Новая Н + , К +-АТФаза человека: генно-инженерный и иммунохимический подходы к поиску функционально активного фермента тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат биологических наук Корнеенко, Татьяна Васильевна

• Корнеенко, Татьяна Васильевна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Корнеенко, Татьяна Васильевна

Введение

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Основные структурные черты Х+,К+-АТФаз

1.2. Семейство генов Na+-K+/H+-K+-ATOa3, тканеспецифичность и сплайсинг

1.3.Na+,K+-ATOasa

1.4. Н+,К+-АТФаза желудка

1.5. р-Субъединицы Х+,К+-АТФаз

1.6. ЬГ,К+-АТФаза нежелудочного типа

1.6.1. Идентификация, структура гена и белка

1.6.2. Функциональная экспрессия Н+,К+-АТФаз

1.6.3. Ингибиторы РГ,К+-АТФазы нежелудочного типа

1.6.4. Вопрос о Р-субъединице

1.7. Роль ГГ,К+-АТФазы

ГЛАВА 2. РЕЗУЛЬТАТЫ

2.1. Получение рекомбинантных белков - фрагментов АТР1AL1 (ang)

2.2. Получение специфических моно- и поликлональных антител к а-субъединице Н+,К+-АТФазы человека, кодируемой геном atplall. Характеристика антител

2.3. Исследование тканеспецифичности экспрессии гена atplall

2.4. Определение внутриклеточной локализации Н+,К+- и №+,К+-АТФазы

2.5. Поиск и характеризация новых р-субъединиц Х+,К+-АТФаз

2.6. Идентификация истинной р-субъединицы - партнера ang

ГЛАВА 3. ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Четвертичная структура Н+,К+-АТФазы нежелудочного типа

3.2. Поляризация и сортинг Х+,К+-АТФаз

3.3. Систематика Х+,К+-АТФаз

3.4. Проблема выделения Н+ ,К+ -АТФазы нежелудочного типа

3.5. Физиологическая роль Н+,К+-АТФазы нежелудочного типа

ГЛАВА 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

4.1. Материалы

4.2. Методы исследования 85 Выводы 95 Благодарности 96 Список сокращений 97 Список литературы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Новая Н + , К +-АТФаза человека: генно-инженерный и иммунохимический подходы к поиску функционально активного фермента»

Актуальность проблемы

Важнейшую роль в ионном гомеостазе животных клеток и целого организма играют Х+,К+-АТФазы - системы активного транспорта, использующие энергию АТФ для переноса ионов калия внутрь клетки, а ионов натрия или протонов - наружу. Х+,К+-АТФазы состоят не менее чем из двух субъединиц: каталитической а и гликозилированной (3. Известно несколько изоформ а- и (5-субъединиц, кодируемых разными генами. Физиологическая роль разнообразия Х+,К+-АТФаз, а также существования (3-субъединицы как таковой до сих пор не вполне ясна. Изучение структурных и функциональных особенностей изоформ Х+,К+-АТФаз относится к числу фундаментальных проблем поскольку тонкая регуляция ионного гомеостаза крайне важна для нормальной жизнедеятельности. В свою очередь, нарушение нормального транспорта ионов часто ассоциировано с различными патологиями. Наименее исследованным представителем семейства Х+,К+-АТФаз является Н+,К+-АТФаза нежелудочного типа, субъединичное строение и физиологическая функция которой до недавнего времени оставались практически неизвестны, а результаты различных исследователей по ее характеризации часто противоречили друг другу. Здесь также важно отметить, что изучение Н+,К+-АТФазы нежелудочного типа совершенно необходимо для построения структурно-функциональной систематики Х+,К+-АТФаз.

Цели и задачи исследования

Задачей данной работы явилось изучение Н+,К+-АТФазы нежелудочного типа, каталитическая а-субъединица которой кодируется геном atplall. Основное внимание предполагалось уделить исследованиям на уровне белка, для чего потребовалось получить специфические антитела. При помощи этих антител планировалось продемонстрировать существование искомого белка, выяснить внутриклеточную локализацию Н+,К+-АТФазы а также, используя иммуноаффинную хроматографию, определить изоформу (3-субъединицы, входящую в комплекс активного фермента in vivo.

Научная новизна и практическая ценность работы

В ходе выполнения данной работы были получены моно- и поликлональные антитела, высокоспецифичные к а-субъединице Н+,К+-АТФазы нежелудочного типа человека и крысы. Используя данные антитела в качестве инструментов для детекции и выделения исследуемого белка, удалось получить новые данные, важные для понимания субъединичного строения и физиологической роли Н+,К+-АТФазы нежелудочного типа, а также и систематики Х^К^-АТФаз. Наиболее важными фактами следует считать демонстрацию высокого уровня а-субъединицы исследуемой АТФазы в апикальных мембранах эпителия антериодорсолатеральной простаты крысы и ассоциацию с первой изоформой (3-субъединицы Х+,К+-АТФаз, pi, в этом органе. Кроме того, помимо достижения большинства первоначальных целей в данной работе удалось получить неожиданные интересные результаты, например, исследовать новую Р-изоформу Х+,К+-АТФаз, рш, которая имеет ряд уникальных для белков данного семейства свойств.

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Корнеенко, Татьяна Васильевна

выводы

1. Используя рекомбинантные белки в качестве антигенов, получена коллекция поли- и моноклональных антител, специфически распознающих Н+,К+-АТФазу нежелудочного типа, а также мышечную изоформу р-субъединицы Х+,К+-АТФаз.

2. Проведен анализ тканеспецифичной экспрессии гена atplall в тканях человека. Показано, что ген atplall имеет наивысший уровень экспрессии в толстом кишечнике человека. В простате человека детектируются только следовые количества транскриптов.

3. Показано, что ген atplall экспрессирован в простате крысы и имеет антериодорсолатеральное распределение.

4. Результаты иммуноблоттинга мембранных белков долей простаты крысы указывают, что коагулирующая железа (передняя простата) имеет наивысший уровень продукции а-субъединицы Н+,К+-АТФазы нежелудочного типа и наименьший - al Na+,K+-АТФазы.

5. Результаты иммуногистохимического исследования коагулирующей железы крысы показывают, что Н ,К-АТФаза нежелудочного типа и Ыа+,К+-АТФаза являются компонентами апикальной и базолатеральной мембран эпителиальных клеток.

6. При помощи поликлональных антител к рекомбинантному белку рт показано существование самого белка в мембранах скелетных мышц свиньи, причем данный белок имеет тип гликозилирования необычный для белков своего семейства.

7. Результаты иммуноблоттинга и иммуногистохимии указывают, что в коагулирующей железе р-субъединицей Н+,К+-АТФазы нежелудочного типа является изоформа pi.

БЛАГОДАРНОСТИ

Автор благодарит своего научного руководителя - Михаила Ивановича Шахпаронова за необыкновенную, недогматическую школу научного творчества и человеческих отношений. Особые благодарности автор приносит Марии Борисовне Костиной за бесценную моральную поддержку и важные научные рекомендации. Автор также выражает благодарность всем коллегам, работавшим бок о бок в течение этих лет: Пестову Николаю Борисовичу (самый лучший муж, друг и коллега), Ларину Дмитрию Ивановичу (за приглашение в группу МБС), Ивановой Марии Вениаминовне (за трудовую кооперацию), а также Егорову Максиму Викторовичу, Романовой Людмиле Геннадиевне, Гевондян Наталье Мушековне, Гевондян Владимиру Саркисовичу, Артамонову Игорю Дмитриевичу, Владимировой Наталье Михайловне за поддержание конструктивной рабочей атмосферы внутри лаборатории. Крайне ценным оказалось научное сотрудничество с зарубежными партнерами: Проф. Н.Н. Модянов, Проф. К. Гиринг, Проф. Я. Ридстрем, X. Жао, Ч. Ю, М. Тиллекератне, А.Е. Гришин, Ж. Крамбер, У. Фьелльстрем, Ю. Мюллер. Кроме того, автор благодарит за синтез олигонуклеотидов Быстрова Сергея Николаевича и Прохоренко Игоря Адамовича, за предоставление образцов тканей человека - Бормотина Алексея Владимировича, Жданова Александра Александровича, Строкову Веру Александровну, Ардашева Юрия Павловича, за предоставление образцов антител - проф. Кайта, проф. Кварони, проф. Мартина-Вассалло, проф. Свиднер, за N-концевое секвенирование - Леонову Юлию Федоровну, за ценные советы по гибридомной технологии - Шамборандт Ольгу Георгиевну и Сухачеву Елену Александровну, за содержание экспериментальных животных - Сачкова Виталия Дмитриевича.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Корнеенко, Татьяна Васильевна, 2002 год

1. Axelsen К.В., Palmgren M.G. (1998) Evolution of substrate specificities in the P-type ATPase superfamily. J. Mol. Evol. 46: 84-101.

2. Geering K. (2000) Topogenic motifs in P-type ATPases. J. Membr. Biol. 174: 181 -190.

3. Moller J. V., Juul В., le Maire M. (1998) Structural organization, ion transport, and energy transduction of P-type ATPases. Biochim. Biophys. Acta 1286: 1-51.

4. Pedersen P.L., Carafoli E. (1987) Ion motive ATPases. I. Ubiquity, properties, and significance to cell function. II. Energy coupling and work output. TIBS 12: 146-150, 186189.

5. Lingrel J.B., Kuntzweiler T. (1994) "Na,K-ATPase" J. Biol. Chem. 269: 19659-19662.

6. Toyoshima C., Nakasako M., Nomura H., Ogawa H. (2000) Crystal structure of the calcium pump of sarcoplasmic reticulum at 2.6 A resolution. Nature 405: 647-655.

7. Sweadner K.J., Donnet C. (2001) Structural similarities of Na,K-ATPase and SERCA, the Ca2+-ATPase of the sarcoplasmic reticulum. Biochem J. 356: 685-704.

8. Ivanov A, Zhao H., Modyanov N. N. (2000) Packing of the Transmembrane Helices of Na,K-ATPase: Direct Contact between Subunit and H8 Segment of R-Subunit Revealed by Oxidative Cross-Linkingf Biochemistry 39, 9778-9785

9. Shull M.M., Lingrel J.B. (1987) Multiple genes encode the human Na+,K+-ATPase catalytic subunit. Proc. Natl Acad. Sci. USA 84: 4039-4043.

10. Shamraj O.I., Lingrel J.B. (1994) A putative fourth Na+,K+-ATPase a-subunit gene is expressed in testis. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 12952-12956.

11. Sverdlov V.E., Kostina M.B., Modyanov N.N. (1996) Genomic organization of the human

12. ATP1AL1 gene encoding a ouabain sensitive H,K-ATPase. Genomics 32: 317-327.

13. Blanco G., Sanchez G., Melton R.J., Tourtellotte W.G., Mercer R.W. (2000) The a4 isoform of the Na,K-ATPase is expressed in the germ cells of the testes. J. Histochem. Cytochem. 48: 1023-1032.

14. Hersey S.J., Sachs G. (1995) Gastric acid secretion. Physiol. Rev. 75: 155-190.

15. Pestov N.B., Adams G., Shakhparonov M.I., Modyanov N.N. (1999) Identification of a novel gene of the X,K-ATPase (3-subunit family that is predominantly expressed in skeletal and heart muscles. FEBSLett. 456: 243-248.

16. Shyjan A.W., Gottardi C., Levenson R. (1990) The Na-K-ATPase f52 subunit is expressed in rat brain and copurifies with Na,K-ATPase activity. J. Biol. Chem. 265: 5166-5516.

17. Shyjan A. W, Cena V., Klein D.C., Levenson R. (1990) Differential expression and enzymatic properties of the Na,K-ATPase a3 isoenzyme in rat pineal glands. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 87:1172-1182.

18. Blanco G., Mercer B. (1998) Isozymes of the Na,K-ATPase: heterogenity in structure, diversity in function. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 275: F633-F650.

19. Grishin A.V., Sverdlov V.E., Kostina M.B., Modyanov N.N. (1994) Cloning and characterization of the entire cDNA encoded by ATP1AL1 a member of the human Na,K/H,K-ATPase gene family. FEBSLett. 349: 144-150.

20. Malik N. Canfield V.A., Beckers M.-A., Gros P., Levenson R. (1996) Identification of the mammalian Na,K-ATPase P3 subunit. J. Biol. Chem. 271: 22754-22758.

21. Zuo J., Curtis L.M., Yao X., Ten Cate W.J., Rarey K.E. (1995) Expression of Na, K-ATPase a and p isoforms in the neonatal rat cochlea. Acta Otolaryngol. 115: 497-503.

22. MedfordR.M., Hyman R., AhmadM., Allen J. C., Pressley T.A., Allen P.D., Nadal-Ginard B. (1991) Vascular smooth muscle expresses a truncated Na+, K+-ATPase al subunit isoform. J. Biol. Chem. 266: 18308-18312.

23. Kone B.C., Higham S.C. (1998) A novel N-terminal splice variant of the rat H+-K+-ATPase a2 subunit. Cloning, functional expression, and renal adaptive response to chronic hypokalemia. J. Biol. Chem. 273: 2543-2552.

24. Campbell W.G., Weiner D., Wingo C.S., Cain B.D. (1999) H-K-ATPase in the RCCT-28A rabbit cortical collecting duct cell line. Am. J. Physiol. 276: F237-F245.

25. Shao Y, Ismail-Beigi F. (2001) Different Na, K-ATPase mRNA pi species exhibit unique translational efficiencies. Arch. Biochem. Biophys. 390: 78-86.

26. Sun В., Salvaterra P.M. (1995) Two drosophila nervous system antigens, Nervana 1 and 2, are homologous to the p subunit of Na+,K+-ATPase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92: 53965400.

27. Scou J.C. (2000) The identification of the sodium-potassium pump. Elsevier Science B.V. Na,K-ATPase and Related ATPases. p.3.

28. Pressley T.A. (1996). Structure and function of the Na,K Pump: ten years of molecular biology. Miner. Electrolyte Metab. 22: 264-271.

29. Collins J.H, LeszykJ. (1987) The "y subunit " of Na,K-ATPase: a small, amphiphilic protein with a unique amino acid sequence. Biochemistry 26: 8665-8668.

30. Mercer R.W., Biemesderfer D., Bliss D.P., Collins J.H., Forbush B.III. (1993) Molecular cloning and immunological characterization of the у polypeptide, a small protein associated with the Na,K-ATPase. J. Cell Biol 121: 579-586.

31. Scheiner-Bobis G., Farley R.A. (1994) Subunit requirements for expression of functional sodium pumps in yeast cells. Biochem. Bioph. Acta 1193: 226-234.

32. Caplan M.J. (1997) Ion pumps in epitelial cells: sorting, stabilization and polarity. Am. J. Physiol. 272: G1304-G1313.

33. Ernst S.A., Palacios J.R. 2nd, Siegel G.J. (1986) Immunocytochemical localization of Na+,K+-ATPase catalytic polypeptide in mouse choroid plexus. J. Histochem. Cytochem. 34: 189-195.

34. Toyama E., Doi Y., Kudo H., Fujimura T. (1997) Diversity in distribution of Na,K-ATPase of the choroid epithelium of prenatal rats: an immunocytochemical study. Arch. Histol. Cytol. 60: 235-244.

35. O'Brien W.J., Lingrel J.В., Wallick E.T. (1994) Ouabain binding kinetics of the rat a2 and a3 isoforms of the sodium-potassium adenosine triphosphate. Arch. Biochem. Biophys. 310: 32-39.

36. Eakle K.A., Kim K.S., Kabalin M.A., Farley R.A. (1992) High-affinity oubain binding by yeast cells expressing Na,K-ATPase а-subunit. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 2834-2838.

37. Barlet-Bas C.,Khadoouri C., Marsy C., Doucet A. (1990) Enchanced intracellular sodium concentration in kidney cells recruits a latent pool of Na,K-ATPase whose size is modulated by corticosteroids. J. Biol. Chem. 265: 7799-7809.

38. Coutry К, Farman N., Bonvalet J.P., Blot-Chabaud M. (1994) Role of cell volume variations in Na,K-ATPase requirement and/or activation in cortical collecting duct. Am. J. Physiol. 266: C1342-C1349.

39. Doucet A., Barlet-Bas C. (1986) Evidence for difference in the sensitivity to oubain to Na,K-ATPase along the nephron of rabbit kidney. J.Biol. Chem. 261:993-995.

40. Wang J., Velotta J.В., McDonough A.A., Farley R.A. (2001) All human Na+-K+-ATPase a-subunit isoforms have a similar affinity for cardiac glycosides. Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 281: C1336-C1343.

41. Blostein A., Zhang, A., Gottardi C.J., Caplan M.J. (1993) Functional properties of an H,K-ATPase/Na,K-ATPase chimera./. Biol. Chem. 268:10654-10658.

42. Hamlyn J.M., Hamilton B.P., Manunta P. (1996) Endogenous oubain, sodium balance and blood pressure: a review and hypothesis. J. Hypertens. 14:151-167.

43. Nelson W.J., Veshnock P.J. (1987) Ankyrin binding to (Na+,K+)ATPase and implications for the organization of membrane domains in polarized cells. Nature 328: 533-536.

44. Cantiello H.F. (1995) Actin filaments stimulate the Na(+)-K(+)-ATPase. Am. J. Physiol. 269: F637-F643.

45. Bertoletto A.M., Aperia A., Walaas S.I., Nairn A.C., Greengard P. (1991) Phosphorylation of the catalytic subunit of Na+,K+-ATPase inhibits the activity of the enzyme. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 11359-11362.

46. Therien A. G., Blostein R. (2000) Mechanizms of sodium pump regulation. Am. J. Physiol. 279: C541-C566.

47. Улумбеков Э.Р., Челышев Ю.А. (1997) Гистология. ГЭОТАР. Москва.

48. Lee J., Simpson G., Scholes P. (1974) An ATPase from dog gastic mucosa: Changes of outer pH suspensions of membrane vesicles accompanying ATP hydrolysis. Biochem. Biophys. Res. Com. 60: 825-832.

49. Sachs G., Chang HH., Rabon E., Schackmann R., Lewis M., Saccomani G. (1976) A nonelectrogenic H-pump in plasma membranes of hog stomach. J. Biol. Chem. 251: 76907698.

50. Prinz С., Kajimura M., Scott D.R., Mercier F., Helander H.F., Sachs G. (1993) Histamin secretion from rat enteromaffmlike cells. Gastroenterology 105: 449-461.

51. Forte J.G., Machen Т.Е., Obrink K.J. (1980) Mechanisms of gastric H+ and СГ transport. Annu. Rev. Physiol. 42: 11-126.

52. Nandi J., Meng-Ai Z., Ray Т.К. (1987) Purification and partial characterization of the (H,K)-transporting adenosintriphosphatase from fundic mucosa. Biochemistry 26: 4272-4279.

53. Okamoto C.T., Karpilow J.M., Smolka A., Forte J.G. (1989) Isolation and characterization of gastric microsomal glycoproteins. Evidence for glycosylated p-subunit of the H,K-ATPase. Biochem. Biophys. Acta 1037: 360-372.

54. Klaasen C.H.W., De Pont J.J.H.HM. (1994) Gastric H+/K+-ATPase. Cell. Physiol. Biochem. 4: 115-134.

55. Asano S, Io T, Kimura T, Sakamoto S, Takeguchi N. Alanine-scanning mutagenesis of the sixth transmembrane segment of gastric H+,K+-ATPase alpha-subunit. J. Biol. Chem. 276: 31265-32173.

56. Kromer W. (1995) Similarities and differences in the properties of substituted benzimidazoles: A comparison between pantoprazole and related compounds. Digestion 56: 443-454.

57. Shin J.M., Besancon M., Simon A., Sachs G. (1993) The site of action of pantoprazole in the gastric H/K-ATPase. Biochem. Biophys. Acta 1148: 223-233.

58. Simon A., Besancon M., Shin J.M., Sachs G. (1993) The H,K-ATPase sites that react selectively with the benzimidazole class of anti-ulcer drugs. Gastroenterology 104: 192.

59. Broterus J., Jacobsen L., Jorgensen P.L. (1993) Soluble and enzymatically stable (Na+,K+)-ATPase from mammalian kidney consisting predominantly of promoter ap-uni ts. Biochem. Biophys. Acta 731: 290-303.

60. Pedersen P.L., Carafoli E. (1987) Ion motive ATPases. I. Ubiquity, properties, and significance to cell function. II. Energy coupling and work output. Trends Biochem. Sci. 12: 146-150.

61. Chow D.C., Forte, J.G. (1995) Functional significance of the beta-subunit for heterodimeric P-type ATPases. J. Exp. Biol. 198: 1-17.

62. Jorgensen P.L., Andersen J.P. (1998) Structural basis for E1-E2 conformational transition in Na,K-pump and Ca-pump proteins. J. Membr. Biol. 103: 95-120.

63. Shull G.E., Lane L. K., Lingrel J.B. (1986) Amino-acid sequence of the P-subunit of the (Na,K)ATPase deduced from a cDNA. Nature 321: 429-431.

64. Lutsenko S., Kaplan J.B. (1993) An essential role for the extracellular domain of the Na,K-ATPase P-subunit in cation occlusion. Biochemistry 32: 6737-6743.

65. Eakle K.A., Kabalin M.A., Wang S., Farley R.A. (1994) The influence of P-subunit structure on the stability of Na+/K+-ATPase complexes and interaction with K+. J. Biol. Chem. 269: 6550-6557.

66. Crambert G., Hasler I J., Beggah A.T., Yu C., Modyanov N.N., Horisberger J.D., Lelievre L., Geering K. (2000) Transport and pharmacological properties of nine different human Na, K-ATPase isozymes. J. Biol. Chem. 275: 1976-1986.

67. Hasler U., Wang X., Crambert G., Beguin P., Jaisser F., Horisberger J.D., Geering K. (1998) Role of P-subunit domains in the assembly, stable expression, intracellular routing, and functional properties ofNa,K-ATPase. J. Biol. Chem. 273: 30826-30835.

68. Beggah А.Т., Beguin P., Bamberg K, Sachs G., Geering K. (1999) P-subunit assembly is essential for the correct packing and the stable membrane insertion of the H,K-ATPase a-subunit. J. Biol. Chem. 274: 8217-8223.

69. Jaisser F., Jaunin P., Geering K, Rossier B.C., Horisberger J.D. (1994) Modulation of the Na,K-Pump function by P subunit isoforms. J. Gen. Physiol. 1994. 103: 605-623.

70. Geering K. (1992) Subunit assembly and posttranslational processing of Na+-pumps. Acta Physiol. Scand. 146: 177-181.

71. Schmalzing G., Gloor S. (1994) Na/K-pump p subunits: Structure and functions. Cell Physiol. Biochem. 4: 96-114.

72. Courtois-Coutry N., Roush D., Rajendran V., McCarthy J.B., Geibel J., Kashgarian M., Caplan M.J. (1997) A tyrosine-based signal targets H/K-ATPase to a regulated compartment and is required for the cessation of gastic acid secretion. Cell 90: 501-510.

73. Pestov N.B., Korneenko T.V., Zhao H., Adams G., Shakhparonov M.I., Modyanov N.N. (2000) Immunochemical demonstration of a novel p-subunit isoform of X,K-ATPase in human skeletal muscle. Biochem. Biophys. Res. Commun. 277: 430-435.

74. Pestov N.B., Korneenko T.V., Zhao H., Adams G., Kostina M.B., Shakhparonov M.I., Modyanov N.N. (2001) The Pm protein, a member of the X,K-ATPase p-subunits family, is located intracellularly in pig skeletal muscle. Arch. Biochem. Biophys. 396: 80-88.

75. Asano S., Hoshina S., Nakaie Y, Watanabe Т., Sato M., Suzuki Y., Takeguchi N. (1998) Functional expression of putative H+-K+-ATPase from guinea pig distal colon. Am. J. Physiol. 275: C669-C674.

76. Jaisser F., Horisberger J.-D., Geering K., Rossier B.C. (1993) Mechnisms of urinary K+ and H+ excretion: primary structure and functional expression of a novel H,K-ATPase. J. Cell. Biol. 123: 1421-1428.

77. Yang-Feng T.L., Schneider J.W., Lindgren V., Shull M.M., Benz E.J.Jr., Lingrel J.B., Francke U. (1988) Chromosomal localization of human Na+, K+-ATPase a- and (3-subumt genes. Genomics 2: 128-138.

78. Jaisser F., Beggah A.T. (1999) The nongastric H+-K+-ATPases: molecular and functional properties. Am. J. Physiol. 276: F812-F824.

79. Jaisser F., Horisberger J.D., Rossier B.C. (1993) Primary sequence and functional expression of a novel p subunit of the P-ATPase gene family. Pflugers Arch. 425: 446-452.

80. Zhang W., Kuncewicz Т., Higham S.C., Kone B.C. (2001) Structure, promoter analysis and chromosomal localization of the murine H,K-ATPase a2 subunit gen. J. Am. Soc. Nephrol. 12: 2554-2564.

81. Modyanov N.N., Mathews P.M., Grishin A.V., Beguin P., Beggah A.T., Rossier B.C., Horisberger J.-D., Geering K. (1995) The human ATP1AL1 gene encodes a ouabain-sensitive H,K-ATPase. Am. J. Physiol. 269: C992-C99s7.

82. Cougnon M., Planelles G., Crowson M. S., Shidl G.E., Rossier B.C., Jaisser F. (1996) The rat distal colon P-ATPase. a subunit encodes a ouabain- sensitive H,K-ATPase. J. Biol. Chem. 271:7277-7280.

83. Codina J., Копе В. C., Delmas-Mata J. Т., Т. D. DuBose Jr. (1996) Functional expression of the colonic H+,K+-ATPase a -subunit. Pharmacologic properties and assembly with X+,K+-ATPase p -subunits. J. Biol. Chem. 271: 29759-29763.

84. Cougnon M., Bouyer P., Planelles G., Jaisser F. (1998) Does the colonic H,K-ATPase also act as an Na,K-ATPase? Proc. Natl. Acad. Sci. US A. 95: 6516-6520.

85. Cougnon M., Bouyer P., Jaisser F., Edelman A. Planelles G. (1999) Ammonium transport by the colonic H+-K+-ATPase expressed in Xenopus oocytes. Am. J. Physiol. 277: C280-C287.

86. Lee J., Rajendran V.M., Mann A.S., Kashgarian M., Binder H.J. (1995) Functional expression and segmental localization of rat colonic K-adenosine triphosphatase. J. Clin. Invest. 96:2002-2008.

87. Blanco G., DeTomaso A. W., Koster J., Xie Z.J., Mercer R.W. (1994) The oo-subunit of the Na-K-ATPase has catalytic activity independent of the P-subunit. J. Biol. Chem. 269: 23420-23425.

88. Blanco G., Koster J.C., Mercer R.W. (1994). The a-subunit of the Na-K-ATPase specifically and stably associated into oligomers. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 8542-8546.

89. Adams G., Tillekeratne M., Yu C., Pestov N.B., Modyanov N.N. (2001) Catalytic function of nongastric H,K-ATPase expressed in Sf-21 insect cells. Biochemistry. 40: 5765-5776.

90. Grishin A.V., Bevensee M.O., Modyanov N.N., Rajendran V., Boron W.F., Caplan M.J. (1996) Functional expression of the cDNA encoded by the human ATP1AL1 gene. Am. J. Physiol 271: F539-F551.

91. Sangan P., Thevananther S., Rajendran V.M. (1999) Functional expression of H,K-ATPase a and P subunits. Gastroenterology 116: G3750 .

92. Grishin A.V., Caplan M.J. (1998) ATP1AL1, a member of the non-gastric H,K-ATPase family, functions as a sodium pump. J. Biol.Chem. 273: 27772-27778.

93. Grishin A. V., Reinhard J., Dunbar L.A., Courtois-Coutry N., Wang Т., Giebsen G., Caplan M.J. (1999) Nongastric H+,K+-ATPase: cell biologic and functional propeties. Sem. Nephrol. 19: 421-430.

94. Binder H.J., Sangan P., Rajendran V.M. (1999) Physiological and molecular studies of colonic H+,K+-ATPase. Sem. Nephrol. 19: 405-414.

95. Codina J., Wall S.M., DuBose T.D.Jr. (1999) Contrasting functional and regulatory profiles of the renal H+,K+-ATPase. Sem. Nephrol. 19: 399-404.

96. Caviston T.L., Campbell W.G., Wingo C.S., Cain B.D. (1999) Molecular identification of the renal H+,K+-ATPases. Sem. Nephrol. 19: 431-437.

97. DuBose T. Jr., Gitomer J., Codina J. (1999) H+,K+-ATPase. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 8: 597-602.102 .Jaisser F. (1996) Molecular and functional diversity of Na,K-ATPase and renal H,K-ATPases. Nephrologie 17: 401-408.

98. Lyu R.M., Farley R.A. (1997) Amino acids Val lie of rat gastric H,K-ATPase confer high affinity for Sch-28080 to Na, K-ATPase. Am. J. Physiol. 272: C1717-C1725.

99. Horisberger J.-D. (1994) "The Na,K-ATPase: Structure-Function Relationship." 1-107, R.G. Landes Company, Austin, TX.

100. Easier U., Wang X., Crambert G., Beguin P., Jaisser F., Horisberger J.D., Geering K. (1998) Role of p-subunit domains in the assembly, stable expression, intracellular routing, and functional properties of Na,K-ATPase. J. Biol. Chem. 273: 30826-30835.

101. Beggah A.T., Beguin P., Bamberg K., Sachs G., K. (1999) (3-subunit assembly is essential for the correct packing and the stable membrane insertion of the H,K-ATPase a-subunit. J. Biol. Chem. 274: 8217-8223.

102. Kraut J.A., Hiura J., Shin J.M., Smolka A., Sachs G., Scott D. (1998) The Na+-K+-ATPase pi subunit is associated with the HKa2 protein in the rat kidney. Kidney Int. 53: 958-962.

103. Codina J., Delmas-Mata J.T., DuBose T.D.Jr. (1998) The a-subunit of the colonic H+,K+-ATPase assembles with pi-Na+,K+-ATPase in lcideny and distal colon. J. Biol. Chem. 273: 7894-7899.

104. Sangan F P., Kolla S.S., Rajendran V.M., Kashgarian M., Binder H.J. (1999) Colonic H-K-ATPase p-subunit: identification in apical membranes and regulation by dietary К depletion. Am. J. Physiol. 276: C350-C360.

105. Doucet A., Marsy S. (1987) Characterization of K-ATPase activity in distal nephron: Stimulation by potassium depletion. Am. J. Physiol. 253: F418-F423.

106. Garg L.C., Narang N. (1988) Oubain-insensitive K-adenosine triphosphatase in distal nephron segments of the rabbit. J. Clin. Invest. 81: 1204-1208.

107. Garg L.C. (1991) Respective roles of H-ATPase and H,K-ATPase in ion transport in the kidney. J. Am. Soc. Nephrol. 2: 949-960.

108. Шмидт P., Тевс Г., n/ред. Костюка П.Г. (1996) Физиология человека. «Мир» Москва, стр.785-805.

109. Wingo C.S., Cain B.D. (1993) The renal H-K-ATPase: physiological significance and role in potassium homeostasis. Annu. Rev. Physiol. 55:323-347.

110. Satlin L.S. (1999) Regulation of potassium transport in the maturing kidney. Semin. Nephrol. 19: 155-165.

111. Laroche-Joubert N., A.Doucet. (1999) Collecting duct adaptation to potassium depletion. Semin. Nephrol. 19: 390-398.

112. Giebisch G. (1998) Renal potassium transport:Mechanisms and regulation. Am. J. Physiol. 274:F817-F833.

113. Mads en K.M., Tisher C.C. (1986) Structureal-functional relation-ships along the distal nephron. Am. J. Physiol. 250: F1-F15.

114. Armitage F., Wingo C. (1994) Luminal acidification in K-replete OMCDj: contributions of H,K-ATPase and bafilomycin-A.-sensitive H-ATPase. Am. J. Physiol. 267: F450-F458.

115. Silver R.B. Frindt G. (1993). Functional identification of H,K-ATPase in intercalated cells of cortical collecting tubule. Am. J. Physiol. 264: F259-F266.

116. Weiner I.D., Milton A.E. (1996) H+,K+-ATPase in rabbit cortical collecting duct B-type intercalated cell. Am. J. Physiol 270: F518-F530.

117. Bastani B. (1995) Colocolization of H-ATPase and H,K-ATPase immunoreactivity in the rat kidney. J. Am. Soc. Nephrol. 5: 1476-1482.

118. Ahn K.Y., Tutner P., Madsen K.M., Kone B.C. (1996) Effect of chronic hypokaliemia on renal expression of gastric H+,K+-ATPase a-subunit gene. Am. J. Physiol. 270: F557-F566.

119. Silver R.B., Mennitt P.A., Satlin L.M. (1996) Stimulation of H-K-ATPase in intercalated cells of cortical collecting duct with chronic metabolic acidosis. Am. J. Physiol. 270: F539-F547.

120. Ahn K.Y., Kone B.C. (1995) Expression and cellular localization of mRNA encoding the "Gastric" isoform of the H/K-ATPase a subunit in rat kidney. Am. J. Physiol. 268: F99-F109.

121. Wingo C.S., Madsen KM., Smolka A. (1990) H,K-ATPase immunoreactivity in cortical and outer medullary collecting duct. Kidney Int. 38: 985-990.

122. Callaghan J., Tan S-S., Khan M.A., Curran K.A., Campbell W.G., Smolka A., Toh B.-H.T., Glesson P.A., Wingo Ch.S., Cain B.D., Driel IV. (1995) Renal expression of the gene encoding the gastric H,K-ATPase P-subunit. Am. J. Physiol. 268: F363-374.

123. Campbell-Thompson M.L., Verlander J.W., Curran K. A., Campbell W.G., Cain B.D., Wingo C.S., McGuigan J.E. (1995) In situ hybridization of H,K-ATPase p-subunit mRNA in rat and rabbit kidney. Am. J. Physiol. 269: F345-F354.

124. Fejes-Toth G., Rusvai E., bongo K.A., Naray-Fejes-Tdth A. (1995) Expression of colonic H-K-ATPase mRNA in cortical collecting duct: Regulation by acid/base balance. Am. J. Physiol. 269: F551-F557.

125. Verlander J.W., Moudy R.M., Campbell W.G., Cain B.D., Wingo C. (2001) Immunohistochemical localization of H,K-ATPase a2c -subunit in rabbit kidney. Am. J. Physiol. 281: F357-F365.

126. Peti-Peterdi J., Bebok Z., Lapointe J. Y., Bell P.D. (2002) Novel regulation of cell Na(+). in macula densa cells: apical Na+ recycling by H-K-ATPase. Am. J. Physiol. 282: F324-F329.

127. Fejes-Toth G., Naray-Fejes-Toth A. (2001) Immunohistochemical localization of colonic H,K-ATPase to the apical membrane of connecting tubule cells. Am. J. Physiol. 281: F318-F325.

128. Kraut J.A., Helander KG., Helander H.F., Iroezi N.D., Marcus E.A., Sachs G. (2001) Detection and localization of H+,K+-ATPase isoforms in human kidney. Am. J. Physiol. 281: F763-F768.

129. Ono S, Guntupalli J., DuBose T.D. (1996) Role of H -K -ATPase in pH regulation in inner medullary collecting duct cells in culture. Am. J. Physiol. 270:F852-F861.

130. Del Castillo J.J., Rajendran V.M., Binder, H.J. (1991) Apical membrane localization of ouabain-sensitive Reactivated ATPase activities in rat distal colon. Am. J. Physiol. 261: G1005-G1011.

131. Jaisser F., Coutry N., Farman N., Binder H.J., Rossier B.C. (1993) A putative H,K-ATPase is selectively expressed in surface epithelial cells of rat distal colon. Am. J. Physiol. 265: C1080-1089.

132. Lee J., Rajendran V.M., Mann A.S., Kashgarian M., Binder H.J. (1995) Functional expression and segmental localization of rat colonic K-adenozine triphosphatase. J. Clin. Invest. 96: 2002-2008.

133. Codina J., Pressley T.A., T. D.Dubose Jr. (1999) The colonic H+-K+-ATPase functions as a Na+-dependent K+ (NH4+)-ATPase in apical membranes from rat distal colon. J. Biol. Chem. 274: 19693-19698.

134. Rajendran V.M., Singh S.K., Geibel J., Binder J. (1998) Differential localization of colonic H,K-ATPase isoforms in surface and crypt cells. Am. J. Physiol. 274: G424-429.

135. Abrahams S.I., De Longi H.R., Bindels R.J.M., Van Os C.H. (1995) Two distinct K-ATPase activities in rabbit distal colon. Biochem. Biophys. Res. Com. 207: 1003-1008.

136. Takeguchi M., Asano S., Tabuchi Y., Takeguchi N. (1990) The presence of H+,K+-ATPase in the crypt of rabbit distal colon demonstrated with monoclonal antibodies against gastric H+,K+-ATPase. Gastroenterology 99: 1339-1346.

137. Okusa M.D., Gottardi C.J., Rajendran V.M, Binder H.J., Caplan M.J. (1995) Expression of a protein in rat kidney and distal colon that is related to the gastric H,K-ATPase. Cell Physiol.Biochem. 5: 1-9.

138. Tabuchi Y., Takeguchi M., Asano S., Takeguchi N. (1992) Ouabain-insensitive, vanadate-sensitive K+-ATPase of rat distal colon is partly similar to gastric H+,K+-ATPase. Jpn. J. Physiol. 42: 577-589.

139. KnoxF.G. (1998) Physiology of K+ Balance. Adv. Physiol. Educ. 20: S142-S147.

140. Маршалл В.Д. (1999) Клиническая биохимия. Невский диалект. БИНОМ, стр 42-44.

141. Agarwal R., Afzalpurkar R., Fordtran J.S. (1994) Pathophysiology of potassium absorbtion and secretion by the human intestine. Gastroenterology 107: 548-571.

142. Wingo C.S., Smolka A.J. (1995) Function and structure of H,K-ATPase in the kidney. Am. J. Physiol. 269: F1-F16.

143. Silver R.B., Choe H, Frindt G. (1998) Low-NaCl diet increases H,K-ATPase in intercalated cells from rat cortical collecting duct. Am. J. Physiol. 275: F94-F102.

144. Pandiyan V., Rajendran V.M., Binder H.J. (1990) Mucosal oubain and Na+ inhibit active Rb+ (K+) absorbtion in normal and sodium-depleted rat distal colon. Gastroenterology 102: 1846-1853.

145. Foster E.S., Hayslett J.P., Binder H.J. (1984) Mechanism of active potassium absorbtion and secretion in the rat colon. Am. J. Physiol. 246: G611-G617.

146. Sweiry J., Binder H.J. (1990) Active potassium absorbtion in rat distal colon. J. Physiol. 423: 155-170.

147. Jaisser F., Escoubet В., Coutry N., Engine E., Bonvalet J.P., Farman N. (1996) Differential regulation of putative K-ATPase by low-K diet and corticosteroids in rat distal colon and kidney. Am. J. Physiol. 270: C679-C687.

148. Sangan P., Rajendran V.M., Mann A.S., Binder H.J. (1997) Regulation of colonic H,K-ATPase in large intestine and kidney by aldosterone and dietary К depletion. Am. J. Physiol. 272: C685-C696.

149. Sangan F.P., Rajendran V.M., Mann A.S., Kashgarian M., Binder H.J. (1997) Regulation of colonic H,K-ATPase in large intestine and kidney by dietary Na depletion and dietary К depletion. Am. J. Physiol. 272: C685-C696.

150. Ornt D.B., Radke K.J., Scandling J.D. (1996) Effect of aldosterone on renal potrassium conservation in the rat. Am. J. Physiol. 270: E1003-E1008.

151. Imbert-Teboul M, Doucet A., Marsy S., Siaume-Perez S. (1987) Alteration of enzymatic activities along the rat collecting tubule in potassium depletion. Am. J. Physiol. 253: F408-F417.

152. Eiam-Ong S., Kurtzman N.A., Sabatini S. (1993) Regulation of collecting duct adenosine triphossssphatase by aldosterone and potassium. J. Clin. Invest. 91:2385-2392.

153. Wald H., Garty H., Palmer L.G. (1998) Differential regulation of ROMK expression in kidney cortex and medulla by aldosterone and potassium. Am. J. Physiol. 275: F239-F245.

154. Buffin-Meyer В., Verbavatz J.M., Cheval L. (1998) Regulation of Na,K-ATPase in rat outer medullary collecting duct during potassium depletion. J. Am. Soc. Nephrol. 9:538-550.

155. Buffin-Meyer В., Younes-Ibrahim M., Barlet-Bas C. (1997) К depletion modifies the properties of SCH28080-sensitive K-ATPase in rat collecting duct. Am. J. Physiol. 274: F124-F131.

156. Meneton P., Schultheis P.J., Greeb J., Nieman M.L., Liu L.H., Clarke L.L., Duffy J.J., Doetschman Т., Lorenz J.N., Shull G. (1998) Increased sensitivity to K+ deprivation in colonic H,K-ATPase-deficient mice. J. Clin. Invest. 101: 536-542.

157. Marsy S., Elalouf J.M., Doucet A. (1996) Quantative RT-PCR analyses of mRNAs encoding a colonic putative H,K-ATPase a subunit along the rat nephron: effect of К depletion. Pflugers Arch. 432: 494-500.

158. DuBose T.D.Jr., Codina J., Burges A., Pressley T.A. (1995) Regulation of H+-K+-ATPase expression in kidney. Am. J. Physiol. 269: F500-F507.

159. Ahn K.Y., Park K.Y., Kim K.K., Kone B.C. (1996) Chronic hypokaliemia enchances expression of the H+,K+-ATPase a2-subunit gene in renal medulla. Am. J. Physiol. 271: F314-F321.

160. Skull G, Miller M.L., Schultheis P.J. (2000) Lessons from genetically engineered animal models VIII. Absorstion and secretion of ions in the gastrointestinal tract. Am. J. Physiology. 278: G185-G190.

161. Kaunitz J.D., Barret E., McRoberts J.A. (1995) Electrolyte secretion and absorbtion: small intstine and colon. Textbook of Gastroenterology. 326-361.

162. Sabatini S. (1999) Experimental Studies in Distal Urinary Acidification: Bringing the Bedside to the Bench. Semin. Nephrol. 19: 188-194.

163. Eiam-Ong S., Laski M.E., Kurtzman N.A. (1995) Diseases of renal adenosine triphosphatase. Am. J. Med. Sci. 309: 13-25.

164. Laski M.E., Kurtzman N.A (1996) The renal adenosine triphosphatase: Ffunctional integration and clinical significance. Miner. Electrolyte Metab. 22: 410-422.

165. Kurtzman N.A. (1990) Disorders of distal acidification. Kidney Int. 38:120-121.

166. Пестов Н.Б., Гусакова Т.В., Костина М.Б., Шахпаронов М.И. (1996) Фаговые мимотопы моноклональных антител к Са2+-АТР-азе плазматических мембран. Биоорган, хим. 22: 664-670.

167. Ml.Hopp Т., Woods К. (1983) A computer program for predicting protein antigenic determinants. Mol. Immunol. 20: 483-489.

168. Codina J., Li J., Hong Y, DuBose T.D. (2002) The у Na+,K+-ATPase subunit assembles selectively with al/pl-Na+,K+-ATPase but not with the colonic H+,K+-ATPase. Kidney Int. 61: 967-974.

169. Sweadner K.J., Rael E. (2000) The FXYD gene family of small ion transport regulators or channels: cDNA sequence, protein signature sequence, and expression. Genomics 68: 41-56.

170. Lee K, Jung J., Kim M., Guidotti G. (2001) Interaction of the a subunit of Na,K-ATPase with cofilin. Biochem. J. 353: 377-385.

171. Papanicolau S., Kajee R., Martin-Vasallo P., Djamgoz M.B.A., Mobasheri A. (2000) Isoforms of Na+,K+ -ATPase in normal rat prostate: immunohistochemical evidence for expression of al, a2 and a3. J. Physiol. 525: 24P.

172. Burke J.M., Cao F., Irving P.E. (2000) High levels of E-/P-cadherin: correlation with decreased apical polarity of Na/K ATPase in bovine RPE cells in situ. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 41: 1945-1952

173. Masuzawa Т., Ohta Т., Kawamura M., Nakahara N., Sato F. (1984) Immunohistochemical localization of Na+, K+-ATPase in the choroid plexus. Brain Res. 302: 357-362.

174. Bernhardt J., Grishin A.V., Oberleithner H., Caplan M.J. (2000) Differential localization of human nongastric H-K-ATPase ATP1AL1 in polarized renal epithelial cells. Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 279: F417-F425.

175. Jorgensen P.L. (1974) Purification and characterization of (Na+ + K+)-ATPase. 3. Purification from the outer medulla of mammalian kidney after selective removal of membrane components by sodium dodecylsulphate. Biochim Biophys Acta. 356: 36-52.

176. Jorgensen P.L. (1974) Isolation of (Na+ + K+)-ATPase. Methods Enzymol. 32: 277-290.

177. Spina A.M., Esposito C., Pagano M., Chiosi E., Mariniello L., Cozzolino A., Porta R., Illiano G. (1999) GTPase and transglutaminase are associated in the secretion of the rat anterior prostate. Biochem. Biophys. Res. Commun. 260: 351-356.

178. Dubbink H.J., Hoedemaeker R.F., van der Kwast Т.Н., Schroder F.H., Romijn J.C. (1999) Human prostate-specific transglutaminase: a new prostatic marker with a unique distribution pattern. Lab. Invest. 79: 141-150.

179. Friedrichs В., Riedmiller H., Goebel H.W., Rausch U., Aumuller G. (1995) Immunological characterization and activity of transglutaminases in human normal and malignant prostate and in prostate cancer cell lines. Urol. Res. 23: 301-310.

180. Nemes Z., Steinert P.M. (1999) Bricks and mortar of the epidermal barrier. Exp. Mol. Med. 31: 5-19.

181. Tamada Y., Takama H., Kitamura Т., Ikeya Т., Yokochi T. (1995) Expression of transglutaminase I in human anagen hair follicles. Acta Derm. Venereol. 75: 190-192.

182. Nonomura K., Yamanishi K, Hosokawa Y., Doi H., Hirano J., Fukushima S., Yasuno H. (1993) Localization of transglutaminase 1 mRNA in normal and psoriatic epidermis by nonradioactive in situ hybridization. Br. J. Dermatol. 128: 23-28.

183. Brooks D.E. in Marshall's Physiology of Reproduction (Lammins GE, ed.) (1990) Edinburgh, UK:Churchill Livingston. 2: 569-690.

184. Chow P.H., Chan C.W., Cheng, L.Y.L. (1992) Contents of fructose, citric acid, acid phosphatase, proteins and electrolytes in secretions of the accessory sex glands of the male golden hamster. Int. J. Androl. 16: 41-45.

185. Kavanagh J.P. (1985) Sodium, potassium, calcium, magnesium, zinc, citrate and chloride content of human prostatic and seminal fluid. J. Reprod. Fertil. 75: 35-41.

186. Denda M., Hosoi J., Asida Y. (2000)Visual imaging of ion distribution in human epidermis. Bioch. Biophys. Res. Com. 272: 134-137.

187. Bovell D.L., Clunes M.T., Roussci E., BurryJ., Elder H.Y. (2000) Vacuolar-type H+-ATPase distribution in unstimulated and acetylcholine-activated isolated human eccrine sweat glands. Histochem. J. 32: 409-413.

188. Nelson N., Perzov N. Cohen A., Hagai K., Padler V., Nelson H. (2000) The cellular biology of proton-motive force generation by V-ATPases. J. Exp. Biol. 203: 89-95.

189. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory Press.

190. Cells J. (1994) Cell Biology: A Laboratory Handbook. San Diego: Academic Press Inc.

191. Galfre G., Milstein C. (1981) Preparation of monoclonal antibodies: strategies and procedures. Methods Enzymol. 73: 3-46.

192. Harlow E., Lane D. (1988) Antibodies. A laboratory Manual. Cold Spring Harbor: Cold spring harbor laboratory press. 557-590.

193. Henniker A.J., Bradstock K.F. (1993) Purification of two murine monoclonal antibodies of the IgM class by hydroxylapatite chromatography and gel filtration. Biomed. Chromatogr. 7: 121-125.

194. Dower W.J., Miller J.F., Ragsdale C. W. (1988) High efficiency transformation of E. coli by high voltage electroporation. Nucleic Acids Res. 16: 6127-6145.

195. Lauriere M. (1993) A semidry electroblotting system efficiently transfers both high- and low-molecular-weight proteins separated by SDS-PAGE. Anal. Biochem. 212: 206-211.

196. Tyagarajan K, Townsend R.R., Forte J.G. (1996) The P-subunit of the rabbit H,K-ATPase: a glycoprotein with all terminal lactosamine units capped with a-linked galactose residues. Biochemistry 35: 3238-3246.

197. Towbin H., Staehelin Т., Gordon J. (1979) Electrophoretic transfer of protein from polyacrilamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 76: 4350-4354.

198. Jack G.W., Beer D.J. (1996) Immunoaffinity chromatography. Methods Mol. Biol. 59: 187196.

199. Корнеенко Т.В., Пестов Н.Б., Егоров М.В., Иванова М.В., Костина М.Б., Ридстрем Я., Шахпаронов М.И. (2000) Идентификация нитратредуктазы Escherichia coli как антигена моноклонального антитела неизвестной ранее специфичности. Биоорган, хим. 26: 601-604.