Новые подходы и алгоритмы в лабораторной диагностике нейросифилиса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.10, кандидат наук Негашева Екатерина Сергеевна

• Негашева Екатерина Сергеевна
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Негашева Екатерина Сергеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1 ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, КЛИНИКА, ДИАГНОСТИКА НЕЙРОСИФИЛИСА В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Эпидемиология сифилиса и нейросифилиса в современных условиях

1.2 Классификации нейросифилиса

1.3 Патогенез и особенности клинического течения нейросифилиса в современных условиях 23 1.4. Лабораторно-инструментальная диагностика нейросифилиса

1.4.1. Клинические и биохимические методы диагностики нейросифилиса

1.4.2. Прямые методы специфической лабораторной диагностики нейросифилиса

1.4.3. Непрямые иммунохимические методы специфической лабораторной диагностики нейросифилиса

1.4.4. Дополнительные лабораторные и инструментальные методы диагностики нейросифилиса

1.4.5. Применение многомерного математического анализа в диагностике заболеваний 46 Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Дизайн исследования: перечень этапов и содержание работ

2.2. Объект исследования. Клиническая характеристика пациентов

2.3. Методы исследования 58 Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Результаты лабораторного обследования больных нейросифилисом

3.1.1. Результаты клинико-биохимического обследования больных нейросифилисом

3.1.2. Результаты иммунохимического обследования больных нейросифилисом

3.1.2.1. Результаты иммунохимических тестов в сыворотке крови больных нейросифилисом

3.1.2.2. Результаты иммунохимических тестов в цереброспинальной жидкости больных нейросифилисом

3.1.2.3. Результаты клинической апробации экспериментальной тест-системы в формате иммуночипа для выявления антител к T. pallidum 76 в цереброспинальной жидкости больных нейросифилисом

3.1.4. Результаты изучения эффективности определения сывороточно-

67

ликворного соотношения для подтверждения диагноза

нейросифилиса

3.2. Использование многомерного дискриминантного анализа для

1 86 диагностики нейросифилиса

3.3. Алгоритм диагностики нейросифилиса с использованием известных и инновационных подходов 93 ЗАКЛЮЧЕНИЕ 97 ВЫВОДЫ 108 ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 110 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ 111 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 113 ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Новые подходы и алгоритмы в лабораторной диагностике нейросифилиса»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность и степень разработанности темы исследования

Нейросифилис (НС) - тяжелое заболевание, вызванное T. pallidum, которое приводит к поражению вегетативной и центральной нервной системы, в результате которого значительно снижается качество жизни, происходит инвалидизация пациентов, а в редких случаях и летальный исход, в особенности при несвоевременном выявлении заболевания.

В последние десятилетия проблема НС приобрела значительную актуальность в связи с ростом заболеваемости НС, как в Российской Федерации, так и в городе Москве.

В России отмечен рост заболеваемости поздними формами сифилиса, в том числе нейросифилисом. Так, по данным А.А. Кубановой и соавт., 2016 [143] c 2013 по 2015 годы отмечен рост заболеваемости поздними формами сифилиса на 52,1%.

Число случаев НС в г. Москве с 2009 по 2014 год возросло почти в 10 раз, что может быть связано как с истинным ростом заболеваемости, так и с улучшением выявления заболевания. В течение 2015 - 2017 годов число зарегистрированных случаев НС в Москве несколько снизилось, но, тем не менее, продолжает оставаться достаточно высоким [140].

Следует отметить, что истинная эпидемиологическая ситуация, в особенности относительно скрытых форм сифилиса, а также асимптомного нейросифилиса, остается не известной, что объясняется серьезными недостатками в обследовании и лечении пациентов (например, в случае отказа от проведения пункции ЦСЖ, использование методов исследования, обладающих недостаточной специфичностью), а также формирование выявления и учета пациентов с повышенным риском развития нейросифилиса.

Высокий уровень заболеваемости нейросифилисом среди населения и ее рост, наличие скрытых, малосимптомных и атипичных форм специфического

поражения нервной системы вызывает необходимость поиска новых и усовершенствования существующих подходов к своевременному выявлению этой формы сифилиса.

В настоящее время определяющим для диагностики нейросифилиса является исследование цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) больных с подозрением на нейросифилис. Однако применяемые при этом методы определения количества белка и клеточного состава ЦСЖ с подсчетом клеток (цитоза) не являются специфичными для сифилиса.

Для оценки специфичности поражения применяется комплекс нетрепонемных (РМП, RPR) и трепонемных (РИТ, РИФ, РПГА, ИФА) тестов, направленных на выявление противотрепонемных антител. Однако ни один из методов не дает возможности получить однозначный ответ о наличии или отсутствии нейросифилиса. Согласно руководству по лечению заболеваний передаваемых половым путем CDC (Centers for disease control and prevention., Sexually transmitted diseases treatment guidelines 2010), в США стандартным методом для исследования ЦСЖ у больных сифилисом является VDRL (Veneral Disease Research Laboratory), который, по мнению многих зарубежных специалистов, является одним из наиболее специфичных тестов на нейросифилис. Вместе с тем, в действующих в РФ стандартах и приказах по диагностике сифилиса применение данного нетрепонемного метода не регламентировано, хотя в отечественной литературе имеются отдельные сообщения о возможности его успешного использования [142].

Для доказательства интратекального синтеза антител к T.pallidum в ликворе за рубежом (преимущественно в странах Европы) применяется расчет индексов, определяемых соотношением концентраций специфических иммуноглобулинов и антител, определяемых в РПГА, в ликворе к аналогичному показателю в сыворотке крови (сывороточно-ликворное, или ликворно-сывороточное соотношение), IgG-индекс (параметр внутритекального синтеза IgG; в норме

<0,7), IgM-индекс (параметр внутритекального синтеза IgM; в норме <0,07), TPHA-индекс по Люгеру (параметр внутритекального синтеза специфических противотрепонемных IgG). Определение индексов позволяет более точно установить диагноз нейросифилиса и доказать специфичность поражения за счет подтверждения факта интратекального синтеза антител к T.pallidum. В России данные показатели для диагностики нейросифилиса не регламентированы и не используются.

Применение методов молекулярной биологии позволило получить очищенные рекомбинантные белковые антигены T.pallidum, методом векторных плазмид и использовать их для диагностики сифилиса в формате иммуноблоттинга, который начал активно применяться для диагностики сифилиса в конце ХХ - начале ХХ! века и показал высокую чувствительность и специфичность [6,89]. Однако данный метод не лишен недостатков, т.к. он не позволяет на одном иммуносорбенте - стрипе (мембране) одновременно определять принадлежность детектируемых трепонемоспецифических антител к разным классам иммуноглобулинов. «К недостаткам этого теста следует отнести субъективность интерпретации результатов при визуальной его оценке, высокую стоимость наборов» [145].

Одним из современных форматов тест-систем, используемых для мультифакторной диагностики инфекционных заболеваний, в том числе сифилиса, лишенных недостатков технологии иммуноблоттинга, являются иммуночипы. «Используемая для диагностики сифилиса тест-система в формате иммуночипа состоит из иммуносорбента с раздельно иммобилизованными на нем антигенами Treponema pallidum, конъюгата и реактивов, необходимых для выявления комплекса антиген-антитело» [145]. Тест-система дает возможность выявлять наличие антител к разным рекомбинантным антигенам Treponema pallidum классов G и М в сыворотке крови. Однако в доступной научной

литературе отсутствуют указания о применении технологии иммуночипов для диагностики нейросифилиса путем исследования ЦСЖ.

В настоящее время в различных областях медицины нередко используют математические подходы, что существенно расширяет возможности диагностики и терапии заболеваний. Одним из таких подходов является метод множественного (многомерного) дискриминантного анализа, позволяющий на основании использования совокупности целого ряда результатов исследований существенно повышать точность диагностики и создавать математические модели. Применительно к сифилису данный метод применялся Е.В. Соколовским для выяснения возможности определения длительности заболевания [159] и Н.В. Фриго с целью проведения дифференциальной диагностики между ранним скрытым сифилисом и биологическими ложноположительными результатами серологических реакций на сифилис [164]. Для диагностики нейросифилиса данный математический подход до настоящего времени не использовался.

Таким образом, диагностику нейросифилиса в настоящее время трудно признать совершенной. В условиях роста заболеваемости населения РФ и города Москвы нейросифилисом диагностика этой формы заболевания должна быть точной, быстрой и доказательной, базироваться на применении актуальных подходов и алгоритмов, что и послужило поводом к проведению настоящего исследования.

В связи с вышеизложенным целью настоящего исследования явилась разработка новых подходов и алгоритмов лабораторной диагностики нейросифилиса, основанная на применении актуальных и инновационных методов.

Задачи исследования:

1. Оценить диагностическую эффективность метода VDRL в сравнении с другими нетрепонемными и трепонемными тестами у больных нейросифилисом

2. Изучить возможность использования экспериментальной тест-системы в формате иммуночипа для выявления антител к T. pallidum в цереброспинальной жидкости больных нейросифилисом

3. Оценить эффективность определения сывороточно-ликворного соотношения (ITPA-индекса) для подтверждения диагноза НС.

4. Изучить возможность использования многомерного дискриминантного анализа для диагностики НС

Научная новизна исследования В процессе выполнения работы впервые:

• установлена высокая эффективность экспериментальной тест-системы в формате иммуночипа для диагностики НС, имеющая высокие показатели диагностической чувствительности и специфичности

• для диагностики НС применен многомерный дискриминантный анализ, позволивший разработать способ диагностики нейросифилиса, повышающий точность диагностики заболевания, в особенности при получении дискордантных результатов лабораторных исследований;

• в сравнительном аспекте изучена диагностическая значимость метода VDRL на отечественных реактивах и других общепринятых (регламентированных) лабораторных методов исследования; показаны ее преимущества перед РМП в диагностике нейросифилиса

• показана высокая эффективность определения ITPA-индекса (сывороточно-ликворного соотношения) для оценки интретекального синтеза трепонемоспецифических антител с целью подтверждения диагноза НС

• разработан алгоритм диагностики нейросифилиса с использованием известных и инновационных подходов.

Теоретическая и практическая значимость исследования На основании результатов проведенных исследований для диагностики НС научно обосновано преимущество применения метода VDRL, подсчета ITPA-

индекса (сывороточно-ликворного соотношения), технологии иммуночипов и в сложных случаях - многомерного дискриминантного анализа, что имеет большое значение для практического здравоохранения.

Впервые на основании использования многомерного дискриминантного анализа лабораторных показателей ЦСЖ больных НС создана математическая модель заболевания, позволяющая с высокой точностью диагностировать нейросифилис.

Разработан и внедрен в практическое здравоохранение алгоритм комплексной диагностики НС, основанный на междисциплинарном взаимодействии врачей разных специальностей. включающий клиническое и параклиническое обследование пациентов, а также лабораторные технологии исследования ЦСЖ пациентов с использованием известных и инновационных подходов. Применение разработанного алгоритма в практическом здравоохранении будет способствовать оптимизации лабораторной диагностики нейросифилиса.

Методология и методы исследования

Исследование выполнено в период 2014-2018 годов на базе ГБУЗ «Московский научно-практический Центр дерматовенерологии и косметологии Департамента здравоохранения города Москвы (МНПЦДК) (тема НИР «Современные методы профилактики, диагностики, лечения инфекций, передаваемых половым путем», номер государственной регистрации АААА-А17-117122290024-5).

Клинический раздел работы выполнялся совместно с сотрудниками филиала «Клиника им. В.Г. Короленко» МНПЦДК (зав. филиалом, к.м.н. Маляренко Е.Н.) и ФГАУ «Национальный научно-практический центр нейрохирургии имени академика Н.Н. Бурденко» МЗ РФ (главный врач - д.м.н. Назаренко А.Г.).

Исследования с использованием клинико-биохимических, иммунохимических методов, определение 1ТРА-индекса и клиническая апробация иммуночипа для диагностики НС проведены в Централизованной клинико-диагностической лаборатории МНПЦДК (рук. - Н.А. Сапожникова) под руководством и при участии зам. директора МНПЦК по научной работе, д.м.н. Фриго Н.В. и главного научного сотрудника МНПЦДК, д.б.н., профессора Г.А. Дмитриева. Разработка и клиническая апробация иммуночипа для диагностики НС осуществлялась совместно с сотрудниками научной группы генной инженерии и биотехнологии отдела молекулярной диагностики ФБУН «ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора (рук. - к.б.н. Маркелов М.Л.).

Работы по изучению возможности использования многомерного дискриминантного анализа в диагностике НС были проведены при содействии профессора кафедры антропологии биологического факультета МГУ им. Ломоносова, д.б.н. Негашевой М.А.

Личное участие автора в выполнении исследования Автором досконально изучена и проработана отечественная и зарубежная литература по теме диссертации, разработан дизайн исследования, определены основные методологические подходы к выполнению диссертационной работы, осуществлены: обследование больных с подозрением на нейросифилис, отбор и транспортировка биологических образцов пациентов, статистическая обработка полученных результатов, анализ и интерпретация полученных данных, а также подготовка выступлений и публикаций по диссертационной теме.

Основные цели, задачи, положения, выносимые на защиту, и выводы сформулированы при участии научного руководителя, профессора Жуковой О.В.

Публикации по материалам диссертационного исследования подготовлены в соавторстве с директором МНПЦДК, д.м.н., профессором Потекаевым Н.Н., зам. директора по научной работе МНПЦДК, д.м.н. Фриго Н.В., главным

научным сотрудником МНПЦДК, д. б. н., профессором Дмитриевым Г. А., и другими.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту

1. Метод VDRL на отечественных реактивах в сравнении с методом РМП имеет более высокую диагностическую эффективность при исследовании как сыворотки крови, так и цереброспинальной жидкости больных НС, что обосновывает целесообразность включения данного метода в число стандартных регламентированных нетрепонемных методов диагностики этого заболевания.

2. Разработанный и клинически апробированный экспериментальный вариант тест-системы для определения трепонемоспецифических антител в ликворе в формате иммуночипа имеет высокие показатели диагностической эффективности при исследовании образцов ЦСЖ пациентов с НС и может быть рекомендован для диагностики НС.

3. Определение сывороточно-ликворного соотношения (ITPA-индекса) высоко эффективно при установлении диагноза нейросифилиса по сравнению с регламентированными методами исследования, что обосновывает возможность его включения в число стандартных регламентированных методов диагностики НС

4. Многомерный дискриминантный анализ может быть использован для диагностики НС. На основе МДА разработаны: способ диагностики нейросифилиса, повышающий точность выявления нейросифилиса при дискордантных результатах лабораторных исследований цереброспинальной жидкости, и математическая модель НС.

Степень достоверности и апробация результатов исследования Достоверность результатов диссертационного исследования обоснована базовыми теоретическими знаниями в рамках изучаемой проблемы, достаточным объемом клинического материала, использованием регламентированных

диагностических методов, применением сертифицированных тест-систем для иммунохимического обследования, результатами лабораторного обследования, использованием лицензионных программ и адекватных методов статистической обработки полученных данных. Представленные в диссертационном исследовании данные согласуются с результатами проведенных ранее исследований, опубликованных в отечественной и зарубежной научной литературе.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности

В соответствии с формулой специальности «14.01.10 - кожные и венерические болезни», медицинские науки, диссертационная работа охватывает проблему повышения качества диагностики нейросифилиса - тяжелой формы сифилитической инфекции, рост которой в РФ и в городе Москве наблюдается в последнее время. В работе отражены вопросы эпидемиология и статистики сифилиса и нейросифилиса, результаты клинических, биохимических, иммунохимических исследований.

Апробация результатов исследования

Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: IX Международном форуме дерматовенерологов и косметологов, Москва 16-18 марта 2016 года; IX междисциплинарной научно-практической конференции «Урогенитальные инфекции и репродуктивное здоровье: клинико-лабораторная диагностика и терапия», 19-20 мая 2016г. Санкт-Петербург; Российском конгрессе лабораторной медицины, Москва, ВДНХ, павильон 75, 14-16 октября 2016 года; VI Межрегиональном Форуме «Дерматовенерология и косметология. Синтез науки и практики», 17-18 октября 2016 года, Москва; Ассамблее «Здоровье столицы» 20-30 ноября 2016 года, Москва; XXII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Теория и практика клинической лабораторной диагностики. Москва, КРОКУС-Экспо, 21-23 марта 2017 года; X юбилейной междисциплинарной научно-практической конференции

«Урогенитальные инфекции и репродуктивное здоровье: клинико-лабораторная диагностика и терапия» с симпозиумами: «Мужское здоровье» и «Заболевания шейки матки», 27-28 апреля 2017г. Санкт-Петербург; Х межрегиональной научно-практической конференции «Современная лабораторная медицина: эффективность, доступность, качество», 26-27 мая 2017г., Москва; VII Межрегиональном форуме дерматовенерологов и косметологов, Москва, 20 октября 2017; XVI Ассамблее «Здоровье столицы», Москва, «Крокус-Экспо» 1.12.2017; XI Международном форуме дерматовенерологов и косметологов, Москва, 14-16 марта 2018; XXIII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Традиции и новации клинической лабораторной диагностики». Москва, 20-22 марта 2018 год; Евразийском форуме с международным участием: Дерматовенерология: время реальных дел. Екатеринбург 12-13 апреля 2018 года, IV Российском конгрессе лабораторной медицины 3-5 октября 2018 года.

Внедрение результатов работы

Результаты работы внедрены в практику лечебной работы отделений ГБУЗ «Московский научно-практический Центр дерматовенерологии и косметологии Департамента здравоохранения города Москвы».

Результаты диссертационного исследования включены в лекционный курс образовательной программы подготовки кадров высшей квалификации в ординатуре, цикла повышения квалификации и профессиональной переподготовки по специальностям «Дерматовенерология» при МНПЦДК ДЗМ.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 22 печатных работы соискателя, в том числе 6 статей в журналах, рекомендованных РУДН и ВАК Министерства

образования и науки Российской Федерации для соискателей ученой степени кандидата медицинских наук.

Объём и структура диссертации

Диссертация оформлена и изложена в соответствии с ГОСТ Р 7.0.11-2011 РФ на 147 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 18 таблицами и 12 рисунками. Работа состоит из введения, 3 глав с описанием данных литературы, материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, содержащего 171 источников, из них 71 -российских и 100 - зарубежных авторов.

ГЛАВА 1.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, КЛИНИКА, ДИАГНОСТИКА НЕЙРОСИФИЛИСА В

СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1 Эпидемиология сифилиса и нейросифилиса в современных условиях

Во всем мире бремя заболеваемости и смертности, связанное с патогенами, передаваемыми половым путем (ИППП), негативно сказывается на качестве жизни, сексуальном и репродуктивном здоровье людей, а также на здоровье детей и новорожденных (Рисунок 1).

| Регион ВОЗ стран Америки | Африканский регион ВОЗ | Регион ВОЗ Восточного Средиземноморья Европейский регион ВОЗ Регион ВОЗ Юго-Восточной Азии Регион ВОЗ Западной части Тихого океана

Рис. 1. Заболеваемость ИППП по данным ВОЗ за 2015 год

Согласно оценкам, ежегодно 357 миллионов людей в возрасте 15-49 лет заболевают четырьмя наиболее распространенными ИППП, вызываемыми облигатными патогенами: Chlamydia trachomatis (131 миллион), Neisseria gonorrhoeae (78 миллионов), Treponema pallidum (6 миллионов) или Trichomonas vaginalis (142 миллиона) [107].

Распространенность этих инфекций варьирует в зависимости от региона мира, возраста и гендерной принадлежности пациентов.

По стратегии ВОЗ, к 2030 году планируется сокращение числа случаев сифилиса на 90% во всем мире (в сравнении с глобальным исходным показателем 2018 года); сокращение числа случаев гонореи на 90% во всем мире (в сравнении с глобальным исходным показателем 2018 года); сокращении не менее чем на 50% случаев врожденного сифилиса на 100 000 живорожденных в 80% стран.

По оценке ВОЗ по состоянию на 2012 год в мире ежегодно регистрируется по 6 млн новых случаев заражения сифилисом [33]. По распространенности сифилитической инфекции по состоянию на 2012 год превалируют такие регионы, как Юго-Восточная Азия, регион стран Америки и Африканский регион (2,4 млн новых случаев, 1,09 млн и 1,07 млн - соответственно) [32].

По данным Европейского бюро ВОЗ, в 2011 - 2013 годы в странах Европы и постсоветского пространства [41] отмечалась тенденция к росту заболеваемости сифилисом. Особенно высокий уровень показателя «число случаев заболеваемости на 100 000 населения» отмечен в республике Молдова (63,6 -64,7), России (37,97 - 28,86) и Грузии (11,3 - 25,82).

Данные CDC последних лет (2011 - 2017 гг.) свидетельствуют о росте заболеваемости сифилисом в США (таблица 1). [43]

Таблица 1.

Заболеваемость сифилисом в США (2011 - 2016 годы)

Годы Число случаев Показатель заболеваемости (число случаев на 100 000 населения)

2011 46,040 14,8

2012 49,915 15,9

2013 56,482 17,9

2014 63,450 20,1

2015 74,707 23,2

2016 88,042 27,4

2017

101,567

31,4

При этом рост заболеваемости ранними манифестными формами сифилиса (первичный, вторичный сифилис) наблюдается преимущественно в группе мужчин, имеющих секс с мужчинами, проживающих преимущественно на Западе, афроамериканцев [42].

Рост заболеваемости всеми формами сифилиса наблюдается также в Китае: 0,2 случая на 100000 населения в 1993 году, 5,7 случаев - в 2005, по состоянию на

2013 год абсолютное количество заболевших сифилисом составило 444,952 случаев (34 случая на 100000 населения) [28,87].

В Российской Федерации в 2003 - 2013 гг., согласно данным официальной статистической отчетности [127,128,148,149,150,151] заболеваемость сифилисом долгое время продолжала оставаться высокой, значительно превышая уровень заболеваемости в развитых странах Европы и США [63].

В девяностых годах ХХ века Россия пережила эпидемию сифилиса, последствия которой не закончилтсь до настоящего времени. Доэпидемический уровень заболеваемости в 1988 - 1989 гг. составил 4.3 случая на 100000 населения. Пик заболеваемости был отмечен в 1997 году (277,3 случая на 100 000 населения), абсолютное количество больных сифилисом тогда составило 404746 человек.

С 1998 г. заболеваемость сифилисом в Российской Федерации начала снижаться, уменьшение уровня заболеваемости происходит достаточно равномерно, варьируя от 12 до 20% в год. И если в 2003 году заболеваемость сифилисом составляла 95,2 случая на 100 000 населения, то в 2013 году - 28,9 , в

2014 году - 25,0, в 2015 году - 23,5 случая, а в 2016 году - 21,3 на 100 000 населения) [114,116,152,153].

100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

95,2

I Заболеваемость сифилисом на 100 ООО населения

2017 год - 19,5

2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015

Рис. 2. Динамика заболеваемости сифилисом в Российской Федерации (2003-2017 гг.) [на 100 тыс. населения]

Однако, несмотря на благоприятные тенденции к изменению уровня заболеваемости сифилисом среди населения РФ, не следует забывать о том, что существует форма сифилиса, которая при несвоевременной диагностике и неадекватном лечении может привести к тяжелейшим последствиям. Эта форма -нейросифилис (НС) - тяжелое поражение нервной системы, вызываемое T. pallidum. Результатом НС является значительное снижение качества жизни, инвалидизация пациентов и даже летальный исход.

С 2005 года статистика по заболеваемости нейросифилисом в США, а также в странах Европы не ведется.

Среди зарубежных публикаций, касающихся заболеваемости НС, интересны данные, полученные от исследователей из Китая. Общая заболеваемость нейросифилисом в Китае в последние годы имеет тенденцию к росту от 0,02

случаев на 100 000 человек в 2000 году до 0,26 случая на 100 000 человек в 2013 году [28]. Однако исследователи отмечают возможное искажение реальной эпидемиологической обстановки по заболеваемости нейросифилисом в связи с проблемами в лабораторной диагностике нейросифилиса, невозможностью проведения комплексного обследования больного, ошибочной постановкой другого диагноза [112]. Исследователи связывают ошибочные диагнозы с отсутствием стандартов по диагностике нейросифилиса, отсутствием в регионе возможности проведения комплексных исследований, неполной укомплектованностью штата лабораторий и клиник.

Следует отметить, что в Российской Федерации в течение ряда последних лет отмечается увеличение числа зарегистрированных случаев нейросифилиса; при этом наблюдается значительно более интенсивный рост поздних форм заболевания [151] (рисунок 3).

1400

1200

х

3 1000

k

О 800

й 600

—

I 400 200

О П-т-,-т-т-т-,-т-т-т-т-,-Т-,

2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 —^Веего -«-Ранний НС -*-Поздннй НС.'

Рисунок 3. Заболеваемость нейросифилисом в Российской Федерации (2002 -

2015 годы)

Просматриваемая тенденция обращает на себя внимание к проблеме НС врачей смежных специальностей - неврологов, психиатров, офтальмологов, оториноларингологов, то есть тех, к кому могут впервые обратиться с жалобами больные нейросифилисом.

Эпидемиология нейросифилиса в различных субъектах РФ также имеет свои особенности. По данным официальной статистической отчетности число случаев раннего нейросифилиса в 2014 году составило 0,2 х 10-5, а позднего - 0,8 х 10-5. При этом наиболее высокие показатели заболеваемости отмечены в Ленинградской области по раннему нейросифилису (1,4 х 10-5), а по позднему нейросифилису - в республике Мордовия (4,0 х 10-5) и Саратовской области (2,6 х 10-5). По данным исследователей в период с 2005 по 2010 год заболеваемость НС в Саратовской области варьировала, причем заболеваемость АНС за указанные 5 лет снижалась (от 2,5 до 0,6 х10-5), тогда как росла частота регистрации форм с НСС (от 0,6 до 1,4 х10-5) [169,170].

В крупном мегаполисе, городе Москва, в последние годы также наблюдается значительный подъем заболеваемости населения нейросифилисом. Так, за период с 2009 по 2014 год число зарегистрированных случаев нейросифилиса возросло в 10,9 раза. В 2015 и в 2016 году уровень заболеваемости поздним нейросифилисом несколько снизился (с 239 случаев в 2014 году до 147 случаев в 2016 году и до 82 случаев ы 2017 году), однако продолжает занимать весомое место (7%) в структуре всех форм сифилиса [140,146] (рисунок 4)

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Негашева Екатерина Сергеевна, 2019 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Active syphilis in HIV infection: a multicentre retrospective survey. / H. Schofer, M. Imhof , E. Thoma-Greber [et al.] - The German AIDS Study Group (GASG) Genitourin Med. - 1996. - Vol. 72(3). - P. 176-81.

2. Analysis of Treponema pallidum recombinant antigens for diagnosis of syphilis by western blotting technique / N.S. Sato [et al.] // Rev. Inst. Med. Trop. San Paulo. - 1999. - Vol.41. №2. - P. 115-118.

3. B. Conrad, R. Benecke, H. Müsers [et al.] Visual evokedpotentials in neurosyphilis // Neurol. Neurosurg. Psychiatry. - 1983;46;1: P.23 - 27

4. Baltabaev M. K., Nurlaev M. D. Osobennosti kletochnogo i gumoral'nogo immuniteta u bol'nyh nejrosifilisom s soputstvujuwej patologiej LOR-organov // Vestn. KRSU. - 2010; 10; 12: P.70 - 74.

5. Blanco Y., Sánchez-Valle R., Valldeoriola F. Bilateral temporal leukoencephathy in neurosyphilis // Neurologia. 2002. №17. Vol. 1: 52.

6. Bollensen E., Albrecht S., Beuche W., et al. Reactivity of locally produced CSF antibodies in patients with neurosyphilis against antigens of Treponema pallidum// J Neurol. -1993. №240 (8). Р. 471—474.

7. Bourekas E. C. The dural tail sign revisited // AJNR Am. J. Neuroradiol. 1995. №16. p.325 - 328.

8. Brandon W. R. Determining the prevalence of neurosyphilis in a cohort co-infected with HIV. / W. R. Brandon, L. M. Boulos, A. Morse // Int. J. STD & AIDS. - 1993 - № 4. - P 99-101;

9. Castro R, Prieto ES, da Luz Martins Pereira F. Nontreponemal tests in the diagnosis of neurosyphilis: an evaluation of the Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) and the Rapid Plasma Reagin (RPR) tests.// J Clin Lab Anal. 2008. - Vol. 22(4). - P. 257-61.

10.Center for disease control prevention, Sexually transmitted diseases treatment guidelines. CDC. MMWR. - 2010. - 59 (RR12). - 1-110.

11.Centers for Disease Control and Prevention. Sexually Transmitted Disease Surveillance 2015. Atlanta: U.S. Department of Health and Human Services. -2016. - P. 1-176

12.Centers for disease control and prevention// Sexually transmitted diseases treatment guidelines, 2015.

13.Centers for Disease Control Prevention Symptomatic early neurosyphilis among HIV-positive men who have sex with men-four cities, United States, January 2002-June 2004. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. -2007. - Vol. 56, № 25. - P. 625.

14.Cerebrospinal fluid at different levels. Weigeldt W. The Journal of Nervous and Mental Disease: June 1923 - Vol. 57 - Issue 6 - ppg 584.

15.Cerebrospinal fluid human immunodeficiency virus viral load in patients with neurosyphilis. / de Almeida S. M. [et. al] // Journal of Neurovirology. - 2010 -Vol. 16. - №1. - P. 6-12.

16.Cerebrospinal fluid treponemal antibodies in untreated early syphilis./ Marra C. M., Critchlow, C.W. [et. al.] // Arch Neurol. - 1995. - 52. - P. 68-72. (96.)

17.Changes in neurosyphilis presentation: a survey on 286 patients / F. Drago. URL: 10.1111/jdv.13753

18.Characterization of outer membranes isolated from Treponema pallidum, the syphilis spirochete. / J. D1. Radolf [et al.]. - Norgard Infect Immun. - 1995 Nov;63(11). - 4244-52.

19.Christina M. Marra. Current Neurology and Neuroscience Reports. -2004. - № 4. - p. 435-440.

20.Comparison of the cerebrospinal fluid (CSF) toluidine red unheated serum test and the CSF rapid plasma reagin test with the CSF venereal disease research laboratory test for diagnosis of neurosyphilis among HIV-negative syphilis patients in China. / L. Zhu [et. al.]. // J Clin Microbiol. - 2014 Mar. - 52(3). - P. 736-40.

21.Davis L. E., Schmitt J. W. Clinical significance of cerebrospinal fluid tests for neurosyphilis. Annals of Neurology. - 1989. - Vol. 25(1). - P. 50-55; Castro R., Prieto E. S., da Luz Martins Pereira F. Nontreponemal tests in the diagnosis of neurosyphilis: an evaluation of the Venereal Disease Research Laboratory (VDRL) and the Rapid Plasma Reagin (RPR) tests. Journal of Clinical Laboratory Analysis. - 2008. - Vol. 22(4). - P. 257-261.

22.Deacon W.E., Falcone V.H., Harris A. A fluorescent test for treponemal antibodies. // Proc Soc Exp Biol Med. - 1957. - 96. - P. 477-480.

23.Deacon WE, Freeman EM, Harris A. Fluorescent treponemal antibody test. Modification based on quantitation (FTA-200) // Proc Soc Exp Biol Med. - 1960. -103. - P. 827-9.

24.Detection of Treponema pallidum Sp. pallidum DNA in cerebrospinal fluid (CSF) by two PCR techniques. / R. Castro [et al.] // J Clin Lab Anal. - 2016 Sep. -30(5). P. 628-32.

25.Enhanced molecular typing of treponema pallidum: geographical distribution of strain types and association with neurosyphilis / C. Marra [et.al.] // J Infect Dis. - 2010; - № 202. - P. 1380.

26.Evaluation of a Treponema pallidum Western immunoblot assay as a confirmatory test for syphilis. / R.E.Byrne [et al.] // Clin Microbiol. - 1992. -№30. - P. 115-122.

27.Falcone S., Quencer R. M., Post M. J. Magnetic resonance imaging of unusual intracranial infections // Top. Magn. Reson. Imaging. 1994. № 6. p.41 - 52.

28.Features and Trend of Syphilis Epidemic in China during 2000 and 2013 / G. Xiangdong [et al.] // Chin J Dermatol. - 2014. - Vol. 47, 6.

29.Gallego, G. Soriano, J. L. Zubieta [et al]. Magnetic resonance angiography in meningovascular syphilis // Neuroradiology. 1994. № 36. Vol. 3. p.208 - 209.

30.Garcia P. Laboratory diagnosis of Treponema pallidum infection in patients with early syphilis and neurosyphilis through a PCR-based test / P. Garcia [et. al] // Rev Chilena Infectol. - 2011 Aug;28(4). - P. 310-5.

31.George R.W., Pope V., Larsen S.A. Use of the Western blot for the diagnosis of syphilis. // Clin Immunol Newsletter. -1991. № 8. p. 124-128.

32.Global estimates of the prevalence and incidence of four curable sexually transmitted infections in 2012 based on systematic review and global reporting / L. Newman [et al.] // PLoS One. - 2015. - Vol. 10. №12. - e0143304.

33.Global health sector strategy on Sexually Transmitted Infections, 2016-2021 / World Health Organization. - 2016. WH0/RHR/16.09. Vol. 13. DOI: http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/250268/1/WH0-RHR-16.09-rus.pdf.

34.Hagedorn H.J., Kraminer-Hagedorn A., De Bosschere K. et al. Evalution of INNO-LIA syphilis assay as a confirmatory test for syphilis // J Clin Microbiol. -2002. Vol. 3. №40. p. 973-978.

35.Harris A., Rosenberg A. A., Riedel L. M. A microflocculation test for syphilis using cardiolopin antigen: preliminary report. J Vener Dis Inform 1946. - Vol. 27. - P. 159-172.

36.Hay P. E. Detection of treponemal DNA in the CSF of patients with syphilis and HIV infection using the polymerase chain reaction./ P. E. Hay, J. R. Clarke, D. Taylor-Robinson, D. Goldmeier // Genitourin Med. 1990 Dec; 66(6). - P. 428-32.

37.Heterozygous Arg753Gln polymorphism of human TLR-2 impairs immune activation by Borrelia burgdorferi and protects from late stage Lyme disease / N.W. Schröder [et.al.] // J Immunol. - 2005. Vol. 175, № 4. - P. 2534-40.

38.Hideyo N., Moore J.W. A demonstration of treponema pallidum in the brain in cases of general paralysis // J Exp Med. - 1913, Feb 1. - Vol. 17. №2. - P. 232238.

39.Hollander H. Neurologic and psychiatric manifestations of HIV disease.// J. Gen. Intern. Med. - 1991- № 6. - P. 24-31.

40.Hook III E.W. Editorial respons: diagnosing neurosyphilis. Clin. Infect. Dis. -1994. - 18. - P. 295-297.

41.http://data.euro.who.int/cisid/?TabID=406865

42. https: //www. cdc. gov/std/statsl 6/

43. https: //www. cdc. gov/std/statsl 7/tables/24. htm

44.Hunter E. F., Deacon W. E., Meyer P. E. An improved FTA test for syphilis, the absorption procedure (FTA-ABS). // Public Health Rep. - 1964. - 79. - P. 410412.

45.Invasion of the central nervous system by Treponema pallidum: implications for diagnosis and treatment / S.A. Lukehart [et al.] // Ann Intern Med. -1988. - V. 109, №11. - P. 855-862.

46.ITPA^^,eKC в клинико-лабораторной диагностике нейросифилиса. Дмитриев Г. А., Потекаев Н. Н., Негашева Е. С., Фриго Н. В. // Клиническая дерматология и венерология. - 2017. №16(6). - C. 38-43.

47.Jaffe HW, Larsen SA, Peters M, Franco-Jove, D, Lopez B, Schroeter AL. Tests for treponemal antibody in CSF. Arch Intern Med. - 1978. - 138. - P. 252-5.

48.Jahnel, F. Die progressive paralyse // Klin. Wschr. - 1934. - №13. - Р. 550.

49.Jeong Y. M., Hwang H. Y., Kim H. S. MRI of neurosyphilis presenting as mesiotemporal abnormalities: a case report // Korean J. Radiol. 2009. №10. Vol. 3. p.310 - 312;

50.Karumudi U. R., Augenbraun M. Syphilis and HIV: a dangerous duo. Expert Rev Anti Infect Ther. - 2005. - Vol. 3(5) - P. 825-31. DOI: 10.1586/14787210.3.5.825.

51.Kassutto S. Syphilis in the HIV era. Emerg Infect Dis. / S. Kassutto, J. P. Doweiko. - 2004. - Vol. 10(8) - P. 1471-3. DOI: 10.3201/eid1008.031107.

52.Kaziev A. H., Karpov S. M. Ispol'zovanie sluhovyh vyzvannyh potencialov v diagnostike nejrosifilisa // Kubanskij nauch. med. zhurn. - 2010; 3: P. 72 - 76.

53.Kodama K., Okada S., Komatsu N. et al. Relationship between MRI findings and prognosis for patients with general paresis // J. Neuropsychiatry Clin. Neurosci. 2000. №12. p. 246 - 250.

54.Landi G., Villani F., Anzalone N. Variable angiographic findings in patients with stroke and neurosyphilis // Stroke. - 1990; 21;2: P. 333 - 338.

55.Larsen S. A., Hambie E. A., Wobig G. H., Kennedy E. J. Cerebrospinal fluid serologic test for syphilis: treponemal and nontreponemal tests. In: Morisset R, Kurstak E, eds. Advances in sexually transmitted diseases. Utrecht, The Netherlands: VNW Science Press. - 1985. - P. 157.

56.Lee J.B., Farshy C.E, Hambie E.A.Detection of immunoglobulin M in cerebrospinal fluid from syphilis patients by enzyme-linked immunosorbent assay /J.Clin //Microbiol. -1992. №3(2). -p.497-500.

57.Levaditi C., Schoen R. Présence du Treponema pallidum chez les souris atteintes de syphilis expérimentale inapparente // Compt. rend. Soc. de boil. - 1932. -№109. - P. 811.

58.Lin L.R., Lin D.H, Tong M.L. [et al]. Macrophage migration inhibitory factor as a novel cerebrospinal fluid marker for neurosyphilis among HIV-negative patients// Clin Chim Acta. 2016 Dec. Vol. 1. №463. p.103-108.

59.Liu, X., Li, X., Zhou, C. Misdiagnosis of neurosyphilis as hydrocephalus: a case report. // Chinese Journal of Neuromedicine. - 2010. - № 2.

60.Luger A. F., Schmidt B. L., Kaulich M. Significance of laboratory findings for the diagnosis of neurosyphilis. Int J STD AIDS. - 2000. - 11. - P. 224-234.

61.M. Ide, K. Mizukami, T. Fujita [et al. A case of neurosyphilis showing a marked improvement of clinical symptoms and cerebral blood flow on single photon emission computed tomography with quantitative penicillin treatment/ // Prog. Neuropsychopharmacol Biol. Psychiatry. - 2004;28; 2: P. 417 - 420.

62.MacLean S., Luger A. Finding neurosyphilis without the Venereal Disease Research Laboratory test. Sex Transm Dis. - 1996 Sep-Oct. - 23(5). - P. 392-4.9.

Garner MF, Backhouse JL. Fluorescent treponemal antibody tests on cerebrospinal fluid. Br J Vener Dis. - 1971. - 47. - P. 356-8.

63.Majewski S, Rudnicka. Sexually transmitted diseases in Poland in 2011 // Przegl Epidemiol. - 2013. - Vol. 67. №2. - 283-6, 379-81; Sexually transmitted infections: update. - 2013. // Praxis (Bern 1994). - 2013 Feb 27. - Vol. 102. №5. - 273-8. URL: http://www.cdc.gov/std/stats11/tables/1.htm; http : //data. euro. who. int/cisid/Default. aspx?TabID=313697.

64.Marra C. M. Update on neurosyphilis Curr Infect Dis Rep. - 2009. - 11(2). - P. 127-34

65.Marra C.M. Neurosyphilis. Continuum (Minneap Minn). (6 Neuroinfectious Disease). - 2015, Dec. - № 2117. - P. 14-28. URL: 10.1212/C0N.0000000000000250.

66.Marra C.M., Tantalo L.C. CXCL13 as a cerebrospinal fluid marker for neurosyphilis in HIV-infected patients with syphilis// Sexually transmitted diseases. 2010. № 37. p. 283-287.

67.Merrit H., Adams R., Solomon H. Neurosyphilis. // New York, Oxford University Press. - 1946. - P. 430.

68.Meyer M.P., Eddy T., Baughn R.E. Analysis of Western blotting (Immunoblotting) technique in diagnosis of congenital syphilis. // J Clin Microbiol. 1994. №32. p. 629-633.

69.Mothapo K.M., Verbeek M.M., van der Velden L.B. [et al]. Has CXCL13 an added value in diagnosis of neurosyphilis?// Journal of clinical microbiology. 2015. № 53. p.1693-1696.

70.Muller F., Moskophidis M. Estimation of the local production of antibodies to T. pallidum in the central nervous system of patient with neurosyphilis//Brit. J. Ven. Dis. 1983. №59. p. 80-84.

71.N. Kawai, A. Baba, i K. Mizukam [et al.] MR and SPECT findings in a general paresis // Comput. Med. Imaging Graph. - 1994; 18; 6: P. 461 - 465.

72.Nelson R. A. Jr., Mayer M. M.. Immobilization of Treponema pallidum in vitro by antibody produced in syphilitic infection. // J Exp Med. - 1949. - 89(4). - P. 369-393.

73.Neuroimaging of six neurosyphilis cases mimicking viral encephalitis. / T. Xiang. [et al.] // Journal of the neurological sciences. - 2013. - № 334. - P. 164-166.

74.Neurosyphilis during the AIDS epidemic, San Francisco, 1985-1992 / J.M. Flood [et.al.] // J Infect Dis. - 1998. - Vol. 177, № 4. - P. 931-40. URL: 10.1086/515245.

75.Noguchi, H. On some of the recent advance in the field of microbiology, with demonstration of the pure cultures of various spirochaetes, of the viruses of rabies and poliomyelitis and of Treponema pallidum in the brains of general paralytics.

- Proc.roy.: Soc. Med., 1913-1914. - Vol. 7. № 1. p.3-30.

76.Paraskevas GI et al. Cerebrospinal fluid tau protein in increased in neurosyphilis: a discrimination from syphilis without nervous system involvement? // Sex Trans Dis. 2007. №34 (4). p. 220-3.

77.Portnoy J., Bossak H.W., Falcone V.H., Harris A. A rapid reagin test with unheated serum and new improved antigen suspension. // Pub Health Rep 1961.

- Vol. 76. - P. 933-935.

78.Portnoy J., Carson W., Smith C.A. Rapid plasma reagin test for syphilis. // Pub Health Rep. - 1957. - 72. - P. 761-766.

79.Prange H.W., Moskophidis M., Schipper H.I. Relationship between neurological features and intrathecal synthesis of IgG antibodies to T.pallidum in untreated and treated human neurosyphilis. J. Neurol. 1983. p. 230. p. 241-252.

80.Rathlev T. Hemagglutination tests utilizing antigens from pathogenic and apathogenic Treponema pallidum. // Br J Vener Dis. - 1967. - 43. - P. 181-185.

81.Sambri V., Marangoni A., Siaone M. Evaluation of recom Well Treponema, a novel recombinant antigen-based enzyme-linked immunosorbent assay for the

diagnosis of syphilis // Clin. Microbiol. Infect. - 2001. - Vol. 7. № 4. - P. 200205.

82.Sandra A. Larsen, Bret M. Steiner, and Andrew H. Rudolph Laboratory Diagnosis and Interpretation of Tests for Syphilis // Clinical Microbiology Reviewrs. Jan. 1995. p. 1-21.

83.Scheck DN, Hook E. Neurosyphilis. Infect Dis Clin North Am. - 1994. - 8(4). -P. 769-795.

84.Simon RP. Neurosyphilis. Arch Neurol. - 1985. - 42(6). - P. 606-613.

85.Soares-FernandesJ. P., RibeiroM., MareR. Diffusion-weighted magnetic resonance imaging findings in a patient with cerebral syphilitic gumma // J. Comput. Assist. Tomogr. 2007. Vol. 4. №31. p. 592 - 594.

86.Svatonova J.,Borecka K.,Adam P., Lanska V. Beta2-Microglobulin as a Diagnostic Marker in Cerebrospinal Fluid: A Follow-Up Study// Disease Markers Volume. -2014. Article ID 495402. 6 pages.

87.Syphilis in China from 2000 to 2013: epidemiological trends and characteristics. / G. Xiangdong [et al.] // Chin J Dermatol. - 2014. - Vol. 5, 6.

88.Syphilis, paludisme, amibiase, notes de thérapeutique pratique / P. Ravaut ; Préface du professeur Fernand Widal. - 3e édition refondue. - 1927. - P. 284.

89.The diagnostic dilemma of otosyphilis. A new western blot assay / E.R. Birdsall [et al.] // Arch. Otolaiyngol. Head. Neck. Surg. - 1990. - Vol. 116. №5. - P. 617621.

90.Tien R. D., Gean-Marton A. D., Mark A. S. Neurosyphilis in HIV carriers: MR findings in six patients // AJR Am. J. Roentgenol. 1992. №158. Vol.6: p.1325 -1328.

91.Timmermans M., Carr J. Neurosyphilis in the modern era. J Neurol Neurosurg Psychiatry. - 2004. - 75(12). - P. 1727-1730.

92.Toll-like receptor polymorphisms are associated with increased neurosyphilis risk / C.M. Marra [et.al.] // Sex Transm Dis. - 2014 Jul. - Vol. 41, № 7, P. 440-6.

93.Toluidine red unheated serum test, a nontreponemal test for syphilis. / D.E. Pettit, S.A. Larsen, P.S. Harbec [et. al.] // J Clin Microbiol. - 1983. - Vol. 18. -P. 1141-1145.

94.Tsuboi M. Cerebral Syphilitic Gumma within 5 Months of Syphilis in HIV-Infected Patient. Emerg Infect Dis. / М. Tsuboi [et. al] - 2016. - 22(10):1846-8. DOI: 10.3201/eid2210.160600.

95.Vanhaecke C. Neurosyphilis Network; Neurosyphilis network., Clinical and Biological Characteristics of 40 Patients With Neurosyphilis and Evaluation of Treponema pallidum Nested Polymerase Chain Reaction in Cerebrospinal Fluid Samples./ C. Vanhaecke [et al.]// Clin Infect Dis. - 2016. - Nov 1;63(9). - P. 1180-1186.

96.Veldkamp J., Visser A.M. Application of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in the serodiagnosis of syphilis // Br J Vener Dis.- 1975. - №51. p.227-231.

97.Wang C, Zhu L, Gao Z.[et al]. Increased interleukin-17 in peripheral blood and cerebrospinal fluid of neurosyphilis patients// PLoS Negl Trop Dis. 2014, Jul 31. №8(7):e3004.

98.Wang C., Wu K., Yu Q. [et al]. CXCL13, CXCL10, CXCL8 [CXCL13, CXCL10 and CXCL8 as Potential Biomarkers for the Diagnosis of Neurosyphilis Patients// Sci Rep. 2016, Sep. 21. 6:33569.

99.Wassermann A, Neisser A, Bruck C. Eine serodiagnostische reaktion bei Syphilis. // Dtsch Med Wochenschr. - 1906. - 32. P. 745-746.

100. Who Guidelines For The Treatment Of Treponema Pallidum (Syphilis), 2016.

101. Zentralbl Bacteriol. IgG western blot as a confirmatory test in early syphilis. 1999. №289. Vol. 2. p. 125-133.

102. Акопова З.П. Роль реакции гемагглютинации в серодиагностике сифилиса // Вестн. дерматол. и венерол. -2000. - №6. - С. 12-13.

103. Александров М. В., Пирятинская В. А., Соколовский В. В. Циклический характер заболеваемости сифилисом и неспецифическая резистентность макроорганизма // Вестн. дерматологии и венерологии. 1997. № 3. С. 48 - 51.

104. Берестнева, О.Г., Макарова, Л.С., Семерякова, Е.Г. //Применение дискриминантного анализа в задачах медицинской диагностики [электронный ресурс] http: //www. rusnauka. com/15_NNM_2012/Matemathics/4_110896.doc. htm;

105. Бибарсова, Г.И. Клинико-иммунологические особенности аллергических заболеваний кожи. Автореф. дисс. канд. мед. наук.; М., 2017 http://rsmu.ru/fileadmin/rsmu/img/about rsmu/disser/2017/bibarsova gi/a bibars ova gi.pdf

106. Вильдеман, А.В. Математические модели прогнозирования индекса моторики на основе многогомерного статистического анализа автореф: Дисс. Вильдеман А.В. канд. физ-мат.наук - П., 2010

107. Глобальная стратегия сектора здравоохранения по инфекциям, передаваемым половым путем 2016-2021. На пути к ликвидации И11111 // Резолюция Генеральной Ассамблеи Организации Объединенных Наций 70/1 - «Преобразование нашего мира: Повестка дня в области устойчивого развития на период до 2030 г.». URL: http://www.un.org/ga/search/view doc.asp?symbol=A/RES/70/1&Lang=R.

108. ГОСТ Р 53022.4 - 2008 Технологии лабораторные клинические. Требования к качеству клинических лабораторных исследований.

109. Дмитриев Г. А Современные методы лабораторной диагностики сифилиса. Ч. 1. / Г.А. Дмитриев, Е.Е. Брагина // Вестн. дерматол. венерол. -1996. №2. - С.29-33.

110. Дмитриев Г. А. Современные методы лабораторной диагностики сифилиса. Ч. 2. / Г.А. Дмитриев, Е.Е. Брагина //Вестн. дерматол. венерол. -1996. №3. - С.33-38.

111. Дмитриев Г.А. Клинико-лабораторное и параклиническое обследование пациентов с нейросифилисом//Сош. Med.- 2014. -№2. с. 17-21.

112. Дмитриев Г.А. Нейросифилис: проблемы и решения. -Москва: БИНОМ, 2016. -с. 376

113. Дмитриев, Г.А. Сифилис (клиника, диагностика, лечение, профилактика). Методические рекомендации №34. М., 2013; Руководство по лабораторной диагностике инфекций урогенитального тракта. / Г. А. Дмитриев, О. К. Лосева, О. В. Доля, М. Домейки и др. - СПб., 2012.

114. Дмитриев, Г.А., Лосева, О.К., Доля, О.В. Сифилис (клиника, диагностика, лечение, профилактика). Методические рекомендации №34. М., 2013;

115. Дмитриев Г.А. Нейросифилис: проблемы и решения. Москва: БИНОМ. - 2016. - С. 376.

116. Заболеваемость, ресурсы и деятельность кожно-венерологических учреждений (2007 - 2008 гг.): статистические материалы. - М.: ДЭКС-ПРЕСС, 2009. - 112с.

117. Иванов А.М., Теличко И.Н, Вербов В.Н., Самцов А.В., Сбойчаков В.Б., Сухарев А.В., Смирнова Т.С. Способ серодиагностики раннего нейросифилиса // Патент на изобретение №2205409. http: //www. findpatent.ru/patent/220/2205409. html

118. Казиев, А.Х. Комплексная диагностика и терапия нейросифилиса (нейрофизиологические и иммунологические аспекты): Автореф. дис. док. мед. наук: М., 2010. - С. 52.

119. Катунин Г. Л. Сравнительная эффективность современных иммунологических методов исследования цереброспинальной жидкости для диагностики нейросифилиса: Автореф. - 2012.

120. Киселева Г.А. Ликвородиагностика сифилиса методом иммуноферментного анализа с тест - системой ЗАО «Вектор - Бест», предназначенной для выявления иммуноглобулинов класса G // Инфекции, передаваемые половым путем. -2003. №2. -С. 27-31.

121. Клинические рекомендации «Сифилис» / утверждены Российским обществом дерматовенерологов и косметологов на XVI Всероссийском Съезде дерматовенерологов и косметологов. - Москва. - 16 июня 2016 г.

122. Коноплева М.В., Даниленко В.В., Чернова Т.А. Аппаратно-программный комплекс для серодиагностики сифилиса методом РПГА: «Критерий 2»// Клин. дерматол. и венерол. -2006.- №4. -С. 17—22.

123. Котровский А.В. Разработка и клиническая оценка методики постановки иммуноферментного анализа на поверхности твердофазного носителя для серодиагностики сифилиса: Автореф. дис. . канд. мед. наук. -М., 1986.

124. Красносельских Т.В., Соколовский Е.В. Современный сифилис: эпидемиологические тенденции и достижения в области изучения Treponema pallidum // Современные проблемы дерматовенерологии иммунологии и врачебной косметологии. - 2010; T. 1, № 1. - С. 80-83.

125. Красносельских, Т. Б. Прогрессирующий паралич: клинико-серологические параллели и лечение / Т. Б. Красносельских, Е. В. Соколовский // Вестник дерматологии и венерологии. - 1998. - №1. - С. 45 - 50.

126. Красносельских, Т.В. Суставной синдром в практике дерматовенеролога. Нейросифилис. / Т. В. Красносельских, Е. В. Соколовский. - СПб. - 2001. - С. 72-270.

127. Кубанова А.А. Анализ эпидемиологической ситуации по заболеваемости инфекциями, передаваемыми половым путем, болезнями кожи и подкожной клетчатки населения Российской Федерации по данным официальной государственной статистики. // Вестник дерматологии и венерологии. - 2008. - №5. - С. 8-18.

128. Кубанова А.А., Тихонова Л.И. Дерматовенерология в России. Реальность и перспективы // Вестник дерматологии и венерологии. - 2004. -№2. - С. 4-11.

129. Кубанова А.А., Фриго Н.В., Ротанов С.В., Нестеренко В.Г. [ и др.]. Опыт использования метода иммуноблотинга для диагностики сифилиса// Вестник дерматол. и ве-нерол. - 2006. № 2. С. 4-11.

130. Куляш, Г. Ю. Об эффективности и перспективе применения теста исследовательской лаборатории венерических заболеваний (VDRL) для диагностики нейросифилиса в Российской Федерации / Г. Ю. Куляш, М. И. Сабаев, Л. В. Ерко, С. Г. Марданлы, Н. В. Бахилина // Клиническая лабораторная диагностика. - 2013. - № 3. - С. 30-33

131. Лукьянов А.М. Современная диагностика нейросифилиса. - Минск: БГМУ, 2009.

132. М.В Родиков., В.И. Прохоренков Нейросифилис: От диагноза к лечению. Часть II. Диагностика. Терапия. Прогноз. // Вестник дерматологии и венерологии.- 2010.- № 2.- С.20-25.

133. Маргулис, М. С. Ранний нейросифилис. Паталогическая анатомия, патогенез и клиника / М. С. Маргулис. - М.: Медгиз. - 1949. - 214 с.

134. Марданлы С.Г., Куляш Г.Ю. Реакция пассивной гемагглютинации в серологической диагностике сифилиса: учебно-методическое пособие. -Электрогорск: ЗАО «ЭКОлаб», 2010.

135. Маркелов М.Л., Чеканова Т.А., Шипулин Г.А. «Диагностическая система в формате иммуночипа и способ серологической

дифференциальной диагностики сифилиса // Патент на изобретение №RU 2397178 С1. Москва, 2009.

136. Марчук, Ю.В., Власова, Е.В., Блохина, С.И., Ткаченко, Т.Я. Применение методов многомерного анализа к прогнозированию риска развития ретинопатии недоношенных // Успехи современного естествознания. - 2010, № 12 - С. 64-66.

137. Молочков В.А., Чеканова Т.А., Маркелов М.Л. [и др.]. Выявление боррелиозной инфекции с помощью инновационной тест-системы в формате иммуночипа при склероатрофических поражениях кожи// Российский журнал кожных и венерических болезней. -2012. №2. с.32-35.

138. Н.В.Фриго, Л.А.Дударева, С.В.Ротанов, А.М.Иванов. Применение иммуноблоттинга в диагностике ранних форм сифилиса// Вестник дерматол. и венерол. - 2008. - № 4. - С. 57-62.

139. Немеров, Е.В., Языков, К.Г. К вопросу изучения личностных свойств в психофизиологической реактивности больных бронхиальной астмой на аудиовизуальную стимуляцию // Вестник ТГПУ. - 2011. - Вып. 6 (108). - С. 134-137.

140. Неопубликованные статистические данные Московского научно-практического Центра дерматовенерологии и косметологии за 2009 - 2018 годы

141. Новиков, Ю.А., Новиков, А.И., Чермошенцев, А.А., Орлова, Л.И., Ивасюк, Г.Н., Кидалов, М.Б. Опыт диагностики нейросифилиса в Омской области за период 2007-2009 гг. [электронный ресурс] // http://omsk-okvd.ru/nauchnye-raboty/opyt-diagnostiki-neirosifilisa-v-omskoi-oblatsi-za-period-20-288.html

142. Об эффективности и перспективе применения теста Исследовательской лаборатории венерических заболеваний (VDRL) для

диагностики нейросифилиса в Российской Федерации. / Куляш Г.Ю. [и др.] // Клиническая дерматология и венерология. - 2012. - № 2. - С. 28 - 31.

143. Организация оказания медицинской помощи по профилю «дерматовенерология» в Российской Федерации. Динамика заболеваемости инфекциями, передаваемыми половым путем, болезнями кожи и подкожной клетчатки, 2013-2015 гг. / А.А. Кубанова [и др.] // Вестник дерматологии и венерологии. - 2016. - №3. - С. 12-28.

144. Патент № 2554765 (РФ). Способ диагностики нейросифилиса.

145. Патент РФ № 2397178. Маркелов М.Л., Чеканова Т.А., Шипулин Г.А. Диагностическая тест-система в формате иммуночипа и способ серологической дифференциальной диагностики сифилиса. М., 2009. - 1 с.

146. Потекаев, Н.Н., Пташинский, Р.И., Фриго, Н.В., Лебедева, Г.А., Негашева, Е.С. Эпидемиологическая ситуация по заболеваемости сифилисом в г. Москве // Всероссийский междисциплинарный медицинский журнал Terra Medica. - 2015. № 1-2 (79-80). - С. 25 - 29.

147. Приказ Минздрава РФ № 87 от 26.03.2001 г. «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса». Приложение №1 «Постановка отборочных и диагностических тестов на сифилис». - М., 2001.

148. Ресурсы и деятельность кожно-венерологических учреждений. Заболеваемость за 2002-2003 гг.: статистические материалы. - М.: ДЭКС-ПРЕСС, 2005. - 124 с.

149. Ресурсы и деятельность кожно-венерологических учреждений. Заболеваемость за 2003-2004 гг.: статистические материалы. - М.: ДЭКС-ПРЕСС, 2005. - 104 с.

150. Ресурсы и деятельность кожно-венерологических учреждений. Заболеваемость за 2005-2006 гг.: статистические материалы. - М.: ДЭКС-ПРЕСС, 2007. - 116 с.

151. Ресурсы и деятельность медицинских организаций дерматовенерологического профиля. Заболеваемость инфекциями, передаваемыми половым путем, заразными кожными болезнями и болезнями кожи за 20102011 гг.: статистические материалы. - М.: Минздрав России, 2012. - 236 с.

152. Ресурсы и деятельность медицинских организаций дерматовенерологического профиля. Заболеваемость инфекциями, передаваемыми половым путем, заразными кожными болезнями и болезнями кожи за 2015-2016 гг.: статистические материалы. - М., 2017. -210 с.

153. Ресурсы и деятельность медицинских организаций дерматовенерологического профиля. Заболеваемость инфекциями, передаваемыми половым путем, заразными кожными болезнями и болезнями кожи за 2016-2017 гг.; статистические материалы. - М., 2018. -213 с.

154. Родиков М.В., Прохоренков В.И. Нейросифилис: от диагноза к лечению. Часть I. Эпидемиология, патогенез, клиника // Вестник дерматологии и венерологии. - 2010. - № 1. - С. 28-34.

155. Родионов, А.Н. Сифилис / Глава: Сифилис нервной системы. СПб., 2007. - С. 204 - 213.

156. Родионов, А.Н., Смирнова, Т.С., Теличко, И.Н. и др. Диагностика, клиника и лечение раннего нейросифилиса на современном этапе. Журнал дерматовенерологии и косметологии. - 2001. №2. - С. 36-38.

157. Сазонова Л.В. Лабораторная диагностика сифилиса. В рук-ве: Шапошников О.К. (ред) Венерические болезни. Лабораторная диагностика сифилиса. М.: Медицина, 1991. - С. 246-266.

158. Саримов, Р.М., Бинги, В.Н. Применение методов многомерного статистического анализа для исследования индивидуальной

чувствительности человека к нулевым магнитным полям // Биомедицинская радиоэлектроника. - 2009. №1. - С.20-31.

159. Соколовский Е.В. Серологическая резистентность после лечения сифилиса (причины и факторы развития, профилактика и лечение): Автореф. дис. докт. мед. наук. - Спб., 1995.

160. Способ диагностики изменений центральной нервной системы при сифилисе: пат. 2315303 Российской Федерации, МИК в01 № 33/487, в01 № 33/50 / А. Ю. Миронов [и др.]; заявитель и патентообладатель Миронов А. Ю., Истратов В. Г., Осман К. А., Рубальский О. В., Терехова Ю. Б. №2006142060/15; заявл. 20.01.2006; опубл. 29.11.2006, Бюл. № 24.

161. Способ дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса: пат. 2141660 (РФ), МИК в01 № 33/48 / М. В. Родиков [и др.]; заявитель и патентообладатель Красноярская государственная медицинская академия. № 98106148/14; заявл. 02.04.1998; опубл. 20.11.1999, Бюл. № 24. с.255.

162. Фаткуллина, И.Б., Протопопова, Н.В., Михалевич, И.М. Дискриминантный анализ как метод проведения дифференциальной диагностики артериальной гипертензии при беременности // Вестник новых медицинских технологий. - 2011. - т. 18, № 1. - С. 134-135.

163. Федеральные клинические рекомендации по ведению больных сифилисом Москва - 2015. - 44 е.; Луа1иа1её а1: http://www.cnikvi.ru/docs/c1inic гесБ/^е^Бп-регеёауаетуе-роЬуут-р^ет/

164. Фриго Н.В. Современные критерии дифференциальной диагностики раннего скрытого сифилиса и ложноположительных результатов стандартных серологических реакций на сифилис: Автореф. дис. докт. мед. наук. - М., 2001.

165. Фридман, Е. Л. К вопросу о сочетании первичного сифилиса с трихомонадными баланопоститами / Е. Л. Фридман // Вестник дерматологии и венерологии. - 1971. - № 3. - 69 с.

166. Чеканова Т.А., Маркелов М.Л., Манзенюк И.Н. и др. Разработка иммуночипа для раздельной детекции антител к вирусу гепатита С// Клин. Лаб. диагностика. - 2008. - №6. - С.25-30.

167. Шварцман, М. Применение дискриминантного анализа в диагностике онкозаболевания // Естественные науки. - 2004, № 2 - C. 35-37.

168. Штульман, Д.Р. Сифилитический менингомиелит // Неврологический журнал. - 1998. №1. - С. 24-30.

169. Эпидемиологическая ситуация по заболеваемости сифилисом в г. Москве./ Н.Н. Потекаев [и др.] // Всероссийский междисциплинарный медицинский журнал Terra Medica. - 2015. - № 1-2. - С. 79-80. - С. 25-29.

170. Эпидемиологические тренды нейросифилиса в Саратовской области. / О.В. Колоколов [и др.] // Saratov Journal of Medical Scientific Research. -2016. - Vol.12. №2. URL: https://cyberleninka.ru/article/v/epidemiologicheskie-trendy-neyrosifilisa-v-saratovskoy-oblasti.

171. Яковлев Н. А. [и др.]. Способ диагностики нейросифилиса // пат. 2230323 (РФ), МИК 7 G01 № 33/50, G01 № 30/90 /; заявитель и патентообладатель ГОУ ВПО «Тверская государственная медицинская академия». № 2003120839/15; заявл. 07.07.2003; опубл. 06.10.2004, Бюл. № 24.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Объект: «Способ» МПК: C07K 14/20; G01N 33/543; G01N33/571

Авторы: Потекаев Н.Н., Жукова О.В., Фриго Н.В., Негашева Е.С. Негашева М.А. Дмитриев Г.А.

Маляренко Е.Н. Чистова О.Ю.

Левощенко Е.П.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НЕЙРОСИФИЛИСА Предлагаемое изобретение относится к области медицины, в частности к дерматовенерологии, а также к неврологии, психоневрологии и клинической лабораторной диагностике и может быть использовано в медицинских организациях дерматовенерологического профиля, в специализированных отделениях профильных больниц, госпиталей (неврологических, психоневрологических).

Нейросифилис (НС) - тяжелое заболевание, вызванное T. pallidum, приводящее к поражению центральной и вегетативной нервной системы, результатом которого является значительное снижение качества жизни, инвалидизация пациентов и летальный исход, особенно в случаях неточной диагностики и несвоевременного выявления заболевания.

В России в последние годы отмечен рост заболеваемости поздними формами сифилиса, в том числе нейросифилисом. Так, число случаев НС в г.

Москве с 2009 по 2014 год возросло почти в 10 раз (Потекаев Н.Н. и соавт., 2015). Частота возникновения нейросифилиса по данным литературы составляет: при первичном сифилисе 10-20%, при вторичном - 30-70%, при скрытом -10-30% (Штульман, Д.Р., 1998; S.A. Lukehart et al., 1988).

Распознавание НС по клиническим признакам в настоящее время считается проблематичным в связи с тем, что заболевание часто протекает бессимптомно, характеризуется неспецифичностью клинической симптоматики, отсутствием или слабой выраженностью «патогномоничных» неврологических симптомов нейросифилиса, что затрудняет диагностику и многими авторами объясняется прежде всего лекарственным патоморфозом. Из субъективных симптомов на первый план сейчас выступают не стреляющие и рвущие боли, парестезии, как это наблюдалось раньше, а жалобы неспецифического характера - на вялость, слабость, подавленность, бессонницу, пониженную работоспособность, которые слагаются в астено-невротический синдром. Пациенты с НС могут жаловаться на головную боль, у них могут наблюдаться эпилептические припадки, признаки инсульта, нарушение чувствительности, проблемы со зрением (Родионов А.Н., 2007; М.В. Родиков., В.И. Прохоренков, 2010).

Субъективные и объективные клинические симптомы поражения нервной системы у больных сифилисом могут рассматриваться как нейросифилис, но окончательное подтверждение диагноза нейросифилиса возможно только после исследования цереброспинальной жидкости (ЦСЖ), или ликвора (Дмитриев Г.А., 2013; 2016). Однако применяемые при этом регламентированные методологии определения содержания белка и клеточного состава ЦСЖ с подсчетом количества клеток (цитоза) не являются специфичными для сифилиса и нередко дают отрицательный результат при наличии НС. Иммунохимические методы исследования - нетрепонемные и специфические трепонемные тесты - при исследовании ЦСЖ больных НС также не всегда дают однозначно трактуемый положительный результат; кроме того, при исследовании одной и той же пробы

ЦСЖ могут наблюдаться дискордантные (несовпадающие, противоречивые) результаты, что сильно затрудняет диагностику, определение тактики ведения пациента, в том числе объема проводимой терапии, прогноза жизни и времени снятия пациента с учета.

Известен ряд способов диагностики нейросифилиса с использованием новых методологий: способ диагностики НС путем исследования уровня сфингомиелина в ЦСЖ с помощью проточной тонкослойной хроматографии (Способ диагностики нейросифилиса: пат. РФ №2230323); способ дифференциальной диагностики ранних и поздних форм нейросифилиса путем исследования уровня хемилюминесценции нативной ЦСЖ, индуцированной перекисью водорода и установления на основании полученных результатов исследования диагноза о форме НС (пат. РФ № 2141660); способ, основанный на определении в ЦСЖ анизоморфонов - твердофазных структур, увеличение количества которых характеризует нарастание продуктов деградации в ЦНС, в том числе при НС (Способ диагностики нейросифилиса; патент РФ № 2554765); способ диагностики изменений центральной нервной системы при сифилисе, основанный на определении в ЦСЖ молекулярных маркеров - ацетилтриптофана, индолуксусной кислоты, индолмасляной кислоты и ацетилморфолина и других -при помощи газохроматографических и масс-спектрометрических методов (патент РФ № 2315303); способ диагностики при раннем врожденном сифилисе (патент РФ №2168177), в котором диагностика поражения нервной системы осуществляется на основе определения в ликворе цитокинов: интерлейкина-4р, и/или интерлейкина-1р, и/или фактора некроза опухоли-а, повышенное содержание которых в ликворе повышает качество ранней диагностики поражения нервной системы при сифилисе (патент №2168177 РФ). Недостатком данных способов является то, что они оперируют косвенными показателями, не специфичными для сифилитической инфекции, а также их сложность и

трудоемкость, требующая для выполнения дорогостоящей аппаратуры, реагентов и расходных материалов, наличия высококвалифицированных кадров.

Одним из возможных подходов к диагностике НС и дифференциальной диагностике различных форм НС может являться математический подход, осуществляемый с использованием многофакторного (множественного, или многомерного) дискриминантного анализа (МДА). Сущность МДА заключается в поиске новых признаков, называемых дискриминантными функциями (ДФ), на основе использования совокупности исходных показателей. При этом полученные новые признаки обладают свойством с высокой точностью разделять группы пациентов с разными диагнозами.

Принцип дискриминантного анализа при сифилисе был использован Е. В. Соколовским (1995) и Н. В. Фриго (2001): Е.В. Соколовским - для дифференцированного определение длительности заболевания (Соколовский Е.В. Серологическая резистентность после лечения сифилиса (причины и факторы развития, профилактика и лечение). Автореф. дисс. ... д-ра мед. наук. Санкт-Петербург. - 1995. -40 C.), Н.В. Фриго - для дифференциальной диагностики ложноположительных серологических реакций на сифилис и раннего скрытого сифилиса (Фриго Н.В. Современные критерии дифференциальной диагностики раннего скрытого сифилиса и ложноположительных результатов стандартных серологических реакций на сифилис Автореф. дисс. докт. мед. наук.; М., - 2001. -34 С.).

Для диагностики НС методология дискриминантного анализа до настоящего времени не использовалась.

Математический подход к диагностике НС осуществлен также в патенте на изобретение «Способ выявления нейросифилиса у больных, инфицированных бледной трепонемой Treponema pallidum» (патент РФ № 2473895). Способ осуществлялся путем постановки серологических реакций (РСК, РПГА и ИФА), получения данных анамнеза и сведений о состоянии нервной системы пациента с

последующим подсчетом четырех диагностических коэффициентов. Отсутствие у больного нейросифилиса устанавливают при значениях диагностических коэффициентов, меньших по сравнению с контрольными значениями. Недостатком данного способа является то, что авторы исследуют у больного с подозрением на НС сыворотку крови, а не ЦСЖ (вместе с тем в настоящее время наиболее значимым исследованием для установления диагноза НС признается исследование именно ЦСЖ, полученной путем люмбальной пункции, а не сыворотки крови); кроме того, использованный авторами математический алгоритм предполагает использование не слишком корректного математического подхода (произвольное начисление баллов за те или иные значения показателей).

Известен способ серодиагностики раннего нейросифилиса (патент РФ № 205409), включающий определение антител к антигенам возбудителя сифилиса с молекулярной массой 15, 17, 41 и 47 кД методом ИФА: при обнаружении в сыворотке крови антител к двум и более антигенам, а в ЦСЖ только к антигену 17 кД, верифицируют раннее сифилитическое поражение ЦНС. Недостатки способа: авторы не используют математических методов обработки полученных результатов; содержание антител к липопротеинам 15, 17, 41 и 47 кД определяют методом твердофазного ИФА, а не в формате иммуночипа, что снижает диагностическую эффективность метода.

Таким образом, диагностику НС в настоящее время трудно признать совершенной. Существующие клинические, иммунохимические и другие методы диагностики не обеспечивают требуемой достоверности диагноза. Вместе с тем, с учетом роста заболеваемости нейросифилисом, как в РФ, так и в городе Москве диагностика НС должна быть точной и доказательной, что позволит усовершенствовать подходы к выявлению, ведению и снятию с учета больных НС.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому способу является способ диагностики НС, предложенный О.К. Лосевой и соавторами.

Способ включает забор крови, проведение комплекса серологических реакций: микрореакции преципитации, реакции иммобилизации бледных трепонем, реакции иммунофлюоресценции, реакции пассивной гемагглютинации, иммуноферментного анализа. Затем при подтверждении сифилиса осуществляют забор ликвора путем люмбальной пункции и проводят общий анализ ликвора, осуществляют постановку в ликворе иммунохимических реакций: РМП, ИФА, РПГА, РИФ с ликвором. При наличии лимфоцитарного плеоцитоза более 5 клеток в 1 мм , повышении содержания белка до уровня более 0,4 г/л, плазмоцитозе, а также положительных нетрепонемных и трепонемных реакциях диагноз НС считают доказанным. При отсутствии описанных выше изменений ЦСЖ нейросифилис исключают (Лосева O.K., Тактамышева Э.Ш. Современный нейросифилис: клиника, диагностика, лечение. РМЖ, 1998. Том 6, №5. С.21-23). Недостатки способа: не проводится математический анализ комплекса полученных результатов с использованием современных статистических методов многофакторного анализа, что не позволяет осуществлять точную интерпретацию дискордантных (несовпадающих, противоречивых) результатов различных методов исследования; кроме того, авторы в своем способе используют морально устаревший метод исследования - РСК (старое название: реакция Вассермана) и не предусматривают применение таких методов исследования ликвора, не регламентированных в РФ для диагностики НС, как реакция VDRL и технология иммуночипов, что снижает точность диагностики НС.

Техническим результатом предлагаемого Способа является повышение точности и достоверности диагностики НС в неясных случаях, в особенности при получении дискордантных (противоречивых) результатов различных методов исследования ЦСЖ, возможность выбора тактики ведения пациентов, в том числе определения объема проводимой терапии, прогноза для жизни пациентов и времени их снятия с учета благодаря использованию многофакторного дискриминантного анализа и применению ряда не регламентированных в РФ

методов исследования (VDRL, определение антител к антигенам T. pallidum с молекулярной массой 15, 17, 41 и 47 кД в формате иммуночипа).

Указанный технический результат достигается тем, что у пациента с подозрением на нейросифилис при исследовании цереброспинальной жидкости определяют ряд лабораторных показателей, а именно: РМП; VDRL, РПГА, РИБТ, ИФА, РИФц, цитоз, белок, антитела к Тр15, Тр17, Тр47, TmpA в формате иммуночипа с последующим определением линейных дискриминантных функций ДФ1 и ДФ2 по формулам:

ДФ1 = -13,682-0,735хРМП+0,035х VDRL +0,941х РПГА -0,011 х РИБТ +0,445х ИФА +3,304х РИФц - 0,201х Цитоз +20,022х Белок +0,003х Тр15+0,000х Тр17+0,001х Тр47-0,008х TmpA;

ДФ2 = -5,741+0,114хРМП-0,348х VDRL +0,653х РПГА +0,013х РИБТ -1,185х ИФА +0,124х РИФц -0,186х Цитоз +22,242х Белок +0,002х Тр15+0,001х Тр17+0,000х Тр47-0,005х TmpA

и при значении ДФ1> ДФ2 диагностируют наличие специфического поражения нервной системы (нейросифилис), а при значении ДФ2> ДФ1 диагноз нейросифилиса исключают.

Описание способа

Предлагаемый Способ осуществляется следующим образом. У пациента с подозрением на НС производится забор ЦСЖ путем люмбальной пункции стандартным способом.

После получения ликвора и его стандартной обработки производится определение ряда лабораторных показателей, а именно: РМП (наличие антител к кардиолипиновому антигену в нетрепонемном тесте - реакции микропреципитации); VDRL (наличие антител к кардиолипиновому антигену в нетрепонемном тесте VDRL), РПГА (наличие антител к бледной трепонеме в трепонемном тесте - реакции пассивной гемагглютинации), РИБТ (процент иммобилизации бледных трепонем в реакции иммобилизации бледных трепонем),

ИФА (наличие антител к бледной трепонеме в трепонемном тесте -иммуноферментном анализе), РИФц (наличие антител к бледной трепонеме в трепонемном тесте - реакции иммунофлуоресценции с цельным ликвором), Цитоз (показатель количества форменных клеточных элементов), Белок (показатель содержания белка), Тр15 (количество антител к рекомбинантному белку бледной трепонемы с молекулярной массой 15кД в формате иммуночипа), Тр17 (количество антител к рекомбинантному белку бледной трепонемы с молекулярной массой 17кД в формате иммуночипа), Тр47 (количество антител к рекомбинантному белку бледной трепонемы с молекулярной массой 47кД в формате иммуночипа) , ТтрА (количество антител к рекомбинантному белку бледной трепонемы с молекулярной массой 42-44кД в формате иммуночипа) с последующим определением линейных дискриминантных функций ДФ1 и ДФ2 по формулам:

ДФ1 = -13,682-0,735хРМП+0,035х VDRL +0,941х РПГА -0,011 х РИБТ +0,445х ИФА +3,304х РИФц - 0,201х Цитоз +20,022х Белок +0,003х Тр15+0,000х Тр17+0,001х Тр47-0,008х ТтрА;

ДФ2 = -5,741+0,114хРМП-0,348х VDRL +0,653х РПГА +0,013х РИБТ -1,185х ИФА +0,124х РИФц -0,186х Цитоз +22,242х Белок +0,002х Тр15+0,001х Тр17+0,000х Тр47-0,005х ТтрА

При этом пациент относится к той группе, для которой получена наибольшая величина ДФ. При значении ДФ1> ДФ2 диагностируют наличие специфического поражения нервной системы (нейросифилис), а при значении ДФ2> ДФ1 диагноз нейросифилиса исключают.

Примеры осуществления Способа Пример 1. Пациент К., пол - мужской, возраст - 46 лет, предъявлял жалобы на головные боли, головокружение, нарушение памяти, эмоциональную неустойчивость и снижение работоспособности, обратился в поликлинику по месту жительства, был консультирован неврологом. Из анамнеза жизни: не женат,

последний половой контакт 2 года назад со случайной половой партнершей. До 2014 года обследование на сифилис проводилось в 2006 году (при устройстве на работу) - данных за сифилис не было, лечение по поводу сифилиса отрицает.

Пациенту проведено серологическое обследование крови на сифилис, где были впервые выявлены положительные тесты на сифилис: РМП= 4+, VDRL= 4+, РПГА= 4+, РИБТ= 65%, ИФА= 4+ (КП=15), РИФц= 4+, Tp 15 =109 у.е., Tp 17=45 у.е., Tp 47=110 у.е., TmpA=143 у.е.

Учитывая наличие неврологической симптоматики, больному проведена диагностическая люмбальная пункция с целью исключения сифилитического поражения нервной системы. Результаты исследования ЦСЖ: РМП= 3+, VDRL= 4+, РПГА= 4+, РИБТ= 52%, ИФА= 4+ (КП=15), РИФц= 4+, цитоз= 5х106/л, белок= 0,42 г/л; результат определения антител к рекомбинантным белкам T. pallidum в формате иммуночипа: Tp 15 =81 у.е., Tp 17=63 у.е., Tp 47=144 у.е., TmpA=213 у.е.

На основании данных анамнеза, жалоб и объективного осмотра больного, результатов инструментального обследования и результатов лабораторного исследования сыворотки крови и ЦСЖ, больному установлен диагноз: Другие формы вторичного сифилиса код А51.4 (МКБ-X). Ранний церебральный менинговаскулярный нейросифилис.

Произведен расчет дискриминантных функций.

ДФ1 = - 0,735х3 + 0,035х4 + 0,941х4 - 0,011х52 + 0,445х15 + 3,304х4 -0,201х5 + 20,022х0,42 + 0,003х81 + 0,000х63 + 0,001х144 - 0,008х213 - 13,682 = -2,205+0,14+3,764-0,572+6,675+13,216-1,005+8,409+0,243+0+0,144-1,704-13,682=13,423;

ДФ2= 0,114х3 - 0,348х4 + 0,653х4 + 0,013х52 - 0,185х15 + 0,124х4 - 0,186х5 + 22,242х0,42 + 0,002х81 + 0,001х63 + 0,000х144 - 0,005х213 - 5,741= 0,342-1,392+2,612+0,676-2,775+0,496-0,93+9,34+0,162+0,063-1,065-5,741=1,788

Получено: ДФ1 (13,423) > ДФ2 (1,788)

В данном случае у пациента с сифилисом и с наличием неврологической симптоматики, но с дискордантными результатами исследования ЦСЖ:

отрицательные значения цитоза - 5х106/л (при норме более 5х106/л) и белка - 0,42 г/л (при норме до 0,5 г/л); положительные значения нетрепонемных и трепонемных тестов, положительные результаты (при норме до 5 у.е.) определения антител к рекомбинантным белкам T. pallidum в формате иммуночипа (Tp 15 =81 у.е., Tp 17=63 у.е., Tp 47=144 у.е., TmpA=213 у.е.) наибольшая величина среди двух ДФ была получена для ДФ1.

Таким образом, на основании данных МДА у пациента было подтверждено сифилитическое поражение нервной системы, что совпало с клиническим диагнозом.

Пример 2. Пациент З., пол - мужской, возраст - 37 лет. Женат 3 года. Жалоб не предъявлял, был пролечен по поводу скрытого раннего сифилиса в 2016 году. Внебрачные половые связи отрицает, жена обследована, данных за сифилис нет. При плановой диспансеризации (клинико-серологический контроль) были выявлены положительные тесты на сифилис в сыворотке крови: РМП= 4+, VDRL= 4+, РПГА= 4+, РИБТ= 56%, ИФА= 4+ (КП=15), РИФ 200/абс= 4+/4+; положительные результаты определения антител к рекомбинантным белкам T. pallidum в формате иммуночипа (Tp 15 =13 у.е., Tp 17=6 у.е., Tp 47=24 у.е., TmpA=16 у.е).

Установлен диагноз: Сифилис в анамнезе. Серорезистентность.

Учитывая наличие серорезистентности, пациенту была проведена пункция ЦСЖ с целью верификации специфического поражения нервной системы. Результаты исследования ЦСЖ: РМП= 0, VDRL= 0, РПГА= 4+, РИБТ= 56%, ИФА= 15 (КП=15), РИФц= 4, цитоз= 9х106/л, белок= 0,52 г/л, Tp 15 =12,51 у.е., Tp 17=13,55 у.е., Tp 47=54,72 у.е., TmpA=8,20 у.е.

Произведен расчет дискриминантных функций.

ДФ1 = - 0,735х0 + 0,035х0 + 0,941х4 - 0,011х56 + 0,445х15 + 3,304х4 -0,201х9 + 20,022х0,52 + 0,003х12 + 0,000х13 + 0,001х55 - 0,008х8 - 13,682 = 0 + 0 + 3,764 - 0,616 + 6,675 + 13,216 - 1,809 + 10,41+ 0,036 + 0 + 0,055 - 0,064 - 13,682 = 17,985;

ДФ2= 0,114х0 - 0,348х0 + 0,653х4 + 0,013х56 - 0,185х15 + 0,124х4 - 0,186х9 + 22,242х0,52 + 0,002х12 + 0,001х13 + 0,000х55 - 0,005х8 - 5,741= 0 - 0 - 2,612 + 0,728 - 2,775 + 0,496 - 1,674 + 11,566 + 0,024 + 0,013 + 0 - 0,04 - 5,741 = - 0,015

Получено: ДФ1 (17,985)> ДФ2 (-0,015)

В данном случае у пациента с дискордантными результатами исследования ЦСЖ: отрицательные значения нетрепонемных тестов - РМП= 0, VDRL= 0, положительные результаты трепонемных тестов - РПГА, РИБТ, РИФц, ИФА=4+, положительные результаты определения антител к рекомбинантным белкам T. pallidum в формате иммуночипа (Tp 15 =12,51 у.е., Tp 17=13,55 у.е., Tp 47=54,72 у.е., TmpA=8,20 у.е. при норме до 5 у.е.), положительные значения цитоза -9х106/л (при норме более 5х106/л) и белка - 0,52 г/л (при норме до 0,5 г/л) наибольшая величина среди двух ДФ была получена для ДФ1.

Таким образом, на основании данных МДА пациенту был установлен диагноз: Серорезистентность. Асимптомный нейросифилис. Назначено дополнительное обследование (МРТ) с целью уточнения локализации поражения ЦНС.

Пример 3. Пациент С., пол - мужской, возраст - 27 лет, предъявлял жалобы на появление высыпаний папулезного характера на ладонях и подошвах, мокнущие папулы в перианальной области. Объективно: лейкодерма, очаги выпадения волос на волосистой части головы. Из анамнеза - половая связь с женщиной, у которой был выявлен сифилис полгода назад. При исследовании райц-серума из очагов поражения (мокнущие папулы) в темном поле зрения обнаружена T. pallidum. При серологическом обследовании (сыворотка крови) выявлены положительные тесты на сифилис: РМП= 4+, VDRL= 4+, РПГА= 4+, РИБТ= 60%, ИФА= 4+ (КП=15), РИФ 200/абс= 3+/3+, Tp 15 =1,54 у.е., Tp 17=1,58 у.е., Tp 47=3,48 у.е., TmpA=1,47

у.е. На основании данных клинико-серологического обследования пациенту установлен диагноз: Вторичный сифилис кожи и слизистых оболочек (А51.3).

С целью исключения сифилитического поражения нервной системы пациенту была проведена люмбальная пункция и исследование ЦСЖ. Результаты: РМП= 0, VDRL= 0, РПГА= 2, РИБТ= 0%, ИФА= 3 (КП=5), РИФц= 0, цитоз= 3х106/л, белок= 0,34 г/л, Tp 15 =0,16 у.е., Tp 17=2,35 у.е., Tp 47=2,09 у.е., TmpA=0,1 у.е.

Произведен расчет дискриминантных функций.

ДФ1 = _- 0,735х0 + 0,035х0 + 0,941х2 - 0,011х0 + 0,445х3 + 3,304х0 - 0,201х3 + 20,022х0,34 + 0,003х0,16 + 0,000х2,35 + 0,001х2,09 - 0,008х0,1 - 13,682 = -4,25939

ДФ2= 0,114х0 - 0,348х0 + 0,653х2 + 0,013х0 - 0,185х3 + 0,124х0 - 0,186х3 + 22,242х0,34 + 0,002х0,16 + 0,001х2,35 + 0,000х2,09 - 0,005х0,1 - 5,741= 2,01645

Получено: ДФ1 (-4,25939) < ДФ2 (2,01645)

В данном случае у пациента с сифилисом и дискордантными результатами исследования ЦСЖ: отрицательные значения нетрепонемных тестов - РМП= 0, VDRL= 0, отрицательные результаты трепонемных тестов - РИБТ, РИФц, отрицательные значения цитоза - 3х106/л (при норме более 5х106/л) и белка - 0,34 г/л (при норме до 0,5 г/л), положительные результаты определения РПГА, ИФА, отрицательные результаты определения антител к рекомбинантным белкам T. pallidum в формате иммуночипа ( Tp 15 =0,16 у.е., Tp 17=2,35 у.е., Tp 47=2,09 у.е., TmpA=0,1 у.е. при норме до 5 у.е.) наибольшая величина среди двух ДФ была получена для ДФ2. На основании данных МДА нейросифилис у пациента с сифилисом был исключен.

Предлагаемый способ диагностики нейросифилиса был применен у 91 пациента с сифилисом в возрасте от 21 до 71 года. Точность диагностики нейросифилиса (точность разделения пациентов с сифилисом на предмет

наличия/отсутствия нейросифилиса методом МДА) составила 95,0%. Оценка по F-критерию показала высокую достоверность различий между группами больных сифилисом с нейросифилисом и без нейросифилиса (F-критерий различий между группами составил 17,437; р <0,0000...).

Способ способствует повышению точности и достоверности диагностики НС в неясных случаях, в особенности при получении дискордантных (противоречивых) результатов различных методов исследования ЦСЖ, возможности выбора тактики ведения пациентов, в том числе определении объема проводимой терапии, прогнозу для жизни пациентов и определению времени их снятия с учета благодаря использованию многофакторного дискриминантного анализа и применению ряда не регламентированных в РФ методов исследования (VDRL, определение антител к антигенам T. pallidum с молекулярной массой 15, 17, 41 и 47 кД в формате иммуночипа). Способ отличается объективностью, прост в выполнении и может быть осуществлен как в условиях стационара, так и поликлиники, куда обращаются пациенты с сифилисом.

Формула изобретения Способ диагностики нейросифилиса путем исследования цереброспинальной жидкости, отличающийся тем, что у пациента с подозрением на нейросифилис в цереброспинальной жидкости определяют ряд лабораторных показателей, а именно: РМП; VDRL, РПГА, РИБТ, ИФА, РИФц, цитоз, белок, антитела к Тр15, Тр17, Тр47, TmpA в формате иммуночипа с последующим определением линейных дискриминантных функций ДФ1 и ДФ2 по формулам:

ДФ1 = -13,682-0,735хРМП+0,035х VDRL +0,941х РПГА -0,011 х РИБТ +0,445х ИФА +3,304х РИФц - 0,201х Цитоз +20,022х Белок +0,003х Тр15+0,000х Тр17+0,001х Тр47-0,008х TmpA;

ДФ2 = -5,741+0,114хРМП-0,348х VDRL +0,653х РПГА +0,013х РИБТ -1,185х ИФА +0,124х РИФц -0,186х Цитоз +22,242х Белок +0,002х Тр15+0,001х Тр17+0,000х Тр47-0,005х TmpA

и при значении ДФ1> ДФ2 диагностируют наличие специфического поражения нервной системы (нейросифилис), а при значении ДФ2> ДФ1 диагноз нейросифилиса исключают.

Реферат

на «Способ диагностики нейросифилиса», авторы: Потекаев Н.Н., Жукова О.В., Фриго Н.В., Негашева Е.С., Негашева М.А., Дмитриев Г.А., Маляренко Е.Н., Чистова О.Ю., Левощенко Е.П.

Изобретение относится к области медицины, а именно к дерматовенерологии, неврологии, психоневрологии и клинической лабораторной диагностике и может быть использовано в медицинских организациях дерматовенерологического профиля, в специализированных отделениях профильных больниц, госпиталей (неврологических, психоневрологических).

Данный способ заключается в том, что у больного сифилисом при исследовании цереброспинальной жидкости определяют ряд лабораторных показателей, а именно: РМП (наличие антител к кардиолипиновому антигену в нетрепонемном тесте - реакции микропреципитации); VDRL (наличие антител к кардиолипиновому антигену в нетрепонемном тесте VDRL), РПГА (наличие антител к бледной трепонеме в трепонемном тесте - реакции пассивной гемагглютинации), РИБТ (процент иммобилизации бледных трепонем в реакции иммобилизации бледных трепонем), ИФА (наличие антител к бледной трепонеме в трепонемном тесте - иммуноферментном анализе), РИФц (наличие антител к бледной трепонеме в трепонемном тесте - реакции иммунофлуоресценции с цельным ликвором), Цитоз (показатель количества форменных клеточных элементов), Белок (показатель содержания белка), Тр15 (количество антител к рекомбинантному белку бледной трепонемы с молекулярной массой 15кД в формате иммуночипа), Тр17 (количество антител к рекомбинантному белку бледной трепонемы с молекулярной массой 17кД в формате иммуночипа ), Тр47 (количество антител к рекомбинантному белку бледной трепонемы с молекулярной массой 47кД в формате иммуночипа), ТтрА (количество антител к рекомбинантному белку бледной трепонемы с молекулярной

массой 42-44кД в формате иммуночипа) с последующим определением линейных дискриминантных функций ДФ1 и ДФ2 по формулам:

ДФ1 = -13,682-0,735хРМП+0,035х VDRL +0,941х РПГА -0,011х РИБТ +0,445х ИФА +3,304х РИФц - 0,201х Цитоз +20,022х Белок +0,003х Тр15+0,000х Тр17+0,001х Тр47-0,008х TmpA;

ДФ2 = -5,741+0,114хРМП-0,348х VDRL +0,653х РПГА +0,013х РИБТ -1,185х ИФА +0,124х РИФц -0,186х Цитоз +22,242х Белок +0,002х Тр15+0,001х Тр17+0,000х Тр47-0,005х TmpA.

При этом пациент относится к той группе, для которой получена наибольшая величина ДФ. При значении ДФ1> ДФ2 диагностируют наличие специфического поражения нервной системы (нейросифилис), а при значении ДФ2> ДФ1 диагноз нейросифилиса исключают.

Способ повышает точность и достоверность диагностики НС в неясных случаях, в особенности при получении дискордантных (противоречивых) результатов различных методов исследования ЦСЖ, дает возможность выбора тактики ведения пациентов, в том числе определения объема проводимой терапии, прогноза для жизни пациентов и времени их снятия с учета благодаря использованию многофакторного дискриминантного анализа и применению ряда не регламентированных в РФ методов исследования (VDRL, определение антител к антигенам T. pallidum с молекулярной массой 15, 17, 41 и 47 кД в формате иммуночипа).

Значения дискриминантных функций и коэффициентов, полученные на основании обработки результатов исследования ЦСЖ больных нейросифилисом методом многофакторного дискриминантного анализа, могут рассматриваться в качестве математической модели диагностики нейросифилиса.