Оценка эффективности применения агонистов рецептора тромбопоэтина в лечении геморрагических проявлений синдрома Вискотта-Олдрича у детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Огнева Анна Леонидовна

• Огнева Анна Леонидовна
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Огнева Анна Леонидовна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Общая характеристика синдрома Вискотта-Олдрича

1.2 Общая концепция патогенеза синдрома Вискотта-Олдрича

1.3 Иммунологические дефекты при синдроме Вискотта-Олдрича

1.3.1 Дефекты адаптивного иммунитета

1.3.1.1 Дефекты Т-лимфоцитов

1.3.1.2 Дефекты В-лимфоцитов

1.3.2 Дефекты врожденного иммунитета

1.4 Роль WASP в тромбоцитах. Общая концепция патогенеза тромбоцитопении при синдроме Вискотта-Олдрича

1.5 Клинические проявления синдрома Вискотта-Олдрича

1.5.1 Геморрагический синдром

1.5.2 Инфекции

1.5.3 Атопия

1.5.4 Аутоиммунные осложнения и злокачественные новообразования

1.5.5 Аутовоспалительные проявления

1.6 Корреляция генотип-фенотип

1.7 Терапевтические подходы к лечению синдрома Вискотта-Олдрича

1.7.1 Куративные методы терапии синдрома Вискотта-Олдрича

1.7.2 Спленэктомия

1.7.3 Консервативная терапия

1.7.4 Применение агонистов рецептора тромбопоэтина

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Общая характеристика

2.1.1 Оценка тяжести заболевания

2.1.2 Критерии оценки ответа на терапию

2.1.3 Оценка экспрессии белка WASP

2.1.4 Молекулярно-генетическое исследование

2.2 Ретроспективное исследование

2.2.1 Клинико-лабораторная характеристика пациентов. Формирование выборки

2.2.2 Обследование пациентов

2.2.3 Дизайн ретроспективного исследования

2.3 Проспективное исследование

2.3.1 Клинико-лабораторная характеристика пациентов

2.3.2 Обследование пациентов

2.3.3 Дизайн проспективного исследования

2.4 Анализ безопасности терапии

2.5 Определение концентрации эндогенного тромбопоэтина

2.6 Исследование мегакариоцитов

2.7 Обработка данных и статистический анализ

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1 Результаты ретроспективного исследования с применением ромиплостима

3.1.1 Эффективность терапии

3.2 Результаты сравнительного исследования эффективности препаратов агонистов рецептора тромбопоэтина: ромиплостим против элтромбопага

3.2.1 Основная характеристика пациентов в обеих группах

3.2.2 Основные результаты терапии

3.2.3 Анализ эффективности терапии альтернативным агонистом рецептора тромбопоэтина (cross-over терапия)

3.3 Безопасность применения терапии препаратом ромиплостим и элтромбопаг

3.4 Прогностические факторы ответа на терапию у пациентов с синдромом Вискотта-Олдрича

3.5 Биологическое обоснование применения агонистов рецептора тромбопоэтина у пациентов с синдромом Вискотта-Олдрича

3.5.1 Анализ концентрации тромбопоэтина

3.5.1 Исследование влияния ромиплостима на мегакариопоэз у пациентов с синдромом Вискотта-Олдрича

3.6 Алгоритм выбора терапии у пациентов с синдромом Вискотта-Олдрича

Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка эффективности применения агонистов рецептора тромбопоэтина в лечении геморрагических проявлений синдрома Вискотта-Олдрича у детей»

Актуальность исследования

Синдром Вискотта-Олдрича (Wiskott-Aldrich syndrome, WAS) - редкий Х-сцепленный первичный иммунодефицит с характерным клиническим фенотипом, включающим в себя тромбоцитопению со сниженным средним объемом тромбоцитов, инфекции, экзему, предрасположенность к развитию аутоиммунных осложнений и злокачественнным новообразованиям.

Тромбоцитопения - самый ранний и основной признак WAS, который, в отличие от остальных проявлений, является постоянным симптомом этого заболевания, приводящим к тяжелым кровотечениям, в том числе и жизнеугрожающим интракраниальным кровоизлияниям, у более 30% пациентов [1].

Анализ долгосрочных результатов терапии показал, что единственным общедоступным методом, позволяющим излечить пациентов с WAS, остается аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (ТГСК). На сегодняшний день современная куративная терапия WAS, включающая в себя ТГСК, а также проводимую в единичных центрах генную терапию (ГТ), показывает хорошие результаты и позволяет достичь выживаемости, по разным данным, до 90% и более [2, 3, 4, 5]. Однако подготовка к проведению ТГСК занимает, как правило, длительное время, в связи с чем задача поддержания удовлетворительного соматического статуса больного, в первую очередь предупреждение жизнеугрожающих кровотечений, является первостепенной в данной когорте пациентов.

Нерешенным остается вопрос о показаниях к проведению консервативных методов терапии. Подавляющее большинство исследователей согласны с положением, что WAS является абсолютным показанием к аллогенной ТГСК, однако необходимо принимать во внимание тот факт, что, в силу биологической гетерогенности заболевания, существует доля пациентов с более благоприятным

прогнозом. На сегодняшний день нет единого мнения по ведению пациентов с менее тяжелым фенотипом заболевания - X-сцепленной тромбоцитопенией (XLT), у которых тромбоцитопения и геморрагические проявления могут являться единственными симптомами заболевания. Проведение ТГСК для данной группы больных, как основного метода терапии, учитывая риск развития целого ряда осложнений, инвалидизирующих пациентов и снижающих качество их жизни, остается дискутабельным и является прерогативой крупных трансплантационных центров.

Методы консервативной терапии также не оптимизированы. Спленэктомия, ранее широко использовавшаяся для коррекции тромбоцитопении при WAS, на сегодняшний день не является терапией выбора ввиду риска тяжелых инфекционных осложнений и рецидива тромбоцитопении у более чем 50% пациентов [6].

Потенциально новым подходом к лечению пациентов с WAS является применение агонистов рецептора тромбопоэтина (аТПО-р), которые успешно используются в терапии иммунной тромбоцитопении (ИТП) и других состояниях [7, 8]. На сегодняшний день при различных формах тромбоцитопении наибольший опыт накоплен в отношении двух препаратов: элтромбопага и ромиплостима. Однако ранее исследований по изучению эффективности ромиплостима у пациентов с WAS не проводилось, а в отношении элтромбопага существуют сообщения о терапии лишь небольшого числа больных с WAS.

Учитывая, что аТПО-р различаются по своему химическому строению, региону взаимодействия с рецептором, и действие препаратов реализуется через различные сигнальные пути, возможно предположить различную эффективность ромиплостима и элтромбопага при WAS. Таким образом, изучение эффективности каждого из этих препаратов в больших когортах пациентов с WAS может открыть новый этап понимания биологии заболевания и новые перспективы терапии.

Степень разработанности темы исследования

Несмотря на то, что впервые пациенты с данным заболеванием были описаны почти более 85 лет назад [9, 10], природа тромбоцитопении при WAS остается спорной и лечение пациентов с WAS, по-прежнему, представляет собой непростую задачу. Исследования пациентов с данным синдромом и нокаутированных по гену WAS мышей показывают, как нарушение тромбопоэза в костном мозге (нарушение морфологии мегакариоцитов (МК) и сниженное количество протромбоцитов in vitro), так и усиленный фагоцитоз фосфатидилсерин-положительных (ФС) тромбоцитов макрофагами селезенки [11, 12]. За последние годы значительно расширилось понимание процессов, лежащих в основе патогенеза тромбоцитопении при WAS. В работах, проведенных на базе НМИЦ ДГОИ, было продемонстрировано, что уменьшенный объем тромбоцитов у пациентов с WAS может приводить к повышенной концентрации кальция и дальнейшей гибели клетки [13, 14].

Трансфузии тромбоконцентрата, которые используются при некоторых формах врожденных тромбоцитопений, в данной когорте больных применяются в исключительных случаях с целью купирования кровотечений. Это обусловлено короткой эффективностью трансфузий и дополнительной аллоиммунизацией -выработкой антитромбоцитарных и анти-HLA антител, которая может приводить к рефрактерной тромбоцитопении и увеличивать риск отторжения трансплантата в дальнейшем [15].

Препараты аТПО-р успешно применяются при ИТП и других гемопатиях и обеспечивают более высокую частоту клинического ответа, чем большинство других методов лечения [16, 17]. Гипотеза о том, что аТПО-р могут увеличивать количество тромбоцитов при WAS, привлекательна, однако исследований по изучению применения ромиплостима у пациентов с WAS ранее не проводилось. Также отсутствуют работы по изучению эффективности элтромбопага в крупных когортах больных с WAS, что обусловлено трудностями проведения клинических испытаний при орфанных заболеваниях. Кроме того, не изучено влияние аТПО-р

на мегакариоциты в данной когорте больных. На сегодняшний день, опыт применения элтромбопага в когорте детей с WAS ограничен единичными клиническими случаями [18, 19].

Кроме того, открытым остается вопрос безопасности аТПО-р у пациентов с мультисистемным заболеванием. В исследовании EXTEND, оценивающем долгосрочную безопасность и эффективность аТПО-р у 302 взрослых пациентов с ИТП, получавших элтромбопаг в течение более 2 лет, нежелательные явления (НЯ) отмечались редко, и их частота не увеличивалась при продолжительности лечения более одного года [20]. Однако, профили безопасности аТПО-р у больных с WAS ранее не изучались.

Отсутствие единых стандартов терапии, а также недостаточная изученность прогностических факторов ответа или не ответа на терапию определяют необходимость разработки новых подходов лечения.

Цель исследования

Оценить эффективность и безопасность агонистов рецептора тромбопоэтина в лечении геморрагических проявлений у детей с синдромом Вискотта-Олдрича.

Задачи исследования

1. В пилотном ретроспективном исследовании оценить эффективность терапии ромиплостимом у детей с WAS.

2. В проспективном рандомизированном исследовании провести сравнительный анализ результатов лечения детей с WAS с использованием различных аТПО-р (ромиплостима или элтромбопага).

3. Провести оценку эффективности конверсии терапии с одного аТПО-р на другой во второй линии терапии.

4. Оценить безопасность терапии с применением аТПО-р у детей с WAS.

5. На основании анализа клинико-лабораторных данных пациентов с WAS, получавших аТПО-р, определить прогностические критерии эффективности данных препаратов.

6. Разработать алгоритм терапии тромбоцитопении при WAS с применением аТПО-р.

7. Изучить подлежащие биологические механизмы действия аТПО-р при WAS.

Научная новизна

Впервые в мире на репрезентативной группе детей с WAS в ходе исследования доказана эффективность и безопасность применения аТПО-р для лечения геморрагических проявлений и коррекции тромбоцитопении при WAS.

Впервые проведено проспективное рандомизированное прямое сравнительное исследование эффективности двух аТПО-р - ромиплостима и элтромбопага - в когорте детей с WAS.

Проведен анализ клинико-лабораторных показателей в группе пациентов, рефрактерных к терапии. Продемонстрировано, что вероятность достижения ответа на аТПО-р у пациентов с более легким фенотипом заболевания (менее 4 баллов по модифицированной шкале) и миссенс вариантами гена WAS выше, чем у больных с классическим WAS (более 4 баллов по модифицированной шкале) и остальными типами генетических дефектов.

Впервые в когорте пациентов с WAS показана эффективность конверсии терапии на альтернативный аТПО-р.

В данной работе проведено исследование биологических основ эффективности терапии аТПО-р и показано, что терапия ромиплостимом восстанавливает нормальное распределение МК между стадиями созревания и нивелирует сдвиг МК в сторону более зрелых форм, характерный для пациентов с WAS.

Научно-практическая значимость

Представлено доказательное обоснование выбора терапии первой линии: аТПО-р. Сформулированы принципы выбора препарата в терапии первой и второй линии, показана эффективность и безопасность конверсии терапии на другой препарат аТПО-р.

Доказана безопасность терапии аТПО-р у детей с WAS, описаны единичные побочные эффекты данной терапии.

Продемонстировано, что применение терапии с использованием аТПО-р у детей с WAS позволило снизить риск развития жизнеугрожающих кровотечений.

На основании результатов, полученных при проведении данной работы, разработан алгоритм выбора агониста рецептора тромбопоэтина в соответствии с клинико-биологической стратификацией пациентов.

На основании изучения кинетики достижения тромбоцитарного ответа при проведении терапии аТПО-р разработана тактика ведения больных с рефрактерной тромбоцитопенией с определением сроков перехода к терапии второй линии.

Внедрение результатов в практику

Разработанный алгоритм выбора терапии используется в отделении иммунологии и отделении стационара кратковременного лечения ФГБУ «НМИЦ ДГОИ имени Дмитрия Рогачева» Минздрава России при лечении пациентов с WAS.

Основные положения и выводы диссертации используются в курсе лекций и семинаров по иммунологии и детской гематологии/онкологии кафедры онкологии, гематологии и лучевой терапии ПФ ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России, кафедры аллергологии и иммунологии, кафедры гематологии и клеточных технологий ФГБУ НМИЦ ДГОИ имени Дмитрия Рогачева Минздрава.

Методология и методы исследования

Диссертационная работа выполнена на базе ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Министрества здравоохранения России (директор - д.м.н., профессор Новичкова Г.А.).

Данное исследование одобрено Независимым этическим комитетом ФГБУ НМИЦ ДГОИ имени Дмитрия Рогачева Минздрава России (протокол № 6э/6-19 от 17.09.2019 г.). В случаях, когда имело место использование лекарственного препарата «не по показаниям», процедуру назначения лекарственных препаратов проводили в соответствии с частью 5 Статьи 37 ФЗ от 21 ноября 2011г. No 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации».

В исследование включены 92 ребенка с генетически верифицированным диагнозом синдром Вискотта-Олдрича в возрасте от 16 дней до 15.2 лет. Проведено ретроспективное исследование по оценке эффективности ромиплостима и проспективное сравнительное рандомизированное исследование эффективности двух препаратов аТПО-р: ромиплостим против элтромбопага.

Необходимый комплекс лабораторных исследований выполнен в клинико-диагностической лаборатории, лаборатории молекулярной биологии, лаборатории трансплантационной иммунологии и иммунотерапии гемобластозов, лаборатории клеточного гемостаза и тромбоза ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Министрества здравоохранения России.

Основные положения выносимые на защиту

1. Терапия ромиплостимом продемонстрировала эффективность у пациентов с WAS и позволила добиться стабильных значений количества тромбоцитов без развития серьезных геморрагических осложнений.

2. В группе пациентов, получавших ромиплостим, имеется тенденция более частого достижения общего тромбоцитарного ответа по сравнению с группой пациентов, получавших элтромбопаг (73% против 43%). Применение альтернативного аТПО-р у больных, инициально не достигших ответа на терапию, может быть эффективным во второй линии терапии.

3. Терапия ромиплостимом и элтромбопагом детей с WAS продемонстрировала удовлетворительный профиль безопасности.

4. Такие характеристики, как легкое течение WAS, миссенс-мутации гена WAS и инициальное количество тромбоцитов более 25 х109/л являются прогностическими факторами хорошего ответа на терапию аТПО-р.

5. Биологическим обоснованием эффективности терапии аТПО-р является относительно низкий уровень ТПО у пациентов с WAS и положительное влияние терапии ромиплостимом на дефекты созревания мегакариоцитов при WAS.

Участие автора в получения результатов исследования

Автором был проведен анализ литературных данных, посвященных эпидемиологии, патогенезу, клинико-лабораторным и молекулярно- генетическим особенностям у пациентов с WAS, а также анализ различных исторических схем терапии.

Совместно с научными руководителями были определены цель, задачи и методы исследования, разработана база данных для хранения и статистической обработки данных. Определен дизайн исследования, в соответствии с которым осуществлялось клинико-лабораторное обследование пациентов, изучение данных анамнеза, их динамическое наблюдение, оценка эффективности терапии. Проанализированы результаты исследования, сформулированы выводы и практические рекомендации. Лично автором проводилось обследовании и лечение пациентов, вошедших в исследование согласно дизайну исследования.

Совместно с лабораторией клеточного гемостаза и тромбоза ФГБУ "НМИЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачёва" Минздрава России проводился отбор и обработка образцов пациентов, и анализ полученных данных.

Степень достоверности и апробация результатов

Достоверность полученных результатов обусловлена значительным, с учетом орфанности заболевания и распространенности WAS в популяции, объемом выборки пациентов, включенных в исследование. Кроме того, достоверность полученных результатов и выводов обеспечена репрезентативностью полученных данных и корректным выбором методов статистического анализа данных в соответствии с решаемыми задачами. Научные положения документированы таблицами и рисунками. Сделанные выводы строго обоснованы и вытекают из результатов проведённых исследований. Материалы диссертации представлены в докладах на Российских и международных конференциях:

- III рабочее совещание аллергологов-иммунологов «Первичные иммунодефициты и аутовоспалительные заболевания», 1-2 октября, 2020, Москва, (устный доклад).

- The European Society for Immunodeficiencies meeting, October 14-17, 2020, Birmingham, UK (устный доклад).

- Научно-клинический совет ФГБУ НМИЦ ДГОИ имени Дмитрия Рогачева Минздрава России, январь, 2021 г., Москва, (устный доклад).

- Детская онкология, гематология и иммунология XXI века: от науки к практике», 27-29 мая, 2021 г., Москва, (устный доклад).

- Российский форум по тромбозу и гемостазу, 17-19 марта, 2022, Москва, (устный доклад).

- International Primary Immunodeficiencies Congress - IPIC 5th Edition, Vilamoura (Algarve), Portugal, April 27-29, 2022, (постерный доклад).

- The European Society for Immunodeficiencies meeting, October 12-16, 2022, Gothenburg, Sweden (устный доклад).

- Конгресс с международным участием «Инновации в детской гематологии, онкологии и иммунологии: от науки к практике», 1-3 июня, 2023, Москва, (устный доклад).

Материалы диссертации опубликованы в 10 печатных работах, из них 6 статей в журналах, рекомендованных в Перечне ВАК Министерства образования и науки РФ, и во втором издании национального руководства «Неонатология».

Получен патент на изобретение №2784361: «Способ коррекции тромбоцитопении у детей с синдромом Вискотта-Олдрича».

Структура и объем диссертации

Структура диссертации включает следующие разделы: введение, обзор литературы, методы, результаты, обсуждение, выводы и практические рекомендации. Объем диссертации составляет 133 страницы, работа иллюстрирована 29 рисунками и 11 таблицами.

Библиография представлена 156 источниками литературы, в том числе отечественных ссылок - 7, иностранных - 149.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика синдрома Вискотта-Олдрича

Синдром Вискотта-Олдрича (Wiskott-Aldrich syndrome, WAS) - Х-сцепленный первичный комбинированный иммунодефицит с характерным клиническим фенотипом, включающим в себя пентаду симптомов: тромбоцитопению со сниженным средним объемом тромбоцитов, инфекции, экзему, предрасположенность к развитию аутоиммунных осложнений и злокачественнных новообразований (ЗНО). Частота встречаемости заболевания по данным российского регистра составляет 1:270 000 мальчиков [21].

В 1994 году Derry и соавт. идентифицировали с помощью метода позиционного картирования точную локализацию гена WAS на Xp11.22 - p11.23 [22]. С момента открытия гена WAS описано более 400 различных мутаций. Х-сцепленная тромбоцитопения (XLT; OMIM #313900) представляет собой аллельный вариант WAS с более легким фенотипом, при котором тромбоцитопения и геморрагические проявления могут являться единственными симптомами заболевания. Еще одним редким вариантом WAS-ассоциированного заболевания является тяжелая врожденная нейтропения (XLN; OMIM #300299).

1.2. Общая концепция патогенеза синдрома Вискотта-Олдрича

Патофизиологической основой данного синдрома является нарушение работы цитоскелета клеток, обусловленное дефицитом WASP. Ген WAS расположен на Х-хромосоме и кодирует белок WASP, который состоит из 502 аминокислот и экспрессируется только в гемопоэтических клетках [22]. WASP не обладает каталитической активностью и действует как каркасный белок, осуществляя трансдукцию сигналов от рецепторов на поверхности клетки к актиновому цитоскелету [23].

WASP принадлежит к семейству белков WASP, включающее хорошо охарактеризованные N-WASP (neural WASP) и три белка WAVE/SCAR (WAVE -WASP family Verprolin-homologous protein, белок семейства WASP, гомологичный верпролину; SCAR - suppressor of G-protein coupled cyclic-AMP receptor, супрессор связанного с G-белком рецептора циклического АМФ), а также недавно открытые WASH и WHAMM/JMY/WHAMY [24]. Все члены семейства WASP имеют сходную доменную структуру.

В структуре белка WASР можно выделить несколько функционально важных доменов: N-концевой WASР-гомологичный домен 1 (WH1), расположенный за ним основной домен (Basic Region), далее GBD домен (GTPase binding domain, домен, связывающий ГТФазу), регион богатый пролином домен (PPP) и C-концевой домен VCA (V - verprolin homology motif, участок, гомологичный верпролину; С - cofilin homology motif, участок, гомологичный кофилину; А - acidic motif, кислотный участок) (Рисунок 1). Первый N-концевой домен WH1 является сайтом связывания для белка WIP (WASP-interacting protein, белок, взаимодействующий с WASP) [2S]. WIP регулирует активность WASP и способствует его стабильности в T-клетках, защищая от деградации кальпаином и протеасомой [26]. ^оме того, домен WH1 может выступать в качестве сайта связывания для Fyn и Lck киназ Src-семейства в Т-клетках [27]. Следующий домен B участвует в активации WASP посредством связывания с PIP2 (фосфатидилинозитол^^-бисфосфат) и Cdc42. Стимуляция мембранных рецепторов приводит к активации ГТФазы Cdc42, которая связывается с доменом GBD и способствует высвобождению домена VCA.

Особенностью, которая определяет все белки семейства WASP, является их консервативный С- концевой участок VCA, который после активации белка может взаимодействовать с комплексом Arp2/3 (белок, связанный с актином 2/3) [24]. В комплексе с белками Arp2/3 запускается полимеризация актина и формирование разветвлённых актиновых филаментов [28]. Согласно предложенной модели, комплекс Arp2/3 связывается с боковой поверхностью нити F-актина и инициирует рост дочерней нити, ориентированной под углом 70 градусов к материнскому филаменту.

Рисунок 1 - Строение, активация белка WASP и ремоделирование

цитоскелета [29]

Слева - белок WASP в аутоингибированном состоянии (структура «шпильки») из-за внутримолекулярного взаимодействия между C-концевым доменом VCA (V -verprolin homology motif, участок, гомологичный верпролину; С - cofilin homology motif, участок, гомологичный кофилину; А - acidic motif, кислотный участок) и GBD доменом (GTPase binding domain, домен, связывающий ГТФазу) в неактивированной клетке. Справа — при активации широкого спектра клетки ГТФаза семейства Rho Cdc42 связывается с WASP, что приводит к разворачиванию молекулы WASP и ее связыванию с комплексом Arp2/3 (белок, связанный с актином 2/3)

Дополнительные активаторы WASP включают белок, взаимодействующий с пролин-серин-треонинфосфатазой (PSTPIP1) и фосфатидилинозитол-4,5-бифосфат (PIP2), которые, связывают полипролиновый (PPP) домен и основной (B) домен. Стабильность активного WASP зависит от статуса фосфорилирования остатка тирозина 291 (Y291), который регулируется тирозинкиназами семейства Src и тирозин-протеинфосфатазой (PTPN12). Динамическое ремоделирование актина

зависит от баланса между активацией и деградацией WASP, последняя регулируется убиквитинированием и опосредована протеасомами [29].

Мутации гена WAS приводят к нарушению многих актин-зависимых клеточных процессов, таких как образование подосом, хемотаксис, поддержание размера и формы клеток, фагоцитоз, формирование иммунного синапса между Т-клетками и антигенпрезентирующими клетками, цитолитического синапса между NK-клетками и клетками-мишенями. Эти клеточные нарушения приводят к функциональным дефектам врожденного и приобретенного иммунитета.

1.3. Иммунологические дефекты при синдроме Вискотта-Олдрича 1.3.1. Дефекты адаптивного иммунитета

1.3.1.1. Дефекты T-лимфоцитов

WASP играет важную роль в функционировании Т-клеток, включая пролиферацию, дифференцировку и выживание через актин-зависимые и независимые механизмы.

Лимфопения - постоянный признак классического фенотипа WAS. Однако, на первом году жизни количество лимфоцитов может быть нормальным или умеренно сниженным, чаще всего лимфопения, обусловленная ускоренным апоптозом Т-лимфоцитов, нарастает к 6-8 годам [1]. У пациентов с WAS выявлено также нарушение функциональной активности Т-лимфоцитов: снижение пролиферации в ответ на стимуляцию моноклональными антителами к СD3 в связи с нарушением передачи сигнала через Т-клеточный рецептор, при этом ответ на фитогемагглютинин, конканавалин соответствует границам нормы. Для осуществления правильной работы Т-клеток в иммунном ответе необходима трансдукция сигналов. Во время связывания со своим специфическим лигандом в комплексе с MHC на антигенпрезентирующей клетке, Т-клеточный рецептор (TCR) инициирует внутриклеточную передачу сигналов, которая приводит к

полимеризации актина. WASP является одним из факторов нуклеации актина, который задействован в микрокластерах TCR, регулируя образование актиновой сети. В исследовании Narayanaswamy Ramesh и соавт. было показано, что лигирование TCR приводит к образованию комплекса ZAP-70-CrkL-WIP-WASP [30]. Тирозинкиназа ZAP-70 необходима для рекрутирования WASP в иммунный синапс, а недавно открытая молекула CrkL осуществляет опосредованную активацию WASP путем связывания с WIP [23]. Затем WASP совместно с этим комплексом в составе липидных рафтов перемещается в иммунный синапс для дальнейшей активации Т-клеток (Рисунок 2).

Рисунок 2 - Роль WASP в формировании иммунного синапса [23]

Кроме нарушения передачи сигналов, у пациентов с дефицитом WASP и нокаутированных по гену WAS мышей было выявлено нарушение миграции Т-лимфоцитов. Перестройка актинового цитоскелета необходима для осуществления хемотаксиса Т-клеток.

В недавних исследованиях была продемонстрирована роль WASP и N-WASP в созревании и развитии T-клеток. У мышей, нокаутированных по гену WAS, был выявлен частичный блок на стадии перехода из дважды негативных в (CD4-CD8-) к дважды позитивным (CD4+CD8+) Т-клеткам. Кроме того, отмечалось снижение

миграционной способности CD4+CD8- и CD4-CD8+ SP-клеток и увеличение процента CD69lowCD24low и CD62low SP-клеток, что может объясняться удержанием SP-клеток в тимусе [31].

Как было обнаружено WASP, кроме цитоплазмы, локализуется и в ядре Т-клеток, и кроме участия в актин-зависимых процессах, может играть важную актин-независимую роль в регуляции метилирования гистонов на промоторе 29 TBX21 и в транскрипции цитокинов, необходимых для дифференцировки Т-хелперов (TH)1 [32]. Отсутствие WASP в Т-хелперах приводит к нарушению транскрипции генов цитокинов, необходимых для дифференцировки TH1, и к смещению в сторону TH2, что может частично объяснять высокую восприимчивость у пациентов с WAS к вирусным инфекциям и атопии.

1.3.1.2. Дефекты B-лимфоцитов

У пациентов и мышей с дефицитом WASP было обнаружено значительное снижение как фолликулярных, так и B-клеток маргинальной зоны [33]. Распределение субпопуляций периферических В-клеток может варьировать: количество переходных и зрелых наивных В-клеток может соответствовать границам нормы, при этом количество B-клеток памяти часто снижено особенно у пациентов взрослого возраста, в то время как CD21low B-лимфоциты, частично аутореактивная субпопуляция B-клеток, увеличивается [34, 35, 36].

Как и в T-лимфоцитах, в B-лимфоцитах с дефектом WASP отмечается нарушение передачи сигнала от B-клеточного рецептора (BCR), что приводит к нарушению формирования иммунного синапса и активации B-клеток [37]. Также было продемонстрировано, что значительная часть циркулирующих В-клеток у пациентов с WAS не может экспрессировать CD21 и CD35 - рецепторы, необходимые для презентации антигена В-лимфоцитами. Это может способствовать нарушению толерантности и аутоиммунитету, поскольку сообщалось о подавлении CD21 и CD35 при нескольких аутоиммунных

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Огнева Анна Леонидовна, 2023 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. A multiinstitutional survey of the Wiskott-Aldrich syndrome / K. E. Sullivan, C. A. Mullen, R. M. Blaese, J. A. Winkelstein // The Journal of pediatrics. - 1994. - Vol. 125 (6 Pt 1). - P. 876-885.

2. Успехи проведения трансплантации гемопоэтических стволовых клеток при синдроме Вискотта - Олдрича / Д. Н. Балашов, С. Н. Козловская,

C. А. Радыгина [и др.] // Педиатрия. - 2019. - Т. 98, № 3. - С. 54-59.

3. Excellent outcomes following hematopoietic cell transplantation for Wiskott-Aldrich syndrome: a PIDTC report / L. M. Burroughs, A. Petrovic, R. Brazauskas, [et al.] // Blood. - 2020. - Vol. 135, № 23 - P. 2094-2105.

4. Long-term outcome following hematopoietic stem-cell transplantation in Wiskott-Aldrich syndrome: collaborative study of the European Society for Immunodeficiencies and European Group for Blood and Marrow Transplantation / H. Ozsahin, M. Cavazzana-Calvo, L. D. Notarangelo [et al.] // Blood. - 2008. -Vol. 111, № 1. - P. 439-445.

5. One hundred percent survival after transplantation of 34 patients with Wiskott -Aldrich syndrome over 20 years / R. A. Elfeky, J. M. Furtado-Silva, R. Chiesa [et al.] // The Journal of allergy and clinical immunology. - 2018. - Vol. 142, № 5. -P. 1654-1656.e7.

6. Bleeding and splenectomy in Wiskott-Aldrich syndrome: A single-centre experience / E. Rivers, A. Worth, A. J. Thrasher, S. O. Burns // The journal of allergy and clinical immunology. In practice. - 2019. - Vol. 7, № 3. - P. 1042-1044.e1.

7. Eltrombopag Added to Standard Immunosuppression for Aplastic Anemia /

D. M. Townsley, P. Scheinberg, T. Winkler [et al.] // The New England journal of medicine. - 2017. - Vol. 376, № 16. - P. 1540-1550.

8. Pharmacodynamics-mediated drug disposition (PDMDD) and precursor pool lifespan model for single dose of romiplostim in healthy subjects / Y. M. Wang,

W. Krzyzanski, S. Doshi [et al.] // The AAPS journal. - 2010. - Vol. 12, № 4. -P. 729-740.

9. Wiskott, A. Familiarer, angeborener Morbus Werlhofii? / A. Wiskott // Monatsschr. Kinderheilkd. - 1937. - № 68. - P. 212-216.

10.Aldrich, R. A. Pedigree demonstrating a sex-linked recessive condition characterized by draining ears, eczematoid dermatitis and bloody diarrhea / R. A. Aldrich, A. G. Steinberg, D. C. Campbell // Pediatrics. - 1954. - № 13. -P. 133-139.

11.Shcherbina, A. Pathological events in platelets of Wiskott-Aldrich syndrome patients / A. Shcherbina, F. S. Rosen, E. Remold-O'Donnell // British journal of haematology. - 1999. - Vol. 106, № 4. - P. 875-883.

12.Deficiency in the Wiskott-Aldrich protein induces premature proplatelet formation and platelet production in the bone marrow compartment / S. Sabri, A. Foudi, S. Boukour [et al.] // Blood. - 2006. - Vol. 108, № 1. - P. 134-140.

13.Mechanisms of increased mitochondria-dependent necrosis in Wiskott-Aldrich syndrome platelets / S. I. Obydennyi, E. O. Artemenko, A. N. Sveshnikova [et al.] // Haematologica. - 2020. - Vol. 105, № 4. - P. 1095-1106.

14. Особенности внутриклеточной кальциевой сигнализации тромбоцитов при синдроме Вискотта - Олдрича / А. А. Мартьянов, Д. С. Морозова, А. Л. Хорева [и др.] // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2020. - № 1 (19). - P. 100-107.

15. Hosahalli Vasanna, S. Clinical Features, Cancer Biology, Transplant Approach and Other Integrated Management Strategies for Wiskott-Aldrich Syndrome / S. Hosahalli Vasanna, M. A. Pereda, J. Dalal // J. Multidiscip. Healthc. - 2021 Dec 23. - № 14. - P. 3497-3512.

16.Thrombopoietin Receptor Agonists: Ten Years Later / W. Ghanima, N. Cooper, F. Rodeghiero [et al.] // Haematologica. - 2019. - № 104. - P. 1112-1123.

17.Gonzalez-Porras, J. R. Eltrombopag in Immune Thrombocytopenia: Efficacy Review and Update on Drug Safety / J. R. Gonzalez-Porras, J. M. Bastida // Ther. Adv. Vaccines. - 2018. - Vol. 9. - P. 263-285.

18.Effects of eltrombopag on platelet count and platelet activation in Wiskott-Aldrich syndrome / X-linked thrombocytopenia / A. J. Gerrits, E. A. Leven, A. L. Frelinger [et al.] // Blood. - 2015. - Vol. 126, № 11. - P. 1367-1378.

19.Eltrombopag for the treatment of inherited thrombocytopenias: a phase II clinical trial / C. Zaninetti, P. Gresele, A. Bertomoro [et al.] // Haematologica. - 2020 Mar. - № 3 (105). - P. 820-828.

20.Safety and efficacy of long-term treatment of chronic/persistent ITP with eltrombopag: final results of the EXTEND study / R. S. M. Wong, M. N. Saleh, A. Khelif [et al.] // Blood. - 2017. - Vol. 130, № 23. - P. 2527-2536.

21.Primary Immunodeficiencies in Russia: Data From the National Registry / A. A. Mukhina, N. B. Kuzmenko, Y. A. Rodina [et al.] // Frontiers Immunollogy.

- 2020. - Vol. 11. - P. 1491.

22.Derry, J. M. Isolation of a novel gene mutated in Wiskott-Aldrich syndrome / J. M. Derry, H. D. Ochs, U. Francke // Cell. - 1994. - Vol. 78, № 4. - P. 635-644.

23.The role of WASp in T cells and B cells / X. Sun, Y. Wei, P. P. Lee [et al.] // Cellular immunology. - 2019 - Vol. 341. - P. 103919.

24.Kramer, D. A. WASP family proteins: Molecular mechanisms and implications in human disease / D. A. Kramer, H. K. Piper, B. Chen // European journal of cell biology. - 2022. - Vol. 101, № 3. - P. 151244.

25.Structure of the N-WASP EVH1 domain-WIP complex: insight into the molecular basis of Wiskott-Aldrich Syndrome / B. F. Volkman, K. E. Prehoda, J. A. Scott [et al.] // Cell. - 2002. - Vol. 111, № 4. - P. 565-576.

26.Wiskott-Aldrich Syndrome Protein: Roles in Signal Transduction in T Cells / J. Ngoenkam, P. Paensuwan, P. Wipa [et al.] // Frontiers in cell and developmental biology. - 2021. - Vol. 9. - P. 674572.

27.Matalon, O. Wiskott-Aldrich syndrome protein-dynamic regulation of actin homeostasis: from activation through function and signal termination in T lymphocytes / O. Matalon, B. Reicher, M. Barda-Saad // Immunological reviews.

- 2013. - Vol. 256, № 1. - P. 10-29.

28.Dynamic nuclear actin assembly by Arp2/3 complex and a baculovirus WASP-like protein / E. D. Goley, T. Ohkawa, J. Mancuso [et al.] // Science (New York, N.Y.). - 2006. - Vol. 314, № 5798. - P. 464-467.

29.Signal Integration during T Lymphocyte Activation and Function: Lessons from the Wiskott-Aldrich Syndrome / V. Cotta-de-Almeida, L. Dupré, D. Guipouy, Z. Vasconcelos // Frontiers in immunology. - 2015 - Vol. 6. - P. 47.

30.Massaad, M. J. Wiskott-Aldrich syndrome: a comprehensive review / M. J. Massaad, N. Ramesh, R. S. Geha //Annals of the New York Academy of Sciences. - 2013. - Vol. 1285. - P. 26-43.

31.Wiskott Aldrich syndrome protein (WASP) and N-WASP are critical for T cell development / V. Cotta-de-Almeida, L. Westerberg, M. H. Maillard [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2007. - Vol. 104, № 39. - P. 15424-15429.

32.Nuclear role of WASp in the pathogenesis of dysregulated TH1 immunity in human Wiskott-Aldrich syndrome / M. D. Taylor, S. Sadhukhan, P. Kottangada [et al.] // Science translational medicine. - 2010. - Vol. 2, № 37. - P. 37-44.

33.B cell-intrinsic deficiency of the Wiskott-Aldrich syndrome protein (WASp) causes severe abnormalities of the peripheral B-cell compartment in mice / M. Recher, S. O. Burns, M. A. de la Fuente [et al.] // Blood. - 2012. - Vol. 119, № 12, - P. 2819-2828.

34.Wiskott-Aldrich Syndrome protein deficiency perturbs the homeostasis of B-cell compartment in human / M. C. Castiello, M. Bosticardo, F. Pala [et al.] // Journal of autoimmunity. - 2014. - Vol. 50, № 100. - P. 42-50.

35.Phenotypic perturbation of B cells in the Wiskott-Aldrich syndrome / J. Y. Park, A. Shcherbina, F. S. Rosen [et al.] // Clinical and experimental immunology. -2005. - Vol. 139, № 2. - P. 297-305.

36.Molecular and phenotypic abnormalities of B lymphocytes in patients with Wiskott-Aldrich syndrome / K. L. Simon, S. M. Anderson, E. K. [et al.] // The Journal of allergy and clinical immunology. - 2014. - Vol. 133, № 3. - P. 896-899.e4.

37.Wiskott-Aldrich syndrome protein deficiency leads to reduced B-cell adhesion, migration, and homing, and a delayed humoral immune response / L. Westerberg, M. Larsson, S. J. Hardy [et al.] // Blood. - 2005. - Vol. 105, № 3. - P. 1144-1152.

38.Notarangelo, L. D. Wiskott-Aldrich syndrome: another piece in the puzzle / L. D. Notarangelo, L. Mori // Clinical and experimental immunology. - 2005. -Vol. 139, № 2. - P. 173-175.

39.Candotti, F. Clinical Manifestations and Pathophysiological Mechanisms of the Wiskott-Aldrich Syndrome / F. Candotti // Journal of clinical immunology. - 2018.

- Vol. 38, № 1. - P. 13-27.

40.Age-Dependent Defects of Regulatory B Cells in Wiskott-Aldrich Syndrome Gene Knockout Mice / T. Yokoyama, A. Yoshizaki, K. L. Simon [et al.] // PloS one. -2015 - Vol. 10, № 10. - P. e0139729.

41.Exacerbated experimental arthritis in Wiskott-Aldrich syndrome protein deficiency: modulatory role of regulatory B cells / G. Bouma, N. A. Carter, M. Recher [et al.] // European journal of immunology. - 2014. - Vol. 44, № 9. -P.2692-2702.

42.Autoimmunity in Wiskott-Aldrich syndrome: risk factors, clinical features, and outcome in a single-center cohort of 55 patients / S. Dupuis-Girod, J. Medioni, E. Haddad [et al.] // Pediatrics. - 2003. - Vol. 111 (5 Pt 1). - P. e622-e627.

43.Two novel activating mutations in the Wiskott-Aldrich syndrome protein result in congenital neutropenia / P. J. Ancliff, M. P. Blundell, G. O. Cory [et al.] // Blood.

- 2006. - Vol. 108, № 7. - P. 2182-2189.

44.Impaired integrin-dependent function in Wiskott-Aldrich syndrome protein-deficient murine and human neutrophils / H. Zhang, U. Y. Schaff, C. E. Green [et al.] // Immunity. - 2006. - Vol. 25, № 2. - P. 285-295.

45.Reduced type I interferon production by dendritic cells and weakened antiviral immunity in patients with Wiskott-Aldrich syndrome protein deficiency / P. A. Lang, N. Shaabani, S. Borkens [et al.] // The Journal of allergy and clinical immunology. - 2013. - Vol. 131, № 3. - P. 815-824.

46.Cytoskeletal remodeling mediated by WASp in dendritic cells is necessary for normal immune synapse formation and T-cell priming / G. Bouma, A. Mendoza-Naranjo, M. P. Blundell [et al.] // Blood. - 2011. - Vol. 118, № 9. - P. 2492-2501.

47.Wiskott-Aldrich syndrome gene mutations modulate cancer susceptibility in the p53± murine model / M. Keszei, J. S. Kritikou, D. Sandfort [et al.] // Oncoimmunology. - 2018. - Vol. 7, № 9. - P. e1468954.

48.Wiskott-Aldrich syndrome protein is required for NK cell cytotoxicity and colocalizes with actin to NK cell-activating immunologic synapses / J. S. Orange, N. Ramesh, E. Remold-O'Donnell [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2002. - Vol. 99, № 17. - P. 1135111356.

49. IL-2 induces a WAVE2-dependent pathway for actin reorganization that enables WASp-independent human NK cell function / J. S. Orange, S. Roy-Ghanta, E. M. Mace [et al.] // The Journal of clinical investigation. - 2011. - Vol. 121, № 4. - P. 1535-1548.

50.Constitutive activation of WASp leads to abnormal cytotoxic cells with increased granzyme B and degranulation response to target cells / J. S. Kritikou, M. M. Oliveira, J. Record [et al.] // JCI insight. - 2021. - Vol. 6, № 6. - P. e140273.

51.Astrakhan, A. Wiskott-Aldrich syndrome protein is required for homeostasis and function of invariant NKT cells / A. Astrakhan, H. D. Ochs, D. J. Rawlings // Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950). - 2009. - Vol. 182, № 12. -P. 7370-7380.

52.The Wiskott-Aldrich syndrome protein is required for iNKT cell maturation and function / M. Locci, E. Draghici, F. Marangoni [et al.] // The Journal of experimental medicine. - 2009. - Vol. 20634. - P. 735-742.

53.Wiskott-Aldrich syndrome protein is necessary for efficient IgG-mediated phagocytosis / R. Lorenzi, P. M. Brickell, D. R. Katz [et al.] // Blood - 2000 -Vol. 95№9, - P. 2943-2946.

54.Megakaryocytes assemble podosomes that degrade matrix and protrude through basement membrane / H. Schachtner, S. D. Calaminus, A. Sinclair [et al.] // Blood. - 2013. - Vol. 121, № 13. - P. 2542-2552.

55.Platelet actin nodules are podosome-like structures dependent on Wiskott-Aldrich syndrome protein and ARP2/3 complex / N. S. Poulter, A. Y. Pollitt, A. Davies [et al.] // Nature communications. - 2015. - Vol. 6. - P. 7254.

56.Wiskott-Aldrich syndrome iPS cells produce megakaryocytes with defects in cytoskeletal rearrangement and proplatelet formation / P. Ingrungruanglert, P. Amarinthnukrowh, R. Rungsiwiwut [et al.]. // Thrombosis and haemostasis. -2015. - Vol. 113, № 4. - P. 792-805.

57.Tablin, F. Blood platelet formation in vitro. The role of the cytoskeleton in megakaryocyte fragmentation / F. Tablin, M. Castro, R. M. Leven // Journal of cell science. - 1990. - Vol. 97 (Pt 1). - P. 59-70.

58.Sokolic, R. Assessment of Immature Platelet Fraction in the Diagnosis of Wiskott-Aldrich Syndrome / R. Sokolic, N. Oden, F. Candotti // Frontiers in pediatrics. -2015. - Vol. 3. - P. 49.

59.Assessment of an immature platelet fraction (IPF) in peripheral thrombocytopenia / C. Briggs, S. Kunka, D. Hart [et al.] // British journal of haematology. - 2004. -Vol. 126, № 1. - P. 93-99.

60.Immature platelet fraction related parameters in the differential diagnosis of thrombocytopenia / J. Li, Y. Li, J. Ouyang [et al.] // Platelets. - 2020. - Vol. 31, № 6. - P. 771-776.

61.Wiskott-Aldrich syndrome: qualitative platelet defects and short platelet survival / K. A. Gröttum, T. Hovig, H. Holmsen [et al.] // British journal of haematology. -1969. - Vol. 17, № 4. - P. 373-388.

62.Splenectomy in the management of the thrombocytopenia of the Wiskott-Aldrich syndrome / L. G. Lum, D. G. Tubergen, L. Corash, R. M. Blaese // The New England journal of medicine. - 1980. - Vol. 302, № 16. - P. 892-896.

63.Strom, T. S. The thrombocytopenia of WAS: a familial form of ITP? / T. S. Strom // Immunologic research. - 2009. - Vol. 44, № 1-3. - P. 42-53.

64.Antiplatelet antibodies in WASP(-) mice correlate with evidence of increased in vivo platelet consumption / B. M. Marathe, A. Prislovsky, A. Astrakhan [et al.] // Experimental hematology. - 2009. - Vol. 37, № 11. - P. 1353-1363.

65.Characteristics and outcome of early-onset, severe forms of Wiskott-Aldrich syndrome / N. Mahlaoui, I. Pellier, C. Mignot [et al.] // Blood. - 2013. - Vol. 121, № 9. - P. 1510-1516.

66.Autonomous role of Wiskott-Aldrich syndrome platelet deficiency in inducing autoimmunity and inflammation / L. Sereni, M. C. Castiello, F. Marangoni [et al.] // The Journal of allergy and clinical immunology. - 2018. - Vol. 142, № 4. -P. 1272-1284.

67.Артеменко, Е. О. Программируемая клеточная смерть тромбоцитов при их сверхактивации / Е. О. Артеменко, А. Н. Свешникова, М. А. Пантелеев // Онкогематология. - 2014. - № 3. - P. 63-66.

68.Sveshnikova, A. N. Compartmentalized calcium signaling triggers subpopulation formation upon platelet activation through PAR1 / A. N. Sveshnikova, F. I. Ataullakhanov, M. A. Panteleev // Molecular bioSystems. - 2015. - Vol. 11, № 4. - P. 1052-1060.

69. Dynamics of calcium spiking, mitochondrial collapse and phosphatidylserine exposure in platelet subpopulations during activation / S. I. Obydennyi, A. N. Sveshnikova, F. I. Ataullakhanov, M. A. Panteleev // Journal of thrombosis and haemostasis. - 2016. - Vol. 14, № 9. - P. 1867-81.

70.Jackson, S. P. Procoagulant platelets: are they necrotic? / S. P. Jackson, S. M. Schoenwaelder // Blood. - 2010. - Vol. 116, № 12. - P. 2011-2018.

71.Flow cytometric analysis of platelets from children with the Wiskott-Aldrich syndrome reveals defects in platelet development, activation and structure / J. W. Semple, K. A. Siminovitch, M. Mody [et al.] // British journal of haematology. - 1997. - Vol. 97, № 4. - P. 747-754.

72.X-linked thrombocytopenia (XLT) due to WAS mutations: clinical characteristics, long-term outcome, and treatment options / M. H. Albert, T. C. Bittner, S. Nonoyama [et al.] // Blood. - 2010. - Vol. 115, № 16. - P. 3231-3238.

73.Defective Th1 cytokine gene transcription in CD4+ and CD8+ T cells from Wiskott-Aldrich syndrome patients / S. Trifari, G. Sitia, A. Aiuti [et al.] // Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950). - 2006. - Vol. 177, № 10. - P. 7451-7461.

74.Shcherbina, A. High incidence of lymphomas in a subgroup of Wiskott-Aldrich syndrome patients / A. Shcherbina, F. Candotti, F. S. Rosen, E. Remold-O'Donnell // British journal of haematology. - 2003. - Vol. 121, № 3. - P. 529-530.

75.Wiskott-Aldrich syndrome protein regulates autophagy and inflammasome activity in innate immune cells / P. P. Lee, D. Lobato-Márquez, N. Pramanik [et al.] // Nature communications. - 2017. - Vol. 8, № 1. - P. 1576.

76.Wiskott Aldrich syndrome protein regulates non-selective autophagy and mitochondrial homeostasis in human myeloid cells / E. Rivers, R. Rai, J. Lötscher [et al.] // eLife. - 2020. - Vol. 9. - P. e55547.

77.A novel genomic inversion in Wiskott-Aldrich-associated autoinflammation / I. Brigida, S. Scaramuzza, D. Lazarevic [et al.] // The Journal of allergy and clinical immunology. - 2016. - Vol. 138, № 2. - P. 619-622.e7.

78.IL-18: A potential inflammation biomarker in Wiskott-Aldrich syndrome / E. Rivers, Y. Hong, M. Bajaj-Elliott [et al.] // European journal of immunology. -2021. - Vol. 51. № 5. - P. 1285-1288.

79.Wiskott-Aldrich syndrome / X-linked thrombocytopenia: WASP gene mutations, protein expression, and phenotype / Q. Zhu, C. Watanabe, T. Liu [et al.] // Blood.

- 1997. - Vol. 90, № 7. - P. 2680-2689.

80.Variable expression of WASP in B cell lines of Wiskott-Aldrich syndrome patients / E. Remold-O'Donnell, J. Cooley, A. Shcherbina [et al.] // Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950). - 1997. - № 9 (158). - P. 4021-4025.

81. Lemahieu, V. Novel mutations in the Wiskott-Aldrich syndrome protein gene and their effects on transcriptional, translational, and clinical phenotypes / V. Lemahieu, J. M. Gastier, U. Francke // Human mutation. - 1999. - Vol. 14, № 1.

- P. 54-66.

82. High prevalence of nonsense, frame shift, and splice-site mutations in 16 patients with full-blown Wiskott-Aldrich syndrome / G. S. Wengler, L. D. Notarangelo, S. Berardelli [et al.] // Blood. - 1995. - Vol. 86, № 10. - P. 3648-3654.

83.Clinical course of patients with WASP gene mutations / K. Imai, T. Morio, Y. Zhu [et al.] // Blood. - 2004. - Vol. 103, № 2. - P. 456-464.

84.Особенности течения синдрома Вискотта - Олдрича в зависимости от мутаций гена WASP / Н. А. Дидковский, С. А. Крынский, И. К. Малашенкова [и др.] // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2016. - № 3 (15). - P. 40-45.

85.Thrasher, A. J. New insights into the biology of Wiskott-Aldrich syndrome (WAS) / A. J. Thrasher // Hematology. American Society of Hematology. Education Program. - 2009. - P. 132-138.

86.Wiskott-Aldrich syndrome / X-linked thrombocytopenia in China: Clinical characteristic and genotype-phenotype correlation / D. W. Liu, Z. Y. Zhang, Q. Zhao [et al.] // Pediatric blood & cancer. - 2015. - Vol. 62, № 9. - P. 16011608.

87.Scanning of the Wiskott-Aldrich syndrome (WAS) gene: identification of 18 novel alterations including a possible mutation hotspot at Arg86 resulting in thrombocytopenia, a mild WAS phenotype / S. P. Kwan, T. L. Hagemann, R. M. Blaese [et al.] // Human molecular genetics. - 1995. - Vol. 4, № 10. - P. 1995-1998.

88.Wiskott-Aldrich syndrome: no strict genotype-phenotype correlations but clustering of missense mutations in the amino-terminal part of the WASP gene product / D. Schindelhauer, M. Weiss, H. Hellebrand [et al.] // Human genetics. -1996. - Vol. 98, № 1. - P. 68-76.

89.Identification of WASP mutations, mutation hotspots and genotype-phenotype disparities in 24 patients with the Wiskott-Aldrich syndrome / W. L. Greer, A. Shehabeldin, J. Schulman [et al.] // Human genetics. - 1996. - Vol. 98, № 6. -P. 685-690.

90.When WAS Gene Diagnosis Is Needed: Seeking Clues Through Comparison Between Patients With Wiskott-Aldrich Syndrome and Idiopathic Thrombocytopenic Purpura / Y. Y. Jin, J. Wu, T. X. Chen, J. Chen // Frontiers in immunology. - 2019. - Vol. 10. - P. 1549.

91.Mutations of the Wiskott-Aldrich Syndrome Protein (WASP): hotspots, effect on transcription, and translation and phenotype/genotype correlation / Y. Jin, C. Mazza, J. R. Christie [et al.] // Blood. - 2004. - Vol. 104, № 13. - P. 40104019.

92.The Wiskott-Aldrich syndrome: from genotype-phenotype correlation to treatment / D. Moratto, S. Giliani, L. D. Notarangelo [et al.] // Expert review of clinical immunology. - 2007. - Vol. 3, № 5. - P. 813-824.

93.Lutskiy, M. I. Genotype-proteotype linkage in the Wiskott-Aldrich syndrome / M. I. Lutskiy, F. S. Rosen, E. Remold-O'Donnell // Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950). - 2005. - Vol. 175, № 2. - P. 1329-1336.

94.The Wiskott-Aldrich syndrome protein acts downstream of CD2 and the CD2AP and PSTPIP1 adaptors to promote formation of the immunological synapse / K. Badour, J. Zhang, F. Shi [et al.] // Immunity. - 2003. - Vol. 18, № 1. - P. 141154.

95.Long-term outcome and lineage-specific chimerism in 194 patients with Wiskott-Aldrich syndrome treated by hematopoietic cell transplantation in the period 19802009: an international collaborative study / D. Moratto, S. Giliani, C. Bonfim [et al.] // Blood. - 2011. - Vol. 118. - P. 1675-1684.

96. Conditioning Regimen with Plerixafor Is Safe and Improves the Outcome of TCRaß+ and CD19+ Cell-Depleted Stem Cell Transplantation in Patients with Wiskott-Aldrich Syndrome / D. Balashov, A. Laberko, A. Shcherbina [et al.] // Biol. Blood Marrow Transplant. - 2018. - Vol. 24, № 7. - P. 1432-1440.

97.Bone-marrow transplantation in a patient with the Wiskott-Aldrich syndrome / F. H. Bach, R. J. Albertini, P. Joo [et al.] // Lancet (London, England). - 1968. - Vol. 2 (7583). - P. 1364-1366.

98.Stem cell transplantation for the Wiskott-Aldrich syndrome: a single-center experience confirms efficacy of matched unrelated donor transplantation / S. Y. Pai, D. DeMartiis [et al.] // Bone marrow transplantation. - 2006. - Vol. 38, № 10. - P. 671-679.

99.Impact of donor type on outcome of bone marrow transplantation for Wiskott -Aldrich syndrome: collaborative study of the International Bone Marrow Transplant Registry and the National Marrow Donor Program / A. H. Filipovich, J. V. Stone, S. C. Tomany [et al.] // Blood. - 2001. - Vol. 97, № 6. - P. 1598-1603.

100. Results and long-term outcome in 39 patients with Wiskott-Aldrich syndrome transplanted from HLA-matched and -mismatched donors / W. Friedrich, C. Schütz, A. Schulz [et al.] // Immunologic research. - 2009. -Vol. 44 (1-3). - P. 18-24.

101. Outcomes following hematopoietic cell transplantation for Wiskott-Aldrich syndrome / C. R. Shin, M. O. Kim, D. Li [et al.] // Bone marrow transplantation. -2012. - Vol. 47, № 11. - P. 1428-1435.

102. Wiskott-Aldrich syndrome: diagnosis, clinical and laboratory manifestations, and treatment / H. D. Ochs, A. H. Filipovich, P. Veys [et al.] // Biology of blood and marrow transplantation: journal of the American Society for Blood and Marrow Transplantation. - 2009. - Vol. 15 (1 Suppl.). - P. 84-90.

103. Применение плериксафора и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора в кондиционировании перед трансплантацией гемопоэтических стволовых клеток у пациентов с синдромом Вискотта - Олдрича / Д. Н., Балашов Е. И. Гутовская, С. Н. Козловская [и др.] // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2017. -№ 3 (16). - P. 55-58.

104. Stem-cell gene therapy for the Wiskott-Aldrich syndrome / K. Boztug, M. Schmidt, A. Schwarzer [et al.] // The New England journal of medicine. - 2010. - Vol. 363, № 20. - P. 1918-1927.

105. Gene therapy for Wiskott-Aldrich syndrome--long-term efficacy and genotoxicity / C. J. Braun, K. Boztug, A. Paruzynski [et al.] // Science translational medicine. - 2014. - Vol. 6, № 227. - P. 227ra33.

106. Lentiviral vector-mediated gene transfer in T cells from Wiskott-Aldrich syndrome patients leads to functional correction / L. Dupre, S. Trifari, A. Follenzi [et al.] // Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy.

- 2004. - Vol. 10, № 5. - P. 903-915.

107. Lentiviral gene therapy corrects platelet phenotype and function in patients with Wiskott-Aldrich syndrome / L. Sereni, M. C. Castiello, D. Di [et al.] // The Journal of allergy and clinical immunology. - 2019. - Vol. 144, № 3. - P. 825838.

108. Purification and characterization of thrombopoietin / T. Kato, K. Ogami, Y. Shimada [et al.] // Journal of biochemistry. - 1995. - Vol. 118, № 1. - P. 229236.

109. The Thrombopoietin Receptor: Structural Basis of Traffic and Activation by Ligand, Mutations, Agonists, and Mutated Calreticulin / L. N. Varghese, J. P. Defour, C. Pecquet, S. N. Constantinescu // Frontiers in endocrinology. -2017. - Vol. 8. - P. 59.

110.Kuter, D. J. Recombinant human thrombopoietin: basic biology and evaluation of clinical studies / D. J. Kuter, C. G. Begley // Blood. - 2002. - Vol. 100, № 10. -P. 3457-3469.

111. Clemons Bankston, P. New Small Molecule Drugs for Thrombocytopenia: Chemical, Pharmacological, and Therapeutic Use Considerations / P. Clemons Bankston, R. A. Al-Horani // International journal of molecular sciences. - 2019.

- Vol. 20, № 12. - P. 3013.

112. Kaushansky, K. Lineage-specific hematopoietic growth factors / K. Kaushansky // The New England journal of medicine. - 2006. - Vol. 354, № 19.

- P. 2034-2045.

113. In vitro senescence and apoptotic cell death of human megakaryocytes / G. Zauli, M. Vitale, E. Falcieri [et al.] // Blood. - 1997 - Vol. 90, № 6. - P. 22342243.

114. Autoantibody to c-Mpl (thrombopoietin receptor) in systemic lupus erythematosus: relationship to thrombocytopenia with megakaryocytic hypoplasia / M. Kuwana, Y. Okazaki, M. Kajihara [et al.] // Arthritis and rheumatism. - 2002.

- Vol. 46, № 8. - P. 2148-2159.

115. Kuter, D. J. The reciprocal relationship of thrombopoietin (c-Mpl ligand) to changes in the platelet mass during busulfan-induced thrombocytopenia in the rabbit / D. J. Kuter, R. D. Rosenberg. - PMID: 7742532 // Blood. - 1995 May 15.

- № 10 (85). - P. 2720-2730.

116. The Ashwell-Morell receptor regulates hepatic thrombopoietin production via JAK2-STAT3 signaling / R. Grozovsky, A. J. Begonja, K. Liu [et al.] // Nature medicine. - 2015. - Vol. 21, № 1. - P. 47-54.

117. Macrophage galactose lectin is critical for Kupffer cells to clear aged platelets / C. Deppermann, R. M. Kratofil, M. Peiseler [et al.] // The Journal of experimental medicine. - 2020. - Vol. 217, № 4. - P. e20190723.

118.Kuter, D. J. Thrombopoietin and thrombopoietin mimetics in the treatment of thrombocytopenia / D. J. Kuter // Annual review of medicine. - 2009. - Vol. 60. -P. 193-206.

119. de Graaf, C. A. Thrombopoietin and hematopoietic stem cells / C. A. de Graaf, D. Metcalf // Cell cycle (Georgetown, Tex.). - 2011. - Vol. 10, № 10. -P.1582-1589.

120. Li, J. Interaction of thrombopoietin with the platelet c-mpl receptor in plasma: binding, internalization, stability and pharmacokinetics / J. Li, Y. Xia, D. J. Kuter // British journal of haematology. - 1999 - Vol. 106, № 2. - P. 345356.

121. Применение ромиплостима при впервые выявленной иммунной тромбоцитопении у детей / Е. В. Сунцова, И. И. Чиквина, М. Н. Садовская [и

др.] // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. -2020. - № 1 (19). - P. 18-26.

122. Thrombocytopenia caused by the development of antibodies to thrombopoietin / J. Li, C. Yang, Y. Xia [et al.] // Blood. - 2001. - Vol. 98, № 12.

- P. 3241-3248.

123. Kuter, D. J. Biology and chemistry of thrombopoietic agents / D. J. Kuter // Seminars in hematology. - 2010. - Vol. 47, № 3. - P. 243-248.

124.Wang, B. Pharmacodynamics and pharmacokinetics of AMG 531, a novel thrombopoietin receptor ligand / B. Wang, J. L. Nichol, J. T. Sullivan // Clinical pharmacology and therapeutics. - 2004. - Vol. 76, № 6. - P. 628-638.

125. A Review of Romiplostim Mechanism of Action and Clinical Applicability / J. B. Bussel, G. Soff, A. Balduzzi [et al.] // Drug design, development and therapy.

- 2021. - Vol. 15. - P. 2243-2268.

126.Broudy, V. C. AMG531 stimulates megakaryopoiesis in vitro by binding to Mpl / V. C. Broudy, N. L. Lin // Cytokine. - 2004. - Vol. 25, № 2. - P. 52-60.

127. Thrombopoietin receptor agonist (TPO-RA) treatment raises platelet counts and reduces anti-platelet antibody levels in mice with immune thrombocytopenia (ITP) / R. Kapur, R. Aslam, E. R. Speck [et al.] // Platelets. - 2020. - Vol. 31, № 3. -P.399-402.

128. Revealing eltrombopag's promotion of human megakaryopoiesis through AKT/ERK-dependent pathway activation / C. A. Di Buduo, M. Currao, A. Pecci [et al.] // Haematologica. - 2016. - Vol. 101, № 12. - P. 1479-1488.

129.Effect of thrombopoietin receptor agonists on the apoptotic profile of platelets in patients with chronic immune thrombocytopenia / W. B. Mitchell, M. P. Pinheiro, N. Boulad [et al.] // American journal of hematology. - 2014. - Vol. 89, № 12. -P. E228-E234.

130. NMR structural studies of interactions of a small, nonpeptidyl Tpo mimic with the thrombopoietin receptor extracellular juxtamembrane and transmembrane domains / M. J. Kim, S. H. Park, S. J. Opella [et al.] // The Journal of biological chemistry. - 2007. - Vol. 282, № 19. - P. 14253-14261.

131. Kuter, D. J. The structure, function, and clinical use of the thrombopoietin receptor agonist avatrombopag / D. J. Kuter// Blood reviews. - 2022 - Vol. 53. -P.100909.

132. Safety and efficacy of eltrombopag for treatment of chronic immune thrombocytopenia: results of the long-term, open-label EXTEND study / M. N. Saleh, J. B. Bussel, G. Cheng [et al.] // Blood. - 2013. - Vol. 121, № 3. -P. 537-545.

133. Eltrombopag for management of chronic immune thrombocytopenia (RAISE): a 6-month, randomised, phase 3 study / G. Cheng, M. N. Saleh, C. Marcher [et al.] // Lancet. - 2011. - Vol. 377, № 9763. - P. 393-402.

134. Second-line treatments in children with immune thrombocytopenia: effect on platelet count and patient-centered outcomes / R. F. Grace, K. A. Shimano, R. Bhat [et al.] // American journal of hematology. - 2019. - Vol. 94, № 7. -P. 741-750.

135. Efficacy and safety of thrombopoietin receptor agonists in patients with primary immune thrombocytopenia: A systematic review and meta-analysis / L. Wang, Z. Gao, X. P. Chen [et al.] // Scientific reports. - 2016. - Vol. 6. -P. 39003.

136. González-Porras, J. R. Switching thrombopoietin receptor agonist treatments in patients with primary immune thrombocytopenia / J. R. González-Porras, B. Godeau, M. Carpenedo // Therapeutic advances in hematology. - 2019. -Vol. 10. - P. 2040620719837906.

137. Romiplostim or standard of care in patients with immune thrombocytopenia / D. J. Kuter, M. Rummel, R. Boccia [et al.] // The New England journal of medicine. - 2010. - Vol. 363, № 20. - P. 1889-1899.

138. Thrombopoietic agents for the treatment of persistent and chronic immune thrombocytopenia in children / K. Ramaswamy, L. Hsieh, E. Leven [et al.] // The Journal of pediatrics. - 2014. - Vol. 165, № 3. - P. 600-605.e4.

139. Rodeghiero, F. ITP and thrombosis: an intriguing association / F. Rodeghiero // Blood advances. - 2017. - Vol. 1, № 24. - P. 2280.

140. Function of eltrombopag-induced platelets compared to platelets from control patients with immune thrombocytopenia / J. Haselboeck, A. Kaider, I. Pabinger, S. Panzer // Thrombosis and haemostasis. - 2013. - Vol. 109, № 4. - P. 676-683.

141. Long-term safety and tolerability of romiplostim in patients with primary immune thrombocytopenia: a pooled analysis of 13 clinical trials / F. Rodeghiero, R. Stasi, A. Giagounidis [et al.] // European journal of haematology. - 2013. -Vol. 91, № 5. - P. 423-436.

142. The Wiskott-Aldrich syndrome and X-linked congenital thrombocytopenia are caused by mutations of the same gene / Q. Zhu, M. Zhang, R. M. Blaese [et al.] // Blood. - 1995 Nov 15. - № 10 (86). - P. 3797-3804.

143. Platelet transfusion: a clinical practice guideline from the AABB / R. M. Kaufman, B. Djulbegovic, T. Gernsheimer [et al.] // Annals of internal medicine. - 2015. - Vol. 162, № 3. - P. 205-213.

144. Разработка метода диагностики синдрома Вискотта - Олдрича путем оценки экспрессии белка WASP с использованием проточной цитофлуориметрии / Д. Е. Першин, О. Б. Лодоева, М. С. Фадеева [и др.]. - DOI 10.24287/1726-17082020-19-2-141-151 // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. - 2020. - № 2 (19). - P. 141-151.

145. Eltrombopag for children with chronic immune thrombocytopenia (PETIT2): a randomised, multicentre, placebo-controlled trial / J. D. Grainger, F. Locatelli, T. Chotsampancharoen [et al.] // Lancet (London, England). - 2015. - Vol. 386, № 10004. - P. 1649-1658.

146. Tsykunova, G. Avatrombopag for the Treatment of Adult Patients with Chronic Immune Thrombocytopenia (cITP): Focus on Patient Selection and Perspectives./ G. Tsykunova, W. Ghanima // Ther Clin Risk Manag. - 2022. - Vol. 18, - P. 273286.

147. Eltrombopag for the treatment of chronic idiopathic thrombocytopenic purpura / J. B. Bussel, G. Cheng, M. N. Saleh [et al.] // The New England journal of medicine. - 2007. - Vol. 357, № 22. - P. 2237-2247.

148. Eltrombopag for the treatment of children with persistent and chronic immune thrombocytopenia (PETIT): a randomised, multicentre, placebo-controlled study / J. B. Bussel, P. G. de Miguel, J. M. Despotovic [et al.] // The Lancet. Haematology.

- 2015. - Vol. 2, № 8. - P. e315-e325.

149. Update on romiplostim and eltrombopag indirect comparison / K. Cooper, J. Matcham, K. Helme, R. Akehurst // Int. J. Technol. Assess. - 2014. - № 30. -P. 129-130.

150. Treatment patterns and clinical outcomes in patients with chronic immune thrombocytopenia (ITP) switched to eltrombopag or romiplostim / D. J. Kuter, C. Macahilig, K. M. Grotzinger [et al.] // Int. J. Hematol. - 2015. - № 101. -P. 255-263.

151. The use of thrombopoietin-receptor agonists (TPO-RAs) in immune thrombocytopenia (ITP): a "real life" retrospective multicenter experience of the Rete Ematologica Pugliese (REP) / P. Mazza, C. Minoia, A. Melpignano [et al.] // Ann. Hematol. - 2016. - № 95. - P. 239-244.

152. Long-term treatment with romiplostim in patients with chronic immune thrombocytopenia: safety and efficacy / D. J. Kuter, J. B. Bussel, A. Newland [et al.] // Br. J. Haematol. - 2013. - Vol. 161, №3. - P. 411-23.

153. Characteristics, outcome, and response to therapy of multirefractory chronic immune thrombocytopenia / M. Mahevas, M. Gerfaud-Valentin, G. Moulis [et al.] // Blood. - 2016. - Vol. 128, №12. - P. 1625-30.

154. Accelerated death of megakaryocytes from Wiskott-Aldrich syndrome patients / S. I. Obydennyi, S. A. Kuznetsova, O. S. Fedyanina [et al.]. - DOI 10.1111/bjh.18875. - PMID: 37221654 // Br. J. Haematol. - 2023 Aug. - № 3 (202). - P. 645-656.

155. Human thrombopoietin levels are high when thrombocytopenia is due to megakaryocyte deficiency and low when due to increased platelet destruction / R. V. Emmons, D. M. Reid, R. L. Cohen [et al.] // Blood. - 1996. - Vol. 87, № 10.

- P. 4068-4071.

156. Al-Samkari, H. Relative potency of the thrombopoietin receptor agonists eltrombopag, avatrombopag and romiplostim in a patient with chronic immune thrombocytopenia / H. Al-Samkari, D. J. Kuter // British journal of haematology. - 2018. - Vol. 183, № 2. - P. 168.

Приложение А

Анкета, предоставленная всем законным представителям пациентов при

включении в исследование

ИНФОРМАЦИЯ О ПАЦИЕНТЕ

ФИО пациента

Дата рождения

Возраст пациента на момент включения в исследование

Пол

Вес

Рост

Телефон

Адрес

E-mail

ИНФОРМАЦИЯ О ЗАБОЛЕВАНИИ

Группа исследования

Дата начала терапии аТПО-р

Кол-во тромбоцитов до терапии аТПО-р (х109/л)

Спленэктомия Да Дата / /

Нет

Ранее проводимая терапия Период лечения

Кортикостероиды Да Нет

ВВИГ Да Нет

Ритуксимаб Да Нет

Дата верификации диагноза Азатиоприн Да Нет

WAS СеллСепт Да Нет

/ / аТПО-р Да Нет

Другие

Проводимая терапия Дата начала

терапии

на настоящим момент

Кортикостероиды Да Нет / /

ВВИГ Да Нет / /

Ритуксимаб Да Нет / /

Азатиоприн Да Нет / /

СеллСепт Да Нет / /

аТПО-р Да Нет / /

Другие / /

Отметить ( V ) при наличии следующих симптомов.

1) Кожный геморрагический синдром

- Петехии

□ 1 р/нед. □ 1 р/мес. П 1 р/год другое

- Экхимозы

□ 1 р/нед. П 1 р/мес. П 1 р/год другое

- Гематомы

□ 1 р/нед. □ 1 р/мес. П 1 р/год другое

2) Носовые кровотечения

- Самостоятельно купируемые эпизоды кровотечения

□ 1 р/нед. П 1 р/мес. П 1 р/год другое

- Профузное трудно купируемое кровотечение,

Кровотечения потребовавшее госпитализации в стационар, трансфузии

(за последний год) компонентов крови

□ 1 р/нед. П 1 р/мес. П 1 р/год другое

3) Гастроинтестинальные кровотечения

- Гематомезис

□ 1 р/нед. □ 1 р/мес. П 1 р/год другое

- Мелена/гематохезия

□ 1 р/нед. П 1 р/мес. П 1 р/год другое

- Профузное трудно купируемое кровотечение,

потребовавшее госпитализации в стационар, трансфузии

компонентов крови

□ 1 р/нед. □ 1 р/мес. П 1 р/год другое

4) Внутричерепное кровотечение

П Эпидуральная гематома

П Субдуральная гематома

□ Субарахноидальное кровоизлияние

□ Внутримозговое кровоизлияние

5) Внутриглазное кровоизлияние

Ц Субконъюктивальное кровоизлияние

Ц Гифема

Ц Гемофтальм

Ц Ретинальное кровоизлияние

131

6) Гематурия

- микрогематурия

□ 1 р/нед. □ 1 р/мес. □ 1 р/год другое

- макрогематурия

□ 1 р/нед. □ 1 р/мес. □ 1 р/год другое

Тромботические/тромбоэмболические осложнения в анамнезе Да Нет

Известные факторы риска тромботические/тромбоэмболических осложнений Ц Дефицит антитромбина □ Лейденская мутация V фактора свертывания крови □ Другое Да Нет

Наличие злокачественных заболеваний системы крови □ ОЛЛ □ ОМЛ □ Лимфома Ходжкина □ МДС □ МПЗ □ Другое Да Нет

Наличие заболеваний печени П Вирусный гепатит Ц Аутоиммунный гепатит □ Другое Да Нет

Динамика геморрагического синдрома за период терапии (1-3-6-12 мес.)

Отметить ( V ) при наличии следующих симптомов, ( х ) - в случае отсутствия следующих симптомов.

1) Кожный геморрагический синдром - Петехии

□ 1 мес. □ 3 мес. □ 6 мес. □ 12 мес

- Экхимозы

□ 1 мес. □ 3 мес. □ 6 мес. □ 12 мес

- Гематомы

□ 1 мес. □ 3 мес. □ 6 мес. □ 12 мес

2) Носовые кровотечения

- Самостоятельно купируемые эпизоды кровотечения П 1 мес. □ 3 мес. Ц 6 мес. ЦЦ 12 мес.

- Профузное трудно купируемое кровотечение, потребовавшее госпитализации в стационар, трансфузии компонентов крови

□ 1 мес. □ 3 мес. □ 6 мес. ЦЦ 12 мес.

3) Гастроинтестинальные кровотечения

- Гематомезис

П 1 мес. □ 3 мес. □ 6 мес. G 12 мес.

- Мелена/гематохезия

□ 1 мес. □ 3 мес. 6 мес. О 12 мес.

- Профузное трудно купируемое кровотечение, потребовавшее госпитализации в стационар, трансфузии компонентов крови

□ 1 мес. □ 3 мес. 6 мес. G 12 мес.

4) Внутричерепное кровотечение

□ 1 мес. □ 3 мес. 6 мес. О 12 мес.

5) Внутриглазное кровоизлияние

□ 1 мес. □ 3 мес. 6 мес. G 12 мес.

6) Гематурия

П 1 мес. □ 3 мес. □ 6 мес. G 12 мес.

Наличие следующих симптомов за период терапии

Печеночная токсичность Да Нет

Ц Незначительное обратимое нарушение функциональных печеночных тестов □ Нарушение функциональных печеночных тестов (повышение АЛТ, АСТ более 3 верхних границ нормы в течение 4 недель), терапия прекращена. □ Другое

Тромботические/тромбоэмболические осложнения _ Да Нет

□ Венозный тромбоз □ Артериальный тромбоз □ Другое

Изменения со стороны костного мозга Да Нет

□ Ретикулиновый фиброз □ Коллагеновый фиброз □ Другое

Изменения со стороны органов зрения Да Нет

□ Катаракта Ц Ретинальное кровоизлияние □ Другое

Изменения со стороны ССС Да Нет

П Удлинение интервала ОТ на ЭКГ □ Другое

Изменения со стороны крови Нет Да

□ Анемия □ Нейтропения □ Эозинофилия □ Другое

Изменения со стороны нервной системы Да Нет

□ Головная боль □ Головокружение □ Бессонница □ Парестезии □ Другое

Изменения со стороны ЖКТ Да Нет

□ Тошнота □ Рвота □ Диарея □ Другое

Изменения со стороны кожи Да Нет

□ Зуд □ Сыпь □ Другое

Изменения со стороны скелетно-мышечной системы Да Нет

□ Артралгии □ Миалгии □ Другое

Местные реакции Да Нет

□ Гиперемия, боль, отек в месте инъекции □ Другое