Оптимизация восстановительного лечения пациентов с гормональнозависимыми атрофическими рубцами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Долгих Светлана Юрьевна

• Долгих Светлана Юрьевна
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Долгих Светлана Юрьевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Атрофические рубцы: вопросы эпидемиологии, этиологии и патогенеза

1.1.1. Эпидемиология и этиология атрофических рубцов

1.1.2. Генетика и эпигенетика формирования атрофических рубцов

1.1.3. Механизмы формирования атрофических рубцов

1.2. Классификация и клиническая картина атрофических рубцов

1.3. Гормональнозависимые атрофические рубцы

1.3.1. Эпидемиология и этиология стрий

1.3.2. Патофизиология гормональнозависимых рубцов

1.3.3. Клиническая картина гормональнозависимых атрофических рубцов

1.4. Методы коррекции гормональнозависимых атрофических рубцов

1.4.1. Топические методы терапии стрий

1.4.2. Малоинвазивные методы коррекции стрий

1.4.3. Аппаратные физиотерапевтические технологии

1.4.4. Лазерная терапия гормональнозависимых атрофических рубцов

1.4.5. Фотодинамическая терапия

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Исследование полиморфизма генов на 1 этапе исследования

2.2. Дизайн исследования

2.2.1. Критерии включения, не включения и исключения

2.2.2. Распределение по группам исследования

2.3. Клиническая характеристика пациентов с гормональными атрофическими рубцами

2.3.1. Методы терапии у пациентов с гормональными атрофическими рубцами

2.3.2. Клинические методы исследования у пациентов с гормональными атрофическими рубцами

2.3.3. Специальные методы исследования у пациентов с гормональнозависимыми атрофическими рубцами

2.4. Статистические методы, используемые в работе

ГЛАВА 3. АНАЛИЗ ИССЛЕДОВАНИЯ ФАКТОРОВ РИСКА ФОРМИРОВАНИЯ АТРОФИЧЕСКИХ ГОРМОНАЛЬНОЗАВИСИМЫХ РУБЦОВ

3.1. Анализ данных генотипирования

ГЛАВА 4. АНАЛИЗ ЭФФЕКТИВНОСТИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО КОМПЛЕКСА У ПАЦИЕНТОВ С АТРОФИЧЕСКИМИ ГОРМОНАЛЬНОЗАВИСИМЫМИ РУБЦАМИ: РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИЧЕСКИХ МЕТОДОВ

4.1. Анализ данных шкалы ВАШ у пациентов с атрофическими гормональнозависимыми рубцами

4.2. Анализ данных шкалы SDSS

4.3. Анализ данных индекса ДИКЖ у пациентов с атрофическими

гормональнозависимыми рубцами

ГЛАВА 5. АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ СПЕЦИАЛЬНЫХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ У ПАЦИЕНТОВ С АТРОФИЧЕСКИМИ ГОРМОНАЛЬНОЗАВИСИМЫМИ РУБЦАМИ

5.1. Результаты кутометрии

5.2. Результаты исследования гемодинамики на уровне микроциркуляторного

русла

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРИМЕРЫ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимизация восстановительного лечения пациентов с гормональнозависимыми атрофическими рубцами»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы исследования

Атрофический рубец (АР) возникает в результате воздействия эндогенных и экзогенных факторов и проявляется нарушением структуры и истончением эпидермально-дермального и подкожного жирового слоя кожи

[19, 22].

Несмотря на достаточно многочисленные исследования, отсутствие унифицированного подхода к проблеме лечения атрофических рубцов, подробной клинико-морфологической классификации приводит к тому, что врачи эмпирически выбирают тактику ведения пациентов, что обуславливает ненадежность или даже отсутствие эффекта. Необходимость проведения многочисленных повторных курсов терапии приводит к значительным экономическим затратам [4, 17].

Для решения вопроса о способах лечения атрофических рубцов, определяющее значение имеет их клиническая разновидность, срок существования, так как различные фенотипы АР требуют разных методов терапии и их методологии [6, 15]. В клинической практике наиболее часто из атрофических рубцов встречаются АР постакне и гормональнозависимые АР (стрии) [24].

Стрии (Striae distensae), широко известные как растяжки, представляют собой видимые линейные атрофические рубцы. Стрии впервые были описаны в медицинской литературе Тройзье и Менетрие в 1829 году. В 1936 году Нарделли назвал эти поражения атрофическими стриями [136]. Они вдвое чаще наблюдаются у женщин и встречаются в возрастной группе от 5 до 50 лет [106]. Стрии достаточно широко распространены и часто вызывают отрицательное влияние на психоэмоциональное состояние пациентов.

Стрии обычно развиваются при различных физиологических состояниях, таких как беременность, всплеск роста в период полового созревания или быстрое изменение пропорций определенных частей тела, например, у штангистов, при ожирении или, наоборот, потере веса [41]. Они также наблюдаются при патологических состояниях с гиперкортицизмом, например, сииндром Кушинга [147] и генетических нарушениях, таких как синдром Марфана [33]. Стрии иногда могут возникать как побочный эффект на лекарственные препараты, к которым можно отнести как местную, так и системную терапию кортикостероидами [128] и ингибиторами антиретровирусной протеазы (индинавир) [58]. Таким образом, стрии являются многофакторным заболеванием, и его точный этиопатогенез все еще остается не до конца изученным. Первичная патология заключается в измененном каркасе соединительной ткани дермы с участием компонентов внеклеточного матрикса (ВКМ), а именно фибриллина, эластина, фибронектина и коллагена [163]. Так для стрий характерны следующие изменения: эпидермис тонкий с потерей кожных сосочков и истончением сетчатого слоя, в дерме отмечается снижение компонентов внеклеточного матрикса, коллагена, фибронектина, фибриллина и эластина [150]. В норме матрикс дермы состоит из переплетенных коллагена и эластина [159], при этом коллагеновые фибриллы собраны в плотные пучки, обеспечивающие тургор кожи [169], а эластичные волокна обеспечивают эластичность кожи [169]. При развитии стрий пучки коллагена расходятся, а коллагеновые фибриллы не образуют пучков, эластичные волокна разрушаются. Стрии возникают в результате чрезмерного механического растяжения кожи до точки разрыва в дерме, при этом фибробласты не способны адекватно синтезировать компоненты внеклеточного матрикса [119], что приводит к снижению фибронектина и проколлагена типа I и типа III [90]. Клинически заболевание проходит две стадии: начальную эритематозную, воспалительную (striae rubrae, красные стрии) и позднюю, атрофическую (striae albae, белые стрии) [54].

Стрии прежде всего являются эстетическим дефектом и могут значительно снижать качество жизни. В ряде случаев стрии самостоятельно регрессируют, в большей степени это касается стрий у подростков с сахарным диабетом [106], а также гормональнозависимых атрофических рубцов, вызванных приемом кортикостероидов. Однако в подавляющем большинстве случаев, стрии носят стойкий характер и требуют терапии.

Лечение пациентов с данной патологией связано с определенными трудностями и представляет сложность для практических врачей. В связи с этим очень важно понимать механизмы действия различных терапевтических методов, выбирать наиболее эффективные и обеспечивать правильное консультирование пациентов для оптимизации результатов лечения [10.].

Ведущими факторами при выборе метода терапии атрофических рубцов являются высокая эффективность, малая травматичность, приемлемый профиль безопасности.

Степень разработанности темы

На сегодняшний день основными теориями патогенеза стрий являются следующие: механическая - АР, как следствие чрезмерного растяжения кожи, гормональная - повышение экспрессии генов к рецепторам различных гормонов и генетическая - стрии, как следствие врожденных структурных нарушений формирования эпидермально-дермальных структур кожи [36]. Предполагается, что АР-стрии возникают вследствие воздействия различных триггерных факторов в результате начальной воспалительной реакции, разрушающей коллаген и эластические волокна с последующей регенерацией коллагена и эластических волокон в направлении растяжения тканей [56].

За генетическую теорию свидетельствуют следующие данные: описаны семейные случаи возникговения АР[115], а также они наблюдаются у монозиготных близнецов и при синдромах Элерса-Данлоса, Марфана и эктодермальной дисплазии [55]. Результаты полногеномного анализа

ассоциаций подтверждают гипотезу о том, что вариации в компоненте эластических волокон и ВКМ предрасполагают к развитию стрий [163].

В ряде исследований была показана роль экспрессии эстрогеновых рецепторов (ER), рецепторов андрогенов (AR) и рецепторов глюкокортикоидов (GR) при стриях. Кордейро и др. [179] обнаружили в 2,2 раза больше ER, в 1,8 раза больше AR и в 1,7 раза больше GR в образцах стрий по сравнению с нормальной кожей [36]. Эти результаты были подтверждены другими исследованиями, однако одно исследование показало снижение экспрессии ER при стриях, несмотря на наличие повышенной экспрессии как AR, так и GR. Экспрессия гормональных рецепторов увеличивается при определенных условиях, что позволяет предположить, что механическое растяжение кожи может способствовать повышению активности рецепторов гормонов, что влияет на метаболизм внеклеточного матрикса и вызывает формирование стрий. Это может быть связью между гормональной и механической теорией [165].

Лазеры - наиболее применяемый метод лечения атрофических рубцов вне зависимости от фенотипа. Используются традиционные абляционные лазеры, которые вызывают эпидермальный и дермальный некроз, и не инвазивные неабляционные лазеры, которые нацелены на дерму и оставляют эпидермис нетронутым. Фракционная лазерная шлифовка активно используется в косметологии, данный метод основан на доставке энергии через микротермические зоны в эпидермально-дермальные слои [111]. Каждый из этих лазерных методов имеет различные риски побочных эффектов, время реабилитации и эффективность в зависимости от фенотипа АР [9].

В последние годы резко возросло количество минимально инвазивных нехирургических процедур и технологий, которые предлагают минимальное время реабилитации, что приводит к повышению приверженности пациентов. Основным принципом, на котором основаны эти методы лечения, является индукция контролируемого воспаления в дерме, что приводит к

стимуляции неоколлагенеза за счет рекрутирования фибробластов. Чтобы быть эффективными при стриях, помимо неоколлагенеза, эти методы должны также уменьшать эритему при красных рубцах и улучшать пигментацию при белых рубцах. Различные методы лечения, используемые для терапии стрий включают: абляционный фракционный CO2 10 600 нм, неабляционный фракционный Er:YAG 1540 нм, неабляционный диодный лазер 1450 нм, Nd:YAG лазер1064 нм, импульсный лазер на красителе 585 нм, эксимерный лазер 308 нм и интенсивный импульсный свет, комбинированную ультрафиолетовую терапию или абляционный/неабляционный, нефракционный/фракционный радиочастотный микроигольчатый метод, гальванопунктуру, карбокситерапию, микродермабразию, применение плазмы, обогащенной тромбоцитами (PRP), химический пилинг.

Аппаратные технологии при гормональнозависимых рубцах играют ведущую роль. В исследовании, при сравнении эффективности фракционного CO2 лазера и микроигольчатой радиочастотной терапии, был показан сопоставимый клинический результат при всех фенотипах стрий [148]. В другом исследовании была показана сопоставимая эффективность и безопасность неабляционного фракционного эрбиевого лазера (1565-нм) и пикосекундного фракционного Nd:YAG лазера (1064/532 нм) в лечении белых стрий [181]. Улучшение отмечалось у 26%-50% пациентов через 3 месяца после третьей процедуры.

По данным ряда авторов Nd:YAG лазер с длиной волны 1064 нм обладает умеренной эффективностью при красных стриях и низко эффективен при белых стриях, в других исследованиях данный лазер показал высокую эффективность у 55% пациентов [76]. В ряде исследований было выявлено отсутствие значимого эффекта на фоне терапии Er: Glass с длиной волны1410-, 1450-, 1540- и 1550-нм [155]. Учитывая столь противоречивые данные, актуальным является дальнейшее изучение эффективности лазерной терапии, в том числе в составе комплексной терапии.

Так в исследовании с участием 33 пациенток сравнивали эффективность фракционного СО2 лазера и микронидлинга, которая составила 76% и 55% соответственно [124]. При этом поствоспалительная гиперпигментация, как осложнение фракционного СО2-лазера, отмечалась у 33% пациентов. Авторы сделали вывод, что микронидлинг - эффективный, безопасный метод терапии стрий, но фракционный С02-лазер более эффективен и может быть предоставлен в качестве первой линии лечения [149]. Еще в одном исследовании микронидлинг оценивался по сравнению с фракционированным С02-лазером и была выявлена сопоставимая эффективность при более высоком удовлетворении пациентов после лазерной терапии [49].

Рандомизированное исследование продемонстрировало эффективность комбинированного применения фракционной биполярной RF-терапии и фракционного СО2 лазера [122], инфракрасной (ИК) световой терапии и RF-терапии [79], фракционного С02 лазера с импульсным лазером на красителе [123].

В систематическом обзоре и сетевом метаанализе из 14 исследований (651 пациент) сравнивались клиническая эффективность и удовлетворенность пациентов микродермабразией, третиноином для местного применения, неабляционным эрбиевым лазером, фракционным СО2 лазером, PRP, микродермабразией, IPL, микронидлингом, карбокситерапией, биполярной радиочастотой было показано, что комбинированные методы имеют преимущество [107]. Таким образом, для клинической практики наиболее перспективным является разработка терапевтических комплексов, однако многие вопросы комбинированной терапии остаются открытыми, что определило цель и задачи настоящего исследования.

Цель исследования

Оптимизация терапии пациентов с гормональнозависимыми атрофическими рубцами длительностью существования более 1 года с помощью комплексного применения фракционной аблятивной лазерной терапии и фотодинамической терапии с топическим фотосенсибилизатором хлорин е6.

Задачи исследования

1. Провести анализ факторов, повышающих риск формирования гормональнозависимых атрофических рубцов с помощью изучения полиморфизма генов эстрогенового рецептора - 1, матриксной металлопротеиназы 3 типа и COL1a1.

2. Изучить влияние комплексного применения фракционной аблятивной лазерной терапии и фотодинамической терапии с топическим фотосенсибилизатором хлорин е6 на клинические симптомы гормональнозависимых атрофических рубцов длительностью существования более 1 года с учетом динамики показателей визуальной аналоговой шкалы и шкалы SDSS.

3. В сравнительном аспекте изучить влияние разработанного физиотерапевтического комплекса на показатель кутометрии и микроциркуляторные процессы по данным лазерной допплерографии у пациентов с атрофическими гормональнозависимыми рубцами длительностью существования более 1 года.

4. Оценить влияние комплексного применения фракционной аблятивной лазерной терапии и фотодинамической терапии с топическим фотосенсибилизатором хлорин е6 на качество жизни пациентов с

атрофическими гормональнозависимыми атрофическими рубцами длительностью существования более 1 года.

5. Исследовать эффективность применения разработанного физиотерапевтического комплекса у пациентов с гормональнозависимыми атрофическими рубцами длительностью существования более 1 года по данным совокупной оценки динамики клинических и специальных методов исследования.

Научная новизна

Впервые в работе, на основании анализа факторов повышенного риска формирования гормональнозависимых атрофических рубцов, с помощью изучения полиморфизма генов эстрогенового рецептора - 1, матриксной металлопротеиназы 3, COL1a1, была доказана их роль в патогегнезе данной патологии.

Впервые в работе доказана высокая эффективность разработанного физиотерапевтического комплекса, включающего использование фракционной аблятивной лазерной терапии и фотодинамической терапии с топическим фотосенсибилизатором хлорин е6 у пациентов с атрофическими гормонольнозависимыми рубцами с давностью патологического процесса более 1 года. Более высокая эффективность физиотерапевтического комплекса по сравнению с монотерапией подтверждается динамикой показателей шкалы ВАШ и шкалы SDSS. Результатами исследования впервые было показано, что после применения исследуемых методов отмечается достоверно значимое различие в показателях ВАШ и SDSS после терапии и через 6 месяцев, что свидетельствует об эффекте последействия разработанного терапевтического комплекса.

Высокий эффект разработанного метода обусловлен выраженным положительным влиянием на эпидермально-дермальную структуру кожи, что подтверждается динамикой показателя кутометрии. В основе высокого

терапевтического эффекта лежит восстановление и усиление гемодинамики на уровне микроциркуляторного русла, о чем свидетельствует достоверно значимая динамика показателей лазерной допплерографии.

Высокий клинический эффект разработанного физиотерапевтического комплекса подтверждается улучшением качества жизни пациентов.

Теоретическая и практическая значимость работы

Теоретическое значение работы заключается в изучении причин и механизмов возникновения атрофических гормональнозависимых рубцов, а также механизмов действия комбинации лазерной терапии в технологии аблятивного фракционного воздействия с проведением последовательной топической фотодинамической терапии с фотосенсибилизатором хлорин е6 с выявлением индивидуального вклада составляющих метода при атрофических рубцах с давностью существования более 1 года.

Разработан инновационный комплексный метод терапии атрофических гормональнозависимых рубцов, который позволяет значимо повысить эффективность терапии и улучшить качество жизни пациентов. Поскольку данный метод является малоинвазивными, его можно рекомендовать для применения в амбулаторных условиях в лечебно-профилактических учреждениях дерматологического, косметологического и

физиотерапевтического профиля.

Полученные в результате проведения исследования данные обеспечивают теоретический базис для изучения эффективности разработанного метода при других фенотипах патологических рубцов, дерматозах, сопровождающихся атрофией.

Методология и методы исследования

Проведенное исследование относится к открытым, проспективным, рандомизированным. В исследование были включены 107 пациентов с атрофическими гормональнозависимыми рубцами длительностью существования более 1 года. В работе решалась задача по разработке и оценке эффективности терапевтического комплекса данной категории пациентов с использованием комбинации лазерной терапии в технологии аблятивного фракционного воздействия с проведением последовательной топической фотодинамической терапии с фотосенсибилизатором хлорин е6.

Для изучения эффективности разработанного метода физиотерапевтического лечения дизайном диссертационного исследования было сформировано 3 группы исследования. Группы различались между собой в зависимости от методов терапии. В группы вошли пациенты с атрофическими гормональнозависимыми рубцами длительностью существования более 1 года.

В настоящем исследовании применялись клинические (визуально-аналоговая шкала, шкала тяжести симптоматики, шкала качества жизни), специальные (генотипирование, кутометрия, лазерная доплеровская флоуметрия), динамические (проспективное наблюдение) методы исследования.

Протокол проведения научного исследования был одобрен локальным этическим комитетом ФГБУ ДПО «ЦГМА» (протокол №.4/2022 от 30 августа 2022 года).

Положения, выносимые на защиту

1. Основными причинами развития атрофических гормональнозависимых рубцов, выявленными в данном исследовании, являются: беременность (43,9%), быстрый набор массы тела (19,6%), пубертатный период (18,7%). При данном фенотипе атрофических рубцов выявляются аллели повышенного риска формирования, которые связаны с полиморфизмом генов ESR1, ММП 3, COL1a1.

2. Комплексное применение фракционной аблятивной лазерной терапии и фотодинамической терапии с топическим фотосенсибилизатором хлорин е6 является высокоэффективной методикой лечения гормональнозависимых атрофических рубцов с длительностью заболевания более 1 года за счет восстановления эпидермально-дермальной структуры кожи на фоне улучшения гемодинамических процессов в микроциркуляторном русле.

3. Комплексный метод, включающий применение фракционной аблятивной лазерной терапии и фотодинамической терапии с топическим фотосенсибилизатором хлорин е6 эффективно улучшает все клинические симптомы атрофических гормональнозависимых рубцов и положительно влияет на качество жизни пациентов.

Степень достоверности и апробация результатов

Достоверность результатов обеспечивается достаточным объемом клинического материала (107 пациентов), использованием в ходе исследования диагностических методов, имеющих высокую доказательную базу. Для статистической обработки полученных результатов применялись современные корректные статистические методы. Конечные результаты были сопоставимы с данными, описанными в литературе. Основные

результаты исследования были обсуждены на научных конференциях и опубликованы в научных рецензируемых журналах.

Результаты проведенных исследований используются в практической деятельности АО «Институт пластической хирургии и косметологии», а также в учебном процессе кафедры физической и реабилитационной медицины с курсом клинической психологии и педагогики и кафедры дерматовенерологии и косметологии федерального государственного бюджетного учреждения дополнительного профессионального образования «Центральная государственная медицинская академия» Управления делами Президента Российской Федерации.

Апробация диссертации проведена на совместном заседании кафедры физической и реабилитационной медицины с курсом клинической психологии и педагогики и кафедры дерматовенерологии и косметологии федерального государственного бюджетного учреждения дополнительного профессионального образования «Центральная государственная медицинская академия» Управления делами Президента Российской Федерации (протокол №12 от 14.12.2023).

Личный вклад автора

Автор самостоятельно сформировал дизайн исследования, сформулировал цель и задачи, провел обзор литературы по теме диссертации. Автором самостоятельно обследованы все включенные в исследование пациенты с рандомизацией их в группы сравнения, проведено лечение. Полученные результаты статистически обработаны, что позволило сделать выводы и сформулировать практические рекомендации в виде алгоритма дифференцированного применения различных методов восстановительного лечения атрофических рубцов. Проведено внедрение разработанных методов, обозначены дальнейшие перспективы применения разработанного комплексного метода.

Публикации

По теме диссертационного исследования опубликовано 4 печатные работы в рецензируемых научных изданиях, включенных в перечень ВАК при Минобрнауки России с учетом их категорирования.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 135 страницах текста и состоит из введения, обзора литературы, глав материалов и методов исследования, 3-х глав с описанием результатов собственных исследований, клинических примеров, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Материалы диссертации отражены в 24 таблицах и 17 рисунках. Библиографический указатель включает 181 источник, из них 31 отечественных и 150 зарубежных.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Атрофические рубцы: вопросы эпидемиологии, этиологии и

патогенеза

1.1.1. Эпидемиология и этиология атрофических рубцов

Причины развития атрофических рубцов весьма многообразны. АР могут быть результатом эволюции воспалительного процесса (акне, пиодермии, язвы), следствием воздействия механических или химических агентов, радиации), гормональных факторов, формироваться после травм (операционные разрезы, укусы животных) [2].

Рубцовые деформации являются одной из наиболее частых причин обращения в лечебные учреждения дерматологического или косметологического профиля, при этом по данным Озерской О.С. (2004) атрофические рубцы составляют подавляющее большинство - 60,3% случаев обращений за медицинской помощью в профильные учреждения [20]. Аналогичную статистику опубликовала Данилина Н.А. (2002) - 58% случаев рубцовых деформаций приходится на атрофические рубцы, при этом из них 65% - это рубцы постакне, 25% - это посттравматические рубцы, 7% -послеоперационные рубцы и 3% - результат применения кортикостероидов [11]. По данным Течиевой С.Г. (2016) основными причинами АР являются: акне - 28,3%; прием стероидных препаратов (системных и топических ГКС, стероидных гормонов) - 19,9%; гормональные изменения (беременность) -16,1%; метаболический синдром — 12,2%; травмы (операционные разрезы, механические травмы) — 9,4% [25].

Хронические заболевания кожи, сопровождающиеся атрофией, как правило, характеризуются воспалением с распространением в глубокие слои дермы и даже подкожной жировой клетчатки - язвы, глубокие пиодермии, панникулит, гиподермальный васкулит. Среди воспалительных заболеваний

кожи, разрешающихся атрофическими рубцами, следует выделить акне, когда процент рубцевания может достигать 90% при тяжелых формах дерматоза [1]. В то же время атрофия кожи может возникать без повреждений целостности эпидермального слоя кожи, например, при аутоиммунных заболеваниях (очаговая склеродермия, склероатрофический лихен, дискоидная красная волчанка, панникулит) [17].

Механизмы формирования АР постакне - результат нарушения равновесия между процессами синтеза/деградации коллагена и внеклеточного матрикса. Фибробластами, тучными клетками, клетками эндотелия и макрофагами синтезируются матриксные металлопротеиназы (ММП), которые являются активными участниками репаративных процессов. В качестве возможного механизма формирования АР постакне рассматриваются СийЬа^егшт аcnes, которые активно синтезируют фермент коллагеназу, разрушающую коллаген. Помимо этого, пептидогликан клеточной стенки, посредством генной экспрессии синтеза ргоММР-2, усиливает деградацию экстрацеллюлярного матрикса. Таким образом, рубцы постакне возникают в результате изменения репаративных процессов в ответ на воспаление, при этом инфильтраты воспалительных клеток обнаруживаются в 77% атрофических рубцов [13].

Также достаточно часто АР формируются под воздействием гормональных факторов (кортикостероиды, эстрогены) [16]. Это может отмечаться на фоне эндогенных причин (соматические заболевания, эндокринная патология, беременность) или экзогенных причин (прием стероидных анаболических препаратов, глюкокортикостероидов топических или системных), вплоть до развития синдрома Кушинга, вследствие эндогенных и экзогенных причин [3.].

Таким образом, причиной развития еще одной часто встречающейся разновидности АР стрий являются различные гормональные факторы, преимущественно это эстрогены или кортикостероиды. Так в период беременности и лактации вследствие гормональной перестройки, а в ряде

случаев и на фоне избыточного набора массы тела, в местах наибольшего натяжения кожи (грудь, живот, бедра) формируются АР [12]. Ожирение, метаболический синдром по схожим механизмам приводят к развитию АР [31]. Формирование АР может быть спровоцировано увеличением мышечной массы, что довольно часто наблюдается у бодибилдеров или лиц, употребляющих стероиды для набора мышечной массы. Гормональная перестройка в пубертатном периоде, быстрый рост или набор веса могут привести к появлению АР [5]. При этом в развитии гормональнозависимых АР могут играть важную роль наследственные факторы.

АР может быть симптомом при ряде болезней эндокринной системы (дисфункция коры надпочечников, опухоли гипофиза, опухоли гипоталамуса), которые сопровождаются ожирением [31].

Часто провоцирует формирование АР прием лекарственных препаратов, относящихся к группе ГКС (топические, системные, в том числе дюрантные), особенно при длительном их применении [22]. Среди топических ГКС наибольший риск развития АР имеют кортикостероиды высокой активности (3-4 класс). Факторами риска являются детский возраст, применение на участках тела с высокой абсорбционной способностью (складки, живот, внутренняя поверхность бедер), большая площадь покрытия при нанесении, длительное бесконтрольное применение ГКС.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Долгих Светлана Юрьевна, 2024 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Акне и розацеа: клинические проявления, диагностика и лечение / Л.С. Круглова, А.Г. Стенько, Н.В. Грязева [и др.]; под редакцией профессора Л. С. Кругловой. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2021. - 207 с.

2. Ахтямов, С.Н. Практическая дерматокосметология: Учеб. пособие для слушателей системы последиплом. образования / С.Н. Ахтямов, Ю.С. Бутов. - М.: Медицина, 2003. - 395.

3. Белоусов, А.Е. Очерки пластической хирургии. Т. 1: Рубцы и их коррекция / А.Е. Белоусов. - СПб.: Командор-SPB, 2005. - 128 с.

4. Белоусов, А.Е. Рубцы как глобальная проблема пластической хирургии / А.Е. Белоусов // Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. - 2004. - № 4. - С. 41-42.

5. Болотова, Н.В. Особенности формирования метаболического синдрома у детей и подростков / Н.В. Болотова, С.В. Лазебникова, А.П. Аверьянов // Педиатрия. - 2007. - № 3. - С. 35-39.

6. Брагина, И.Ю. Физиотерапия рубцов: обзор современных технологий / И.Ю. Брагина, Т.Н. Алтухова // Экспериментальная и клиническая дерматокосметология. - 2009. - № 5. - С. 30-38.

7. Галлямова, Ю.А. Рубцовые изменения кожи / Ю.А. Галлямова, З.З. Кардашова // Экспериментальная и клиническая дерматокосметология. 2008. - № 6. - С. 56-63.

8. Гафаров, Т.У. Моделирование атрофического рубцового дефекта кожи у лабораторных животных / Т.У. Гафаров, Д.А. Еникеев, Л.Т. Идрисова [и др.] // Успехи современного естествознания. - 2013. - № 6. - С. 28-42.

9. Гейниц, A.B. Дермабразия С02-лазером эпидермально-дермальиых дефектов, а также увядающей кожи в амбулаторных условиях / A.B. Гейниц, В.А. Доронин. - Тула: Граф и К, 2004. - 102 с.

10. Гуллер, А.Е. Клинический тип и гистологическая структура кожных рубцов как прогностические факторы исхода лечения / А.Е. Гуллер,

А.Б. Шехтер // Анналы пластической, реконструктивной и эстетической хирургии. - 2007. - № 4. - С. 19-31.

11. Дворников, А.С. Опыт применения лонгидаза методом фотофореза у пациентов с ограниченной склеродермией / А.С. Дворников, Л.С. Круглова, Ю.К. Скрипкин [и др.] // Вестник дерматологии и венерологии. - 2007. - № 5. - С. 57-59.

12. Дедов, И.И. Эндокринология. Национальное руководство / Под редакцией И.И. Дедова, Г.А. Мельниченко. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2019. -380 с.

13. Долгих, С.Ю. Микронидлинг в комплексной терапии атрофических поствоспалительных рубцов / С.Ю. Долгих, Н.В. Грязева // Эффективная фармакотерапия. - 2022. - Т. 18, № 31. - С. 44-47.

14. Долгих, С.Ю. Эффективность комбинированных методов лечения атрофических рубцов кожи / С.Ю. Долгих, Н.В. Грязева // Медицинский алфавит. - 2023. - № 5. - С. 56-59.

15. Круглова, Л.С. Акне и симптомокомплекс постакне: клиническая картина и методы терапии / Л.С. Круглова, А.М. Талыбова, М.М. Глузмина // Кремлевская медицина. Клинический вестник. - 2018. - № 1. - С. 21-26.

16. . Курганская, И.Г. Новые алгоритмы отбора генетических маркеров, предопределяющих развитие патологических рубцов кожи / И.Г. Курганская // Вестник физиотерапии и курортологии. - 2021. - № 2. - С. 19.

17. Мантурова, Н.Е. Рубцы кожи / Н.Е. Мантурова, Л.С. Круглова, А.Г. Стенько. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2021. - 238 с.

18. Мяделец, О.Д. Морфофункциональная дерматология / О.Д. Мяделец, В.П. Адаскевич. - М.: Медлит, 2006. - 752 с.

19. Озерская, О.С. Рубцы кожи и их дерматокосметологическая коррекция / О.С. Озерская. - СПб.: ОАО «Искусство России», 2007. - 224 с.

20. Потекаев, Н.Н. Лазер в дерматологии и косметологии: [монография] / Н.Н. Потекаев, Л.С. Круглова. - 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Апрель, 2018. - 289 с.

21. Смулевич, А.Б. Психодерматология: современное состояние проблемы / А.Б. Смулевич, О.Л. Иванов, А.Н. Львов [и др.] // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2004. - № 10. - С. 4-13.

22. Стенько, А.Г. Патологические рубцовые деформации - тактика ведения пациентов / А.Г. Стенько, Л.С. Круглова, А.А. Шматова // Лечащий врач. - 2013. - № 4. - С. 32-39.

23. Стенько, А.Г. Стратегии комплексного подхода к лечению рубцовых поражений кожи лица и шеи / А.Г. Стенько, А.Г. Шматова, Л.С. Круглова [и др.] // Российский журнал кожных и венерических болезней. -2013. - № 2. - С. 49.

24. Стенько, А.Г. Консервативное лечение формирующихся рубцов: обзор современных технологий / А.Г. Стенько, Л.С. Круглова, А.Г. Шматова [и др.] // Вестник эстетической медицины. - 2014. - Т. 13, № 2. - С. 42-50.

25. Тищенко, А.Л. Практическое применение изделий медицинского назначения RegenLab для проведения процедур терапии богатой тромбоцитами плазмой: методические рекомендации для врачей-косметологов и дерматовенерологов / А.Л. Тищенко, С.М. Федоров, Л.С. Круглова [и др.]. - М.: РУДН, 2017.- 40 с.

26. Уфимцева, М.А. Методы клинической оценки и лечения атрофических рубцов постакне / М.А. Уфимцева, Н.В. Симонова, Ю.М. Бочкарев [и др.] // Современные проблемы науки и образования. - 2020. - № 2. - С. 166.

27. Фисенко, Г.И. Коррекция рубцовых изменений кожи лица методом ранней повторной дермабразии: автореферат дис. ... кандидата медицинских наук: 14.00.27 / Ин-т хирургии им. А.В. Вишневского РАМН. -Москва, 2005. - 24 с.

28. Шакуров, И.Г. Психоэмоциональный статус и личностно-характерологические особенности пациентов с рубцовыми изменениями кожи / И.Г. Шакуров, И.Б. Глубокова, А.И. Табашникова // Вестник дерматологии и венерологии. - 2009. - № 3. - С. 50-60.

29. Шехтман, М.М. Заболевания эндокринной системы и обмена веществ у беременных / М.М. Шехтман, Т.М. Варламова, Г.М. Бурдули. - М.: «Триада-X», 2001. - 128 с.

30. Шепелькевич, А.П. Эндокринология. Учебник. / А. П. Шепелькевич, Т. В. Мохорт. — Минск : Вышэйшая школа, 2021. — 399 с.

31. Шепелькевич, А.П. Молекула резистина: строение, биологическая роль / А. П. Шепелькевич, В.Л. Лобашова // Медицинский журнал. - 2018. - № 1. - Т.63. - С. 22-26.

32. Abdel-Latif, A.M. Treatment of striae distensae with microdermabrasion: A clinical and molecular study / A.M. Abdel-Latif, A.S. Elbendary // JEWDS. - 2008. - Vol. 5. - P. 24-30.

33. Agg, B. Possible extracardiac predictors of aortic dissection in Marfan syndrome / B. Agg, K. Benke, B. Szilveszter [et al.] // BMC Cardiovasc Disord. -2014. - Vol. 14. - P. 47.

34. Ahmed, N.A. Comparative study between: Carboxytherapy, platelet-rich plasma, and tripolar radiofrequency, their efficacy and tolerability in striae distensae / N.A. Ahmed, O.M. Mostafa // J Cosmet Dermatol. - 2018. - Vol. 18(3). - P. 788-797.

35. Al-Dhalimi, M.A. A comparative study of the effectiveness of intense pulsed light wavelengths (650 nm vs 590 nm) in the treatment of striae distensae / M.A. Al-Dhalimi, A.A.A. Nasyria // J. Cosmet. Laser Ther. - 2013. - Vol. 15. - P. 120-125.

36. Al-Himdani, S. Striae distensae: a comprehensive review and evidence-based evaluation of prophylaxis and treatment / S. Al-Himdani, S. Ud-Din, S. Gilmore [et al.] // Br J Dermatol. - 2014. - Vol. 170. - P. 527-547.

37. Alster, T.S. Microneedling: A review and practical guide / T.S. Alster, P.M. Graham // Dermatol Surg. - 2018. - Vol. 44. - P. 397-404.

38. Alster, T.S. Cutaneous resurfacing with CO2 and erbium: YAG lasers: preoperative, intraoperative, and postoperative considerations / T.S. Alster // Plast Reconstr Surg. - 1999. - Vol. 103. - P. 619-634.

39. Altshuler, G.B. Absorption Characteristics of Tissues as a Basis for the Optimal Wavelength Choice in Photodermatology / G.B. Altshuler, I. Yaroslavsky. - Burlington: Palomar Medical Technologies. 2004.

40. Alves, R.O. Striae after topical corticosteroid: Treatment with nonablative fractional laser 1540 nm / R.O. Alves, M.F. Boin, E.I. Crocco [et al.] // J Cosmet Laser Ther. - 2015. - Vol. 17. - P. 143-147.

41. Ammar, N.M. Adolescent striae / N.M. Ammar, B. Rao, R.A. Schwartz [et al.] // Cutis. - 2000. - Vol. 65. - P. 69-70.

42. Bertin, C. Striae distensae are characterized by distinct microstructural features as measured by non-invasive methods in vivo / C. Bertin, A. Lopes-Da Cunha, A. Nkengne [et al.] // Skin Res Technol. - 2014. - Vol. 20. - P. 81-86.

43. Bhan, A. Long noncoding RNAs: emerging stars in gene regulation, epigenetics and human disease / A. Bhan, S.S. Mandal // Chem Med Chem. -2014. - Vol. 9. - P. 1932-1956.

44. Bitencourt, S. Safety and patient subjective efficacy of using galvanopuncture for the treatment of striae distensae / S. Bitencourt, A. Lunardelli, R.H. Amaral [et al.] // J Cosmet Dermatol. - 2016. - Vol. 15. - P. 393-398.

45. Boen, M. Review and Update of Treatment Options Using the Acne Scar Classification System / M. Boen, C.A. Jacob // Dermatol Surg. - 2019. - Vol. 45(3). - P. 411-422.

46. Bolognia, J.L. Dermatology / J.L. Bolognia, J. Jorizzo, R.P. Rapini. -2nd ed. - Maryland Heights, MO: Mosby, 2007.

47. Brauchle, M. Suppression of keratinocyte growth factor expression by glucocorticoids in vitro and during wound healing / M. Brauchle, R. Fassler, S. Werner [et al.] // J Invest Dermatol. - 1995. - Vol. 105. - P. 579-584.

48. Brennan, M. Topical preparations for preventing stretch marks in pregnancy / M. Brennan, G. Young, D. DeVane // Cochrane Database Syst. Rev. -2012. - Vol. 11. - P. CD000066.

49. Burket, J.M. Linear focal elastosis (elastotic striae) / J.M. Burket, A.S. Zelickson, R.S. Padilla // J Am Acad Dermatol. - 1989. - Vol. 20. - P. 633-636.

50. Calzavara-Pinton, P.G. A retrospective analysis of real-life practice of off-label photodynamic therapy using methyl aminolevulinate (MAL-PDT) in 20 Italian dermatology departments Part 1: inflammatory and aesthetic indications / P.G. Calzavara-Pinton, M.T. Rossi, E. Aronson [et al.] // Photochem Photobiol Sci

- 2013. - Vol. 12. - P. 148-157.

51. Casabona, G. Microfocused Ultrasound with Visualization for the Treatment of Stretch Marks / G. Casabona // J Clin Aesthet Dermatol. - 2019. -Vol. 12(2). - P. 20-24.

52. Chang, A.L. Risk factors associated with striae gravidarum / A.L. Chang, Y.Z. Agredano, A.B. Kimball // J Am Acad Dermatol. - 2004. - Vol. 51. -P. 881-885.

53. Chiu, L.L. Photodynamic therapy on keloid fibroblasts in tissue-engineered keratinocyte-fibroblast co-culture / L.L. Chiu, C.H. Sun, A.T. Yeh [et al.] // Laser Surg Med. - 2005. - Vol. 37. - P. 231-244.

54. Cho, S. Clinical features and risk factors for striae distensae in Korean adolescents / S. Cho, E.S. Park, D.H. Lee [et al.] // J Eur Acad Dermatol Venereol.

- 2006. - Vol. 20. - P. 1108-1113.

55. Cordeiro, R.C. Striae Distensae: Physiopathology / R.C. Cordeiro, A.M. de Moraes // Surg Cosmet Dermatol. - 2009. - Vol. 1. - P. 137-140.

56. Cordeiro, R.C. Expression of estrogen, androgen, and glucocorticoid receptors in recent striae distensae / R.C. Cordeiro, K.G. Zecchin, A.M. de Moraes // Int J Dermatol. - 2010. - Vol. 49. - P. 30-32.

57. Cotterill, J.A. WJ. Suicide in dermatological patients / J.A. Cotterill, W.J. Cunliffe // Br J Dermatol. - 1997. - Vol. 137(02). - P. 246-250.

58. Darvay, A. Striae formation in two HIV-positive persons receiving protease inhibitors / A. Darvay, K. Acland, W. Lynn [et al.] // J Am Acad Dermatol. - 1999. - Vol. 41. - P. 467-469.

59. Deprez, P. Easy peel for the treatment of stretch marks / P. Deprez // International Journal of Cosmetic Surgery and Aesthetic Dermatology. - 2000. -Vol. 2. - P. 201-204.

60. Di Lernia, V. Striae distensae (rubrae) in monozygotic twins / V. Di Lernia, A. Bonci, M. Cattania [et al.] // Pediatr Dermatol. - 2001. - Vol. 18. - P. 261-268.

61. Dover, J.S. Management of stretch marks (with a focus on striae rubrae) / J.S. Dover, K. Rothaus, M.H. Gold // Journal of Cutaneous and Aesthetic Surgery. - 2017. - Vol. 10(3). - P. 124-129.

62. El Taieb, M.A. Fractional CO2 laser versus intense pulsed light in treating striae distensae / M.A. El Taieb, A.K. Ibrahim // Indian J Dermatol. -2016. - Vol. 61. - P. 174-180.

63. El-Khalafawy, G.M. Comparative study between Intense Pulsed Light IPL and Pulsed Dye Laser in the treatment of striae distensae / G.M. El-Khalafawy // Dermatol Surg. - 2014. - Vol. 40. - P. 632-634.

64. Ellett, F. Defining the phenotype of neutrophils following reverse migration in zebrafish / F. Ellett, P.M. Elks, A.L. Robertson [et al.] // J Leukoc Biol. - 2015. - Vol. 98(6). - P. 975-981.

65. El-Ramly, A.Z. Histological and quantitative morphometric evaluation of striae distensae treated by long-pulsed 1064-nm Nd:YAG laser / A.Z. El-Ramly, G.M. El-Hanafy, Z.M. El Maadawi [et al.] // J Egypt Women Dermatol Soc. - 2015. - Vol. 12. - P. 120-128.

66. Elsaie, M.L. Comparison of the effectiveness of two fiuences using long-pulsed Nd:YAG laser in the treatment of striae distensae. Histological and morphometric evaluation / M.L. Elsaie, M.S. Hussein, A.A. Tawkk [et al.] // J Lasers Med Sci. - 2016. - Vol. 31. - P. 1845-1853.

67. Farahnik, B. Striae gravidarum: Risk factors, prevention, and management / B. Farahnik, K. Park, G. Kroumpouzos [et al.] // Int. J. Women's Dermatol. - 2017. - Vol. 3. - P. 77-85.

68. Ferreira, A.C. Galvano-puncture and dermabrasion for striae distensae: A randomized controlled trial / A.C. Ferreira, A.C. Guida, A.A. Piccini [et al.] // J Cosmet Laser Ther. - 2018. - Vol. 21(1). - P. 39-43.

69. Forbat, E. Treatment of striae distensae: an evidence-based approach / E. Forbat, F. Al-Niaimi // J Cosmet Laser Ther. - 2019. - Vol. 21. - P. 49-57.

70. Gamil, H.D. Platelet-rich plasma versus tretinoin in treatment of striae distensae: A comparative study / H.D. Gamil, S.A. Ibrahim, H.M. Ebrahim [et al.] // Dermatol Surg. - 2018. - Vol. 44. - P. 697-704.

71. Gauglitz, G.G. Treatment of striae distensae using an ablative Erbium: YAG fractional laser versus a 585-nm pulsed-dye laser / G.G. Gauglitz, M. Reinholz, P. Kaudewitz [et al.] // J Cosmet Laser Ther. - 2014. - Vol. 16. - P. 117-119.

72. Gentile, R.D. Radiofrequency technology in face and neck rejuvenation / R.D. Gentile, B.M. Kinney, N.S. Sadick // Facial Plast Surg Clin North Am. - 2018. - Vol. 26. - P. 123-134.

73. Gilmore, S.J. A mechanochemical model of striae distensae / S.J. Gilmore, B.L. Vaughan Jr, A. Madzvamuse [et al.] // Math Biosci. - 2012. - Vol. 240. - P. 141-147.

74. Gokalp, H. Long-term results of the treatment of pregnancy-induced striae distensae using a 1550-nm non-ablative fractional laser / H. Gokalp // J Cosmet Laser Ther. - 2017. - Vol. 19. - P. 378-382.

75. Goldberg, D.J. Histologic and ultrastructural analysis of ultraviolet B laser and light source treatment of leukoderma in striae distensae / D.J. Goldberg, E.S. Marmur, C. Schmults [et al.] // Dermatol Surg. - 2005. - Vol. 31. - P. 385-387.

76. Goldman, A. Stretch marks: Treatment using the 1,064-nm Nd:YAG laser / A. Goldman, F. Rossato, C. Prati [et al.] // Dermatol Surg. - 2008. - Vol. 34. - P. 686-692.

77. Guimaraes, P.A. Striae distensae after breast augmentation: Treatment using the nonablative fractionated 1550-nm erbium glass laser / P.A. Guimaraes, A. Haddad, M.S. Neto [et al.] // Plast Reconstr Surg. - 2013. - Vol. 131. - P. 636-642.

78. Hague, A. Therapeutic targets in the management of striae distensae: A systematic review / A. Hague, A. Bayat // J Am Acad Dermatol. - 2017. - Vol. 77. - P. 559-568.

79. Harmelin, Y. Fractionated bipolar radiofrequency and bipolar radiofrequency potentiated by infrared light for treating striae: A prospective randomized, comparative trial with objective evaluation / Y. Harmelin, D. Boineau, N. Cardot-Leccia [et al.] // Lasers Surg Med. - 2016. - Vol. 48. - P. 245-253.

80. He, L. Two new susceptibility loci 1q24.2 and 11p11.2 confer risk to severe acne / L. He, W.J. Wu, J.K. Yang [et al.] // Nat Commun. - 2014. - Vol. 5.

- P. 2870.

81. Henderson, N.C. Fibrosis: from mechanisms to medicines / N.C. Henderson, F. Rieder, T.A. Wynn // Nature. - 2020. - Vol. 587. - P. 555-566.

82. Hernandez-Perez, E. Intense pulsed light in the treatment of striae distensae / E. Hernandez-Perez, E.C. Charrier, E. Valencia-Ibiett // Dermatol Surg.

- 2002. - Vol. 28. - P. 1124-1130.

83. Hexsel, D. Superficial dermabrasion versus topical tretinoin on early striae distensae: A randomized, pilot study / D. Hexsel, M. Soirefmann, M.D. Porto [et al.] // Dermatol Surg. - 2014. - Vol. 40. - P. 537-544.

84. Hodeib, A.A. Clinical and immunohistochemical comparative study of the efficacy of carboxytherapy vs platelet-rich plasma in treatment of stretch marks / A.A. Hodeib, G.F.R. Hassan, M.N.M. Ragab [et al.] // J Cosmet Dermatol. -2018. - Vol. 17. - P. 1008-1015

85. Issa, M.C. Transepidermal retinoic acid delivery using ablative fractional radiofrequency associated with acoustic pressure ultrasound for stretch marks treatment / M.C. Issa, L.E. de Britto Pereira Kassuga, N.S. Chevrand [et al.] // Lasers Surg Med. - 2013. - Vol. 45. - P. 81-88.

86. Ji, H.T. 5-ALA mediated photodynamic therapy induces autophagic cell death via AMP-activated protein kinase / H.T. Ji, L.T. Chien, Y.H. Lin [et al.] // Mol Cancer. - 2010. - Vol. 9. - P. 91.

87. Jime Nez, G.P. Treatment of Striae Rubra and Striae Alba With the 585-Nm Pulsed-Dye Laser. Dermatol / G.P. Jime Nez, F. Flores, B. Berman [et al.] // Surg. - 2003. - Vol. 29. - P. 362-365.

88. Kaplan, H. Clinical and histopathological results following TriPollarTM radiofrequency skin treatments / H. Kaplan, A. Gat // J Cosmet Laser Ther. - 2009. - Vol. 11. - P. 78-84.

89. Karimipour, D.J. Microdermabrasion: A molecular analysis following a single treatment / D.J. Karimipour, S. Kang, T.M. Johnson [et al.] // J Am Acad Dermatol. - 2005. - Vol. 52. - P. 215-223.

90. Keen, M.A. Striae distensae: What's new at the horizon? / M.A. Keen // BJMP. - 2016. - Vol. 9. - P. a919.

91. Khater, M.H. Treatment of striae distensae with needling therapy versus CO2 fractional laser / M.H. Khater, F.M. Khattab, M.R. Abdelhaleem // J Cosmet Laser Ther. - 2016. - Vol. 18. - P. 75-79.

92. Kim, I.S. Efficacy of intradermal radiofrequency combined with autologous platelet-rich plasma in striae distensae: a pilot study / I.S. Kim, K.Y. Park, B.J. Kim [et al.] // Int J Dermatol. - 2012. - Vol. 51. - P. 1253-1258.

93. Kim, M. 1340 Non-invasive evaluation of skin biophysical properties of striae distensae / M. Kim, S. Kim, Y. Jung [et al.] // J. Investig. Dermatol. -2018. - Vol. 138. - p. S228.

94. Korgavkar, K. Stretch marks during pregnancy: A review of topical prevention / K. Korgavkar, F. Wang // Br. J. Dermatol. - 2015. - Vol. 172. - P. 606-615.

95. Kravvas, G. The use of energy devices in the treatment of striae: a systematic literature review / G. Kravvas, D. Veitch, F. Al-Niaimi // J Dermatolog Treat. - 2019. - Vol. 30. - P. 294-302.

96. Lee, S.E. Treatment of striae distensae using an ablative 10,600-nm carbon dioxide fractional laser: A retrospective review of 27 participants / S.E. Lee, J.H. Kim, S.J. Lee [et al.] // Dermatol Surg. - 2010. - Vol. 36. - P. 1683-1690.

97. Lee, W.-L. Younger pregnant women have a higher risk of striae gravidarum, the study said / W.-L. Lee, C.-C. Yeh, P.-H. Wang // J. Chin. Med. Assoc. - 2016. - Vol. 79. - P. 235-236.

98. Liu, G.Y. The long noncoding RNA Gm15055 represses Hoxa gene expression by recruiting PRC2 to the gene cluster / G.Y. Liu, G.N. Zhao, X.F. Chen [et al.] // Nucleic Acids Res. - 2016. - Vol. 44. - P. 2613-2627.

99. Liu, L. Risk factors of striae gravidarum in Chinese primiparous women / L. Liu, J. Huang, Y. Wang [et al.] // PLoS One. - 2018. - Vol. 13(6). - P. e0198720.

100. Liu, Y. miRNA expression profiles in keloid tissue and corresponding normal skin tissue / Y. Liu, D. Yang, Z. Xiao [et al.] // Aesthetic Plast Surg. -2012. - Vol. 36. - P. 193-201.

101. Liu, L. Interventions for the treatment of stretch marks: A systematic review / L. Liu, H. Ma, Y. Li [et al.] // Cutis. - 2014. - Vol. 94. - P. 66-72.

102. Loddo, I. Inflammatory Bowel Disease: Genetics, Epigenetics, and Pathogenesis / I. Loddo, C. Romano // Front Immunol. - 2015. - Vol. 6. - P. 551.

103. Lokhande, A.J. Striae distensae treatment review and up-date / A.J. Lokhande, V. Mysore // Indian Dermatol Online J. - 2019. - Vol. 10. - P. 380395.

104. Long, H. The critical role of epigenetics in systemic lupus erythematosus and autoimmunity / H. Long, H. Yin, L. Wang [et al.] // J Autoimmun. - 2016. - Vol. 74. - P. 118-138.

105. Longo, L. Two-Year Follow-Up Results of Copper Bromide Laser Treatment of Striae / L. Longo, M.G. Postiglione, O. Marangoni [et al.] // J. Clin. Laser Med. Surg. - 2003. - Vol. 21. - P. 157-160.

106. Lovell, C.R. Acquired Disorders of Dermal Connective Tissue - Striae / C.R. Lovell // Rook's Textbook of Dermatology / C. Griffiths, J. Barker, T. Bleiker [et al.]. - 9th ed. - Chichester UK, 2016. - P. 96.9-10.

107. Lu, H. Comparative effectiveness of different therapies for treating striae distensae: A systematic review and network meta-analysis / H. Lu, J. Guo, X. Hong [et al.] // Medicine (Baltimore). - 2020. - Vol. 99(39). - P. e22256.

108. Lucas, T. Differential Roles of Macrophages in Diverse Phases of Skin Repair / T. Lucas, A. Waisman, R. Ranjan [et al.] // J Immunol. - 2010. -Vol. 184. - P. 3964-3977.

109. Mahuzier, F. Microdermabrasion of stretch marks / F. Mahuzier // Microdermabrasion or Parisian Peel in Practice / F. Mahuzeier, editor. - Marseille, 1999. - P. 25-65.

110. Malekzad, F. The safety and efficacy of the 1540nm non-ablative fractional XD probe of star lux 500 device in the treatment of striae alba: Before-after study / F. Malekzad, S. Shakoei, A. Ayatollahi [et al.] // J Lasers Med Sci. - 2014. - Vol. 5. - P. 194-198.

111. Manstein, D. Fractional photothermolysis: a new concept for cutaneous remodeling using microscopic patterns of thermal injury / D. Manstein, G.S. Herron, R.K. Sink [et al.] // Lasers Surg Med. - 2004. - Vol. 34(05). - P. 426438.

112. Manuskiatti, W. Treatment of striae distensae with a TriPollar radiofrequency device: A pilot study / W. Manuskiatti, E. Boonthaweeyuwat, S. Varothai // J Dermatol Treat. - 2009. - Vol. 20. - P. 359-364.

113. Marmur, E.S. Clinical, histologic and electron microscopic findings after injection of a calcium hydroxylapatite filler / E.S. Marmur, R. Phelps, D.J. Goldberg // J Cosmet Laser Ther. - 2004. - Vol. 6. - P. 223-226.

114. McDaniel, D.H. Treatment of stretch marks with the 585-nm flashlamp-pumped pulsed dye laser / D.H. McDaniel, K. Ash, M. Zukowski // Dermatol Surg. - 1996. - Vol. 22. - P. 332-337.

115. McKusick, V.A. Transverse striae distensae in the lumbar area in father and two sons / V.A. McKusick // Birth Defects Orig Artic Ser. - 1971. -Vol. 7. - P. 260-261.

116. Mendoza, J. Differential cytotoxic response in keloid fibroblasts exposed to photodynamic therapy is dependent on photosensitizer precursor, fluence and location of fibroblasts within the lesion / J. Mendoza, A. Sebastian, E. Allan // Arch Dermatol Res. - 2012. - Vol. 304. - P. 549-562.

117. Mendoza-Garcia, J. Ex vivo evaluation of the effect of photodynamic therapy on skin scars and striae distensae / J. Mendoza-Garcia, A. Sebastian, T. Alonso-Rasgado [et al.] // Photodermatol Photoimmunol Photomed. - 2015. - Vol. 31. - P. 239-251.

118. Mishra, V. The use of a fractional ablative micro-plasma radiofrequency device in treatment of striae / V. Mishra, L. Miller, S.M. Alsaad [et al.] // J Drugs Dermatol. - 2015. - Vol. 14. - P. 1205-1208.

119. Mitts, T.F. Skin biopsy analysis reveals predisposition to stretch mark formation / T.F. Mitts, F. Jimenez, A. Hinek // Aesthet Surg J. - 2005. - Vol. 25. -P. 593-600.

120. Mysore, V. Striae distensae treatment review and update. Indian Dermatol / V. Mysore, A.J. Lokhande // Online J. - 2019. - Vol. 10. - P. 380-395.

121. Naein, F.F. Fractional CO2 laser as an effective modality in treatment of striae alba in skin types III and IV / F.F. Naein, M. Soghrati // J Res Med Sci. -2012. - Vol. 17. - P. 928-933.

122. Naeini, F. Promising option for treatment of striae alba: fractionated microneedle radiofrequency in combination with fractional carbon dioxide laser / F. Naeini, S. Behfar, B. Abtahi-Naeini [et al.] // Dermatol Res Pract. - 2016. - P. 2896345.

123. Naeini, F.F. Comparison of the fractional CO2 laser and the combined use of a pulsed dye laser with fractional CO2 laser in striae alba treatment / F.F. Naeini, Z. Nikyar, F. Mokhtari [et al.] // Adv Biomed Res. - 2014. - Vol. 3. - P. 184.

124. Naspolini, A.P. Efficacy of microneedling versus fractional nonablative laser to treat striae alba: a randomized study / A.P. Naspolini, J.C. Boza, V.D. da Silva [et al.] // Am J Clin Dermatol. - 2019. - Vol. 20. - P. 277-287.

125. Nassar, A. Treatment of striae distensae with needling therapy versus microdermabrasion with sonophoresis / A. Nassar, S. Ghomey, Y. El Gohary [et al.] // J Cosmet Laser Ther. - 2016. - Vol. 18. - P. 330-334.

126. Nehal, K.S. Treatment of mature striae with the pulsed dye laser / K.S. Nehal, D.A. Lichtenstein, H. Kamino [et al.] // J Cutan Laser Ther. - 1999. - Vol. 1. - p. 41-44.

127. Nouri, K. Comparison of the 585 Nm Pulse Dye Laser and the Short Pulsed CO2 Laser in the Treatment of Striae Distensae in Skin Types IV and VI / K. Nouri, R. Romagosa, T. Chartier [et al.] // Dermatol. Surg. - 1999. - Vol. 25. -P. 368-370.

128. Nuutinen, P. Modulation of collagen synthesis and mRNA by continuous and intermittent use of topical hydrocortisone in human skin / P. Nuutinen, R. Riekki, M. Parikka [et al.] // Br J Dermatol. - 2003. - Vol. 148. - P. 39-45.

129. O'Neill, L.A. Immunometabolism governs dendritic cell and macrophage function / L.A. O'Neill, E.J. Pearce // J Exp Med. - 2016. - Vol. 213(1). - P. 15-23.

130. Ostovari, N. The 308-nm excimer laser in the darkening of the white lines of striae alba / N. Ostovari, N. Saadat, S. Nasiri [et al.] // J Dermatolog Treat. - 2010. - Vol. 21. - P. 229-231.

131. Park, K.Y. Treatment of striae distensae using needling therapy: A pilot study / K.Y. Park, H.K. Kim, S.E. Kim [et al.] // Dermatol Surg. - 2012. -Vol. 38. - P. 1823-1828.

132. Passeron, T. The 308 nm excimer laser in dermatology / T. Passeron, J.P. Ortonne // Press Med. - 2005. - Vol. 34. - P. 301-309.

133. Piletic, K. MicroRNA epigenetic signatures in human disease / K. Piletic, T. Kunej // Arch Toxicol. - 2016. - Vol. 90. - P. 2405-2419.

134. Podgorna, K. Cutometric assessment of elasticity of skin with striae distensae following carboxytherapy / K. Podgorna, A. Kolodziejczak, H. Rotsztejn [et al.] // J Cosmet Dermatol. - 2018. - Vol. 17. - P. 1170-1174.

135. Pongsrihadulchai, N. An effcacy and safety of nano fractional radiofrequency for the treatment of striae alba / N. Pongsrihadulchai, T. Chalermchai, S. Ophaswongse [et al.] // J Cosmet Dermatol. - 2017. - Vol. 16. -P. 84-90.

136. Rogalski, C. Extensive striae distensae as a result of topical corticosteroid therapy in psoriasis vulgaris / C. Rogalski, U.F. Haustein, H.J. Glander [et al.] // Acta Derm Venereol. 2003. - Vol. 83. - P. 54-55.

137. Ross, N.A. Striae Distensae: Preventative and Therapeutic Modalities to Improve Aesthetic Appearance / N.A. Ross, D. Ho, J. Fisher [et al.] // Dermatol Surg. - 2017. - Vol. 43(5). - P. 635-648.

138. Sadick, N.S. Bipolar and multipolar radiofrequency / N.S. Sadick, A.H. Nassar, A.S. Dorizas [et al.] // Dermatol Surg. - 2014. - Vol. 40 (12). - P. 174-179.

139. Sakamoto, F. Surgical scar remodelling after photodynamic therapy using aminolevulinic acid or its methylester: a retrospective, blinded study of patients with field cancerization / F. Sakamoto, L. Izikson, Z. Tannous [et al.] // Br J Dermatol. - 2012. - Vol. 166. - P. 413-416.

140. Sarnoff, D.S. Therapeutic update on the treatment of striae distensae / D.S. Sarnoff // J Drugs Dermatol. - 2015. - Vol. 14(1). - P. 11-22.

141. Sato, F. MicroRNAs and epigenetics / F. Sato, S. Tsuchiya, S.J. Meltzer [et al.] // FEBS J. - 2011. - Vol. 278. - P. 1598-1609.

142. Savas, J.A. Lasers and lights for the treatment of striae distensae / J.A. Savas, J.A. Ledon, K. Franca [et al.] // Lasers Med Sci. - 2014. - Vol. 29. - P. 1735-1743.

143. Schwingel, A.C. Exercise and striae distensae in obese women / A.C. Schwingel, Y. Shimura, Y. Nataka [et al.] // Med Sci Sports Exerc. - 2003. - Vol. 35. - P. S33.

144. Serhan, C.N. Novel lipid mediators and resolution mechanisms in acute inflammation: to resolve or not? / C.N. Serhan // Am J Pathol. C.N. Serhan. -2010. - Vol. 177(4). - P. 1576-1591.

145. Shin, J.U. The effect of succinylated atelocollagen and ablative fractional resurfacing laser on striae distensae / J.U. Shin, M.R. Roh, D.K. Rah [et al.] // J Dermatolog Treat. - 2011. - Vol. 22. - P. 113-121.

146. Shokeir, H. Effcacy of pulsed dye laser versus intense pulsed light in the treatment of striae distensae / H. Shokeir, A. El Bedewi, S. Sayed [et al.] // Dermatol Surg. - 2014. - Vol. 40. - P. 632-640.

147. Shuster, S. The cause of striae distensae / S. Shuster // Acta Derm Venereol Suppl (Stockh). - 1979. - Vol. 59. - P. 161-169.

148. Sobhi, R.M. Comparative study between the efficacy of fractional micro-needle radiofrequency and fractional CO2 laser in the treatment of striae distensae / R.M. Sobhi, I.S. Mohamed, D.A. El Sharkawy [et al.] // Lasers Med Sci. - 2019. - Vol. 34(7). - P. 1295-1304.

149. Soliman, M. Efficacy of fractional carbon dioxide laser versus microneedling in the treatment of striae distensae / M. Soliman, M. Mohsen Soliman, A. El-Tawdy [et al.] // J Cosmet Laser Ther. - 2019. - Vol. 21(5). - P. 270-277.

150. Stamatas, G.N. Biophysical properties of Striae Distensae evaluated in vivo using non-invasive assays / G.N. Stamatas, A. Lopes-DaCunha, A. Nkengne [et al.] // Skin Res Technol. - 2015. - Vol. 21. - P. 254-258.

151. Stotland, M. The safety and efficacy of fractional photothermolysis for the correction of striae distensae / M. Stotland, A.M. Chapas, L. Brightman [et al.] // J Drugs Dermatol. - 2008. - Vol. 7. - P. 857-861.

152. Suh, D.H. Radiofrequency and 585-nm pulsed dye laser treatment of striae distensae: A report of 37 Asian patients / D.H. Suh, K.Y. Chang, H.C. Son [et al.] // Dermatol Surg. - 2007. - Vol. 33. - P. 29-34.

153. Suh, D.H. Treatment of striae distensae combined enhanced penetration platelet-rich plasma and ultrasound after plasma fractional radiofrequency / D.H. Suh, S.J. Lee, J.H. Lee [et al.] // J Cosmet Laser Ther. -2012. - Vol. 14. - P. 272-276.

154. Szyf, M. Nongenetic inheritance and transgenerational epigenetics / M. Szyf // Trends Mol Med. - 2015. - Vol. 21. - P. 134-144.

155. Tay, Y.K. Non-ablative 1,450-nm diode laser treatment of striae distensae / Y.K. Tay, C. Kwok, E. Tan [et al.] // Lasers Surg Med. - 2006. - Vol. 38. - P. 196-199.

156. Thornton, MJ. Estrogens and aging skin / M.J. Thornton // Dermatoendocrinol. - 2013. - Vol. 5. - P. 264-270.

157. Tian, T. Efficacy and safety of a sublative bipolar fractional radiofrequency system combined with topical tretinoin in treating striae gravidarum: a randomized pilot study / T. Tian, Y.J. Luo, H. Wang // Dermatol Surg. - 2019. - Vol. 45. - P. 1245-1252.

158. Tong, P.L. A quantitative ap proach to histopathological dissection of elastin-related disorders using multiphoton microscopy / P.L. Tong, J. Qin, C.L. Cooper [et al.] // Br J Dermatol. - 2013. - Vol. 169. - P. 869-879.

159. Trace, A.P. Keloids and Hypertrophic Scars: A Spectrum of Clinical Challenges / A.P. Trace, C.W. Enos, A. Mantel [et al.] // Am J Clin Dermatol. -2016. - Vol. 17. - P. 201-223.

160. Trelles, M.A. Effects achieved on stretch marks by a non-fractional broadband infrared light system treatment / M.A. Trelles, J.L. Levy, I. Ghersetich [et al.] // Aesthetic Plast Surg. - 2008. - Vol. 32. - P. 523-530.

161. Tretti Clementoni, M. A novel 1565 nm non-ablative fractional device for stretch marks: A preliminary report / M. Tretti Clementoni, R. Lavagno // J Cosmet Laser Ther. - 2015. - Vol. 17. - P. 148-155.

162. Tung, J.Y. Genome-wide association analysis implicates elastic microfibrils in the development of nonsyndromic striae distensae / J.Y. Tung, A.K. Kiefer, M. Mullins [et al.] // J Invest Dermatol. - 2013. - Vol.133. - P. 2628-2631.

163. Ud-Din, S. Topical management of striae distensae (stretch marks): prevention and therapy of striae rubrae and albae / S. Ud-Din, D. McGeorge, A. Bayat // J Eur Acad Dermatol Venereol. - 2016. - Vol. 30. - P. 211-222.

164. Valente, D.S. Incidence and risk factors of Striae Distensae following breast augmentation surgery: a cohort study / D.S. Valente, R.K. Zanella, L.F. Doncatto [et al.] // PLoS One. - 2014. - Vol. 9(5). - P. e97493.

165. Wahman, A.J. Striae gravidarum as a predictor of vaginal lacerations at delivery / A.J. Wahman, M.A. Finan, S.C. Emerson [et al.] // South Med J. -2000. - Vol. 93. - P. 873-876.

166. Waibel, J. Preliminary observations on fractional ablative resurfacing devices: clinical impressions / J. Waibel, K. Beer, V. Narurkar [et al.] // J Drugs Dermatol. - 2009. - Vol. 8(05). - P. 481-485.

167. Wang, K. Evaluation of a 1540-nm and a 1410-nm nonablative fractionated laser for the treatment of striae / K. Wang, N. Ross, K. Osley [et al.] // Dermatol Surg. - 2016. - Vol. 42. - P. 225-231.

168. Wang, F. Severe disruption and disorganization of dermal collagen fibrils in early striae gravidarum / F. Wang, K. Calderone, T.T. Do [et al.] // Br J Dermatol. - 2018. - Vol. 178. - P. 749-760.

169. Wanitphakdeedecha, R. Treatment of striae distensae with variable square pulse Erbium: YAG laser resurfacing / R. Wanitphakdeedecha // J Laser Health Acad. - 2012. - Vol. 1. - P. S15.

170. Watson, R.E. Fibrillin microfibrils are reduced in skin exhibiting striae distensae / R.E. Watson, E.J. Parry, J.D. Humphries [et al.] // Br J. Dermatol. - 1998. - Vol. 138. - P. 931-937.

171. Weinacker, D. Applications of recombinant in the healthcare industry / D. Weinacker, C. Rabert, A.B. Zepeda [et al.] // Braz J Microbiol. - 2013. - Vol. 44. - P. 1043-1048

172. Weisenberger, D.J. Role of the DNA methyltransferase variant DNMT3b3 in DNA methylation / D.J. Weisenberger, M. Velicescu, J.C. Cheng [et al.] // Mol Cancer Res. - 2004. - Vol. 2. - P. 62-72.

173. Wilson, B.T. Juvenile idiopathic arthritis, mitral valve prolapse and a familial variant involving the integrin-binding fragment of FBN1 / B.T. Wilson,

S.A. Jensen, C.P. McAnulty [et al.] // Am J Med Genet A. - 2013. - Vol. 161. - P. 2047-2051.

174. Wollina, U. Management of stretch marks (with a focus on striae rubrae) / U. Wollina, A. Goldman // J. Cutan. Aesthetic Surg. - 2017. - Vol. 10. -P. 124.

175. Wu, Z.Y. Identification of differently expressed microRNAs in keloid and pilot study on biological function of miR-199a-5p / Z.Y. Wu, L. Lu, X.R. Guo // Chinese Journal of Plastic Surgery. - 2013. - Vol. 29(4). - P. 279-284.

176. Yamaguchi, K. Prevention of striae gravidarum and quality of life among pregnant Japanese women / K. Yamaguchi, N. Suganuma, K. Ohashi // Midwifery. - 2014. - Vol. 30. - P. 595-599.

177. Yang, Y.J. Treatment of Striae distensae with nonablative fractional laser versus ablative CO (2) fractional laser: A randomized controlled trial / Y.J. Yang, G.Y. Lee // Ann Dermatol. - 2011. - Vol. 23. - P. 481-489.

178. Yi, N. Pyruvate dehydrogenase kinase is a negative regulator of interleukin-10 production in macrophages / N. Yi, J. Daun, S. Juha [et al.] // Journal of molecular cell biology. - 2020. - Vol. 12(7). - P. 543-555.

179. Youssef, S.E.S. Striae distensae: Immunohistochemical assessment of hormone receptors in multigravida and nulligravida / S.E.S. Youssef, E.A. El-Khateeb, D.G. Aly [et al.] // J Cosmet Dermatol. - 2017. - Vol. 16. - P. 279-286.

180. Yu, X. MicroRna deregulation in keloids: an opportunity for clinical intervention? / X. Yu, Z. Li, M.T. Chan [et al.] // Cell Prolif. - 2015. - Vol. 48. -P. 626-630.

181. Zaleski-Larsen, L.A. A Comparison Study of the Nonablative Fractional 1565-nm Er: glass and the Picosecond Fractional 1064/532-nm Nd: YAG Lasers in the Treatment of Striae Alba: A Split Body Double-Blinded Trial / L.A. Zaleski-Larsen, I.T. Jones, I. Guiha [et al.] // Dermatol Surg. - 2018. - Vol. 44(10). - P. 1311-1316.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Приложение 1 - Исследование полиморфизма генов.

Место проведения Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, Лаборатория генной диагностики (лицензия ФС-54-01-000991 от 02.04.2009)

Использованные реактивы Tween 20 ("Serva", USA), SDS, Tris-base (ICN, USA), акриламид (ICN, USA), N,N- метилен бисакриламид (ICN, USA), ПСА (Sigma), ТЭМЕД (Reanal), KCl, MgCl2, (NH4)2SO4, ЭДТА, NaCl, NaAc, NaOH, HCl, дезоксинуклеотидтрифосфаты (dNTP) и олигонуклеотидные праймеры (ИХБФМ СОРАН)

Ферменты Taq-полимераза (ИХБФМ), лизоцим (Serva), протеиназа К (Serva)

Выделение ДНК В пробирки объемом 1,5 мл с клиническими образцами вносят в 250 мкл лизирующего раствора а1 и тщательно перемешивают на вортексе. Прогревают пробирку 5 минут при 65°С (45-70°С), тщательно перемешивают на вортексе до полного растворения материала. Добавляют 20 мкл ресуспендированного на вортексе сорбента (в каждую пробирку отдельным наконечником), хорошо перемешивают содержимое пробирки на вортексе и оставляют в штативе на 2 минуты для осаждения сорбента. Суспензию еще раз перемешивают и отстаивают 7-9 минут. Осаждают сорбент на микроцентрифуге в течение 30 секунд. Отбирают супернатант из каждой пробирки отдельным наконечником (удобно использовать вакуумный отсос с колбой-ловушкой для отбираемой жидкости). Добавляют по 400 мкл отмывочного раствора а2, перемешивают на

вортексе до полного ресуспендирования сорбента (если сорбент плохо разбивается, тогда его разбивают при помощи наконечника пипетки) осаждают на "Микроспине" в течение 30 секунд и отбирают супернатант. Повторяют процедуру отмывки раствором а2 еще раз, тщательно отбирают супернатант. Аналогичным образом осадок промывают 70% этиловым спиртом 1 раз, тщательно отбирают супернатант и высушивают осадок сорбента при открытых крышках пробирок в термостате при 56°С в течение 10 минут. Добавляют 100 мкл элюирующего буфера а3, тщательно ресуспендируют сорбент, помещают в термостат при 56°С на 10 минут. Суспензию осаждают на микроцентрифуге при 13000 об/мин в течение 2 минут. Супернатант содержит очищенную ДНК, проба готова к постановке ПЦР.

Растворы для выделения ДНК

Лизирующий раствор а1 6M Gu HCl, 40 mM Tris HCl pH 7-8, 36 mM EDTA.

Отмывочный раствор а2 55% этанол, 10 мМ Tris HCl pH 7-8, 100 мМ NaCl. Хранить при комнатной температуре. Срок годности, по крайней мере, три недели.

Элюирующий буфер а3 10 mM Tris HCl pH 7-8, 0,5 mM EDTA

Генотипирование однонуклеотидных замен в режиме реального времени с использованием конкурирующих TaqMan-зондов, комплементарных полиморфным участкам ДНК

Генотипирование однонуклеотидных замен в генах COL1a1 (га4880), ММП3 (га3025058) проводили методом генотипирования однонуклеотидных замен в режиме реального времени с использованием конкурирующих

TaqMan-зондов, комплементарных полиморфным участкам ДНК.

Зонды отличаются по структуре на один нуклеотид, соответствующий SNP (находится в центре олигонуклеотидного зонда). В реакционной смеси зонды конкурируют друг с другом за гибридизацию с матрицей. При полной комплементарности матрицы и зонда гибридизация будет эффективнее, чем в случае неполной комплементарности. Следовательно, накопление флуоресцентного сигнала, соответствующего полностью комплиментарному зонду, будет преобладать.

Основным параметром, который мы учитывали для каждой из реакций, являлось соотношение значений флюоресценции (relative fluorescence unit, или RFU) в диапазонах эмиссии красителей FAM и R6G. Важным критерием достоверности генотипирования служила кластеризация генотипов в группы, строившаяся на основе показателей интенсивности флюоресценции (в относительных единицах флюоресценции - RFU).

Каждый образец амплифицировался с использованием пары праймеров и двух зондов, несущих «гаситель» на З'-конце и разные флюоресцентные красители (FAM либо R6G) на 5'-конце. Структуры праймеров и зондов приведены в таблице 1. Общий объем реакционной смеси составлял 25 мкл, смесь содержала 40-100 нг ДНК; 300 нМ каждого праймера; по 100-200 нМ Taqman-зондов, коньюгированных с FAM или R6G; 200 мкМ-ные dNTP, амплификационный буфер термостабильную Taq-полимеразу - 0,5 ед.акт./реакц.

ПЦР проводилась в следующих условиях: начальная денатурация 3' при 96С°; затем 40 циклов, включающих денатурацию при 96°С-8", отжиг праймеров и последующую элонгацию при 60°С-35" (каждый шаг сопровождался регистрацией флюоресцентного сигнала в диапазонах, соответствующим интервалам флюоресценции флюорофоров FAM и R6G). Структуры праймеров и зондов, используемых для генотипирования в режиме реального времени методом конкурирующих TaqMan-зондов

Локус

Праймеры

Зонды

COLlal (rs4880)

Gtgctggaggttagggtgtc

5'- FAM- ATCCCGCCCaCATTCCCTG -BHQ-3'

TGGCTTGCGTGGTAGAGAC

5'- R6G - ATCCCGCCCCCATTCCCT BHQ-3'

ММП3 (rs3025058)

5'-

TATTTTCCCTGTATTTCAATCAGGA-

3'

5'-FAM-

AGACATGGTTTTTTCCCCCC-BHQ-3'

5' -AGTATTCTATGGTTCTCCATTCCT-

3'

5' -R6G-AGACATGGTTTTTCCCCCC-BHQ-3'

Генотипирование однонуклеотидных замен с использованием флюоресцентно-меченого олигонуклеотидного зонда и анализа кривых плавления

Типирование полиморфных локусов ESR1 (rs2234693 проводили методом Fluorescent melt curve analysis (FMCA) с использованием флюоресцентно-меченого олигонуклеотидного зонда с последующим плавлением амплификационных продуктов и анализа кривых плавления. Суть метода заключается в том, что участок гена, содержащий полиморфную замену, амплифицируется с использованием прямого и обратного праймеров, при этом для преимущественной наработки одной из цепей концентрация одного из праймеров в несколько раз превышает концентрацию другого (лимитирующий праймер). В амплификационную смесь также добавляется олигонуклеотидный зонд, комплементарный полиморфному участку нарабатываемой цепи и несущий на 5'-конце флюоресцентную метку, а на 3'-конце - тушитель флюоресценции. Далее амплификационная смесь инкубируется при температуре, позволяющей зонду образовать дуплекс с наработанной цепью, и плавится со съёмом сигнала в режиме реального времени. Кинетика плавления дуплекса различается благодаря полной или неполной гибридизации зонда с амплификационным продуктом, содержащим полиморфную замену, что позволяет определить генотип образца. В случае полной гибридизации температура, при которой цепи плавились, была выше, чем в случае неполной. Краситель флюоресцировал с разной интенсивностью в зависимости от того, прикреплен ли зонд к ДНК или нет, соответственно в

момент плавления дуплекса флуоресценция резко падала.

Полимеразную цепную реакцию проводили в конечном объёме 20 мкл, содержащем 65 мМ Tris-HCl, 16 мМ (NH4)2SO4; 0,05% Tween 20; 3 мМ MgCl2., 0.2 мМ dNTP, 20-100 нг ДНК, 1 ед. акт. KlenTaq-ДНК-полимеразы и растворы олигонуклеотидных праймеров и зондов в следующих концентрациях: лимитирующий праймер - 0.1 мМ, избыточный праймер - 1 мМ и зонд - 0.1 мМ. Структура олигонуклеотидных праймеров и зондов приведена в таблице 1. Амплификация проводилась с помощью амплификатора iCycler iQ5 (Bio-Rad, США) в следующих условиях: начальная денатурация 3' при 96°С; затем 55 циклов, включающих денатурацию при 96°С-8 сек, отжиг праймеров и последующую элонгацию при 58°С- 20 сек (каждый шаг сопровождался регистрацией флюоресцентного сигнала в диапазонах, соответствующим интервалам флюоресценции используемых флуорофоров), затем проводилась денатурация полученных амплификационных продуктов при 96°С - 20 секунд, гибридизация с зондом при 40°С - 20 секунд и съем кривой плавления, полученных гибридных молекул в диапозоне 40°С - 80°С с шагом 0,5°С в течение 10 секунд.

Структуры праймеров и зондов, используемых для генотипирования в режиме реального времени методом FMCA

Локус

Праймеры

Зонды

ESR1 (rs2234693)

5' -cagggttatgtggcaatgac-3'

5-FAM-

AGCATAAAACAGCTGGGACAT-BHQ-3'

5' -ACCAATGCTCATCCCAACTC-

3'

Интерпретация данных генетического анализа

В работе исследовался полиморфизм следующих генов: матриксных металлопротеиназ (ММР 3), рецептора эстрогена (ESR1), цепей коллагена 1 типа (С01Ш).

Для генотипа С/С интенсивность флюоресценции снижалась

преимущественно при температуре 54°, при генотипе G/G интенсивность флюоресценции снижалась преимущественно при температуре 64°, при гетерозиготном генотипе интенсивность флюоресценции снижалась в обоих диапазонах. Оценка генетического анализа

Аллель Комментарии

1 - гомозигота частый аллель (норма/норма) Отсутствие повышенного риска развития исследуемого признака. Риск соответствует «среднепопуляционному».

2 - гетерозигота (норма/мутация) Умеренный риск развития исследуемого признака.

3 - гомозигота редкий аллель (мутация/мутация) Значительный риск развития исследуемого признака (ген в отношении данного признака является фактором риска возникновения заболевания).

Приложение 2 - Адаптированный опросник ДИКЖ

Насколько сильно Вас беспокоят зуд, боль, жжение, болезненность кожи в области стрий? - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл; - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов

Насколько неуверенно Вы чувствовали себя в повседневной жизни из-за стрий? - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл; - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов

Насколько сильно состояние Вашей кожи мешало Вам при совершении покупок, в хозяйственной работе? - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл; - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов

Насколько сильно состояние Вашей кожи влияло на выбор одежды? - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл; - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов

Насколько сильно состояние Вашей кожи помешало Вашим контактам с окружающими, активному отдыху? - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл; - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов

Насколько сильно состояние вашей кожи помешало Вам в занятиях физкультурой и - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл;

спортом? - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов

Помешало ли Вам состояние Вашей кожи в работе или учебе? - Да - 3 балла; - Нет - 0 баллов

Влияло ли состояние Вашей кожи на отношения с друзьями, близкими, родственниками, партнерами? - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл; - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов

Насколько сильно состояние вашей кожи затрудняло Вам интимные отношения? - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл; - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов

Насколько сильно лечение стрий изменило порядок Вашей жизни (например, Вы потеряли много времени, денег, уделяли меньше внимания работе, семье)? - очень сильно (очень часто) - 3 балла; - сильно (часто) - 2 балла; - несильно - 1 балл; - совсем нет или затрудняюсь ответить - 0 баллов