологические эффекты с целыо исключения экологической опасности этих соединений. Наиболее широко в этом направлении используется гидролизный лигнин, поэтому крайне актуальной, на наш взгляд, представляется оценка биологической активности этой формы технического лигнина. Вот почему значительная часть настоящего исследования выполнена именно при использовании гидролизного лигнина (ГЛ). Цитогенетическая активность ГЛ, выявленная ранее в экспериментах на моллюсках (Новикова и др., 1994 (а)), подтвердилась и в наших экспериментах, которые были проведены не только на моллюсках, но и на кукурузе. Исследование двух образцов гидролизного лигнина, которые были отобраны на предприятии в разное время и различались по молекулярной массе (различие в молекулярных массах ГЛ, которая в данном случае составляла 9680 и 11600, связана с его полндисперсностыо), вновь показало, что гидролизный лигнин способен индуцировать нарушения хромосом с частотой, в 2,5-3,6 раза превышающей контрольный уровень. Кроме того, ГЛ в концентрации 100 и 300 мкг/мл был токсичен для моллюсков, на что указывало снижение их двигательной активности. По отношению к кукурузе собственно гидролизный лигнин токсичностью, по-видимому, не обладал. Ингибирующие эффекты, которые отмечались при концентрациях 32,3 и 161 мкг/мл, судя по всему, связаны с токсичностью растворителя диметилсульфоксида (ДМСО), который использовался для приготовления образцов гидролизного лигнина.

Наличие мутагенной активности гидролизного лигнина ставит под сомнение возможность его применения в качестве экологически безопасного органичеекгого удобрения. Однако, учитывая ряд его ценных качеств, основным из которых является высокая адсорбционная способность, способствующая удержанию питательных веществ в почве, применение его в сельском хозяйстве всё же целесообразно, ио при условии устранения генетической активности этого соединения посредством какого-либо модифицирующего воздействия. В качестве одного из путей такой модификации гидролизного лигнина ранее было исследовано воздействие электрического газового разряда и установлено, что оно приводит к деструкции молекул гидролизного лигнина, а именно, к снижению его молекулярной массы (Новикова и др., 1996). В этой работе было также спрогнозировано возможное снижение то кси ко генетической активности гидролизного лигнина в результате его обработки электрическим газовым разрядом при различном напряжении. Экспериментальная проверка высказанного предположения было проведена в настоящем исследовании. Помимо электрического газового разряда нами были исследованы также и другие способы модификации гидролизного лигнина, такие как электрогидравлический удар в водной и щелочной средах и контактная обработка последрожжевой бражкой. Наряду с цитогенетической активностью оценивали влияние этих обработок на эффективность ГЛ по ряду биологических показателей, которые могут быть существенными в плане его практического применения в сельском хозяйстве.

Как и было предсказано, воздействие на гидролизный лигнин электрического газового разряда при напряжении на электродах 20-48 кВ снижало уровень наблюдаемых хромосомных мутаций как в половых клетках моллюсков, так и в клетках корневой меристемы кукурузы до спонтанного уровня. Ещё одним положительным и важным в практическом отношении результатом такой модификации, помимо устранения мутагенного эффекта, явилось то, что у образцов ГЛ, полученных при воздействии электрического газового разряда (при напряжении 30 и 40 кВ), появлялась рост-стимулирующая активность в виде усиления интенсивности роста корешков у прорастающих семян. Аналогичные результаты были получены при исследовании гидролизного лигнина, модифицированного электрогидравлическим ударом в водной среде, тогда как такая обработка в щелочной среде положительного влияния не оказывала, а именно, не устранялся мутагенный эффект ГЛ и появлялся эффект ингибирования, а не стимуляции роста. Необходимо отметить, что существенные биостимулирующие эффекты отмечались при обоих вариантах модификации гидролизного лигнина в основном при концентрациях веществ 4,0-16,1 мкг/мл при которых, исключалось негативное влияние растворителя ДМСО. Исходя из этого, продукты ГЛ, полученные в результате его модификации электрическим газовым разрядом (40 кВ) и электрогидравлическим ударом в водной среде при данных концентрациях можно рекомендовать к использованию в сельском хозяйстве в качестве экологически безопасных биостимуляторов. Положительных результатов в отношении биостимуляции мы ожидали и от контактной обработки гидролизного лигнина последрожжевой бражкой, поскольку предполагалась возможность улучшения его качества за счёт сорбции ценных компонентов ПДБ (белков, углеводов, низкомолекулярных компонентов). Однако ожидаемые в отношении биостимуляции эффекты выявлены не были, хотя генетическая активность гидролизного лигнина после контакта с последрожжевой бражкой исчезала.

В условиях лабораторного эксперимента нами фиксировались лишь кратковременные эффекты от воздействия образцов гидролизного лигнина. С целью исследования более отдалённых и стойких эффектов нами были проведены нолевые испытания, в которых опробированы два пути воздействия ГЛ на растения: внесение образцов ГЛ под корни растений (пшеница) и предпосевная обработка семян (горох). Полученные результаты показали, что исходный гидролизный лигнин ни при одной из указанных обработок и ни по одному из исследованных биологических показателей не проявил себя как биостимулятор, тогда как ГЛ, модифицированный электрическим газовым разрядом при напряжении 40 кВ, в обоих случаях оказывал биостимулирующее действие по таким показателям как средняя длина колоса, масса зерна и соломы пшеницы, а также доля выросших растений гороха от общего числа посеянных семян и мощность их развития (доля многостебельных растений). Положительная биологическая активность при проведении агротехнических испытаний была установлена и для образца гидролизного лигнина после контактной обработки последрожжевой бражкой с нейтрализацией аммиаком, который не исследовался нами в лабораторных условиях. Однако на возможность использования такого образца ГЛ в качестве органического удобрения указывалось и ранее (Гельфанд и др., 1979).

Вопрос о том, насколько стабильны наблюдаемые положительные отдалённые эффекты от воздействия модифицированных образцов лигнина, и могут ли они закрепляться у растений в последующих поколениях, решался нами в исследовании качества семян первого поколения (F1), полученных от растений, выросших под влиянием образцов гидролизного лигнина. Результаты исследования показали, что при условии внесения ГЛ, модифицированного электрическим газовым разрядом при напряжении 40 кВ, под корни растений биостимулирующие эффекты в F1 не проявлялись, тогда как при условии предпосевной обработки рост-стимулирующие эффекты данного образца ГЛ на семенах F1 сохранялись. Интересно, что в случае предобработки исходным гидролизным лигнином в проростках, полученных от семян F1 отмечается повышенный относительно контроля уровень хромосомных аберраций, как и в проростках, полученных от семян, непосредственно обработанных ГЛ. Выяснение природы этого явления представляет самостоятельный интерес, однако в задачи настоящего исследования это не входило.

Возможные механизмы генотоксичности лигнинсодержащих соединений практически не изучены. На основании полученных ранее данных о снижении цитогенетической активности лигносульфоната по мере уменьшении его молекулярной массы (результат воздействия нейтронного облучения и фракционирования) было выдвинуто предположение, что степень генетической активности лигнинсодержащих веществ может зависеть от величины их молекулярной массы (Новикова и др., 1994 (а), 1996). Подобная зависимость от молекулярной массы наблюдалась и в нашей работе в случае лигнинных веществ, выделенных из биологически очищенных сточных вод ЦБП: значение коэффициента корреляции между цитогенетической активностью н молекулярной массой положительное и высокое, а именно, в случае моллюсков г=0,89 (Р<0,95), а в случае кукурузы г= 0,76 и 0,86 (Р<0,95) при концентрациях 32,3 и 161 мкт/мл, соответственно.

В случае гидролизного лигнина влияние молекулярной массы на токсичность и мутагенность также имело место, а именно, ее снижение от 11600 уже до 9200 (результат воздействия электрического газового разряда при напряжении 20 кВ) практически снимало генотоксичность, так как достигался контрольный уровень аберраций хромосом, и дальнейшие ее снижение максимально до 3400 (воздействие электрического газового разряда при напряжении 30-48 кВ) уже практически ничего не меняло в плане цитогенетических эффектов ГЛ. Подобный эффект зависимости от молекулярной массы отмечался и в результате обработки гидролизного лигнина электрогидравлическим ударом в водной среде и контактной обработки последрожжевой бражкой. Однако, в случае обработки ГЛ электрогидравлическим ударом в щелочной среде, хотя молекулярная масса ГЛ снижалась (ог 9680 до 6460), его генотоксичность не уменьшалась. Этот результат указывает на то, что молекулярная масса лигнинсодержащих соединений может быть не единственным фактором, влияющим на их токсикогенетическую активность. Так, нами было отмечено, что в случае обработки ГЛ электрогидравлическим ударом в щелочной среде, наряду со снижением молекулярной массы, происходило уменьшение (с 2,0 до 1,41%) общего содержания в его составе кислых групп (фенольных гидроксильных и карбоксильных), тогда как у продуктов, полученных путём воздействия на ГЛ электрического газового разряда и электрогидравлического удара в водной среде оно существенно увеличивалось (с 3,1 до 4,24-8,05 и с 2,0 до 9,72%, соответственно). Таким образом, понижение токсикогенетической активности ГЛ коррелирует как с уменьшением молекулярной массы (положительная достоверная коррреляция), так и с увеличением суммарного содержания в составе ГЛ карбоксильных и фенольных гидроксильных групп (имеет место отрицательная достоверная корреляция: г=-0,66, -0,68 и -0,77 при концентрациях ГЛ 4,0; 16,1 и 32,3 мкг/мл, соответственно). Нами установлено также, что увеличение общего содержания кислых групп положительно сказывается и на эффектах биостимуляции, которые наблюдались в случае образцов ГЛ, полученных путём модификации электрическим газовым разрядом и электрогидравлическим ударом в водной среде, тогда как снижение их содержания, напротив, приводило к появлению эффектов ингибирования, что было показано в случае ГЛ, модифицированного электрогидравлическим ударом в щелочной среде. Сопоставление данных по содержанию в составе образцов ГЛ кислых групп и их положительной биологической активностью показало наличие между ними достоверной положительной корреляции (г=0,86 и г=0,95 при концентрациях образцов 4,0 и 16,1 мкг/мл, соответственно).

Таким образом, результаты наших исследований показали, что токсикогенетической активностью, в основном, обладают высокомолекулярные образцы лигнинсодержащих соединений (в нашем случае с молекулярной массой от 9680 до 27000). Каким образом вещества с такой высокой молекулярной массой могут проникать в ядра клеток растений и животных и воздействовать иа генетический материл? Установлено, что на степень проникновения веществ в растения могут влиять как величина молекулярной массы, так и биологические особенности растений. Так, в работе А. Д. Фокина (Фокин и др., 1977) было показано, что некоторые физиологически активные вещества с молекулярными массами от 500 до 12000 способны проникать в ядра клеток гипокотилей огурцов. Однако нельзя утверждать, что высокомолекулярные вещества поступают в клетки в виде неизмененных молекул. Высказано мнение (Новикова и др., 1994), что генотоксичность лигнинных веществ может быть связана с продуктами их биодеградации, например, с кислотами типа ванилиновой или феруловой, фенолами, метоксифенолами, хинонами. Возможно биологические эффекты лигнинсодержащих соединений как у моллюсков, так и у растений, связаны с существованием у них ферментных лигнолитических систем, а именно, ферментов фенолоксидазы (Стрельский, 1986) и пероксидазы (Crawford, 1981). В случае моллюсков, ферменты, принимающие участие в деструкции лигнина, могут быть либо собственными моллюсков, либо их продуцентами могут быть, населяющие их симбиотические спирохеты рода Cristispira. Крупные молекулы лигнинных веществ, еще не подвергшиеся биодеградации, могут проникать в клетки животных посредством эндоцитоза, который характерен для простейших и клеток различных тканей животных, в том числе и моллюсков (Саляев и Романенко, 1979).

Известно, что лигнинсодержащие соединения являются одиним из источников образования гуминовых веществ, широко используемых в сельском хозяйстве в качестве биостимуляторов. Фактически гуминовые вещества - это будущее состояние лигнинных веществ. Поэтому к настоящему исследованию были привлечены также гуминовые кислоты, близкие но строению к лигнинсодсржащим веществам. Проведённые нами лабораторные исследования образцов гуминовых кислот бурых углей из Хандинского, Щёткинского и трёх монгольских (Адуунчулуунского, Тальбулагского, Увдугхудагского) месторождений при концентрациях 4,0, 16,1, 32,3 и 161 мкг/мл, показали, что ГК углей далеко не всегда могут выступать в качестве биостимуляторов, а некоторые из них могут оказывать эффект ингибирования даже в тех концентрациях, при которых установлена биостимулирующая активность различных ГК. Различия в действии на растения разных образцов гуминовых кислот связано с их физико-химическими особенностями, что было показано нами на примере Хандинских образцов ГК. Улучшение качества гуминовых кислот данного месторождения отмечалось после предварительной механообработки и деминерализации угля, которые приводили к изменению его физико-химических показателей. Как и в случае лигнинсодержащих соединений, просматривалась связь биологической активности гуминовых кислот с молекулярной массой и содержанием кислых групп. Ни в одном случае не была установлена мутагенность исследованных образцов гуминовых кислот по критерию аберраций хромосом. В литературе имеются сведения, которые указывают не только на генетическую безопасность ГК, но также и на их антимутагенные свойства. Так, физиологически активные гуминовые вещества способствуют снижению частоты аберраций хромосом, индуцированных радиацией (Горовая и Прохоров, 1977) или гексахлораном (Филиппова и др., 1977). Однако результаты проведенных нами экспериментов указывают на то, что практическому применению гуминовых кислот или их солей (гуматов) конкретного происхождения должно обязательно предшествовать исследование их биологической активности.

Таким образом, можно заключить, что оценка биологических эффектов веществ, используемых в сельском хозяйстве, таких как лигнинсодержащие соединения и гуминовые кислоты, с целыо обеспечения их экологической безопасности является важным и необходимым этапом в их исследовании, дающем представление о их возможных достоинствах и недостатках. Получение информации о механизмах действия таких веществ, причинах негативных и позитивных сторон их влияния на клетки и организмы, связанных с их физико-химическими особенностями, позволит путём определённых модификаций добиться устранения нежелательных эффектов, а также получения или усиления положительных.

97

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Яковлева, Юлия Николаевна, 2005 год

1. Аксенов С.М., Гусев Н.А. Влияние лигнина на биологическую активность и продуктивность рейграса. Использ. лигнина и его произв. в сельском хоз. Рига, 1978. С.56-60.

2. Александрова А.И., Кулиш Т.П., Трегубова Г.М. Трансформация органических веществ сточных вод целлюлозно-бумажного производства в воде Ладожского озера // Экспериментальная водная токсикология. Рига: Зинатне. 1984. № 9. С. 184-195.

3. Александрова Г.П., Медведева С.А., Бабкина В.А., Соловьев В.А., Малышева О.Н. Исследование некоторых факторов, влияющих на ферментативную активность гриба Phanerochaete sunguinea // Химия древесины. 1993. № 4 С.55-60.

4. Алиев С.А. Парамагнитные свойства и физиологическая активность гумусовых кислот // Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск, 1983. Т8. С.78-80.

5. Антропова О.Н., Билай В.И., Войцеховский Р. В. Исследование разложения лигнина грибами // Тез. докл. 5-й Всесоюзной конфер. по химии лигнина. 1971. С.409-414.

6. А.с. 423841 СССР, кл. С 12Н1/02 Способ очистки гидролизных сред / Гельфанд Е.Д. / Опубл. в Б.Н. 1974, №14.

7. А.с. 1728211 СССР, кл.Со5 F 11/00. Способ получения оргаиоминерального удобрения /Лодыгин В.А., Сюткина В.Г., Попов В.М. / Опубл. В Б.Н. 1992., № 15.

8. Ауэрбах Ш. Проблемы мутагенеза. М.: Мир. 1978. 462 с.

9. Афанасьева М.М., Кадыров P.M. Подбор целлюлозо- и лигнинразрушающихгрибов для применения их в системе искусственного замкнутогоэкологического цикла // Микология и фитопатология. 1980. Т.14. №5. С.410416.

10. Бейм A.M. Проблемы идентификации компонентного состава очищенных сточных вод Байкальского ЦБК // Региональный мониторинг состояния озера Байкал. Л.: Гидрометеоиздат. 1987. С. 140-152.

11. Бейм А.М Экспериментальное обоснование допустимого содержания компонентов в очищенных сточных водах БЦБК // Охрана природы от загрязнений промышленными выбросами предприятий ЦБП: Сб. науч. тр. Л., 1983. С. 6-19.

12. Бейм A.M., Трошева Е.И. Шлам-лигнин агротехническое средство или экологический баласт? Бум. пром. 1991. №2. С.11-12. Богомолов С.П. Экология. Учебное пособие. М, 1997.

13. Бобырь Л.Ф. Изменение фотоассимиляции СО2 под влиянием гумусовых веществ // Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск, 1983. Т8. С. 97-102.

14. Булгаков И.Г. Индикация состояния природных экосистем и нормирование факторов окружающей среды: обзор существующих подходов // Успехи современной биологии. 2002. Т.122. №2. С.115-135.

15. Вафина Ф.Г. Эффективность применения физиологически активных веществ /Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск. 1983. Т9. С.39-42.

16. Вишнякова Л.В., Дуброва С.Н., Аляутдинова Р.Х. Применение гуминовых стимуляторов роста растений при выращивании овощей в защищенном грунте// Кокс и химия. 1985. №12. С.40-41.

17. Волчатова И.В., Медведева С.А., Бабкина В.А. Изучение состава внеклеточных ферментов грибов Phanerochaete sunguinea и Coriolus villosus // Биохимия. 1994. Т.59., выи.6. С.797 803.

18. Гельфанд Е.Д., Страхов B.JI. Промышленный опыт производства лигнина-пометных компостов (ЛПК) в Архангельской области // Использ. лигнина и его произв. в сельском хоз. Андижан, 1985. С.99-100.

19. Горовая А.И. Роль физиологически активных гуминовых кислот в адаптации растений к действию ионизирующей радиации и пестицидов//Гуминовые кислбты в биосфере. М: Наука. 1993. С. 144-149.

20. Горохова В.Г., ПетрушенкоЛ.Н. и др. Иммульсионная механохимическая обработка полимеров растительного происхождения // ДАН. 1995. Т.343. №1. С. 62-64.

21. Госдоклад. Экологическое состояние рыбохозяйственных водоемов России. Выпуск 49. 2000. (http: // Gosdoklad / Section5.htm)

22. Государственный доклад: О состоянии окружающей среды Иркутской области в 2000 году. Иркутск, 2001 г. 383 с.

23. Громова Л.И., Громов B.C. Эффективность новых препаратов из лигнина в рисосеянии. Использ. лигнина и его произв. в сельском хоз. Рига, 1978. С.43-47.

24. Грушников О.П., Ёлкин О.В. Достижения и проблемы химии лигнина. М.: Наука. 1973.- 296с.

25. Грушко Я.М. Вредные органические соединения в промышленных сточных водах. Л., 1976. 128 с.

26. Груш ко Я.М., Кожова О.М., Стом Д.И. Сточные воды сульфат-целлюлозных заводов и их токсичность для гидробионтов. // Гидробиол. журн. 1976. Т.П. №5. С. 118-125.

27. Дубинин Н.П., Митрофанов Ю.А., Мануйлов Е.С. Анализ мутагенного действия тио-ТЭФ на клетки культуры человека. Изв. АН СССР. Сер. биол., 1967. №4. С. 477-488.

28. Драгунов С.С. Химическая природа гуминовых кислот// Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск, 1976. С. 337.

29. Закис Г.Ф., Можейко Л.Н., Телышева Г.М. Методы определенияфункциональных групп лигнина. Рига: Зинатне. 1975. С. 120-230.

30. Запрометов М.Н. Основы биохимии фенольных соединений. Учебн. пособиедля биол. специальностей ун-ов. М., Высшая школа. 1974

31. Засухина О.В., Гречаный Г.В., Никитин А.Я. Дрозофилла как тест-системадля оценки мутагенного действия сточных вод целлюлозно-бумажнойпромышленности // Проблемы экологии Прибайкалья:Тез. докл. креспубликанскому совещанию. Иркутск, 1979 4.1. С.10-11.

32. Захариев И. Основные направления решения проблемы охраны окружающейсреды // Рац. исп. природных ресурсов и охрана окр. среды. М.: Прогресс,1977. С. 86-99.

33. Захаров В.М. Здоровье среды: концепция. М.: Центр экологической политики России. 2000. 68 с.

34. Захаров В.М., Кларк Д.М. (ред.) Биогест: интегральная оценка здоровья экосистем и отдельных видов. М.: Московское отделение международного фонда "Биотест". 1995. 68 с.

35. Иванова Р.Г. Лигно-стимулирующие удобрения и урожай картофеля на Северо-Западе. Автореф. дис.канд.биол.наук. JI. 1970. 20 с.

36. Иванова Р.Т., Боровская Т.З., Криглин П. Д., Гельфанд Е.Д. Влияние лигноудобрения Архангельского гидролизного завода на урожайность полевых культур. Использ. лигнина и его произв. в сельском хоз. Рига, 1978. С. 65-67.

37. Иванова Р.Г., Соловьев В.И., Гемес В.М. К решению проблемы использования отходов Кирижского биохимического завода в качестве удобрений // Тез. докл. 7-й Всесоюз. конф. по химии и использованию лигнина. Рига, 1987. С.262-263.

38. Иванова Р.Г. Состояние и перспективы использования различных видов отходов гидролизной промышленности // Научно-технический семинар по использованию лигнина и его производных в сельском хозяйстве: Тез.докл. Ленинград-Пушкин. 1989. С.5-8.

39. Иванова И.В. Электрогидравлический эффект в гетеродисперсных системах гидролизного лигнина: Автореф. дисс. на соиск уч. степени канд. хим. наук. Красноярск, 1995. 25 с.

40. Иванова Н.В., Горохова В.Г., Шишко А.А., Кошилев И.А., Бабкин В.А. Электорогидравлический удар в водных суспензиях гидролизного лигнина //Химия в интересах устойчивого развития.- Новосибирск, 1996. Т.4. № 4-5. С.365-369.

41. Израэль Ю.А. КомплекснЕлй анализ окружающей среды. Подходы к определению допустимых нагрузок па окружающую природную среду и обоснование мониторинга. В кн.: Всесторонний анализ окружающей природной среды. Л., 1975.

42. Израэль Ю.А., Анохии Ю.А., Кожова О.М., Чебаненко Б.Б., Бейм A.M. Комплексный анализ окружающей природной среды и обоснование .мониторинга в регионе оз. Байкал. В кн.: Всесторонний анализ окружающей природной среды. Л., 1981.

43. Имранова Е.Л. Сукцессия микроорганизмов при деструкции древесных остатков: Автореф. дисс. на соиск уч. степени канд. биол. наук. Хабаровск. 1998. 18 с.

44. Казарновский A.M. Исследование процесса окислительного аммонолиза гидролизного лигнина: автореф. дисс. на соиск. уч. степени канд. тех. наук. Л. 1974.133 с.

45. Калинкина Н.М. Эколого-токсикологическая оценка опасности сульфатного лигнина для гидробионтов: автореф. дисс. на соиск. уч. степени канд. биол. наук. С-Пб., 1993.

46. Каширский В.Г. О комплексном использовании гидролизного лигнина // Гидролиз, и лесохим. пром-сть. 1990. №6. С.2-3.

47. Киприанов А.И., Ковалёв В.Е., Широкова М.И., Рощин В.И. и др. Состав органических кислот сульфатного чёрного щёлока от варки древесины пихты//Химия древесины. 1979. №3. С. 25 -29.

48. Климентов А.С., Костенко Л.Д., Дикун П.П и др. // Химия древесины. 1986. N2. С .45.

49. Кожова О.М., Павленко В.В. Разработка мотодов для оценки биологического действия антропогенных факторов // Рац. исп. ирир. ресурсов и охрана окр. среды. Л., 1978. С.13-18.

50. Комшилов Н.Ф., Понькина Н.А., Кашочкова Г.К., Литвинова В.Б. и др. Изучение процесса разрушения лигнина, растворенного в воде // Химия древесины. 1978. №4. С.72-81.

51. Компонентный состав водотоков и сточных иод. Сообщ. 5. Сточные воды лесообрабатывающей, лесохимической и целлюлозно-бумажной промышленности/Деп. ВИТИТП № 1705-85. Казань, 1984. Константинов Л.С. Общая гидробиология. М., 1979.

52. Криульков В.А., Каплин В.Т. Лигнины в природных водоемах. // Гидрохимические материалы. Загрязнение и самоочищение природных водоёмов, распад органических веществ и методы анализа. Л., 1968. Т. 46. С. 226-234.

53. Криульков В.А., Каплин В.Т, Ганин Г.И. Механизм превращения лигнина и его производных в природной воде // Химия и использование лигнина. Рига, 1974. С.397-408.

54. Леванова В.П. Технология, свойства и применение энтеросорбентов на основе гидролизного лигнина: Дис. в виде научного доклада . д-ра техн. наук. С.-П., 1995. 33 с.

55. Левинский Б.В. Все о гуматах. Иркутск. 1996. С.4.

56. Лейбович-Гранина Л.З. Некоторые фоновые характеристики донных отложений озера Байкал и оценка их влияншша состав Байкальской воды //

57. Региональный мониторинг состояния озера Байкал.- JI.: Гидрометеиздат, 1987. С.175-181.

58. Лекявичус Р. К. Химический мутагенез и загрязнение окружающей среды.-вилынос.-1983- 223 с.

59. Лесников Л.А., Врочинскпй К.К. Классификация пестицидов с рыбохозяйственных позиций//Изв. НИОРХ. 1974. Т.98. С.9-13. Лигнины. Под ред. Сарканена К.В. и Людвига К.Х. Пер. с англ. М.: Лесная пром-сть, 1975. С. 19-25.

60. Любешкииа Е.Г. Лигнины как компонкнт полимерных композиционных материалов//Успехи химии. 1983. Т.52. №7. С.1196-1224. Мануковский К.С., Абрасов Л.Г. Кинетика биоконверсии лигноцеллюлоз. -Новосибирск: Наука. 1990. 111с.

61. Маруняк М.Н., Власенко И.В., Григорьева Н.Г., Струнников В.II. Химический состав щёлоковых сточных вод сульфатно-целлюлозных заводов, перерабатывающих лиственную древесину // Бумажная промышленность. 1982. №3. С.21-22.

62. Медведева С.А. Превращение ароматической компоненты древесины в процессе биоделигнификации: Автореф. докт. дис. Иркутск, 1995. Мелиорация и водное хозяйство. Справочник. 5. Водное хозяйство / Под ред. Бородавченко И.И. М.: Агропромиздат. 1988.

63. Мельник 11.Г. О состоянии зоопланктона Южного Байкала в районе г. Байкальска в 1984-1985 гг // Региональный мониторинг состояния озера Байкал. Л.: Гидрометеоиздат. 1987. С.238-244.

64. Методические указания по установлению эколого-рыбохозяйственных нормативов (ПДК и ОБУВ) загрязняющих веществ для воды водных объектов, имеющих рыбохозяйственное значение / Под ред. Филенко О.Ф., Соколовой С.А. М.: Изд-во ВНИРО. 1998. 145 с.

65. Михайлов О.Ф., Корытов А.И. Защитное и антимутагенное действие на семена гороха гумата натрия и пеницилина // Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск. 1977. С.94-97.

66. Молдавская Т.В. Патогистологические изменения в жаберной ткани костистых рыб под воздействием фенольных соединений. Иркутск. 1981. С. 59-63.

67. Никитин В.М., Оболенская А.В., Щеголев В.П. Химия древесины. М.: Лесная промышленность. 1978. 386 с.

68. Никитин Н.И. Химия древесины и целлюлозы. М.-Л.: Изд-во АН СССР. 1962. 280 с.

69. Новикова Л.Н., Островская P.M., Потекина Е.В. Закономерности мутагенной активности лигнинсодеожащих веществ для байкальских эндемичных моллюсков // Оценка состояния водных и наземных экологических систем. Новосибирск. Наука. 1994(a). С.97-102.

70. Орлов Д.С. Гумусовые кислоты почв и общая теория гумификации. М.: Изд-воМГУ. 1990. 325 С.

71. Орлов Д.С., Демин В.В., Загородияя Ю.Л. Влияние молекулярных параметров гуминовых кислот на их физиологическую активность И Почвоведение. 1997. №6. С.843-845.

72. Островская P.M., Побережный Е.С. Полиплоидия у байкальских моллюсков и ее роль в их реакции на антропогенное воздействие // Тез. докл. V съезда Всесоюзн. об-ва генетиков и селекционеров им. Н.И. Вавилова. М. Наука. 1987. С.152-153.

73. Осиновский А.Г., Гребень В.В., Якубеня Н.А. Органическое удобрение на основе гидролизного лигнина. В реф. сборнике: Гидролизное производство. М.: 1982. Вып. 25 (137). С.20-22.

74. Островская P.M., Побережный Е.С., Петренко Н.К. Использование байкальских эндемичных моллюсков как объекта цитогенетического мониторинга // Моллюски. Систематика, экология и закономерности распределения: Сб.7. Л.: Наука. 1983. С.70-71.

75. Островская P.M., Анализ клеточного цикла. Методические указания. Иркутск. 1984. 8-15.

76. Павленко В.В., Трубачева Л.Я. Мутагенное действие монофенолов на штам 15B-II4 дрожжей сахаромицетов. // Влияние фенольных соединений на гидробионтов. Иркутск. 1981. С.40.

77. Пилюгина Л.И., Куликова Е.К., Леонтьева Р.В. Влияние комностов на основе гидролизного лигнина на агрохимические свойства почвы и рост сеянцев сосны, ели. Проблемы комплекс, использ. древесного сырья Петрозаводск. 1981. С.153-167.

78. Побережный Е.С. Байкальские эндемичные моллюски как объект гидробиологического мониторига: Автореф. дис.канд. биол. наук. Иркутск, 1989. 17 с.

79. Реймерс Ф.Э., Илли И.Э. Физиология семян культурных растений Стбири Изд-во Наука. Новосиирск, 1974.

80. Реймерс Ф.Э., Илли И.Э. Прорастание семян и температура. Из-во Наука. Новосибирск, 1978.

81. Рокитский П.Ф. Биологическая статистика. Минск, Изд-во "Вышейшая школа", 1973. 319 с.

82. Рудых А.Р. Влияние лигнинных веществ сточных вод целлюлозно-бумажного производства на водные биотесты: Автореф. дис.канд. биол. наук. Иркутск, 1988. 22 с.

83. Рудых А.Р. Влияние лигнинных веществ сточных вод целлюлозно-бумажного производства на водные биотесты // Автореф. дисс. на соиск уч. степени канд. биол.наук. Иркутск. 1990. 22 с.

84. Саловарова В.П., Козлов Ю.П. Эколого-биотехнологические основы конверсии растительных субстратов М., Изд-во Российского университета дружбы народов. 2001. 331с.

85. Сальникова Т.В., Григорьева Н.В., Абрамов В.И., Костяновский Р.Г., Лукомец В.М., Мамедова А. Исследование эффективности и механизма действия химических мутагенов в различных растительных системах. // Генетика. 1994. Т.ЗО. №5. С. 657-665.

86. Солоха К.И. Действие физиологически активных веществ на развивающиеся растения и их семена/ Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск. 1973. Т4. С.103-105.

87. Страхов В.Л. Лигнин и урожай // Гидролизная и лесохимическая промышленность. 1986. №4. С.2-3.

88. Сторчай Л.П. Влияние гухмата на некоторые физиологические процессы и уменьшение аккумуляции яда в тканях яблони // Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск. 1983. Т8. С. 47-50

89. Сухановский С.И., Ахмина Е.И., Лисина З.И. Фракционный состав гидролизного лигнина и методы его определения // Сб. тр. ВНИИГидролиз. 1968. Вып. 17. С. 210-215.

90. Тарасов В.А., Тарасов А.В., Любимова U.K., Асланян М.М. проблема количественной оценки опасности химических соединений в генетической токсикологии.//Успехи современной биологии. 2002. Т. 122. №2. С. 136 -147.

91. Тейт Р. Лигнин: разложение и гумификация // Органическое вещество почвы: Биологические и экологические аспекты. М.: Мир. 1991. С. 167-188. Телышева Г.М., Панкова Р.Е. Удобрения на основе лигнина. Рига: Зинатне. 1978. 62 с.

92. Тикавин В.А. Оснновскпй А.Г., Гребень В.В. и др. Органические удобрения на основе гидролизного лигнина и их использование в сельском хозяйстве. Минск: БелНИИНТИ. 1983. 40 с.

93. Тимофеева С.С., Виннченко Э.В., Ошарова Л.Б. О воздействии некоторых фенолов и хинонов на ассимиляцию 14С02 байкальской водорослью Drapamaldiella pilosa. // Влияние фенольных соединений на гидробионтов. Иркутск. 1981. С.24.

94. Трушкин А.В., Надыров Е.К. Применение лигностимулирующего удобрения в хлопководстве // Тез. докл. 4-й Всесоюз. конф. по химии и использованию лигнина. Рига: Зинатне. 1976. С. 226.

95. Трушкин А.В. Лигнин в хлопководстве. Ташкент: МЕХНАТ. 1986. 79с. Туманов А.А., Филимонова И.А., Постнов И.Е., Осипова Н.И. Методы биоиндикации и биотестирования природных вод. Л.: Гидрометоиздат, 1987. Вып.1. С. 34-48.

96. Узюмова О.В., Зеленевскнй Н.В. Эмбриотропная активность гидролизного лигнина. // Фармркология и токсикология лекарственных средств и кормовых добавок в ветеренарин: Сб. науч. тр. Л. 1990. №106. С.165-168.

97. Уланов Н.Н. Возможности использования окисленных углей и гуминовых кислот в сельском хозяйстве // Гуминовые кислоты в биосфере. М: Наука. 1993. С.157-161.

98. Улезло И.В. Микробиологическое разрушение лигнина грибами // Микроорганизмы и низшие растительные разрушители материалов и изделий. М.: 1979. С. 202-207.

99. Федоров В.Д. Принципы организации биологического мониторинга.- В кн: Изучение загрязнения окружающей природной среды и его влияние на биосферу. J1. 1979.

100. Федорова Т.Е. Количественная спектроскопия ЯМР 13С, 170 и физиологическая активность гуминовых кислот // Дис.канд. хим. наук. -Иркутск. 2000. 140 с.

101. Филиппова Н.В., Васильев В.А. Справочник по органическим удобрениям. М.: Росагропрмиздат, 1996. 144 с.

102. Филиппова Т.В., Ткаченко J1.K., Горовая А.И., Христева JT.A. Послествие повышенных доз гексохлорана на ренродуктивность ячменя // Гуминовые удобрения.Теория и практика их применения. Днепропетровск. 1977. С.45-54.

103. Фокин А.Д., Бобырь Л.Ф., Епишипа Л.А., Кравцова Л.В., Христева Л.А. О проникновении гумусовых веществ в клетки растений // Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск. 1977. Т. VI. С. 57-59.

104. Химия древесины / Под ред. А.И. Иванова М.: Лесная промышленность, 1982.- 397 с.

105. Христева JI.A. О природе действия физиологически активных форм гуминовых кислот и других стимуляторов роста растений // Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Киев. 1968. часть III. С. 1327.

106. Христева JI.A. Действие физиологически активных гуминовых кислот на растения при неблагоприятных внешних условиях/ / Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск. 1973. Т4. С. 5-23.

107. Христева JI.A. К природе действия физиологически активныхгумусовых веществ на растения в экстремальных условиях // Гуминовые удобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск. 1977. С. 315.

108. Царев И.И., Першина JI.A., Забелина А.В. Модификация лигнина смешанными ангидридами алкилфосфористых и карболовых кислот. 4. Возможные пути применения фосфитов гидролизного лигнина // Химия растительного сырья. 1998. Т.2. №1.С.51-56.

109. Цой P.M., Пак И.В. Эффективность различных тест-систем в оценке мутагенной активности загрязненных вод// Экология. 1996. № 3.*"С. 194-197,. Цуркан М.А. Агрохимические основы применения органических удобрений. Кишенев. 1985.-288 с.

110. Чепега Л.И., Суржинов В.В., Громов B.C. Влияние лигниновых удобрений на прдуктивность растений риса. // Тез. докл. V-ofi Всесоюз. конф. по химиии и использ. лпгнпна. Рига. 1976. С. 207-209.

111. Чудаков М.И. Промышленное использование лигнина. М.: Лесная промышленность, 1972. 200 с.

112. Чудаков М.И. Промышленное использование лигнина. Изд. 3-е, испр. и доп. М.: Лесная пром-сть, 1983. 199 с.

113. Чудаков М.И. Гидролизный лигнин. // Сб. тр. ВНИИГидролнз. 1978. Выи. 20. С. 151 180.

114. Чуков С.Н., Талашкина В.Д., Надпорожская М.А. Физиологическая активность ростовых стимуляторов и гуминовых кислот почв // Почвоведение. 1995. №2. С. 169-174.

115. Шевченко В.В. Действие 8-этоксикофеина на хромосомы Crepsis capilaris L. // Генетика. 1965. №4. С.138.

116. Шеховцова Т.Н. Биологические методы анализа // Соросовский образовательный журнал. М., Т.6. № 11. 2000. С.17-21. Шопен Ж. Продукты с фенольной реакцией сточных вод бумажных фабрик / Пер. с француз. АТИП бюл. № 3. 1959. С.147-154.

117. Шорыгина Н.И., Резников В.М., Ёлкин В.В. Реакционная способность лигнина. М.: Наука, 1976. 308 с.

118. Шрам Р. Сравнительная чувствительность теста на доминантные летали и цитогенетического анализа хромосомных аберраций в клетках костного мозга и сперматоцитах млекопитающих // Генетич. послед, загрязнения окр. среды. М.: Наука, 1977. С. 132-141.

119. Шуберт В. Биохимия лигнина. М.: Лесная пром-ть, 1968. 136 с. Экологический мониторинг. Методы биомониторинга / Под. Ред. Гелашвили Д.Б. Н. Новгород: Изд.-во ННГ, 1995. Ч. 2. 272 с.

120. Энштейн Л.В., Ахмина Е.Н., Раскин М.Н. Рациональное направление использования гидролизного лигнина. Химия древесины. 1977. №6. С. 1824.

121. Юдина Н.В., Писарева С.И., Сарабикова А.С. Оценка биологической активности гуминовых кислот торфов // Химия твердого топлива. 1996. № 5. С.31-34.

122. Юхнин А.А., Жабина Н.И. Сравнительная химическая и физиологическая Ф характеристика перегнойных и торфяных гуминовых кислот/Туминовыеудобрения. Теория и практика их применения. Днепропетровск, 1977. TVI. С.21-31.

123. Юшманов С.Н. Получение, основные свойства и область применениядревесного угля. М.: Лесная промышленность, 1979. 133 с.

124. Яблоков А.В. О недооценке отрицательных последствий примененияпестецидов и о важности разработки иных путей развития сельского хозяйства. Препринт. Пущино, 1988. С.49.

125. Archibald F.S., Bourbonnais R., Jurasek L., Paice M. G., Reid I.D. Kraft pulp bleaching and delignification by Trametes versicolor// Biotechnol. 1997. Vol. 53. N2-3. P. 215-236.

126. Auerbach Ch., Robson J.M. The production of mutations by chemical substances. Proc. Roy. Soc. Edinburg. 1947. Vol.6. P. 271-283.

127. Bjorkman A. Isolation of Iignin from finely divided wood with neutral solvents. Sature, 1954. №4440. 174 p.

128. Conillard D. Evalution de la pollution et des repercussions des rejets des industriesdes pates et despapiers sur la vie aquatique // Sci Total Environ. 1980. Vol.14. № 2. P. 167-184.

129. Chet J., Trojanowski G., Huttermann A. Decolourization of the Due Poly В -411 and its correlation with Iignin Degradation by fungi // Microbios Letters. 1985. Vol.29. N1. P.37-43.

130. Dixon D.R. Sister chromatid exchange and mutagens in the agnatic environment //

131. Mar Pollut Bull. 1983. 14. N8. P. 282-284.

132. Dixon D.R, Jones J.M., Harrison F.H. Cytogenetic evidence of enducible processes linked with xenobiotic metabolism in larval and adult Mutilus edulis // Mar Environ. Res. 1984.14. N1-4. P. 495-496.

133. Eriksson К.E., Johnsrud S.C., Valander L. Degradation of lignin and model compounds by various mutants of the white-rot fungus sporotrichum // Arch microbiol. 1983. Vol.135. N3. P.161-168.

134. Eriksson K.E., Ander P., Petterson B. Regulation of lignin degradation in Phanerochaete chrysosporium // Materiuals of the third Int. Conf. Biotechnol. In the Pulp Ind. Stockholm, 1986. P.24-27.

135. Flaig W. Biochemical factors in coal formation // Advances in Organic Geochemistry. Pergamon Press, 1972. P.197-232.

136. Gold M., Cheng T.M. Conditions for fruit body formation in the wood rotting basidiomycete Phanerochaete chrysosporium// Arch. Microbiol. 1979. N121. P. 37-41.

137. Hammel K.E., Jensen K.A. J., Mozuch M.D., Landucci L.L., Tien M., Pease E. A. Ligninolysis by a purified lignin peroxidase // J. Biol. Chem. 1993. Vol. 268. P. 12274-12281.

138. Hatakka A. Lignin-modifyng enzymes from selected white-rot fungi: productionand role in lignin degradation // FEMS Microbiol. Rev. Vol. 13. P. 125-135.

139. Hunter B.I.В., Ross S.L., Tannahill I. Aluminium pollution and fish Toxicity //

140. Water Pollut. Contr.: Cr. Erit. 1980. Vol.79. N3. P.413-420.

141. Hellwell S., Batley G.E., Florence T.M., Linisden B.G. Speciation and toxicity ofaluminium in a model fresh water // Environ Technol. Lett. 1983. Vol.4. N 3.1. P.141-144.

142. Jone E., Zwan P.P., Bont J. A. M. Microbial degradation of veratryl alcohol // Forum Microbiol. 1989. Vol.12. №1-2. P. 106.

143. Jacobs F. Graut G.C. Acute toxicity of unbleached kraft mill effluent (UKME) tu the opossum shrimp. Neomysis americana in aquatic systems // Svensk paperstid. 1973. Vol.76. N 1. P. 26-29.

144. Kaplan D.L., Hartenstein R. Decomposition of lignin by microorganisms // Soil. Biol. Biochem. 1980. Vol.12. P.65-75.

145. Kerm Hartmut W. Transformation of lignosulfonates by Trichoderma hazzianum //Holzforschung. 1983. Vol.37. N3. P.109-115.

146. Martin Q.P., Haider K. Decomposition in soil of specifically 14 С labeled DHP and corns talk lignins model humic acid-type polymers and coniferyl alcohols in shelagli free man // Organic Matte Studies. 1976. P. 19.

147. Nestman E. R., Lebel G. L., Williams D.F., Kowbel D.J. Mutageniciti of organus extracts from Canadian drinking water in the Salmonella // Emiron. Mutagen. 1979. Vol.1. № 4. P. 337-345.

148. Nogychi A., Shimada M., Niguchi T. Studies on lignin biodegradation. I. Possible role of nonspecific oxidation of lignin by laccase // Holzforschung. 1980. Bd. 34. № 3. S.86-89.

149. Pettay T.M., Cravvfod D.L. Enhancement of lignin degradation in Streptomyces sp.• by protoplast fusion // Appl. and Environ. Microbiol. 1984. Vol.47. N2. P.439-440.

150. Ralph J., Mackay J. J., Hatfield R. D., Malley D. M. O., Whetten R. YV., Sederosf R.R. Abnormal Lignin in Loblolly Pine Mutant // Science. 1997. Vol. 227. P. 235239.

151. Saxena Y.K. Microbial degradation of lignin // Bombay Technol. 1979. Vol.29. P. 38-41.

152. Tokar E.M., Cambell I.P., Tollegson R. Environmental improvement at Post Alice //Pulp. Pap. Can. 1982. Vol.83. №5. P. 50-53.

153. Wariishi H., Valli K., Gold M.H. In vitro depolymerization of lignin by manganese peroxidase of Plianerochaete chrysosporium // Biochem. Biophys. Res. Commun.1991. Vol. 176. P. 269-275.

154. Wariishi H„ Valli R., Gold M.H Manganese (II) Oxidation by Manganese Peroxidase from the basidiomycete Phanerochaete chrysosporium // J. Biol. Chem.1992. Vol. 267. № 33. P. 23688-23695.

155. Woodard F.E., Sproul O.I., Atkins P.F. The biological degradation of lignin from pulp mill bleak liquor//J. Water Pollut. Control. Fed. 1964. Vol. 36. № 11. P. 1401.

156. Wekague A.B. Some toxic constituents of chlorinations-stage effluents from bleached kraft pulp mills // Canadian Journal of Fish and Aquatic Science. 1981. Vol.38. № 7. P. 739-743.