Оптимизация методов спектрофлюориметрической диагностики поверхностного рака мочевого пузыря тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.40, кандидат медицинских наук Васильченко, Илья Леонидович

• Васильченко, Илья Леонидович
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Васильченко, Илья Леонидович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Клиническое значение совершенствования лечебно- 10 диагностической тактики при поверхностном РМП

1.2. Современные принципы лечения поверхностного РМП

1.3. Методы диагностики поверхностного РМП

1.4. Флюоресцентные методы при поверхностном раке мочевого 16 пузыря

1.4.1. Естественная (эндогенная) флюоресценция в диагностике 16 поверхностного РМП

1.4.2. Значение флюоресцентной диагностики с 19 использованием экзогенных фотосенсибилизаторов

1.4.2.1. Патогенетические механизмы 20 фотосенсибилизации и фотоповреждения

1.4.2.2. Терапевтический вклад экзогенных 22 фотосенсибилизаторов

1.4.2.3 Основные аспекты проведения флюоресцентной 25 диагностики при раке мочевого пузыря

1.4.2.4. Флюоресцентная диагностика поверхностного 32 РМП с 5-аминолевулиновой кислотой

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Экспериментальная часть

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оптимизация методов спектрофлюориметрической диагностики поверхностного рака мочевого пузыря»

АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ

В современной онкоурологии вопрос об адекватной оценке распространенности и эффективности лечения поверхностного рака мочевого пузыря (РМП) не потерял своей актуальности. Современные схемы лечения поверхностного РМП наряду с внутрипузырной терапией предусматривают обязательный хирургический этап с предпочтением способа трансуретральной резекции (ТУР) остаточной опухоли [150]. Поэтому точная идентификация всех очагов поверхностного рака мочевого пузыря, который в большинстве случаев характеризуется мультицентричным ростом [200], необходима для достижения успеха при хирургическом органосохранном лечении. Использование традиционной цистоскопии при трансуретральной резекции поверхностных опухолей мочевого пузыря сопровождается рецидивами уже через три месяца в 36% случаев, достигая 75% при мультифокальном поверхностном РМП [200].

Возможность снизить показатель рецидивирования поверхностного рака мочевого пузыря за счет объективной оценки степени распространенности и адекватной резекции стала реальной с появлением методов, основанных на собственной флюоресценции соединений, содержащихся в злокачественно трансформированных тканях организма - так называемой аутофлюоресценции. Соединения порфиринового ряда наиболее изучены и предпочтительны для диагностики злокачественных опухолей. Они флюоресцируют в красной и ближней инфракрасной областях спектра и достоверное двух-, трехкратное увеличение их концентрации в неопластически трансформированной ткани по сравнению с нормальными [179; 323] происходит уже на ранних стадиях патологического процесса.

Чувствительность и специфичность метода аутофлюоресценции в диагностике поверхностного РМП максимально высоки и составляют 95% и 77% [323], но в то же время подвержены влиянию различных факторов -морфологические особенности опухоли, опыт врача эндоскописта, условия проведения процедуры, а также чувствительность сложной аппаратуры.

Одним из вариантов оптимизации флюоресцентной диагностики поверхностного РМП является введение экзогенных фотосенсибилизаторов, стимулирующих синтез собственных (эндогенных) порфиринов. Способность злокачественных опухолей мочевого пузыря селективно накапливать фотосенсибилизаторы, повышая градиент концентрации порфирина между нормальной и неопластической тканью, обеспечивает достаточный для визуализации флюоресцентный контраст.

В настоящее время метод флюоресцентной диагностики онкологических новообразований различных локализаций, основанный на введении индуктора образования эндогенного- протопорфирина IX - 5-аминолевулиновой кислоты (5-AJIA), является одним из наиболее распространённых [135; 148; 201; 279; 280]. Эффективность использования 5-AJIA для флюоресцентной диагностики изучена для различных типов злокачественных клеток, и в частности, мочевого пузыря, меланомы, различных типов лейкозов» [152; 171; 191; 192; 214; 249]. Высокая информативность использования 5-АЛА в диагностических целях подтверждена и в исследованиях in vivo. Результаты чувствительности (96,998,7%) и специфичности (81-98%) флюоресцентной диагностики поверхностного РМП с 5-AJIA, а также отдаленные результаты ТУР- под контролем флюоресценции в- присутствии 5-АЛА значительно выше традиционных методов диагностики [322].

Тем не менее; метод диагностики поверхностного РМП, основанный на флюоресценции в опухоли протопорфирина IX, образующегося при избытке 5-АЛА, пока не до конца изучен и отработан. Не удается решить проблему недостаточной информативности метода, связанную с низкой интенсивностью эндогенной и экзогенной флюоресценции биологических тканей in vivo в целом [33; 45]. Недостаточно изучены спектральные характеристики индуцированного 5-АЛА протопорфирина IX, что могло бы помочь для интерпретации флюоресценции нормальных тканей, окружающих опухоль, а также флюоресценции в местах грануляций и некроза на месте удаленной опухоли [112; 138] и снизить число ложноположительных результатов [278]. Кроме того, отсутствуют исследования, изучающие условия синтеза протопорфирина IX, его распределение в клетках и в межклеточной среде и как результат -разногласия в режимах проведения флюоресцентной диагностики с 5-AJIA [63; 190].

Таким образом, флюоресцентная диагностика с использованием 5-АЛА, несомненно, является наиболее информативной в свете существующих методов оценки распространенности и эффективности лечения поверхностного рака мочевого пузыря, но требует подробного изучения и отработки самой методики для повышения информативности и диагностической точности метода, а также расширения спектра клинического приложения.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ: повысить эффективность флюоресцентной диагностики поверхностного рака мочевого пузыря

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Изучить особенности порфиринового обмена клеток миелолейкоза К-562, клеток костного* мозга и мононуклеаров в условиях вариаций времени инкубации и доз 5-аминолевулиновой кислоты.

2. Изучить спектры флюоресценции протопорфирина IX при инкубации образцов микрокультур в условиях эффективных и нетоксичных доз 5-АЛА.

3. Изучить спектрофлюорометрические характеристики поверхностного рака мочевого пузыря с использованием разработанного in vitro режима эффективной флюоресцентной диагностики.

4. Выполнить сравнительную оценку традиционной и флюоресцентной диагностики поверхностного рака мочевого пузыря с использованием 5-аминолевулиновой кислоты.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ

• Изучены условия синтеза порфиринов при использовании 5-АЛА в качестве метаболического предшественника в гемопоэтических и лимфоидных клетках в норме и на модели клеточной лейкозной линии К-562 в эксперименте in vitro.

• Сравнительное изучение накопления протопорфирина IX клетками костного мозга, нормальными лимфоцитами, лимфоцитами, активированными митогеном ФГА и клетками миелолейкоза К-562 показало исключительно высокую степень избирательности накопления данного вещества в опухолевых клетках по сравнению с нормальными клетками.

• Установлено, что добавление 5-AJ1A в среду культивирования в дозах от 0,4 до 15 мМ приводит к дозозависимому снижению интенсивности флюоресценции ППIX и увеличению числа погибших опухолевых клеток.

• Показано, что максимальная интенсивность флюоресценции протопорфирина IX в суспензии опухолевых клеток без существенного цитотоксического действия наблюдается при сроке инкубации 4 часа и концентрации 5-AJIA 5 мМ.

• Показано, что начиная с дозы 8 мМ проявляется эффект темновой фототоксичности 5-AJIA - гибель 43% опухолевых клеток, достигающая 86% при дозе 5-AJIA 15 мМ.

• Установлено, что полоса флюоресценции в красной области спектра с максимумом интенсивности вблизи длин волн 630 нм и слабой широкой полосой в области 690 нм, наблюдается только в суспензии, клеток миелолейкоза К-562.

• Отмечено, что суммарный спектр максимальной флюоресценции суспензии клеток миелолейкоза К-562 вблизи длин волн 630 нм состоит из двух полос флюоресценции - на длине волньг 625 нм, совпадающим со спектром супернатанта (молекулы протопорфирина IX в водном растворе), и на длине волны 635 нм, совпадающим со спектром излучения отмытых клеток (молекулы протопорфирина IX в клетках).

• Показано, что полоса флюоресценции в длинноволновой области с максимумом на X = 675 нм обусловлена излучением димерных форм молекул протопорфирина IX и регистрируется только при относительно высоких концентрациях этих молекул как в супернатанте так и в клетках.

• Установлено, что клетки, находящиеся в стадии пролиферативной активности в отличие от покоящихся клеток, обладают максимальной интенсивностью флюоресценции, причем время затухания свечения протопорфирина IX в клетках составляет 5 секунд, в.опухоли мочевого пузыря — 60 секунд.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

• Определены. параметры нетоксичной и эффективной флюоресцентной диагностики поверхностного рака мочевого пузыря - доза 5-AJIA - до 5 мМ!и оптимальное время инкубации - 4 часа.

• Интенсивность флюоресценции индуцированного 5-AJIA протопорфирина* IX в опухоли мочевого пузыря определяется ее клеточным составом и возрастает с увеличением степени дифференцировки, а значит, может служить прогностическим признаком агрессивного течения поверхностного рака мочевого пузыря.

• Регистрация с помощью компьютеризированной спектроскопической системы спектров флюоресценции от измененных и-нормальных участков* тканей увеличивает специфичность флюоресцентной диагностики поверхностного рака мочевого пузыря с 5-АЛА до-96%.

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. Добавление 5-АЛА в среду культивирования приводит к дозозависимому увеличению числа погибших клеток миелолейкоза К-562 и снижению интенсивности флюоресценции протопорфирина IX, так что максимум флюоресценции протопорфирина IX наряду- с несущественным цитотоксическим действием приходится-на 4-х часовую инкубацию клеток с 5-АЛА в концентрации до 5 мМ.

2. Сравнительные исследования in vitro по изучению накопления протопорфирина IX клетками костного мозга, нормальными лимфоцитами, лимфоцитами, активированными митогеном ФГА и клетками миелолейкоза К-562, показали исключительно высокую степень избирательности накопления ППIX и более интенсивную флюоресценцию в опухолевых клетках.

3. Интенсивность флюоресценции опухолевых клеток линии К-562 при культивировании в присутствии 5мМ 5-АЛА достоверно зависит от фазы клеточного роста, а максимальной интенсивностью флюоресценции обладают клетки, находящиеся в стадии пролиферативной активности.

4. Полоса флюоресценции протопорфирина IX в красной области спектра с максимумом интенсивности вблизи длин волн 630 нм и слабой широкой полосой в области 690 нм наблюдается только в суспензии клеток миелолейкоза К-562, при этом максимум на X = 675 нм характерен для димерных форм молекул протопорфирина IX и регистрируется только при относительно высоких концентрациях этих молекул.

ПУБЛИКАЦИИ По теме диссертации опубликовано две печатных работы:

1. Васильченко, И.Л. Спектрофлюорометрическая идентификация порфиринопатий как основа фотодинамической терапии гемобластозов / И.Л. Васильченко, В.В. Удут, Л.В. Гердт, В.Е. Прокопьев, Е.В. Бородулина // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2005. -Приложение 1. - С. 82 — 85.

2. Васильченко, И.Л. Оптимизация флюоресцентной диагностики при использовании в качестве метаболического предшественника порфиринов 5-аминолевулиновой кислоты / И.Л. Васильченко, С.П. Селиванов, В.Е. Прокопьев, А.В. Петлин, В.В. Удут // Медицина в Кузбассе. - 2005. - № 4.

Материалы научных исследований были доложены на заседании Областного общества онкологов (Томск, 1992-2000 гг.), Региональной научно-практической конференции "Проблемы терапии онкоурологических заболеваний" (Новосибирск, 1998г), Научно-практической конференции урологов Сибири "Актуальные вопросы урологии" (Томск, 1998г), Научно-практической конференции "Социально-клинические проблемы онкологии" (Кемерово, 2001 г), V Международном конгрессе по вопросам противоопухолевой химиотерапии (Франция, 2000г).

ОБЪЕМ И СТРУКТУРА РАБОТЫ Диссертация изложена на 133 страницах машинописного текста, состоит из введения, трех глав, заключения, выводов, списка литературы, включающего 36 источников отечественной и 294 - зарубежной литературы. Текст иллюстрирован 5 таблицами, 14 графиками и рисунками.

Заключение диссертации по теме «Урология», Васильченко, Илья Леонидович

ВЫВОДЫ

1. Сравнительные исследования in vitro по изучению накопления 5-АЛА клетками костного мозга, нормальными лимфоцитами, лимфоцитами, активированными митогеном ФГА и клетками миелолейкоза К-562, показали исключительно высокую степень избирательности накопления данного вещества в опухолевых клетках по сравнению с нормальными клетками.

2. Определены параметры оптимальной флюоресценции опухолевых клеток - диапазон нетоксичных доз 5-аминолевулиновой кислоты - до 5 мМ и оптимальное время инкубации - 4 часа.

3. Суммарный спектр суспензии опухолевых клеток в среде инкубации состоит из полос флюоресценции с максимумами интенсивности на длине волны 625 нм, совпадающим со спектром супернатанта, и на длине волны 635 нм, совпадающим со спектром излучения отмытых клеток. Первый максимум флюоресценции характерен для молекул протопорфирина IX в водном растворе, а второй — для этих же молекул, находящихся в клетках.

4. Полоса флюоресценции в длинноволновой области с максимумом на А, = 675 нм обусловлена излучением димерных форм молекул протопорфирина IX и должна приниматься во внимание в процедурах диагностики участков неопластически измененных тканей.

5. По данным микроскопических исследований максимальной интенсивностью флюоресценции обладают клетки, находящиеся в стадии пролиферативной активности.

6. Время затухания свечения индуцированного 5-АЛА протопорфирина IX в клеточной культуре составляет 5 секунд, в опухоли мочевого пузыря - 60 секунд.

7. Показатель интенсивности флюоресценции опухоли мочевого пузыря достоверно зависит от степени дифференцировки поверхностного рака мочевого пузыря и не связан с размерами опухоли.

8. Диагностика поверхностного рака мочевого пузыря на основе регистрации флюоресценции индуцированного 5-АЛА протопорфирина IX и ее спектрального анализа при помощи компьютеризированного видеоспектроанализатора с многоканальным усилителем яркости обеспечивает соответствие гистоморфологическим данным злокачественной опухоли в 96%.

88

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В современной онкоурологии вопрос об адекватной оценке распространенности и эффективности лечения поверхностного РМП не потерял своей актуальности. Современные схемы лечения поверхностного РМП наряду с внутрипузырной терапией предусматривают обязательный хирургический этап с предпочтением способа трансуретральной резекции остаточной опухоли. Поэтому точная идентификация всех очагов поверхностного рака мочевого пузыря, который в большинстве случаев характеризуется мультицентричным ростом, необходима для достижения успеха при органосохранной операции.

Объективность оценки степени распространенности поверхностного РМП возросла с появлением методов, основанных на регистрации флюоресценции соединений, содержащихся в злокачественно трансформированных тканях организма, (и, в частности, порфиринов). Особенно перспективным направлением флюоресцентной диагностики является использование индукторов синтеза протопорфирина IX и, в частности, 5-аминолевулиновой кислоты. Однако, метод диагностики поверхностного РМП, основанный на флюоресценции опухоли в присутствии избытка предшественника порфирина -5-АЛА, пока не до конца изучен и отработан. Не удается решить проблему недостаточной информативности метода, связанную с низкой интенсивностью эндогенной и экзогенной флюоресценции биологических тканей in vivo в целом. Не изучены спектральные характеристики протопорфирина IX, образующегося в условиях избытка 5-АЛА, что могло бы помочь для правильной интерпретации флюоресценции нормальных тканей, окружающих опухоль, а также флюоресценции в местах грануляций и некроза на месте удаленной опухоли и снизить число ложноположительных результатов. Кроме I того, отсутствуют исследования, изучающие условия синтеза протопорфирина IX, его распределение в клетках и в межклеточной среде и как результат -разногласия в режимах проведения флюоресцентной диагностики с 5-АЛА.

С целью повышения эффективности флюоресцентной диагностики поверхностного рака мочевого пузыря мы в настоящее работе подробно изучали флюоресцентные и спектральные характеристики протопорфирина IX, образующегося в клетках в условиях избытка 5-АЛА.

Основной объем исследований, решающих поставленные задачи, был выполнен в условиях эксперимента. Образцы нормальных и опухолевых клеток инкубировались в течение 1-24 часов с раствором 5-АЛА, который добавлялся к клеточным культурам в различной концентрации - от 0,4 мМ до 15 мМ.

Флюоресценция и спектральные характеристики протопорфирина IX в опухоли мочевого пузыря изучались у 78 пациентов (16 женщин и 62 мужчины) в возрасте 30-79 лет, больных поверхностным раком мочевого пузыря Та-TimNoM0. Достоверных различий в распределении больных в зависимости от возраста, стадии рака мочевого пузыря, локализации и размеров опухоли, а также степени дифференцировки переходноклеточного рака мочевого пузыря в исследуемой группе не было. Всем больным трансуретральная резекция опухоли под контролем флюоресценции индуцированного 5-АЛА протопорфирина IX выполнялась как хирургический этап комбинированного лечения поверхностного РМП. Раствор 5-АЛА вводился внутрипузырно с соблюдением дозы и длительности экспозиции, установленными в исследованиях in vitro, после чего выполнялась ТУР под контролем флюоресцентных и спектральных характеристик опухоли мочевого пузыря. Для возможности соблюдения дозировки 5-АЛА и продолжительности ее внутрипузырной экспозиции и исключения преждевременного опорожнения мочевого пузыря по причине дизурических расстройств, всем больным перед инсталляцией назначались обезболивающие и спазмолитические препараты.

Источником излучения, возбуждающим флюоресценцию образцов клеток и опухоли мочевого пузыря, служила кварцевая ртутная лампа высокого давления мощностью 250 Вт ДРШ-250 с длиной волны возбуждения - 405 нм. Для получения фазово-контрастного изображения использовалась галогеновая лампа мощностью 100 Вт.

Регистрацию фазово-коитрастиого и флюоресцентного изображения клеток и опухоли мочевого пузыря проводили с использованием видеоспектроанализатора с многоканальным усилителем яркости излучения и супервидиконом на основе промышленной телевизионной установки ПТУ-50 через канал наблюдения дихроичного зеркала, пропускающего свет красного диапазона спектра. Эта система регистрации излучения адаптирована к микроскопу И-2 для наблюдения клеток крови, гистологических и цитологических срезов в свете флюоресценции и отражения, а также к цистоскопу фирмы "Karl Shtorz". Дополнительно производилось возбуждение и наблюдение флюоресценции в системе двух скрещенных светофильтров. Светофильтр, пропускающий свет в диапазоне 350-490 нм (СС-8), устанавливался в осветительном (возбуждающем) канале микроскопа. Светофильтр (ЖЗ-18), пропускающий излучение с длинами волн больше 580 нм, устанавливался в наблюдательном канале перед чувствительной видеокамерой VNC-703. Съемка каждого поля зрения осуществлялась на два кинокадра: на первый - фазово-контрастное изображение клетки, на второй -флюоресцентное изображение клетки, обусловленное излучением порфириновых молекул в красной области спектра. Обработка результатов этих наблюдений проводилась с помощью специально разработанной компьютерной программы, которая включала захват и суммирование видеокадров, вычисление шумов и помех видеосистемы, а также математическую обработку полученных видеоизображений.

Спектральные характеристики проб изучали на спектрофлюорометре «Hitachi MPF-4». Измерения проводили в термостатируемых кварцевых кюветах (1x1 см). Интенсивность флюоресценции регистрировали при длине волны 625, 630, 635 нм (длина волны возбуждения 405 нм) и выражали в относительных единицах. Большинство измерений проводили при ширине щели возбуждения 10 нм и ширине щели регистрации флюоресценции 3 нм, а спектры возбуждении флюоресценции при 3 и 3 нм соответственно.

При цистоскопическом исследовании слизистой мочевого пузыря искали красную флюоресценцию - свет с длиной волны 630-700 нм опухолевых участков. Спектры флюоресценции и отражения опухоли мочевого пузыря снимались в 3-5 различных точках и анализировались с помощью стандартных методов и программ корреляционного анализа. При регистрации спектральных характеристик тканей слизистой мочевого пузыря вводились поправки на оптические характеристики цистоскопа. Полученный при ТУР материал отправлялся на гистологическое исследование для уточнения соответствия спектральных характеристик тканей морфологическим.

Микроскопические исследования влияния различных доз 5-АЛА на выживаемость клеток миелолейкоза К-562 и интенсивность флюоресценции протопорфирина IX в суспензии клеток показали, что добавление 5-АЛА в среду культивирования в дозах от 0,4 до 15 мМ приводило к дозозависимому увеличению числа погибших клеток и снижению интенсивности флюоресценции протопорфирина IX.

При этом краткосрочная инкубация клеток с 5-АЛА в концентрации до 5 мМ не сопровождалась существенным цитотоксическим действием. В то же время интенсивность флюоресценции протопорфирина IX возрастала, достигая максимума при концентрации 5-АЛА 5 мМ и продолжительности инкубации 4 часа.

В области высоких концентраций (выше 10 мМ) наблюдалось увеличение числа погибших клеток до 20% и снижение интенсивности флюоресценции протопорфирина IX. При увеличении срока инкубации до 24 часов максимальная интенсивность флюоресценции протопорфирина IX в суспензии клеток наблюдалась при концентрации 5-АЛА 2,5 мМ, а при максимальной дозе 5-АЛА (15 мМ) интенсивность флюоресценции снижалась в 3,5 раза. Эффект темновой фототоксичности 5-АЛА начинал проявляться при использовании 5-АЛА в дозе 8 мМ. Возрастала гибель клеток, достигая уровня 43%. При максимальной дозе 5-АЛА (15 мМ) количество погибших клеток составило 86%. Этот факт можно объяснить тем, что с увеличением содержания

5-АЛА в среде роста происходит уменьшение рН, приводящее к нарушению процессов нормального функционирования клеток и кислотному разрушению плазматических мембран клеток.

Таким образом, диапазон доз 5-АЛА до 5 мМ и время инкубации - 4 часа являются нетоксичными и достаточными для эффективной флюоресценции раствора клеток плотностью 2x105 клеток/мл и объемом микрокультур — 200 мкл, в связи с чем в дальнейшем культивирование клеток с 5-АЛА проводили, придерживаясь именно этих параметров.

Сравнительные исследования накопления протопорфирина IX клетками костного мозга, нормальными лимфоцитами, лимфоцитами, активированными митогеном ФГА и клетками миелолейкоза К-562, а также спектров флюоресценции образцов микрокультур, показали исключительно высокую степень избирательности накопления данного вещества в опухолевых клетках по сравнению с нормальными клетками. При этом только в суспензии клеток миелолейкоза К-562 наблюдалась полоса флюоресценции в красной области спектра с максимумом интенсивности вблизи длин волн 630 нм и слабой широкой полосой в области 690 нм. Полоса флюоресценции в длинноволновой области с максимумом на X = 675 нм характерна для димерных форм молекул протопорфирина IX. Она регистрировалась только при относительно высоких концентрациях этих молекул как в супернатанте так и в клетках.

Анализ вклада различных молекулярных компонент показал, что суммарный спектр суспензии опухолевых клеток в среде инкубации состоит из полос флюоресценции с максимумами интенсивности на длине волны 625 нм, совпадающей со спектром супернатанта, и на длине волны 635 нм, совпадающей со спектром излучения отмытых клеток. Первый максимум флюоресценции характерен для молекул протопорфирина IX в водном растворе, а второй - для этих же молекул, находящихся в клетках.

Микроскопическое изучение опухолевых клеток линии К-562 после культивирования в присутствии 5мМ 5-АЛА показало, что увеличение интенсивности флюоресценции достоверно зависело от фазы клеточного роста.

Из анализа видеоизображения клеток, находящихся в экспоненциальной фазе роста, при их наблюдении фазово-контрастным и флюоресцентным способом, следует, что спустя 4 часа после начала инкубации флюоресцировало не более 30-40% всех клеток. При этом максимальной интенсивностью флюоресценции обладали клетки больших размеров с высоким ядерно-цитоплазматическим отношением, то есть клетки, находящиеся в стадии пролиферативной активности. После суточной инкубации флюоресцировало не менее 95% клеток, наблюдаемых в поле зрения микроскопа. Это объясняется увеличением скорости синтеза и накопления молекул протопорфирина IX в активно пролиферирующих клетках, а также захватом молекул протопорфирина IX из супернатанта плазматической мембраной покоящихся клеток. При этом отмечались значительные колебания в яркости флюоресценции наблюдаемых клеток. Таким образом, не принимая во внимание длительность инкубации, в конечном счете, внутриклеточное содержание фотоактивного протопорфирина IX, индуцированного 5-АЛА, достаточно высоко, что опровергает утверждение ряда исследователей о низкой проницаемости липидного слоя биомембран для 5-АЛА. Время затухания свечения клеток составляло 5 секунд, и зависело от интенсивности возбуждающего излучения.

Максимально устранить влияние факторов, снижающих флюоресценцию in vivo, а также измерить спектральные характеристики и в то же время получить пространственное изображение опухоли мочевого пузыря в свете флюоресценции и отражения стало возможным с использованием видеоспектроанализатора с многоканальным усилителем яркости излучения и супервидеоконом на основе промышленной телевизионной установки ПТУ-50.

Спектрофлюорометрия опухоли мочевого пузыря выполнялась после внутрипузырной инсталляции раствора 5-АЛА с соблюдением концентрации (5 мМ в 100 мл) и длительности экспозиции (4 часа) - нетоксичных и эффективных с позиции флюоресцентной диагностики в исследованиях in vitro. При цистоскопическом исследовании слизистой мочевого пузыря в условиях введенного внутрипузырно раствора 5-АЛА было отмечено, что интенсивность флюоресценции опухолевой ткани превосходила свечение неизмененной слизистой оболочки более чем на 25% (р<0,05) и визуально определялась в виде рубинового свечения пораженного участка с определением достаточно четких границ на фоне нормальной слизистой мочевого пузыря, имеющей серо-голубую окраску. Морфологическое исследование участков слизистой, удаленных при трансуретральной резекции под контролем визуальной флюоресценции показало наличие переходноклеточного рака мочевого пузыря только в 85% случаев. В целом, низкий ожидаемый диагностический потенциал был обусловлен тем, что удаленные под флюоресцентным контролем ткани по результатом гистоморфологического исследования были представлены не только опухолью мочевого пузыря. Среди прочих имелись участки слизистой мочевого пузыря с элементами выраженного неспецифического воспаления, метаплазией уротелия и грануляционной тканью на месте предшествующих биопсийных исследований. Кроме того, ложная флюоресценция наблюдалась в случаях локализации опухоли в шейке мочевого пузыря и была обусловлена тангенциальным свечением эндоскопа, расположенного под острым углом по отношению к стенке пузыря.

В ходе видеоэндоскопии с внутрипузырным введением 5-АЛА нами было отмечено, что интенсивность и размеры флюоресцирующих опухолей мочевого пузыря варьировали и зависели не только от локализации опухоли в мочевом пузыре и состояния окружающих тканей, не вовлеченных в опухолевый процесс. Так, интенсивность , флюоресценции снижалась с увеличением размеров опухоли и увеличением глубины инвазии, т.е. стадии поверхностного рака мочевого пузыря. Однако эта зависимость не носила статистически достоверный характер. И напротив, высоко достоверная корреляция была получена между интенсивностью флюоресценции и степенью дифференцировки опухолей мочевого пузыря, резецированных под контролем флюоресценции (р=0,00594).

Для корректного научного анализа порфиринового обмена в опухоли мочевого пузыря нами одновременно исследовались спектры отражения, флюоресценции и спектры возбуждения флюоресценции в широком диапазоне длин волн. При регистрации с помощью компьютеризированной спектроскопической системы спектров флюоресценции от измененных и нормальных участков тканей было отмечено, что принципиальная разница между нормальными и опухолевыми тканями наблюдается в красной области спектра (к > 600 нм) - интенсивность флюоресценции злокачественных тканей в этой области спектра растет, в то время как для нормальных участков падает. Максимальная разница флюоресценции опухолевой ткани и нормальной слизистой мочевого пузыря наблюдалась на двух участках спектра с длинами волн (630-635) 635-640 нм и 700-710 нм соответственно. Морфологическое исследование участков слизистой, удаленных при трансуретральной резекции под флюоресцентным контролем с учетом данных спектрометрии показало соответствие спектральных характеристик тканей морфологическому исследованию в 96% случаев.

Элиминация (разрушение) 5-АЛА-индуцированного протопорфирина IX под действием света и как следствие - уменьшение и исчезновение флюоресценции (фотообесцвечивание) опухоли мочевого пузыря наблюдались нами (с учетом периода поиска опухоли под контролем обычного освещения цистоскопа) спустя 60 секунд после начала облучения кварцевой лампой. Таким образом, продолжительность спектрофлюорометрической визуализации опухоли мочевого пузыря, полученная при клинической апробации и подтвержденная в исследованиях in vitro, в которых время затухания свечения клеток составило 5 секунд, ставит под сомнение длительную флюоресценцию (в течение 10-30 минут), представленную в литературе.

Подводя итоги можно сказать, что применение флюоресцентной диагностики поверхностного рака мочевого пузыря, включающей регистрацию флюоресценции индуцированного 5-АЛА протопорфирина IX и получение его спектральных характеристик, обеспечивает выявление истинных границ опухоли, очагов рака in situ и дополнительных очагов рака при множественном поражении мочевого пузыря. Именно сопутствующий визуальной флюоресценции спектрофотометрический анализ, ставший возможным с использованием компьютеризированного видеоспектроанализатора с многоканальным усилителем яркости излучения, обеспечивает высокий процент совпадений спектрофлюорометрических характеристик тканей морфологическому исследованию. Это позволит снизить число рецидивов после проведения трансуретральной резекции опухоли мочевого пузыря и повторных оперативных вмешательств, на которые пока обречены больные поверхностным раком мочевого пузыря. Метод может использоваться для оценки эффективности внутрипузырной химиотерапии и иммунотерапии поверхностного рака мочевого пузыря, но при условии учета терапевтического вклада цитотоксического дозозависимого воздействия 5-АЛА на опухолевые клетки, что является предметом отдельного исследования.

86

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Васильченко, Илья Леонидович, 2006 год

1. Алексеев Б.Я. Внутрипузырная иммунотерапия поверхностного рака мочевого пузыря // Автореф. дис. канд. мед. наук. - М., 1998. — 23 с.

2. Аль-Шукри С.Х., Ткачук В.Н. Опухоли мочеполовых органов. СПб, 2000. -320 с.

3. Анисимов П.М. Лучевые язвы мочевого пузыря // Вопросы эксперим. и клинич. Радиологии. 1966. - Вып. 2. - С. 191-194.

4. Асламазов Э.Г., Долсуров Г.С., Саркисян Ю.Х., Агафонова Г.Б. Результаты комбинированного лечения больных раком мочевого пузыря // Урол. и нефрол. 1984. - № 4. - С. 27-31.

5. Барский И.Я., Брумберг Е.М., Кондратьева Т.М. Ультрафиолетовая флюоресценция форменных элементов костного мозга и периферической крови животных и человека в норме и при патологии // Биофизика. 1960. -Том 6. - № 5. - С. 605-609.

6. Блознелите Л., Пономарев И. Фотодинамическая терапия при опухолях различного гистогенеза // Врач. 1997. - № 3. - С. 24-26.

7. Бутслов М.М. Каскадные электронно-оптические преобразователи и их применения // Пер. с анг. сб. статей. М.: Мир. 1965. - 448 с.

8. Векшин Н.Л. Фотоника биологических структур // Пущино: ОНТИ, НЦБИ АН СССР. 1988. - 164 с.

9. Верле Д., Гирт А., Богдан-Рай Т., Шнурпфайл Г. Фотодинамическая терапия рака: второе и третье поколение фотосенсибилизаторов // Известия Академии наук. Серия химическая. 1998. - № 5. - С. 836-845.

10. Горелов С.И., Карелин М.И., Каган О.Ф., Старцев В.Ю. и соавт. // Материалы 1-ого Российского научного форума с международным участием "Лучевая диагностика и лучевая терапия на пороге третьего тысячелетия". Москва, 2000. - 159 с.

11. Гуринович Г.П., Стрелкова Т.И. Спектроскопическое исследование ассоциации молекул в бинарных растворителях // Материалы XIII совещания «Физические проблемы спектроскопии». — Москва. 1962. — Т. 1.-С. 305-306.

12. Зырянов Б.Н., Прокопьев В.Е., Селиванов С.П. Проблемы и перспективы спектрометрического метода диагностики рака мочевого пузыря // Тезисы докладов 1-го Всероссийского съезда онкологов. Москва. 1996. - С. 250.

13. Карякин А.В. Спектральные исследования люминесценции злокачественных опухолей // Изд. АН СССР, серия физ. 1962. - Т. 26. -№ 4. - С. 94-99.

14. Карякин А.В., Анисимова И.Н. Флюоресценция легочной ткани в норме и при раке легкого // Биофизика. 1962. - Том 7. - Вып. 2. - С. 145—149.

15. Карякин А.В., Гладкова М.А., МилаеваМ. Сравнительные исследования спектров поглощения и флюоресценции сыворотки крови больных раком легкого и здоровых людей // Биофизика. 1961. - Том 7. - № 2. - С. 240242.

16. Коновалова Н.П., Сомякова Т.И. Биологические аспекты рецидивирования злокачественных опухолей // Эксп. онкол. 1988. - № 2. - С. 9-14.

17. Красновский А.А. Синглентный молекулярный кислород и первичные механизмы фотодинамического действия оптического излучения // Итоги науки и техники. — 1992. Т. 3. - С. 63-132.

18. Лейси А. Световая микроскопия в биологии // Пер. с англ. М.: Мир. 1992. - 464 с.

19. Лопаткин Н.А., Камалов А.А., Кудрявцев Ю.В., Токарев Ф.В. Флюоресцентная диагностика рака мочевого пузыря // Урология. — 2000. — №4.-С. 3-6.

20. Лощенов В.Б., Стратонников А.А., Волкова А.И., Прохоров A.M. Портативная спектроскопическая система для флюоресцентной диагностики опухолей и контроля за фотодинамической терапией // Российский химический журнал. 1998. - Т. XLII. - № 5. - С. 50-53.

21. Матвеев Б.П., Карякин О.Б., Сафиуллов К.Н., Фигурин К.М., Леви Д.Т., Ватин О.Е. Профилактика рецидивов поверхностного рака мочевого пузыря иммунотерапией БЦЖ // Урол. и нефрол. 1993. - № 5. - С. 27-29.

22. Матвеев Б.П., Шипилов В.И., Романов В.А., Минакова Л.Р., Гориловский Л.М. Внутрипузырная химиотерапия рака мочевого пузыря адриамицином // Урол. и нефр. 1984. - № 5. - С. 6-9.

23. Матвеев Б.П., Фигурин К.М. Международная классификация TNM онкоурологических заболеваний // Урол. и нефрол. — 1999. № 1. - С. 3238.

24. Миронов А.Ф. Разработка сенсибилизаторов второго поколения на основе природных хлорофиллов // Рос. химический журнал. 1998. — Т. XLII. — №5.-С. 23-36.

25. Прокопьев В.Е. Биофизические механизмы воздействия низкоинтенсивного лазерного излучения на биологические ткани и оптические методы диагностики их состояния // Автореф. дисс. докт. мед. наук. Томск, 2004.

26. Прокофьева В.В. Исследование слабых астрономических объектов методами телевизионной электроники // УФН. 1979. - Т. 127. - Вып. 3. -С. 500-526.

27. Селиванов С.П. Диагностика и лечение поверхностного рака мочевого пузыря // Автореф. дисс. докт. мед. наук Томск, 2001. - 38 с.

28. Селиванов С.П., Прокопьев В.Е., Удут В.В., Исаева С.Н. Трансуретральная резекция поверхностного рака мочевого пузыря под контролем флюоресценции // Клиническая Онкология и Гематология. -2001. Т. 1. - № 1.-С. 3-6.

29. Черняева Е.Б., Степанова Н.В., Литинская Л.Л. // Итоги науки и техники. Сер. соврем, пробл. лазер, физ. ВИНИТИ. 1990. - Т. 3 - С. 136-224.

30. Чиссов В.И., Соколов В.В., Булгакова Н.Н., Филоненко Е.В. Флюоресцентная эндоскопия, дермаскопия и спектрофотометрия в диагностике злокачественных опухолей основных локализаций // Рос. биотерапевтический журнал. 2003. - Том. 2. - № 4. - С. 45-56.

31. Чиссов В.И., Соколов В.В., Филоненко Е.В. Фотодинамическая терапия злокачественных опухолей. Краткий очерк развития и опыт клинического применения в России // Рос. химический журнал. 1998. - Т. XLII. - № 5. -С. 5-9.

32. Штепп Г., Вагнер С., Цаак Д., Кнюхель-Кларке Р. Флюоресцентная диагностика рака мочевого пузыря с использованием 5-аминолевулиновой кислоты основополагающие исследования и их результаты // Изд-во: Endo-Press. Туттлинген. Германия, 2000. — 58 с.

33. Эмануэль Н.М. Кинетика экспериментальных опухолевых процессов. — М., 1977.-С. 414.

34. Якубовская Р.И., Казачкина Н.И., Кармакова Л.А., и др. Скрининг и медико-биологическое изучение отечественных фотосенсибилизаторов // Российский химический журнал. 1998. - Т. XLII. - № 5. - С. 17-23.

35. Якубовская Р.И., Соколов В.В., Немцова Е.Р. и др. Влияние фотодинамической терапии на состояние иммунной системы и антиоксидантный статус у онкологических больных // Рос. онкол. журнал.- 1997.-Т. 2.-С. 27-32.

36. Agarwal M.L., Clay М.Е., Harvey E.J., Evans H.H., Antunez A.R., Oleinick N.L. Photodynamic therapy induces rapid cell death by apoptosis in L5178Y mouse lymphoma cells // Cancer Res. 1991. - Vol. 51. -P. 5993-5996.

37. Agarwal M.L., Larkin H.E., Zaidi S.I., Mukhtar H., Oleinick N.L. Phospholipase activation triggers apoptosis in photosensitized mouse lymphoma // Cancer Res.- 1993. Vol. 53. - P. 5897-5902.

38. Alfano R.R., Tata D.B., Tomashefsky P., Longo F.W., Alfano M.A. Laser induced fluorescence spectroscopy from native cancerous and normal tissue // I. E. E. E. Quantum Electron. 1984. - Vol. 20. -P. 1507-1511.

39. Allison B.A., Pritchard P.H., Levy J.G. Evidence for low-density lipoprotein receptor-mediated uptake of benzoporphyrin derivative // Br. J. Cancer. 1994. -Vol. 69.-P. 833-839.

40. Allison B.A., Pritchard P.H., Richter A.M., Levy J.G. The plasma distribution of benzoporphyrin derivative and the effects of plasma lipoproteins on its biodistribution // Photochem. Photobiol. 1990. - Vol. 52. - P. 501-507.

41. Andrejevic-Blant S., Hadjur C., Ballini J.P., et al. Photodynamic therapy of early sguamous cell carcinoma with tetra (m-hydroxyphenyl) chlorin: optimal drug-light interval // Br. J. Cancer. 1997. - Vol. 76. - P. 1021-1028.

42. Andreoni A., Culbeddu R., De Silvestri S., Laporta P. Hematoporphyrin derivative: Photophysical properties and laser activation // Med. Biol. Environ. -1983.-Vol. 10.-N. l.-P. 261-268.

43. Anidjar M., Cussenot O., Avrillier S., et al. The role of laser-induced autofluorescence spectroscopy in bladder tumor detection. Dependence on the excitation wavelength // Ann. N. Y. Acad. Sci. 1998. - Vol. 838. - P. 130-142.

44. Anidjar M., Ettori D., Cussenot O., et al. Laser induced autofluorescence diagnosis of bladder tumors: dependence on the excitation wavelength // J. Urol. 1996. - Vol. 156. - N. 5. - P. 1590-1596.

45. Bachor R., Hautmann R., Hasan T. Comparison of two routes of photosensitizer administration for photodynamic therapy of bladder cancer // Urol. Res. 1994. -Vol. 22.-N. l.-P. 21-23.

46. Bachor R., Reich E., Ruck A., Hautmann R. Aminolevulinic acid for photodynamic therapy of bladder carcinoma cells // Urol. Res. 1996. - Vol. 24. -N. 5.-P. 285-289.

47. Baert L., Berg R., Van Damme В., D'Hallewin M.A., Johansson J., Svanberg K., et al. Clinical fluorescence diagnosis of human bladder carcinoma following low-dose Photofrin injection // Urology. 1993. - Vol. 41. - P. 322-330.

48. Barentsz J., Engelbrecht M., Jager G., Witjes J., et al. Fast dynamic gadolinium-enhanced MR imaging of urinary bladder and prostate cancer // J. Magn. Reson. Imaging. 1999. - Vol. 10. - P. 295-304.

49. Barentsz J.O., Jager G.J., Witjes J.A., Ruijs J.H. Primary staging of urinary bladder carcinoma: the role of MRI and a comparison with CT // Eur. Radiol. -1996.-Vol. 6.-N. 2.-P. 129-133.

50. Benson R.C., Farrow C.M., et al. Detection and localization of in situ carcinoma of the bladder with hematoporphyrin derivative // Mayo. Clin. Proc. 1982. -Vol. 57.-P. 548-555.

51. Berenbaum M., Bonnett R., Cheorettan E. Selectivity of meso-tetra-(hydroxyphenyl) porphyrins and chlorins and photofrin in causing photodamage in tumor, skin, muscle and bladder // Laser. Med. Sci. 1993. - Vol. 8. - P. 235-243.

52. Berg K., Moan J. Lysosomes and microtubules as targets for photochemotherapy of cancer // J. Photochem. Photobiol. 1997. - Vol. 65. - N. 3. - P. 403-409.

53. Biel M. Photodynamic therapy and the treating of head and neck cancers // J. Clin. Laser. Radiat. Surg. 1996. - Vol. 14. - P. 239-244.

54. Bochner B.H., Cote R.J., Weidner N., Groshen S., Chen S.C., Skinner D.G., Nichols P.W. Angiogenesis in bladder cancer: relationship between microvessel density and tumor prognosis // Natl. Cancer Inst. 1995. -Vol. 87. - N. 21. — P. 1603-1612.

55. Bohmer R.M., Morstyn G. Uptake of hematoporphyrin derivative by normal and malignant cells: effect of serum, pH, temperature, and cell size // Cancer Res. -1985.-Vol. 45. -N. 11.-P. 5328-5334.

56. Bonnett R., White R.D., Winfield U .J., Berenbaum M.C. Hydroporphyrins of the meso-tetra (hydroxyphenyl)porphyrin series as tumour photosensitizers // Biochem. J. 1989. - Vol. 261. - N. 1. - P. 277-280.

57. Bown S.G., Millson C.E. Photodynamic therapy in gastroenterology // Gut. -1997.-Vol. 41.-P. 5-7.

58. Brunner H., Hausmann F., Knuechel R. New 5-aminolevulinic acid esters-efficient protoporphyrin precursors for photodetection and photodynamic therapy // Photochem Photobiol. 2003. - Vol. 78. -N. 5. - P. 481-486.

59. Bugelski P.J., Porter C.W., Dougherty T.J. Autoradiographic distribution of hematoporphyrin derivative in normal and tumor tissue of the mouse // Cancer Res. 1981 - Vol. 41.-N. 11.-P. 4606-4612.

60. Burk K., Troller R., Pittner P. Prevention of recurrence in non-invasive bladder carcinoma. Experiences with 400 patients // Urologe Ausg. A. 1983. - Vol. 22. -P. 332-336.

61. Bush I.M., Whitmore W.F. Occult cancer of the bladder. Its detection by ultraviolet tetracycline cystoscopy // J. Med. Soc. N. J. 1967. - Vol. - 64. - P. 56-60.

62. Canete M., Villanueva A., Dominguez V., et al. Meso-tetraphennylporphyrin: photosensitizing properties and cytotoxic effects on cultured tumor cells // Int. J. Oncol. 1998. - Vol. 13. - P. 497-504.

63. Carruth J.A. Clinical applications of photodynamic therapy // Int. J. Clin. Pract. 1998.-Vol. 52.-N. l.-P. 39-42.

64. Catanzaro F., Torelli F., Catanzaro M., Cappellano F., Pizzoccaro M., Baruffi M., Sironi D., Pozzoli G.L. Conservative treatment of high-risk (T1G3) transitional carcinoma // Arch. Ital. Urol. Androl. 1996. - Vol. 68. - N. 1. - P. 21-24.

65. Chang S.C., MacRobert A.J., Bown S.G. Photodynamic therapy on rat urinary bladder with intravesical instillation of 5-aminilevulinic acid: light diffusion and histological changes // J. Urol. 1996. - Vol. 155. - P. 1749-1753.

66. Chen H., Hetzel F.W. Tumor oxygenation changes post-photodynamic therapy // Photochem. Photobiol. 1996. - Vol. 63. - P. 128-131.

67. Christensen Т., Sandquist Т., Feren K., et al. Retention and photodynamic effects of haematoporphyrin derivative in cells after prolonged cultivation in the presence of porphyrin//Br. J. Cancer. 1983. - Vol. 48. -N. 1. - P. 35-43.

68. Chung Y.G., Schwartz J.A., Gardner C.M., Sawaya R.E., and Jacques S.L. Diagnostic potential of laser-induced autofluorescence emission in brain tissue // J. Korean Med. Sci. 1997. -Vol. 12. -N. 2.-P. 135-142.

69. Colasanti A., Kisslinger A., Fabbrocini G., Liuzzi R., Quarto M., Riccio P., Roberti G., and Villani F. MS-2 fibrosarcoma characterization by laser induced autofluorescence // Lasers Surg. Med. 2000. - Vol. 26. - N. 5. - P. 441-448.

70. Cozzani I., Jori G., Reddi E., et al. Distribution of endogenous and injected porphyrins at the subcellular level in rat hepatocytes and in ascites hepatoma // Chem. Biol. Interact. 1981. - Vol. 37. -N. 1-2. -P. 67-75.

71. Craft P.S., Harris A.L. Clinical prognostic significance of tumour angiogenesis // Ann. Oncol. 1994. - Vol. 5. - P. 305-311.

72. Crawford E.D. Diagnosis and treatment of superficial bladder cancer: an update // Semin. Urol. Oncol. 1996. - Vol. 14. -N. 1. -P. 1-9.

73. Cuenco G.M., Knisely T.L., Averboukh L., Garett L., Castro S., Cincotta A.H. Induction of glucose regulatory proteins in tumor cells after treatment with a benzophenothiazine analogue // Photochem. Photobiol. 1997. — Vol. 65. - 19 S.

74. Daniltchenko D., Riedl C., Koenig F., Daha L.K., Sachs M., Schnorr D. The impact of ALA (5-aminolevulinic acid)-fluorescence detection on the prognosis of superficial bladder cancer // Aktuelle Urol. 2004. - Vol. 35. - N. 6. - P. 497-501.

75. Datta S.N., Allman R., Loh C.S., et al. Photodynamic therapy of bladder cancer cell lines // Br. J. Urol. 1997. - Vol. 80. - P. 421 -426.

76. Datta S.N., Loh C.S., MacRobert A.J., et al. Quantitative studies of the kinetics of 5-ALA induced Fluorescence in bladder transitional cell carcinoma // Br. J. Cancer.- 1998. Vol. 78.-N. 8.-P. 1113-1118.

77. Dein A.B., Baz E.M., Aly A., Shamaa S., Ashamallah A. Intravesical epirubicin versus doxorubicin for superficial bladder tumors (stages pTa and pTl): a randomized prospective study // J. Urol. 1997. - Vol. 158. -N. 1. - P. 68-73.

78. De Jode M.L., Mcgilligan J.A., Dilkes M.G., Cameron I., Hart P.B., Grahn M.F. A comparison of novel light sources for photodynamic therapy // Lasers Med. Sci. 1997. - Vol. 12. - P. 260-268.

79. D'Hallewin M.A., Baert L., Vanherzeele H. In vivo fluorescence detection of human bladder carcinoma without sensitizing agents // J. Am. Paraplegia. Soc. -1994.-Vol. 17.-N. 4.-P. 161-164.

80. D'Hallewin M. A., Baert L., Vanherzeele H. Fluorescence imaging of bladder cancer // Acta Urol. Belg. 1994. - Vol. 62. - P. 49-52.

81. D'Hallewin M.A., Bezdetnaya L., Guillemin F. Fluorescence detection of bladder cancer: a review // Eur. Urol. 2002. - Vol. 42. - N. 5. - P. 417-425.

82. D'Hallewin M.A., De Witte P.A., Waelkens E., Merlevede W., Baert L. Fluorescence detection of flat bladder carcinoma in situ after intravesical instillation of hypericin// J. Urol. 2000. - Vol. 164.-N. 2.-P. 349-351.

83. D'Hallewin M.A., Vanherzeele H., Baert L. Fluorescence detection of flat transitional cell carcinoma after intravesical instillation of aminolevulinic acid // Am. J. Clin. Oncol. 1998. - Vol. 21. -N. 3. - P. 223-225.

84. Dickson J.A., Calderwood S.K. Effects of hyperglycemia and hyperthermia on the pH, glycolysis and respiration of the Yoshida sarcoma in vivo // J. Natl. Cancer Inst.-1979.-Vol. 63.-P. 1371-1381.

85. Dickson E.F., Goyan R.L., Pottier R.H. New directions in photodynamic therapy // Cellular and Molecular Biology. 2003. - Vol. 48. - N. 8. - P. 939-954.

86. Dolmans D.E., Fukumura D., Jain R.K. Photodynamic therapy for cancer // Nature Reviews Cancer. 2003. - Vol. 3. -N. 5. - P. 380-387.

87. Dougherty T.J. A brief history of clinical photodynamic therapy development at Roswell Park Cancer Institute // J. Clin. Laser. Med. 1996. - Vol. 14. - P. 219-221.

88. Dougherty T.J., Henderson B. Historical perspective: Schwartz S., Winkelman J.W., Lipson R.L. In: Henderson B.W., Dougherty T.J., editors. Photodynamic therapy. New York: Marcel Dekker Inc., 1992. - P. 1-15.

89. Dougherty T.J., Kaufman J.E., Goldfarb A., et al. Photoradiation therapy for the treatment of malignant tumors // Cancer Res. — 1978. Vol. 38. - N. 8. — P. 2628-2635.

90. Dugan M., Crawford E., Nseyo U. Photodynamic therapy (PDT) after transurethal resection (tur) for superficial papillary bladder carcinoma (SBC): a randomized trial // Proc. ASCO. 1991. - Vol. 10. - P. 173.

91. Duque J.L., Loughlin K.R. An overview of the treatment of superficial bladder cancer. Intravesical chemotherapy // Urol. Clin. North. Am. 2000. - Vol. 27. -N. l.-P. 125-135.

92. Edell E.S., Cortese D.A. Photodynamic therapy in the management of early superficial squamous cell carcinoma as an alternative to surgical resection // Chest. 1992.-Vol. 102.-P. 1319-1322.

93. Eden M., Haines В., Kahler H. The pH of rat tumors measured in vivo // J. Natl. Cancer. Inst. 1955. - Vol. 16. - P. 541-556.

94. Egger N.G., Motamedi M., Pow-Sang M., et al. Accomulation of porohyrins in plasma and tissues of dogs after delta-aminolevulinic acid administration:implications for photodynamic therapy // Pharmacology. 1996. - Vol. 52. - P. 362-370.

95. Evans S., Matthews W., Perry R., Fraker D., Norton J., Pass H.I. Effect of photodynamic therapy on tumor necrosis factor production by murine macrophages // J. Natl. Cancer Inst. 1990. - Vol. 82. - P. 34-39.

96. Evensen J.F., Moan J., Hindar A., Sommer S. Tissue distribution of 3H-hematoporphyrin derivative and its main components, 67Ga and 1311-albumin in mice bearing Lewis lung carcinoma // Prog. Clin. Biol. Res. 1984. - Vol. 170. -P. 541-562.

97. Fan K.F., Hopper C., Speight P.M., Buonaccorsi G., MacRobert A.J., Bown S.G. Photodynamic therapy using 5-aminolevulinic acid for premalignant and malignant lesions of the oral cavity // Cancer. 1996. - Vol. 78. —P. 1374-1383.

98. Filbeck Т., Wimmershoff M.B., Pichlmeier U., et al. No generalized skin phototoxicity after intravesical application of 5-aminolevulinic acid for fluorescence diagnosis of superficial bladder cancer // Urol. Int. 2000. - Vol. 64.-N. 3.-P. 126-128.

99. Fingar V.H. Vascular effects of photodynamic therapy // J. Clin. Laser Med. Surg. 1996. - Vol. 14. - P. 323-328.

100. Fingar V.H., Siegel К.A., Wieman T.J., Doak K.W. The effects of thromboxane inhibitors on the microvascular and tumor response to photodynamic therapy // Photochem. Photobiol. 1993. - Vol. 58. - P. 393-399.

101. Fingar V.H., Wieman T.J., Haydon P.S. The effects of thrombocytopenia on vessel stasis and macromolecular leakage after photodynamic therapy using photofrin // Photochem. Photobiol. 1997. - Vol. 66. - P. 513-517.

102. Fioretti P., Facchini V., Caducci A., Cozzani I. Monitoring of hematoporphyrin ingected in humans and clinical prospects of its use in gynecologic oncology // Porphyrins Tumor Photother.: Proc. Int. Symp. New York. London, 1984. — P. 355-361.

103. Foote C.S. Mechanisms of photooxygenation // Prog. Clin. Biol. Res. — 1984. -P. 3-18.

104. Freitas I. Lipid accumulation: the common feature to photosensitizer-retaining normal and malignant tissues // J. Photocem. Photobiol. B. 1990. - Vol. 7. - N. 2-4.-P. 359-361.

105. Friedberg J., Mick R., Stevenson J., Zhu Т., Busch Т., et al. Phase II Trial of

106. Pleural Photodynamic Therapy and Surgery for Patients With Non-Small-Cell1.ng Cancer With Pleural Spread // J. of Clin. Oncol. 2004. - Vol. 22. - N. 11. -P. 2192-2201.

107. Furukawa K., Yamamoto H., Crean D.H. et al. Localization and treatment of transformed tissues using the photodynamic sensitizer 2-l-hexyloxyethyl.-2-devinyl pyropheophorbidera // Lasers. Surg. Med. — 1996. Vol. 18. - P. 157166.

108. Garbo G.M. Purpurins and benzochlorins as sensitizers for photodynamic therapy // J. Photochem. Photobiol. 1996. - Vol. 34. - N. 2-3. - P. 109-116.

109. Gaullier J.M., Berg K., Peng Q., et al. Use of 5-aminolevulinic acid esters to impove photodynamictherapy on cells in culture // Cancer Res. 1997. - Vol. 57.-P. 1481-1486.

110. Gerweck LE, Seetharaman K. Cellular pH gradient in tumor versus nor-mal tissue: potential exploitation for the treatment of cancer // Cancer Res. 1996. -Vol. 56.-P. 1194-1198.

111. Gilissen M.J., van de Merbelde Wit L.E., Star W.M., Koster J.F., Sluiter W. Effect of photodynamic therapy on the endothelium-dependent relaxation of isolated rat aortas // Cancer Res. 1993. - Vol. 53. - P. 2548-2552.

112. Gimbrone M.A., Cotran R.S., Leapman S.B., Folkman J. Tumor growth neovascularization: an experimental model using rabbit cornea // J. Nail. Cancer Inst.-1974.-Vol. 52.-P. 413-417.

113. Gimbrone M.A., Leapman S.B., Cotran R.S., Folkman J. Tumor dormancy in vivo by prevention of neovascularization // J. Exp. Med. 1972. — Vol. 136. - P. 261-276.

114. Gollnick S.O., Liu X., Owczarczak В., Musser D.A., Henderson B.W. Altered expression of interleukin 6 and interleukin 10 as a result of photodynamic therapy in vivo // Cancer Res. 1997. - Vol. 57. - P. 3904-3409.

115. Gomer G., Ferrario A. Tissue distribution and photosensitizing properties of mono-L-aspartyl chlorin e6 in a mouse tumor model // Cancer Res. — 1990. — Vol. 50. N. 13. - P. 3985-3990.

116. Gomer C.J., Luna M., Ferrario A., Wong S., Fisher A., Rucker N. Cellular targets and molecular responses associated with photodynamic therapy // J. Clin. Laser. Med. Surg. 1996. - Vol. 14. - P. 315-321.

117. Gottschlich S., Lippert B.M., Schade W., Werner J.A. Time-resolved fluorescence spectroscopy of a hematoporphyrin derivative used forphotodynamic therapy of cancer // Res. Communs. Mol. Pathol. Pharmacol. 1997. Vol. 98. - N. 2. - P. 237-240.

118. Griffiths S.J., Heelis P.F., Haylett A.K., Moore J.V. Photodynamic therapy of ovarian tumours and normal cells using 5,10,15,20-tetra-(3-carboxymethoxyphenyl)-chlorin // Cancer Lett. 1998. - Vol. 125. - N. 1-2. -P. 177-184.

119. Grimbergen M.C., Jonges T.G., Lock T.M., et al. Photodynamic diagnosis of bladder cancer with intravesical 5-aminolevulinic acid induced fluorescence // Europ. Urology. -2001. Vol. 39. -N. 5. - P. 37.

120. Gronlund-Pakkanen S., Makinen K., Talja M., et al. The importance of fluorescence distribution and kinetics of ALA-induced PpIX in the bladder in photodynamic therapy // J. Photochem. Photobiol. B. 1997. - Vol. 38. - N. 2-3.-P. 269-273.

121. Grossweiner L.I. Porphyric Pesticides Chemistry, Toxicology and Pharmaceutical Applications // Eds. Duke. S.O., Rebeiz K.A. Washington, 1994.-P. 73-75.

122. He X.Y., Sikes R.A., Thomsen S., Chung L.W., Jacques S.L. Photodynamic therapy with photofrin II induces programmed cell death in carcinoma cell lines // Photochem. Photobiol. 1994. - Vol. 59. - P. 468-473.

123. Heney N.M., Ahmed S., Flanagan M.J., et al. Superficial bladder cancer: Progression and recurrence // J. Urol. 1983. - Vol. 130. - P. 1083-1086.

124. Henderson B.W., Dougherty TJ. How does photodynamic therapy work? // Photochem. Photobiol. 1992. - Vol. 55. - P. 145-157.

125. Henderson B.W., Fingar V.H. Relationship of tumor hypoxia and response to photodynamic treatment in an experimental mouse tumor // Cancer Res. — 1987. -Vol. 47.-P. 3110-3114.

126. Henderson B.W., Vaughan L., Bellnier D.A., van Leengoed H., Johnson P.G., Oseroff A.R. Photosensitization of murine tumor, vasculature and skin by 5-aminolevulinic acid-induced porphyrin // Photochem. Photobiol. 1995. - Vol. 62.-P. 780-789.

127. Hrkal Z., Cajthamlova H., GrebenovaD., BartasovaJ., KlamovaH., Marinov J. Selective photodynamic destruction of leukamickych bunek // Cas. Lek. Cesk2000.-Vol. 15.-P. 148-154.

128. Huang Z., Zheng W., Xie S., Chen R, Zeng H., McLean D.I., Lui H. Laser-induced autofluorescence microscopy of normal and tumor human colonic tissue // Int. J. Oncol. 2004. - Vol. 24. - N. 1. - P. 59-63.

129. Jichlinski P., Guillou L., Karlsen S.J., Malmstrom P.U., et all. Hexyl aminolevulinate fluorescence cystoscopy: new diagnostic tool for photodiagnosis of superficial bladder cancer—a multicenter study // J. Urol. -2003.-Vol. 170.-N. l.-P. 226-229.

130. Jichlinski P., Leisinger H.J. Fluorescence cystoscopy in the management of bladder cancer: a help for the urologist! // Urol. Int. 2005. - Vol. 74. -N. 2. -P. 97-101.

131. Jichlinski P., Marti A., Guillou L., et al. First report on hexyl-ester aminolevulinic acid (h-ALA) induced fluorescence cystoscopy in superficial bladder cancer // Europ. Urology. 2001. - Vol. 39. - N. 5. - P. 37.

132. Jichlinski P., Wagnireres G., Forrer M., et al. Clinical assessment of fluorescence cytoscopy during transurethral bladder resection in superficial bladder cancer // Urol. Res. 1997. - Vol. 25. - N. 1. - P. 3-6.

133. Jichlinski P., Wagnireres G., Forrer M., et al. The clinical value of fluorescence cystoscopy in the detection of superficial transitional epithelial cell carcinoma of the bladder // Ann. Urol. 1997. - Vol. 31. - P. 43-48.

134. Jocham D., Staehler G., Chaussy C., Hammer C., Lohrs U. Laserbehandlung von Blasentumoren nach Photosensibilisierung mit Hamatoporphyrin-Derivat // Urol. A. 1981. - Vol. 20. - P. 340-343.

135. Jordan A.M., Weingarten J., Murphy W.M. Transitional cell neoplasms of the urinary bladder. Can biologic potential be predicted from histologic grading? // Cancer. 1987. - Vol. 60. - P. 2766-2774.

136. Lamm D.L., Griffith J.G. Intravesical therapy: Does it affect the natural history of bladder cancer? // Semin. Urol. 1992. - Vol. 10. - P. 39-44.

137. Kamat A.M., DeHaven J.I., Lamm D.L. A potential adjunct to intravesical chemotherapy for bladder cancer // Proc. Annu. Meet. Am. Soc. Clin. Oncol. -1999.-Vol. 18.-A. 1319.

138. Kato H., Aizawa К., Ono J., et al. Clinical measurement of tumor fluorescence using a new diagnostic system with hematoporphyrin derivative, laser photoradiation, and a spectroscope // Laser in Surgery and Medicine. — 1984. — Vol. 4.-N. l.-P. 49-58.

139. Kelly J.F., Snell M.E. Hematoporphyrin derivative: a possible aid in the diagnosis and therapy of carcinoma of the bladder // J. Urol. 1976. - Vol. 115. -P. 150-151.

140. Kennedy J.C., Pottier R.H. Endogenous protoporphyrin IX, a clinical useful photosensitizer for photodynamic therapy // J. Photochem. Photobiol. B. — 1992. -Vol. 14.-P. 275-292.

141. Kennedy J.C., Pottier R.H., Pross D.C. Photodynamic therapy with endogenous protoporphyrin IX: basic principles and present clinical experience // J. Photochem. Photobiol. B. 1990. - Vol. 6. - P. 143-148.

142. Kessel D., Luo Y. Mitochondrial photodamage and PDT-induced apopto-sis // J. Photochem. Photobiol. B. 1998. - Vol. 42. - P. 89-95.

143. Kessel D., Luo Y., et al. The role of subcellular localization in initiation of apoptosis by photodynamic therapy // J. Photochem. Photobiol. 1997. - Vol. 65.-N. 3.-P. 422-426.

144. Kessel D., Luo Y., Woodburn K., Chang C.K., Henderson B.W. Mechanisms of phototoxicity catalyzed by two porphycenes // Proc. SPIE. 1995. - Vol. 2392. -P. 122-128.

145. Kessel D., Woodburn K., Gomer С J., Jagerovic N., Smith K.M. Photosensitization with derivatives of chlorin p6 // J. Photochem. Photobiol. B. -1995.-Vol. 28.-P. 13-8.

146. Kessel D., Woodburn K., Henderson B.W., Chang C.K. Sites of photodamage in vivo and in vitro by a cationic porphyrin // Photochem. Photobiol. 1995. - Vol. 62.-P. 875-881.

147. Kluck R.M., Martin S.J., Hoffman B.M., Zhou J.S., Green D.R., Newmeyer D.D. Cytochrome с activation of CPP32-like proteolysis plays a critical role in a Xenopus cell-free apoptosis system // E. M. В. O. J. 1997. - Vol. 16. - P. 4639-4649.

148. Koenig F., McGovern F.J., Althausen A.F., et al. Laser induced autofluorescence diagnosis of bladder cancer // J. Urol. 1996. - Vol. 156. - N. 5. - P. 15971601.

149. Koenig F., McGovern F.J., Enquist H., et al. Autofluorescence guided biopsy for the early diagnosis of bladder carcinoma // J. Urol. 1998. - Vol. 159. - N. 6. -P. 1871-1875.

150. Koenig F., McGovern F. J., Lame R., et al. Diagnosis of the bladder carcinoma using protoporphyrin IX fluorescence induced by 5-aminolevulinic acid // Br. J. Mol. Intern.-1999.-Vol. 83.-N. l.-P. 129-135.

151. Kongshaug M. Distribution of tetrapyrrole photosensitizers among human plasma proteins // Int. J. Biochem. 1992. - Vol. 24. - P. 1239-1265.

152. Korbelik M. Induction of tumor immunity by photodynamic therapy // J. Clin. Laser. Med. Surg. 1996. - Vol. 14. - P. 329-334.

153. Korbelik M. Low density lipoprotein receptor pathway in the delivery of Photofrin: how much is it relevant for selective accumulation of the photosensitizer in tumors? // J. Photochem. Photobiol. B. 1992. - Vol. 12. - P. 107-119.

154. Korbelik M. The role of nitric oxide in the response of solid tumors to photodynamic therapy // Photochem. Photobiol.- 1997. Vol. 65. - 55S-56S.

155. Korbelik M., Krosol G., Chaplin D.J. Photofrin uptake by murine macrophages // Cancer Res. 1991. - Vol. 51. - P. 2251-2255.

156. Korbelik M., Krosol G., Olive P.L., Chaplin D.J. Distribution of Photofrin between tumour cells and tumour associated macrophages // Br. J. Cancer. -1991.-Vol. 64.-P. 508-512.

157. Korbelik M., Naraparaju V.R., Yamamoto N. Macrophage-directed immunotherapy as adjuvant to photodynamic therapy of cancer // Br. J. Cancer. — 1997. Vol. 75. - P. 202-207.

158. Koss L.G. Mapping of the urinary bladder: its impact on the concepts of bladder cancer // Hum. Pathol. 1979. - Vol. 10. - P. 533-548.

159. Krieg R.C., Fickweiler S., Wolfbeis O.S., Knuechel R. Cell-type specific protoporphyrin DC metabolism in human bladder cancer in vitro // Photochem. Photobiol. 2000. - Vol. 72. - N. 2. - P. 226-233

160. Kriegmair M., Baumgartner R., Knuechel R., et al. Fluorescence photodetection of neoplastic urothelial lesions following intravesical instillation of 5-aminolevulinic acid // Urology. 1994. - Vol. 44. - N. 6. - P. 836-841.

161. Kriegmair M., Baumgartner R., Lumper W., et al. Early clinical experience with 5-ALA for the photodinamic therapy of superficial bladder cancer // Br. J. Urol. 1996. - Vol. 77. - P. 667-671.

162. Kriegmair M., Waidelich R., Baumgartner R., et al. Photodynamic therapy of superficial bladder cancer. An alternative to radical cystectomy? // Urol. 1994. -Vol. 33.-P. 276-280.

163. Kriegmair M., Waidelich R, Lumper W., et al. Integral photodynamic treatment of refractory superficial bladder cancer // J. Urol. 1995. - Vol. 154. - P. 13391341.

164. Kriegmair M., Zaak D., Hofstetter A., et al. Transurethral resection (TUR) of bladder cancer controlled by 5-aminolevulinic acid induced fluorescence endoscopy (AFE) versus white light endoscopy // J Urol. -2000. Vol. 163. - P. 149.

165. Krosl G., Korbelik M., Dougherty G.J. Induction of immune cell infiltration into murine SCCVII tumour by photofrin-based photodynamic therapy // Br. J. Cancer. 1995. - Vol. 71. - P. 549-555.

166. Krosl G., Korbelik M., Krosl J., Dougherty G.J. Potentiation of photody-namic therapy-elicited antitumor response by localized treatment with granulocyte-macrophage colony-stimulating factor // Cancer Res. 1996. - Vol. 56. — P. 3281-3286.

167. Kurth K.H. Intravesical chemotherapy for superficial bladder tumors category Ta/Tl: who should be treated and how? // Semin. Urol. Oncol. 1996. - Vol. 14.-N. 1 - P. 30-35.

168. Kurth K.H., Bouffioux C., Sylvester R., van der Meijden A.P., Oosterlinck W., Brausi M. Treatment of superficial bladder tumors: achievements and needs. The EORTC Genitourinary Group // Eur. Urol. 2000. - Vol. 37. - P. 1-9.

169. Lang K., BolsenK., Stahl W., RuzickaT., SiesH., LehmannP., and Fritsch C. The 5-aminolevulinic acid-induced porphyrin biosynthesis in benign and malignant cells of the skin // J. Photochem. Photobiol. 2001. - V. 65 N.l P. 2934.

170. Leung J. Photosensitizers in photodynamic therapy // Semin. Oncol. 1994. -Vol. 21.-P. 4-10.

171. Leunig A., Rick K., Stepp H., et al. Photodynamic diagnosis of neoplasms of the mouth cavity after local administration of 5-aminolevulinic acid // Laryngorhinootologie. Vol. 75. - P. 459-464.

172. Leveckis J., Burn J.L., Brown N.J., Reed W.R. Kinetics of endogenous protoporphyrin IX induction by aminolevulinic acid: preliminary studies in the bladder//J. Urol.// 1994.-Vol. 152.-P. 550-553.

173. Lin C.W., Bellnier D., Prout Jr. G., Andrus W.S., Prescott R. Cystoscopic fluorescence detector for photodetection of bladder carcinoma with hematoporphyrin derivative // J. Urol. 1984. - Vol. 131. - P. 587-590.

174. Liu X., Kim C.N., Yang J., Jemmerson R., Wang X. Induction of apoptotic program in cell-free extracts: requirement for dATP and cytochrome с // Cell. — 1996. Vol. 86. - P. 147-157.

175. Loidl W., Schmidbauer J., Susani M., Marberger M. Flexible cystoscopy assisted by hexaminolevulinate induced fluorescence: a new approach for bladder cancer detection and surveillance? // Eur. Urol. 2005. - Vol. 47. — N. 3.-P. 323-326.

176. Maffezzini M., Simonato A., Zanon M., Raber M., Carmignani G. Up-front intravesical chemotherapy for low stage, low grade recurrent bladder cancer // J. Urol.- 1996.-Vol. 155.-N. 1.-P. 91-33.

177. Malik Z., Lugaci H. Destruction of erythroleukaemic cells by photoactivation of endogenous porphyrins // Br. J. Cancer. 1987. - Vol. 56. - P. 589-595.

178. Malkowicz S.B. Intravestical therapy for superficial bladder cancer // Semin. Urol. Oncol. 2000. - Vol. 18. - N. 4. - P. 280-288.

179. Malmstrom P. Improved patient outcomes with BCG immunotherapy vs. chemotherapy Swedish and worldwide experience // Eur. Urol. - 2000. — Vol. 37.-N. l.-P. 16-20.

180. Marchetti P., Hirsch Т., Zamzami N., Castedo M., Decaudin D., Susin SA, et al. Mitochondrial permeability transition triggers lymphocyte apoptosis // J. Immunol. 1996. - Vol. 157. - P. 4830-4836.

181. Marcus S.L., Sobel R.S., Golub A.L., et al. Photodynamic therapy and photodiagnosis using endogenous photosesitization induced by 5-aminolevulinic acid: current and development status // J. Clin. Laser. Med. Surg. 1996. - Vol. 14.-P. 59-66.

182. McMahon K.S., Wieman T.J., Moore P.H., Fingar V.H. Effects of photodynamic therapy using mono-L-aspartyl chlorin e 6 on vessel constriction, vessel leakage, and tumor response // Cancer Res. 1994. - Vol. 54. - P. 5374-5379.

183. Melamed M.R., Voutsa N.G., Grabstald H. Natural history and clinical behavior of in situ carcinoma of the human urinary bladder // Cancer. 1964. Vol. 17. -P. 1533-1545.

184. Melekos M.D., Moutzouris G.D. Intravesical therapy of superficial bladder cancer // Curr. Pharm. Des. Curr. Pharm. Des. 2000. - Vol. 6. - N. 3. - P. 345359.

185. Moan J. Porphyrin photosensitization and phototherapy // Photochem. Photobiol. 1986. - Vol. 43. - P. 681-690.

186. Moan J., Berg K., Bommer J.C., Western A. Action spectra of phthalocyanines with respect to photosensitization of cells // Photochem. Photobiol. 1992. -Vol. 56.-N. 2.-P. 171-175.

187. Moan J., Smedshammer L., Christensen T. Photodynamic effects on human cells exposed to light in the presence of hematoporphyrin. pH effects // Cancer Lett. — 1980.-Vol. 9.-P. 327-332.

188. Morgan A.R., Garbo G.M., Keck R.W., Selman S.H. New photosensitizers for photodynamic therapy: combined effect of metallopurpurin derivatives and light on transplantable bladder tumors // Cancer Res. 1988. - Vol. 48. -N. 1. - P. 194-198.

189. Mori Y., Shima H., Ihara H., Yabumoto H., Taguchi K., Koike H., Nojima M., Yamamoto H., Ikoma F. Clinical study of primary carcinoma in situ of the bladder//HinyokikaKiyo.- 1996. -Vol. 42.-N. 1.-P. 17-21.

190. Mourant J.R., Bigio I.J., Boyer J., et al. Spectroscopic diagnosis of bladder cancer with elastic light scattering // Lasers. Surg. Med. 1995. - Vol. 17. - N. 4.-P. 350-357.

191. Nagamoto N., Saito Y., Ohta S., Sato M., Kanma K., Sagawa M., et al. Relation of lymphnode metastasis to primary tumor size and microscopic appearance of roentgenographically occult lung cancer // Am. J. Surg. Pathol. 1989. - Vol. 13.-P. 1009-1013.

192. Nelson J.S., Liaw L.H., Orenstein A., Roberts W.G., Berns M.W. Mechanism of tumor destruction following photodynamic therapy with hematopor-phyrin derivative, chlorin, and phthalocyanine // J. Natl. Cancer Inst. 1988. - Vol. 80. -P. 1599-1605.

193. Nichols M.G., Foster Т.Н. Oxygen diffusion and reaction kinetics in the photodynamic therapy of multicell tumor speroids // Phys. Med. Biol. 1994. -Vol. 39.-P. 2161-2181.

194. Nomi M., Gohji K., Okamoto M., Takenaka A., Ono Y., Fujii A. Results of transurethral resection plus adjuvant intravesical chemotherapy for superficial bladder cancer// Int. J. Urol. 1998. - Vol. 5. -N. 6. - P. 534-539.

195. Novo M., Heuttmann G., Diddens H. Chemical instability of 5-aminolevulinic acid used in the fluorescence diagnosis of bladder tumours // J. Photochem. Photobiol. B. 1996. - Vol. 34. - N. 2-3. - P. 143-148.

196. Nseyo U.O. Photodynamic therapy // Clin. North. Am. 1992. - Vol. 19. -N. 3. -P. 591-599.

197. Nseyo U.O., DeHaven J., Dougherty T.J., et al. Photodynamic therapy in the treatment of patients with resistant superficial bladder cancer: a long-term experience //J. Clin. Laser Med. Serg. 1998. - Vol. 16. -N. 1. - P. 61-68.

198. Nseyo U.O., Lamm D.L. Therapy of superficial bladder cancer // Semin. Oncol. 1996. - Vol. 23. - N. 5. - P. 598-604.

199. Nseyo U., Lamm D., Riggs D., et al. Long term experience with photodynamic therapy (PDT) in the management of superficial vesical transitional cell carcinoma (SVTCC) // Proc. Annu. Meet. Am. Assoc. Cancer Res. 1997. -Vol. 38.-A. 2524.

200. Ogura Y., Sato K., Kato Т., Saito K., Enomoto K. Immunohistochemical analysis of expression of angiogenic factors and tumor angiogenesis in superficial bladder cancer // Nippon. Hinyokika Gakkai. Zasshi. 1998. - Vol. 89.-N. 5.-P. 529-553.

201. Okamura K., Ono Y., Kinukawa T. Randomized study of single early instillation of tetrahydropyranyl-doxorubicin for a single superficial bladder carcinoma // Cancer. 2002. - Vol. 94. - P. 2363-2368.

202. Ozen H., Akdas A., Alkibay F. Prognostic factors in superficial bladder cancer // Int. Urol. Nephrol. 1986. - Vol. 18. -N. 4. - P. 417-420.

203. Parker S.L., Tong Т., Bolden S., et al. Cancer Statistics, 1997 // C. A. Cancer J. Clin. 1997. - Vol. 47. - P. 5-27.

204. Parkin D.M., Pisani P., Ferlay J. Global cancer statistics // C. A. Cancer J. Clin. -1999.-Vol. 49.-P. 33-64.

205. Pass H.I. Photodynamic therapy in oncology: mechanisms and clinical use // J. Nat. Cancer Inst. 1993. - Vol. 85. - N. 6 - P. 443-456.

206. Pass H., Donington J. Photodynamic therapy for the management of pleural malignancies//Sem. Surg. Oncol. 1995.-Vol. 11.-P. 360-367.

207. Peng Q., Berg K., Moan J., Kongshaug M., Nesland J.M. 5-Aminolevulinic acid-based photodynamic therapy: principles and experimental research // Photochem. Photobiol. 1997. - Vol. 65. - P. 235-251.

208. Peng Q., Moan J., Cheng L.S. The effect of glucose administration on the uptake of photofrin II in a human tumor xenograft // Cancer Lett. 1991. - Vol. 58. - P. 29-35.

209. Peng Q., Warloe Т., Berg K., Moan J., Kongshaug M., Giercksky K.E., et al. 5-Aminolevulinic acid-based photodynamic therapy: clinical research and future challenges // Cancer. 1997. - Vol. 79. - P. 2282-308.

210. Policard A. Etudes surles aspects offerts par des tumure experimentases examime a la lumure de Woods // C. R. Soc. Biol. 1924. - Vol. 91. - P. 14231424.

211. Pottier R., Chow Y.F., LaPlante J.P., Truscott T.G., Kennedy J.C., Beiner L.A. Non-invasive techniques for obtaining fluorescence excitation and emission spectra in vivo // Photochem. Photobiol. 1986. - Vol. 44. - P. 679-687.

212. Pottier R., Kennedy J.C. The possible role of ionic species in selective biodistribution of photochemotherapeutic agents toward neoplastic tissue // J. Photochem. Photobiol. B. 1990. - Vol. 8. - P. 1-16.

213. Pow-Sang J.M., Seigne J.D. Contemporary Management of Superficial Bladder Cancer // J. M. С. C. 2000. - Vol. 7. - N. 4. - P. 335-339.

214. Prokop^ev V.E., Selivanov S.P. Spectroscopic criterion of diagnostics of malignant neoplasms on urinary bladder mucous membrane // Abst. The 5th Inter. Conf. «Atomic and molecular pulsed laser» Tomsk. - 2001. - P. 88.

215. Qin В., Selman S.H., Payne K.M., Keck R.W., Metzger D.W. Enhanced skin allograft survival after photodynamic therapy. Association with lymphocyte inactivation and macrophage stimulation // Transplantation. 1993. - Vol. 56. -P. 1481-1486.

216. Renschler M., Yuen A., Panella T. Photodynamic therapy trials with Lutetium Texaphyrin // Photochem. Photobiol. 1997. - Vol. 65. - P. 475.

217. Riedl C.R., Plas E., Pfluger H. Fluorescence detection of bladder tumors with 5-aminolevulinic acid // J. Endourol. 1999. - Vol. 13. - N. 10. - P. 755-779.

218. Riesenberg R., Fuchs C., Kriegmair M. Photodynamic effects of 5-aminolevulinic acid- induced porphyrin on human bladder carcinoma cells in vitro // Eur. J. Cancer. 1996. - Vol. 32. - P. 328-334.

219. Ripley P.M. The physics of diode lasers // Lasers Med. Sci. 1996. - Vol. 11.-P. 71-78.

220. Roberts DJ, Cairnduff F., Driver I., Dixon В., Brown S.B. Tumour vascular shutdown following photodynamic therapy based on polyhaematoporphyrin or 5-aminolaevulinic acid // Int. J. Oncol. 1994. - Vol. 5. - P. 763-768.

221. Rosenthal I. Phthalocyanines as photodynamic sensitizers // Photochem. Photobiol.- 1991. -Vol. 53.-N. 6.-P. 859-870.

222. Scattoni V., Da Pozzo L.F., Colombo R., Nava L., et al. Dynamic gadolinium-enhanced magnetic resonance imaging in staging of superficial bladder cancer // J. Urol. 1996. - Vol. 155. -N. 5. - P. 1594-1599.

223. Shipley W.U. Non-invasive Management of Invasive Bladder Cancer: Lectures // Jpn. J. Clin. Oncol. 2003. - Vol. 33. - N. 11. - P. 592-594.

224. Spinelli P. Endoscopie au laser avec fluorescence et photohimiotherapie du cancer// Acta Endosc. 1983. -Vol. 13.-N. 3.-P. 201-205.

225. Steinbach P., Kriegmair M., Baumgartner R., et al. Intravesical instillation of 5-aminolevulinic acid : The fluorescent metabolite is limited to urothelial cells // J. Urol. 1994. - Vol. 44. -N. 5. - P. 676-681.

226. Stenzl A., Holtl L., Bartsch G. Fluorescence assisted transurethral resection of bladder tuvours: is it cost effective? // Europ. Urology. 2001. - Vol. 39. - N. 5. -P. 31.

227. SteppH. 10th Congress of the European Society of Photobiology, Vienna, Avstria, 2003. Abstract Book. P. 56.

228. Stepp H., Wagner S., Zaak D., Knuchel R. Fluorescence diagnosis of bladder tumor by use of 5-aminolevulinic acid — Fundamentals and results // Eds. R. Baumgartner. 1998. - P. 39-41.

229. Stocker S., KnEuchel R., Sroka R., et al. Wavelength dependent photodynamic effects on chemically induced rat bladder tumors following intravesical instillation of 5-aminolevulinic acid // J. Urol. 1997. - Vol. 157. - P. 357-361.

230. Sugimura Y., Hayashi N., Yamashita A., Kinbara H., et al. Endorectal magnetic resonance imaging of the prostate and bladder // Hinyokika Kiyo. 1994. - Vol. 40.-N. 1.-P. 31-36.

231. Sutherland R.M., McCredie J.A., Inch W.R. Growth of multicell spheroids in tissue culture as a model of nodularcarcinomas // J. Nail. Cancer Inst. 1971. — Vol. 46.-P. 113-120.

232. Tannock I.F., Rotin D. Acid pH in tumors and its potential for therapeutic exploitation // Cancer Res. 1989. - Vol. 49. - P. 4373-4384.

233. Tatsuta M., Yamamoto R., Yamamura H., et al. Photodynamic effects of exposure to hematoporphyrin derivatives and dye laser radiation on human gastric adenocarcinoma cells // J. Nat. Canser Inst. 1984. - Vol. 73. - N. 1. -P. 59.

234. Tekes A., Kamel I., Imam K., et al. Dynamic MRI of bladder cancer: evaluation of staging accuracy //A. J. R. 2005. - Vol. 184. - P. 121-127.

235. Tekes A., Kamel I., Imam K., Chan Т., Schoenberg M. Bluemke D. MR imaging features of transitional cell carcinoma of the urinary bladder // A. J. R. 2003. -Vol. 180.-P. 771-777.

236. Tochner A.Z., Pass H.I., Smith P.D., DeLaney T.F., Sprague M., DeLuca A.M., et al. Intrathoracic photodynamic therapy: a canine normal tissue tolerance study and early clinical experience // Lasers Surg. Med. 1994. - Vol. 14. - P. 118123.

237. Thomas J.P., Girotti A.W. Glucose administration augments in vivo uptake and phototoxicity of the tumor-localizing fraction of hematoporphyrin derivative // Photochem. Photobiol. 1989. - Vol. 49. - P. 241-247.

238. Tian Мао-en., et. al. Photodynamic therapy bladder transitional cell cancer with hematoporphyrin derivative // Chin. J. Oncol. -1989. Vol. 11. -N. 4. - P. 304306.

239. Tomio L., Zorat P.L., Jori G., et al. Elimination pathway of hematoporphyrin from normal and tumor bearing rats // Tumori. — 1982. — Vol. 68. N. 1. — P. 283-286.

240. Uehlinger P., Zellweger M., Wagnieres G., et al. 5-Aminolevulinic acid and its derivatives: physical chemical properties and protoporphyrin IX formation in cultured cells // J. Photochem. Photobiol. B. 2000. - Vol. 54. - N. 1. - P. 7280.

241. Van Staveren H.J., Beek J.F., Keijzer M., Star W.M. Integrating sphere effect in whole-bladder-wall photodynamic therapy: II. The influence of urine at 458, 488, 514 and 630 nm optical irradiation // Phys. Med. Biol. 1995. - Vol. 40. -P. 1307-1311.

242. Van Staveren H.J., Bertrams R.H., Star W.M. Bladder PDT with intravesical clear and light scattering media: effect of an eccentric isotropic light source on the light distribution // Lasers Surg. Med. 1997. - Vol. 20. - P. 248-253.

243. Vaucher L., Lange N., Ritter-Schenk C., et al. Phototoxic effects in the protoporphyrin IX loaded urothelium // Europ. Urology. 2001. - Vol. 39. - N. 5.-P. 173.

244. Vrouenraets M.B., Visser G.W., Snow G.B., van Dongen G.A. Basic principles, applications in oncology and improved selectivity of photodynamic therapy // Anticancer Research. 2003. - Vol. 23. - P. 505-522.

245. Wagnieres G.A., Star W.M., Wilson B.C. In vivo fluorescence spectroscopy and imaging for oncological applications // Photochem. Photobiol. 1998. - Vol. 68. -P. 603-632.

246. Waidelich R., Hofstetter A., Stepp H., et al. Early clinical experience with 5-aminolevulinic acid for the photodynamic therapy of upper tract urothelial tumors // J. Urol. 1998. - Vol. 159. - N. 2. - P. 401-404.

247. Walther M.M., Delaney T.F., Smith P.D., et al. Phase I trial of photodynamic therapy in the treatment of recurrent superficial transitional cell carcinoma of the bladder // Urology. 1997. - Vol. 50. - P. 199-206.

248. Walther M.M., Eanes E.D., Delaney T.F., Travis W.D. Bladder calcifications after photodynamic therapy: analysis of a rare complication // Urology. 1996. -Vol. 47.-P. 831-835.

249. Webber J., Kessel D., Fromm D. Side effects and photosensitization of human tissues after aminolevulinic acid // J. Surg. Res. 1997. - Vol. 68. - P. 31-37.

250. Webber J., Luo Y., Crilly R., Fromm D., Kessel D. An apoptotic response to photodynamic therapy with endogenous protoporphyrin in vivo // J. Photochem. Photobiol. B. 1996. - Vol. 35. - P. 209-211.

251. Weidner N. Folkman J. Tumoral vascularity as a prognostic factor in cancer // Important. Adv. Oncol. 1996. - P. 167-190.

252. Weishaupt K.R., Gomer С .J., Dougherty T.J. Identification of singlet oxygen as the cytotoxic agent in photoinactivation of a murine tumor // Cancer Res. — 1976. Vol. 36. - N. 3. - P. 2326-2329.

253. Whitmore W.F., Bush I. Ultraviolet cystoscopy // J. A. M. A. 1986. Vol. - P. 203.-P. 153-155.

254. Whitmore W.F., Bush I.M., Esquivel E. Tetracycline ultraviolet fluorescence in bladder carcinoma // Cancer. 1964. - Vol. 17. - P. 1528-1532.

255. Wile A.G., Dahlman A., Burns R.G., Berns M.W. Laser photoradiation therapy of cancer following hematoporphyrin sensitization // Lassers Sung. Med. 1982. -Vol. 2.-N. l.-P. 163-168.

256. Williams R.D., Runge T.C. Photodynamic therapy of human bladder cancer cells in vitro correlated with cellular fluorescence levels of Photofrin-II // J. Photochem. Photobiol. 1987. -Vol. 46. - N. 5. - P. 733-737.

257. Wyld L., Smith O., Lawry J., et al. Cell cycle phase influences tumour cell sensitivity to aminolaevulinic acid-induced photodynamic therapy in vitro // Br. J. Cancer. 1998. - Vol. 78. - N. 1. - P. 50-55.

258. Xue L.Y., He J., Oleinick N.L. Rapid tyrosine phosphorylation of HS1 in the response of mouse lymphoma L5178Y-R cells to photodynamic treatment sensitized by the phthalocyanine Pc 4 // Photochem. Photobiol. 1997. - Vol. 66.-P. 105-113.

259. Yamamoto N., Hoober J.K., Yamamoto N., Yamamoto S. Tumoricidal capacities of macrophages photodynamically activated with hematoporphyrin derivative // Photochem. Photobiol. 1992. - Vol. 56. - P. 245-250.

260. Zaak D., Kriegmair M., Stepp H., Baumgartner R., Oberneder R., Schneede P., et al. Endoscopic detection of transitional cell carcinoma with 5-aminolevulinic acid: results of 1012 fluorescence endoscopies // Urology 2001. - Vol. 57. - P. 690-694.

261. Zaak D., Stepp H., Baumgartner R., Schneede P., et al. Ultraviolet-excited (308 nm) autofluorescence for bladder cancer detection // Urology. 2002. - Vol. 60. -P. 6.-P. 1029-1033.

262. Zaak D., Wagner S., Stepp H., et al. Fluoreszenzquantifizierung bei der 5-Aminolavulinsaure induzierten Fluoreszenzendoskopie des oberflachlichen Harnblasenkarzinoms // Akt. Urol. 1998. - Vol. 29. - P. 39.

263. Zaidi S.I., Oleinick N.L., Zaim M.T., Mukhtar H. Apoptosis during photodynamic therapy-induced ablation of RIF-1 tumors in C3H mice: electron microscopic, histopathologic and biochemical evidence // Photochem. Photobiol. 1993. - Vol. 58. - P. 771-776.

264. Zumbraegel A., Feil G., Krause S., Bichler K.H. Photodynamic diagnosis (PDT) and analysis of DNA-ploidy for detection of dysplasias of the urinary bladder // Europ. Urology. 2001. - Vol. 39. -N. 5. - P. 37.

265. Zimmern P.E., Laub D., Leach G.E. Fluorescein angiography of the bladder: technique and relevance to bladder cancer and interstitial cystitis // J. Urol. // 1995.-Vol. 154.-P. 62-65.

266. Zungri E., Martinez L., Da Silva E.A., Pesqueira D., de la Fuente Buceta A., Pereiro В. T1 GUI bladder cancer. Management with transurethral resection only // Eur. Urol. 1999. - Vol. 36. -N. 5. - P. 380-384.